RO133904B1 - Procedeu de obţinere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu şi silice - Google Patents
Procedeu de obţinere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu şi silice Download PDFInfo
- Publication number
- RO133904B1 RO133904B1 ROA201800616A RO201800616A RO133904B1 RO 133904 B1 RO133904 B1 RO 133904B1 RO A201800616 A ROA201800616 A RO A201800616A RO 201800616 A RO201800616 A RO 201800616A RO 133904 B1 RO133904 B1 RO 133904B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- mycelium
- plant material
- nanoparticles
- silica
- selenium
- Prior art date
Links
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 73
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims description 65
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 48
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 title claims description 37
- 239000000725 suspension Substances 0.000 title claims description 21
- 239000011669 selenium Substances 0.000 title description 45
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 title description 40
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 63
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 39
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 36
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 30
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 25
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 20
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 18
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 14
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 14
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 13
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 12
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 11
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 11
- BVTBRVFYZUCAKH-UHFFFAOYSA-L disodium selenite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Se]([O-])=O BVTBRVFYZUCAKH-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 11
- 229960001471 sodium selenite Drugs 0.000 claims description 11
- 239000011781 sodium selenite Substances 0.000 claims description 11
- 235000015921 sodium selenite Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 11
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 7
- 239000007003 mineral medium Substances 0.000 claims description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 7
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000003816 axenic effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 5
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 claims description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 claims description 4
- 241000223260 Trichoderma harzianum Species 0.000 claims description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 4
- 241001460073 Trichoderma asperellum Species 0.000 claims description 3
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims description 3
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 3
- 239000012466 permeate Substances 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 3
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 claims description 2
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000221781 Hypocreaceae Species 0.000 claims description 2
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 claims description 2
- 241000222350 Pleurotus Species 0.000 claims description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 238000009736 wetting Methods 0.000 claims description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 claims 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229940091258 selenium supplement Drugs 0.000 description 39
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 8
- 102000005575 Cellulases Human genes 0.000 description 6
- 108010084185 Cellulases Proteins 0.000 description 6
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 6
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 6
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 6
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 6
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 5
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 5
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- -1 especially hydrated Inorganic materials 0.000 description 5
- 229940082569 selenite Drugs 0.000 description 5
- MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-L selenite(2-) Chemical compound [O-][Se]([O-])=O MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000005543 nano-size silicon particle Substances 0.000 description 4
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 3
- 230000036579 abiotic stress Effects 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000489861 Maximus Species 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- XDSSPSLGNGIIHP-VKHMYHEASA-N Se-methyl-L-selenocysteine Chemical compound C[Se]C[C@H]([NH3+])C([O-])=O XDSSPSLGNGIIHP-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 238000001095 inductively coupled plasma mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 2
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 150000003346 selenoethers Chemical class 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M (3r,5r)-7-[3-(4-fluorophenyl)-8-oxo-7-phenyl-1-propan-2-yl-5,6-dihydro-4h-pyrrolo[2,3-c]azepin-2-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound O=C1C=2N(C(C)C)C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C(C=3C=CC(F)=CC=3)C=2CCCN1C1=CC=CC=C1 OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M 0.000 description 1
- RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 2-thiobarbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=S)N1 RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195730 Aflatoxin Natural products 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 241000228230 Aspergillus parasiticus Species 0.000 description 1
- 241000193744 Bacillus amyloliquefaciens Species 0.000 description 1
- 241000193388 Bacillus thuringiensis Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000221785 Erysiphales Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 229920001732 Lignosulfonate Polymers 0.000 description 1
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000342322 Sclerospora graminicola Species 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000005409 aflatoxin Substances 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940097012 bacillus thuringiensis Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 description 1
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000005693 branched-chain amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001354 calcination Methods 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000012824 chemical production Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000013626 chemical specie Substances 0.000 description 1
- 229940126540 compound 41 Drugs 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000004665 defense response Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 239000005712 elicitor Substances 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002608 ionic liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000012978 lignocellulosic material Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 description 1
- 231100000623 nanotoxicology Toxicity 0.000 description 1
- VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N norethisterone Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 230000001863 plant nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000037039 plant physiology Effects 0.000 description 1
- 239000004476 plant protection product Substances 0.000 description 1
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 description 1
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- NNFCIKHAZHQZJG-UHFFFAOYSA-N potassium cyanide Chemical compound [K+].N#[C-] NNFCIKHAZHQZJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 1
- 150000003342 selenium Chemical class 0.000 description 1
- 229940065287 selenium compound Drugs 0.000 description 1
- 150000003343 selenium compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002893 slag Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 230000008646 thermal stress Effects 0.000 description 1
- 231100000701 toxic element Toxicity 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000002525 ultrasonication Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N59/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing elements or inorganic compounds
- A01N59/02—Sulfur; Selenium; Tellurium; Compounds thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
- C01B33/00—Silicon; Compounds thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05D—INORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C; FERTILISERS PRODUCING CARBON DIOXIDE
- C05D9/00—Other inorganic fertilisers
- C05D9/02—Other inorganic fertilisers containing trace elements
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P3/00—Preparation of elements or inorganic compounds except carbon dioxide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
- C01B33/00—Silicon; Compounds thereof
- C01B33/02—Silicon
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Description
Prezenta invenție se referă la un procedeu de obținere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu zerovalent și silice, asociate, destinate aplicării ca biostimulanți pentru plante.
Sunt cunoscute procedee pentru sinteza suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu și silice asociate. Astfel de suspensii de nanoparticule au utilizări diverse. Atât nanoparticulele de seleniu elementar (zerovalent), cât și nanoparticulele de silice (bioxid de siliciu, mai ales hidratat, SiO2 xnH2O), datorită raportului lor ridicat suprafață/volum funcționează ca rezervor de eliberare treptată a speciilor chimice bioactive, ioni de seleniură, selenit și/sau selenat (Skalickova et al. 2017, Nutrition, 33: 83-90), respectiv acid ortosilicic (Quignard et al. 2017, Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 155: 530-537). Astfel de specii de seleniu și de siliciu bioactive acționează asupra plantelor de cultură ca biostimulanți anorganici (du Jardin, 2015, Scientia Horticulturae, 196: 3-14).
