NO172345B

NO172345B - PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF 2 ', 3'-DIDEOXY-2', 3'-DIDEHYDRONUCLEOSIDES

Info

Publication number: NO172345B
Application number: NO913456A
Authority: NO
Inventors: Jr John E Starrett; Muzammil M Mansuri; John C Martin; Carl E Fuller; Henry G Howell
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1988-03-24
Filing date: 1991-09-03
Publication date: 1993-03-29
Also published as: NO913456L; NO172345C; NO913456D0

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører fremgangsmåte for fremstilling av 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydronukleosider. The present invention relates to a method for the production of 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleosides.

Erhvervet immunsviktsyndrom (AIDS) er resultatet av en infeksjon med humant immunsviktvirus (HIV)-*-. Dette retro-viruset utviser spesifikk tropisme for hjelpe/induktor T-celler<2>, hvilket fører til at cellene oppbrukes. Den resulterende immunundertrykkelsen predisponerer HIV-pasienter for livstruende opportunistiske infeksjoner. Acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) is the result of an infection with the human immunodeficiency virus (HIV)-*-. This retrovirus exhibits specific tropism for helper/inducer T cells<2>, leading to the exhaustion of the cells. The resulting immunosuppression predisposes HIV patients to life-threatening opportunistic infections.

Selv om det for øyeblikket ikke finnes noen helbredelse overfor AIDS, har et nukleosidderivat, 3'-azido-3'-deoksy-tymidin (AZT, Retrovir) allerede vist seg å være et virksomt middel ved behandling av AIDS i kliniske forsøk, og er blitt frigitt av myndighetene for anvendelse på pasienter med AIDS<3>. Et antall andre kjemiske og biologiske midler har vist seg å være biologisk aktive overfor HIV. 2',3'-dideoksy-cytidin (ddC), 2',3'-dideoksyadenosin (ddA)<4>, 2',3'-dideoksy-2'-3'-didehydrocytidin (d4C)^, suramin og analoger derav^, ribavarin<7>, foscarnet<8>, EPA-23^, d-penicillamin^<0>, kas-tanospermin<11>, fusidinsyre12, 3'-azidoguanosin (AZG)1<3> og 3'-f luor-3'-deoksytymidin (FDDT)-^ har alle vist seg å være effektive overfor HIV. Although there is currently no cure for AIDS, a nucleoside derivative, 3'-azido-3'-deoxy-thymidine (AZT, Retrovir) has already been shown to be an effective agent in the treatment of AIDS in clinical trials, and is has been released by the authorities for use on patients with AIDS<3>. A number of other chemical and biological agents have been shown to be biologically active against HIV. 2',3'-dideoxycytidine (ddC), 2',3'-dideoxyadenosine (ddA)<4>, 2',3'-dideoxy-2'-3'-didehydrocytidine (d4C)^, suramin and analogues thereof^, ribavarin<7>, foscarnet<8>, EPA-23^, d-penicillamine^<0>, castanospermine<11>, fusidic acid12, 3'-azidoguanosine (AZG)1<3> and 3'- fluoro-3'-deoxythymidine (FDDT)-^ have all been shown to be effective against HIV.

Et antall beskrivelser som er fremkommet i litteraturen har vist at 2',3'-dideoksy-2',3'-didehydrotymidin (d4T) er i besittelse av aktivitet in vitro overfor HIV i flere cellelinjer^^. A number of descriptions that have appeared in the literature have shown that 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydrothymidine (d4T) possesses activity in vitro against HIV in several cell lines^^.

2',3'-dideoksy-2',3'-didehydrotymidin (d4T) er blitt fremstilt av Horwitz et al. ifølge to forskjellige veier-^ <>>1<?>. Ved den første av disse fremgangsmåtene underkastes 3',5'-anhydroderivatet av tymidineliminerende reaksjonsbetingelser. Ved den andre av disse fremgangsmåtene underkastes det 5'-O-beskyttende 2,3'-anhydronukleosid-derivatet av tymidin ringåpnings-eliminerende reaksjonsbetingelser . 2',3'-dideoxy-2',3'-didehydrothymidine (d4T) has been prepared by Horwitz et al. according to two different ways-^ <>>1<?>. In the first of these methods, the 3',5'-anhydro derivative is subjected to thymidine-eliminating reaction conditions. In the second of these methods, the 5'-O-protecting 2,3'-anhydronucleoside derivative of thymidine is subjected to ring-opening-eliminating reaction conditions.

Anvendelsen av anhydronukleosider som mellomprodukter ved nukleosidfremstllling er beskrevet innenfor teknikken, som foreliggende oppfinnelse hører inn under<18>. The use of anhydronucleosides as intermediates in nucleoside production is described within the technique, to which the present invention belongs<18>.

Med den nylige oppdagelsen av styrken av 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydrotymidin (d4T) som et anti-HIV-middel, blir en fremgangsmåte som muliggjør billig fremstilling av 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydronukleosider, herunder d4T, i stor målestokk viktig. With the recent discovery of the potency of 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydrothymidine (d4T) as an anti-HIV agent, a method that enables the inexpensive preparation of 2',3'-dideoxy-2' 3'-didehydronucleosides, including d4T, are important on a large scale.

Fremgangsmåten ifølge Horwitz for fremstilling av d4T ut fra 3',5'-anhydroforbindelsen<1>^, er ikke gjennomført i større målestokk på grunn av at fullstendig fjerning av det store volumet DMSO, som anvendes ved utøvelse av fremgangsmåten ifølge Horwitz i større målestokk,- er meget vanskelig å oppnå, og krever høyvakuum (0,01 mmHg og oppvarming i et temperaturområde på ca. 40-50°C) i et omfattende tidsrom. Disse betingelsene fører til spaltning av glykosidbindingen som danner tymidin som et uønsket biprodukt. Forlenget utsettelse av basiske betingelser, som er nødvendige ved anvendelse av andre oppløsningsmidler enn DMSO (f.eks. THF, DMF), fører også til dekomponering av d4T, som igjen gir tymidin som et uønsket biprodukt. The method according to Horwitz for the production of d4T from the 3',5'-anhydro compound <1>^, has not been carried out on a large scale due to the fact that the complete removal of the large volume of DMSO, which is used when carrying out the method according to Horwitz on a large scale ,- is very difficult to achieve, and requires a high vacuum (0.01 mmHg and heating in a temperature range of approx. 40-50°C) for an extensive period of time. These conditions lead to cleavage of the glycosidic bond forming thymidine as an unwanted by-product. Prolonged exposure to basic conditions, which is necessary when using solvents other than DMSO (eg THF, DMF), also leads to decomposition of d4T, which in turn gives thymidine as an unwanted byproduct.

Den alternative fremgangsmåten ifølge Horwitz krever beskyttelse av 5'-OH-stillingen forut for dannelse av 2,5'-anhydronukleosidet. Dette 2,5'-anhydronukleosidet kan åpnes for oppnåelse av det 5'-O-beskyttende nukleosidet. The alternative method according to Horwitz requires protection of the 5'-OH position prior to formation of the 2,5'-anhydronucleoside. This 2,5'-anhydronucleoside can be opened to obtain the 5'-O-protecting nucleoside.

Det ønskede 2,3'-anhydronukleosidet kan fremstilles direkte ved omsetning av tymidin med dietyl -(2-klor-l,1-2-tri-fluoretyl)aminl^.The desired 2,3'-anhydronucleoside can be prepared directly by reacting thymidine with diethyl -(2-chloro-1,1-2-trifluoroethyl)amine.

Den foreliggende oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydronukleosider med formelen The present invention relates to a method for the production of 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleosides with the formula

med høyt utbytte og i relativ stor målestokk. with a high yield and on a relatively large scale.

