PT1891075E - Derivados espiro tricíclicos como moduladores do crth2 - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "DERIVADOS ESPIRO TRICÍCLICOS COMO MODULADORES DO CRTH2"

DOMÍNIO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a derivados espiro para utilização como compostos farmacêuticos activos, bem como a formulações farmacêuticas contendo esses derivados espiro. Esses derivados são úteis para o tratamento e/ou prevenção de doenças alérgicas e dermatoses inflamatórias. Especificamente, a presente invenção refere-se à utilização de derivados espiro para a modulação da actividade do CRTH2. A presente invenção também se refere a métodos de preparação de derivados espiro.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A prostaglandina D2 (PGD2) tem sido associada desde há muito tempo a estados inflamatórios e atópicos, especificamente doenças alérgicas, como asma, rinite e dermatite atópica (Lewis et al. (1982) J. Immunol. 129, 1627). A PGD2 pertence a uma classe de compostos derivados do esqueleto de ácido gordo de 20 carbonos do ácido araquidónico. Em resposta a uma provocação antigénica, a PGD2 é libertada em grandes quantidades nas vias aéreas, bem como na pele, durante uma resposta alérgica aguda. Pensava-se desde há muito tempo que o receptor DP, que é um membro da subfamilia de receptores acoplados à proteína G (GPCR), era o único receptor da PGD2. O papel do DP em asma alérgica foi demonstrado com ratinhos deficientes em DP (Matsuoka et ai. (2000) Science 287, 2013-2017). No entanto, apesar do intenso interesse no papel da PGD2 na resposta inflamatória, não foi estabelecida uma ligação directa entre a activação do receptor DP e a migração de 2 eosinófilos estimulada pela PGD2 (Woodward et al. (1990)

Invest. Ophthalomol Vis. Sei. 31_, 138-146; Woodward et al. (1993) Eur. J. Pharmacol. 230, 327-333).

Mais recentemente, outro receptor acoplado à proteína G, denominado "Molécula Homóloga a Receptor Quimioatractor expressa em células T Auxiliadoras 2" ("Chemoattractant

Receptor-Homologous molecule expressed on T-Helper 2 cells") (CRTH2) (Nagata et al. (1999) J. Immunol. 162, 1278-1286, Hirai et al. (2001) J Exp. Med. 193, 255-261), foi recentemente identificado como receptor para a PGD2, e esta descoberta começou a iluminar o mecanismo de acção da PGD2. O CRTH2, também referido como DP2, GPR44 ou DLIR, exibe pouca semelhança estrutural com o receptor DP e outros receptores prostanóides. No entanto, o CRTH2 possui afinidade semelhante para a PGD2. Entre os linfócitos T do sangue periférico, o CRTH2 humano é selectivamente expresso em células Th2 e é altamente expresso em tipos de células associadas a inflamação alérgica, como eosinófilos, basófilos e células Th2. Adicionalmente, o CRTH2 medeia a migração celular dependente da PGD2 de eosinófilos e basófilos do sangue. Além disso, números aumentados de células T em circulação que expressam o CRTH2 foram correlacionados com a gravidade de dermatite atópica (Cosmi et al. (2000) Eur. J. Immunol. 3_0, 2972-2979. A interaeção do CRTH2 com a PGD2 desempenha um papel crítico no recrutamento induzido por alergénios de células Th2 nos tecidos-alvo de inflamação alérgica. Em consequência, compostos que inibem a ligação do CRTH2 e PGD2 devem ser úteis para o tratamento de doenças alérgicas.

Doença alérgica, como asma, e dermatoses inflamatórias representam uma classe importante de doenças inflamatórias 3 complexas e tipicamente crónicas que presentemente afectam cerca de 10% da população, e esse número parece estar a crescer (Bush, R.K., Georgitis J. W., "Handbook of asthma and rhinitis". Ia ed. (1997), Abingdon: Blackwell Science. 270). A dermatite atópica é uma doença crónica da pele, em que a pele adquire um prurido extremo. É responsável por 10 até 20 por cento de todas as consultas a dermatologistas. A incidência crescente de doenças alérgicas e dermatoses inflamatórias em todo o mundo sublinha a necessidade de novas terapias para tratar ou prevenir eficazmente estas doenças. Presentemente, numerosas classes de agentes farmacêuticos são amplamente usadas para tratar estas doenças, por exemplo, anti-histamínicos, descongestionantes, anticolinérgicos, metilxantinas, cromolinas, corticosteróides e moduladores de leucotrienos. No entanto, a utilidade destes agentes é muitas vezes limitada por efeitos secundários e baixa eficácia.

Foi recentemente relatado que derivados indolo com substituição 3-enxofre (A) exibem actividade de CRTH2 (WO 04/106302, AstraZeneca AB) e são potencialmente úteis para o tratamento de várias doenças respiratórias.

0 documento WO 04/096777 (Bayer Healthcare AG) refere-se a derivados pirimidina, que são úteis para o tratamento de doenças mediadas pelo CRTH2. 4

Os documentos WO 04/035543 e WO 05/102338 (Warner-Lambert Company LLC) divulgam derivados tetra-hidrocolina como antagonistas do CRTH2 (C) , também sendo descrito que são eficazes no tratamento de dor neuropática. 0

cr 'r

Derivados tetra-hidrocolina específicos como moduladores do CRTH2 também são proporcionados pelo documento WO 04/032848 (Millenium Pharmaceutical Inc) e WO 05/007094 (Tularik Inc.). É dito que estes derivados tetra-hidrocolina são úteis para o tratamento de perturbações associadas a processos de inflamação alérgica. O documento GB-A-2388540 divulga novas utilizações médicas para o modulador do CRTH2 Ramatroban:

como doenças alérgicas, doenças relacionadas com eosinófilos e doenças relacionadas com basófilos.

Expert Opinion on Therapeutic Patents (Ashley Publications, GB, Vol. 14, N° 1, 2004, 125-128) discute derivados do ácido l-heteroaril-indolo-3-acético como antagonistas do 5 receptor CRTH2 e a sua utilização para o tratamento de asma, doença pulmonar obstrutiva crónica e rinite.

Outros derivados espiro triciclicos são descritos no documento US-A-4 386 100 como inibidores da aldose redutase úteis para o tratamento de certas complicações de diabetes e galactosemia.

Kumar et ai. (Organic Letters, 3_{26) , 2001, 4193-6) descrevem uma nova via de síntese para certos derivados espiro triciclicos (alcaloides espiropirrolidinil-oxindolo). A síntese ainda de outra classe de derivados espiro multicíclicos, incluindo variantes tri- e tetra-cíclicas, é divulgada em Khalil et al. {Buli. Fac. Pharm. Cairo Univ. 2_8(1), 1990, 39-42). Os compostos divulgados têm propriedades antiepilépticas e/ou anticonvulsivas.

RESUMO DA INVENÇÃO A invenção proporciona, num aspecto, derivados espiro de acordo com a Fórmula (I). Outro aspecto da presente invenção consiste na utilização de derivados espiro representados pela Fórmula (I) como compostos farmacêuticos activos. Esses compostos são adequados para o tratamento e/ou prevenção de doença alérgica e dermatoses inflamatórias. Esses compostos modulam o CRTH2. Especificamente, a invenção refere-se a derivados espiro de Fórmula (I): 6 6

m em que R1, R2, R3, T, X, Y, Z e m são definidos como descrito na descrição pormenorizada em baixo, para utilização como medicamento. A invenção também proporciona uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) em conjunto com um excipiente ou transportador farmaceuticamente aceitável. A invenção também se refere à utilização de compostos de Fórmula I para a preparação de um medicamento destinado ao tratamento e/ou prevenção de doenças seleccionadas de doenças alérgicas, como asma alérgica, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, e dermatoses inflamatórias, como dermatite atópica, hipersensibilidade de contacto, dermatite alérgica de contacto, urticária crónica/urticária idiopática/autoimune crónica, exantemas induzidos por fármacos (por exemplo, necrólise epidérmica tóxica ou síndroma de Lyell/síndroma de Stevens-Johnson/síndroma da hipersensibilidade a fármacos), fotodermatose ou erupção polimorfa solar (por exemplo, dermatite de contacto fotoirritante, dermatite de contacto fotoalérgica, dermatite actínica crónica) e miosite, perturbações neurodegenerativas, como dor neuropática, e outras doenças com um componente inflamatório, como artrite reumatóide, esclerose múltipla, osteoartrite, e doença inflamatória do intestino (IBD) e outras doenças e perturbações associadas a actividade do CTRH2. Especificamente, a presente invenção 7 refere-se à utilização de compostos de Fórmula (I) para a modulação da actividade do CRTH2. A invenção também se refere a um método de tratamento e/ou prevenção de um paciente que sofre de uma doença seleccionada de doenças alérgicas, como asma alérgica, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, e dermatoses inflamatórias, como dermatite atópica, hipersensibilidade de contacto, dermatite alérgica de contacto, urticária crónica/urticária idiopática/autoimune crónica, exantemas induzidos por fármacos (por exemplo, necrólise epidérmica tóxica ou síndroma de Lyell/síndroma de Stevens-Johnson/síndroma da hipersensibilidade a fármacos), fotodermatose ou erupção polimorfa solar (por exemplo, dermatite de contacto fotoirritante, dermatite de contacto fotoalérgica, dermatite actínica crónica) e miosite, perturbações neurodegenerativas, como dor neuropática, e outras doenças com um componente inflamatório, como artrite reumatóide, esclerose múltipla, osteoartrite, e doença inflamatória do intestino (IBD) e outras doenças e perturbações associadas a actividade do CTRH2, por administração de um composto de acordo com a Fórmula (I). A invenção também se refere à utilização de compostos de Fórmula (I) para a preparação de uma composição farmacêutica.

Por fim, a invenção refere-se a novos compostos de Fórmula (I), bem como a métodos para sintetizar compostos de Fórmula (I). 8

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

Os parágrafos seguintes apresentam definições de várias fracções químicas que constituem os compostos de acordo com a invenção, sendo pretendido que sejam aplicadas uniformemente ao longo da especificação e reivindicações a menos que outra definição expressamente apresentada forneça uma definição mais lata. "Ci-C6-alquilo" refere-se a grupos alquilo monovalentes possuindo 1 até 6 átomos de carbono. Este termo é exemplificado por grupos tais como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, tert-butilo, n-hexilo e afins. "Arilo" refere-se a um grupo carbocíclico aromático insaturado com 6 até 14 átomos de carbono possuindo um único anel (por exemplo, fenilo) ou múltiplos anéis condensados (por exemplo, naftilo). Arilo preferido inclui fenilo, naftilo, fenantrenilo e afins. 0 anel arilo também pode estar fundido a um grupo heterocicloalquilo. Esses arilos fundidos incluem di-hidrobenzimidazolo-2-ona, benzo[1,3]dioxolo e afins. "Ci-Ce-alquilarilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo possuindo um substituinte arilo, tais como, por exemplo, benzilo, fenetilo e afins. "Heteroarilo" refere-se a um grupo heteroaromático monocíclico ou um grupo heteroaromático de anéis fundidos bicíclico ou tricíclico. Exemplos particulares de grupos heteroaromáticos incluem os grupos opcionalmente substituídos piridilo, pirrolilo, pirimidinilo, furilo, tienilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, 9 isotiazolilo, pirazolilo, 1, 2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1,3,4-triazinilo, 1,2,3-triazinilo, 1,3,4-tiadiazolilo, benzofurilo, [2,3-di-hidro]benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, benzotriazolilo, isobenzotienilo, indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo, benzimidazolilo, imidazo[1,2-a]piridilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinolizinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, cinolinilo, naftiridinilo, piridazinilo, pirido[3,4 —b]piridilo, pirido[3,2-b]piridilo, pirido[4,3-b]piridilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrazolilo, 5,6,7,8-tetra-hidroquinolilo, 5,6,7,8-tetra-hidroisoquinolilo, purinilo, pteridinilo, carbazolilo, xantenilo ou benzoquinolilo e afins. "Ci-C6-alquil-heteroarilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo possuindo um substituinte heteroarilo, tais como, por exemplo, 2-furilmetilo, 2-tienilmetilo, 2-(lH-indol-3-il)etilo e afins. "C3-C8-cicloalquilo" refere-se a um grupo carbociclico saturado com 3 até 8 átomos de carbono possuindo um único anel (por exemplo, ciclo-hexilo) ou múltiplos anéis condensados (por exemplo, norbornilo). Cicloalquilo preferido inclui ciclopentilo, ciclo-hexilo, norbornilo e afins. "C3-C8-Heterocicloalquilo" refere-se a um grupo C3-C8-cicloalquilo de acordo com a definição acima no qual até 3 átomos de carbono estão substituídos por heteroátomos escolhidos do grupo que consiste em 0, S, NR, R sendo definido como hidrogénio ou metilo. Heterocicloalquilo 10 preferido inclui pirrolidina, piperidina, piperazina, 1-metilpiperazina, morfolina, 1,4-dioxano e afins. "Ci-C6-alquilcicloalquilo" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo possuindo um substituinte cicloalquilo, incluindo ciclo-hexilmetilo, ciclopentilpropilo e afins. "Ci-C6-alquil-heterocicloalquilo" refere-se a grupos C1-C6-alquilo possuindo um substituinte heterocicloalquilo, incluindo 2-(1-pirrolidinil)etilo, 4-morfolinilmetilo, (1-metil-4-piperidinil)metilo e afins. "C2-C6-alcenilo" refere-se a grupos alcenilo preferivelmente possuindo desde 2 até 6 átomos de carbono e possuindo um ou mais sítios de insaturação alcenilo. Grupos alcenilo preferidos incluem etenilo (-CH=CH2) , n-2-propenilo (alilo, -CH2CH=CH2) e afins. "C2-C6-alcinilo" refere-se a grupos alcinilo preferivelmente possuindo desde 2 até 6 átomos de carbono e possuindo um ou mais sítios de insaturação alcinilo. Grupos alcinilo preferidos incluem etinilo (-C=CH), propinilo (-CH2C=CH) e afins. "Carboxi" refere-se ao grupo -C(0)0R, em que R inclui hidrogénio ou "Ci-Ce-alquilo". "Acilo" refere-se ao grupo -C(0)R em que R inclui "Ci-Cõ-alquilo", "arilo", "heteroarilo", "Cs-Ce-cicloalquilo", "C3-Ce-heterocicloalquilo", "Ci-C6-alquilarilo" ou "C1-C6-alquil-heteroarilo". 11 "Aciloxi" refere-se ao grupo -0C(0)R em que R inclui "Ci-C6-alquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquilarilo" ou "Ci-C6-alquil-heteroarilo" . "Arilacilo" refere-se a grupos arilo possuindo um substituinte acilo, incluindo 2-acetilfenilo e afins. "Heteroarilacilo" refere-se a grupos heteroarilo possuindo um substituinte acilo, incluindo 2-acetilpiridilo e afins. "Alcoxi" refere-se ao grupo -0-R em que R inclui "C1-C6-alquilo", "C2-C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", "C3-C8- cicloalquilo", "heteroarilo", heteroarilo", heteroarilo", heteroarilo", "arilo", "Ci-C6-alquil-"C2-C6-alcenil-"C2-C6-alcinil-"Ci-C6-alquil- "heterocicloalquilo", "Ci-C6-alquilarilo" ou "C2-C6-alcenilarilo", "C2-C6-alcinilarilo", "Ci-C6-alquilcicloalquilo", heterocicloalquilo". Grupos alcoxi preferidos incluem, a titulo exemplificativo, metoxi, etoxi, fenoxi e afins. "Ci-C6-alquilalcoxi" refere-se a grupos Ci-C6-alquilo possuindo um substituinte alcoxi, incluindo 2-etoxietilo e afins. "Alcoxicarbonilo" refere-se ao grupo -C(0)0R em que R inclui "Ci-C6-alquilo" ou "arilo" ou "heteroarilo" ou "Ci-C6-alquilarilo" ou "Ci-C6-alquil-heteroarilo" . "Aminocarbonilo" refere-se ao grupo -C(0)NRR' em que cada R, R' inclui independentemente hidrogénio ou Ci-C6-alquilo ou arilo ou heteroarilo ou "Ci-C6-alquilarilo" ou "Ci-C6-alquil-heteroarilo". 12 "Acilamino" refere-se ao grupo -NR(CO)R' em que cada R, R' é independentemente hidrogénio ou "Ci-C6-alquilo" ou "arilo" ou "heteroarilo" ou "Ci-C6-alquilarilo" ou "Ci-Cô-alquil-heteroarilo". "Halogéneo" refere-se a átomos de fluoro, cloro, bromo e iodo. "Sulfoniloxi" refere-se a um grupo -OSO2-R em que R é seleccionado de H, "Ci-C6-alquilo", "Ci-C6-alquilo" substituído com halogéneos, por exemplo, um grupo -OSO2-CF3, "C2-C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", "C3-C8-ciclo-alquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquilarilo" ou "Ci-C6-alquil-heteroarilo", "C2~Ce~ alcenilarilo", "C2-C6-alcenil-heteroarilo", "C2-Ce~ alcinilarilo", "C2-C6-alcinil-heteroarilo", "Ci-C6- alquilcicloalquilo", " C i-C6-alquil-heterocicloalquilo". "Sulfonilo" refere-se a um grupo "-SO2-R" em que R é seleccionado de H, "arilo", "heteroarilo", "Ci-Cô-alquilo", "Ci-Cõ-alquilo" substituído com halogéneos, por exemplo, um grupo -S02-CF3, "C2-C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", "C3-C8- cicloalquilo", "heteroarilo", heteroarilo", heteroarilo", heteroarilo", "arilo", "Ci-Cõ-alquil-"C2-C6-alcenil-"C2-C6-alcinil-"Ci-C6-alquil- "heterocicloalquilo", "Ci-C6-alquilarilo" ou "C2-C6-alcenilarilo", "C2-C6-alcinilarilo", "Ci-C6-alquilcicloalquilo", heterocicloalquilo" "Sulfinilo" refere-se a um grupo "-S(0)-R" em que R é C2-C6-alcinilo", seleccionado de H, "Ci-Cô-alquilo", "Ci-C6-alquilo" substituído com halogéneos, por exemplo, um grupo -SO-CF3, "C2“C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", "C3-C8-cicloalquilo", 13 "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "C1-C6-alquilarilo" ou "Ci-C6-alquil-heteroarilo", "C2-C6-alcenilarilo", "C2-C6-alcenil-heteroarilo", "C2-C6-alcinilarilo", "C2-C6-alcinil-heteroarilo", "C1-C6-alquilcicloalquilo", "Ci-C6-alquil-heterocicloalquilo". "Sulfanilo" refere-se a grupos -S-R em que R inclui H, "Ci-C6-alquilo", "Ci-C6-alquilo" opcionalmente substituído com halogéneos, por exemplo, um grupo -S-CF3, "C2-C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", "C3-C6-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquilarilo" ou "Ci-C6-alquil-heteroarilo", "C2-C6-alcenilarilo", "C2-C6-alcenil-heteroarilo", "C2-C6-alcinilarilo", "C2-C6-alcinil-heteroarilo", "Ci-C6-alquilcicloalquilo", "Ci-C6-alquil-heterocicloalquilo". Grupos sulfanilo preferidos incluem metilsulfanilo, etilsulfanilo e afins. "Sulfonilamino" refere-se a um grupo -NRS02-R' em que cada R, R' inclui independentemente hidrogénio, "Ci-Cõ-alquilo", "C2-C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", "C3-C8-cicloalquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-Cõ-alquilarilo" ou "Ci-C6-alquil-heteroarilo", "C2-C6-alcenil-arilo", "C2-C6-alcenil-heteroarilo", "C2-C6-alcinilarilo", "C2-C6-alcinil-heteroarilo", "Ci-C6-alquilcicloalquilo", "Ci-Cõ-alquil-heterocicloalquilo" . "Aminossulfonilo" refere-se a um grupo -S02-NRR' em que cada R, R' inclui independentemente hidrogénio, "Ci-Cõ-alquilo", "C2-C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", "C3-C8-ciclo-alquilo", "heterocicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ch-Ce-alquilarilo" ou "Ci-C6-alquil-heteroarilo", "C2-C6-alcenilarilo", "C2-C6-alcenil-heteroarilo", "C2-C6-alcinil- 14 arilo", "C2-C6-alcinil-heteroarilo", "Ci-C6-alquilciclo-alquilo", "Ci-C6-alquil-heterocicloalquilo". "Amino" refere-se ao grupo -NRR' em que cada R, R' é independentemente hidrogénio, "Ci-C6-alquilo", "C2-C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", "C3-C8-cicloalquilo", "hetero-cicloalquilo", "arilo", "heteroarilo", "Ci-C6-alquilarilo" ou "Ci-Cô-alquil-heteroarilo", "C2-C6-alcenilarilo", "C2-C6-alcenil-heteroarilo", "C2-C6-alcinilarilo", "C2-C6-alcinil-heteroarilo", "Ci-C6-alquilcicloalquilo", "Ci-C6-alquil-heterocicloalquilo", e em que R e R', juntamente com o átomo de azoto ao qual estão ligados, podem opcionalmente formar um anel heterocicloalquilo de 3-8 membros. "Substituído ou não substituído": A menos que de outro modo restringido pela definição do substituinte individual, os grupos referidos acima, como os grupos "alquilo", "alcenilo", "alcinilo", "alcoxi", "arilo" e "heteroarilo" etc. podem estar opcionalmente substituídos com 1 até 5 substituents seleccionados do grupo que consiste em "C1-C6-alquilo", "Ci-Cõ-alquilarilo", "Ci-Cg-alquil-heteroarilo", "C2-C6-alcenilo", "C2-C6-alcinilo", grupos amino primários, secundários ou terciários ou fracções de amónio quaternário, "acilo", "aciloxi", "acilamino", "amino-carbonilo", "alcoxicarbonilo", "arilo", "ariloxi", "heteroarilo", "heteroariloxi", carboxilo, ciano, halogéneo, hidroxi, nitro, sulfanilo, sulfoxi, sulfonilo, sulfonamida, alcoxi, tioalcoxi, tri-halometilo e afins. No contexto desta invenção, pretende-se que essa "substituição" também compreenda situações em que substituintes vizinhos sofrem fecho em anel, em particular quando estão envolvidos substituintes funcionais vizinhos, desse modo formando, por exemplo, lactamas, lactonas, anidridos cíclicos, mas também 15 acetais, tioacetais, aminais formados por fecho em anel, por exemplo, numa tentativa para obter um grupo protector.

Pretende-se que "sais ou complexos catiónicos farmaceuticamente aceitáveis" defina sais tais como os sais de metais alcalinos (por exemplo, sódio e potássio), sais de metais alcalino-terrosos (por exemplo, cálcio ou magnésio) , sais de alumínio, sais de amónio e sais com aminas orgânicas, tais como com metilamina, 2-N-morfolinoetanol, dimetilamina, trimetilamina, etilamina, trietilamina, morfolina, N-Me-D-glucamina, N,Ν'-bis(fenil-metil)-1,2-etanodiamina, etanolamina, dietanolamina, etilenodiamina, N-metilmorfolina, piperidina, benzatina (N,Ν'-dibenziletilenodiamina), colina, etilenodiamina, benetamina (N-benzilfenetilamina), dietilamina, piperazina, trometamina (2-amino-2-hidroximetil-l,3-propanodiol), procaína, bem como aminas de fórmula -NRR'R" em que R, R', R" são independentemente hidrogénio, alquilo ou benzilo. "Sais ou complexos farmaceuticamente aceitáveis" refere-se a sais ou complexos dos compostos de Fórmula I abaixo identificados que retêm a actividade biológica desejada. Exemplos desses sais incluem mas não estão restringidos a sais de adição de ácidos formados com ácidos inorgânicos (por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico e afins), e sais formados com ácidos orgânicos, como ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido málico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido ascórbico, ácido benzóico, ácido tânico, ácido pamóico, ácido algínico, ácido poliglutâmico, ácido naftalenossulfónico, ácido naftalenodissulfónico e ácido poli-galacturónico. Esses compostos também podem ser administrados na forma de sais 16 quaternários farmaceuticamente aceitáveis conhecidos do profissional, que especificamente incluem o sal de amónio quaternário de Fórmula -NRR'R"+Z~, em que R, R', R" são independentemente hidrogénio, alquilo ou benzilo, e Z é um contra-ião, incluindo cloreto, brometo, iodeto, -O-alquilo, toluenossulfonato, metilsulfonato, sulfonato, fosfato ou carboxilato (como benzoato, succinato, acetato, glicolato, maleato, malato, fumarato, citrato, tartarato, ascorbato, cinamoato, mandeloato e difenilacetato). "Derivado farmaceuticamente activo" refere-se a qualquer composto que, por administração ao receptor, é capaz de proporcionar, directa ou indirectamente, a actividade divulgada aqui. A invenção proporciona, num primeiro aspecto, derivados espiro de acordo com a Fórmula (I) que são úteis no tratamento e/ou prevenção de doenças seleccionadas de doenças alérgicas, como asma alérgica, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, e dermatoses inflamatórias, como dermatite atópica, hipersensibilidade de contacto, dermatite alérgica de contacto, urticária crónica/urticária idiopática/autoimune crónica, exantemas induzidos por fármacos (por exemplo, necrólise epidérmica tóxica ou síndroma de Lyell/síndroma de Stevens-Johnson/síndroma da hipersensibilidade a fármacos), fotodermatose ou erupção polimorfa solar (por exemplo, dermatite de contacto fotoirritante, dermatite de contacto fotoalérgica, dermatite actínica crónica) e miosite, perturbações neurodegenerativas, como dor neuropática, e outras doenças com um componente inflamatório, como artrite reumatóide, esclerose múltipla, osteoartrite, e doença inflamatória do intestino (IBD). 17 |4-y Y 1

Numa forma de realização, os compostos de acordo com a Fórmula (I) são adequados como moduladores do CRTH2. Em consequência, os compostos da presente invenção também são particularmente úteis para o tratamento e/ou prevenção de perturbações que são mediadas pela actividade do CRTH2. Esse tratamento envolve a modulação do CRTH2 em mamíferos e particularmente em humanos. Os moduladores do CRTH2 são seleccionados do grupo que consiste num agonista inverso, um antagonista, um agonista parcial e um agonista do CRTH2.

Numa forma de realização, os moduladores do CRTH2 são agonistas inversos do CRTH2.

Noutra forma de realização, os moduladores do CRTH2 são antagonistas do CRTH2.

Noutra forma de realização, os moduladores do CRTH2 são agonistas parciais do CRTH2.

Noutra forma de realização, os moduladores do CRTH2 são agonistas do CRTH2.

