PT711289E - Compostos piperazina utilizados em terapia - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO '♦COMPOSTOS PIPERAZINA UTILIZADOS EM TERAPIA”

Este invento diz respeito de modo geral a compostos diarilmetilo piperazina tendo utilidade em terapia médica especialmente como espécies de ligação a receptores, por exemplo como conjugado em pares agonista/antagonista para receptor de verificação/ensaio e função neuro-transmissora. Os compostos do invento incluem compostos benzidrilo piperazina úteis como compostos receptores aos opióides mu e/ou delta mediadores de analgesia, assim como compostos que têm utilidade no tratamento da dor, para o combate da dependência de droga, dependência de álcool, dose excessiva de droga, doença mental, incontinência urinária, tosse, edema pulmonar, diarreia, depressão e perturbações respiratória, gastrointestinal e cognitiva. O invento também diz respeito a formulações farmacêuticas de tais compostos, utilização de tais compostos para a preparação de medicamentos para tratamento e certas perturbações e processos pelos quais tais compostos podem ser preparados.

No estudo da bioquímica opióide, foram identificados uma variedade de compostos opióides endógenos e compostos opióides não-endógenos. Neste esforço, pesquisa significativa tem sido focada na compreensão do mecanismo da acção da droga opióide, particularmente como ela se relaciona com receptores opiáceos de tecidos celulares e diferenciados.

Drogas opióides são tipicamente classificadas pela sua selectividade de ligação com respeito a receptores de tecido celular e diferenciado aos quais uma espécie de droga específica liga como um ligante. Estes receptores -2- U/η incluem receptores mu (μ), delta (δ), sigma (σ), e kapa (k).

Os narcóticos opiáceos bem conhecidos, tais como morfina e seus análogos, são selectivos para o receptor mu aos opiáceos. Os receptores mu regulam analgesia, depressão respiratória, e inibição do transito gastrointestinal. Os receptores kapa regulam analgesia e sedação. Os receptores sigma regulam várias actividades biológicas. A existência do receptor delta dos opióides é uma descoberta relativamente recente seguida do isolamento e caracterização dos péptidos endógenos de encefalina as quais são ligandos do receptor delta. A pesquisa na década passada produziu informação significativa acerca do receptor delta, mas ainda não se tem uma ideia clara do seu funcionamento. Os receptores delta regulam a analgesia, mas parece que não inibem o transito intestinal da maneira característica dos receptores mu.

Agentes opióide são frequentemente caracterizados quer como agonistas ou antagonistas. Agonistas e antagonistas são agentes que reconhecem e se ligam aos receptores, afectando (quer iniciando ou bloqueando) sequências bioquímicas/fisiológicas, um processo conhecido como transducção. Os agonistas inibem ou suprimem a produção de neuro transmissores em tecidos contendo receptores, por exemplo, inibindo respostas a dores, ou afectando outro fenómeno relacionado com a produção. Os antagonistas também se ligam a receptores, mas não inibem produções de neuro transmissores. Deste modo, os antagonistas ligam-se aos sítios do receptor e bloqueiam a inibição das espécies agonistas que são selectivas para o mesmo receptor.

Acerca dos ligandos de receptores específicos, a distinção entre agonistas e antagonistas do receptor delta anteriormente era feita pela sua -3- (/Mj actividade no ensaio de vaso deferente no rato estimulado electricamente, o qual tem sido tipicamente considerado o tecido diagnóstico apropriado para o receptor delta. Por contraste, os agonistas dos receptores mu são geralmente / caracterizados pela sua actividade no ensaio do intestino de porquinho da índia estimulado electricamente. Só um número relativamente pequeno de agentes selectivos de receptores delta essencialmente puros são conhecidos. Com excepção dos antagonistas ou agonistas de receptores opióides delta revelados na Patente U.S. 4.816.586 e Pedido de Patente Internacional WO93/15062, todos os compostos conhecidos opióides selectivos dos receptores delta são péptidos, incluindo encefalinas endógenas e outras endorfinas, assim como análogos péptidos endógenos. Os análogos péptidos exógenos previamente sintetizados têm várias desvantagens associadas no que respeita à sua estabilidade, suas vias de distribuição adequadas potenciais como agentes de administração de drogas e sua distribuição em tecidos in vivo. Vários efeitos psicológicos dos ligandos opióides com base em peptídeos conhecidos foram estudados, incluindo: analgesia, depressão respiratória, efeitos gastro intestinais; funções do processo mental, emocional e cognitivo; e mediação/modulação de outros processos fisiológicos.

Patente U.S. 4.518.711 revela análogos de encefalinas cíclicas conformacionalmente constrangidos. Estes compostos incluem quer os agonistas quer os antagonistas para o receptor delta.

Adicionalmente às referências descritas anteriormente relacionadas com compostos opióides, a técnica relevante para os compostos do presente invento incluem os compostos poliarilo piperazina descritos nas várias -4-

referências identificadas em seguida. S. Goenechea, et al, em “Investigation of the Biotransformation of meclozine in the Human Body’V· Clin. Chem. Clin. Biochem., 1988, 26(2), 105-15(6), 105-15, descreve a administração oral de um composto poliarilo piperazina num estudo de metabolização da meclozina em sujeitos humanos.

Em “Plasma Leveis, Biotransformation and Excretion of Oxatomide in Rats, Dogs, and Man”, Meuldermans, W. et al., Xenobiotica, 1984, 15(6), 445-62, é revelado um estudo metabólico dos níveis do plasma, biotransformação, e excreção da oxatomida. T. Iwamoto, et al, em “Effects of KB-2796, A New Calcium Anatagonist, and other Diphenylpiperazines on [ HJnitrendipina Binding”, Jpn. J. Pharmacol., 1988, 48(2), 241-7, descrevem o efeito de uma poliarilo piperazina de fórmula específica, como um antagonista de cálcio. K. Natsuka, et al., em “Synthesis and Structure-Activity Relationships of 1-Substituted 4-(l,2-Difenylethyl)piperazina Derivatives Having Narcotic Agonist and Antagonist Activity”, J. Med. Chem., 1987, 30(10), 1779-1787, revela racematos e enantiómeros de derivados 1-substituído 4-[2-(3-hidroxifenil)-1 -feniletiljpiperazina. O Pedido de Patente Europeia No. 458.160 descreve derivados difenilmetano substituído os quais são referidos por serem úteis como analgésicos e agentes anti-inflamatórios , incluindo compostos em que o grupo de ligação metileno (ligando as duas porções fenilo) pode ter como um substituinte no carbono do metileno um grupo piperidinilo e piperazinilo. -5- O Pedido de Patente Sul Africana No. 8604522 revela compostos amino substituídos com arilalquileno e arilalquilo heterociclicos N-substituídos, incluindo derivados piperidina, os quais são descritos como agentes cardiovasculares, antihistamínicos, e anti-secretórios úteis. O Pedido da Patente Europeia No. 133.323 revela certos compostos difenilmetilo piperazina úteis como antihistaminas não-sedativas.

Existe uma contínua necessidade na técnica de melhorar compostos opióides, particularmente compostos que são livres de efeitos secundários adversos dos convencionas opiáceos tais como morfina e petidina. O presente invento fornece compostos diarilmetilo piperazina de fórmula (I):

em que:

Q R é fenilo substituído por um ou mais substituintes seleccionados a partir de halogéneo e trifluorometilo, e R9 é hidrogénio, hidrocarbilo CrC6 saturado ou hidrocarbilo C3-C6 não saturado; um de R3 e R5 é metilo e o outro e R4 são ambos hidrogénio ou um é hidrogénio e -6-

(/MJ o outro é metilo; e R6 é hidrogénio, hidrocarbilo Ci-C6 saturado, hidrocarbilo C3-C6 ou metoxialquilo C2-C6; óu um seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável, ou um seu derivado funcional íisiologicamente.

Como aqui utilizado, em referência ao presente invento, o termo “alquilo” pretende ser largamente construído como incluindo grupos alquilo de cadeia linear assim como de cadeia ramificada.

Como aqui utilizado, em referência ao presente invento, o termo “hidrocarbilo” pretende incluir um grupo que contém só átomos de carbono e átomos de hidrogénio os quais podem conter ligações duplas ou triplas e as quais podem ser de natureza cíclica ou aromática.

Por “derivado funcional fisiologicamente” significa sal farmaceuticamente aceitável, éster, éter ou sal de um éster do composto de fórmula (I) ou qualquer outro composto que, depois da administração ao receptor, é capaz de fornecer (directa ou indirectamente) o referido composto de fórmula (I) ou um metabólito activo ou seu resíduo. Éteres CrC6 alquilo fenólicos são uma sub-classe de derivados fisiologicamente funcionais dos compostos de fórmula (I).

Em formas enanteoméricas, os compostos do invento incluem enantiómeros individuais dos compostos de fórmula (I) em forma de espécies únicas substancialmente livre do enantiómero correspondente, assim como uma mistura (em misturas de pares enantioméricos e/ou em misturas de espécies múltiplas de enantiómeros). -7- Uuj

Uma subclasse de compostos dentro de um âmbito da fórmula (I) são os compostos em que o grupo hidrocarbilo R6 e R9 é alquilo CpCô ou cicloalquilo C3-C6.

Uma subclasse de compostos dentro do âmbito da fórmula (I) são os compostos em que R3 e R5 são ambos metilo e R4 é hidrogénio.

Uma subclasse preferida de compostos dentro do âmbito do presente invento compreende compostos de fórmula:

00 em que R6 e R8 e R9 são como aqui definidos.

Uma subclasse adicional de compostos dentro do âmbito da fórmula (I) são os compostos em que R6 é hidrocarbilo C3-C6 não saturado e de preferência é alilo.

De preferência, halogéneo é cloro ou flúor.

Uma subclasse de compostos dentro do âmbito da fórmula (I) são os compostos em que

-8- R9 é hidrogénio, hidrocarbilo CrC6 saturado ou alilo. De preferência, hidrocarbilo Cj-Cô saturado é alquilo Q-Có, tal como metilo, etilo ou propilo (incluindo n-, iso- e ciclo-propilo) ou cicloalquilo C3-C6.

Num aspecto específico e preferido de compostos diarilmetilo

o Q piperazina da fórmula anterior, NR R pode, por exemplo, ser seleccionado a partir do grupo que consiste em:

F

Fr

Compostos ilustrativos do invento dentro do âmbito da anterior fórmula geral (I) inclui os compostos benzamida identificados em seguida. (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(4- fluorofenil)-N-metilbenzamida (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(4- clorofenil)-N-metilbenzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-metil-N- -9-

(2-trifluorometil)fenil)benzamida

3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-metil-N (2,4,6-triclorofenil)benzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3- fluorofenil)-N-metilbenzamida (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(2- fluorofenil)-N-metilbenzamida (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil- N-(4-fluorofenil)-benzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3- fluorofenil)-N-propilbenzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil-N- (3-fluorofenil)benzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(2- fluorofenil)-N-propilbenzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil-N- (2-fluorofenil)benzamida (+)_3_((aR).a.((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-metoxibenzil)-N-(3- fluorofenil)-N-metilbenzamida -10- IΜη (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-metoxibenzil)-N-etil- N-(4-fluorofenil)benzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(N-(3-fluorofenil)-N-(metilcarbamoil)benzil)fenil monofosfato e seus éteres, ésteres ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou seus derivados fisiologicamente funcionais.

Compostos particularmente preferidos dos compostos do invento ilustrativos listados anteriormente incluem (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(4- fluorofenil)-N-metilbenzamida (+)-3-((cxR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(2- fluorofenil)-N-metilbenzamida (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3- fluorofenil)-N-metilbenzamida (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil- N-(4-fluorofenil)benzamida e seus éteres, ésteres ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou seus derivados fisiologicamente funcionais. O quadro 1 seguinte mostra a estrutura química dos quatro compostos do presente invento particularmente preferidos identificados anteriormente, indicados aqui como compostos “A”, “B”, “C” e “D” - 11 -

respectivamente. - 12-

Uuj

Quadro 1

"D" "C" .13. ίΛη

Compostos da fórmula geral (I) anterior exibindo selectividade de ligação para receptor(es). Dependendo da estrutura e estereo-especificidade dos compostos particulares de fórmula (I), tais compostos podem mostrar capacidade de ligação a receptor(es) seleccionados a partir do grupo que consiste em receptores delta, receptores mu, receptores kapa, receptores sigma, e combinações de tais receptores. Vários compostos dentro da fórmula geral (I) exibem actividade agonista ao receptor delta incluindo a mediação de analgesia. Outros compostos de tal fórmula geral mostram actividade agonista de receptor delta, como aqui descrito mais completamente. Ainda outros compostos dentro da fórmula geral exibem actividade de receptor mu, e mais particularmente, em algumas instâncias, actividade à mistura do receptor mu /receptor delta.

Exemplos de ésteres farmaceuticamente aceitáveis do invento incluem ésteres de ácido carboxílico de grupos hidroxi em compostos de fórmula (I) na qual a porção não-carbonilo da porção ácido carboxílico do agrupamento éster é seleccionada a partir de cadeia alquilo linear ou ramificada (por exemplo, n-propilo, t-butilo, n-butilo), alcoxialquilo (por exemplo metoximetilo), arilalquilo (por exemplo benzilo), ariloxialquilo (por exemplo fenoximetilo), e arilo (por exemplo fenil); alquilo- ou arilsulfonilo (por exemplo metanossulfonil); ésteres amino ácido (por exemplo L-valilo ou L-isoleucilo): ésteres ácido dicarboxílico (por exemplo hemissuccinato); ésteres carbonato (por exemplo etoxicarbonil); ésteres carbamato (por exemplo dimetilaminocarbonilo, (2-amino-etilo)aminocarbonilo); e ésteres inorgânicos (por exemplo mono-, di- ou trifosfato).

Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) e seus derivados funcionais fisiologicamente incluem sais derivados - 14- Ι/ΐΆη de uma base apropriada, tais como um metal alcalino (por exemplo, sódio, potássio), um metal alcalino terroso (por exemplo, cálcio, magnésio), amónio e NX4+ (em que X é alquilo Cr4). Sais farmaceuticamente aceitáveis de um grupo amino incluem sais de ácidos carboxílico orgânico, ácido láctico, tartárico, málico, lactobiónico, fumárico, e succínico; ácidos organo sulfónico tais como ácidos metanossulfónicos, etanossulfónicos, isetiónicos, benzenossulfónicos e p-toluenossulfónicos, e ácidos inorgânicos tais como ácidos clorídrico, bromídrico, sulfurico, fosfórico e sulfamico. Sais farmaceuticamente aceitáveis de um composto tendo um grupo hidroxi consiste no anião do referido composto em combinação com um catião adequado tal como Na+, NH4+, ou NX4+ (em que X é por exemplo um grupo alquilo Cw).

Como aqui utilizado, em referência ao presente invento, o termo “arilo” pretende ser largamente interpretado como referência a grupos carbocíclico assim como grupos heterocíclicos aromáticos.

Para utilização terapêutica, sais dos compostos de fórmula (I) serão farmaceuticamente aceitáveis, isto é, serão sais derivados de um ácido ou base farmaceuticamente aceitáveis. No entanto, sais de ácidos ou bases que não são farmaceuticamente aceitáveis também podem encontrar utilidade, por exemplo, na preparação ou purificação de um composto farmaceuticamente aceitável. Todos os sais, quer sejam ou não derivados de um ácido ou base farmaceuticamente aceitável, estão dentro do âmbito do presente invento.

Os compostos do presente invento têm utilidade como compostos de combinação para receptor exógeno, isto é, compostos úteis para a ligação com um receptor, tal como receptor delta, receptor mu, receptor sigma, receptor kapa, ou dois ou mais de tais receptores. O composto de combinação pode ser um conjugado num par agonista/antagonista que pode ser empregue para ensaio - 15 - U·*] transduccional de função neurotransmissora que pertence a sistemas de tecido diferenciado ou celular. Em adição à análise do receptor, a ligação diferencial, e aplicações específicas para avaliação e monitorização celular, histológica, e corpórea e fins de determinações, os compostos do presente invento mostram características de bioactividade específica que são úteis como agentes de tratamento para várias condições fisiológicas e patológicas.

Os compostos do presente invento incluem espécies agonistas úteis para o tratamento da dor, diarreia, depressão, incontinência urinária, doença mental, tosse, edema pulmonar, perturbações gastrointestinais, danos na coluna vertebral, e dependência de droga.

Os compostos do presente invento também incluem espécies antagonistas que como mencionado são úteis como conjugados agonistas para aplicações de análise de neurotrasmissor assim como espécies antagonistas com utilidade para o tratamento de abuso de álcool, e dose excessiva de droga de opiáceo ou outras espécies agonistas.

Adicionalmente, ao grau que a degeneração ou disfunção de receptores opióides que está presente ou implicada num estado de doença envolvendo tecido ou locais celulares discretos, versões rotuladas isotopicamente de compostos opióides do presente invento encontram utilidade em diagnóstico e aplicações de imagens, por exemplo, técnicas de diagnóstico envolvendo o varrimento do cérebro com tomografía de emissão de positrões (PET).

Como mencionado anteriormente, sítios de receptores opióides são locais em células que reconhecem e ligam drogas opiáceas e opióies, as quais por sua vez podem afectar (iniciam/bloqueiam) sequências bioquímicas/fisiológicas (trasnducção). -16-

No caso de agentes opióides não-péptidos contemplados pelo presente invento, o padrão estrutura/actividade para os vários compostos dentro da fórmula geral (I) é altamente diverso, e diferenças adequadas tais como mudanças na estereoquímica podem resultar em efeitos trasnduccionais diferentes. Deste modo, a fórmula (I) compreende espécies agonistas assim como espécies antagonistas.

No caso de agonistas de receptores delta, a actividade é geralmente distinguida e medida pela actividade no ensaio do canal deferente do rato estimulado electricamente.

Adicionalmente, determinações empíricas do presente invento fornecem fortes evidências da existência de um subtipo de receptor delta no cérebro que é diferente do receptor delta no canal deferente do rato.

Em consequência da existência de tais subtipos de receptor delta, outros ensaios de ligação ao receptor ou técnicas de rastreio, isto é testes de rastreio de analgesia, podem ser empregues como um preditor adicional de actividade agonista ou antagonista para compostos específicos do presente invento.

No caso de agonistas de receptores mu, a actividade é geralmente distinguida e medida pela actividade no ensaio do intestino do porquinho da índia estimulado electricamente.

Os compostos A, B, C e D são espécies de ligandos para receptores opióides altamente selectivas. Todas são eficazes a regular a analgesia. Em geral, o espectro das utilidades analgésicas dos compostos diarilmetilo piperazina por - 17-

Uuj simples testes de rastreio de ligação a receptores. A este respeito, e meramente para ilustração, compostos diarilmetilo piperazina do invento que são receptores de agonistas predominantemente mu podem ser utilizados por exemplo para regular analgesia cirúrgica. Compostos diarilmetilo piperazina do invento que são predominantemente agonistas de receptores delta podem ser utilizados por exemplo para regular analgesia epidural. Compostos diarilmetilo piperazina do invento que são agonistas opióides mu/delta misturados, por exemplo, Compostos A, B, C, e D podem ser utilizados por exemplo para regular analgesia cirúrgica e/ou post-operatória. O carácter receptor mu/delta misturado de vários compostos dentro do âmbito do presente invento vincula uma vantagem substancial sobre vários compostos receptores mu conhecidos correntemente empregues como analgésicos. A larga maioria dos analgésicos de alta potência correntemente utilizados, incluindo morfina, fentanilo, meperidina, sufentanilo, e codeína, são compostos de ligação de receptor mu. Como está bem estabelecido, estes compostos, enquanto altamente eficazes para regular a analgesia, têm efeitos secundários, que incluem desorientação, atenuação da acuidade mental, rigidez muscular, e depressão respiratória, e evitam os efeitos secundários da retirada de drogas incluindo náusea, vómitos, tremuras, convulsões, e transpirações. Tais efeitos secundários estão tipicamente ausentes ou pelo menos muito mais reduzidos com a utilização de espécies de ligação de receptores delta de mediação de analgesia. Portanto, a utilização de espécies receptoras de mistura mu/delta do presente invento pode atenuar ou mesmo eliminar os efeitos secundários normalmente presentes resultante da utilização de compostos de ligação de receptor mu. - 18- Ι/ίΛη <~2A^U'

Os compostos do invento quando utilizados em aplicações farmacêuticas ou de diagnóstico são preparados desejavelmente em formas substancialmente enantiomérica, com uma enantiopureza de pelo menos 90% de excesso enantiomérico (EE), de preferência pelo menos 95% EE, mais preferencialmente de pelo menos 98% EE, e mais preferencialmente de pelo menos 99% EE. Valores de excesso enantiomérico fornecem uma medida quantitativa do excesso da quantidade de percentagem de um isómero maior sobre a quantidade de percentagem de um isómero menor o qual está também presente, e pode ser prontamente determinado por métodos adequados bem conhecidos e estabelecidos na técnica, assim como por exemplo cromatografia líquida de alta pressão quiral (HPLC), cromatografia de gás quiral (GC), ressonância magnética nuclear (RMN) utilizando reagentes com desvio quiral, etc.

