RU2089222C1

RU2089222C1 - Apparatus for magnetic separation of cells

Info

Publication number: RU2089222C1
Application number: RU95103027A
Authority: RU
Inventors: А.Ю. Барышников; Д.Ю. Блохин; Н.П. Глухоедов; О.Л. Ершов; П.К. Иванов; Р.С. Махлин; Н.Г. Мошечков; А.В. Хиникадзе
Original assignee: Центральный научно-исследовательский институт точного машиностроения
Priority date: 1995-03-03
Filing date: 1995-03-03
Publication date: 1997-09-10
Also published as: RU95103027A

Abstract

FIELD: medicine; oncology; treatment of malignant diseases associated with bone marrow autotransplantation. SUBSTANCE: proposed apparatus for magnetic separation of cells comprises plurality of containers intended for different purposes, namely: container filled with suspension of hemopoietic system cells, container filled with immunomagnetic sorbent, container filled with physiological solution, and containers for collecting cells and physiological solution. Apparatus further comprises unit for mixing cell suspension with immunomagnetic sorbent, assembly of thermoelements comprising unit for controlling and maintaining temperature of cell suspension and of immunomagnetic sorbent, electromagnetic valves assembly, ferment-filled container, unit for proportioned supply of ferment, and assembly of thermoelements for controlling and maintaining temperature of physiological solution. EFFECT: useful apparatus for oncology. 2 dwg

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и преимущественно предназначено для использования при лечении злокачественных заболеваний человека, связанном с аутотрансплантацией костного мозга после хирургического удаления опухоли и интенсивной химиотерапии, путем очистки и пересадки собственного костного мозга, что исключает его отторжение. The invention relates to medicine, namely to oncology, and is mainly intended for use in the treatment of human malignant diseases associated with autologous bone marrow transplantation after surgical removal of the tumor and intensive chemotherapy, by cleaning and transplanting your own bone marrow, which excludes its rejection.

Изобретение может применяться также при лечении различных злокачественных заболеваний кроветворной системы человека. The invention can also be used in the treatment of various malignant diseases of the human blood-forming system.

Возможно использование изобретения для исследований в области вирусологии, с целью разработки методов лечения таких заболеваний, как СПИД и др. а также в научно-исследовательских учреждениях для негативной и позитивной сепарации клеток при решении фундаментальных медицинских и биологических проблем. It is possible to use the invention for research in the field of virology, with the aim of developing methods for treating diseases such as AIDS, etc., as well as in research institutions for negative and positive cell separation in solving fundamental medical and biological problems.

Аутотрансплантация костного мозга в онкологии -это комплексная медицинская технология, включающая забор костного мозга, выделение мононуклеаров, их разделение и/или лекарственную обработку (при необходимости), заморозку и хранение, проведение больному высокодозной химиотерапии (или облучения), собственно трансплантацию костного мозга и ведение больного в остром посттрансплантационном периоде. Bone marrow autotransplantation in oncology is a comprehensive medical technology, including bone marrow sampling, isolation of mononuclear cells, their separation and / or drug treatment (if necessary), freezing and storage, high-dose chemotherapy (or radiation) for the patient, bone marrow transplantation and management patient in the acute post-transplant period.

Известен способ разделения клеток (а.с. N 1169615), основанный на связывании злокачественных или здоровых клеток со специфическими антителами с липосомами, содержащими монокристаллы ферромагнитного материала, при этом разделение осуществляют в неоднородном магнитном поле. A known method of separation of cells (and.with. N 1169615), based on the binding of malignant or healthy cells with specific antibodies with liposomes containing single crystals of ferromagnetic material, while the separation is carried out in an inhomogeneous magnetic field.

Фирмой Baxter (USA) для иммуноселективной сепарации клеток созданы ряд систем магнитной сепарации клеток. Baxter (USA) developed a number of magnetic cell separation systems for immunoselective cell separation.