Os compostos de acordo com a Fórmula (I) são adequados para utilização como medicamento. como

Compostos de Fórmula (I) também incluem os seus isómeros geométricos, as suas formas opticamente activas, 18 enantiómeros, diastereómeros, suas formas de racematos, bem como respectivos sais farmaceuticamente aceitáveis, em que: R1 é seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, Ci-C6-alquilo substituído ou não substituído, Ci-C6-alcoxi substituído ou não substituído, halo-Ci-C6-alquilo substituído ou não substituído, halo-Ci-Cê-alcoxi substituído ou não substituído, halogéneo, arilo substituído ou não substituído e heteroarilo substituído ou não substituído, e m é um inteiro seleccionado de 0, 1, 2, 3 ou 4.

De acordo com uma forma de realização, R1 é halogéneo ou halo-Ci-Cg-alcoxi.

Numa forma de realização preferida, R1 é cloro ou fluoro. Noutra forma de realização preferida, R1 é trifluorometoxi. R2 é Ci-C6-alquilo ou A. A é seleccionado do grupo que consiste em Al, A2, A3, A4, A5 e A6:

Ai A2 ' A3 ô ' em que cada n é um inteiro independentemente seleccionado de 1, 2, 3 ou 4; 19 em que R4 é seleccionado do grupo que consiste em C1-C6-alquilo substituído ou não substituído, C2-C6-alcenilo substituído ou não substituído, C2-C6-alcinilo substituído ou não substituído, C3-C8-cicloalquilo substituído ou não substituído, C3-C8-heterocicloalquilo substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído, heteroarilo substituído ou não substituído, sulfonilamina substituída ou não substituída, amina substituída ou não substituída, halo-Ci-Cô-alquilo substituído ou não substituído, hidroxilamina substituída ou não substituída e hidroxilo.

Exemplos de R4 incluem metilo, etilo, propilo, isopropilo, etinilo, propinilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, dioxinilo, derivados dioxinilo opcionalmente substituídos e/ou fundidos (por exemplo, 2,3-di-hidrobenzo[1,4]dioxina), fenilo, naftilo, piridilo, imidazolidinilo, pirrolilo, pirimidilo, quinolizinilo, furilo, tienilo, imidazolilo, derivados imidazolilo fundidos (por exemplo, imidazopiridina) , oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, carbazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,3,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, tetrazolilo, 1,3,4-triazinilo, 1,2,3-triazinilo, benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, benzotriazolilo, isobenzotienilo, indolilo, isoindolilo, derivados isoindolilo opcionalmente substituídos (por exemplo, isoindolo-1,3-diona), 3H-indolilo, benzimidazolilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, oxolanilo, pirrolidinilo, derivados pirrolidinilo opcionalmente substituídos (por exemplo, pirrolidino-2,5-diona), pirazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 20 piridilo, imidazolidinilo, 1,2,4-oxadiazolidinilo, 1,2,5-oxadiazolidinilo, 1,3,4-oxadiazolidinilo, isoxazolidinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, cinolinilo, naftiridinilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrazolilo, 5,6,7,8-tetra-hidroquinolilo, 5,6,7,8-tetra-hidroiso- quinolilo, purinilo, pteridinilo, xantenilo ou benzoquinolilo.

Numa forma de realização, R2 é AI com n sendo um inteiro seleccionado de 1, 2, 3 ou 4.

Noutra forma de realização, R2 é AI com n =1.

Noutra forma de realização, R2 é A5 em que cada n é um inteiro seleccionado de 1, 2, 3 ou 4.

Ainda noutra forma de realização, R2 é A5 com cada n = 2.

Ainda noutra forma de realização, R4 é um arilo substituído ou não substituído.

Ainda noutra forma de realização, R4 é um fenilo substituído ou não substituído ou um naftilo substituído ou não substituído.

Noutra forma de realização, R4 é um heteroarilo substituído ou não substituído.

Ainda noutra forma de realização, R4 é um tiazolilo, piridina substituída ou não substituída ou quinolilo substituído ou não substituído. 21

Cada R4 pode estar opcionalmente substituído independentemente com um ou mais grupos R6. R3 é B. em que n é um inteiro independentemente seleccionado de 1, 2, 3 ou 4; em que R5 é carboxi.

De acordo com uma forma de realização, R3 é B, em que n é um inteiro seleccionado de 1, 2, 3 ou 4.

Ainda noutra forma de realização, R3 é B com n=l, e em que R5 é carboxi.

Ainda noutra forma de realização, R3 é B com n=3, e em que R5 é carboxi.

Cada R6 é independentemente seleccionado do grupo que consiste em Ci-C6-alquilo, alcoxi, alcoxicarbonilo, arilo substituído ou não substituído, aril-Ci-C6-alquilo substituído ou não substituído, heteroarilo substituído ou não substituído, heteroaril-Ci-C6-alquilo substituído ou não substituído, C3-C8-cicloalquilo substituído ou não substituído, C3-C8-heterocicloalquilo substituído ou não substituído, carboxilo, ciano, halogéneo, hidroxi, amino, aminocarbonilo, acilamino, nitro, sulfoxi, sulfonilo, sulfonilamina, aminossulfonilo e tri-halo-Ci-Cô-alquilo. 22

Numa forma de realização, R6 é independentemente seleccionado do grupo de Ci-Cô-alquilo, C3-C8-cicloalquilo, acilamino, aminocarbonilo, arilo, heteroarilo, ciano, halogéneo, sulfonilo, alcoxi e tri-halometilo. R7 é hidrogénio ou Ci-C6-alquilo; T é CH ou N; X é CH2 ou NH; cada Y é independentemente C(0) ou CH2; e Z é C(0) ou CHR7.

Numa forma de realização, T é CH. Noutra forma de realização, X é CH. Noutra forma de realização, pelo menos um Y é C(0). Noutra forma de realização, Z é CHR7.

Numa forma de realização preferida, T e X são CH, Y é C(O) e Z é CHR', em que R-' é hidrogénio.

Noutra forma de realização preferida, T e X são CH, pelo menos um Y é C(0) e Z é C(0) .

Numa forma de realização os compostos da invenção têm a Fórmula (I’),

em que R1 é seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, Ci-C6-alquilo substituído ou não substituído, Ci-C6-alcoxi substituído ou não substituído, halo-Ci-C6-alquilo substituído ou não substituído, halo-Ci-C6-alcoxi 23 substituído ou não substituído, halogéneo, arilo substituído ou não substituído e heteroarilo substituído ou não substituído; e m é um inteiro seleccionado de 0, 1, 2, 3 ou 4.

Numa forma de realização preferida m é 1 ou 2.

De acordo com uma forma de realização, R1 é halogéneo ou halo-Ci-Ce-alcoxi.

Numa forma de realização preferida, R1 é cloro ou fluoro. Noutra forma de realização preferida, R1 é trifluorometoxi. R2 é C3-C6-alquilo ou A. A é seleccionado do grupo que consiste em Al, A2, A3, A4, A5 e A6: ?f Aí fà A3

M *5 AS em que cada n é um inteiro independentemente seleccionado de 1, 2, 3 ou 4; em que R4 é seleccionado do grupo que consiste em C2-C6 alquilo substituído ou não substituído, C2-C6 alcinilo substituído ou não substituído, C3-C8-cicloalquilo substituído ou não substituído, C3-C8-heterocicloalquilo substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído e heteroarilo substituído ou não substituído. 24

Arilos preferidos são um fenilo substituído, ou naftilo substituído ou não substituído. 0 anel arilo também pode estar fundido a um grupo cicloalquilo ou heterocicloalquilo.

Heteroarilos preferidos são heteroarilos monocíclicos, tais como oxazolilo, oxadiazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, furilo, piridilo, ou heteroarilo bicíclico, tal como benzo-tiazolilo, naftilo, quinolilo, indolilo, benzoimidazolilo, imidazolpiridilo ou benzotriazolilo.

Numa forma de realização, R2 é AI com n sendo seleccionado de 1, 2, 3 ou 4.

Noutra forma de realização, R2 é AI com n =1.

Noutra forma de realização, R2 é A5 em que cada n é um inteiro seleccionado de 1, 2, 3 ou 4.

Ainda noutra forma de realização, R2 é A5 com cada n = 2.

Ainda noutra forma de realização, R4 é um fenilo substituído.

Noutra forma de realização, R4 é um heteroarilo substituído ou não substituído.

Numa forma de realização, A é AI em que n é seleccionado de 1, 2 ou 3 e R4 é seleccionado do grupo de C2-C6 alcinilo substituído ou não substituído, C3-C8-cicloalquilo substituído ou não substituído, C3-C8-heterocicloalquilo 25 substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído e heteroarilo substituído ou não substituído.

Noutra forma de realização, A é seleccionado de A2, A3, A4, A5 e A6, em que n é seleccionado de 1, 2 e 3 e R4 é seleccionado do grupo que consiste em C2-C6 alquilo substituído ou não substituído, C2-C6 alcinilo substituído ou não substituído, C3-C8-cicloalquilo substituído ou não substituído, C3-C8-heterocicloalquilo substituído ou não substituído, arilo substituído ou não substituído e heteroarilo substituído ou não substituído.

Cada R4 pode estar opcionalmente substituído independentemente com um ou mais grupos R6.

Cada R6 é independentemente seleccionado do grupo que consiste em Ci-C6-alquilo, alcoxi, alcoxicarbonilo, arilo substituído ou não substituído, aril-Ci-C6-alquilo substituído ou não substituído, heteroarilo substituído ou não substituído, heteroaril-Ci-Cõ-alquilo substituído ou não substituído, C3-C8-cicloalquilo substituído ou não substituído, C3-C8· -heterocicloalquilo substituído ou não substituído, carboxilo, ciano, halogéneo, hidroxi, amino, aminocarbonilo, acilamino, nitro, sulfoxi, sulfonilo, sulfonilamina, aminossulfonilo e tri-halo-Ci-Cô-alquilo.

Numa forma de realização, R6 é independentemente seleccionado do grupo de Ci-C6-alquilo, C3-C8-cicloalquilo, acilamino, aminocarbonilo, arilo, heteroarilo, ciano, halogéneo, sulfonilo, alcoxi e tri-halometilo. R'' é hidrogénio ou Ci-Cô-alquilo; R3 é B, em que 26 B é: <*-(CHaín—Ff em que n é um inteiro independentemente seleccionado de 1, 2, 3, 4; em que R5 é carboxi.

De acordo com uma forma de realização, R3 é B, em que n é um inteiro seleccionado de 1, 2, 3 ou 4.

Ainda noutra forma de realização, R3 é B com n=l, e em que R5 é carboxi.

Ainda noutra forma de realização, R3 é B com n=3, e em que R5 é carboxi. X é CH2 ou NH; cada Y é independentemente C(0) ou CH2; e Z é C (0) ou CHR7.

Noutra forma de realização, X é CH. Noutra forma de realização, pelo menos um Y é C(0). Noutra forma de realização, Z é CHR7.

Numa forma de realização preferida, X é CH, Y é C (0) e Z é CHR7, em que R‘ é hidrogénio.

Noutra forma de realização preferida, X é CH, pelo menos um Y é C (0) e Z é C (0) . como

Compostos de Fórmula (I') também incluem os seus isómeros geométricos, as suas formas opticamente activas, 27 enantiómeros, diastereómeros, suas formas de racematos, bem como respectivos sais farmaceuticamente aceitáveis.

Um subgrupo especifico de Fórmulas (I) e (I') consiste em compostos de Fórmula (Ia), em que R1, R2, R3 são definidos como nas Fórmulas (I) e (I') acima.

Outro subgrupo de Fórmula (Ia) consiste em compostos de Fórmulas (Ia-1) e (Ia-2), em que R1, R2, R3 são definidos como acima.

Compostos de Fórmulas (Ia-1) e (Ia-2) existem na forma de enantiómeros, como mostrado em baixo.

Enantiómero A

Enantiómero B consiste R3 são

Outro subgrupo especifico de Fórmulas (I) e (I') em compostos de Fórmula (Ib), em que R1, R2 definidos como para as Fórmulas (I) e (I') acima. 28

Um subgrupo Fórmula (Ib) consiste em compostos de Fórmulas (Ib-1) e (Ib-2), em que R1, R2, R3 são definidos como acima.

{MJ

Compostos de Fórmulas (Ib-1) e (Ib-2) existem na forma de enantiómeros, como mostrado em baixo.

R\ - o=c: 7 0 f tf

Enantiómero A

Enantiómero B

Outro subgrupo especifico de Fórmulas (I) e (IT ) consiste em compostos de Fórmula (Ic), em que R1, R2, R3 são definidos como para as Fórmulas (I) e (I') acima. como acima.

Um subgrupo de Fórmulas (Ic-1)

Fórmula (Ic) consiste e (Ic-2), em que R1, R2, em R3 compostos de são definidos 29

Compostos de Fórmulas (Ic-1) e (Ic-2) existem na forma de enantiómeros, como mostrado em baixo.

Enantiómero A Enantiómero B

Outro subgrupo especifico de Fórmulas (I) e (I') consiste em compostos de Fórmula (Id), em que R1, R2, R3 são definidos como para as Fórmulas (I) e (I') acima.

m

Um subgrupo de Fórmula (Id) consiste em compostos de Fórmulas (Id-1) e (Id-2), em que R1, R2, R3 são definidos como acima.

Compostos de Fórmulas (Id—1) e (Id— 2) existem na forma de enantiómeros, como mostrado em baixo. 30 *\ 5 <·' RHf· | >^Q \e >s r’-4·· $ 4=0 RS Enantiómero A Enantiómero B Enantiómeros puros, bem como misturas racémicas de compostos de Fórmulas (Ia-1) e (Ia-2), (Ib- -1) e (Ib-2), (Ic— 1) e (Ic-2) e (Id-1) e (Id-2), pertencem ao âmbito da invenção. Diastereoisómeros dos mesmos também pertencem ao âmbito da presente invenção.

Compostos preferidos de Fórmulas (I') são compostos seleccionados da lista seguinte: ácido [5-cloro-l'-[(2-meti1-1,3-tiazol-4-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2,4-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(quinolin-2-ilmetil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(4-cianobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(3-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(3,4-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(1-naftilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 31 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(3-fenoxibenzil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético ácido [5-cloro-l'-(3-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético ácido (1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético ácido [5-cloro-l'-(4-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(3-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'(2,3-di-hidro-l,4-benzodioxin-2-ilmetil)-2,2', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(piridin-2-ilmetil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-l(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-{[5-(trifluorometil)-2-furil]metil}espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [5-cloro-l'-(4-metilbenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[3-(trifluorometil)benzil] espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2-naftilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(1-feniletil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-feniletil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetil)- 2,2', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético 32 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[(2E)-3-fenilprop-2-en-l- il]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[4-(trifluorometil)benzil] espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido 4 —(1'-benzil-6-cloro-2,2 ', 5 '-trioxoespiro[indolo- 3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico ácido [5-cloro-l'-(2-etoxietil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [1' — [2 —(benziloxi)etil]-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-fenoxietil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(3-fenilprop-2-in-l-il) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(l-metil-lH-imidazol-2-il)metil]- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido 4-[5-cloro-l'-(4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico ácido 4-[5-cloro-l'-(4-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico ácido 4-[5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[4-(trifluorometil) benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico ácido [l'-benzil-2,2',5'-trioxo-5-(trifluorometoxi)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [1'-(4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(trifluoro metoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [1'-(3-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(trifluoro metoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [1'-(2 — fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(trifluoro metoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 33 ácido [2,2',5 '-trioxo-5-(trifluorometoxi)-1'-[3-(trifluoro-metil)benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1] acético ácido [1'-(1-naftilmetil)-2,2',5'-trioxo-5-(trifluoro metoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético ácido [1'-(4-clorobenzil)-2, 2', 5'-trioxo-5-(trifluoro metoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [1'-(4-fluorobenzil)-2, 2', 5'-trioxo-5-(trifluoro metoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido 4-[5-cloro-l'-(4-metoxibenzil)-2, 2', 5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico ácido 4-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2, 2 ',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico ácido [(3 S)—11-benzil-5-cloro-2,2 ', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [(3R)-1'-benzil-5-cloro-2,2 ', 5 '-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [6-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [6-cloro-l'-(3-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [6-cloro-l'-(4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido 4-[5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-feniletil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico ácido [5-cloro-l'-(3,5-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(4-fenoxibenzil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[4-(metilsulfonil)benzil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 34 ácido [1'-[4-(aminocarbonil)benzil]-5-cloro-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]—1(2H)—il]acético ácido [5-cloro-l'-(3-cianobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(5-metilisoxazol-3-il)metil]-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [1'-(1,3-benzotiazol-2-ilmetil)-5-cloro-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(5-cloro-2-tienil)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(5-cloro-l,2,4-tiadiazol-3-il)metil]- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[(2-fenil-l,3-tiazol-4-il) metil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2-cloro-4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2,5-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [1'-[4-(acetilamino)benzil]-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(6-cloropiridin-3-il)metil]-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(lH-indol-3-ilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(1,3-tiazol-4-ilmetil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(4-cloropiridin-3-il)metil]-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(piridin-3-ilmetil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 35 ácido [5-cloro-l' -[(3,5-dimetilisoxazol-4-il)metil]- 2,2’,5’-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [ 1’- [ (5-tert-butil-l,2,4-oxadiazol-3-il)metil]-5- cloro-2,2’,5’-trioxoespiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l’-[(5-ciclopropil-l,3,4-tiadiazol-2-il) metil]-2,2’,5’-trioxoespiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)- il]acético ácido [5-cloro-l’-[(4-metoxi-3,5-dimetilpiridin-2-il) metil]-2,2’,5’-trioxoespiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l’-[(4,6-dicloropiridin-3-il)metil]-2,2’,5’-trioxoespiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2’,5’-trioxo-1’-(2-tienilmetil)espiro [indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l’-[(3,4-dimetoxipiridin-2-il)metil]- 2,2’,5’-trioxoespiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [5-cloro-l’-(isoquinolin-l-ilmetil)-2,2’,5’-trioxoespiro [indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-2,2’,5’-trioxo-1’-[(5-fenil-l,2,4-oxadiazol-3-il)metil]espiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético l’-benzil-5-cloro-l-(lH-tetrazol-5-ilmetil)-2’H,5’H-espiro [indolo-3,3’-pirrolidino]-2,2’,5’(1H)-triona ácido (3R)-[5-cloro-l’-(3-clorobenzil)-2,2’,5’-trioxoespiro [indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido (3S)-[5-cloro-l’-(3-clorobenzil)-2,2’,5’-trioxoespiro [indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido (3R)-[5-cloro-l’-(3-metoxibenzil)-2,2’,5’-trioxo espiro [indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido (3S)-[5-cloro-l’-(3-metoxibenzil)-2,2’,5’-trioxo espiro [indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 36 ácido [5-cloro-l'-(2,4-difluorobenzil)-2,2',5'-trioxo- espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-i1]acético ácido [5-cloro-l'-(1,3-oxazol-2-ilmetil)-2,2',5'-trioxo- espiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(4-metoxi-3-metilpiridin-2-il)metil]- 2,2' , 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [5-cloro-l'-{ [2-(4-clorofenil)-l,3-tiazol-4-il] metil}-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-{[5-(4-metoxifenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il] metil}-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(1-metil-lH-l,2,3-benzotriazol-5-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)- il]acético ácido [5-cloro-l'-(3-furilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2-cloro-5-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2,5-difluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2,3-difluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(3,5-difluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(3,4-difluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(l-metil-lH-benzimidazol-2-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [5-cloro-l'-(3-fluoro-4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 37 ácido [5-cloro-l'-(3-cloro-5-fluorobenzil)-2,2', 5'-trioxo- espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]- 2,2', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [5-cloro-l'-[(3-metil-5-fenilisoxazol-4-il)metil]- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ácido [5-cloro-l'-{[2-(3-clorofenil)-l,3-tiazol-4-il] metil}-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2 — fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5'-cloro-1-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,2',5-trioxoespiro [ imidazolidino-3,3'-indol]-1'(2'H)-il]acético ácido [5'-cloro-l-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il) metil ] - 2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2 Ή)-il] acético ácido (1-benzi1-5'-cloro-2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-1'(2Ή)-il)acético ácido [5'-cloro-1-(2-fluorobenzil)-2,2',5-trioxoespiro [imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2 Ή)-il]acético ácido (3R)-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2', b'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido (3S)-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido (3S)-[5-cloro-l'-(2-fluoro-5-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido (3R)-[5-cloro-l'-(2-fluoro-5-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido (1'-benzil-5-cloro-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1(2H)-il)acético 38 ácido [5-cloro-l'-[(3-metil-5-fenilisoxazol-4-il)metil]- 2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido [5-cloro-l'-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]- 2,2'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético.

Sais ou complexos catiónicos farmaceuticamente aceitáveis de compostos de Fórmulas (I) e (I'), e compostos de subgrupos de Fórmulas (Ia, Ib, Ic, Id) contendo, por exemplo, um resíduo carboxílico são sais formados com sais de metais alcalinos, sais de metais alcalino-terrosos, sais de alumínio, sais de amónio e sais com aminas orgânicas farmaceuticamente aceitáveis.

Num segundo aspecto, a invenção proporciona derivados espiro de Fórmulas (I) ou (I') para utilização como medicamento. Numa forma de realização preferida, estes derivados espiro são compostos de sub-Fórmulas (Ia), (Ib), (Ic), (Id). Noutra forma de realização preferida, os compostos têm Fórmulas (Ia-1), (Ia-2), (Ib—1), (Ib-2), (Ιοί) , (Ic-2), (Id-1) ou (Id-2) .

Noutra forma de realização, o derivado espiro para utilização como medicamento é seleccionado dos compostos seleccionados da lista apresentada acima e dos compostos seguintes: ácido (1'-benzil-5-fluoro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético ácido 4-(l'-alil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico 39 ácido [5-cloro-l'-(2-metoxietil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido 4-(1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo- 3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico ácido (1'-benzil-5-metoxi-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético ácido [5-fluoro-l'-[(2-metoxietoxi)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido 4-(1'-alil-5-fluoro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico ácido 4 —(11-benzil-5-fluoro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo- 3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico, e ácido [5-cloro-l'-[2-(dimetilamino)-2-oxoetil]-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético.

Num terceiro aspecto, a invenção proporciona a utilização de um derivado espiro de acordo com a Fórmula (I), (I'), ou suas sub-Fórmulas (Ia, Ib, Ic, Id), para a preparação de um medicamento destinado ao tratamento e/ou prevenção de uma doença seleccionada de doenças alérgicas, como asma alérgica, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, e dermatoses inflamatórias, como dermatite atópica, hipersensibilidade de contacto, dermatite alérgica de contacto, urticária crónica/urticária idiopática/autoimune crónica, exantemas induzidos por fármacos (por exemplo, necrólise epidérmica tóxica ou síndroma de Lyell/síndroma de Stevens-Johnson/síndroma da hipersensibilidade a fármacos), fotodermatose ou erupção polimorfa solar (por exemplo, dermatite de contacto fotoirritante, dermatite de contacto fotoalérgica, dermatite actínica crónica) e miosite, perturbações neurodegenerativas, como dor neuropática, e outras doenças com um componente inflamatório, como artrite reumatóide, esclerose múltipla, 40 osteoartrite, e doença inflamatória do intestino (IBD) e outras doenças e perturbações associadas a actividade do CTRH2. Numa forma de realização preferida, o derivado espiro é seleccionado das Fórmulas (Ia-1), (Ia-2), (Ib-1), (Ib-2), (Ic—1), (Ic—2), (Id-1) ou (Id-2).

Num quarto aspecto, a invenção proporciona um método de tratamento e/ou prevenção de um paciente que sofre de uma doença seleccionada de doenças alérgicas, como asma alérgica, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, e dermatoses inflamatórias, como dermatite atópica, hipersensibilidade de contacto, dermatite alérgica de contacto, urticária crónica/urticária idiopática/autoimune crónica, exantemas induzidos por fármacos (por exemplo, necrólise epidérmica tóxica ou síndroma de Lyell/síndroma de Stevens-Johnson/síndroma da hipersensibilidade a fármacos), fotodermatose ou erupção polimorfa solar (por exemplo, dermatite de contacto fotoirritante, dermatite de contacto fotoalérgica, dermatite actínica crónica) e miosite, perturbações neurodegenerativas, como dor neuropática, e outras doenças com um componente inflamatório, como artrite reumatóide, esclerose múltipla, osteoartrite, e doença inflamatória do intestino (IBD) e outras doenças e perturbações associadas a actividade do CTRH2, por administração de um derivado espiro de acordo com a Fórmula (I), (I'), ou suas sub-Fórmulas (Ia, Ib, Ic, Id) . Numa forma de realização preferida, o derivado espiro é seleccionado das Fórmulas (Ia-1), (Ia-2), (Ib-1), (Ib-2), (Ic-1), (Ic-2), (Id-1) ou (Id-2). O termo "prevenção", como usado aqui, deve ser entendido como prevenção, inibição, atenuação ou reversão parcial ou 41 total de um ou mais sintomas ou causa(s) de doença alérgica ou dermatite inflamatória.

Os compostos da invenção, em conjunto com um adjuvante, transportador, diluente ou excipiente convencionalmente empregue, podem ser manipulados na forma de composições farmacêuticas e respectivas dosagens unitárias, e nessa forma podem ser empregues como sólidos, como comprimidos ou cápsulas cheias, ou líquidos, como soluções, suspensões, emulsões, elixires ou cápsulas cheias com os mesmos, todos para utilização oral, ou na forma de soluções injectáveis esterilizadas para utilização parentérica (incluindo subcutânea). Essas composições farmacêuticas e respectivas formas galénicas unitárias podem compreender ingredientes em proporções convencionais, com ou sem compostos ou princípios activos adicionais, e essas formas galénicas unitárias podem conter qualquer quantidade eficaz adequada do ingrediente activo proporcional ao intervalo de dosagem diária pretendido a ser empregue.

Num quinto aspecto, a invenção proporciona uma composição farmacêutica compreendendo um derivado espiro de acordo com a Fórmula (I), (I'), ou suas sub-Fórmulas (Ia, Ib, Ic, Id). Numa forma de realização preferida, a composição farmacêutica compreende um derivado espiro de (Ia-1), (Ia-2), (Ib-1), (Ib-2), (Ic-1), (Ic—2), (Id-1) ou (Id-2), juntamente com um excipiente ou transportador farmaceuticamente aceitável.