Siliciul nu este considerat deocamdată ca un element esențial pentru plante, ci doar ca unul cu efecte benefice (Yan et al 2018, Journal of Integrative Agriculture, 17: 603457). Studiile au arătat că siliciul are toate caracteristicile unui biostimulant pentru plante (Savvas și Ntatsi, 2015, Scientia Horticulturae, 196: 66-81). Siliciul solubil este unul dintre puținii elicitori care amorsează în mod echilibrat diferitele căi metabolice implicate în răspunsul de apărare din plante (Van Bockhaven et al. 2013, Journal of Experimental Botany, 64: 1281-1293). Acțiunea siliciului solubil nu se limitează doar la orchestrarea căilor metabolice implicate în apărarea plantelor față de atacul patogenilor si al dăunătorilor, dar are efecte si de creștere a eficientei de utilizare a nutrienților, reducere a toxicității elementelor potențial toxice/metalelor grele, limitare a efectelor stresului hidric (salinitate, secetă) și a stresului termic (îngheț, temperatură crescută) (Frew et al. 2018, Annals of botany, 121: 1265-1273).
Siliciul cel mai accesibil pentru plante este cel de origine biologică, în special din material vegetal. Din astfel de bio-structuri eliberarea speciilor de siliciu solubil nu este însoțită și de eliberarea de contraioni, cum sunt cei de aluminiu, fier, calciu sau potasiu.
În cazul rocilor silicioase sau al amendamentelor silicioase, ca este de exemplu zgura silicioasă de furnal, elementele adiționale prezente, respectiv fierul (Fe) sau aluminiul (Al), reduc biodisponibilitatea siliciului. Acidul silicic, care este o specie moleculară parțial mobilă în soluția solului, este precipitat sub formă de argile secundare în contact cu ionii imobili (în sol) Fe3+ și Al3+ (Sommer et al. 2006, Journal of Plant Nutrition and Soil Science, 169: 310-329).
Sărurile acidului silicic generează prin hidroliză un p H foarte ridicat, acidul silicic fiind un acid foarte slab, p H-ul ridicat al acestor săruri îngreunează aplicarea. De asemenea sărurile acidului ortosilicic sunt eficiente numai pe termen scurt și au dezavantajul de a genera prin solubilizare concentrații prea ridicate de acid ortosilicic în soluția solului, la limita de concentrație de 2 mM, la care siliciul solubil este preluat de către rădăcini (Tubana et al. 2016. Soil Science, 181: 393-411). La această limită de concentrație se generează și reacții de poli/oligo-condensare, cu formare de specii moleculare de siliciu care nu mai sunt biodisponibile (Spinde et al. 2011, Chemistry of Materials, 23: 4676-4687).
Comparativ cu alte forme de siliciu, nanoparticulele de silice sunt mai eficiente ca biostimulanți pentru plante, în special în cazul aplicării foliare (Laane, 2018, Plants, 7: 45). Se cunosc o serie de procedee destinate obținerii de nanoparticule de siliciu biogene. Brevetul US 9403688 B1 prezintă un procedeu de obținere a nanoparticulelor de silice biogene, care include următoarele etape: pre-tratamentul cojilor de semințe cu acid, plasarea cojilor tratate cu acid într-o autoclavă la o temperatură mai mare de 100°C, timp de aproximativ 2 h, sub presiune, separarea cojilor de semințe și spălarea cu apă, uscarea la 1 aer a cojilor de semințe, urmată de calcinarea cojilor la o temperatură cuprinsă între 500700°C, timp de cel puțin o oră, pentru a produce nanoparticule de silice biogene. 3 Nanoparticulele biogene de silice astfel obținute sunt amorfe și biocompatibile, având o dimensiune a particulelor cuprinsă în intervalul de 25-75 nm. 5
Cererea de brevet WO 2017042011 se referă la un procedeu pentru extracția silicei din material vegetal lignocelulozic, care cuprinde etapele de: a) fracționarea materiei 7 vegetale lignocelulozice în prezența unei soluții de acid, astfel încât să se obțină o fracție solidă cuprinzând celuloza, b) extragerea silicei din fracția solidă obținută în etapa a) cu o 9 soluție bazică, la un p H între 10 și 13, și la o temperatură cuprinsă între 70 si 90°C, astfel încât să se obțină o fază lichidă conținând silice și o fază solidă, c) separarea fazei lichide 11 și a fazei solide care se obține în etapa b), d) precipitarea silicei care este cuprinsă în faza lichidă, la un p H cuprins între 5 și 6. 13
Procedeele de mai sus sunt procedee chimice și au dezavantajul unor consumuri ridicate de acizi și baze, a căror producție și utilizare are impact asupra mediului. Procedeele 15 biotehnologice, verzi, cu o eco-eficiență ridicată, ar fi mai utile în producerea de nanoparticule de silice biogene. 17
A fost publicat un procedeu biologic de conversie a unor substrate vegetale cu un conținut ridicat de structuri de silice formate în peretele celular (pleavă de orez) în nano- 19 particule de siliciu (Zielonka et al. 2018, Fungal biology, 122: 333-344). Tulpina folosită, Aspergillus parasiticus NRRL 2999, este însă o tulpină etalon în ceea privește producerea 21 de aflatoxine (Rasooli și Abyaneh, 2004, Food control, 15: 479-483), și deci acest procedeu are numai o semnificație teoretică, de demonstrare a posibilității conversiei biologice, 23 și nu este utilizabil în practică.
Seleniul stimulează creșterea plantelor (Hartikainen și Xue, 1999, Journal of 25 Environmental Quality, 28: 1372-1375; Xue et al. 2001, Plant and Soil, 237: 55-61), are rol în protecția plantelor față de agenții fitopatogeni (Hanson et al. 2003, New Phytologist, 27 159: 461-469), și față de factorii de stres abiotici, inclusiv metale grele (Feng et al. 2013, Environmental and Experimental Botany 87: 58-68) și secetă (Ahmad et al. 2016, 29 Journal of the Science of Food and Agriculture 96: 372-380).
Pentru tratamentul plantelor sunt utilizați compuși anorganici de seleniu. Speciile 31 anorganice de seleniu au o toxicitate care scade în ordinea selenat, selenit, seleniură, seleniul elementar/zerovalent (Nuttall, 2006, Annals of Clinical & Laboratory Science 36: 33 409-420). În timp ce selenatul are o toxicitate foarte ridicată pentru șobolan, mai ridicată decât cea a cianurii de potasiu, seleniul zerovalent are o toxicitate cu două ordine de mărime 35 mai redusă (Olson, 1986, Journal of the American College of Toxicology 5: 45-70). Nanoparticulele de seleniu zerovalent (SeNPs) au dovedit o toxicitate chiar mai redusă decât 37 cea a seleniului elementar (Shakibaie et al. 2013, Pharmaceutical Biology 51: 58-63). În același timp, eficacitatea nanoparticulelor de seleniu (SeNPs) în inducerea seleno-enzimelor 39 este comparabilă cu cea a celei mai eficiente forme de seleniu organic, seleno-metil-selenocisteină (SeMeSeCys) (Zhang et al. 2008, Toxicological Sciences 101: 22-31), compus 41 cu toxicitate similară cu a selenatului și care se obține prin sinteze organice dificile, cu randament mic (Iwaoka et al. 2016, Proceedings of the National Academy of Sciences, 43 SectionA. 86: 499-509).
