PL178844B1 - Biodegradable implants/dressings made of collagen foam suitably for use particularly on internal focuses of infections by pathogenic microorganisms and method of obtaininf them - Google Patents
Biodegradable implants/dressings made of collagen foam suitably for use particularly on internal focuses of infections by pathogenic microorganisms and method of obtaininf themInfo
- Publication number
- PL178844B1 PL178844B1 PL95307820A PL30782095A PL178844B1 PL 178844 B1 PL178844 B1 PL 178844B1 PL 95307820 A PL95307820 A PL 95307820A PL 30782095 A PL30782095 A PL 30782095A PL 178844 B1 PL178844 B1 PL 178844B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- antibiotic
- sponge
- biodegradable implants
- collagen
- collagen sponge
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
1. Biodeneadowalne onplantk/opgtn.mkio gąbko kojagenoweó iautybioo/ku, stosowanz zwfeecza na wewnętrzne ogniska zakażeń drobnoustrojami patogennymi, znamienne tym, że zawierają gąbkę kolagenową o grubości do 20 mm i porach do 0,4 mm oraz wodną zawiesinę antybiotyku polipeptydowegOt chinolinowogo albo totracykiinowego zamkniętego w liposomach w ilości do 6 mg antybiotyku na 1 cm2 gąbki. 7. Biodogradowdlne implanty/opatrunki z gąbki kolagenowej i antybiotyku, stosowane zwłaszcza na wewnętrzne ogniska zakażeń drobnoustrojami patogennymi, znamienne tym, że złożone są z co najmniej dwu sprasowanych warstw gąbki kolagenowej o grubości do 20 mm i porach do 0,4 mm, pomiędzy warstwami gąbki zdwdrtdjost warstwa o grubości do 1,5 mm kremu ploliposomowogo zawierającego antybiotyk polipoptydowe, chinolinowy albo totlacyalmowy trwały w środowiskuwodnymw ilości do 6 mg antybiotykuna 1 cm? gąbki. 9. Sposób otrzymywania niodogradowdlnych implantów/opatrunków, stosowanych zwłaszcza na wewnętlzns ogniska zakażeń drobnoustrojami patogennymi, z gąbki kolagenowej i antybiotyku, znamienny tym, że gąbkę kolagenową o grubości od 3 do 10 mm i porach do 0,4 mm pokrywa się cienkąwarstwą o grubości do 1,5 mm kremu proliposomowego zawierającego antybiotyk polipoptydowe, chinolinowe albo tetracyklinowy trwały w środowisku wodnym w ilości co najwyżej 6 mg antybiotyku na 1 cm2 gąbki, po czym pokrywa się drugąwarstwągąbki, ewentualnie nakłada następnie warstwy kremu z antybiotykiem przykrywając każdorazowo warstwą gąbki, całość sprasow^je się przez okres 4 do 24 godzin w temperaturze 0 - 30°C.1. Biodenadeable onplantk / opgtn.mkio kojagen sponge iautybioo / ku, used for internal foci of infections with pathogenic microorganisms, characterized in that they contain a collagen sponge o up to 20 mm thick and pores up to 0.4 mm and an aqueous suspension of a polypeptide quinoline antibiotic or liposome encapsulated totracycin in an amount of up to 6 mg of antibiotic per cm2 of sponge. 7. Biodegradable implants / dressings made of collagen sponge and antibiotic, especially used for internal foci of infections with pathogenic microorganisms, characterized in that they consist of at least two pressed layers of collagen sponge with a thickness of up to 20 mm and pores up to 0.4 mm, between the sponge layers zdwdrtdjost layer up to 1.5 mm thick ploliposomal cream containing a polypeptide antibiotic, quinoline or totlacyalm in an aqueous environment in an amount up to 6 mg of antibiotic 1 cm? sponges. 9. The method of obtaining nodular implants / dressings, especially used for internal purposes foci of infections with pathogenic microorganisms, from collagen sponge and antibiotic, characterized by that a collagen sponge with a thickness of 3 to 10 mm and pores up to 0.4 mm is covered with a thin layer up to 1.5 mm of proliposome cream containing a polypeptide, quinoline or tetracycline antibiotic stable in an aqueous environment in an amount of no more than 6 mg of antibiotic per 1 cm2 of sponge, after which it is covered the second layer of the sponge, possibly then applying layers of antibiotic cream, covering each time with a sponge layer, the whole is pressed for 4 to 24 hours at 0-30 ° C.
