NL8300755A - Chemische verbindingen. - Google Patents

Description

* x *s«- 1,3 VO 4588

Chemische verbindingen.

Deze uitvinding heeft betrekking op nieuwe cefalosporine- derivaten met de formule 1 van het formuleblad, waarin R waterstof of 2 een gebruikelijke amino-beschermende groep is en R een rechte of vertakte alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, allyl, 2-butenyl is of een 5 groep waarin 3 ' 4

R -C-R

COOH

3 4 3

waarin R en R elk onafhankelijk waterstof, methyl of ethyl zijn, of R

4 en R , tezamen genomen met het koolstofatoom waaraan zij zijn gebonden een cycloalkylideenring zijn met 3-5 koolstof atomen vormen, en niet-10 giftige farmaceutisch aanvaardbare zouten, fysiologisch hydrolyseerbare esters en solvaten daarvan. Tevens worden werkwijzen ter bereiding daarvan beschreven.

Het Britse octrooischrift nr. 1 399 086 geeft een algemene beschrijving van een groot aantal cefalosporinen met de formule 18 a 15 van het formuleblad waarin R waterstof of een organische groep is, R een veretherende monovalente organische groep is gebonden aan de zuurstof via een koolstofatoom. B ^ S of ^ S—> O is en P een organische groep is. De 2-aminothiazol-4-yl-groep is echter niet geïdentificeerd als een R-substituent en er is geen suggestie dat P betrekking kan hebben op N-20 methylpyrrolidiniummethyl (of elke andere volledig verzadigde stikstof-bevattende ring, die via zijn stikstofatoom aan de 3-methyleenheid is gebonden en die een extra substituent aan zijn stikstofatoom bevat). De Amerikaanse octrooischriften 3 971 778 en nrs. 4 024 133, 4 024 137, 4 064 346, 4 033 950, 4 079 178, 10 91 209, 4 092 477 en 4 093 803 geven 25 soortgelijke beschrijvingen.

Het Amerikaanse octrooischrift 4.278.793 bevat een algemene beschrijving van een groot aantal cefalosporinederivaten met de formule 19 van het formuleblad waarin de variabelene R^, R£, R^, R^, X en A algemene definities geven van de overeenkomende substituenten van de 30 hierin geclaimde verbindingen volgens formule 1. In de 20 kolommen definities van de verschillende substituentgroepen, de 78 pagina’s lange tabel 8300755 P I» 2 van structuurformules en de 225 voorbeelden wordt echter niet beschreven dat A A-methylpyrrolidiniummethyl (of elke andere volledig verzadigde stikstof-bevattende heterocyclische ring) kan zijn, die via zijn stikstofatoom aan de 3-methyleenheid is gebonden en een extra substituent aan 5 zijn stikstofatoom bevat. Het Britse octrooischrift nr. 1 604 971 komt hiermee overeen en geeft een nagenoeg identieke beschrijving. De gepubliceerde Britse octrooiaanvrage nr. 2 028 305 A bevat, hoewel blijkbaar niet formeel verwant, dezelfde globale algemene beschrijving maar geeft als voorbeeld A alleen waterstof.

10 Het West-Duitse Offenlegungsschrift 2 805 655 be schrijft 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)methoxyimino aceetamido]ce- falosporinezuurderivaten met de formule 20 van liet formuleblad, waarin 1 2 R NH een naar keuze beschermde aminogroep is, R halogeen of een naar keuze gesubstitueerde hydroxyl-thiol of aminogroep is, en COOR een naar 15 keuze veresterde carboxylgroep is. Tevens wordt beschreven dat wanneer 2 R een aminogroep is, deze digesubstitueerd kan zijn en dat de substi- tuenten, tezamen genomen met het N-atoom inter alia een pyrrolidinogroep kunnen vormen. Er wordt echter geen melding gemaakt van een N-methyl- pyrrolidiniummethylgroep (of enige andere quatemaire ammoniumgroep) en 2 20 substituent R kan niet aan de 3-plaats gebonden zijn via een methyleen-groep.

* Het Amerikaanse octrooischrift nr. 4 278 671 beschrijft 7-[ 2-(2-aminothiazol-l-4-yl) -2-(syn) -methoxy-iminoaceetamido]cefalospo-rinederivaten met de formule 21 van het formuleblad, waarin R2NH een 25 naar keuze beschermde aminogroep is en R^ waterstof of "de rest van een nucleofiele verbinding" is. De term. "rest van een nucleofiele verbinding" wordt ruim gedefinieerd en er wordt vermeld dat R^ 'haar keuze een quatemaire ammoniumgroep kan zijn". Pyridinium, verschillend gesubstitueerd pyridinium, chinolinium, picolinium en lutidinium worden 30 beschreven als quatemaire ammoniumgroepen. Er is geen suggestie dat de quatemaire ammoniumgroep uit een volledig verzadigd stiks tof-bevattend heterocyclisch ringsysteem kan bestaan dat via zijn stikstofatoom is gebonden en dat een extra substituent aan zijn stikstofatoom bevat.

Het Britse octrooischrift nr. 1 581 854 komt hiermede overeen en geeft 35 een nagenoeg identieke beschrijving. Andere octrooien van dezelfde aanvrager, die niet volledig verwant zijn maar die soortgelijke beschrij- 8300755 „ - * 3 vingen, geven, omvatten het Amerikaanse octrooischrift 4 098 888 en zijn afsplitsingen, de Amerikaanse octrooischriften 4 203 899, 4 205 180 en 4 298 606, en het Britse octrooischrift 1 536 281.

Het Amerikaanse octrooischrift nr.. 4 168 309 beschrijft

5 cefalosporinederivaten met de formule 22 van het formuleblad, waarin R

a b fenyl, thiënyl of furyl is; R en R onafhankelijk waterstof, alkyl, cycloalkyl, fenyl, naftyl, thiënyl, furyl, cazboxy, alkoxycarbonyl of a b cyano zijn, of R en R tezamen genomen met het stikstofatoom waaraan zij zijn gebonden een cycloalkylideen- of cycloalkenylideenring vormen; 10 en m en n elk O of 1 zijn zodanig dat de som van m en n 0 of 1 is; en R tezamen met het stikstofatoom waaraan deze gebonden is, ruim gedefinieerd is maar niet inter alia een verzadigde 5-ring mag zijn. De verbinding heeft de formule 23 van het formuleblad, en wordt als voorbeeld genoemd in voorbeeld V. Het Britse octrooischrift nr. 1 591 439 is hiermede over-15 eenkomend en geeft een nagenoeg identieke beschrijving. Er is geen suggestie in dit octrooischrift dat de R-substituent de 2-aminothiazol-4-yl-eenheid kan zijn of dat de iminosubstituent geen carboxylgroep mag bevatten.

Deze uitvinding heeft betrekking op cefalosporine- 20 derivaten met de formule 1 van het formuleblad, waarin R1 waterstof of 2 een bekende amino-beschermende groep is, en R een rechte of vertakte al- kylgroep met 1-4 koolstofatomen, allyl, 2-butenyl of 3-butenyl is, of 3*4 3 4 een groep R -C-R , waarin R en R elk onafhankelijk waterstof, methyl of

COQH

3 4 25 ethyl zijn, of R en R , tezamen genomen met het koolstof atoom waaraan zij zijn gebonden een cycloalkylideenring kunnen zijn met 3-5 koolstof-atomen, alsmede niet-giftige farmaceutisch aanvaardbare zouten en fysiologisch hydrolyseerbare esters daarvan. Tevens zijn binnen het kader van de uitvinding omvat de solvaten (met inbegrip van hydraten) van de ver-30 bindingen volgens formule 1, alsmede de tautomere vormen van verbindingen volgens formule 1, bijvoorbeeld de 2-iminothiazolin-4-yl-vorm van de 2-aminothiazol-4-yl-eenheid.

Zoals aangetoond in de structuurformule hebben de verbindingen volgens formule 1 de "syn" of "Z" configuratie ten opzichte 35 van de alkoxyimino (of alkenyloxyimino) groep of de carboxy-gesubsti-tueerde alkoxyiminogroep. Aangezien de verbindingen geometrische isome- 8300755 4 * ren zijn kunnen tevens enige van de "anti"-isomeren aanwezig zijn. Deze uitvinding omvat verbindingen volgens formule 1, die tenminste 90% van het "syn"-isomeer bevatten. Bij voorkeur zijn de verbindingen volgens formule 1 " syn"-isomeren die in wezen vrij zijn van de overeenkomende 5 "anti,,-isomeren.

De farmaceutische aanvaardbare zouten van de verbindingen volgens formule 1 omvatten de anorganische basische zouten, zoals de alkalizouten (bijvoorbeeld de natrium- en kaliumzouten) en de aardal-kalizouten (bijvoorbeeld de calciumzouten), ammoniumzouten, organische 10 basische zouten (bijvoorbeeld triëthylamine, procaine, fenetylbenzyl-amine, dibenzylethyleendiamine en andere organische basen die in de techniek van penicilline en cefalosporine zijn toegepast), en de zuur-additiezouten (bijvoorbeeld de zouten met zoutzuur, broomwaterstof zuur, mierezuur, salpeterzuur, zwavelzuur, methaansulfonzuur, fosforzuur, 15 azijnzuur of trifluorazijnzuur) en andere zuren die in de penicilline-en cefalosporine-techniek zijn toegepast. De fysiologisch hydrolyseer- · bare esters omvatten de acyloxyalkylesters, bijvoorbeeld (lagerw)al-kanoyl(lagerw) alkylesters, zoals acetoxymethyl, acetoxyethyl, pivaloyl-oxymethyl en dergelijke. De basische zouten en de esters kunnen worden 20 gevormd met elk van de carboxylgroepen van de verbindingen volgens formule 1. '

De verbindingen volgens formule 1 waarin R* waterstof is vertonen een hoge antibacteriële activiteit tegen verschillende Gram-positieve en Gram-negatieve bacteriën en zijn doelmatig voor de behandeling van bac-25 teriële infecties van dier en mens. De verbindingen volgens formule 1 kunnen op gebruikelijke wijze voor parenterale toepassing worden samengesteld onder gebruik van bekende farmaceutische dragers en verdunnings-middelen en kunnen tot eenheidsdoseringsvormen of multi-doseringshouders worden gevormd. Het preparaat kan de vorm hebben van oplossingen, suspen-30 sies of emulsies in olieachtige of waterige dragers en deze kunnen gebruikelijke dispergeer-, suspendeer- of stabiliserende middelen bevatten. De preparaten kunnen tevens de vorm hebben van een droog poeder dat vóór het gébruik met bijvoorbeeld steriel pyrogeen-vrij water wordt aangemaakt. De verbindingen volgens formule 1 kunnen tevens worden samenge-35 steld als zetpillen onder toepassing van een gebruikelijke zetpilbasis, zoals cacaoboter of andere glyceriden. De verbindingen van deze uitvin- 8300755 «. 4 5 ding kunnen desgewenst in combinatie met andere antibiotica zoals penicilline of andere cefalosporinen worden toegediend.

Indien geleverd in eenheidsdoseringsvormen zullen de preparaten bij voorkeur ongeveer 50 tot ongeveer 1500 mg van de actie-5 ve component volgens formule 1 omvatten. Be dosis voor volwassen mensen zal bij voorkeur in het gebied zijn van ongeveer 500 tot ongeveer 5000 mg per dag, afhankelijk van de frequentie en route van toediening. Indien intramusculair of intraveneus aan volwassenen toegediend, zal een totale dosering van ongeveer 750 tot ongeveer 3000 micron per dag, in 10 verdeelde doses, normaal voldoende zijn, hoewel in het geval van Pseudomonas infecties hogere dagelijkse doses van sommige van de verbindingen gewenst kunnen zijn.

