PT94021A - Processo para a preparacao de novos derivados alquilados em 17/21 da 19-nor-progesterona - Google Patents

Description

LABORATOIRE_IHERA.ME)U_P "PROCESSO PARA A PREPARAÇflO DE NOVOS DERIVADOS ALQUILADOS EM 17/21 DA 19-NOR-PROGESTERQNA" A presente invenção diz respeito ao domínio da química terapêutica e em particular da química esterofde.

Tem mais particularmente por objectivo novos esteroides derivados da 19-nor-progesterona apresentando na posição 17 e eventualmente na posição 21 um substituinte alquilado.

Tem mais especificamente por objectivo os 6-metil-13-nor--pregna-4,6-dienos 17o^e, eventualmente, 21 -alquilados de formula geral

(I) na qual -2-

R1 e R", iguais ou diferentes, representam, cada um, um ãtomo de hidrogénio ou um radical alquilo inferior, comportando 1 a 3 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada, e R.j representa um radical alquilo inferior igual ou diferente do radical representado pelo símbolo R‘ ou R", comportando la 6 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada.

Na formula geral I o grupo de fórmula geral

I

-COCH \ R“ representa de preferência, uma cadeia 1-oxo-etilo (R'=CH3 e R"= =H), 1-oxo-propi 1 o (R'=CH3 e R"=H), 1-oxo-butilo (R'=C9Hg e R" = =H), 1-οχο-2-metil-propilo (R'=CH3 e R"=CH3) ou 1-οχο-2-etil-bu-tiio CR‘=ch2ch3 e r"=ch2ch3i.

Na formula geral I, os símbolos R' e R" representam de preferência um radical metilo, etilo ou isopropilo, Podendo igual_ mente representar um radical propilo.

Conhecem-se já derivados da 19-nor-progesterona e mais particularmente os que possuem um encadeamento caracteristico f

/ "6-metil-Dienona" sobre o.s ciclos A e B da molécula esteroidiana (patente de invenção francesa N9 2.271,333} como por exemplo o 6-metil-17#-hidroxi-3,2Q-dioxo-19-nor-pregna-4,6-dieno e os seus ésteres e éteres. Vãrios derivados esterôidicos possuindo o esqueleto car-bonado da 19-nor-progesterona, portadores sobre o átomo de carbo no 17 e/ou 21 de radicais alquilados são conhecidos como moléculas progestativas (cf. patente de invenção francesa N9 2.077.877} como por exemplo o 3,20-dioxo-17o(-metil-19-nor-pregna-4,9-dieno. A presente inevnção tem por objectivo propor novos compostos de formula geral I, possuindo propriedades progestomiméti_ cas absolutamente interessantes, ligações aos. receptores da pro-gesterona melhoradas e uma metabolização hepática moderada, A eficácia destes novos compostos pode ser atribuída ã estrutura derivada da 19-nor-progesterona, caracterizada, com efej_ to, por um sistema esteroidico portador, ao mesmo tempo, de um encadeamento dito "6-metil-dienona" e pela presença de três sub£ tituintes representados pelos símbolos R', R" e tais como de finidos antes que impedem ou retardam a metabolização do composto no organismo pelas enzimas sem impedir a ligação aos receptores da progesterona.

Entre os compostos de formula geral I, pode-se citar pa£ ticularmente. - o 6,1 7oe,21 -trimeti 1 -3,20-dioxo-1 9-nor-pregna-4,6-die no, -4

- ο 17of-eti 1 —6,21 -dimetíl -3,20—di oxo —19—nor—pregna-4,6~ -dí eno, - o 17<y-eti1 -3,20-diοχο-6-meti 1 -19-nor-pregn.a-4,6-di eno , - o 6,17ctf-di meti 1 -3,2Q-dioxo-l 9-nor-pregna-4,6-di eno , - ο 17οί,21-θίι'1-6-πΐθΐΐ1-3,20^ιοχο-19-ηοΓ-ρΓθ9η3^4,6--dieno, que são os compostos actualmente preferidos,

Os compostos iniciais de fórmula geral IV,

na qual R1, R" e R-j tem os significados definidos antes, necessários para a realização do processo de preparação dos compostos de fórmula geral I, preparam-se de acordo com a literatura submetendo um derivado 19-noi—esteroide de fórmula geral % %

na qual Ac representa um resto acilo de um acido orgânico carboxTlico comportando 1 a 4 átomos de carbono, o traço ondulado indica uma orientação espacial c*ou i e o ciclo A e inteiramente aromãtico do tipo 3-alqui1oxi--A-l,3,5(10.)-estratriénico ou parcialmente insaturado do tipo 3-oxo- Δ4 -estrenico, eventualmente bloqueado sob a forma de derivado funcional com ou sem basculamento , da 1igaçao dupla , ã acção de uma base forte e depois 5 acção de um agente de alqu^ lação para se obter um derivado mono- ou bis-alqui1ado de formula geral

V

na qual R', R" e R-j tem os significados definidos antes, A base forte pode ser um alcoolato alcalino derivado de um álcool inferior comportando 1 a 5 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada e de um metal como o litio, o sodio ou o po tássio, como por exemplo o teramilato de sodio, o butilato terc, de potássio, o etanolato de sodio, um amideto alcalino ou alcaH no-terroso de litio, sodio, potássio, cálcio ou bário, De uma maneira preferida utiliza-se o amideto de sodio ou o isopropilami_ deto de litio. Pode-se ainda utilizar o dimsilsõdio, 0 agente de alquilaçao pode ser um sulfato de dialquilo, como o sulfato de dimetilo por exemplo, ou um halogeneto de alquilo podendo o halogeneo ser o iodo ou o bromo. 0 dissolvente pode ser iodado ou uma mistura escolhida entre a lista: amoníaco liquido, ?ter, THF, benzeno, tolueno , hexano, álcool, sendo os dissolventes preferidos o amonTaco 1T- -7- quido e o tetra-hidrofurano. A base forte e o agente de alquilação utilízam-se em excesso em relação ã estequiometria. A reacção i seguida de uma hidrólise acida.

Os compostos.de fórmula geral III, mono- ou polialquila-dos, purificam-se, eventual mente, mediante meios apropriados co_ mo por exemplo, mediante cristalização ou mediante cromatografia em uma coluna constituída por um adsorvente apropriado para a cr£ matografia como a sílica, o talco ou o silicato de magnésio ou a alumi na. A temperatura da reacção pode variar em largas proporções entre -60° e +50°C. De preferencia esta compreendida entre -60° e -40°, devido ao uso preferido do amoníaco como dissolvente.

Para se obter um derivado mono-alqui1ado (caso em que os símbolos R1 e R“ representam, cada um, um átomo de hidrogénio) , utiliza-se, de preferência, uma concentração menor de agente alcalino (de 4 a 7 equivalentes) e uma concentração menor· de agente de alquilação.

Pelo contrário, para se obter um derivado 17,21-dialqui-lado e necessário introduzir uma maior quantidade de agente alca lino (de 10 a 50 equivalentes) e uma maior quantidade de agente de alquilação (50 a 75 equivalentes). A escolha da base e influenciada. A experiência mostra que o isopropilamideto de lítio i o melhor reagente para a alqui- -8- lação na posição 21, Os alcoolatos alcalinos favorecem a alqui-lação na posição 17, sendo o. reagente alcalino, preferido neste caso, o amideto metálico resultante do ataque "in situ" do amonTa co liquido por um metal alcalino ou alcalino-terroso como o lTtio ou o cálcio. A alquilação na posição 170( a partir de um enolato alca_ lino 5 uma reacção difícil e necessita da presença de um excesso muito grande de agente alcalino, 0 acesso ao metilo na posição 21 pelo agente de alquilação é mais difícil quando a posição 17 está já ocupada por um grupo alquilo. Obtem-se uma mistura de derivados mono- e dial -quilados na posição 21- e, por este facto, requer um grande excesso de metal e de agente de aquilação, Favorece-se uma mono--alquilação na posição 21 utilizando um agente alcalino tal como o isopropi1amideto de litio em tetra-hidrofurano devido ao impedimento estereoquTmico deste reagente alcalino.