Description
Przedmiotem wynalazku sąbiodegradowalne implanty z gąbki kolagenowej i antybiotyku stosowane zwłaszcza na wewnętrzne ogniska zakażeń drobnoustrojami patogennymi i sposób otrzymywania przedmiotowych implantów/opatrynków. Implanty z gąbki kolagenowej zawierające antybiotyki umożliwiają leczenie zakażeń wewnętrznych np. zakażeń szpiku kostnego. Implanty te charakteryzują się obojętnością chemiczną wykluczającą drażnienie chemiczne tkanek, zwłaszcza tkanek zranionych, jałowością mikrobiologiczną, brakiem immunogenności,The subject of the invention is biodegradable implants made of collagen sponge and an antibiotic used in particular against internal foci of infections with pathogenic microorganisms and the method of obtaining the said implants / dressings. Collagen sponge implants containing antibiotics enable the treatment of internal infections, e.g. bone marrow infections. These implants are characterized by chemical indifference, which excludes chemical irritation of tissues, especially injured tissues, microbiological sterility, lack of immunogenicity,
178 844 działaniem hemostatycznym biodegradacją w odpowiednim czasie, niebolesnością stosowania, odpowiednią trwałością.Hemostatic action timely biodegradation, painless application, adequate durability.
Znane są implanty z gąbki kolagenowej zawierającej gentamycynę wbudowaną w kolagen za pomocą wiązań chemicznych. Otrzymanie chemicznego połączenia kolagenu z antybiotykiem przy zachowaniu odpowiedniej aktywności antybiotyku wymaga żmudnych i długotrwałych operacji chemicznych.Implants made of collagen sponge containing gentamicin incorporated into collagen by means of chemical bonds are known. Obtaining a chemical combination of collagen with an antibiotic while maintaining the appropriate activity of the antibiotic requires tedious and long-lasting chemical operations.
Bardzo pożądaną cechą implantu (wszczepu) jest możliwość łatwej zmiany antybiotyku. Gąbka kolagenowa zawierająca wbudowaną gentamycynę nie posiada takiej cechy.A very desirable feature of the implant (graft) is the ability to easily change the antibiotic. The collagen sponge with built-in gentamicin does not have this feature.
Nieoczekiwanie okazało się, żejako implanty lub opatrunki można stosować gąbki kolagenowe nasycone liposomalnąpostacią antybiotyku (antybiotyk zamknięty w liposomie) lub gąbki kolagenowe zawierające wewnątrz warstwę w pełni biodegradowalnego, tak zwanego kremu proliposomowego. Zależnie od potrzeby można otrzymać implanty zawierające różne antybiotyki. Warunkiem koniecznymjaki należy spełnićjest otrzymanie liposomalnych postaci antybiotyków o odpowiednio dużej trwałości i jednocześnie dużej aktywności w stosunku do bakterii zakażających tkanki.Unexpectedly, it turned out that collagen sponges saturated with a liposomal form of an antibiotic (an antibiotic closed in a liposome) or collagen sponges with a layer of fully biodegradable, so-called proliposome cream, can be used as implants or dressings. Depending on the needs, implants containing various antibiotics can be obtained. A necessary condition to be met is to obtain liposomal forms of antibiotics with sufficiently high stability and, at the same time, high activity against bacteria that infect tissues.
Liposomy są kulistymi tworami, złożonymi z fosfolipidów i lipidów, otrzymywanymi w postaci jedno- lub wielobłonowych struktur o różnej wielkości od około 25 nm do 2500 nm. Liposomy otaczają przestrzeń wodną. Do liposomów można wprowadzać leki, przy czym trwałość liposomalnych postaci leków zależy w dużej mierze od natury chemicznej leków, a w szczególności od ich stopnia hydrofobowości. Leki hydrofilowe, jak np. antybiotyki aminoglikozydowe, są zamykane w przestrzeni wodnej wewnątrz liposomów, takie liposomy nie są zbyt trwałe i łatwo tracą lek przez wyciek. Związki hydrofobowe np. amfoterycyna B, lub posiadające regiony hydrofobowe jak np. białka wbudowująsię w błony liposomowe, tworząc trwałe struktury (pod względem możliwości wycieku leku). Substancje o właściwościach pośrednich, jeśli chodzi o stopień hydrofilowości mogą prawdopodobnie ulegać adhezji do błon, co zwiększa trwałość liposomów.Liposomes are spherical structures composed of phospholipids and lipids, obtained in the form of single or multi-membrane structures of various sizes from about 25 nm to 2500 nm. Liposomes surround the water space. Drugs can be incorporated into liposomes, the stability of the liposomal drug forms being largely dependent on the chemical nature of the drugs, and in particular their degree of hydrophobicity. Hydrophilic drugs, such as aminoglycoside antibiotics, are confined in the water space inside the liposomes, such liposomes are not very stable and easily lose the drug through leakage. Hydrophobic compounds, e.g. amphotericin B, or those with hydrophobic regions, such as proteins, are incorporated into liposome membranes, creating stable structures (in terms of the possibility of drug leakage). Substances with intermediate properties, in terms of the degree of hydrophilicity, are likely to adhere to membranes, which increases the stability of the liposomes.