Be voorkeursverbindingen volgens formule 1 zijn die 1 2 3 4 waarin R waterstof en R methyl of ethyl is en R en R elk onafhanke- 2 15 lijk waterstof of methyl zijn. In de voorkeursverbindingen is R methyl 3 4 of zijn R en R elk methyl. Bij de primaire evaluatie van de verbindingen volgens deze uitvinding werden de minimaal remmende concentraties (MRC's) van de verbindingen en de twee referentieverbindingen (cefotaxime en ceftazidime), bepaald met de tweevoudige agar verdunningsmethode in 20 Mueller-Hinton agar ten opzichte van 32 stammen proef organismen in zes groepen. Het in deze proef vastgestelde geometrische gemiddelde van de MRC's wordt vermeld in de tabellen A en D.

(Zie formules 24, cefotaxime; ter vergelijking en 25, ceftazidime, ter vergelijking ten opzichte van formule 1, de proefverbindingen).

25 Men kan waarnemen dat alle proefverbindingen actiever dan cefotaxime waren tegen de (G-)-II en (G-)-III groepen proef organismen, waarbij de'meest verkozen verbinding Ia duidelijk meer actief was. Alle proefverbindingen waren meer actief dan ceftazidime tegen de (G+)-Ia en (G+)-Ib groepen van proef organismen, waarbij de meest verko-30 zen verbinding la duidelijk actiever was dan ceftazidime tegen alle groepen proef organismen met uitzondering van (G-)III, dat enigszins meer gevoelig was voor ceftazidime.

De absorptie van de meest verkozen verbinding Ia en referentieverbindingen (cefotaxime en ceftazidime) werden bij muizen be-35 paald na een enkele intramusculaire injectie van de proefverb inding (opgelost in p.lM fosfaat buffer; pH 7) in een dosis van 20 mg Ag. Bloed- 8300755 . » * 6 monsters werden verzameld uit de oogkasholte in geheperiniseerde capillaire buizen en in Mueller-Hinton medium geanalyseerd onder toepassing van Morganella Morganii A9695 als proef organisme. De bloedniveaus op verschillende tijdsintervallen, de halveringstijd-waarden (t^) en de opper-5 vlakken onder de kromme (AUC) worden vermeld in tabel B.

Proeven voor het identificeren van organismen die resistent waren tegen de voorkeursvefbinding volgens formule la, werden eveneens uitgevoerd met cefotaxime en ceftazidime. De MRC van deze drie verbindingen tegen 240 stammen van Enterobacteriaceae werden vastgesteld 10 in een Mueller-Hinton medium en een MRC gelijk aan of groter dan 8 voor tenminste één van de proefverbindingen werd willekeurig gekozen als indicatie van een resistent organisme. Van de 240 stammen bleken er 27 resistent te zijn tegen tenminste één van de proefverbindingen. De resultaten, die 3 organismen aangeven die resistent zijn tegen verbinding la, 15 15 organismen die resistent zijn tegen ceftazidime en 18 organismen die resistent zijn tegen cefotaxime worden vermeld in tabel C.

8300755 7 t, 4 § ra +> ca i

H CM

H CO VO CO w 1 —» ** * * _ Λ co cm m ··-< <n cm ft n

I W ft ft cm "H

s d S ~

H G

-H <D

s I

^ V Λ in o cm n* f* co Sl "cm s «m ·>»'*»» ftl fi a 0,^w O ft m CM n· CM g | cm w fs -P n ,, 0 ra c ö ra 0) s 4J n u a n ra — ra (3 Η <n CM LO — 5 (3 i f* >fm tn «n f» co p*· r* ® 8 S Λ U) *.«**»"· «{ίί ίέ” ° ° ~ - ° ~ I « * | lil j "s ut me j|h in o rno fi j, « h tj>if. cMco^copP: °*iri ^ in o o <n m o o «I -p

H 2 ü o o o o o o ri SS

p,. . {$ O » 3 64 Tl 5 § Λ a +) £ I 1 G ® to i Λ I 5 I 1 cm o h »-t ft co · co cm r ® I 5 w C3 f in · m en en tn cm cm in+jmej w 4. — ft tn ra ra X w en o ü ca cm w Λ

Π 3 - , O

3 (D f! rM

<B u ri H ü P G ft O · , i:>: ï

| 4 Ml · - I

ra 1 cm n1 n* co o ft . +} _ p -p ® u a ^ % Ö» C O' G 0 *P * I 4j ft ft ft ft f> m ft ra -w ra ra ra

‘m ι-t 4J H +J -P

X ra ra ra ra ra co c SÏÏ· > ra > ra fi > δ o ra ra ra ra οι μ o* m rap i f i i ή o ö φ φ φ Φ ft C Qt 5 5 5 5 § "o* m d d 5 5 ff 2 5 •h -w o o o ra > o o r-t rj a ra •η ·η ra ra g c c <w ή .·, „·. ra η <u ra ra ra nl ral > >, o, a ra o a| al >-t o f- ra 5 S >, Qt >,— ra ra o> +> .G o r-t ra i 3 c ra+soir-ta-H ..2 •η g ra -π ra ft Ό <n if it it ii « ή ra λ ra λ η h s

£* CM CM CM CM ITS CM HHHHHHdJ

h « ei si « ü ra Iiiiiiot jj K t^ ik ik Ψ| + + I I I I ^ ra ra^oOrara u o w cd ü u ra > HHHHOÜ w w w w w w Nf 8300755 - j *> 8 ΐ

N

Μ 1Π (Tl CO

3 --- 3 n μ· η Q ♦ Η Η Η ο en * 8 3 Φ Ρ οι 3 r» m r- * \ C Η rt Η Ρ -Η

Ρ S

<W« σ> oj ω Λ Ο - - - θ' ΟΙ Ο π Ο Ι ο οι V0 ^ % % a ο ^ΐ! 3 va 0) Ν Ρ1 Ή 3

W S

Λ 3

It) Ο Ί Is rij Λ ιΠ » - * tr ο ο) ο ζ4 θ' ö •Η 3 Φ •Η Ό — θ' ω J 3 νο σ> ο S -η ο Ρ 3 m m m ^ θ' Φ Ρ τΗ Ρ Φ q ρ

ρ SO

η —* φ 3 0 Η Μ Ρ 3 3 ο 3 3 νο η 'S· οι Φ 3 Ο - - - 3 > Ν O' Φ 00 Η Ρ 3 ρ ρ ρ 3 3 Φ Ρ Ό Ρ Ρ Φ 3 3 0 3 _ Ρ Ρ Ρ 3 3 as Φ Φ 3 Γ- co m > > β ο - - - Φ Φ ρ Ο Γ- ρ 0 0 01 (Μ ΟΙ Μ Ρ Ρ 3 Οι 3ι 3 Φ oim > Ρ 3 3 3 3 <ο -3 — > > Φ 3 0 — Φ Φ Η Η ~ Ό Ό a ^ <-* ο η ρ Λ Λ - Φ Ρ Φ +J Ο 0) Ό φ Ό θ' Φ Φ S fl Ο Ό 3 S S ·Η Ρ Ρ Ρ

Ρ II Ρ fl S Οι S

Ό ΟΙ χ Ρ Φ Φ 3 05 3 Μ θ' ρ θ' Ρ Ρ 3 Λ Ο Ρ Ρ «- Ρ Ρ Φ 3 Φ Φ 3 Λ ϋ > Η ϋ Ο --- 8300755 9

TABEL C

Resistentie (MRC = è 8 .ug/ml) tegen een of meer proef verbindingen van 240 stammen Enterobacteriaceae in Mueller-Hinton medium

Geometrisch gemiddelde MRC (^ug/ml)

Organisme Aantal * "T

5 _._simmen I Ia .__Ceftazidime 1 Cefotaxime

Escherichia coli 1 0,25 32 8

Escherichia coli 14 0,5 8 10 Klebsiella pneumoniae 12 16 0,13

Enterobacter aerogenes 3 0,25 32 13

Enterobacter is -:- aerogenes 1 48 32

Snterobacter cloacae 1 0,13 4 8

Snterobacter / 20 . cloacae/ 3 0,5 40 50

Enterobacter cloacae 3 1,6 >63 >63

Enterobacter cloacae 1 >32 >63 >63 25 Citrobacter freundii 2 0,35 45 32

Citrobacter species 1 0,03 >63 32

Proteus 30 vulgaris 1 0,06 8 8

(^organella J

inorganii j 1 0,06 32 32

Serratia j marcescens 11 1 16 35 Serratia marcescens 12 8 16 l i 8300755 10 ' TABEL, C (Vervolg) _.Geometrisch gemiddelde MRC ( /iig/ml)

Aantal · [ ]7~ .Organisme stammen 13 Ceftazidime Cs fOtaxims

Serratia 5 marcescens 2 2j8 2 11

Serratia* marcescens 14 8 63

Serratia marcescens 18 16 8 10Serratia 1 marcescens · 1 32 >63 >63 ✓ -Totaal aantal resistente 15 stammen 27 3 15 18

Zie verbinding Ie van het formuleblad.

20 TABEL D

_ Geometrische gem, van MRC (mcg/mL)_ _Verbinding__

Proef- Verbinding . , . .

organisme Ie Cefotaxime1 Ceftazidime1 25 (G+) -Ia (5 stammen) 14 1,0 5,1 (G+)-Ib (5) 33 2,2 12 (G-)-Ia (5) ' 0,066 0,015 0,070 (G-)-Ib (6) 0,79 0,35 1,7 30 (G-)-II (5) 1,2 4,1 2,6 (G—)-III (6) 4,0 22 1,8 (G+)-Ia : Penicilline-gevoelig S. aureus (5 stammen) (G+)-Ib : Penicillins-resistent S. aureus (5 stammen) 8300755 11 (G-)-Ia ï Cefalotine-gevoelig E. coli (2 stammen), KI. pneumoniae (1 stam) en Pr. mirabilis (2 stammen) (G-)-Ib : Cefalotine-resistent E. coli (3 stammen) en KI. pneumoniae (3 stammen) 5 (G-)-II ï Pr. morgani (1 stam), Bat, cloacae (2 stammen) en Ser.

Marcescens (2 stammen) (G-)-III : Ps. aeruginosa (6 stammen) ‘ (a) Gemiddelde van 5 proeven

Opgemerkt kan worden dat de verbinding Ie meer actief 10 was dan cefotaxime tegen de (Ge-)-II groep van de proeforganismen en opvallend actiever dan cefotaxime tegen de (G-)-III groep van de proef-organismen (Ps. aeruginosa). Hij was meer actief dan ceftazidime tegen alle groepen van Gram-negatieve proeforganismen met uitzondering van (G-)-III (Ps. aeruginosa), dat wat meer gevoelig was voor ceftazidime.

15 In een ander aspect heeft de uitvinding betrekking op werkwijzen ter bereiding van verbindingen volgens formule 1. Er zijn twee basisprocedures voor het omzetten van een gemakkelijk verkrijgbaar uit-gangscefalosporine in een ander cefalosprine met verschillende substi-tuenten op de 7- en 3-plaatsen. Men kan eerst de 7-substituent verwijde-20 ren en vervangen door de gewenste 7-substituent, en vervolgens de gewenste 3-substituent inbrengen. Naar keuze kan men eerst de gewenste 3-substituent inbrengen en aansluitend de 7-substituent uitwisselen. De verbindingen volgens formule 1 kunnen volgens beide procedures worden bereid en beide vallen binnen het kader van deze uitvinding, maar het 25 heeft de voorkeur eerst de gewenste 7-substituent en vervolgens de gewenste 3-substituent in te brengen. De voorkeursprocedure wordt getoond in reactieschema A en de alternatieve procedure in reactieschema B van het formuleblad. De afkorting "Tr" stelt de trityl(difenylmethyl)-groep voor die een voorkeursamino-beschermende groep is. Afkorting "Ph" stelt 30 de fenylgroep voor. Aldus is de -CH(Ph) ^ eenheid de benZhydryl-groep, welke een voorkeurscarboxyl-beschermende groep is. De reactieschema1 s C en D van het formuleblad tonen de bereiding van verbinding (le) waar- 1 3 4 in R waterstof is en R en R elk methyl zijn.