Pelo contrario, tendo em conta velocidades de alquilação diferentes, é possível alquilar inicialmente na posição 17<V mediante introdução de um pequeno excesso de agente de alquilação no meio reaccional, adicionando de novo, depois, um agente de aj quilação igual ou diferente para realizar a alquilação na posição 21 com um radical alquilo igual ou diferente do da posição MU. E igualmente possível utilizar como composto inicial um 19-nor-pregnadieno ja metilado na posição 21 e realizar uma bis--alquilação na posição 17 e na posição 21 mas, neste caso, e a alquilação na posição 21 que e favorecida visto o carbono na posi ção 21 formar um carbanião secundário mais estável e mais reacti vo. A reacçao pode-se escrever assim para uma reacção de et| lação:

CH

- CH3

CH0CH

23¾

Agente-> de etilação

Quando se utiliza como composto inicial um derivado es tra-trienico de fórmula geral III, quer dizer um composto para o qualo núcleo A é aromático, realiza-se a conversão em composto de formula geral IV pelas seguintes etapas: -10- ·' f - submeta-se um composto de formula geral

na qual R‘, R" e R-j tem os significados definidos antes e R2 representa um radical alquilo inferior, a uma redução de acordo com o método de Bircb-Nielsen seguida de uma hidrólise em meio acido forte e depois uma reoxidação com o reagente de Jones para se obter o 3-ceto-l9-nor-pregna-4-eno de fórmula geral IV, A redução segundo Birch-Nielsen efectua-se no seio de um dissolvente inerte como um eter cíclico ou de cadeia linear com uma solução de metal alcalino em amoníaco liquido na presença de um agente dador de protões como por exemplo um alcanol tal como o metanol ou o etanol . Eliminaram-se, em seguida, o amoníaco e des^ trõi-se o excesso de metal alcalino mediante adição de um álcool, Hidrolisa-se, em seguida, o eter enolico resultante, mediante reacção com um ácido inorgânico forte. -π

A presente invenção diz igualmente respeito a um processo para e preparação de compostos de formula geral I, utilizando como compostos iniciais, um eter de enol do 3,20-dioxo-l9-nor-pre£ na-4-eno, obtido a partir de 3,20-dioxo-l9-nor-pregna-4-eno, com postos iniciais que tem a seguinte fórmula geral

na qual R', R" e R-j têm os significados definidos antes .

Submete-se os compostos de formula geral IV a uma eteri-ficação em eter de enol com um ortoformato de alquilo para se ob ter um composto de formula geral

f

na qual R2 representa um radical alquilo inferior e R', R" e R-| têm os significados definidos antes, que se faz reagir com um agente de formilação do tipo Vilsmeier-Hack para se obter um derivado formilado de fórmula geral

CHO -13- \ na qual R', R“, R^ e R^ tim os significados definidos aji tes, o qual se reduz com um fndreto misto de metal alcalino para se obter um derivado Fndroxi-metilado de formula geral

CH

(VII) na qual R1, R", R2 e R^ tim os significados definidos ajn tes, que se trata com um acido inorgânico ou orgânico para se obter 0 derivado 3-oxo-6-metilinico de formula geral -14 Λ

Cvnií na qual R‘, R" e R-j têm os significados definidos antes, o qual se trata, por sua vez, com um catalisador de isomerização para se obter o derivado 6-meti1-3-oxo-l9-nor-pregna~4,6-dienico correspondente de formula geral I. A presente invenção estende-se igualmente as composições farmacêuticas comportando, como ingrediente activo, pelo menos um composto de formula geral I sÕ, em mistura com um ou vários excipientes ou um veiculo inerte, não tóxico, aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. A presente invenção compreende igualmente composições farmacêuticas comportando alem disso um outro ingrediente activo de acção similar ou sinergica ou complementar,

As composições farmacêuticas de acordo com a presente in venção são destinadas ã administração por via oral, parenteral , rectal, per-mucosa ou per-cutinea,

Para a administração por via parenteral , os compostos de formula geral I administram-se sob a forma de soluções ou suspeji soes injectãveis acondicionadas em ampolas, em frascos multicores ou em seringas auto-injectaveis.

Para a administração por via oral, os compostos de formjj la geral I administram-se sob a forma de comprimidos simples ou revestidos, de drageias, de gelulas, de capsulas moles, de pílulas, de pÕs ou de granulados.

Para a administração por via rectal, os compostos de fÕ£ mula geral I apresentam-se sob a forma de supositórios ou de cãjo sulas rectais.

Para administração por via per-mucosa, os compostos de formula geral I apresentam-se sob a forma de soluçoes oleosas , cremes, geleias ou capsulas, E possível administrar os compostos de formula geral I quer pela mucosa vaginal, pela mucosa na^ sal sob a forma de nebulização ou de gel, ou pela mucosa ocular.

Para a administração por via per-cutanea, os compostos de fórmula geral I, administram-se sob a forma de soluçoes ou de cre mes em um dissolvente penetrante como o álcool benzTlico, o dime-ti 1 sul fõxfdo., a 1-n dodecil-2-azaciclo-fieptanona [AZ0NE®í, ou a N-/3h.idroxieti 1-acetamida.

Estas composições farmacêuticas de acordo com a presente i > -16- . invenção encontram utilização em terapêutica para o tratamento das perturbações ginecológicas provocadas por uma insuficiência luteal tais como irregularidade menstrual, dismenorreia, sindro ma pré-menstrual e distúrbios da menopausa, Podem servir sós ou em associação com um estrogénio como agente contraceptivo, A posologia usual esta compreendida entre Q.,0.5 mg e 25 mg e a posologia diaria esta compreendida entre 0,1 mg e 5Q mg em administração continua ou periódica, A presente invenção diz ainda respeito aos compostos intermediários novos formados durante a síntese, a saber:

- os compostos de formula geral IV

(IV) na qual R1, R" e R-| tem os significados definidos antes, com exclusão do caso em que o símbolo R' representa um grupo me-tilo ou etilo e os símbolos R' e R" representam, cada um, um ãto mo de hidrogénio, -1 7-i

- os compostos de formula geral V -1 7-i

R"

1 (V) na qual R2 representa um radical alquilo inferior, R‘ e R", iguais ou diferentes, representam, cada um, um átomo de hidrogénio ou um radical alquilo inferior, comportando 1 a 3 átomos de carbono, de cadeia linear ou rami_ ficada, R-| representa um radical alquilo inferior, igual ou diferente de R' ou de R", comportando 1 a 6 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada e na qual R’ e R", iguais ou diferentes, representam, cada um, um átomo de hidrogénio ou um radical alquilo inferior, comportando 1 a 3 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada, os compostos de fórmula geral -18- / chT (vi}

na qual R1 , R", R-j e R^ tim os significados definidos ajn tes, os compostos de fórmula geral

^R‘ CH

ch2 OH (VII ) X, f , na qual R1, R", R-| e tem os significados definidos an_ tes, - os compostos de formula geral

na qual R1 , R" e R-| têm os significados definidos antes.

