[go: up one dir, main page]

RU2157675C2 - Method for cornea diseases - Google Patents

Method for cornea diseases Download PDF

Info

Publication number
RU2157675C2
RU2157675C2 RU98119433A RU98119433A RU2157675C2 RU 2157675 C2 RU2157675 C2 RU 2157675C2 RU 98119433 A RU98119433 A RU 98119433A RU 98119433 A RU98119433 A RU 98119433A RU 2157675 C2 RU2157675 C2 RU 2157675C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cornea
suspension
cells
corneal
treatment
Prior art date
Application number
RU98119433A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU98119433A (en
Inventor
Е.В. Ченцова
Г.Т. Сухих
Г.Г. Петриашвили
И.Р. Арутюнова
Г.К. Гречко
И.А. Фомина
Original Assignee
МНИИ глазных болезней им. Гельмгольца
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by МНИИ глазных болезней им. Гельмгольца filed Critical МНИИ глазных болезней им. Гельмгольца
Priority to RU98119433A priority Critical patent/RU2157675C2/en
Publication of RU98119433A publication Critical patent/RU98119433A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2157675C2 publication Critical patent/RU2157675C2/en

Links

Images

Landscapes

  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves performing allotransplantation of human fetus cornea cell suspension. The suspension is subconjunctivally administered in the amount of 200000 cells containing in 0.2-0.3 ml of physiological salt solution. The suspension is instilled into the conjunctival eye cavity every 15 min during 1 h. EFFECT: accelerated recipient cornea repair.

Description

Изобретение относится к области медицины - офтальмологии и может быть использовано при лечении эрозий и язв роговицы у человека. The invention relates to the field of medicine - ophthalmology and can be used in the treatment of erosion and ulcers of the cornea in humans.

Эрозии и язвы роговицы - одна из наиболее трудноподдающихся лечению нозологий заболевания глаз, для которой характерны глубина и тяжесть поражения тканей, резкое нарушение обменных процессов в роговице, искажение и ослабление биосинтеза белков в строме, непокрытой эпителием. Erosions and ulcers of the cornea are one of the most difficult to treat nosologies for eye diseases, which are characterized by the depth and severity of tissue damage, a sharp violation of metabolic processes in the cornea, distortion and weakening of protein biosynthesis in the stroma uncovered by the epithelium.

Регенерация эпителия роговицы происходит путем миграции, пролиферации и адгезии клеток к строме. Миграция эпителиальных клеток в сторону дефекта сопровождается снижением их нормальной митотической активности. Медленная эпителизация или полное ее отсутствие создают условия для инфицирования, истончения и перфорации роговицы, что в свою очередь может привести к гибели глаза. Замедление репарации при трофических язвах роговицы обусловлено нарушением обмена веществ в тканях, действием протеолитических ферментов, аллергизирующих факторов. Недостаточная эффективность традиционной терапии, которая включает применение ингибиторов протеолитических ферментов (гордокс, контрикал), препаратов нуклеинового ряда, солкосерила, витаминов в качестве стимуляторов различных стадий репаративных процессов в роговице, диктует необходимость поиска нового способа лечения (1). Corneal epithelial regeneration occurs through migration, proliferation, and cell adhesion to the stroma. The migration of epithelial cells towards the defect is accompanied by a decrease in their normal mitotic activity. Slow epithelization or its complete absence creates conditions for infection, thinning and perforation of the cornea, which in turn can lead to eye death. Slowing the repair of trophic ulcers of the cornea is due to metabolic disorders in the tissues, the action of proteolytic enzymes, allergic factors. The lack of effectiveness of traditional therapy, which includes the use of inhibitors of proteolytic enzymes (gordox, contracal), nucleic acid preparations, solcoseryl, vitamins as stimulants of various stages of reparative processes in the cornea, necessitates the search for a new treatment method (1).

В связи с этим нами проявлен интерес к вопросу о целесообразности широкого использования культивированных in vitro фетальных клеток (ФК) роговицы человека при эрозиях и язвах роговицы, замедленной эпителизации роговицы после фоторефракционной кератэктомии (ФРК), болезни трансплантата, послеоперационной кератопатии при артифакии и др. заболеваний роговицы. In this regard, we have shown interest in the feasibility of widespread use of in vitro cultured fetal cells (FC) of the human cornea with erosion and ulcers of the cornea, delayed corneal epithelization after photorefractive keratectomy (PRK), graft disease, postoperative keratopathy in case of artifact, and other diseases. cornea.

