PT1865941E

PT1865941E - Óleos de capsaicinóides e métodos para a sua produção e utilização

Info

Publication number: PT1865941E
Application number: PT06748969T
Authority: PT
Inventors: Gene C Jamieson; Keith Roger Bley; Naweed Muhammad
Original assignee: Neurogesx Inc
Priority date: 2005-04-01
Filing date: 2006-03-31
Publication date: 2011-01-05
Also published as: EP1865941A1; CA2602796A1; US7771760B2; ATE483457T1; EA200702139A1; EA013056B1; DE602006017345D1; US20060233901A1; WO2006107723A1; JP5042989B2; JP2008537550A; ES2353399T3; EP1865941B1; EP1865941B8

Description

ΕΡ 1 865 941/PT

DESCRIÇÃO "Óleos de capsaicinóides e métodos para a sua produção e utilização"

DOMÍNIO

Os óleos de capsaicinóides aqui descritos, assim como os métodos para a sua produção e utilização, pertencem ao domínio da administração dérmica de fármacos para o tratamento da dor.

ANTECEDENTES

Nas moléculas dos capsaicinóides, um anel aromático está ligado a uma longa cadeia alifática, geralmente por meio de um grupo funcional amida. Estas moléculas existem como sólidos. Um vez que o estado físico sólido não é o mais favorável para uma penetração eficaz da pele, as formulações dérmicas à base de capsaicinóides são líquidos, géis, ou pensos, pelo que os capsaicinóides são solubilizados e a solução resultante é adaptada à natureza da forma farmacêutica. Nas formas farmacêuticas dérmicas utilizam-se geralmente promotores de penetração para facilitar/aumentar a penetração na pele de um capsaicinóide. A presença de uma cadeia alifática nas moléculas dos capsaicinóides confere-lhes uma capacidade intrínseca para penetrar tecidos como a pele ou as membranas mucosas. No entanto, quando se encontram no estado sólido, a capacidade intrínseca dos capsaicinóides para penetrarem na pele é dificultada pela falta de actividade termodinâmica. Uma mudança do estado sólido para o estado líquido aumenta grandemente a actividade termodinâmica. Além disso, alguns dos ingredientes de formulação, tais como produtos adesivos, diminuem a capacidade dos capsaicinóides para difundir para fora da formulação e, portanto, para penetrar a pele. Esta invenção elimina a necessidade de incluir estes ingredientes (por exemplo, promotores de penetração ou produtos adesivos) e utiliza a capacidade intrínseca dos capsaicinóides para penetrar a pele muito mais eficazmente do que no seu estado sólido.

Com a adição de cada ingrediente a qualquer formulação, sobe o nível de preocupação em relação às propriedades 2

ΕΡ 1 865 941/PT físico-químicas, farmacológicas e toxicológicas da formulação. Esta preocupação aumenta a tendência para manter o sistema o mais simples possível. No entanto, um nível elevado de simplicidade nem sempre é possível devido à necessidade de atender a outros requisitos de desempenho. A formulação de um óleo de capsaicinóide elimina a necessidade de empregar promotores de penetração, pois faz-se uso da propriedade intrínseca do capsaicinóide para penetrar a pele simplesmente através da mudança do seu estado físico.

Em FR-A-2721213 revela-se uma preparação de um extracto de cápsico, por um processo que produz capsaicina a 5% p/p em álcool cetílico.

Por conseguinte, são desejáveis novas formas farmacêuticas para o tratamento da dor, que incluam óleos de capsaicinóides.

RESUMO

Descreve-se aqui a constatação surpreendente de que capsaicinóides de alta pureza, os quais normalmente existem na forma de sólido, podem existir estavelmente na forma de óleo. Os óleos de capsaicinóides incluem pelo menos 40% p/p de um capsaicinóide e um solvente para solubilizar o capsaicinóide. O óleo de capsaicinóide é preparado de modo a praticamente não conter cristais de capsaicinóide ou precipitados de capsaicinóide. Numa variante, a cristalização do capsaicinóide é impedida pela inclusão no óleo de um inibidor da cristalização. Em alguns casos, o solvente propriamente dito é um inibidor da cristalização dos capsaicinóides.

Descrevem-se também métodos para a produção de óleos de capsaicinóide bem como para a caracterização do produto resultante. Ao ser utilizada como um medicamento, a formulação da substância na forma de óleo tem potencialmente a vantagem de melhorar a administração, especialmente quando aplicada topicamente. Os capsaicinóides têm certas propriedades intrínsecas de permeação, mas normalmente são formulados com outros promotores de penetração e auxiliares de formulação, para garantir a sua apresentação na forma 3 ΕΡ 1 865 941/ΡΤ solubilizada ou liquefeita. Descreve-se ainda aqui a forma como as propriedades intrínsecas de permeação dos capsaicinóides, quando apresentados na forma de óleo, eliminam a necessidade de co-formular um capsaicinóide com outros promotores de penetração.