Os exemplos que se seguem ilustram a presente invenção sem contudo a limitarem.

EXEMPLO I 6,17$-dimeti1-3,20-dioxo-l9-nor-pregna-i,6-dieno

Estádio A: 17c(-acetoxi-3-etoxi-20-oxo-l9-nor-pregna-3,5-dieno

Sob atmosfera inerte e ã temperatura ambiente, adicionam- -20 ,/ // -se a uma solução de 126 g de 3,2Q-díoxo-17c<-acetoxi-19-nor-prec} na-4-eno em 1.Q10 ml de etanol , 115 g de ortoformato de etilo e então, apos agitação durante 10 minutos, adiciona-se Q,63 g de acido p-toluenosulfSnico,

Mantem-se sob agitação durante 60 minutos e interrompe--se a reacção mediante adição de 17 ml de trietilamina. Dilui--se o meio reaccional com 380 ml de etanol e aquece-se a mistu-· ra reaccional a refluxo ate a dissolução,

Faz-se cristalizar deixando a solução voltar ã temperatura ordinária e depois mediante arrefecimento com um banho de acetona/gelo, Obtim-se deste modo 113 g de S-etoxi-Utf-acetoxi--20-oxo-l9-nor-pregna-3,5-dieno, ou seja um rendimento de 83 % em relação ã teoria. 0 eter de enol apresenta as seguintes caracteristicas:

Espectro I,V,: 174Q cm"^ CO do acetoxi, 1710 cm CO em 2Q, 1650, 1620. cm-1 delta - 3,5

Espectro U.V,; \ max 243 nm,£=20840 -21 - RMN : (T, 3H) a 1,3 ppm CHg do etoxi, (Q, 2H) a 3,60 ppm CH2 do etílo, (S, 1H) a 5,25 ppm H transportado pelo Cg (S, 1H) a 5,40 ppm H transportado pelo

Estádio B: 17d- meti 1-3,20-dioxo-19-nor-pregna-4-eno e 170(,21- -dimeti 1-3,20-dioxo-l9-nor-pregna-4-eno

Prepara-se anteclpadamente uma solução de 46 g de cilcio em 1.000 ml de amoníaco liquido arrefecido a -60°C e, sob atmosfera inerte, adiciona-se em fio fino uma solução de 30 g de eter de enol do estádio A em 495 ml de tetra-hidrofurano, ApÕs 15 mi_ nutos de agitação, adicionam-se, gota a gota, 363 ml de iodeto de metilo. Forma-se um precipitado branco-cinzento. Terminada a adição, agita-se durante 60 minutos e evapora-se depois o mãxi^ mo possTvel de amoníaco sob vazio e sob banho de agua quente. Adicionam-se então, 1.000 ml de etanol e de acido clorídrico 6N ati que o pK seja acido, mantendo sempre a temperatura do meio reaccional a Q°C mediante imersão em um banho de acetona/gelo.

Mantêm-se ainda sob agitação durante 60 minutos. Precipita-se os. compostos da reacção mediante adição de 2.000 ml de agua e extrai-se com tolueno, Obtêm-se deste modo, apos evapora ção do dissolvente, 22,9 g de um Óleo bruto contendo 68¾ de deri_ vado 17o<-meti 1 ado e 24% de derivado 17 Oi ,21 -dimetil ado, determi_ nadas por CLHP.

Mediante cromatografia sobre sílica com eluição de ciclo -22

hexano a 10¾ de éter, isolam-se as fracções da cabeça 1,1 g de derivado 17o621 -dimeti 1 ado e depois 6 g do derivado 17tf-meti 1 ado nas fracções da cauda. Recristalizam-se estes dois compostos se paradamente em metanol. Apresentam as seguintes constantes fTsj_ cas: —»3 , 20-d i oxo-1 7<tf-meti 1 -1 9-nor-pregna-4-eno I ,V.: 1 705 •cm"'1 CO em 20 1680 cm 1 CO em 3 1620 cm*1 para o C=C conjugado U.V. : X max 240 nm., £ = 17385 RMN: (S, 3H) a 1,2 ppm CH3>17o( (S, 3H) a 2,2 ppm CH3-21, 3,20-d i oxo-17oí, 21 -dimeti 1 -19-nor-pregna-4-eno I.V.; : 169.7 ~ 1 cm CO em 20 167Q cm'1 CO em 3 U.V.: : X max 240 nm, £ = 16515 RMN: (S, 3H) a 1 ,2 ppm CH3“17oí (T, 3H) a 1,07 ppm CH2~22 Mui ti pleto a 2,55 ppm CH?- -23/ /

Estádio C: 3-etoxi-l 7<tf-meti 1 -20-oxo-l 9-nor-pregna-3, 5-dieno

Prepara-se este composto de acordo com o processo descH to no estádio A, partindo de 3,20-dioxo-17<*-metil-19-nor-pregna--4-eno, 12 ml de etanol, 1,85 ml de ortoformato de etilo, 0,102 g de ácido ]D-tolueno-sulfÕnico e depois 0,2 ml de trietilamina.

Obtem-se, deste modo, com 78 % de rendimento, o eter eníj lico cristalizado apresentando as seguintes constantes físicas:

Espectro IV; 1695 cm""* C0 em 20 1640, 1620 cm ^ delta-3,5

Espectro UV: \ max 243 nm, £= 16520

Espectro de RMN:· (S, 3H} a 1,15 ppm CH3-17# (T, 3H] a 1,30 ppm CHg do etoxi (S, 3H) a 2,15 ppm CH3-21 CQ, 2H] a'3,80 ppm CH2 do etoxi ($, 1H) a 5,22 ppm H em Cg ($, 1H) a 5,32 ppm H em

Estádio D: 3-etoxi-6-formi 1 -1 7o^-meti 1 - 20-oxo-l 9-noi—pregna- -3,5-dieno

Prepara-se um. reagente de formilação dissolvendo gota a go ta sob atmosfera de azoto e a 2o, 3,15 ml de P0C13, destilado

recentemente, em 28 ml de dimetilformamida seguida de um período de agitação de 5 minutos. Adiciona-se o reagente assim preparado, gota a gota, a uma solução de 7 g de 3-etoxi-1Ttf-meti1-20--oxo-19-nor-pregna-3,5-dieno em 56 ml de dimetilformamida no decurso de 10 a 15 minutos.

Mantém-se sob agitação durante 10 minutos e hidrolisa-se depois o ião imÕnio mediante adição, gota a gota, de uma solução de 14 g de acetato de potássio em 28 ml de ãgua sem que a temperatura ul- trapasse +30°C. A solução inicialmente corada de vermelho, vira para amarelo com o início da cristalização. ApÕs 30 minutos de agitação, adicionam-se 105 ml de agua gelada. 0btem-se deste modo.7,2 g, ou seja 95¾ da teoria, de 3-etoxi-6-formi 1 -1 7<tf-meti 1 --20-oxo-l9-nor-pregna-3,5-dieno bruto. Recristaliza-se em eta-nol para se obter 3,1 g de composto puro cujas constantes são: I.V: 1 700 cm"1 , C0 em 20 1650 e 1615, delta-3,5

max 220 e 320 nm RMN: desaparecimento de (S, 1H) a 5,22 ppm.

Estádio E: 17af-meti 1 - 6-meti 1 eno-3,20-dioxo-l9-nor-pregna-4-eno.