Producerea chimică a nanoparticulelor de seleniu implică utilizarea acizilor minerali 45 concentrați (Stroyuk et al. 2008, Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects 320: 169-174) sau a unor reactivi toxici precum hidrazina (Mishra et 47 al. 2005, The Journal of Physical Chemistry B109: 12718-12723) sau lichidele ionice (Langi et al. 2010, Materials Research Bulletin 45: 668-671). 49
În schimb, biosinteza nanoparticulelor de seleniu se desfășoară în condiții blânde (Wadhwani et al. 2016, Applied Microbiology and Biotechnology 100: 2555-2566). În general, SeNPs sintetizate biologic sunt cu până la de zece ori mai puțin toxice decât nanoparticulele sintetizate chimic (Mal et al. 2017, Nanotoxicology 11: 87-97).
Obținerea de nanoparticulele de seleniu prin biosinteza prezintă avantaje evidente. Cererea de brevet CN 107881127 (A) dezvăluie o tulpină de Bacillus amyloliquefaciens, Lxz41, depusă cu numărul M2016578 la China Center for Type Culture Collection (CCTCC), și o metodă de preparare controlabilă a nano-seleniului prin intermediul respectivei tulpini. Procedeul de biosinteza a nanoparticulelor de seleniu implică următoarele etape: cultivarea pe un mediu pe bază de glucoza și peptonă care conține și un surfactant, adăugarea unei sări de seleniu, de la început sau prin alimentare continuă, recoltarea culturii, ultrasonicarea bacteriilor și separarea endo-nanoparticulelor din interiorul celulelor bacteriene. Cererea de brevet CN 105199979 (A) dezvăluie o tulpină de Bacillus thuringiensis YLX-4, izolată din apele de percolare de la o mină de seleniu (Enshi, provincia Hubei din China), depusă cu numărul M2013674 la China Center for Type Culture Collection (CCTCC). Tulpina are caracteristicile tipice ale seleno-bacteriilor și este utilizată inclusiv pentru producerea de nano-seleniu.
Aplicarea concomitentă la plante a seleniului și a siliciului determină efecte sinergice în protecția față de stresurile abiotice determinate de secetă (Emam et al. 2014, Australian Journal of Crop Science 8: 596), salinitate (Sattar et al. 2017, Russian journal of plant physiology 64: 341-348) și metale grele (Gao et al. 2018, Science of The Total Environment, 631: 1100-1108).
Pentru a valorifica acest sinergism dintre seleniu și siliciu, brevetul US 9919978 B2 descrie un nanosol de silice în care este dopat nano-seleniu, obținut prin reducerea acidului selenios și/sau a sărurilor sale cu acid ascorbic, cu glutation sau cu glucide reducătoare. Nanoparticulele de seleniu hidrofob de maximum 50 nm sunt menținute în nanosolul de silice prin emulsifiere cu polivinilpirolidonă, alcool polivinilic sau monolaurat de polioxietilen sorbitan (Tween 20). Produsul rezultat reduce absorbția cadmiului de către plantele de orez și concomitent, biofortifică agronomic cultura de orez cu seleniu.
Procedeul de preparare al unui nanosol de silice în care este dopat nano-seleniu dezvăluit în brevetul US 9919978 B2 implică șapte etape în care se utilizează acizi și baze tari, inclusiv soluții toxice de amoniac. Dezavantajul acestui produs care asociază nanoparticule de seleniu și siliciu este comun cu al altor nanoparticule sintetizate chimic. Astfel de nanoparticule sintetizate chimic au o reproductibilitate redusă a acțiunii bilogice, pentru că își formează aleatoriu o biocoroană variabilă de proteine și/sau alte biomolecule, la interacția cu sistemele biologice (Guerrini, 2018, Materials, 11: 1154), iar efectele asupra plantelor sunt semnificativ mediate de această biocoroană (Ma et al. 2018, Annual review of food science and technology 9: 129-153). Controlul asupra biocoroanei nanoparticulelor este esențial pentru activitatea biologică a acestora (Ke et al. 2017, ACS nano 11:11773-11776).
Nanoparticulele produse prin biosinteză / sinteză bioasistată în medii biologice, au avantajul de a-și forma o coroană cu stabilitate mai ridicată încă din faza de (bio)sinteză. Aceast tip de coroană, formată încă din faza de biosinteză/sinteză bioasistată amplifică proprietățile nanoparticulelor - de exemplu nano-seleniu sintetizat bioasistat în mediul de cultură al fungilor din genul Trichoderma are o acțiune amplificată de combatere a făinării produsă la mei de Sclerospora graminicola (Nandini et al. 2017, Scientific reports 7: 2612). Un avantaj suplimentar al procedeelor de sinteză în medii biologice a nanoparticulelor este că acestea sunt procedee verzi, care nu implică temperaturi ridicate sau p H extrem.
În cazul suspensiilor de nanoparticule de seleniu asociate cu nanoparticule de siliciu, 1 stabilitatea este însă afectată de caracterul diferit al celor două tipuri de nanoparticule, puternic hidrofob al celor de nano-seleniu zerovalent și puternic hidrofil al celor de silice 3 (hidratată). Iar utilizarea surfactantilor pentru stabilizarea suspensiilor de nanoparticule prezintă riscul de a determina schimbarea compoziției biocoroanei (Muller et al. 2018, 5
Biomacromolecules 19: 2657-2664).
Soluția tehnică este de a realiza un procedeu de biosinteză a suspensiilor stabile 7 de nanoparticule de seleniu elementar și silice asociate prin utilizarea unor tulpini înalt producătoare de proteine amfifile cu afinitate pentru carbohidrați cum ar fi expansine micro- 9 biene, cerato-platanine, swolenine, celulaze într-un mediu de cultură al unor microorganisme cu acțiune de biostimulant pentru plante. Astfel de proteine amfifile desfac legăturile de 11 hidrogen din structura materialului lignocelulozic (Cosgrove, 2017. Annual review of microbiology, 71: 479-497; Baccelli, 2015, Frontiers in plant science 5: 769), datorită 13 masei moleculare mici, caracterului lor amfilic (Bonazza et al. 2015, Soft Matter 11: 17231732) și structurii flexibile, care permite mișcarea separată a părții hidrofobe și a celei 15 hidrofile (Sunde et al. 2017, Annual review of biochemistry 86: 585-608).
