Przedmiotem wynalazku jest sposób mikrobio¬ logicznego otrzymywania bialka, w szczególnosci sposób oddzielania metoda ciagla bialka z mie¬ szaniny reakcyjnej przez cidiwiiroiwainiie albo sepa¬ racje z wykorzystaniem wlasciwosci powienzichnio- woczymnych srodka ulepszajacego seperacje.Znane sa sposoby, wedlug których mikrobiolo¬ giczne otrzymywanie bialka przeprowadza sie w odpowiednich aparaturach fermentacyjnych w obecnosci fazy wodnej, fazy olejowej i fazy gazo¬ wej. Faza wodna zawiera w tych sposobach z (re¬ guly wszystkie potrzebne do zycia dla mikroorga¬ nizmów nieorganiiiczine skladniki substancji odzyw¬ czych i rozupszcizailne w woldzie produkty prze¬ miany materii.W fazie olejowej zawarte jest zródlo wegla, przewaznie w postaci proistolancuchowycih parafin o dlugosci lancucha Cio—C22. Przez faze gazowa doprowadzony jesit potrzebny tlen. Miedzy tymi fazami dla wystaircizajajceg-o zaopatrzenia w sposób ciagly mikroorganizmów we wszystkie skladniki substancji odzywczej potrzebna jest intesywna wymiana materii Wysokie stopnie wymiany materii osiaga sie w tych sposobach z reguly za pomoca mechanicz¬ nych urzadzen homogenizujacych, dodatkowo z jednoczesnyni wytprowaidzeniem wybranych sub¬ stancji powierizchniowoczynnylch, tak zwanych po¬ mocniczych srodków fermentacyjnych. Otrzymany w tylch sposobach produkt reakcji, zwany dalej ,,produktem fermentacji", sklada sie na ogól ze stabiilinej emulsji olejiu-((miitoroorganiiizmów)-wiody- -pecherzyków gazu i miusi zostac w przypadjku otrzymywania bialka po uprizedniim maksymalnym wolnym odgazowaniu rozlozony za pomoca odpo¬ wiednich procesów rozdzielania.Odpowiednie procesy rozdzielania polegaja na ciaglym odwirowaniu albo seperaoji i w celu po¬ lepszenia 'rozdzielania faz sa zaopatrzone w wyb¬ rane substancje pc^erzchniowoczynne, zwane da¬ lej ,^pomocniczymi srodkami oddzielajacymii", ja¬ ko dodatki. Dodatkowo przeprowadza sie oddzie¬ lanie, ewentualnie w podwyzszonej temperaturze.Znany jest tutaj szereg sposobów, w których do produktu fermentacji dodaje sie niejonotwórcze albo jonotwórcze, z tych ostatnich zarówno anio- noaiktyiwne jak równiez kationoaiktywne oraz za¬ leznie od problemu rozdzielania optymalne kom¬ binacje niejonotwórczych i jonotwórczych substan¬ cji poiwierzchniowoczynnych jako pomocniczy sro¬ dek oddzielajacy i poddaje dokladnemu wymiesza¬ niu z produktem fermentacji. Przygotowana w ten sposób emulsje rozklada sie nastepnie przez jed¬ no- albo wielostopniowa ciagla seperacje calko¬ wicie na zadane faizy,, mp. na faze wodna, olejowa i wodna faze mikroorganizmów.Znane sa równiez przypadki stosowainia, w któ¬ rych oddzielona emulsje przed albo po dodaniu pomocniczych srodków oddzielajacych ogrzewa sie i przeprowadza w podwyzszonej temperaturze. 1002443 100244 4 We wszystkich przypadkach ogólna ilosc doda¬ nych pomocniczych srodków oddzielajacych wyno¬ si nie wiecej niz 0,25% wagowych, w odniesieniu do oddzielanej emulsji. W wiekszosci przypadków stosuje sie temperature nie przekraczajaca 90°C.W niektórych sposobach mozna juz przez de- kantowanie oddzielic czesc wodnej fazy srodowis- ska substancji odzywczej z produktu fermentacji . i ewentualnie zwrócic do procesu fermentacji. Ten proces dekantacji stanowi jednakze tylko czescio¬ we odwodnienie, przy czym faza zawierajaca mi¬ kroorganizmy równiez po procesie dekantacji ma wyteY podane wlaScIwosci stabilnej emulsji oleju mikroorganizmów/wody) pecherzyków gazu. Dalsza obróbke tej emulsji trzeba przeprowadzic analo¬ gicznie?: jak w opisanych procesach seperacji. ¦i Procesy hodowania i rozdzielania w celu uzy¬ skania bialka mikrobiologicznego maja ogólem na¬ stepujace wady: - W przypadku zastosowania pomocniczych srod¬ ków fermentacyjnych i oddzielajacych dla calego procesu potrzebne sa co najmniej dwie substancje powierzchniowpczynne.Pomocnicze srodki fermentacyjne i oddzielajace opuszczaja proces z poszczgólnymi oddzielonymi fazami i musza byc dodawane * na biezaco. Czes¬ ciowe odzyskanie pomocniczego srodka fermenta¬ cyjnego mozliwe jest tylko w przypadkach uprzed¬ niej dekantacji i zwrócenia wodnego srodowiska substancji odzywczej do fermentacji bez dodatko¬ wego nakladu. Odzyskiwanie srodków pomocni¬ czych z poszczególnych faz po separacji jesit zwia¬ zane ze znacznym nakladem techniezno-technolo- r gicznyni jak równiez energetycznym i jest w