Nieoczekiwanie stwierdzono, że antybiotyki polipeptydowe, chinolonowe i z grupy tetracyklin można zamknąć z dużąwydajnościąw liposomach i następnie wprowadzić do gąbki kolagenowej co gwarantuje wysokie ich stężenie w implantach/opatrunkach kolagenowych.Surprisingly, it was found that polypeptide, quinolone and tetracycline antibiotics can be closed with high efficiency in liposomes and then introduced into the collagen sponge, which guarantees their high concentration in implants / collagen dressings.
Przedmiotem wynalazku sąbiodegradowalne implanty/opatrunki zawierające gąbkę kolagenową o grubości poniżej 20 mm i porach poniżej 0,4 mm oraz zawiesinę wodną antybiotyku polipeptydowego, chinolinowego albo tetracyklinowego zamkniętą w liposomach. Korzystnie antybiotykiem zamkniętym w liposomach jest polimyksyna, kolistyna, cyprofloksacyna, doksycyklina. Wynalazek dotyczy również biodegradowalnych implantów/opatunków złożonych z co najmniej dwu sprasowanych warstw gąbki kolagenowej o grubości poniżej 20 mm i porach poniżej 0,4 mm pomiędzy którymi zawarta jest warstwa kremu proliposomowego o grubości poniżej 1,5 mm zawierającego antybiotyk polipeptydowy, chinolinowy albo tetracyklinowy trwały w środowisku wodnym, w ilości do 6 mg antybiotyku na 1 cm2 gąbki. W przypadku, gdy implanty/opatrunki zawierają sprasowaną, wielowarstwową gąbkę kolagenową, korzystnie gdy pomiędzy warstwami jest krem proliposomowy zawierający antybiotyk.The present invention relates to biodegradable implants / dressings containing a collagen sponge less than 20 mm thick and pores less than 0.4 mm and an aqueous suspension of a polypeptide, quinoline or tetracycline antibiotic encapsulated in liposomes. Preferably the liposome encapsulated antibiotic is polymyxin, colistin, ciprofloxacin, doxycycline. The invention also relates to biodegradable implants / dressings composed of at least two compressed layers of collagen sponge less than 20 mm thick and pores less than 0.4 mm between which there is a layer of proliposome cream less than 1.5 mm thick containing a polypeptide, quinoline or tetracycline permanent antibiotic in an aqueous medium, up to 6 mg of antibiotic per 1 cm 2 of sponge. In case the implants / dressings contain a compressed, multilayer collagen sponge, preferably a proliposome cream containing an antibiotic is between the layers.
Trwałość implantów/opatrunków z gąbek kolagenowych nasyconych liposomalną formą, antybiotyku jest duża, co jest niezmiernie istotne przy ich przechowywaniu.The durability of implants / dressings made of collagen sponges saturated with the liposomal form of an antibiotic is high, which is extremely important for their storage.
Sposobem według wynalazku biodegradowalne implanty/opatrunki otrzymuje się przez wprowadzenie wodnej zawiesiny antybiotyku zamkniętego w liposomach do gąbki kolagenowej o grubości poniżej 20 mm i porach poniżej 0,4 mm. Na 1 cm2 gąbki wprowadza się do 6 mg antybiotyku, po czym implant/opatrunek zamyka się w hermetycznym opakowaniu. Ewentualnie przed zamknięciem implant/opatrunek zawierający liposomy poddaje się liofilizacji. Alternatywnie, krem proliposomowy wprowadza się w cienkiej warstwie (0,5 do 1,0 mm) między dwie gąbki i sprasowuje. Liposomy zawierające antybiotyk lub krem proliposomowy (znany pod nazwą „hydrated gel”) przygotowuje się jedną ze znanych metod (New R.R.C.; Liposomes. A practical approache. Oxford, 1990).According to the method of the invention, biodegradable implants / dressings are obtained by introducing an aqueous suspension of liposome-encapsulated antibiotic into a collagen sponge with a thickness of less than 20 mm and pores less than 0.4 mm. For 1 cm2 of sponges, 6 mg of antibiotic is introduced, and the implant / dressing is then sealed in an airtight package. Optionally, the implant / dressing containing liposomes is lyophilized prior to closure. Alternatively, the proliposome cream is introduced in a thin layer (0.5 to 1.0 mm) between two sponges and pressed. Liposomes containing an antibiotic or a proliposome cream (known as a "hydrated gel") are prepared by one of the known methods (New R.R.C .; Liposomes. A practical approache. Oxford, 1990).