DESCRIÇÃO DETALHADA

Os óleos de capsaicinóides aqui descritos são geralmente formulados de modo a incluir pelo menos 40% p/p de capsaicinóide e um solvente para solubilizar o capsaicinóide. Imediatamente após a formulação, os óleos estão substancialmente isentos de cristais de capsaicinóide ou precipitados de capsaicinóide. Os óleos podem ser inspeccionados, por exemplo, visualmente com um microscópio, para determinar se cristais ou precipitados estão presentes. Métodos de Produção de Óleos de Capsaicinóides. A titulo de exemplo e não como limitação, foram produzidos óleos de capsaicina pura sintética, através de vários métodos que deram origem a um liquido transparente, substancialmente isento de cristais ou precipitados de capsaicina (por exemplo, mais de 90% isento de cristais ou precipitados de capsaicina, mais de 95% isento de cristais ou precipitados de capsaicina, etc.) e com concentrações de capsaicina entre mais de 40% e 95% p/p. Estas composições liquidas transparentes mantiveram-se estáveis durante pelo menos duas semanas após a sua preparação, a temperaturas entre -20 °C, 2 a 8 °C e 25 °C. Os métodos utilizados para produzir óleos muito concentrados de capsaicina assemelham-se às técnicas usadas para fazer soluções simples, soluções de co-solventes, soluções com inibidores de cristalização e misturas eutécticas, que são conhecidas na arte. Por exemplo, a adição de inibidores de cristalização a soluções simples proporciona uma maneira de aumentar a concentração de capsaicina acima do limite de saturação do sistema de solvente em si. Esta combinação resulta num liquido que não cristaliza ou produz precipitados, tal como acontece em simples soluções em si.

Os métodos utilizados para demonstrar a formação de um óleo incluem análises de ordem visual e microscópica e de estabilidade física a curto prazo utilizando stress por 4

ΕΡ 1 865 941/PT temperatura para induzir precipitação e/ou cristalização. Outros métodos empregues para avaliar a estabilidade e a formação dos óleos incluem: transparência determinada por meios visuais ou turvação, imiscibilidade com a água, viscosidade, densidade e as caracteristicas reológicas do fluxo.

Noutro aspecto, um óleo de um capsaicinóide é formado in situ após a sua administração. Por exemplo, pura capsaicina sintética é dissolvida num sistema de solventes voláteis, como o etanol. Adicionam-se inibidores de cristalização e a formulação resultante é um liquido transparente isento de capsaicinóides precipitados ou cristalizados. Após a administração, o solvente mais volátil evapora-se deixando um resíduo muito concentrado de capsaicinóide. Normalmente, a evaporação do solvente deixa um residuo sólido e, consequentemente, a permeação da pele pelo residuo sólido é minima. No entanto, com a adição de um inibidor da cristalização, uma película oleosa residual de capsaicina é deixada na superfície. A combinação do efeito derivado do sistema de solventes voláteis e o óleo gerado in situ pode resultar numa taxa de permeação muito mais elevada do que uma formulação semelhante sem a adição de um ou mais inibidores de cristalização.

Em algumas variantes, o óleo de um capsaicinóide compreende pelo menos 40% p/p de capsaicinóide. Noutras variantes, o óleo de capsaicinóide compreende pelo menos 60% p/p de capsaicinóide, pelo menos 70% p/p de capsaicinóide, pelo menos 80% p/p de capsaicinóide, ou pelo menos 95% p/p de capsaicinóide ou pelo menos 99,5% p/p de capsaicinóide.

Noutras variantes, os óleos de capsaicinóides descritos aqui consistem basicamente de pelo menos 40% p/p de capsaicinóide e um solvente capaz de solubilizar o capsaicinóide. Estes óleos podem ainda incluir um inibidor da cristalização dos capsaicinóides, por exemplo, polivinilpirrolidona. Ainda noutras variantes, o solvente é um inibidor da cristalização dos capsaicinóides. Óleos de Capsaicinóides. Os óleos de capsaicinóides produzidos pelos métodos acima descritos são líquidos 5 ΕΡ 1 865 941/ΡΤ transparentes, com uma cor que varia desde incolor e transparente como a água até castanho-âmbar. Os óleos não são misciveis com água e têm uma viscosidade semelhante aos alcanóis de longa cadeia, como o álcool oleilico, conforme avaliado por comparação visual.

Normalmente, os óleos são preparados com capsaicina como o capsaicinóide, mas outros capsaicinóides apropriados podem ser utilizados. A capsaicina tem sido utilizada como promotor de penetração para a administração transdérmica dos princípios activos farmacêuticos (veja Kansa Buyukasar et al., Kocatepe Tip Dergisi (2003), 1, 29-37). A capsaicina é o composto químico principal dos óleos essenciais chamados oleorresinas, que são extraídos dos pimentos do género Capsicum. O extracto botânico natural contém uma mistura de capsaicinóides. Normalmente, 80 a 90% dos capsaicinóides são compostos por capsaicina (69%) e di-hidrocapsaicina (22%) . As propriedades físicas da capsaicina (registo CAS n.° 404-86-4) são: fórmula empírica = Ci8h2703N, peso molecular = 305,4 Dalton, partículas cristalinas de cor branca, moderadamente solúvel em água fria mas solúvel em benzeno, álcool, cetona, éter e óleos de parafina (Monsereenusorn et al., 1982, Rumsfield and West, 1991) . A substância pura medicinal e os extractos botânicos naturais são sólidos que ocorrem na forma de um pó branco microcristalino. A capsaicina propriamente dita é também farmacologicamente activa e tem sido usada para tratar nevralgias de origem periférica, cistite intersticial, osteoartrite, bem como outras condições dolorosas. As propriedades intrínsecas de permeação da capsaicina não foram demonstradas em formulações tópicas (por exemplo, cremes, géis, pomadas ou emplastros) e, em geral, a presença de outros ingredientes inactivos nestas formulações afecta as propriedades de permeação da capsaicina. Uma constatação surpreendente é que a capsaicina pode ser convertida a uma forma líquida muito concentrada e estável através da adição de inibidores ou retardadores de cristalização, de tal forma que capsaicina de elevada pureza pode ocorrer na forma de um líquido apropriado para administração tópica directa (por exemplo, na forma de um óleo muito concentrado). A vantagem de ser apresentada na forma líquida é que as propriedades 6