Adicionam-se em pequenas fracções, sob atmosfera de azoto e ã temperatura ambiente, 95 mg de boro-hidrato de sodio a uma solução de 1,9 g de 3-etoxi-1 7 tf-meti 1 -6-formi 1 -19-nor-20-ceto-pregna-3,5--dieno em 5,7 ml de etanol e 4,7 ml de dimetilformamida. Mantém- -se sob agitação durante 2 horas. Leva-se a temperatura da sol£ ção reaccional a 0°C e adiciona-se uma solução de 0,4 ml de ácido sulfúrico 2N em 2 ml de agua no decurso de 2 minutos. A temperatura sobe a 10°C e aparece um ligeiro precipitado amarelo sob a forma de uma goma. Mantém-se a agitação durante mais 20 mi nutos.

Adiciona-se então uma solução de 0,88 g de carbonato de potássio em 2 ml de água, gota a gota. 0 precipitado aumenta Separa-se o precipitado mediante filtração e lava-se abundantemeji te com água ate ã neutralidade das águas de lavagem. Obtem-se deste modo 1,40 g de 3,20-dioxo-6-metileno-17o(-metil-19-nor-preg-na-4-eno, ou seja um rendimento de 87%.

Espectro I. V .: 1 700 cm-1 CO em 20

1660 cm-1 CO em 3 1620, 1595 cm"1, C=C

Espectro U.V. ^ max 263 nm, £ =12280

Espectro de RMN: aparecimento de dois singuletos não muj[ to bem resolvidos a 5 ppm e 5,25 ppm.

Estádio F: 3,20-dioxo-6,l loi- d i me ti l-19-nor-pregna-4,6-dieno (composto de formula I)

Prepara-se uma suspensão de 0,65 g de carvão paladiado a 5% em 33,5 ml de metanol que se leva a refluxo durante 30 minu-

tos; adicionam-se 1,34 g do derivado 6-metilinico do estádio E. Mantim-se o aquecimento a refluxo. Segue-se a reacção mediante determinação da absorção em u.v. ApÕs 30 minutos de agitação, deixa-se a mistura reaccional voltar ã temperatura ambiente Filtra-se sobre Clareei. Concentra-se o filtrado, submete-se a uma cromatografia em três vezes o seu.peso de sílica e elui-se com tolueno. Recristaliza-se as fraeções contendo o derivado 6--metílico em metanol e obtem-se, deste modo, 0,83 g de 3,20-dio-xo-6,1 7<tf-dimetil-19-nor-pregna-4,6-dieno, ou seja 62¾ da teoria.

As constantes analíticas são.as seguintes:

Espectro I. V.: 1 695 cm"1 C0 em 20 1650 cm"1 CO em 3 1622, 1576 cm"1 delta-4,6

Espectro UV: \ max 289 nm, £ =23900

Massa: 326 massa molar

283 perda de CHoC0 43 CH3CO

IX3D : (dioxano) + 22° 32 P. F.: 164,6°C í -27- y

Composi ção centesimal: C22H30°2 Encontrada Calculada C% 80,26 80,93 H% 9,20 9,26 Espectro de RMN: (S,3H) a 0,76 ppm para o CHg-18 (S, 3H) a 1,19 ppm para o CH3-17rt (S,3H) a 1,88 ppm para o CH3 em 6 (S,3H) a 2,16 ppm para o CH3-21 (S,1H) a 6,01 ppm para o H em C? (S , 1 H) a 6,12 ppm para o H em C, EXEMPLO II: 6,1 70(i 21 -trimetil-3,20-dioxo-19-nor-pregna-4,6-dieno

Estádio A: 3-etoxi-l 7<*,21 -d i me ti 1 -20-oxo-l 9-nor-pregna-3,5-dieno

Procede-se de acordo com o processo descrito no estádio h do exemplo I, partindo-se de 5,85 g de 3,20-dioxo-17<V,21-dimetil--19-nor-pregna-4-eno obtido no estádio B do exemplo I em 12 ml de etanol , 5,9 ml de ortoformato de etilo e 0,029 g de ácido p-tolue^ no-sulfonico. Uma vez terminada a reacção, interrompe-se mediante adição de 0,6 ml de trieti1amina. 0 éter enÕlico obtido não cristaliza, esgota-se com benzeno e lava-se a fase benzenica com água. Obtem-se deste modo 7,07 g de éter enolico bruto que, apos -28

«rtJC® f purificação mediante cromatografia sobre alumina básica e elui-ção com hexano e 1% de trieti1amina, fornece 5,8 g de 3-etoxi--17tf,21-dimeti1-20-oxo-l9-nor-pregna-3,5 - d ieno, ou seja um rendimento de 91¾.

Estádio B; 3-etoxi -6-formi 1 -1 loí, 21 - dimeti 1- 20-oxo-l 9-nor-pregna--3,5-dieno

Efectua-se a formilação na posição 6 do composto do está dio A de acordo com o processo descrito no estádio D do exemplo I. Parte-se de 5,1 g de eter enolico do estádio A em 41 ml de dimeti1formami da. 0 reagente de formilação Ó constituído por 2,15 ml de POC1^ em 20 ml de dimeti1formamida. 0 reagente de hidrólise é formado por 13,8 g de acetato de potássio em 20 ml de água.

Obtem-se deste modo 4,4 g, ou seja um rendimento de 77%, de derivado 6-formilado bruto.

Estádio C; 6-metil eno-1 lc(} 21 -dimeti! -3,20-dioxo-19-nor-pregna--4-eno.

Procede-se de acordo com o processo descrito no estádio E do exemplo I. Parte-se de 4,3g do derivado 6-formilado do e_s tãdio B em 43 ml de etanol. Reduz-se com uma solução de 0,273 g de boro-hidreto de sódio em 4 ml de dimeti1formamida. Agita-se durante 10 minutos e desidrata-se, depois, o derivado hidroxime-tTlico com uma solução de 5,15 ml de ácido sulfurico 2N em 40 ml -29- de agua.

Obtem-se deste modo 1,9 g, ou seja um rendimento de 50%, do derivado 6-metilÍnico bruto. X max = 258 nm

Estádio D: 6,17<tf,21 -trimetil-3,20-dioxo-l9-nor-pregna-4,6-dieno (composto de formula I)

Leva-se a refluxo uma suspensão de 25 ml de etanol e 0,14 g de carvão paladiado durante 60 minutos. Adiciona-se, em seguida, 1,1 g de derivado 6-metilénico do estádio C; Segue-se o desenvol_ vimento da reacção mediante espectrometria de UV. ApÕs 50 minutos de agitação ã temperatura do refluxo, verifica-se um deslocamento do \ max a 286 nm. Filtra-se então sobre Clareei e leva-se, de pois, o filtrado até a secura e submete-se o resíduo a uma croma tografia com tolueno sobre 35 vezes o seu peso de sílica. Obtém--se deste modo uma fraeção que fornece 0,83 g de derivado 6,17^,21--trimetilado que se purifica mediante recristalização em etanol a 95%. 0 3,20-dioxo-6,l 7o(, 21 - trimetil -19- no r-pregna-4,6-dien o funde a 1 600C.