Problema tehnică, pe care o rezolvă invenția, constă în realizarea compatibilizării17 dinte nanoparticulele de seleniu hidrofobe și nanoparticulele de silice hidrofile și de a crește stabilitatea suspensiei.19
Procedeul de obținere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu elementar și silice, asociate conform prezentei invenții cuprinde următoarele etape:21
- cultivarea tulpinilor de microorganisme cu acțiune de biostimulant pentru plante, înalt producătoare de celulaze și proteine amfifile cu afinitate pentru carbohidrați cum ar fi 23 expansine microbiene, cerato-platanine, swolenine, pe medii de cultură care favorizează inducerea genelor respective, timp de 5 zile la temperatura de 28-30°C, pe agitator rotativ, 25 70 rpm;
- separarea axenică a miceliului de microorganisme cu acțiune de biostimulant pentru 27 plante, de supernatant, prin centrifugare la 2500 x g;
- umectarea materialului vegetal cu un conținut ridicat de siliciu în apă pură (Milli Q) 29 sau bidistilată, în proporție de 1 g material vegetal la 1 ml apă pură sau bidistilată;
- sterilizarea materialului vegetal cu un conținut ridicat de siliciu umectat prin trei 31 cicluri repetate, de încălzire la 72-75°C timp de 25-30 min și răcire la temperatura camerei timp de 6 h; 33
- adăugarea aseptică peste materialul vegetal cu un conținut ridicat de siliciu, umectat și sterilizat, a miceliului umed de microorganisme, în raport de 1 g miceliu umed la 5 g 35 material vegetal umectat și sterilizat;
- aducerea peste amestecul miceliu - material vegetal a unui mediu mineral minimal 37 steril, în raport de 80 ml mediu mineral minimal la 20 g amestec miceliu -material vegetal;
- purificarea proteinelor amfifile din supernatantul separat în prima etapă, concen- 39 trarea și sterilizarea lor prin filtrare, cu obținerea unei soluții proteice pentru adăugarea peste amestecul de miceliu și material vegetal, pentru a crește concentrația proteinelor amfifile; 41
- incubarea amestecului miceliu - material vegetal - soluție proteică la temperatura de 28-30°C, pe agitator rotativ, 70 rpm, timp de 5-7 zile; 43
- îndepărtarea miceliului și a materialului vegetal prin centrifugare, la viteză la 1000 xg sau prin filtrare, pe pori de minimum 0,45 pm; 45
- adăugarea aseptică a unei soluții de selenit de sodiu 10 mM, în supernatantul obținut la pasul anterior și conținând spori formați din miceliu, proteine amfifile în exces, 47 nanoparticule de silice asociate cu carbohidrați, în raport de 10 ml soluție selenit de sodiu la 90 ml supernatant; 49
- incubarea amestecului dintre supernatantul cu spori formați din miceliu, proteine amfifile, nanoparticule de silice și selenit de sodiu, la temperatura de 28-30°C, pe agitator rotativ, 70 rpm, timp de 5-7 zile, urmată de separarea prin ultrafiltrare tangențială pe membrană de 0,45 pm a miceliului nou format;
- concentrarea suspensiei de nanoparticule rezultată ca permeat prin ultrafiltrare tangențială și apoi sterilizarea acesteia.
Tulpinile de microorganisme cu acțiune de biostimulant pentru plante, înalt producătoare de proteine amfifile cu afinitate pentru carbohidrați pot fi selectate dintre tulpinile familiei Hypocreaceae, cum ar fi Trichoderma harzianum Td50b, Trichoderma asperellum Td36b, Trichoderma spp. T27.
Mediul care favorizează exprimarea de celulaze și expansine microbiene are următoarea compoziție: 10 g/l zer praf cu minimum 12% proteină și minimum 72% lactoză, 0,68 g/l KH2PO4, 0,87 g/l K>HPO4,1,2 g/l(NH4)2SO4, 0,2 g/l KCI, 0,2 g/l CaC^, 0,2 g/l MgSO4 • 7H2O, 2 mg/l FeSO4 · 7H2O, 2 mg/l MnSO4 · 7H2O și 2 mg/l ZnSO4 · 7H2O.
Materialul vegetal cu un conținut ridicat de siliciu include pleavă de orez, substrat epuizat de la cultivarea ciupercilor Pleurotus, borhot de orz precum și amestecuri ale acestora.
Mediul mineral minimal steril este în sine cunoscut, cel folosit conform prezentei invenții are următoare compoziție: KH2PO4 1,0 g/l, K2HPO4 1,0 g/l, NaCI 0,5 g/l, NH4NO3 1,0 g/l, MgSO4 · 7H2O 0,2 g/l, CaCI2 20 mg/l și FeCI3 · 6H2O 5 mg/l.
Purificarea proteinelor amfifile produse în mediul inițial se realizează prin cromatografie de afinitate hidrofobă pe o coloană hidrofobizată, iar concentrarea se realizează prin ultrafiltrare. Soluția proteică rezultată are o concentrație cuprinsă în intervalul 8-10 mg/ml.
Procedeul conform invenției prezintă următoarele avantaje:
- stimulează exprimarea genelor pentru cerato-platanine și celulaze, expansine microbiene sau swolenine, prin cultivare pe medii care conțin lactoză și proteine cu aminoacizi hidrofobi și aminoacizi cu catenă ramificată;
- eliberează nano-particulele de silice din materialul vegetal prin acțiunea combinată a celulazelor și proteinelor amfifile, expansine microbiene, cerato-platanine, sau swolenine, asupra materialului vegetal;
- generează biologic nanoparticule de seleniu, prin detoxifierea reductivă a selenitului de către metabolismul microorganismelor cu acțiune de biostimulant pentru plante;
- favorizează formarea de nanoparticule de seleniu cu o biocoroană formată preponderent din proteine amfifile, expansine microbiene, cerato-platanine sau swolenine, nou formate sau pre-formate în mediul inițial recuperat prin centrifugare;
- determină asocierea compatibilă între nanoparticulele hidrofobe de seleniu și nanoparticulele hidrofile de silice asociate cu carbohidrați, prin proteine amfifile, expansine microbiene, cerato-platanine sau swolenine, proteine cu o flexibilitate ridicată și care permit mișcarea liberă a porțiunii hidrofile și a celei hidrofobe;
- potențează acțiunea biostimulantă asupra plantelor de cultură prin asocierea nanoseleniului cu nanosilice și cu metaboliți produși de tulpinile biostimulante de microorganisme.
În continuare se prezintă exemple de realizare care ilustrează invenția fără a o limita.