ΕΡ 1 865 941/PT intrínsecas de permeação da capsaicina são suficientes para se atingir o nível desejado de entrega do fármaco por via dérmica, assim como o seu efeito farmacológico. Uma nova forma física de um extracto sintético ou enriquecido em capsaicina e métodos para produzir o mesmo são descritos.

Entre os capsaicinóides apropriados que podem ser utilizados para formular um óleo constam o isómero cis da capsaicina, nonivamida, di-hidrocapsaicina, homocapsaicina, nordi-hidrocapsaicina, homodi-hidrocapsaicina, olvanilo, "aravanil" e análogos da capsaicina, tal como éster de capsaicina e derivados com cadeia lateral de amida.

Verificou-se que os inibidores de cristalização que são normalmente utilizados para impedir a cristalização de óleos fixos, ou para impedir a precipitação de princípios activos solubilizados farmacêuticos nas formas farmacêuticas, podem ser utilizados para impedir a cristalização da capsaicina. Entre os exemplos constam, mas não lhes estando limitados, Luvitol® BD 10 P (BASF), povidona e seus derivados; derivados da dextrina, polietilenoglicol, polipropilenoglicol, manitol e glicerina, e monoglicéridos e diglicéridos de óleos essenciais, ésteres de poliglicerina e de ácidos gordos, éster de sacarose e de ácido palmítico, éster de pentaeritritol da colofónia da madeira (Pentalyn A®) e Eudagrits®. Os inibidores da cristalização podem variar de 0,1 a 10% p/p. Mais de preferência 2%, ou no mínimo 1%, e podem ser formulados na forma de uma solução, tal como uma adição de 10% de Kollidon® a 10% em PEG 400.

Os óleos de capsaicinóides aqui descritos incluem um solvente capaz de solubilizar o capsaicinóide. Entre os exemplos de solventes que podem ser utilizados constam solventes voláteis, solventes semi-voláteis e solventes não voláteis. A. Solventes voláteis

Os solventes voláteis orgânicos adequados para utilização em óleos de capsaicinóides são compostos de baixo peso molecular, nos quais a capsaicina é especialmente solúvel. Entre os exemplos constam metanol, etanol, acetona, 7

ΕΡ 1 865 941/PT isopropanol, n-propanol, ciclo-hexano e alcanos com peso molecular inferior ao dodecano (C—12). Na preparação, o capsaicinóide é dissolvido até a solução estar saturada. Inibidores da cristalização, tais como Kollidon® 17 PF (também conhecido como povidona e disponível na BASF) e co-solventes podem ser adicionados. A solução saturada é filtrada para remover qualquer capsaicinóide residual não dissolvido. Quase todo o solvente volátil é removido (por exemplo, mais de 60%, mais de 70%, mais de 80%, mais de 90%, mais de 95%, etc.), resultando num líquido sub-arrefecido; isto é, o estado líquido de um composto orgânico puro, em que o estado mais estável em condições Standard é um sólido. Sem estar vinculado a qualquer teoria particular, pensa-se que a presença do inibidor de cristalização influencia a energia da estrutura cristalina para a cristalização da capsaicina e, deste modo, impede a nucleação homogénea. O resultado é um óleo de capsaicinóide. B. Solventes Semi-Voláteis

Os solventes semi-voláteis que podem ser utilizados para formular os óleos de capsaicinóide incluem muitos óleos essenciais voláteis, tais como óleo de cravo-da-índia, óleo da árvore do chá, óleo de gergelim e óleo de eucalipto. Numa variante, o óleo essencial é um óleo fixo, que também pode ser conhecido como óleo transportador. Como solvente adequado semi-volátil também se pode utilizar, por exemplo, Transcutol® (Gattefossé, França), Glycofurol®, álcool oleilíco, propilenoglicol, monoterpenos, óleo de eucalipto (Sigma-Aldrich Chemical Co, Reino Unido), mentol, oleato de etilo, miristato de isopropilo, álcool benzílico, alcanos ou alcanóis, alcenóis, ácidos alcanóicos e alcenóicos de 12 a 28 átomos de carbono. Os solventes semi-voláteis normalmente têm um ponto de ebulição mais elevado do que o ponto de fusão do capsaicinóide. O capsaicinóide e os inibidores de cristalização são adicionados ao meio na forma de uma suspensão. A temperatura é elevada acima do ponto de fusão do capsaicinóide e abaixo do ponto de ebulição do solvente. Quase todo o solvente semi-volátil é removido (por exemplo, mais de 60%, mais de 70%, mais de 80%, mais de 90%, mais de 95%, etc.). À medida que a solução arrefece, a cristalização ou precipitação dos capsaicinóides é impedida pela presença 8

