PT749471E - PROCESSO PARA A REDUCAO DO TEOR DE áCIDO NUCLEICO DE UM FUNGO IMPERFEITO - Google Patents

Description

DESCRICÃO "Processo para a redução do teor de ácido nucleíco de um fungo imperfeito" A presente invenção refere-se à produção de alimentos. É conhecida a produção de alimentos adequados para o consumo humano através da cultura de fungos. Os fungos adequados são microfungos da classe dos Fungos Imperfeitos. Um processo deste tipo é descrito nas patentes britânicas N°s. 1 210 356 e 1 346 062 e são descritas estirpes de Fusarium para utilização na produção de alimentos na patente britânica 1 346 061 e na patente dos EUA 4 347.

De modo a tornar estes produtos mais adequados para o consumo humano considera-se desejável reduzir o seu teor de ácido nucleico. A patente britanica n° 1 440 642 revela um processo em que isto se consegue submetendo fungos imperfeitos a uma temperatura de 55 a 72°C durante um período de pelo menos 60 segundos a um pH de 4,7 a 7,0. Esta temperatura foi aparentemente seleccionada devido à ribonuclease sobreviver a estas condições enquanto que a protease é destruída; assim, o teor proteico do fungo não seria degradado pela protease, mas o ácido ribonucleico seria degradado pela ribonulcease. 0 processo é revelado como produzindo um teor final de ARN de 1 a 4% em organismos que contêm originalmente 7 a 12%. Em certos casos são descritos teores de ARN do produto inferiores a 1%. Nas experiências descritas os fungos são geralmente separados dos seus meios de crescimento e aquecidos na presença de água ou soluções aquosas de NaCI ou NH4CI, sob várias condições. No exemplo J, contudo, os fungos foram aquecidos na presença dos seus meios de crescimento a uma temperatura de 64°C, filtrados, lavados, novamentos colocados em pasta aquosa e secos por pulverização. E apresentado no Exemplo A da patente britânica n°. 1 440 642 o efeito da temperatura e duração do tratamento térmico. Em nenhum caso de tratamento acima de 66°C o teor final de ARN foi inferior ao nível de 2% em peso, número que não foi corrigido para a perda de biomassa. 0 número baseado no produto final após perda de biomassa teria sido superior. 86 833 ΕΡ Ο 749 471/ΡΤ Ο processo anterior sofre contudo considerável perda de material proteináceo.

Desenvolvemos agora um processo no qual qualquer perda de actividade de ribonuclease não impede uma redução satisfatória do teor de ácido nucleico.

Verificámos agora que é possível realizar a remoção eficaz de ARN com menor perda de proteínas operando a temperaturas mais elevadas numa gama desde acima de 68°C até 80°C, preferivelmente 69 a 75°C e mais preferivelmente 70 a 74°C, por exemplo desde acima de 72, até 74°C, desde que o fungo seja levado a estas temperaturas na presença do seu meio de crescimento. Não se sabe porque ocorre este fenómeno, mas pode ser que o fungo, no seu estado de crescimento, seja mais susceptível a perda de ARN por aquecimento e que mantendo-o em contacto com o seu meio de crescimento até à temperatura de tratamento o mantenhamos no seu estado susceptível. A invenção compreende um processo no qual o teor de ácido nucleico de Fungos Imperfeitos é reduzido para menos de 2% em peso, que compreende o seu crescimento na presença de um meio de crescimento, o aumento da sua temperatura na presença do meio de crescimento acima de 68°C e preferivelmente no máximo a 80°C, por exemplo de 69 a 75°C, preferivelmente 70 a 74°C e mais preferivelmente desde acima de 72°C até 74°C, e a separação de pelo menos parte do meio de crescimento do fungo. O ácido nucleico passa do fungo para o meio de crescimento e o fungo tratado tem um teor de ácido nucleico reduzido. O processo permite uma elevada retenção dos componentes do fungo com valor nutritivo, em especial proteínas. Crê-se que a proteína é retida mais facilmente porque durante a remoção do ácido nucleico esta está num estado substancialmente coagulado. A temperaturas superiores a 80°C a coagulação de material proteináceo pode ocorrer suficientemente rápido para impedir a perda adequada de ácidos nucleicos e a temperaturas inferiores a 68°C é geralmente insuficiente para impedir uma perda substancial de proteína. 3 86 833 ΕΡ Ο 749 471/ΡΤ Ο teor de ácido nucleico do fungo tratado é preferivelmente no máximo 3% ou mais preferivelmente no máximo 2% em peso, por exemplo cerca de 1% em peso. O fungo é adequadamente uma estirpe edível de Fusarium, por exemplo Fusarium graminearium, Fusarium oxysporum ou Fusarium solani. O Fusarium graminearium Schwabe IMI 145 425 depositado no Commomwealth Agricultural Bureau, International Mycological Institute (IMI), Ferry Lane, Kew, Surrey, TW9 3AF em 26 de Fevereiro de 1970 e 3 de Fevereiro de 1 979, foi aprovado para utilização em produtos alimentares pelas autoridades reguladoras no RU e pode ser tratado através da presente invenção. O processo pode ser realizado sob uma vasta gama de condições. O pH e a constituição do meio de crescimento deverão ser tais que o crescimento do fungo possa ocorrer nesse meio a temperaturas normais mas, se desejado, pode ser modificado no processo; por exemplo, se ocorrer aquecimento através de injecção de vapor, o vapor pode conter um gás ácido ou alcalino, por exemplo S02 ou NH3. É contudo desejável um pH durante a remoção do ácido nucleico de 4 a 8 preferivelmente 4,5 a 7 e mais preferivelmente de 5 a 6,5. Prefere-se o aquecimento rápido desde a temperatura de crescimento (que é normalmente inferior a cerca de 30°C, por exemplo 28°C) até à temperatura de remoção do ácido nucleico. De modo adequado, este aquecimento deve ser rápido, preferivelmente demorando menos de cinco segundos, mais preferivelmente menos de um segundo. 0 produto pode ser lavado para remover ácidos nucleicos residuais que aderem ao meio de crescimento mas isto não é essencial se a maior parte do meio de crescimento for removida por exemplo por drenagem ou filtração.