Exemplul 1
Se prepară 2 L de mediu (mediul A), care favorizează exprimarea de celulaze și expansine microbiene, cerato-platanine sau swolenine, cu următoarea compoziție: 10 g/l zer praf cu minimum 12% proteină și minimum 72% lactoză, 0,68 g/l KH2PO4, 0,87 g/l K2HPO4,
1,2 g/l(NH4)2SO4, 0,2 g/l KCI, 0,2 g/l CaCI2, 0,2 g/l MgSO4 · 7H2O, 2 mg/l FeSO4 · 7H2O, 1 mg/l MnSO4 · 7H2O și 2 mg/l ZnSO4 · 7H2O într-un balon de sticlă de 2,5 L. Mediul se distribuie în 10 pahare Erlenmeyer de 1 L, câte 200 ml în fiecare flacon. Paharele se astupă 3 cu dop de vată, se sterilizează prin autoclavare la 121 °C timp de 20 min și se răcesc. Fiecare pahar se inoculează cu 2 ml suspensie 109 propagule/mL din tulpina Trichoderma harzianum 5
Td50b, depozitată cu numărul de depozit NCAIM (P) F 001412 la National Collection of Agricultural and Industrial Microorganisms, Universitatea Corvinus din Budapesta, Ungaria. 7 Se incubă timp de 5 zile, la temperatura de 28°C, pe agitator rotativ la 70 rpm. După 5 zile se trece axenic miceliul cu mediul de cultură în 4 flacoane de centrifugă sterile de 500 ml. 9 Tuburile se centrifughează într-o centrifugă Eppendorf 5810 (Eppendorf, Hamburg, Germania) cu rotor batant A-4-81, în care se introduc cele 4 flacoane, echilibrate 2 câte 2. 11 Se centrifughează la viteza de 3525 rpm, care corespunde, în cazul rotorului batant A-4-81, cu o raza de 18 cm, la o forță centrifugală relativă de 2500 x g. 13
Într-un balon de sticlă termorezistentă de 5 L se aduc 500 g de pleavă de orez, peste care se adaugă sub agitare lentă, cu o baghetă de sticlă, 500 ml apă pură (MiliQ). Se lasă 15 la temperatura camerei timp de 2 h, amestecând din 10 în 10 min. Se astupă cu dop de vată, se încălzește pe baie de apă termostatată și cu agitare (Lab Companion 37 L, Cole Parmer, 17 Vernon Hills, SUA), până la temperatura de 75°C, unde se menține timp de 25 min. Se răcește la temperatura camerei timp de 12 h și apoi se repetă ciclurile de încălzire/ 19 menținere/răcire de încă 2 ori. După realizarea celor 3 cicluri de încălzire/răcire (tindalizare), prin care se distrug formele vegetative de microorganisme, inclusiv cele care se formează 21 din propagulele termorezistente în timpul procesului de răcire, balonul se inoculează cu miceliu. 23
Se adaugă aseptic 100 g de miceliu, biomasă propaspătă, de Trichoderma harzianum Td50b, peste cele 500 g de pleavă umectată și sterilizată. Se prepară 2,4 L de mediu mineral 25 minimal cu următoarea compoziție: KH2PO4 1,0 g/l, K2HPO4 1,0 g/l, NaCI 0,5 g/l, NH4NO3 1,0 g/l, MgSO4 · 7H2O 0,2 g/l, CaCI2 20 mg/l și FeCI3 · 6H2O 5 mg/l. Se sterilizează prin 27 autoclavare timp de 20 min la 121 °C, se răcește și se adaugă peste materialul vegetal umectat și sterilizat și miceliu. 29
Din supernatantul mediului inițial de inducere sunt separate și purificate proteinele amfifile prin cromatografie de afinitate hidrofobă. Cei aproximativ 1,8 L supematant sunt 31 aplicați treptat pe o coloană de agaroză hidrofobizată, Phenyl Sepharose® 6 Fast Flow (45 x 10 cm, GE Healthcare, Chicago, IL, SUA), echilibrată cu 100 mM Tris/HCI, pH 7,5, 33 conținând 2 M sulfat de amoniu. Proteinele amfifile care includ cerato-plataninele de interes sunt eluate cu apă, după un gradient linear, pornind de la tamponul de echilibrare până la 35 20 mM Tris/HCI p H 7,5. Fracțiile conținând proteinele hidrofobe sunt concentrate prin ultrafiltrare tangențială, pe un sistem de ultrafiltrare tangențială Prostak (Merck Group, 37 Darmstad, Germania), prevăzut cu o membrană Ultracel PLAC (Merck Group) din celuloză regenerată, cu limită de excludere de 1 KDa. Concentrarea proteinelor este continuată până 39 la atingerea unei concentrații de 10 mg/ml proteine totale în retentat, controlată prin reacția biuretului. Cei aproximativ 20 ml de soluție proteică rezultați după concentrare sunt sterilizați 41 prin filtrare pe filtru de 0,2 :m, și sunt adăugați peste amestecul miceliu - material vegetal pentru a crește concentrația proteinelor de interes, respectiv concentrația cerato-plataninelor. 43
Se incubă balonul de sticlă termorezistentă cu amestecul miceliu - material vegetal, îmbogățit în proteine amfifile de interes, la temperatura de 28°C, pe agitator rotativ, 70 rpm, 45 timp de 7 zile. După 7 zile se îndepărtează axenic miceliul și biomasa de pleavă de siliciu. Se trece amestecul în flacoane de centrifugă sterile de 500 ml. Tuburile se centrifughează 47 într-o centrifugă Eppendorf 5810 (Eppendorf) cu rotor batant A-4-81, în care se introduc flacoanele, echilibrate 2 câte 2. Se centrifughează la viteza de 2229 rpm, care corespunde, în cazul rotorului batant A-4-81, cu o rază de 18 cm, la o forță centrifugală relativă de 1000 x g.
Biomasa de Td50 împreună cu pleava de orez se recuperează, se usucă în condiții blânde, maximum 40°C, și se folosește ca tratament în agricultură, ca biostimulant pentru plante. Biostimulanții pentru plante sunt o nouă categorie de agenți utilizați în tehnologiile de cultură ale plantelor, situate între fertilizanți și produsele de protecția plantelor. Aplicarea biostimulanților determină creșterea eficienței de utilizare a nutrienților, mărirea toleranței la stresurile abiotice și îmbunătățirea calității recoltei.
În supernatantul recuperat axenic conținând spori proveniți din miceliu, proteine amfifile, nanoparticule de silice asociate cu carbohidrați, se adăugă aseptic o soluție de selenit de sodiu 10 mM, în raport de 10 ml soluție selenit la 90 ml supernatant.
