RU2014149185A - Дифференцирование эмбриональных стволовых клеток человека в панкреатическую энтодерму - Google Patents
Дифференцирование эмбриональных стволовых клеток человека в панкреатическую энтодерму Download PDFInfo
- Publication number
- RU2014149185A RU2014149185A RU2014149185A RU2014149185A RU2014149185A RU 2014149185 A RU2014149185 A RU 2014149185A RU 2014149185 A RU2014149185 A RU 2014149185A RU 2014149185 A RU2014149185 A RU 2014149185A RU 2014149185 A RU2014149185 A RU 2014149185A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- stem cells
- expressing markers
- definitive endoderm
- pluripotent stem
- Prior art date
Links
- 210000001900 endoderm Anatomy 0.000 title claims abstract 48
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 title claims 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract 66
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract 61
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims abstract 40
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 claims abstract 30
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims abstract 15
- 238000007747 plating Methods 0.000 claims abstract 14
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 claims abstract 13
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 claims abstract 10
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 claims 4
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims 4
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 claims 3
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 108010083123 CDX2 Transcription Factor Proteins 0.000 claims 1
- 101100518002 Danio rerio nkx2.2a gene Proteins 0.000 claims 1
- 108700014808 Homeobox Protein Nkx-2.2 Proteins 0.000 claims 1
- 102100031671 Homeobox protein CDX-2 Human genes 0.000 claims 1
- 102100027886 Homeobox protein Nkx-2.2 Human genes 0.000 claims 1
- 102100028096 Homeobox protein Nkx-6.2 Human genes 0.000 claims 1
- 101000578254 Homo sapiens Homeobox protein Nkx-6.1 Proteins 0.000 claims 1
- 101000578258 Homo sapiens Homeobox protein Nkx-6.2 Proteins 0.000 claims 1
- 101100460496 Homo sapiens NKX2-2 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101000603702 Homo sapiens Neurogenin-3 Proteins 0.000 claims 1
- 101000976653 Homo sapiens Zinc finger protein ZIC 1 Proteins 0.000 claims 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims 1
- 102100032063 Neurogenic differentiation factor 1 Human genes 0.000 claims 1
- 108050000588 Neurogenic differentiation factor 1 Proteins 0.000 claims 1
- 102100038553 Neurogenin-3 Human genes 0.000 claims 1
- 102100041030 Pancreas/duodenum homeobox protein 1 Human genes 0.000 claims 1
- 101710144033 Pancreas/duodenum homeobox protein 1 Proteins 0.000 claims 1
- 102100023497 Zinc finger protein ZIC 1 Human genes 0.000 claims 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0676—Pancreatic cells
- C12N5/0678—Stem cells; Progenitor cells; Precursor cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
- C12N5/005—Protein-free medium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0676—Pancreatic cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/067—Hepatocytes
- C12N5/0672—Stem cells; Progenitor cells; Precursor cells; Oval cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/505—Erythropoietin [EPO]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/065—Modulators of histone acetylation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/19—Growth and differentiation factors [GDF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/999—Small molecules not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
- C12N2506/02—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from embryonic cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
- C12N2510/02—Cells for production
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2511/00—Cells for large scale production
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/90—Substrates of biological origin, e.g. extracellular matrix, decellularised tissue
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
1. Способ культивирования плюрипотентных стволовых клеток, включающий высевание плюрипотентных стволовых клеток на поверхность с плотностью посева от приблизительно 0,8×10до приблизительно 3,0×10клеток/см.2. Способ по п. 1, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.3. Способ по п. 2, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.4. Способ по п. 1, в котором плюрипотентные стволовые клетки высевают на поверхность, содержащую Matrigel™.5. Способ дифференцирования плюрипотентных стволовых клеток, включающий высевание плюрипотентных стволовых клеток на поверхность с плотностью от приблизительно 0,8×10до приблизительно 3,0×10клеток/сми дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму.6. Способ по п. 5, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.7. Способ по п. 6, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.8. Способ по п. 5, в котором поверхность, на которую высевают плюрипотентные стволовые клетки, содержит Matrigel™.9. Способ по п. 5, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.10. Способ получения клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, включающий дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в котором плюрипотентные стволовые клетки высевали на поверхность с плотностью посева от приблизительно 0,8×10до приблизител
Claims (53)
1. Способ культивирования плюрипотентных стволовых клеток, включающий высевание плюрипотентных стволовых клеток на поверхность с плотностью посева от приблизительно 0,8×105 до приблизительно 3,0×105 клеток/см2.
