PT98026B - Processo para a preparacao de um derivado de aspartil-fenilalanina util como inibidor de agregacao de plaquetas - Google Patents

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

Rasurou

O presente invente diz respeito a um processo para a preparação de N-E8-Ciaminoiminomet.il )amino3~l~oxa-~octil3-~N~L~ -α-aspartil—L—fenilalanina a qual é um inibidor altamente potente da agregação de plaquetas»

referido processo consiste no acoplamento do ácido

8-guanidino-octanoico com o éter de metilo da asparti1-fenilalanina, seguido por saponificação do éster de metilo com um hidróxido de metal alcalino, de preferência hidróxido de sódio»

Este inventa refere-se a um novo composto mimético de peptídeo que tem uma potente actividade in vivo como inibidor da agreqação de plaquetas, fibrinogénio é uma glicoproteína presente como componente normal do plasma do sangue, Participa na agregação de plaquetas e na formação de fibrina no mecanismo de coagulação do sangue«

As plaquetas são elementos celulares que se encontram no sangue completo que também participam na coagulação do sangue, A ligação do fibrinoqênio às plaquetas é importante para a normal função das plaquetas no mecanismo de coagulação do sangue, Quando um vaso sanguíneo sofre uma lesão, a ligação das plaquetas ao fibrinogénio iniciará a agregação e forma um trombo, A interacção do fibrinogénio com as plaquetas ocorre através de um complexo de glicoproteína da membrana, conhecida como gpIIbZIIIa? isto é uma característica importante da função das plaquetas. Os inibidores desta interacção são úteis na modulação da formação de trombos de plaquetas.

é também conhecido que uma outra grande glicoproteína denominada fibronectina, que é uma proteína de matriz extracelular principal, interage com o fibrinogénio e a fibrina e com outras moléculas estruturais tais como actina, colagénio e proteog1icanos, Os fragmentos de polipeptídeo relativamente grandes no domínio da ligação à célula de fibronectina têm sida mencionados como tendo actividade de ligação ã célula. Ver U.S. Patents 4 517 686, 4 589 881 e 4 661 íll» Estes polipeptídeos incluem uma sequência de aminoácido interna Arg-81y-Asp-Ser ÍR8DS5. Tem-se verificado que alguns fragmentos de polipeptídeo relativamente curtos da mesma molécula promovem a ligação da célula ao substrato quando imobilizada sobre o substrato ou

inibem a ligação quando em forma imobilizada ou suspensa» Ver U„S« Patente 4 578 079 e 4 614 517, Estes peptideos foram definidos como

X -Arg-S1y-ftsp-R-Y | επί que X = H ou aminoácido,

R = Thr ou Cys;

X-Arg-Gly-Asp-Ser-Y em que X - H ou. aminoácido,

Y = OH ou aminoácido»

Na U»S« Patent 4 683 291, é revelada a inibição da função da plaqueta com peptideos sintéticos desenhados para serem antagonistas de alta afinidade da ligação do fibrinogénio às plaquetas» Estes peptideos sintéticos têm até 16 resíduos de aminoácido com

Arg-Bly-Asp—Vai ou

Arg-81y-Asp-Ser

no terminal C„

Peptideos sintéticos semelhantes que contêm a sequência Arg-Sly-Asp e a sua utilização coroo inibidores da ligação de fibrinogénio a plaquetas são revelados por Koczewiak et al»,

Eílochem» 25, 1767-1774 (19843; Plow et al», Proc. Natl.__Ac aà,

Ruggeri et al», Ibirf. 83, 5708-5712

8ci, 82, 8057-8061 (19853; (19863; Sinsberg et al»₅ (19853; Haverstick et al

Ruoslahti e Pierschbacher , Biol,

L- htói

Ϊ60

3931-3936

Biood 66 (43, 946-952 (1985)

Science 238, 491-497 (19873» cãO

também revelados outros peptídeos inibidores fias .EP Patent Ap. 275 748 e 298 820.

Na U.S. Patent 4 857 508, são revelados alguns novos derivados de tetrapeptideo que têm actividade melhorada como inibidores da agragação de plaquetas. Estes derivados de tetrapeptídeo contêm a sequência X-Gly-Asp-Y em que X e Y são definidos de modo a compreenderem uma variedade de porções orgânicas. Um exemplo ilustrativo preferido é Arg-Gly-Asp-(O-metil-Tyr)-NH₂.

BREVE DESCRIÇÃO DO INVENTO

De acordo com o presente invento, é produzido um novo composto mimético de peptídeo que tem uma potente actividade in vivo como inibidor da agregação de plaquetas. Acredita-se que este inibidor actua por interacções de antagonismo entre o fibrinogénio e/ou proteínas de matriz extracelular e o receptor gpIIb/IIIa de plaquetas, o novo composto inibidor deste invento tem um grupo guanidino no terminal N, uma ligação pseudopeptídea ou mimética de peptídeo na cadeia e um grupo fenilalanina no terminal C. Este composto mimético de peptídeo pode ser representado pela seguinte fórmula de estrutura química:

seu nome sistemático é N-íQ-C íaminoiminometil) amino!··· — 1—oxooctil 3—N—L—ct—aspartí 1—L—fenilalanina; mas è mais convenien·temente referido daqui em diante como 8-guanidinooctanoil-aspar— til-fenilalanina ou pelo termo abreviado 8-BD—Asp-Phe.

novo composto mimético de peptídeo 8-GO-Asp-Phe do invento tem uma demonstrada actividade inibidora de agregação de plaquetas que se salienta pelos seguintes resultados obtidos em vários testes in vitro e in vivos

Έ i'^:>5 r - Inibe directamente a ligação de I—f ibrinogénio a plaquetas humanas activadas por trombina.