Supernatantul recuperat axenic cu selenit se distribuie aseptic în flacoane Erlenmeyer de 1 l, câte 200 ml. Se astupă cu dopuri de vată. Se incubă mediul la temperatura de 28, pe agitator rotativ, 70 rpm, timp de 7 zile. Se formează biomasa, care sintetizează nanoparticule de seleniu. După 7 zile se separă miceliul nou format prin ultrafiltrare tangențială pe un sistem Prostak (Merck Group, Darmstad, Germania), prevăzut cu o membrană de 0,45 pm din polisulfonă hidrofilă.
Suspensia de nanoparticule rezultată ca permeat este concentrată prin ultrafiltrare tangențială, pe un sistem de ultrafiltrare tangențială Prostak (Merck Group), prevăzut cu o membrană Ultracel PLAC (Merck Group) din celuloză regenerată, cu limită de excludere de 1 KDa, iar cei circa 200 ml de concentrat final sunt sterilizați pe o membrană de polietersulfonă hidrofilă (Millipore Express® SHC, Merck Group).
Produsul obținut este sub forma unei suspensii de culoare roșie.
Conținutul de siliciu total și seleniu total se determină în probe prin ICP-MS (sistem 7800 ICP-MS, Agilent, Santa Clara, CA, SUA). Se determină valori de 20,2 ± 4,5 mg/ml Si și 1,05 ± 0,27 mg/ml Se. Distribuția dimensiunii particulelor se determină prin folosirea tehnicii non-invazive de împrăștiere a luminii laser de fundal (Zetasizer Nano ZS, Malvern Instruments, Malvern, Marea Britanie). Se determină o distribuție, de nanoparticule hibride cu dimensiuni cuprinse între 72 și 124 nm. Populația de nanoparticule este omogenă, cu un diametru dominant de 92 nm, volum maxim de 27,8%. Stabilitatea nanoparticulelor a fost estimată prin determinarea potențialului zeta, prin electroforeză capilară cuplată cu măsurarea mobilității particulelor prin efect Doppler (Zetasizer Nano ZS). Se determină o valoare cuprinsă între - 44 ± 9,7 mV, valoare care indică o bună stabilitate a populației de nanoparticule hibride, silice - seleniu zerovalent. Această valoare este similară cu cea obținută pentru nanoparticulele hibride seleniu - silice sintetizate chimic și asociate prin molecule amfifile de lignosulfonat (Modrzejewska-Sikorska et al. 2017 International journal of biological macromolecules, 103: 403-408).
Exemplul 2
Se lucrează la fel ca în exemplul 1, cu diferența că se folosește tulpina Trichoderma asperellum Td36b, depozitată sub numărul P(F) 001434 la National Collection of Agricultural and Industrial Microorganisms (NCAIM) Budapesta, care este producătoare de swolenine. Materialul vegetal se umectează cu apă bidistilată. Incubarea tulpinii se realizează la 30°C, iar durata de incubare este de 5 zile. Incubarea tulpinii se realizează la 30°C, iar durata de incubare este de 5 zile. Se determină în final valori de 22,4 ± 5,2 mg/ml Si și 0,98 ± 0,23 mg/ml Se, pentru conținutul în siliciu total și seleniu total, cu o distribuție de nanoparticule hibride de dimensiuni cuprinse între 75 și 142 nm. Populația de nanoparticule 1 este omogenă, cu un diametru dominant de 98 nm, volum maxim de 22,3%, iar potențialul zeta are valoare cuprinsă între - 38 ± 8,2 mV, care indică o bună stabilitate. 3
Exemplul 3
Se lucrează la fel ca în exemplul 1, cu diferența că se folosește tulpina Trichoderma 5 spp. T27, care este producătoare de expansine microbiene. Îndepărtarea miceliului și a materialului vegetal se realizează prin folosirea unei unități de filtrare EZ-Fit™ (Merck Grup) 7 cu membrană de 0,45 pm.
Se determină în final valori de 18,2 ± 6,7 mg/ml Si și 0,94 ± 0,28 mg/ml Se, pentru9 conținutul în siliciu total și seleniu total, cu o distribuție de nanoparticule hibride de dimensiuni cuprinse între 62 și 136 nm. Populația de nanoparticule este omogenă, cu un diametru11 dominant de 94 nm, volum maxim de 24,5%, iar potențialul zeta are valoare cuprinsă între 36 ± 9,3 mV, care indică o bună stabilitate.13
Exemplul 4
S-a testat capacitatea nanoparticulelor hibride seleniu - silice, de a proteja plantele 15 test față de acțiunea toxică a cadmiului. S-a lucrat cu plantule de rapiță de toamnă, Brassica napus oleifera, hibrid Maximus® PR45D03 (Pioneer Du Pont, Afumați, Ilfov, România), 17 crescute în vase magenta cu mediu Murashige Skoog (MS) mineral, cameră climatică la 20 ± 1°C, la un regim lumină - întuneric 16/8 h, cu intensitate luminoasă mică (150 pE/m2/s) 19 în timpul perioadelor de iluminare. În mediul MS au fost incluse concentrații de 0,5 mM de CdSO4. S-a lucrat în 8 variante, martor netratat cu cadmiu, martor tratat cu cadmiu, referință 21 tratată cu 0,2 mg/l Se (ca selenit de sodiu), referință tratată cu 30 mg/l Si (ca acid silicic stabilizat cu colină), referință tratată cu 0,2 mg/l Seleniu (ca selenit de sodiu) și 30 mg/l Si 23 (ca acid silicic stabilizat cu colină) și produse de testat, conform exemplelor 1-3, aplicate ca 2 ml la litru, corespunzând la 40 mg Si (ca nanoparticule de silice) și 2 mg Se (ca nano- 25 particule de seleniu). Suspensiile s-au realizat în soluții 1% de esteri etilici ai uleiului de floarea-soarelui (ca adjuvant de stropire). S-au aplicat pe fiecare plantulă de 5 zile câte 50 pl 27 soluții de testat, prin utilizarea unei micro-pipete. Martorul netratat a fost tratat cu apă. Fiecare variantă a inclus câte 80 plantule, distribuite în 4 repetiții de câte 20 plantule (2 vase 29 Magenta cu câte 10 plantule). Repetițiile au fost randomizate conform unei scheme de randomizare în pătrat latin. După 10 zile s-au determinat caracteristicile morfologice ale 31 plantelor (masa umedă a tulpiniței și masa umedă a rădăcinuței), ca și peroxizi lipidici (ca malondialdehidă, cu acid tiobarbituric (Heath și Parker, 1968, Archives of biochemistry and 33 biophysics, 725:189-198). Rezultatele sunt prezentate în tabelul 1 de mai jos.