178 844178 844
Sposób otrzymywania implantów/opatrunkowych według wynalazku odnzacza się dużą prostotą i może być stosowany w przemyśle. Możliwe jest sporządzanie przedmiotowych implantów/opatrunków w postaci mikrobiologicznie jałowej, różnymi metodami (patrz niżej), w zależności od wydajności zamykania antybiotyku w liposomach (enkapsulacji) oraz od' pożądanych własności otrzymanych preparatów.The method of producing implants / dressings according to the invention is very simple and can be used in industry. It is possible to prepare the subject implants / dressings in microbiologically sterile form by various methods (see below), depending on the efficiency of encapsulating the antibiotic in the liposomes and on the desired properties of the preparations obtained.
Gąbkę kolagenowąnasyca się zawiesiną antybiotyku zamkniętego w liposomie, następnie po oddzieleniu niezwiązanego leku, poddaje się liofilizacji. Taki preparat można sterylizować radiacyjnie. Zastosowany na ranę uwalnia lek powoli, przy czym szybkość uwalniania zależy od warunków środowiska (wpływ tkanek, obecność bakterii, wysokość ciśnienia osmotycznego itp.).The collagen sponge is saturated with a liposome-encapsulated antibiotic suspension, and then, after separation of the unbound drug, it is lyophilized. Such a preparation can be sterilized by radiation. When applied to a wound, it releases the drug slowly, with the release rate dependent on environmental conditions (tissue influence, presence of bacteria, amount of osmotic pressure, etc.).
Przy wydajności zamykania antybiotyku w liposomach (enkapsulacji) 40 do 60% gąbkę kolagenowąmożna nasycić zawiesinę antybiotyku zamkniętego w liposomach bez konieczności oddzielania niezamkniętego antybiotyku i przechowywać w odpowiednim hermetycznym opakowaniu np. w miseczce z tworzywa zamkniętej przez zgrzanie z aluminiową folią, albo przed zamknięciem poddać liofilizacji. Między liposomami i wolnym antybiotykiem zostaje zachowany stan równowagi. W tym przypadku implant/opatrunek zawiera około 50% antybiotyku w postaci wolnej, który w ranie szybko penetruje do · tkanek, zapewniając początkowe wysokie stężenie leku w miejscu zakażenia, przez krótki okres czasu. Pozostałe 50% antybiotyku uwalniane jest stopniowo z liposomów zapewniając bakte-r-statyczne/bakteriobójcze stężenie leku przez okres kilku dni.With the capacity of encapsulating the antibiotic in liposomes (encapsulation) of 40 to 60%, the collagen sponge can be saturated with the suspension of the antibiotic closed in liposomes without the need to separate the unsealed antibiotic and stored in a suitable airtight container, e.g. in a plastic bowl closed by welding with aluminum foil, or freeze-dried before closing . There is a balance between the liposomes and the free antibiotic. In this case, the implant / dressing contains about 50% of the free form of antibiotic, which penetrates the wound quickly into the tissues, providing an initial high concentration of the drug at the site of infection for a short period of time. The remaining 50% of the antibiotic is released gradually from the liposomes, providing a bacterial static / bactericidal concentration of the drug over a period of several days.
Przy mniejszej wydajności enkapsulacji np. 15 do 20% zawiesinę liposomów należy zagęścić przez wirowanie i po oddzieleniu supematantu użyć liposomalny antybiotyk do nasycenia gąbki kolagenowej. Tak otrzymany implant/opatrunek można przechowywać w stanie wilgotnym lub po liofilizacji.For lower encapsulation efficiency, e.g. 15 to 20%, the liposome suspension should be concentrated by centrifugation and after separating the supernatant, use a liposomal antibiotic to saturate the collagen sponge. The thus obtained implant / dressing can be stored in a moist state or after lyophilization.
Liposomalny antybiotyk można również wbudować w gąbkę kolagenowąw trakcie procesujej wytwarzania, mieszając go z zawiesiaąkolageau przed liofilizację będąc^integralnym etapem technologicznym otrzymywania gąbek. Taki sposób jest korzystny dla procesu liofilizacji mniej stabilnych liposomów ponieważ kolagen chronije przed uszkodzeniem w trakcie suszenia.The liposomal antibiotic can also be incorporated into the collagen sponge during the manufacturing process by mixing it with the collageau slurry prior to lyophilization as an integral technological step in the preparation of the sponges. Such a method is advantageous for the freeze-drying process of less stable liposomes because collagen protects against damage during drying.
W celu otrzymania liposomalnej formy antybiotyku odparowuje się w kolbce chloroformowy roztwór lipidów zawierający lecytynę ewentualnie z dodatkiem do 40% cholesterolu otrzymując film lipidowy. Na ten film lipidowy wlewa się roztwór wodny antybiotyku o stężeniu do 100 mg antybiotyku w 1ml buforu. Następnie obraca się kolbkąna wyparce i spontanicznie powstają liposomy zawierające wbudowane antybiotyki.In order to obtain the liposomal form of the antibiotic, a chloroform lipid solution containing lecithin is evaporated in a flask, optionally with addition of up to 40% cholesterol, to obtain a lipid film. An aqueous solution of the antibiotic with a concentration of up to 100 mg of antibiotic in 1 ml of buffer is poured onto this lipid film. The flask is then rotated on an evaporator and liposomes containing embedded antibiotics are formed spontaneously.