Система магнитной сепарации клеток Isolex 50 предназначается для позитивного отбора кроветворных клеток. Система Isolex 50 содержит контейнер с физиологическим раствором, съемный контейнер для суспензии клеток, магнитной системы, механизма приведены в движение магнитов. The Isolex 50 magnetic cell separation system is designed for the positive selection of hematopoietic cells. The Isolex 50 system contains a container with physiological saline, a removable container for a suspension of cells, a magnetic system, a mechanism powered by magnets.

Система Isolex 50 предназначается только для исследовательских целей. The Isolex 50 is for research use only.

Разработанная система Isolex 300 аналогична системе Isolex 50, рассчитана на одновременную очистку до 300 мл и предназначена для клинического использования. The developed Isolex 300 system is similar to the Isolex 50 system, designed for simultaneous purification of up to 300 ml and is intended for clinical use.

Система магнитной сепарации клеток MaxSep предназначена для сепарации клеток с использованием негативной и позитивной иммуноселекции. Устройство MaxSep состоит из нескольких пластмассовых контейнеров, соединенных между собой эластичными полихлорвиниловыми трубками, блоков магнитной системы, перистальтического насоса, блока управления. При имунно-селективной сепарации используется иммуномагнитный сорбент, состоящий из гладких, однородных нетоксичных магнитных шариков, покрытых полистиролом и соединенных с антителами. The MaxSep Magnetic Cell Separation System is designed to separate cells using negative and positive immunoselection. MaxSep device consists of several plastic containers interconnected by flexible PVC pipes, blocks of the magnetic system, peristaltic pump, control unit. In immune-selective separation, an immunomagnetic sorbent is used, consisting of smooth, uniform, non-toxic magnetic balls coated with polystyrene and connected to antibodies.

К недостаткам системы магнитной сепарации клеток следует отнести:
отсутствие в системе встроенных устройств для инкубации (нагрев, перемешивание) суспензии клеток с иммуномагнитным сорбентом.The disadvantages of the system of magnetic separation of cells include:
the absence in the system of built-in devices for incubation (heating, mixing) of a suspension of cells with an immunomagnetic sorbent.

Инкубация производится в отдельных специальных дорогостоящих инкубаторах, что удорожает процесс сепарации клеток, нарушается единый технологический процесс очистки, что отрицательно сказывается на выполнении требований стерильности;
отсутствует возможность многократного повторения процесса очистки с использованием одного и того же комплекта контейнеров, из-за чего уменьшается степень очистки клеток при позитивной селекции;
отсутствие нагрева и регулирования температуры суспензии клеток в процессе очистки, что повышает вероятность снижения жизнедеятельности клеток;
при позитивной селекции разделение клеток от иммуномагнитного сорбента осуществляется вне системы;
отсутствие автоматизации процесса очистки.Incubation is carried out in separate special expensive incubators, which makes the cell separation process more expensive, the unified cleaning process is violated, which negatively affects the fulfillment of sterility requirements;
there is no possibility of repeated repetition of the purification process using the same set of containers, which reduces the degree of purification of cells with positive selection;
the lack of heating and temperature control of the cell suspension during the cleaning process, which increases the likelihood of a decrease in cell activity;
with positive selection, the separation of cells from the immunomagnetic sorbent is carried out outside the system;
lack of automation of the cleaning process.

В качестве прототипа берется устройство для магнитной сепарации клеток MaxSep. As a prototype, a device for magnetic separation of MaxSep cells is taken.

Цель изобретения заключается в повышении степени очистки с одновременным ускорением процессов инкубации и фракционирования клеток. The purpose of the invention is to increase the degree of purification while accelerating the processes of incubation and fractionation of cells.