Influența tratamentelor cu produse conținând suspensie de nanoparticule hibride și cu produse de referință asupra toxicității cadmiului 37 pentru plantule de rapiță (cv. Maximus® PR45D03)
| Tabelul 1 | 39 | |||
| Varianta experimentală | Masa proaspătă tulpiniță (mg) | Masa proaspătă rădăcinuța (mg) | ||
| Peroxizi lipiaici (MDA, pM/g s.p.) | 41 | |||
| Martor netratat, fără Cd | 124 ± 23 | 25 ± 9 | 5,18 ± 0,83 | |
| Martor netratat, + Cd | 22 ± 10 | 10 ± 5 | 8,23 ± 1,64 | 43 |
| Selenit de sodiu, 0,2 mg/L Se, + Cd | 103 ± 16 | 18 ± 7 | 6,37 ± 0,73 |
| Varianta experimentală | Masa proaspătă tulpiniță (mg) | Masa proaspătă rădăcinuța (mg) | Peroxizi lipidici (MDA, :M/g s.p.) |
| Acid silicic, 30 mg/L Si | 110 ± 20 | 23 ± 6 | 6,22 ± 0,82 |
| Selenit de sodiu, 0,2 mg/L Se + acid silicic, 30 mg/L Si, +Cd | 120 ± 15 | 27 ± 9 | 5,14 ± 0,87 |
| Produs conform Ex. 1, + Cd | 144 ± 14 | 37 ± 8 | 4,83 ± 1,08 |
| Produs conform Ex. 2, + Cd | 128 ± 19 | 32±12 | 4,23 ± 1,48 |
| Produs conform Ex. 3, + Cd | 132 ± 16 | 30 ± 8 | 4,72 ± 1,57 |
Produsele realizate conform exemplelor au o eficacitate superioară în protejarea față de efectele toxice ale acidului silicic și/sau seleniului.
Claims (3)
- Revendicare 11. Procedeu de obținere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu elementar 3 și silice asociate destinate aplicării ca biostimulanți pentru plante, caracterizat prin aceea că, include următoarele etape: 5- cultivarea tulpinilor de microorganisme cu acțiune de biostimulant pentru plante, înalt producătoare de proteine amfifile cu afinitate pentru carbohidrați, pe medii care 7 favorizează inducerea genelor respective, timp de 5 zile la temperatura de 28...30°C, pe agitator rotativ, 70 rpm; 9- separarea axenică a miceliului de microorganisme cu acțiune de biostimulant pentru plante, de supernatant, prin centrifugare;11- umectarea materialului vegetal cu un conținut ridicat de siliciu în apă pură sau bidistilată, în proporție de 1 g material vegetal la 1 ml apă pură sau bidistilată;13- sterilizarea materialului vegetal cu un conținut ridicat de siliciu, umectat, prin trei cicluri repetate, de încălzire la 72...75°C timp de 25...30 min și răcire la temperatura camerei15 timp de 6 h;- adăugarea aseptică peste materialul vegetal cu un conținut ridicat de siliciu, umectat17 și sterilizat a miceliului umed de microorganisme cu acțiune de biostimulant pentru plante, în raport de 1 g miceliu umed la 5 g material vegetal umectat și sterilizat;19- aducerea peste amestecul miceliu - material vegetal a unui mediu mineral minimal steril, în raport de 80 ml mediu mineral minimal steril la 20 g amestec miceliu, - material vegetal; 21 - separarea proteinelor amfifile din supenatantul separat în prima etapă; și- purificarea, concentrarea și sterilizarea lor prin filtrare și obținerea unei soluții23 proteice pentru adăugarea peste amestecul de miceliu - material vegetal, pentru a crește concentrația proteinelor amfifile, incubarea amestecului miceliu - material vegetal-soluție25 proteică la temperatura de 28...30°C, pe agitator rotativ, 70 rpm, timp de 5...7 zile;- îndepărtarea miceliului și a materialului vegetal prin centrifugare, la viteză la 1000 27 x g sau prin filtrare, pe pori de minimum 0,45 pm, adăugarea aseptică a unei soluții de selenit de sodiu 10 ml, în supernatantul obținut la pasul anterior și conținând spori formați din 29 miceliu, proteine amfifile în exces, nanoparticule de silice asociate cu carbohidrați, în raport de 10 ml soluție selenit de sodiu la 90 ml supernatant, incubarea mediului cu spori formați 31 din miceliu, proteine amfifile, nanoparticule de silice, selenit de sodiu la temperatura de 28...30°C, pe agitator rotativ, 70 rpm, timp de 5...7 zile; 33- separarea prin ultrafiltrare tangențială pe membrană de 0,45 pm a miceliului nou format, concentrarea suspensiei de nanoparticule rezultată ca permeat prin ultrafiltrare 35 tangențială și apoi sterilizarea acesteia.