EXEMPLO

Cresceu-se Fusarium graminearum IMI 145 425 num fermentador contínuo a 28°C na presença de um meio de crescimento com a composição seguinte, a uma taxa de diluição de 0,16 a 0,23/h, mantendo um peso de células secas de 14,5 g/kg no fermentador, e com arejamento contínuo com ar estéril contendo amónia gasosa.

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Operação em estado estacionário Limites operativos Ferro <0,05 ppm <0,05-0,10 ppm Cálcio 45 ppm 35-55 ppm Fósforo 300 ppm 200-400 ppm Magnésio 60 ppm 40-80 ppm Potássio 600 ppm 400-800 ppm Manganês 0,6 ppm 0,2-1,0 ppm Zinco 0,5 ppm 0,3-0,7 ppm Cobre 0,12 ppm 0,08-0,16 ppm Glucose - 1-5 g/kg Ο ρΗ foi controlado a 6 através da adição contínua de amónia gasosa. O fósforo foi fornecido na forma de ácido fosfórico, o cálcio na forma de acetato e outros sais como os sulfatos. A cultura a 28°C é passada para um reactor contínuo em tanque agitado (CSTR - "Contínuos Stirred Tank Reactor") com a temperatura mantida à temperatura apresentada nas tabelas abaixo por injecção directa de vapor. A cultura é então mantida a esta temperatura no tanque durante um tempo de residência médio de 30 a 45 minutos. A descarga do tanque foi alimentada a um filtro de correias, do qual se removeu um produto molhado contendo mais de 20% de sólidos totais, como avaliado por secagem durante 24 horas a 105°C. Tem um teor de ácido nucleico inferior a 2% numa base de peso seco como observado das tabelas de resultados que se seguem. Não foi realizada qualquer lavagem. O processo era contínuo e retiraram-se amostras diariamente. Realizaram-se duas operações de produção e os resultados estão apresentados nas tabelas que se seguem. Os dados no final de cada período de 24 horas, estão registados na vertical e sequencialmente nas tabelas.

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Operação 1 Temp. ácido nucleico Temp. ácido nucleico Temp. ácido nucleico [°C] final [%]* [°C] final [%]* [°C] final [%] + 72,6 1,5 72,5 1,0 74,0 0,9 72,6 1,3 73,3 1,1 71,9 1,0 73,1 1,1 72,3 1,1 72,7 1,0 71,4 1,0 72,5 1,2 72,0 1,0 71,7 1,7* 72,6 1,2 72,9 0,9 73,0 1,3 72,3 1,2 73,7 0,9 73,2 1,2 73,4 1,1 72,0 1,1 73,0 1,0 72,3 1,2 73,0 1,0 73,0 1,1 73,0 1,0 73,1 1,0 74,1 1,3 74,0 1,0 72,3 1,2 Os dados marcados com * são considerados erróneos - erro experimental