Os compostos A, B, C, e D são agentes analgésicos enantioméricamente puros exibindo agonismo em ambos os receptores opióides mu e delta. Em sujeitos roedores em teste, por exemplo, estes compostos produzem analgesia comparável a morfina analgésica mu, mas produzem uma muito menor extensão de rigidez muscular e depressão respiratória. Adicionalmente, testes em roedores mostram estes compostos como sendo livres de actividade proconvulsionante, tal como pode ser associado a agonistas puros delta estruturalmente relacionados.

Apesar de se poder assumir na primeira impressão que todos os compostos agonistas delta do presente invento teriam perfis semelhantes in vivo, com potências paralelas a actividade no canal deferente do rato, isto não é invariavelmente o caso.

Os compostos diarilmetilo piperazina do invento incluem -19-^ compostos que têm potência significativa no ensaio de ligação do receptor (cérebro do rato), compostos que são predominantemente activos num ou noutro dos subtipos de receptores delta, e compostos que têm actividade de receptor mu ou actividade de receptor mu/receptor delta mista. O ensaio de ligação e resultados de teste de analgesia mostram que os compostos do presente invento regulam variadamente a analgesia com respeito a uma larga variedade de estímulos e perturbações fisiológicas. Isto por sua vez evidencia um alto nível de complexidade em funções neurotransmissoras e respostas relacionadas com estímulos com vários receptores opióides, incluindo receptores mu, receptores delta e subtipos de receptores delta. Vários dos compostos do presente invento dentro da fórmula (I), ou seus precursores químicos (os quais também em muitas circunstâncias constituem novos compostos e deste modo são contemplados dentro do âmbito do presente invento), evidenciam actividades biológicas em adição à actividade opióide, por exemplo, actividade biológica incluindo afinidade de ligação ao receptor sigma, e actividade de resistência a multidroga.

Como é evidente a partir da descrição que se segue, os compostos do presente invento têm larga utilidade no tratamento de uma larga variedade de condições e perturbações fisiológicas. O invento consequentemente contempla a utilização de tais compostos na preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de tais condições e perturbações fisiológicas. Adicionalmente a estas aplicações de tratamento já mencionadas, outras utilidades para os compostos do presente invento incluem o tratamento de perturbações brônquicas tais como asma, enfisema, e apneia.

Adicionalmente, opióides endógenos tais como encefalinas e -20-

endorfinas, e seus sistemas neurológicos, foram identificados como tendo ligação com várias perturbações CNS, tais como comportamento compulsivo, depressão, psicose, etc., e espécies agonistas e antagonistas dentro da fórmula (I) do presente invento tem utilidade no combate de tais perturbações. Várias espécies agonistas assim como espécies antagonistas dos compostos da fórmula (I) também encontram utilidade no tratamento de abuso de droga (opióide/narcótico)/dependência, e deste modo têm utilidade para substituição de metadona ou outros agentes opiáceos convencionais em programas de reabilitação de droga, para o grau que os agentes de tratamento da droga convencional têm efeitos secundários ou outras desvantagens que contra-indicam ou limitam a sua utilização.

Relativamente ao tratamento de dependência de droga com compostos efectivos dentro do largo âmbito do presente invento, é notado que a metadona é um opiáceo receptor mu com acções semelhantes à morfina, isto é, metadona é susceptível de abuso e dependência. A metadona é utilizada como um agente de “terapia de manutenção” para dependentes de opiáceos, de maneira a que tais indivíduos possam permanecer funcionais enquanto se satisfazem as suas dependências de uma maneira segura e não-criminosa. A este respeito, os compostos do invento podem ter utilidade em vez de, ou como um suplemento a, tratamentos correntemente utilizados para dependência de droga, tais como aqueles envolvidos em naltrexona, metadona, clonidina, etc..

Certos compostos dentro do âmbito do presente invento, como revelado anteriormente, têm utilidade na afectação da analgesia local, tal como analgesia da coluna, e compostos do invento podem também encontrar utilidade em aplicações de supressão de apetite, e etc. -21 -

Compostos do presente invento incluem vários compostos que são agonistas opióides delta no subtipo receptor delta do canal deferente do rato, assim como compostos que são antagonistas em tais subtipos receptores delta. Os compostos do presente invento incluem também compostos que são agonistas ou antagonistas para o receptor delta no cérebro, os quais aparecem, na base de determinações empíricas, por serem subtipo receptor delta diferente do receptor delta no canal deferente do rato. Um substancial número de compostos da fórmula (I) do invento mencionada anteriormente tem actividade quer agonista quer antagonista em ambos os subtipos receptor delta. Vários destes compostos tem alta actividade no receptor mu, ou como compostos de ligação de receptor mu puro ou como compostos de ligação receptor mu/ receptor delta misturados, e ainda outros compostos dentro do vasto âmbito do presente invento têm afinidade significativa para o receptor sigma.

Nos testes in viiro para actividade agonista /antagonista, tais como testes de afinidade de ligação de receptores, e testes de inibição de musculo contraído estimulado electricamente, compostos do presente invento mostram potência acima de uma gama de concentrações nanomolares até micromolares, dependendo do composto específico empregue.

Compostos do presente invento têm actividade farmacêutica, incluindo, inter alia, actividade analgésica, e são úteis no tratamento de animais, por exemplo, mamíferos tais como humanos, para doenças nas quais a analgesia é desejada.

Uma resposta analgésica num sujeito animal que precise de tal tratamento é obtida por um método que compreende a administração a um sujeito animal uma quantidade de um composto de fórmula (I) que induza analgesia. -22-

Adicionalmente, vários compostos do presente invento tendo a referida utilidade terapêutica podem ser úteis quando utilizados nos tratamentos de doenças incluindo: dependência de droga e álcool/dose excessiva: perturbações mental, emocional, e cognitiva; tosse; edema de pulmão; e perturbações gastrointestinais. Correspondentemente, o presente invento contempla um método de tratar um sujeito animal tendo tais condições e que precise de tal tratamento, compreendendo a administração a um tal animal uma quantidade efectiva de um composto do presente invento o qual é terapeuticamente efectivo para a referida condição.

Sujeitos a serem tratados da maneira referida anteriormente inclui ambos os sujeitos animais humano e não-humano (por exemplo pássaro, cão, gato, vaca, cavalo) e são preferivelmente sujeitos mamíferos, e mais preferencialmente sujeitos humanos.

Dependendo da doença específica a ser tratada, a sujeitos animais podem ser administrados compostos de fórmula (I) em qualquer dosagem efectiva terapeuticamente adequada, assim como podem prontamente ser determinada pelos peritos da técnica normais.

Em geral, enquanto a dosagem efectiva dos compostos do invento para utilização terapêutica possa ser largamente variada na larga prática do invento, dependendo da específica aplicação, condição, ou estados de doença envolvidos, como prontamente determinado dentro da técnica, doses terapêuticas adequadas de compostos de fórmula (I), para cada uma das composições pertencentes aqui descritas , e para se conseguir o benefício terapêutico de cada uma das doenças aqui descritas, estarão numa gama de 1 micrograma fag) até 100 miligramas (mg) por kilograma de peso corporal do receptor por dia, de preferência numa gama de 5pg até 75 mg por Kilograma de peso corporal por -23- i/Uu>ι dia, e mais preferencialmente numa gama de 10 pg até 50 mg por kilograma de peso corporal por dia. A dose desejada é e preferência apresentada como duas, três, quatro, cinco, seis, ou mais sub-doses administradas em intervalos apropriados ao longo do dia. Estas sub-doses podem ser administradas em formas de dosagem unitária, por exemplo, contendo desde 10pg até lOOOmg, de preferência desde 50 pg até 500 mg, mais preferencialmente desde 50 pg até 250 mg, e mais preferencialmente desde 50 pg até 10 mg de ingrediente activo por forma de dosagem unitária. Altemativamente, se a doença do receptor assim requerer, as doses podem ser administradas como uma infusão contínua. O modo de administração e formas de dosagem claro que afectarão as quantidades terapêuticas dos compostos que são desejados e eficazes para a dada aplicação de tratamento.

Por exemplo, dosagens administradas oralmente são tipicamente pelo menos duas vezes, por exemplo, 2-10 vezes, os níveis de dosagem utilizados em métodos de administração parenteral, para o mesmo ingrediente activo. Em administração oral para indução de analgesia, os níveis de dosagem para compostos de ligação de receptor mu do invento podem ser na ordem de 5-200 mg/Kg peso corporal/dia. Os níveis de dosagem de administração intratecal são geralmente na ordem de cerca de 10% dos níveis característicos dos níveis de dosagem de administração parenteral. Em formas de dosagem por comprimidos, os níveis de dosagem do agente activo adequado para indução de analgesia estão na ordem de 10-100 mg por comprimido.

Os compostos de fórmula (I) podem ser administrados per se assim como na forma de ésteres, éteres, sais e outros seus derivados funcionais fisiologicamente, farmaceuticamente aceitáveis. -24-

O presente invento também contempla formulações farmacêuticas, para ambas as utilizações médicas veterinária e humana, as quais compreendem como o agente activo um ou mais compostos do invento, e um veículo farmacêutico. O invento também fornece a utilização de um composto do invento na preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia das condições e perturbações aqui descritas.

Em tais formulações farmacêuticas e de medicamentos, o agente activo de preferência é utilizado em conjunto com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis e opcionalmente quaisquer outros ingredientes activos. Os veículos devem ser farmaceuticamente aceitáveis no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da formulação e não inadequadamente prejudicial para com o seu receptor. O agente activo é fornecido numa quantidade efectiva para se conseguir o desejado efeito farmacológico, como descrito anteriormente, e numa quantidade apropriada para se conseguir o desejada dosagem diária.

As formulações incluem aquelas que são adequadas para administração parenteral assim como não-parenteral, e modalidades de administração específica inclui administração oral, rectal, tópica, nasal, oftálmica, subcutânea, intramuscular, intravenosa, transdérmica, intratecal, intra-articular, intra-arterial, sub-aracnóide, brônquica, linfática, e intra-uterina. São preferidas formulações adequadas para administração parenteral.

Quando o agente activo é utilizado numa formulação que compreende uma solução líquida, a formulação pode ser vantajosamente administrada parenteralmente. Quando o agente activo é empregue numa formulação em suspensão líquida ou como um pó numa formulação de veículo biocompatível, a formulação pode ser vantajosamente administrada oralmente, rectalmente, oú através dos brônquios. -25- ί/ίΛη

Quando ο agente activo é utilizado directamente na forma de um sólido em pó, o agente activo pode vantajosamente ser administrado oralmente. Altemativamente, pode ser administrado através dos brônquios, via nebulização do pó num veículo gasoso, para formar uma dispersão gasosa do pó que é inspirado pelo doente a partir de um circuito de respiração compreendendo um dispositivo nubulizador adequado.

Em algumas aplicações, pode ser vantajoso utilizar o agente activo numa forma “vectorizada”, tal como por encapsulação do agente activo num liposoma ou outro meio de encapsulação, ou por fixação do agente activo, por exemplo, por ligação covalente, quelação, ou coordenação associativa, numa biomolécula adequada, tal como aquelas seleccionadas a partir de proteínas, lipoproteínas, glicoproteínas, e polissacarídeos.

As formulações que compreendem o agente activo do presente invento podem convenientemente ser apresentadas em formas de dosagem unitária e podem ser preparadas por qualquer dos métodos bem conhecidos na técnica de farmácia. Tais métodos incluem geralmente a fase de conduzir os compostos activos a uma associação com um veículo que constitui um ou mais ingredientes. Tipicamente, as formulações são preparadas trazendo uniformemente e intimamente os compostos activos para a associação com um veículo líquido, um veículo finamente dividido, ou ambos, e depois, se necessário, enformar o produto em formas de dosagem da formulação desejada.

Formulações do presente invento adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas tais como cápsulas, pastilhas, comprimidos ou losangos, contendo cada uma, uma pre-determinada quantidade do ingrediente activo como um pó ou grânulos; ou uma suspensão -26- Um num licor aquoso ou um líquido não-aquoso, tal como um xarope, um elixir, uma emulsão, ou uma inalação.

Um comprimido pode ser feito por compressão ou moldação, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Patilhas comprimidas podem ser preparadas comprimindo numa máquina adequada, com o composto activo sendo numa forma de fluxo livre tal como um pó ou grânulos que é opcionalmente misturado com um ligante, desintegrante, lubrificante, diluente inerte, agente activo de superfície, ou agente de descarga. Comprimidos moldados que compreendem uma mistura do composto activo em pó com um veículo adequado pode ser feitos moldando numa máquina apropriada.

Um xarope pode ser feito adicionando o composto activo a uma solução aquosa concentrada de um açúcar, por exemplo sucrose, à qual pode ser adicionado qualquer ingrediente(s) acessório. Tal ingrediente(s) acessório pode incluir aromatizantes, conservantes adequados, agentes para retardar a cristalização do açúcar, e agentes para aumentar a solubilidade de qualquer outro ingrediente, tal como um álcool polihidróxi, por exemplo glicerol ou sorbitol.

Formulações adequadas para administração parenteral compreendem convenientemente uma preparação aquosa estéril do composto activo, o qual é isotónico com o sangue do receptor (por exemplo, solução salina fisiológica). Tais formulações podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes e liposomas e outros sistemas de micropartículas os quais são concebidos para dirigir o composto para os componentes do sangue ou um ou mais órgãos. As formulações podem ser apresentadas em doses únicas ou forma de multi-dose.

Formulações de pulverização nasal compreendem soluções aquosas -27- [Μη purificadas dos compostos activos com agentes conservantes e agentes isotónicos. Tais formulações são de preferência ajustadas a um pH e o estado isotónico compatível com as membranas da mucosa nasal.

Formulações para administração rectal podem ser apresentadas como um supositório com um veículo apropriado tal como manteiga de cacau, gorduras hidrogenadas, ou ácidos carboxílicos hidrogenados.

Formulações oftálmicas são preparadas por um método semelhante ao da pulverização nasal, excepto que o pH e os factores isotónicos são de preferência ajustados para condizer com o do olho.

Formulações tópicas compreendem o composto activo dissolvido ou suspenso em um ou mais meios, tais como óleo mineral, petróleo, alcoóis políhidroxi ou outras bases utilizadas para formulações tópicas farmacêuticas.

Formulações transdérmicas podem ser preparadas incorporando o agente activo num veículo tixotrópico ou gelatinoso tal como um meio celulósico, por exemplo, metil celulose ou hidroxil celulose, sendo a formulação resultante depois empacotada num dispositivo transdérmico adaptado para ser seguro em contacto dérmico com a pele de um utilizador.

Adicionalmente aos ingredientes mencionados anteriormente, as formulações deste invento pode ser adicionalmente incluir um ou mais ingrediente(s) acessório(s) seleccionados a partir de diluentes, tampões, aromatizantes, ligantes, desintegrantes, agentes activos de superfície, espessantes, lubrificantes, conservantes (incluindo antioxidantes), e semelhantes. O presente invento também contempla um processo para a preparação de um composto de fórmula (I), como definido anteriormente, ou um -28-

éster, éter, sal, ou outro seu derivado flsiologicamente funcional, farmaceuticamente aceitável, compreendendo o referido processo um procedimento de síntese seleccionado a partir do grupo que consiste em procedimentos de síntese (A), (B) e (C) seguintes: (A) a alquilação de uma piperazina de fórmula (IV) por um agente de alquilação de fórmula (III)

K

R* (IV) em que R3 até R6 e R8 e R9 são como definidos anteriormente, P é hidrogénio ou um grupo de protecção hidroxi e X1 é um grupo dissociável; e, quando R6 é hidrogénio, alquilando opcionalmente o composto resultante da fórmula (I) com um agente de alquilação de fórmula R6-X', em que R6 é CpCô hidrocarbilo saturado, hidrocarbilo C3-C6 não saturado ou metoxialquilo C2-C6 e X1 é um grupo dissociável ou alquilando opcionalmente o composto de fórmula (I) resultante por aminação redutora com um aldeído C1-C5 na presença de um agente de redução. (B) reacção de um composto de fórmula (V) -29-

R6 (V) em que R3 até R6 são como definidos anteriormente e Z é bromo, iodo ou trifluorometilsulfonilo como apropriado, com (a) no caso em que Z é bromo ou iodo; um alquil metal, ou metal reactivo adequado, opcionalmente transmetalação do composto metálico resultante com uma variedade de metal de transição para fornecer um composto metálico diferente, fazendo reagir o composto metálico resultante com dióxido de carbono e convertendo o ácido carboxílico resultante no cloreto, anidrido ou éster de ácido correspondente, e fazendo reagir o ácido cloreto resultante, anidrido ou éster com uma amina de fórmula HNR8R9 em que R8 e R9 são como aqui definidos ou fazendo reagir o composto metálico resultante com um composto cloreto aminocarbonilo de fórmula CICONR8R9, em que R8 e R9 são como aqui definidos; ou (b) no caso em que Z é bromo, iodo ou trifluorometilcarbonilo; um reagente de cianação, hidrolizando o nitrilo resultante com um ácido mineral alcalino ou aquoso, convertendo o ácido carboxílico resultante no cloreto, anidrido ou éster de ácido correspondente, e fazendo reagir o cloreto, anidrido ou éster de ácido resultante com uma amina de fórmula NHR R em que R e R são como aqui -30- definidos.; ou (c) no caso em que Z é bromo, iodo ou trifluorometilsulfonilo; amina em excesso da fórmula NHR8R9 em que R8 e R9 são como aqui definidos e monóxido de carbono na presença de um catalisador metal de transição para produzir um composto de fórmula (I), em que R e R são como aqui definidos; ou (C) fazer reagir um composto de fórmula (VI), com um composto fenilmetálico de fórmula (VII):

A (VII) em que R3 até R5 e R8 e R9 são como aqui definidos, P é hidrogénio ou um grupo de protecção hidroxi, M é uma variedade de metal e W é benzotriazolilo ou triclorotitanium-oxi; (Katritzky; A.R.; Yannakopoulou, K.; Lue, P.; Rasala, D.; Urogdi, L; J.Chem. Soc., Perkin Trans, 1, 1139, (1989); Seebach, D; Betscart, C.; Schiess, M. Helv. Chim. Acta, 67, 1593 (1984)) e, quando P é um grupo de protecção de hidroxi, desprotegendo o grupo hidroxi; opcionalmente convertendo o composto resultante de fórmula (I) num seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável ou um seu derivado funcional farmaceuticamente aceitável. -31 -

Processo A A reacção entre um agente de alquilação de fórmula (III) e uma piperazina de fórmula (IV) pode ser efectuada num solvente tal como tolueno ou acetonitrilo.