Hoewel de bovenstaande reactieschema's voorkeurs-multi-35 traps procedures voor de bereiding van de verbindingen van formule 1 aangeven, is het duidelijk dat eveneens andere uitgangsmaterialen en proce- 8300755 12 dures kunnen worden toegepast ter bereiding van de in de sleuteltrap van elk reactieschema toegepaste .tussenprodukten. Aldus is de sleuteltrap in reactieschema A de reactie van verbinding 7 met N-methylpyrroli-dine. Verbinding 7 kan op zichzelf door andere procedures worden be-5 reid. Op soortgelijke wijze is de sleuteltrap in reactieschema B de acylering van verbinding 12 met verbinding 4. Beide verbindingen 12 en 4 kunnen via andere procedures worden bereid.

De sleuteltrap in reactieschema C is de reactie van verbinding 6a met N-methylpyrrolidine. Verbinding 6a kan op zichzelf via 10 andere procedures worden bereid. Op soortgelijke wijze is de sleuteltrap in reactieschema D de acylering van verbinding 12 met verbinding 3a'. Beide verbindingen 12 en 3a' kunnen via andere procedures worden bereid.

De onderhavige uitvinding voorziet in een werkwijze voor 2 de bereiding van verbindingen van de formule 1, waarin R een rechte 15 of vertakte alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, allyl, 2-butenyl of 3-butenyl is, of een groep ^ ί 4

_3 - C - R R

CQOR

3 4 waarin R en R elk onafhankelijk waterstof, methyl of ethyl zijn of 3 4 R en R tezamen genomen .met het koolstofatoom waaraan zij zijn verbon- 20 den, een cycloalkylideênring met 3-5 koolstofatomen kunnen zijn, alsmede niet-figtige farmaceutisch aanvaardbare zouten, fysiologisch hy- drolyseerbare esters en solvaten daarvan volgens welke een verbinding 2 met de formule 14 van het formuleblad, waarin R de voomoemde betekenis- 1 2 sen heeft, B een bekende carboxyl-beschermende groep is en B een be- 25 kende amino-beschermende groep is, met N-methylpyrrolidine in reactie wordt gebracht onder vorming van een. verbinding met de formule. 15 van het formuleblad, en aansluitend alle beschermende groepen via gebruikelijke middelen worden verwijderd, of een verbinding met de formule 14a 3 4 van het formuleblad, waarin R en R de voomoemde betekenissen hébben, 13 2 30 B en B gebruikelijke carboxyl-beschermende groepen zijn en B een bekende amino-beschermende groep is, met N-methylpyrrolidine in reactie wordt gébracht, waarbij een verbinding wordt gevormd met de formule 15a van het formuleblad, en aansluitend alle beschermende groepen via gebruikelijke middelen worden verwijderd.

35 De reactie wordt uitgevoerd in een niet-waterig orga- 8300755 13 nisch oplosmiddel, zoels methyleenchlöride, chloroform, ethyl ether, hexaanethylacetaat, tetrahydrof uran, acetonitril en dergelijke, of mengsels van dergelijke oplosmiddelen. De reactie wordt doelmatig uitgevoerd bij een temperatuur van ongeveer -10 tot ongeveer +50°C; waarbij nor-5 maal de voorkeur wordt gegeven aan het uitvoeren van de reactie bij kamertemperatuur. Tenminste een mol N-methylpyrrolidine wordt toegepast per mol van verbinding 14 of 14a; normaal word er de voorkeur aan gegeven een 50 - 100% overmaat N-methylpyrrolidine te gebruiken.

Carboxy1-b eschermende groepen geschikt om te worden 10 toegepast als B* en in de voomoemde reactie zijn aan de vakman bekend en omvatten aralkylgroepen, zoals benzyl, p-methaxybenzyl, p-nitro-benzyl en difenylmethyl (benzhydryl); alkylgroepen zoals t-butyl; halo-alkylgroepen zoals 2,2,2-trichloorethyl en andere carboxy1-b es chermende groepen als in de literatuur beschreven, bijvoorbeeld in het Brits 15 octrooischrift 1 399 086. Er wordt de voorkeur aan gegeven carboxy1-beschermende groepen te gebruiken, die gemakkelijk door behandeling met zuur worden verwijderd. Bijzondere voorkeurs carboxyl-beschermende groepen zijn de benzhydryl- en t-butyleenheden.

2

Amino-beschermende groepen geschikt om als B te wor-20 den toegepast zijn tevens in de techniek bekend en omvatten de trityl-groep en acylgroepen, zoals chlooracetyl. Amino-beschermende groepen die gemakkelijk door behandeling met zuur kunnen worden verwijderd, bijvoorbeeld een tritylgroep, hebben voorkeur.

De onderhavige uitvinding voorziet tevens in een werk- 2 25 wxjze ter bereiding van verbindingen met de formule 1, waarin R een rechte of vertakte alkylgroep met 1-4 koolstof atomen, allyl, 2-butenyl of 3-butenyl is, of een groep 3 · 4

R - C - R

COOH

3 4 waarin R en R elk onafhankelijk waterstof, methyl of ethyl zijn, of 1 8300755 4 30 R en R tezamen genomen met het koolstofatoom waaraan zij zijn gebonden een cycloalkylideenring met 3-5 koolstofatomen kunnen zijn, alsmede niet-giftige farmaceutisch aanvaardbare zouten, fysiologisch hydroly-seerbare esters en sulfaten daarvan, volgens welke werkwijze een verbinding met de formule 16 van het formuleblad, of een N-silylderivaat daar- * %.

14 van, waarin B* waterstof een bekende earboxyl-beschermende groep is, met een acyleringsderivaat van een zuur volgens de formule 17 van het for- 2 2 muleblad, waarin B een bekende amino-beschermende groep is, en R de voomoemde betekenissen heeft, wordt geacyleerd, waarbij een verbin-5 ding wordt gevormd door de formule 15 van het formuleblad, en aansluitend alle beschermende groepen worden verwijderd of verbinding 16 of een N-silylderivaat daarvan wordt geacyleerd met een acyleringsderivaat 2 van een zuur volgens de formule 17a van het formuleblad, waarin B een bekende amino-beschermende groep is, en B1 een bekende carboxyl-bescher- 3 4 10 mende groep is en R en R elk onafhankelijk waterstof, methyl of ethyl 3 · 4 zijn, of R en R , tezamen genomen met het koolstof atoom waaraan zij zijn verbonden, een cycloalkenylideenring kunnen zijn met 3-5 koolstof-atomen, waarbij een verbinding wordt gevormd met de formule 15a van het formuleblad, en aansluitend alle beschermende groepen worden ver-15 wijderd.

De acyleringsderivaten van het zuur volgens formule 17 of 17a omvatten de zuurhalogeniden, (en in het bijzonder het zuurchlo-ride), gemengde zuuranhydriden (zoals de zuuranhydriden gevormd met piva-linezuur of een halogeenformiaat zoals ethylchloorformiaat) , en geac-20 tiveerde esters (zoals gevormd kunnen worden met N-hydroxybenzthiazool in aanwezigheid van een condenseermiddel zoals dicyclohexylcarbodixmide) . . De acylering kan tevens worden uitgevoerd door toepassing van het vrije zuur van formule 17 of 17a in aanwezigheid van een condenseermiddel, zoals dicyc lohexy learbodilmide, carbonyldilmidazool of een isoxazoliumzout.

25 Zoals hierin toegepast betekent de term "acyleringsderivaat" van het zuur van formule 17 of 17a het vrije zuur zelf in aanwezigheid van een condenseermiddel zoals boven beschreven. Het voorkeursacyleringsderivaat van het zuur volgens formule 17 of 17a is het zuurchloride, bijvoorbeeld toegepast in aanwezigheid van een zuur bindmiddel (en in het bijzonder.

30 een tertiair 'aminezuurbindmiddel, zoals triëthylamine, dimethylaniline of pyridine).

Wanneer de acylering wordt uitgevoerd met een zuur-halogenide is het mogelijk een waterig reactiemedium te gebruiken, hoewel een niet-waterig medium de voorkeur heeft. Wanneer zuuranhydriden, geac-35 tiveerde esters of het vrije zuur in aanwezigheid van een condenseermiddel voor de acylering worden toegepast, dient het reactiemedium niet-waterig te zijn. Bijzondere voorkeursoplosmiddelen voor de acyle- 8300755 « 15 ringsreactie zijn géhalogeneerde koolwaterstoffen, zoals methyleen-chloride en chloroform, maar tertiaire amiden zoals dimethylaceetamide of dimethylformamide kannen worden toegepast evenals alle andere gebruikelijke oplosmiddelen zoals tetrahydrofuran, acetonitril en derge-5 lijke.

De acyIeringsreactie kan worden uitgevoerd bij een temperatuur van ongeveer -50 tot ongeveer +50°C. Het heeft evenwel de voorkeur deze uit te voeren bij of beneden kamertemperatuur en met de meeste voorkeur bij ongeveer -30 tot ongeveer 0eC. Het heeft gewoonlijk 10 de voorkeur de verbinding volgens formule 16 met ongeveer een stoechio-metrische hoeveelheid van het acyleringsmiddel volgens formule 17 of 17a te acyleren, hoewel men tevens een geringe overmaat (bijvoorbeeld 5 - 25%) van het acyleringsmiddel kan gébruiken.

Het heeft de voorkeur dat de verbinding volgens for-15 mule 16 wordt geacyleerd in de vorm van zijn N-silylderivaat (indien een niet-waterig reactiemedium wordt toegepast). Dit wordt doelmatig in situ uitgevoerd door eenvoudig een geschikt silyleringsmiddel (bijvoorbeeld N,Pbistrimethylsilylaceetamide) aan de oplossing van verbinding 16 toe te voegen vóór de toevoeging van het acyleringsmiddel 20 van formule 17 of 17a. Het heeft de voorkeur ongeveer 3 mol silyleringsmiddel per mol van verbinding 16 te gébruiken, hoewel dit niet kritisch is. De silylverb inding wordt na acy lering gemakkelijk verwijderd door toevoeging van water.

De acyleringszuren volgens formule 17 of 17a met inbe-25 grip van carboxyl- en aminbbeschermde derivaten daarvan zijn in de techniek bekend of kunnen volgens bekende procedures worden bereid. Het (2)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl) azijnzuur (3a) werd bereid volgens de algemene procedure beschreven in het Amerikaanse octroorschrift 4 258 041 en de Britse octrooiaanvrage 30 2 025 398. Het daarin vermelde smeltpunt was 152 - 156°C (ontleding) maar deze onderhavige verbinding smolt bij 174 - 175°C (ontleding). Bereiding nr. 1

Zie formule 3 van het formuleblad..

Ethyl (Z) -2-methoxyiTirir>o-2- (2-tritylamlnothiazol-4-yl) -acetaat (3a) 35 Een mengsel van ethyl (Z) -2-hydraxyimino-2- (2-tri- tylamino-thiazol-4-yl)acetaat (2) (5,00 g, 10,9 mmol) , CH^X (2,04 ml, 8300 75 5 16 Λ *i 32,8 nmol) en I^COg (4,54 g, 32,8 mmol) in droog dimethylsulfoxyde (DMSO) (100 ml) werd gedurende de nacht bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens in water (250 ml) geschonken. Het gevormde neerslag werd door filtratie verzameld, met water gewassen en gedroogd en men verkreeg de 5 titelverbinding (5,15 g, kwantitatieve opbrengst). Smeltpunt 115°C (ontleding) .

NMR : i CDClj ppm 1,32 (3H, t), 3,98 (3H, s), 4,30 (2H, q), 6,42 (1H, s), 7,2 (1H, m), 7,25 (15H, s).

Verbindingen 3b, 3c en 3d werden volgens de bovenbe-10 schreven algemene procedure bereid, waarbij echter het methyl jodide werd vervangen door het geschikte jodide.