Foreliggende oppfinnelse vedrører følgelig en fremgangsmåte for fremstilling av et 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydronukleosid med formelen The present invention therefore relates to a method for the preparation of a 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleoside with the formula

hvor where

X er N eller C-H, X is N or C-H,

Y er C-R<5> eller N, Y is C-R<5> or N,

Z er C-H eller N, Z is C-H or N,

R4 er OH eller NH2, og R 4 is OH or NH 2 , and

r<5> er H, usubstituert eller halogensubstituert alkyl med formelen CnH2nA, eller usubstituert eller halogensubstituert alkenyl med formelen -(CH2)m-CH=CHA, hvor m er 0, 1, 2 eller 3, n er 1, 2 eller 3 og A er H, F, r<5> is H, unsubstituted or halogen-substituted alkyl of the formula CnH2nA, or unsubstituted or halogen-substituted alkenyl of the formula -(CH2)m-CH=CHA, where m is 0, 1, 2 or 3, n is 1, 2 or 3 and A is H, F,

Cl, Br eller I, kjennetegnet ved at man Cl, Br or I, characterized in that one

a) omdanner et 2'-deoksynukleosid med formelen a) converts a 2'-deoxynucleoside of the formula

og and

b) omdanner det reaktive 2,3 *-anhydro-2'-deoksynukleosi-det fra trinn (a) til det ønskede produkt 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydronukleosidet i nærvær av tetrabutylammoniumfluorid (TBAF). b) converting the reactive 2,3*-anhydro-2'-deoxynucleoside from step (a) into the desired product 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleoside in the presence of tetrabutylammonium fluoride (TBAF).

Som beskrevet ovenfor, vedrører foreliggende oppfinnelse en fremgangsmåte for fremstilling av 2', 3 '-dideoksy-2'3'-didehydronukleosider. Utgangsmaterialet er et 2'-deoksynukleosid. As described above, the present invention relates to a method for the production of 2', 3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleosides. The starting material is a 2'-deoxynucleoside.

Første trinn omfatter fremstilling av et reaktivt 3',5'-anhydro-2'-deoksynukleosid-mellomprodukt ut fra et utgangs-2'-deoksynukleosid. Dette kjente mellomproduktet oppnås ved å omsette et tilsvarende 2'-deoksynukleosid med tilstrekkelig konvensjonelt, aktiverende hydroksygruppebeskyttelsesreagens, f.eks. MsCl eller TsCl, under konvensjonelle betingelser for oppnåelse av et første mellomprodukt i form av et 3',5'-0-beskyttelsesgruppe-2'-deoksynukleosid, og omsette dette mellomproduktet med sterk base i form av KOH eller NaOH, i et oppløsningsmiddel, f.eks. vann eller etanol. Selv om et vilkårlig velkjent, aktiverende hydroksylgruppebeskyttelses-reagens som er anvendelig i teknikken kan anvendes, anvendes fortrinnsvis mesylklorid ved fremgangsmåten ifølge Horwitz et al. The first step comprises the production of a reactive 3',5'-anhydro-2'-deoxynucleoside intermediate from a starting 2'-deoxynucleoside. This known intermediate is obtained by reacting a corresponding 2'-deoxynucleoside with a sufficiently conventional, activating hydroxy group protecting reagent, e.g. MsCl or TsCl, under conventional conditions for obtaining a first intermediate in the form of a 3',5'-0-protecting group-2'-deoxynucleoside, and reacting this intermediate with a strong base in the form of KOH or NaOH, in a solvent, e.g. water or ethanol. Although any well-known activating hydroxyl group protecting reagent useful in the art may be used, mesyl chloride is preferably used in the method of Horwitz et al.

En alternativ fremgangsmåte for fremstilling av de ønskede 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydronukleosider ut fra tilsvarende deoksynukleosid er å begynne ut fra det tilsvarende ribonuk-leosidet. Det har følgelig vist seg at man kan behandle uridin med trimetylortoformiat for oppnåelse av det tilsvarende reaktive ortoestermellomproduktet. An alternative method for producing the desired 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleosides from the corresponding deoxynucleoside is to start from the corresponding ribonucleoside. Consequently, it has been shown that uridine can be treated with trimethylorthoformate to obtain the corresponding reactive orthoester intermediate.

Skjema I belyser skjematisk fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse. Syntesevei A illustrerer utførelsesfor-men via det reaktive 3' ,5'-anhydro- eller "oksetan"-mellomproduktet. Form I schematically illustrates the method according to the present invention. Synthesis route A illustrates the embodiment via the reactive 3',5'-anhydro or "oxetane" intermediate.

Problemene ved de i litteraturen kjente fremgangsmåtene for fremstilling av de ønskede 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydro-nukleosider ved hjelp av det reaktive 2,3'-anhydromel-lomproduktet omfatter anvendelsen av dietyl(2-klor-l,1,2-trifluoretyl)amin, et fluoraminreagens, som er vanskelig å fremstille og som krever spesielt utstyr. Et alternativ beskrives i litteraturen og omfatter en langvarig 4-trinns-metode som omfatter 5'-O-tritylering, 3'-O-mesylering, detritylering og anhydrodannelse. I litteraturen beskrives at forskjellige andre produkter og biprodukter enn de ønskede 2',3 ' -dideoksy-2'3'-didehydronukleosidprodukter dannes. The problems with the methods known in the literature for preparing the desired 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydro-nucleosides by means of the reactive 2,3'-anhydro intermediate include the use of diethyl (2-chloro- 1,1,2-trifluoroethyl)amine, a fluoramine reagent, which is difficult to prepare and requires special equipment. An alternative is described in the literature and comprises a lengthy 4-step method comprising 5'-O-tritylation, 3'-O-mesylation, detritylation and anhydro formation. In the literature it is described that various other products and by-products than the desired 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleoside products are formed.

De spesifikke forbedringene som blir foretatt i den foreliggende fremgangsmåten og som forløper via det reaktive 2,3'-anhydromellomproduktet omfatter den overraskende erkjennelse at anvendelsen av reagenset, tetrabutylammoniumfluorid (TBAF), under ikke-nukleofile betingelser gir det ønskede produktet i ren tilstand, og i stort utbytte. Anvendelsen av KOtBu/DMSO og NaOH/DMF, men ikke NaCN/DMF eller DBU/DMF eller NaOH/MeOH eller KOtBu/BuOH, i stedet for TBAF i TEF eller DMF gir det ønskede produktet, selv om utbyttet er mindre og det oppnås noen uønskede biprodukter (3'-epi-tymidin) ved anvendelse av NaOH/DMF. The specific improvements made in the present process which proceed via the reactive 2,3'-anhydro intermediate include the surprising realization that the use of the reagent, tetrabutylammonium fluoride (TBAF), under non-nucleophilic conditions gives the desired product in the pure state, and in large dividends. The use of KOtBu/DMSO and NaOH/DMF, but not NaCN/DMF or DBU/DMF or NaOH/MeOH or KOtBu/BuOH, instead of TBAF in TEF or DMF gives the desired product, although the yield is lower and some unwanted by-products (3'-epi-thymidine) using NaOH/DMF.

Fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse er følgelig nyttig ved fremstilling av forskjellige 2',3'-dideoksy-2'3'-didehydronukleosider, spesielt pyrimidin- og pyrinnukleo-sider, med antiviral, antimetabolsk og antineoplastisk aktivitet samt aktivitet overfor human immunsvikt-virus. The method according to the present invention is consequently useful in the production of various 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleosides, especially pyrimidine and pyrin nucleosides, with antiviral, antimetabolic and antineoplastic activity as well as activity against human immunodeficiency virus.