Agentes de alquilação da fórmula R6-X* estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por processos já publicados. Como uma alternativa à alquilação com um agente de alquilação Ró-X', o método de aminação redutora pode ser empregue na qual um aldeído Q-Cô apropriado disponível comercialmente é reduzido com um agente de redução tal como cianoborohidreto de sódio em solventes tais como álcoois ou éteres.

Processo B (a) Um composto de fórmula (I) pode ser preparado a partir de um composto de fórmula (V), em que Z é bromo ou iodo e P é um grupo de protecção de hidroxi, tal como terc-butildimetilsililo, por permuta de metal do halogéneo de reacção a baixa temperatura (por exemplo, -60°C até -78°C) com um reagente organometálico, tal como n-butillítio, ou uma forma activada de um metal, tal como lítio ou magnésio, para fornecer um composto metálico intermediário, seguido da reacção com dióxido de carbono para fornecer o ácido carboxílico num solvente anidro tal como tetrahidrofurano, sob uma atmosfera inerte (por exemplo azoto). O ácido carboxílico pode então ser convertido na carboxamida de fórmula (I) pelos métodos descritos em seguida.

Altemativamente, o composto metálico intermediário gerado a partir de um composto de fórmula (V) pode ser tratado com um cloreto carbamoilo apropriado (CICONR R ) para produzir um composto de fórmula (I). -32-

(b) Um composto de fórmula (I) pode também ser preparado a partir de um composto de fórmula (V) em que Z é bromo, iodo ou triflato (trifluorometilsulfonilo) pelo tratamento com um reagente de cianação, tal como cianeto de cuproso, num solvente adequado tal como dimetilformamida ou N-metilpirrolidinona, para fornecer o correspondente composto de fórmula (V) em que Z é nitrilo, o qual pode ser adicionalmente hidrolizado para o correspondente ácido carboxílico com ácido mineral alcalino ou aquoso. O ácido carboxílico pode então ser convertido num composto de fórmula (I) por vários meios conhecidos na técnica, tais como formação do cloreto de ácido (por exemplo com cloreto de tionilo ou cloreto de oxalilo) ou por formação de um anidrido misto (por exemplo com cloroformato de isobutilo) ou pela formação de um éster activado com reagentes convencionais de acopolação peptídica (por exemplo diciclohexilcarbodiimida ou benzotriazol-l-iloxi-tris(dimetilamino)fosfónio hexofluorofosfato), qualquer dos intermediários activados pode ser convertido na carboxamida desejada de fórmula (I) pela reacção com uma amina apropriada (HNR R ) num solvente adequado tal como diclorometano ou dimetilformamida. (c) Um composto de fórmula (I) pode também ser preparado a partir de um composto de fórmula (V), em que Z é bromo, iodo ou triflato, pelo tratamento com um catalisador de metal de transição, tal como tetraquis(trifenilfosfina)paládio, na presença de excesso de amina e monóxido de carbono num solvente tal como tetrahidrofurano ou acetonitrilo.

Processo C

Um composto de fórmula (V) pode ser preparado como um intermediário de reacção combinando um aldeído de fórmula (VIII) com uma -33 - [/ΜΊ piperazina de fórmula (IV)

v jpl

R 9 CHO

O (vim em que R3 até R6 e R8 e R9 são como aqui definidos, na presença de tetracloreto de titânio ou benzotriazolilo num solvente adequado tal como tolueno ou diclorometano, ou para um intermediário de fórmula (VI) em que W é benzotriazole, o intermediário de reacção pode ser isolado, se desejado, por cristalização ou outro meio apropriado.

Um composto de fórmula (I) pode ser obtido como uma variedades enantioméricas isoladas por resolução clássica com um ácido enantiopuro, tal como ácido mandélico, ou por formação de diastereómeros separados prontamente por um agente de derivação enanteopuro, ou por cromatografia quiral, ou por resolução enzimática de um composto de fórmula (I) ou um derivado adequado, ou pela preparação do composto de fórmula (I) a partir de precursores enantiopuros, os quais podem eles mesmos ser obtidos como enantiómeros isolados por meios semelhantes.

Compostos de fórmula (III) podem ser obtidos a partir de álcoois apropriados de fórmula (IX), em que o fenol é protegido com um grupo adequado P de protecção, por métodos tais como halogenação com cloreto de tionilo ou trifenilfosfma/tetrabrometo de carbono, ou reacção com cloreto metanossulfonilo ou cloreto toluenossulfonilo, num solvente tal como diclorometano.

Piperazinas de fórmula (IV) estão disponíveis comercialmente, ou podem ser preparadas por processos já publicados ou variações dos processos publicados em que R6 é modificado por alquilação apropriada com agentes R6-X\

Compostos de fórmula (V) podem ser preparados por alquilação de uma piperazina de fórmula (IV) com um agente de alquilação de fórmula (X), de maneira semelhante à alquilação de piperazina descrita anteriormente. Agentes de alquilação de fórmula (X) são obtidos igualmente a partir de álcoois de fórmula (XI) por métodos semelhantes aos descritos anteriormente para compostos de fórmula (III).

Álcoois de fórmula (IX) ou (XI) podem ser preparados por adição a baixa temperatura (por exemplo -60°C até -78°C) de variedadess arilmetálicas substituídas, preparadas a partir de compostos de fórmula (XII), em que Z é halogéneo reactivo (por exemplo iodo ou bromo), por métodos descritos anteriormente, para proteger benzaldeídos de fórmula (XIII). -35- -35-

Reciprocamente, compostos de fórmula (IX) ou (XI) também podem ser formados por adição semelhante das variedades fenilmetálicas protegidas (VII) mencionadas anteriormente a benzaldeídos de fórmula (VIII).

Compostos (VII), (VIII), (XII) e (XIII) e os seus derivados adequadamente protegidos podem ser preparados a partir de materiais disponíveis comercialmente por processo de literatura normalizados.

Um composto de fórmula (I) pode ser convertido num éster farmaceuticamente aceitável pela reacção com um agente de esterifícação apropriado, por exemplo um haleto ou anidrido ácido. O composto de fórmula (I), incluindo seus ésteres, pode ser convertido nos seus sais farmaceuticamente aceitáveis de maneira convencional, por exemplo, pelo tratamento com um ácido apropriado. Um éster ou sal de um composto de fórmula (I) pode ser convertido r no composto principal, por exemplo, por hidrólise. Éteres fenólicos, de um composto de fórmula (I) em que P é alquilo Cj-Cô, podem ser preparados como descrito anteriormente. -36- i/ΐΛη

Baseado na descrição anterior assim como considerações de síntese geral, será apreciado que várias sínteses são úteis para a preparação de compostos diarilmetilo piperazina do presente invento, como será evidente para os técnicos. Métodos de síntese ilustrativos para a produção de compostos dentro do âmbito do presente invento são estabelecidos em seguida como exemplo, entendendo-se que os compostos do invento são sensíveis à preparação por várias outras vias e métodos de síntese dentro da técnica, e que os métodos de síntese ilustrativos estabelecidos em seguida não devem ser portanto interpretados como limitativos com respeito ao âmbito do invento. Deverá ser adicionalmente apreciado que os novos compostos do presente invento compreendem vários novos intermediários, precursores, pro-drogas, análogos e derivados dos compostos especificamente identificados aqui com referência ao invento.

Quando os processos de síntese que são empregues para produzir compostos do invento produzem misturas racémicas como produtos de reacção, tais misturas racémicas podem ser resolvidas por meios e métodos adequados bem conhecidos e estabelecidos na técnica, assim como por exemplo pela formação de sais diastereoméricos com ácidos carboxílicos enantiopuros, por resolução cromatográfica quiral, por resolução enzimática, ou por outros métodos convencionais adequados. São estabelecidos em seguida os esquemas de síntese ilustrativos para a formação do (+)-3-((aR*)-a-((2S*,5R*)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N,N-dietilbenzamida racémico, referido em seguida como um Composto (±)-l, o qual pode ser obtido como os seus constituintes enantiómeros aplicando resolução clássica ou métodos de síntese quiral no produto final ou em intermediários apropriados. Tais métodos são adicionalmente ilustrados para a obtenção do enantiómero (+)-3-((aR)-cc-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N,N-dietilbenzamida, aqui referido como Composto -37- I, ο qual é mais especificamente aqui descrito em (Referência) Exemplo 1. O composto (±)-l não está de acordo com o invento mas os esquemas de síntese ilustrativos e metodologia de resolução da seguinte descrição pode da mesma maneira ser empregue na síntese e resolução dos compostos do invento, ou altemativamente outra síntese e/ou metodologias de resolução podem ser empregues dentro da técnica. -38-

t-8uM&SÍCl imidazole DMF (ΑΛη

OSiMeit-Eu

<ÍO 1) n-SuLj, THF, -7

η n

Br OSiMejt-S

Cl CH 3

H .CH 3

Er

OSLMe 2t- .CH 3

Eu >- c: 1

N i H

SrCH 2-CH =CH :

-39-,OjX

Br y — OStMe 2t-Bu vNyCHjcHa1'" q CH zCH =CH 2

EUNF

CH 3CN cromatografla ou f cristalização selectiva

CHj +

C^-CH=CH2

CHj-CÍ^CHj

OH

1) n-BuLi

2) CQ

1) soq, C^Cl*

2) EtjNH -40-

Composto fel-|

Com respeito ao esquema de síntese anterior, o álcool benzidrílico inicial pode ser preparado a partir de 3-(t-butildimetilsililoxi)bromobenzeno pelo seguinte esquema:

O intermediário pode ser preparado por meio de benzofenona, a qual por sua vez pode ser obtida a partir de uma adição organometálica a 4-bromobenzonitrilo:

-41 -

l/ÍMJ

Outras alternativas para intermediários envolve condensação de uma piperazina apropriadamente substituída por um composto carbonilo. A condensação com um benzaldeído pode fornecer um sal iminio que pode ser adicionado um arillítio para fornecer compostos benzidrilo piperazina em que X = CONEt2, Y = CH2CH=CH2, ou em que X = Br, Y = CH2CH = CH2, como misturas com seus dastereómeros, ou precursores protegidos desses compostos.

CH, -HzO tf X = Br ou ΟΟΝφ Y = CQEt ou

C*CH=CH

OSiMejt-B

De modo semelhante, a aminação redutora da benzofenona apropriada com um piperazina adequada pode fornecer os directamente compostos desejados.

De modo semelhante, um composto “disfarçado de iminio”, em que Z é um grupo dissociável (por exemplo benzotriazole ou oxotitaniotricloreto), pode ser tratado com uma variedade arilmetálica (por exemplo um arillítio ou um reagente brometo de arilmagnésio), -42- -42-

em que a benzilpiperazina pode dissociar-se para dar origem ao ião iminio requerido in situ.

De modo semelhante, a aminação redutora da benzofenona apropriada com uma piperazina adequada pode fornecer directamente os compostos desejados. -43- -43-

Ο composto (±)-1 pode ser também sintetizado pela via sintética alternativa estabelecida em seguida. -44- -44- i/Uw

Ο

-45- 1) separação do isómero 2) Et4NF

Et2N

Composto

O reagente trans-1 -alil-2,5-dimetilpiperazina utilizado no esquema de síntese anterior pode ser formado adequadamente pelo processo sintético seguinte.

EtOCOCI -:->- pH e 4 CHj'* .(

ÇOjEt N

N H yCM3

BrCHjCHFCHj - ÇOjEt

NaOH

CHj N CH,' A* CHj-CH=CHí CHz-C^CMz O íra«s-l-alil-2,5-dimetilpiperazina racémico pode ser resolvido no seus enantiómeros constituintes por resolução clássica com um ácido carboxílico enantiopuro para fornecer intermediário quiral (2R,5S)-llil-2,5-dimetilpiperazina para a produção do Composto 1 (+)-antípoda. -46- O (2R,5S)-l-alil-2,5-dimetilpiperazina também pode ser feito em forma enantiopura, pela via sintética ilustrativa sublinhada em seguida.

H

Lcooh 1) >2 equiv. NaH H 2) brometo de alilo CHz=CH-Chfe T T CH, CH, BOC-D-AJa BOC 0-(2=CH-of

N

H vJ^-COOH + CH3 ^N^CQzCH, CH, L-Ala-0 Me

Me2N-(01)3-N=C=N-Et -»-

H

LiAiKi -► N\ v (2R, 5S) ijT^c* CH2-CH=CMz

Quando o (2R,5S)-l-alil-2,5-dimetilpiperazina enantiopuro é tratado com cloreto racémico, o produto resultante é uma mistura de dois diastereómeros enantiopuros que podem ser separados por métodos convencionais tais como cromatografia ou cristalização fraccional. -47-

1) (COC0 ^ 2) EfeNH

1) n-BuLi

— y OSiMe^t-Bu

CHj 2) Et,NF * 3) Separação do isómero

OSiMejt-Bu racémico +

CHz-Ch^CHz (2R.5S)

1) CH)CN, base, N

CH tCH =CH 2 Composto

Em adição ao anterior, Compostos I ou (±)-l podem ser sintetizados por meio de uma via de síntese nitrilo, utilizando cianeto cuproso como agente de nitrilação, como se mostra em seguida. 0¾ 0¾ -48- (/Λη

CH íCH =CH 2

1) neutralizar com HCI — - >- 2) reagente de acoplamento de amida»Et2NH

Composto f Sínteses alternativas de Composto I a partir de um composto halogenado correspondente são estabelecidas em seguida. -49- (Μη

CH *0Η =CH 2

t-BuMe 2SÍCI — " » imidazole. DMP

1) n-BuLi 2) EtjNCOCI

Pd°.CO

Et2NH ' t

Composto |

A descrição anterior estabelece de modo ilustrativo exemplos de técnicas de síntese as quais são empregues de forma útil para formar compostos tais como Compostos I ou (±)-l, assim como compostos benzidrilpiperazina do presente invento, via reagentes correspondentes ou análogos.

Os aspectos e vantagens do invento são mais completamente mostradas com respeito aos seguintes exemplos não limitativos.

Certas especificações e métodos comuns a muitos dos exemplos seguintes relacionados com síntese química são descritos no próximo parágrafo.

Pontos de fusão foram determinados com um aparelho Thomas- 50-

Hoover e são não corrigidos. Todos os reagentes químicos foram comprados em Aldrich Chemical Company, Milwakee, Wisconsin a não ser que seja especificado em contrário. Solventes comerciais foram utilizados sem purificação adicional excepto tetrahidrofurano, o qual foi destilado a partir do metal potássio. Espectro Ressonância Nuclear Magnética (RMN) foram obtidos variadamente com espectómetros Perkin-Elmer R-24, Varian XL-200, ou XL-300. Análises HPLC foram executadas com sistema de cromatografia líquida Waters equipado com um Satelite WISP 700, Sistema Controller 600E e um detector Fotodióide 991, ou com uma coluna Cylobnd (4,6 x 250 mm, Advanced Separations Technologies, Whippany, New Jersey) ou uma coluna μ-Bondapak C-18 (125 A, 3,9 x 300, Waters Chromatography Dividion, Millipore Corporation, Milford, Massachusetts) num caudal de 1 ml/min. Cromatografia de gás analítica foi executada num instrumento Hewlett-Packard Série II, Modelo 5890 com detector de ionização de chama utilizando hélio como gás portador (injector de temperatura, 225°C; detector de temperatura, 250 °C). Rotações ópticas foram obtidas num polarímetro Perkin-Elmer 241. Espectro de Massa foram executados por Serviços Oneida Research, Whitesboro, New York. Cristalografia de Raio-X foi executada por Molecular Structure Corporation , College Station, Texas. Análise de cromatografia de camada fina foi executada em placas de vidro Analtech pré-revestidas com gel de sílica GF (250 mícrons), e cromatografia de camada fina preparativa em Analtech Uniplates pré-revestidas com gel de sílica GF (1000 e 2000 mícrons). Análise elementar foram executados por Atlantic Microlab, Norcross, Georgia. EXEMPLO 1 A (REFERÊNCIA) (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxi-benzil)-N,N- dietilbenzamida -51 - (/Λη Ácido 3-iodobenzóico (55,5 g, 0,224 mol) foi dissolvido em tetrahidrofurano (220 mL) e cloreto de oxalilo (22 mL, 0,252 mol). Dimetilformamida catalítica (4 gotas) foi adicionada, a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em 20 mL de éter de petróleo (35-60°C gama de ebulição) e arrefecido para 0°C num banho de gelo. Dietilamina (55 mL, 0,352 mol) foi então adicionado gota a gota durante 15 minutos. A mistura de reacção foi agitada e esteve 15 minutos adicionais no banho de gelo, foi então diluída com acetato de etilo 8100 mL) e lavada com solução saturada de cloreto de sódio (50 mL). A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, e concentrada in vacuo para aproximadamente metade do volume original. A solução foi então filtrada através de uma pequena almofada de gel de sílica, utilizando acetato de etilo para lavar a almofada. Todos os voláteis foram removidos in vacuo, e o produto foi seco sob alto vácuo para dar 65,69 g (97%) de Ν,Ν-3-iodobenzamida como um óleo âmbar. RMN (300 MHz, CDC13): δ 1,11 (br s, 3H); 1,21 (br s, 3H), 3,23 (br s, 2H), 3,51 (br s, 2H); 7,13 (ddd, J, - 0,8hz, J2= 7,6 hz, J3 = 7,6Hz, 1H); 7,32 (ddd, J,= 1,3 Hz, J2= 1,3Hz, J3 = 7,5 Hz, 1H), 7,71 (d, J=l,2Hz, 1H), 7,72 (ddd, J^UHz, J2= 1,3Hz, J3= aprox. 0,8 Hz (parcialmente obstruído), 1H).

Espectro de Massa (CI-CH4) m/e: 304 (M+l, 100%).

Cale. para CuHi4NOI: C, 43,58; H, 4,65; N, 4,62; 1,41,86.

Encontrado: C, 43,68; H, 4,64; N, 4,64; 1,41,92. 3-Hidroxibenzaldeído (70 g, 0,57 mol), cloreto de terc-butildimetilsililo (92 g, 0,61 mol) e imidazole (92g, 1,35 mol) foram combinados em dimetilformamida (250 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente, sob azoto, durante 1 hora. A solução foi deitada em água 81,5 L) e extraída com 2 52- (Μη χ 500 mL de éter de petróleo (35-60°C gama de ebulição). A solução orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio (100 mL), seca sobre sulfato de magnésio, tratada com gel de sílica (20 g), filtrada, e concentrada in vacuo. O resíduo foi seco adicionalmente sob alto vácuo para produzir 126,6 g (94%) de 3-(ter-butildimetilsilil)oxi)benzaldeído sensível ao ar e à luz como um óleo âmbar. RMN (300 MHz, CDC13): δ 0,22 (s, 6H); 0,99 (s, 9H), 7,10 (ddd, J, = 1,2Hz, J2= 2,5 Hz, J3 =7,9Hz, 1H); 7,32 (ddd, J,= 1,5 Hz, J2= 2,4Hz, 1H), 7,39 (t, J=7,8Hz, 1H), 7,47 (ddd, J,=l,3Hz, J2=l,3Hz, J3= 7,6 Hz,lH); 9,95 (s, 1H)..

Espectro de Massa (CI-CH4) m/e: 237 (M+l, 100%).

Cale. para Ci3H20O2Si: C, 66,05; H, 8,53.