Espectro I. V.: 1 695 cm~^ C0- em 20 1680 cm"^ C0 em 3 1628, 1 580 cm""* , delta 4,6 -30-

Espectro U.V.: X max 288,5 nm, £=24280

Massa: m/e 340 massa molar 283 (M-57) perda de C0CH2CH3

Composição centesimal: c23H32°2

Exemplο 17^-etil

Estádio

Encontrada Calculada C% 81 ,06 81 ,13 W% 9,46 9 ,47 Espectro de RMN: (S,3H) a 0,71 ppm para o C Η 3 -1S (T,3H) a 1,05 ppm para o CH3-22 (Dq) a 2,45 ppm para o C H 2 - 21 (S ,3H) a 1,13 ppm para o C H 3-17# (S , 1 H) a 5,95 ppm para o H em C η (S , 1 H) a 6,05 ppm para o H em Cg [οι]D + 18,9 (C= 0,53¾ em di oxano III -ô-metil-3,20-dioxo-l9-nor-pregna -4,6- d i e η o A: 3,2 0 - d ioxo-17tf-eti1 - 19-nor-pregna -4-eno

Dissolve-se 1 g de cálcio em 40 ml de amoníaco líquido a -60°C e sob atmosfera de gás inerte. Adiciona-se então, em fio fino, uma solução de 1 g de 3-etoxi-20-oxo-l9-nor-pregna-3,5-die no em 18 ml de tetra-hidrofurano cuidadosamente desidratado. Maji tim-se sob agitação durante 1 hora e adicionam-se, depois, 9,8 ml de iodeto de etilo. Agita-se a mistura reaccional durante uma ho ra e evapora-se depois o amoníaco sob vazio em banho-maria de água tépida. Obtém-se uma pasta esbranquiçada que se dilui em 100 ml de metanol e adiciona-se, depois, uma solução 3N de acido clorídrico até pH ácido arrefecendo sempre com um banho de aceto na/gelo.

ApÕs 60 minutos de agitação, extrai-se o composto com t£ lueno, separa-se a fase toluénica e lava-se com água. Após evaporação, obtém-se 0,81 g ou seja um rendimento de 95,5%, de derj_ vado 17oC-eti 1 ado bruto contendo 41,6 % de 17tf-etilo puro deternd nado por HPLC.

Purifica-se o composto mediante cromatografia, sobre 50 vezes o seu peso de sílica utilizando como dissolvente ciclo-h£ xano a 10% de éter. Evapora-se a fracção correspondente ao derj vado U^-etilado ate ã secura e recristaliza-se o resíduo seco em ciclo-hexano.

Espectro I.V.: 1705 cm"^ CO em 20 1620 cm”^, delta 4 1670 cm~^ CO em 3 -32- v i!

Espectro U . V .: \ max 240 nm, f=17520

Espectro de RMN: (S, 3H) a 0,70 ppm (T, 3H) a 0,75 ppm (S, 3H) a 2,05 ppm (S, 1H) a 5,80 ppm de CΗ3-18 CH do etilo-17cx' 3 o C H 3 - 21 o H em

Estádio B; 3-etoxi -1 7o(-eti 1 - 20-oxo-l 9-nor-pregna-3,5-dieno

Procede-se à eter-enol ização de acordo com o processo des^ crito no estádio A do exemplo 1, partindo-se de 9,6 g de derivado 17^-etilado do estádio A em 29 ml de etanol , com 9,6 ml de or toformato de etilo e 0,048 g de ácido p-tolueno-sulfÕnico e depois 1 ml de trietilamina.

Obtem-se deste modo 7,1 g, ou seja um rendimento de 68%, de eter enõlico puro.

Espectro I.V.: banda a 1700 cm~^ (carbonilo em 20) bandas a 1650 e 1620 ligações duplas em 3 e 5

Espectro de U. V.: \ max 243 nm, £=18520

Espectro de RMN: (Q, 2H) a 3,7 ppm (CH2 do etoxi) (S, 3H) a 2,3 ppm (CH3 em 21) (S, 1H) a 5,2 ppm (H em Cg) (S, 1H) a 5,8 ppm (H em ) -33- .%

Estádio C: 3-etoxi-6-formi 1-1 7<*-eti 1-20-oxo-l 9-nor-pregna-3,5- -dieno

Procede-se à formilação de acordo com o processo descrito no estádio D do exemplo 1:

Reagente de formilação: 0,5 ml P0C1 ^ em 4,5 ml de dj_ meti 1formami da . Solução de hidrólise: 2 g de acetato de potássio em 40 ml de água.

Partindo-se de 1 g de 3-etoxi-1 7o(-eti 1 -20-oxo-l 9-nor-preg na-3,5-dieno, obtém-se 1,18 g do derivado 6-formilado bruto que , mediante cromatografia com diclorometano sobre silicato de magnésio, fornece 0,7 g, ou seja um rendimento de 65%, de 3-etoxi-6--formil-17tf-etil-20-oxo-l9-nor-pregna-3,5-dieno puro. \ max = 323 nm e 220 nm

Estádio D: 3,20-di οχο-6-meti 1 eno-1 70(-eti l-lS-nor-pregna-4-eno

Prepara-se o derivado 6-rneti1énico a partir do derivado 6-formilado do estádio C, de acordo com o processo descrito no exemplo I, estádio E, partindo-se de 0,5 g de 3-etoxi-6-formil--17<tf-etil-20-oxo-19-nor-pregna-3,5-dieno em 65 ml de etanol e 0,419 g de boro-hidreto de sódio e hidrolisa-se depois e desidrata-se com 8 ml de ácido sulfurico 2N e 55 ml de água. Obtém--se deste modo 4,4 g do derivado 6-metilénico bruto, ou seja um -34-/ rendimento de 76%. Este produto contém pequenas quantidades do derivado 6-hidroxi-metilado intermediário.

Espectro I.V.: 3400 cm"1 fraco, corresponde a H-0 3080 cm"1 muito fraco, corresponde ao CH2 do 6-metileno 1695 cm"1 CO em 20 1660 cm”1 CO em 3

Espectro U. V.: \ max 258 nm

Espectro RMN: (S, 3H) a 0,7 ppm CHg-18 (T, 3H) a 0,75 ppm CH3 do etilo-Uo^ (S, 3H) a 2,1 ppm CH3-21

Aparecimento de 3H etilénicos a: 4,95 ppm 5,17 ppm 6,10 ppm (Q) muito fraco a 3,74 ppm correspondente ao CH^ do eto xi do composto hidroximeti1ado, prova, tendo em conta a fraca banda I.V. a 3400 cm"1, a presença de uma certa quantidade de hidroximeti1-esteroide. -35

Estádio E: 3,20-dioxo-6-meti 1 -1 /tf-etil-19-nor-pregna-4,6-dieno (Composto de formula I)

Leva-se a refluxo uma suspensão de 5,5 g de carvão pala^ diado em 820 ml de etanol durante 60 minutos. Adicionam-se, em seguida, 4,1 g de 3,20-di οχο-6-rneti 1 eno-1 7o<-eti 1-19-nor-pregna-4-eno e segue-se o desenvolvimento da isomerização mediante es-pectrofotometria de U.V. Decorridos 8 minutos, o máximo cai a 288 nm. Interrompe-se então a reacção, filtra-se a suspensão sobre Clareei e leva-se o filtrado ate à secura. Obtem-se deste modo 3,65 g de composto 6-metilado bruto.

Purifica-se mediante cromatografia sobre 30 vezes o seu peso de sTlica e cristaliza-se em solução metanõlica. 0 composto puro funde a 162°C + 0° (0 = 126¾ em di£ xano) .

Espectro I.V.: 1 695 cm""* C0 em 20 1660 cm~^ C0 em 3 1622, 1579 cm ^ , delta-4,6

Espectro

Massa: m/e 340 massa 297 (M-43) perda de COMe 268 (M-72) perda de COMe e do etilo -36- P.F.