De følgende eksempler belyser noen få representative utførel-sesformer for fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse. Hvis ikke annet er angitt, er alle delene og prosent-angivelsene på vektbasis og alle temperaturangivelsene er i The following examples illustrate a few representative embodiments of the method according to the present invention. Unless otherwise noted, all parts and percentages are by weight and all temperature indications are in

•c. c.

Biologiske data, herunder anti-HIV-data for d4T fremstilt ved en fremgangsmåte ifølge oppfinnelsen er ført opp i tabell I. Disse data er i overensstemmelse med publiserte data. Biological data, including anti-HIV data for d4T produced by a method according to the invention are listed in Table I. These data are in accordance with published data.

FORSØK ATTEMPT

Smeltepunkter bestemmes på et "Elektrotermal"-kappilært apparat, og er ukorrigerte. TLC utføres på silisiumoksydgel-"60 F-254"-plater fra E.Merck & Co. , og kolonnekromatografi utføres på flammesilisiumoksydgel (40 pm partikkelstørrelse, Baker). Elementanalyse utføres av den analytiske avdelingen, Bristol-Myers, Wallingford. <1>H- og <13>C-NMR-spektre ble opptatt på et "AM360 Bruker NMR"-spektrometer med tetrametyl-silan som den interne standard. Kjemiske skift ble notert i ppm. Analytisk HPLC ble utført på en "Waters C18"-reversfase-kolonne. Melting points are determined on an "Electrothermal" capillary apparatus, and are uncorrected. TLC is performed on silica gel "60 F-254" plates from E.Merck & Co. , and column chromatography is performed on flamed silica gel (40 µm particle size, Baker). Elemental analysis is performed by the Analytical Department, Bristol-Myers, Wallingford. <1>H and <13>C NMR spectra were recorded on an "AM360 Bruker NMR" spectrometer with tetramethyl-silane as the internal standard. Chemical shifts were noted in ppm. Analytical HPLC was performed on a "Waters C18" reverse phase column.

3 ', 5 ' - Di- 0-( metansulfonyl) tymidin 3',5'-Di-O-(methanesulfonyl)thymidine

En 3 liters, 3-halset, rundbundet kolbe ble utstyrt med en ovenfra montert omrører med propell, en 500 ml skilletrakt og en Claisen-adapter inneholdende tørrerør og termometer. Tymidin (200 g, 0,82 M) og pyridin (750 ml) ble satt til kolben. Blandingen ble omrørt og oppvarmet på et vannbad (20 minutter) for oppnåelse av en klar oppløsning. Deretter ble oppløsningen avkjølt i et isbad til 0-3°C og skilletrakten ble fylt med metansulfonylklorid (206,5 g, 1,08 M). Metansul-fonylkloridet ble deretter tilsatt dråpevis i løpet av 40 minutter uten tydelig eksoterm reaksjon. Oppløsningen ble omrørt ved 0°C i 1 time, og henstod deretter ved 5°C i 18 timer. Den lysebrune blandingen ble deretter utfelt i hurtig omrørt vann (3 liter) inneholdende is (ca. 500 g). Det ønskede produktet ble omgående utkrystallisert. Etter omrøring i 1/2 time ble produktet oppsamlet ved filtrering og flere ganger vasket med vann (3 x 100 ml). Det hvite faste stoffet ble deretter tørket over vakuum natten over (vekt i rå tilstand 322 g, 98$ utbytte). Produktet ble omkrystallisert fra varm aceton for oppnåelse av 267 g av et hvitt faststoff (8156 utbytte), sm.p. 169-171°C (lit. 170-171°C). A 3 L, 3-necked, round-necked flask was fitted with a top-mounted propeller stirrer, a 500 mL separatory funnel, and a Claisen adapter containing a drying tube and thermometer. Thymidine (200 g, 0.82 M) and pyridine (750 mL) were added to the flask. The mixture was stirred and heated on a water bath (20 minutes) to obtain a clear solution. Then the solution was cooled in an ice bath to 0-3°C and the separatory funnel was filled with methanesulfonyl chloride (206.5 g, 1.08 M). The methanesulfonyl chloride was then added dropwise over 40 minutes without any apparent exothermic reaction. The solution was stirred at 0°C for 1 hour, and then left at 5°C for 18 hours. The light brown mixture was then precipitated in rapidly stirred water (3 litres) containing ice (approx. 500 g). The desired product was immediately crystallized. After stirring for 1/2 hour, the product was collected by filtration and washed several times with water (3 x 100 ml). The white solid was then dried under vacuum overnight (crude weight 322 g, 98% yield). The product was recrystallized from hot acetone to give 267 g of a white solid (8156 yield), m.p. 169-171°C (lit. 170-171°C).

<i>HzNMR (360 MHz, d6-DMS0) §: 11,40 (s, 1H, NH), 7,50 (s, 1H, H-6), 6,21 (t, 1H, H-l<*>), 5,29 (m, 1H, E-3'), 4,45 (m, 2H, E-5'), 4,35 (m, 1H, H-4'), 3,31 (s, 6E, S02CH3), 2,50 (m, 2E, H-2' ), 1,78 (s, 3E, CE3). <i>HzNMR (360 MHz, d6-DMS0) §: 11.40 (s, 1H, NH), 7.50 (s, 1H, H-6), 6.21 (t, 1H, H-l<*> ), 5.29 (m, 1H, E-3'), 4.45 (m, 2H, E-5'), 4.35 (m, 1H, H-4'), 3.31 (s, 6E, SO 2 CH 3 ), 2.50 (m, 2E, H-2' ), 1.78 (s, 3E, CE 3 ).

Analyse (C12<H>18<N>2°9<S>2) c» H» N* Analysis (C12<H>18<N>2°9<S>2) c» H» N*

l -( 3. 5- anhydro- 2- deoksy- g- D- treo- pentofuranosylHvmin l -( 3. 5- anhydro- 2- deoxy- g- D- threo- pentofuranosylHvmin

3',5'-Di-0-(metansulfonyl)tymidin (248 g, 0,62 M) ble porsjonsvis satt til en omrørt oppløsning av natriumhydroksid (74,7 g, 1,87 M) i vann (1,6 1). Ved tilsetningen ble 3',5'-Di-O-(methanesulfonyl)thymidine (248 g, 0.62 M) was added portionwise to a stirred solution of sodium hydroxide (74.7 g, 1.87 M) in water (1.6 L ). At the addition was

reaksjonsblandingen en gulorange oppløsning. Den omrørte oppløsningen ble deretter oppvarmet med tilbakekjøling i 2 timer. Ved avkjøling av reaksjonsblandingen til romtemperatur, ble 6N (100 ml) saltsyre. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum ved fjernelse av 1,3 1 vann. Den resulterende oppslemmingen ble avkjølt i et isbad i 2 timer. Deretter ble det faste stoffet frafiltrert og vasket forsiktig med isvann, og tørket i vakuum til konstant vekt (103,7 g, 7456). Produktet 3, sm.p. 188-190°C (lit. 190-193°C) ble anvendt under ytterligere rensning. the reaction mixture a yellow-orange solution. The stirred solution was then heated under reflux for 2 hours. On cooling the reaction mixture to room temperature, 6N (100 mL) hydrochloric acid. The reaction mixture was concentrated in vacuo by removing 1.3 L of water. The resulting slurry was cooled in an ice bath for 2 hours. Then the solid was filtered off and washed carefully with ice water, and dried in vacuo to constant weight (103.7 g, 7456). The product 3, m.p. 188-190°C (lit. 190-193°C) was used during further purification.