Фетальные ткани обладают рядом доказанных уникальных и незаменимых свойств. К ним относятся: повышенный пролиферативный потенциал, сниженная антигенная активность, содержание ряда ростовых, антибактериальных и аналгезирующих факторов (2,3,4,5). Fetal tissues have a number of proven unique and irreplaceable properties. These include: increased proliferative potential, decreased antigenic activity, the content of a number of growth, antibacterial and analgesic factors (2,3,4,5).

Техническим результатом предлагаемого изобретения является ускорение репаративной регенерации всех слоев роговицы реципиента за счет использования суспензии культивированных in vitro фетальных клеток роговицы человека. The technical result of the invention is to accelerate the reparative regeneration of all layers of the cornea of the recipient through the use of a suspension of cultured in vitro fetal cells of the human cornea.

Технический результат достигается путем введения в глаз суспензии ФК роговицы методом инстилляций и субконъюнктивальных инъекций. The technical result is achieved by introducing into the eye a suspension of FC of the cornea by instillation and subconjunctival injection.

Источником культуры эпителиальных и эндотелиальных клеток роговицы служит ткань роговицы 14 - 22-недельных эмбрионов человека, которые получены при проведении искусственного прерывания беременности по медицинским показаниям. The source of culture of corneal epithelial and endothelial cells is the corneal tissue of 14 to 22-week-old human embryos, which were obtained by artificial termination of pregnancy for medical reasons.

Аборты проводятся в государственном учреждении - Научном центре акушерства, гинекологии и перинатологии (НЦАГ и П) РАМН строго в соответствии с основами законодательства об охране здоровья граждан - статья N 36, приказом МЗ РФ N302 от 28.12.93 г., рекомендациями ВОЗ, принятыми РФ, а также нормами этического Комитета и специально созданной комиссии по госпитализации. Abortions are carried out in a state institution - the Scientific Center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology (NCAG and P) of the RAMS strictly in accordance with the principles of legislation on the protection of public health - Article No. 36, Order of the Ministry of Health of the Russian Federation No. 302 of 12/28/93, WHO recommendations adopted by the Russian Federation , as well as the norms of the ethics committee and a specially created commission for hospitalization.

Перед трансплантацией культура представляет собой первичную монокультуру эпителиальных (100%) и эндотелиальных (80% + 20% стромальных фибробластов) клеток с характерными признаками. Непосредственно перед трансплантацией суспензию клеток тщательно отмывают от культуральной среды, подсчитывают количество жизнеспособных клеток по исключению трепанового синего (как правило, 95%) и суспензируют в минимальном объеме физиологического раствора. Для лечения используют суспензию эмбриональных клеток с концентрацией 106 кл/мл. Доза вводимых фетальных клеток отработана экспериментально. Время пребывания размороженного материала при положительной температуре не должна превышать 2 ч.Before transplantation, the culture is a primary monoculture of epithelial (100%) and endothelial (80% + 20% stromal fibroblasts) cells with characteristic features. Immediately before transplantation, the cell suspension is thoroughly washed from the culture medium, the number of viable cells is counted to exclude trepan blue (usually 95%) and suspended in a minimum volume of physiological saline. For treatment, a suspension of embryonic cells with a concentration of 10 6 cells / ml is used. The dose of injected fetal cells was tested experimentally. The residence time of thawed material at a positive temperature should not exceed 2 hours.

Способ лечения осуществляют путем инстилляций (каждые 15 мин в течение 1 часа) в конъюнктивальную полость глаза суспензии фетальных клеток эпителия роговицы больным при эрозиях роговицы, пациентам с замедленной эпителизацией роговицы после ФРК, или субконъюнктивальных инъекций суспензии эпителиальных и эндотелиальных клеток роговицы, больным с язвой роговицы, послеоперационной кератопатией на артифакичном глазе, болезнью трансплантата. The method of treatment is carried out by instillation (every 15 minutes for 1 hour) into the conjunctival cavity of the eye suspension of corneal epithelial fetal cells in patients with corneal erosion, patients with delayed corneal epithelization after PRK, or subconjunctival injection of a suspension of corneal epithelial and endothelial cells in patients with ulcers , postoperative keratopathy on the artifact eye, graft disease.

Лечение проведено 22 больным в возрасте от 19 до 72 лет. Количество больных по характеру и патологии представлено в таблице. Treatment was performed for 22 patients aged 19 to 72 years. The number of patients by nature and pathology is presented in the table.

В результате инстилляций в конъюктивальную полость глаза суспензии фетальных клеток эпителия роговицы у всех пациентов отмечалась полная эпителизация трофических эрозий и уменьшение эпителиального флера роговицы через 24 ч после начала лечения. As a result of instillations into the conjunctival cavity of the eye, a suspension of corneal epithelial fetal cells in all patients showed complete epithelialization of trophic erosion and a decrease in corneal epithelial fleur 24 hours after the start of treatment.