Поставленная цель достигается тем, что в известном устройстве магнитной сепарации клеток MaxSep, состоящем из контейнера с суспензией клеток кроветворной системы и иммуномагнитным сорбентом, контейнера с физиологическим раствором, контейнера для сбора антиген-позитивных (АГ+) клеток и контейнера для сбора физраствора с антиген-негативными клетками, соединенных эластичными трубками, блока магнитной системы, блока управления, введены блок перемешивания суспензии клеток с иммуномагнитным сорбентом, блок термоэлементов и блок регулирования и поддержания температуры суспензии клеток и иммуномагнитного сорбента, блок электромагнитных клапанов, контейнер с ферментом, блок дозированной подачи фермента, блок термоэлементов с блоком регулирования и поддержания температуры физраствора.Антиген-позитивные (АГ+) клетки имеют на поверхности дертиминанту,специфичную для моноклональных антител, привязанных к иммуномагнитному сорбенту.Все остальные клетки,не несущие такие детерминанты,являются антиген-негативными (АГ-). This goal is achieved by the fact that in the known MaxSep magnetic cell separation device, consisting of a container with a suspension of hematopoietic system cells and an immunomagnetic sorbent, a container with physiological saline, a container for collecting antigen-positive (AG +) cells and a container for collecting saline from antigen negative cells connected by elastic tubes, a block of the magnetic system, a control block, a block for mixing a suspension of cells with an immunomagnetic sorbent, a block of thermocouples and a control block are introduced and maintaining the temperature of the cell suspension and the immunomagnetic sorbent, the block of electromagnetic valves, the container with the enzyme, the block of the dosed supply of the enzyme, the block of thermocouples with the block for regulating and maintaining the temperature of the saline solution. Antigen-positive (AG +) cells have a dermatant specific for monoclonal antibodies on the surface, attached to an immunomagnetic sorbent. All other cells that do not carry such determinants are antigen-negative (AG-).

При этом выходы блока управления соединены со входами блока электромагнитных клапанов, блока перемешивания с закрепленным на нем контейнером с суспензией клеток и иммуномагнитным сорбентом, блока дозированной подачи ферментов, блока магнитной системы, блока регулирования и поддержания температуры суспензии клеток и иммуномагнитного сорбента и блока регулирования и поддержания температуры физраствора, выход блока регулирования и поддержания температуры суспензии клеток и иммуномагнитного сорбента соединен со входом блока термоэлементов суспензии клеток иммуномагнитного сорбента, закрепленного с блоком перемешивания. The outputs of the control unit are connected to the inputs of the solenoid valve block, the mixing block with a container with a cell suspension and an immunomagnetic sorbent attached to it, the enzyme dosed supply block, the magnetic system block, the cell suspension and temperature control unit and the immunomagnetic sorbent, and the control and maintenance block the temperature of saline solution, the output of the control unit and maintain the temperature of the cell suspension and immunomagnetic sorbent is connected to the input of the thermoelectric unit cops of a suspension of cells of an immunomagnetic sorbent fixed with a mixing unit.

Выход блока регулирования и поддержания температуры физраствора соединен со входом блока термоэлементов физраствора, с закрепленным на нем контейнером для физраствора. Выход блока дозированной подачи ферментов соединен со входом контейнера ферментов, выход которого соединен посредством эластичной трубки с контейнером суспензии клеток и иммуномагнитного сорбента. The output of the block for regulating and maintaining the temperature of saline solution is connected to the input of the block of thermoelements of saline solution, with a container for saline solution mounted on it. The output of the dosed enzyme supply unit is connected to the input of the enzyme container, the output of which is connected via an elastic tube to a container of cell suspension and an immunomagnetic sorbent.

Предлагаемые технические решения позволяют получить следующие преимущества по сравнению с имеющимися аналогами и прототипом:
повышение степени очистки с одновременным ускорением процессов инкубации и фракционирования клеток достигаемое введением блока для перемешивания суспензии клеток с иммуномагнитным сорбентом и устройства для нагрева и регулирования температуры суспензии клеток, с одновременной возможностью многократного повторения процесса очистки с использованием одного и того же комплекта контейнеров;
возможность проведения как позитивной, так и негативной селекции клеток;
низкая вероятность повреждения АГ+ клеток в результате задания и поддержания необходимой температуры в процессе очистки;
полная автоматизация процесса очистки, в результате чего уменьшается время очистки;
единый технологический процесс при позитивной селекции, включающий сцепление АГ+ клеток с иммуномагнитным сорбентом, очистка их от АГ- клеток, дальнейшее разделение АГ+ клеток от иммуномагнитного сорбента, проводимое в автоматическом режиме, приводит к повышению стерильности и уменьшению повреждения АГ+ клеток. На фиг. 1 приведена блок-схема предлагаемого устройства;на фиг.2- циклограмма.The proposed technical solutions allow you to get the following advantages compared to existing analogues and prototype:
an increase in the degree of purification with simultaneous acceleration of the processes of incubation and fractionation of cells achieved by the introduction of a unit for mixing a suspension of cells with an immunomagnetic sorbent and a device for heating and controlling the temperature of the suspension of cells, with the possibility of multiple repetitions of the cleaning process using the same set of containers;
the ability to conduct both positive and negative cell selection;
low probability of damage to AG + cells as a result of setting and maintaining the required temperature during the cleaning process;
full automation of the cleaning process, resulting in reduced cleaning time;
a single technological process with positive selection, including adhesion of AH + cells to an immunomagnetic sorbent, their purification from AH cells, further separation of AH + cells from an immunomagnetic sorbent carried out in an automatic mode, leads to increased sterility and reduced damage to AH + cells. In FIG. 1 shows a block diagram of the proposed device; figure 2 is a sequence diagram.