<i>H-NMR (360 MHz, d6-DMS0) S: 11,35 (s, 1H, NH), 8,01 (s, 1H, H-6), 6.49 (q, 1E, E-I'), 5,47 (m, 1H, E-3'), 4,88 og 4,67 (m, 2E, H-5'), 4,22 (d, 1E, E-4'), 2,47 (m, 2E, H-2'), 1,77 (s, 3E, CE3). <i>H-NMR (360 MHz, d6-DMS0) S: 11.35 (s, 1H, NH), 8.01 (s, 1H, H-6), 6.49 (q, 1E, E-I' ), 5.47 (m, 1H, E-3'), 4.88 and 4.67 (m, 2E, H-5'), 4.22 (d, 1E, E-4'), 2, 47 (m, 2E, H-2'), 1.77 (s, 3E, CE3).

<13>C-NMR (75 MBz, d6-DMS0): 163,64 (C2), 151,10 (C4), 136,57 (C6), 109,62 (C5), 88,29 (C4'), 86,85 (cl'), 79,83 (C3'), 75,'14 (C5'), 37,17 (C2'), 12,33 (CE3). <13>C-NMR (75 MBz, d6-DMS0): 163.64 (C2), 151.10 (C4), 136.57 (C6), 109.62 (C5), 88.29 (C4') , 86.85 (cl'), 79.83 (C3'), 75.14 (C5'), 37.17 (C2'), 12.33 (CE3).

Analyse (C10<E>12N2046) C, E, N. Analysis (C10<E>12N2046) C, E, N.

l-( 2. 3- dideoksv- p- D- glysero- pent- 2- enofuranosyl) tymin l-(2.3-dideoxv-p-D-glycero-pent-2- enofuranosyl)thymine

Til en trehalset 1 liters kolbe med rund bunn, utstyrt med mekanisk omrører, termometer og nitrogentilledning, ble tørt DMSO (400 ml) og oksetan (90,0 g, 0,402 M) tilsatt. Til oppløsningen ble 9756 KOtBu (74 g, 0,643 M) tilsatt i porsjoner på 1,5 g i løpet av 25 minutter. Temperaturen ble holdt mellom 18 og 22°C ved hjelp av et eksternt isbad. Etter endt tilsetning ble reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere 1 time og det ble ikke iaktatt noen ytterligere stigning i temperaturen og TLC indikerte at omsetningen var løpt ca. 90$ til ende. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 21°C i 16 timer, hvorpå TLC indikerte at reaksjonen var slutt. Viskoseopp-løsningen ble helt i kaldt (4°C) toluen (3 liter), som resulterte i et beige-farvet presipitat. Blandingens temperatur steg til 20°C ved tilsetning av DMSO-oppløsningen. Blandingen ble omrystet av og til i 20 minutter, og filtrert på en 18,5 cm Buchner-trakt. Det oppsamlede, gulaktige, faste stoffet ble vasket to ganger med kald toluen og tørket under sug i 1 time. Det faste stoffet ble oppløst i 30 ml vann og 2 faser ble dannet. Blandingen ble overført til en skilletrakt og den øvre fasen (inneholdende resterende toluen) ble kastet. Den vandige fasen ble overført til et 1 liter begerglass tilsatt pE-probe, magnetpinne og termometer. Temperaturen ble senket til 10°C ved anvendelse av et eksternt isbad. Konsentrert EC1 ble dråpevis tilsatt til den omrørte oppløsningen ved en slik hastighet at temperaturen ble holdt under 15°C. Etter tilsetning av EC1 (50,5 ml, 0,61 M) var pE = 7 ± 0,1 og det ble dannet et presipitat. Til den tykke blandingen ble kalsiumklorid. (70 g) tilsatt, og omrøringen ble fortsatt ved 5°C i 1 time. Presipitatet ble oppsamlet og tørket i sug i 2 timer og lufttørket i 16 timer. Faststoffet ble knust og oppslemmet i varm aceton (500 ml) og filtrert. Resten på filterpapiret ble renset med varm aceton (2 x 200 ml), igjen oppslemmet i varm aceton (300 ml), filtrert og påny vasket med varm aceton (2 x 100 ml). Det kombinerte filtratet ble konsentrert til tørrhet for oppnåelse av 51,3 g (57$) d4T som et off-white fast stoff, sm.p. 165-166°C To a three-necked 1 L round-bottom flask equipped with a mechanical stirrer, thermometer, and nitrogen line, dry DMSO (400 mL) and oxetane (90.0 g, 0.402 M) were added. To the solution was added 9756 KOtBu (74 g, 0.643 M) in 1.5 g portions over 25 minutes. The temperature was maintained between 18 and 22°C using an external ice bath. After the addition was complete, the reaction mixture was stirred for a further 1 hour and no further increase in temperature was observed and TLC indicated that the reaction had run approx. 90$ to end. The reaction mixture was stirred at 21°C for 16 hours, whereupon TLC indicated that the reaction was complete. The viscose solution was poured into cold (4°C) toluene (3 liters), which resulted in a beige-colored precipitate. The temperature of the mixture rose to 20°C upon addition of the DMSO solution. The mixture was shaken occasionally for 20 minutes and filtered on an 18.5 cm Buchner funnel. The collected yellowish solid was washed twice with cold toluene and dried under suction for 1 hour. The solid was dissolved in 30 ml of water and 2 phases were formed. The mixture was transferred to a separatory funnel and the upper phase (containing residual toluene) was discarded. The aqueous phase was transferred to a 1 liter beaker with a pE probe, magnetic stick and thermometer. The temperature was lowered to 10°C using an external ice bath. Concentrated EC1 was added dropwise to the stirred solution at such a rate that the temperature was kept below 15°C. After addition of EC1 (50.5 mL, 0.61 M), pE = 7 ± 0.1 and a precipitate formed. To the thick mixture was calcium chloride. (70 g) was added and stirring was continued at 5°C for 1 hour. The precipitate was collected and dried under suction for 2 hours and air dried for 16 hours. The solid was crushed and slurried in hot acetone (500 mL) and filtered. The residue on the filter paper was cleaned with hot acetone (2 x 200 ml), reslurried in hot acetone (300 ml), filtered and washed again with hot acetone (2 x 100 ml). The combined filtrate was concentrated to dryness to afford 51.3 g (57%) d 4 T as an off-white solid, m.p. 165-166°C

[a]<g>° = 46,1° (c = 0,7, vann) [a]<g>° = 46.1° (c = 0.7, water)

1-E-NMR (360 MEz, d6-DMS0) S: 11,29 (s, 1E, NE), 7,63 (s, 1E, E-6), 6,80 (d, 1E, J=l,2 Ez, H-l'), 6,38 (d, 1E, J=5,9 Ez, E-3'), 5,90 (dd, 1E, J=l,l, 4,7 Ez, E-3'), 5,01 (m, 1E, OE), 4,76 (s, 1H, E-4'), 3,60 (dd, 2E, J=4,8, 3,6 Ez, E-5'), 1,71 (d, 3E, J=l,2 Ez, CE3). 1-E-NMR (360 MEz, d6-DMSO) S: 11.29 (s, 1E, NE), 7.63 (s, 1E, E-6), 6.80 (d, 1E, J=l ,2 Ez, H-l'), 6.38 (d, 1E, J=5.9 Ez, E-3'), 5.90 (dd, 1E, J=l,l, 4.7 Ez, E-3'), 5.01 (m, 1E, OE), 4.76 (s, 1H, E-4'), 3.60 (dd, 2E, J=4.8, 3.6 Ez, E-5'), 1.71 (d, 3E, J=1.2Ez, CE3).

<13>C-NMR (75 MEz, d6-DMS0): 164,42 (C4), 151,30(C2), 137,23 (C2'), 135,36 (C3'), 126,35 (C6), 109,33 (C5), 89,15 (Cl'), 87,56 (C4'), 62,41 (C5'), 12,15 (C5CE3). <13>C-NMR (75 MEz, d6-DMS0): 164.42 (C4), 151.30(C2), 137.23 (C2'), 135.36 (C3'), 126.35 (C6 ), 109.33 (C5), 89.15 (Cl'), 87.56 (C4'), 62.41 (C5'), 12.15 (C5CE3).