Os compostos da invenção são tipicamente administrados na forma de uma composição farmacêutica. Essas composições podem ser preparadas de um modo bem conhecido na área farmacêutica e compreendem pelo menos um composto activo. 42

Em geral, os compostos desta invenção são administrados numa quantidade farmaceuticamente eficaz. A quantidade do composto realmente administrada será tipicamente determinada por um médico, à luz das circunstâncias relevantes, incluindo o estado a ser tratado, a via de administração escolhida, o composto real administrado, a idade, peso e resposta do paciente individual, a gravidade dos sintomas do paciente e afins.

As composições farmacêuticas destas invenções podem ser administradas por uma variedade de vias, incluindo oral, rectal, transdérmica, subcutânea, intravenosa, intramuscular e intranasal. As composições para administração oral podem tomar a forma de soluções ou suspensões liquidas em volume, ou pós em volume. Mais habitualmente, no entanto, as composições são apresentadas em formas galénicas unitárias, para facilitar uma dosagem rigorosa. 0 termo "formas galénicas unitárias" refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias para sujeitos humanos e outros mamíferos, em que cada unidade contém uma quantidade predeterminada de material activo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado, associada a um excipiente farmacêutico adequado. Formas galénicas unitárias típicas incluem ampolas ou seringas pré-cheias e pré-medidas das composições líquidas, ou pílulas, comprimidos, cápsulas ou afins no caso de composições sólidas. Nessas composições, o derivado metilenamida substituído de acordo com a invenção é habitualmente um componente minoritário (desde cerca de 0,1 até cerca de 50% por peso ou, preferivelmente, desde cerca de 1 até cerca de 40% por peso), o restante consistindo em vários veículos ou transportadores e 43 auxiliares de processamento úteis para formar a forma galénica desejada.

Formas liquidas adequadas para administração oral podem incluir um veiculo aquoso ou não aquoso adequado com tampões, agentes de suspensão e distribuição, corantes, aromatizantes e afins. Formas sólidas podem incluir, por exemplo, qualquer um dos ingredientes seguintes, ou compostos de uma natureza semelhante: um aglutinante, como celulose microcristalina, goma de tragacanto ou gelatina; um excipiente, como amido ou lactose; um agente de desintegração, como ácido alginico, Primogel ou amido de milho; um lubrificante, como estearato de magnésio; um agente deslizante, como dióxido de silício coloidal; um edulcorante, como sucrose ou sacarina; ou um agente aromatizante, como hortelã-pimenta, salicilato de metilo ou aroma de laranja.

Composições injectáveis são tipicamente baseadas em solução salina ou solução salina tamponada com fosfato esterilizada injectável ou outros transportadores injectáveis conhecidos na área. Como mencionado acima, os derivados espiro de Fórmula (I) nessas composições são tipicamente um componente minoritário, frequentemente variando entre 0, 05 e 10% por peso, com o restante consistindo no transportador injectável e afins.

Os componentes acima descritos para composições administradas oralmente ou injectáveis são meramente representativos. Outros materiais, bem como técnicas de processamento e afins, são apresentados na Parte 5 de "Remington's Pharmaceutical Sciences", 20a Edição, 2000, 44

Marck Publishing Company, Easton, Pensilvânia, que é incorporado aqui por referência.

Os compostos desta invenção também podem ser administrados em formas de libertação prolongada ou a partir de sistemas de distribuição de fármacos de libertação prolongada. Uma descrição de materiais representativos de libertação prolongada também pode ser encontrada nos materiais incorporados em "Remington's Pharmaceutical Sciences".

Num sexto aspecto, a invenção proporciona um método de síntese de um composto de acordo com a Fórmula (I), (I' ) , ou suas sub-Fórmulas (Ia, Ib, Ic, Id) . Numa forma de realização preferida, o derivado espiro é seleccionado das Fórmulas (Ia-1), (Ia-2), (Ib-1), (Ib-2), (Ic-1), (Ic-2), (Id-1) ou (Id— 2) .

Os derivados espiro exemplificados nesta invenção podem ser preparados a partir de materiais de partida facilmente disponíveis utilizando os seguintes métodos e procedimentos gerais. Será apreciado que, quando foram apresentadas condições experimentais típicas ou preferidas (isto é, temperaturas reaccionais, tempos, moles de reagentes, solventes, etc.), também podem ser utilizadas outras condições experimentais, a menos que afirmado em contrário. Condições reaccionais óptimas podem variar com os reagentes ou solventes particulares utilizados, mas essas condições podem ser determinadas pelo profissional utilizando procedimentos de optimização de rotina.

As abordagens de síntese gerais para obter compostos de Fórmula (Ia) estão representadas nos Esquemas la-lc. Aí, derivados espiroindolinona de acordo com a fórmula geral 45

Ia, em que os substituintes R1, R2 e R3 são como definidos acima, podem ser preparados em 6 passos químicos, a partir de isatina VIII preparada intencionalmente ou comercialmente disponível seguindo, num caso, dois protocolos de síntese diferentes sublinhados como via A e B, ou a partir de oxoindolo XIX preparado intencionalmente ou comercialmente disponível, como esboçado nos esquemas la até lc e 2 até 6 aqui em baixo.

Esquema la p rR? TVo v^vV> H Ytíi m

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De acordo com a primeira abordagem, os derivados isatina VIII em que R1 é como definido acima reagem com cianoacetato de metilo para sofrerem uma reacção de Knoevenagel, na presença de uma base adequada (por exemplo, piperidina) e sob condições de refluxo, dando origem aos correspondentes derivados indolinona VII. Os compostos intermediários VI foram obtidos após tratamento de derivados indolinona VII com um cianeto adequado, por exemplo, cianeto de potássio, cianeto de sódio ou ciano-hidrina de acetona, à temperatura ambiente durante a noite ou sob condições de refluxo num período mais curto, em 46 metanol como solvente. Os dois passos podem ser igualmente realizados de modo sequencial ou combinados num processo num único reactor. Os derivados espiroindolinona V foram isolados após ciclização de compostos intermediários VI em condições acídicas, preferivelmente numa mistura de cloreto de hidrogénio e metanol. Esta reacção pode ser conduzida em solventes como metanol, etanol ou isopropanol, à temperatura ambiente ao longo do tempo dependendo da reactividade intrínseca dos compostos VI, e também requereu um método tradicional de aquecimento térmico, utilizando condições comuns bem conhecidas do profissional, como

Esquema 2

Esquema 2, em baixo. p irA, ΝβόΗ,ΟΟϊΜ* ^ .,-^,1' «CNoiWaCN \ $»o '"'M •HA*-0 k μ (CH,.yli0MiCN k Ví HCIíMbGH j ÁeCSH V»

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Os derivados espiroindolinona II são obtidos seguindo dois métodos diferentes. 0 primeiro método consiste na via A como mostrado no Esquema 3, partindo de derivados espiroindolinona V, os compostos espiroindolinona II foram isolados seguindo alquilações sequenciais. A alquilação ocorre no azoto do anel indolinona primeiramente utilizando uma base adequada, por exemplo, hidreto de sódio em DMF, na presença de um agente alquilante adequado, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R3 é definido como acima, permitindo a obtenção dos compostos espiroindolinona intermediários IV. Num passo subsequente, os intermediários espiroindolinona IV foram tratados com um 47 agente alquilante, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R2 é definido como acima, na presença de uma base adequada, por exemplo, carbonato de potássio como base, num solvente adequado, por exemplo, N, N-dimetilformamida, à temperatura ambiente, pelo método térmico tradicional ou utilizando tecnologia de microondas. Após este processo em 2 passos, os derivados espiroindolinona II foram isolados, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional, como mostrado no Esquema 3, em baixo.

Esquema 3

9! s (CHjfcvCO,»»

«AW IV W * Cl. i, MsO

Via A

KaHouKOiSíu íuKjÕOjj aw W ¥ Cl, fe, t4 0 segundo método consiste na via B como mostrado no Esquema 4, partindo de derivados espiroindolinona V, os compostos espiroindolinona II foram isolados seguindo alquilações sequenciais. A alquilação ocorre exclusivamente no azoto do anel succinimida utilizando primeiramente uma base adequada, preferencialmente carbonato de potássio em DMF, na presença de agentes alquilantes, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R2 é definido como acima, permitindo a obtenção dos compostos espiroindolinona intermediários III. Num passo seguinte, os intermediários espiroindolinona III podem ser tratados com vários nucleófilos, por exemplo, cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, na presença de uma base, como carbonato de potássio, tert-butóxido de potássio ou hidreto de sódio, em solventes tais como N,N-dimetilformamida ou tetra-hidrofurano anidros, 48 preferencialmente à temperatura ambiente. Após este procedimento em 2 passos, os derivados espiroindolinona II foram isolados, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional, como mostrado no Esquema 4, em baixo. Os dois passos podem ser igualmente conduzidos num processo num único reactor.

Esquema 4

«StJo-ilBuOK .•..iKjCOj

»

Um aspecto adicional relativamente à via B consiste na obtenção de derivados espiroindolinona II utilizando acrilato de tert-butilo como agente alquilante. Neste passo especifico, os intermediários espiroindolinona III podem ser tratados com acrilato de tert-butilo na presença de bases adequadas, por exemplo, hidreto de sódio, tert-butóxido de potássio ou carbonato de potássio, em solventes anidros, como tetra-hidrofurano ou DMF, à temperatura ambiente, permitindo o isolamento dos derivados espiroindolinona II após técnicas de purificação de cromatografia "flash", utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional, como mostrado no Esquema 5, em baixo. 49

Esquema 5

Via &

Rj«(Çjy&co^u

Num passo final, como mostrado no Esquema 6, os derivados espiroindolinona de fórmula Ia podem ser tratados com vários ácidos, por exemplo, ácido trifluoroacético ou cloreto de hidrogénio, para desproteger os derivados éster de tert-butilo II e para dar origem aos derivados espiroindolinona esperados Ia. Esta reacção pode ser conduzida a várias temperaturas e em vários solventes, por exemplo, diclorometano, dioxano ou tetra-hidrofurano, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional.

Esquema 6

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Uma segunda abordagem geral para obter compostos de Fórmula (Ia) está representada no Esquema lb. Ai, derivados espiroindolinona de acordo com a fórmula geral Ia, em que os substituintes R1, R2 e R3 são como definidos acima, podem ser igualmente preparados em 6 passos químicos, a partir de isatina VIII preparada intencionalmente ou comercialmente disponível, seguindo os protocolos de síntese esboçados no esquema lb aqui em baixo. 50 Esquema lb feCÓi : *ftw JM&* cu «uDK RVW w - e* 8í: f> to»o MCCWÍM» . .--·ν*,Λ *l-:r —- 1 >«0 R? VÍKfc w» eu j H 1 Í.--.V N ·.,:<> i ----------- rL$ · >0 AcíSi RS IV Wh R* ec *CQ~° h m a2 TOS*«u ftj^N&Hou R* i

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Num método mais especifico, os derivados isatina VIII em que R1 é como definido acima são alquilados utilizando uma base adequada, preferencialmente carbonato de potássio em DMF, na presença de agentes alquilantes adequados, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R3 é definido como acima, dando origem aos correspondentes derivados isatina VlIIb. Os compostos indolinona VIIb foram obtidos após condensação de Knoevenagel com cianoacetato de metilo na presença de uma base adequada (por exemplo, piperidina) sob condições de refluxo. Os derivados intermediários VIb foram isolados após tratamento dos compostos indolinona VIIb preferencialmente com ciano-hidrina de acetona na presença de uma base adequada, como carbonato de potássio, em solventes como tetra-hidrofurano ou metanol, utilizando métodos térmicos tradicionais. Podem ser igualmente utilizados cianetos inorgânicos, como cianetos de potássio ou sódio, em condições de refluxo em metanol como solvente. Os derivados espiroindolinona IV foram obtidos após ciclização de derivados intermediários VIb em condições acidicas, preferivelmente numa mistura de 51 cloreto de hidrogénio e metanol, aplicando métodos térmicos tradicionais bem conhecidos do profissional. Obteve-se alquilação de derivados espiroindolinona IV utilizando uma base adequada, por exemplo, carbonato de potássio ou tert-butóxido de potássio em DMF, na presença de um agente alquilante adequado, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R2 é definido como acima, permitindo o isolamento dos compostos espiroindolinona intermediários II.

Num passo final, como mostrado no Esquema lb, os derivados espiroindolinona de Fórmula (Ia) podem ser obtidos após tratamento dos derivados éster de alquilo II com ácidos de Lewis, como iodeto de trimetilsililo, bases, por exemplo, hidróxido de tetrabutilamónio, ou em condições enzimáticas bem conhecidas do profissional.

Uma terceira abordagem geral para obter compostos de Fórmula (Ia) está representada no Esquema lc. Ai, derivados espiroindolinona de acordo com a fórmula geral Ia, em que os substituintes R1, R2 e R3 são como definidos acima, podem ser igualmente preparados em 6 até 7 passos químicos, a partir de oxoindolo XIX preparado intencionalmente ou comercialmente disponível, como esboçado no esquema lc aqui em baixo. 52

Esquema lc d Ú Λ ' T ff' 3 H RtOfOUia NSlj R*·* Ά b1-*- ] Vo R1-» sm? 'r - N *- o"::° m m 30ΡΛ mu! r! "O?* k tff .«c 3 WWi TPAouHCÉ & ϋ «? w R:4* I >o ou LsKtSW XjCOjoiiiíOlSo BM* ou NMt W Bf. *1 t ^niCn^co^ú ψ vv» «4 í v R'-’"*· Ff ÍK* ,.11...1+- _ V / 9 Pil±

Num método mais especifico, os derivados oxoindolo XIX em que R1 é definido como acima reagem com cloroformato de etilo na presença de uma base adequada, como trietilamina, para dar origem aos derivados correspondentes XX. 0 tratamento adicional com DMAP em DMF permitiu o rearranjo do carbonato, dando origem aos correspondentes derivados XXVI. Obteve-se alquilação na posição 3 de derivados XXVI utilizando uma base adequada, preferencialmente DBU em N,N-dimetilformamida ou tetra-hidrofurano, na presença de agentes alquilantes adequados, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R3 é definido como acima, dando origem aos derivados indolinona duplamente alquilados XXVII à temperatura ambiente ou sob condições de refluxo. 0 tratamento com vários ácidos, por exemplo, ácido trifluoroacético ou cloreto de hidrogénio, permitiu a desprotecção dos derivados éster de tert-butilo XXVII para isolar os correspondentes ácidos carboxilicos intermediários XXVIII. Esta reacção pode ser conduzida a várias temperaturas e em vários solventes, por exemplo, 53 diclorometano, dioxano ou tetra-hidrofurano, em condições padrão bem conhecidas do profissional. Alternativamente, pode obter-se desprotecção utilizando lipases bem conhecidas do profissional. 0 sistema espiroindolinona III foi formado por reacção dos ácidos carboxilicos XXVIII com I, 1'-carbonildiimidazolo em tetra-hidrofurano na presença de alquilaminas primárias adequadas, em que R2 é definido como acima, à temperatura ambiente ou em condições de refluxo. Num passo seguinte, os intermediários espiroindolinona III podem ser tratados com vários nucleófilos, por exemplo, cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R3 é definido como acima, na presença de uma base, como carbonato de potássio, tert-butóxido de potássio ou hidreto de sódio, em solventes como N,N-dimetilformamida ou tetra-hidrofurano anidros, preferencialmente à temperatura ambiente, por métodos térmicos tradicionais ou utilizando tecnologia de microondas, para obter os derivados espiroindolinona Ia ou II. Num passo final, como mostrado no Esquema lc, os derivados éster de tert-butilo II podem ser tratados com vários ácidos, como trifluoroacetato ou cloreto de hidrogénio, para obter desprotecção e dar origem aos derivados espiroindolinona esperados Ia. Esta reacção pode ser conduzida a várias temperaturas e em vários solventes, por exemplo, diclorometano, dioxano ou tetra-hidrofurano, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional. Várias abordagens de síntese gerais diferentes para obter compostos de Fórmula (Ib) estão representadas nos Esquemas 7a e 7b. Aí, derivados espiroindolinona de acordo com a fórmula geral Ib, em que os substituintes R1, R2 e R3 são como definidos acima, podem ser preparados em 4 passos químicos, a partir de isatina VIII preparada 54 intencionalmente ou comercialmente disponível, seguindo os protocolos de síntese esboçados nos esquemas 7a e 7b aqui em baixo.

Num método mais específico, os derivados isatina VIII em que R1 é definido como acima reagem com carbonato de amónio e cianeto de potássio para formar os derivados hidantoína IX, na presença de etanol/água como solventes. Os compostos espiroindolinona XI foram isolados seguindo alquilações sequenciais. A alquilação selectiva foi possível neste caso devido à maior acidez do NH do tipo imida comparado com amida, utilizando uma base adequada, como tert-butóxido de potássio ou carbonato de potássio em DMF, na presença de agentes alquilantes, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R2 é definido como acima, permitindo a obtenção dos compostos espiroindolinona intermediários X. Num passo seguinte, os intermediários espiroindolinona X podem ser tratados com vários electrófilos, por exemplo, cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, na presença de uma base, como tert-butóxido de potássio, carbonato de potássio ou hidreto de sódio, em solventes tais como N,N-dimetilformamida ou tetra-hidrofurano anidros, à temperatura ambiente, pelo método térmico tradicional ou utilizando tecnologia de microondas. Após este processo em 2 passos, os derivados espiroindolinona XI foram isolados utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional, como mostrado no Esquema 7a em baixo.

Num passo final, como mostrado no Esquema 7a, os derivados espiroindolinona de fórmula Ib podem ser tratados com vários ácidos, por exemplo, ácido trifluoroacético ou cloreto de hidrogénio, para desproteger os derivados éster 55 de tert-butilo XI e dar origem aos derivados espiroindolinona esperados Ib. Esta reacção pode ser conduzida a várias temperaturas e em vários solventes, por exemplo, diclorometano, dioxano ou tetra-hidrofurano, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional.

Esquema 7a p * Ϊ ;^0 fi m H KC*I> T .-wVNH ——^ Rl-J 1 -X H» SLíÚiX. HjO, α al o r A-A' sj H ix " p :··· : —0

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Alternativamente, os derivados isatina VIII em que R1 é definido como acima foram alquilados utilizando uma base adequada, preferencialmente carbonato de potássio em DMF, na presença de agentes alquilantes adequados, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R3 é definido como acima, para dar origem aos derivados isatina correspondentes VlIIb. Os derivados isatina VlIIb reagem adicionalmente com carbonato de amónio e cianeto de potássio, formando os derivados hidantoina IXb, na presença de etanol/água como solventes. Os compostos espiroindolinona XI foram isolados após alquilação utilizando uma base adequada, preferencialmente carbonato de potássio em DMF, na presença de agentes alquilantes, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R2 é definido como acima. 56

Num passo final, como mostrado no Esquema 7b, os derivados espiroindolinona de fórmula Ib podem ser tratados com vários ácidos, por exemplo, ácido trifluoroacético ou cloreto de hidrogénio, para desproteger os derivados éster de tert-butilo XI e dar origem aos derivados espiroindolinona esperados Ib. Esta reacção pode ser conduzida a várias temperaturas e em vários solventes, por exemplo, diclorometano, dioxano ou tetra-hidrofurano, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional.

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Outra abordagem de síntese geral para obter compostos de Fórmula (Ic) está representada no Esquema 8. Aí, derivados espiroindolinona de acordo com a fórmula geral Ic, em que os substituintes R1, R2 e R3 são como definidos acima, podem ser preparados em 8 passos químicos, a partir de derivados VII preparados intencionalmente (Esquema 1, 2), seguindo os protocolos de síntese esboçados no esquema 8 aqui em baixo.

Num método mais específico, os derivados VII em que R1 é definido como acima reagem com nitrometano, na presença de piperidina como base, para dar origem aos correspondentes derivados XII. Os compostos espiroindolinona XIV foram isolados seguindo um processo em dois passos sequenciais. A 57 hidrólise dos derivados éster XII com hidróxido de sódio ou potássio em metanol deu origem ao intermediário de síntese XIII, que foi adicionalmente descarboxilado por aquecimento a 160 graus em solventes de elevado ponto de ebulição, como dimetilformamida. Os derivados XIV foram isolados após processos de precipitação e lavagens como descrito na secção experimental. O tratamento adicional de derivados XIV com dicloreto de paládio com um grande excesso de acetamida numa mistura de solventes tetra-hidrofurano-água deu origem aos correspondentes derivados amidas primárias XV. O anel pirrolidinona foi formado por reacção de derivados amidas primárias XV com zinco em ácido acético, conduzindo à redução da fracção nitro na amina primária, seguido de ciclização espontânea para dar origem aos derivados tricíclicos XVI. Os compostos espiroindolinona XVIII foram isolados seguindo alquilações sequenciais. A alquilação ocorre no azoto do anel indolinona primeiramente utilizando uma base adequada, por exemplo, tert-butóxido de potássio em DMF, na presença de um agente alquilante adequado, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R3 é definido como acima, permitindo a obtenção dos compostos espiroindolinona intermediários XVII. Num passo subsequente, os intermediários espiroindolinona XVII foram tratados com um agente alquilante, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R2 é definido como acima, na presença de uma base adequada, por exemplo, hidreto de sódio ou tert-butóxido de potássio como base, num solvente adequado, por exemplo, N,N-dimetilformamida ou tetra-hidrofurano, à temperatura ambiente, pelo método térmico tradicional ou utilizando tecnologia de microondas. Após este processo em 2 passos, os derivados espiroindolinona XVIII foram 58 isolados utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional, como mostrado no Esquema 8 em baixo.

Num passo final, como mostrado no Esquema 8, os derivados espiroindolinona de fórmula Ic podem ser tratados com vários ácidos, por exemplo, ácido trifluoroacético ou cloreto de hidrogénio, para desproteger os derivados éster de tert-butilo XVIII e dar origem aos derivados espiroindolinona esperados Ic. Esta reacção pode ser conduzida a várias temperaturas e em vários solventes, por exemplo, diclorometano, dioxano ou tetra-hidrofurano, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional.

Esquema 8 R-4

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Outra abordagem de síntese geral para obter compostos de Fórmula (Id) está representada no Esquema 9. Aí, derivados espiroindolinona de acordo com a fórmula geral Id, em que os substituintes R1, R2 e R3 são como definidos acima, podem ser preparados em 7 passos químicos, a partir de derivados 59 2-oxoindolo comerciais XIX seguindo os protocolos de síntese esboçados nos esquemas 9 aqui em baixo.

Num método mais específico, os derivados XIX em que R1 é definido como acima reagem com cloroformato de etilo ou benzilo, na presença de trietilamina como base, dando origem aos correspondentes derivados XX. 0 tratamento adicional com amoníaco em metanol permitiu a desprotecção do carbonato, dando origem aos correspondentes derivados XXI. 0 anel pirrolidinona foi formado por reacção de derivados XXI com isocianato de 2-bromoetilo, na presença de hidreto de sódio, em dimetilformamida, para dar origem aos derivados tricíclicos XXII. 0 grupo protector de carbamato foi clivado com óxido de platina em dimetilformamida sob pressão de hidrogénio, ou com hidróxido de potássio em etanol-água, no caso de carbamato de benzilo ou carbamato de etilo, respectivamente. Após estes procedimentos, os derivados XIII foram isolados. Os compostos espiroindolinona XXV foram isolados seguindo alquilações sequenciais. A alquilação ocorre no azoto do anel indolinona primeiramente utilizando uma base adequada, por exemplo, tert-butóxido de potássio em DMF, na presença de um agente alquilante adequado, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R3 é definido como acima, permitindo a obtenção dos compostos espiroindolinona intermediários XXIV. Num passo subsequente, os derivados espiroindolinona XXIV foram tratados com um agente alquilante, como cloretos, brometos, iodetos ou mesilatos de alquilo, em que R2 é definido como acima, na presença de uma base adequada, por exemplo, hidreto de sódio ou tert-butóxido de potássio como base, num solvente adequado, por exemplo, N,N-dimetilformamida ou tetra-hidrofurano, preferencialmente à temperatura ambiente. Após este 60 processo em 2 passos, os derivados espiroindolinona XXV foram isolados, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional, como mostrado no Esquema 9 em baixo.

Num passo final, como mostrado no Esquema 9, os derivados espiroindolinona de fórmula Id podem ser tratados com vários ácidos, por exemplo, ácido trifluoroacético ou cloreto de hidrogénio, para desproteger os derivados éster de tert-butilo XXV e dar origem aos derivados espiroindolinona esperados Id. Esta reacção pode ser conduzida a várias temperaturas e em vários solventes, por exemplo, diclorometano, dioxano ou tetra-hidrofurano, utilizando condições padrão bem conhecidas do profissional.

Esquema 9

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As abreviaturas seguintes referem-se às abreviaturas usadas em baixo: 61 min (minuto) , hr (hora) , g (grama) , MHz (MegaHertz) , mL (mililitro), mmol (milimole), mM (milimolar), TA (temperatura ambiente), AcNH2 (Acetamida), AcOH (Ácido acético), ATP (Adenosida Trifosfato), BSA (Albumina de Soro Bovino), BU4NOH (Hidróxido de tetrabutilamónio), CDI (1,1'-Carbonildiimidazolo), DBU (1,8-Diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno) , DCM (Diclorometano), DIPEA (diisopropiletilamina), DMAP (4-Dimetilaminopiridina), DMSO (Dimetilsulfóxido), DMF (N,N-Dimetilformamida) , CH3NO2 (Nitrometano), CsC03 (Carbonato de césio), cHex (Ciclo-hexanos) , Et3N (Trietilamina), EtOAc (Acetato de etilo), EtOH (Etanol), HC1 (cloreto de hidrogénio), K2C03 (Carbonato de Potássio), Nal (Iodeto de Sódio), KCN (Cianeto de potássio), MeOH (Metanol), MgS04 (Sulfato de magnésio), NH3 (amoníaco), NaH (Hidreto de sódio), NaHC03 (Bicarbonato de sódio), NH4C1 (Cloreto de amónio), NH4(C03)2 (carbonato de amónio), TEA (Trietilamina), TFA (Ácido trifluoroacético), THF (Tetra-hidrofurano), tBuOK (tert-Butóxido de potássio), PdCl2 (Dicloreto de paládio), PetEter (Éter de petróleo), Pt02 (Óxido de platina), TBME (Éter de tert-Butilmetilo), TMSI (Iodeto de trimetilsililo), Zn (Zinco em pó), ta (temperatura ambiente). HPLC (Cromatografia Liquida de Alto Desempenho), FC (Cromatografia "Flash" em silica gel), MS (Espectrometria de Massa), NMR (Ressonância Magnética Nuclear), PBS (Solução Salina Tamponada com Fosfato), SPA (Ensaio de Proximidade de Cintilações), TLC (Cromatografia de Camada Fina), UV (Ultravioleta).