: 162°C

Composição centesimal: CZ3 H32 °2

% encontrada % calculada c 81 ,34 H 9,41 0 9,24 81,13 9,47 9,40

Espectro de RMN: (S, 3H) a 0,70 ppm CHg-18 (T, 3H) a 0,75 ppm do etil-17^ (dd, 3H) a 1,83 ppm CH3 em Cg (S, 3H) a 2,10 ppm CH3-21 (S, 1H) a 5,95 ppm H em Cj (S, 1H) a 6,05 ppm em

Exemplo IV: 3,20-dioxo-6,21-dimeti1 -17tf-eti1-19-nor-pregna-4,6-- d i e η o

Estádio A: 3-metoxi-l 7p6-aceti 1 -17j£-acetoxi - estra-1 ,3,5(10)--1 r i e η o

Adicionam-se 1250 ml de resina permutadora catiónica do tipo poliestireno sulfõnico a 4 litros de água. Agita-se a su_s pensão durante 12 horas, filtra-se e suspende-se a resina em 3,5 litros de água. -37- "/Γ

Adicionam-se, então, 50 g de acetato mercúrico e 1 ml de acido acético e agita-se durante 60 minutos. Filtra-se e la_ va-se abunaantemente a resina com água. Retiram-se 100 ml da resina mercurica e suspendem-se em uma solução de 100 g de acetato de Mestranol, 50 ml de dioxano e 1500 ml de etanol. ApÕs 20 minutos de agitação, adicionam-se 20 ml de agua e leva-se a refluxo durante 15 horas. Filtra-se, então, a mistura reaccio-nal a quente e lava-se com etanol. Concentra-se o filtrado ate ã secura e recristaliza-se o resíduo com etanol. Obtem-se deste modo 83 g, ou seja um rendimento de 79%, de 3-metoxi-1 7p^-ac£ ti 1-1 7^-acetoxi-estra-1,3,5(10)-trieno puro.

Espectro I. V .: desaparecimento das bandas a 3265 cm“^ e 2100cm-^ (C = C - H)

- aparecimento de banda a 1709 cm-1 (CO em 17oO

Espectro de RMN: desaparecimento do (S, 1H) a 2,65 ppm correspori te ao H do C = C-H em 17<* . aparecimento do (S, 3H) a 2,05 ppm correspondente ao CH3 do C0CH3 em 17cx. -38,-

Estádio B: 3-metoxi-17ú,''-etil-20-oxo-19-nor-pregna-l,3,5(10)--tri eno

Prepara-se uma solução de 3,75 g de litio em 800 ml de amoníaco líquido sob atmosfera de ãrgon e a -60°C. Adiciona-se, em seguida, uma solução de 50 g de 3-metoxi-1 7o(-aceti 1-1 7^-ace-toxi-estra-1,3,5(10)-trieno em 750 ml de tetra-hidrofurano. ApÕs 3 horas de agitação, adicionam-se, no decurso de 20 minutos, 270 ml de iodeto de etilo e agita-se durante 2 horas.

Evapora-se então o amoníaco com um banho de agua quente sob vazio. Neutraliza-se o meio reaccional mediante adição de ácido clorídrico diluído e esgota-se depois a fase aquosa com cloreto de metileno. Apos separação e evaporação da solução orgâ-ca, obtêm-se 40 g do composto bruto (rendimento 87% da teoria). Retoma-se este ultimo a refluxo com uma mistura de 400 ml de me tanol e 80 ml de cloreto de metileno.

Após concentração parcial da mistura reaccional e evapc) ração, obtém-se 34 g de 3-metoxi-1 7oí-eti 1 -20-oxo-l9-nor-pregna--133,5(10)-trieno puro, ou seja um rendimento de 74%.

Espectro I.V.: - desaparecimento da banda a 1 738 cm""' a 1 263 cm”"' e a 1240 cm~^ (acetoxi) I ,·®

L

Espectro RMN: (S, 3H) a 0,70 ppm ΟΗ^-Ιδ (T, 3H) a 0,80 ppm CH3 do etil-17tf (S, 3H) a 2,10 ppm CH3-21 (S, 3H) a 3,70 ppm CH^ do metoxi

Estádio C: 3-metoxi-1 7o(-eti1-20-oxo-21-metil-19-nor-pregna--1,3,5(10)-trieno

Sob atmosfera de azoto e a 0°C, prepara-se uma-solução de 1 ml de diisopropi1amina e 6,5 ml de tetra-hidrofurano anidro e adiciona-se, depois, gota a gota, 4 ml de uma solução de metil-litio a 5% em éter. ApÕs 5 minutos de agitação, adiciona-se, gota a gota, uma solução de 1 g de 3-metoxi-1 70(-eti 1-20--oxo-19-nor-pregna-l,3,5(10)-trieno em 22 ml de tetra-hidrofura no anidro. Deixa-se voltar ã temperatura da solução a temperatura ambiente e mantém-se a agitação durante 80 minutos. Deixa--se, em seguida, arrefecer até 0°C. Adicionam-se, então, sob agitação enérgica 2 ml de iodeto de metilo de uma sÕ vez e coji tinua-se a agitação durante 2 horas à temperatura ambiente. Forma-se um precipitado do sal esbranquiçado que se separa mediante filtração.

Leva-se o filtrado até ã secura e esgota-se com tolueno. Lava-se a solução toluénica com agua, seca-se e evapora-se até ã secura. Obtém-se deste modo 1 g do derivado 17tf-eti1-21-me-tilado bruto, ou seja um rendimento de 96%, que se purifica mediante recristalização em 20 ml de metanol para se obter 0,8 g, .. . Αο Π%, de 3-metoxi-1 7í^-eti 1-20-οχο-21-me ou seja um rendimento de i‘,0> c ^ _ til-19-nor-pregna 1 ,3,5(l0)"trieno*

Anali se: c 2 4 H 3 4° 2 C H 0% Calculada 81 j 36 9,37 9,03 Encontrada 81 ,46 9,66 8,87 Espectro RMN : (S , 3H) a 0,65 ppm CH2 em 17 (T,3H) a 0,75 ppm CH2 do etilo em (T, 3H) a 1,10 ppm CH3 em 22 (Dq, 2H) a 2,42 ppm Cl·^ em 21 (S, 3H) a 3,78 ppm CHo do metoxi

Estádio D: 3, 20-di oxo-Ί 70^-eti 1 - 21 -meti 1 -19-nor-pregna-4-eno. A -50°C e sob atmosfera de ãrgon, adiciona-se uma solução de 172 g de 3-metoxi-17<tf-eti 1-20-oxo-21-meti 1-19-nor-pregna--1,3,5(1 0)-trieno em 1 750 ml de tetra-hidrofurano anidro a 3000 ml de amoníaco. Adiciona-se, em seguida, com intervalos de 30 minutos, sob agitação 3 vezes 90 ml de etanol e 17,2 g de iTtio . Após 60 minutos de agitação, elimina-se 0 amoníaco com um banho de água quente sob vazio.

Adicionam-se, então, 13 litros de água e agita-se a mis^ tura reaccional durante 2 horas. Separa-se 0 composto insolúvel

mediante filtração e lava-se o filtrado ate a neutralidade. Dj_ lui-se com 3000 ml de metanol, adiciona-se uma solução 4N de acido clorídrico ate pH2 e mantém-se sob agitação durante 2 ho^ ras. Mediante adição de água, precipita-se o esterÓide e sepa_ ra-se mediante filtração. Obtem-se deste modo 145 g de compo^ to bruto cujo espectro I.V. mostra a existência de bandas OH , CO conjugado e C=C conjugado, que se retoma com 1960 ml de ace tona e se reoxida com 114 ml de reagente de Oones.