MS m/e (metan DCI) (relativ intensitet): 225 (+E, 20), 207 (15), 193 (8), 155 (13), 127 (100), 99 (20). MS m/e (methane DCI) (relative intensity): 225 (+E, 20), 207 (15), 193 (8), 155 (13), 127 (100), 99 (20).

IR (cm-<1>): 3463, 3159, 3033, 1691, 1469, 1116, 1093. Analyse (C10E12<N>204) C, E, N. l-( 2. 3- dideoksy- p- D- glysero- pent- 2- enofuranosyl ) tymin Tetrabutylammoniumfluorid (0,22 ml, 0,22 mM, 1,0 M) ble satt til en suspensjon av anhydronukleosidet (25 mg, 0,11 mM) i tørt TEF (3 ml). Etter omrøring ved 22°C i 3 timer viste TLC bare utgangsmateriale. Blandingen ble oppvarmet med til-bakekjøling i 18 timer hvoretter reaksjonen forekom å være gått til ende. Etter avkjøling ble oppløsningsmidlene fjernet i vakuum og resten oppløst i CE2Cl2/MeOE/NE4OE (90:10:1). Opprensingen ble utført på en 20 mm lynkromatografisk kolonne under eluering med CE2Cl2/Me0E/NE40E (90:10:1). Konsentrering av fraksjonene inneholdende produktet ga 18 mg (7256) d4T. l-( 5- 0- trityl- 2', 3'- tiokarbonmylribofuranosyl) uracil 5'-O-trityluridin (10,6 g, 22 mM) ble overført til en tørr 250 ml rundbundet kolbe under argonatmosfære. Tørt tetrahydrofuran (110 ml) ble tilsatt, og reaksjonsblandingen omrørt helt til den ble homogen. Ved tilsetning av 1,1-tiokarbonyldiimidazol (4,3 g, 27 mM) til oppløsningen ble reaksjonsblandingen gul, og den henstod deretter under omrøring ved romtemperatur i 72 timer. Oppløsningsmidlet ble fjernet i vakuum og den resulterende sirupen ble lynkromatografert på silisiumoksydgel med etylacetat/heksan (75:25) som elueringsmiddel. Produktet ble isolert og omkrystallisert fra absolutt etanol for oppnåelse av et off-white pulver (0,8 g, 7756). %-NMR (360 MEz, CDC13) å: 8,9 (br s, 1H, NH), 7,3 (m, 16E, 3xC6E5, E6), 5,7 (d, 1E, E5), 5,6 (m, 2E, E2', H3'), 5,4 (m, 1H, El'),3,4 (q, 2E, E5'). 5'- 0- tritvl- 2'. 3'- dideoksy- 2'. 3'- didehydrouridin l-(5'-0-trityl-23'-tiokarbonylribofuranosyl)uracil (6,0 g, 11,5 mM) ble satt til trietylfosfitt (30 ml). Trietylfosfitt ble foroppvarmet til 160°C. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 160°C i 1 time. Oppløsningsmidlet ble deretter fjernet i vakuum, og det resulterende glassaktige faste stoffet ble lynkromatografert på silisiumoksydgel under eluering med etylacetat/heksan (75:25). Det ønskede produktet ble isolert fra kolonnen og ble omkrystallisert fra etylacetat/heksan og samlet som et hvitt fast stoff (2,0 g, 40$), sm.p. 188-191°C. l-H-NMR (360 MHz, CDC13) S: 8,95 (br2, 1E, MB), 8,00 (d, 1H, H6), 7,5 (m, 15H, 3xC6E5 ), 7,2 (m, 1E, El'), 6,7 (m, 1E, E2'), 6,05 (m, 1E, E3' ), 5,2 (dd, 1E, E5), 5,10 (br s, 1E, E4'), 3,6 (m, 2E, E5'). IR (cm-<1>): 3463, 3159, 3033, 1691, 1469, 1116, 1093. Analysis (C10E12<N>204) C, E, N. l-( 2. 3- dideoxy- p- D- glycero-pent-2-enofuranosyl) thymine Tetrabutylammonium fluoride (0.22 mL, 0.22 mM, 1.0 M) was added to a suspension of the anhydronucleoside (25 mg, 0.11 mM) in dry TEF (3 mL). After stirring at 22°C for 3 hours, TLC showed only starting material. The mixture was heated with re-cooling for 18 hours, after which the reaction appeared to have gone to completion. After cooling, the solvents were removed in vacuo and the residue dissolved in CE2Cl2/MeOE/NE4OE (90:10:1). The purification was carried out on a 20 mm flash chromatography column eluting with CE2Cl2/Me0E/NE40E (90:10:1). Concentration of the fractions containing the product gave 18 mg (7256) of d4T. 1-(5-O-trityl-2',3'-thiocarbonmylribofuranosyl)uracil 5'-O-trityluridine (10.6 g, 22 mM) was transferred to a dry 250 ml round bottom flask under argon atmosphere. Dry tetrahydrofuran (110 mL) was added and the reaction mixture stirred until homogeneous. Upon addition of 1,1-thiocarbonyldiimidazole (4.3 g, 27 mM) to the solution, the reaction mixture turned yellow, and it was then allowed to stir at room temperature for 72 hours. The solvent was removed in vacuo and the resulting syrup was flash chromatographed on silica gel with ethyl acetate/hexane (75:25) as eluent. The product was isolated and recrystallized from absolute ethanol to give an off-white powder (0.8 g, 7756). %-NMR (360 MEz, CDCl 3 ) δ: 8.9 (br s, 1H, NH), 7.3 (m, 16E, 3xC6E5, E6), 5.7 (d, 1E, E5), 5.6 (m, 2E, E2', H3'), 5.4 (m, 1H, E1'), 3.4 (q, 2E, E5'). 5'- 0- tritvl- 2'. 3'- dideoxy- 2'. 3'-didehydrouridine 1-(5'-O-trityl-23'-thiocarbonylribofuranosyl)uracil (6.0 g, 11.5 mM) was added to triethyl phosphite (30 mL). Triethyl phosphite was preheated to 160°C. The reaction mixture was heated at 160°C for 1 hour. The solvent was then removed in vacuo and the resulting glassy solid was flash chromatographed on silica gel eluting with ethyl acetate/hexane (75:25). The desired product was isolated from the column and was recrystallized from ethyl acetate/hexane and collected as a white solid (2.0 g, 40$), m.p. 188-191°C. 1-H NMR (360 MHz, CDCl 3 ) S: 8.95 (br2, 1E, MB), 8.00 (d, 1H, H6), 7.5 (m, 15H, 3xC6E5 ), 7.2 (m, 1E, El'), 6.7 (m, 1E, E2'), 6.05 (m, 1E, E3' ), 5.2 (dd, 1E, E5), 5.10 (br s, 1E, E4'), 3.6 (m, 2E, E5').