Encontrado: C, 65,95; H, 8,56. n-Butillítio em hexanos (280 mL de uma solução a 2,5M) foi adicionado por meio de funil de gotas a terahidrofurano (1,4 L) a -78°C, sob azoto. Quando a solução n-butillítio arrefeceu de novo para -78°C, foi adicionada uma solução de N,N-dietil-3-iodobenzamida (106 g, 0,35 mol) em tetrahidrofurano (350 mL) lentamente durante 20 minutos. A temperatura interna subiu para -65°C durante a adição. Depois da adição estar completa, a solução foi agitada durante 10 minutos, e foi adicionada uma solução de 3-((terc-butildimetilsilil)oxi)benzaldeído (88 g, 0,37 mol) em tetrahidrofurano (90 mL) lentamente durante 7 minutos. A mistura de reacção foi agitada durante 5 minutos adicionais a -78°C e foi deixada aquecer para -10°C. A mistura foi deitada em 875 mL de éter de petróleo (35-60°C gama de fusão ) e solução dibásica de fosfato de sódio (350 mL de solução aquosa a 2M), agitada, e a fase orgânica separada. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e foi concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido numa mistura de acetato de etilo-éter de petróleo (1:3, 90 mL) colocada numa coluna de gel de sílica (lKg), e lavada com acetato de etilo-éter de petróleo (1.3) para remover impurezas de eluição fácil. A eluição -53-

com acetato de etilo produziu, depois de concentração in vacuo, 115,9 g (80%) de 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-a-hidroxibenzil)-N,N-dietilbenzamida como um óleo âmbar viscoso. RMN (300 MHz, DMSO-de): δ 0,13 (s, 6H); 0,92 (s, 9H), 0,98 (br s, 3H), 1,11 (br s, 3H); 3,10 (br s, 2H), 3,39 (br s, 2H), 5,69 (d, J= 4,lHz,lH); 5,96 (d, J=4,2Hz, 1H), 6,68 (dd, Ji=l,9 Hz, J2= 7,7Hz, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,97 (d, J=7,7Hz, 1H), 7,16 (d, J= aprox. 8 Hz (parcialmente obscuro), 1H), 7,17 (t, J= 7,7Hz, 1H); 7,28 (s, 1H), 7,35 (t, J=7,8 Hz, 1H); 7,42 (d, J=7,6 Hz, 1H).

Espectro de Massa (CI-CH4) m/e: 414 (M+l, 11%), 178 (32%).

Cale. para C24H35NO3S1: C, 69,69; H, 8,53; N, 3,39.

Encontrado: C, 69,65; H, 8,56; N, 3,40.

Um frasco de fundo redondo de 3 gargalos de 12 L foi carregado com íra«£-2,5-dimetilpiperazina (767g, 6,72 mol), o qual tinha sido cristalizado a partir de tolueno para pf = 115-119°C, e 600 mL de água. O frasco foi arrefecido num banho de gelo e uma solução de ácido metanossulfónico (1290 g, 13,4 mol) em 600 mL de água foi adicionada lentamente com agitação e arrefecimento para manter a temperatura abaixo de 40°C. A solução foi arrefecida para 20°C e foi adicionado 800 mL de etanol. Um funil de adição de 500 mL foi cheio com acetato de potássio aquoso a 60% a partir de um reservatório de 2 L da solução, e acetato de potássio foi adicionado ao frasco da reacção para ajustar o pH para 4,0. Um segundo funil de adição foi carregado com uma solução de cloroformato de etilo (642 mL, 6,71 mol) em 360 mL de tetrahidrofurano.

As soluções de cloroformato de etilo e acetato de potássio foram simultaneamente adicionadas gota a gota com ajustamento de velocidade para manter a solução de reacção em pH 4,0 ± 0,1, com arrefecimento como necessário para manter a temperatura a 25°C. Depois da adição do cloroformato -54-

UlM de etilo estar completa, a reacção foi mantida durante 1 hora com adição contínua de solução de acetato de potássio para manter um pH de 4,0. Os solvente orgânicos foram removidos por destilação sob vácuo. A restante solução aquosa foi lavada com 1500 mL de acetato de etilo para remover qualquer impureza bis-carbamato. O produto da lavagem com acetato de etilo foi extraído com duas porções de 500 mL de ácido clorídrico a 1M para recuperar o produto desejado. Os extractos ácidos foram combinados com a solução aquosa original e o pH foi ajustado para 11 pela adição de hidróxido de sódio a 10M, com arrefecimento para manter a temperatura abaixo dos 40°C. A solução aquosa foi extraída com duas porções de 1500 mL de acetato de etilo, os extractos combinados foram secos sobre sulfato de magnésio, e o solvente foi removido para dar 927 g (74%) de íra«5'-2,5-dimetil-l-piperazinocarboxilato de etilo como um óleo amarelo.

Uma mistura de /ra«s-2,5-dimetil-l-piperazinocarboxilato de etilo (643 g, 3,45 mol), bromato de alilo (328 mL, 3,80 mol), e carbonato de sódio (440g, 4,15 mol) em 2500 mL de acetonitrilo foi aquecida ao refluxo durante 1,5 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, filtrada, e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em 4000mL de diclorometano e lavado com duas porções de 500 mL de hidróxido de sódio a 1M. A solução diclorometano foi seca sobre sulfato de magnésio e o solvente foi removido para dar 630 g (81%) de íra«s-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinocarboxilato de etilo como um óleo.

Tra«s-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinocarboxilato de etilo (630 g, 2,78 mol) foi adicionado a uma solução de peletes de hidróxido de potássio a 87% (2970 g, 46 mol) em 4300 mL de 95% etanol e foi aquecido ao refluxo durante 1,5 horas. Foi observada evolução de dióxido de carbono na primeira 0,5-1 hora do aquecimento. A reacção foi arrefecida abaixo da temperatura de refluxo e 2000 mL de tolueno foi cuidadosamente adicionado. O etanol foi removido por 55 l/Uy destilação azeotrópica a 105°C, enquanto se adicionava 4000 mL de tolueno ao frasco da reacção durante o decorrer da destilação. Depois da recolha de 9000 mL do destilado, a reacção foi arrefecida para 100°C e 1000 mL de tolueno foram cuidadosamente adicionado. A solução foi lentamente arrefecida para 5°C e mantendo a 5°C durante 30 minutos. A solução foi filtrada, e o bolo filtrado foi lavado com 1500 mL adicionais de tolueno. O filtrado foi lavado com 1000 mL de água, seco sobre sulfato de magnésio, e o solvente foi removido para dar 296 g (69%) de trans-1 -alil-2,5-dimetilpiperazina como um líquido escuro. RMN (300 MHz, DMSO-d*): δ 0,87 (d, J=6,3Hz, 3H); 0,92 (d, J=6,3Hz, 3H); 1,63 (t, J=llHz, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,30 (t, J=llHz, 1H), 2,6-2,8(m, 4H); 3,33 (dd, J,=5Hz, J2=14Hz, 1H); 5,09 (d, J=8,7Hz, 1H); 5,13 (d, J=14Hz, 1H); 5,8 (m, 1H). Ácido Di-/?-toluoil-D-tartárico (Schweizerhall, Inc., South Plainfield, New Jersey) (1,25 Kg, 3,2 mol) foi dissolvido em etanol a 95% (16 L) quente (~60°C) e trans-1 -alil-2,5-dimetilpiperazina racémica (500 g, 3,2 mol) foi adicionada em várias porções (cuidado: exotérmico). A solução quente foi semeada com cristais de sal diastereoisomericamente puro (obtido a partir de uma resolução prévia a pequena escala) e arrefecida até à temperatura ambiente durante 2-3 horas. A solução foi agitada lentamente durante 2 dias à temperatura ambiente. O sal resultante foi recolhido por filtração, lavado duas vezes com etanol a 95%, e foi seco sob vácuo para dar 826,5 g de um sólido branco (47%). O processo foi repetido com uma segunda porção de ácido di-p-toluoil-D-tartárico e trans-1 -alil-2,5-dimetilpiperazina racémica para dar 869 g (50%). O total de 1695 g de sal foi dividido em três porções e cada porção foi recristalizada duas vezes da seguinte maneira. O sal foi dissolvido em refluxo etanol a 95% (~2,7 L/100 g de sal), e aproximadamente metade do etanol foi -56- removido por destilação. (Nota: agitação vigorosa foi necessária durante a destilação para evitar a cristalização na parede do vaso). A solução quente foi semeada com cristais do sal diastereomérico puro, arrefecida até à temperatura ambiente, e agitada lentamente durante 2 dias antes da recolha do sal por filtração. (Nota: uma experiência subsequente sugeriu que o tempo de cristalização pode ser reduzido desde 2 dias até 8 horas.) A quantidade total recuperada foi de 1151 g. O sal foi dissolvido em 3 L de hidróxido de sódio aquoso a 2M, e a solução aquosa foi extraída com quatro porções de 1 L de diclorometano. Os extractos orgânicos foram combinados, secos sobre sulfato de sódio, e o solvente foi removido por evaporação rotativa (temperatura <20°C) para dar 293 g (29% baseado no peso racémico) de (2R,5S)-l-alil-2,5-dimetilpiperazina como um óleo transparente, [a] D = -51,1° (Etanol abs., c = 1,2). A trifluoroacetamida do produto foi preparada com anidrido trifluoroacético e analisada por cromatografía de gás capilar quiral (Chiraldex B-PH coluna, 20 m x 0,32 mm, Advanced Separation Technologies Inc., Whippany, NJ, 120°C) indicando uma enantiopureza de >99% ee (tempo de retenção do enantiómero desejado, 11,7 min; outro enantiómero, 10,7 min). 3-(3-((terc-Butildimetilsilil)oxi)-a-hidroxibenzil)-N,N-dietilbenza-mida (115,9 g, 0,280 mol) foi dissolvida em tetrahidrofurano (560 mL) e foi adicionado cloreto de tionilo (24,5 mL, 0,336 mol). A reacção foi visivelmente exotérmica. A mistura foi agitada durante 15 minutos e concentrada in vacuo (primeiro cuidadosamente, devido à rápida evolução do gás). Depois todos os voláteis foram removidos, a 3-(3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-a-clorobenzil)-N,N-dietilbenzamida foi dissolvida em acetonitrilo (560 mL). Iodeto de sódio (42 g, 0,280 mol), diisopropiletilamina (73 mL, 0,42 mol), e (2R,5S)-l-alil-2,5-dimetlpiperazina (52,5 g, 0,280 mol) foram adicionados. A mistura foi agitada ao refluxo, sob azoto, durante 2,5 horas. O acetonitrilo foi removido por destilação sob azoto, durante a próxima hora. Depois do arrefecimento, a mistura de reacção -57- foi deitada em acetato de etilo (1,1 L) e solução de carbonato de potássio (350 mL de solução aquosa a 2M), e agitada. A fase orgânica foi separada, seca sobre carbonato de potássio sólido, e concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etilo-éter de petróleo (1.1, 150 mL), e colocado numa coluna de gel de sílica (3 Kg). A eluição com acetato de etilo-éter petróleo (1.1) produziu o isómero desejado como o primeiro dos dois epímeros a eluir. A solução do eluato foi concentrada num pequeno volume e deixada repousar durante 12 horas. Uma impureza cristalina que precipitou foi removida por filtração, e o filtrado foi concentrado até secar. O resíduo foi dissolvido em tetrahidrofurano-éter de petróleo (1.1, 125 mL) e extraído com 350 mL de ácido clorídrico a 0,75 Μ. A fase aquosa, contendo o desejado produto, foi agitada à temperatura ambiente durante 24 horas para clivar o éter silílico. A solução foi então lavada com 1:1 acetato de etilo:éter de petróleo (2 x 100 mL). A solução aquosa foi agitada com acetato de etilo (100 mL) enquanto bicarbonato de sódio (38 g) foi adicionado por porções, com cuidado (evolução vigorosa de gás). Depois de 15 minutos de agitação adicional, as camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída de novo com acetato de etilo (100 mL). As duas porções de acetato de etilo foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio, concentradas in vacuo, e secas sob alto vácuo para produzirr 37,3 g (30%) de (+)-3-((aR)-a-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N,N-dietilbenzamida como um sólido branco, [a] D - +20 (metanol, c=2). RMN (400 MHz, DMSO-de): δ 0,91 (d, J=6,2Hz, 3H); 0,99 (br s, 3H), 1,05 (d, J=6,2Hz, 3H), 1,09 (br s, 3H); 1,84 (dd, Jt=7,3Hz, J2=10,9Hz, 1H), 2,06 (dd, J,=7,3Hz, J2=10,9Hz, 1H), 2,48 (m, 1H); 2,51 (dd, J,=2,7Hz, J2=10,9Hz, 1H), 2,58 (br s, 1H); 2,70 (dd, 1,=2,7 Hz, J2=10,9Hz, 1H), 2,81 (dd, J,=7,0Hz, J2=13,9Hz, 1H), 3,12 (dd, J,=5,lHz, J2=13,9Hz, 1H), 3,38 (br s, 2H), 4,97 (br s, -58- 1H); 5,07 (d, J=10,2Hz, 1H); 5,14 (d, J=16,9Hz, 1H), 5,70-5,82 (m, 1H), 6,64 (dd, J]=2,l Hz, J2=8,0Hz, 1H); 6,65 (s, 1H); 6,68 (d, J=7,7Hz, 1H), 7,11 (t, J=8,0 Hz, 1H); 7,14 (d, J=7,6 Hz, 1H); 7,30 (s, 1H), 7,33 (t, J=7,6 hz, 1H); 7,39 (d, J=8,0 Hz, 1H); 9,31 8(s, 1H).

Espectro de Massa (CI-CH4) m/e: 436 (M+l, 53%).

Cale. para C27H37N3O2 0,5H2O: C, 72,94; H, 8,61; N, 9,45.

Encontrado: C, 73,00; H, 8,57; N, 9,40. A amina livre (32,2 g) foi dissolvida em 200 mL de etanol absoluto e titulada com cloreto de hidrogénio etanólico (7 M e 1 M) para um pH de 3,95. O solvente foi removido e 0 resíduo foi redissolvido em 50 mL de diclorometano. Éter dietílico (900 mL) foi adicionado com agitação vigorosa para precipitar um produto gomoso o qual solidificou depois da agitação durante a noite sob azoto. O produto foi recolhido por filtração e foi seco sob vácuo a 55°C para dar 33,06 g (91% recuperação) do sal monohidrocloreto.

Cale. para C27H37N3O2 HC1 H20: C, 66,17; H, 8,23; N, 8,57; Cl 7,23.

Encontrado: C, 66,40; H, 8,17; N, 8,48; Cl 7,28. EXEMPLO 1B (REFERÊNCIA) {+1-3-( (ocRVa-í (2S.5RV4-alil-2.5-dimetil-1 -piperazinil)-3-hidroxi-benzil)-N-metil-N-fenilbenzamida

Uma mistura de 1400 g (8,1 mol) de 3-bromofenol, 1218 g (8,1 mol) de terc-butilclorodimetilsilano e 1376 g (20,2 mol) de imidazole em 1600 mL de Ν,Ν-dimetilformamida foi agitada à temperatura ambiente sob azoto -59-

IjMj

J durante 18 horas. A mistura de reacção foi deitada numa solução aquosa tampão de pH 8 e foi extraída com éter dietílico. Os extractos de éter foram lavados com água e salmoura, secos sobre sulfato de sódio, e o solvente foi evaporado sob vácuo para dar 2314 g de 3-bromofenil terc-butildimetilsililo em bruto como um óleo cor de laranja. RMN (CDCL3, 200 MHz) d: 0,2 (s, 6H); 0,95 (s, 9H); 6,8 (m, 1H); 7,0-7,1 (m, 3H). O éter silílico (1771 g, 6,17 mol) foi dissolvido em 4 L de tetrahidrofurano seco, foi seco adicionalmente sobre peneiras moleculares, depois foi transferido para um frasco de reacção de 12L sob azoto e arrefecido para -78°C. Foi adicionado n-Butillítio (2400 mL de uma solução a 1,6M em hexano), enquanto era agitado sob azoto numa velocidade para manter a temperatura abaixo de -70°C. A agitação continuou a -78°C durante 2 horas. Uma solução de 3-bromobenzaldeído (1119g, 6,05 mol) em 600 mL de tetrahidrofurano seco foi adicionada numa velocidade para manter a temperatura de reacção abaixo de -70°C. depois da agitação durante 2 horas a -78°C, a reacção foi temperada com 1400 mL de cloreto de amónio saturado aquoso e foi deixada aquecer até à temperatura ambiente. A mistura foi filtrada para remover sólidos e as camadas foram separadas. A fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e evaporada para dar 2500 g de álcool a-(3-bromofenil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)-benzílico como um óleo amarelo. A cromatografia em gel de sílica de 1 Kg do produto em bruto com hexano:diclorometano (gradiente a partir de 90_10 para 75:25, seguida de diclorometano:acetato de etilo/ 90:10 deu 692,3 g de álcool a-(3-bromofenil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzilo como um óleo amarelo. RMN (CDCL3, 200 MHz) d: 0,2 (s, 6H); 0,95 (s, 9H); 2,3 (br s, 1H); 5,7 (s, 1H); 6,75 (d, J=8Hz, 1H); 6,8 (s, 1H); 6,9 (d, J=8Hz, 1H); 7,2 (m, 2H); 7,3 (d, J=8Hz, 1H); 7,4 (d, J=8Hz, 1H); 7,5 (s, 1H). -60-

Cloreto de tionilo (38 mL, 0,51 mol) foi adicionado gota a gota a uma solução de álcool benzidrílico (160 g, 0,41 mol) em 1 L de diclorometano e a mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. O solvente foi removido sob vácuo, o resíduo foi redissolvido em tolueno, e o solvente foi de novo removido sob vácuo para eliminar excesso de cloreto de tionilo para dar cloreto de a-(3-bromofenil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzilo bruto como um óleo castanho RMN (CDCL3, 200 MHz) d: 0,2 (s, 6H); 0,95 (s, 9H); 6,0 (m, 1H); 6,8-7,0 (m, 3H), 7,2-7,6 (m, 5H).

