RU2050857C1

RU2050857C1 - Method for carrying out emergency prophylaxis of anthrax in laboratory animals

Info

Publication number: RU2050857C1
Authority: RU
Inventors: О.И. Коготкова; Н.П. Буравцева; Ю.В. Юркевич; Т.М. Андронова
Original assignee: Научно-исследовательский институт Кавказа и Закавказья
Priority date: 1988-10-18
Filing date: 1988-10-18
Publication date: 1995-12-27

Abstract

FIELD: veterinary medicine. SUBSTANCE: method involves subcutaneously administering single dose of immunostimulation remedy 24-72 h before being infected and doxycyclin hydrochloride 24 h after being infected once a day at a dose of 1.5-13.5 mg/kg during 3 days. EFFECT: enhanced effectiveness of prophylaxis. 2 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к способам экстренной профилактики сибиреязвенной инфекции с использованием этиотропной терапии и иммуностимуляторов. The invention relates to medicine, in particular to methods of emergency prevention of anthrax infection using etiotropic therapy and immunostimulants.

Известен способ специфической профилактики сибирской язвы с использованием живой сибиреязвенной вакцины (Бургасов П.Н. и Рожков Г.И. Сибиреязвенная инфекция. М. 1984; Ипатенко Н.Г. Седов В.А. Зелепукин В.С. и Гущин В. Н. Сибирская язва сельскохозяйственных животных. М. 1987). There is a method of specific prophylaxis of anthrax using live anthrax vaccine (Burgas P.N. and Rozhkov G.I. Siberian ulcer infection. M. 1984; Ipatenko N.G. Sedov V.A. Zelepukin V.S. and Gushchin V.N. Anthrax of farm animals. M. 1987).

Недостатком этого способа является то, что в процессе применения вакцины создается недостаточно напряженный и длительный поствакцинальный противосибиреязвенный иммунитет, т. е. в данном случае специфическая профилактика вакциной СТИ обладает относительно низкой эффективностью. The disadvantage of this method is that in the process of using the vaccine, insufficiently intense and long-term post-vaccination anti-sirulent immunity is created, i.e., in this case, specific prophylaxis with STI vaccine is relatively low.

Наиболее близким к предлагаемому является способ экстренной профилактики сибиреязвенной инфекции, включающий сочетанное использование антибиотиков, например доксициклина гидрохлорида, с живой сибиреязвенной вакциной СТИ, которую вводят после окончания курса экстренной профилактики, при наличии вакцины и антибиотикоустойчивых штаммов курс экстренной профилактики проводят одновременно с вакцинацией (Инструкция по сочетанному применению средств экстренной и специфической профилактики опасных инфекционных заболеваний. М. 1983). Closest to the proposed method is the emergency prevention of anthrax infection, including the combined use of antibiotics, for example, doxycycline hydrochloride, with the live anthrax vaccine STI, which is administered after the end of the emergency prevention course, if there is a vaccine and antibiotic-resistant strains, the emergency prevention course is carried out simultaneously with vaccination (Instruction for combined use of emergency and specific prophylaxis of dangerous infectious diseases. M. 1983).

Недостатком данного способа профилактики является также низкая иммунологическая активность сибиреязвенной вакцины СТИ. The disadvantage of this method of prevention is also the low immunological activity of the anthrax vaccine STI.

Никитин А. В. с соавторами (Антибиотики и химиотерапия, 1985, N 5, с. 360-364) использовали глюкозаминилмурамилдипептид (ГМДП) с доксициклином на фоне диагностического препарата тулярина. Однако авторами не изучены протективные свойства сочетанного применения указанных препаратов, вводимых по принципиально отличной дозовременной схеме. Nikitin A.V. et al (Antibiotics and chemotherapy, 1985, No. 5, pp. 360-364) used glucosaminyl muramyl dipeptide (GMDP) with doxycycline against the background of the diagnostic drug tularine. However, the authors have not studied the protective properties of the combined use of these drugs, administered by a fundamentally excellent pre-treatment regimen.