2' 3'- dideoksy- 2', 3'- didehydrouridin ( d4U) 2' 3'- dideoxy- 2', 3'- didehydrouridine (d4U)

5'-O-trityl-2',3'-dideoksy-2'3'-didehydrouridin (0,5 g, 1,1 mM) ble oppløst i en blanding av kloroform (10 ml) og metanol (2ml) inneholdende 2$ p-toluensulfonsyre. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 0,75 t. og nøytralisert med 2N NaOE (0,5 ml). Oppløsningsmidlet ble fjernet i vakuum og resten kromatografert på silisiumoksydgel under eluering med kloroform/aceton (2:1). Det ønskede produktet ble isolert som et hvitt krystallinsk fast stoff med samme fysiske og spektroskopiske karakteristika som d4U fremstilt ved en alternativ metode, sm.p. 155°C. 5'-O-trityl-2',3'-dideoxy-2'3'-didehydrouridine (0.5 g, 1.1 mM) was dissolved in a mixture of chloroform (10 mL) and methanol (2 mL) containing 2 $ p-toluenesulfonic acid. The reaction mixture was stirred at room temperature for 0.75 h and neutralized with 2N NaOE (0.5 mL). The solvent was removed in vacuo and the residue chromatographed on silica gel eluting with chloroform/acetone (2:1). The desired product was isolated as a white crystalline solid with the same physical and spectroscopic characteristics as d4U prepared by an alternative method, m.p. 155°C.

%-NMR (360 MEz, D20/DMS0) S: 7,8 (d, 1E, E6), 6,7 (m, 1E, El'), 6,37 (m, 1E, H2'), 5,8 (m, 1E, E3'), 5,56 (d, 1E, E5), 4,7 (m, 1E, E4' ), 3,6 (m, 2E, E5' ). %-NMR (360 MEz, D2O/DMSO) S: 7.8 (d, 1E, E6), 6.7 (m, 1E, E1'), 6.37 (m, 1E, H2'), 5, 8 (m, 1E, E3'), 5.56 (d, 1E, E5), 4.7 (m, 1E, E4' ), 3.6 (m, 2E, E5' ).

<13>C-NMR (70 MEz, D20/DMS0): 163 (C4), 151 (C2), 141 (C2'), 135 (C3'), 126 (C6), 101 (C5), 89 (cl'), 87 (C4'), 62 (C5' ). <13>C-NMR (70 MEz, D20/DMS0): 163 (C4), 151 (C2), 141 (C2'), 135 (C3'), 126 (C6), 101 (C5), 89 (cl '), 87 (C4'), 62 (C5' ).

2'. 3'- metoksymetylidenuridin 2'. 3'-Methoxymethylidenuridine

Uridin (50 g, 0,025 M) ble overført til en 1 liters rundbundet kolbe under nitrogenatmosfære. Tørt, friskt destillert tetrahydrofuran (500 ml) og pyrldinium-p-toluensulfonat (5 g, 20 mM) ble satt til reaksjonsblandingen. Timetyl-ortoformiat (109 g, 1,03 M) ble deretter tilsatt langsomt via en tilsetningstrakt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 18 timer ved romtemepratur, hvorved reaksjonsblandingen ble homogen. Vann (18 g, IM) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 1/2 time hvoretter pyridin (20 ml) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i ytterligere 18 timer, og oppløsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Det resulterende hvite faste stoffet ble lynkromatografert på silisiumoksydgel for oppnåelse av det ønskede produktet som et hvitt fast stoff (40 g, 68%), sm.p. 188-190°C (lit. 189-190° ). Uridine (50 g, 0.025 M) was transferred to a 1 L round bottom flask under nitrogen atmosphere. Dry, freshly distilled tetrahydrofuran (500 mL) and pyrldinium p-toluenesulfonate (5 g, 20 mM) were added to the reaction mixture. Dimethyl orthoformate (109 g, 1.03 M) was then added slowly via an addition funnel. The reaction mixture was stirred for 18 hours at room temperature, whereby the reaction mixture became homogeneous. Water (18 g, 1 M) was added and the reaction mixture was stirred for an additional 1/2 hour after which pyridine (20 mL) was added. The reaction mixture was stirred at room temperature for an additional 18 hours, and the solvent was removed in vacuo. The resulting white solid was flash chromatographed on silica gel to afford the desired product as a white solid (40 g, 68%), m.p. 188-190°C (lit. 189-190°).

5- 0- acetvl- 2'. 3'- dideoksy- 2' . 3'- didehydrouridin 5-0-acetvl-2'. 3'-dideoxy-2'. 3'-didehydrouridine

Metoksymetylidenforbindelsen (11,8 g, 41 mM) ble oppløst i eddiksyreanhydrid (110 ml) og p-toluensulfonat (20 mg) ble tilsatt, og reaksjonsblandingen oppvarmet til 140°C i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt, og trietylamin (1 ml) ble tilsatt. Oppløsningsmidlene ble fjernet i vakuum og produktet kromatografert på silisiumoksydgel under eluering med kloroform/aceton (4:1) for oppnåelse av det ønskede produktet som en klar olje. The methoxymethylidene compound (11.8 g, 41 mM) was dissolved in acetic anhydride (110 mL) and p-toluenesulfonate (20 mg) was added, and the reaction mixture heated to 140°C for 6 hours. The reaction mixture was cooled and triethylamine (1 mL) was added. The solvents were removed in vacuo and the product chromatographed on silica gel eluting with chloroform/acetone (4:1) to give the desired product as a clear oil.

^E-NMR (360 MHz, DMSO) §: 11,3 (br s, 1H, NH), 7,4 (d, 1H, H6), 6,8 (m, 1E, Hl'), 6,4 (m, 1H, H2'), 5,9 (m, 1H, H3'), 5,6 (d, 1H, H5), 5,0 (m„ 1H, H4'), 4,2 (m, 2H, H5'), 2,0 (s, 3H, CH3). ^E-NMR (360 MHz, DMSO) §: 11.3 (br s, 1H, NH), 7.4 (d, 1H, H6), 6.8 (m, 1E, Hl'), 6.4 (m, 1H, H2'), 5.9 (m, 1H, H3'), 5.6 (d, 1H, H5), 5.0 (m„ 1H, H4'), 4.2 (m, 2H, H5'), 2.0 (s, 3H, CH3).

5' - 0 - ( 2 '- acetoksyi sobutyryl)- 3- 0- acetyl- 2'- brom- 2' deok-s<y>uridin 5' - 0 - ( 2 '- acetoxyi sobutyryl)- 3- 0- acetyl- 2'- bromo- 2' deoc- s<y>uridine

Uridin (5,0 g, 0,021 M) ble suspendert i acetonitril (90 ml), og 2-acetoksyisobutyrylbromid (12,85 g, 0,063 M) ble tilsatt i løpet av 15 minutter, og reaksjonen ble oppvarmet ved 80°C i 3 timer. Den homogene oppløsningen ble avkjølt til tomtemperatur og oppløsningsmidlet fjernet i vakuum. Den resulterende sirupen ble oppløst i EtOAC (200 ml) og vasket med NaHCOO ml). Den organiske fasen ble tørket over MgS04 og oppløsningsmidlet fjernet i vakuum. Kromatografi på Si02 ( 75% EtOAc/25# Heks) ga 6,7 g av et hvitt skum (67$), sm.p. 68-70°C (MS M<+> = 477). Uridine (5.0 g, 0.021 M) was suspended in acetonitrile (90 mL), and 2-acetoxyisobutyryl bromide (12.85 g, 0.063 M) was added over 15 min, and the reaction was heated at 80 °C for 3 hours. The homogeneous solution was cooled to room temperature and the solvent removed in vacuo. The resulting syrup was dissolved in EtOAc (200 mL) and washed with NaHCOO mL). The organic phase was dried over MgSO 4 and the solvent removed in vacuo. Chromatography on SiO 2 (75% EtOAc/25% Hex) gave 6.7 g of a white foam (67$), m.p. 68-70°C (MS M<+> = 477).