Uma mistura de cloreto de benzidrilo e (-)-(2R-5S)-l-alil-2,5-dimetilpiperazina (137,6 g, 0,89 mol, a partir do exemplo IA, infra) em 1500 mL de acetonitrilo foi aquecido ao refluxo durante 48 horas, concentrado in vacuo, e o resíduo dissolvido em acetato de etilo. A mistura foi lavada com hidróxido de sódio aquoso a 0,25 M, seca sobre sulfato de sódio e concentrada in vacuo para dar 202,6 g de óleo escuro, o qual foi dissolvido em acetonitrilo (1 L)e tratado com dihidrato fluoreto de tetraetilamónio (88,9 g, 0,48 mol). Depois da agitação à temperatura ambiente durante a noite, o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em diclorometano (2 L), lavado com solução tampão aquosa pH 8, seco sobre sulfato de sódio e concentrado num óleo escuro o qual foi agitado em acetonitrilo (700 mL) a 25°C durante 72 horas para produzir um precipitado colorido. A recristalização a partir de acetonitrilo (2 L) deu 53,3 g de um diastereómero isolado. (+)-3-((aR)-oc-((2S-5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazi-nil)-3-bromobenzil)fenol como um sólido branco. RMN (DMSO-d6,200 MHz) d: 0,95 (d,J=6Hz, 3H); 1,03 (d, J=6Hz, 3H); 1,8 (dd, Ji=6Hz, J2=10Hz, 1H); 2,1 (dd, J,=6Hz, J2=10Hz, 1H); 2,4-2,6 (m, 3H); 2,7(d, J=11Hz, 1H); 2,8 (dd, J^Hz, J2=14Hz, 1H); 3,2 (dd, J^ÓHz, J2=13Hz, 1H); 4,9 -61 - i/Uuj (s, 1H); 5,1 (d, J=10Hz, 1H); 5,2 (d, J=18Hz, 1H); 5,7-5,9 (m, 1H); 6,6-6,8 (m, 3H); 7,0-7,4 (m, 4H); 7,55 (s, 1H); 9,35 (s, 1H). O licor mãe evaporou para dar 127 g de um sólido castanho. Uma porção (11 g) deste sólido foi purificada por cromatografia em gel de sílica com diclorometano:etanol (0-,25%). O primeiro isómero a eluir a partir da coluna foi recolhido para dar 2,32 g de 3-((aS)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-bromo-benzil)fenol como um sólido amarelo claro. RMN (DMSO-d6,200 MHz) d: 0,95 (d, J=6Hz, 3H); 1,05 (d, J=6Hz, 3H); 1,85 (dd, J,=7Hz, J!=9Hz, 1H); 2,1 (dd, J^óHz, J2=9Hz, 1H); 2,5 (m, 3H); 2,7 (dd, J,= 2Hz, J2=8Hz, 1H); 2,9 (dd, J,=7Hz, J2=7Hz, 1H); 3,1 (dd, Ji=5Hz, J2=9Hz, 1H); 4,95 (s, 1H); 5,1 (d, J=10Hz, 1H); 5,2 (d, J=17Hz, 1H); 5,8 (m, 1H); 6,6 (d, J=8Hz, 1H); 6,8 (m, 2H); 7,1 (t, J=8Hz, 1H); 7,3 (m, 2H); 7,5 (m, 2H); 9,3 (s, 1H). (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-bromo-benzil)fenol (147,3 g, 0,355 mol) foi dissolvido em 1 L de N-metil-2-pirrolidona em cianeto cuproso (63,6 g, 0,71 mol), e a reacção foi aquecida a 170°C durante 30 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e deitada em 7 L de cianeto de sódio 14% aquoso. A mistura foi agitada durante a noite e extraída com acetato de etilo. Os extractos de acetato de etilo foram combinados, lavados com água, secos sobre sulfato de sódio e concentrados in vacuo para dar 133,3 g de um sólido castanho. Cromatografia em gel de sílica com etanol (2-7%) em dicloro-metano deu 97,8g de (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)benzonitrilo bruto. A recristalização a partir de acetonitrilo deu 74,2 g (58%) 3-((aS)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l- piperazinil)-3-bromo-benzil)fenol (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 - piperazinil)-3-hidroxibenzil)benzonitrilo puro como um sólido branco. O benzonitrilo (78,8 g, 0,22 mol) foi combinado com 60 g de -62- hidróxido de sódio em peletes em 1 L de 95% etanol e aquecido ao refluxo durante 72 horas. A mistura foi concentrada in vacuo para remover etanol. O resíduo foi dissolvido em água e a solução resultante foi ajustada para pH 5 com ácido clorídrico concentrado. O solvente foi removido in vacuo para dar 138,8 g de ácido 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxi-benzil) benzóico como uma mistura com cloreto de sódio. Uma porção (5,0 g) do ácido bruto foi agitada com 50 mL de água. A pasta resultante foi filtrada, o sólido no filtro foi lavado três vezes com água depois foi seco sob vácuo durante três horas para dar 2,02 g de ácido (+)-3-((ccR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)benzóico como um sólido beije claro. RMN (DMSO-dô, 200 MHz): δ 0,95 (d, J=6Hz, 3H); 1,1 (d, J=6Hz, 3H), 1,9 (ddd, Ji=3Hz, J2=7Hz, J3=10Hz, 1H), 2,1 (dd, J,=8Hz, J2=10Hz, 1H); 2,5 (m, 2H); 2,7-2,9 (m, 2H); 3,2 (m, 2H); 5,05 (d, J=12Hz, 1H), 5,2 (d, J=18Hz, 1H), 5,8 (m, 1H); 6,7 (m, 3H); 7,1 (t, J=8Hz, 1H), 7,4 (t, J=8Hz, 1H); 7,65 (d, J=8Hz, 1H); 7,8 (d, J=8Hz, 1H); 8,0 (s, 1H); 9,4 (s, 1H).

[a]2°D = +4,1° (0,1 M hidróxido de sódio aquoso, c=l,09).

Cale. para C23H28N203 0,75 H20: C, 70,12; H, 7,55; N, 7,11.

Encontrado: C, 70,23; H, 7,35; N, 7,10.

Espectro de Massa (CI-CH4) m/e: 381 (M+l, 35%); 380 (M, 2%); 227 (28%); 155 (100%); 153 (83%). Ácido 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-hidro-xibenzil)benzóico (25,9 g de uma mistura em peso a 50% com cloreto de sódio , 34,0 mmol) foi dissolvido em 40 mL de dimetilformamida com 12,8 g (84,9 mmol) de terc- butilclorodimetilsilano e 11,5 g (169,1 mmol) de imidazole e foi agitado durante a noite à temperatura ambiente. A solução de reacção foi deitada em 500 mL de água gelada com 500 mL de éter dietílico. O extracto de éter foi -63- lavado duas vezes com 250 mL de água, e depois com 125 mL de solução saturada de cloreto de sódio. A solução de éter foi seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido para dar 20,8 g de 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoato de terc-butildimetilsililo em bruto. O éter silílico-éster silílico em bruto ( 20,7 g, < 33,9 mmol baseado na anterior reacção) foi dissolvido em 60 mL de diclorometano e arrefecido para 0°C sob azoto. Cloreto de oxalilo (3,7 mL, 42,4 mmol) foi adicionado gota a gota. Enquanto se mantinha a temperatura do banho a 0°C, era adicionada lentamente dimetilformamida catalítica (10 gotas). A evolução do gás foi evidente durante a adição de dimetilformamida. A temperatura do banho foi mantida a 0°C durante 30 minutos, depois foi deixada aquecer até à temperatura ambiente, sob azoto durante 24 horas. Todos os voláteis foram removidos por evaporação sob pressão reduzida para dar 29,76 g de cloreto de 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoilo em bruto como um sólido castanho amarelado. O cloreto de ácido em bruto foi utilizado sem purificação. EXEMPLO 2 (+V3-((aRVa-((2S.5RV4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzilVN-(4- fluorofenilVN-metilbenzamida

Seguindo um processo de literatura geral para alquilação redutora (Krishnamurthy, S. tetrahedron Lett. 1982, 23, 3315) anidrido acético-fórmico foi preparado pela adição lenta de ácido fórmico (7,5 mL) a anidrido acético a 0°C. Depois da agitação durante 5 minutos a 0°C, a mistura foi aquecida a 55°C durante 1,75 horas sob azoto. A mistura foi arrefecida para 0°C e utilizada sem purificação. Foi adicionado 4-fluoroanilina (3,1 mL, 32,8 mmol) em tetrahidrofurano (10 mL) a anidrido fórmico (125 mL, 88 mmol) a 0°C. A -64- (/Λη reacção foi agitada durante 25 minutos e os voláteis foram removidos sob vácuo para fornecer a formamida como um sólido castanho. Uma porção de sólido em bruto (2,39 g, 17,2 mmol) foi dissolvido em tetrahidrofurano (8 mL) e arrefecido para 0°C. Borano em tetrahidrofurano (40 mL de uma solução a 1,0M) foi adicionado gota a gota. A evolução de gás foi evidente durante a primeira metade da adição. Depois da adição, a solução foi aquecida ao refluxo durante 3 horas. A solução foi arrefecida para 0°C e cuidadosamente foi adicionado metanol 810 mL). Depois da agitação durante 10 minutos, foi adicionado cloreto de hidrogénio etanólico (7 mL de uma solução a 7,1M) e a reacção foi agitada durante a noite. Depois da remoção de todos os voláteis in vacuo, N-metil-4-fluoroanilina em bruto foi obtida como um sólido púrpura claro. RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ 2,65 (s, 3H); 5,54 (s, 1H); 6,51 (dd, J,=4,7Hz, J2=8,8Hz, 2H); 6,93 (dd, J,=8,9Hz, J2=8,8Hz, 2H).

Cloreto de 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoilo (Exemplo 1B, infra, 2,08 g, em bruto, aproximadamente 1,29 g do composto actual, 2,51 mmol baseado em ácido 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-hidroxibenzil)benzóico) foi dissolvido em 8 mL de diclorometano à temperatura ambiente sob azoto. Foi adicionada trietilamina (0,5 mL) à solução. Depois 4-fluoro-N-metilamina (0,478 mg, 3,82 mmol) em diclorometano (5 mL) foi adicionada gota a gota à solução (exotérmica), e a reacção foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. Todos os voláteis foram removidos por evaporação sob pressão reduzida para fornecer um sólido gomoso castanho amarelado. O sólido em bruto foi dissolvido em acetonitrilo (8 mL) sob azoto à temperatura ambiente. Hidrato de fluoreto de tetraetilamónio (1,06 g, 5,7 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. -65-

Depois da remoção do solvente, o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (4 cm x 14 cm) com 0,25-3,5% etanol em diclorometano para dar 0,419 g (34% depois de 4 fases a partir de ácido 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-hdroxibenzil)benzóico) de (+)-3-((aR)-ot-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(4-fluorofenil)-N-metil-benza-mida como um pó amarelo. RMN (300 MHz, DMSO-de): δ 0,88 (d, J=6,0Hz, 3H); 0,96 (d, J=6,0Hz, 3H); 1,68 (dd, Ji=7,7Hz, J2=10,8Hz, 1H), 2,02 (dd, 1,=7,1¾ J2=10,7Hz, 1H), 2,28 (br d, J=10,7Hz, 1H); 2,35-2,52 (m, 2H); 2,66 (br d, J=10,6Hz, 1H); 2,82 (dd, Ji=7,4Hz, J2=13,9Hz, 1H); 3,16 (dd, J,=4,6Hz, J2=14,0Hz, 1H), 3,32 (s, 3H); 4,77 (s, 1H); 5,10 (d, J=10,3Hz, 1H), 5,16 (d, J=17,3Hz, 1H); 5,70-5,84 (m, 1H); 6,43 (d, J=7,4Hz, 1H), 6,56 (s, 1H); 6,64 (d, J=8,0Hz, 1H); 7,02-7,22 (m, 9H), 9,31 (s, 1H).

Espectro e massa (CI-CH4) m/e: 488 (M+l, 100%), 334 (11%), 153 (68%).

[ot]2°D = +6,9° (etanol, c=l,6). A amina livre (0,390 g) foi dissolvida em etanol e titulada com cloreto de hidrogénio etanólico para pH 3,3 seguido da precipitação com éter dietílico a partir de diclorometano para dar 0,327 g (recuperação de 78%) do sal monohidrocloreto como um pó higroscópico amarelo claro.

Cale. para C30H34N3O2 F HC1H20: C, 66,47; H, 6,88; N, 7,75; F, 3,50; Cl, 6,54.

Encontrado: C, 66,36; H, 6,74; N, 7,82; F, 3,27; Cl, 6,62. EXEMPLO 3 (+V3-((aRVa-((2S.5R)-4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinir)-3-hidroxi-benziO-N-(4- clorofenilVN-metil-benzamida -66-U^l 4-Cloro-N-metilanilina foi preparado a partir de 4-cloroanilina, acoplado com cloreto de 3-((aR)-cc-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoilo, desprotegido e purificado pelos métodos descritos no Exemplo 2 para dar (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(4-clorofenil)-N-metilbenzamida como um pó amarelo claro. RMN (300 MHz, DMSO-dé): δ 0,89 (d, J=6,2Hz, 3H); 0,96 (d, J=6,lHz, 3H); 1,65 (dd, J,=7,6Hz, J2=10,8Hz, 1H), 2,01 (dd, ^=7,6¾ J2=10,4Hz, 1H), 2,27 (dd, J!=1,5Hz, J2=11,4Hz, 1H); 2,35-2,52 (m, 2H); 2,65 (br d, J=10,8Hz, 1H); 2,82 (dd, Ji=7,6Hz, J2=13,5Hz, 1H); 3,16 (dd, J,=4,5Hz, J2=14,6Hz, 1H), 3,33 (s, 3H); 4,77 (s, 1H); 5,10 (d, J=10,2Hz, 1H), 5,16 (d, J=17,2Hz, 1H); 5,70-5,86 (m, 1H); 5,70-5,86 (m, 1H); 6,42 (d, J=8,lHz, 1H), 6,56 (s, 1H); 6,64 (d, J=7,5Hz, 1H); 7,04-7,25 (m, 5H), 7,13 (d, J=8,5Hz, 2H); 7,29 (d, J=8,5Hz, 2H); 9,31 (s, 1H).

Espectro e massa (CI-CH4) m/e: 504 (35C1, M+l, 86%), 350 (28%), 153 (100%). [α]2°ο = +10,2° (etanol, c=l,6). O sal monohidrocloreto foi preparado no Exemplo 2 para dar um pó higroscópico amarelo claro.

Cale. para C3oH34N302 HC1 0,75 H20: C, 65,04; H, 6,64; N, 7,58; Cl, 12,80.

Encontrado: C, 65,04; H, 6,71; N, 7,49; Cl, 12,83. EXEMPLO 4 (+V3-(YaRVa-((2S.5RV4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinilV3-hidroxibenzilVN-(3- fluorofenilVN-metilbenzamida -67-

Ui*j l-((3-Fluoro-N-metilanilina foi preparada a partir de 3-fluoroanilina utilizando uma aminação redutora modificada. Primeiro, foi preparado 1-hidroximetilbenzotriazole pela adição de formaldeído aquoso a 37% a benzotriazole a 40°C numa proporção 1:1 e arrefecimento até à temperatura ambiente para precipitar o produto. Depois da filtração o hidroximetilbenzotriazole (125 g) foi aquecido ao refluxo em tolueno com 3-fluoroanilina (92,2 g). A água foi removida azeotropicamente utilizando um sifão Dean-Stark. Depois de três horas, a mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, depois foi refrigerada durante várias horas para completar a precipitação. O sólido branco cristalino foi recolhido por filtração, rendendo 174,2 g (86,6%) de l-(3-fluoroanilino)metil)-lH-benzotriazole. l-((3-Fluoroanilino)metil)-lH-benzotriazole (173 g) foi empastado em tetrahidrofurano seco. Borohidróxido de sódio (32,5 g) foi adicionado em porções à mistura à temperatura ambiente. Depois da adição estar completa, a mistura foi aquecida ao refluxo durante 4 horas. A solução foi arrefecida e deitada lentamente em 400 mL de ácido clorídrico a 5 M com gelo e agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. A solução pH foi ajustada para 9-10 utilizando solução de hidróxido de sódio a 10M. O produto foi extraído utilizando éter dietílico. Os extractos de éter foram lavados sucessivamente com solução de hidróxido de sódio a 1M, solução saturada de cloreto de sódio, e água. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada sob pressão reduzida para produzir 87,5 g (97%) de 3-fluoro-N-metilalinina como um óleo incolor.

[RMN (200 MHz, DMSO-dé): δ 2,76 (s, 3H); 3,41 (br s, 1H); 6,59-6,92 (m, 3H); 7,27 (q, J=8,0Hz, 1H). 3-carboxibenzaldeído (Alfredo Inc., Monroe, Ohio; 2,0g) foi -68- ['/tMj empastado em cloreto de tionilo (6 mL). Um condensador de refluxo equipado com um tubo de secagem de cloreto de cálcio foi colocado no frasco. A reacção foi colocada num banho de óleo e foi aquecida à temperatura do banho mantida abaixo de 100°C. A mistura foi deixada refluxar até ser obtida uma solução transparente e durante 5-10 minutos adicionais antes do arrefecimento até à temperatura ambiente. A solução foi diluída com tolueno anidro, e todos os voláteis foram removidos sob vácuo. O cloreto de ácido em bruto foi dissolvido em diclorometano e arrefecido num banho de gelo/água. Trietilamina (6 mL) foi adicionada gota a gota por meio de um funil de adição, seguida de N-metil-3-fluoroanilina (1,83 g) em diclorometano. A solução turva foi deixada aquecer até à temperatura ambiente durante 1 hora. Foi adicionada água e o produto foi extraído com diclorometano. A camada orgânica foi lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio e foi seca sobre sulfato de sódio, e o solvente foi removido sob vácuo. N-(3-Fluorofenil)-3-formil-N-metilbenzamida (3,20 g) foi obtido como um óleo dourado claro (rendimento 93% não cromatografado).

[RMN (300 MHz, DMSO-dé): δ 3,38 (s, 3H); 6,94-7,02 (m, 2H); 7,18-7,29 (m, 2H); 7,46 (t, J=7,7 Hz, 1H); 7,55 (d, J=7,6 Hz, 1H); 7,81 (m, 2H); 9,90 (s, 1H).

Um frasco de fundo redondo com 3- gargalos de 12 L foi carregado com /ra«s-2,5-dimetilpiperazina (767 g, 6,72 mol), o qual foi cristalizada a partir de tolueno para p.f.=l 15-119°C, e 600 mL de água. O frasco foi arrefecido num banho de gelo e uma solução de ácido metanossulfónico (1290 g, 13,4 mol) em 600 mL de água foi adicionada lentamente com agitação e arrefecimento para manter a temperatura abaixo de 40°C. A solução foi arrefecida para 20°C e foram adicionados 800 mL de etanol. Um funil de adição de 500 mL foi cheio com 60% de acetato de potássio aquoso a partir de um reservatório de 2L da solução, e acetato de potássio foi adicionado ao frasco da reacção para ajustar o pH para 4,0. -69- ίΜη

Um segundo funil de adição foi carregado com uma solução de cloroformato de etilo (642 mL, 6,71 mol) em 360 mL de tetrahidrofurano. As soluções de cloroformato de etilo e acetato de potássio foram simultaneamente adicionadas gota a gota com ajustamento da proporção para manter a solução de reacção a pH 4,0 ± 0,1, com arrefecimento como necessário para manter a temperatura a 25°C. Depois da adição do cloroformato de etilo estar completa, a reacção foi agitada durante 1 hora com adição contínua de solução de acetato de potássio para manter um pH de 4,0. Os solventes orgânicos foram removidos por destilação sob vácuo. Os solventes orgânicos foram removidos por destilação sob vácuo. A solução aquosa restante foi lavada com 1500 mL de acetato de etilo para remover qualquer impureza bis-carbamato. A lavagem acetato de etilo foi extraída com duas porções de 500 mL de ácido clorídrico a 1M para recuperar o produto desejado. Os extractos foram combinados com a solução aquosa original e o pH foi ajustado para 11 pela adição de hidróxido de sódio a 10M, com arrefecimento para manter a temperatura abaixo de 40°C. A solução aquosa foi extraída com duas porções de 1500 mL de acetato de etilo, os extractos combinados foram secos sobre sulfato de magnésio, e o solvente foi removido para dar 927 g (74%) etilo íra«s-2,5-dimetil-l-piperazinocarboxilato como um óleo amarelo.