wiek¬ szosci przepadków nieoplacalne. tDte Oplitóaliioscr calego procesu korzystne jest, aby równiez oddzielona w separacji wodna faza srd#0wi»k substancji odzywczych zostac zawróco¬ na tio fetftleaUaeii. .W dotychczasowych sposobach jednakze przy za¬ wracaniu wodnej fazy pozywek do fermetacji za¬ warty w niej pomoetnczy srodek oddzielajacy zo¬ staje przez mikroorganizmy albo rozlozony albo z£fiibaoirbowa •rofcdzieiaflia musi byc na biezaco uzupelniany albo taft wystepuja z powodu zawróconego pomocni¬ czego srodka oddzielajacego ujemne dzialanie na ptfoces fermentacji, np. dzialanie toksyczne na mi- ferodrfftftizttiy albo ulamifce wplywy na stopnie przejscia materii, np. w przypadku alkilosulfona- nóW; "rJ" Celettt wynalazku jest ominiecie wymienionych, -Wlrd, afay. w tten sposób uksztaltowac. korzystniej oplacalnosc procesu. gadStttelrt wynalazku jest opracowania sposo¬ bi fetory przy calkowitym zawróceniu wodnej po* £ywki i fifezy olejowej, które prawie calkowicie za- wtoraja pomocniczy srodek oddzielajacy i przez z&s&Jsowaiiie jednaj jedynej substancji powierz- *fcttteWoc*ytine;j (taisydu), któfra dniala jednoczes¬ nie jako pomocniczy srodek oddzielajacy jak rów¬ nia* fertftentacyjny umozliwia sprzezony proces fefSWe^acyjno«oddziiei&jacy. £itate*iolH, ze zmiany pomocniczy srodek fermen- tacy)n-y, ptfddUkt polintetfyzacji tletiku etylenu i tlenku propylenu o srednim ciezarze czasteczko¬ wym 1750—225i0 moze byc stosowany jednoczesnie jako pomocniczy srodek oddzielajacy, jesli srodek pomocniczy zo&tal doprowadzony do produktu fer¬ mentacji przed rozdzieleniem faz przez separcje albo odwirowanie do wymaganego stezenia.(Produkt fermentacji przed separacja albo odwi¬ rowaniem ogrzewa sie do temperatury 65—90°C Koirzysftnie 80—85°C, poniewaz dopiero w tym za¬ kresie temperatur, powierzehniowoczyrine dzialanie srodka fermentacyjnego dla wplywu na zawiesine mikroorganizmów (oleju) wody w celu uzyskania zdolnosci do rozdzielania poszczególnych faz jest wystarczajaco wysokie.Ogrzany produkt fermenitacjd, który zawiera sub¬ stancje powierzchniowoczynna w wystarczajacej ilosci, rozklada sie nastepnie przez ciagla jedno- Sitopniowa separacje 3-fazowa alit o separacje dwu¬ stopniowa na faze olejowa, wodna faze pozywki i wodna faze mikrooirgainiizimów.W procesie fermentacji wymieniony pomocniczy srodek fermentacji w zakresie stezen 0,0:2—0,15, korzystnie 0,03—0,05% wagowych osiaga swa pel¬ na skutecznosc. Wyzsze stezenia nie wplywaja na proces fermentacji. Dla jego skutecznosci w se¬ paracji potrzebne jest stezenie w produkcie fer¬ mentacji 0,07—0,15% wagowych. Wystarczajace za¬ opatrzenie calego procesu, tj. fermentacji wlacz¬ nie z separacja, w pomocniczy srodek powierzch- niowoczynny mozna przy tym prowadzic nastepu¬ jaco: * 1. Ciagle dawkowanie substancji powierzchnio- woczynnej w fermentacji do 0,07—0,15% wago¬ wych bez zawracania fazy wodnej albo olejowej do fermentacji. 2. Ciagle dozowanie substancji powierzchniowo- czynnej w stopniu fermentacji do 0,02—-^15% wa¬ gowych i dodatkowe dozowanie przed separacja do 0,07-^15% wagowych bez zawracania wodnej fazy pozywki albo fazy olejowej do fermentacji. 3% Zawracanie wodnej fazy pozywki albo tez fa¬ zy olejowej do fermentacji i uzupelnianie braku¬ jacej ilosci substancji powierzchniowoczynnej, któ¬ ra zostala wyniesiona pnzez wodna faze mikroor¬ ganizmów i faze olejowa, przez dodatkowe dozo¬ wanie do fermentacji i /albo separacji.W niniejszym sposobie korzyistaie stosuje sie trzeci wariant, poniewaz stanowi on techniczno- ekonomiczne optymalne rozwiazanie sprzezenia fer¬ mentacji i separacji. £aleita wynalazku polega na tym, ze przy wyko¬ rzystaniu jednej jedynej substancji powierzchniowo¬ czynnej zarówno w stopniu fermentacji jak równiez w stopniu separacji umo&liwia sprzezenie procesu fermentacji z procesem separacji i przera zawrócenie wodnej pozywki i fazy olejowej osia¬ ga sie maksymalne stopnie przechodzenia matefiii i tym samym maksymalne wydajnosci w fermen¬ tacji przy minimalnie wymaganym nakladzie dla materialów energetycznych, odzywczych, surowco¬ wych i pomocniczych.Frzyfcfcut wykonania.Dla przykladów wykonania wybrano nastepu¬ jaca jednolita doswiadczalna baze wyjsciowa-: W wielkotechinticznym doswiadczalnym uarcajdze- 40 45 50 55 60100244 & niu fermentacyjnym hodowano szczep drozdzy „i62fnidifda' gurillenm-cndiLi" w