2 (1) Verbinding R Opbrengst (%) Smeltpunt (°C) Literatuur _ _ _ _ Smp. (°C) 3a methyl 100 115° (ontl.) ca. 120° (ontl.) 15 3b ethyl 67 97-98° 36 3c isopropyl 26 51-55° x 3d allyl x x x X.

De ester werd zonder isolatie, gehydrolyseerd.

^ Tetrahedron, 34, 2233 (1978).

20 Bereiding nr. 2

Zie formule 4 van het formuleblad.

(Z)-2-Methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)azijnzuur (4a)

De in bereiding nr. 1 bereide ethylester 3a, (6,00 g, 12,7 mmol) in ethanol (120 ml) werd bij kamertemperatuur gedurende de 25 nacht met 2N NaOH (12,7 ml) behandeld. Het reactiemengsel werd door toevoeging van droog ijspoeder op pH 8 ingesteld en het oplosmiddel onder verlaagde druk verdampt. Het residu werd opgelost in water (100 ml) en de oplossing met IN HCl tot pH 2 aangezüurd en vervolgens met ethylace-taat (3 x 50 ml) geëxtraheerd. De gecombineerde extracten werden gewas-30 sen met een verzadigde waterige NaCl-oplossing, gedroogd en ingedampt. Het residu werd uit ethylacetaat-hexaan gekristalliseerd en men verkreeg 5,56 g (opbrengst 98%) van het titelprodukt (smeltpunt 138 - 143°C (ontleding) .

. cnci NMR: 03 ppm 3,89 (3H, s), 6,52 (1H, s), 7,2 (15Ξ, s).

8300755 17

Verbindingen 4b, 4c en 4d werden volgens de bovenbeschreven algemene procedure bereid»

Verbinding Opbrengst (%) Smeltpunt Literatuur^ _(°C, ontl.) Smp. (°C, ontl.) 5 4a methyl 98 138 - 143 ca. 140 4b ethyl 85 140 - 145 niet vermeld 4c isopropyl 85 166 - 169 ca. 170 3d allyl 66 170 - 178 ca. 170 (1) Tetrahedron, 34, 2233 (1978) 10 Bereiding nr. 3

Benzhydryl-3-hydroxymethyl-7-fenylaceetamido-3-cefem-4-carboxylaat (8)

Aan een geroerde suspensie van fosfaatbuffer (pH 7, 152,5 ml) en tarwezemelen (20 g, droog) werd bij kamertemperatuur 7-fenylaceetamidocefalosporanzuur natriumzout (5 g, 12,1 mmol) in één keer 15 toegevoegd. Het verloop van de reactie werd gevolgd door HPLC tot de hydrolyse was voltooid (5 uur). De suspensie werd gefiltreerd ter verwijdering van de tarwezemelen en het filtraat tot 5 - 10°C gekoeld voor extractieve verestering. Aan de gekoelde oplossing werd methyleenchlo-ride (82 ml) toegevoegd gevolgd door een 0,5 M oplossing van difenyl-20 diazomethaan in methyleenchloride (24 ml). De pH werd vervolgens met 28% fosforzuur op 3,0 ingesteld. Na 1 uur liet men de temperatuur van het reactiemengsel tot 20°C stijgen. Heptaan (56 ml) werd langzaam toegevoegd en het verkregen kristallijne titelprodukt gewonnen door filtratie. De opbrengst van het titelprodukt was 3,0 g (50%).

25 Bereiding nr. 4

Benzhydryl-7-amino-3-chloormethyl-3-cefem-4-carboxylaat (5)

Aan een suspensie van PC1<- (8,3 g, 40 mmol) in CHjClj (100 ml) werd pyridine (3,2 g, 40 mmol) toegevoegd en het mengsel gedurende 20 minuten bij 20aC geroerd. Aan het mengsel werd benzhydryl-3-30 hydroxymethyl-7-fenylaceetamido-3-cefem-4-carboxylaat bereid in bereiding nr. 3, (5,1 g, 10 mmol) onder roeren bij -40°C in één keer toegevoegd.

Het mengsel werd gedurende 15 minuten bij -10°C geroerd, waarna men het gedurende 7 uur bij -10 tot -15°C liet staan. Aan de gekoelde oplossing (-20°C) werd propaan-1.3-diol (10 ml) toegevoegd en het mengsel geduren-35 de 6 uur bij -20°C bewaard, waarna het gedurende 20 minuten bij kamer- 8300755 18 temperatuur werd geroerd. De verkregen oplossing werd gewassen met ijswater (2 x 20 ml) en verzadigd waterig NaCl (10 ml), gedroogd met MgSO^ en in vacuum geconcentreerd. Het gomachtige residu (12 g) werd opgelost in een. mengsel van CHCl^ en n-hexaan (2:1), en onderworpen aan chroma-5 tografie onder toepassing van een silicagelkolom (200 g) en hetzelfde oplosmiddel als eluent. Fracties die de titelverbinding bevatten werden in vacuum ingedampt en het residu aangewreven met n-hexaan, waarbij het 'titelprodukt werd verkregen (2,1 g, 51%) smeltpunt bij > 110°C (ontl.) . IR : y 3400, 2800, 1785, 1725 cm"1.

10 UV : XEt0H 265 nm (E?% . 160).

Λπβχ 1 cm NMR ï $ DMSCHd6 + 3,69 (2H, s), 4,43 (2H, s), 5,09 (1H, d, ppm J = 4,5Hz), 5,24 (1H, d, J * 4,5HZ), 6,87 (1H, s), 7,3 (10, m).

Voorbeeld I

7-[ (Z) —2-Methoxyimlno-2— (2-aminothiazol-4—yl)aceetamido]—3—[ (1-methyl-15 l-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxylaat (la) A. Benzhydryl-3-chloormethyl-7-g (Z) -2-methoxyimino-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)aceetamido]-3-cefem-4-carboxylaat (6a')

Benzhydryl-7-amino-3-chloormethyl-3-cefem-4-carboxy-laat bereid in bereiding nr. 4 (2,29 g, 5,52 mmol) in CH^CN (57 ml) 20 werd met bis(trimethylsilyl)aceetamide (BSA 4,09 ml, 16,6 mmol) bij kamertemperatuur gedurende 50 minuten behandeld, waarbij een heldere oplossing werd verkregen. Aan de oplossing werd een zuurchlorideoplossing toegevoegd, die werd bereid uit (Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothia-' zol-4-yl)azijnzuur (4a) (2,04 g, 4,60 mmol) en PCI,. (1,15 g, 5,52 mmol) 25 in methyleenchloride (20 ml). Het mengsel werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, in koud water (200 ml) geschonken en met ethylacetaat. 3 x 100 ml, geëxtraheerd. De gecombineerde extracten werden gewassen met waterig NaCl, gedroogd en ingedampt. De residu-siroop (4 g) werd gechromatografeerd over silicagel (150 g) door achtereenvol-30 gens eluëring met 10 : 1 en 3 : 1 mengsels van tolueen en ethylacetaat. De fracties die de gewenste titelverbinding bevatten werden gecombineerd en ingedampt waarbij 2,61 g (68%) van 6a* als een amorf poeder werd verkregen.

5CDC13 3,50 C2H, sj, 4,02 (3H, s), 4,33 (2H, sj, 35 4,98 (1H, dj, 5,87 (1H, qj, 6,65 (1H, sj, 6,90 (1H, sj, 7,3 (25H, mj.

8300755 19 B. Benzhydryl-3-joodmethyl-7-[ (Z) -2-methoxyifflino-2-(2-triylamino-thia-zol-4-yl) -aceetamido 3 -3-cefem-4-carboxylaat (7a')

Een mengsel van het 3-chloormethylderivaat (6a') (1,50 g, 1,79 mmol) en Nal (1,34 g, 8,93 mmol) in methyleenethylketon (30 ml) 5 werd gedurende 1 uur hij kamertemperatuur geroerd. Na verdamping van het oplosmiddel werd het residu opgelost in ethylacetaat (100 ml} en met water, waterig Na^S^O^ en waterig NaCl gewassen, gedroogd en ingedampt, waarhij.de titelverbinding 7a' werd verkregen (1,47 g, 89%) als een amorf poeder.

10 NMRr dCDC13 ppm 3j55 (2H> 4^00 (3Hf sJt 4j25 (2fi, sJt 4,97 (1H, dj, 5,80 (1H, qj, 6^65 (1H, s), 6,90 C1H, sJ, 7;3 (25H, mj.

C. 7-[(2)-2-Methoxyimino-2-(2-aminothlazol-4-yl)-aceetamido]-3-[(1-me-15 thyl-1 -pyrrolidinium) methyl 3 -3 -cefem-4-carboxylaat (la)

Een mengsel van 7a' (4,5 g, 4,83 mmol) en N-methylpyrro-lidine (0,65 ml, 6,28 mmol) in CHjC^ (45 ml) werd gedurende 20 minuten hij kamertemperatuur geroerd. Aan het mengsel werd ether (400 ml) toegevoegd om het kwatertiaire zout van het geblokte cefalosporine af te 20 scheiden dat door filtratie werd verzameld en gedurende 1 uur hij kamertemperatuur behandeld met 90%'s fluorazijnzuur (TFA) . Het mengsel werd vervolgens onder verlaagde druk beneden 20°C ingedampt. Het residu werd aangewreven met ether en men verkreeg het FTA zout van la (2,40 g), dat werd opgelost in methanol (5 ml) en hij kamertemperatuur gedurende 25 30 minuten behandeld met een 1M oplossing van natrium-2-ethylhexoaat (SEH) in ethylacetaat (8 ml). Na toevoeging van ethylacetaat (100 ml), werd het gevormde neerslag (1,94 g) door filtratie verzameld. HPLC-ana- lyse toonde aan dat het ruwe produkt voor 7% zuiver was met een 1 : 8 3 2 verhouding van het Δ isomeer tot het Δ i some er. Zuivering van het pro- 30 dukt door HPLC werd driemaal herhaald (Lichrosorb RP-18, 8 x 300 mm) ge- elueerd met 5%'s waterig CH^OH of 0,01 M ammoniumfosfaatbuffer (pH 7,2) die 5% CH^OH bevatte, waarbij 35 mg (1,5%) van het titelprodukt werd verkregen als een kleurloos poeder. Geschatte zuiverheid (volgens HPLC) 90%. Smeltpunt 150°C (ontleding).

35 IR „„ .

: vkBr cm’1 1770, 1660, 1620. max 8300755 ' 20 OV · χ fosfaatbuffer' ρΗ 7 nm( £ ) 235 (16200), 258 (15400).

*max NMR :5D2° ppm 2.31 (4H, mj, 3.08 (3H, sj, 3.63 (4H, m), 4.09 (3H, s), 5.43 (1H, d, J = 4.8 HzJ, 5.93 (1H, d), 7.08 (1H, s).

5 Voorbeeld II

7-[ (Z) -2-Methoxyimlno-2-(2-aminothiazol-4-yl) -aceetamido]-3-[ (1-methyl- 1-pyrrolidinlum) methyl]-3-cefem-4-carboxylaat (la)

Aan een geroerde oplossing van 20,4 g (21,9 mmol) van 7a' in 150 ml droog methyleenchloride werd 2,242 g (28,5 mmol) 10 1 -methyl-pyrrolidine in één keer bij kamertemperatuur toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 5 minuten geroerd en onder krachtig roeren in 100Q ml ether geschonken, waarbij een neerslag werd gevormd dat werd gefiltreerd, met ether (5 x 20 ml) gewassen en in vacuum gedroogd, waarbij 19,3 g van het geblokte produkt als een lichtgeel poeder werd ver-15 kregen.

ms vKBr cm*1 3400, 1780 (s), 1740, 1675, 1530. max TLC ï oplosmiddel ethanol-CHCl^ (1 : 3), Rf= 0,30 (Rf 0 0,95 voor 8a').