Uma mistura de írans-2,5-dimetil-l-piperazinocarboxilato de etilo (643 g, 3,45 mol), brometo de alilo (328 mL, 3,80 mol), e carbonato de sódio (440 g, 4,15 mol) em 2500 mL de acetonitrilo foi aquecida ao refluxo durante 1,5 horas. A reacção foi arrefecida para a temperatura ambiente, filtrada, e o solvente removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em 4000 mL de diclorometano e lavado com duas porções de 500 mL de hidróxido de sódio a 1M. A solução de diclorometano foi seca sobre sulfato de magnésio e o solvente foi removido para dar 630 g (81%) de ?ra«5-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinocarboxilato de etilo como um óleo. -70- Η /ra«s-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinocarboxilato de etilo (630 g, 2,78 mol) foi adicionado a uma solução de peletes de hidróxido de potássio a 87% (2970 g, 46 mol) em 4300 mL de 95% etanol e foi aquecido ao refluxo durante 1,5 horas. A evolução de dióxido de carbono foi observada durante a primeira 0,5-1 hora de aquecimento. A reacção foi arrefecida abaixo da temperatura de refluxo e 2000 mL de tolueno foi cuidadosamente adicionado. O etanol foi removido por destilação azeotrópica a 105°C, enquanto eram adicionados uns 4000 mL adicionais de tolueno ao frasco de reacção durante o decorrer da destilação. Depois da recolha de 9000 mL de destilado, a reacção foi arrefecida até 100°C e 1000 mL de tolueno foram cuidadosamente adicionados. A solução foi lentamente arrefecida para 5°C e mantida a 5°C durante 30 minutos. A solução foi filtrada, e o bolo de filtro foi lavado com 1500 ml adicionais de tolueno. O filtrado foi lavado com 1000 mL de água, seco sobre sulfato de magnésio, e o solvente foi removido para dar 296 g (69%) de ínms-l-alil-2,5-dimetilpiperazina como um líquido escuro. RMN (300 MHz, DMSO-dô): δ 0,87 (d, J=6,3Hz, 3H); 0,92 (d, J=6,3Hz, 3H); 1,63 (t, J=llHz, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,30 (t, J=llHz, 1H); 2,6-2,8 (m, 4H); 3,33 (dd, J!=5Hz, J2=14Hz, 1H); 5,09 (d, J=87,Hz, 1H); 5,13 (d, J=14Hz, 1H); 5,8 (m, 1H).

Ácido di-p-toluilo-D-tartárico (Schweizerhall, Inc., South Plainfield, New Jersey) (1,25 Kg, 3,2 mol) foi dissolvido em etanol a 95% (16 L) quente (~60°C) em trans-1 -alil-2,5-dimetilpiperazina racémica (500 g, 3,2 mol) foi adicionado em várias porções (cuidado: exotérmico). A solução quente foi semeada com cristais do sal diastereoisomericamente puro (obtido a partir de resolução prévia em pequena escala) e arrefecido até à temperatura ambiente durante 23 horas. A solução foi lentamente agitada durante 2 dias à temperatura ambiente. O sal resultante foi recolhido por filtração, lavado duas vezes com etanol a 95%, e seco sob vácuo para dar 826,5 g de um sólido branco (47%). O -71 -i/M! processo foi preparado com uma segunda porção de ácido di-p-toluil-D-tartárico e ím//í-l-alil-2,5-dimetilpiperazina racémica para dar 869 g (50%). O total de 1695 g de sal foi dividido em três porções e cada porção foi recristalizada duas vezes da seguinte maneira. O sal foi dissolvido refluxando etanol a 95% (~2,7 L/100 g de sal), e aproximadamente metade do etanol foi removido por destilação. (Nota: agitação vigorosa foi necessária durante a destilação para evitar a cristalização na parede do vaso). A solução quente foi semeda com cristais do sal diastereomérico puro, arrefecida até à temperatura ambiente, e agitada lentamente durante 2 dias antes da recolha do sal por filtração. (Nota: uma subsequente experiência sugeriu que o tempo de cristalização pode ser reduzido desde 2 dias até 8 horas). A quantidade total recuperada foi de 1151 g. O sal foi dissolvido em 3 L de hidróxido de sódio aquoso a 2M, e a solução aquosa foi extraída com quatro porções de 1 L de diclorometano. Os extractos orgânicos foram combinados, secos sobre sulfato de sódio, e o solvente foi removido rotativamente (temperatura <20°C) para dar 293 g (29% baseado no peso racémico) de (2R,5S)-l-alil-dimetilpiperazina como um óleo transparente. [a]20D = -55,1° (Etanol abs., c = 1,2). A trifluoroacetamida do produto foi preparada com anidrido trifluoroacético e analisada por cromatografia de gás capilar quiral (Chraldex B-PH coluna, 20 m x 0,32 mm, Advanced Separation Technologies Inc., Whippany, NJ, 120°C) indicando uma enantiopureza de >99% ee (tempo de retenção do enantiómero desejado, 11,7 min; outro enantiómero, 10,7 min). (2R,5S)-l-alil-2,5-dimetilpiperazina (6,13 g), benzotriazole (4,79 g), e N-(3-fluorofenil)-3-formil-N-metilbenzamida (10,23 g) foram misturados em tolueno seco com uma gota de trietilamina. A mistura foi colocada num banho de óleo e mantida a 140°C (temperatura do banho). O frasco estava ligado a um sifão Dean-Stark para permitir a remoção azeotrópica da água, sob uma corrente - 72 - (/ΙΛ*Ι de azoto. A mistura foi aquecida ao refluxo durante 2-3 horas e a maioria do tolueno foi removido sob pressão reduzida. O produto bruto aduzido pode ser isolado por cristalização neste estádio para dar 3-(((2R,5S)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-( 1 H-benzotriazol-1 -il)metil)-N-(3-fluorofenil)-N-metilbenzamida como uma mistura de epímeros, mas devido à natureza sensível à água do aductor, é geralmente mais fácil utilizar o material em bruto para reacções subsequentes. (A mistura de reacção em tolueno é habitualmente satisfatória na fase seguinte).

Uma solução de 3-bromofenol (500 g, 2,89 mmol), terc-butilclorodimetilsilano (436 g, 2,89 mol), e imidazole (500 g, 7,22 mol) em 500 mL de dimetilformamida foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A solução de reacção foi deitada em 3000 mL de água e extraída com duas porções de 2000 mL de éter dietílico. Os extractos combinados de éter foram secos sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido para dar 846 g de 3-(bromofenoxi)-terc-butildimetilsilano como um líquido amarelo pálido. RMN (300 MHz, CDC13): Ô 0,2 (s, 6H); 1,0 (s, 9H); 6,75(m, 1H); 7,0 (br s, 1H); 7,1 (m, 2H). 3-(bromofenoxi).terc-butildimetilsilano (17,12 g) foi dissolvido em tetrahidrofurano seco (150 mL), e arrefecido para -78°C sob azoto. N-Butillítio em hexanos (23,88 mL de uma solução a 2,5M) foi adicionado lentamente à solução por meio de seringa. Enquanto agitava durante 40 minutos a -78°C, a solução tomou-se branca e espessa. A solução foi transferida por meio de uma agulha de extremidade dupla para um frasco contendo eterato de brometo de magnésio (16,5 g) em tetrahidrofurano (150 mL) e foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. O aductor benzotriazole em bruto anterior contendo primeiramente 3-(((2R,5S)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(lH-benzotriazol-l-il)metil)-N-(3-fluorofenil)-N-metilbenzamida foi dissolvido em -73-

Um tetrahidrofurano e adicionado a um reagente brometo de arilmagnésio acabado de preparar. A solução aqueceu ligeiramente durante a adição e tomou-se de uma cor castanho amarelada turva. Depois da agitação à temperatura ambiente durante 2 horas, ácido clorídrico aquoso a 0,5 M foi adicionado cuidadosamente até a solução atingir pH=6. O produto foi extraído com 250 mL de acetato de etilo e o solvente foi removido sob vácuo. O grupo de protecção terc-butildimetilsililo foi removido dissolvendo o resíduo em 175 mL de tetrahidrofurano e adicionando 85 mL de HC1 aquoso a 3N à temperatura ambiente. A solução aqueceu depois da adição de r ácido. A mistura foi agitada durante 40 minutos à temperatura ambiente. Eter dietílico foi adicionado, e a camada acídica aquosa foi separada. A camada aquosa foi lavada uma segunda vez com éter dietílico e ajustada para pH =8-9 utilizando solução aquosa de hidróxido de sódio. O produto foi extraído utilizando acetato de etilo. As porções de acetato de etilo foram combinadas, e lavadas com solução diluída de hidróxido de sódio para remover qualquer benzotriazole que permaneça. A camada orgânica foi então lavada com solução saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio, e evaporada sob pressão reduzida. O produto 810,85 g, 56%) foi recuperada como uma mistura de dois diastereoisómeros numa proporção de 91:9 favorecendo o desejado diastere-ómero, como determinado por análise HPLC. HPLC foi realizada numa coluna C-18 μ-Bondapak (125 Á, 3,9 x 300 mm, Waters Cromatography Division, Milipore Corporation, Milford, MA) utilizando 60% metanol e 40% acetato de amónio aquoso a 0,1M numa caudal de 1 mL/min. A mistura diastereomérica foi recristalizada a partir de acetato de etilo/hexano para dar (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3-fluorofenil)-N-metilbenzamida como um sólido branco cristalino (p.f. 144-145°C) em 99% de pureza isomérica (como determinado por HPLC). -74- Ι/(Λη RMN (200 ΜΗζ, DMSO-d6): δ 0,84 (d, J=6,0Hz, 3H); 0,97 (d, J=5,9Hz, 3H); 1,69 (dd, Ji=7,7Hz, J2=10,7 Hz, 1H); 2,01 (dd, J,=7,4 Hz, J2=10,7Hz, 1H); 2,28 (br d, J=8,3Hz, 1H); 2,40-2,52 (m, 2H); 2,67 (br d, J=10,5Hz, 1H); 2,82 (dd, Ji=7,6hz, J2=13,2 Hz, 1H); 3,17 (br d, J=14,0Hz, 1H); 3,34 (s, 3H); 4,80 (s, 1H); 5,10 (d, J= 10,1 Hz, 1H); 5,17 (d, J=17,3 Hz, 1H); 5,70-5,84 (m, 1H); 6,42 (d, J=7,lHz, 1H); 6,56 (s, 1H); 6,65 (d, J=8,3Hz, 1H); 6,90-7,32 (M, 9H); 9,31 (s, 1H).

Espectro de massa (CI-CH4) m/e: 488 (m + 1, 100%), 334 (39%), 153 (87%). [cx]20D = + 4,9° (etanol abs., c = 1,2). A amina livre foi dissolvida em etanol e titulada com cloreto de hidrogénio etanólico para pH 3,7, seguida da precipitação com éter dietílico a partir de diclorometano para dar o sal monohidrocloreto como um pó higroscópico branco.

Calculado para C3oH34N302F HC11,25 H20: C, 65,92; H, 6,92; N, 7,69; Cl, 6,49.

Encontrado: C, 66,07; H, 6,95; N, 7,53; Cl, 6,54. EXEMPLO 5 3-(Y aR)-q-( (2 S .5R)-4-alil-2,5 -dimetil-1 -piperazinil)-3 -hidroxi-benzil)-N-metil-N-(2.4.6-triclorofenil)benzamida N-Metil-2,4,6-tricloroanilina [RMN(200 MHz, CDC13): δ 2,82 (s, 3H); 5,11 (s, 1H); 7,46 (s, 2H);] foi preparada a partir de 2,4,6-tricloroanilina, acoplada com cloreto 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoilo, desprotegido e purificado pelos métodos descritos no Exemplo 2 para dar (+)-3-((aR)-ot-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-metil-N-(2,4,6-triclorofenil)benzamida -75- {/ί4η como um pó branco. RMN (200 MHz, DMSO-d6): δ 0,90 (d, J=6,l Hz, 3H); 0,98 (d, J=6,0Hz, 3H); 1,65 (dd, Ji=7,4Hz, J2=10,6Hz, 1H); 2,03 (dd, Ji=7,5Hz, J2=10,2Hz, 1H); 2,35 (d, J=ll,7Hz, 1H); 2,38-2,51 (m, 2H); 2,65 (br d, J=10,6Hz, 1H); 2,80 (dd, Ji=7,0Hz, J2=l3,3 Hz, 1H); 3,12 (m, 1H); 3,18 (s, 3H); 4,80 (s, 1H); 5,11 (d, J=11Hz, 1H); 5,18 (d, J=16,8 Hz, 1H); 5,66-5,87 (m, 1H); 6,48 (d, J=8,4Hz, 1H); 5,56 (s, 1H); 6,64 (d, J=8,6 hz, 1H); 7,17 (t, J=8,0Hz, 1H); 7,22-7,28 (m, 3H); 7,38 (s, 1H); 7,69 (d, J=2,2Hz, 1H); 7,72 (d, J=2,2Hz, 1H); 9,31 (s, 1H).

Espectro de Massa (C1-CH4) m/e: 572 (M+l, 14%), 153 (100%). EXEMPLO 6 3-ííaR)-a-((2S.5R)-4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxi-benzilVN-metil- N-(2-(trifluorometil)fenil)benzamida N-Metil-2-(trifluorometil)anilina [RMN (200MHz, DMSO-d^): δ 2,75 (s, 3H); 3,40 (s, 1H); 6,70 (t, J=8,0Hz, 1H); 6,94-7,16 (br m, 2H); 7,38 (d, J=7,3hz, 1H)] foi preparada a partir de 2-trifluorometil)anilina, acoplada com cloreto de 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-(terc-butildi-metilsililoxi)benzil)benzoilo, desprotegido e purificado pelos métodos descritos no Exemplo 2 para dar (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(2-(trifluorometil)fenil)benzamida como um pó amarelo. RMN (200 MHz, DMSO-de): δ 0,90 (d, J=6,0Hz, 3H); 0,97 (d, J=6,0hz, 3H); 1,64 (m, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,27 (br d, J=10,5Hz, 1H); 2,40-2,84 (m, 4H); 3,18 (br d, J=13,5Hz, 1H); 3,29 (s, 3H); 4,79 (s, 1H); 5,11 (d, J=10,2 Hz, 1H); 5,18 (d, J=17,0 Hz, 1H); 5,70-5,82 (m, 1H); 6,42 (d, J=7,6 Hz, 1H); 6,65 (d, J=7,7hz, 1H); 6,67 (s, 1H); 7,04-7.83 (m, 9H); 9,32 (s, 1H);

Espectro de massa (C1-CH4) m/e: 538 (M+l, 82%), 384 (13%), 153 (100%). -76- [/Μ* EXEMPLO 7 (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil- N-(4-fluorofenil)benzamida 4-Fluoro-N-etilamina [RMN (200 MHz, DMSO-de): δ 1,25 (t, J=7,l Hz, 3H); 3,12 (q, J=7,lHz, 2H); 3,24 (br s, 1H); 6,57 (dd, ^=4,5Hz, J2= 9,0 Hz, 2H); 6,90 (t, J=8,9Hz, 2H)] foi preparada a partir de 4-fluoroanilina e anidrido acético pelos métodos descritos no Exemplo 2. A anilina foi utilizada a partir de N-(4-fluorofenil)-3-formil-N-etilbenzamida [RMN (200 MHz, DMSO-de): δ 1,11 (t, J=7,0Hz, 3H); 3,88 (q, J=7,0Hz, 2H); 7,10 (t, J=8,6Hz, 2H); 7,21-7,35 (m, 2H); 7,46 (q, J=7,4Hz, 1H); 7,56 (d, J=7,2Hz, 1H); 7,83 (m, 2H); 9,93 (s, 1H)] pelos métodos descritos no Exemplo 4. (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil-N-(4-fluorofenil)benzamida foi obtida como um sólido cristalino a partir de N-(4-fluorofenil)-3-formil-N-etilbenzamida por meio de 3-(((2R,5S)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(lH-benzotriazol-l-il)metil)-N-etil-N-(4-fluorofenil)benzamida em bruto utilizando os processos descritos no Exemplo 4. A recristalização final foi executada em acetoni trilo. RMN (2020 MHz, DMSO-dé): δ 0,91 (d, J=6,l Hz, 3H); 0,98 (d, J=6,0Hz, 3H); 1,08 (t, J=7,0Hz, 3H); 1,71 (dd, Ji=7,0Hz, J2=ll,3Hz, 1H); 2,05 (dd, J]= 7,2Hz, J2=10,8Hz, 1H); 2,31 (d, J=ll,4Hz, 1H); 2,36-2,57 (m, 2H); 2,69 (dd, J,=2,2Hz, J2=10,7Hz, 1H); 2,85 (dd, Ji=7,0Hz, J2=13,9Hz, 1H); 3,18 (dd, J,=5,3Hz, J2=13,9Hz, 1H);3,84 (q, J=7,0Hz, 2H); 4,78 (s, 1H); 5,11 (d, J=10,0Hz, 1H); 5,18 (J=16,4Hz, 1H); 5,65-5,88 (m, 1H); 6,46 (d, J=7,4Hz, 1H); 6,58 (s, 1H); 6,65 (d, J=8,lHz, 1H); 7,01-7,27(m, 9H); 9,33 (s, 1H);

Espectro de Massa (C1-CH4) m/e 502 (M+l, 90%), 348 (15%), 153 (100%).

[cc]2°d = + 6,30° (abs.etanol, c = 1,1). 77- (/Mj A amina livre (0,313 g) foi dissolvida em etanol e titulada com cloreto de hidrogénio etanólico para pH 3,95 seguido da precipitação com éter dietílico a partir de diclorometano para dar 0,263 g de sal monohidrocloreto como um pó higroscópico branco.

Calculado para C3iH36N302F HC1 H20: C, 66,95; H, 7,07; N, 7,56; Cl, 6,38.

Encontrado: C, 66,97; H, 7,10; N, 7,47; Cl, 6,41. EXEMPLO 8 (+1-3-(( aRl-q-( (2 S. 5RV 4-alil-2.5-dimetil-1 -piperaziniD-3 -hi droxibenzil)-N-(2-fluorofenill-N-metilbenzamida 2-Fluoro-N-metiIanilina [RMN (200 MHz, DMSO-ck): δ 2,89 (s, 3H); 3,87 (br s, 1H); 6,59-6,78 (m, 2H); 6,91-7,10 (m, 2H)] foi preparada a partir de 2-fluoroanilina, acoplada com cloreto de 3-((aR)-oc-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoilo, desprotegida e purificada pelos métodos descritos no Exemplo 2 para dar 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(2-fluorofenil)-N-metilbenza-mida como um pó branco. RMN (200 MHz, DMSO-de): δ 0,92 (d, J=6,lHz, 3H); 0,99 (d, J=6,lHz, 3H); 1,69 (dd, Ji=6,7Hz, J2=10,8Hz, 1H); 2,05 (dd, ^=7,6Hz, J2=11,1Hz, 1H); 2,30 (br d, J=ll,5Hz, 1H); 2,41-2,52 (m, 2H); 2,68 (br d, J=10,4Hz, 1H); 2,83 (dd, J!=7,2Hz, J2=13,8Hz, 1H); 3,20 (dd, Ι,=6,1Ηζ, J2=14,2Hz, 1H); 3,30 (s, 3H); 4,82 (s, 1H); 5,12 (d, J=9,7Hz, 1H); 5,18 (d, J=15,8 Hz, 1H); 5,72-5,86 (m, 1H); 6,45 (d, J=7,4Hz, 1H); 6,56 (s, 1H); 6,66 (d, J=8,0Hz, 1H); 7,05-7,38 (m, 9H); 9,33 (s, 1H).

Espectro de Massa (C1-CH4) m/e: 488 (M+l, 100%), 334 (45%), 153 (86%). [a]2°o = + 2,02° (Etanol abs., c = 1,1). A amina livre foi dissolvida em etanol e -78- titulada com cloreto hidrogénio etanólico para pH 4,0 seguido de precipitação com éter dietílico a partir de diclorometano para dar sal monohidrocloreto como um pó higroscópico beije.

Cale. para C30H34N3O2F HC10,75H2O: C, 67,03; H. 6,84; N, 7,82; Cl 6,59.