ΕΡ 1 865 941/PT dos inibidores, resultando numa composição líquida (isto é, um óleo). 0 próprio meio pode actuar como inibidor da cristalização. C. Solventes não voláteis

Os sistemas de solventes não voláteis que podem ser empregues nos óleos de capsaicinóides incluem capsaicinóides em alta concentração dissolvidos em polietilenoglicol 400, Lutrol® (copolímero de bloco de polietileno e polioxipropileno disponível na BASF), monooleato de glicerilo, glicerina, lanolina, ceras de baixo ponto de fusão, sesquiterpenos e alcanos, alcenos, ácidos alcanóicos e alcenóicos com mais de 28 átomos de carbono. Semelhante à preparação semi-volátil, o capsaicinóide e os inibidores de cristalização são adicionados ao meio na forma de uma suspensão. A temperatura é elevada acima do ponto de fusão do capsaicinóide. À medida que a solução arrefece, a cristalização ou precipitação do capsaicinóide é impedida pela presença dos inibidores, resultando num líquido (isto é, um óleo) . O próprio meio pode actuar como inibidor da cristalização.

Formas farmacêuticas e aplicações. Os óleos de capsaicinóide aqui descritos podem ser administrados directamente na forma de óleo, ou podem ser formulados na forma de penso, gel, pomada, creme ou loção, para aplicação tópica em tecidos como a pele e as membranas mucosas. Os óleos de capsaicinóides podem ser aplicados topicamente em qualquer uma das formas farmacêuticas acima mencionadas, durante pelo menos cerca de 10 minutos, pelo menos cerca de 30 minutos, ou pelo menos cerca de uma hora, mas não estando assim limitado. A duração da aplicação depende de factores como a forma farmacêutica usada, o tipo e a quantidade de capsaicinóide incluído e afins. A seguir, o óleo de capsaicinóide pode ser removido, por exemplo, pela aplicação de um gel de limpeza. Um gel de limpeza típico que pode ser utilizado está descrito em U.S.-A-2004/0126430.

Para utilização num penso, a forma líquida de um capsaicinóide juntamente com os inibidores de cristalização pode ser directamente misturada numa massa adesiva na qual a 9

ΕΡ 1 865 941/PT gotícula de capsaicinóide líquido é imiscível com a massa adesiva. Um exemplo é uma massa adesiva à base de silício. Esse sistema é denominado penso-microreservatório no qual o fármaco na massa adesiva é um líquido. Como alternativa, o capsaicinóide liquefeito pode ser adsorvido numa partícula inerte, tal como bentonite ou terra de diatomáceas, e formulado como um fármaco com a forma de um penso de matriz adesiva. Uma forma tradicional de penso-reservatório de líquido multicamadas é também possível.

Emulsões, microemulsões ou outros cremes, pomadas ou géis bifásicos tópicos também podem ser preparados. A emulsificação directa de óleo de capsaicinóide pode ter lugar, por exemplo, numa emulsão óleo-em-água, onde o centro hidrofóbico é em grande parte composto por óleo de capsaicinóide. Outros tensioactivos ou excipientes de formulação podem ser adicionados para estabilizar fisicamente a emulsão.

Os óleos de capsaicinóide podem ser incluídos em formas farmacêuticas utilizadas para tratar quaisquer afecções responsivas à capsaicina, tais como, mas não lhes estando limitadas, síndromes de dor neuropática periférica, nevralgia pós-herpética, neuropatia diabética dolorosa, nevralgia do trigémeo, dor neuropática após trauma, eritromelalgia, osteoartrite, artrite reumatóide, fibromialgia, dor lombar, psoríase, coceira, prurido, cancro, verrugas, hipertrofia prostática, hiperpigmentação, rugas e infecções virais.

Além disso, os óleos de capsaicinóide podem ter inúmeras aplicações em actividades agrícolas ou comerciais (por exemplo, no desenvolvimento ou cultivo de vários produtos agrícolas ou comerciais) devido à sua capacidade intrínseca para dissuadir ou repelir roedores, insectos ou outros animais que andam, ou dissuadir bactérias ou criaturas marítimas de se fixarem a docas ou cascos de navios. Isto deve-se, em parte, à pungência da capsaicina mediada pelo receptor TRPVl, que pode ser explorada. Mais especificamente, o desenvolvimento de técnicas para reduzir a contaminação da alimentação dos animais por roedores e para controlar as populações de roedores é uma parte crucial dos esforços no sentido de reduzir a ocorrência de infecções 10

ΕΡ 1 865 941/PT bacterianas em explorações avícolas. Os capsaicinóides produzem uma sensação de ardor na boca dos mamíferos e são utilizados eficazmente como dissuasão para algumas espécies de pragas. Adicionados à alimentação das aves de capoeira, os óleos de capsaicinóides podem ser eficazes como agentes de aversão para dissuadir os roedores, mas não dissuadem as aves porque os receptores TPRVl das aves é muito menos sensível à capsaicina (Jordt SE, Julius D., Molecular basis for species-specific sensitivity to "hot" chili peppers. Cell. 2002. 108(3):421-30). A utilização de alimentação tratada com capsaicinóides em explorações avícolas pode reduzir substancialmente a contaminação das rações por roedores e, em última análise, a incidência de infecções bacterianas em aves de capoeira. (Jensen PG, Curtis PD, Dunn JA, Austic RE, Richmond ME. Field evaluation of capsaicin as a rodent aversion agent for poultry feed. Pest Manag Sei. 2003. 59(9) :1007-15) .