De vaste stof werd opgelost in 185 ml trifluorazijnzuur-2Q water (99 : 1), gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geroerd en tot ca. 30 ml beneden 10°C geconcentreerd. Het concentraat werd onder krachtig roeren in 1000 ml ether geschonken, waarbij een neerslag werd gevormd, dat werd gefiltreerd, gewassen met ether (5 x 40 ml) en onder vacuum gedroogd, onder vorming van 10,6 g van een lichtgeel poeder. Het poeder werd opgelost in 20 ml methanol en de oplossing gefiltreerd. Aan het filtraat werd 45 ml Q,8M SEH-ethylacetaat toegevoegd. De verkregen suspensie werd in 400 ml ethylacetaat geschonken en gefiltreerd en men verkreeg. 8,08 g van een vaste stof, die een mengsel was van de titel- 2 3 2

verbinding en het overeenkomende Δ isomeer (Δ -Δ *1:8) zoals aange-toond door HPLC-analyse (Lichrosorb RP-18, 10,15% methanol in 0,01 M

‘fosfaatbuffer pH 7) . Een tweede proef van 28,9 g (31,0 mmol) van 7a' 3 2 gaf 16,0 g van het ruwe produkt (Δ /Δ =1:8). Isolatie van het gewenste Δ^ isomeer uit het gecombineerde ruwe produkt (24,08 g) door toepassing van preparatieve HPLC (systeem 500, Waters Associates, PrePAK 35 500/c18, 5 - 10% CH^OH) leverde 769 mg van verbinding la.

8300755 , \ 21

Voorbeeld III

7-Ε (Ζ) -2-Methoxyimino-2-(2-(2-aminothiazol-4-yl) aceetamido]-3-f (1- methyl-l-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxylaat (la)

Een reeks proeven werd uitgevoerd ter bepaling van het 5 effect van oplosmiddel, hoeveelheid oplosmiddel en de reactieperiode 3 2 van de opbrengst op de verbinding la en de Δ /Δ verhouding in het reactieprodukt. De algemene procedure was als volgt:

Aan een suspensie van het 3 - joodmethyIderivaat 7a' (45 mg, 0,048 mmol) in de aangegeven hoeveelheid van het aangegeven oplos» 10 middel werd een oplossing van N-methylpyrrolidine (0,01 ml, 0,097 mmol) in ether (Ó,l ml) toegevoegd en het mengsel gedurende de aangegeven periode bij kamertemperatuur geroerd. Het reaqtiemengsel werd verdund met ether (5 ml) en het verkregen neerslag door filtratie verzameld en vermengd met 90% TFA. Het mengsel werd gedurende 1 uur geroerd en tot droge 15 toestand ingedampt onder verlaagde druk beneden 20 °C, waarbij het pro- 3 2 dukt werd verkregen. De verhouding van Δ /Δ in het produkt werd bepaald door HPLC (Lichrosorb RP-18; mobiele fase, 0,01M ammoniumfosfaatbuffer 3 2 (pH 7,2) met 15% CH-QH; retentie tijd Δ 6,60 minuten, Δ 5,56 minuten) .

J 3 2

Opbrengst van het produkt en de verhouding van Δ /Δ isomer en voor elke 20 proef worden hierna gegeven.

TABEL

Experiment Oplosmiddel Verhouding Reactie- Op- Ver- nr. van 7a' (in g) tijd brengst hou- tot oplosmiddel (min) (%) ding (in ml) ΔΙ/

25 _;_A

8300755 \ 22 t

Voorbeeld IV

7—[ (Z) -2-Ethoxyimino-2-(2-aminothiazol-4-yl) aceetamido] -3-C (1-methyl-1-pyrrolldinluia) methyl ] -3 -cefem-4-carboxylaat (lb) A. Benzhydryl-3-chloormethyl-7-[ (Z) -2-ethoxyijnino-2-(2-tritylamino- 5 thiazol-4-yl)aceetamido]-3-cefem-4-carboxylaat (6b)

Aan een oplossing van (Z)-2-ethoxyimino-2-(2-trityl-aminothiazol-4-yl)azijnzuur (4b) (1,095 g, 2,4 mmol) in dichloor-methaan (20 ml) werd fosforpentachloride (500 mg) toegevoegd. Na gedurende 1 uur roeren bij kamertemperatuur werd het mengsel in één keer 10 toegevoegd aan een ijsgekoelde oplossing van verbinding 5 (1,083 g, 2,4 mmol) en BSA <1 ml) in dichloormethaan (20 ml). Na gedurende 0,5 uur roeren werd het reactiemengsel in 10% 's waterig NaHCO^ (200 ml) geschonken en met CHCl^ (100 ml) geëxtraheerd. Het extract werd met water gewassen, op MgS04 gedroogd en onder verlaagde druk ingedampt* 15 Het residu werd gechramatografeerd over een silicagel- kolom. Elutie met CHCl^ gaf 6b als een amorf poeder (1,76 g) (86%) .

NMR r <5CDC13 ppm 1 j40 (3H> t* CH2CH3), 3,53 (2H, ABq, 2-CH2), 4,37 C2H, s» -C^Cl)^ 4,60 (2H, q, -CH2CH3J, 20 4,90 ClH» dr 6-HJ, 5.89 ClH, d, 7-H), 6,88 (1H, s), thiazool -H), 6,91 (1H, s, benzhydryl- CH.) B. Difenylmethyl 7-[ (Z)-2-ethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)- acee-^mido]-3-joodmethyl-3-cefem-4-carboxylaat (7b)

Een mengsel van 6b (1,07 g, 1,25 mmol) en Nal (562 mg, 25 2,75 mmol) in aceton (20 ml) werd gedurende 1 uur geroerd. Het mengsel werd gefiltreerd en het filtraat in water geschonken en met ethyl-acetaat geëxtraheerd. De organische laag werd achtereenvolgens gewassen met 5%'s- waterig Na2S^0^, water en verzadigd NaCl, met Mgso4 gedroogd en ingedampt waarna men 1,04 g (89%) verkreeg van verbinding 7b.

30 NMR : - __________________ t CUCH PP» 3,55 (2H," q, 2-CH2), 4,27 C2H, CH^Ï j', 5,02 ClH, d, 6-HJ, 5,87 ClH, d, 7-H), 6,68 (IH, s, thiazool-ring H), 6,93 (1H, s, benzhydryl-CH).

35 C. 7-[ (Z);-2-Ethoxyimino-2-(2-aminothiazol-4-yl) -aceetamido]-3-[ (1-methyl-1 -pyrrolidinium) methyl] -3-cefem-4-carboxylaat (lb) 8300755 23

Een mengsel 7b (333 mg, 0,85 mmol) en N-methylpyrroli-dine (60 mg, 0,7 mmol in (5 ml) werd gedurende 0,5 uur bij kamer temperatuur geroerd en vervolgens in vacuum ingedampt. Het residu werd met ether gewassen en opgelost in 90%'s waterig TFA. Na gedurende 0,5 5 uur bij kamertemperatuur te zijn bewaard werd het mengsel onder verlaagde druk geconcentreerd. Aan het concentraat werd ether toegevoegd om het gekwatemiseerde produkt af te scheiden dat door filtratie werd verzameld en in een kleine hoeveelheid methanol werd opgelost. De oplossing werd gechromatografeerd over een HP-2-kolom (40 ml). Elutie met 30%'s IQ waterig CH-GB gevolgd door vriesdrogen leverde 0,062 g van een mengsel 2* 3 2 3 van het Δ en Δ isomeer (Δ : Δ = 5:1). Het mengsel werd gezuiverd door HPLC (Lichrosorb RP-18, 8 x 300 mm, 15% methanol) en het ge- 3 wenste Δ isomeer (lb) werd geïsoleerd als een lichtgeel poeder (4,9 mg (2,7%).

15 UV : λ fosfaatbuffer, ph 7 £ 235 (15000) 258 (14000).

λ max 5D2° ppm 1,43 C3H, tj, 2,33 C4H, m), 3,10 (3H, s, 3S64 C4H, m), 4,36 (2H, qj, 5,44 (lH,d>, 5,95 (1H, dj, 7,08 (1H, sj.

20'

Voorbeeld V

7-E(Z)-2-(2-Propoxyimino)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-aceetamido] -3-[(1-methyl-1-pyrrolidinlum)methyl]-3-cef em-4-carboxylaat (lc) A. Difenylmethy 1-3-chloormethy 1-7-[ (Z) -2- (2-propoxyimino) -2-(2-trltyl-25 aminothiazol-4-yl)aceetamidoJ-3-cefem-4-carboxylaat (6c)

Een mengsel van (Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-trityl-amino-thiazol-4-yl) azijnzuur (4c) (707 mg, 1,5 mmol) en fosforpenta-chloride (344 mg, 1,65 mmol) in dichloormethaan (14 ml) werd gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geroerd en in een oplossing van verbinding 30 5 (677 mg, 1,5 mmol) en BSA (1,1 ml, 4,5 mmol) in dichloormethaan (15 ml) geschonken. Het reactiemengsel werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, verdund met ethylacetaat (200 ml) en water, (3 x 100 ml), met natriumsulfaat gedroogd en ingedampt, waarbij 1,4 g (100%) van verbinding 6c werd gevormd.

35 IR: 3360, 3020, 3060, 2960, 1785, 1725, 1680, 1520, raax 1500, 1450, 1375, 1300, 1250, 1160, 1090, 1060, 1010, 990, 840, 740, 700.

8300755 24 UV ; xEt0Hnm(c) 240 (24600), 260 (20700). max

Nmr : 5CDC13 ppm 1,35 (6H, d. J=6HzJ, 3,50 (2H, s), 4,35 2H, s), 4,58 (1H, m, J“6HzJ, 5,00 (1H, 5 -J. d, J*4,5HzJ > 5,91 ClH, d-d, J=4,5 $ 9Hz; d by D2°» J=4,5Hz), 6;68 ClH, sj, 6,88 ClH, sJ» 7,25 C25H, s).

B, Di£ênylmethyl-3-joodmeth.yl-7-[ (Z) -2- (2-propoxyimino) -2-(2-trityl-10 aminothiazol-4-yl-aceetamido]-3-cefem-4-carboxylaat (7c)

Ben mengsel van verbinding 6c (500 mg, 0,55 mmol) en natrium jodide (248 mg, 1,66 mmol) in aceton (10 ml) werd gedurende 50 minuten bij kamertemperatuur geroerd. Na indamping werd het residu opgelost in ethylacetaat (15 ml), achtereenvolgens gewassen met 10%'s wa-15 terig natriumthiosulfaat (10 ml), water (10 ml) en waterig NaCl (10 ml), gedroogd met natriumsulfaat en ingedampt tot een opbrengst van 494 mg (90%) van de titelverbinding 7c.

iR‘ j u01™'1 3360, 3040, 3020, 2960, 1785, 1720, 1680, : max 1600, 1520, 1500, 1450, 1370, 1300, 1230, .

2? 115.0, 1115, 1080, 990, 900, 840, 750, 700.

i UV : XEtÜH nmU) 240 C24900J, 260 C19400J. max 25 NMR : dCDC13 PPm 1.,30 C6H, d, J=6HzJ, 3,37 $ 3,70 ClH elk, d, J=16HzJ, 4,22 (2H, s), 4,55 ClH, m, J=6Hz), 4,95 ClH, d, J=4,5Hz), 5,83 ClH, d-d, J=4,5 § 9Hz; d by D20), 6,66 ClH, s), 6,87 ClH, sJ, 7,25 C25H, sj.