Após 20 minutos de agitação, adicionam-se 400 ml de me tanol e 4.000 ml de água. Extrai-se o esteroide com cloreto de metileno e purifica-se mediante cromatografia em coluna de sílica. Obtem-se deste modo 84 g de 3,20-dioxo-l7<2^-eti 1 -21 -me^ til-19-nor-pregna-4-eno, ou seja um rendimento de 54¾. A cri s^ talização em éter isopropTlico fornece o composto puro.

Espectro I. V . : 1705 cm”^ CO em 20 1680 cm~^ CO em 3 1620 cm‘^ delta- -4

Massa: m/e 343 massa molar 285 perda de COC2Hg

Espectro de RMN: desaparecimento do pico (S,3H) a 3,7 ppm (CH3 do metoxi) e dos picos a 7,2 ppm (núcleo aromático) -42- ί

Estadio Ε: 3-etoxi-1 7(^-eti l-21-meti1-20-oxo-19-nor-pregna-3,5- -di eno

Procede-se ã enol-eterificação de 5 g de 3,21-dioxo-1 7<p^--eti1-21-meti 1-19-nor-pregna-4-eno em 10 ml de etanol com 5 ml de ortoformato de etilo e extracção com benzeno a 1% de trie-tí1ami na. A cromatografia sobre alumina básica com o benzeno co^ mo dissolvente fornece 4,8 g de éter enolico, ou seja um rendj_ mento de 89%.

As constantes analíticas são as seguintes:

Espectro I.V.: desaparecimento de 1680 cm-\ CO em 3 aparecimento de 1 640 cm"'', delta-5

Massa: m/e 370 massa molar 342 perda C2H^ 285 perda e C0C2H5

Espectro RMN: (T, 3H) a 1,3 ppm CHg do etoxi (maciço , 2H) a 3,7 ppm CH2 do etoxi (S, 1H) a 5,7 ppm H em Cg

(S, 1H) a 5,8 ppm H em C 4’

Estádio F: 3-etoxi-6-formil-1 /b^-eti 1 - 21 -meti l-20-oxo-19-nor- -pregna-3,5-dieno

Procede-se ã formilação de 12,5 g de 3-etoxi-17o4-eti 1 --21-meti1-20-oxo-pregna-3,5-dieno em 87,5 ml de dimeti1formanH da com um reagente de formilação formado por 5,25 ml de P0C13 em 37,5 ml de dimeti1formamida. A hidrólise do sal de imÕnio efec-tua-se mediante adição de 3 fracções sucessivas de uma solução de 37,5 ml de acetato de potássio em água. 0 produto da reacção, corado de amarelo, cristaliza. Separa-se este último mediante filtração e seca-se para se obter 12,75 g de composto bruto, ou seja 95¾ da teoria.

Espectro I. V.: banda a 1699 cm~^ (CO em 20) banda a 1651 cm“^ e a 1610 cm“^ (C=C conjugado)

Massa: m/e 398 341 (perda de C0C2H5)

Espectro de RMN: (S, 1H) a 6,20 ppm etilenico aparecimento de (S, 1H) a 10,25 ppm (CHO)

Estádio G: 3,20-dioxo-6-meti1 eno-17Q<í-etil-21 -metil -19-nor- -pregna-4-eno.

Sob banho de gelo, adicionam-se 40 mg de· boro-hidreto de sodio a uma solução de 0,5 g de 3-etoxi-6-formil-17Q£-etil--20-oxo-21-metil-19-nor-pregna-3,5-dieno dissolvido em 3,8 ml de metanol e 2,2 ml de dieti1formamida. Deixa-se, em seguida, voltar a temperatura ambiente e ao fim de 40 minutos de agitação, o espectro U.V. indica a queda do Max a 25 nm.

Adiciona-se então a 0°C 1 ml de uma solução 2N de aci- do sulfúrico e 0,8 ml de dieti1formamida. ApÓs 30 minutos de agitação, neutraliza-se mediante adição de 2,5 ml de uma solução aquosa de carbonato de sodio. Cristaliza-se o derivado 6--metilénico, filtra-se e lava-se abundantemente com água. Apre^ senta

Estádio H: 3,20-dioxo-6,21-dimeti1-17¾-etil-19-nor-pregna-4,6- - d i e η o (composto de formula I)

Submetem-se a uma isomerização 5 g do derivado 6-meti- lênico bruto em 245 .ml de etanol com 5 g de carvão paladiado a ref1uxo. -45- àf·....,

Apos 25 minutos de agitação, o espectro U.V. indica a presença do Max a 288 nm. Filtra-se então sobre Clareei e co_n centra-se o filtrado ate à secura. Submete-se o resíduo a uma cromatografia sobre 60 vezes o seu peso de sílica com dicloro-metano como dissolvente. Cristaliza-se o composto em metanol para se obter o 3,20-dioxo-6,21-dimetil-17^-etil-19-nor-pregna--4,6-dieno puro cujas constantes analíticas são: P. F.: 180° : +4° 4 (cal,26¾ dioxano) C 2 4 H 3 4° 2

Analise centesimal: 0% 9,67 9,03

Calculada 81,31

Encontrada 81,84 9,75 8,59 -46 Espectro_I. V.: 1700 cm"^ , C0 em 20 _ 1 1660 cm , CO em 3 1630, 1580 delta-4,6

Espectro RMN: (S, 3H) a 0,70 ppm CH3~18 (T, 3H) a 0,75 ppm CH3 do eti 1—17 00 (T, 3H) a 1,05 ppm CH^-21 (Dd) a 2,40 ppm CH2-21 (dd, 3H) a 1,85 ppm CH3 em Cg (S, 1H) a 5,95 ppm H em C-

(S, 1H) a 6,05 ppm H em C

ESTUDO FARMACOLÕGICO DOS COMPOSTOS PREPARADOS PELO PROCESSO DE ACORDO COM A PRESENTE INVENÇÃO

Determinação da afinidade relativa: Fez-se um esforço para determinar, para 0 receptor da progesterona, 0 poder competidor de cada esteroide em relação substância de referência (progesterona fria). 11-0 ο 1 4 A progesterona marcada com carbono C e incubada com ci tosol de útero, sõ ou na presença de concentrações crescentes de esteroide frio (compreendendo a progesterona não marcada), seguji do uma relação R compreendida entre 1 e 1000 entre as duas substâncias. 0 quadro seguinte regista as percentagens de progesteno na marcada ainda ligada ao receptor na presença do competidor fri o.

Esteroi des NQ de medidas n R = 0 R = 1 R= 1 0 R = 1 00 R = 1 0 0 0 Progesterona 10 100¾ 74 34 8 0 Composto A 5 - 80 28 17 12 Composto B õ - 60 34 25 11 Composto C 5 - 77 44 17 7 Composto D 5 - 106 58 27 17 Acetato de Moí.- -metoxi Progesterona 4 - 62 35 20 11 Acetato de Nomegestrol 4 - 73 25 5 0 Nomegestrol 4 — 96 52 23 0 composto D e o 17^-acetoxi-6,21-dimeti1-3-oxo-l9-nor--pregna-4,6-dieno. -48- "ΙΙΒΙΗ. »(*,“*«< J? f „ % 0 composto A é o 3 , 20-dioxo-6,1 7íX-dimetil -1 9-nor-pregna--4,6 - d ieno. 0 composto B e o 3, 20-diοχο-6-meti 1 -17o(-etil-1 9-nor-preg na-4,6-d ieno. 0 composto C é o 3,20-dioxo-6,17ctf-20-triiTietil-19-nor-prec[ na-4,6-dieno.