Numa outra variante, os óleos de capsaicinóide podem ser utilizados como anti-incrustantes. Os anti-incrustantes dissuadem a fixação de organismos marinhos (inclusive bactérias) a superfícies submersas, como cais, docas ou cascos de embarcações. O anti-incrustante mais comummente utilizado é o tributilestanho (TBT). Os sistemas de TBT são muito eficazes, mas também são tóxicos para os organismos não visados; a utilização de revestimentos à base de TBT será completamente banida nos Estados Unidos a partir de 1 de Janeiro de 2008. Por conseguinte, há necessidade urgente de encontrar alternativas não tóxicas adequadas. Os capsaicinóides são atractivos como alternativas aos tóxicos anti-incrustantes à base de metais actualmente em uso, porque são muito menos tóxicos (Xu Q, Barrios CA, Cutright T, Zhang Newby BM. Evaluation of toxicity of capsaicin and zosteric acid and their potential application as antifoulants. Environ Toxicol. 2005, 20(5):467-74.), mas ainda são bastante eficazes (Xu Q, Barrios CA, Cutright T, Newby BM. Assessment of antifouling effectiveness of two natural product antifoulants by attachment study with freshwater bactéria. Environ Sei Pollut Res Int. 2005. 12(5):278-84. Os óleos de capsaicinóides são um produto particularmente conveniente para aplicar como anti-incrustante em estruturas marítimas. 11

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Noutra variante, produtos à base de capsaicina podem ser utilizados para repelir insectos (incluindo pulgões, ácaros, tripés, lagartas mineiras, moscas brancas, percevejos de renda e cigarrinhas verdes) de plantas, especialmente frutas e legumes; por exemplo, frutas citricas, raizes e tubérculos, bolbos, produtos hortícolas de folhas, brássicas (couve), legumes, frutos e cucurbitáceas. Com o tempo e os procedimentos de limpeza normais, a administração tópica da capsaicina não afecta o sabor dos produtos agrícolas. Os repelentes à base de capsaicina também podem ser usados em todas as plantas ornamentais de interior e exterior. Por conseguinte, os óleos de capsaicinóide constituem uma forma particularmente conveniente de aplicação de repelente de insectos em plantas, frutas e produtos hortícolas.

EXEMPLOS

Os exemplos a seguir servem para descrever mais completamente o modo de produzir e utilizar os óleos de capsaicinóides atrás descritos. Entende-se que estes exemplos são apresentados não para limitar, de maneira nenhuma, o âmbito de aplicação da presente invenção, mas sim para fins ilustrativos.

Além disso, os exemplos a seguir empregam, salvo indicação em contrário, técnicas convencionais de formulação farmacêutica, química medicinal e assim por diante, que estão dentro da perícia da arte. Estas técnicas estão explicadas em pormenor na literatura. Esforços foram envidados para garantir a precisão em relação aos números (por exemplo, quantidades, rácios, etc.), mas algum erro experimental e desvios devem ser tidos em conta. Salvo indicação em contrário, as partes são partes em peso. Todos os componentes podem ser obtidos comercialmente, salvo indicação em contrário.

Exemplo 1: Solubilização com um solvente volátil e inibidor

Prepararam-se soluções de capsaicina na concentração mínima exigida (40%), dissolvendo-a num solvente adequado, com ou sem a adição de um inibidor de cristalização, da seguinte maneira: capsaicina foi pesada e adicionada a um 12 ΕΡ 1 865 941/ΡΤ frasquinho de borossilicato, seguido dos restantes excipientes (tamanho usual da amostra de 1 g) . 0 frasquinho foi fechado e os ingredientes foram agitados por vórtice e inspeccionados visualmente. A formulação foi deixada em repouso durante a noite à temperatura ambiente. 0 teste era considerado bem sucedido quando se obtinha um liquido transparente. A solubilidade máxima da capsaicina nos solventes seleccionados foi determinada da seguinte formar a uma quantidade fixa de cada solvente (100 mg), era adicionada uma quantidade conhecida de capsaicina (100 mg). A amostra era agitada por vórtice até toda a capsaicina estar dissolvida (avaliação visual). Novas aliquotas de capsaicina (100 mg) eram adicionadas à amostra e misturadas por vórtice até a máxima solubilidade ser atingida. A solubilidade aparente máxima possível da capsaicina em cada solvente foi determinada visualmente.