30 C. 7-[(Z)-2-(2-Propoxyimino)-2-(2-aminothiazol-4-yl)aceetamido3-3-[(1-methyl-1-pyrrolidinium)methyl3-3-cefem-4-carboxylaat (lc)

Een mengsel van verbinding 7c (545 mg, 0,55 mmol) en 35 1-methylpyrrolidine (70 mg, 0,82 mmol) in dichloormethaan (10 ml) werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd en verdund met ether 8300755 25 (100 ml). Het verkregen, neerslag werd' door filtratie verzameld. Een oplossing van het neerslag in 90% TFA (4,5 ml) werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd en in vacuum ingedampt. Bet residu werd aangewreven met ether en gaf 317 mg van het ruwe produkt, dat werd ge-5 cromatografeerd over een HP-20 kolom (50 ml), geëlueerd met water (500 ml) en 30%'s CH-OH (500 ml). Het 30%*s CH^OH eluaat werd geconcentreerd 3 J 2 en gevriesdroogd en men verkreeg 109 mg van een mengsel van de Δ en 3 2 3 Δ isomeren (Δ /Δ = 6 / 1), waarvan 100 mg werd gezuiverd door HPLC (Lichrosorb RP-18, 15% MeOH) waarbij 5 mg (3%) van de gewenste titel-10 verbinding 1c werd gevormd.

ov . χΡΗ 7 buffer ηιη(ε) 236 (15100)f 252 (14600J.

max NMR : sD2üppm 1,42 (6H, d, J=6Hz), 2,33 (4H, s), 3,10 (3H, 15 s), 3,65 (4H, s), 3,83 § 4,23 (1H elk , d, J*17HzJ, 5,45 (1H, d, J*4,5HzJ, 5,95 ClH, d, J*4>5Hzj, 7,05 ClH, s).

Voorbeeld VI

20 7-[(Z)-2-Allyloxyiïïiino-2-(2-aTm· uothiazol-4-yl)-aceetamido]-3-[(1-methyl- 1 ~pyrrolidinium) methyl 1-3-cefem-4-carboxylaat (ld) A. Benzhydryl 7-[(Z)-2-allyloxylmino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)aceet-amido 1 -3-chloormethyl-3-cefem-4-carboxylaat (6d)

Aan een suspensie van verbinding 5 (1,35 g, 3 mmol) in 25 methyleenchloride (20 ml) werd BSA (1,1 ml, 4,5 mmol) toegevoegd en het mengsel gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, waarbij een heldere oplossing werd verkregen. Een mengsel van (Z)-2-allyloxy-imino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)azijnzuur (4d) (1,40 g, 3,0 mmol) en fosforpentachloride (690 mg, 3,3 mmol) in methyleenchloride (20 ml) 30 werd gedurende 15 minuten bij kamertemperatuur geroerd en in één keer in de oplossing van de trimethyl gesilyleerde verbinding 5 geschonken. Het mengsel werd gedurende 20 minuten bij kamertemperatuur geroerd en verdund met ethylacetaat (200 ml), gewassen met waterig natriumbicarbonaat en water, gedroogd en onder verlaagde druk ingedampt. Het olieachtige 35 residu werd gezuiverd door silicagelkolomchromatografie (Wako-gel, C-200, 30 g). De kolom werd geëlueerd met chloroform en de fracties die 8300755 26 het gewenste produkt bevatten werden gecombineerd. Na indamping onder t verlaagde druk verkreeg men de titelverbinding (6d) als een amorf poeder, opbrengst 2,32 g (89%). Smeltpunt 100 - 115°C (ontleding).

IR :υΚΒΓαη-1 3990, 1790, 1730, 1680, 1530, 1380, 1250, 5 max 1160, 1020.

NMR : 3 ppm 3,50 (2H, 2-H), 4,32 (2H, s, 3-CH2), 4,6 - 6,1 (7H, m, CE^CE=CE^ en 6,7-H), 6,70 (1H, s, thiazool-H), 6,90 (1H, s, Ph2CH), 7,1 - 7,6 (30H, m, fenyl-protonen).

analyse berekend voor C48il4oN5°5S2C1*1/3CHCl3: C, 64,05; H, 4,45; N, 7,73; S, 7,08; Cl, 7?82.

gevonden: C, 64,13, 63,99; 15 H, 4,61, 4,64; N, 7,50, 7,30; S, 6,85, 6,85;

Cl, 7,55, 7,46.

B. Benzhydryl 7-[(Z)-2-allyloxyimino-2-(tritylaminothiazol)-4-yl)- 20 aceetamido]-3-joodmethyl-3-cefem-4-carboxylaat (7d)

Een mengsel van verbinding 6d (2,03 g, 2,65 mmol) en natriumjodide (2 g, 13,3 mmol) in aceton (15 ml) werd gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens onder verlaagde druk ingedampt. Een oplossing van het olieachtige residu in ethylacetaat (200 25 ml) werd gewassen met 10%’s natriumthiosulfaat en water, onder verlaagde druk ingedampt waarna men verbinding. 7.d verkreeg als een amorf poeder, dat in de volgende trap werd toegepast zonder verdere zuivering. Opbrengst 2,52 g (99%).

C. 7-[ (Z) -2-AlIyloxyimino-2-(2-aminothiazol-4-yl)aceetamido]-3-[ (1-me- 30 thyl-l-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxylaat (ld)

Een mengsel van verbinding 7d (478 mg, 0,5 mmol) en N-methyl-pyrrolidine (0,05 ml, 0,5 mmol) in methyleenchloride (5 ml) werd gedurende 20 minuten bij kamertemperatuur geroerd en met ether (50 ml) verdund waarbij het gekwaterniseerde produkt (opbrengst 500 mg) 35 werd neergeslagen. Een mengsel van het gekwaterniseerde produkt en TFA (2 ml) werd gedurende 11 uur bij kamertemperatuur bewaard en met ether 8300755 # 27 verdund, waarbij het ruwe TFA-zout van het produkt werd neergeslagen (opbrengst 265 g), dat werd gechromatografeerd over een kolom van HP- 20 (1,8 x 18 cm) . De kolom werd geëlueerd met water en 30%'s waterig methanol. Het methanolische eluaat werd onder verlaagde druk ingedampt 5 en het residu werd gevriesdroogd onder vorming van een amorf poeder, (opbrengst 124 mg), dat het gewenste produkt (17%) en het overeenkomende 2 Δ isomeer (83%) bevatte. Het mengsel werd gezuiverd door HPLC /Lichro-sorb RP-18; 0,01 M NH4H2P04 (pH 7) ï CH3<3S = 87 : 15). Het eluaat werd met verdund HCl aangezuurd tot pH 3 en gechromatografeerd over een ko-10 lom van HP-20 (1,8 x 10 cm). De kolom werd geêlueerd met water en vervolgens met 30%'s waterig methanol. Het methanolische eluaat werd onder verlaagde druk ingedampt en het residu gevriesdroogd waarbij de titelver-binding (ld) werd verkregen als een amorf poeder (opbrengst 13 mg, 5,1%); smeltpunt 155 °C (ontleding).

15 IR -* yKBr cm-l 3600-2800, 1770, 1670, 1610, 1530, 1200.

max ÜV : ipH 7 buffer nra(e) 235 (16600J, 253 (15600J.

max 20 X D-0 ppm 2,1 - 2,5 (4H, m, pyrrolidine-H), 3,10 (3H, s,

NnR £ ^ NCH^), 3,4 -3,8 (4H, m, pyrrolidine-H), 5,95 (1H, d, 4HZ, ~-H), 7,10 (1H, s, thiazool-H).

Voorbeeld VII

25 7-[ 2- (2-Aminothiazol-4-yl) - (Z) -2- (2-carboxyprop-2-oxyimino) -aceetamido]- 3-{ (1 -methy 1-1 -pyrrolldinium)methyl3-3-cefaa-4-carboxyiaat (le) A. Benzhydryl 3-chloormethyl-7-C(Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxy-imino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)aceetamido]-3-cefem-4-carboxyiaat (5a) 30 Procedure 1

Een mengsel van (Z)-2-(2-t-butc«ycarbonylprop-2-oxy-imino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)azijnzuur (3a') (1,94 g, 3,6 mmol), DDC (742 mg, 3,6 mmol) en N-hydroxybenzthiazool (486 mg, 3,6 mmol) in tetrahydrofuran (THF) (45 ml) werd gedurende 45 minuten bij kamertempe-35 ratuur geroerd, waarbij dicyclohexylureum werd afgescheiden. Het di-cyclohexylureum werd verwijderd door filtratie en het filtraat ganengd 8300755 28 met 5 (If5 g, 3,6 mmol}. Het mengsel werd gedurende de nacht bij kamer-

K

temperatuur geroerd en vervolgens in vacuum ingedampt. De restolie werd opgelost in CHCl^ (20 ml), gewassen met verzadigd waterig NaHCO^ en verzadigd waterig NaCl, met MgSO^ gedroogd en tot droge toestand inge-5 dampt. Het residu (3,9 g) werd opgelost in n-hexaan:CHCl3 (1:2) en gepasseerd door een silicagelkolom (40 g) onder toepassing van'hetzelfde oplosmiddelsysteem. Fracties die de titelverbinding bevatten werden in vacuum, ingedampt en men verkreeg 1,2 g (39%) van 5a; smeltpunt bij 100°C (ontleding).

10 IR: vKBr cm-l 3.99Ov 1790, 1715, 1690.

max UV^EtOH ^ 24Q tEl* 280), 265 (El* 190)e max 1 cm 1 cm 15 ppm χ^45 (9H, s), 1,63 § lf66 (6H, elke sJ, 3,49 C2H, breed s), 4,34 (2H, s), 4,96 (1H, d, J=4,5Hz), 5,90 (1H, d-d, J=4,5 § 7,5)* 6,66 (1H, si, 6,86 (1H, s), 7,0-7,5 (25H,m), 20 8,23 ClH, d, J-7t5HzJ.'

Procedure 2

Een oplossing van 5 (1,86 g, 4,49 mmol) in CH^CN (46,5 ml) werd bij kamertemperatuur gedurende 50 minuten behandeld met BSA 25 (3,33 ml, 13,5 mmol),. waarbij een heldere oplossing werd verkregen. Aan de oplossing werd een zuurchloride-oplossing toegevoegd die was bereid uit 3a' (2,56 g, 4,49 mmol) en PCl^ (1,12 g, 5,38 mmol) in methyleenchlo-ride (26 ml). Het mengsel werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd, in koud water (100 ml) geschonken en met ethylacetaat (3 x 30 50 ml) geëxtraheerd. Het gecombineerde extract werd gewassen met waterig NaCl, gedroogd en ingedampt. De restsiroop (5 g) werd gechromatografeerd over een silicagel (100 g) kolom door eluering met een 10 : 1 mengsel van tolueen en ethylacetaat. De fracties die de gewenste verbinding bevatten werden gecombineerd en ingedampt en men verkreeg 2,84 g (65%) 35 van 5a.

8300755 29 B. Benzhydryl 7-[(Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-l-oxylmino)-2-(2-trl- .

ty lam -t n p thlazol-4 -yl) ac eetamido ] -3 - j oodmethy 1-3 -c ef em-4 -carb oxylaat (6a)

Een mengsel van 5a (500 mg, 0,53 mmol) en Nal (240 mg, 5 1,6 mmol) in aceton (3 ml) werd gedurende 2 uur bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens in vacuum ingedampt. Aan het residu werd (20 ml) en water (10 ml) toegevoegd. De organische laag werd gewassen met 10%'s s/v natriumthiosulfaat (5 ml) en waterig NaCl (5 ml), op MgS04 gedroogd en tot droge toestand ingedampt waarbij 540 mg (90%) 10 6a als een amorf poeder werd verkregen met een smeltpunt van 106 °C (ontleding) .

tv . KBr -1 3350, 1790, 1690.

Cm sax -¾ 15 ÜV : xEtüH nm 240 (E1* 270), 265 (E1% 190).

max 1 cm 1 cm NMR : 6CDC13 ppm 1,44 C9H, s), 1,65 (6H, s), 3,54 (1H, 4,28 (2H, s), 4,98 (1H, d, 20 '· J=4,5Hz), 5,85 (1H, d-d, J*4,S § 7,5Hz), 6,70. (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,1-7,5 (25H, m)l C. 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl) -(2) -2-(2-carboscyprop-3-oxyimino) aceetami- 25 do]-3-( (1-methyl-l-pyrrolidinium)methyl3-3-cefem-4-carboxylaat (ie)

Een mengsel van het joodmethylderivaat 6a (538 mg, 0,51 mmol) en N-methylpyrrolidine, (0,079 ml), (0,076 mmol) in CH^^ (10,8 ml) werd gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur bewaard en vervolgens met ether (80 ml) verdund. Het gevormde neerslag wordt door filtratie ver- 30 zameld en met ether gewassen waarna men 420 mg verkreeg van het gekwater- niseerde produkt, dat gedeblokkeerd werd met 90%’s trifluorazijnzuur (TFA) (4,2 ml) gedurende 1 uur bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens tot droge toestand ingedampt. Aan het residu werd ether toegevoegd, waarbij ruw TFA zout van la (245 mg, kwantitatief) werd 3 2 35 verkregen, dat bestond uit een 1 : 4 mengsel van de A en Δ isomeren.