sposób cliagly na des¬ tylacie ropy naftowej w celu uzyskania „single celi protein".Warunki i parametry" fermentacji: Fermen;ta.toi: Stopien wypelnienia: ferment rurowy 25Q cm8 75 t produktu fermen¬ tacji Wlasciwe wprowadzenie mocy przez mieszalnik: 3,2 kW/t Wlasciwy stopien przewietrzenia: • 8.0 Nm3/th Temperatura produktu fanmemtacji: 32°C wartoscpH: 4,2 Czas przebywania w femieiiibatorze: 5 h destylat .ropy naftowej: w produkcie fenmetacjd: ,20% zakpes temfoeratur wrzenia destylatu ropy naHtowej: 2/Mh^3&Q°C zawartosc n-parafin w destylacie ropy naftowej: 18—»20% W celu zapewnienia nieograniczonego wzrostu dozowano roztwór odzywczy, w którym znajdo¬ waly sie azot, fosfor, potas jak równiez wszystkie potrzebne pierwiastki odzywcze 1 sladowe w wys¬ tarczajacej ilosci.Z fermentatora odciagano w sposób ciagly 15t/h (co odpowiada czasowi przebywania 5h) produktu fermentacji i w celu uzyskania bialka rozkladano w nastepujacy sposób na faze wodna, faze olejo¬ wa i faze bialkowa. «—l oddzielanie 5,5 t/b wodnej iiazy pozywki jwzez ciagla dekantacje i zawracanie tego strumienia do fermentatora. — oddzielanie okolo 3 t/h destylatu ropy nafto¬ wej w 1 stopniu separacji i dalsze oddzielanie okolo 3;5 t/h wodnej pozywki w 2 stopniu sepa¬ racji za pomoca separatorów przemyslowych o dzialaniu ciaglym.Ogólem otrzymano faze bialkowa w ilosci okolo 3 t/h, które mozna bylo doprowadzic do dalszej przeróbki. Ta faza bialkowa miala we wszystkich nizej podanych przykladach nastepujacy sklad: 0—|l(2°/o bialka, 0,5—d°/o destylatu resztkowego iropy naftowej, 87—OWo wody (woda komórkowa i wodna pozywka).Hodowle i rodzielanie na poszczególne fazy pod- dejmowano wedlug obydwóch typowych znanych mozliwosci prowadzenia pirocesu. a Feia»eaf*fcacja bez srodków pomocniczych i od¬ dzielanie destylatu*- iropy naftowej z dodatkiem al- kUosuKonjiaau (dlugosc . lancucha Cu—Cu*) jako pom sulfcniaswa jako dodatek w doplywie do pierw¬ szego stopnia separacji). flb) Dodatek KP/trigo roztworu tensydu typu ad¬ duktu tteiku propylenu i tlenku etylenu. Nasta¬ wianie wodowskazu na 0,4% tensydu w cieczy fermaintacyjnej i separacja wedlug a). iPo ustaleniu trwalego stanu procesu (po uply¬ wie okolo 36 h) pffizeMarwiono na wiaffiamty sposo¬ bu wedlug nfcuejgaego wynalazku.Wyniki fazy nastawiania wedlug znanych apo- 40 45 50 sobów w celu uwypuklenia zalet rozwiazania wed¬ lug wynalazku podano równiez w nastepujacej ta¬ blicy w kolumnach 3 14.Przyklad I (tablica kolumna 5) Proces rozpoczeto w sposób podobny pod a) i b).Po 36 godzinnej fazie rozruchu przez zwiekszenie doprowadzenia 10°/o-go roztworu tensydu podwyz¬ szono wodowskaz adduktu tlenku propylenu i tle¬ nku etylenu w eteezy fermentacyjnej w sposób ciagly do 0,13% utrzymano w przyblizeniu na sta¬ lym poziomie. Po osiagnieciu stalej- wartosci pro¬ dukt ogrzano w wymienniku ciepla posrednio za pomoca pEiry w sposób ciagly do temperatury 80°C i jednoczesnie przerwano doprowadzanie roztworu alikilosulfonianu. Nie pojawilo sie zadne pogorsze¬ nie oddzielania destylatu ropy naftowej i wody.Fazy bialkowa i destylatu ropy Mito9*t$ tSKSHa bylo doprowadzic bez pogorszenia da&M# prW- róbki. Faze wodna odprowadzano do scieków; Przyklad n (tabfócJUkolumna 6).Proces rozpoczeto analogicznie jak w przykladnie I, jednakze pozostawiono wodowskaz adduktu ifeo- ku propylenu i tlenku etylenu w produkcie fermen¬ tacji przy 0,04%. Przez dodatkowe dobywa*** J0#o go roztworu adduktu tlenku pro&jrl«n& i tfcafeu etylenu przed wyrmeiflsiteiem cieplfr jródtagano stezenie tensydu w doplywajacym produkcie do se¬ paracji do 0,13%. Separacje i dalsza? Obtfflbte^ Jfrfii- mieni produktu przeprowadzo analogfcetfnfte jak-w przykladzie I.Przyklad III. (tablica kolumna 7). ^ - Proces rozpoczeto analogiicfcnie jak w jprzy^a,ó*zie II. Po 24^godziLnnym czasie rozrufenu zwrócono fa¬ ze wodna (wodna pozywka) z drugiego stopnia seperacji calkowicie do fermentatora Zawarta w tym strumieniu ilosc tensydu (ókoto tT,Ii^^%) wystarczala calkowicie do uftrzymania poffrzefcnego stezenia tensydu wiekslze^o (równego tyl4Wo w sro¬ dowisku fermentacja, tak ze dozowanie1' tensydu z fermenltatora moglo byc przerwane. t Dodatkowe dozowanie roztworu £Le#ku jw- lenu i tlenku etylenu przed separacja nastawiotw na potrzebna wiartosc 0„13% tensydu w doplywa¬ jacym produkcie. Nie wystapilo pogorszenie