Soluções muito concentradas de capsaicina foram preparadas dissolvendo capsaicina no respectivo solvente em concentrações ligeiramente inferiores (aproximadamente 5 a 10% p/p) à solubilidade máxima como atrás determinada. A capsaicina foi pesada e adicionada a um frasquinho de borossilicato, seguido do solvente seleccionado. Os ingredientes foram misturados por vórtice e inspeccionados visualmente até toda a capsaicina estar dissolvida. A formulação foi deixada em repouso durante a noite, à temperatura ambiente e destapada.

Para a preparação de soluções muito concentradas de capsaicina, uma classe especifica de PVP foi identificada como o inibidor adequado da cristalização. O produto Kollidon® 17 PF cumpre os requisitos das actuais monografias harmonizadas para a povidona da Farmacopeia Europeia, da Farmacopeia dos Estados Unidos - Formulário Nacional (USP-NF) e da JPE. As suas aplicações principais incluem o uso como agente solubilizante, dispersante e inibidor de cristalização, especialmente para injecções. Várias composições típicas foram preparadas comparando a concentração máxima possível antes e depois da remoção do 13 ΕΡ 1 865 941/ΡΤ solvente. Como se pode ver na Tabela 1 a seguir, foi possível obter composições muito concentradas.

Tabela 1 Código da Formulação NG26 NG27 NG28 NG29 NG30 Ingrediente Inicial Final Inicial Final Inicial Final Inicial Final Inicial Final Capsaicina 44 61 44 61 44 68 44 75 44 73 Álcool isopropilico 44 23 44 23 44 11 N.A. N.A. N.A. N.A. PEG 400 (polietilenoglicol) 11 15 N.A. N.A. N.A. N.A. 11 17 N.A. N.A. Propilenoglicol N.A. N.A. 11 15 N.A. N.A. N.A. N.A. 11 18 Etanol N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. 44 7 44 8 Álcool benzilico N.A. N.A. N.A. N.A. 11 19 N.A. N.A. N.A. N.A Kollidon® 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 N.A. = não aplicável

Os resultados mostram que se podem preparar soluções mais concentradas de capsaicina por dissolução num solvente volátil, na presença de um inibidor de cristalização, do que as obtidas somente pela capacidade do solvente. A evaporação do componente mais volátil da mistura resultou num líquido (isto é, um óleo) estabilizado pela presença do inibidor(es).

Exemplo 2: Solubilização com um solvente não volátil

Soluções deste tipo foram preparadas pela dissolução da capsaicina no solvente escolhido, com adição do inibidor de cristalização da seguinte forma: Capsaicina (Torcan Chemicals LTD, Canadá) e Kollidon® (BASF, Alemanha) foram pesados e adicionados a um frasquinho de borossilicato, seguido dos excipientes restantes (peso usual da amostra de 1 g) . Os ingredientes foram misturados por vórtice e inspeccionados visualmente. 0 frasquinho foi pesado e a formulação foi colocada em banho-maria a 70 °C, durante 1 hora e destapada. O frasquinho foi arrefecido, fechado e pesado novamente no final da hora. A formulação foi deixada em repouso durante a noite à temperatura ambiente. O teste era considerado bem-sucedido quando se obtinha um líquido transparente. Os componentes das várias composições preparadas estão apresentados na Tabela 2. 14

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Tabela 2 Código da formulação Ingrediente NG3 NG3 NG3 NG3 NG3 NG3 NG4 NG4 NG5 NG5 4 5 6 7 8 9 5 8 0 2 Capsaicina 80 80 80 80 80 80 85 50 50 50 Mentol 10 N.A. N.A. 10 N.A. N.A. 10 N.A. N.A. N.A. Óleo de cravo-da-índia N.A. 10 N.A. N.A. 10 N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. Óleo de eucalipto N.A. N.A. 10 N.A. N.A. 10 N.A. N.A. N.A. N.A. Glycofurol® N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. 50 50 N.A. Transcutol® N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. Álcool benzílico N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. N.A. 50 Kollidon® a 10% 10 10 10 N.A. N.A. N.A. 5 N.A. N.A. N.A. em PEG 400 PEG 400 N.A. N.A. N.A. 10 10 10 N.A. N.A. N.A. N.A. (polietilenogilcol) N.A. = não aplicável

Os resultados mostram que a adição de capsaicina a um solvente semi-volátil e aquecimento acima do ponto de fusão da capsaicina produziu composições estáveis, em alguns casos com inibidores de cristalização e noutros casos em que o sistema de solvente actuou como inibidor.

Exemplo 3: Fusões a quente

Formularam-se óleos muito concentrados de capsaicina. Três formulações de capsaicina a 95%, 99% e 100% foram preparadas. A capsaicina foi pesada e adicionada a um frasquinho de borossilicato, seguido de Kollidon® a 10% p/p em 400 PEG. O frasquinho foi fechado, colocado em banho-maria a 70 °C e inspeccionado visualmente até toda a capsaicina ter derretido e se ter formado um liquido transparente. Para o óleo de capsaicina a 100%, capsaicina pura foi pesada e adicionada a um frasquinho de borossilicato, que foi tapado e colocado em banho-maria a 70 °C, até toda a capsaicina estar derretida. O frasquinho foi arrefecido e a formulação foi deixada em repouso à temperatura ambiente. O comportamento durante o arrefecimento foi observado para determinar a que temperaturas e por quanto tempo se podiam obter óleos transparentes. 15

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Os resultados mostraram que só a capsaicina a 95% com 5% de Kollidon® a 10% p/p era suficientemente estável. As composições de capsaicina a 99% e a 100% cristalizavam num curto período de tempo após o arrefecimento até à temperatura ambiente.

