RU2015152861A - Способ очистки полисиалированного инсулина человека - Google Patents
Способ очистки полисиалированного инсулина человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2015152861A RU2015152861A RU2015152861A RU2015152861A RU2015152861A RU 2015152861 A RU2015152861 A RU 2015152861A RU 2015152861 A RU2015152861 A RU 2015152861A RU 2015152861 A RU2015152861 A RU 2015152861A RU 2015152861 A RU2015152861 A RU 2015152861A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- solution
- insulin
- polysialic acid
- polar component
- column
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims 9
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 title claims 2
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 title claims 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 title 1
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 12
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims 8
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims 3
- VKIGAWAEXPTIOL-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyhexanenitrile Chemical compound CCCCC(O)C#N VKIGAWAEXPTIOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/20—Partition-, reverse-phase or hydrophobic interaction chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Claims (11)
1. Способ получения белка, который содержит инсулин и остаток полисиаловой кислоты, включающий следующие стадии:
a) нанесение раствора, содержащего смесь свободного инсулина и конъюгатов инсулина и полисиаловой кислоты, содержащих один или более остатков полисиаловой кислоты на молекулу инсулина, на колонку, содержащую хроматографический материал PRLP-S (диаметр пор 300 
, размер частиц 10 мкм), уравновешенный раствором с содержанием неполярного компонента 2-8%,
b) промывка колонки раствором с содержанием неполярного компонента 2-8% и, таким образом, удаление свободной полисиаловой кислоты,
c) промывка колонки раствором с ступенчато возрастающей концентрацией неполярного компонента до конечного значения около 80% и, таким образом, раздельное высвобождение с колонки белков, содержащих два или более остатков полисиаловой кислоты, также белка, содержащего инсулин и один остаток полисиаловой кислоты, и инсулина, при этом белок, содержащий инсулин и один остаток полисиаловой кислоты, высвобождается вторым.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствор с содержанием неполярного компонента 2-8% представляет собой раствор с pH, значение которого составляет 6,0-8,0.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что раствор с содержанием неполярного компонента представляет собой буферную систему на основе триэтиламмония ацетата.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствором для промывки колонки является раствор с концентрацией этанола 5%.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствором со ступенчато возрастающей концентрацией неполярного компонента является раствор со ступенчато возрастающей концентрацией этанола.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что раствор со ступенчато возрастающей концентрацией этанола имеет pH, значение которого составляет 6,0-8,0.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что инсулин представляет собой инсулин человека, полученный рекомбинантным путем.
8. Способ по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что один остаток полисиаловой кислоты имеет молекулярную массу в диапазоне от 10 кДа до 40 кДа.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015152861A RU2736358C2 (ru) | 2015-12-09 | 2015-12-09 | Способ очистки полисиалированного инсулина человека |
| PCT/RU2016/050083 WO2017099637A2 (ru) | 2015-12-09 | 2016-12-08 | Способ очистки полисиалированного инсулина человека |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015152861A RU2736358C2 (ru) | 2015-12-09 | 2015-12-09 | Способ очистки полисиалированного инсулина человека |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015152861A true RU2015152861A (ru) | 2017-06-15 |