Inibe a agregação de plaquetas humanas e de cão in vitro a uma variedade de estímulos pró-agregadoress trombina, colagénio, ADP.

Induz um efeito antiplaqueta sustentado durante a infusão intravenosa constante»

Possui uma duração de acção relativamente curta que permite a terminação rápida dos efeitos antiplaqueta se for requerido pela situação clínica»

J

Não exibe efeitos sobre a libertação ou desgranulação da elastase neutrófila humana»

Ausência de efeitos elctrocardiográficos e hemodinâmicos em cães a velocidades de infusão que são Í0 vezes nsais altas do que as necessárias para se alcançar 90 7» de inibição da agregação de plaquetas nestas BSpéC ÍEiS »

Ausência ds efeitos no SNC em ratos nas 0,5, 1

horas seguintes a uma dose ds composto que foi 20 vezes maior do que a EDc-^ de antiplaqueta da ratazana.

Quando se compara com a. estreitamente relacionada 8-guanidino-octanoil-Asp-2-(4-metoxifenil)-eti1amida (8-GO-Asp--MPE) descrita na U.S. Pat. 4 879 313 8-GO-Asp-Phe apresenta inesperadamente potência substancialmente aumentadas. A S-80-Asp-P'he é surpreendentemente cerca de 5 a 15 vezes mais potente in vivo e cerca de 5 vezes mais activa in vivo do que a 8~S0-ftsp-MPE« observa-se que a nova uma solubilidade e uma

Com base nos anteriores resultados de teste.

~se que a 3-GO-Asp-Phe terapêuticas, por exemp a processos de recanali acreditaserá útil numa -variedade de intervenções lo, na prevenção da reoclusSo que se segue zação tais como pós-terapia fibrinolítica, terapia trombol.it.ica, angioplastia e cirurgia coronária de bypass. Outras utilizações potenciais são para, a prevenção do enfarte do miocárdio, enfarte do miocárdio recorrente, angina instável, doença arterial periférica, isquemia cerebral, apoplexia e doenças de hiperagregabilidade de plaquetas, para prevenir a. oclusão na hemodiálise, processos de desvio (shunt) e para prevenir a progressão da aterosclerose..

Tem-se também encurta substancia 1 mante tancialmente o tempo de coágulo pela administraç verificado que a nova o tempo de reperfusão e alcance da reoclusão após ão do agente trombolítico

8—QO-Asp—Phe prolonga subsa lise de um t-PA em cães»

Por conseguinte, o composto deverá, ser útil para ção com t-PA em terapias tromboIóticas„ a co-administraDESCRIÇÃO DETALHADA DD INVENTO

Ainda que a memória descritiva seja acompanhada por

Claims (5)

1. REIVINDICftçSES lã. - Processo para a preparação de N-E8-ECaminoiminomsti 13 aminol ~i -oxooc ti 3.3 -N-L-a-asparti1 -L~fen i 1 a 1 an ina, carac terizado por compreender o acoplamento do ácido S-guanidino-octarsoico cofli o éter de metilo da aspartil-fenilalanina, seguido por saponificação do éster de metilo com um hidróxido de metal alcalino, de preferência hidróxido de sódio.
2. 2ã» - Método de inibição da agregação de plaquetas num mamífero de sangue quente, caracterizado por compreender a administração ao referido mamífero de uma quantidade eficaz para a inibição da agregação de plaquetas do composto de acordo com a reivindicação 1, num agente de suporte farmaceuticamente aceitável, sendo a gama de dosagem de composto activo de cerca €5,3 a 0,ó mg/kg, quando administrado sob a forma de bólus, e cerca de 2€í a 30 pg/kg/min durante até cerca de 2 horas, quando administrado por infusão.
3. 3ã. - Método de inibição da formação de um trombo num mamífero de sangue quente, caracterizado por compreender a administração ao referido mamífero de uma quantidade eficaz para a inibição da formação de um trombo do composta de acordo com a reivindicação 1, num agente de suporte farmaceuticamente aceitável, sendo a gama de dosagem de composto activo de cerca ¢3,3 a 0,ó mg/kg, quando administrado sob a forma de bólus, e cerca de 20 a 3tí pg/kg/min durante até cerca de 2 horas, quando administrado por infusão.
4. 4S·. - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se incluir na referida composição um composto de acordo com a reivindicação 1, juntamente com um agente de suporte farmaceuticamente aceitável.
5. 5â. - Método para acentuar a actividade trombolítica do tecido activador de plasminogéneo administrado a um mamífero de sangue quente, caracterisado por compreender a co~administração de uma quantidade eficaz do composto de acordo com a reivindicação 1 adequada para o encurtamento do tempo de reperfusão e para | prolongar o tempo para se conseguir a reoclusão, sendo a gama de dosagem de composto activo de cerca 0,3 a 0,6 flig/kg, quando administrado sob a forma de bólus, e cerca de 20 a 30 pg/kg/min durante até cerca de 2 horas, quando administrado por infusão.

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   Lisboa, 19 de Junho de 1991

   J. PEREIRA DA CRUZ

   Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VtCTOR CORDON, 10-A 3.» 1200 US8OA .''χ

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