Exemplo 4: Estudo da estabilidade física a curto prazo

Um total de 14 formulações das categorias atrás referidas foram testadas quanto à sua estabilidade a curto prazo, a três temperaturas diferentes. As formulações foram seleccionadas de modo a incluir exemplos de tantos tipos diferentes quanto possível, incluindo 100% de capsaicina como comparação.

Para estudar a estabilidade física a curto prazo, formulações foram preparadas com um tamanho de amostra de 3 a 6 g em frascos Duran de 25 ml (vidro de borossilicato) conforme descrito atrás. Três alíquotas de cada amostra foram então transferidas para frasquinhos pequenos de borossilicato, que foram tapados e colocados a três temperaturas seleccionadas, nomeadamente 25 °C, 2-8 °C e -20 °C. A estabilidade ao longo do tempo foi determinada para estas três temperaturas, nos seguintes pontos no tempo: t = 0, t = 12 h, t = 36 h, t = 1 semana e t = 2 semanas. Após cada ponto no tempo, as formulações eram avaliadas quanto a alterações visíveis, especialmente quanto à presença de cristais ou partículas, do seguinte modo: as amostras colocadas para incubação a 25 °C, 2-8 °C e -20 °C foram removidas do gabinete da estabilidade e colocadas na bancada. A avaliação visual foi realizada imediatamente após a remoção da incubadora e após 1, 2 e 4 h em repouso na bancada à temperatura ambiente. Posteriormente, as amostras foram devolvidas às respectivas incubadoras. Várias outras formulações foram preparadas como reserva e observadas quanto a alterações visíveis ao longo de duas semanas, mas apenas à temperatura ambiente. 16 ΕΡ 1 865 941/ΡΤ

Exemplo 5: Teste rápido de avaliação de estabilidade -Avaliação microscópica A estabilidade acelerada das formulações foi investigada por meio de um teste rápido de avaliação da cristalização. 0 teste envolveu a observação ao microscópio do comportamento de filmes finos das formulações ao voltarem à temperatura ambiente depois de terem sido congelados. Para este efeito, uma amostra de cada formulação foi espalhada numa lâmina microscópica com duas cavidades e coberta com uma lamela. A lamela foi selada com uma laca para impedir gualquer evaporação dos solventes de formulação. As lâminas de microscópio foram então colocadas no congelador a -20 °C durante 1 hora, removidas e observadas ao microscópio durante um período de 5 minutos e a uma ampliação de 200x. A presença, formação ou desaparecimento de quaisquer cristais e/ou precipitados foi observada ao longo do tempo de observação. Todas as 14 formulações seleccionadas para o estudo de estabilidade a curto prazo descrito atrás foram também avaliadas por este método microscópico.

Exemplo 6: Calorimetria diferencial de varrimento (DSC)

Para preparar óleos muito concentrados, dados elementares relativos às propriedades físicas da capsaicina podem ser obtidos por DSC. Análises comuns por DSC foram realizadas num DSC 2920 (TA Instruments). A célula de DSC foi purgada com azoto seco (60 cm3/min) e o sistema de refrigeração foi purgado com azoto (150 cm3/min) . Todas as análises por DSC foram realizadas em cadinhos de alumínio que foram selados hermeticamente por prensagem. Três diferentes protocolos foram seguidos para as análises por DSC: a. Aumento de temperatura de 20 °C a 80 °C, a uma taxa de 10 °C/min. b. Aumento de temperatura de 20 °C a 100 °C, a uma taxa de 10 °C/min, seguido por uma etapa de resfriamento até -20 °C, a uma taxa de 10 °C/min, e uma segunda etapa de aquecimento até 150 °C. c. Aumento de temperatura de 20 °C a 70 °C, a uma taxa de 10 °C/min, seguido por uma etapa de resfriamento até -20 °C, 17

ΕΡ 1 865 941/PT a uma taxa de 10 °C/min, e uma segunda etapa de aquecimento até 100 °C.

As temperaturas de transição foram determinadas através dos picos endotérmicos máximos observados nas curvas de aquecimento. As curvas de aquecimento foram construídas traçando os valores de fluxo de calor, normalizados para o peso da amostra (P/g), em função da temperatura.