Через сутки после субконъюктивальной инъекции ФК отмечалось значительное уменьшение площади и глубины язвы роговицы, полная эпителизация наступала на 3-4 сутки. A day after subconjunctival injection of FC, a significant decrease in the area and depth of the corneal ulcer was noted, complete epithelization occurred on 3-4 days.

Клинический пример: больной А., 35 лет, история болезни N 3365. Поступил в отдел травматологии и реконструктивной хирургии МНИИ ГБ им.Гельмгольца с диагнозом: ОД- васкуляризированное бельмо роговицы III категории (после рецидивирующего герпетического кератита). Операция: ОД- сквозная субтотальная пересадка роговицы. На 8-й день после операции появился отек трансплантата и выраженная смешанная инъекция, а на 12-й день началось тотальное расплавление сквозного трансплантата с его истончением. Несмотря на активную антипротеолитическую терапию, состояние трансплантата ухудшалось: он полностью помутнел, стали прорезываться швы. Местное лечение фетальными клетками роговицы человека начато через 2 недели после операции. На следующий день после субконъюнктивальной инъекции отмечалась положительная динамика, процесс расплавления был купирован. Повторное введение суспензии ФК через 2 недели привело к дальнейшему улучшению состояния сквозного трансплантата с почти полным восстановлением прозрачности через один месяц. Clinical example: patient A., 35 years old, medical history N 3365. He entered the Department of Traumatology and Reconstructive Surgery of the Helmholtz Research Institute of Medicine with a diagnosis of OD - vascular corneal thrombosis of category III (after recurrent herpetic keratitis). Operation: OD-through subtotal corneal transplant. On the 8th day after the operation, graft edema and severe mixed injection appeared, and on the 12th day the total melting of the through graft began with its thinning. Despite active antiproteolytic therapy, the condition of the transplant worsened: it became completely cloudy, and sutures began to erupt. Local treatment with fetal cells of the human cornea was started 2 weeks after surgery. The day after subconjunctival injection, positive dynamics were noted, the melting process was stopped. Repeated administration of the PK suspension after 2 weeks led to a further improvement in the condition of the through graft with an almost complete restoration of transparency after one month.

Резюмируя представленные данные клинического исследования, можно сказать, что результатом использования фетальных клеток роговицы человека явилось ускорение репаративной регенерации поврежденных тканей глаза реципиента: полная эпителизация роговицы и значительное уменьшение ее отека, почти полное восстановление прозрачности сквозного трансплантата роговицы. Summarizing the clinical trial data presented, it can be said that the use of fetal cells of the human cornea resulted in an acceleration of the reparative regeneration of damaged tissues of the recipient's eye: complete epithelization of the cornea and a significant reduction in its edema, almost complete restoration of transparency of the corneal transplant.

Учитывая возможность постоянно располагать запасом донорского материала, а также эффективность и простую методику трансплантации, применение фетальных клеток роговицы человека представляется перспективным при лечении заболеваний глаз. Given the ability to constantly have a supply of donor material, as well as the efficiency and simple technique of transplantation, the use of fetal cells of the human cornea seems promising in the treatment of eye diseases.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Адамова Н. А. "Экспериментальное обоснование и клиническое применение препарата фибронектина при заболеваниях и повреждениях роговицы".- Канд. дис. - Одесса, 1992 г., с.16, 23.
LIST OF REFERENCES
1. Adamova N. A. "Experimental justification and clinical use of the drug fibronectin in diseases and injuries of the cornea." - Cand. dis. - Odessa, 1992, p.16, 23.

2. Смирнов С.В., Шахламов М. В." Лечение ожогов фетальными тканями человека". - М.: Трансплантация фетальных тканей и клеток человека, 1996 г., с. 73. 2. Smirnov SV, Shakhlamov MV "Treatment of burns with human fetal tissues." - M .: Transplantation of fetal tissues and human cells, 1996, p. 73.

3. Кулаков В.И., Сухих Г.Т., Молнар Е.М. "Трансплантация фетальных тканей человека: анализ состояния проблемы и перспективы развития". - М.: Трансплантация фетальных тканей и клеток человека, 1996 г., с.5-9. 3. Kulakov V.I., Sukhikh G.T., Molnar E.M. "Transplantation of human fetal tissues: analysis of the state of the problem and development prospects." - M .: Transplantation of fetal tissues and human cells, 1996, p.5-9.

4. Seiger A., Olson L, "Cell Tissue Res".-1977. -P. 285-316. 4. Seiger A., Olson L, "Cell Tissue Res" .- 1977. -P. 285-316.