Alternatywnie implant/opatrunek można przygotować jako preparat kilkuwarstwowy. W tym celu gąbkę kolagenowąo grubości od 3 do 10 mm pokrywa się cienką warstwą (od 0,1 do 1,0 mm) kremu proliposomowego zawierającego antybiotyk, przykrywa się drugą gąbką i sprasowuje przez okres 4 do 24 godzin w temperaturze od 0 do 30°C. Można również przygotować implanty o większej liczbie warstw korzystnie pięciowarstwowe wprowadzając w różne warstwy różne antybiotyki. Gąbki stosowane do sporządzania implantów/opatrunków tym sposobem mogą również zawierać już wprowadzony wcześniej liposomalny antybiotyk (taka gąbka z liposomalnym antybiotykiem np. z polimyksyną lub kolistynąmusi być zliofilizowana).Alternatively, the implant / dressing can be prepared as a multi-layer preparation. To this end, a collagen sponge with a thickness of 3 to 10 mm is covered with a thin layer (0.1 to 1.0 mm) of proliposome cream containing an antibiotic, covered with a second sponge and pressed for 4 to 24 hours at a temperature of 0 to 30 ° C. It is also possible to prepare implants with a greater number of layers, preferably five-layer ones, by introducing different antibiotics into different layers. The sponges used to prepare the implants / dressings in this way may also contain a liposomal antibiotic already introduced (such a sponge with a liposomal antibiotic e.g. with polymyxin or colistin must be lyophilized).
W wilgotnym środowisku tkanek rany antybiotyk jest powoli uwalniany z warstwy kremu proliposomowego. Gdy ilość płynu w tkankach rany jest duża z kremu proliposomowego mogą tworzyć się spontanicznie liposomy zawierające antybiotyk. W takim przypadku część antybiotyku pozostaje w postaci wolnej, a część w postaci liposomalnej.In the moist environment of the wound tissues, the antibiotic is slowly released from the proliposome cream layer. When the amount of fluid in the wound tissues is large, the proliposomal cream may spontaneously form liposomes containing the antibiotic. In this case, some of the antibiotic remains free and some remains liposomal.
Stosowanie implantów/opatrunków zawierających krem proliposomuwy jest korzystne w przypadku stosowania antybiotyków, które zamykają się w liposomach z małą wydajnością(np. bacytracyna), lub też tworzą mało trwałe liposomy.The use of implants / dressings containing proliposomal cream is advantageous in the case of using antibiotics that close in liposomes with low efficiency (e.g. bacitracin) or form non-stable liposomes.
Wynalazek został zilustrowany poniższymi przykładamiThe invention is illustrated by the following examples
Przykład IExample I
Rozpuszcza się 100 mg lecytyny z żółtekjaj i 50 mg cholesterolu w 5 ml chloroformu. Roztwór odparowuje się w kolbie okrągłodennej przy 60 obrotach na minutę, w temperaturze 37°CDissolve 100 mg of lecithin from egg yolks and 50 mg of cholesterol in 5 ml of chloroform. The solution was evaporated in a round bottom flask at 60 rpm and 37 ° C
178 844 stosując strumień sterylnego azotu, przefiltrowanego przez filtr teflonowy o porach 0,22 mm, a następnie dosusza się przez 1 godzinę w próżni. Na otrzymany film lipidowy wlewa się 5 ml polimyksyny B o stężeniu 4 mg/ml. Następnie obraca się kolbkę przez 30 minut i pozostawia na dwie godziny w temperaturze 20°C. Otrzymanązawiesinę liposomalnej polimyksyny B po oddzieleniu nie zamkniętego antybiotyku przez wirowanie, nasyca się gąbkę kolagenową o grubości 3 mm i porach 0,04 mm, liposomy wprowadza się w ilości zapewniającej stężenie antybiotyku 0,3 mg/cm2. Następnie otrzymany implant/opatrunek poddaje się procesowi liofilizacji i zamyka w hermetycznym opakowaniu.Using a stream of sterile nitrogen, filtered through a 0.22 mm Teflon filter, then dried for 1 hour in vacuo. 5 ml of polymyxin B at a concentration of 4 mg / ml is poured onto the obtained lipid film. The flask is then rotated for 30 minutes and left for two hours at 20 ° C. The obtained liposomal polymyxin B suspension, after separating the unenclosed antibiotic by centrifugation, is saturated with a collagen sponge with a thickness of 3 mm and pores of 0.04 mm, the liposomes are introduced in an amount ensuring an antibiotic concentration of 0.3 mg / cm 2 . Then the obtained implant / dressing is subjected to the lyophilization process and closed in an airtight package.