Se o conjunto acima de métodos gerais de síntese não for aplicável para obter compostos de acordo com a Fórmula (I) e/ou intermediários necessários para a síntese de compostos de Fórmula (I), devem ser utilizados métodos de preparação adequados conhecidos do profissional. Em geral, as vias de 62 síntese para qualquer composto individual de Fórmula (I) irão depender dos substituintes específicos de cada molécula e da necessária disponibilidade imediata de intermediários; mais uma vez, esses factores são apreciados pelos profissionais. Quanto a todos os métodos de protecção e desprotecção ver Philip J. Kocienski, em "Protecting Groups", Georg Thieme Verlag Estugarda, Nova Iorque, 1994, e Theodora W. Greene e Peter G. M. Wuts em "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, 3a Edição 1999.

Compostos desta invenção podem ser isolados em associação com moléculas de solvente por cristalização a partir de evaporação de um solvente apropriado. Os sais de adição de ácidos farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de Fórmula (I) que contêm um centro básico podem ser preparados de um modo convencional. Por exemplo, uma solução da base livre pode ser tratada com um ácido adequado, puro ou numa solução adequada, e o sal resultante é isolado por filtração ou por evaporação sob vácuo do solvente reaccional. Sais de adição de bases farmaceuticamente aceitáveis podem ser obtidos de um modo análogo, tratando uma solução do composto de Fórmula (I) com uma base adequada. Os dois tipos de sais podem ser formados ou interconvertidos utilizando técnicas de resina de permuta iónica.

Seguidamente a presente invenção será ilustrada através de alguns exemplos, não se pretendendo que sejam considerados limitadores do âmbito da invenção. 63

PARTE EXPERIMENTAL

Os dados de HPLC, NMR e MS apresentados nos exemplos descritos em baixo são obtidos do modo seguinte: HPLC: coluna Waters Symmetry C8 50 x 4,6 mm, Condições: MeCN/H20, 5 até 100% (8 min), comprimentos de onda de absorção máxima 230-400 nm; Espectros de massa: PE-SCIEX API 150 EX (APCI e ESI), Espectros de LC/MS: Waters ZMD (ES); 1H-NMR: Bruker DPX-300MHz. HPLC analítica quiral é realizada utilizando uma coluna Chiralpak AD-H 250 x 4,6 mm, fase móvel etanol/ ácido fórmico 100:1.

As purificações por HPLC preparativa são realizadas com o Sistema HPLC Waters Prep LC 4000 equipado com colunas Prep Nova-Pak®HR C 186 pm 60 Ã, 40 x 30 mm (até 100 mg) ou com XTerra® Prep MS C8, 10 pm, 50 x 300 mm (até 1 g). Todas as purificações são efectuadas com um gradiente de MeCN/H20 0,09% TFA. A HPLC semi-preparativa de fase reversa é realizada com o Sistema Biotage Parallex Flex equipado com colunas Supelcosil™ ABZ + Plus (25 cm x 21,2 mm, 12 pm) ; detecção UV a 254 nm e 220 nm; fluxo 20 mL/min (até 50 mg). A Análise de TLC é realizada em placas Merck Precoated 60 F254 - Purificações por cromatografia "flash" são efectuadas em suporte de Si02, utilizando misturas de ciclo-hexano/EtOAc ou DCM/MeOH como eluentes.

Intermediário 1: (2Z)- (5-cloro-2-oxo-l,2-di-hidro-3H-indol- 3-ilideno)(ciano)acetato de metilo (ver Esquemas 1, 2, composto VII)

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Uma mistura agitada de 5-cloro-lH-indolo-2,3-diona, material de partida VIII, (90,8 g, 0,5 mol) e cianoacetato 64 de metilo (44,1 mL, 0,5 mol) em metanol (1000 mL) foi tratada com piperidina (2 mL) e aquecida no refluxo durante 5 horas antes de permanecer durante a noite à temperatura ambiente. O éster de metilo do ácido (5-cloro-2-oxo-l,2-di-hidro-indol-3-ilideno)-cianoacético em bruto foi removido por filtração, lavado com metanol frio (2 x 150 mL) e seco in vacuo, dando origem a 117,6 g (90%) de um sólido púrpura escuro. Este consistiu numa mistura 6,5:1 de isómeros geométricos que estava suficientemente pura, por 1H NMR, para reacção subsequente. 1H NMR (400MHz, DMSO) ; 4,12 e 4,18 (2s, 3H) , 7,14 e 7,17 (2d, 1H) , 7,65 e 7,75 (2m, 1H) , 8,00 e 8,48 (2s, 1H) , 11,35 e 11,45 (2s largo, 1H) . MS (ESI-) : 261.

Intermediário 2: (2Z)-ciano(5-metoxi-2-oxo-l,2-di-hidro-3H- indol-3-ilideno)acetato de metilo: (ver Esquemas 1, 2, composto VII)

Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 1, partindo de 5-metoxi-lH-indolo-2,3-diona e cianoacetato de metilo, o composto do titulo foi isolado, após evaporação, na forma de um sólido púrpura escuro com 88% de rendimento. Este consistiu numa mistura 4,5:1 de isómeros geométricos (99 % de pureza por HPLC). '"H NMR (400MHz, DMSO); 3,76 e 3,80 (2s, 3H) , 3,92 e 4,00 (2s, 3H) , 6,82 e 6,88 (2d, 1H) , 7,12 (m, 1H) , 7,40 e 7,78 (2s, 1H) , 10,90 (s largo, 1H) . MS (ESI + ) : 259; MS (ESI-) : 257 .

Intermediário 3: (2 Z)-ciano[2-oxo-5-(trifluorometoxi)-1,2- 65 65 (ver di-hidro-3H-indol-3-ilideno]acetato_de metilo

Esquemas 1, 2, composto VII)

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 1, partindo de 5-(trifluorometoxi)-isatina e cianoacetato de metilo, o composto do titulo foi isolado, após evaporação, na forma de um sólido púrpura escuro com 77% de rendimento. Este consistiu numa mistura 7,5:1 de isómeros geométricos. ^ NMR (400MHz, DMSO) ; 3,75 e 3,80 (2s, 3H) , 6,82 e 6,88 (2d, 1H) , 7,28 e 7,38 (2d, 1H) , 7,58 e 8,12 (2s, 1H) , 11,04 e 11,15 (2s largo, 1H).

Intermediário 4: (2Z)-(6-cloro-2-oxo-l,2-di-hidro-3H-indol- 3-ilideno)(ciano)-acetato de metilo, (ver Esquemas 1, 2, composto VII)

H

Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 1, partindo de 6-cloroisatina e cianoacetato de metilo, o composto do titulo foi isolado, após evaporação, na forma de um sólido castanho-escuro com 84% de rendimento. Este consistiu numa mistura 5,5:1 de isómeros geométricos (98 % de pureza por HPLC). NMR (400MHz, DMSO); 3,76 e 3,82 (2s, 3H) , 6,78 e 6,85 (2s, 1H) , 7,00 e 7,10 (2d, 1H) , 7,72 e 8,08 (2d, 1H) , 11,00 e 11,14 (2s largo, 1H) . MS (ESI + ) : 263; MS (ESI ): 261.

Intermediário 5: Éster de metilo do ácido (5-cloro-3-ciano- 66 66 (ver 2-ΟΧΟ-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il)-cianoacético Esquemas 1, 2, composto VI)

Uma suspensão agitada de éster de metilo do ácido (5-cloro-2-oxo-l,2-di-hidro-indol-3-ilideno)-cianoacético em bruto, intermediário 1 (56,0 g, 0,21 mol) em metanol (750 mL) foi tratada, em porções, com cianeto de potássio (13,8 g, 0,21 mol) seguido de água (45 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 7 horas e a solução preta resultante foi deixada repousar durante a noite. O solvente foi removido in vacuo, adicionou-se água (500 mL) e a mistura foi acidificada pela adição de ácido clorídrico 2 M [CUIDADO: AINDA PODEM ESTAR PRESENTES VESTÍGIOS DE CIANETO!] . A mistura foi extraída com diclorometano (3 x 300 mL). Os extractos combinados foram lavados com água (2 x 300 mL) e secos (MgS04) . O solvente foi removido in vacuo, dando origem ao éster de metilo do ácido (5-cloro-3-ciano-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il)-cianoacético em bruto na forma de um sólido castanho claro (53,3 g, 86%). Este consistiu numa mistura de diastereómeros, que estava suficientemente pura, por 1H NMR, para reacção subsequente. 1H NMR (400MHz, DMSO) ; 3,62 (s, 3H) , 5,72 e 5,82 (2s, 1H) , 6,92 (m, 1H) , 7,40 (m, 1H) , 7,56 e 7,62 (2s, 1H) , 11,60 e 11, 64 (2s, 1H) .

Intermediário 6: ciano(3-ciano-5-metoxi-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il)acetato de metilo (ver Esquemas 1, 2, composto VI)

1:1 ,^0 H 67

Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 5, partindo de (2Z)-ciano(5-metoxi-2-oxo-l,2-di-hidro-3H-indol-3-ilideno)acetato de metilo (intermediário 2) e cianeto de potássio, o composto do titulo foi isolado, após evaporação, na forma de um sólido castanho claro com 90% de rendimento. Este consistiu numa mistura de diastereómeros. XH NMR (400MHz, DMSO) ; 3, 75, 3, 77, 3, 80 e 3,82 (4s, 6H) , 5,80 e 5,88 (2s, 1H) , 6,98 (m, 1H) , 7,06 (m, 1H) , 7,20 e 7,28 (2s, 1H), 11,42 (s, 1H) .

Intermediário 7: ciano[3-ciano-2-oxo-5-(trifluorometoxi)-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il]acetato de metilo, (ver Esquemas 68

Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 5, partindo de (2Z)-(6-cloro-2-oxo-l,2-di-hidro-3H-indol-3-ilideno)(ciano)acetato de metilo (intermediário 4) e cianeto de potássio, o composto do titulo foi isolado, após evaporação, na forma de um sólido castanho claro com 61% de rendimento. Este consistiu numa mistura de diastereómeros. XH NMR (400MHz, DMSO) ; 3,90 e 3,95 (2s, 3H) , 6,00 e 6,05 (2s, 1H) , 7,22 (s, 1H) , 7,38-7,48 (m, 1H) , 7,70 e 7,80 (2d, 1H) , 11,90 (s, 1H) .

Intermediário 9: 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirroli- dino]-2,21,51-triona, (ver Esquemas 1, 2, 3, 4, composto V)

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Uma solução agitada do éster de metilo do ácido (5-cloro-3-ciano-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il)-cianoacético em bruto, intermediário 5 (53,3 g, 0,18 mol) em metanol (450 mL) foi arrefecida num banho de gelo-água e foi saturada com cloreto de hidrogénio gasoso, mantendo a temperatura inferior a 20°C. A solução resultante foi deixada repousar à temperatura ambiente durante a noite e depois foi aquecida cuidadosamente no refluxo durante 5 horas, dando origem a uma suspensão amarela. O solvente foi removido in vacuo, dando origem a um resíduo semi-sólido que foi misturado com ácido acético glacial (375 mL) e aquecido no refluxo, com agitação, durante 16 horas. Após arrefecimento num banho de gelo-água, a 5-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona em bruto foi removida por filtração, lavada com ácido acético glacial frio (100 mL) seguido de água (100 mL) e depois éter dietílico (100 mL) , e foi seca in vacuo, dando origem a um sólido quase branco. Uma segunda colheita foi obtida por remoção do solvente in 69 vacuo dos filtrados combinados de ácido acético e repetindo o procedimento de purificação, dando origem a um total de 30,5 g (66%). Suficientemente puro por 1H NMR para reacção subsequente. 1H NMR (400MHz, DMSO) ; 3,00 (d, 1H) , 3,20 (d, 1H) , 6,92 (d, 1H), 6,35 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 11,00 (s largo, 1H), 11,84 (s largo, 1H) . MS (ESI-): 249.

Intermediário 10:_5-metoxi-2'H,5'H-espiro[indolo-3,3'- pirrolidino]-2,2',5'(lH)triona (ver Esquemas 1, 2, 3, 4, composto V)

Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 9, partindo de ciano(3-ciano-5-metoxi-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il)acetato de metilo (intermediário 6) e na presença de cloreto de hidrogénio em metanol, o composto do titulo foi isolado, após evaporação, na forma de um sólido castanho claro com 46% de rendimento (100 % de pureza por HPLC). 1H NMR (400MHz, DMSO); 2,86 (d, 1H) , 3,05 (d, 1H) , 3,62 (s, 3H) , 6,74 (m, 2H) , 7,15 (s, 1H) , 10,52 (s, 1H) , 11,67 (s largo, 1H) . MS (ESI~) : 245.

Intermediário_11:_5- (trif luorometoxi) -2' H, 5'H-espiro [ indo lo-3, 3 ' -pirrolidino] -2,2',5' (1H) -triona. (ver Esquemas 1, 2, 3, 4, composto V)

Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 9, partindo de ciano[3-ciano-2-oxo-5-(trifluorometoxi)-2,3- 70 di-hidro-lH-indol-3-il]acetato de metilo (intermediário 7) e na presença de cloreto de hidrogénio em metanol, o composto do título foi isolado, após evaporação, na forma de um sólido quase branco com 30% de rendimento (99 % de pureza por HPLC). ^ NMR (400MHz, DMSO); 3,00 (d, 1H), 3,20 (d, 1H), 7,02 (d, 1H), 7,32 (m, 1H), 7,75 (d, 1H), 11,05 (s largo, 1H), 11,60 (s largo, 1H) . MS (ESI-): 299.

Intermediário 12: 2-cloro-N-(3-cloropirazin-2-il)benzeno-sulfonamida. (ver Esquemas 1, 2, 3, 4, composto V)

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 9, partindo de (6-cloro-3-ciano-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il)(ciano)acetato de metilo (intermediário 8) e na presença de cloreto de hidrogénio em metanol, o composto do titulo foi isolado, após evaporação, na forma de um sólido quase branco com 22% de rendimento (80 % de pureza por HPLC). ^ NMR (400MHz, DMSO); 3,18 (d, 1H) , 3,35 (d, 1H) , 7,13 (s, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,72 (d, 1H), 11,16 (s largo, 1H), 12,00 (s largo, 1H). MS (ESI): 249.

Intermediário 13: Éster de tert-butilo do ácido (5-cloro-2,2 ' , 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il)acético, (ver Esquemas 1, 3, composto IV)

71

Uma suspensão agitada de hidreto de sódio (dispersão 60% em óleo minutoseral, 1,68 g, 42 mmol) em N, N-dimetilformamida anidra (140 mL) foi tratada com a 5-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona em bruto, intermediário 9 (5,0 g, 19,96 mmol) . Após agitação à temperatura ambiente durante 40 minutos, a solução laranja escuro foi arrefecida num banho de gelo e foi tratada, durante 30 minutos, com uma solução de bromoacetato de t-butilo (3,24 g, 2,26 mL, 18,96 mmol) em N, N-dimetilformamida anidra (46 mL) . A mistura amarela escura resultante foi deixada atingir a temperatura ambiente e foi agitada durante 4 horas. A mistura resultante foi diluída com cloreto de amónio aquoso saturado (500 mL) e foi extraída com acetato de etilo (3 x 200 mL) . Os extractos combinados foram secos (MgS04) e o solvente foi removido, dando origem ao éster de tert-butilo do ácido (5-cloro-2,2' , 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1-il)acético em bruto, que foi purificado por cromatografia "flash" (sílica), eluindo com éter de petróleo (40-60) contendo uma quantidade crescente (0 até 80%) de acetato de etilo. Isto deu origem a 4,76 g (95%) de um sólido amarelo. ΧΗ NMR (400MHz, CDC13, TMS) ; 1,50 (s, 9H) , 3,03 (d, 1H) , 3,38 (d, 1H) , 4,22 (d, 1H) , 4,54 (d, 1H) , 6,73 (d, 1H) , 7,22 (d, 1H) , 7,35 (m, 1H) , 8,32 (s largo, 1H) . MS (ESI-): 363.

Intermediário 14: 1'-Benzil-5-cl°ro 5H espiro[indolo_3,3' pirrolidino]-2,21,51-triona (ver Esquemas 1, 4, 5, composto III)

72

Uma solução agitada da 5-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona em bruto, intermediário 9 (800 mg, 3,19 mmol) em N,N-dimetilformamida anidra (6 mL) foi tratada com tert-butóxido de potássio (377 mg, 3,19 mmol). Após agitação à temperatura ambiente durante 40 minutos adicionou-se brometo de benzilo (0,38 mL, 3,19 mmol). A mistura foi agitada durante 2 horas e deixada repousar durante a noite. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etilo (3 x 50 mL) . Os extractos combinados foram secos (MgSCU) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem à 1'-benzil-5-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona em bruto que foi purificada por cromatografia "flash" (sílica) , eluindo com éter de petróleo (40-60) contendo uma quantidade crescente (0 até 75%) de acetato de etilo. Isto deu origem a 789 mg (73%) de um sólido amarelo • NMR (400MHz, CDC13, TMS) ; 2,97 (d, 1H) , 3,35 (d, 1H) 4, 78 (s, 2H) , 6,85 (d, 1H) , 6,98 (s, 1H) , 7,25-7,48 (m 6H ), 8,06 (s largo, 1H). MS (ESI") : 339.

Intermediário 15: éster de tert-butilo do ácido 3 — (1' — benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3 ' -pirrolidin]-1-il)-propiónico, (ver Esquema 5, composto II)

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Uma suspensão agitada de hidreto de sódio (dispersão 60% em óleo, 7 mg, 0,16 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (2 mL) foi tratada com 1'-benzil-5-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona, intermediário 14 (50 mg, 0,15 mmol) . Após agitação à temperatura ambiente durante 30 73 minutos adicionou-se acrilato de tert-butilo (0,03 mL, 0,19 mmol) e a mistura resultante foi agitada durante 2 horas e deixada repousar à temperatura ambiente durante 18 horas. Adicionou-se água (15 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 15 mL). Os extractos combinados foram lavados com solução salina (15 mL) e secos (MgS04) e o solvente foi removido in vácuo, dando origem ao éster de tert-butilo do ácido 3-(1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il)-propiónico em bruto. Este foi purificado por cromatografia "flash" (sílica), eluindo com éter de petróleo (40-60) contendo uma quantidade crescente (0 até 50%) de acetato de etilo, dando origem a um sólido branco (37 mg 54%) . Este era suficientemente puro, por 1H NMR, para ser submetido ao passo de hidrólise final. !h NMR (400MHz, CDC13, TMS) \—1 \—1 (s, 9H), 2, 63 (t, 2H) 2, 93 (d, 1H) , 3,31 (d, 1H) , 3,98 (t, 2H), 4,75 (s, 2H) 6, 96 (m, 2H), 7,29-7,37 (m, 6H) .

Intermediário 16: Éster de tert-butilo do ácido (l'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il) acético, (ver Esquemas 1, 3, 4, composto II) N O O \ cs:. :·. Ί "'· o •v h O..·. ò

Via A:

Uma solução agitada de éster de tert-butilo do ácido (5-cloro-2,2 ', 5 '-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il) acético, intermediário 13 (100 mg, 0,27 mmol) em N, N-dimetilformamida anidra (2,5 mL) foi tratada com carbonato de potássio (114 mg, 0,82 mmol) seguido de brometo de 74 benzilo (56 mg, 0,04 mL, 0,33 mmol) e foi aquecida durante 18 horas a 50°C. Adicionou-se água (25 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 25 mL) . Os extractos combinados foram lavados com solução salina (25 mL) e secos (MgS04) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem ao Éster de tert-butilo do ácido (1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il)-acético em bruto. Este foi purificado por cromatografia "flash" (sílica), eluindo com éter de petróleo (40-60) contendo uma quantidade crescente (0 até 50%) de acetato de etilo, dando origem a um sólido branco (104 mg, 83%). Este era suficientemente puro, por 1H NMR, para ser submetido ao passo de hidrólise final.

Via B:

Uma suspensão agitada de hidreto de sódio (dispersão 60% em óleo [116 mg, 2,9 mmol]) em tetra-hidrofurano anidro (30 mL) foi tratada com 1'-benzil-5-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona, intermediário 14 (900 mg, 2,64 mmol). Após agitação à temperatura ambiente durante 30 minutos, a solução límpida foi tratada com bromoacetato de tert-butilo (0,51 mL, 3,44 mmol). A suspensão resultante foi agitada durante 3 horas e depois foi deixada repousar durante a noite. Adicionou-se água (100 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 100 mL) . Os extractos combinados foram lavados com solução salina (100 mL) e secos (MgS04) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem ao éster de tert-butilo do ácido (l'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il)-acético em bruto. Este foi purificado por cromatografia "flash" (sílica), eluindo com éter de petróleo (40-60) contendo uma quantidade crescente (0 até 50%) de acetato de etilo, dando origem a um sólido branco (1,088 g, 91%). 75 NMR ( 400MHz, CDC13, TMS) ; \—1 s, 9H) , 2,97 ( d. 1—1 3, 35 ( d, 1H) , 4,21 (d, 1H) , 4,53 ( (d, 1H) , 4,76 ( :s, 2H) , 6, 72 ( d, 1H) , 7,00 (s, 1H) , 7,30-7, 37 (m, 6H) . MS (ESI + ) : 399 (perda de tBu).

Intermediário 17: Éster de etilo do ácido (1'-benzil-5-cloro-2,2', 5'-trioxoespiro[indolo-3, 3'-pirrolidin]-1-il)-acético, (ver Esquemas 1, 3, 4, composto II) ο "7 i j; ; V>(} " &<./ p

Uma suspensão agitada de hidreto de sódio (dispersão 60% em óleo [39 mg, 0,969 mmol]) em tetra-hidrofurano anidro (10 mL) foi tratada com 1'-benzil-5-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona, intermediário 14 (300 mg, 0,88 mmol). Após agitação à temperatura ambiente durante 30 minutos, a solução límpida foi tratada com bromoacetato de etilo (0,13 mL, 1,16 mmol) . A suspensão resultante foi agitada durante 3 horas e depois foi deixada repousar durante a noite. Adicionou-se água (50 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 50 mL) . Os extractos combinados foram lavados com solução salina (50 mL) e secos (MgSCU) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem ao éster de etilo do ácido (1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il)-acético em bruto. Purificação por cromatografia "flash" (sílica) , eluindo com éter de petróleo (40-60) contendo uma quantidade crescente (0 até 50%) de acetato de etilo, seguida de trituração com éter diisopropílico, deu origem a um sólido branco (264 mg, 70%), p.f. 143-144°C. 76 76 (d, 1H) (d, 1H) 6H) . 1H NMR (4 Ο ΟΜΗ ζ; CDC13; Me4Si): 1,27 (t, 3Η) , 2,99 3,36 (d, 1Η) , 4,22 (q, 2H) , 4,31 (d, 1H) , 4,63 4,76 (s, 2H) , 6,74 (d, 1H) , 7,00 (d, 1H) , 7,32 (m,

Intermediário 18: 51-cloro-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2',5(1’H)-triona, (ver Esquema 7a, composto IX)

Uma mistura de 5-cloroisatina (5,00 g; 27,54 mmol), carbonato de amónio (21,14 g; 0,22 mol) e cianeto de potássio (2,37 g; 36,35 mmol) em EtOH (130 mL) e água (70 mL) foi aquecida sob refluxo suave durante 3 horas. A mistura foi derramada em água (400 mL) e foi acidificada com AcOH até um pH de 5. Após remoção dos solventes orgânicos in vacuo, um sólido precipitou e foi filtrado e seco, dando origem ao composto do titulo com 58% de rendimento (pureza por HPLC 94%). MS(ESI") : 250, 0.

Intermediário_19 :_5'-cloro-l - (5-cloro-2-fluorobenzil) - 2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2',5(1'H)-triona, (ver Esquema 7a, composto X)

Uma solução gelada de 5'-cloro-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2',5(1Ή)-triona, intermediário 18 (500,00 mg; 1,99 mmol) em DMF (10 mL) foi tratada com carbonato de potássio (274, 62 mg; 1,99 mmol). O banho de gelo foi removido e a mistura reaccional foi tratada com brometo de 5-cloro-2-fluorobenzilo (444,05 mg; 1,99 mmol). Após 1,5 horas adicionou-se acetato de etilo e a fase orgânica foi 77 lavada com água e solução salina e foi seca (MgS04) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem ao produto em bruto na forma de um sólido vermelho que foi purificado por cromatografia (sílica), eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (20 até 50%), dando origem ao composto do título com 2 6% de rendimento (pureza por HPLC 94%). MS (ESI + ) : 394,1; MS (ESI"): 392, 0.

Intermediário 20: [5'-cloro-1-(5-cloro-2-fluorobenzil)- 2,2',5-trioxoespiro-[imidazolidino-4,3'-indol]-1' (21H)— i1] acetato de tert-butilo, (ver Esquemas 7a e 7b, composto XI) F . % . CS Í4 o o....

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Método A:

Uma solução gelada de 5'-cloro-1-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2',5(1'H)-triona, intermediário 19 (1,100 g; 2,79 mmol) em DMF (10 mL) foi tratada com hidreto de sódio (123,89 mg; 3,10 mmol) e agitada durante 30 minutos. Adicionou-se bromoacetato de tert-butilo (2,11 mL; 2,79 mmol) e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente. Adicionou-se acetato de etilo, a fase orgânica foi lavada com água e solução salina e foi seca (MgS04) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem ao produto em bruto na forma de um sólido vermelho que foi purificado por cromatografia (sílica) , eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (20 até 50%), dando origem ao composto do título com 12% de rendimento (pureza por HPLC 98,8%). MS (ESI + ) : 510,2 . 78 Método B: A uma solução de (5'-cloro-2,2'5'-trioxoespiro [imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2' H)-il)acetato de tert-butilo, intermediário 54, (7,90 g, 21,59 mmol) em N,N-dimetilformamida (80 mL) adicionou-se carbonato de potássio (3,58 g, 25,91 mmol) em porções a 0-5 °C. Continuou-se a agitação a 0-5 °C durante 45 minutos e durante 90 minutos adicionais à temperatura ambiente. A suspensão foi tratada com brometo de 5-cloro-2-fluorobenzilo e foi agitada durante uma hora à temperatura ambiente. 0 sólido foi filtrado, o filtrado foi submetido a partição entre água (400 mL) e éter de tert-butilmetilo (200 mL) e o produto foi extraído com éter de tert-butilmetilo (3 x 150 mL) . Os extractos combinados foram lavados com água (400 mL) e foram secos (MgS04) , dando origem a um resíduo rosa. Recristalização a partir de tolueno deu origem ao composto do título (6,47 g, 59 %) na forma de um sólido ligeiramente rosa (pureza por HPLC: 96 %).