Het ruwe materiaal werd onderworpen aan HPLC zuivering [Lichrosorb RP-18, 4 x. 300 mm, geëlueerd met 0,01 M ammoniumfosfaatbuffer (pH 7,0), 8300755 4, 30 die 10% CH^OH bevatte}. De fractie die het gewenste produkt bevatte werd verzameld en tot een klein volume ingedampt. Het concentraat werd door toevoeging van 1M HCl op een pH van ca. 2 ingesteld en gepasseerd door een HP-20 kolom (2 x 15 cm) ter verwijdering van het anorganische S zout. De kolom werd gewassen met (1000 ml) en geëlueerd met 30% 's CH^OH. De eluent werd ingedampt en gevriesdroogd en men verkreeg 21 mg (10%) van het titelprodukt (le) als een kleurloos poeder. Smeltpunt 16Q°C (ontleding).

IR: KBr -1 v cm 3400* 1775, 1610.

10 max fosfaatbuffer PH 7 nmCe ) 237 (15700), 257 C1S5S00).

max 15nmr:5D20 ppm ^65 C6H> sJj 2,3 (4H , mj, 3,09 (3H, sj, 3,6..; (4H, mj, 4,0 (2H, mj, 5,44 (1H, d, J=4,8Hz),' 5,94 (1H, dj, 7,15 (1H, sJ. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 8300755

Voorbeeld VI1X

2

De algemene procedure van voorbeeld VII wordt gevolgd 3 met uitzondering dat het (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino)-2- 4 (2-tritylaminothiazol-4-yl) azijnzuur wordt vervangen door een equimolai- 5 re hoeveelheid van 6 (Z) -2-t-butoxycarbonylmethoxyimino) -2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) azijn 7 zuur r 8 (Z)-2-(1-t-butoxycarbonylethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)- 9 azijnzuur, 10 (Z) -2- (2-t-butoxycarbony lbut-2-oxyimino) -2- (2-tritylaminothiazol-4-yl- 11 azijnzuur, 12 (Z) -2- (3-t-butoxycarbonylpent-3 -oxyimino) -1- (2-tritylaminothiazol-4-yl) - 13 azijnzuur, 14 (Z) -2- (1 -t-butoxy carbony lcycloprop-1 -oxyimino) -2- (2-tritylamino-thiazol- 15 4-yl)-azijnzuur, 16 (Z) -2- (1-t-butoxycarbonylcyclobut-l-oxyimino) -2- (2-tritylamino-thiazol- 4-yl)azijnzuur, en ψ 31 (Ζ) -2- (1-t-butoxyca rbonylcyclopent-1 -oxyimino) -2- (2-tritylamino-thla-zolr-4-yl) azijnzuur, respectievelijk en daarbij respectievelijk wordt verkregen 7-[ 2-(2-aminothiazöl-4-yl) - (Z) -2- (carboxymethoxyimino) aceetamido ] -3 -5 CC 1-methyl-l-pyrrolidinium) methyl]-3-cefem-4-carboxylaat, 7-[ 2-(2-aminothiazol~4-yl)-(Z)-2-(1-carboxyethoxyimino)aceetamido]-3-[ C 1-methyl-l-pyrrolidinium) methyl ] -3-cefem-4-carboxylaat, 7-[ 2- (2-aminothiazol-4-yl) - (2)-2- (2-carfaoxybut-2-oxyimino) aceetamido 3- 2- [(1-methyl-l-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxylaat, 10 7- [2-(2-aminothiazol-4-yl)-(Z)-2-(3-carboxypent-3-oxyimino)aceetamido]- 3- [ (1-methyl-l-pyrrolidinium) methyl] -3-cefem-4-carboxylaat, 7-t 2- (2-aminothiazol-4-yl) -(Z) -2- (1-carboxycycloprop-l-oxyimino) aceetamido]-3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinium) methyl ] -3 -cef em-4-carboxylaat 7—[ 2— (2-aminothiazol-4-yl) - (Z) -2- (1-carboxycyclobut-l-oxyimino) aceet-15 amido]-3-[(1-methyl-l-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxylaat, en 7-[ 2- (2-aminothiazol-4-yl) - (Z) -2- (1-carboxycyclopent-l-oxyimino) aceetamido}-3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinium) methyl ] -3-cef em-4-carboxylaat.

8300755

Claims (2)

1. Verbinding volgens formele 1, waarin R^ waterstof of 2 een beleende amino-beschermende groep is, · en R ' een rechte of vertakte alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, allyl,, 2-butenyl of 3-butenyl is of een groep - r 4

5 R, - C - R , J I COOH 3 4 waarin R. en R elk onafhankelijk waterstof, methyl of ethyl zijn, of 3 4 R en R tezamen genomen met het koolstofatoom waaraan zij zijn gebonden een cycloalkylideenring kunnen vormen met 3-5 koolstof atomen, of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydrolyseerbare 10 esters of solvaat daarvan.

2. Verbinding volgens conclusie 1, namelijk 7-[(Z)-2-me-thoxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) aceetamido ]-3-[ (1-methyl-l-pyrrolidi-nium) methyl ]-3-cefem-4-carboxylaat, of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan.

3. Verbinding volgens conclusie 1, namelijk 7-[ (Z)-2-(2- propoxyimino) -2- (2-aminothiazol-4-yl) -aceetamido J-3-[ (1-methyl-l-pyrroli-dinium) methyl ]-3-cefem-4-carboxylaat, of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan.

4. Verbinding volgens conclusie 1, namelijk 7-[(Z)-2-(2- 20 pr opoxy imino) -2- (2-aminothiazol-4-ylaceetamido ]-3- (1 -methyl- 1-pyrrolidini-um) methyl ]-3-cefem-4-carboxylaat of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan.

5. Verbinding volgens conclusie 1, namelijk 7-[(Z)-2-allyl-ojcyiraino-2-(2-aminothiazol-4-yl)aceetamido]-3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinium) 25 methyl ] -3-cefem-4-carboxylaat, of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan.

6. Werkwijze ter bestrijding van bacteriële infecties bij warmbloedigen die aan een dergelijke behandeling behoefte hebben, met het kenmerk, dat aan genoemde warmbloedigen een voor anti-bacteriële 30 doeleinden effectieve hoeveelheid van tenminste één verbinding volgens conclusie 1 wordt toegediend.

7. Werkwijze volgens conclusie 6, met het kenmerk, dat de 8300755 * verbinding volgens conclusie 1 7-[ (Z) -2-methoxyimino-2- (2-aminothlazol- i 4-yl)aceetamido]-3-[(1-methyl-1-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-car-boxylaat of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan is.

8. Anti-bacteriëel preparaat, met het kenmerk, dat dit een voor anti-bacteriële doeleinden doeltreffende hoeveelheid van tenminste één verbinding volgens conclusie 1 en een inerte farmaceutische drager bevat.

9. Preparaat volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat de 10 verbinding volgens conclusie 1 7-f(Z)-2-methoxyimino-2-(2-amlnothiazol- 4-yl) aceetamido]-3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxylaat of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan is.

10. Antibacteriëel preparaat in eenheidsdoseringsvorm, met 15 het kenmerk, dat dit ongeveer 50 tot ongeveer 1500 mg van tenminste één verbinding volgens conclusie 1 en een inerte farmaceutische drager bevat,

11. Preparaat volgens conclusie 10, met het kenmerk, dat de verbinding volgens conclusie 1 7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(2-aminothla-zol-4-yl) aceetamido] -3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinium) methyl]-3-cefem-4-20 carboxylaat of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan is.

12. Verbinding volgens conclusie 1, namelijk 7-[2-(2-amino-thiazol-4-yl)-(Z)-2-(2-carboxyprop-2-oxyimino)aceetamido]-3-[(1-methyl- 1-pyrrolidinium)methyl]-3-cef em-4-carboxylaat of een niet-giftig farma- 25 ceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydrolyseerbare ester of solvaat daarvan is.

13. Werkwijze ter bestrijding van gram-negatieve bacteriële infecties bij warmbloedigen die aan een dergelijke behandeling behoefte hebben, met het kenmerk, dat aan genoemde warmbloedigen een voor anti- 30 bacteriële doeleinden effectieve hoeveelheid van tenminste één verbinding volgens conclusie 1 wordt toegediend, waarin R* de betekenissen vol- 3 4 gens conclusie 1 heeft en R en R elk onafhankelijk waterstof, methyl 3 4 of ethyl zijn, of R en R tezamen genomen met het koolstofatoam waaraan zij zijn verbonden een cycloalkylideenring kunnen vormen met 3-5 kool-35 stofatomen of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydrolyseerbare ester of solvaat daarvan. 8300755

14. Methode volgens conclusie 13, met het kenmerk, dat de verbinding volgens conclusie 1 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-(Z)-2-(2-carboxyprop-2-oxyimino) aceetamido]-3-[ (1-methyl-1-pyrrolidiniummethyl ] -3-ce£em-4-carboxylaat of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout, 5 fysiologisch hydrolyseerbare ester of solvaat daarvan is.

15. Antibacteriëel preparaat dat actief is tegen gram-negatie-ve bacteriën, met het kenmerk, dat een voor antibacteriële doeleinden effectieve hoeveelheid van tenminste één verbinding volgens conclusie 1 1 3 4 waarin R de betekenissen van conclusie 1. heeft, en R en R elk on- 3 4 10 afhankelijk waterstof, methyl of ethyl zijn, of R en R , tezamen met het koolstofatoom waaraan zij zijn gebonden een cycloalkylideenring kunnen vormen met 3-5 koolstofatomen, of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydrolyseerbare ester of solvaat daarvan en een inerte farmaceutische drager omvat.

16. Preparaat volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat de verbinding volgens conclusie 1 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-(Z) -2-(2-carboxy-2-oxyimino)aceetamido]-3-[ (l-methyl-3-(1-methyl-l-pyrrolidini-um) methyl]-3-cefem-4-carboxylaat of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydrolyseerbare ester of solvaat daarvan is. 20 17. Antibacteriëel preparaat actief tegen gram-negatieve bacteriën in eenheidsdoseringsvorm, met het kenmerk, dat dit ongeveer 50 tot ongeveer 1500 mg van tenminste een verbinding volgens conclu- 1 3 4 sie 1 waarin R de betekenissen van conclusie 1 heeft en R en R elk 3 4 onafhankelijk waterstof, methyl of ethyl zijn, of R en R tezamen ge-25 nomen met het koolstofatoom waaraan zij zijn gebonden een cycloalkylideenring met 3-5 koolstofatomen kunnen vormen of een niet-giftig far. maceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydrolyseerbare ester of solvaat daarvan en een inerte farmaceutische drager omvat.

18. Preparaat volgens conclusie 17, met het kenmerk, dat de 30 verbinding volgens conclusie 1, 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-(Z)-2-(2- carboxyprop-2-oxyimino) aceetamido]-3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxylaat of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydrolyseerbare ester of solvaat daarvan is.