Целью изобретения является повышение эффективности профилактических мероприятий. The aim of the invention is to increase the effectiveness of preventive measures.

Для этого вводят доксициклина гидрохлорид и иммуностимулятор в терапевтических дозах, причем в качестве иммуностимулятора используют глюкозаминилмурамилдипептид (ГМДП), вводимый однократно подкожно за 72-24 ч до момента инфицирования
Отличительные признаки это сочетанное использование одноразового подкожного введения ГМДП за 72-24 ч до инфицирования и доксициклина гидрохлорида обеспечивает синергизм действия данных препаратов при сибиреязвенной инфекции. Это объясняется тем, что при инфицировании организма сибиреязвенным микробом угнетается клеточное звено неспецифической резистентности, в том числе и интралейкоцитарная бактерицидная функция полиморфно-ядерных лейкоцитов крови. Начало этого процесса соответствует инкубационному периоду сибиреязвенной инфекции.To do this, doxycycline hydrochloride and an immunostimulant are administered in therapeutic doses, and glucosaminylmuramyl dipeptide (GMDP) is used as an immunostimulant, administered once subcutaneously 72-24 hours before infection
Distinctive features are the combined use of a single subcutaneous administration of GMDP 72-24 hours before infection and doxycycline hydrochloride provides a synergistic effect of these drugs for anthrax infection. This is due to the fact that when an organism is infected with an anthrax microbe, the cellular link of nonspecific resistance is inhibited, including the intraluminal bactericidal function of polymorphic nuclear blood leukocytes. The beginning of this process corresponds to the incubation period of anthrax infection.

Кроме того, в настоящее время в качестве средства экстренной профилактики сибиреязвенной инфекции рекомендуется использовать доксициклина гидрохлорид. Однако при всех положительных его качествах как антибиотика широкого спектра действия, обладающего пролонгированным эффектом при пероральном методе введения, он угнетает интралейкоцитарную бактерицидную функцию полиморфно-ядерных лейкоцитов крови: ингибирует их хемотаксис, подавляет миграцию, снижает фагоцитарную активность, отрицательно влияет на уровень внутриклеточного интерлейкина-1. In addition, at present, doxycycline hydrochloride is recommended to be used as an emergency preventive measure for anthrax infection. However, with all its positive qualities as a broad-spectrum antibiotic, which has a prolonged effect with the oral method of administration, it inhibits the intra-leukocyte bactericidal function of polymorphonuclear blood leukocytes: inhibits their chemotaxis, inhibits migration, reduces phagocytic activity, negatively affects the level of intracellular interleukin-1 .

Поэтому с целью возможной неспецифической иммунокоррекции за счет исключения неблагоприятного побочного действия антибиотика и особенности острого течения сибиреязвенной инфекции появилась необходимость в использовании иммуностимулятора, активизирующего неспецифическую бактерицидную функцию полиморфно-ядерных лейкоцитов крови. Therefore, with the aim of possible non-specific immunocorrection due to the elimination of the adverse side effect of the antibiotic and the acute course of anthrax infection, it became necessary to use an immunostimulator that activates the non-specific bactericidal function of polymorphic nuclear blood leukocytes.