Устройство магнитной сепарации клеток состоит из контейнера с физраствором 1, контейнера АГ+ клетками 2, контейнера с АГ- клетками 3, эластичных трубок 4 и 5, блока термоэлементов 6 с блоком регулирования и поддержания температуры физраствора 7, блока электромагнитных клапанов 8, контейнера с ферментом 9, блока дозированной подачи фермента 10, блока магнитной системы 11, контейнера с суспензией клеток и иммуномагнитного сорбента 12, блока перемешивания 13, блока термоэлементов 14 с блоком регулирования и поддержания температуры суспензии клеток и иммуномагнитного сорбента 15, блока управления 16. The device for magnetic separation of cells consists of a container with saline solution 1, a container of AG + cells 2, a container of AG cells 3, elastic tubes 4 and 5, a block of thermocouples 6 with a block for regulating and maintaining the temperature of saline solution 7, a block of electromagnetic valves 8, a container with an enzyme 9, a unit for the dosed supply of the enzyme 10, a block for the magnetic system 11, a container with a suspension of cells and an immunomagnetic sorbent 12, a mixing unit 13, a block of thermocouples 14 with a block for regulating and maintaining the temperature of the suspension of cells, and mmunomagnitnogo sorbent 15, the control unit 16.

В качестве контейнеров 1, 2, 3 и 12 могут использоваться пластмассовые стерильные мешки (пакеты) для хранения препаратов крови, выпускаемые заводом "Синтез" г. Курган или фирмы Hambro. В качестве эластичных трубок 4, 5 для соединения контейнеров используются выпускаемые серийно полихлорвиниловые трубки. Термоэлементы 6, 14 в зависимости от задаваемой температуры нагрева могут быть выполнены в виде обычного нагревательного элемента (например, спирали) или с использованием термоэлектрических элементов типа "Пельтье". Питание термоэлементов осуществляется от интегрального стабилизатора, выполненного, например, на микросхемах серии 142 и двух- составных транзисторов. As containers 1, 2, 3, and 12, sterile plastic bags (bags) for storing blood products produced by the Synthesis plant in Kurgan or Hambro can be used. As elastic tubes 4, 5, commercially available polyvinyl chloride tubes are used to connect the containers. Thermoelements 6, 14, depending on the set heating temperature, can be made in the form of a conventional heating element (for example, a spiral) or using Peltier-type thermoelectric elements. Power supply of thermocouples is carried out from an integral stabilizer, made, for example, on 142 series microcircuits and two-component transistors.

Устройство блоков 7 и 15 регулирования и поддержание температуры физраствора, суспензии клеток и иммуномагнитного сорбента аналогично, собраны на двух операционных усилителях и формируют пропорциональный закон изменения регулирующего воздействия. На первом операционном усилителе собран формирователь сигнала ошибки регулирования, на втором суммирующий усилитель. The device blocks 7 and 15 regulation and maintaining the temperature of saline, cell suspension and immunomagnetic sorbent in the same way, collected on two operational amplifiers and form a proportional law of change of the regulatory effect. At the first operational amplifier, a shaper of the control error signal is assembled, at the second, a summing amplifier.