Encontrado: C, 67,05; H, 6,86; N, 7,77; Cl, 6,67. EXEMPLO 9 3-(YaRVa-(Y2S.5RV4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzilVN-etil-N- (3-fluorofenil)benzamida 3-Fluoro-N-etilanilina [RMN (DMSO-d6, 200MHz): δ 1,18 (t, J=7,2 Hz, 3H); 3,02 (dq, .1,=7,2hz, J2=7,2Hz, 2H); 5,86 (br m, 1H); 6,46-6,42 (m, 3H); 7,07 (q, J=7,8Hz, 1H)] foi preparada a partir de 3-fluoroanilina e anidrido acético, acoplado com cloreto de 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(terc-btuildimetilsililoxi)benzil)benzoilo, desprotegido e purificado pelos métodos descritos no Exemplo 2 para dar (+)-3-((aR)-ot-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil-N-(3-fluorofenil)benzamida como um sólido branco. RMN (DMSO-dé, 200MHz): δ 0,92 (d, J=6Hz, 3H); 0,96 (d, J=6Hz, 3H); 1,05 (t, J=7Hz, 3H); 1,7 (m, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,3 (m, 1H); 2,5 (m, 2H); 2,7 (m, 1H); 2,9 (m, 1H); 3,2 (m, 1H); 3,9 (q, J=7Hz, 2H); 4,8 (s, 1H); 5,1 (d, J=10Hz, 1H); 5,2 (d, J=16Hz, 1H); 5,8 (m, 1H); 6,45 (d, J=8Hz, 1H); 6,6 (s, 1H); 6,65 (d, J=8Hz, 1H); 6,9 (d, J=8Hz, 1H); 7,0-7,2 (m, 3H); 7,2-7,4 (m, 5H); 9,35 (s, 1H). [a]20D = + ,43o (abs EtOH, c= 3,9).

Cale. para C3,H36FN302HC10,5H2O: C, 68,06; H, 7,00; N, 7,68; Cl, 6,48.

Emcontrado: C, 68,10; H, 7,04; N, 7,63; Cl, 6,42. 79- (Μη

Espectro de Massa (C1-CH4) m/e: 502 (M+l, 39%), 501 (M, 9%), 348 (29%), 153 (100%). EXEMPLO 10 (+)-3-((aR)-g-í(2S.5R)-4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinilV3-hidroxibenzil)-N-(2- fluorofenil)-N-propilbenzamida 2-Fluoro-N-propilanilina [RMN (DMSO-d^, 200 MHz): δ 0,93 (t, J=7,4hz, 3H); 1,59 (m, 2H); 3,04 (q, 6,5Hz, 2H); 5,33 (br m, 1H); 6,47-6,58 (m, 1H); 6,70 (t, J=8,lHz, 1H); 6,93-7,05 (m, 2H)] foi preparada a partir de 2-fluoroanilina e anidrido propiónico, acoplado com cloreto de 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoilo, desprotegido e purificado pelos métodos descritos no Exemplo 2 para dar (+)-3-((aR)-cc-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(2-fluorofenil)-N-propilbenzamida como um sólido branco. RMN (DMSO-dé, 200 MHz): δ 0,9-1,05 (m, 9H); 1,5 (m, 2H); 1,7 (m, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,3 (m, 1H); 2,5 (m, 2H); 2,7 (m, 1H); 2,85 (m, 1H); 3,2 (m, 1H); 3,7 (m, 2H); 4,8 (br s, 1H); 5,1 (d, J=10Hz, 1H); 5,2 (d, J=16Hz, 1H); 5,8 (m, 1H); 6,5 (d, J=8Hz, 1H); 6,6 (s, 1H); 6,65 (d, J=8Hz, 1H); 7,0-7,4 (m, 9H); 9,3 (s, 1H). [a]20p = + 1,8 0 (etanol abs., c = 2,8).

Clc. Para C32 H38FN302 HC1 0,25 H20: C, 69,05; H, 7,15; N, 7,55; Cl,. 6,37.

Encontrado: C, 68,94; H, 7,19; N, 7,57; Cl, 6,41.

Espectro de Massa (C1-CH4) m/e: 516 (M + 1, 93%), 515 (M, 29%), 362 (26%), 153 (100%). EXEMPLO 11 - 80 - l/^Aj (+)-3-((aRVa-((2S.5RV4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinilV3-hidroxibenzil)-N-etil- N-Q-fluorofeninbenzamida 2-Fluoro-etilanilina [RMN (DMSO-d^, 200MHz): δ 1,16 (t, J=7,lHz, 3H); 3,11 (dq, J,=7,2hz, J2=6,5hz, 2H); 5,30 (br m, 1H); 6,48-6,59 (m, 1H); 6,70 (t, J=8,5Hz, 1H); 6,92-7,06 (m, 2H);] foi preparada a partir de 2-fluoroanilina e anidrido acético, acoplada com cloreto de 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoilo, desprotegido e purificado pelos métodos descritos no Exemplo 2 para dar (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil-N-(2-fluoro-fenil)benzamida como uma cera amarela clara. RMN (DMSO-de, 200 MHz): δ 0,9 (d, J=6Hz, 3H); 0,95 (d, J=6Hz, 3H); 1,1 (t, J=7Hz, 3H); 1,7 (m, 1H); 2,1 (m, 1H); 2,3 (m, 1H); 2,5 (m, 2H); 2,7 (m, 1H); 2,85 (m, 1H); 3,8 (br m, 2H); 4,8 (br s, 1H); 5,1 (d, J=10Hz, 1H); 5,2 (d, J=17Hz, 1H); 5,8 (m, 1H); 6,45 (m, 1H); 6,5 (s, 1H); 6,65 (m, 1H); 7,0-7,4 (m, 9H); 9,35 (s, 1H).

[a]20D = + 3,4° (etanol abs., c = 2,04).

Cale. para C31H36FN3O2 HC1 H20: C, 66,95; H, 7,07; N, 7,56; Cl, 6,38.

Encontrado: C, 66,61; H, 7,14; N, 7,53; Cl, 6,40.

Espectro de Massa (C1-CH4) m/e : 502 (M + 1, 89%), 501 (M,17%), 348 (36%), 153 (100%). EXEMPLO 12 (+V3-(YaRVa-((2S.5RV4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinil,)-3-hidroxibenzil)-N-(3- fluorofenill-N-propilbenzamida -81 -

Uu, ^ U^y 3-Fluoro-N-propilanlina [RMN (DMSO-d^, 200 MHz): δ 0,96 (t, J=7,3Hz, 3H); 1,56 (m, 2H); 2,97 (q, 6,9Hz, 2H); 5,93 (br m, 1H); 6,22-6,43 (m, 3H); 7,06 (q, J=7,8Hz, 1H)] foi preparada a partir de 3-fluoroanilina e anidrido propiónico, acoplado com cloreto de 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzil)benzoilo, desprotegido e purificado pelos métodos descritos no Exemplo 2 para dar (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3-fluorofenil)-N-propilbenzamida como um sólido beije claro. RMN (DMSO-dô, 200 MHz): δ 0,9-1,05 (m ,9H); 1,5 (m, 2H); 1,7 (m, 1H); 2,05 (m, 1H); 2,3 (m, 1H); 2,5 (m, 2H); 2,7 (m, 1H); 2,85 (m, 1H); 3,8 (m, 2H); 4,8 (s, 1H); 5,1 (d, J=10Hz, 1H); 5,2 (d, J=16Hz, 1H); 5,8 (m, 1H); 6,45 (d, J=8Hz, 1H); 6,6 (s, 1H); 6,7 (d, J=8Hz, 1H); 6,9 (d, J=8Hz, 1H); 7,0-7,4 (m, 9H); 9,3 (s, 1H).

[cc]2°d = + 4,3 0 (etanol abs., c = 1,5).

Cale. para C32H38FN3O2 HC10,75 H20: C, 67,95; H, 7,22; N. 7,43; Cl, 6,27.

Encontrado: C, 67,72; H, 7,19; N, 7,49; Cl, 6,30.

Espectro de massa (CI-CH4) m/e : 516 (M + 1, 100%), 515 (M, 22%), 362 (30%), 153 (73%). EXEMPLO 13 3-í(aR)-a-((2S.5R)-4-alil-2.5-dimetil-l-piperazinil')-3-(N-(3-fluorofenil)-N-metilcarbamoiDbenziPfenil monofosfato (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxi-benzil)-N-(3-fluorofenil)-N-metilbenzamida (Exemplo 4 0,05 g, 1,03 mmol) foi dissolvido em piridina seca(8 mL) sob uma atmosfera de azoto. A solução foi arrefecida para -10°C num banho de gelo e metanol. Cloreto de fosforilo (394 mg) foi adicionado lentamente à solução fria. A reacção foi deixada aquecer até à -82- l/ίΛη temperatura ambiente e foi agitada sob atmosfera de hidrogénio.

Foi adicionada água (2 mL) gota a gota à solução. A solução foi agitada durante 15 minutos à temperatura ambiente e todos os voláteis foram removidos sob pressão reduzida. Espectrometria de massa de pulverização de ião do resíduo indicou que o sólido em bruto é na maioria o desejado 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(N-(3-fluorofenil)-N-metilcarbamo-il)benzil)fenil monofosfato (ISMS pico M+H = 568,1). O fosfato pode ser isolado como o sal monoamónio por meio de cromatografia de permuta iónica. EXEMPLO 14 (+)-3-((aR)-a-(( 2 S. 5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3 -metoxibenzilVN-f 3-fluorofenilVN-metilbenzamida 3-(((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1-piperazinil)-3-(l H-benzotriazol-1-il)metil)-N-(3-fluorofenil)-N-metilbenzamida em bruto foi preparada a partir de (2R,5S)-l-alil-2,5-dimetilpiperazina (1,89 g), benzotriazole (1,39 g), e N-(3-fluorofenil)-3-formil-N-metilbenzemida (3,0 g) em tolueno como descrito no Exemplo 4. 3-Bromoanisole (4,36 g) foi dissolvido em tetrahidrofurano seco (40 mL), e arrefecido para -78°C sob azoto. N-Butillítio em hexanos (9,2 mL de solução a 2,5M) foi adicionado lentamente por meio de seringa à solução. Enquanto agitava durante 25 minutos a -78°C, a solução tomou-se branca e um tanto espessa. A solução foi transferida por meio de uma agulha de extremidade dupla para um frasco contendo eterato de brometo de magnésio (6,02 g) em tetrahidrofurano (60 mL) e foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. O 3-(((2R,5S)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-( 1 H-benzotriazol-1 -il)metil)-N-(3- -83-

fluorofenil)-N-metilbenzamida em bruto em tolueno foi adicionado ao reagente brometo de arilmagnésio acabado de preparar. A solução aqueceu ligeiramente durante a adição e tomou-se de uma cor castanho amarelado turvo. Depois da agitar à temperatura ambiente durante 2,5 horas, ácido clorídrico aquoso a 0,5M foi adicionado cuidadosamente até a solução atingir pH=5. O produto foi extraído com 100 mL de acetato de etilo e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi retirado em 25 mL de ácido clorídrico aquoso a 3N à temperatura ambiente, foi adicionado éter etilo, e a camada aquosa foi lavada uma segunda vez com éter dietílico e ajustada para pH =10 utilizando solução aquosa de hidróxido de sódio. O produto foi extraído com acetato de etilo. As porções acetato de etilo foram combinadas, lavadas com solução diluída de hidróxido de sódio para remover qualquer benzotriazole restante, lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de sódio, e evaporadas sob pressão reduzida. O produto em bmto foi purificado por cromatografía numa coluna de gel de sílica utilizando etanol a 1% em diclorometano como eluente para dar 1,71 g de (+)-3-((aR)-<x-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetiI-l-piperazinil)-3-metoxibenziI)-N-(3-fluorofeml)-N-metilbenzamida como um sólido branco cristalino em pureza isomérica maior do que 98% (como determinado por HPLC, executado numa coluna C-18 m-Bondapak (125 A , 3,9 x 300 mm, Waters Chromatography Division, Milipore Corporation, Milford, massachusetts) utilizando 70% metanol e 30% acetato de amónio aquoso a 0,1M numa proporção de corrente de 1 mL/min.). RMN (200 MHz, DMSO-dé): δ 0,91 (d, J=6,0Hz, 3H); 1,00 (d, J=6,2Hz, 3H); I, 69 (dd, J, =7,1 Hz, J2=11,0 Hz, 1H); 2,05 (dd, J,=7,5Hz, J2=l 1,0Hz, 1H); 2,31 (br d, J=9,3 Hz, 1H); 2,42-2,53 (m, 2H); 2,69 (br d, J=ll,2Hz, 1H); 2,85 (dd, J, =7,0Hz, J2=14,l Hz, 1H); 3,18 (dd, ^=5,5Hz, J2=13,5Hz, 1H); 3,37 (s, 3H); 3,74 (s, 3H); 4,88 (s, 1H); 5,12 (d, J=10,0Hz, 1H); 5,18 (d, J=15,7Hz, 1H); 5,70-5,83 (m, 1H); 6,58 (d, J=7,6Hz, 1H); 6,70 (s, 1H); 6,84 (d, J=8,2Hz, 1H); 6,94 (t, J=7,8 Hz, 1H); 7,02-7,14 (m, 2H); 7,18-7,34 (m, 6H); 9,31 (s, 1H); -84-

Espectro de massa (C1-CH4) m/e: 502 (m, + 1, 100%), 348 (81%), 153 (12%).

[α] V + 7,73° (abs. Etanol, c=l,l). A amina livre foi dissolvida em etanol e titulada com cloreto de hidrogénio etanólico para pH 4,0 seguido da precipitação com éter dietílico a partir de diclorometano para dar 0 sal monohidrocloreto como um pó higroscópico amarelo claro.

Cale. para C3,H36N302F HC10,5H2O: C, 68,06; H, 7,00; N, 7,68; Cl, 6,48.

Encontrado: C, 68,13; H, 7,12; N, 7,55; Cl, 6,35. EXEMPLO 15 (+V3-( (qRV a-(Y2S.5RV4-alil-2.5-dimetil-1 -piperazinilV 3-metoxibenzil)-N-etil-N-(4-fluorofenil)benzamida O composto preparado a partir de 3-(((2R,5S)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3 -(1 H-benzotriazol-1 -il)metil)-N-etil-N-(4-fluorofenil)benzamida em bruto (Exemplo 7, in fra) e 3-bromoanisole pelos métodos descritos no Exemplo 4. RMN (200 MHz, DMSO-d6): δ 0,91 (d, J=6,2Hz, 3H); 0,99 (d, J=6,3Hz, 3H); 1,08 (t, J=7,0Hz, 3H); 1,71 (dd, 1,=7,0Hz, J2=ll,lHz, 1H); 2,03 (dd, J,=7,lHz, J2= 10,9Hz, 1H); 2,31 (d, J=ll,2hz, 1H); 2,40-2,57 (m, 2H); 2,67 (d, J=ll,5hz, 1H); 2,84(dd, 1,=6,6¾ J2=13,9Hz, 1H); 3,17 (dd, J,=5,5Hz, J2=13,9Hz, 1H); 3,74 (s, 3H); 3,83 (q, J=7,0Hz, 2H); 4,83 (s, 1H); 5,11 (d, J=10,2Hz, 1H); 5,18 (d, J=16,4Hz, 1H); 5,63-5,85 (m, 1H); 6,60 (d, J=7,4hz, 1H); 6,71 (s, 1H); 6,84 (d, 8,2Hz, 1H); 7,02-7,28 (m, 9H).

Espectro de massa (C1-CH4) m/e: 516 (M + 1, 38%), 362 (100%), 153 (16%). EXEMPLO 16

-85- [/MJ

Compostos seleccionados do presente invento, identificados em seguida com referência aos exemplos de síntese aqui referidos, foram avaliados pela actividade receptora opióide in vitro em vários sistemas receptores, incluindo agonismo ao receptor delta no canal deferente do rato (Mouse Vas Deferent ED50), e agonismo ao receptor mu no intestino do porquinho da índia (Guinea Pig Ileum ED50).

Os processos de ensaio utilizados para tais determinações da actividade receptora são estabelecidos em seguida.

Bioensaios In vitro: Canais deferentes foram removidos dos ratos e suspensos entre eléctrodos com 0,5 g de tensão em câmaras de banho de órgãos contendo um tampão Krebs da seguinte composição (milimolar): NC1, 118; KC1, 4,75; CaCl2, 2,6; KH2PO4, 1,20; NaHCC>3, 24,5; e glucose, 11. O tampão foi saturado com 95% O2/5% C02 e mantido a 37°C. Os tecidos foram estimulados com voltagem supramáxima com trens de impulsos de 10Hz para 400 msec; f intervalos de trem de 10 segundos; e 0,5 msec duração do impulso. íleos intactos (cerca de 3 cm comprimento) foram removidos do porquinho da índia e suspensos com lg de tensão numa câmara de banho como descrito para os canais deferentes. O tampão Krebs modificado continha também MgS04 (1,20 mM). Os íleos foram estimulados com impulso eléctricos de onda quadrada de 0,1 Hz, 0,5 msec duração de pulsação em voltagem supramáxima quiral. A percentagem de inibição das contracções induzidas electricamente foram determinadas para os compostos em concentrações cumulativas variáveis. Os valores ED50 foram explorados a partir de curvas mostrando a concentração de dosagem assinalados contra a resposta (J. A. H. Lord, A.A. Waterfield, J. Hughes, H, W. Korterlitz, Nature 267, 495 (1997)).

Os resultados são mostrados no Quadro A seguinte. -se- (*η

Quadro A

Actividade a Receptora Opióide In Vitro Receptor delta do Recentor-Mu do Exemplo do canal deferente do Porquinho da índia rato íleo ED50 (nM) 2 0,35 (12) 0,67 (8) 4 0,47 (8) 3,3 (8) 7 0,39(11) 4,0 (4) 8 0,39 (4) 4,4 (4) a Valores são a média de um número (n) de experiências. EXEMPLO 17

Actividade analgésica foi avaliada pelo ensaio em ratos com apertos na cauda (machos estirpe Sprague-Dawley CD, peso aproximadamente de 300 g) depois de injecção intravenosa (i.v.) na veia da cauda. Um grupo de 6 a 8 animais foi injectado i.v. com solução de composto estéril 5% dextrose numa concentração de 1-5 mg/mL. Cinco minutos depois da injecção, um grampo de artéria (Fisher Scientific Co., fórceps de auto-bloqueamento da artéria, catalogo # 08-905) foi colocado na cauda a cerca de uma polegada da extremidade da cauda para induzir pressão nociceptiva durante uma curta duração (máximo de 20 segundos). A resposta nociceptiva foi julgada por qualquer sinal de desconforto, tal como corrida, guinchos, ou andando à volta para morder a cauda. A curva de dose-resposta foi assinalada para cada composto. A potência analgésica (meia dose efectiva máxima, ED50) foi determinada pela dose à qual metade dos animais não mostra qualquer resposta nonciceptiva à pressão do grampo na

87 " {/MJ artéria durante 20 segundos. Doses antinociceptiva ED50 foram 0,03 mg/Kg para os compostos dos Exemplos 4 e 7.

Fomulacões Farmacêuticas

Nos seguintes Exemplos de formulação, o “Ingrediente Activo” pode ser qualquer composto do invento. EXEMPLO 18

Formulação de comprimidos 4

As seguintes formulações A, B e C são preparadas por granulação húmida dos ingredientes com uma solução de povidona, seguida da adição do estereato de magnésio e compressão

Formulação A

Mg/comprimido Mg/cmprimido (a) Ingrediente Activo 100 100 (b) Lactose B.P. 210 26 (c) Povidona B.P. 15 9 (c) Glicolato de Amido 20 12 de sódio (e) Estereato de 5 3 Magnésio 350 150 -88-

Formulacão B

Mg/comprimido Mg/comprimido (a) Ingrediente Activo 100 100 (b) Lactose 150 - (c) Activel PH 101 60 26 (d) Povidona B.P. 15 9 (e)Glicolato de amido de 0 12 sódio (f) estereato de Magnéiso 5 3 350 150 Formulação C Mg/comprimido Ingrediente activo 100 Lactose 200 Amido 50 Povidona 5 Estereato de magnésio 4 359

As seguintes formulações, D e E, são preparadas pela compressão directa dos ingredientes misturados.