В настоящее время известно неспецифическое иммуностимулирущее влияние глюкозаминилмурамилдипептида, который активизирует Т-хелперы, продуцирующие интерлейкин-2, способствует увеличению количества антителообразующих клеток в селезенке мышей, иммунизированных эритроцитами барана, в эксперименте оказывает противоопухолевое действие при меланоме Б-16, Саркоме 37, 298, Саркоме Иесена. Одним из проявлений иммуностимулирующего влияния глюкозаминилмурамилдипептида является активизация супероксидгенерирующей системы макрофагов. В механизме активизации макрофагов под влиянием глюкозаминилмурамилдипептида важную роль может играть и понижение активности 5'-нуклеотидазы в этих клетках. At present, the nonspecific immunostimulating effect of glucosaminylmuramyl dipeptide, which activates T-helpers producing interleukin-2, promotes an increase in the number of antibody-forming cells in the spleen of mice immunized with sheep erythrocytes, has an antitumor effect in the experiment with melanoma B-16, Sarcoma, Sarcoma Yesen. One of the manifestations of the immunostimulating effect of glucosaminylmuramyl dipeptide is the activation of the superoxide-generating macrophage system. In the mechanism of macrophage activation under the influence of glucosaminylmuramyl dipeptide, a decrease in the activity of 5'-nucleotidase in these cells can also play an important role.

В эксперименте показано принципиально новое свойство протективный эффект сочетанного применения глюкозаминилмурамилдипептида с доксициклином, выражающееся в повышении выживаемости животных, инфицированных сибиреязвенным микробом, продлении их средней продолжительности жизни, возможности снижения дозы антибиотика без потери его эффективности. The experiment showed a fundamentally new property: the protective effect of the combined use of glucosaminylmuramyl dipeptide with doxycycline, expressed in increasing the survival of animals infected with an anthrax microbe, prolonging their average life expectancy, and the possibility of reducing the dose of the antibiotic without losing its effectiveness.

При сравнительном анализе эффективности экстренной профилактики сибиреязвенной инфекции по известному и предлагаемому способам (терапевтическая доза ГМДП 5-15 мг/кг, доксициклина гидрохлорида 1,5-13,5 мг/кг) процент защиты разность между процентом выживших животных по предлагаемой и известной схемам составляет 20-50. In a comparative analysis of the effectiveness of emergency prophylaxis of anthrax infection by the known and proposed methods (therapeutic dose of GMDP 5-15 mg / kg, doxycycline hydrochloride 1.5-13.5 mg / kg), the percentage of protection, the difference between the percentage of surviving animals according to the proposed and known schemes is 20-50.

Таким образом, предлагаемый способ экстренной профилактики сибиреязвенной инфекции позволяет увеличить выживаемость животных на 20-50% по сравнению с известной схемой антибиотикопрофилактики данной инфекции. Глюкозаминилмурамилдипептид обладает неспецифическим иммуностимулирующим действием к возбудителю сибирской язвы. Thus, the proposed method for the emergency prevention of anthrax infection allows to increase the survival of animals by 20-50% compared with the known antibiotic prophylaxis scheme for this infection. Glucosaminylmuramyl dipeptide has a non-specific immunostimulating effect on the causative agent of anthrax.

Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.

Животным за 72-24 ч до момента возможного инфицирования вводят 1 раз подкожно глюкозаминилмурамилдипептид в терапевтической дозе 5 мг/кг. Экстренную профилактику доксициклином гидрохлоридом начинают проводить спустя 24 ч после инфицирования в дозах 1,5-13,5 мг/кг. The animals are injected subcutaneously with glucosaminyl muramyl dipeptide at a therapeutic dose of 5 mg / kg 1 time 72-24 hours before a possible infection. Emergency prophylaxis with doxycycline hydrochloride begins to be carried out 24 hours after infection in doses of 1.5-13.5 mg / kg.

Так как действие иммуностимуляторов зависит от различных факторов: дозы антибиотика, дозы, кратности и срока введения иммуностимулятора и т.д. то изучение сочетанного применения доксициклина гидрохлорида и глюкозаминилмурамилдипептида проводят с учетом математической теории планирования экспериментов и с последующей обработкой результатов на ЭВМ с использованием матрицы двухфакторного трехуровневого эксперимента. Since the effect of immunostimulants depends on various factors: the dose of the antibiotic, the dose, the multiplicity and timing of the administration of the immunostimulant, etc. then the study of the combined use of doxycycline hydrochloride and glucosaminylmuramyl dipeptide is carried out taking into account the mathematical theory of experimental design and subsequent processing of the results on a computer using a matrix of a two-factor three-level experiment.