Данная схема регулирования имеет две особенности: первая формирователь ошибки регулирования собран по мостовой схеме на операционном усилителе с демпфирующим звеном, вторая управление температурой осуществляется через цепь обратной связи интегрально-стабилизированного источника питания. В качестве термодатчиков применен транзистор, включенный по диодной схеме. Термодатчики располагаются на контейнерах с суспензией и физраствором. This control circuit has two features: the first control error driver is assembled according to the bridge circuit on an operational amplifier with a damping element, the second temperature control is carried out through the feedback circuit of the integrated stabilized power source. A transistor connected by a diode circuit is used as temperature sensors. Thermal sensors are located on containers with suspension and saline.

Блок электромагнитных клапанов состоит из четырех идентичных электромагнитов, подвижные сердечники которых по командам с блока управления открывают или закрывают эластичные трубки, по которым поступает соответствующий состав. В качестве контейнера 9 с ферментом используется, например, одноразовый стерильный шприц. The solenoid valve block consists of four identical electromagnets, the movable cores of which, on commands from the control unit, open or close the elastic tubes, through which the corresponding composition arrives. As the container 9 with the enzyme, for example, a disposable sterile syringe is used.

Блок дозированной подачи фермента 10 представляет управляемый привод, выполненный, например, на шаговом двигателе, который по команде с блока управления перемещает с помощью штока поршень шприца. The dosed supply unit of the enzyme 10 is a controllable drive made, for example, on a stepper motor, which, on a command from the control unit, moves the piston of the syringe using the rod.

Блок для перемешивания 13 представляет собой поворотное основание с закрепленным на ней контейнером с суспензией клеток и иммуномагнитным сорбентом. Основание блока перемешивания имеет опоры, относительно которых контейнер может прокачиваться по командам с блока управления 16 и приводимым в движение управляемым приводом, выполненным, например, на шаговом двигателе. The mixing unit 13 is a rotary base with a container attached to it with a suspension of cells and an immunomagnetic sorbent. The base of the mixing unit has supports, relative to which the container can be pumped by commands from the control unit 16 and driven by a controlled drive made, for example, on a stepper motor.

Блок управления 16 представляет из себя программное устройство, выполненное с применением однокристального процессора, обеспечивающее цикличность работы всех входящих в устройство блоков согласно циклограмме.Кроме того, в блоке управления размещен блок питания, обеспечивающий необходимыми условиями напряжений все электронные и электромеханические узлы. The control unit 16 is a software device made using a single-chip processor, which ensures the cyclic operation of all units included in the device according to the sequence diagram. In addition, the control unit contains a power supply unit that provides all the electronic and electromechanical components with the necessary voltage conditions.