2'. 3'- dihvdro- 2'. 3'- dideoksyuridin ( D4U) 2'. 3'-dihydro-2'. 3'-dideoxyuridine (D4U)

Bromuridin (2 g, 4,2 mM) ble oppløst i 3 ml DMF og satt dråpevis til en oppslemming av Zn/Cu (0,70 g, 10,5 mM) i tørt DMF (25 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt i2,5 timer ved romtemperatur og ikke noe utgangsmateriale kunne iaktaes ved TLC. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom celitt, og filtratet konsentrert i vakuum i et høyvakuumsystem ved 20° C. Det resulterende hvite faste stoffet (1,1 g, 85$) ble oppløst i MeOH og avkjølt til 0°C med et is-vannbad. Vannfritt ammoniakk ble boblet gjennom i 20 minutter, og oppløsningen oppvarmet til 60°C i 18 timer. TLC avslørte en flekk svarende til D4TJ. Oppløsningsmidlene ble fjernet og det resulterende hvite faste stoffet ble kromatografert på Si02 (10$ MeOH/CH2C2) for oppnåelse av 5 g (5356) av det ønskede produktet, sm. p. 155°C (lit. 154-155°C). Bromuridine (2 g, 4.2 mM) was dissolved in 3 mL DMF and added dropwise to a slurry of Zn/Cu (0.70 g, 10.5 mM) in dry DMF (25 mL). The reaction mixture was stirred for 2.5 hours at room temperature and no starting material could be observed by TLC. The reaction mixture was filtered through celite and the filtrate concentrated in vacuo in a high vacuum system at 20°C. The resulting white solid (1.1 g, 85$) was dissolved in MeOH and cooled to 0°C with an ice-water bath. Anhydrous ammonia was bubbled through for 20 minutes and the solution heated to 60°C for 18 hours. TLC revealed a spot corresponding to D4TJ. The solvents were removed and the resulting white solid was chromatographed on SiO 2 (10% MeOH/CH 2 Cl 2 ) to afford 5 g (5356) of the desired product, m.p. p. 155°C (lit. 154-155°C).

Referanseliste Reference list

1. (a) F. Barre-S1nouss1, J.C. Chermann, R. Rey, M.T. Nugeyre, S. Chamaret, C. Gruest, C. Dauguet, C. Axler-BUn, C. Rouzioux, W. Rozembaum og L. Montagnier, Science (Washington D.C.) 1983, 220, 868-871. (b) S. Broder, R.C. Gallo, N. Engl. J. Med. 1984, 311, 1292-1297. 1. (a) F. Barre-S1nouss1, J.C. Chermann, R. Rey, M.T. Nugeyre, S. Chamaret, C. Gruest, C. Dauguet, C. Axler-BUn, C. Rouzioux, W. Rozembaum and L. Montagnier, Science (Washington D.C.) 1983, 220, 868-871. (b) S. Broder, R.C. Gallo, N. Engl. J. Med. 1984, 311, 1292-1297.

(c) S. Broder, R.C. Gallo: Annu. Rev. Immunol. 1985, 3, 321-336. (c) S. Broder, R.C. Gallo: Yes. Fox. Immunol. 1985, 3, 321-336.

2. M. Popovic, M.G. Sarngadharan, E. Read, R.C. Gallo, Science (Washington D.C.) 1984, 224, 497-500. (b) R.C. Gallo, M.G. Sarngadharan, M. Popovic, G.M. Shaw, B. Hahn, F. Wong-Stahl, M. Robert-Guroff, Z. Salahaddian, P.D. Markham, Prog. Allergy 1986, 37, 1-45. 3. M.A. Fischl, D.D. Richman, M.H. Grieco, M.S. Gottlieb, P.A. Volberding, O.L. Laskin, J.M. Leedom, J.E. Groopman, D. Mildvan, R.T. Schooley, G.G. Jackson, D.T. Durack, D. King, New Engl. J. Med., 1987, 317, 185. 4. H. Mitsuya, S. Broder, Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 1986, 83, 1911-1915. 5. (a) T.S. Lin, R. Shinazi, M.S. Chen, E. Kinney-Thomas. W.H. Prusoff, Biochem. Pharmacol. 1987, 36, 311. (b) J. Balzarini, R. Pauwels, P. Herdewijn, E. De Clercq, D.A. Cooney, G-J. Kang, M. Dalai, D.G. Johns, S. Broder, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1986, 140, 735. 6. B.D. Cheson, A.D. Levine, D. Mildvan, L.D. Kaplan, P. Wolfe, A. Rios, J. Groopman, P. Gill., P.A. Volbéderding, B.J. Poiesz, M.S. Gottlieb, H. Holden, D.J. Volsky, S.S. Silver, M.J. Hawkins, J. Amer. Med. Assoc. 1987, 258, 1347. 7. (a) J. Balzarini, H. Mitsuya, E. De Clercq, S. Broder, Int. J. Med., 1986, 37, 451. (b) S.W. Mitchell, D.R. H1cks, J.B. McCormick, Lancet 1984, ii, 1367. 8. (a). P.S. Sarin, Y. Taguchi, D, Sun, A; Thornton, R.C. Gallo, B. Oberg, Biochem. Pharmacol. 1985, 34, 4075. (b) E.G. Sandstrom, J.C. Kaplan, R.E. Byington, M.S. Hirsch, Lancet 1985, i, 480. 2. M. Popovic, M.G. Sarngadharan, E. Read, R.C. Gallo, Science (Washington D.C.) 1984, 224, 497-500. (b) R.C. Gallo, M.G. Sarngadharan, M. Popovic, G.M. Shaw, B. Hahn, F. Wong-Stahl, M. Robert-Guroff, Z. Salahaddian, P.D. Markham, Prog. Allergy 1986, 37, 1-45. 3. M.A. Fischl, D.D. Richman, M.H. Grieco, M.S. Gottlieb, P.A. Volberding, O.L. Laskin, J.M. Leedom, J.E. Groopman, D. Mildvan, R.T. Schooley, G.G. Jackson, D.T. Durack, D. King, New Engl. J. Med., 1987, 317, 185. 4. H. Mitsuya, S. Broder, Proe. Nati. Acad. Pollock. United States, 1986, 83, 1911-1915. 5. (a) T.S. Lin, R. Shinazi, M.S. Chen, E. Kinney-Thomas. W.H. Prusoff, Biochem. Pharmacol. 1987, 36, 311. (b) J. Balzarini, R. Pauwels, P. Herdewijn, E. De Clercq, D.A. Cooney, G-J. Kang, M. Dalai, D.G. Johns, S. Broder, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1986, 140, 735. 6. B.D. Cheson, A.D. Levine, D. Mildvan, L.D. Kaplan, P. Wolfe, A. Rios, J. Groopman, P. Gill., P.A. Volbéderding, B.J. Poiesz, M.S. Gottlieb, H. Holden, D.J. Volsky, S.S. Silver, M.J. Hawkins, J. Amer. With. Assoc. 1987, 258, 1347. 7. (a) J. Balzarini, H. Mitsuya, E. De Clercq, S. Broder, Int. J. Med., 1986, 37, 451. (b) S.W. Mitchell, D.R. H1cks, J.B. McCormick, Lancet 1984, ii, 1367. 8. (a). p.s. Sarin, Y. Taguchi, D, Sun, A; Thornton, R.C. Gallo, B. Oberg, Biochem. Pharmacol. 1985, 34, 4075. (b) E.G. Sandstrom, J.C. Kaplan, R.E. Byington, M.S. Hirsch, Lancet 1985, i, 480.