Os dados deste quadro permitem deduzir as afinidades relji t i v a s . A afinidade relativa (AR) e a relação entre as concentra ções a 50% da inibição (C15Q) de um dado esteroide e da hormona fria especTfica tomada para referência (aqui a progesterona): AR = CI50

Esta afinidade relativa é assim expressa em percentagem, considerando que para a hormona (ou o esteroide ) de referência, a AR e igual a 100%.

As C15g constituem uma avaliação do Kl (constante de inj_ bição) dos esteroides ensaiados para a ligação do esteroide de referênci a. * :·3 -49 ¢-

EsterÕi des Cl 50 (nM) AR% Composto B 12,5 160 Acetato de i i 1 7o(-Metoxi 1 progesterona 14,0 142 Acetato de Nomegestrol (DCI) 15,0 133 Composto A 18,5 108 Progesterona 20,0 100 Composto C 33,0 60 Nomegestrol 600,0 3 A determinação do AR dã assim a seguinte sequência:

Composto B>acetato de nomegestrol> composto A>Proges-terona >Composto ONomegestrol

Discussão:

Os seis compostos estudados pertencem a uma serie de de rivados do acetato de nomegestrol. -5

São de considerar dois tipos de variação: - alquilo em 17c< - alongamento da cadeia em 21 por um metilo.

Os grupos 17o(-metilo (composto A), 17ck-etilo (composto B) e 17^-acetoxi como no acetato de nomegestrol dão moléculas cuja afinidade para o receptor progestativo é pelo menos igual ã da progesterona e equivalente ã da Medroxiprogesterona.

Mas as diferenças de afinidade observadas neste estádio do estudo, parecem indicar uma hierarquia entre estes tres compostos. Pelo contrario, o nomegestrol possui uma mesma cadeia lateral em 17 β que os três compostos ensaiados (composto A, composto B e Nomegestrol acetato) mas apresentando um hidroxilo em 17d- mostra uma afinidade diminuída, 40 a 60 vezes mais fria ca que os três compostos citados antes.

Considerando AR=1 para o acetato de nomegestrol como re ferência, pode-se estabelecer o quadro seguinte, passando do acetato de nomegestrol a 0,17 para o composto B e de 0,81 para o composto A a 0,45 para o composto C.

.%

EsterÕide AR para o receptor da proges-terona expressa em relação ao acetato de Nomegestrol ψ-n-r-r- 17 p 1 70c Composto B 1 ,20 COMe Et Acetato de Nomegestrol 1,00 COMe OAc Composto A 0,81 COMe Me Composto C 0,45 COEt Me Nomegestrol !__ 0,02 COMe 0H

Para um mesmo substituinte em 17^, o alongamento da cadeia em 21 leva a uma diminuição da afinidade para o receptor progestati vo.

Contudo, convêm notar que uma diminuição da afinidade pa ra o receptor "in vitro" não conjectura uma diminuição da acti-vidade biológica "in vivo" ou não. -52

Com efeito, se a modificação estrutural leva a uma menor afinidade, pode ser, contudo, acompanhada de uma melhor biodispo^ nibilidade (degradação mais difTcil, ciclo entero-hepãtico acentuado, sequestração reduzida pelas proteínas plasmãticas, etc), e o efeito resultante pode, por conseguinte, traduzir-se por um aumento da actividade pseudogestagenica. CONCLUSÃO:

Partindo do facto de que a menor afinidade relativa da se rie dos derivados alquilados preparados pelo processo de acordo com a presente invenção é da ordem de 60¾ e que se substitui o grupo hidroxi na posição 17β por uma cadeia alquTlica inferior, verificou-se que a mono- ou a bis-alqui1 ação dos 6-meti1-19-nor--pregna-dienos leva ã obtenção de progestativos muito activos.

Claims (2)

1. REIVINDICAÇÕES 1.- Processo para a preparação de 6-metil-19-nor-pregna-4,6--dienos 17¢4-alquilados de fórmula geral

   na qual R" e R' iguais ou diferentes representam, cada um, um átomo de hidrogénio ou um radical alquilo comportan do 1 a 3, átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada, e R-^ representa um radical alquilo inferior comportando 1 a 6 átomos de carbono, de cadeia linear ou ramificada, caracterizado pelo facto de se submeter um derivado 3-oxo-19-nor-- Δ 4 -pregneno de fórmula geral

   na qual R', R" e R^ têm os significados definidos antes, a uma enol-eterificação em meio ácido para se obter o éter enólico de fórmula geral CH — R" (V)

   na qual R', R" e R^ têm os significados definidos antes e R£ representa um radical alquilo inferior, que se faz reagir com um agente de formilação do tipo Vilsmeier--Hack para se obter um derivado 6-formilado de fórmula geral A -55- .H**

   R' R" (VI) na qual R', R , R^ e R2 tem os significados definidos antes, que se reduz com um hidreto misto de metal alcalino para se obter um derivado hidroxi-metilado de fórmula geral

   0 *1 R' R" (VII) na qual R*, R", Rj e R2 têm os significados definidos antes, que se trata com um ácido inorgânico ou orgânico para se obter o derivado 3-oxo-6-metilénico de fórmula geral f « 1 -56- f

   na qual R1 , R" e R^ têm os significados definidos antes, que se trata, por sua vez, com um catalisador de isomerização para se obter o derivado 6-metilado correspondente de fórmula geral R'

   R" (I) na qual R1, R" e R^ têm os significados definidos antes.

   2.- Processo para a preparaçao de compostos intermediários de fórmula geral • * · -57- \ \ ·"»

   na qual R'., R" e R^ têm os significados definidos antes com excepção do caso com que R^ representa um grupo metilo ou etilo e R' e R" representam, cada um, um átomo de hidrogénio, caracterizado pelo facto de se submeter um composto de fórmula geral

   (III) na qual R, R^ e R2 têm os significados definidos antes, a uma redução de acordo com o método de Birch-Nielsen seguido de uma hidrólise em meio ácido forte e depois uma oxidação por meio do reagente de Jones para se obter o 3-ceto-19-nor--pregna-4-eno de fórmula geral IV. 0 * ψ 3.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos intermediários de fórmula geral

   na qual representa um radical alquilo inferior, R' e R", iguais ou diferentes, representam, cada um, um átomo de hidrogénio ou um radical alquilo comportando 1 a 3 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada e R-^ representa um radical alquilo inferior comportando 1 a 6 átomos de carbono de cadeia linear ou ramificada, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais de fórmula geral IV correspondentemente substituídos que se submetem a uma enol-eterificação em meio ácido.

   4.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos intermediários de fórmula geral -59

   na qual R* , R", e R^ têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais de formula geral V correspondentemente substituídos que se submetem a uma formilação do tipo Vilsmeier-Hack.

   5.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos intermediários de fórmula geral

   na qual R', R", R^ e R^ têm os significados antes, (VII) definidos caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais de -60 f fórmula geral VI correspondentemente substituídos, que se submetem a uma redução com um hidreto misto de metal alcalino.

   6.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos intermediários de fórmula geral 0
2. ®2 (VIII) na qual R', R" e R^ têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais de fõr mula geral VII correspondentemente substituídos que se submetem a um tratamento com um ácido inorgânico ou orgânico, Lisboa, 11 de Maio de 1990