5. Bjorlund, Lindwall O. " Trends Neurosci ".- 1987.-Vol. 10.- P.509- 516. 5. Bjorlund, Lindwall O. "Trends Neurosci" .- 1987.-Vol. 10.- P.509- 516.

Claims (1)

Способ лечения заболеваний роговицы путем аллотрансплантации, отличающийся тем, что для лечения используют суспензию фетальных клеток роговицы человека концентрацией 106 кл/мл, которую вводят субконъюнктивально в количестве 200.000 клеток в 0,2 - 0,3 мл физиологического раствора или инстиллируют непосредственно в конъюнктивальную полость глаза каждые 15 мин в течение 1 ч.A method of treating corneal diseases by allotransplantation, characterized in that for treatment using a suspension of fetal cells of the human cornea with a concentration of 10 6 cells / ml, which is administered subconjunctively in an amount of 200,000 cells in 0.2 - 0.3 ml of physiological saline or instill directly into the conjunctival cavity eyes every 15 minutes for 1 hour
RU98119433A 1998-10-26 1998-10-26 Method for cornea diseases RU2157675C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98119433A RU2157675C2 (en) 1998-10-26 1998-10-26 Method for cornea diseases

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98119433A RU2157675C2 (en) 1998-10-26 1998-10-26 Method for cornea diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU98119433A RU98119433A (en) 2000-08-20
RU2157675C2 true RU2157675C2 (en) 2000-10-20

Family

ID=20211692

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU98119433A RU2157675C2 (en) 1998-10-26 1998-10-26 Method for cornea diseases

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2157675C2 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2242190C2 (en) * 2003-02-05 2004-12-20 Республиканская офтальмологическая клиническая больница Method for treating corneal diseases
RU2635540C1 (en) * 2016-11-22 2017-11-13 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for treatment of vascularized corneal leukoma resulting from eye burn injury

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2076672C1 (en) * 1994-10-04 1997-04-10 Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней Eye film

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2076672C1 (en) * 1994-10-04 1997-04-10 Уфимский научно-исследовательский институт глазных болезней Eye film

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
КАРАНОВ К.С. Трансплантация культивированного in vitro монослоя клеток заднего эпителия роговицы: Автореф. дисс. д.м.н. - СПб, 1991. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2242190C2 (en) * 2003-02-05 2004-12-20 Республиканская офтальмологическая клиническая больница Method for treating corneal diseases
RU2635540C1 (en) * 2016-11-22 2017-11-13 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for treatment of vascularized corneal leukoma resulting from eye burn injury

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Dua Amniotic membrane transplantation
Pfister Chemical injuries of the eye
John Amniotic membrane transplantation in the management of severe ocular surface disease: indications and outcomes
Talamo et al. Modulation of corneal wound healing after excimer laser keratomileusis using topical mitomycin C and steroids
Wilson Analysis of the keratocyte apoptosis, keratocyte proliferation, and myofibroblast transformation responses after photorefractive keratectomy and laser in situ keratomileusis
JP2022171847A (en) Adhesion promoter for corneal endothelial cell
Araki et al. Epithelial wound healing in the denervated cornea
Kirchhof et al. Pathogenesis of proliferative vitreoretinopathy
US20040057938A1 (en) Use of a human amniotic membrane composition for prophylaxis and treatment of diseases and conditions of the eye and skin
Yamamoto Growth of lens and ocular environment: role of neural retina in the growth of mouse lens as revealed by an implantation experiment
JP3490447B2 (en) Retinal pigment epithelium transplantation
Bahn et al. Penetrating keratoplasty in the cat: a clinically applicable model
US20210386791A1 (en) Methods of cellular reprogramming
JPH05184358A (en) Cell line for producing antibody against crystal lens epithelium cell
Avery et al. Inhibition of retinal pigment epithelial cell attachment by a synthetic peptide derived from the cell-binding domain of fibronectin
CN114425033A (en) An ophthalmic gel containing mesenchymal stem cell exosomes and preparation method thereof
Levin et al. Ocular Disease: Mechanisms and Management E-Book: Expert Consult-Online and Print
Gipson et al. Transplant of oral mucosal epithelium to rabbit ocular surface wounds in vivo
Kim et al. Clinical uses of human amniotic membrane for ocular surface diseases
CN117018165A (en) Application of Reelin protein or Reln gene in cornea injury treatment medicine
US20040081643A1 (en) Process for inhibiting vascular proliferation in the eye
US6733750B1 (en) Process and composition for inducing posterior vitreous detachment
RU2157675C2 (en) Method for cornea diseases
Fagerholm et al. Human and experimental lens repair and calcification
Chen et al. Gelatin methacryloyl hydrogel eye pad loaded with amniotic extract prevents symblepharon in rabbit eyes.