PL237703B1 - 6-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu - Google Patents
6-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu Download PDFInfo
- Publication number
- PL237703B1 PL237703B1 PL426974A PL42697418A PL237703B1 PL 237703 B1 PL237703 B1 PL 237703B1 PL 426974 A PL426974 A PL 426974A PL 42697418 A PL42697418 A PL 42697418A PL 237703 B1 PL237703 B1 PL 237703B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- methoxy
- flavone
- methylglucopyranosyl
- hours
- formula
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- XZQLSABETMKIGG-UHFFFAOYSA-N 6-Methoxyflavone Chemical compound C=1C(=O)C2=CC(OC)=CC=C2OC=1C1=CC=CC=C1 XZQLSABETMKIGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims abstract description 6
- 241000188153 Isaria fumosorosea Species 0.000 claims abstract description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 2
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 8
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 8
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N chrysin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 RTIXKCRFFJGDFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 3
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 3
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- -1 methoxy flavonoid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- ZXJJBDHPUHUUHD-UHFFFAOYSA-N 4',5,7-Trimethoxyflavone Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(OC)C=C(OC)C=C2O1 ZXJJBDHPUHUUHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNDCRMJDZLFEG-UHFFFAOYSA-N 7-Methoxyflavone Chemical compound C=1C(OC)=CC=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 QKNDCRMJDZLFEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MQGPSCMMNJKMHQ-UHFFFAOYSA-N 7-hydroxyflavone Chemical compound C=1C(O)=CC=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 MQGPSCMMNJKMHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- KZNIFHPLKGYRTM-UHFFFAOYSA-N apigenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 KZNIFHPLKGYRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- JRFZSUMZAUHNSL-UHFFFAOYSA-N chrysin 5,7-dimethyl ether Chemical compound C=1C(OC)=CC(OC)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=CC=C1 JRFZSUMZAUHNSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229930182486 flavonoid glycoside Natural products 0.000 description 2
- 150000007955 flavonoid glycosides Chemical class 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 2
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAFBOKYTDSDNHV-UHFFFAOYSA-N (2S)-(-)-5,7-dimethoxyflavanone Natural products O1C2=CC(OC)=CC(OC)=C2C(=O)CC1C1=CC=CC=C1 IAFBOKYTDSDNHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MLYYOHQNXPDGGV-UHFFFAOYSA-N 3,5-dimethoxy-2-phenylchromen-4-one Chemical class COC=1C(=O)C=2C(OC)=CC=CC=2OC=1C1=CC=CC=C1 MLYYOHQNXPDGGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NYCXYKOXLNBYID-UHFFFAOYSA-N 5,7-Dihydroxychromone Natural products O1C=CC(=O)C=2C1=CC(O)=CC=2O NYCXYKOXLNBYID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- XADJWCRESPGUTB-UHFFFAOYSA-N apigenin Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=CC(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 XADJWCRESPGUTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008714 apigenin Nutrition 0.000 description 1
- 229940117893 apigenin Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002113 chemopreventative effect Effects 0.000 description 1
- 235000015838 chrysin Nutrition 0.000 description 1
- 229940043370 chrysin Drugs 0.000 description 1
- CXQWRCVTCMQVQX-UHFFFAOYSA-N cis-dihydroquercetin Natural products O1C2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1 CXQWRCVTCMQVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000052637 human pathogen Species 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000025563 intercellular transport Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000647 material safety data sheet Toxicity 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 1
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/26—Acyclic or carbocyclic radicals, substituted by hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia jest 6-metoksy-3'-O-ß-D-(4"-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3'-O-ß-D-(4"-O-metyloglukopiranozylo)-flawonu o wzorze 2. Powyższy sposób polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCH J2. Po upływie co najmniej 72 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 6-metoksyflawon o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu co najmniej 96 godzin. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest 6-metoksy-3’-O-^-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-^-D-(4”-O -metyloglukopiranozylo)-flawonu o wzorze 2, przedstawionym na rysunku.