Intermediário 21: 5'-cloro-1-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4- il)metil]-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2' , 5 (1'H)-triona. (ver Esquema 7a, composto X) A, ...¼ X; o Q.V.:

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 19, partindo de 5'-cloro-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3 ' -indolo]-2,2',5(1Ή)-triona (intermediário 18) e 4-(bromo-metil)-5-metil-3-fenilisoxazolo, o composto do título foi isolado, após purificação por cromatografia (sílica) eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de 79 acetato de etilo (20 até 50%), na forma de um sólido branco com 27% de rendimento. MS(ESI + ) : 423,2; MS(ESI ) : 423, 1.

Intermediário 22: [ 5'-cloro-1-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4- il)metil]-2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-11 (2 Ή)-il] acetato de tert-butilo, (ver Esquemas 7a e 7b, composto XI) %·. Ã ti "" -V··· p

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 20 (método A), partindo de 5'-cloro-1-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2',5(1Ή)-triona (intermediário 21) e

Bromoacetato de tert-butilo, o composto do titulo foi isolado, após purificação por cromatografia (sílica) eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (10 até 30%), na forma um sólido branco com 37% de rendimento (pureza por HPLC 91%) . MS (ESI + ) : 537,3; MS(ESI): 535,6.

Intermediário 23: (l-benzil-5 '-cloro)-2H,5H-espiro[imidazolidino-4, 3'-indolo]-2,2',5(1Ή)-triona, (ver Esquema 7a, composto X) o

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 19, partindo de 5'-cloro-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'- 80 indolo]-2,2',5(1 Ή)-triona (intermediário 18) e brometo de benzilo, o composto do titulo foi isolado, após trituração com éter dietílico, na forma de um sólido bege com 45 % de rendimento. MS(ESI") : 340.

Intermediário 24: [l-benzil-5'-cloro)-2,2',5-trioxoespiro [imidazolidino-4,31-indol]-1' (2Ή)— i1]acetato de tert-butilo, (ver Esquemas 7a e 7b, composto XI)

Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 20 (método A), partindo de (l-benzil-5'-cloro)-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2',5(1'H)-triona (intermediário 23) e Bromoacetato de tert-butilo, o composto do titulo foi isolado, após purificação por cromatografia (sílica) eluindo com uma mistura 1:1 de éter de petróleo e acetato de etilo, na forma de um óleo incolor com 38 % de rendimento. MS(ESI-) : 454.

Intermediário 25: 5'-cloro-1-(2-fluorobenzil)-2H,5H-espiro [imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2',5(1'H)-triona, (ver

Esquema 7a, composto X)

Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 19, partindo de 5'-cloro-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2',5(1Ή)-triona (intermediário 18) e brometo de 2-fluorobenzilo, o composto do título foi isolado, após 81 purificação por cromatografia (sílica) eluindo com éter de petróleo contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (50 até 65%), na forma de um sólido branco com 41% de rendimento. MS(ESI-) : 358.

Intermediário 26:_[5'-cloro-l-(2-fluorobenzil)-2,2',5- trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2'H)— i1]acetato de tert-butilo, (ver Esquemas 7a e 7b, composto XI)

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 20 (método A), partindo de (l-benzil-5'-cloro)-2H,5H-espiro[imidazolidino-4,3'-indolo]-2,2 ', 5 (1 Ή)-triona (intermediário 25) e bromoacetato de tert-butilo, o composto do título foi isolado, após purificação por cromatografia (sílica) eluindo com éter de petróleo contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (20 até 50%), na forma de um sólido branco com 52% de rendimento. MS (ESI") : 454 .

Intermediário 27:_[5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di- hidro-lH-indol-3-il](ciano)acetato de metilo, (ver Esquema 8, composto XII) <r

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Uma suspensão de (2Z)-(5-cloro-2-oxo-l,2-di-hidro-3H-indol-3-ilideno)(ciano)acetato de metilo, intermediário 1 (10,000 g; 38,1 mmol) em nitrometano seco (61 mL; 1,14 mol) foi 82 tratada com piperidina (189 μΐ; 1,90 mmol) . Após agitação durante 3 horas, a mistura foi diluída com acetato de etilo e filtrada em sílica. Evaporação do solvente deu origem a [5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il] (ciano) acetato de metilo na forma de um óleo (9,1 g, 73,8%). Este consistiu numa mistura de diastereómeros que era suficientemente pura para reacção subsequente (pureza por HPLC 97%). MS(ESI + ) : 324,2/ MS(ESI ) : 322,2.

Intermediário 28: ácido [5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il](ciano)acético, (ver Esquema 8, composto XIII)

A uma solução de [5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il](ciano)acetato de metilo, intermediário 27 (5,00 g; 15,45 mmol) em MeOH (150 mL) adicionou-se uma solução de hidróxido de potássio em água (9,27 mL; 5,00 M; 46, 34 mmol) . Após agitação durante 2,5 1, o solvente foi evaporado. 0 resíduo foi recolhido com acetato de etilo, a fase orgânica foi extraída com IN HC1 e foi seca (MgSC>4) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem ao ácido [5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il] (ciano)acético em bruto (4,89 g, quantitativo). Este consistiu numa mistura de diastereómeros, que era suficientemente pura para reacção subsequente (pureza por HPLC 93 %) .

Intermediário 29:_[5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il]acetonitrilo (ver Esquema 8, composto XIV) 83 83 fiO, \ esc.,.. )iaO '>

Uma solução de ácido [5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2, 3-di-hidro-lH-indol-3-il](ciano)acético, intermediário 28 (2,00 g; 6,46 mmol) em DMF anidro (15 mL) foi aquecida a 160 °C durante 1 hora. Após evaporação do solvente, o resíduo foi recolhido em acetato de etilo, foi extraído com solução salina e foi seco (MgS04) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem a [5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il]acetonitrilo em bruto (1,74 g, quant, pureza por HPLC 93%). MS (ESI-) : 264, 1.

Intermediário 30: 2-[5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di- hidro-lH-indol-3-il]acetamida, (ver Esquema 8, composto XV) a’V^V^TtxNa « J -

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Uma solução de [5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il]acetonitrilo, intermediário 29 (775 mg; 2,92 mol) em THF (6 mL) e água (2 mL) foi tratada com acetamida (775 mg; 13,13 mmol) e cloreto de paládio (II) (51,7 mg; 0,29 mmol) e foi agitada durante a noite. Adicionou-se acetato de etilo e a fase orgânica foi lavada com solução salina, foi seca (MgS04) e concentrada in vacuo, dando origem ao composto do título (740 mg) que foi utilizado como tal no passo seguinte (pureza por HPLC 93%) . MS(ESI + ) : 284,1; MS(ESI-) : 282,1.

Intermediário 31: 5-cloro-5'H-espiro[indolo-3,3'-pirroli-dino]-2,5'(lH)-diona, (ver Esquema 8, composto XVI) ii 84 Η A uma suspensão gelada de 2-[ 5-cloro-3-(nitrometil)-2-oxo-2, 3-di-hidro-lH-indol-3-il]acetamida, intermediário 30 (1,10 g; 3,88 mmol) em AcOH (25 mL) adicionou-se zinco em porções (2,5 g; 39 mmol) durante 5 minutos [CUIDADO: REACÇÃO EXOTÉRMICA]. Após 5 minutos de agitação, o banho de gelo foi removido e a mistura reaccional foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi aquecida até ao refluxo durante 2 horas. O solvente foi removido in vacuo, o resíduo foi purificado por Cromatografia "Flash" (sílica), utilizando DCM contendo quantidades crescentes de MeOH (3% até 20%), dando origem ao composto do título (420 mg, 45,8%) que foi utilizado como tal no passo seguinte (pureza por HPLC 77%) . MS(ESI+) : 237,1; MS(ESI-) : 235, 1.

Intermediário 32: (5-cloro-2,5'-dioxoespiro[indolo-3, 3'- pirrolidin]-1(2H)-il]acetato de tert-butilo, (ver Esquema 8, composto XVII) b A uma solução de 5-cloro-5Ή-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,5’(1H)-diona, intermediário 31 (230 mg; 0,97 mol) , em DMF seco (10 mL) adicionou-se tert-butóxido de potássio (109 mg; 0,97 mmol) . A mistura reaccional foi agitada à TA durante 30 minutos, depois foi arrefecida para 0°C e adicionou-se bromoacetato de tert-butilo (190 mg; 0,97 mmol) dissolvido em 3 mL de DMF seco. A mistura reaccional foi agitada durante 1 hora à temperatura 85 ambiente. 0 solvente foi evaporado in vacuo, o resíduo foi novamente dissolvido em acetato de etilo (20 mL) , foi lavado com água e seco (MgSC>4) e o solvente foi removido in vacuo. O resíduo foi purificado por Cromatografia "Flash" (sílica), utilizando ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (50% até 100%), dando origem ao composto do título (341 mg, 52,4%, pureza por HPLC 100%). MS (ESI + ) : 351,1; MS (ESI ) : 349, 2.

Intermediário_33 :_[l'-benzil-5-cloro-2,5' -dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acetato de tert-butilo, (ver Esquema 8, composto XVIII)

•O O A uma solução de (5-cloro-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acetato de tert-butilo, intermediário 32 (175,00 mg; 0,50 mmol), em THF seco (5 mL) adicionou-se hidreto de sódio (24 mg; 0,60 mmol) . A mistura reaccional foi agitada durante 15 minutos, depois adicionou-se brometo de benzilo (71,10 pL; 0,60 mmol). Após agitação durante 10 minutos, o solvente foi evaporado e o resíduo foi novamente dissolvido em acetato de etilo, foi lavado com água e solução salina, seco (MgS04) e removido in vacuo, dando origem a um resíduo que foi purificado por cromatografia (sílica), eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (20 até 50%), dando origem ao composto do título (220 g, 52,1%, pureza por HPLC 96,7%). MS (ESI + ) : 441,4; MS (ESI-) : 439, 2. 86

Intermediário 34: [5-cloro-l'-(5-cloro-2-fluorobenzil)- 2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-(2H)— i1]acetato de tert-butilo, (ver Esquema 8, composto XVIII) = .·

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 33, partindo de [5-cloro-l(2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acetato de tert-butilo (intermediário 32) e brometo de 5-cloro-2-fluoro-benzilo, o composto do título foi isolado, após purificação por cromatografia (sílica) eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (5 até 40%), na forma de um sólido branco com 72,7% de rendimento (pureza por HPLC 94%). MS(ESI + ) : 493, 4; MS(ESI ) : 491,0.

Intermediário 35: [5-cloro-l'-[(3-metil-5-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acetato de tert-butilo, (ver Esquema 8, composto XVIII) U,.Λ...... o ” S. ,N 7 -o si 0:v

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 33, partindo de (5-cloro-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acetato de tert-butilo (intermediário 32) e 4-(bromometil)-3-metil-5-fenilisoxazolo, o composto do título foi isolado após purificação por cromatografia (sílica), eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades 87 crescentes de acetato de etilo (10 até 50%), na forma de um sólido branco com 53% de rendimento (pureza por HPLC 89%). MS (ESI + ) : 522,4; MS (ESI-) : 520, 1.

Intermediário 36: [5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,5'-dioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1] acetato de tert-butilo, (ver Esquema 8, composto XVIII)

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Seguindo o método geral como esboçado para o Intermediário 33, partindo de [5-cloro-l’-(2-fluorobenzil)-2,5'-dioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acetato de tert- butilo (intermediário 32) e brometo de 2-fluorobenzilo, o composto do titulo foi isolado, após purificação por cromatografia (silica) eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (20 até 50%), na forma de um sólido branco com 54% de rendimento (pureza por HPLC 90%). MS (ESI + ) : 459, 3; MS (ESI-) : 457,2.

Intermediário 37: 2-{[(benziloxi)carbonil]oxi}-5-cloro-lH- indolo-l-carboxilato de benzilo (ver Esquema 9, composto XX)

Ci . ...... ;r‘u,u is o A uma solução gelada de 5-clorooxindolo (16,75 g; 100 mmol) e trietilamina (30,50 mL; 220 mmol) em THF (360 mL) adicionou-se gota-a-gota cloroformato de benzilo (37,9 mL; 240 mmol). Após agitação à temperatura ambiente durante 6 horas adicionou-se água e a fase orgânica foi separada, lavada de novo com solução salina, seca (MgSCh) e removida in vacuo, dando origem a um resíduo sólido que foi purificado por recristalização (acetato de etilo), dando origem ao composto do título com 61% de rendimento (pureza por HPLC 89%).

Intermediário 38: 5-cloro-2-oxoindolino-l-carboxilato de benzilo, (ver Esquema 9, composto XXI) cs

2-{[(Benziloxi)carbonil]oxi}-5-cloro-1H-indolo-1-carboxilato de benzilo, intermediário 37 (5,00 g; 11,47 mmol), foi tratado com uma solução de amoníaco em dioxano (25,2 mL; 0,50 M; 12,6 mmol) e agitado durante a noite. Adicionou-se solução salina e a mistura foi extraída com acetato de etilo. A fase orgânica foi seca (MgSCU) e removida in vacuo, dando origem a um resíduo sólido que foi purificado por recristalização (acetato de etilo), dando origem ao composto do título com 59% de rendimento (pureza por HPLC 88%). MS (ESI + ) : 302,1; MS (ESI") : 300, 1.

Intermediário 39: 5-cloro-2,2'-dioxoespiro[indolo-3,3'- pirrolidino]-1(2H)-carboxilato de benzilo, (ver Esquema 9, composto XXII)

Uma solução de 5-cloro-2-oxoindolino-l-carboxilato de benzilo, intermediário 38 (2,00 g; 6,63 mmol), em DMF seco 89 (30,00 mL) foi tratada com hidreto de sódio prat. (265,12 mg; 6,63 mmol). Após 10 minutos adicionou-se isocianato de 2-bromoetilo (599 pL; 6,63 mmol). Passados mais 10 minutos adicionou-se acetato de etilo e o sistema foi lavado com água. A fase orgânica foi seca (MgS04) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem a um resíduo sólido que foi purificado por recristalização (acetato de etilo), dando origem ao composto do título com 57% de rendimento (pureza por HPLC 92%). MS (ESI + ) : 371,1; MS (ESI ) : 369, 1.

Intermediário 40: 5-cloro-2'H-espiro[indolo-3,3'-pirroli-dino]-2,2'(lH)-diona, (ver Esquema 9, composto XXIII)

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Uma solução de 5-cloro-2,2'-dioxoespiro[indolo-3,3'- pirrolidino]-1(2H)-carboxilato de benzilo, intermediário 39 (1,000 g; 2,70 mmol), em DMF (50 mL) foi tratada com óxido de platina (200 mg; 0,88 mmol). A mistura foi colocada num reactor de hidrogenação sob 2 0 atm de hidrogénio. Após agitação durante a noite adicionou-se outra quantidade de dióxido de platina (2,50 g) e continuou-se a hidrogenação a 20 atm H2 durante a noite. A mistura reaccional foi filtrada num filtro de papel e depois o solvente foi removido in vacuo, dando origem ao composto do título com 96% de rendimento (pureza por HPLC 85%) . MS (ESI + ) : 237,0; MS (ESI-) : 235, 0 .

Intermediário 41: (5-cloro-2,2'-dioxoespiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1(2H)-il]acetato de tert-butilo, (ver Esquema 9, composto XXIV)

Uma solução de 5-cloro-5Ή-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,5'(lH)-diona, intermediário 40 (600,00 mg; 2,16 mmol), em 30 mL de DMF seco foi tratada com tert-butóxido de potássio (241,82 mg; 2,16 mmol; 1,00 eq.). Após 10 minutos, a mistura reaccional foi tratada com uma solução de bromoacetato de tert-butilo (420,35 mg; 2,16 mmol) em 6 mL de DMF seco. Após 4 horas, o solvente foi evaporado e o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo. Após adição de água, um sólido precipitou e foi filtrado, dando origem ao composto do título na forma de um sólido cinzento com 30% de rendimento (pureza por HPLC 89%) MS(ESI+) : 351,2; MS (ESI-) : 348, 9.

Intermediário 42: [5-cloro-l1 -[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,2'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acetato de tert-butilo, (ver Esquema 9, composto XXV) \\ | b

Uma suspensão de (5-cloro-2,5'-dioxoespiro[indolo-3, 3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acetato de tert-butilo, intermediário 41 (100 mg; 0,29 mmol), em DMF seco (5 mL) foi tratada com hidreto de sódio prat. (14,8 mg; 0,37 mmol). Após agitação durante 20 minutos adicionou-se 4-(bromometil)-5-metil-3-fenilisoxazolo (86,24 mg; 0,34 mmol). Após agitação durante 1 hora evaporou-se o solvente, dando origem a um resíduo 91 que foi dissolvido em acetato de etilo. A fase orgânica foi lavada com solução salina, seca (MgSCd) e removida ín vacuo, dando origem a um resíduo sólido que foi purificado por cromatografia (sílica) , eluindo com ciclo-hexano contendo quantidades crescentes de acetato de etilo (30 até 50%), dando origem ao composto do título com 58% de rendimento (pureza por HPLC 99%). MS(ESI+) : 522, 4; MS(ESI- ) : 520,2 .

Intermediário 43: (5-Cloro-2,3-dioxo-2,3-di-hidro-lif-indol- 1-il)acetato de metilo (ver Esquema Ib, composto VlIIb) o OU. .. .í 1 í %·.· o <U:, o A uma solução de 5-cloroisatina, composto VIII, (10,0 g, 55,07 mmol) em N,N-dimetilformamida anidra (100 mL) adicionou-se carbonato de potássio (9,87 g, 71,59 mmol) em porções a 0-5 °C. Após agitação a 0-5 °C durante mais 10 minutos e à temperatura ambiente durante uma hora adicional adicionou-se gota-a-gota bromoacetato de metilo (8,25 mL, 60,58 mmol) a uma taxa tal que a temperatura interna não excedeu 35 °C. Deixou-se a suspensão laranja resultante com agitação à temperatura ambiente durante a noite. Adicionou-se água (350 mL) e extraiu-se o produto com acetato de etilo (5 x 100 mL). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com solução salina (100 mL) , foram secos (MgS04) e evaporados sob pressão reduzida, dando origem ao composto do título (10,83 g, 76 %) na forma de um sólido laranja (pureza por HPLC 98 %) . MS (ESI + ) : 254,1; MS (ESI") : 252,1.

Intermediário 44: (5-Cloro-2,3-dioxo-2,3-di-hidro-lH-indol- 92 1-il)acetato de tert-butilo (ver Esquema 7b, composto VlIIb)

92 O

De acordo com o procedimento geral como esboçado acima para a síntese do intermediário 43, f 5-cloroisatina, composto VIII, (10,0 g, 55,07 mmol) reagiu com carbonato de potássio (9,89 g, 5,03 mmol) e bromoacetato de tert-butilo (8,95 mL, 60,58 mmol) em N,N-dimetilformamida (100 mL), dando origem ao composto do título (12,14 g, 75 %) na forma de um sólido laranja (pureza por HPLC: 99 %) após precipitação a partir de água. MS (ESI-) : 294,2.

Intermediário 45: (2 Z)-[5-Cloro-l-(2-metoxi-2-oxoetil)-2- oxo-1,2-di-hidro-3i7-indol-3-ilideno] (ciano) acetato_de metilo, (ver Esquema lb, composto Vllb)

:g A uma suspensão de (5-cloro-2,3-dioxo-2,3-di-hidro-lfí- indol-l-il)acetato de metilo, intermediário 43, (10,17 g, 40,10 mmol) em metanol (200 mL) adicionaram-se cianoacetato de metilo (3,55 mL, 40,10 mmol) e piperidina (0,40 mL, 4,01 mmol) à temperatura ambiente. A suspensão fina resultante foi continuamente agitada à temperatura ambiente durante a noite. O precipitado foi removido por filtração, lavado com metanol (3 x 20 mL) e seco in vacuo, dando origem ao composto do título (11,62 g, 80 %) na forma de um sólido púrpura (pureza por HPLC: 92 %). MS (ESI + ) : 335, 2; MS (ESI-) : 333,2. 93

Intermediário 46: [5-Cloro-3-ciano-l-(2-metoxi-2-oxoetil)-2-OXO-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il](ciano)acetato de metilo, (ver Esquema lb, composto VIb)

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Uma solução de carbonato de potássio (1,39 g, 10,03 mmol) em água (8,2 mL) foi tratada com ciano-hidrina de acetona (4,0 mL, 43,5 mmol) à temperatura ambiente e foi continuamente agitada durante 15 minutos. Adicionou-se gota-a-gota uma suspensão fina de (2Z)-[5-cloro-l- (2- metoxi-2-oxoetil) -2-oxo-l, 2-di-hidro-3íí-indol-3-ilideno](ciano) acetato de metilo, intermediário 45, (11,19 g, 33,43 mmol) em tetra-hidrofurano (500 mL) e a suspensão resultante foi aquecida para o refluxo durante 3 horas. O sólido foi removido por filtração, o resíduo foi lavado com tetra-hidrofurano (3 x 40 mL) e os filtrados recolhidos foram evaporados até à secura. 0 sólido foi dissolvido em diclorometano (250 mL) , foi lavado com NaHC03 saturado (2 x 100 mL) e água (100 mL) e foi seco (MgS04) , dando origem ao composto do título (10,82 g, 89 %) na forma de um sólido vermelho-castanho (pureza por HPLC: 91 %). MS(ESI+): 362,2; MS (ESI ) : 360,2.

Intermediário 47: (5-(31ογο-2,2',5' -trioxoespiro [ indolo- 3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acetato de metilo (ver Esquemas la, lb, 3, composto de estrutura geral IV)

vvV 94

Uma suspensão de [5-cloro-3-ciano-l-(2-metoxi-2-oxoetil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lfí-indol-3-il] (ciano) acetato de metilo, intermediário 46, (10,56 g, 29,19 mmol) em metanol seco (190 mL) foi purgada com cloreto de hidrogénio a -78 °C durante 45 minutos. A suspensão foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e foi adicionalmente aquecida até ao refluxo durante 4 horas. 0 solvente foi removido in vacuo, o sólido remanescente foi suspenso em ácido acético glacial (300 mL) e foi aquecido até ao refluxo durante 5 horas. Evaporação sob pressão reduzida deu origem a um óleo vermelho-castanho, que foi novamente dissolvido em acetato de etilo (300 mL) . A solução foi lavada com água (2 x 200 mL) , as lavagens aquosas foram retroextraidas uma vez com acetato de etilo (200 mL) e os extractos orgânicos foram secos (MgS04) , dando origem ao composto do titulo (10,87 g, quantitativo) na forma de uma espuma solidificada (pureza por HPLC: 91 %). MS (ESI + ) : 323,2; MS (ESI~) : 321,1.

Intermediário 48:_[5-Cloro-l'-(3-clorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acetato_de metilo, (ver Esquemas la, lb, lc, 3, 4, composto de estrutura geral II)

Seguindo o procedimento geral (Via A) como esboçado acima para a síntese do intermediário 16, (5-cloro-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acetato de metilo, intermediário 47, (2,94 g, 9,11 mmol) reagiu com tert-butóxido de potássio (1,07 g, 9,57 mmol) e brometo de 3-clorobenzilo (1,25 mL, 9,57 mmol) em N,N-dimetilformamida 95 anidra (90 mL) à temperatura ambiente durante duas horas, dando origem ao composto do titulo (2,10 g, 52 %) na forma de um pó ligeiramente rosa após trituração a partir de tetra-hidrofurano/éter dietilico. O composto foi isolado em várias fracções (pureza por HPLC: 96-99 %) . MS(ESI + ) : 447,3; MS (ESI') : 445, 3 .

Intermediário 49: 5-Cloro-2-[(etoxicarbonil)oxi]-lff-indolo-1-carboxilato de etilo (ver Esquemas lc, 9, composto XX) o cs v ·· · : ' V 0

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Seguindo o procedimento geral como esboçado acima para a síntese do intermediário 37, 5-clorooxindolo, composto VIII, (20,0 g, 119,34) foi tratado com trietilamina (36,4 mL, 262,54 mmol) e cloroformato de etilo (25,2 mL, 262,54 mmol) durante 90 minutos, dando origem ao composto do título (36, 87 g, 99 %) na forma de um sólido cristalino ligeiramente rosa após manipulação aquosa (pureza por HPLC: 97 %) . MS(ESI') : 310,1.

Intermediário 50: 5-Cloro-2-oxoindolino-l,3-dicarboxilato de dietilo, (ver Esquema lc, composto XXVI) A uma solução de 5-cloro-2-[(etoxicarbonil)oxi]-lH-indolo-1-carboxilato de etilo, intermediário 49, (36,87 g, 118,28 mmol) em N,N-dimetilformamida (100 mL) adicionou-se em porções 4-dimetilaminopiridina (14,45 g, 118,28 mmol), a 0-5 °C, de modo que a temperatura interna não excedeu 5 °C. Obteve-se uma suspensão espessa que foi repetidamente 96 diluída com N,N-dimetilformamida (volume total: 350 mL) para facilitar a agitação. Após duas horas a 0-5 °C adicionou-se uma solução de cloreto de hidrogénio (fumante, 37 %; 9,8 mL) em água (480 mL) a uma velocidade tal que a temperatura interna pôde ser mantida inferior a 15 °C. O precipitado foi filtrado, lavado com água a 0-5 °C (2 x 100 mL) e seco, dando origem ao composto do título (27,45 g, 70 %) na forma de um pó quase branco (pureza por HPLC: 94 %) . MS (ESI + ) : 312,2/ MS (ESI") : 310,2.

Intermediário 51: 3-(2-tert-Butoxi-2-oxoetil)-5-cloro-2-oxoindolino-1,3-dicarboxilato de dietilo, (ver Esquema lc, composto XXVII)

X \ «vV A uma solução de 5-cloro-2-oxoindolino-l,3-dicarboxilato de dietilo, intermediário 50, (5,0 g, 16,04 mmol) em N,N-dimetilformamida anidra (80 mL) adicionou-se gota-a-gota, à temperatura ambiente, 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (2,63 mL, 17,64 mmol) a uma velocidade tal que a temperatura interna permaneceu inferior a 30 °C. Após agitação contínua à temperatura ambiente durante uma hora, a solução foi tratada com bromoacetato de tert-butilo (2,73 mL, 18,45 mmol) e continuou-se a agitação durante 72 horas. Adicionou-se água (100 mL), o produto foi extraído com éter de tert-butilmetilo (2 x 50 mL) , os extractos combinados foram lavados com solução salina (50 mL) e foram secos (MgSCq) , dando origem a um sólido vermelho (7,11 g) . Purificação por cromatografia "flash" (n-heptano/acetato de etilo = 15 %; aumentado até 20 %) deu origem ao composto do 97 título (4,00 g, 59 %) na forma de um sólido incolor (pureza por HPLC: 99 %). MS (ESI + ) : 426, 3.