Устройство магнитной сепарации клеток работает следующим образом. Работу устройства рассмотрим на примере очистки костного мозга путем выделения из него с помощью метода позитивной селекции стволовых клеток, являющихся предшественниками клеток кроветворной системы (СД34+), осуществляемой в соответствии с циклограммой, приведенной на фиг. 2. Определенное количество костного мозга (100-300 мл в зависимости от массы тела больного) помещают в контейнер 12, разбавляют с использованием физиологического раствора и противосвертывающих препаратов (например, гепарин). Далее в приготовленный раствор помещают иммуномагнитный сорбент, состоящий из магнитоуправляемых капсул (частицы железа, покрытие полистиролом), связанных с моноклональными антителами, специфичных к стволовым клеткам костного мозга (СД34+). Соединяют контейнер 12 с контейнерами 1, 2, 3 и 9 с помощью эластичных трубок с соблюдением требований стерильности. При этом эластичные трубки 4 и 5 пережаты пружинами электроклапанов 8. Контейнер 1 устанавливают на блок термоэлементов 6, а контейнер 12 на блок перемешивания 13 с закрепленным на нем также блоком термоэлементов 14. Соединяют контейнер с ферментом 9 с блоком дозированной подачи фермента 10. После включения напряжения питания начинается работа устройства в автоматическом режиме в соответствии с циклограммой (фиг. 2). Система перемешивания (прокачка контейнера) 18 начинает функционировать одновременно с включением системы нагрева суспензии и физраствора 17 для уменьшения времени выхода на режим стабилизации и исключения локальных перегревов суспензии. Таким образом происходит процесс инкубации, т.е. магнитоуправляемые капсулы с моноклональными антителами в силу специфичности сцепляются только со ствольными клетками костного мозга (СД34+). A device for the magnetic separation of cells works as follows. We will consider the operation of the device using the example of bone marrow purification by isolation from it using the positive selection of stem cells, which are the precursors of the hematopoietic system cells (CD34 +), carried out in accordance with the sequence diagram shown in FIG. 2. A certain amount of bone marrow (100-300 ml, depending on the patient’s body weight) is placed in container 12, diluted with physiological saline and anticoagulant preparations (for example, heparin). Next, an immunomagnetic sorbent consisting of magnetically controlled capsules (iron particles, polystyrene coating) connected with monoclonal antibodies specific for bone marrow stem cells (CD34 +) is placed in the prepared solution. Container 12 is connected to containers 1, 2, 3, and 9 using flexible tubes in compliance with sterility requirements. In this case, the elastic tubes 4 and 5 are clamped by the springs of the electrovalves 8. The container 1 is mounted on the thermocouple block 6, and the container 12 on the stirring block 13 with the thermocouple block 14 also attached. Connect the container with the enzyme 9 to the dosed supply of the enzyme 10. After switching on the supply voltage starts the operation of the device in automatic mode in accordance with the sequence diagram (Fig. 2). The mixing system (pumping the container) 18 begins to function simultaneously with the inclusion of the suspension heating system and saline solution 17 to reduce the time it takes for the stabilization mode to occur and eliminate local overheating of the suspension. Thus, the incubation process occurs, i.e. magnetically controlled capsules with monoclonal antibodies, due to their specificity, adhere only to bone marrow stem cells (CD34 +).

На 20-й минуте включается магнитная система, в результате чего сорбент с СД34+ клетками притягивается. Через 20 мин (на 40-й минуте) открывается электроклапан слива отстоя 20 и в течение 2 мин происходит слив жидкости с СД34- клетками в контейнер 3. На 42-й минуте открывается клапан долива физиологического раствора 21 с закрытием клапана слива отстоя 20 и происходит наполнение контейнера 12 физиологическим раствором из контейнера 1. At the 20th minute, the magnetic system turns on, as a result of which the sorbent with SD34 + cells is attracted. After 20 minutes (at the 40th minute), the solenoid drain drain valve 20 opens and within 2 minutes the liquid with SD34 cells is drained into the container 3. At the 42nd minute, the valve for adding saline solution 21 opens with the closure of the drainage valve 20 and occurs filling the container 12 with physiological saline from the container 1.

Далее происходит перемешивание суспензии в контейнере 12 в течение 1-й минуты с последующим включением магнитной системы 19 и сливом жидкости с СД34- клетками в контейнер 3. Эта процедура происходит три раза с целью повышения степени очистки костного мозга. Then, the suspension is mixed in the container 12 for 1 minute, followed by the inclusion of the magnetic system 19 and the discharge of liquid with CD34 cells into the container 3. This procedure occurs three times in order to increase the degree of purification of the bone marrow.

После этого на 63-й минуте происходит долив физиологического раствора через открывающийся на 0,2 мин клапан долива физраствора 21 с одновременным включением прокачки контейнера 18. На 64-й минуте открывается электроклапан долива фермента 22 в контейнер с суспензией 12 с необходимым количеством фермента. С началом введения фермента происходит перемешивание (прокачка) контейнера 18, при этом происходит отделение под воздействием фермента СД34+ клеток от иммуномагнитного сорбента. Далее включается электроклапан долива физраствора 21 и в контейнер с суспензией добавляется еще физиологический раствор для прекращения действия фермента с одновременным включением магнитной системы для притяжения магнитоуправляемых капсул. After that, at the 63rd minute, the physiological solution is added through the valve for adding saline solution 21, which opens for 0.2 minutes, and the pump 18 is turned on at the same time. At the 64th minute, the solenoid valve of the enzyme 22 is opened into the container with suspension 12 with the required amount of enzyme. With the beginning of the introduction of the enzyme, mixing (pumping) of the container 18 occurs, while separation occurs under the influence of the SD34 + enzyme from the immunomagnetic sorbent. Next, an electrovalve topping up the saline solution 21 is turned on and a physiological solution is added to the suspension container to terminate the enzyme while simultaneously turning on the magnetic system to attract magnetically controlled capsules.