9. H.C. Lane, A.S. Fauci, Ann. Intern. Med. 1985, 103, 714. 9. H.C. Lane, A.S. Fauci, Ann. Intern. With. 1985, 103, 714.

10. P. Chandra, P.S. Sarin, Arznrim-Forsch/Drug Res. 1986, 36, 184. 11. A.S. Tyms, E.M. Berrie, T.A. Ryder, R.J. Nash, M.P. Hegarty, D.L. Taylor, M.A. Mobberley, J.M. Davis, E.A. Bell. D.A. Jeffries, D. Taylor-Robinson, L.E. Fellows, Lancet 1987, 1i, 1025. 12. V. Faber, A. Newell, A.G. Dalgleish, M. Malkovsky, Lancet 1987, ii, 827. 13. (a) H. Hartmann, G. Hunsmann, F. Eckstein, Lancet 1987, i, 40. (b) M. Baba, R. Pauwels, J. Balzarini, P. Herdewijn, E. De Clercq, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 145, 1080. 14. (a) P. Herdewijn, J. Balazarini, E. De Clercq, R. Pauwels, M. Baba, S. Broder, H. Vanderhaeghe, J. Med. Chem. 1987, 30, 1270. (b) E. Mattes, C. Lehmann, D. Scholz, M. von Janta-Lipinski, K. Gaertner, H.A. Rosenthal, P. Langen, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 148, 78. (c) B. Polski, J.M.W. Gold, W.D. Hardy, P.A. Baron, E.E. Zuckermann, T-C. Chou, S.M. Levine, N. Flomenberg, L. Wang, K.A. Watanabe, J.J. Fox, D. Armstrong, 27th ICAAC 1987, Abstract 368, side 161. 15. (a) T.S. Lin, M.S. Chen, Y-S. Gao, I. Ghazzouli, W.H. Prusoff, J. Med. Chem. 1987, 30, 440. (b) T.S. Lin, R.F. Shinazi, W.H. Prusoff, Biochem. Pharmacol. 1987, 17, 2713. (c) M. Baba, R. Pauwels, E. De Clercq, J. Desmyter, M. Vandeputte, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 142, 128. (d) J. Balazarini, G-J. Kang, M. Dalai, P. Herdewijn, E. De Clercq, S. Broder, D.G. Johns, Mol. Pharmacol. 1987, 32, 162. (e) Y. Hamamoto, H. Nakashima, T. Matsui, A. Matsuda, T. Ueda, N. Yamamoto, Antimicrob. Agents Chemother. 1987, 31, 907. 16. J. Horwitz, J. Chua, i "Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry" (vol. 1), W.W. Zorbach, R.S. Tipson (eds.), Interscience, New York, side 344. 17. J. Horwitz, J. Chua, M.A. Da Rooge, M. Noel, I.L. Klundt, J. Org. Chem. 1966, 31, 205. 10. P. Chandra, P.S. Sarin, Arznrim-Forsch/Drug Res. 1986, 36, 184. 11. A.S. Tyms, E.M. Berrie, T.A. Ryder, R.J. Nash, M.P. Hegarty, D.L. Taylor, M.A. Mobberley, J.M. Davis, E.A. Bell. THEN. Jeffries, D. Taylor-Robinson, L.E. Fellows, Lancet 1987, 1i, 1025. 12. V. Faber, A. Newell, A.G. Dalgleish, M. Malkovsky, Lancet 1987, ii, 827. 13. (a) H. Hartmann, G. Hunsmann, F. Eckstein, Lancet 1987, i, 40. (b) M. Baba, R. Pauwels, J. Balzarini, P. Herdewijn, E. De Clercq, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 145, 1080. 14. (a) P. Herdewijn, J. Balazarini, E. De Clercq, R. Pauwels, M. Baba, S. Broder, H. Vanderhaeghe, J. Med. Chem. 1987, 30, 1270. (b) E. Mattes, C. Lehmann, D. Scholz, M. von Janta-Lipinski, K. Gaertner, H.A. Rosenthal, P. Langen, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 148, 78. (c) B. Polski, J.M.W. Gold, W.D. Hardy, P.A. Baron, E.E. Zuckermann, T-C. Chou, S.M. Levine, N. Flomenberg, L. Wang, K.A. Watanabe, J.J. Fox, D. Armstrong, 27th ICAAC 1987, Abstract 368, page 161. 15. (a) T.S. Lin, M.S. Chen, Y-S. Gao, I. Ghazzouli, W.H. Prusoff, J. Med. Chem. 1987, 30, 440. (b) T.S. Lin, R.F. Shinazi, W.H. Prusoff, Biochem. Pharmacol. 1987, 17, 2713. (c) M. Baba, R. Pauwels, E. De Clercq, J. Desmyter, M. Vandeputte, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987, 142, 128. (d) J. Balazarini, G-J. Kang, M. Dalai, P. Herdewijn, E. De Clercq, S. Broder, D.G. Johns, Mol. Pharmacol. 1987, 32, 162. (e) Y. Hamamoto, H. Nakashima, T. Matsui, A. Matsuda, T. Ueda, N. Yamamoto, Antimicrob. Agents Chemother. 1987, 31, 907. 16. J. Horwitz, J. Chua, in "Synthetic Procedures in Nucleic Acid Chemistry" (vol. 1), W.W. Zorbach, R.S. Tipson (eds.), Interscience, New York, page 344. 17. J. Horwitz, J. Chua, M.A. Da Rooge, M. Noel, I.L. Klundt, J. Org. Chem. 1966, 31, 205.

18. J.J. Fox, N.C. Miller, J. Org. Chem. 1963, 28, 936. 18. J.J. Fox, N.C. Miller, J. Org. Chem. 1963, 28, 936.

19. G. Kowollik, K. Gaertner, P. Langen, Tetrahedron Lett., 1969, nr. 44, 3863. 20. R.P. Glinski, M.S. Khan, R.L. Kal arnas, M.B. Sporn, J. Org. Chem., 1973, 38, 4299. 21. V.J. Davisson, D.R. Davis, V.M. Dixit, CD, Poulter, J. Org. Chem., 1987, 52, 1794. 22. B.E. Griffin, J. Jarman, C.B. Reese, J. Sulston, Tetrahedron, 1967, 23, 230. 19. G. Kowollik, K. Gaertner, P. Langen, Tetrahedron Lett., 1969, No. 44, 3863. 20. R.P. Glinski, M.S. Khan, R.L. Kal arnas, M.B. Spurn, J. Org. Chem., 1973, 38, 4299. 21. V.J. Davison, D.R. Davis, V.M. Dixit, CD, Poulter, J. Org. Chem., 1987, 52, 1794. 22. B.E. Griffin, J. Jarman, C.B. Reese, J. Sulston, Tetrahedron, 1967, 23, 230.

23. M. Ando, H. Ohhara, K. Takase, Chem. Lett., 1986, 879. 23. M. Ando, H. Ohhara, K. Takase, Chem. Lett., 1986, 879.

24. T.C. Jain , I.D. Jenkins, A.F. Russell, J.P.H. Verheyden, J.H. Moffatt, J. Org. Chem., 1974, 39, 80. 24. T.C. Jain, I.D. Jenkins, A.F. Russell, J.P.H. Verheyden, J.H. Moffatt, J. Org. Chem., 1974, 39, 80.

Claims

1. Process for the preparation of a 2 3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleoside of the formula where X is N or C-H, Y is C-R<5> or N, Z is C-H or N, R<4> is OH or NH2, and r<5> is H, unsubstituted or halogen-substituted alkyl with the formula CnH2nA, or unsubstituted or halogen-substituted alkenyl of the formula -(CH2)m-CH=CHA, where m is 0, 1, 2 or 3, n is 1, 2 or 3 and A is H, F, Cl, Br or I , characterized in that one a) converts a 2'-deoxynucleoside with the formula to a reactive 2,3'-anhydro-2'-deoxynucleoside intermediate of the formula and b) converting the reactive 2,3'-anhydro-2'-deoxynucleoside from step (a) to the desired product 2',3'-dideoxy-2'3'-didehydronucleoside in the presence of tetrabutylammonium fluoride (TBAF).

2. Method according to claim 1, characterized in that a 2,3'-anhydro-2'-deoxynucleoside intermediate is used, in which the pyrimidine base is thymine.