Intermediário 52: Ácido [5-cloro-l,3-bis(etoxicarbonil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il]acético, (ver Esquema lc, composto XXVIII)

A uma solução de 3-(2-tert-butoxi-2-oxoetil)-5-cloro-2-oxoindolino-1,3-dicarboxilato de dietilo, intermediário 51, (1,83 g, 4,30 mmol) em diclorometano (30 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (3,18 mL, 42,97 mmol) a 0-5 °C. A agitação foi continuada a 0-5 °C durante 30 minutos e à temperatura ambiente durante a noite. Evaporação e secagem sob alto vácuo deram origem ao composto do título (1,57 g, 99 %) na forma de um óleo incolor (pureza por HPLC: 85 %). MS (ESI + ) : 370, 2 .

Intermediário 53: 5-Cloro-l'(2-fluorobenzil)-2'H,5'ff-espiro [ indo lo-3, 3 ' -pirrolidino] -2,2',5' (1H) -triona, (ver Esquemas la, lc, 4, 5, composto III)

A uma solução de ácido [5-cloro-l,3-bis(etoxicarbonil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indol-3-il]acético, intermediário 52, (1,55 g, 4,1,9 mmol) em tetra-hidrofurano (20 mL) adicionou-se 1,1'-carbonildiimidazolo (820 mg, 5,03 mmol) a 0-5 °C. A agitação foi continuada a 0-5 °C durante 10 minutos e à temperatura ambiente durante 3 horas. A solução 98 foi tratada com 2-fluorobenzilamina (0,57 mL, 5,03 mmol) e foi continuamente agitada à temperatura ambiente durante 24 horas. A solução foi aquecida para o refluxo durante 24 horas adicionais antes da adição de água (25 mL). O produto foi extraído com éter de tert-butilmetilo (3 x 15 mL) e os extractos recolhidos foram secos (MgS04) , dando origem a um sólido vermelho-castanho (1,92 g). A recristalização a partir de tolueno (25 mL) deu origem ao composto do título (810 mg, 54 %) na forma de um sólido quase branco (pureza por HPLC 96 %) . MS (ESI + ) : 359, 0/ MS (ESI") : 357,0.

Intermediário 54: (5'-Cloro-2,2',5'-trioxoespiro[imidazo-lidino-4,3'-indol]-1'(2'H)-il)acetato de tert-butilo, (ver Esquema 7b, composto IXb)

De acordo com o método geral esboçado acima para a síntese do intermediário 18, (5-cloro-2,3-dioxo-2,3-di-hidro-lH- indol-l-il)acetato de tert-butilo, intermediário 44, (8,17 g, 27,64 mmol) reagiu com cianeto de potássio (2,39 g, 36,76 mmol) e carbonato de amónio (21,24 g, 221,0 mmol) em etanol/água = 2:1 (300 mL) durante 90 minutos, dando origem ao composto do título (7,38 g, 73 %) na forma de um sólido púrpura escuro (pureza por HPLC: 63 %). MS(ESI-) : 364,3.

Exemplo 1: ácido [5-cloro-l'-[(2-metil-l, 3-tiazol-4-il) metil]-2,2', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ’,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 60% de rendimento (96% de pureza por HPLC) . MS(ESI + ) : 420, 8; MS(ESI ): 418,7.

Exemplo 2: ácido [5-cloro-l'-(2,4-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 65% de rendimento (90% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 468, 8; MS(ESI ): 466, 7.

Exemplo 3: ácido [5-cloro-2,21,5'-trioxo-1'-(quinolin-2-il-metil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético rç·'·' Ύ m ò

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco-castanho com 55% de 100 rendimento (79,5% de pureza por HPLC) . MS(ESI+) : 450, 9; MS (ESI-) : 448, 8 .

Exemplo 4: ácido [5-cloro-l'-(4-cianobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-l(2H)-il]acético

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 66% de rendimento (82% de pureza por HPLC). MS (ESI + ) : 424,9; MS (ESI-) : 422,8.

Exemplo 5: ácido [5-cloro-l'-(3-clorobenzil)-2,21,51 - trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 61% de rendimento (91% de pureza por HPLC).

Alternativamente, uma solução de [5-cloro-l'-(3-clorobenzil) -2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acetato de metilo, intermediário 48, (250 mg, 0,56 mmol) em clorofórmio ou acetonitrilo (10 mL) foi tratada com iodotrimetilsilano (0,31 mL, 2,24 mmol) e foi aquecida para 101 o refluxo até a reacção estar completada. A adição de 1,0 N HC1 (10 mL) , extracção do produto com acetato de etilo ou clorofórmio (3 x 5 mL) , lavagem dos extractos combinados com tiossulfato de sódio saturado (10 mL) e secagem (MgS04) deram origem ao composto do titulo, com rendimento quantitativo, na forma de um sólido ligeiramente amarelo (75 % de pureza por HPLC utilizando clorofórmio; 68 % de pureza por HPLC utilizando acetonitrilo) . MS(ESI + ) : 434,3; MS(ESI ) : 431,4.

Exemplo 6: ácido [5-cloro-l'-(3,4-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético ...... .*· •' cs o ^ o α 1 '1

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 7 0% de rendimento (94% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 468,7; MS(ESI ) : 465, 6.

Exemplo 7: ácido [5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético a

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi 102 isolado na forma de um sólido bege com 72% de rendimento (85% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 417,7; MS (ESI-) : 415,6.

Exemplo 8: ácido [5-cloro-l'-(4-fluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 73% de rendimento (92% de pureza por HPLC). MS (ESI + ) : 417,8; MS (ESI") : 415,6.

Exemplo 9: ácido [5-010^-^-(1^3^111116^1)-2,2^5^ trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético i; ;>*·$ ” \ .m b

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de uma espuma castanha com 76% de rendimento (93,4% de pureza por HPLC). MS(ESI+) : 449, 8; MS (ESI-) : 447, 6.

Exemplo 10: ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(3-fenoxi-benzil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 103 * . Λ S ' V-Ô %

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido preto com 72% de rendimento (92% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 491,9; MS (ESI-) : 489, 8.

Exemplo 11: ácido [ 5-cloro-l1 -(3-fluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético ;>·..·*·· -o

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 69% de rendimento (91% de pureza por HPLC). MS (ESI + ) : 417,8; MS (ESI") : 415,6.

Exemplo 12: Procedimento geral para a síntese de derivados espiroindolinona de fórmula geral Ia, com R1, R2 e R3 como definidos acima (Esquemas 1, 6): Ácido (1'-benzil-5-cloro- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il)acético O-··' C*· .···" ' ii Ί 7 o

" :iS Ò-.:y m 104 Método A:

Uma solução agitada de éster de tert-butilo do ácido (1T — benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin] -1-il)-acético, intermediário 16 (800 mg, 1,76 mmol), em diclorometano anidro (20 mL) foi arrefecida num banho de gelo-água e tratada com ácido trifluoroacético (1,0 mL) . Após agitação no frio durante 30 minutos, a mistura foi deixada atingir a temperatura ambiente. Após 2 horas, cromatografia de camada fina (sílica; acetato de etilo/éter de petróleo (40-60) [1:1]) revelou pouca reacção, de modo que se adicionou mais ácido trif luoroacético (1,0 mL) e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 48 horas. O solvente foi removido in vacuo e adicionou-se tolueno (50 mL) . 0 ácido (1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1-il)acético em bruto foi removido por filtração e lavado com mais tolueno (25 mL) , seguido de éter de petróleo (40-60) (25 mL) . Purificação por cromatografia "flash" (sílica), eluindo com acetato de etilo, deu origem a um sólido branco (401 mg, 57%), p.f. 205-207°C. ^ NMR (400 MHz, CDC13 + DMSO(d6); Me4Si) : 3,06 (d, 1H) , 3,32 (d, 1H) , 4,30 (d, 1H) , 4,60 (d, 1H) , 4,75 (s, 2H) ,

6,83 (d, 1H) , 7,11 (d, 1H), 7,33 (m, 5H), 7,43 (s, 1H) . MS (ESI + ) 399, 9, (ESI ) 397,8. Método B: (Via A, Método paralelo 1)

Fase 1: Cada tubo foi carregado com Éster de tert-butilo do ácido (5-cloro-2,2 ', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin] -1-il) acético, intermediário 13 (73 mg, 0,2 mmol), carbonato de potássio (83 mg, 0,6 mmol) e N,N- dimetilformamida anidra (2 mL). Adicionou-se o agente alquilante apropriado (0,24 mmol) e as misturas reaccionais foram agitadas a 50°C durante a noite (excepto nos casos em 105 que foi considerado que o agente alquilante poderia ser menos estável, altura em que as reacções foram realizadas à temperatura ambiente). Quando o agente alquilante foi brometo de alba-metilbenzilo ou análogos, a reacção foi conduzida num reactor de Microondas CEM Discover a 150°C durante 30 minutos. Nos casos em que o agente alquilante estava na forma do sal cloridrato utilizou-se duas vezes a quantidade normal de carbonato de potássio. Cada uma das misturas reaccionais foi manipulada por adição de água (cerca 5 mL) e extracção com acetato de etilo (3x5 mL (aproximadamente)). Os extractos foram evaporados em tubos utilizando um Genevac HT4 durante 2 horas a 60°C. Depois foram encaminhados para a fase seguinte.

Fase 2: Cada um dos produtos em bruto da Fase 1 foi tratado com uma solução 10% (v/v) de ácido trifluoroacético em diclorometano anidro (3 mL) e foi agitado à temperatura ambiente durante 72 horas. Adicionou-se tolueno (1 mL) a cada mistura reaccional, removeram-se as esférulas de agitação magnética e removeram-se os solventes utilizando um Genevac HT4, primeiramente em condições de "rampa de vácuo" a 45° C durante lh 50 e depois a vácuo completo a 50°C durante 45 minutos. Adicionou-se a cada tubo N,N-dimetilformamida (1 mL) para dissolver os resíduos, que foram transferidos para uma placa de microtítulo para cromatografia preparativa de fase reversa automatizada. Método C: (Via B, Método paralelo 2)

Fase 1: Reactores foram carregados com 6-cloro-lH- espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona, intermediário 12 (300 mg, 1,198 mmol), N,N-dimetilformamida anidra (2,5 mL) e tert-butóxido de potássio (141 mg, 1,198 mmol) ou 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'- pirrolidino]-2,2',5'-triona, intermediário 11 (400 mg, 1,6 106 mmol), N,N-dimetilformamida anidra (2,5 mL) e tert-butóxido de potássio (188 mg, 1,6 mmol). Após agitação à temperatura ambiente durante 40 minutos adicionou-se o agente alquilante apropriado (1 eq) e as misturas foram agitadas à temperatura ambiente durante 18 horas. Quando o agente alquilante estava na forma do sal cloridrato, foi misturado com um equivalente extra de tert-butóxido de potássio em N,N-dimetilformamida anidra (1 mL) antes de ser adicionado à mistura reaccional. Adicionou-se água (25 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 25 mL). Os extractos combinados foram secos (MgS04) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem aos produtos em bruto que foram purificados por cromatografia "flash" (sílica), eluindo com éter de petróleo (40-60) contendo uma quantidade crescente de acetato de etilo. Os produtos foram verificados por NMR e, quando suficientemente puros, foram encaminhados para a fase seguinte.

Fase 2: Cada tubo foi carregado com o produto apropriado da Fase 2 (0,2 mmol) e foi dissolvido em N, N-dimetilformamida anidra (2 mL) . Adicionou-se tert-butóxido de potássio (25 mg, 0,22 mmol) seguido de bromoacetato de tert-butilo (0,04 mL, 0,22 mmol). Após agitação à temperatura ambiente durante 3 horas, as misturas foram deixadas repousar durante 18 horas. Cada uma das misturas reaccionais foi manipulada por adição de água (cerca de 5 mL) e extracção com acetato de etilo (3 x 5 mL (aproximadamente) ) . Os extractos foram evaporados em tubos utilizando um Genevac HT4 durante 2 horas a 60°C. Depois foram encaminhados para a fase seguinte.

Fase 3: A fase final foi realizada tal como na última fase (Fase 2) do método B. 107 Método D: (Via B, Método paralelo 3)

Fase 1: Reactores foram carregados com 5-cloro-lH-espiro [indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona, intermediário 9 (500 mg, 1,9 mmol) , N, N-dimetilformamida anidra (3 mL) e tert-butóxido de potássio (235 mg, 1,9 mmol) ou 6-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2', 5'-triona, intermediário 12 (300 mg, 1,2 mmol), N, N-dimetilformamida anidra (2,5 mL) e tert-butóxido de potássio (141 mg, 1,2 mmol) ou 5-triflurometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'- pirrolidino]-2,2',5'-triona, intermediário 11 (400 mg, 1,6 mmol), N,N-dimetilformamida anidra (2,5 mL) e tert-butóxido de potássio (188 mg, 1,6 mmol). Após agitação à temperatura ambiente durante 40 minutos adicionou-se o agente alquilante apropriado (1 eq) e as misturas foram agitadas à temperatura ambiente durante 18 horas. Quando o agente alquilante estava na forma do sal cloridrato, foi misturado com um equivalente extra de tert-butóxido de potássio em N, iV-dimetilformamida anidra (1 mL) antes de ser adicionado à mistura reaccional. Adicionou-se água (25 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etilo (3 x 25 mL). Os extractos combinados foram secos (MgSCq) e o solvente foi removido in vacuo, dando origem aos produtos em bruto que foram purificados por cromatografia "flash" (sílica), eluindo com éter de petróleo (40-60) contendo uma quantidade crescente de acetato de etilo. Os produtos foram verificados por 1H NMR e, quando suficientemente puros, foram encaminhados para a fase seguinte.

Fase 2: Foram realizados dois procedimentos diferentes, e cada um é descrito em baixo:

Cada tubo foi carregado com o produto apropriado da Fase 1 (0,2 mmol) e foi dissolvido em iV, iV-dimetilformamida anidra (2 mL). Adicionou-se tert-butóxido de potássio (25 mg, 0,22 mmol) seguido de 4-bromobutirato de tert-butilo (0,04 mL, 108 0,22 mmol) e as misturas reaccionais foram aquecidas a 50°C durante 18 horas. As reacções foram manipuladas por adição de água (cerca de 5 mL) e extracção com acetato de etilo (3 x 5 mL (aproximadamente)). Os extractos foram evaporados em tubos utilizando um Genevac HT4 durante 2 horas a 60°C. Depois foram encaminhados para a fase seguinte.

Cada tubo foi carregado com o produto apropriado da Fase 1 (0,2 mmol) e foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidro (2 mL) . Adicionou-se hidreto de sódio (dispersão 60% em óleo, 9 mg, 0,22 mmol) e, após agitação à temperatura ambiente durante 40 minutos, adicionou-se acrilato de tert-butilo (0,04 mL, 0,26 mmol) e as misturas reaccionais foram aquecidas a 30°C durante 18 horas. As reacções foram manipuladas por adição de água (cerca de 5 mL) e extracção com acetato de etilo (3 x 5 mL (aproximadamente)) . Os extractos foram evaporados em tubos utilizando um Genevac HT4 durante 2 horas a 60°C. Depois foram encaminhados para a fase seguinte.

Fase 3: A fase final foi realizada tal como na última fase (Fase 2) do método B.

Exemplo 13: ácido [5-cloro-l'-(4-clorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 58% de rendimento (97% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 434,3; MS (ESI~) : 432,4. 109

Exemplo 14: ácido [5-cloro-l1 -(4-metoxibenzil)-2,2',5' - trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético .... <3 »:·.,> V,:0 cs·,, .,.-¾..

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 80% de rendimento (97% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 429, 8; MS (ESI-) : 427,8.

Exemplo 15: ácido [5-cloro-l'-(3-metoxibenzil)-2,21,51 - trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético • · ' -'' o

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 7 5% de rendimento (91% de pureza por HPLC). MS (ESI + ) : 429, 8; MS (ESI') : 427,8.

Exemplo 16: ácido [5-cloro-l'-(2,3-di-hidro-l,4-benzo- dioxin-2-ilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 70% de rendimento (86% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 434,3; MS (ESI-) : 432,4.

Exemplo 17: ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1(piridin-2-il-metil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético h

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,31-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do título foi isolado na forma de um sólido branco com 69% de rendimento (91,2% de pureza por HPLC). MS (ESI + ) : 400, 8; MS (ESI ): 398,9.

Exemplo 18: ácido [5-cloro-2,21,51-trioxo-11 -{[5-(tri- fluorometil)-2-furil]metil}espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1 (2H)-il]acético : "' " Ο % y O « ,ο ts.A:..i ;; : )::0 " \ í» ΐί

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido castanho com 72% de rendimento (96,7% de pureza por HPLC) . MS(ESI + ) : 457,8; MS (ESI-) : 455, 8 . 111

Exemplo 19: ácido [5-cloro-l'-(4-metilbenzil)-2,2', 5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido castanho com 65% de rendimento (88% de pureza por HPLC) . MS(ESI+) : 413,8; MS (ESI") : 411, 8 .

Exemplo 20: ácido [5-cloro-2,2',51-trioxo-1'-[3-(trifluoro-metil)benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético r

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do título foi isolado na forma de um óleo bege com 58% de rendimento (92% de pureza por HPLC). MS (ESI + ) : 467, 8; MS (ESI") : 465, 6.

Exemplo 21: ácido [5-cloro-l'-(2-naftilmetil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético í>:

O 112

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 74% de rendimento (93% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 449, 9; MS (ESI") : 447,9.

Exemplo 22: ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(1-feniletil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético ** o et.. j., ;i T >o m

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido laranja com 26% de rendimento (94,5% de pureza por HPLC). MS (ESI+) : 413,8; MS (ESI ): 411,7 .

Exemplo 23: ácido [5-cloro-2,21,5'-trioxo-1(2-feniletil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido castanho com 67% de rendimento (96% de pureza por HPLC) . MS(ESI + ) : 413,8; MS (ESI") : 411, 6. 113

Exemplo 24: ácido [5-cloro-l'-(imidazo[1,2-a]piridin-2-il-metil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético O , 1 2 : 0

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido castanho com 65% de rendimento (95,9% de pureza por HPLC) . MS(ESI+) : 439, 8/ MS (ESI ) : 437, 8 .

Exemplo 25: ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[(2E)-3-fenil-prop-2-en-l-il]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético 1

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 60% de rendimento (98% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 425, 8/ MS(ESI ): 423, 6.

Exemplo 26: ácido [5-cloro-2,2',5,-trioxo-l,-[4-(trifluoro-metil)benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético 114 ^ V: 0 C*·.. >χ·0 Λ ΌΚ b

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 63% de rendimento (92% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 467,7; MS (ESI-) : 465, 6.

Exemplo 27: ácido 4-(1'-benzil-6-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico *. « a I; ---0 Çj··"'""··:·' 9Ç \ <X*Í b

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C) , partindo de 6-cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (intermediário 12), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 17% de rendimento (90,4% de pureza por HPLC). MS (ESI + ) : 427,9; MS (ESI ): 425,8.

Exemplo 28: ácido [5-cloro-l(2-etoxietil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 9 " .».... ·.·,... ;j : c: * -S*

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D) , partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi 115 isolado na forma de um sólido bege com 69% de rendimento (89% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 381,8; MS (ESI-) : 379, 8.

Exemplo 29: ácido [11 -[2-(benziloxi)etil]-5-cloro-2,21,51 -trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético Q·.. .·& ..·$ í? * Jw ò

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 65% de rendimento (93% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 443, 9; MS(ESI ) : 441,8.

Exemplo 30: ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-fenoxietil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido bege com 71% de rendimento (91% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 429, 8; MS(ESI ): 427,8.

Exemplo 31: ácido [5-cloro-2,2',5’-trioxo-1'-(3-fenilprop-2-in-l-il)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 0,.. 116 cs.

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido preto com 56% de rendimento (84,5% de pureza por HPLC) . MS (ESI+) : 423, 8; MS (ESI ): 421,7.

Exemplo 32: ácido (1'-but-2-in-l-il-5-cloro-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético o , 14 o £1 2·,,.· * cm h

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 69% de rendimento (94% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 361,7; MS(ESI ): 359, 8.

Exemplo 33: ácido [5-cloro-l'-[(l-metil-lH-imidazol-2-il) meti-1-2,2' ,b' -trioxoespiro [indolo-3, 3 ' -pirrolidin] -1 (2H) -il]acético 1 %ίί·"\ 2 ' '"'Ή «s, . ,, í 0 ^ OH •í?

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do título foi 117 isolado na forma de um sólido branco com 51% de rendimento (87% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 403,7; MS (ESI-) : 401,8.

Exemplo 34: ácido 4-(5-010^-^-(4-1^0^06^11)-2,2^5^ trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico ΰ ^ 0

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido amarelo com 64% de rendimento (82,2% de pureza por HPLC). MS (ESI + ) : 445, 7; MS (ESI~) : 443,8.

Exemplo 35: ácido 4-[5-cloro-l'-(4-clorobenzil)-2,2',5T-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico .·:·... Cl Ο··.·* ,...:-0 a.. . >·· o

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]- 2.2 ' ,5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 62% de rendimento (90% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 462,3; MS(ESI ): 460, 2.

Exemplo 36: ácido 4-[5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[4-(tri- fluorometil)benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico 118 CKV·,·· =:-,, W i ’>-:0 ···. χ·'·····?Η

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método D), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido amarelo claro com 60% de rendimento (74,3% de pureza por HPLC) . MS(ESI + ) : 495, 9; MS (ESI-) : 493, 8 .

Exemplo 37: ácido [ 1'-benzil-2,2',5'-trioxo-5-(trifluoro-metoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético O,· N , :<5 Γ O . ..· \ Λ.....: ^ ' V K J.u °

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 11), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 67% de rendimento (96% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 449, 5; MS (ESI ) : 447,3 .

Exemplo 38: ácido [1'-(4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(trifluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1] acético i-, ò » «:·N . o

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 11), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido castanho claro com 74% de rendimento (79% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 479,4; MS(ESI ): 477,3.

Exemplo 39: ácido [1'-(3-fluorobenzil)-2,21,51-trioxo-5-(trifluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 11), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 73% de rendimento (96,9% de pureza por HPLC). MS(ESI+) : 467, 4/ MS (ESI-) : 465, 3 .

Exemplo 40: ácido [1(2 — fluorobenzil)-2,2',51-trioxo-5-(trifluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 11), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 58% 120 de rendimento (97,3% de pureza por HPLC) . MS(ESI+) : 467, 4/ MS (ESI-) : 465, 3.

Exemplo 41: ácido [2,2',5'-trioxo-5-(trifluorometoxi)-1'-[3- (trifluorometil)benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3 ' -pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 11), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido castanho claro com 68% de rendimento (98,9% de pureza por HPLC). MS (ESI+) : 517,3; MS(ESI ): 515,3.

Exemplo 42: ácido [11 -(1-naftilmetil)-2,21,5'-trioxo-5- (trifluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético ©

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 11), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 65% de rendimento (98,9% de pureza por HPLC) . MS(ESI + ) : 499, 5; MS (ESI-) : 497,3 . 121

Exemplo 43: ácido [ 1'-(4-clorobenzil)-2,2',5'-trioxo-5- (trifluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 11), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido castanho claro com 56% de rendimento (71,8% de pureza por HPLC) . MS(ESI+) : 483, 8/ MS (ESI") : 481,7.

Exemplo 44: ácido [ 1f-(4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(trifluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-trifluorometoxi-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 11), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco com 66% de rendimento (82,7% de pureza por HPLC). MS(ESI + ) : 467,5; MS (ESI") : 465, 2.

Exemplo 45: ácido 4-[5-cloro-l'-(4-metoxibenzil)-2,2', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico 122 122 0¾ ..T7 íTVo Γ \\ ο

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C) , partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2 ',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido amarelo claro com 61% de rendimento (100% de pureza por HPLC). MS(ESI+): 457,9; MS (ESI-) : 455, 8 .

Exemplo 46: ácido 4-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]butanóico F.,.. O·,,·* ,,,:-:0

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Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), partindo de 5-Cloro-lH-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'-triona (Intermediário 9), o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido amarelo claro com 54% de rendimento (96,5% de pureza por HPLC). MS(ESI+) : 445, 9; MS (ESI-) : 443, 6.

Exemplo 47: ácido [(3S)-1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético \\ ^ Λ ou 0 123

Após purificação numa coluna quiral ChiralPak-AD-H, eluindo com Etanol:0,5% ácido fórmico, do exemplo 12, o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco (100% de pureza por HPLC) . MS(ESI + ) : 399, 8/ MS(ESI ) : 397,7/ Tempo de retenção (HPLC quiral): 8,30 minutos.

Exemplo 48: ácido [(3R)-1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético o CK , 5., I; Ί >·.·.$

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Após purificação numa coluna quiral ChiralPak-AD-H, eluindo com Etanol:0,5% ácido fórmico, do exemplo 12, o composto do titulo foi isolado na forma de um sólido branco (100% de pureza por HPLC). MS (ESI+) : 399, 8/ MS (ESI~) : 397,7/ Tempo de retenção (HPLC quiral): 5,62 minutos.