2. Способ по п. 1, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.
3. Способ по п. 2, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.
4. Способ по п. 1, в котором плюрипотентные стволовые клетки высевают на поверхность, содержащую Matrigel™.
5. Способ дифференцирования плюрипотентных стволовых клеток, включающий высевание плюрипотентных стволовых клеток на поверхность с плотностью от приблизительно 0,8×105 до приблизительно 3,0×105 клеток/см2 и дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму.
6. Способ по п. 5, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.
7. Способ по п. 6, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.
8. Способ по п. 5, в котором поверхность, на которую высевают плюрипотентные стволовые клетки, содержит Matrigel™.
9. Способ по п. 5, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.
10. Способ получения клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, включающий дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в котором плюрипотентные стволовые клетки высевали на поверхность с плотностью посева от приблизительно 0,8×105 до приблизительно 3,0×105 клеток/см2.
11. Способ по п. 10, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.
12. Способ по п. 11, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.
13. Способ по п. 10, в котором поверхность, на которую высевают плюрипотентные стволовые клетки, содержит Matrigel™.
14. Способ по п. 10, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.
15. Способ дифференцирования клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, включающий высевание плюрипотентных стволовых клеток на первую поверхность с плотностью посева, достаточной для максимальной эффективности дифференцирования плюрипотентных стволовых клеток; дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму; высевание клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, с плотностью посева, достаточной для максимальной эффективности дифференцирования клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму; и дифференцирование клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму.
16. Способ по п. 15, в котором плюрипотентные стволовые клетки высевают на первую поверхность с плотностью посева от приблизительно 0,8×105 до приблизительно 3,0×105 клеток/см2.
17. Способ по п. 15, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, высевают на поверхность с плотностью посева от приблизительно 1,5×105 до приблизительно 5,0×105 клеток/см2.
18. Способ по п. 15, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.
19. Способ по п. 18, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.
20. Способ по п. 15, в котором первая поверхность содержит Matrigel™.
21. Способ по п. 15, в котором вторая поверхность содержит Matrigel™.
22. Способ по п. 15, в котором первая поверхность и вторая поверхность представляют собой одну и ту же поверхность.
23. Способ по п. 15, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.
24. Способ по п. 15, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму, являются клетками человека.
25. Способ дифференцирования клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, включающий дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму; и дифференцирование клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму; при этом плюрипотентные стволовые клетки высевали на поверхность с плотностью посева от приблизительно 0,8×105 до приблизительно 3,0×105 клеток/см2.
26. Способ по п. 25, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.
27. Способ по п. 26, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.
28. Способ по п. 25, в котором поверхность содержит Matrigel™.
29. Способ по п. 25, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.
30. Способ по п. 25, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму, являются клетками человека.
31. Способ получения клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму, включающий:
a) высевание плюрипотентных стволовых клеток на поверхность;
b) дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму; и
с) дифференцирование клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму.
32. Способ по п. 31, в котором плюрипотентные стволовые клетки высевают на поверхность с плотностью посева от приблизительно 0,8×105 до приблизительно 3,0×105 клеток/см2.
33. Способ по п. 31, дополнительно включающий стадию высевания клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, на поверхность с плотностью посева от приблизительно 1,5×105 до приблизительно 5,0×105 клеток/см2.
34. Способ по п. 31, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.
35. Способ по п. 34, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.
36. Способ по п. 31, в котором поверхность содержит Matrigel™.
37. Способ по п. 31, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.
38. Способ по п. 31, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму, являются клетками человека.
39. Способ получения клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на эндокринную часть поджелудочной железы, включающий:
a) высевание плюрипотентных стволовых клеток на поверхность;
b) дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму; и
с) дифференцирование клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на эндокринную часть поджелудочной железы.
40. Способ по п. 39, в котором плюрипотентные стволовые клетки высевают с плотностью посева от приблизительно 0,8×105 до приблизительно 3,0×105 клеток/см2.
41. Способ по п. 39, дополнительно включающий стадию высевания клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, на поверхность с плотностью посева от приблизительно 1,5×105 до приблизительно 5,0×105 клеток/см2.
42. Способ по п. 39, в котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки.
43. Способ по п. 40, в котором эмбриональные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки человека.
44. Способ по п. 39, в котором поверхность содержит Matrigel™.
45. Способ по п. 39, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.
46. Способ по п. 39, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму, являются клетками человека.
47. Способ дифференцирования клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, включающий высевание клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, c плотностью посева от приблизительно 1,5×105 клеток/см2 до приблизительно 5,0×105 клеток/см2; и дифференцирование клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму.