Operação 2 Temp. Ácido nucleico Temp. ácido nucleico Temp. ácido nucleico [°C] final [%] + [°C] final [%] + [°C] final [%] + 72,5 1,3 64,0 0,6 74,0 1,2 73,0 1,0 64,3 0,7 72,8 1,3 71,7 1,3 70,2 1,1 73,3 1,4 72,6 1,4 73,3 1,1 73,1 1,1 72,3 1,4 72,1 1,3 73,4 1,1 73,4 1,4 73,7 1,5 73,5 1,0 72,7 1,3 73,5 1,4 70,7 0,9 72,4 1,2 72,7 1,3 73,1 1,2 63,8 0,7 72,9 0,8 72,6 0,9 + em peso com base na matéria seca total O exemplo adiante, de ensaio em fábrica, mostra a influência da remoção de ácido nucleico a 73,25°C e 64°C, na perda de biomassa. Observa-se uma clara queda após aumento da temperatura de redução. Os dados estão registados de hora a hora. Crê-se que o primeiro resultado após a redução da temperatura para 64°C foi influenciado pelo arrastamento de material processado a 73y4°C. 6 86 833 ΕΡ Ο 749 471/ΡΤ

Temp. de remoção do ácido nucleico [°C1 Descarga do fermentador, peso de células secas Peso de células secas após remoção do ácido nucleico** Perda de biomassa pela remoção do ácido nucleico % Ácido nucleico final % 64 *15,25 9,5 37,7 0,8 64 15 9,7 35,3 0,8 73% *15,1 10,2 32,6 0,9 73¼ 15,2 10,1 33,7 1.2 73¼ *15,35 10,7 30,5 1,1 73¼ 15,5 9,5 38,8# 1.2 64 *15,45 10,4 32,7 1,0 64 15,4 9,7 37,0 0,8

Nota: * Peso de células secas calculado como a média de cada lado. O peso de células secas foi medido de duas em duas horas. # Crê-se elevada devido a erro analítico/de amostragem ou a erro de registo. ** Corrigido para a diluição pelo vapor. A 64°C, são necessários para o aquecimento 60,2 g de vapor bar por kg de cultura. A 73,25°C (a temperatura média durante o ensaio) são necessários 75,33 g de vapor a 4 bar por kg de cultura. Para permitir isto os pesos secos da cultura reduzida são multiplicados por 1,0602 e 1,0754, respectivamente, antes do cálculo das perdas de biomassa.

Lisboa, ΐ9. H0\í.

Por MARLOW FOODS LIMITED - O AGENTE OFICIAL -

Eng.° ANTÓNIO JOÃO DA CUNHA FERREIRA Ag. Of. Fr. Ind. Rua das Flores, 74-4·.° 1200-195 LISBOA

Claims (10)

1. 86 833 ΕΡ Ο 749 471 /ΡΤ 1/2 REIVINDICAÇÕES 1. Processo no qual o teor de ácido nucleico de Fungos Imperfeitos é reduzido para menos de 2% em peso, que compreende o seu crescimento na presença de um meio de crescimento, o aumento da sua temperatura no seu estado de crescimento na presença do meio de crescimento para acima de 68°C e a separação de pelo menos parte do meio de crescimento, do fungo.
2. 2. Processo de acordo com a reivindicação 1 em que a temperatura é aumentada para uma temperatura na gama acima de 72 e no máximo 74°C.
3. 3. Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2 em que o teor de ácido nucleico do fungo após tratamento é no máximo de 2% em peso.
4. 4. Processo de acordo com a reivindicação 1, 2 ou 3 em que o fungo é uma estirpe edível de Fusarium.
5. 5. Processo de acordo com a reivindicação 4 em que o fungo é Fusarium graminearum.
6. 6. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores em que o pH é 4,5 a 7.
7. 7. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores em que a temperatura é aumentada desde a temperatura de crescimento até à temperatura de remoção do ácido nucleico, em menos de cinco segundos.
8. 8. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores em que o fungo e o meio de crescimento são aquecidos por injecção de vapor.
9. 9. Processo de acordo com a reivindicação 7 em que está presente no vapor um gás modificador do pH.
10. 10. Processo de acordo com a reivindicação 8 em que o fungo e o meio de crescimento substancialmente à temperatura de crescimento são 86 833 ΕΡ Ο 749 471/ΡΤ 2/2 passados para um vaso contendo líquido acima de 68°C e preferivelmente acima de 72°C. Lisboa, $ :;Qy. Por MARLOW FOODS LIMITED - O AGENTE OFICIAL -

    E-ng^ÃRTÓNíO JOÃO DA CUNHA FERREIRA Ag. Of. Pr. Ind. Rua das Flores, 74- -4·.° 1200-íSõ LISBOA