Exemplos 49-108:

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 12 (Método C), também foram preparados os compostos seguintes. Alguns compostos are enantiómeros isolados, obtidos seguindo purificação numa coluna quiral ChiralPak-AD-H, eluindo com Etanol mais 0.5% ácido fórmico. 124

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 49 ácido [6-cloro-1'-(2 — fluoro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético £ h : >»0 91,5 417,2 (ESI + ) 415,1 (ESI-) 50 ácido [6-cloro-1'-(3-fluoro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético * . λ rr^ »" " νί· r: 0, "t 93, 1 417.1 (ESI + ) 415.1 (ESI-) 51 ácido [6-cloro-1'-(4-fluoro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético fY ,OÍ“. Ί, 77, 6 417.1 (ESI + ) 415.1 (ESI) 52 ácido 4 —[5 — cloro-2,2 ' , 5 ' -trioxo-1'- (2-feniletil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] V "WC \ Λ * 74,5 441.2 (ESI + ) 439.2 (ESI) 125

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS butanóico 53 ácido [5-cloro-1'-(3,5-dicloro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético * l s ; s""'Ns :? : .Λ··5? & 95, 7 466 (ESI + ) 464 (ESI-) 54 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(4-fenoxi-benzil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético f rvj; 1"’[ "li 5· 97,8 491 (ESI + ) 489 (ESI) 55 ácido [5-cloro-1'-(2-metoxi-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético "o βν,·51 v>v ^*1; í» 9 98,8 429 (ESI + ) 427 (ESI-) 56 ácido [5-cloro-1'-[4-(metil-sul fonil)benzi1] -2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'- O ....... ...V' f { % .y·^. ,.-5 v^· s a. >·-·® ν'·?· i «,« X á 96, 2 477 (ESI + ) 475 (ESI-) 126

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS pirrolidin]-1 (2H)-il]acético 57 ácido [ 1' - [ 4-(aminocarbonil) benzil]-5-cloro-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin] -1(2H)-il]acético 't íí 87, 1 442 (ESI + ) 440 (ESI) 58 ácido [5-cloro-1'-(3-ciano-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético .0. í " -¾ V v* YtP, "'V :e 84 442 (ESI + ) 440 (ESI) 59 ácido [5-cloro-1'-[(5-metil-isoxazol-3-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ri.. •X “Ό0 83, 6 404 (ESI + ) 402 (ESI-) 127

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 60 ácido [ 1'- (1,3-benzotiazol-2-ilmetil)-5-cloro-2,2 ' , 5 ' -trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético r-\ ^ | I ./**5 \ 83,5 456 (ESI + ) 454 (ESI) 61 ácido [5-cloro-1'-[(5-cloro-2-tienil)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético Λ ,*· ·*· ΰ:ν,,A. ! ! > s W v'd 82,1 439 (ESI + ) 437 (ESI) 62 ácido [5-cloro-1'-[(5-cloro-1,2,4-tiadiazol-3-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ra K'>'V is T* e 84,3 441 (ESI + ) 439 (ESI) 128

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 63 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[(2-fenil-1,3-tiazol-4-il) metil]espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético p "OíP' O co σι 482 (ESI + ) 480 (ESI) 64 ácido [5-cloro-1'-(2-cloro-4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético Ç5., ,,A ,EJ r Tx% Xí ^ ΪΗ "Λ \—I LO CO 451 (ESI + ) 449 (ESI) 65 ácido [5-cloro-1'-(2,5-dicloro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético V'^ ΎτΡ % #1 \—I co 467 (ESI + ) 465 (ESI) 66 ácido [ 1'- [4-(acetilamino) benzil]-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo- r0'V Λ . 85, 6 456 (ESI + ) 454 (ESI-) 129

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 3,3' - pirrolidin]-1 (2H)-il]acético 67 ácido [5-cloro-1'-[(6-cloro-piridin-3-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ,cr «.vVo VrV. V ^ LO co co 434 (ESI + ) 432 (ESI) 68 ácido [5-cloro-1'-(lH-indol-3-ilmetil)-2,2',5'- trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético O Vi 95, 3 438 (ESI + ) 436 (ESI) 69 ácido [5-cloro-1'-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3' - pirrolidin]-1 (2H)-il]acético jCX § i; >^i> ··" ^ p* "1 co 451,3 (ESI + ) 449, 3 (ESI-) 130

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 70 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(1,3-tiazol-4-ilmetil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético L -s A-J "-S 5 93, 9 406 (ESI + ) 404 (ESI-) 71 ácido [5-cloro-1'-[(4-cloro-piridin-3-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ¥ j Is 87,3 434 (ESI + ) 432 (ESI) 72 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(piridin-3-ilmetil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético A A :¾ : 0 90,4 400 (ESI + ) 398 (ESI) 73 ácido [5-cloro-l’-[(3,5-dimetilisoxazol-4-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo- : à ,χ'-χν t> 98,9 418 (ESI + ) 416 (ESI) 131

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 3,3' - pirrolidin]-1 (2H)-il]acético 74 ácido [l'-[(5-tert-butil-1,2,4-oxadiazol-3-il)metil]-5-cloro-2,2',5'-trioxospiro [indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético V" /\ »Λ'\ . rv § 3 \ P* $ 98,5 447 (ESI + ) 75 ácido [5-cloro-1'-[(5-ciclo-propil-1,3,4-tiadiazol-2-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético i.l·** α vn-V- d <3N <v^s·· 98,2 447 (ESI + ) 445 (ESI) 76 ácido [5-cloro-1'-[(4-metoxi-3,5-dimetil-piridin-2-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'- ·. .6'·. f r-y * ^ * SK S) 96, 2 458 (ESI + ) 456 (ESI) 132

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS pirrolidin]-1 (2H)-il]acético 77 ácido [5-cloro-l'-[(4,6-dicloropiridin-3-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ,KJ< fct X../ ϊ y a· 97,5 468 (ESI + ) 466 (ESI-) 78 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-tienil-metil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético A"V' vV % 85, 3 405 (ESI + ) 403 (ESI~) 79 ácido [5-cloro-1f- [ (3,4-dimetoxipiridin-2-il)metil]-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético f-V s·*· * 87,5 460 (ESI + ) 458 (ESI) 133

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 80 ácido [5-cloro-1'-(isoquinolin-1-ilmetil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3’- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético P ij Y) r*·* βγ·%·ν'„ ' Y* 87,5 450 (ESI + ) 448 (ESI) 81 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1’-[(5-fenil-1,2,4-oxadiazol-3-il)metil] espiro[indolo-3,3’- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético rs t>·, .--3-,. Λ—' 11/* > CK ô 96, 3 467 (ESI + ) 465 (ESI) 82 1'-benzil-5-cloro-1-(1H-tetrazol-5-il-metil)-2'H,5'H-espiro[indolo-3,3’- pirrolidino]-2,2’,5’(1H)-triona t.ry\_ e·*/-§ : 9f 79, 3 423 (ESI + ) 421 (ESI-) 134

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 83 ácido (3R)—[5— cloro-1' - (3-clorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético »v^vV í ·: ávjJ \^···'^ ÍS**/ 99,1 (tempo de retenção de HPLC quiral 7,21 minutos) 433,3 (ESI + ) 431,1 (ESI) 84 ácido (3 S)-[5-cloro-11 —(3 — clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético d arvV ‘ .»:* Χν.·'·'"··« 99,7 (tempo de retenção de HPLC quiral 10,98 minutos) 433,5 (ESI + ) 431,3 (ESI) 85 ácido (3R)—[5— cloro-11 —(3 — metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético .. ΛΚ ,-U $ ;.···^> • v.'·· · ''«WM 99,8 (tempo de retenção de HPLC quiral 5,88 minutos) 429, 4 (ESI + ) 427,3 (ESI-) 86 ácido (3 S) — [5 — cloro-11 —(3 — metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo- , jijíÇ f" «v. _ P ; ).·-νχ5 '"iças·; 99 (tempo de retenção de HPLC 429, 4 (ESI + ) 427,2 (ESI) 135

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético quiral 9,66 minutos) 87 ácido [5-cloro-1'- (2,4- difluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético pU V-:SS g . .·. n / "V' v ^ j. Ϊ3 93, 6 435 (ESI + ) 433 (ESI) 88 ácido [5-cloro-1'—(1,3-oxazol-2-ilmetil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético W p 97 390 (ESI + ) 388 (ESI-) 89 ácido [5-cloro-1'-[(4-metoxi-3-metilpiridin-2-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]- s>y ''k'- * ν-χ,-V·1 a 97,4 444 (ESI + ) 442 (ESI) 136

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 1(2H)-il] acético 90 ácido [5-cloro-1'-{[2-(4-cloro-fenil)-1,3-tiazol-4-il] metil}-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ,AV:^ SVv^V'*1 ^4 x·. k..·· I A* '"d; 8· 99, 1 516 (ESI + ) 514 (ESI-) 91 ácido [5-cloro-1'-{ [5- (4-metoxifenil)-1,2,4-oxadiazol-3 — i1]metil}-2,2’,5’-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético »'·· 0 ,À 8y'vV 1. 98,9 497 (ESI + ) 495 (ESI-) 92 ácido [5-cloro-1’-[(1-metil-lH-1,2,3-benzo-triazol-5-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'- *:·» _.n W.... ,:-vAV . CU' 98,2 454 (ESI + ) 452 (ESI) 137

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS pirrolidin]-1 (2H)-il]acético 93 ácido [5-cloro-1'-(3-furil-metil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético r>'-x\ :: ^ %-ovV. $: ; :-:::-¾ s .0« iá 94,7 389 (ESI + ) 387 (ESI-) 94 ácido [5-cloro-1'-(2-cloro-5-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético 97,8 451 (ESI + ) 449 (ESI-) 95 ácido [5-cloro-1'-(2,5- difluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro [indolo-3,3-pirrolidin]-1(2H)-il]acético . Vb :: '"•••.3·'·' "N ·_. % 98,8 435 (ESI + ) 433 (ESI-) 138

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 96 ácido [5-cloro-1'-(2,3- difluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético P tWT 98,3 435 (ESI + ) 433 (ESI) 97 ácido [5-cloro-1'-(3,5- difluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro [indolo-3,3-pirrolidin]-1 (2H)-il]acético ri vtO" 98,5 435 (ESI + ) 433 (ESI) 98 ácido [5-cloro-1'-(3,4- difluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro [indolo-3,3 ' -pirrolidin]-1(2H)-il]acético A' •u- 99, 5 435 (ESI + ) 433 (ESI-) 99 ácido [5-cloro-1'-[(1-metil-lH-benzimidazol-2-il)metil]- A5 YYrt, V ff 97,9 453 (ESI + ) 451 (ESI) 139

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético 100 ácido [5-cloro-1'-(3-fluoro-4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético .AvA * !· >>-***..·* St .·>, 1. 1 T i< 99, 7 447 (ESI + ) 445 (ESI-) 101 ácido [5-cloro-1'-(3-cloro-5-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético fu, 5- , ..'X·. · 1 I>« ô 99, 2 451 (ESI + ) 449 (ESI-) 102 ácido [5-cloro-1'-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'- r"> χ·Λν* e ^ .m $ 99, 5 480 (ESI + ) 478 (ESI) 140

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS pirrolidin]-1 (2H)-il]acético 103 ácido [5-cloro-1'-[(3-metil-5-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético r'\ ,vi. ,* :j 1 >* 99,6 480 (ESI + ) 478 (ESI-) 104 ácido [5-cloro-1f-{ [2- (3-cloro-fenil)-1,3-tiazol-4-il] metil}-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético *ί· x ÍV.'-·', * ν' -v™*' í* 99 516 (ESI + ) 514 (ESI) 105 ácido (3R)-[5-cloro-1'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético SÈ- .'1·. £ ! W· ’· •yS*'·'' $ 99,5 (tempo de retenção de HPLC quiral 5,10 minutos) 417,2 (ESI + ) 414,9 (ESI) 141

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 106 ácido (3S)- [ 5-cloro-1' - (2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3’- pirrolidin]-1 (2H)-il]acético tf. ^ XI :· . 98,8 (tempo de retenção de HPLC quiral 6, 60 minutos) 417.3 (ESI + ) 415.3 (ESI) 107 ácido (3S)- [ 5-cloro-1'-(2-fluoro-5-cloro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ύί ' «ν-'νν * 95,8 (tempo de retenção de HPLC quiral 6,27 minutos) 451,3 (ESI + ) 449, 3 (ESI) 108 ácido (3R)—[5— cloro-1'-(2-fluoro-5-cloro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ! ~ el·. ..-'N, Λ' ·-· 1 1 v-o N 98,2 (tempo de retenção de HPLC quiral 6, 68) 451,3 (ESI + ) 449, 3 (ESI-)

Exemplo 109: ácido [ 5'-cloro-1-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2'H)— i1] acético 142 N o >íH o Ο: . m

Uma solução gelada de [5'-cloro-1-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2 Ή)-il] acetato de tert-butilo (168,00 mg; 0,33 mmol) em DCM (4,00 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (1,00 mL). Após agitação da reacção durante 4 horas, os solventes foram evaporados. Adicionou-se tolueno duas vezes e foi evaporado, dando origem ao composto do título na forma de um sólido bege com 67,5 % de rendimento (96,1% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 452,1; MS (ESI-) : 454,4.

Exemplos 110-112:

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 109, também foram preparados os compostos seguintes partindo dos intermediários apropriados:

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 110 ácido [5’-cloro-l-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,2',5-trioxoespiro [ imidazolidino-4,3'-indol]-1'(2Ή)-il]acético U < \ VSV* V »1 96, 3 481,2 (ESI + ) 479, 9 (ESI") 111 ácido (l-benzil-5'-cloro-2,2',5-trioxoespiro [imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2 Ή)-il) acético ÀXv.'' v?c 97,3 400 (ESI + ) 398 (ESI") 143

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 112 ácido [5'-cloro-1-(2-fluorobenzil)-2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-1'(2'H)-il] acético í <«*> 93, 6 417,9 (ESI + ) 416, 1 (ESI-)

Exemplo 113: ácido [5-cloro-l'-fluorobenzil-2,5'-dioxo- espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético k-, ''··. :: *r:‘ ‘:<M! Γ

Uma solução gelada de [5-cloro-l'-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acetato de tert-butilo, intermediário 33 (110 mg; 0,25 mmol) , em DCM (8,00 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (2,00 mL). Após agitação à temperatura ambiente durante 4 horas, os solventes foram removidos in vacuo. Adicionou-se tolueno duas vezes e foi removido in vacuo, dando origem ao composto do titulo na forma de um sólido branco com 95% de rendimento (99,8% de pureza por HPLC) . MS (ESI+) : 358,3; MS (ESI~) : 356, 3 .

Exemplos 114-116:

Seguindo os métodos gerais esboçados no Exemplo 113, também foram preparados os compostos seguintes partindo do intermediário apropriado: 144

Exemplo Nome Estru tura Pureza por HPLC (%) MS 114 ácido [5-cloro-1'-[(3-metil-5-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,5'-dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético . 0 ç> co 466, 3 (ESI + ) 464,5 (ESI-) 115 ácido [5-cloro-1'-(2 — fluoro-benzil)-2,5'-dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético Αΐβ'-'Ύ'Ν “í 91,5 403,2 (ESI + ) 401,0 (ESI) 116 ácido [5-cloro-1'-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ^brò * 96, 3 437,1 (ESI + ) 435, 1 (ESI)

Exemplo 117: ácido [5-cloro-l'-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,2'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético

Uma solução gelada de [5-cloro-l'-[(5-metil-3-fenil-isoxazol-4-il)metil]-2,2'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acetato de tert-butilo, intermediário 42 (80,00 mg; 0,15 mmol), em DCM (8,00 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (2,00 mL) . Após agitação à temperatura ambiente durante 5 horas, os solventes foram removidos in vacuo. Adicionou-se tolueno duas vezes e foi removido in vacuo, dando origem ao composto do titulo na forma de um sólido branco com 91% de rendimento (96,3% de pureza por HPLC) . MS (ESI + ) : 466, 3; MS (ESI ) : 464,4.

Exemplo 118: Preparação de uma formulação farmacêutica

Os seguintes exemplos de formulações ilustram composições farmacêuticas representativas de acordo com a presente invenção, que não está restringida àquelas.

Formulação 1 - Comprimidos

Uma espiroindolinona de Fórmula (I) é misturada, na forma de um pó seco, com um aglutinante de gelatina seca numa razão de pesos aproximada de 1:2. Como lubrificante adiciona-se uma quantidade muito pequena de estearato de magnésio. A mistura é configurada em comprimidos de 240-270 mg (80-90 mg de composto espiroindolinona activo por comprimido) numa prensa de comprimidos. 146

Formulação 2 - Cápsulas

Uma espiroindolinona de Fórmula (I) é misturada, na forma de um pó seco, com um diluente de amido numa razão de pesos aproximada de 1:1. Com a mistura enchem-se cápsulas de 250 mg (125 mg de composto espiroindolinona activo por cápsula).

Formulação 3 - Liquido

Uma espiroindolinona de Fórmula (I) (1250 mg), sucrose (1,75 g) e goma de xantano (4 mg) são combinados, passados por um crivo E.U.A. de malha N° 10 e depois misturados com uma solução previamente preparada de celulose microcristalina e carboximetilcelulose sódica (11:89, 50 mg) em água. Benzoato de sódio (10 mg), aromatizante e corante são diluidos com água e adicionados com agitação. Depois adiciona-se água suficiente para produzir um volume total de 5 mL.

Formulação 4 - Comprimidos

Uma espiroindolinona de Fórmula (I) é misturada, na forma de um pó seco, com um aglutinante de gelatina seca numa razão de pesos aproximada de 1:2. Como lubrificante adiciona-se uma quantidade muito pequena de estearato de magnésio. A mistura é configurada em comprimidos de 450-900 mg (150-300 mg de composto espiroindolinona activo) numa prensa de comprimidos.

Formulação 5 - Injecção 147

Uma espiroindolinona de Fórmula (I) é dissolvida num meio aquoso injectável de solução salina esterilizada tamponada para uma concentração de aproximadamente 5 mg/mL.

ENSAIOS BIOLÓGICOS

Exemplo 119: Construção do vector de expressão de mamífero pCEP4-hCRTH2 cDNA de CRTH2 humano foi amplificado por PCR utilizando uma biblioteca de cDNA de bexiga humana como modelo e "primers" específicos contendo sítios de restrição HindiII e BamHI para clonagem no vector pCEP4 (Invitrogen). A construção do vector é descrita em pormenor em Sawyer et al., Br. J. Pharmocol 2002, 137, 1163-72. A sequência de nucleótidos do cDNA clonado era idêntica à sequência de hCRTH2 previamente relatada (Nagata et al., 1999, J. Immunol. 162, 1278-1286).

Exemplo 120: Estabelecimento de uma linha de células pCEP4-hCRTH2-HEK2 93 (EBNA)

Células HEK293 (EBNA) foram transfectadas com a construção pCEP4-hCRTH2 utilizando a técnica de fosfato de cálcio. As células foram mantidas em cultura a 37°C numa atmosfera de 5% CO2 em meio de Eagle modificado de Dulbecco F12 (Invitrogen), contendo 10% soro fetal de vitelo inactivado pelo calor (TerraCell International, Canadá) , 2 mM

Glutamina, 100 unidades/mL de penicilina e 100 pg/mL de estreptomicina (Invitrogen). Quarenta e oito horas após a transfecção, as células cresceram na presença de 300 pg/mL de Higromicina B (Invitrogen) durante 4 semanas, e células resistentes a antibióticos foram amplificadas para preparação de membranas celulares. 148

Exemplo 121: Preparação de membranas que expressam o hCRTH2 Células HEK293 (EBNA) aderentes que expressam o hCRTH2 foram cultivadas em balões de cultura de células de 225 cm2 (Corning, E.U.A.) em 30 mL de meio. Após dois enxaguamentos de solução salina tamponada com fosfato (PBS), as células foram recolhidas em 10 mL de PBS contendo 1 mM EDTA, foram centrifugadas a 500 x g durante 5 minutos a 4°C e congeladas a -80°C. 0 grânulo foi novamente suspenso em 50 mM Tris-HCl, pH 7,4, 2 mM EDTA, 250 mM Sucrose, contendo pastilhas de "cocktail" de inibidores de proteases, (Complete EDTA-free, Roche, Alemanha) e foi incubado durante 30 minutos a 4°C. As células foram desagregadas por cavitação com azoto (Parr Instruments, E.U.A.) a 4°C (800

p.s.i. durante 30 minutos) e foram centrifugadas a 500 x g durante 10 minutos a 4°C. O grânulo contendo núcleos e detritos celulares foi desperdiçado e o sobrenadante foi centrifugado durante 60 minutos a 4°C a 45000 x g. O grânulo membranar foi novamente suspenso em tampão de armazenamento (10 mM HEPES/KOH pH 7,4, 1 mM EDTA, 250 mM sucrose, pastilhas de "cocktail" de inibidores de proteases) utilizando homogeneização Dounce e foi congelado em azoto liquido, e armazenado a -80°C.

Exemplo 122: Ensaio de ligação de ligandos radioactivos

Os compostos da presente invenção inibem a ligação da PGD2 ao seu receptor CRTH2. A actividade inibidora pode ser investigada por um ensaio de ligação de ligandos radioactivos (Sawyer et al. , Br. J. Pharmocol 2002, 137, 1163-72). 0 ensaio de ligação de ligandos radioactivos foi realizado à temperatura ambiente em tampão de ligação (10 149 mM HEPES/KOH pH 7,4, 10 mM MnCl2, com pastilhas de "cocktail" de inibidores de proteases), contendo 1,5 nM [3H]PGD2 (Amersham, 156 Cie/mmol) , e 10 pg de proteína de membranas de células HEK293 (EBNA) hCRTH2 num volume final de 100 pL em placas de 96 cavidades (Corning, E.U.A.) . A ligação inespecífica foi determinada na presença de 1 pM PGD2 (Cayman, E.U.A.)· Espiroindolinonas competidoras foram diluídas em dimetilsulfóxido de modo que o volume total de dimetilsulfóxido foi mantido constante a 1% dimetilsulfóxido (Me2S0) . Prepararam-se diluições em série de 100 pM e 100 pm. Adicionaram-se 10 pL de cada uma destas soluções-mãe de espiroindolinona. A incubação (60 minutos à temperatura ambiente) foi terminada por filtração rápida em placas GF/C Unifilter hidrofóbicas de 96 cavidades (Whatman, E.U.A.). Os filtros foram lavados duas vezes com 250 pL de Tris-HCl pH 7,4, 10 mM MnCl2, ligando radioactivo residual ligado aos filtros foi misturado para 100 pL de "cocktail" de cintilações líquidas (Optiphase Supermix, Perkin Elmer, E.U.A.) e determinou-se a actividade de ligação por contagem do ligando radioactivo residual utilizando um contador de cintilações 1450 Micro-beta (Wallac, R.U.). Testaram-se os seguintes compostos representativos. Todos inibiram a ligação da PGD2 ao CRTH2 em mais de 7 0%. ácido (1'-benzi1-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético ácido (1'-benzil-5-fluoro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético ácido 4-(l'-alil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico ácido [5-cloro-l'-(2-metoxietil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 150 ácido 4 — (1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo- 3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico ácido (1'-benzil-5-metoxi-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético ácido [5-fluoro-l'-[(2-metoxietoxi)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3-pirrolidin]-1(2H)-il]acético ácido 4-(1'-alil-5-fluoro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico ácido 4 —(1T-benzil-5-fluoro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo- 3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico

Exemplo 123: Determinação de Kj (Ensaio de ligação de ligandos radioactivos)

Determinaram-se valores K± por experiências de ligação de competição no equilíbrio contra [3H]PGD2. Os valores K± foram calculados a partir da fórmula em baixo e representam a média de pelo menos três experiências independentes de resposta à dose. Os valores Ki dão as concentrações de ligando necessárias para inibir 50% da ligação da [ H] PGD2 ao CRTH2.

Ki= IC5o/ (1+ [Concentração de Ligando] /Kd) ]

Todas as experiências foram realizadas em placas de 96 cavidades, num volume final de 100 pL, de acordo com 0 ensaio de filtração descrito acima. A concentração de membranas e 3 [H] PGD2, bem como os controlos positivos e negativos, foram idênticos às condições descritas acima.

Numa forma de realização, os derivados espiro da presente invenção inibem o CRTH2 a uma concentração < 10 μΜ. Noutra forma de realização, os derivados espiro da presente 151 invenção inibem o CRTH2 a uma concentração < 1 μΜ. Numa forma de realização preferida, as espiroindolinonas da presente invenção inibem o CRTH2 a uma concentração < 0,1 μΜ.

Valores K± de compostos representativos estão apresentados na Tabela 1. Pode derivar-se que os referidos compostos de acordo com a Fórmula (I) exibiram uma inibição significativa da ligação da PGD2 ao CRTH2.

Tabela 1

Composto N* Nome Ki (nM) 1 ácido [5-cloro-l'-[(2-meti1-1,3-tiazol-4-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético 39 3 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(quinolin-2-ilmetil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 93 4 ácido [5-cloro-l'-(4-cianobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 89 5 ácido [5-cloro-l'-(3-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 73 6 ácido [5-cloro-l' - (3,4-diclorobenzil)-2,2 ' , 5 '-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 100 10 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(3-fenoxi-benzil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 148 16 ácido [5-cloro-l'-(2,3-di-hidro-l,4-benzo- 213 152

Composto Ne Nome K± (nM) dioxin-2-ilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético 17 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1(piridin-2-ilmetil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 170 18 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-{[5-(tri fluorometil)-2-furil]metil}espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 270 23 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-fenil-etil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 267 24 ácido [5-cloro-l'-(imidazo[l,2-a]piridin-2-ilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 705 25 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[ (2E)-3-fenilprop-2-en-l-il]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 768 28 ácido [5-cloro-l'-(2-etoxietil)-2,2',5' -trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 1031 29 ácido [1'-[2-(benziloxi)etil]-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 1129 32 ácido [5-cloro-l'-[(l-metil-lH-imidazol-2-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 1817 35 ácido 4-[5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'—[4— (trifluorometil)benzi1]espiro[indolo-3,3 ' -pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico 681 54 ácido [5-cloro-l'-(2-metoxibenzil)-2,2',5'- 153 153

Composto Ν* Nome Ki (nM) trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 75 ácido [5-cloro-l'-[(4-metoxi-3,5-dimetil-piridin-2-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 510 76 ácido [5-cloro-l'-[(4,6-dicloropiridin-3-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 12 77 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-tienil-metil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 75 78 ácido [5-cloro-l'-[(3,4-dimetoxipiridin-2-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3, 3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 101 103 ácido [5-cloro-l'-{[2-(3-clorofenil)-1,3-tiazol-4-il]metil}-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 6 104 ácido [5-cloro-l'-(2 — fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-l(2H)-il]acético 24 105 ácido [5'-cloro-l-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-l'(2'H)-il]acético 16 106 ácido [5'-cloro-l-(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,2',5-trioxoespiro [imidazolidino-4,3'-indol]-1'(2'H)-il] acético 1120 107 ácido (l-benzil-5'-cloro-2,2',5-trioxoespiro [imidazolidino-4,3'-indol]-1'(2'H)-il) acético 300 154

Composto Ne Nome K± (nM) 108 ácido [5'-cloro-l-(2-fluorobenzil)-2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-1'(2Ή)-il]acético co 109 ácido (3R)-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 28 110 ácido (3S)-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético co 111 ácido (3 S)-[5-cloro-l'-(2-fluoro-5-cloro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 470 112 ácido (3R)-[5-cloro-l'-(2-fluoro-5-cloro-benzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 150 113 ácido (l'-benzil-5-cloro-2,5'-dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético 630 114 ácido [5-cloro-l'-[(3-metil-5-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 3,4 115 ácido [5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 140 116 ácido [5-cloro-l'-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 22

Exemplo 124: Ensaio de ligação de [35S]GTPyS 0 ensaio de [35S]GTPyS mede o aumento da permuta de guanina 155 nucleótido em proteínas G em membranas celulares resultante da ligação agonista (PGD2) ao CRTH2. Este processo pode ser monitorizado in vitro por incubação de membranas celulares contendo proteínas G e CRTH2 com GDP e [35S]GTPyS, um análogo do GTP etiquetado de forma radioactiva e resistente a hidrólise (ver Harrison et al., Life Sciences 7_4, 489-508, 2003) . A adição de uma espiroindolinona resulta em ligação ao CRTH2 e, assim, numa inibição da ligação agonista, que pode ser monitorizada como inibição da estimulação da permuta GTP/GDP.