wyni¬ ków w porównaniu z poprzednimi przykladami.Slabo polarne tetnsydy, ró*two¥ a^dbfotti 4!feAiku propylenu i tlenku etylenu sa rozpuszczalne didb- rze w temperaturze 60—Q0°C w destylatach* ropy naftowej. Przez obnizenie przerobu destylatu ropy naftowej mozna zminimalizowac fcuzycie. WpWOfr- lizacje przeprowadzono wedlug nastepujacego przykladu.P r z y k l a d IV (tablica kolumna $) Proces- roapoczeto afia&giczinie jak w przyWa^r dzie III. Po nastawienki trwalego ppoocau dopro- wadzanie destylatu ropy naftowej d& ieraaeiotaeji1 zmniejszano powoli tak dlugo az wystapil sgpadtpk 0,2 jednostek bialka w wyd^mossi aa jednostka, czasu i objetosci' 3a podis^awóe abyt maletj podamy destylatu ropy naftowej. Od te#o iwoenantiu de^y- lat ropy naftowej z pierwszego stojmia separacji, który zawiera jesacae zdolne do koowecaji aktach* niki, zawracano do fermentatora i z&wrapainie zwiekszano tak dlugo, az osiagnieto pfmetw$to #100244 t 8 Tablica Wydajnosc bialka na jednostke czasu i objetosci w fer- imentatorze Wyrzut produkcyj¬ ny fermentatora Doplyw pomocni¬ czego srodka fer¬ mentacyjnego Doplyw pomocni¬ czego srodka od¬ dzielajacego Ogólne zapotrze¬ bowanie srodka po¬ mocniczego Specyficzne zapo¬ trzebowanie ener¬ gii mieszania w fermentacji (netto) Specyficzne zapo¬ trzebowanie srodka pomocniczego | (ogólem) Wymliar UcgHrTS/h+ ikg HTS/h kg/h kg/h kg/h kWh/kg HTS g^kg HTS Proces wyjsciojwy —< bez po¬ mocniczego srodka fer¬ mentacyjnego — z alkilo- sulfoniamem jako pomioc- miczymy srod¬ kiem oddzie¬ lajacym $fi 1,95 13 v» 1,23 67 — iz pomoc¬ niczym srod¬ kiem fermen¬ tacyjnym — iz alkilo- sulfoinianem jako pomoc¬ niczym srod¬ kiem oddzie¬ lajacym i3,9 2&a 3,8 19,0' \2Z -. 4«2 88 (przyk¬ lad I 3,94 296 112$ H ,12,3 Qy81 42,0 •.przyk¬ lad II 3,9 2912/ &8 i (a,55 12,35 Q,a2 42,4 przyk¬ lad III 3,9,1 ;203 /8,5(0 8,5 G,8fc , przyk¬ lad IV 3,9(1 219.3 H 7,9 7,9 0b82 ,27 ) kg suchej substancji drozdzowej na t produktu feirmentcji i godzine pewnoscia pierwotna wydajnosc na jednostke cza¬ su i objetosc.Ilosciowo strumienie destylatu ropy naftowej ksztaltowaly sie przy tym nastepujaco: Ogólem okolo 3,3 t/h, z tego okolo 2 t swiezego destylatu ropy naftowej i okolo 1,3 t/h zawracanego desty¬ latu ropy naftowej.' W zawracanym destylacie ropy naftowej rozpu- # czczonych jest w temperaturze ap°C okolo 600i— 80ib mg/litr adduktu tlenku propylenu i tlenku ety¬ lenu. W temperaturze 32°C w produkcie fermen¬ tacji przechodzi ten rozpuszczony tesyd w okolo 9CP/o do fazy wodnej, tak ze ogólem zapotrzebowa¬ nie adduktu tlenku propylenu i tlenku etylenu dla fermentacji i separacji wyraznie zmalalo o 0,6i— 0,8 kg/h. Podczas ogólem 10-dniowej próby nie nastapilo pogorszenie wyników w porównaniu z przykladami I—UL Z tablicy wynika, ze przy zastosowaniu sposobu $5 wedlug wynalazku wystepuje znacza oszczednosc srodków pomocniczych do separacji i fermentacji, w szczególnosci przedstawione przez specyficzne zapotrzelbowainie substancji pomocniczej.Ponadto wykazano, ze w ten sposób mozliwe jest w korzystne technologiczne sprzezenie separacji i fer¬ mentacji. Parametry sprawnosci w fermentacji (wydajnosc na jednostke czasu i objetosci, specy¬ ficzne . zapotrzebowanie energii) nie ulegaja pogor¬ szeniu przez zastosowanie sposobu wedlug wyna- 65 Lazku9 100244 Zcistrzezeniia patentowe 1. Sposób mikrobiologicznego oltrzymyiwamia bial¬ ka przez oddzielanie w sposób ciagly z mieszani¬ ny reakcyjnej, z wykorzystaniem znanego produk¬ tu polimeryzacji tlenku etylenu i tlenku propy¬ lenu o srednim ciezarze czasteczkowym 1750—2250 jako pomocniczego srodka fermentacyjnego, zna¬ mienny tym, ze- dzialajacy jako substancja po- wierzchniowoczynna niej onotwórczy pomocniczy srodek fermentacyjny, stosuje sie jednoczesnie ja¬ ko pomocniczy srodek oddzielajacy. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze niezuzyta substancje poiwierzchmiowocizynna z fer¬ mentacji po zdekantowaniu przez wodna faze sub¬ stancji odzywczej zwraca sie do fertaientora. 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze niezuzyta powierzchniiowoczynna substancje z od¬ dzielania przez faze zawierajaca olej zawiraca sie bezposrednio albo posrednio do fermentora. 4. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze dzialajaca jako pomocniczy srodek fermentacyjny substancje powderzchniowoczynna stosuje sie w stezeniu 0,0il^0,15, korzystnie 0,03^0,08V* wago¬ wego.. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako pomocniczy srodek oddzielajacy substancje powierzchniowoczynna stosuje sie w stezeniu 0,01—0,8, korzystnie 0,05-^0,2% wagowego. 6. Sposób wedlug zastrz. 1, 4 i 5, znamienny tym, ze produkt oddzielania ogrzewa sie do tempera- tury" 30^90°C, korzystnie 65^85°C. 7. Spo"sób wedlug zastirz. 1, znamienny tym, ze doprowadzanie w sposób ciagly substancji po- wierzchniowoczymnej, która jednoczesnie dziala ja¬ ko pomocniczy srodek fermentacyjny i oddziela- jacy, przeprowadza sie bez zawracania wodnej fa¬ zy srodowisk odzywczych i/albo zawierajacej olej, do fermentacji w stezeniu 0,5—1,9°/* wagowego. 8. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze doprowadzanie w sposób ciagly substancji po- wierzchniowoczyninej, która jednoczesnie dziala ja¬ ko pomocniczy srodek fermentacyjny i oddziela¬ jacy bez zawracania fazy wodnej srodowisk od¬ zywczych i/albo olejowej, do fermentacji przepro¬ wadza sie w stezeniu 0,0!1—O^lWo wagowego i ja- ko dodatkowe doprowadzanie przed oddzielaniem do 0,01—0,8% wagowego. 9. Sposób wedlug zastrz. 1—6, znamienny tym, ze po zawróceniu substancji powierzchmiowoczyn- nej przez faze Rodnia srodowisk odzywczych i/al- bo olejowa do fermentacji doprowadza sie braku¬ jaca ilosc substancji powienzchoiiowoczynnej do¬ datkowo do fermentacji i/albo oddzielania, PL PLThe subject of the invention is the method of microbiological preparation of the protein, in particular the method of continuous separation of the protein from the reaction mixture by cidivirovinium or separations using the postconvertive properties of the separation enhancing agent. in the presence of an aqueous phase, an oil phase and a gas phase, in suitable fermentation equipment. In these methods, the aqueous phase contains (as a rule, all the inorganic nutrients necessary for the life of microorganisms and the volatilizable products of metabolism. Oxygen is required through the gas phase through the gas phase. other homogenizing devices, additionally with the simultaneous processing of selected surface-active substances, the so-called fermentation auxiliaries. - water - gas bubbles In the case of obtaining protein after simplified maximum slow degassing, it must be decomposed by suitable separation processes. Suitable separation processes are continuous centrifugation or seperaoji and, in order to improve the phase separation, they are provided with selected surface-active substances, called further, "separating aids" as additives. In addition, the separation is carried out, possibly at an elevated temperature. A number of methods are known here in which non-ionic or ionogenic are added to the fermentation product, the latter of which are both anionic and cation-active, and depending on the separation problem, optimal combinations non-ionic and ion-forming surface-active substances as an auxiliary separating agent and thoroughly mixed with the fermentation product. The emulsion prepared in this way is then broken down by a single or multi-stage continuous separation completely into the desired phases, mp. The water, oil and water phases of the microorganisms are also known to be used in which the separated emulsions are heated before or after the addition of separating aids and carried out at an elevated temperature. 1002443 100244 4 In all cases, the total amount of added release aids is not more than 0.25% by weight, based on the emulsion to be separated. In most cases, a temperature not exceeding 90 ° C is used. In some methods, it is already possible to separate a part of the aqueous phase of the nutrient from the fermentation product by decanting. and possibly turn to the fermentation process. This decantation process, however, is only a partial dehydration, the phase containing the microorganisms also after the decantation process having the stated properties of a stable microorganism oil / water emulsion gas bubbles. The further treatment of this emulsion must be carried out analogously to the described separation processes. Generally speaking, the cultivation and separation processes to obtain microbial protein have the following disadvantages: - When using fermentation and separation aids, at least two surface-active substances are required for the entire process. separate phases and must be added * on a regular basis. Partial recovery of the fermentation aid is possible only in cases of prior decantation and the return of the aqueous medium of the nutrient to fermentation without additional expenditure. Recovery of auxiliaries from individual phases after separation is associated with a significant technical and technological as well as energy expenditure and is in most cases unprofitable. It is preferable that the aqueous medium phase, separated in the separation, of the nutrients, is returned to the thio fetftleaUaeii. In the hitherto methods, however, when returning the aqueous phase of the fermentation medium, the auxiliary separating agent contained therein becomes either decomposed or decomposed by the microorganisms or the phylum and the fronds must be replenished on a regular basis, or the taft is present due to the recycled auxiliary agent. separating negative effect on the fermentation process, eg toxic effect on the microprocess of fermentation, or ulamifce effect on the degree of transfer of matter, eg in the case of alkylsulfonates; The "rJ" Celettt invention is omitted, -Wlrd, afay. thus shape it. more preferably the cost-effectiveness of the process. The gadget of the invention is to develop a method of stench with complete recycling of the aqueous medium and oily phyphosis, which almost completely contains the separating aid and by means of a single substance that entails Not as an auxiliary separating means, as well as an equilibrium fertilization, it is possible to combine the FefSWeactivity process. Itate * iolH that changes the auxiliary fermentation agent, ptfdd The polyinthetics of ethylene oxide and propylene oxide with an average molecular weight of 1750-22510 can be used simultaneously as an auxiliary separating agent, if the auxiliary agent is fed to the fermentation product. before phase separation by separation or centrifugation to the required concentration. The effect on the microorganism suspension (oil) of water in order to obtain the ability to separate the individual phases is sufficiently high. ¬ gradual for the oil phase, the water phase of the nutrient solution and the water phase of the mic In the fermentation process, said fermentation auxiliary in the concentration range of 0.0: 2 to 0.15, preferably 0.03 to 0.05% by weight reaches its full effectiveness. Higher concentrations do not affect the fermentation process. For its effective separation, a concentration of 0.07-0.15% by weight in the fermentation product is needed. Sufficient provision of the entire process, i.e. fermentation including separation, with a surfactant can be carried out as follows: 1. Continuous dosing of the surface-active substance in the fermentation to 0.07-0.15% by weight without recycling the aqueous or oil phase to fermentation. 2. Continuous dosing of the surfactant in the fermentation stage down to 0.02-15% by weight and additional dosing prior to separation up to 0.07- ^ 15% by weight without recycling the aqueous medium phase or the oil phase to fermentation. 3%. Recycle the aqueous phase of the nutrient solution or the oil phase to fermentation and replenish the missing amount of surfactant which has been removed from the water phase of the microorganisms and the oil phase by additional dosing for fermentation and / or separation. In the present process, the third variant is preferably used as it represents the technico-economic optimal solution for the fermentation and separation process. The advantage of the invention lies in the fact that when using one single surfactant, both in the degree of fermentation and in the degree of separation, it is possible to combine the fermentation process with the separation process and prevent the return of the water medium and the oil phase to achieve the maximum degree of transformation of the mataphy. and thus maximum fermentation efficiency with the minimum required input for energy, nutritional, raw and auxiliary materials. 60100244 The yeast strain "i62fnidifda" gurillenm-cndiLi "was cultivated cliagly on crude oil desaturate in order to obtain" single cell protein ". Fermentation conditions and parameters: Fermen; ta.toi: Filling degree: 25 ° C tubular fermentation cm8 75 t of fermentation product. Proper introduction of power through the mixer : 3.2 kW / t Appropriate airing rate: • 8.0 Nm3 / th Fan-temperature product temperature: 32 ° C pH value: 4.2 Residence time in femieiiibator: 5 h petroleum distillate: in the product fenmetation:, 20% boiling point range crude oil distillate: 2 / Mh ^ 3 & Q ° C content of n-paraffins in crude oil distillate: 18-20% In order to ensure unlimited growth, a nutrient solution containing nitrogen, phosphorus, potassium as well as all the necessary elements was dosed nutrient and traces in sufficient quantity. 15 t / h (corresponding to a residence time of 5 h) of the fermentation product were continuously withdrawn from the fermentor and, to obtain the protein, it was decomposed into the water phase, the oil phase and the protein phase as follows. «-1 separating 5.5 t / b of the aqueous nutrient iase by continuous decantation and recycling of this stream to the fermentor. - separation of approx. 3 t / h of petroleum distillate in the 1st stage of separation and further separation of approx. 3; 5 t / h of aqueous nutrient solution in the 2nd stage of separation by means of industrial separators with continuous operation. A total of approx. 3 protein phase was obtained. t / h, which could be led to further processing. This protein phase had the following composition in all of the examples below: 0—µL (2% protein, 0.5 — d% residual oil distillate, 87% water (cell water and aqueous nutrient). the separation into individual phases was carried out according to both typical known possibilities of pyrocessing, and Feia »eaf * fcation without auxiliaries and separation of the distillate * - crude oil with the addition of Alu-Konjiaau (length of the Cu-Cu * chain) as an aid of sulfurization as an additive in the feed to the first stage of separation). flb) Addition of a KP / trigo tenside solution of the propylene tetraide adduct and ethylene oxide. Setting the gauge for 0.4% of the tenside in the fermaintenance fluid and the separation according to a). After the stable state of the process had been established (after about 36 hours), the pffize was dyed in the light method according to the present invention. in columns 3 14. Example I (table column 5) The process was started in a similar manner under a) and b). After a 36-hour run-in phase, by increasing the feed of 10% tenside solution, the water gauge of the propylene oxide adduct and oxygen was increased. of ethylene in the fermentation continuously up to 0.13% was kept approximately constant. Once a constant value had been attained, the product was heated indirectly in a heat exchanger continuously to 80 ° C. by means of a pEira, and at the same time the feed of the alkylsulfonate solution was interrupted. There was no deterioration in the separation of crude oil and water distillate. The protein and crude distillate phases of Mito9 * tSKSHa were achieved without deterioration of the sample yield. The water phase was discharged to sewage; Example n (table 6, column 6). The process was started in the same way as in example I, however, the water gauge of the adduct of propylene and ethylene oxide in the fermentation product was left at 0.04%. The concentration of the tenside in the effluent separation product was reduced to 0.13% by additional extractions of the pro & jrl < > n ' ethylene oxide adduct prior to the heat transfer. Separation and further? The product was changed analogously to example I. Example III. (table column 7). ^ - The process started analogically to the same as in the case of II. After a 24 hour run-up time, the water phase (aqueous medium) from the second stage of separation was completely returned to the fermentor. fermentation in the field, so that the dosing of the tenside from the fermentor could be interrupted. deterioration of the results compared with the previous examples. The weak polar tetnsides, the propylene oxide and ethylene oxide diffraction are soluble at 60 ° C in crude oil distillates. By reducing the distillate throughput. Crude oil fusion can be minimized. Influence was carried out according to the following example. o the setting of the permanent aftermath of the crude oil distillate supply d & ieraaeiotaeji1 was slowly reduced as long as there was a sgpadtpk of 0.2 protein units in extending the unit, time and volume '3a podis ^ that we would give a small amount of crude oil distillate. From that time onwards, the crude oil from the first separation stage, which contains any end-actable crude oil, was returned to the fermentor and the & wrapain was increased until the value of $ 100244 was reached. 8 Table Protein yield per unit time and volume in the fermentor Production discharge of the fermentor Inflow of the fermentation aid Inlet of the separating aid General need of the auxiliary agent Specific need of agitation energy in fermentation (net) Specific need for auxiliary agent | (total) Dimension UcgHrTS / h + ikg HTS / h kg / h kg / h kg / h kWh / kg HTS g ^ kg HTS Starting process - <without fermentation aid - with alkylsulfonam as a measure of the medium With separating aid 1.95 13% 1.23 67 - and with fermentation aid - and with alkylsulfoate as separation aid and 3.9 2 to 3.8 19.0 '\ 2Z -. 4 '2 88 (example I 3.94 296 112 A, 12.3 Q81 42.0. example III 3.9.1; 203 / 8.5 (0.5 G, 8 fc, example IV 3.9 (1 219.3 H 7.9 7.9 b 82.27) kg of dry yeast per t of fermentation product and one hour of certainty the original yield per unit of time and volume. t / h of recycled crude oil distillate. In the recycle of crude oil distillate is dissolved at ap ° C about 600-80ib mg / liter of propylene oxide and ethylene oxide adduct. At about 9% of the tesside, this dissolved theside passes into the water phase, so that the total demand for the propylene oxide and ethylene oxide adduct for fermentation and separation has decreased significantly by 0.6-0.8 kg / h. the test did not deteriorate the value Compared to Examples I-UL The table shows that when using the method $ 5 according to the invention, there is a considerable saving of the separation and fermentation aids, in particular shown by the specific cavities of the auxiliary substance. combined separation and fermentation. The parameters of the fermentation efficiency (time and volume yield, specific energy requirements) are not deteriorated by the application of the method according to the invention of Lazku9 100244 Patent cuttings 1. The method of microbiological preservation of proteins by continuous separation with mixing The reaction, using the known polymerization product of ethylene oxide and propylene oxide with an average molecular weight 1750-2250 as fermentation aid, i.e., acting as a surfactant a non-forming fermentation aid, at the same time as a separating aid. 2. The method according to p. The method of claim 1, wherein the unused acetic acid from the fermentation is returned to the fermentor after decanting by the aqueous phase of the nutrient. 3. The method according to p. A process as claimed in claim 1, characterized in that unused surface-active material from separation by the oil-containing phase enters directly or indirectly into the fermenter. 4. The method according to p. A method according to claim 1, characterized in that the surfactants acting as a fermentation aid are used in a concentration of 0.01-0.15, preferably 0.03-0.08% by weight. A method as claimed in claim 1, characterized in that a concentration of 0.01-0.8, preferably 0.05- ^ 0.2% by weight is used as surfactant separating aid. 6. The method according to p. A method according to claims 1, 4 and 5, characterized in that the separation product is heated to a temperature of "30-90 ° C, preferably 65-85 ° C. A process as claimed in claim 1, characterized in that the continuous feeding of the surfactant, which simultaneously acts as fermentation and separating aid, is carried out without recycling the aqueous phase of the nutrient and / or oil-containing media to fermentation at a concentration of 0 .5-1.9% by weight. 8. The method according to p. A method according to claim 1, characterized in that the continuous feeding of the surfactant, which simultaneously acts as a fermentation aid and separates without recycling the aqueous phase of the nutrient and / or oily media, to the fermentation is carried out at a concentration of 0 0.1-0.8% by weight and as an additional feed prior to separation to 0.01-0.8% by weight. 9. The method according to p. 1 to 6, characterized in that after the recirculation of the surface-active substance through the Rodnia phase of nutrient and / or oily environments, the lacking amount of post-acetic substance is additionally fed to fermentation and / or separation, for fermentation, PL PL