Przykład IIExample II
Implant/opatrunek otrzymuje się w sposób opisany w przykładzie I, z tą różnicą, że do enkapsulacji stosuje się polimyksynę w stężeniu 3 mg/ml i z preparatu lipososomalnej polimyksyny nie usuwa się nie zamkniętego w mikrokapsułkach antybiotyku.The implant / dressing was prepared as described in Example 1, with the difference that polymyxin was used for encapsulation at a concentration of 3 mg / ml, and the unencapsulated antibiotic was not removed from the lipososomal polymyxin preparation.
Przykład IIIExample III
Implant/opatrunek otrzymuje się w sposób opisany w przykładzie I, z tą różnicą, że stosuje się 140 mg lecytyny i 10 mg cholesterolu w 5 ml chloroformu oraz roztwór kolistyny (zamiast polimyksyny) o stężeniu 4 mg/ml. Gąbkę kolagenową o grubości 5 mm i porach 0,1 mm nasyca się liposomalną kolistyną w ilości zapewniającej stężenie antybiotyku 2 mg na 1 cm2.The implant / dressing was prepared as described in Example 1, except that 140 mg of lecithin and 10 mg of cholesterol in 5 ml of chloroform and a colistin solution (instead of polymyxin) at a concentration of 4 mg / ml were used. A collagen sponge with a thickness of 5 mm and pores of 0.1 mm is saturated with liposomal colistin in an amount to provide an antibiotic concentration of 2 mg per cm 2.
Przykład IVExample IV
Implant/opatrunek otrzymuje się w sposób opisany w przykładzie I, z tą różnicą, że stosuje się 100 mg lecytyny i 40 mg cholesterolu oraz 10 mg fosfatydyloetanoloaminy w 5 ml chloroformu oraz roztwór cyprofloksacyny (zamiast polimyksyny) o stężeniu 20 mg/ml. Gąbkę kolagenową o grubości 7 mm i porach 0,04 mm nasyca się liposomalną cyprofloksacyną w ilości zapewniającej stężenie antybiotyku 0,5 mg na 1 cm2 gąbki..The implant / dressing was prepared as described in Example 1, with the difference that 100 mg of lecithin and 40 mg of cholesterol and 10 mg of phosphatidylethanolamine in 5 ml of chloroform and a solution of ciprofloxacin (instead of polymyxin) at a concentration of 20 mg / ml were used. A collagen sponge with a thickness of 7 mm and pores of 0.04 mm is saturated with liposomal ciprofloxacin in an amount to provide an antibiotic concentration of 0.5 mg per 1 cm2 of sponge.
Przykład VExample V
Badania aktywności implantów/opatrunków in vitro. Aktywność przeciwbakteryjna in vitro implantów/opatrunków była testowana przy użyciu standardowej metody probówkowej jak przy badaniu wartości MIC (Minamal Inhibitory Concentration). Do badania użyto implantu zawierającego liposomalną polimyksynę B sporządzanego według przykładu I, z tym, że stężenie polimyksyny wynosiło 0,3 mg/cm2. Preparat kontrolny stanowi gąbka kolagenowa o tej samej grubości nasycona wolnąpolimyksynąB o tym samym stężeniu 0,3 mg/cm2 oraz gąbka koloagenowa nasycona płynem fizjologicznym, bez antybiotyku. Test przeprowadzono umieszczając w probówkach zawierających po 20 ml jałowego bulionu po 1,2,4 lub 8 kawałków implantu/opatrunku lub gąbki o powierzchni 1 cm2. Następnie do probówek dodawano inokulum żywych bakterii Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853); wartość MIC polimyksyny dla tego szczepu wynosiła 0,6 pg/ml. Po 24 godzinach inkubacji w 37°C oznaczono w probówkach liczbę żywych komórek bakteryjnych standartową metodą płytkową.In vitro activity studies of implants / dressings. The in vitro antimicrobial activity of the implants / dressings was tested using a standard test tube method as in the Minamal Inhibitory Concentration (MIC) test. For the study, an implant containing liposomal polymyxin B prepared according to Example 1 was used, except that the concentration of polymyxin was 0.3 mg / cm2. The control preparation is a collagen sponge of the same thickness saturated with free polymyxin B at the same concentration 0.3 mg / cm2 and a collagen sponge saturated with physiological fluid, without antibiotic. The test was carried out by placing 1,2,4 or 8 pieces of implant / dressing or sponge with an area of 1 cm2 in 20 ml of sterile broth. The tubes were then inoculated with live Pseudomonas aeruginosa bacteria (ATCC 27853); the polymyxin MIC value for this strain was 0.6 pg / ml. After 24 hours of incubation at 37 ° C, the number of viable bacterial cells in the tubes was determined by a standard plate method.