| RU2015152861A3 RU2015152861A3 (ru) | 2019-06-14 |
| RU2736358C2 RU2736358C2 (ru) | 2020-11-16 |
Family
ID=59013781
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015152861A RU2736358C2 (ru) | 2015-12-09 | 2015-12-09 | Способ очистки полисиалированного инсулина человека |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2736358C2 (ru) |
| WO (1) | WO2017099637A2 (ru) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19838097A1 (de) * | 1998-08-24 | 2000-03-02 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Verfahren zur chromatographischen Reinigung von Insulinen |
| WO2009104199A1 (en) * | 2008-02-19 | 2009-08-27 | Biocon Limited | A method of obtaining purified heterologous insulins expressed in yeast |
| AR087433A1 (es) * | 2011-08-08 | 2014-03-26 | Merck Sharp & Dohme | Analogos de insulina n-glicosilados |
-
2015
- 2015-12-09 RU RU2015152861A patent/RU2736358C2/ru active
-
2016
- 2016-12-08 WO PCT/RU2016/050083 patent/WO2017099637A2/ru not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2736358C2 (ru) | 2020-11-16 |
| WO2017099637A2 (ru) | 2017-06-15 |
| RU2015152861A3 (ru) | 2019-06-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2018085599A3 (en) | Methods of nucleic acid sample preparation for immune repertoire sequencing | |
| WO2015195453A3 (en) | Methods for increasing the capacity of flow-through processes | |
| EA201790247A1 (ru) | Платформа для очистки биспецифичных антител | |
| CL2014003322A1 (es) | Proteínas de fusión que comprenden una molécula de inmunoglobulina y dos moléculas de interleuquina-2 (il-2); polinucleótido que la codifica; vector; célula huésped; método de producción; composición farmacéutica; y uso para tratar una enfermedad autoinmunológica. | |
| GEP20227447B (en) | Constructs having sirp-alpha domain or variant thereof | |
| FR3001362B1 (fr) | Procede de fractionnement des solubles de pois, fractions obtenues et leur valorisation | |
| EP3769775A3 (en) | Compositions for linking dna-binding domains and cleavage domains | |
| TR201809571T4 (tr) | Ll-22 polipeptidleri ile ıl-22 fc füzyon proteinleri ve kullanım yöntemleri. | |
| WO2013036778A3 (en) | Compstatin analogs with improved pharmacokinetic properties | |
| EA201691027A1 (ru) | Модуляторы aplnr и их применение | |
| RU2020124757A (ru) | Система и способ сбора образца нуклеиновой кислоты | |
| EP4389757A3 (en) | Methods for purifying antibodies | |
| MX2020000288A (es) | Cromatografia. | |
| MY180054A (en) | Human-derived anti-dipeptide repeats (dprs) antibody | |
| MX2016017115A (es) | Metodos y reactivos para la purificacion de proteinas. | |
| WO2017083729A3 (en) | Fixatives and methods of use | |
| AR104358A1 (es) | Método para la purificación de proteínas | |
| WO2016133152A3 (ja) | 蛋白質吸着抑制方法 | |
| RU2015152861A (ru) | Способ очистки полисиалированного инсулина человека | |
| EA201890187A1 (ru) | Рекомбинантные вирусоподобные частицы (vlp) с использованием протеина группового антигена (gag) вируса бычьего иммунодефицита | |
| BR112015026306A2 (pt) | método para separação e purificação da lactoferrina humana recombinante das sementes de arroz | |
| HK1213795A1 (zh) | 使用疏水作用層析法進行蛋白質的提純 | |
| WO2014169274A3 (en) | Modified proteins and methods of use thereof | |
| RU2019129537A (ru) | Способы получения пептидов, полипептидов или клеток для модулирования иммунитета | |
| RU2014114954A (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ДНК pA4, РЕКОМБИНАНТНАЯ ДНК pQE 30-pA4, ОБЕСПЕЧИВАЮЩИЕ ПОЛУЧЕНИЕ ПОЛИПЕПТИДА A4, ШТАММ Esherichia coli M 15-A4, ТРАНСФОРМИРОВАННЫЙ РЕКОМБИНАНТНОЙ ПЛАЗМИДНОЙ ДНК pQE 30-pA4 И ЭКСПРЕССИРУЮЩИЙ РЕКОМБИНАНТНЫЙ ПОЛИПЕПТИД A4, РЕКОМБИНАНТНЫЙ ПОЛИПЕПТИД A4, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ СЕЛЕКТИВНО СВЯЗЫВАТЬ ЧСА, АФФИННЫЕ СОРБЕНТЫ (ВАРИАНТЫ) И СПОСОБЫ УДАЛЕНИЯ ЧСА И IgG ИЗ СЫВОРОТКИ КРОВИ (ВАРИАНТЫ) |