Związek ten może znaleźć zastosowanie jako antyoksydant w przemyśle spożywczym oraz jako składnik środków farmaceutycznych i kosmetycznych, a także dodatek do pasz.
Źródła literaturowe podają, że metoksylowe pochodne flawonoidowe mają zdolność do łatwego penetrowania do wnętrza komórek, co jest cechą bardzo pożądaną przy tworzeniu nowych środków leczniczych. Po przeniesieniu linii komórkowych płuc do medium, w którym znajdowały się dimetoksyflawony, już po pięciu minutach komórki zakumulowały 30-50 razy więcej badanych związków, niż znajdowało się w otaczającym je buforze. Badania dowodzą, że związki te łatwo penetrują również komórki serca, płuc, piersi czy mózgu.
Międzykomórkowy transport 5,7-dimetoksyflawonu był około 10-krotnie wyższy niż chryzyny (5,7-dihydroksyflawonu). Może być to wynikiem faktu, że metoksylowe pochodne flawonoidów nie są tak szybko metabolizowane, jak ich hydroksylowe odpowiedniki. Dzięki temu ich biodostępność w podaniu doustnym przewyższa biodostępność hydroksylowych pochodnych flawonoidów.
4’,5,7-trimetoksyflawon około ośmiokrotnie skuteczniej hamował namnażanie komórek płaskonabłonkowego nowotworu jamy ustnej niż jego hydroksypochodna - apigenina (4’,5,7-trihydroksyflawon). W przypadku linii komórkowych nowotworu piersi MCF-7 7-metoksyflawon działał silniej przeciwnowotworowo, niż 7-hydroksyflawon (Walle, T. Methoxyfated flavones, a superior cancer chemopreventive flavonoid subclass?. Semin. Cancer Biol. 2007, 17, 354-362).
Uważa się, że glikozydy flawonoidowe przed absorpcją w układzie pokarmowym muszą zostać poddane hydrolizie przez mikroflorę jelitową do odpowiednich aglikonów. Dowiedziono jednak, że częściowa absorpcja połączeń cukrowych flawonoidów również jest możliwa.
Cząsteczka glukozy przyłączona w pozycji 3 kwercetyny (3,3’,4’,5,7-pentahydroksyflawon) zwiększała absorpcję tego związku w jelicie cienkim do 52%, w porównaniu z 24% absorpcją aglikonu kwercetyny i 17% rutynozydu kwercetyny (Heim, K. E.; Tagliaferro, A. R.; Bobilya, D. J. Flavonoid antioxidants: Chemistry, metabolism and structure-activity relationships. J. Nutr. Biochem. 2002, 13, 572-584, Hollman, P. C.; Bijsman, M. N.; van Gameren, Y.; Cnossen, E. P.; de Vries, J. H.; Katan, M. B. The sugar moiety is a major determinant of the absorption of dietary flavonoid glycosides in man. Free Radic. Res. 1999, 31, 569-573).
Flawonoidy w roślinach występują wyłącznie w połączeniu z jednostkami cukrowymi. Glikozylacja skutkuje wzrostem rozpuszczalności cząsteczki flawonoidu w wodzie i wzrostem jego stabilności. Dzięki temu zwiększa się przyswajalność przyjmowanych z pokarmem związków flawonoidowych (J. Xiao, T.S. Muzashvili, M.l. Georgiev, Biotechnology Advances, 2014, 32, 1145-1156, Plaza, M.; Pozzo, T; Liu, J.; Gulshan Ara, K. Z.; Turner, C.; Nordberg Karlsson, E. Substituent effects on in vitro antioxidizing properties, stability, and solubility in flavonoids. J. Agric. Food Chem. 2014, 62, 3321-3333).
W dostępnej literaturze brak jest informacji na temat otrzymywania 6-metoksy-3’-O-p-D-(4-O-metyloglukopiranozylo)-flawonu na drodze syntezy chemicznej i biotransformacji.