Tabela 1Table 1
Liczba żywych komórek bakterii Pseudomonas aeruginosa hodowli bulionowej po dodaniu implantów kolagenowych o powierzchni 1 cm 2 zawierających liposomalną polimyksynę B o stężeniu 0,3 mg/cm .The number of viable cells of Pseudomonas aeruginosa bacteria in the broth culture after the addition of collagen implants with an area of 1 cm 2 containing liposomal polymyxin B at a concentration of 0.3 mg / cm.
Wniosek: Implant/opatrunek z gąbki kolagenowej zawierającej liposomalnąpolimyksynę B posiada aktywność bakteriobójczą w hodowli bulionowej.Conclusion: Implant / dressing made of collagen sponge containing liposomal polymyxin B has bactericidal activity in broth culture.
178 844178 844
Przykład VIIExample VII
Badania aktywności in vivo. Tabela 2. Redukcja liczby żywych komórek bakterii Pseudomonas aeruginosa (ATTC 27853) w doświadczalnie zakażonych ranach u myszy. Po wycięciu okienek skórnych u 40 myszy (po 5 myszy w grupie), między mięsie skórny i grzbietowy wstrzykiwano 107 żywych komórek bakteryjnych, po czym rany pokrywano opatrunkiem z gąbki kolagenowej zawierającej liposomalnąpostać polimyksyny B lub opatrunkiem z gąbki kolagenowej zawierającej liposomy „puste”, bez antybiotyku (placebo). Po pierwszym, drugim, trzecim i ósmym dniu zdejmowano opatrunki i pobierano biopsje z tkanek zakażonych, po czym oznaczano w nich liczbę żywych bakterii metodą płytkową. Jak widać z tabeli, w pierwszym i drugim dniu po zakażeniu liczba bakterii w grupie badanej była niższa o jeden rząd wielkości niż w kontroli (liposomy „puste”); w ósmym dniu liczba bakterii w biopsji spod opatrunku „placebo” (w grupie kontrolnej) była wciąż wyższa niż 105na 1 g tkanki, która to wartość jest uważana za graniczną dla zakażenia. W grupie z opatrunkami zawierającymi polimyksynę, liczba bakterii spadła poniżej 104 na gramIn vivo activity studies. Table 2. Reduction in the number of viable Pseudomonas aeruginosa bacteria (ATTC 27853) cells in experimentally infected wounds in mice. After excision of the skin windows in 40 mice (5 mice per group), 10 7 viable bacterial cells were injected between the dermal and dorsal muscles, and the wounds were covered with a collagen sponge dressing containing liposomal polymyxin B or a collagen sponge dressing containing "empty" liposomes without antibiotic (placebo). After the first, second, third and eighth days, the dressings were removed and biopsies were taken from the infected tissues, and the number of viable bacteria was determined by the plate method. As can be seen from the table, on the first and second days after infection, the number of bacteria in the test group was lower by one order of magnitude than in the control ("empty"liposomes); on the eighth day the number of bacteria in the biopsy from the placebo dressing (in the control group) was still higher than 10 5 per 1 g of tissue, which value is considered borderline for infection. In the group with polymyxin-containing dressings, bacterial counts dropped below 10 4 per gram
Tabela 2Table 2
Liczba bakterii w zakażonej ranie, leczonej implantem/opatrunkiem z polimyksynąB.Bacterial count in infected wound treated with polymyxin implant / dressing B.
Wniosek: Implant/opatrunek kolagenowy z liposomalną formą polimyksyny B posiada aktywność bakteriobójczą in vivo o przedłużonym działaniu.Conclusion: Implant / collagen dressing with liposomal form of polymyxin B has in vivo bactericidal activity with prolonged action.
Przykład VIIIExample VIII
Krem proliposomowy sporządza się jak standardowe kremy, np. ucierając w moździerzu 4 g lecytyny z żółtekjaj i od 0,5 do 3 g cholesterolu z 4 do 8 ml roztworu (lub zawiesiny) antybiotyku o stężeniu do 250 mg/ml, zawierającym 0,1 do 5% aminokwasu - kwasu glutaminowego, argininy lub lizyny. Bardziej szczegółowo krem proliposomowy sporządza się z: 4 g lecytyny z żółtekj aj, 2 g cholesterolu i 6 ml roztworu doksycykliny zawierającej 1 %o kwasu glutaminowego. Na gąbkę kolagenowąo grubości 4 mm i porach 0,1 mm nanosi się warstwę kremu o grubości 0,4 mm i przykrywa drugątakąsamągąbkąi sprasowuje przez okres 17 godzin w temperaturze 20°C. Implant zamyka się w hermetycznym opakowaniu.A proliposome cream is prepared as standard creams, e.g. by grinding 4 g of lecithin with yolks in a mortar and 0.5 to 3 g of cholesterol with 4 to 8 ml of an antibiotic solution (or suspension) up to 250 mg / ml containing 0.1 up to 5% of the amino acid - glutamic acid, arginine or lysine. More specifically, a proliposome cream is made up of: 4 g of yolk lecithin, 2 g of cholesterol and 6 ml of a doxycycline solution containing 1% glutamic acid. A layer of cream with a thickness of 0.4 mm is applied to a collagen sponge with a thickness of 4 mm and pores of 0.1 mm and covered with the second sponge and pressed for 17 hours at a temperature of 20 ° C. The implant is closed in an airtight package.