Formulação D

Ingrediente activo

Mg/ comprimido 100 -89- [/Λ&Ι

Amido Pregelatinisado NF 15 50 150

Formulação E

Ingrediente Activo Lactose Avicel

Mg/comprimido 100 150 100 350

Formulação F (Formulação de libertação controlada) A formulação é preparada por granulação húmida dos seguintes ingredientes com uma solução de povidona seguida da adição de estereato de magnésio e compressão. M g/comprimido (a) Ingrediente Activo 500 (b) Hidroxipropilmetilcelulose 112 (Methocel K4M Premium) (c) Lactose B.P. 53 (d) Povidona B.P.C. 28 (e) Estereato de Magnésio 7 500 A libertação de droga tem lugar durante um período de cerca de 6-8 horas e está completa depois de 12 horas. -90- Ι/Αη EXEMPLO 19

Formulações para cápsulas Formulação A

Uma formulação para cápsula é preparada pela mistura de ingredientes da Formulação D no Exemplo 18 anterior e enchimento de cápsulas de gelatina dura de duas partes.

Formulação B

Mg/cápsula (a) Ingrediente activo 100 (b) Lactose B.P. 143 (c) Glicolato de Amido de sódio 25 (d) Estereato de magnésio 2 270

As cápsulas são preparadas pela mistura dos ingredientes anteriores e enchimento em cápsulas de gelatina dura de duas partes.

Formulação C

Mg/cápsula (a) Ingrediente activo 100 (b) Macrogel 4000 BP 350 450

As cápsulas são preparadas fundindo o Macrogel 4000 BP, dispersando o ingrediente activo no produto fundido e enchimento do produto fundido em -91 - Í/U#i cápsulas de gelatina dura de duas partes. Formulação D Me/cánsula Ingrediente activo 100 Lecitina 100 Óleo Araquis 100 300

As cápsulas são preparadas pela dispersão do ingrediente activo na lecitina e óleo araquis e enchimento da dispersão nas cápsulas de gelatina macia e elástica.

Formulação E (Cápsula de Libertação Controlada) A seguinte formulação de cápsula de libertação controlada é preparada extrudindo os ingredientes (a), (b) e (c) utilizando um extrusor, seguido da esferonização do extrudido e secagem. As pílulas secas são então revestidas com membrana de libertação controlada (d) e metidas em cápsulas de gelatina dura de duas partes. Με/cáDsula (a) Ingrediente Activo 250 (b) Celulose Microcristalina 125 (c) Lactose BP 125 (d) Etilcelulose 13 513 -92-

EXEMPLO 20

Formulação Iniectável Formulação A

Ingrediente activo Solução ácido clorídrico, 0,1M Solução hidróxido de sódio Água estéril 5,0 mg q.s. para pH 4,0 até 7,0 q.s. para pH 4,0 até 7,0 q.s. até 10 ml O ingrediente activo é dissolvido na maioria da água (35°-40°C) e o pH ajustado para entre 4,0 e 7,0 utilizando o ácido clorídrico ou o hidróxido de sódio como for apropriado. A porção é então tomada volumosa com a água e filtrada através de um filtro microporoso estéril para um frasco estéril de vidro âmbar de 10 ml e selado com tampas seladas.

Formulação B

Ingrediente Activo 12,5 mg

Tampão de fosfato pH7, livre de q.s. até 25 ml pirogénio, estéril EXEMPLO 21

Injecção intramuscular 4,0 mg 0,10 g

Ingrediente Activo Álcool Benzílico -93- [/ΜΊ Glicofural r Agua para injecção 1,45 g q.s. até 4,00 ml O ingrediente activo é dissolvido no glicofural. O álcool benzílico é então adicionado e dissolvido, e é adicionada água a 4ml. A mistura resultante é filtrada através de um filtro microporoso e selada em frascos estéreis de vidro âmbar.

Xarone EXEMPLO 22 Ingrediente Activo 0,025 g Solução Sorbitol 0,10 g Glicerol 2,00 g Benzoato de Sódio 0,005 g Sabor, pêssego 17,42,3169 0,0125 ml Agua Purificada q.s.até 5,00 ml O ingrediente activo é dissolvido numa mistura de glicerol e a maioria da água purificada. Uma solução aquosa da solução de benzoato é então adicionada à solução, seguida da adição do sorbitol e finalmente o aromatizante. O volume é feito com água purificada e bem misturada. -94-

Uuj EXEMPLO 23

Supositório Mg/supositório

Ingrediente Activo 30

Gordura Dura, BP (Witepsol Hl5 - 1970 Dynamit Nobel) 2000

Um quinto do Witepsol Hl5 é posto num recipiente com uma camisa de vapor de água a 45°C no máximo. O ingrediente activo é peneirado através de uma peneira de 200 mm e adicionado à base derretida, com mistura, utilizando um filtro Silverson equipado com um cabeça de corte, até ser conseguida uma dispersão suave. Mantendo a mistura a 45°C, o restante Witepsol Hl5 é adicionado à suspensão e agitada para assegurar uma mistura homogénea. Toda a suspensão é passada através de um crivo em aço inoxidável de 250 mm e, com agitação contínua, e deixada arrefecer até 40°C. A uma temperatura de 38°C até 40°C, 2,0 g da mistura é metida em moldes de plástico adequados de 2 ml. Os supositórios são deixados arrefecer até à temperatura ambiente. EXEMPLO 24 É em seguida estabelecido numa formulação ilustrativa para pessários compreendendo pelo menos um dos compostos diarilmetilo piperazina do presente invento.

Pessários

Mg/pessário

Ingrediente Activo Dextrose Anidrato 30 490 -95- ^*7 Amido de Batata 473 Estereato de magnésio 7 1000

Os ingredientes anteriores são misturados directamente e os pessários são preparados por compressão directa da mistura resultante. EXEMPLO 25 São em seguida estabelecidas formulações ilustrativas nas quais os compostos do invento podem ser utilmente empregues, incluindo formulações nas formas de dosagem das suspensões orais, injectáveis, suspensões de nebulização, formulações de aerosol, formulações de inalação de pó, e gotas nasais.

Comprimido

Composto de fórmula (I) 25,0 mg Lactose BP 48,5 Celulose Microcristalina BP (“Avicel pH 101”) 10,0 mg Hidroxipropilo substituído com pouca celulose BP (“LHPC LH-11”) 10 mg Glicolato de Amido de Sódio BP (Explotab”) 3 mg Povidona BP (“K30”) 3,0 mg Estereato de Magnésio BP 0,5 mg 100,0 mg -96-

Suspensão Oral

Composto de Fórmula (I) 50 mg Avicel RC 591 75 _ Xarope de Sucrose 3,5 ml Metilhidroxibenzoato 5 mg Cor 0,01 % p/v Aromatizante de cereja 0,1% v/v Tween 80 0,2% v/v Agua Até 5 ml

Suspensão Injectável Composto de Fórmula (I) 1,5 mg Polivinilpirrolidona (PVP) 170 mg Tween 80 0,2% v/v Metilhidroxibenzoato 0,1% p/v Água para injecção Até 3 ml Formulação de cápsula Composto de fórmula (I) 1,5 mg Amido 1500 150 mg Estereato de magnésio 2,5 mg

Encher uma cápsula de gelatina dura com a formulação descrita anteriormente. -97- Suspensão Dara Nebulizacão Composto de Fórmula (I), estéril 1,0 mg r Agua para injecção Até 10,0 ml

Dispersar o composto de fórmula (I) na água para injecção, como previamente esterilizada num recipiente estéril. Encher ampolas de vidro estéril, 10 ml/ampola sob condições estéreis, e selar cada ampola por fusão do vidro.

Formulação Aerosol

Composto de fórmula (I), micronizado Aerosol propelante 1,0 mg até 5,0 ml

Suspender o composto micronizado de fórmula (I) no propelante aerosol. Encher latas de aerosol com esta suspensão, 5 ml/lata sob pressão, através de um orifício válvula. Inalação de Pó Composto de Fórmula (I), micronizado 1,0 mg Lactose 29,0 mg

Triturar e misturar o composto micronizado de fórmula (I) com lactose. Encher os invólucros da cápsulas de gelatina dura com a mistura de pó resultante, 30 mg por cápsula. -98-

Uuj

Gotas Nasais 20.0 mg 10.0 mg Até 10,0 ml

Composto de Fórmula (I) Metilhidroxibenzoato r

Agua para injecção

Dispersar o composto de fórmula (I) e metilhidroxibenzoato na água para a injecção. Encher frascos de gotas adequados com esta suspensão, 10 ml/frasco, e fechar com segurança o frasco de gotas e tampa do frasco EXEMPLO 26. A seguinte formulação pode ser utilizada para aplicações de microinfusão de formulações contendo pelo menos um composto do invento como um componente ingrediente activo.

Formulação de Microinfusão 10 mg 16 g q.s. até pH 4,0 até 7,0 q.s. até pH 4,0 até 7,0 q.s. até 20 ml

Ingrediente Activo Cloreto de sódio

Solução de ácido clorídrico,0,lM Solução de hidróxido de sódio, 0,1M r

Agua estéril O ingrediente activo e cloreto de sódio são dissolvidos na maioria da água (35°-40°C) e o pH é ajustado até entre 4,0 e 7,0 utilizando o ácido clorídrico ou hidróxido de sódio como for apropriado. O banho é então tomado volumoso com a água e filtrado através de um filtro microporoso estéril para um -99- Ι/Αη frasco estéril de vidro âmbar de 20 ml e selado com fecho estéril e sobre vedação. EXEMPLO 27

Administração Transdérmica

Composições que compreendem compostos de fórmula (I) como um ingrediente activo podem ser utilizadas em dispositivos de administração transdérmica tais como emplastros transdérmicos.

Os emplastros transportando ou por outro lado contendo a formulação transdérmica são colocados no corpo do utilizador de tal maneira a permanecer em contacto com a epiderme do recipiente durante um período de tempo prolongado.

Tais emplastros adequados compreendem um composto activo (1) numa solução aquosa opcionalmente tamponada, (2) dissolvido e/ou disperso num adesivo, ou (3) disperso num polímero.

Uma concentração adequada do composto activo é cerca de 1% até cerca de 35%, e de preferência desde cerca de 3% até cerca de 15%.

Como exemplo, o composto activo pode ser distribuído a partir do emplastro por electrotrasnporte ou iontoforese, como geralmente descrito em Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986). EXEMPLO 28

Um exemplo específico de uma formulação transdérmica - 100 - 1/ί4η <~2λ/^ compreendendo um composto do invento como um ingrediente activo é estabelecido em seguida.

Formulação Transdermica 200 mg 0,1 ml

Ingrediente activo Álcool USP Hidroxietilcelulose O ingrediente activo e álcool USP são gelatinizados com hidroxietil celulose e embalados num dispositivo transdérmico com área de superfície de 10 cm2.

Maneiras de Efectuar o Invento

Uma maneira vantajosa de efectuar o invento envolve a síntese e utilização de compostos preferidos do invento (feito por método de síntese adequado, como por exemplo a via de síntese benzotriazole anteriormente descrita), por exemplo, um composto seleccionado a partir do grupo incluindo compostos designados A, B, C, e D e seus ésteres, sais, e outros derivados funcionais físiologicamente aceitáveis, no tratamento de doenças de perturbações seleccionadas a partir das do grupo que consiste a dor fisiológica, diarreia, incontinência urinária, doença mental, dependência/dose excessiva de droga e álcool, edema pulmonar, depressão, asma, enfisema, e apneia, perturbações cognitivas, e perturbações gastrointestinais.

Dentro do anteriormente descrito, um modo exemplar de efectuar o invento com respeito à utilização dos compostos do invento, é a administração dos mesmos numa dose efectiva farmaceuticamente segura, e numa forma de dosagem adequada, para um sujeito animal, por exemplo, um sujeito humano, - 101 - 0 com o fim de induzir analgesia em tal sujeito animal.

Espécies de composto altamente preferidas do presente invento é o Composto C, (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3-fluorofenil)-N-metilbenzamida

Aplicação Industrial

Compostos do presente invento são compostos de ligação a receptores de opióides altamente selectivos tendo utilidade como variedades receptoras, por exemplo, como conjugados em pares agonistas/antagonistas para receptor de verificação/ensaio e função neurotransmissora.

Os compostos do invento incluem compostos benzidrilpiperazina úteis para mediação de analgesia, assim como compostos tendo utilidade no tratamento de doenças tais como dependência de droga, dependência de álcool, dose excessiva de droga, doença mental, perturbações gastrointestinais, incontinência urinária, diarreia, edema do pulmão, tosse, e perturbações respiratórias.

Um composto altamente preferido dentro do âmbito do presente invento, (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-idroxibenzil)-N-(3-fluorofenil)-N-metilbenzamida, é um agonista opióide delta/mu misto com vantagem substancial sobre vários compostos receptores mu conhecidos correntemente empregues como analgésicos.

Lisvoa, 15 de Novembro de 2000

Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA

Claims (10)

1. Uu, ^ REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula (I):

   em que: R é fenilo substituído por um ou mais substituintes seleccionados a partir de halogéneo e trifluorometilo, e R9 é hidrogénio, hidrocarbilo Ci-C6 saturado ou hidrocarbilo C3-Q não saturado; um de R1 e R5 é metilo e o outro e R2 são ambos hidrogénio ou um é hidrogénio e o outro é metilo; e R6 é hidrogénio, hidrocarbilo Q-Cô saturado, hidrocarbilo C3-Cô ou metoxialquilo C2-C6; ou um seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável, ou um seu derivado funcional fisiologicamente.
2. 2. Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que R8 é fenilo substituído por halogéneo 1 Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que R9 é 2 alquilo Ci_6. -2- , -2- , Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que r9 c Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que R1 4. metilo ou etilo. 5. metilo. Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que R8 6. fenilo substituído por flúor.
3. 7. Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que R8 é fenilo substituído por flúor e R1 é metilo.
4. 8. Composto de acordo com a Reivindicação 1, em que R3 e R5 são ambos metilo e R4 é hidrogénio.

   e Q í em que R e R e R são como definidos na Reivindicação 1.
5. 10. Composto de acordo com a Reivindicação 1 o qual é: (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(4- 1 Composto de acordo com a Reivindicação 8 tendo a configuração isomérica da fórmula (II): -3- Uu, ^ fluorofenil)-N-metilbenzamida; (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(4- clorofenil)-N-metilbenzamida; 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-metil-N- (2-(trifluorometil)fenil)benzamida; 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-metil-N- (2,4,6-triclorofenil)benzamida; 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-aliI-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3- fluorofenil)-N-metilbenzamida; (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(2- fluorofenil)-N-metilbenzamida; (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil- N-(4-fluorofenil)benzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3- fluorofenil)-N-propilbenzamida 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil-N- (3-fluorofenil)benzamida; 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(2- fluorofenil)-N-propilbenzamida; -4-

   3-((aR)-oc-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-etil-N-(2-fluorofenil)benzamida; (+)-3 -((aR)-a-((2S, 5R)-4-alil-2,5-dimetil-1 -piperazinil)-3 -metoxibenzil)-N-(3 -fluorofenil)-N-metilbenzamida; (+)-3-((aR)-cc-((2S, 5R)-4-alil-2,5-dimetil- l-piperazinil)-3-metoxibenzil)-N-etil-N-(4-fluorofenil)benzamida; 3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-(N-(3-fluorofenil)-N-metilcarbamoil)benzil)fenil monofosfato; ou um seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável ou um seu derivado fisiologicamente funcional.
6. 11. Composto de acordo com a Reivindicação 1 o qual é (+)-3-((aR)-a-((2S,5R)-4-alil-2,5-dimetil-l-piperazinil)-3-hidroxibenzil)-N-(3-fluoro-fenil)-N-metilbenzamida ou um seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável ou um seu derivado fisiologicamente funcional.
7. 12. Utilização de um composto de fórmula (I) de acordo com qualquer das Reivindicações 1 até 11 ou um seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável ou um seu derivado fisiologicamente funcional para a preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de uma perturbação seleccionada a partir do seguinte: dor, dependência de droga, dependência de álcool, dose excessiva de droga, doença mental, incontinência urinária, tosse, edema do pulmão, diarreia, depressão e perturbações cognitiva, respiratória e gastro-intestinal.
8. 13. Utilização de acordo com a Reivindicação 12 para a -5- U*u preparação de um medicamento para a mediação de analgesia.
9. 14. Formulação farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I) de acordo com as Reivindicações 1 até 11 ou um seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável ou um seu derivado físiologicamente aceitável, e um seu veículo farmaceuticamente aceitável.
10. 15. Processo para a preparação de um composto de fórmula (I) de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1 até 11 ou um seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável ou um seu derivado físiologicamente funcional, compreendendo o referido processo um procedimento de síntese seleccionado a partir do grupo que consiste dos processos de síntese (A), (B) e (C) seguintes: (A) a alquilação de uma piperazina de fórmula (IV) pela alquilação um agente de fórmula (III),

    H

    em que R3 até R6 e R8 e R9 são definidos em qualquer das Reivindicações 1 até 8, P é hidrogénio ou um grupo de protecção hidroxi e X1 é um grupo dissociável; e, quando R6 é hidrogénio, alquilando opcionalmente o resultante composto de fórmula (I) com um agente de alquilação de fórmula R6-X*, em que R6 é hidrocarbilo CrC6 saturado, hidrocarbilo Q-Cô insaturado ou metoxialquilo C2-C6 e X1 é um grupo dissociável, ou alquilando opcionalmente o -6-

    resultante composto de fórmula (I) por aminação redutora com um aldeído Ci-C6 na presença de um agente de redução; (B) fazendo reagir um composto de fórmula (V),

    RS (V) λ r em que R até R são como definidos na Reivindicação 1 até 8, P é como definido anteriormente e Z é bromo, iodo ou trifluorometilsulfonilo como for apropriado, com (a) no caso em que Z é bromo ou iodo; um alquil metal, opcionalmente transmetalação do composto metálico resultante com uma variedade de metal de transição para fornecer um composto metálico diferente, fazendo reagir o composto metálico resultante com dióxido de carbono e convertendo o ácido carboxílico resultante no correspondente cloreto, anidrido ou éster de ácido, e fazendo reagir o cloreto, anidrido ou éster de ácido resultante com uma amina de fórmula HNR R em que R e R são como definidos em qualquer das Reivindicações 1 até 7, ou fazendo reagir o composto metálico resultante com um composto cloreto de aminocarbonilo de fórmula C1CONR R , O Q em que R e R são como definidos em qualquer das Reivindicações 1 até 7; ou -7- (/Λη (b) no caso em que Z é bromo, iodo ou trifluorometilsulfonilo; um reagente de cianação, hidrolizando o nitrilo resultante com ácido mineral alcalino ou aquoso, convertendo o ácido carboxílico resultante no cloreto, anidrido ou éster de ácido correspondente, e fazendo reagir o cloreto, anidrido ou éster de ácido resultante com uma amina de fórmula HNR R em que R e R são como definidos em qualquer das Reivindicações 1 até 7; ou (c) no caso em que Z é bromo, iodo ou trifluorometilsulfonilo; um excesso de amina e monóxido de carbono em presença de um catalisador de Ο Λ metal de transição para produzir um composto de fórmula (I), em que R e R são como definido em qualquer das Reivindicações 1 até 7; ou (C) Fazendo reagir um composto de fórmula (VI), com um composto fenilmetálico de fórmula (VII):

    (VI) Λ £ jj Λ em que R até R e R e R são como definidos em qualquer das Reivindicações 1 até 8, P é hidrogénio ou um grupo de protecção hidroxi, M é uma variedade metálica e W é benzotriazolilo ou triclorotitaniumoxi; e, quando P é um grupo de protecção hidroxi, desprotegendo o grupo hidroxi; -8- opcionalmente convertendo o resultante composto de fórmula (I) num seu éter, éster ou sal farmaceuticamente aceitável ou um seu derivado fisiologicamente funcional. Lisboa, 15 de Novembro de 2000 LUIS SILVA CARVALHO Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA