NO313227B1

NO313227B1 - Terapeutisk forbindelse - fettsyrekonjugater

Info

Publication number: NO313227B1
Application number: NO19960389A
Authority: NO
Inventors: Robert George Whittaker; Veronika Judith Bender; Wayne Gerrard Reilly
Original assignee: Commw Scient Ind Res Org
Priority date: 1993-08-02
Filing date: 1996-01-30
Publication date: 2002-09-02
Also published as: DE69426629T2; ATE198880T1; CN1128531A; FI960504A; NZ269773A; EP0712389A4; EP0712389A1; CA2167818A1; US5792786A; ES2156156T3; CN1125040C; DK0712389T3; NO960389L; WO1995004030A1; JPH09501655A; EP0712389B1; NO960389D0; RU2137755C1; DE69426629D1; FI960504A0

Description

Foreliggende oppfinnelse angår terapeutiske konjugater som omfatter en terapeutisk forbindelse forbundet til en til tre acylgrupper avledet fra fettsyrer og til metoder omfattende anvendelsen av disse forbindelsene. Spesielt angår foreliggende forbindelse ikke-steroidale anti-inflammatoriske forbindelser bundet til en til tre acylder ivater av fettsyrer .

Blant de mest vanlig benyttede terapeutiske midlene er de ikke-steroidale anti-inflammatoriske medikamentene. Disse blir typisk oppdelt i tre hovedgrupper:

Karboksyl syrer,

pyrazoler og

oksikamer.

Av spesiell interesse i foreliggende oppfinnelse er de ikke-steroidale anti-inflammatoriske midlene som omfatter en karboksylsyregruppe slik som salicylater. Av disse ikke-steroidale anti-inflammatoriske medikamentene er de mest vanlig benyttede forbindelsene acetylsalicylsyre (aspirin), ibuprofen og indometacin..

Foreliggende oppfinnere har nå oppdaget at ikke-steroidale anti-inflammatoriske medikamenter og andre terapeutiske forbindelsr kan bli bundet til en til tre fettsyrer. Disse nye forbindelsene er antatt å forbedre den transdermale levering, transdermale opptaket, halveringstid og/eller andre leveringsmoduser for disse ikke-steroidale antiinflammatori-ske og andre terapeutiske midler. Videre er det antatt at disse nye forbindelsene vil hjelpe til ved oral, internasal og intraokkulær levering av ikke-steroidale anti-inflammatoriske medikamenter og andre terapeutiske midler.

Følgelig omfatter et første aspekt av foreliggende oppfinnelse en forbindelse kjennetegnet ved den følgende formel:

hvor X er en ikke-steroidal anti-inflammatorisk forbindelse Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid eller avstandsgruppe

B er H eller CH20 - R3; og

R-^, Rg °S ^3 er like eller forskjellige og er enten hydrogen, metyl, etyl, hydroksyl eller en acylgruppe som er avledet fra en fettsyre under den forutsetning at minst hver av R-^, R2 og R3 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

Ifølge et annet aspekt omfatter foreliggende oppfinnelse en forbindelse kjennetegnet ved den følgende formel:

hvor X er en ikke-steroidal-anti-inflammatorisk forbindelse, Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid eller en avstandsgruppe, og R4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

Ifølge et tredje aspekt omfatter foreliggende oppfinnelse en forbindelse kjennetegnet ved den følgende formel:

hvor X er et radikal avledet fra en ikke-steroidal anti-inf lammas j onsforbindelse;

Y er fraværende eller en eller to aminosyrer eller et peptid eller en avstandsgruppe;

B er H eller CH20-R3; og

Ri, R2 og R3 er like eller forskjellige og er enten hydrogen, metyl, etyl, hydroksyl eller en acylgruppe avledet fra en fettsyre, med den betingelsen at minst en av R^, R2 og R3 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre for anvendelse ved forlengelse av aktiviteten til den ikke-steroidale anti-inf lammas j onsforbindelsen.

Ifølge et fjerde aspekt angår foreliggende oppfinnelse en forbindelse kjennetegnet ved formelen

hvori X representerer et radikal avledet fra en ikke-steroidal anti-inflammasj onsforbindelse;

Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid eller en avstandsgruppe, og

R4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre for anvendelse ved forlengelse av aktiviteten til den ikke-steroidale anti-inf lammas j onsforbindelsen.

Ifølge et femte aspekt angår foreliggende oppfinnelse en forbindelse kjennetegnet ved formelen

X er et radikal avledet fra ibuprofen,

Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid en avstandsgruppe,

B er H eller CH20-R3; og

El, R2 og R3 er like eller forskjellige og er enten hydrogen, metyl, etyl, hydroksyl eller en acylgruppe avledet fra en fettsyre med den betingelsen at minst en av R^, R2 og R3 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre for anvendelse ved behandling av forbrenninger.

Ifølge et sjette aspekt omfatter foreliggende oppfinnelse en forbindelse kjennetegnet ved formelen

hvori

X er et radikal avledet fra ibuprofen,

R4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre for anvendelse ved behandling av forbrenninger.

Fagmannen vil forstå at forbindelsen ifølge det første aspekt av foreliggende oppfinnelse omfatter en terapeutisk forbindelse bundet, eventuelt via en aminosyre, til et trometaminderivat som er bundet til en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

Tilsvarende kan forbindelsen ifølge det andre aspektet bli gjenkjent som et terapeutisk middel bundet, eventuelt via en aminosyre til et etanolaminderivat, til hvilket det er bundet en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

I en foretrukket utførelsesform av foreliggende oppfinnelse er den terapeutiske forbindelsen en ikke-steroidal anti-inf lammatorisk forbindelse som fortrinnsvis omfatter en karboksylsyregruppe.

Den ikke-steroidale anti-inflammatoriske forbindelsen kan bli valgt fra forskjellige kjente forbindelser inkludert salicylat, acetylsalicylat, salsalat, diflunisal, fendosal, indometacin, salsalat, diflunisal, fendosal, indometacin, acemetacin, cinmetacin, sulindak, tolmetin, zomepirak, diklofenak, isoksepak, ibuprofen, flurbiprofen, naproksen, ketoprofen, fenoprofen, benoksaprofen, indoprofen, pirprofen, karprofen, mefenaminsyre, flufenaminsyre, meklofenamat, nifluminsyre, tolfenaminsyre, fluniksin og kloniksin. Det er imidlertid for tiden foretrukket at C er valgt fra gruppen omfattende acetylsalicylat, salicylat, indometacin og ibuprofen.

Ytterligere eksempler på ikke-steroidale anti-inflammatoriske forbindelser er kjent i Weissman, Scientific American, januar 1991, 58-64, hvis beskrivelse er innlemmet her som referanse.

I enda en foretrukket utførelsesform er , R2 og R3 enten hydrogen eller en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

Det må også være tydelig for fagmannen at substitusjoner forskjellig fra metyl, etyl og hydroksyl er mulige ved R1, R2 eller R3. Hovedkravet er at minst en av R^, R2 eller R3 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

I en ytterligere foretrukket utførelsesform av det første aspektet av foreliggende oppfinnelse, er hver R^, R2 og R3 acylgrupper avledet fra fettsyrer, og mer spesielt er hver den samme acylgruppen. Det er for tiden foretrukket at fettsyren har en karbonkjede på 3 til 18 karbonatomer, mer foretrukket 10 til 18 karbonatomer, og mest foretrukket 16 karbonatomer. På samme måte er det foretrukket at R4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre som har en karbonkjede på 3 til 18 karbonatomer, mer foretrukket 10 til 18 karbonatomer, og mest foretrukket 16 karbonatomer.

I en ytterligere foretrukket utførelsesform av foreliggende oppfinnelse er Y enten fraværende eller er alanin eller glycin.

I en ytterligere foretrukket utførelseform av foreliggende oppfinnelse, er forbindelsen valgt fra gruppen omfattende salicylat-Tris-tripalmitat,

salicylat-Tris-dipalmitat,

salicylat-Tris-monopalmitat,

ibuprofen-alanin-Tris-tripalmitat,

ibuprofen-alanin-Tris-dipalmitat,

ibuprofen-alanin-Tris-monopalmitat,

indometacin-glycin-Tris-monopalmitat,

indometacin-glycin-Tris-dipalmitat,

indometacin-glycin-Tri s-tripalmitat,

indometacin-glycin-etanolaminpalmitat og

indometacin-etanolaminpalmitat.

Som angitt ovenfor kan forbindelsene eventuelt omfatte en sammenbindende gruppe. Sammenbindende grupper benyttet i foreliggende oppfinnelse er velkjente og omfatter: 1. Mellom en forbindelse med en karboksylgruppe og aminogruppen av Tris

a) en sammenbindende gruppe med en aminogruppe til forbindelsen og en karboksylgruppe til Tris slik som aminosyrer

og antibiotika

b) en sammenbindende gruppe med en aminogruppe til forbindelsen og en sulfonsyregruppe til Tris slik som 2-aminoetansulfonsyre (taurin) c) en sammenbindende gruppe med en aminogruppe til forbindelsen og en hydroksylgruppe til Tris slik som 2-aminoeta-nol (f.eks. via et klorid eller bromid mellomprodukt) d) en sammenbindende gruppe med hydroksylgruppe til forbindelsen og en karboksylgruppe til Tris slik som glykolsyre,

melkesyre osv.

e) en sammenbindende gruppe med en hydroksylgruppe til

forbindelsen og en sulfonsyregruppe til Tris slik som 2-hydroksyetansulfonsyre (isetonsyre) f) en sammenbindende gruppe med en hydroksylgruppe til forbindelsen og en reaktiv halidgruppe til Tris slik s<q>m 2-kloretanol g) andre eksempler på eventuelt passende sammenbindende grupper mellom en forbindelse med en reaktiv karboksyl og

aminogruppen av Tris omfatter familiene av forbindelsen eksemplifisert med p-hydroksybenzaldehyd, 2-kloroeddiksyre, 1,2-dibrometan og etylenoksyd.

2. Mellom en forbindelse med en hydroksylgruppe og aminogruppen til Tris

a) Sammenbindende gruppe med en karboksylgruppe til forbindelsen og en aldehydgruppe til Tris slik som glykosylsyre

(i nærvær av et reduksjonsmiddel f.eks. NaBH4).

c) En sammenbindende gruppe med en karboksylgruppe til forbindelsen og en halidgruppe til Tris slik som kloreddiksyre d) en sammenbindende gruppe med en karboksylgruppe til forbindelsen og en N=C=0-gruppe til Tris slik som etylisocya-natacetat. 3. Mellom en forbindelse med en amingruppe og aminogruppen av Tris a) En sammenbindende gruppe med en karboksylgruppe til forbindelsen og en karboksylgruppe til Tris som dikarboksyl-syrer via anhydridet, f.eks. ravsyreanhydrid, maleinsyrean-hydrid osv., b) En sammenbindende gruppe med en karboksylgruppe til forbindelsen og en aldehydgruppe til Tris slik som glykosylsyre i nærvær av et reduksjonsmiddel slik som NaBH4, c) En sammenbindende gruppe med en karboksylgruppe til forbindelsen og en halidgruppe til Tris slik som kloreddiksyre, d) andre eksempler på potensielt anvendelige sammenbindende grupper mellom en forbindelse med en amidgruppe og aminogruppen av Tris omfatter familier av forbindelsen eksemplifisert ved akrolein (i nærvær av et reduksjonsmiddel f.eks. NaBH4) og akrylsyre.

4. Mellom en forbindelse med en tiolgruppe og aminogruppen til Tris

Eksempler på potensielle passende sammenbindende grupper mellom en forbindelse med en tiolgruppe og aminogruppen av Tris omfatter familier av forbindelsen eksemplifisert ved kloreddiksyre og akrolein (i nærvær av et reduksjonsmiddel, f.eks. NaBH4).

For naturen til foreliggende oppfinnelse kan bli klarere forstått, vil foretrukne former derav nå bli beskrevet med referanse til de følgende eksempler og figurer.

Kjemiske forkortelser benyttet:

ATP1 = alanin-Tris-monopalmitat

ATP2 = alanin-Tris-dipalmitat

ATP3 = alanin-Tris-tripalmitat

CDCI3 = kloroform-d

DCC = dicykloheksylkarbodiimid

DCM = diklormetan

DCU = dicykloheksylurea

DIEA = diisopropyletylamin

DMAP = dimetylaminopyridin

DMF = dimetylformamid

DMS0-d6 = dimetylsulfoksyd-d6

GTP1 = glycin-Tris-monopalmitat

GTP2 = glycin-Tris-dipalmitat

GTP3 = glycin-Tris-tripalmitat

HOSu = N-hydroksysuksimid

Ibuprofen = a-metyl-4-(2-metylpropyl)benzeneddiksyre Indometacin = l-(4-klorbenzoyl)-5-metoksy-2-metyl-lH-indol-eddikester

NSAID = ikke-steroidal anti-inflammatorisk medikament

TFA = trifluoreddiksyre

THF = tetrahydrofuran,

Tris = 2-amino-2-hydroksy-metyl-l,3-propandiol

TSTU = (0-(N-suksinimidyl)-N,N,N',N'-tetrametyl-uronium-tetrafluorborat

Z = benzyloksykarbonyl

MATERIALER OG METODER

Høy- ydelsevfieskekromatografi ( HPLC)

Analytisk HPLC ble utført på Milliproe Waters HPLC-utstyr (Waters Chromatography Division of Millipore, Milford, MA), omfattende en 6000A serie oppløsningsleveringssystem med en automatisert gradientkontroller og modell 746 datamodul. Separasjonene ble utført på en Novapak C18 reversfasekolonne (100x8 mm). Eluering av ikke-fettacylderivater ble utført ved hjelp av en lineær gradient fra 24 til 80$ acetonitril med 0,1$ TFA over 5 min. med en strømningshastighet på 2 ml/min.

(system A) (R-^). Deteksjonen var ved 260 nm ved anvendelse av et Waters Lambda Max Spectrophotometer, model 480.

Konjugatene ble analysert på en C18-kolonne med en lineær gradient fra 40$ vann: 50$ acetonitril: 10$ THF til 50$ acetonitril; 50$ THF inneholdende 0,1$ TFA over 5 min. ved en strømningshastighet på 2 ml/min. (system B); (R-^).

Preparativ HPLC

Separasjoner ble utført på en Millipore Waters DeltaPrep 4000 HPLC ved bruk av PrepPak<R> eller C18 revers-fase-kolonne (Prep Nova-Pak HR 40xl00mm) eluert med lineære gradienter ved bruk av det samme elueringsbuffersystemet som analytisk HPLC ved strømningshastigheter på 20 ml/min.

Kjernemagnetisk resonans (NMR)

NMR-spektra ble registrert med et 200 MHz Bruker spektrome-ter.

Syntese

To alternative metoder ble benyttet i syntesen av palmitoyl-derivater av indometacin og ibuprofen. I den ene ble de aktive estrene av NSAID-forbindelsene reagert med den nylig fremstilte, rensede GTP1, GTP2, GTP3 eller ATP1, AT02 og ARP3, og i den andre ble de aktive estrene reagert med Ala-Tris eller Gly-Tris, produktene renset og så palmitoylert for å gi en blanding av mono-, di- og tripalmi tater. Disse ble så separert og renset som beskrevet. Indometacinetanol-amid og indometacin-glycin-etanolamidderivater ble syntetisert via aktiv esterkjemi og palmitoylert.

Fremstilling av Gly- Tris

Forbindelsen i tittelen ble oppnådd med kvantitativt utbytte ved hydrogenering av en oppløsning av Z-Gly-Tris i etanol ved 40 atm. trykk i en Parr-hydrogenator i nærvær av palladium-på-karbon (10$). Fjerning av benzyloksykarbonylgruppen ble fulgt ved HPLC (system A). Katalysatoren ble fjernet ved filtrering og vasket med etanol. Avdamping av oppløsningsmid-let ga produktet i tittelen med 95$ renhet som vist ved ^H NMR-spektroskopi. Ala-Tris ble fremstilt på en analog måte. Fremstillingen av Z-Gly-Tris og Z-Ala-Tris er beskrevet i Whittaker, R.G., Hayes, P.J., and Bender, V.J. (1993) Peptide Research 6, 125 og Australian Patent nr. 649242.

Fremstilling av indometacin- Gly- Tris

Til en omrørt oppløsning av indometacin (1 g, 2,80 mmol) i DMF (50 ml), ble det tilsatt HOSu (484 mg, 4,2 mmol). Oppløsningen ble avkjølt til 0°C og en oppløsning av DCC (618 mg, 3 mmol) i DCM (5 ml) ble tilsatt. Omrøringen ble fortsatt ved romtemperatur i 2 timer for å gi den aktive esteren i 92$ utbytte (HPLC, System A, Rt 8,38 min). DCU ble fjernet ved filtrering og vasket med DCM. De sammenslåtte filtratene ble tilsatt til en oppløsning av Gly-Tris (1,70 g, 9 mmol) i DMF (10 ml) og omrøringen fortsatte ved romtemperatur i 4 timer. Forbindelsen i tittelen ble dannet med 85$ utbytte som bestemt ved HPLC (system A). Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk, og gjenværende olje ekstrahert med etylacetat og tørket (MgSO^j) for å gi forbindelsen i tittelen som en gul olje (0,91 g, 61$ av teoretisk utbytte). HPLC (system A) ga en enkel topp, Rt 5,35.

Fremstilling av indometacin- Gly- Tris- palmitater

Til en oppløsning av indometacin-Gly-Tris (800 mg, 1,48 mmol) i DMF (20 ml), palmitinsyre (570 mg, 2,22 mmol) i DCM (20 ml), DCC (310 mg, 1,5 mmol) og DMAP (20 mg) ble tilsatt ved 0°C under omrøring. Reaksjonen ble fulgt av HPLC (system B). Etter 16 timer under disse betingelsene ble mono-, di- og tripalmitater dannet i et 66:30:4-forhold. Oppløsningsmidlet ble avdampet til tørrhet, resten gjenoppløst i DCM (100 ml) og vasket med vann, sitronsyre (10$), natriumhydrogenkarbonat (5$) og vann (100 ml hver) og tørket (MgS04). Mono-, di- og tripalmitater ble separert ved preparativ HPLC på en C4-kolonne (system B) for å gi produkter som ga enkle topper på analytisk HPLC, Rt 7,49, 8,93 og 9,80. ft NMR av alle disse tre proudktene indikerte imidlertid at noe spalting av indometacinmolekylet opptrådte under reaksjonen, mest sannsynlig på grunn av effekten av vandig alkali, slik at en alternativ fremgangsmåte for disse syntesene ble benyttet.

Fremstilling av GTP1. GTP2 og GTP3

Disse forbindelsene ble oppnådd ved hydrogenering av Z-Gly-Tris-mono-, di- og tripalmitater ved 40 atm. trykk i en Parr hydrogenator i nærvær av palladium-på-karbon (10$) i etanol. Fjerningen av benzyloksykarbonylgruppen ble fulgt ved HPLC (system B). Etter fjerning av katalysatoren ved filtrering og avdamping av oppløsningsmidlet GTP1, GTP2 og GTP3 ble oppnådd med kvantitativt utbytte. Syntesene og rensingen av Z-GTP1, Z-GTP2, Z-GTP3 og de tilsvarende alanylforbindelsene ble beskrevet i Whittaker, R.G., Hayes, P.J. og Bender, V.J.,

(1993), Peptide Research 6, 125-128, og Autralian Patents Research 6, 125-128 og australsk patent nr. 649249. Den samme kilden beskriver syntesen av mono-, di- og triformene av myristat, laurat og kaprat.

De følgende ^H NMR-data blir vist som eksempler på renhet:

1H NMR og GTP2

<*>H NMR (CDClg, S, ppm): 0,87 (6H, t, palmitat (CH3), J=6,4Hz), 1,19-1,42 (52H, m, CH2). 1,60 (4H, m, palmitat (eCH2), 2,33 (4H, t, Palmitat (a-CH2), J=7,2Hz), 3,41 (1H, brs, OH), 3,70 (2H, q, Gl.y(CH2), J=7Hz) , 3,80 (2H, s, Tris(CH2)), 4,17 (2H, d, Tris(CH2), J=10,4Hz), 4,31 (2H, d, Tris(CH2), J=ll,2Hz), 7,92 (2H, brs, NH2).

1H NMR av Z- GTP2

XE NMR (CDCI3, S, ppm): 0,89 (6H, t, Palmitat (CH3), J=6,4Hz), 1,19-1,42 (52H, m, CH2), 1,61 (4H, m, Palmitat (eCH2)) 2,31 (4H, t, Palmitat (aCH2), J=7,2Hz), 3,8 (2H, d, Tris(CH2), J=5,5Hz), 3,82 (2H, d, Gly(CH2), J=8Hz) , 4,21 (2H, d, Tris(CH20C0), J=ll,6Hz), 4,39 (2H, d, Tris(CH20C0), J = ll,4Hz), 5,14 (2J, s, Ar-CH2), 5,31 (1H, t, glyamid NH), J=5,4Hz), 6,55 (1H, s, Tris(amid NH), 7,35 (5H, m, Ar (H)).

Produksjon av indometacin- Gly- Tris- dipalmitat

Til en oppløsning av indometacin (716 mg, 2 mmol) i tørr DMF (15 ml) TSTU (Finka, 85972), (1,20 g, 4 mmol) i DMF (10 ml) ble tilsatt. Den påviste pH i oppløsningen ble holdt ved 8,3 med DIEA og blandingen ble omrørt ved romtemperatur. Dannelsen av den aktive esteren ble målt ved revers fase HPLC på en C18-kolonne (system A). Reaksjonen var fullstendig i løpet av 1 time; Rt til indometacin, 8,08 min.; indometacin-OSu, 8,38 min.

Denne oppløsningen ble tilsatt dråpevis til en oppløsning av Gly-Tris-dipalmitat (GTP2, 640 mg, 1 mmol) i DCM (10 ml). Den påviste pH ble holdt ved 8,3 med DIEA og reaksjonen ble fulgt ved HPLC på en C^g-kolonne (system B). Etter at den relative arealtellingen indikerte at reaksjonen hadde opptil 65-70$ fullførelse, ble oppløsningen avdampet til tørrhet under redusert trykk.

Forbindelsen i tittelen ble oppnådd i form av et hvitt faststoff etter kromatografi på silikagel (kieselgel S, 0,063-0,2 mm, for kolonne-kromatografi, Riedel de Haen A.G.) eluert med etylacetat/heksan (1:9) til (6:4). Fraksjonene ble analysert ved HPLC (system B). Fraksjoner inneholdende det rene produktet ble slått sammen, avdampet til tørrhet og lyofilisert fra tert.butanol.

Oppløsningen fra en prøve av produktet i DCM (10 mg/ml), ga en enkel topp på HPLC, Rt 8,89 høyere enn 95$ renhet som demonstrert ved ^H NMR.

1-HNMR (CDC13, S, ppm): 0,86 (6H, t, palmitat CH3), J=6,4Hz), 1,02-1,39 (52H, m, CH2) , 1,59 (4H, m, palmitat (PCH2) 2,32 (4H, t, palmitat (cxCH2), J=7,4Hz), 2,39 (3H, s, CH3) 3,69 (2H, s, 0CH2) 3,77 (2H, t, Gly(CH2), J=5,2Hz), 3,82 (5H, s, Tris(CH2), OCH3), 4,19 (2H, d, Tris(CH2), J=12,2Hz), 4,37 (2H, d, Tris(CH2), J=ll,6Hz), 6,23 (1H, t, glyamid NH), J=5,4Hz), 6,55 (1H, s, Tris(amid NH) 6,70 (1H, dd, Ar (CH), J=2,4, 8,8Hz), 6,91 (1H, d, Ar (CH), J=9,lHz), 6,93 (1H, d, Ar (CH)J=2,4Hz), 7,49 (2H, d, Ar (CH), J=8,5Hz), 7,68 (2H, d, Ar (CH), J=8,8Hz).

Produksjon av indometacin- Gly- Tris- tripalmitat

Forbindelsen i tittelen ble fremstilt på en måte analogt med den beskrevet ovenfor for dipalmitatderivatet. Indometacin (716 mg, 2 mmol), TSTU (1,2 g, 4 mmol) og Gly-Tris-tripalmitat (950 mg, 1 mmol) ble reagert og overvåket ved HPLC (system B). Forbindelsen i tittelen ble oppnådd etter rensing på silikagel for å gi den kromatografisk rene forbindelsen med en R-^ 9,42 (system B).

Fremstilling av indometacin- glycin

Til en suspensjon av indometacin (500 mg, 1,40 mmol) i acetonitril (20 ml) ble det tilsatt HOSu (177 mg, 1,54 mmol) og DCC (317 mg, 1,54 mmol) og oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. En oppløsning av glycin (178 mg, 2,38 mmol) og trietylamin (184 mg, 1,82 mmol) i vann (10 ml) ble tilsatt til den resulterende indometacin-hydroksysuksini-midesteren og omrørt i 2 timer, fortynnet med vann (60 ml), surgjort med IM HC1 og ekstrahert med etylacetat (80 ml). Etter tørking (MgS04) ble oppløsningen avdampet til tørrhet for å gi et gult faststoff, som ble rekrystallisert fra etylacetat/heksan for å gi forbindelsen i tittelen (406 mg, 70$ teoretisk) i 95$ renhet som bestemt ved 1H NMR.

Fremstilling av indometacin- glycin- etanolamid

Til en oppløsning av indometacin-glycin (1,5 g, 3,62 mmol) i acetonitril/DMF (60 ml, 5:1) ble tilsatt HOSu (460 mg, 3,98 mmol) og DCC (820 mg, 3,98 mmol) og oppløsningen ble omrørt i 3 timer inntil reaksjonen var fullstendig. Etanolamin (445 mg, 7,3 mmol) ble tilsatt og omrørt kontinuerlig ved romtemperatur i 1 time. Etylacetat (300 ml) ble tilsatt og oppløsningen vasket med IM HC1 (120 ml) vann og mettet med en NaCl-oppløsning (hver gang 120 ml) og tørket (MgS04). Avdamping av oppløsningsmidlet ga det rå produktet i tittelen, som på rekrystallisering fra etylacetat/heksan ga forbindelsen i tittelen (1,45 g, 88$ av teoretisk) som et gult faststoff.

Fremstilling av indometacin- glycin- etanolamid- palmitat

Til en suspensjon av indometacin-glycin-etanolamid (410 mg, 0,89 mmol) i DCM/DMF (25 ml, 9:1) ble det tilsatt palmitinsyre (240 mg, 0,93 mmol) DMAP (10 mg) og DCC (192 mg, 0,93 mmol), og oppløsningen ble omrørt i 16 timer. Oppløsningen ble fortynnet med DCM (50 ml) og vasket med IM HC1, vann og mettet NaCl-oppløsning (hver gang 50 ml) og tørket (MgS04). Etter fjerning av oppløsningsmidlet ble resten kromatografert på silika. Eluering med DCM/etylacetat ga forbindelsen i tittelen som et et gult faststoff. Endelig rensing ved rekrystallisering fra etanol (utbytte 510 mg, 82$ av teoretisk).

Fremstilling av indometacin- etanolamid

Til en oppløsning av indometacin (1,0 g, 2,80 mmol) i acetonitril (50 ml) ble det tilsatt HOSu (335 mg, 2,9 mmol) og DCC (605 mg, 2,9 mmol) og oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Etanolamin (340 mg, 5,5 mmol) ble tilsatt og oppløsningen ble omrørt i ytterligere 2 timer. DCU ble fjernet ved filtrering og vasket med DCM. De sammenslåtte filtratene og vaskevannet ble avdampet og resten oppløst i DCM (50 ml), vasket med IM HC1 (30 ml) og vann (30 ml) og tørket (MgS04). Avdamping av oppløsningsmidlet ga forbindelsen i tittelen som et gult faststoff (1,1 g, 98$ av teoretisk). Rekrystallisering fra etylacetat/heksan med noen få dråper DCM ga det rene produktet som et lysegult faststoff (750 mg, 67$ av teoretisk).

<1->HNMR (CDC13, S, ppm), 2,37 (3H, s, CH3) , 2,78 (1H brs, OH), 3,36 (2H, dt, CH2, J=5,5,5,5 Hz), 3,65 (4H, brs, CH2C0,CH2-0H), 3,82 (3H, s, 0CH3), 6,16 (1H, brt, amid NH, J=5,5Hz), 6,68 (1H, dd, Ar(CH), J2,4, 9, 1Hz) , 6,87 (1H, d, Ar(CH), J=9,lHz), 6,90 (1H, d, Ar(CH), J=2,4Hz), 7,46 (2H, d, Ar(CH), J=7,9Hz), 7,64 (2H, d, Ar(CH), J=7,9Hz).

Fremstilling av indometacin- etanolamid- palmitat

Til en oppløsning av indometacin-etanolamid (600 mg, 1,50 mmol) i DCM (10 ml) ble det tilsatt palmitinsyre (405 mg, 1,58 mmol), DMAP (10 mg) og DCC (320 mg, 1,55 mmol). Oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer og fortynnet med DCM (50 ml), vasket med IM HC1 (50 ml) og vann (50 ml) og tørket (MgS04). Etter avdamping av oppløsningsmid-let ble råproduktet oppnådd som et svakt oljeaktig faststoff, som så ble renset ved kromatografi på silika. Eluering med DCM/etylacetat (9:1) til (8:2) for å gi forbindelsen i tittelen. Rekrystallisering fra etylacetat ga 610 mg, (66$ av teoretisk) av et tett faststoff. -'■HNMR (CDCI3, S, PPm) 0,86 (3H, t, palmitat (CH3, J=6,4 Hz), 1,20-1,42 (26H, m), 1,46 (2H, m, palmitat (f3CH2)), 2,05 (2H, t, J=7,9Hz), 2,38 (3H, s, CH3) 3,4 5 (2H, dt, C0NHCH2, J=5,5, 5,5Hz), 3,63 (2H, s, CH2) 3,80 (3H, s, 0CH3), 4,08 (2H, t, CH2-0CO J=5,5Hz), 5,95 (1H, brt, amid NH, J=5,5Hz), 6,67 (1H, dd, Ar(CH), J = 2,4, 9,1Hz) , 6,84 (1H, d, Ar(CH), J=9,lHz), 6,85 (1H, d, Ar(CH), J=2,4Hz), 7,47 (2H, d, Ar(CH), J=8,5Hz), 7,70 (2H, d, Ar(CH), J=8,5Hz).

SYNTESE AV IBTJPROFENKONJUGATER

Fremstilling av ibuprofen- Ala- Tris- monopalmitat

Ibuprofen (206,3 mg, 1 mmol) i DMF (5 ml) ble reagert med TSTU (377 mg, 1,25 mmol) som hadde blitt oppløst i DMF (5 ml) ved pH 8,5 (DIEA). Dannelsen av ibuprofen-OSu ble overvåket ved HPLC (system A) og ble funnet å være komplett i 10 min, Rt<A> 5,70. Til denne blandingen ble en oppløsning av ATPI (536 mg, 1,25 mmol) i DCM (10 ml) tilsatt og pH oppnådd ved HPLC (system B). Ved fullførelsen av reaksjonen ble oppløsnings-midlet avdampet under redusert trykk. Bearbeidet HPLC på en C4-kolonne ga den kromatografisk rene prøven, Rt 7,83.

Ibuprofen- Ala- Tris- dipalmitat

Forbindelsen i tittelen ble fremstilt på samme måte som beskrevet ovenfor for monopalmitatet. Ibuprofen-OSu ble reagert med ATP2 (835 mg 1,25 mmol) for å gi den kromatografisk rene prøven, Rt 9,17 min.

Ibuprofen- Ala- Tris- tripalmitat

Produktet i tittelen ble syntetisert som ovenfor; ibuprofen-OSu ble reagert med ATP3 (1,134 g, 1,25 mmol) for å gi en kromatografisk ren prøve, R-^ 10,43.

Molekylvekt til ibuprofenpalmitater ble bestemt ved masse-spektrometri for å gi rene topper på 619,5, 858,0 og 1096,5, i godt samsvar med beregnet molekylvekt. ^-H NMR-studier av disse prepareringene indikerte imidlertid at prosedyren resulterte i en racemisk blanding, slik at en alternativ metode ble benyttet, som omfattet sepreringen av isomerer ved krystallisering av ibuprofen-Alfa-Tris-forbindelsen.

Fremstilling av ibuprofen- Ala- Tris

Til en oppløsning av ibuprofen (3 g, 14,5 mmol) i DCM (50 ml) ble det tilsatt HOSu (2,49 g, 21,6 mmol) og DIEA (1,25 ml, 7,25 mmol) og oppløsningen ble avkjølt til 0°C. DCC (3 g, 14,5 mmol) oppløst i DCM (20 ml) ble dryppet opp i reaksjonsblandingen. Den ble omrørt ved 0°C i 2 timer fulgt av kontinuerlig omrøring ved romtemperatur i 12 timer for å oppnå den aktiverte esteren (ibuprofen-OSu) i 95$ utbytte ved HPLC. DCU-utfell ingen ble filtrert fra og Ala-Tris (2,77 g, 14,5 mmol) oppløst i DMF (10 ml) ble tilsatt til reaksjonsblandingen og omrøringen fortsatte ved romtemperatur i 4 timer. Forbindelsen i tittelen ble dannet med 70$ utbytte ved HPLC. R-tA; 5,43. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og den oljeaktige resten ble oppløst i DCM og vasket med sitronsyre (4$), natriumbikarbonat (5$) og vann. DCM ble tørket (MgS04) og avdampet til tørrhet for å oppnå 5,4 g av en oljeaktig forbindelse. Den oljeaktige resten var en 50/50 racemisk blanding som ble identifisert ved dets ^HNMR-spektrum. Dublettoppen av metylproton av alanin og ibuprofen av diasteroisomerene var skilt med omkring 6 Hz fra hverandre. -'■HNMR av blandingen (CDCL3, S, ppm) : 0,89 (6H, d, Ibu (CH3), J=6,4 Hz), 1,22, 1,25 (3H, 2d, Ala (BCH3), J = 5,2 Hz), 1,40, 1,43 (3H, 2d, Ibu (BCH3), J=4,9 Hz), 1,86 (1H, m, Ibu (CH)), 2,46 (2H, d, Ibu (CH2), J=7 Hz), 3,57 (1H, q, Ibu (aCH), J=7,9 Hz), 3,67 (6H, s, Tris (CH2), 4,14 (3H, brs, Tris (OH)), 4,28 (1H, m, Ala (ocCH), 5,99, 6,02 (1H, 2d, Ala amid NH), J=6,7Hz, 7Hz), 7,09 (1H, s, Tris-(amid NH), 7,16 (4H, m, Ar (H)).

De to forskjellige diasteroisomerene ble separert med suksess ved delvis krystallisering av racematet i DCM (1,6 g). Tilsvarende arbeid har også blitt beskrevet av M. Bodanszky, "Principles of Peptide Synthesis", volum 16, Springer-Verlag, Berlin 1984. ^HNMR av krystallene og den oljeaktige resten bekreftet renheten av diasteroisomerene. 1.HNMR av krystallet (CDC13, S, ppm) : 0,89 (6H, d, Ibu (CH3) , J=6,4 Hz), 1,3 (3H, d, Ala (HC3), J=7,6 Hz), 1,48 (3H, d, Ibu (CH3), J=7,3 Hz), 1,86 (1H, m, Ibu (CH)), 2,46 (2H, d, Ibu (CH2), J=7 Hz), 3,57 (1H, q, Ibu (aCH), J=7,9 Hz), 3,67 (6H, s, Tris (CH2)), 4,14 (3H, brs, Tris (0H), 4,28 (1H, m, Ala (aCH), 6,02 (1H, d, Ala amid NH, J=6,4 Hz), 7,09 (1H, s, Tris (amid NH)), 7,16 (4H, m, Ar (H) ).

Ibuprofen- Ala- Tris- palmitater

Til en oppløsning av ibuprofen-Ala-Tris (krystallinsk produkt, 1,2 g, 3 mmol) i en 50$ tørr DCM/DMF oppløsnings-middelblanding (40 ml) ble tilsatt palmitinsyre (0,924 g, 3,6 mmol) og en katalytisk mengde av DMAP (20 mg) og reaksjonsblandingen ble avkjølt til 0°C. DCC (0,77 g, 3,6 mmol) oppløst i DCM (20 ml) ble dryppet i reaksjonsblandingen. Den ble omrørt ved 0°C i en time og ved romtemperatur i 20 timer. Forholdet av mono-, di- og tripalmitater av ibuprofen var 55$, 39$ og 6$ ved HPLC /system B).

Oppløsningsmidlet ble avdampet til tørrhet og resten ble gjennoppløst i DCM, DCU ble filtrert av og filtratet ble vasket med natriumbikarbonat (5$) og vann. Preparativet for HPLC av denne blandingen på en C18-kolonne ga forbindelser med høy renhet av monopalmitat (520 mg, Rt: 7,81 min.), dipalmitat (720 mg, Rt: 9,24 min.) og tripalmitat (63 mg, Rt:10,29 min.)~forbindelser (totalt utbytte: 56$).

1-HNMR av monopalmitatet (CDC13, S, ppm) : 0,87 (3H, t, palmitat (CH3), J=6,4 Hz) 0,89 (6H, d, Ibu (CH3), J=6,4 Hz), 1,13-1,40 (26H, m, palmitat (CH2)), 1,49 (3H, d, Ibu (PCH3), J=7 Hz), 1,58 (5H, m, Ala (pCH3), palmitat (CH2)), 1,86 (1H, m, Ibu (aCH))), 2,46 (2H, d, Ibu (CH2), J=7 Hz), 3,56 (1H, q,

Ibu (aCH), J=7 Hz), 3,64 (2H, t, Tris (CH2), J=7,9 Hz), 3,74 (2H, t, Tris (CH2) , J=6,lHz), 3,82 (1H, t, TrisOH), J=6,4Hz), 3,99 (1H, t, Tris(OH), J=6,7 Hz), 4,26 (2H, s, Tris(CH2)), 4,27 (1H, m, Ala(aCH)), 5,77 (1H, d, Ala amid NH), J=6,7 Hz), 6,87 (1H, s, Tris-NH), 7,16 (4H, mAr(H)).

Fremstilling av salicvlat- Tris

Metylsalicylat (2,3 g, 15,1 mmol) ble reagert med Tris (14,8 g, 120,8 mmol) i DMF (182 ml) og vann (121 ml) ved pH 9,0 og 60°C i 48 timer. Dannelsen av produktet i tittelen (Rt 3,95) fra metylsalicylat (Rt 7,66) ble overvåket ved HPLC (system A) inntil reaksjonsblandingen stoppet ved 75$ fullførelse. Blandingen ble så avdampet til tørrhet under redusert trykk og prøven oppløst i vann. pH ble justert til 4,5 og forbindelsen i tittelen ble renset ved preparativ HPLC fulgt av ionebyttekromatografi (Amberlite IR63 harpiks) for å gi den kromatografisk rene salicylat-Tris (3,66, 65$ av teoretisk).

Salicylat-Tris er så rede for reaksjon med en til tre fettsyrer.

ANTI-lNFLAMMATORISK EFFEKT AV MODIFISERT NSAID'S

ETTER AKUTT UVB-INDUSERT FOTOSKADE

PÅ SKH-1 HÅRLØSE MUS

Introduksjon

Kronisk eksponering av albino hårløse mus (SKH-1) for sub-erythemale doser av ultraviolett (UV) lys induserer både synlige og histologiske forandringer i huden (Bissett et al., 1990). Akutt eksponering for lys induserer solbrenningserythema og ødem. Begge disse effektene er forbigående og forsvinner i løpet av få dager.

Kaidbey og Kurban, i 1976 og Snyder i 1975, undersøkte begge graden ved hvilken topikal indometacin ville undertrykke solbrenningserythema hos mennesker og marsvin. I deres eksperimenter ble indometacin funnet å ha en utpreget effekt på erythema. Konsentrasjonene, ved hvilken det ble funnet å være mest effekt at 2, 5% indometacin i en propylenglykol: etanol:dimetylacetamidbærer (19:19:2). Individene mottok 3 MED's (mediane erythemadoser) av UV-lys og indometacinbe-handling ved denne konsentrasjonen ga total beskyttelse.

Metode

Grupper på 3 hunnkjønnsmus ble eksponert til 3 MED av UVB på deres dorsale overflate, og ble så umiddelbart malt (ved smøring av den topikale oppløsningen over den dorsale overflate) med 60 pl eller 100 jjI bærer, eller bærer inneholdende økende konsentrasjoner av NSAID eller NSAID fettsyrekonjugater. Bæreren benyttet var en variasjon av tidligere publiserte bærere og bestod av etanol:DMS0 ved et 5:1.1-forhold. Testene NSAID og deres konjugater ble enten påført etter UVB-bestrålning for å redusere muligheten til solskjærmingsef f ekt (dag 0), eller 1 til 5 dager før UVB-eksponering. Ødemet ble så bestemt ved måling av hudens foldetykkelse (SFT) av en foldet midt-dorsal bit av huden ved å anvendelse av et håndholdt mikrometer. Målinger ble tatt ved 0 timer, rett før UVB-eksponering og ved 24 timer etter UNB-eksponering. En kontrollgruppe, valgt med 60 eller 100 pl bærer, ble benyttet for å bestemme økningen av hudoødem på grunn av den inflammatoriske respons. Tids-punktet, 24 timer, ble funnet å vise maksimalt hudødem. Pre-UVB SFT-målingen ble trukket fra 24 timers SFT-måling for å bestemme netto hudfoldøkelse (NSFT)).

Resultater

Indometacinbeskyttelse mot ødem.

Som en preliminær studie med evne til indometacin for å beskytte mot ødem hos Skh-l-mus ble bestemt. Indometacin over et konsentrasjonsområde fra 0, 1% til 2, 5% ble påført etter at musen hadde blitt bestrålet med UVB; ikke-bestrålede kontroller ble også kjørt. Initielt ble det funnet at konsentrasjoner på 2$ og over, var indometacin letalt etter 36 timer ved å indusere typisk gastrointestinalblødning. Dette førte til at 1$ indometacin ble satt opp som øvre konsentrasjon i ytterligere eksperimenter. Unge mus ble funnet enda mer mottagelig for gastrointestinal skade, og en grense på 0,75$ indometacin ble satt. NSFT-måling for dette eksperimentet er representert i figur 1 (A 24 timer indometacin NSFT).

Mus som ikke hadde blitt eksponert for UVB og malt med bærer eller bærer pluss indometacin, viste ingen tegn på erytema eller ødem, noe som indikerte at hverken bæreren eller applikasjonsmetoden eller indometacin induserte en inflammatorisk respons. Musen som hadde blitt eksponert for UVB og behandlet med indometacin viste en reduksjon i erythema og ødem med økende konsentrasjoner av indometacin. Konsentrasjoner på 0,1$ indometacin hadde en mild anti-inflammatorisk effekt, med maksimal beskyttelse ved 1$ indometacin og over.

Indometacin- f ett- acylkon. jugat resultater

Indometacinfettacelkonjugatene ble undersøkt ved anvendelse av en ikke-eksponert gruppe Skh-1 hunnkjønnsmus. Det hadde blitt bestemt tidligere at de rå indometacinfettacylkon-jugatene ikke var beskyttende konsentrasjoner under 1$ (w/v basert på indometacininnholdet) (data ikke vist). Konsentrasjonene testet ifølge eksperimentene var 2$ (w/v basert på indometacininnholdet) og ble påført på huden enten etter eksponering for UVB eller 5 dager, 3 dager eller 1 dag før UVB-eksponer ing.

En prøve på 100 jjI av en 1$ (w/v) oppløsning av indometacin i en 5:1 etanol:DMSO-bærer ble malt på den dorsale overflaten av den hunnkjønns hårløse musen (Skh-1) ved tidsintervaller før eksponering for UVB, dager -5 til -1 og etter UVB-eksponering dag 0. Deres NSFT ble beregnet ved 24 timer etter eksponering og presentert i figur 2 (<> bærer; x 1$ indometacin). En logaritmisk tilpasning av dataen indikerer at 1$ indometacin mister dets beskyttende effekt på UVB-indusert ødem etter som intervallet av påføring før eksponering øker.

I figur 3 blir grupper Skh-1 mus malt med 100 ul prøver av rå 2$ indometacin-glycin-Tris-dipalmitat (30$ rent kontaminert med GTP2; fri for ukoblet indometacin) ved de samme tids-intervallene før UVB-eksponering som for fri indometacin i figur 2 ( O bærer; x 2$ indometacin-GTP2). En lineær tilpasning av data indikerer en forskjellig profil med den sett med ikke-modifisert indometacin. Fotobeskyttelse mot UVB indusert ødem var mest uttalt ved 5 dager før eksponering med UVB, noe som indikerer en forlenget beskyttelse mot UVB før indusert ødem opptrådte.

Indometacin ble funnet å være omkring 50$ beskyttende 3 dager før eksponering med UVB, men denne beskyttelsen var ikke tilstede 5 dager før eksponering, figur 2. Indo-GTP2 ble funnet å være mest beskyttende 5 dager før bestråling med

UVB.

I figur 4 ble grupper av 3 mus malt med 2$ oppløsninger (indometacinekvivalent) av høy renhet indometacin-glycin-Tr is-dipalmitat (Indo-GTP2), indometacin-glycin-Tris-tripalmitat (Indo-GTP3), indometacin-etanolamin-monopalmitat (Indo-EPl) eller indometacin-glycin-etanolamin-monopalmitat (Indo-GEPl) og testet for forlenget beskyttende aktivitet ved maling 5 dager før UVB-eksponering eller for umiddelbar aktivitet ved maling umiddelbart etter UVB-eksponering; 0 dager. Kontrollene var 0,75$ indometacin og bærer (5:1 etanol:DMS0). Indometacin-GTP2 ble funnet å ha de høyeste nivåene av forlenget og umiddelbar aktivitet. Dette bekreftet funnet vist i figur 3 for de rå preparatene.

Ibuprof en- alanin- Tr i s- f et tacvlkon. iugat resultater

Eksperiment ved undersøkelse av anti-inflammatoriske effekter av ibuprofen-fettacylkonjugater har indikert at de er aktive ved beskyttelse mot UVB-indusert ødem. Figur 5 viser 2% og 4$ resultater for ibuprofenfettsyrekonjugater.

Grupper på 3 mus ble eksponert for 3 MED av UVB og så malt med 4$ (ibuprofenekvivalent) oppløsninger av ibuprofen-alanin-Tr is-monopalmitat (Ibu-ATPlc), ibuprofen-alanin-Tris-dipalmitat (Ibu-ATP2c), ibuprofenalanin-Tris-tripalmitat (Ibu-ATP3c, ved 2$) eller ibuprofenalanin-Tris (Ibu-AT). Kontrollene var 4$ ibuprofen (Ibu) eller bærer alene.

Umiddelbar aktivitet resultater. - Høyest til lavest

4$ Ibu=4$ Ibu-ATP>4$ Ibu-ATP2>4$ Ibu-AT=2$ Ibu-ATP3

(c= krystallinsk Ibu-alanin-Tris form benyttet i syntesen.)

Ibuprofen- Tris- fettacylkon. iugatef fekt på forbrenninger

Et etterfølgende funn med ibuprofen-fettsyrekonjugater var deres overraskende evne til å redusere UVB-forbrenninger og resultatene av en serie eksperimenter med ibuprofen-alanin-Tris-monopalmitat er vist i tabell 1.

TABELL 1. Effekt av ibuprofen og ibuprof en- ATPl nå UVB-induserte forbrenninger

Grupper av 3 mus ble eksponert for 3MED UVB og så malt med 100 ul mengder av 2$ ibuprofen-alanin-Tris-monopalmitat (ibu-ATP1). Musene ble så sammenlignet med 2% ibuprofen (ibu cont) eller bærer (bærere) kontroller, over en 8 dagers periode, og resultatene er satt opp i tabellen nedenfor. Den maksimale UVB-f orbrenning er angitt som 5 og den minimale forbrenning som 1. Dersom ingen forbrenning var tilstede, ble en 0 benyttet.

Individuelle verdier er vist for hver mus, dvs. et resultat som vises som 5, 4, 3 er forstått som at den første musen hadde en alvorlig forbrenning, den andre musen en moderat til alvorlig forbrenning og den tredje musen en moderat forbrenning .

Resultatene for disse eksperimentene indikerer at ibuprofen-alanin-Tris-monopalmitat (Ibu-ATP) har en beskyttende effekt på UVB-induserte forbrenninger i mye større grad enn ikke-modifisert ibuprofen. Dette ble sett som en initiell reduksjon i forbrenningsrespons og så en hurtigere oppløs-ningen av forbrenning resulterer i normalepidermis. Dette resultatet synes å være uavhengig av ødemreduksjon etter som 2$ ibuprofen (enten som konjugat eller som det frie medika-mentet) har liten effekt på ødem ved denne konsentrasjonen. I tillegg har indometacinnivåer som forhindrer ødem til-synelatende liten eller ingen effekt på forbrenningsrepara-s j on.

Konklusj on

NSAID-fettsyrekonjugater forandrer biotilgjengeligheten av indometacin og ibuprofen når påført topikalt. Denne foran-dringen i biotilgjgengelighet er muligens på grunn av en egenskap ved sakte frigiving som tillater forlenget beskyttelse mot UVB indusert ødem. Ibuprofen-fettacylkonjugater som gis for øket forbrenningsbesskyttelse ved å akselerere forbrenningshelingen etter akutt UVB-eksponering. Foreliggende oppfinnere har vist at den ikke-steroidale anti-inf lammatoriske forbindelseskomponenten av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, opprettholder sin aktivitet i konjugatet og at denne aktiviteten er vedvarende og forlenget. Som det er blitt foreslått i den vitenskapelige litteraturen at ikke-steroidal anti-inflammatoriske forbindelser kan ha anti-tumoraktivitet, er det antatt at forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan finne anvendelse i dette området.

Fagmannen vil forstå at forskjellige variasjoner eller relasjoner ved oppfinnelsen er vist i foreliggende spesifikke utførelsesformer, uten å forlate ånden og rammen som blir beskrevet. Foreliggende utførelsesformer er derfor ansett på alle måter som illustrative og ikke restriktive.

Referanser

1. Bissett, D.L., Chatterjee, R. og Hannon, D.P., 1990.

Photodermatol Photoimmunol Photomed, vol.7, s. 153-158.

2. Reeve, V.E., Personal communication.

3. Kaidbey, K.H. og Kurban, A.K. 1976. J. Invest. Dermatol. 1976, vol. 66, s.153-156. 4. Snyder, D.S. 1975. J.Invest.Dermatol., vol. 64, s.322-325.

Claims

1. Forbindelse, karakterisert ved den følgende formel: hvor X er en ikke-steroidal anti-inflammatorisk forbindelse Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid eller avstandsgruppe B er H eller CH20 - R3; og R]_, R2 og R3 er like eller forskjellige og er enten hydrogen, metyl, etyl, hydroksyl eller en acylgruppe som er avledet fra en fettsyre under den forutsetning at minst hver av R^, R2 og R3 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

2 . Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den ikke-steroidale anti-inflammatoriske forbindelsen omfatter en karboksylsyregruppe.

3. En forbindelse ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved_ at den ikke-steroidale anti-inflammatoriske forbindelsen er valgt fra gruppen omfattende salicylat, acetylsalicylat, salsalat, diflunisal, fendosal, indometacin, acemetacin, cinmetacin, sulindac, tolmetin, zomepirak, diklofenak, isoksepak, ibuprofen, flurbiprofen, naproksen, ketoprofen, fenoprofen, benoksaprofen, indoprofen, pirprofen, karprofen, mefenaminsyre, flufenaminsyre, meklofenamat, nifluminsyre , tolfenaminsyre , fluniksin og kloniksin.

4 . Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 3, karakterisert ved at X er valgt fra gruppen omfattende acetylsalicylat, salicylat, indometacin og ibuprofen.

5 . Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 4, karakterisert ved at R^, Eg og E3 er enten hydrogen eller en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

6. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 5, karakterisert ved at hver av , E2 og E3 er acylgrupper avledet fra fettsyrer, og fortrinnsvis er hver den samme acylgruppen.

7. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 6, karakterisert ved at hver av E^, E2 og E3 er acylgrupper avledet fra fettsyrer som har en karbonkjede fra 3 til 18 karbonatomer, mer foretrukket 10 til 18 karbonatomer, og mest foretrukket 16 karbonatomer.

8. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 7, karakterisert ved at Y enten er fraværende eller er alanin eller glycin.

9. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 8, karakterisert ved at forbindelsen er valgt fra gruppen omfattende salicylat-Tris-tripalmitat, salicylat-Tris-dipalmitat, salicylat-Tris-monopalmitat, ibuprofen-alanin-Tris-tripalmitat, ibuprofen-alanin-Tris-dipalmitat, ibuprofen-alanin-Tris-monopalmitat, indometacin-glycin-Tris-monopalmitat og indometacin-glycin-Tris-tripalmitat, hvor "Tris" betyr hydroksymetylaminometan.

10. Forbindelse, karakterisert ved den følgende formel: hvor X er en ikke-steroidal-anti-inflammatorisk forbindelse, Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid eller en avstandsgruppe, og E4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

11. Forbindelse ifølge krav 10, karakterisert ved at den ikke-steroidale anti-inflammatoriske forbindelsen omfatter et karboksylsyrederivat.

12. Forbindelse ifølge krav 10 eller 11, karakterisert ved at den ikke-steroidale anti-inflammatoriske forbindelsen er valgt fra grupen omfattende salicylat, acetylsalicylat, salsalat, diflunisal, fendosal, indometacin, acemetacin, cinmetacin, sulindak, tolmetin, zomepirak, diklofenak, isoksepak, ibuprofen, flurbiprofen, naproksen, ketoprofen, fenoprofen, benoksaprofen, indoprofen, pirprofen, karprofen, mefenaminsyre, flufenaminsyre, meklofenamat, nifluminsyre, tolfenaminsyre, fluniksin og kloniksin.

13. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 10 til 12, karakterisert ved at X er valgt fra gruppen omfattende acetylsalicylat, salicylat, indometacin og ibuprofen.

14 . Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 10 til 13, karakterisert ved at hver av R4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre som har en karbonkjede på 3 til 18 karbonatomer, mer foretrukket 10 til 18 karbonatomer, og mest foretrukket 16 karbonatomer.

15 . Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 10 til 14, karakterisert ved at Y enten er fraværende eller er alanin eller glycin.

16. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 10 til 15, karakterisert ved at forbindelsen er indometacin-etanolamin-palmitat eller indometacin-glycin-etanolamin-palmitat.

17. Forbindelse, karakterisert ved den følgende formel: hvor X er et radikal avledet fra en ikke-steroidal anti-inf lammasjonsfo.rbindelse; Y er fraværende eller en eller to aminosyrer eller et peptid eller en avstandsgruppe; B er H eller CH20-R3; og R-L, R2 og R3 er like eller forskjellige og er enten hydrogen, metyl, etyl, hydroksyl eller en acylgruppe avledet fra en fettsyre, med den betingelsen at minst en av R^, R2 og R3 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre for anvendelse ved forlengelse av aktiviteten til den ikke-steroidale anti-inf lammasjonsforbindelsen.

18. Forbindelse ifølge krav 17, karakterisert ved at den ikke-steroidale anti-inflammasjonsforbindelsen inkluderer en karboksylsyregruppe.

19. Forbindelse ifølge krav 17 eller 18, karakterisert ved at den ikke-steroidale anti-inf lammasjonsforbindelsen er utvalgt fra gruppen som består av salicylat, acetylsalicylat, salsalat, diflunisal, fendosal, indometacin, acemetacin, cinmetacin, sulindak, tolmetin, zomepirak, diklofenak, isoksepak, ibuprofen, flurbiprofen, naproksen, ketoprofen, fenoprofen, benoksaprofen, indoprofen, pirprofen, karprofen, mefenaminsyre, flufenaminsyre, meklofenamat, nifluminsyre, tolfenaminsyre, fluniksin og kloniksin.

20. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 17 til 19, karakterisert ved at den ikke-steroidale anti-inflammasjonsforbindelsen er utvalgt fra gruppen som består av acetylsalicylat, salicylat, indometacin og ibuprofen, og er foretrukket indometacin.

21. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 17 til 20, karakterisert ved at R^, Bg og R3 er enten hydrogen eller en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

22. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 17 til 21, karakterisert ved at hver av , Rg og R3 er acylgrupper avledet fra fettsyrer, og foretrukket er hver den samme acylgruppen.

23. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 17 til 22, karakterisert ved at hver av R^, Rg og R3 er acylgrupper avledet fra fettsyrer som har en karbonkjede på 3 til 18 karbonatomer, mer foretrukket 10 til 18 karbonatomer, og mest foretrukket 16 karbonatomer.

24 . Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 17 til 23, karakterisert ved at Yer enten fraværende eller er alanin eller glycin.

25 . Forbindelse, karakterisert ved formelen X-Y-NH-CH2-CH20-R4 hvori X representerer et radikal avledet fra en ikke-steroidal anti-inflammasj onsforbindelse; Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid eller en avstandsgruppe, og R4 er en acylgruppe avledet . fra en fettsyre for anvendelse ved forlengelse av aktiviteten til den ikke-steroidale anti-inf lammas jonsforbindelsen .

26. Forbindelse ifølge krav 25, karakterisert ved at den ikke-steroidale anti-inflammasjonsforbindelsen inkluderer en karboksylsyregruppe.

27. Forbindelse ifølge krav 25 eller krav 26, karak-terisert ved at den ikke-steroidale anti-inf lammasjonsforbindelsen er utvalgt fra gruppen som består av salicylat, acetylsalicylat, salsalat, diflunisal, fendosal, indometacin, acemetacin, cinmetacin, sulindak, tolmetin, zomepirak, diklofenak, isoksepak, ibuprofen, flurbiprofen, naproksen, ketoprofen, fenoprofen, benoksaprofen, indoprofen, pirprofen, karprofen, mefenaminsyre , flufenaminsyre, meklofenamat, nifluminsyre , tolfenaminsyre, fluniksin og kloniksin.

28. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 25 til 27, karakterisert ved at X er et radikal avledet fra en forbindelse som er utvalgt fra gruppen som består av acetylsalicylat, salicylat, indometacin og ibuprofen og er foretrukket indometacin.

29. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 25 til 28, karakterisert ved at R4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre som har en karbonkjede på 3 til 18 karbonatomer, mer foretrukket 10 til 18 karbonatomer, og mest foretrukket 16 karbonatomer.

30. Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 25 til 29, karakterisert ved at Y enten er fraværende eller er alanin eller glycin.

31. Indometacin-glycin-tris-dipalmitat eller indometacin-glycin-tris-tripalmitat eller indometacin-etanolamin-palmitat eller indometacin-glycin-etanolamin-palmitat, karakterisert ved at de anvendes ved forlengelse av aktiviteten til indometacin.

32. Forbindelse, karakterisert ved formelen hvori X er et radikal avledet fra ibuprofen, Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid en avstandsgruppe, B er H eller CH20-R3; og R-L, R2 og R3 er like eller forskjellige og er enten hydrogen, metyl, etyl, hydroksyl eller en acylgruppe avledet fra en fettsyre med den betingelsen at minst en av R^, R2 og R3 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre for anvendelse ved behandling av forbrenninger.

33. Forbindelse ifølge krav 32, karakterisert ved at Ri, R2 og R3 enten er hydrogen eller en acylgruppe avledet fra en fettsyre.

34 . Forbindelse ifølge krav 32 eller 33, karakterisert ved at hver av R^, R2 og R3 er acylgrupper avledet fra fettsyrer som har en karbonkjede på 3 til 18 karbonatomer, mer foretrukket 10 til 18 karbonatomer, og mest foretrukket 16 karbonatomer.

35 . Forbindelse ifølge et hvilket som helst av kravene 32 til 34, karakterisert ved at Yer enten fraværende eller er alanin eller glycin.

36. Forbindelse ifølge krav 32, karakterisert ved at forbindelsen er ibuprofen-alanin-tris-monopalmitat.

37. Forbindelse, karakterisert ved formelen hvori X er et radikal avledet fra ibuprofen, Y er fraværende eller er en eller to aminosyrer eller et peptid eller en avstandsgruppe, og R4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre for anvendelse ved behandling av forbrenninger.

38. Forbindelse ifølge krav 37, karakterisert ved at E4 er en acylgruppe avledet fra en fettsyre som har en karbonkjede på 3 til 18 karbonatomer, mer foretrukket 10 til 18 karbonatomer, og mest foretrukket 16 karbonatomer.

39. Forbindelse ifølge krav 37 eller 38, karakterisert ved at Y enten er fraværende eller er alanin eller glycin.