48. Способ по п. 47, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.
49. Способ по п. 47, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму, являются клетками человека.
50. Способ дифференцирования клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на эндокринную часть поджелудочной железы, включающий высевание клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, на поверхность с плотностью посева от приблизительно 1,5×105 клеток/см2 до приблизительно 5,0×105 клеток/см2 и дифференцирование клеток, экспрессирующих маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, в клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на эндокринную часть поджелудочной железы.
51. Способ по п. 50, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на дефинитивную энтодерму, являются клетками человека.
52. Способ по п. 50, в котором клетки, экспрессирующие маркеры, указывающие на панкреатическую энтодерму, являются клетками человека.
53. Популяция клеток, дифференцированных in vitro из эмбриональных стволовых клеток человека, демонстрирующих падение экспрессии по меньшей мере одного маркера, который выбирают из PDX-1, NKX6.1, NGN3, NKX2.2, NeuroD и инсулина, и повышенную экспрессию ZIC1 и CDX2 по сравнению с эмбриональными стволовыми клетками человека; и при этом эмбриональные стволовые клетки человека высевают на поверхность с плотностью посева менее 5×105 клеток/см2.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261643684P | 2012-05-07 | 2012-05-07 | |
US61/643,684 | 2012-05-07 | ||
PCT/US2013/039940 WO2013169769A1 (en) | 2012-05-07 | 2013-05-07 | Differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endoderm |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2014149185A true RU2014149185A (ru) | 2016-06-27 |
RU2668814C2 RU2668814C2 (ru) | 2018-10-02 |
Family
ID=49551213
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014149185A RU2668814C2 (ru) | 2012-05-07 | 2013-05-07 | Способы продуцирования клеток дефинитивной энтодермы и панкреатической энтодермы |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20140162359A1 (ru) |
EP (1) | EP2847319A4 (ru) |
JP (1) | JP6450674B2 (ru) |
KR (1) | KR20150014478A (ru) |
CN (1) | CN104284977A (ru) |
AR (1) | AR090970A1 (ru) |
AU (1) | AU2013259706A1 (ru) |
BR (1) | BR112014027783A2 (ru) |
CA (1) | CA2872770A1 (ru) |
HK (1) | HK1207885A1 (ru) |
IL (1) | IL235132A0 (ru) |
IN (1) | IN2014DN08561A (ru) |
MX (1) | MX2014013524A (ru) |
PH (1) | PH12014502686A1 (ru) |
RU (1) | RU2668814C2 (ru) |
SG (1) | SG11201406884SA (ru) |
WO (1) | WO2013169769A1 (ru) |
Families Citing this family (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP4461806A3 (en) | 2013-06-11 | 2025-02-12 | President and Fellows of Harvard College | Sc-b cells and compositions and methods for generating the same |
WO2016100898A1 (en) | 2014-12-18 | 2016-06-23 | President And Fellows Of Harvard College | Serum-free in vitro directed differentiation protocol for generating stem cell-derived b cells and uses thereof |
DK3234110T3 (da) | 2014-12-18 | 2024-05-13 | Harvard College | FREMGANGSMÅDER TIL GENERERING AF STAMCELLE-AFLEDTE ß-CELLER OG ANVENDELSER DERAF |
WO2016100930A1 (en) | 2014-12-18 | 2016-06-23 | President And Fellows Of Harvard College | Methods for generating stem cell-derived b cells and methods of use thereof |
CN106467918B (zh) * | 2015-08-18 | 2020-07-31 | 中国科学技术大学先进技术研究院 | 一种基于人皮肤细胞的胰岛素分泌细胞的诱导方法及应用 |
WO2018229179A1 (en) * | 2017-06-14 | 2018-12-20 | Helmholtz Zentrum München - Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt (GmbH) | Methods for purifying endoderm and pancreatic endoderm cells derived from human embryonic stem cells |