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz.Publishing Department of the UP RP. Circulation of 60 copies
Cena 2,00 zł.Price PLN 2.00.
Claims (10)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL95307820A PL178844B1 (en) | 1995-03-23 | 1995-03-23 | Biodegradable implants/dressings made of collagen foam suitably for use particularly on internal focuses of infections by pathogenic microorganisms and method of obtaininf them |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL95307820A PL178844B1 (en) | 1995-03-23 | 1995-03-23 | Biodegradable implants/dressings made of collagen foam suitably for use particularly on internal focuses of infections by pathogenic microorganisms and method of obtaininf them |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL307820A1 PL307820A1 (en) | 1996-09-30 |
| PL178844B1 true PL178844B1 (en) | 2000-06-30 |
Family
ID=20064678
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL95307820A PL178844B1 (en) | 1995-03-23 | 1995-03-23 | Biodegradable implants/dressings made of collagen foam suitably for use particularly on internal focuses of infections by pathogenic microorganisms and method of obtaininf them |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL178844B1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003047643A1 (en) * | 2001-12-06 | 2003-06-12 | Johnson & Johnson Medical Limited | Controlled release therapeutic wound dressings |
-
1995
- 1995-03-23 PL PL95307820A patent/PL178844B1/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003047643A1 (en) * | 2001-12-06 | 2003-06-12 | Johnson & Johnson Medical Limited | Controlled release therapeutic wound dressings |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL307820A1 (en) | 1996-09-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6703040B2 (en) | Polymer blends as biodegradable matrices for preparing biocomposites | |
| CA2396344C (en) | Polymer blends as biodegradable matrices for preparing biocomposites | |
| US8128708B2 (en) | Multi-formed collagenous biomaterial medical device for use in wound care | |
| US9138444B2 (en) | Dried collagenous biomaterial medical device | |
| US8741352B2 (en) | Graft materials containing ECM components, and methods for their manufacture | |
| US5139527A (en) | Biologic absorbable implant material for filling and closing soft tissue cavities and method of its preparation | |
| ES2213961T3 (en) | FLEXIBLE TANK FOR FIBRINE BASED WOUNDS AND PROCEDURE FOR PREPARATION. | |
| EP1985320A1 (en) | A multi-formed collagenous biomaterial medical device | |
| JPS60122568A (en) | Hydrophilic biopolymer copolyelectrolyte | |
| US8882850B2 (en) | Multi-formed collagenous biomaterial medical device | |
| CA2223889A1 (en) | Supplemented and unsupplemented tissue sealants, methods of their production and use | |
| Sanderson et al. | Encapsulation of vancomycin and gentamicin within cationic liposomes for inhibition of growth of Staphylococcus epidermidis | |
| JP2009515569A (en) | Antibacterial collagen construct | |
| JPH07501470A (en) | Antibacterial coated medical implants | |
| WO2009153140A2 (en) | Antibiotic dressing for the treatment of infected wounds | |
| CA1333050C (en) | Biologic absorbable implant material for filling and closing soft-tissue cavities and method of its preparation | |
| MXPA01012170A (en) | Preparations for the application of anti-inflammatory agents. | |
| JPH0347867B2 (en) | ||
| CA2396146C (en) | Process for antibiotic coating of elements with interconnecting microcavities, elements thus coated as well as their usage | |
| JPS5888316A (en) | Wound treating composition, manufacture and use | |
| BG65793B1 (en) | METHOD FOR OBTAINING ANTIBIOTIC COVERAGE OF BACKGROUND MICROSCUES, COVERED MATTERS AND THEIR USE | |
| PL178844B1 (en) | Biodegradable implants/dressings made of collagen foam suitably for use particularly on internal focuses of infections by pathogenic microorganisms and method of obtaininf them | |
| CN214158117U (en) | Medical polyurethane foam dressing with antibacterial property | |
| Woolverton et al. | Subverting bacterial resistance using high dose, low solubility antibiotics in fibrin | |
| RU2703284C1 (en) | Bactericidal anti-burn biodegradable agent based on a collagen pharmaceutical composition with lactoferrin, methods of producing (versions) and properties |