19. Werkwijze ter bereiding van verbindingen volgens for- 35 mule 1, waarin R* waterstof of een bekende amino-beschermende groep is, 2 en R een rechte of vertakte alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, allyl, 83 0 0 75 5 2-butenyl of 3-butenyl is, of een groep 3 ' 4 R - C - R t COOH 3 4' waarin R en R elk onafhankelijk waterstof, methyl of ethyl zijn of 3 4 R en R tezamen genomen met het koolstofatoom waaraan zij zijn ge-5 bonden, een cycloalkylideenring met 3-5 koolstof atomen vormen, of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydro-lyseerbare ester of solvaat daarvan, met het kenmerk, dat een verbinding volgens formule 16 of een N-silylderivaat daarvan, waarin B waterstof of een bekende beschermende groep is, wordt geacyleerd met een acy- 10 leringsderivaat van een zuur volgens de formules 17 of 17a, waarin 2 3 B een bekende amino-beschermende groep is, B een bekende carboxyl- 3 4 beschermende groep is en R en R de voomoemde betekenissen hebben, waarbij een verbinding wordt gevormd, volgens de formule 15 of 15a, en aansluitend alle beschermende groepen worden verwijderd.

20. Werkwijze ter bereiding van verbindingen volgens formule 2 1, waarin R een rechte of vertakte alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, allyl, 2-butenyl of 3-butenyl is of een groep 3 * 4 R - C - R , COOH 3 4 waarin R en R elk onafhankelijk waterstof, methyl of ethyl zijn, of 3 4 20. en R tezamen genomen met het koolstofatoom waaraan zij zijn gebonden een cycloalkylideenring met 3-5 koolstofatomen kunnen vormen en niet- giftige farmaceutische aanvaardbare zoute, fysiologisch hydrolyseer- bare esters en solvaten daarvan, met het kenmerk, dat een verbinding 2 3 4 volgens de formule 14 of 14a, waarin R , R en R de voomoemde beteke- 13 2 25 nissen hebben, B en B bekende carboxyl-beschermende groepen zijn, B een bekende amino-beschermende groep is, in reactie wordt gebracht met N-methylpyrrolidine, waarbij een verbinding wordt gevormd volgens de formules 15 of 15a, en aansluitend alle beschermende groepen volgens gebruikelijke middelen worden verwijderd.

21. Werkwijze volgens conclusie 19 of 20 ter bereiding van 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-(Z)-2-(2-carboxyprop-2-oxyimino)aceetamido]- 3-{ (methyl-l-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxylaat (Ie) of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout, fysiologisch hydrolyseer- 8300755 Λ * * * bare ester of solvaat daarvan, met het kenmerk, dat een mengsel van benzhydryl-7-amino-3-chloormethyl-3-cefem-4-carboxylaat, (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino) -2-(2-tritylaminothiazol-4-yl) -azijnzuur, DDC, N-hydroxybenztriazool in een organisch oplosmiddel in reactie 5 wordt gebracht, waarbij benzhydryl-3-chloormethyl-7-[(Z)-2-(2-t-butoxy-carbonyl-prop-2-oxyimino) -2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) aceetamido]-3-cefem-4-carboxylaat (lf) wordt verkregen, of naar keuze een mengsel van benzhydryl-7-amino-3-chloormethyl-3-cefem-4-carboxylaat en bis-(tri-methylsilyl) aceetamlde in reactie wordt gebracht met een zuurchloride 10 van (Z) -2- (2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino) -2- (2-tritylaminothiazol-4-yl)azijnzuur onder vorming van (lf) vervolgens (lf) in reactie wordt gebracht met jodidezout onder vorming van benzhydryl 7-C(Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxyimino) -2- (2-trity laminothiazol-4-yl) aceetamido J-3-joodmethyl-3-cefem-4-carboxy laat (lg), vervolgens (Ig) in reactie 15 wordt gebracht met N-methylpyrrolidine in een organisch oplosmiddel onder vorming van (Ih), en tenslotte (lh) wordt gedeblokkeerd onder vorming van de'titelverbinding (le), die smelt bij 160eC (ontleding) en/of desgewenst naar keuze (le) in zijn niet-giftige farmaceutisch aanvaardbare zouten, fysiologisch hydrolyseerbare esters en solveten daarvan 20 wordt omgezet»

22. Werkwijze volgens conclusie 19 of 20, ter bereiding van 1 2 verbindingen met formule 1, waarin R waterstof en R . methyl, ethyl, isopropyl of allyl is, of een niet-giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan, met het kenmerk, dat een mengsel van benzhydryl-25 7-amino-3-chloormethyl-3-cefem-4-carboxylaat en bis-(trimethylsilyl) aceetamide in reactie wordt gebracht met een zuurchloride van (Z)-2-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)azijnzuur of (Z)-2-ethoxy-imino-2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl) azijnzuur of (Z) -2-(2-propoxyimino) - 2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)azijnzuur of (Z) -2-allyloxyimino-2-(2-30 tritylaminothiazol-5-yl)azijnzuur, waarbij het overeenkomende gecondenseerde derivaat wordt verkregen dat 2-methoxyimino-of 2-ethoxyimino- of 2-propoxyimino- of 2-allyloxyiminogroepen bevat, waarna genoemd gecondenseerd derivaat met jodidezout in reactie wordt gebracht onder vorming van het overeenkomende 3-joodmethylderivaat, verder genoemd 3-35 joodmethylderivaat in een organisch oplosmiddel of een mengsel van organische oplosmiddelen met N-methylpyrrolidine in reactie wordt ge- 8300755 A * bracht waarbij het overeenkomende pyrrolidiniumderivaat wordt gevormd en tenslotte genoemd pyrrolidiniumderivaat wordt gedeblokkeerd, waarbij 7-E (Z) -2-ethoxyimino-2-(2-aminothiazol-4-yl) aceetamido] -3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinium) -methyl]-3-cefem-4-carboxylaat, of 7-[ (Z) -2-methoxyimino-5 2- (2-aminothiazol-4-yl) aceetamido ]-3 -[ (1 -methyl-1 -pyrrolidinium) -methyl J - 3-cefem-4-carboxylaat, of 7-[(Z)-2-(2-propoxyimino)-2-(2-aminothiazol-4-ylaceetamido]-3-[(1-methyl-1-pyrrolidinium)methyl]-3-cefem-4-carboxy-laat, of 7-[(Z)-2-allyloxyimino-2-(2-aminothiazol-4-yl)aceetamido]-3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinium) methyl ] -3 -cefem-4-carboxylaat wordt verkre-10 gen en/of desgewenst genoemde gedeblokkeerde derivaten in een niet- giftig farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan worden omgezet. 8300755 N--r-C-CONH--f > //V Π TrHN^\s/ \qr2 /' ηΎ^\0Η201 COOCH(Ph)- 6 _A Nal N —t-C-COOC-Ης ' . , TrHH^s/ \0H - N -r-C-CONH T 1 2 7ΓΤΒ TT R2X Tr HN^^ S' \r2

7 COOCH(Ph). N-r-C-COQC7H. //V 25 Χ· *3C-0 TrHN>\s/ V2 2. deblo 3 oh" Φ Ψ /S\ N--r-C-CONH-—f η h2,AsXr2 /-TcvO s -j cocF* ch3 4 2 ΠΓ cr ch2c1 COOCH(Ph)2 φ 5 Bristol-Myers Company ( 8300755 ! /2 PhCH2C0NH-r-< ^ /-lKs^^CH 20H ' COOCH(Ph), 8 PC15 pyridine /2 PhCH2CONH-j-f ^ /—1Vi^CHjCl g COOCHCPh)2 , Nal Ψ PhCH2C0NH-j-S N /—N\^~ CH2I COOCH(Ph)2 3C'0 V 8 3 0 0 7 5 5 Bristol-Myers Company B PhCH-CONH-j-f J©· Α,λ-rVD COOCH(Ph), \ 11 2 ά»3 deacylen'ng . Φ »2»]-[^'"l P /-V^—O COOCH(Ph) _ \ 12 2 άιί3 .4 V s N r—C-CONH--S' ^ 3© XrHN^S^V2 i-i^CvO

13 COOCH (Ph)2 \ CH- deblokkeren ·* ψ //~P-CONH— .... , Top> 2 ^ CH3 83 0 0 75 5 Bristol-Myers Company N—x" C-C00H H2N-|-^ ^ Jl ^ j-N TrHN^\ / \ <¥ CH-Cl ? COOCH(Ph)2 H3CCCH3 2 3a' cooc(ch3)3 5 \l) dicyclohexyl- j 1) bis(trimethyl- Y carbodiiraide (DCC) j silylkceatamide \ / (BSAJ V) 5· j \ 1 2) 3a' + PC1S N T-C-CONH —:--Γ J-V^^ci H3cicH3 COOCH(Ph)2 COOC (CH,) , 33 5q ^ Nal „„Os> P-A*·· HjCCCHj COOCH(Ph)2 cooc(ch3)3 6a H3C'0 1£ __ N-r-C-CONH--^ /-v IXJL ©^ TrHN X xO Ο V CH_—N I T 2 \\ J H3CCCH3 COOCH (Ph) 2 \ cooc(ch3)3 7q \ \ CH3 “3 0 0 75 5 Bristol-Myers Company D * c. deblokkeren Ψ N-r~C-CONH--S ^ k2n^S/ /“nn^-ch2JQ H3CCCH3 cocP V COOH 1 CH_ 1e 3 X PhCH^CONH-t-S' S N J-V^^-CH20H COOCK(Ph)2 8 PC15 ., pyridine PhCH2CONH-r-S' S ^ g COOCH(Ph)2 Nal Ψ 8 3 0 075 5 Bristol-Myers Company ®Us Qjf a.· d1 i ó Q,© | % }—= U ^ 'g O Λ x £ O O a ^ ^ / r -^ “ f~\J I I V/° ° ί ° =T§ j «"8 9-g-S έ-P-o-8 / aT * / af1 0=3 u=z <^\ w M 2*^v/

2 W W u H H A Ο-® »T fi Sd Qt© s μ C i n c ,-( n n W Λ *2 - / \ § E H t S’ “ V8 -\ i—( g 3 \ / * /\8-2-> = s \—J γΛ, —f p 2 O λ ü 1 XX fN 5 Ό k 5 s s * u s 8300755 Bristol-Myers Company N-r-e-Ü-NH-I-f^S ^ aA5\r2 sq Ιοί· £y N—^-C-CONH--^ ^ ,,A/ ch3 Ie N-r-C-CONH--p •4», - ïi 2^ toon Λ U . N__-5-ΝΗ-π/S // \\n τι 32HN^\s/ \or2 J ^\^Sh2I COOB1 1/»a Π s N rr-C-ë-NH—i S' X b2hn^\sX <y \^ch2i R3 -(j:-R4 coob^· COOB3 Bristol-Myers Company 8300755 15 μ ' ir, 0 s N-rC-Ü-NH-i-S ^ -Θ COOB ^ 15a 0 s N-r-C-Ü-NH-r—^ J9 aA^n, ^fvfO 13 3 CQOBJ 16 1? H w, -r^S ^ N r-C-COOH jXp^SQ.. jJOKj coob1 Va ΠΓ ; ... 2 / \ R-C-CO-NH-i f > B^HN XS^ O || I R3-Lr4 \ £ 1*vs^>p I _ \ _a I COOB3 0R COOH 19 R, i 4 O i y -rr-C-Ü-NH--'N «1 P "j 1

2 COOR3 8300755 Bristol-Myers Company °§ /—\ °=8 <r< - - *ί O c« u ,—ï m u ® l\g __1 a g" r-\J Λ r° r(i yr H w y-u -^ ^ N-z η X) · n 8. e a g § n cj m 2 ur> 2: Vn -Vv w i w o cm o O—O—CJ k No cj—u—u V u 7 ii

2. S' f o i o w / n °=V ^ J8 / .a 5*-z usaa^ u=* A p\ C° K cm 2 K CM W en « CM ™ Pi ® Hu Hd (*") V-* \_/ ©Kg 8 P*. A, »_ƒ ® 5 8 ^ § <n I y_s ~

5 I 8 \ / V~ - / ,U=^ «r -a i4· j r Γ t—^

2 CM ^ r-C W « 8 3 0 0 7 5 5 Bristol-Myers Company