Таким образом, отделение от магнитоуправляемых капсул СД34+ клетки через открывающийся электроклапан 23 слива чистого продукта помещаются в контейнер для чистого продукта. Полученные в результате очистки СД34+ клетки при необходимости могут быть сразу использованы для аутотрансплантации или помещены на длительное хранение в камеру глубокого охлаждения. Thus, the separation of the pure product from the magnetically controlled capsules СД34 + through the opening electrovalve 23 of the drain of the pure product is placed in the container for the pure product. If necessary, the cells obtained as a result of purification of SD34 + can be immediately used for autotransplantation or placed for long-term storage in a deep cooling chamber.

Работа устройства для разделения клеток в случае негативной селекции происходит аналогичным образом, только в этом случае подача фермента в суспензию с клетками не производится, а специфичные антитела с магнитоуправляемыми капсулами сцепляются с АГ- клетками. The device for separation of cells in the case of negative selection occurs in a similar way, only in this case the enzyme is not supplied to the suspension with cells, and specific antibodies with magnetically controlled capsules adhere to AG cells.

ЦНИИТОЧМАШ, ОНЦ РАМН и ГНИИХТЭОС в соответствии с договором с Минздравмедпром РФ разработан и изготовлен экспериментальный образец устройства магнитной сепарации клеток (ОКР "Сортер") и лабораторные образцы иммуномагнитного сорбента. В процессе экспериментальных исследований и предварительных испытаний было показано, что система обеспечивает высокую степень очистки аутотрансплантата костного мозга (до 99,9%),что практически исключит рецидив заболевания при трансплантации. TSNIITOCHMASH, ONC RAMS and GNIIHTEOS in accordance with the agreement with the Ministry of Health of the Russian Federation developed and manufactured an experimental sample of a device for magnetic separation of cells (OCD "Sorter") and laboratory samples of an immunomagnetic sorbent. In the process of experimental studies and preliminary tests, it was shown that the system provides a high degree of purification of the bone marrow autograft (up to 99.9%), which practically eliminates the disease recurrence during transplantation.

Claims

A device for magnetic cell separation containing a container with a suspension of blood cells of the hematopoietic system and an immunomagnetic sorbent, a container with saline solution, a container for collecting antigen-positive cells and a container for collecting saline with antigen-negative cells connected by elastic tubes, a magnetic system unit and a control unit characterized in that a block for mixing a suspension of cells with an immunomagnetic sorbent, a block of thermocouples with a block for regulating and maintaining the temperature of the suspension to taphole and immunomagnetic sorbent, block of electromagnetic valves, a container with an enzyme, a block of dosed supply of an enzyme, a block of thermocouples with a block for regulating and maintaining the temperature of saline solution, while the outputs of the control block are connected to the inputs of the block of electromagnetic valves, a mixing block with a container with a cell suspension fixed to it and an immunomagnetic sorbent, a unit for the dosed supply of enzymes, a block for the magnetic system, a unit for regulating and maintaining the temperature of the cell suspension, and an immunomagnet of the second sorbent and the block for regulating and maintaining the temperature of the saline solution, the output of the block for regulating and maintaining the temperature of the cell suspension and the immunomagnetic sorbent is connected to the input of the block of thermocouples of the cell suspension and the immunomagnetic sorbent mounted on the mixing block, the output of the block for regulating and maintaining the temperature of the saline solution is connected to the input of the block of thermocouples of the saline solution , with a container with saline solution fixed on it, the output of the dosed enzyme supply unit is connected to the input of the container with f An enzyme whose output is connected via an elastic tube to a container with a cell suspension and an immunomagnetic sorbent.