As condições do ensaio foram idênticas às condições do ensaio de ligação de ligandos radioactivos como descrito no Exemplo 21. 0 ensaio de ligação de [35S]GTPyS foi realizado a 30°C com agitação suave em placas de poliestireno brancas de cintilação de 96 cavidades (Perkin Elmer, E.U.A.), num volume final de 200 pL, contendo 2% de dimetilsulfóxido (Me2SO) . Os derivados espiro foram incubados em 20 mM HEPES/KOH pH 7,4, 10 mM MgCl2, 10 pg/mL Saponina, 3 pM GDP, 150 mM NaCl contendo 10 pg de membranas que expressam o receptor hCRTH2 (Euroscreen, Bélgica) durante 10 minutos. A ligação inespecífica foi determinada na presença de 10 pM de GTPyS. As amostras foram incubadas durante 30 minutos na presença de concentrações crescentes de PGD2 para a determinação da actividade agonista, ou com 80 nM de PGD2 para a determinação da actividade antagonista, respectivamente. Subsequentemente adicionaram-se a cada amostra 0,15 nM de [35S] GTPyS e, após incubação durante 30 minutos, as reacções foram terminadas por centrifugação a 1000 x g, a 4°C durante 10 minutos. O sobrenadante foi removido e a ligação de [35S]GTPyS foi determinada utilizando um contador de cintilações 1450 Micro-beta. Os dados foram analisados utilizando "Prism" (GraphPad 156

Software, Inc. San Diego, E.U.A.). Determinaram-se os valores IC50 (isto é, a quantidade necessária para atingir 50% de inibição da ligação (em μΜ)) em placas de 96 cavidades, num volume final de 100 pL de acordo com o ensaio de filtração descrito acima. A concentração de membranas e de ligando radioactivo, bem como os controlos positivos e negativos, foram idênticos às condições utilizadas e descritas acima nos Exemplos 122 e 123.

Apresentam-se na Tabela 2 valores IC50 de compostos representativos. Pode derivar-se que os referidos compostos de acordo com a Fórmula (I) exibiram uma inibição significativa da ligação da PGD2 ao CRTH2.

Tabela 2

Composto N* Nome Ki (nM) 1 ácido [5-cloro-l'-[(2-meti1-1,3-tiazol-4-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético 198 2 ácido [5-cloro-l'-(2,4-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético 80 3 ácido [5-cloro-2,2 ' , 5 '-trioxo-1'-(quinolin-2-ilmetil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 200 4 ácido [5-cloro-l'-(4-cianobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 305 5 ácido [5-cloro-l'-(3-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 90 157

Composto N* Nome K± (nM) 10 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(3-fenoxi-benzil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 95 16 ácido [5-cloro-l'-(2,3-di-hidro-l,4-benzo-dioxin-2-ilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 370 17 ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(piridin-2-ilmetil)espiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 980 18 ácido [5-cloro-2,2', 5'-trioxo-1' - {[5-(tri-fluorometil)-2-furil]metil}espiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 420 76 ácido [5-cloro-l'-[(4,6-dicloropiridin-3-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 1300 103 ácido [5-cloro-l'-{[2-(3-clorofenil)-1,3-tiazol-4-il]metil}— 2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 46 104 ácido [5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético 190 107 ácido (1-benzi1-5'-cloro-2,2',5-trioxoespiro [imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2 Ή)-il) acético 72

Exemplo 125: Modelo de CHS model O modelo de hipersensibilidade de contacto pode ser utilizado para avaliar a eficácia terapêutica de derivados espiro em inflamação da pele mediada por células T. 0 modelo está bem estabelecido para a caracterização de 158 compostos para indicações dermatológicas, como psoriase e dermatite de contacto alérgica (Xu et al. J Exp Med. 183, 1001-12, 1996) . Envolve uma fase de sensibilização e uma provocação subsequente com um antigene (DNFB, 2,4-dinitrofluorbenzeno) . Este procedimento origina inflamação da pele, com formação de edema e infiltrados celulares na pele. O edema pode ser medido com um compasso no sitio provocado (orelha dos ratinhos). A administração intravenosa ou oral, com 10% Labrasol como veiculo, dos compostos da invenção 30 minutos antes da provocação com DNFB origina um decréscimo do inchaço e consequentemente reduz a inflamação na pele em comparação com controlos positivos tratados somente com veiculo antes da provocação com o antigene. Ratinhos de controlo negativo não são sensibilizados mas são provocados com DNFB, de modo que não ocorre inflamação dependente de células T nem se forma edema. Ratinhos Balb/c foram obtidos da CharlesRiver (Calcco, Itália) . Os animais foram alojados numa instalação convencional para animais. O tratamento começou a uma idade média de 8 - 12 semanas. O DNFB (2,4-dinitrofluorbenzeno) foi adquirido à Sigma-Aldrich (St. Louis, MO E.U.A.).

Sensibilização e provocação de CHS pelo DNFB

Os ratinhos foram sensibilizados e provocados para induzir CHS ao DNFB. À fase de sensibilização seguiu-se uma fase de provocação. O DNFB foi diluído em acetona/azeite (4/1) imediatamente antes da utilização. Os ratinhos foram sensibilizados ao DNFB por aplicação de 25 pL de solução 0,5% DNFB sobre a pele dorsal rapada. Cinco dias mais tarde aplicaram-se 10 pL de 0,2% DNFB dos dois lados da orelha direita (provocação). A espessura da orelha foi monitorizada no dia 6 (1 dia após a provocação) utilizando 159 um compasso (Mitutoyo, Milão, Itália). 0 inchaço da orelha foi calculado na forma de ((Tn-T5)orelha direita - (Tn-T5)orelha esquerda), em que Tn e T5 representam valores da espessura da orelha no dia n da investiqação e dia 5 antes da provocação, respectivamente.

Apresentam-se em baixo resultados para dois compostos representativos. 0 composto 83 (administração de 60 mg/kg; po) causou uma redução do inchaço da orelha de 40%. 0 composto 105 (administração de 60 mg/kg; po) causou uma redução do inchaço da orelha de 55%.

Exemplo 126: Modelo de fugas vasculares induzidas por DK-PGD2 em ratinhos

Este teste é descrito em Takeshita et al. (2004). Ratinhos Balb/c (Elevage Janvier) (8 semanas de idade) receberam uma injecção intradérmica de DK-PGD2 (10 pg em 30 pL) nos seus dorsos rapados e uma injecção intravenosa de solução Evans Blue (25 mg/kg) 30 minutos após a administração das moléculas de teste (derivado espiro). Noventa minutos após a provocação, os animais foram sacrificados. A pele do dorso foi removida e recolheram-se amostras de sangue. O corante que extravasou (diâmetro da punção: 5 mm) foi extraído com 0,2 mL de formamida e foi quantificado por fluorescência (El: 585 nm, E2: 660 nm). A razão do extravasamento de Evans Blue foi expressa do modo seguinte: pele/soro X 1000.

Apresentam-se na Tabela 3 percentagens de inibição de fugas 160 vasculares para compostos representativos (a uma dose de 30 mg/kg).

Tabela 3

Composto N2 Inibição (%) 83 77 105 60 109 38 111 65 112 61 113 55 114 44 115 45 116 51

LISTA DE REFERÊNCIAS

Cosmi et al. (2000) Eur. J. Immunol. 3_0, 2972-2979

Bush, R.K., Georgitis J. W., "Handbook of asthma and rhinitis". Ia edição (1997), Abingdon: Blackwell Science. 270

Harrison et al. (2003) Life Sciences ]_4_, 489-508

Hirai et al. (2001) J Exp. Med. 193, 255-261

Lewis et al. (1982) J. Immunol. 129, 1627

Matsuoka et al. (2000) Science 287, 2013-2017

Nagata et al. (1999) J. Immunol. 162, 1278-1286

Sawyer et al. (2002) Br. J. Pharmacol. 137, 1163-1172

Takeshita et al. (2004) International Immunol, 1_6, 947-959.

Woodward et al. (1990) Invest. Ophthalomol Vis. Sei. 31, 138-146

Woodward et al. (1993) Eur. J. Pharmacol. 230, 327-333

Xu et al. (1996) J Exp Med. 183, 1001-12 161 WO 04/106302 WO 04/096777 WO 04/035543 WO 04/032848 WO 05/007094 WO 04/108692 WO 04/108717 WO 05/102338

Lisboa, 27 de Outubro de 2011

Claims (26)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de acordo com a Fórmula (I') Ϊ P'kt X/ k3 em que R1 é seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, Ci-C6-alquilo, Ci-C6-alcoxi, halo-Ci-C6-alquilo, halo-Ci-C6-alcoxi, halogéneo, arilo e heteroarilo; m é um inteiro seleccionado de 0, 1, 2, 3 ou 4/ R2 é C3-C6-alquilo ou A; em que A é seleccionado do grupo que consiste em Al, A2, A3, A4, A5 e A6: R, Γ —a* -*-5 6Ηί»·Ή<* *·{ ~~ 0-R4 aí Ã2 A3 H..... 0 A4 A§ em que cada n é um inteiro seleccionado independentemente de 1, 2, 3 ou 4; em que R4 é seleccionado do grupo que consiste em C2-C6 alquilo, C2-C6 alcenilo, C3-C8-cicloalquilo, C3-C8- heterocicloalquilo, arilo e heteroarilo; cada R4 pode estar opcionalmente substituído independentemente com um ou mais grupos R6; cada R6 é independentemente seleccionado do grupo que consiste em Ci-Cô-alquilo, alcoxi, alcoxicarbonilo, 2 arilo, aril-Ci-C6-alquilo, heteroarilo, heteroaril-Ci-C6-alquilo substituído ou não substituído, C3-C8-cicloalquilo, C3-C8-heterocicloalquilo, carboxilo, ciano, halogéneo, hidroxi, amino, aminocarbonilo, acilamino, nitro, sulfoxi, sulfonilo, sulfonilamina, aminossulfonilo e tri-halo-Ci-C6-alquilo; R7 é hidrogénio ou Ci-Cô-alquilo; R3 é B, em que B é: em que n é um inteiro seleccionado independentemente de 1, 2, 3 ou 4; em que R5 é carboxi; X é CH2 ou NH; cada Y é independentemente C(0)ou CH2; e Z é C(0)ou CHR7; Arilo é um grupo carbocíclico aromático insaturado com 6 até 14 átomos de carbono possuindo um único anel ou múltiplos anéis condensados; Heteroarilo é um grupo heteroaromático monocíclico ou um grupo heteroaromático de anéis fundidos bicíclico ou tricíclico; C3-C8-cicloalquilo é um grupo carbocíclico saturado com 3 até 8 átomos de carbono possuindo um único anel ou múltiplos anéis condensados; C3-C8-heterocicloalquilo é um grupo C3-C8-cicloalquilo no qual até 3 átomos de carbono estão substituídos por heteroátomos escolhidos do grupo que consiste em 0, S, NH ou NCH3; activas como bem como os seus isómeros geométricos, formas opticamente activas, como enantiómeros, 3 diastereómeros, suas formas de racematos ou respectivos sais farmaceuticamente aceitáveis.

2. Compostos de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é halogéneo ou halo-Ci-Cô-alcoxi.

3. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que R1 é halogéneo e m é 1 ou 2.

4 . Composto de 1 até 3, em

5. Composto de 1 até 4, em

6. Composto de 1 até 4, em

7. Composto de 1 até 6, em

8. Composto de do grupo que ácido [5- 2,2', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-l'-(2,4-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(quinolin-2-ilmetil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(4-cianobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, 4 ácido [5-cloro-l'-(3-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3,4-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2 — fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(1-naftilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(3-fenoxibenzil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(4-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3-metoxibenzil)-2,2', 5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2,3-di-hidro-l,4-benzodioxin-2- ilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(piridin-2-ilmetil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-{[5-(trifluorometil)-2-furil]metil}espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-l'-(4-metilbenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[3-(trifluorometil) benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, 5 ácido [5-cloro-l'-(2-naftilmetil)-2,2',b'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(1-feniletil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)—11]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-feniletil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetil)- 2, 2 ', 5 '-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1' - [(2E)-3-fenilprop-2-en-l-il]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-11 — [4 —(trifluorometil) benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido 4-(l'-benzil-6-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)butanóico, ácido [5-cloro-l'-(2-etoxietil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [l'-[2-(benziloxi)etil]-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-fenoxietil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(3-fenilprop-2-in-l-il)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido (1'-but-2-in-l-il-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético, ácido [5-cloro-l'-[(l-metil-lH-imidazol-2-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido 4-[5-cloro-l'-(4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico, 6 ácido 4-[5-cloro-l'-(4-clorobenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]butanóico, ácido 4-[5-cloro-2,2',5'-trioxo-1' — [4 —(trifluorometil) benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] butanóico, ácido [ 1'-benzi1-2,2',5'-trioxo-5-(trifluorometoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [1'—(4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(tri- fluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [1'—(3-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(tri- fluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [1'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(tri- fluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [2,2',5'-trioxo-5-(trifluorometoxi)—1'—[3—(trifluorometil) benzil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [1T-(1-naftilmetil)-2,2',5'-trioxo-5-(trifluorometoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [1T-(4-clorobenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(trifluorometoxi) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [1'-(4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-5-(tri- fluorometoxi)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido 4-[5-cloro-l'-(4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico, ácido 4-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo-espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico, 7 ácido [(3S) —1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)— i1]acético, ácido [(3R)-1'-benzil-5-cloro-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [6-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [6-cloro-l'-(3-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [6-cloro-l'-(4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido 4-[5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-feniletil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]butanóico, ácido [5-cloro-l'-(3,5-diclorobenzil)-2,2', 5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(4-fenoxibenzil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[4-(metilsulfonil)benzil]-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [1'-[4-(aminocarbonil)benzi1]-5-cloro-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3-cianobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(5-metilisoxazol-3-il)metil]- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [1'-(1,3-benzotiazol-2-ilmetil)-5-cloro-2,2 ', 5' -trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(5-cloro-2-tienil)metil]-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(5-cloro-l,2,4-tiadiazol-3-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1 (2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-[(2-fenil-l,3-tiazol- 4- il)metil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-l'-(2-cloro-4-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2,5-diclorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [1'-[4-(acetilamino)benzil]-5-cloro-2,2 ', 5 ' - trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(6-cloropiridin-3-il)metil]- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-l'-(lH-indol-3-ilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,2', 5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(1,3-tiazol-4-il- metil)espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(4-cloropiridin-3-il)metil]- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(piridin-3-ilmetil) espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(3,5-dimetilisoxazol-4-il)metil]- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [1'-[(5-tert-butil-l,2,4-oxadiazol-3-il)metil]- 5- cloro-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, 9 ácido [5-cloro-l'-[(5-ciclopropil-l,3,4-tiadiazol-2-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3 ' -pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(4-metoxi-3,5-dimetilpiridin-2-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l' -[(4,6-dicloropiridin-3-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1'-(2-tienilmetil)espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(3,4-dimetoxipiridin-2-il)metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido [5-cloro-l'-(isoquinolin-l-ilmetil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-2,2',5'-trioxo-1' - [ (5-fenil-1,2,4- oxadiazol-3-il)metil]espiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, l'-benzil-5-cloro-l-(lH-tetrazol-5-ilmetil)-2'H,5'H-espiro[indolo-3,3'-pirrolidino]-2,2',5'(1H)-triona, ácido (3R)-[5-cloro-l'-(3-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido (3 S) — [5-cloro-l'-(3-clorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido (3R)-[5-cloro-l'-(3-metoxibenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido (3S)-[5-cloro-l'-(3-metoxibenzil)— 2,2 T,5 T — trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2,4-difluorobenzil)-2,2' , 5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(l,3-oxazol-2-ilmetil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, 10 ácido [5-cloro-l'-[(4-metoxi-3-metilpiridin-2-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1 (2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-{ [2-(4-clorofenil)-l,3-tiazol-4-il] metil}-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-{[5-(4-metoxifenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]metil}-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3, 3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(1-metil-lH-l,2,3-benzotriazol-5- il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3-furilmetil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2-cloro-5-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2,5-difluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2,3-difluorobenzil)-2,2' , 5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3,5-difluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3,4-difluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(l-metil-lH-benzimidazol-2-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3-fluoro-4-metoxibenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(3-cloro-5-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, 11 ácido [ 5-cloro-l'-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il) metil]-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-[(3-metil-5-fenilisoxazol-4-il) metil]-2,2’,5'-trioxoespiro[indolo-3,3’-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-{[2-(3-clorofenil)-l,3-tiazol-4-il] metil}-2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'-trioxo espiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5'-cloro-l-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,2',5- trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2 Ή)-il] acético, ácido [5'-cloro-1-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il) metil]-2,2',5-trioxoespiro[imidazolidino-4,3'-indol]- 1'(2'H)-il]acético, ácido (l-benzil-5'-cloro-2,2',5-trioxoespiro [imidazolidino-4,3'-indol]-1'(2'H)-il)acético, ácido [5'-cloro-1-(2-fluorobenzil)-2,2',5-trioxoespiro [imidazolidino-4,3'-indol]-1' (2 Ή)-il]acético, ácido (3R)-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido (3S)-[5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,2',5'- trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido (3S)-[5-cloro-l'-(2-fluoro-5-clorobenzil)- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido (3R)-[5-cloro-l'-(2-fluoro-5-clorobenzil)- 2,2',5'-trioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il] acético, ácido (1'-benzil-5-cloro-2,5'-dioxoespiro[indolo-3, 3'-pirrolidin]-1(2H)-il)acético, 12 ácido [5-cloro-l'-[(3-metil-5-fenilisoxazol-4-il) metil]-2,5'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1 (2H) -il]acético, ácido [5-cloro-l'-(2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético, ácido [5-cloro-l'-(5-cloro-2-fluorobenzil)-2,5'-dioxoespiro [indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H)-il]acético e [5-cloro-l'-[(5-metil-3-fenilisoxazol-4-il)metil]-2,2'-dioxoespiro[indolo-3,3'-pirrolidin]-1(2H).

9. Composto de acordo com a Fórmula (I),

bem como os seus isómeros geométricos, as suas formas opticamente activas, como enantiómeros, diastereómeros e suas formas de racematos, e tautómeros, ou respectivos sais farmaceuticamente aceitáveis e derivados farmaceuticamente activos, em que R1 é seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, Ci-Cô-alquilo, Ci-Cô-alcoxi, halo-Ci-C6-alquilo, halo-Ci-Cô-alcoxi, halogéneo, arilo e heteroarilo; m é um inteiro seleccionado de 0, 1, 2, 3 ou 4; R2 é Ci-C6-alquilo ou A; R3 é B; R4 é seleccionado do grupo que consiste em Ci-C6-alquilo, C2-C6-alcenilo, C2-C6-alcinilo, C3-C8-cicloalquilo, C3-C8-heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, sulfonilamina, amina, halo-Ci-C6-alquilo, hidroxilamina e hidroxilo; em que cada R4 pode estar substituído independentemente com um ou mais grupos 13 R6; R5 é carboxi; R6 é seleccionado do grupo que consiste em Ci-Cõ-alquilo, alcoxi, alcoxicarbonilo, arilo, aril-Ci-Cõ-alquilo, heteroarilo, heteroaril-Ci-C6-alquilo, C3-C8-cicloalquilo, C3-C8-heterocicloalquilo, carboxilo, ciano, halogéneo, hidroxi, amino, aminocarbonilo, nitro, sulfoxi, sulfonilo, sulfonamida e tri-halo-Ci-C6-alquilo; R7 é hidrogénio ou Ci-Cô-alquilo; A é seleccionado do grupo que consiste em Al, A2, A3, A4, A5 e A6: f A1 .«2 A8 Q AA AS em que cada n é um inteiro seleccionado independentemente de 0, 1, 2, 3, 4; B é: —(CHjSft—tf. em que n é um inteiro seleccionado de 1, 2, 3 ou 4 T é CH ou N; cada Y é independentemente C(0), ou CH2; X é CH2 ou NH; e Z é C(O)ou CHR7; Arilo é um grupo carbociclico aromático insaturado com 6 até 14 átomos de carbono possuindo um único anel ou múltiplos anéis condensados; 14 Heteroarilo é um grupo heteroaromático monocíclico ou um grupo heteroaromático de anéis fundidos biciclico ou tricíclico; C3-C8-cicloalquilo é um grupo carbociclico saturado com 3 até 8 átomos de carbono possuindo um único anel ou múltiplos anéis condensados; C3-C8-heterocicloalquilo é um grupo C3-C8-cicloalquilo no qual até 3 átomos de carbono estão substituídos por heteroátomos escolhidos do grupo que consiste em 0, S, NH ou NCH3; para utilização como medicamento.

10. Composto de acordo com a reivindicação 9, em que R1 é halogéneo ou halo-Ci-Cg-alcoxi.

11. Composto de acordo com a reivindicação 10, em que R1 é halogéneo.

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 até 11, em que R2 é Al, e n é 1.

13. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 até 11, em que R2 é A5, e n é 2.

14. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 até 13, em que R4 é arilo ou heteroarilo.

15. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 até 14, em que n é 1 ou 3.

16. Utilização de um composto de acordo com a Fórmula (I) : 15

R1 é seleccionado do grupo que consiste em hidrogénio, Ci-C6-alquilo, Ci-C6-alcoxi, halo-Ci-C6-alquilo, halo-Ci-C6-alcoxi, halogéneo, arilo e heteroarilo; m é um inteiro seleccionado de 0, 1, 2, 3 ou 4/ R2 é Ci-C6-alquilo ou A; R3 é B; R4 é seleccionado do grupo que consiste em Ci-C6-alquilo, C2-C6-alcenilo, C2-C6-alcinilo, C3-C8-cicloalquilo, C3-C8-heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, sulfonilamina, amina, halo-Ci-C6-alquilo, hidroxilamina e hidroxilo; em que cada R4 pode estar substituído independentemente com um ou mais grupos R6; R5 é carboxi; R6 é seleccionado do grupo que consiste em Ci-C6-alquilo, alcoxi, alcoxicarbonilo, arilo, aril-Ci-C6-alquilo, heteroarilo, heteroaril-Ci-C6-alquilo, C3-C8-cicloalquilo, C3-C8-heterocicloalquilo, carboxilo, ciano, halogéneo, hidroxi, amino, aminocarbonilo, nitro, sulfoxi, sulfonilo, sulfonamida e tri-halo-Ci-C6-alquilo; R7 é hidrogénio ou Ci-C6-alquilo; A é seleccionado do grupo que consiste em Al, A2, A3, A4, A5 e A6: 16 At AS q 44 A5 AS em que cada n é um inteiro seleccionado independentemente de 0, 1, 2, 3 ou 4; B é: em que n é um inteiro seleccionado de 1, 2, 3 ou 4 T é CH ou N; cada Y é independentemente C(0), ou CH2; X é CH2 ou NH; e Z é C(0)ou CHR7; Arilo é um grupo carbociclico aromático insaturado com 6 até 14 átomos de carbono possuindo um único anel ou múltiplos anéis condensados; Heteroarilo é um grupo heteroaromático monociclico ou um grupo heteroaromático de anéis fundidos biciclico ou tricíclico; C3-C8-cicloalquilo é um grupo carbociclico saturado com 3 até 8 átomos de carbono possuindo um único anel ou múltiplos anéis condensados; C3-C8-heterocicloalquilo é um grupo C3-C8-cicloalquilo no qual até 3 átomos de carbono estão substituídos por heteroátomos escolhidos do grupo que consiste em 0, S, NH ou nch3; bem como isómeros geométricos, enantiómeros, diastereómeros, formas de racemato e sais farmaceuticamente aceitáveis dos referidos compostos para a preparação de um medicamento destinado ao 17 tratamento e/ou prevenção de doença alérgica, dermatoses inflamatórias, doenças inflamatórias e perturbações neurodegenerativas.

17. Utilização de acordo com a reivindicação 16, em que a referida doença alérgica é seleccionada do grupo que consiste em asma alérgica, rinite alérgica, conjuntivite alérgica, anafilaxia sistémica ou respostas de hipersensibilidade.

18. Utilização de acordo com a reivindicação 16, em que a referida dermatose inflamatória é seleccionada do grupo que consiste em dermatite atópica, hipersensibilidade de contacto, dermatite alérgica de contacto, urticária crónica/urticária idiopática/ autoimune crónica, exantemas induzidos por fármacos, fotodermatose ou erupção polimorfa solar e miosite.

19. Utilização de acordo com a reivindicação 16, em que a referida doença é seleccionada do grupo que consiste em artrite reumatóide, osteoartrite, esclerose múltipla e doença inflamatória do intestino.

20. Utilização de acordo com a reivindicação 16, em que a referida doença é dor neuropática.

21. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 16 até 20, em que o referido composto é um modulador da actividade do CRTH2.

22. Composto de acordo com a reivindicação 1 para o tratamento e/ou prevenção de doença alérgica, 18 dermatoses inflamatórias, doenças inflamatórias e perturbações neurodegenerativas.

23. Composição farmacêutica contendo pelo menos um composto de acordo com a reivindicação 1 e um respectivo transportador, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

24. Processo para a preparação de compostos de Fórmula (I'), em que o referido processo compreende o passo de sujeitar o intermediário II a uma hidrólise: > r t V ofíw . y y y y l"F L I y N5 Rs $«>> m Ri* - < Ci-C6-alquilo ou benzilo e X, são como definidos na reivindicação 1.

25. Processo de acordo com a reivindicação 24, em que o referido processo compreende o passo de sujeitar o intermediário III a uma alquilação:

r * JN. x Y RH|- z

26. Processo de acordo com a reivindicação 24, em que o referido processo compreende o passo de sujeitar o intermediário IV a um passo de alquilação: 19 19

Lisboa, 27 de Outubro de 2011