- 2. Procedeu de obținere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu elementar 37 și silice conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, tulpinile de microorganisme cu acțiune de biostimulant pentru plante, producătoare de proteine amfifile cu afinitate pentru 39 carbohidrați se selectează dintre tulpinile familiei Hypocreaceae, cum ar fi Trichoderma harzianum Td50b, Trichoderma asperellum Td36b, Trichoderma spp. T27. 41
- 3. Procedeu de obținere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu elementar și silice conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, mediul care favorizează 43 exprimarea de proteine amfifile cu afinitate pentru carbohidrați are următoarea compoziție: 10 g/l zer praf cu minimum 12% proteină și minimum 72% lactoză, 0,68 g/l KH2PO4, 0,87 g/l 45 K2HPO4, 1,2 g/l(NH4)2SO4, 0,2 g/l KCI, 0,2 g/l CaCI2, 0,2 g/l MgSO4 · 7H2O, 2 mg/l FeSO4 · 7H2O, 2 mg/l MnSO4 · 7H2O și 2 mg/l ZnSO4 · 7H2O. 47RO 133904 Β11 4. Procedeu de obținere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu elementar și silice conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, materialul vegetal cu un conținut 3 ridicat de siliciu include pleavă de orez, substrat epuizat de la cultivarea ciupercilor Pleurotus, borhot de orz precum și amestecuri ale acestora.5 5. Procedeu de obținere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu elementar și silice conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, purificarea proteinelor amfifile 7 produse în mediu inițial se realizează prin cromatografie de afinitate hidrofobă pe o coloană hidrofobizată, iar concentrarea se realizează prin ultrafiltrare.Editare și tehnoredactare computerizată - OSIM Tipărit la Oficiul de Stat pentru Invenții și Mărci sub comanda nr. 458/2023
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA201800616A RO133904B1 (ro) | 2018-08-28 | 2018-08-28 | Procedeu de obţinere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu şi silice |
| EP18191359.1A EP3617143A1 (en) | 2018-08-28 | 2018-08-29 | Process for obtaining stable suspensions of selenium and silicon nanoparticles |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA201800616A RO133904B1 (ro) | 2018-08-28 | 2018-08-28 | Procedeu de obţinere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu şi silice |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO133904A2 RO133904A2 (ro) | 2020-03-30 |
| RO133904B1 true RO133904B1 (ro) | 2023-11-29 |
Family
ID=63915132
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ROA201800616A RO133904B1 (ro) | 2018-08-28 | 2018-08-28 | Procedeu de obţinere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu şi silice |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP3617143A1 (ro) |
| RO (1) | RO133904B1 (ro) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108840904B (zh) * | 2018-07-12 | 2022-03-04 | 江西中科硒谷功能农业发展有限公司 | 一种从烟叶中提取硒蛋白质的方法 |
| CN111676168B (zh) * | 2020-06-30 | 2022-01-25 | 大连澎立生物科技有限公司 | 纳米硒脱毒剂及其制备方法、脱毒生物蛋白硒及其制备方法和应用 |
| CN113373180B (zh) * | 2020-12-18 | 2023-05-26 | 中国农业科学院烟草研究所 | 解淀粉芽孢杆菌的纳米硒合成活性菌液、其制备方法及应用 |
| CN113875989B (zh) * | 2021-09-23 | 2023-09-29 | 山东安为先生物科技有限公司 | 一种功能化水溶性纳米硒、制备方法及应用 |
| CN114031650B (zh) * | 2021-11-29 | 2023-05-02 | 上海交通大学 | 壳寡糖硒配位化合物及其制备方法和应用 |
| CN114703088B (zh) * | 2022-03-01 | 2023-08-01 | 武汉轻工大学 | 一种地衣芽孢杆菌及其应用 |
| CN114632434B (zh) * | 2022-03-21 | 2023-01-24 | 哈尔滨工业大学 | 一种纳米SiO2粉体-糖溶液的制备方法 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US978A (en) | 1838-10-10 | Hobse-power | ||
| US9919A (en) | 1853-08-09 | Railroad-cab seat | ||
| RO128889B1 (ro) * | 2012-11-27 | 2017-06-30 | Corax-Bioner Ceu S.A. | Tulpină de trichoderma harzianum şi compoziţie cu eliberare controlată care conţine respectiva tulpină |
| CN103789114B (zh) * | 2013-12-26 | 2015-08-26 | 广东省生态环境与土壤研究所 | 一种可以抑制水稻重金属吸收积累生产富硒稻米的硒掺杂纳米硅溶胶及其制备方法 |
| US9403688B1 (en) | 2015-02-09 | 2016-08-02 | King Saud University | Method of producing biogenic silica nanoparticles |
| CN105199979B (zh) | 2015-08-31 | 2019-05-03 | 苏州硒谷科技有限公司 | 苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis YLX-4及其应用 |
| EA033652B1 (ru) | 2015-09-09 | 2019-11-13 | Compagnie Ind De La Matiere Vegetale Cimv | Способ извлечения диоксида кремния |
| RO131926B1 (ro) * | 2015-12-02 | 2020-04-30 | Institutul Naţional De Cercetare-Dezvoltare Pentru Chimie Şi Petrochimie - Icechim | Procedeu de condiţionare a microorganismelor biostimulante pentru plante pe suporturi ceramice poroase |
| CN107881127B (zh) | 2018-01-23 | 2022-03-22 | 陕西省微生物研究所 | 一种解淀粉芽孢杆菌Lxz-41及利用该菌株可控制备纳米硒的方法 |
-
2018
- 2018-08-28 RO ROA201800616A patent/RO133904B1/ro unknown
- 2018-08-29 EP EP18191359.1A patent/EP3617143A1/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3617143A1 (en) | 2020-03-04 |
| RO133904A2 (ro) | 2020-03-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RO133904B1 (ro) | Procedeu de obţinere a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu şi silice | |
| ES2964927T3 (es) | Composiciones para el tratamiento de plantas | |
| EP3098303B1 (en) | Microbial fermentation methods and compositions | |
| ES2788631T3 (es) | Composiciones y métodos de mejora de la producción de tomate | |
| Pandey et al. | Optimization of biomass production of Spirulina maxima | |
| JP2016528906A (ja) | 液体培養におけるアーバスキュラ菌根菌類の連続的増殖および大量生産のためのシステムおよび方法 | |
| BR122020001306B1 (pt) | Métodos e composições de fermentação bacteriana | |
| El-Ramady et al. | Biological aspects of selenium and silicon nanoparticles in the terrestrial environments | |
| CN109477126A (zh) | 罗汉果醇或罗汉果醇糖苷的生产方法 | |
| CN106047749A (zh) | 一种玉米赤霉烯酮降解菌及其应用 | |
| EP1546319A1 (de) | Abbau und modifizierung von silicaten und siliconen durch silicase und verwendung des reversiblen enzyms | |
| RO128931A0 (ro) | Tulpină de brevibacillus parabrevis şi compoziţie cu eliberare controlată pe bază de aceasta | |
| CN107493979A (zh) | 基于分子生物学技术的蛹虫草子囊孢子杂交育种方法 | |
| Coronel León et al. | Lichenysin production and application in the pharmaceutical field | |
| Vetchinkina et al. | Biological synthesis of selenium and germanium nanoparticles by xylotrophic basidiomycetes | |
| Gharieb et al. | Biosynthesis of selenium nanoparticles by potential endophytic fungi Penicillium citrinum and Rhizopus arrhizus: characterization and maximization | |
| WO2003104433A2 (en) | Materials and methods for in vitro production of bacteria | |
| Đorđević et al. | The use of bacterial indole-3-acetic acid (IAA) for reduce of chemical fertilizers doses | |
| CN106566784A (zh) | 防治猕猴桃溃疡病的菌株及其应用 | |
| ES2269004B2 (es) | Uso de arthrobacter oxidans bb1 como protector frente a estres salino. | |
| RO135350A2 (ro) | Procedeu de biosinteză a suspensiilor stabile de nanoparticule de seleniu | |
| KR100690816B1 (ko) | 신규 미생물 마이크로박테리움 아우룸 ｍａ-8 및 이를 이용한 마 영양번식체 생산방법 | |
| Siunova et al. | PGPR Pseudomonas strains promising for the development of bioformulations for plant protection and stimulation | |
| TWI381049B (zh) | 一種用於培養枯草桿菌之液體培養基及其製作方法 | |
| RU2757506C1 (ru) | Штамм бактерий Pseudarthrobacter equi S2 для повышения урожайности зерновых культур |