RU2021126015A - ОЧИСТКА иРНК ФИЛЬТРАЦИЕЙ В ТАНГЕНЦИАЛЬНОМ ПОТОКЕ - Google Patents
ОЧИСТКА иРНК ФИЛЬТРАЦИЕЙ В ТАНГЕНЦИАЛЬНОМ ПОТОКЕ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2021126015A RU2021126015A RU2021126015A RU2021126015A RU2021126015A RU 2021126015 A RU2021126015 A RU 2021126015A RU 2021126015 A RU2021126015 A RU 2021126015A RU 2021126015 A RU2021126015 A RU 2021126015A RU 2021126015 A RU2021126015 A RU 2021126015A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mrna molecules
- solution
- stage
- iib
- filtration
- Prior art date
Links
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 title claims 16
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 title claims 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims 2
- 230000030609 dephosphorylation Effects 0.000 claims 2
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 claims 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 claims 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical group OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 claims 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims 1
- 239000012527 feed solution Substances 0.000 claims 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims 1
Claims (22)
1. Способ очистки молекул иРНК, где указанный способ включает
(Iа) очистку осажденных молекул иРНК из суспензии, включающей осажденные молекулы иРНК, с использованием первого раствора,
(Iб) промывку и растворение очищенных осажденных молекул иРНК, полученных на стадии (Iа), с использованием второго раствора,
(IIа) очистку молекул иРНК из растворенных молекул иРНК, полученных на стадии (Iб), с использованием третьего раствора, включающего хелатирующий агент, а затем
(IIб) промывку очищенных молекул иРНК, полученных на стадии (IIа) с использованием четвертого раствора,
где стадии (Iа)-(IIб) проводят с использованием фильтрации в тангенциальном потоке.
2. Способ по п. 1, где хелатирующим агентом является ЭДТА.
3. Способ по п. 1 или 2, где значение рН третьего раствора находится в интервале от 1 до 10.
4. Способ по любому из предшествующих пунктов, где третий раствор включает буферное вещество MOPS.
5. Способ по любому из предшествующих пунктов, где стадии (Iа)-(IIб) проводят при температуре от 0°С до 25°С.
6. Способ по любому из предшествующих пунктов, где перед стадией (Iа) указанную суспензию получают с использованием ацетата аммония для осаждения молекул иРНК, и где первый раствор содержит ацетат аммония.
7. Способ по любому из предшествующих пунктов, где второй раствор представляет собой воду или где четвертый раствор представляет собой воду или включает хлорид и/или цитрат натрия.
8. Способ по любому из предшествующих пунктов, где молекулы иРНК содержатся в концентрате после фильтрации в тангенциальном потоке.
9. Способ по п. 8, где концентрат, полученный на стадии (Iа), используют в качестве питающего потока раствора для фильтрации в тангенциальном потоке на стадии (Iб), концентрат, полученный на стадии (Iб), используют в качестве питающего потока раствора на стадии (IIа), и концентрат, полученный на стадии (IIа), используют в качестве питающего раствора на стадии (IIб).
10. Способ по любому из предшествующих пунктов, где молекулы иРНК, содержащиеся в суспензии, получают транскрипцией in vitro.
11. Способ по любому из предшествующих пунктов, где способ дополнительно включает дефосфорилирование и/или полиаденилирование и/или пост-кэппинг молекул иРНК.
12. Способ по п. 11, где способ включает дефосфорилирование молекул иРНК, полученных на стадии (Iб), с последующим выполнением этапов (Iа)-(IIб), с последующим полиаденилированием полученных молекул мРНК, с последующим выполнением стадий (Iа)-(IIб).
13. Способ по любому из предшествующих пунктов, где в случае стадии (Iа) для фильтрации в тангенциальном потоке используют фильтрационную мембрану с пределом отсечения по молекулярной массе от 300 кДа до 0,65 мкм, и/или где в случае стадий (Iб) и (IIб) используют фильтрационную мембрану с пределом отсечения по молекулярной массе 1 кДа до 0,65 мкм, и/или в случае стадии (IIа) используют фильтрационную мембрану с пределом отсечения по молекулярной массе по меньшей мере 70 кДа.
14. Способ по любому из предшествующих пунктов, где объем диафильтрации любого первого, второго, третьего и/или четвертого раствора составляет 1-кратный объем суспензии на стадии (Iа).
15. Способ получения фармацевтической композиции, включающий
(а) очистку молекул иРНК способом по любому из пп 1-14, и
(б) переработку полученных таким образом молекул иРНК в фармацевтическую композицию.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP19156522.5 | 2019-02-11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021126015A true RU2021126015A (ru) | 2023-03-14 |
| RU2810003C2 RU2810003C2 (ru) | 2023-12-21 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2012503489A5 (ru) | ||
| DK2007883T3 (da) | Rensningsfremgangsmåder til isolering af renset vesikulær stomatitis-virus fra cellekultur | |
| CN103394076B (zh) | 一种人血白蛋白的制备工艺 | |
| EA201691696A1 (ru) | Способы очистки матричной рнк | |
| ZA202106391B (en) | Mrna purification by tangential flow filtration | |
| RU2019110171A (ru) | Очищенные композиции олигосахаридов грудного молока | |
| RU2021126015A (ru) | ОЧИСТКА иРНК ФИЛЬТРАЦИЕЙ В ТАНГЕНЦИАЛЬНОМ ПОТОКЕ | |
| CN104031067A (zh) | 一种头孢曲松钠粗品的精制方法 | |
| RU2013112276A (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПОЗИЦИИ IgG ПОСРЕДСТВОМ ТЕПЛОВОЙ ОБРАБОТКИ | |
| CN102757992A (zh) | 一种聚乙二醇偶联结合超滤离心分离富集糖肽的方法 | |
| JPWO2020232371A5 (ru) | ||
| HRP20160815T1 (hr) | Postupak pročišćavanja ugljikohidrata iz skupine a streptokoka | |
| CN104498445A (zh) | 一种从水体中高效浓缩病毒的方法 | |
| CN114307652B (zh) | 一种硫代磷酸血液净化改性膜及其制备方法 | |
| ATE477267T1 (de) | Methode zur reinigung von proteinen | |
| WO2017036138A1 (zh) | A群脑膜炎球菌荚膜粗多糖纯化工艺 | |
| CN105753977A (zh) | 一种规模化生产高纯度乌司他丁的方法 | |
| JP2015181356A (ja) | 精製ウイルス液の製造方法及びウイルス検出方法 | |
| CN111606912A (zh) | 一种高效分离葫芦[n]脲的方法 | |
| RU2021136635A (ru) | Способы очистки матричной рнк | |
| JP2003012807A (ja) | 還元型ケラチンの製造方法 | |
| CN102988989B (zh) | 一种代血浆的膜分离精制提纯方法 | |
| CN1243024C (zh) | 沙枣胶多糖脱色精制方法 | |
| CN119285734A (zh) | 一种贻贝黏蛋白的提取纯化方法 | |
| RU2018136935A (ru) | Способ получения кровезаменителя для применения в ветеринарии |