KR102789149B1 (ko) | 2017-11-15 | 2025-03-31 | 셈마 테라퓨틱스, 인크. | 섬세포 제조 조성물 및 사용 방법 |
EP3833365A4 (en) | 2018-08-10 | 2022-05-11 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Stem cell derived islet differentiation |
US20200080107A1 (en) | 2018-09-07 | 2020-03-12 | Crispr Therapeutics Ag | Universal donor cells |
JP2022535239A (ja) | 2019-05-31 | 2022-08-05 | ダブリュ.エル.ゴア アンド アソシエイツ,インコーポレイティド | 生体適合性メンブレン複合体 |
WO2020243663A1 (en) | 2019-05-31 | 2020-12-03 | W. L. Gore & Associates, Inc. | A biocompatible membrane composite |
CN114401752B (zh) | 2019-05-31 | 2023-04-04 | W.L.戈尔及同仁股份有限公司 | 具有受控氧扩散距离的细胞封装装置 |
US12310830B2 (en) | 2019-05-31 | 2025-05-27 | W. L. Gore & Associates, Inc. | Biocompatible membrane composite |
JP2022547505A (ja) | 2019-09-05 | 2022-11-14 | クリスパー セラピューティクス アクチェンゲゼルシャフト | ユニバーサルドナー細胞 |
MX2022002663A (es) | 2019-09-05 | 2022-04-07 | Crispr Therapeutics Ag | Celulas donantes universales. |
US11566230B2 (en) | 2020-12-31 | 2023-01-31 | Crispr Therapeutics Ag | Universal donor cells |
CN113046306B (zh) * | 2021-03-12 | 2022-10-18 | 广东东阳光药业有限公司 | 一种多能干细胞的培养方法 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5523226A (en) * | 1993-05-14 | 1996-06-04 | Biotechnology Research And Development Corp. | Transgenic swine compositions and methods |
JP4666567B2 (ja) | 2001-12-07 | 2011-04-06 | ジェロン・コーポレーション | ヒト胚幹細胞由来の膵島細胞 |
SG149061A1 (en) | 2003-12-23 | 2009-01-29 | Cythera Inc | Definitive endoderm |
US20050266554A1 (en) | 2004-04-27 | 2005-12-01 | D Amour Kevin A | PDX1 expressing endoderm |
US7695965B2 (en) | 2006-03-02 | 2010-04-13 | Cythera, Inc. | Methods of producing pancreatic hormones |
US8741643B2 (en) * | 2006-04-28 | 2014-06-03 | Lifescan, Inc. | Differentiation of pluripotent stem cells to definitive endoderm lineage |
AU2007277364B2 (en) | 2006-07-26 | 2010-08-12 | Viacyte, Inc. | Methods of producing pancreatic hormones |
JP2010532172A (ja) * | 2007-07-01 | 2010-10-07 | ライフスキャン・インコーポレイテッド | 単細胞の分化万能性幹細胞の培養 |
JP5738591B2 (ja) * | 2007-07-18 | 2015-06-24 | ライフスキャン・インコーポレイテッドLifescan,Inc. | ヒト胚幹細胞の分化 |
CA2695225C (en) * | 2007-07-31 | 2021-06-01 | Lifescan, Inc. | Differentiation of human embryonic stem cells to pancreatic endocrine |
US7939322B2 (en) * | 2008-04-24 | 2011-05-10 | Centocor Ortho Biotech Inc. | Cells expressing pluripotency markers and expressing markers characteristic of the definitive endoderm |
MX2011000125A (es) | 2008-06-30 | 2011-02-25 | Centocor Ortho Biotech Inc | Diferenciacion de celulas madre pluripotentes. |
US20100028307A1 (en) * | 2008-07-31 | 2010-02-04 | O'neil John J | Pluripotent stem cell differentiation |
EP2346988B1 (en) * | 2008-10-31 | 2017-05-31 | Janssen Biotech, Inc. | Differentiation of human embryonic stem cells to the pancreatic endocrine lineage |
EP2456859A4 (en) * | 2009-07-20 | 2015-03-18 | Janssen Biotech Inc | DIFFERENTIATION OF HUMAN EMBRYONIC STEM CELLS |
EP4166652A1 (en) * | 2009-11-12 | 2023-04-19 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Culture media, cell cultures and methods of culturing pluripotent stem cells in an undifferentiated state |
EP2542666A4 (en) * | 2010-03-02 | 2014-05-07 | Univ Singapore | CULTURE ADDITIVES FOR PROMOTING A STEM CELL PROGRAMMING AND DIFFERENTIATION REACTION |
EP2551341B1 (en) * | 2010-03-23 | 2017-04-26 | Kuraray Co., Ltd. | Culture method for causing differentiation of pluripotent mammalian cells |
RU2673946C1 (ru) * | 2010-08-31 | 2018-12-03 | Янссен Байотек, Инк. | Дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток |
-
2013
- 2013-05-07 RU RU2014149185A patent/RU2668814C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-05-07 EP EP13786955.8A patent/EP2847319A4/en not_active Withdrawn
- 2013-05-07 BR BR112014027783A patent/BR112014027783A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2013-05-07 AR ARP130101563A patent/AR090970A1/es unknown
- 2013-05-07 JP JP2015511622A patent/JP6450674B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-05-07 SG SG11201406884SA patent/SG11201406884SA/en unknown
- 2013-05-07 MX MX2014013524A patent/MX2014013524A/es unknown
- 2013-05-07 AU AU2013259706A patent/AU2013259706A1/en not_active Abandoned
- 2013-05-07 CA CA2872770A patent/CA2872770A1/en not_active Abandoned
- 2013-05-07 US US13/888,968 patent/US20140162359A1/en not_active Abandoned
- 2013-05-07 WO PCT/US2013/039940 patent/WO2013169769A1/en active Application Filing
- 2013-05-07 CN CN201380024226.9A patent/CN104284977A/zh active Pending
- 2013-05-07 HK HK15108511.6A patent/HK1207885A1/xx unknown
- 2013-05-07 KR KR1020147033897A patent/KR20150014478A/ko not_active Ceased
-
2014
- 2014-10-14 IN IN8561DEN2014 patent/IN2014DN08561A/en unknown
- 2014-10-19 IL IL235132A patent/IL235132A0/en unknown
- 2014-12-02 PH PH12014502686A patent/PH12014502686A1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BR112014027783A2 (pt) | 2017-06-27 |
AR090970A1 (es) | 2014-12-17 |
EP2847319A4 (en) | 2015-12-16 |
PH12014502686A1 (en) | 2015-01-26 |
CA2872770A1 (en) | 2013-11-14 |
SG11201406884SA (en) | 2014-11-27 |
JP6450674B2 (ja) | 2019-01-09 |
US20140162359A1 (en) | 2014-06-12 |
CN104284977A (zh) | 2015-01-14 |
EP2847319A1 (en) | 2015-03-18 |
JP2015516161A (ja) | 2015-06-11 |
MX2014013524A (es) | 2015-02-10 |
KR20150014478A (ko) | 2015-02-06 |
RU2668814C2 (ru) | 2018-10-02 |
HK1207885A1 (en) | 2016-02-12 |
IN2014DN08561A (ru) | 2015-05-22 |
WO2013169769A1 (en) | 2013-11-14 |
IL235132A0 (en) | 2014-12-31 |
AU2013259706A1 (en) | 2014-10-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2014149185A (ru) | Дифференцирование эмбриональных стволовых клеток человека в панкреатическую энтодерму | |
PH12012501254A1 (en) | Differentiation of human embryonic stem cells | |
PH12012502189B1 (en) | Differentiation of human embryonic stem cells | |
GB2485113A (en) | Differentiaiotn of human embryonic stem cells | |
RU2012131400A (ru) | Дифференцировка человеческих эмбриональных стволовых клеток | |
HK1217110A1 (zh) | 在空氣-液體界面處培養人胚胎幹細胞以用於分化成胰腺內分泌細胞 | |
SG10201810739VA (en) | Use of small molecules to enhance mafa expression in pancreatic endocrine cells | |
JP2016503654A5 (ru) | ||
PH12015501450A1 (en) | Differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endocrine cells using hb9 regulators | |
PH12013500389A1 (en) | Differentiation of human embryonic stem cells | |
RU2015137400A (ru) | Дифференцировка in vitro плюрипотентных стволовых клеток в панкреатические эндодермальные клетки (пэк) и эндокринные клетки | |
RU2012105923A (ru) | Дифференцировка эмбриональных стволовых клеток человека | |
WO2012079086A3 (en) | Mesenchymal stem cells (msc) expansion methods and materials | |
PH12013500367A1 (en) | Differentiation of human embryonic stem cells | |
MX2018013175A (es) | Metodo de purificacion para celulas precursoras pancreaticas derivadas a partir de celulas madre pluripotentes y metodo de amplificacion para ellas. | |
Ichikawa et al. | Cryopreservation of mouse embryoid bodies | |
AR090001A1 (es) | Fibroblastos modificados, procedimientos para su modificacion, usos y kit | |
TH134110A (th) | การเปลี่ยนรูปลักษณะเฉพาะเซลล์ต้นกำเนิดเอ็มบริโอของมนุษย์ | |
AR080087A1 (es) | Metodo para promover la diferenciacion de celulas madre embrionarias humanas | |
TH134111A (th) | การเปลี่ยนรูปลักษณะเฉพาะเซลล์ต้นกำเนิดเอ็มบริโอของมนุษย์ |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200508 |