Действие сочетанного применения препаратов оценивают по выживаемости, средней продолжительности жизни животных, продолжительности инкубационного периода. The effect of the combined use of drugs is evaluated by survival, average life expectancy of animals, the duration of the incubation period.

В каждую группу входит по 10 нелинейных белых мышей, самцов двухмесячного возраста, массой 18-20 г. Инфицирование проводят вирулентным штаммом сибиреязвенного с микроба в дозе 10 ЛД₅₀ (I ЛД₅₀1 ^.10² спор).Each group included 10 non-linear white mice, two months old males, weighing 18-20 g Infection is carried out with the virulent microbe anthracis in a dose of 10 _LD50 (I 1 LD _^50. February ¹⁰ spores).

В качестве средства экстренной профилактики перорально вводят доксициклина гидрохлорид через 24 ч после инфицирования, однократно в сутки, на протяжении 3 сут. Глюкозаминилмурамилдипептид вводят 1 раз подкожно в бедро по 5 мг/кг в 0,5 мл физиологического апирогенного раствора. As a means of emergency prevention, doxycycline hydrochloride is orally administered 24 hours after infection, once a day, for 3 days. Glucosaminylmuramyl dipeptide is administered 1 time subcutaneously in the thigh at 5 mg / kg in 0.5 ml of physiological pyrogen-free solution.

В табл. 1 представлено влияние дозы и срока самостоятельно введенного глюкозаминилмурамилдипептида на неспецифическую резистентность белых мышей к сибиреязвенной инфекции. In the table. Figure 1 shows the effect of the dose and duration of self-administered glucosaminylmuramyl dipeptide on the non-specific resistance of white mice to anthrax infection.

Из данных табл. 1 видно, что самостоятельно вводимый глюкозаминилмурамилдипептид в интервале доз 5-15 мг/кг за 72 или 48 ч до инфицирования способствует активизации неспецифической резистентности белых мышей к возбудителю сибирской язвы, что явилось основанием для изучения сочетанного применения глюкозаминилмурамилдипептида с доксициклином гидрохлоридом. From the data table. 1 it can be seen that self-administered glucosaminylmuramyl dipeptide in the dose range of 5-15 mg / kg 72 or 48 hours before infection promotes activation of nonspecific resistance of white mice to the causative agent of anthrax, which was the basis for studying the combined use of glucosaminyl muramyl dipeptide with doxycycline hydrochloride.

Сочетанное применение диоксициклина гидрохлорида с глюкозаминилмурамилдипептидом при экстренной профилактике сибиреязвенной инфекции показано в табл.2. The combined use of dioxicycline hydrochloride with glucosaminylmuramyl dipeptide in the emergency prevention of anthrax infection is shown in Table 2.

Таким образом, установлено повышение неспецифической резистентноси белых мышей к сибиреязвенной инфекции при проведении экстренной профилактики доксициклином гидрохлоридом в сочетании с глюкозаминилмурамилдипептидом как по показателю выживаемости животных, так и по средней продолжительности жизни павших белых мышей. Защитный эффект иммуностимулятора выявлен во всем исследуемом диапазоне доз доксициклина. Thus, an increase in the non-specific resistance of white mice to anthrax infection was established during emergency prophylaxis with doxycycline hydrochloride in combination with glucosaminyl muramyl dipeptide both in terms of animal survival and average life expectancy of dead white mice. The protective effect of the immunostimulant was detected in the entire studied range of doxycycline doses.

П р и м е р 1. Рассмотрено действие глюкозаминилмурамилдипептида, вводимого за 72 ч до заражения. PRI me R 1. The effect of glucosaminylmuramyl dipeptide administered 72 hours before infection is examined.

Установлено, что при одноразовом применении глюкозаминилмурамилдипептида в сочетании с доксициклином гидрохлоридом выживаемость животных возросла на 30-50% средняя продолжительность жизни увеличилась на 3-5 cут, инкубационный период продлился на 3 сут, создав при этом условия для отсроченного начала экстренной профилактики. При данной схеме сочетанного применения антибиотика с иммуностимулятором выявлена возможность снижения дозы доксициклина в 3 раза без потери его эффективности. It was found that with a single use of glucosaminylmuramyl dipeptide in combination with doxycycline hydrochloride, animal survival increased by 30-50%, the average life expectancy increased by 3-5 days, the incubation period lasted 3 days, creating conditions for a delayed start of emergency prevention. With this scheme, the combined use of an antibiotic with an immunostimulant revealed the possibility of reducing the dose of doxycycline by 3 times without losing its effectiveness.

П р и м е р 2. Рассмотрено действие глюкозаминилмурамилдипептида, вводимого за 48 ч до заражения. PRI me R 2. The effect of glucosaminylmuramyl dipeptide administered 48 hours before infection is examined.

Установлено, что при одноразовом применении глюкозаминилмурамилдипептида в сочетании с доксициклином гидрохлоридом выживаемость животных возросла на 20-30% средняя продолжительность жизни павших животных увеличилась на 1 сут, инкубационный период 1-2 cут. представилось возможным снизить дозу доксициклина гидрохлорида в 3 раза без потери его эффективности. It was found that with a single use of glucosaminylmuramyl dipeptide in combination with doxycycline hydrochloride, animal survival increased by 20-30%, the average life expectancy of dead animals increased by 1 day, the incubation period of 1-2 days. it was possible to reduce the dose of doxycycline hydrochloride by 3 times without losing its effectiveness.

П р и м е р 3. Рассмотрено действие глюкозаминилмурамилдипептида, вводимого за 24 ч до заражения. PRI me R 3. The effect of glucosaminylmuramyl dipeptide administered 24 hours before infection is examined.

Установлено, что при одноразовом применении глюкозаминилмурамилдипептида в сочетании с доксициклином гидрохлоридом выживаемость животных возросла на 30% средняя продолжительность жизни павших животных на 1-2 cут, инкубационный период также на 1-2 cут, а также что при данном сроке введения иммуномодулятора можно снизить дозу антибиотика в 3 раза без потери его эффективности. It was found that with a single use of glucosaminylmuramyl dipeptide in combination with doxycycline hydrochloride, the animal survival increased by 30%, the average life expectancy of dead animals was 1-2 days, the incubation period was also 1-2 days, and also, with this period of administration of the immunomodulator, the antibiotic dose can be reduced 3 times without losing its effectiveness.

Использование предлагаемой схемы экстренной профилактики сибиреязвенной инфекции в эксперименте обеспечило повышение выживаемости нелинейных белых мышей на 20-50% продление среднего срока жизни павших животных на 1-5 сут. и удлинение инкубационного периода на 1-3 cут, дало возможность снизить суточную и соответственно курсовую дозу доксициклина гидрохлорида в 3 раза. Using the proposed scheme for emergency prevention of anthrax infection in the experiment provided an increase in the survival of nonlinear white mice by 20-50%, prolonging the average life of dead animals by 1-5 days. and lengthening the incubation period by 1-3 days, made it possible to reduce the daily and, accordingly, course dose of doxycycline hydrochloride by 3 times.

Claims

METHOD FOR EMERGENCY PREVENTION OF ANTI-ULCER INFECTION IN LABORATORY ANIMALS, which involves the administration of doxycycline hydrochloride and an immunostimulant, characterized in that the immunostimulants use a glucosaminylmuramyl dipeptide, it is administered once every 15 mg / dose once a dose of 5 mg / dose 72 mg administered 24 hours after infection once a day at a dose of 1.5-13.5 mg / kg for 3 days.