PL201922B1 - Sposób wytwarzania 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu - Google Patents

Abstract

Sposób wytwarzania 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu, o wzorze 2, na drodze transformacji mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się androst-4-en-3,17-dion, o wzorze 1, znamienny tym, że hydroksylację substratu prowadzi się za pomocą systemu enzymatycznego szczepu grzyba z gatunku Chaetomium sp. 1.

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.

Związek ten może znaleźć zastosowanie w terapii hormonalnej lub posłużyć jako substrat do dalszej syntezy związków o wysokiej aktywności biologicznej.

Znany jest proces przekształcania androst-4-en-3,17-dion do 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu, na drodze mikrobiologicznej za pomocą kultur szczepów, np. Curvularia lunata, Acremonium strictum, Mucor piriformis (S.B. Mahato, S. Garai; Steroids, 1997, vol. 62, ss. 332-345).

Wynalazek dotyczy sposobu wytwarzania 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu na drodze mikrobiologicznej.

Istota wynalazku polega na tym, że hydroksylację substratu, którym jest androst-4-en-3,17-dion, o wzorze 1, do 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu, o wzorze 2, prowadzi się przy pomocy kultury szczepu grzyba z gatunku Chaetomium sp. 1.

Korzystne jest, gdy proces hydroksylacji substratu prowadzi się wodną kulturą mikroorganizmu, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 288 - 308 K.

W wyniku postępowania, zgodnie z wynalazkiem, na skutek działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach grzyba strzępkowego Chaetomium sp. 1, następuje regioselektywna hydroksylacja substratu w pozycji 14α. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję chloroformem.

Będący przedmiotem wynalazku 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu może znaleźć zastosowanie np. jako substrat w syntezie 6e,14a-dihydroksyandrost-4-en-3,17-dionu, który posiada aktywność androgenną i może być stosowany jako inhibitor rozwoju nowotworów piersi (S. Hu, G. Genain, R. Azerad; Steroids., 1995, vol. 60).

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymywanie 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu, jako głównego produktu reakcji, z 78% wydajnością, w temperaturze pokojowej i pH bliskim obojętnemu.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d. Do kolby Erlenmajera o pojemności 250 cm³, w której znajduje się 100 cm³ sterylnej pożywki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku, wprowadza się szczep Chaetomium sp. 1. Po trzech dniach jego wzrostu dodaje się 100 mg androst-4-en-3,17-dionu wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm³ acetonu.

Transformację prowadzi się w temperaturze pokojowej, przy ciągłym wstrząsaniu przez 48 godzin.

Następnie uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 142 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, jako eluentu używa się mieszaniny heksanu-acetonu w stosunku 2:1.

Na tej drodze otrzymuje się 78,0 mg 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu (wydajność 78%).

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (CDCl3) δ (ppm); 1,04 (s, 18-CH3); 1,21 (s, 19-CH3); 5,73 (s, 4-H).

Claims (3)

1. Zastrzeżenia patentowe

   1. Sposób wytwarzania 14a-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu, o wzorze 2, na drodze transformacji mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się androst-4-en-3,17-dion, o wzorze 1, znamienny tym, że hydroksylację substratu prowadzi się za pomocą systemu enzymatycznego szczepu grzyba z gatunku Chaetomium sp. 1.
2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces regioselektywnej hydroksylacji substratu prowadzi się wodną kulturą szczepu przy ciągłym mieszaniu.
3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces hydroksylacji substratu prowadzi się w temperaturze 288 - 308 K.