Lisboa, 2010-12-30

Claims

ΕΡ 1 865 941/PT 1/4 REIVINDICAÇÕES 1. Óleo de capsaicinóide que compreende capsaicinóide e um solvente capaz de solubilizar o capsaicinóide, caracterizado por compreender: pelo menos 40% em peso de capsaicinóide; e compreender ainda um inibidor da cristalização do capsaicinóide, ou em que o solvente é um inibidor da cristalização do capsaicinóide; em que o óleo de capsaicinóide é substancialmente isento de cristais de capsaicinóide ou precipitados de capsaicinóide.
2. Óleo de capsaicinóide composto essencialmente por: pelo menos 40% em peso de capsaicina. um solvente capaz de solubilizar a capsaicina; e um inibidor da cristalização da capsaicina, ou em que o solvente é um inibidor da cristalização da capsaicina.
3. Óleo de capsaicinóide das Reivindicações 1 ou 2, que compreende um inibidor da cristalização do capsaicinóide ou da capsaicina.
4. Óleo de capsaicinóide da Reivindicação 3, em que o inibidor da cristalização é polivinilpirrolidona.
5. Óleo de capsaicinóide das Reivindicações 1 ou 2, em que o solvente é um inibidor da cristalização do capsaicinóide ou da capsaicina.
6. Óleo de capsaicinóide das Reivindicações 1 ou 2, em que o solvente tem um peso molecular de 100 a 300 Dalton e um ponto de ebulição superior a 69 °C.
7. Óleo de capsaicinóide das Reivindicações 1 ou 2, em que o solvente é um solvente semi-volátil.
8. Óleo de capsaicinóide da Reivindicação 7, em que o solvente é seleccionado entre terpenos, óleos da árvore do chá, óleos essenciais, e suas misturas. ΕΡ 1 865 941/ΡΤ 2/4
9. Óleo de capsaicinóide das Reivindicações 1 ou 2, em que o solvente é um solvente não volátil.
10. Óleo de capsaicinóide da Reivindicação 9, em que o solvente não volátil é seleccionado entre polietilenoglicol, propilenoglicol, álcool tetra-hidrofurfurílico de éter de polietilenoglicol, éter monoetilico de dietilenoglicol, álcool benzilico e suas misturas.
11. Óleo de capsaicinóide das Reivindicações 1 ou 2, em que o solvente é um solvente volátil.
12. Óleo de capsaicinóide da Reivindicação 11, em que o solvente volátil é seleccionado entre metanol, etanol, álcool isopropilico, e suas misturas.
13. Óleo de capsaicinóide da Reivindicação 1, que compreende pelo menos a) 50% em peso de capsaicina; b) 60% em peso de capsaicina; c) 70% em peso de capsaicina; d) 80% em peso de capsaicina; e) 90% em peso de capsaicina; ou f) 95% em peso de capsaicina.
14. Óleo de capsaicinóide da Reivindicação 1, em que o capsaicinóide é capsaicina.
15. Método para produzir um óleo de capsaicina, que compreende as etapas de: solubilizar pelo menos 40% em peso de capsaicina num solvente volátil ou semi-volátil; adicionar um inibidor da cristalização da capsaicina; e remover substancialmente todo o solvente volátil ou semi-volátil.
16. Método da Reivindicação 15, em que o solvente é: a) um solvente volátil seleccionado entre etanol, álcool isopropilico, e suas misturas; ou ΕΡ 1 865 941/PT 3/4 b) um solvente semi-volátil seleccionado do grupo composto por terpenos, óleos da árvore do chá, óleos essenciais, e suas misturas.
17. Método para produzir um óleo de capsaicinóide, que compreende as etapas de: misturar pelo menos 40% em peso de capsaicinóide com um solvente não volátil; e aquecer a mistura de capsaicinóide e solvente não volátil acima do ponto de fusão do capsaicinóide, mas abaixo do ponto de ebulição do solvente não volátil; em que o óleo compreende ainda um inibidor da cristalização do capsaicinóide, ou em que o solvente é um inibidor da cristalização do capsaicinóide.
18. Método da Reivindicação 17, em que o solvente não volátil é seleccionado entre polietilenoglicol, propilenoglicol, álcool tetra-hidrofurfurílico de éter de polietilenoglicol, éter monoetilico de dietilenoglicol, álcool benzilico e suas misturas.
19. Método para produzir um óleo de capsaicinóide, que compreende as etapas de: aquecer pelo menos 40% em peso de capsaicina acima da sua temperatura de ebulição; e adicionar um inibidor da cristalização da capsaicina.
20. Método de qualquer uma das Reivindicações 15, 16, 17 e 19, em que o inibidor de cristalização é polivinilpirrolidona.
21. Óleo de capsaicinóide de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 14, para utilizar num método de tratamento de uma afecção responsiva a capsaicinóide num indivíduo.
22. Óleo de capsaicinóide da Reivindicação 21, que é administrado por aplicação tópica na pele ou numa membrana mucosa do indivíduo. ΕΡ 1 865 941/ΡΤ 4/4
23. Óleo de capsaicinóide da Reivindicação 22, que é aplicado durante: a) pelo menos 10 minutos; b) pelo menos 30 minutos; ou c) pelo menos uma hora.
24. Óleo de capsaicinóide das Reivindicações 22 ou 23, em que o método compreende ainda remover o óleo de capsaicinóide com um gel de limpeza.
25. Método para evitar que um organismo contamine uma substância ou se fixe a uma superfície, que compreende tratar a substância com, ou aplicar na superfície o óleo de capsaicinóide de qualquer uma das Reivindicações de 1 a 14.
26. Método da Reivindicação 25, em que a substância é um produto agrícola ou comercial.
27. Método das Reivindicações 25 ou 26, em que: a) o organismo é um organismo marinho e a superfície é um cais, doca ou casco de barco. b) o organismo é um roedor e a substância é a alimentação de aves de capoeira; ou c) o organismo é um insecto e a substância é uma planta, fruta ou produto hortícola. Lisboa, 2010-12-30