W ostatnich latach, w leczeniu i prewencji chorób coraz większe znaczenie zyskują związki pochodzenia naturalnego i ich odpowiedniki uzyskane na drodze biotransformacji. Dlatego istotne jest poszukiwanie nowych sposobów wytwarzania związków aktywnych biologicznie, które mogą być wykorzystane w przemyśle farmaceutycznym, ale też kosmetycznym i spożywczym.
Istotą wynalazku jest 6-metoksy-3’-O-p-D-(4- O -metyloglukopiranozylo)-flawon.
Istota sposobu polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCH J2. Po upływie co najmniej 72 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 6-metoksyflawon, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu co najmniej 96 godzin. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym, niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie. 6-Metoksy-3’-O-^-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawon znajduje się we frakcji o najniższej polarności.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,1 mg : 1 mL.
Korzystnie także jest, gdy proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
Dodatkowo, korzystnie jest, gdy transformację prowadzi się przez 312 godzin.
PL 237 703 Β1
Korzystnie również jest, gdy oczyszczanie prowadzi się wykorzystując cienkowarstwową chromatografię preparatywną w układzie eluującym chloroform : metanol 9:1.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Isaria fumosorosea KCH J2, następuje hydroksylacja i przyłączenie 4-metoksy-/?-D-glukozy przy C-3’. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (octan etylu).
Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 8-metoksy-3’-O-/?-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)flawonu w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu wykorzystując mikroorganizm niebędący patogenem ludzkim.
Wykorzystanie biotransformacji, zamiast syntezy chemicznej, umożliwia, w sposób przyjazny dla środowiska, uzyskanie związków o wyższej biodostępności i aktywności biologicznej, niż użyte substraty (E. Kostrzewa-Susłow, J. Dmochowska-Gładysz, J. Oszmiański, Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2007, 49 (1-4), 113-117, W. A. Loughlin, Bioresource Technology, 2000, 74, 49-62).
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
Przykład. Do kolby Erlenmajera o pojemności 2000 cm3, w której znajduje się 500 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 10 g aminobaku i 30 g glukozy, wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCH J2 ujawniony w zgłoszeniu patentowym o numerze P.416996. Po 96 godzinach jego wzrostu dodaje się 50 mg 6-metoksyflawonu o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 tetrahydrofuranu. Transformację prowadzi się w 25 stopniach Celsjusza przy ciągłym wstrząsaniu przez 13 dni. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny chloroformu i metanolu w stosunku 9:1. Produkt znajduje się we frakcji o najniższej polarności.
Na tej drodze otrzymuje się 2,3 mg 6-metoksy-3’-O-/?-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawonu (wydajność 2,6%). Stopień konwersji substratu według HPLC >99%.
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi.
Opis sygnałów pochodzących z widma 1H NMR (600 MHz, Aceton-de)
| Sygnały pochodzące od szkieletu flawonoidowego | Sygnały pochodzące od jednostki cukrowej | ||||
| δ [ppm] | J[Hz] | H | δ [ppm] | J[Hz] | H |
| 5,57 (dd) | J= 12,7, 3,0 | H-2 | 4,93 (d) | >7,8 | 1C |
| 3,12 (dd) | >16,8, 12,7 | H-3A | 3,49 (m) | 2C | |
| 2,87 (m) | H-3e | 3,67 (dt) | >9,0, 3,7 | 3C | |
| 7,49 (t) | >3,1 | H-5 | 3,27 (t) | >9,3 | 4C |
| 7,37 (dd) | Λβ=9,0 4.5=3,1 | H-7 | 3,49 (m) | 5C | |
| 7.07 (m) | H-8 | 3,87 (m) 3,76 (m) | 6C | ||
| 7,07 (m) | H-2’ | 3,60 (s) | 4C-OCH3 | ||
| 6.89 (ddd) | 2,3. 0,8 | H-4' | |||
| 7.29 (t) | >7,9 | H-5’ | |||
| 7,07 (m) | >7,6 | H-6’ | |||
| 8,54 (s) | -OH |
PL 237 703 B1
Claims (6)
1. 6-Metoksy-3’-O-^-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawon o wzorze 2.
2. Sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-^-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawonu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCH J2, następnie po upływie co najmniej 72 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 6-metoksyflawon o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 96 godzin, po czym produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie, przy czym 6-metoksy-3’-O-^-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawon o wzorze 2 znajduje się we frakcji o najniższej polarności.
3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,1 mg : 1 mL.
4. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
5. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 312 godzin.
6. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że oczyszczanie prowadzi się wykorzystując cienkowarstwową chromatografię preparatywną w układzie eluującym chloroform : metanol 9:1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL426974A PL237703B1 (pl) | 2018-09-10 | 2018-09-10 | 6-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL426974A PL237703B1 (pl) | 2018-09-10 | 2018-09-10 | 6-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL426974A1 PL426974A1 (pl) | 2020-03-23 |
| PL237703B1 true PL237703B1 (pl) | 2021-05-17 |
Family
ID=69845705
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL426974A PL237703B1 (pl) | 2018-09-10 | 2018-09-10 | 6-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL237703B1 (pl) |
-
2018
- 2018-09-10 PL PL426974A patent/PL237703B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL426974A1 (pl) | 2020-03-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL246768B1 (pl) | Sposób wytwarzania 2’-hydroksy-2-metylo-3’-O-β-D-(4’’-Ometyloglukopiranozylo)- dihydrochalkonu | |
| PL246773B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3-hydroksy-2-metylo-2’-O-β-D-(4’’-Ometyloglukopiranozylo)- dihydrochalkonu | |
| PL246775B1 (pl) | Sposób wytwarzania 2’,4-dihydroksy-2-metylo-3’-O-β-D-(4’’- O-metyloglukopiranozylo)-dihydrochalkonu | |
| PL238971B1 (pl) | 6-Chloro-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-chloro-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu | |
| PL237703B1 (pl) | 6-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu | |
| PL237705B1 (pl) | 3’-Hydroksy-6-metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawon i sposób wytwarzania 3’-hydroksy-6-metoksy- 4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawonu | |
| PL237706B1 (pl) | 3’-Hydroksy-6-metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanon i sposób wytwarzania 3’-hydroksy-6- metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanonu | |
| PL238968B1 (pl) | 2’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawan-4-ol i sposób wytwarzania 2’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawan-4-olu | |
| PL238785B1 (pl) | Sposób wytwarzania 4’-hydroksy-6-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL237701B1 (pl) | 2’-Metoksy-5’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanon i sposób wytwarzania 2’-metoksy-5’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL238969B1 (pl) | 3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawan-4-ol i sposób wytwarzania 3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawan-4-olu | |
| PL237704B1 (pl) | 6-Metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu | |
| PL237707B1 (pl) | 6-Metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanon i sposób wytwarzania 6-metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL235025B1 (pl) | 4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-3-metoksyflawon i sposób wytwarzania 4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-3- metoksyflawonu | |
| PL234610B1 (pl) | Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4"-metoksyglukopiranozyloflawanonu | |
| PL244217B1 (pl) | 7-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon oraz sposób wytwarzania 7-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu | |
| PL244218B1 (pl) | 7-Metoksy-8-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 7-metoksy-8-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu | |
| PL244216B1 (pl) | Sposób wytwarzania 7-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu | |
| PL237702B1 (pl) | 3’-Hydroksy-6-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanon i sposób wytwarzania 3’-hydroksy-6-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL237324B1 (pl) | 5-hydroksy-4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 5-hydroksy-4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu | |
| PL241533B1 (pl) | 2-Fenylo-6-metylo-4-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- chroman i sposób wytwarzania 2-fenylo-6-metylo-4-O-β-D-(4’’-Ometyloglukopiranozylo)- chromanu | |
| PL238534B1 (pl) | Sposób wytwarzania 4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL244214B1 (pl) | 7-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawanon i sposób wytwarzania 7-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL238533B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3’,4’-dihydroksy-6-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu | |
| PL237327B1 (pl) | 3’-hydroksy-4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 3’-hydroksy-4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu |