NL8300693A

NL8300693A - Pyrroolazijnzuuramiden, werkwijze ter bereiding ervan, alsmede farmaceutische samenstellingen, die deze pyrroolazijnzuuramiden bevatten.

Info

Publication number: NL8300693A
Application number: NL8300693A
Authority: NL
Original assignee: Sigma Tau Ind Farmaceuti
Priority date: 1982-02-26
Filing date: 1983-02-24
Publication date: 1983-09-16
Also published as: KR840003614A; SE453388B; ES520112A0; GB2115417B; DK70083A; FI830556L; FI77227B; DE3306006A1; IT1210673B; SE8301008D0; NL193217B; BE896018A; IT8247881A0; MX161088A; GR77920B; GB8304996D0; GB2115417A; ES8403453A1; IL67929A; JPH0662562B2

Description

9 - ' *v ! ^ 4 Pyrroolazijnzuuramiden, werkwijze ter bereiding ervan, alsmede farma- ceutische samenstellingen, die deze pyrroolazijnzuuramiden bevatten.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een nieuwe klasse amiden van het l-methyl-5-p—toluoylpyrrool-2-azijnzuur, die waardevolle anti-ontstekende, analgetische, antipyretische, antisecretieve en anti-tussieve eigenschappen bezitten. De onderhavige uitvinding heeft evenr* 5 eens betrekking op een werkwijze ter bereiding van dergelijke amiden en op farmaceutische samenstellingen, die deze amiden bevatten.

Meer in het bijzonder heeft de onderhavige uitvinding betrekking op de amiden van het l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-azijnzuur met de algemene formule 1, waarin 10 R H of een niet gesubstitueerde alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen of een alkylgroep met 1 tot 3 koolstof atomen, gesubstitueerd met OH-, SH- of NH2-groepen voorstelt of met het stikstofatoom en met R^ een verzadigde heterocyclische ring met de formule 2 vormt, waarin ZO, S, NR2 of (CH2)n is, waarin R2 H, CH3, C^Hg, 15 CH2CH20H, CH2C00H of CH2CH2NH2 is en n een geheel getal tussen 0 en 3 is en (a) wanneer R H is, R^ een niet gesubstitueerde alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen, een alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen gesubstitueerd met GOOR3, OH, NH2, SH of Cl groepen, waarin R3 H, CH3, (%%, cycloalkyl 20 met 4 tot 6 koolstofatomen, fenyl, met alkoxy gesubstitueerd fenyl, waarbij de alkoxygroep 1 tot 3 koolstofatomen bevat of alkylfenyl, een alkylaminogroep met 1 tot 3 koolstofatomen gesubstitueerd met een COR4 groep waarin R4 de groep met formule 3 is, waarin R5 een alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen is, 25 een niet gesubstitueerde cycloalkylgroep met 4 tot 6 koolstofatomen, een cycloalkylgroep met 4 tot 6 koolstofatomen, gesubstitueerd met al-’ kylgroepen met 1 tot 3 koolstofatomen of hydroxylgroepen, een fenylgroep, gesubstitueerd met een of meer alkylgroepen met 1 tot 3 koolstofatomen, hydroxy- of mercaptogroepen of de esters ervan met ver-30 zadigde organische zuren met 2 tot 4 koolstofatomen, carboxylgroepen of de esters ervan met alcoholen met 1 tot 3 koolstofatomen, halogenen of N02, NH2 of CF3 groepen, of een onverzadigde of aromatische heterocyclische 5- of 6-ring, die één heteroatoom of meer heteroatomen bevat, die gelijk of verschillend 35 zijn, gekozen uit stikstof, zwavel en zuurstof, die niet gesubstitueerd is of gesubstitueerd is met GOOCH3, CH3, OCH3, Cl of fenylgroe-pen, is 8300 69 3 « * 2 v (b) wanneer R een niet gesubstitueerde alkylgroep of een met OH, SH of NH2 groepen gesubstitueerde alkylgroep is, R^ een niet gesubstitueerde alkylgroep met 1 tot 3 koolstof at omen, of 5 een alkylgroep met 1 tot 3 koolstof atomen gesubstitueerd met OH, SH of NH2 groepen is, en de farmacologisch aanvaardbare zouten ervan.

Niet beperkende voorbeelden van amiden van de algemene formule 1, die de voorkeur verdienen, zijn de volgende: 10 l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-(cyclohexyl)aceetamide l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamidoazijnzuur l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamidoazijnzuur ethylester l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamidoazijnzuur guaiacylester l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-( 2-mercapto-l-ethyl) aceetamide 15 l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-(l-carboxymethyl-2-mercapto-l-ethyl)-aceetamide l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-(4-methyl-2-pyridyl)aceetamide l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N~(4-carboxyethyl-fenyl)aceetamide l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-(4-carboxyfenyl)aceetamide 20 l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-(4-hydroxyfenyl)aceetamide l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-(3-trifluormethylfenyl)aceetamide l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-(3,5-dimethylfenyl)aceetamide l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-azi jnzuur—2 [ 4-( 4-methyl-l-piperazinyl)-aceetamide]hydrazide 25 1-me thyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N,N,-(di'éthyl) aceetamide l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-[(4-methyl)-l-piperazinyl]aceetamide en l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-N-(4-morfolinyl)aceetamide.

Alle· voorgaande verbindingen zijn wat structuur betreft verwant 30 aan 1-methyl—5-p—toluoylpyrrool-2-azijnzuur (US octrooiaanvrage 656.074, ingediend 26 juli 1967 ) een anti-ontstekingsmiddel, bekend onder de niet geregistreerde naam TOLMETÏN en in de therapie gebruikt in de vorm van het natriumzoutdihydraat ervan (TOLMETÏN Na.2^0)» TOLMETÏN behoort tot de klasse van de anti-ontstekingsmiddelen met pyrroolstruc-35 tuur, analoog aan CL0PIRAC, (l-p-chloorfenyl-2,5-dimethylpyrrool-3-yl)-azijnzuur en ZOMEPIRAC, 5-(4-chloorbenzoyl)-l,4-dimethylpyrrool-2-yl azijnzuur.

Deze anti-ontstekende middelen veroorzaken toxische effecten op het maag-darmkanaal, zoals bloeding en maagzweervorming, vanwege de 40 aanwezigheid van de carboxylgroep in hun moleculen.

8300693 \ ' '* 3 ' In een poging deze toxische effecten te elimineren, zijn reeds de rivaten van TOLMETIN bestudeerd, waarin een estergroep de carboxylgroep bevat. Echter blijken deze esterderivaten pro-geneesmiddelen van TOLMETIN te zijn, voorzover de hydrolytische enzymen in vitro de ester 5 tot het zuur omzetten.

Gevonden werd nu, dat de amidederivaten van formule 1 volgens de onderhavige uitvinding niet beïnvloed worden door de hydrolytische in vivo werking van de enzymen. Deze verbindingen bezitten een anti-ont-stekende activiteit van zichzelf, welke werking niet veroorzaakt wordt 10 door de terugomzetting van het amide tot het zuur, d.w.z. zij zijn geen TOLMETIN pro-geneesmiddelen. Bovenzien bezitten zij een krachtigere en langer durende anti-ontstekingsactivitei’t dan het TOLMETIN. Bovendien bezitten zij eveneens analgetische, antipyretische, antisecretieve en antitussieve eigenschappen, die deze verbindingen therapeutisch werkza-15 me middelen maken.

De werkwijze ter bereiding van de verbinding van formule 1 omvat de volgende trappen: (a) reactie van een amine van de algemene formule NERR^, waarin R en R]_ de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben, met een geac- 20 tiveerd derivaat van het l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-azijnzuur van de algemene formule 4, waarin X een activeringsgroep is, die geschikt is voor de bevordering van een amidebinding met de hiervoor gespecificeerde aminen, bij een temperatuur tussen ongeveer 0°C en 35°C, in aanwezigheid van hetzij aprotische hetzij protische oplosmiddelen, afhanke-25 lijk van de aard van de activerende groep, en eventueel, in het geval het produkt van trap (a) de COOR3 groep bevat, waarin R3 de hiervoor gespecificeerde betekenis heeft, behalve dat R3 H is, (b) hydrolyse van het produkt van trap (a), waarbij het overeenkomstige zuur derhalve wordt vrijgemaakt, en eventueel 30 (c) verestering van het zuur van trap (b) met een verbinding met formule R3OH, waarin R3 de hiervoor gespecificeerde betekenis heeft, behalve R3 * H.

Geschikt geactiveerde derivaten van formule 4, zijn die derivaten, waarin X gekozen is uit de groep bestaande uit de halogeenatomen (bij 35 voorkeur chloor), de rest met formule 5, waarin Rg en R7 alkylgroe-pen met 1 tot 3 koolstofatomen of cycloalkylgroepen met 5 of 6 kool-stofatomen, bij voorkeur cyclohexyl zijn en de rest met formule 6.

Al deze geactiveerde derivaten kunnen volgens bekende methoden bereid worden.

40 Wanneer X halogeen (bijvoorbeeld chloor) is, kan het overeenkom- 8300693 *! f 4 ^ ' stige geactiveerde derivaat bereid worden door halogenering (bijvoorbeeld chlorering) van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-azijnzuur.

Wanneer X de rest met formule 5 is (bij voorkeur Rg * R7 a cy-clohexyl) wordt het overeenkomstige geactiveerde derivaat bereid door 5 condensatie van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-azijnzuur met een N,N’-dialkylcarbodiimide (bij voorkeur Ν,Ν’-dicyclohexylcarbodiimide). Deze condensatiereactie kan op geschikte wijze worden uitgevoerd in aanwezigheid van een katalysator, zoals p-tolueensulfonzuur en 4-dimethyl-aminopyridine» 10 Wanneer X de rest met formule 6 is, wordt het overeenkomstige ge activeerde derivaat bereid door condensatie van l-methyl-5-p-toluoyl-pyrrool-2-azijnzuur met Ν,Ν'-carbonyldiimidazool. Deze condensatiereactie kan op geschikte wijze worden uitgevoerd in aanwezigheid van een katalysator, zoals natrium- of magnesiumethanolaat.

15 De hoeveelheid amine varieert in het algemeen tussen 1 en 1,5, bij voorkeur 1,2 maal de equivalente hoeveelheid van het geactiveerde derivaat. In de volgende tabel A zijn enkele voorbeelden van aminen, die voor reactie met het geactiveerde derivaat volgens de onderhavige uitvinding geschikt zijn, toegelicht.

20

TABEL A

25 » 30 ^>H C2VCO^0-NH2 γΥνη2 ho°c -O-”* 35 c2h5ococh2nh2 ho nh2 40 8300693 5 ι ........:*ï hsch2ch2nh2 f3c 2| \\ COOCH3 \ // 2 c*3. ·.

10 o ^HH \ A“NH2 \_y )-7 .

CH

CH3 /“λ Λ 15 ^JL. HH2 20

Trap (a) van de werkwijze wordt in het algemeen in een niet polair 25 milieu uitgevoerd, hoewel water-dioxan en water-tetrahydrofuranmengsels toegepast kunnen worden wanneer Ν,Ν1-dicyclohexylcarbodiimide als con-densatiemiddel wordt gebruikt, in aanwezigheid of afwezigheid van een katalysator. Oplosmiddelen, die de voorkeur verdienen, zijn de volgende: dichloormethaan, dichloorethaan, tetrahydrofuran, dioxan, dimethyl- 30 sulfoxide en Ν,Ν-dimethylformamide. De hoogste opbrengsten worden met watervrije oplosmiddelen verkregen en liggen in het traject van 50-90%.

De gemiddelde opbrengst is ongeveer 70%. De reactietemperatuur ligt tussen ongeveer 0°C en 35°C, waarbij de optimumtemperatuur ongeveer 20°C is. Het reactiemengsel wordt bij voorkeur krachtig geroerd, desge- 35 wenst in een atmosfeer van stikstof of een ander inert gas. De reagentia worden langzaam op een zodanige wijze aan elkaar toegevoegd, dat de reactietemperatuur op de optimale waarde gehouden wordt. De reactie is in een tijdsperiode, die varieert van ongeveer 15 min. tot ongeveer 6 uren, afhankelijk van het specifieke amine, voltooid.

40 De verdere verwerking van de reactiemengsels wordt op de gebruike- 8300693 V * 6 ’ lijke wijzen volgens bekende scheidingstechnieken uitgevoerd, zoals filtratie, chromatografie over kolommen van silicagel, aluminiumoxide (als zodanig of ten dele gedeactiveerd gebruikt) of andere inerte materialen.

5 De farmacologisch aanvaardbare zouten van de verbindingen van de algemene formule 1 kunnen volgens bekende methoden verkregen worden door reactie van de zure of basische verbindingen van de algemene formule 1 met, respectievelijk, een farmacologisch aanvaardbare, niet toxische base of een dergelijk zuur. Deze farmacologisch aanvaardbare, 10 niet toxische basen en zuren zijn voor de deskundige op het farmacologische gebied bekend. De met de zure verbindingen gevormde zouten zijn bij voorkeur de natrium-, kalium-, glucamine- en diëthanolaminezouten. De met de basische verbindingen gevormde zouten zijn bij voorkeur hy-drochloriden, sulfaten, salicylaten, benzoaten en pamoaten.

15 De volgende niet beperkende voorbeelden en de tabellen B en C

lichten de bereiding en de chemisch-fysische eigenschappen van enkele verbindingen van de onderhavige uitvinding toe.

Voorbeeld I

Bereiding van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamidoazijnzuur 20 ethylester (1-b; zie tabel B).

Een oplossing van 3,4 g (0,021 mol) l,l'-carbonyldiimidazool in 70 ml watervrije tetrahydrofuran werd onder krachtig roeren en koeling op ijskoud water op een zodanige wijze, dat de temperatuur op ongeveer 20°C wordt gehouden, toegevoegd aan een oplossing van 4,6 g (0,018 mol) 25 l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-azijnzuur in 150 ml watervrije tetrahydrofuran (THF). De toevoeging duurde ongeveer 30 min. Vervolgens werd het verkregen mengsel gedurende 1 uur bij 20°C krachtig geroerd. Vervolgens werden aan het mengsel 3,2 g (0,023 mol) aminoazijnzuurethyl-esterhydrochloride toegevoegd en werd de verkregen suspensie krachtig 30 geroerd, terwijl 3,2 ml (2,3 g, 0,023 mol) triëthylamine, opgelost in 20 ml watervrije THF, druppelsgewijze aan de suspensie werden toegevoegd (de toevoeging van dit reagens kan weggelaten worden in die gevallen, waarin het vrije amine in plaats van het hydrochloride ervan gebruikt wordt). Het mengsel werd gedurende 3 uren bij 20®C geroerd, 35 vervolgens werd het neergeslagen triëthylaminehydrochloride afgefiltreerd en werd de aldus verkregen doorzichtige oplossing onder verminderde druk op een waterbad bij 50°C verdampt. Het dikke en olie-achtige residu, dat gevormd was, werd in 200 ml ethylacetaat opgelost en over-gebracht naar een scheidtrechter. De organische oplossing werd eerst 40 met IN NaOH (3 x 30 ml) gewassen om het niet omgezette l-methyl-5-p-to- 8300693 7 t ..........:-¾ , ^ * luoylpyrrool-2-azijnzuur te verwijderen en werd vervolgens driemaal met 30 ml water gewassen. Daarna werden de wasbehandelingen voortgezet met 3 x 30 ml IN HC1 om de overmaat uitgangsamine, die niet had gereageerd, te verwijderen en tenslotte werd de organische oplossing driemaal met 5 30 ml verzadigde NaCl oplossing gewassen tot neutraliteit was bereikt.

De organische oplossing werd gedroogd door deze gedurende 12 uren boven watervrij natriumsulfaat te laten staan. Na filtratie werd het oplosmiddel door verdampen onder verminderde druk,op een waterbad bij 50°C verwijderd. Een vast residu werd op deze wijze verkregen, dat, na kris-10 tallisatie uit benzeen-cyclohexaan (1:1) 4,8 g van een verbinding van de formule 7 gaf, welke verbinding de volgende chemisch-fysische eigenschappen heeft: - bruto formule : C;L9H22N2°4 - moleeuulgewicht : 342,38

15 - smeltpunt : 132-133eC

- opbrengst : 78,7% van de theoretische waarde - oplosbaarheid : oplosbaar in de gebruikelijke organische oplosmiddelen

Analyse : 20 berekend % C 66,65; H 6,48; N 8,18 gevonden % C 66,47; H 6,40; N 7,90 I.R. spectrum (nujol): 3275 cm-·®· (amide NH); 1750, 1725, 1640 en 1620 cm“^ (C * o ester, keto en amide groepen).

25 Voorbeeld II

Bereiding van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamidoazijnzuur (1-c; zie tabel B).

Een mengsel bestaande uit 4,45 g (0,013 mol) l-methyl-5-p-toluoyl-pyrrool-2-aceetamidoazijnzuur ethylester (1-b), 50 ml ethanol, 25 ml 30 THF en 19,5 ml (0,0195 mol) IN NaOH werd bij kamertemperatuur (20-25°C) gedurende 1,5 uren geroerd. Vervolgens werd het mengsel met water tot 300 ml verdund en langzaam met 37%'s HC1 aangezuurd. Een vast produkt precipiteerde, dat na filtratie en drogen 3,4 g woog, welk produkt uit ethanol werd gekristalliseerd, waarbij 2,3 g van een verbinding met 35 formule 8 met de volgende chemisch-fysische eigenschappen verkregen werd: - bruto formule : - moleeuulgewicht : 314,33

- smeltpunt : 203-205°C

40 - opbrengst : 57,8% van de theoretische waarde 8300693 8 -- - oplosbaarheid ; oplosbaar in alkali.

Analyse : ^17^18¾¾ berekend % C 64,95;. H 5,77; N 8,91 gevonden % C 66,65; H 5,67; N 8,65 5 I.R. spectrum (nujol): 3275 cm”1* (amide NH); 1738 cm”1· (C = 0 carboxylgroep), 1625 cm”1· (C - 0 keto en amidegroepen).

NMR spectrum (oplosmiddel DMS0-d6; standaard IMS): 2,4 (3H, s_, CH3p-toluoyl); 3,7 (2H, _s, CH2C0NH); 10 3,8-3,9 (2H, d_, CH2COOH); 3,9 (3H, s_, CH3-N*); 6,2 (1H, _d, proton bij 3 in de pyrroolring); 6,6 (1H, d, proton bij 4 in de pyrroolring); 7,3-7,7 (4H, dubbel doublet, protonen van benzeenring); 8,45 (1H, t, NH) dpm.

Φ 15 Massaspectrum: m/e 314 (M ) Φ m/e 299 [M - CH3] m/e 212 cV^^"'‘C0“O'^a® ch3 20 m/e 119 CI^—^ ^—c=o® m/e 91 \ ®

Voorbeeld III

25 Bereiding van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamidoazijnzuur guayacilester (1-d; zie tabel B).

Aan een oplossing van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aeeetamido-azijnzuur (1-c) (2,4 g; 7,64 mmol) in watervrij THF (150 ml), werd een oplossing van l,l'-carbonyldiimidazool (1,5 g; 9,17 mmol) in watervrije 30 THF (70 ml) druppelsgewijze in 30 min. toegevoegd. Gedurende de toevoeging ontstond een precipitaat, bestaande uit het imidazolide van de verbinding (1-c). Na beëindiging van de toevoeging werd de verkregen suspensie gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geroerd, vervolgens werd een oplossing van guayacol (1,4 g, 9,17 mmol) in watervrije THF (30 ml) 35 toegevoegd. De suspensie werd eerst gedurende 2 uren krachtig bij kamertemperatuur geroerd en werd vervolgens gedurende 0,5 uren op 70°C verwarmd. Het oplosmiddel werd uit de aldus verkregen doorzichtige oplossing op een bad met heet water onder vacuum verwijderd en het olieachtige residu, dat verkregen werd, werd in 150 ml ethylacetaat opge-40 lost. De organische oplossing werd eerst eenmaal met 100 ml IN NaOH ge- 8300 69 3 9 * wassen om het uitgangszuur te verwijderen en werd vervolgens driemaal met 100 ml van een verzadigd NaCl oplossing gewassen tot neutraliteit was bereikt. Na drogen op watervrij natriumsulfaat werd de oplossing gefiltreerd en werd het oplosmiddel uit het filtraat verwijderd door op 5 een bad met warm water onder vacuum te verdampen. Op deze wijze werd een residu verkregen, bestaande uit het vaste produkt (2,7 g) dat uit een mengsel van cyclohexaan-b enz een (1:1) werd gekristalliseerd, waarbij 2,3 g van de verbinding met formule 9 met de volgende chemisch-fysische eigenschappen verkregen werd: 10 - bruto formule i C24H24N2O5 - molecuulgewicht : 420,45

- smeltpunt : 117-120°C

- opbrengst : 71,8% van de theoretische waarde - oplosbaarheid : oplosbaar in de gebruikelijke organische 15 oplosmiddelen

Analyse : ¢24^24¾¾ berekend % G 68,56; H 5,75; N 6,66 gevonden % G 68,35; H 5,85; N 6,97 I.R. spectrum (nujol): 3270 cm""^ (amide NH); 1770 cm“^- (C * 0 20 ester), 1650 cm“^· (C =* 0 keton) en 1620 cm"·** (C = 0 amide).

De verbindingen bereid volgens de voorafgaande methoden en voorgesteld door de formules 10, 1 en 11 zijn in de tabellen B en C toegelicht. Voor elke verbindingen zijn de volgende gegevens vermeld: mole-25 cuulgewicht, smeltpunt, kristallisatie oplosmiddel, opbrengst en reactietijd.

De verbinding (1-c) werd verkregen door alkalische hydrolyse van de ester (1-b) met de stoechiometrische hoeveelheid IN NaOH, zoals gedetailleerd beschreven in voorbeeld II, aangezien het niet mogelijk was 30 de directe amidering van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-azijnzuur met glycine uit te voeren. De verbinding (1-d) werd verkregen door vereste-ring van het zuur (1-c) met guayacol in aanwezigheid van een geschikt condensatiemiddel zoals gedetailleerd in voorbeeld III beschreven.

83 0 0 69 3 » 10 t

CD

0) /—* ^ CO I rH I f-f •H 3' ·· g " H Cd r-t Λ r-i H C8 W S'-'

Cd X *

W ·"» 3 Ü H J) C

co o d iu g js g

•h d o <u d ο V

W Cd Η N Cd Η N

d d ss ud si o d (U<H W !>i -> d)

So 3 a a .a (U u-a d •t-l <u · a t-l d ,

4J Ή Ο I I

u ό S on cd ·τ-ι (U -Η O ,d <u mw on on

t3 •H

4J 4J

<U CO

* cd <u «—· oo r-~ ι-t 1 u \o r-» m rt CX Si I e- H 0

O

o

W

>, u vo cn m o Ο, I o ex on o ex

rH w ex ft ex tH

>> 1—I 4-1 I I I I

O 3 d m ex en ft

d 0 a ex en O ι-H

H co ft ex 1-1 ex i-i 0 w ft I o

in r—I rH

I 3 4J

HcuadS on oo en in H o ü xr cn en <f j-3(UtH « * * * wi ns oo ex xf o a W o a en χΐ- ή <x i O i 00 en en en <r 1 y

P-H S

s> d ex xr xr in a a ο ο ο o 4J H ex ex ex ex

cd o 3 B B B B

> w Q vo ex oo xr •H aw ex ex r-ι ex w w o pc pc pc pc a s m t-ι σ» ft xr Ό ex ι-h i—I ex o a u o a -e w a 3

Ϊ Q

* - * O » pc YV

a 8 o § rt 00 1 υ υ S * 2 Ucxu d PC cn a § v V 5 a iii K Ö0 1 s PC Ό d .

J ·Η cd B . CJ T3

w I I I I

CQ W 1—I rW r-C rH

H > 8300693 11 T3 S-l

ö I

<u Jh

03 -U C

•rl 2 j? 3 § « s -s

a 3 1 O S O «rt S

jS j3 § <u e 7 g 15 1 s ^ s * «s • d u ** υ «o - B «

Cd Ό JS x ·= ai i-i Λ ïz _.

+j «o cn <-i cn om 4J * S o on o O <n 03 a«e o σν « 15 5 !-i cm co r·»

.O

a o o <t> m om $ 2

| o VO OM O' ® S

M-l 1—I 1—· r1 V ,

H 4J I I I I A

-i 1-1

iH

lias 5 s § H S 'O . <f J>' g £ | g> 3 R S s s cn co rsl -3- CM sr aj o o O O o

I-M OM CM en CM OM

3 1¾¾¾ % ° 2 S b « ί* I? <ζ s - 5 s s s a o u u . u u en 2d o 8 jf ^ m sj JP o x % % s § | f I1 ¥ V p p

► 1 I

1 5 P5 Ό J -H <-* <3 03 H > .... .........

8300693 12 η μ αι 0) <u co τ) •Η" ·Η ι-ι μ Η I Ο «) ιμ ιΗ μ Η Ο Xi Η Η CÖ Ο WOO Ο •Η 3 Μ 3 3 Ο μ 3 Η μ cö 5 μ ,Π Ο μ Λ Λ <υ «η μ ο ο μ μ

öo ο ο μ ο CD

• β

α, * I

μ Ο * Ο Ό CO _ 3 ·η ,3 Λ St <D ·Η Λ μ μ 04 ι-t (Μ <Ν μ Μ _ Ö0 Ο I·"» es ο d Λ Λ Λ Λ β) 8>? Ο 1-1 CS ο μ m νο γ·* νο ,η ft ο ο cn ι-ι οο ι-t I Ο CO CS Ο

JJ CS ι-Η CS CS

Η μ I I I I

<D 3 .η σι -ο· σι g 3 cn cn in σι CO Οι Μ 1-1 CS 1"4 μ 3 3 Η ·Η 3 μ je 3 X σι ο <t- 00 μ

ο υ cn μ -σ -σ 3J

ο ή ·> * " * S4

η 13 co cn ο νο S

ο o -σ ο νο σι <d g öo cn <r cn cn μ

CU

H

m 0) <N ^

O

cn cs es en m

CD O 'S O O -H

h cn cn cs ^ o 3 13 Pu 53 8 w g o cs sf οο 3 3 μ es es es cs μ O PÈ P3 8 PB i-i

wa m-c i-i es cn cs „„ tics CS CS CS op 3 C

o u u υ ^. 3 3 « ' T O ' I- Γ'25'! 330 * Λ rfS l J t c u O Yj *”ΛΑγ § Λ 0 s ? T T ^ * ° 3 > 9 Ό *3 μ 5 (3 C in Q) 8 <D <ü ·Η to (DO)

ie μ μ X

•η <u <u

P0 1¾ PO PO rS

tJ Ή r-l 0 Ö O

M rO I I II

pQ μ r—I iH t—I i—4 * S3 <d * * H > * * * 8300693 13 <u · * •η * a ö +j ·* ·* ο ό a s

Cd Π _ ·“ 0) -Η Ο Ο Μ U CO ^

JJ

01 00 _ C εΊ <r ο <0 β* *> * * μ ο r- 2 ^3 00 VO m ο.

ο Τ3 Μ 0) V _

S <0 , O’ I CT

_ι ca I ft L ” la C g ** g ” § H rt 5 r* S ri 5 h 3 « ^ 2 ^ s 3 8 sg I g g 4! 3 o 3 5 !

1 U Η Η N i—I N

' b 4J ü Oö O C

Λ ω a o y -° u -° o o μ si. U 00 £ 1 O <- en r-j pH 4J ep r4 T4 >* H W 1 I · 0 ï « 0 2 £ en 3 r-i a 3 w 2 d ,-4,-1 00 O* 1-4 ^ 2 Ö

1 <U

ΟΙ *-* ^ HO 3 X O «

£ ^ g 2 *- " J

t! g rl 3 CM 'ö 2i a) μ om r-< 2 2 S o S öO en en en I «w tH · « cd > Ö e^ JT1 <0 <U o o o 4j H e^j en

Λ O 3 Z Z Z

w 4J Ö CM ΙΠ μ μ O Μ β d ό μ σ» o\ o : <u a y -η m sP §?

S .OO

S ^ I

*; 5 3 * ^ |

•π ö I

-o öó tn 2 I Pd S3 , . c Z eO 1 I _, « U 2

Z S

$P

1 5 2 ü ·2 «

• J H cd rt · ’f1 M

W ,ο l I · § μ «m en en 1 s 8300693 14

FARMACOLOGISCHE EIGENSCHAPPEN

De met de in de tabellen B en C gegeven N-monogesubstitueerde en Ν,Ν-gedisubstitueerde derivaten van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamide uitgevoerde experimenten, laten zien dat deze produkten far-5 macologische eigenschappen bezitten, die geschikt zijn voor therapeutische toepassing in sommige pathologische toestanden,. De preparaten die langs de orale en/of parenterale weg werden toegediend, waren in een suspensie van 0,5% carboxymethylcellulose in een fysiologische zoutoplossing met neutrale pH. In het bijzonder vertoonden de verbindingen 10 van de onderhavige uitvinding een acute ontstekingremmende werking die samenging met een duidelijke analgetische werki'ng. Eveneens is aangetoond, zoals hierna beschreven, dat deze derivaten een aanzienlijk antithermische activiteit hebben, en in vivo proeven laten een goede antisecretieve en antitussieve werking zien. Al deze farmacotherapeuti-15 sche effecten werden verkregen met de doseringen en toedieningsregels, die geen duidelijke toxicische effecten veroorzaakten. In het algemeen is de toxiciteit van deze stoffen zeer laag en in het bijzonder zijn maagkwetsuren duidelijk beperkt, zoals in de voorbeelden hierna beschreven. Doses, de toedieningswegen en in het algemeen de methoden, 20 waarbij de effecten op dieren worden verkregen, suggereren dat deze verbindingen geschikt zijn voor de therapie bij de mens voor pathologische situaties, die gekenmerkt worden door flogosis en pijn. Als voorbeeld worden hierna de experimentele gegevens beschreven van de activiteit van enkele van de verbindingen volgens de uitvinding in vergelij-25 king met die van het gedihydrateerde natriumzout van l-methyl-5-p-to-luoylpyrrool-2-azijnzuur (TOLMETIN Na.2%0), bij equimolaire doses en ook met die van indomethacin bij de anti-ontstekingsproef. Anti-ontstekingsactiviteit

Dit effect werd gewaardeerd door middel van een experimenteel mo-30 del, dat acute ontsteking reproduceert: voor dit doel werd de met car-rageenine opgewekte oedeemproef toegepast volgens de methode beschreven door C.A.Winter (J. Pharmac» Exp. Ther. 141 (1963) 369, onder toepassing van een referentiestof van bekende anti-ontstekingsactiviteit: indomethacin en tolmetin Na.2H20 (S.Wong, J.F.Gardocki en T.P.Pruss, 35 J. Pharmac. Exp. Ther. 185 (1) (1973) 127).

Mannelijke albinoratten van de Wistarstam met een gewicht van 140-160 g werden 10 dagen bij 22 + 1°C in een kooi.geplaatst en ontvingen een gebalanceerd dieet en water ad libitum. 18 Uren voor het expe-riment werden de dieren willekeurig in groepen van 10 verdeeld en ge-40 vast, evenwel met vrije toegang tot water. Elke dosis werd in drie 83 0 0 69 3

* '-V

15 - ’ groepen ratten beproefd. Elke verbinditfg werd hetzij oraal door geven hetzij parenteraal door intraperitoneale injectie als volgt toegediend: - controle : 0,5% carboxymethylcellulosesuspensie in fysiologische zoutoplossing, 10 ml/kg 5 - behandeld : suspensie van de te beproeven verbindingen in dezelfde drager bij hetzelfde volume (10 ml/kg) gebruikt voor de controle bij de hierna gespecificeerde doses.

Een uur na toediening van de verbindingen en drager ontving elke rat, teneinde het oedeem voor de bepaling van het beschermende effect 10 van de te onderzoeken stof te veroorzaken, door subcutane injectie in het voetoppervlak van de linkerachterpoot 0,1 ml van een 1%’s steriele carrageeninesuspensie. De veranderingen in de voetvolumina van elk dier werden bepaald volgens de plethysmometrische methode onder toepassing· van een digitale waterplethysmograaf (model 7150-Basile) 2, 4, 6, 24, 15 48 en 72 uren na toediening van de het oedeem teweeg brengende stof.

Oedeemremming werd berekend door referentie naar het voetoppervlak van de onbehandelde poot en de graad van ontsteking in de controleproeven.

Tabel D vermeldt de proefverbindingen, de concentratie daarvan, de toedieningswegen en de relatieve percentages van de oedeemremmingen; de 20 gegevens worden aan het einde van de tabel becommentarieerd.

830 0 69 3 TABEL D - Anti-ontstekingsactiviteit van N-monogesubstitueerde en N,IT-digesubstitueerde derivaten van l-methyl-5-p-toluoyl- pyrrool-2-aceetamide 16 5 | j % remming oedeem_ |Dosis|

Verbindingen · |mg/kg|_per os_ ___ 1 | 2 h 1 4 h | 6 h j 24 h 148 h ] 72 h 10 drager - 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0

Indomethacin 2,5 20,6 33,7 25,2 6,0 0,0 0,0 5 34,3 45,9 42,1 4,2 0,0 0,0 15 " 10 66,4 53,2 51,6 20,0 6,0 0,0

Tolmetin Na.H20 10 44,8 29,2 10,2 0,0 0,0 0,0 50 48,0 55,3 55,2 0,0 0,0 0,0 20 " , 100 50,8 57,3 54,8 9,7 7,8 0,0 1-c 25 38,6 39,1 37,2 12,1 0,0 0,0 50 51,8 58,9 60,4 18,7 0,0 0,0 25 ” 100 69,0 70,1 67,0 26,0 10,0 0,0 1-d 2,5 50,0 34,6 23,1 0,0 0,0 0,0 5 51,4 38,8 24,0 10,0 10,0 6,0 30 " 10 61,5 41,2 34,9 12,6 14,0 9,0 20 62,1 48,7 32,8 26,6 25,9 3,3 50 66,9 66,8 57,8 30,9 36,3 38,6 100 68,0 74,0 67,5 40,3 38,0 33,0 83 0 0 69 3 TABEL D - (vervolg) i 'int* 17 | [_% remming oedeem_ 5 |Dosis|

Verbindingen |mg/kg|_per os_ _1 | 2 h 1 4 h 1 6 h [24 h [48 h [72 h 1-h 25 28,9 30,1 29,0 8,3 0,0 0,0 10 " 50 48,9 49,0 47,1 9,9 0,0 0,0 ” 100 66,9 67,1 69,0 22,0 13,0 0,0 l-o 25 37,1 42,0 44,0 12,1 0,0 0,0 15 " 50 49,2 50,1 50,0 22,1 4,5 0,0 100 70,1 73,4 77,5 33,5 8,6 0,0 3-a 25 27,1 29,0 32,3 7,1 0,0 0,0 20 " 50 46,0 49,1 48,0 13,4 0,0 0,0 " 100 60,1 55,2 69,7 18,1 0,0 0,0 3-b 25 28,1 33,4 30,0 10,2 0,0 0,0 25 " 50 49,1 48,0 49,7 15,2 0,0 0,0 " 100 69,7 68,0 69,0 35,0 8,9 0,0 8300693 ' ’ TABEL D - deel 2 18 | |_% remming oedeem_ 5 |Dosis|

Verbindingen |mg/kg|_i.p. _ _ | 1 2 h 1 4 h 1 6 h 124 h 148 h [72 h drager - 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 10 _

Indomethacin 2,5 25,7 38,0 30,0 5,0 0,0 0,0 " 5 39,0 50,1 48,0 7,0 0,0 0,0 10 70,8 66,6 65,0 16,0 0,0 0,0 15 _

Tolmetin Na.H20 10 46,0 39,1 20,0 0,0 0,0 0,0 " 50 53,8 60,0 58,4 0,0 0,0 0,0 100 57,0 66,0 67,1 8,7 2,0 0,0 20__ 1-c 25 40,0 44,8 45,0 9,0 0,0 0,0 50 55,0 64,0 65,4 20,0 8,0 0,0 100 74,8 77,5 74,0 30,4 12,0 0,0 25 _._ 1-d ’ 2,5- 52,3 37,0 26,0 14,0 0,0 0,0 " 5 54,0 40,0 24,6 10,1 0,0 0,0 " 10 60,0 46,9 36,7 16,5 6,3 0,0 30 " 20 65,0 50,4 48,6 23,5 9,1 8,4 50 69,7 74,0 67,2 34,5 20,8 15,3 100 76,5 79,5 73,4 42,4 33,0 31,6 83 0 0 69 3 TABEL D - deel 2 (vervolg) 19 | |_% remming oedeem_ 5 |Dosis]

Verbindingen | mg/kg ]_i.p._ _ | | 2 h | 4 h 1 6 h 124 h [48 h [72 h 1-h 25 30,1 27,9 29,0 13,0 0,0 0,0 10 ” 50 50,2 51,0 47,0 15,1 0,0 0,0 100 70,1 68,9 66,0 19,0 10,0 0,0 l-o 25 39,0 37,1 36,0 11,1 0,0 0,0 15 " 50 52,1 55,θ’ 43,0 17,9 0,0 0,0 100 79,1 78,0 77,3 24,1 0,0 0,0 3-a 25 28,9 32,7 34,0 10,1 0,0 0,0 20 " 50 50,7 48,9 42,0 11,2 0,0 0,0 " 100 69,8 69,0 63,0 13,1 0,0 0,0 3-b 25 33,2 36,0 30,0 10,0 0,0 0,0 25 " 50 52,3 55,6 58,9 11,2 0,0 0,0 100 73,4 77,1 72,9 25,6 1,4 0,0 8300693 20

Analgetische activiteit

Door middel van de met fenylchinon geïnduceerde krampproef beschreven door E.Siegmund (Proc. Soc. Exp. Biol.Med. 95, (1957) 729 werd de analgetische activiteit van enkele van de in de tabellen B en C op-5 gesomde verbindingen geëvalueerd in vergelijking met de bekende analgetische activiteit voortgebracht door Tolmetin Na.2H20, (H.Nakamura en M.Shimizu, Br. J. Pharmacol. 73, (1981) 779. Mannelijke ratten van de Wistarstam met een gewicht van 110 + 5 g werden gedurende 10 dagen bij 22 + leC in een kooi geplaatst en ontvingen een gebalanceerd dieet met 10 vrije toegang tot water. 24 uren voor het experiment werden de dieren willekeurig in groepen van 10 verdeeld en gedurende 14 uren gevast, evenwel met vrije toegang tot water. Elke dosis werd in drie groepen ratten beproefd. 30 Minuten na toediening van hetzij oraal hetzij pa-renteraal van de te onderzoeken produkten en de drager alleen (0,5% 15 carboxymethylcellulose in fysiologische zoutoplossing) bij de controle-dieren, ontving elke rat 2 ml van een 5%-ige ethanolische wateroplos-sing, die 0,36% fenyl-p-chinon (Sigma Chemical Company) bevatte, teneinde krampen te veroorzaken. 15 minuten na toediening van fenyl-p-chinon werd het aantal contracties gedurende 20 min. geteld. Het rem-20 mingseffect van de onder onderzoek zijnde verbindingen op de achter-lijfcontracties geïnduceerd door fenyl-p-chinon werd berekend door de volgende formule: % bescherming = aantal contracties lij controledieren - aantal contracties bij behandelde ratten 25 __;_ x 100 aantal contracties bij controledieren

Tabel E somt de onderzochte verbindingen, doses, toedieningswegen en hun doelmatigheid uitgedrukt als percentage bescherming op, rekening 30 houdende met het feit dat fenyl-p-chinon 30 min. na de verbindingen werd toegediend.

Tabel E-a geeft de analgetische activiteit van de verbindingen 1-d in vergelijking met TOLMETIN, rekening houdende met het feit dat deze verbindingen langs de orale weg 1, 2, 4, 6, 8, 16, 24 uren voor fenyl-35 p-chinon werden toegediend.

83 0 0 69 3 » -je 21 TABEL E - Analgetische activiteit van N-monogesubstitueerde en Ν,Ν-digesubstitueerde derivaten van l-methyl-5-p-toluoyl- pyrrool-2-aceetamide (fenyl-p-chinon-fcrampproef) 5 _ ) |_% bescherming _ jDosis| |

Verbindingen_[mg/kg]_per os_|_i.p._ 10 drager - 0,00 0,0

Tolmetin Na.E^O 5 15,0 16,5 10 40,0 46,2 15 ” 20 62,0 69,1 1-c 5 25,3 27,1 " 10 49,0 46,3 20 ” 20 85,1 82,0 1-d 5 29,1 22,1 10 53,4 56,0 25 " 20 80,2 87,0 1-h 5 16,2 18,0 " 10 37,9 44,0 30 ” 20 70,1 79,0 l-o 5 29,3 35,1 H 10 60,4 63,9 35 " 20 86,2 87,0 830 0 69 3 TABEL E - (vervolg •t 22 ] |_% bescherming_ 5 |Dosis| |

Verbindingen_|mg/kg[_per os_J__i.p._ 3-a 5 16,0 18,0 " 10 39,0 48,0 10 " 20 65,0 76,0 3-b 5 20,0 28,0 " 10 52,0 50,0 15 " 20 78,0 80,3 1 ‘ 83 0 0 69 3 ? I* 23 TABEL E-a Analgetische activiteit van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamidoazijnzuur guaiacylester (1-d) en Tolmetin Na.2H20 na orale toediening 1, 2, 4, 6, 8, 16, 24 uren voor fenyl-chinon toediening.

5 _ | |_% bescherming_ [Dosis]

Tolmetin Na.2H20 10 51,8 35,5 32,0 17,2 20,2 3,0 5,0 15 ** 20 79,6 78,0 50,0 45,3 40,1 8,7 4,2 50 81,0 84,6 62,5 49,7 45,0 9,3 3,8 1-d 10 55,7 43,3 40,1 44,0 32,0 12,1 10,0 20 " 20 78,1 80,6 70,5 66,3 71,0 23,6 25,0 50 86,4 87,0 81,5 76,8 75,0 60,7 64,0 8300693 24

Antipyretisehe activiteit

Teneinde deze activiteit te bepalen werd hyperthérmie bij mannelijke albinoratten van de Wistarstam met een gewicht van 250 + 10 g geïnduceerd door intraperitoneale injectie van 10 ml/kg van een 1,5%’s 5 suspensie van droge, gezuiverde brouwersgist (Carlo Erba). De voor vergelijking gebruikte stof was TOLMETIN Na.2H20, waarvan de antipyreti-sche activiteit bekend is (S.Wong, S.F.Gardocki en T.P.Pruss, J. Phar-mac. Exp. Ther. 185 (1), (1973) 127). De dieren werden onder dezelfde omstandigheden zoals in de voorafgaande .proef beschreven, in kooien ge-10 plaatst. Vijf uren na toediening van de gist werden die dieren met een stijging in lichaamstemperatuur ten opzichte van de basale waarden van 1,5°C of meer, bepaald door een rectale sonde verbonden met een YSI thermometer (73 ATP model, Yellow Springs Instrument Company) voor het experiment geselecteerd. De dieren werden vervolgens willekeurig in 15 groepen van 10 verdeeld en de te onderzoeken verbindingen en de drager werden via de orale en parenterale wegen toegediend, waarbij elke dosis in twee groepen werd beproefd. De lichaamstemperatuur werd 1, 2 en 3 uren na toediening van de stoffen bepaald. Door middel van deze bepalingen was het mogelijk het percentage veranderingen in de lichaamstem-20 peratuur van de behandelde groepen in vergelijking met de controlegroepen, die alleen de drager hadden ontvangen, vast te stellen. Tabel F somt de onderzochte verbindingen, doses, toedieningswegen en percentage van verlaging in lichaamstemperatuur op.

83 0 0 69 3 ; .....* 25 1 - — TABEL F - Antipyretische activiteit van N—monogesubs titueerde en Ν,Ν-digesubstitueerde derivaten van l-methyl-5-p-toluoyl-pyrrool-2-aceetamide 5 | _% temperatuurdaling_ |Dosis| |

Verbindingen [mg/kg{_per os_I i«P»_ ___| l 1 h I 2 h |3h|lhl2hl3h

Tolmetin Na.2H20 50 12,0 20,0 29,5 15,0 19,0 30,5 10 " 75 13,0 26,0 27,0 18,0 29,0 34,0 - 100 18,0 30,9 47,0 28,0 39,0 51,0 1-c 50 15,0 23,0 32,0 20,0 21,9 36,0 15 - 75 16,5 -30,7 42,1 19,0 32,6 45,2 - 100 27,1 31,2 57,9 35,0 49,1 65,7 1-d 50 14,0 22,0 31,6 16,0 23,0 37,5 20 " 75 18,5 23,4 29,1 22,1 33,4 39,8 '* ' 100 22,0 42,5 59,0 28,1 37,2 60,4 1-h 50 13,0 28,0 31,1 12,0 29,1 36,2 " 75 17,0 29,1 39,4 18,0 27,2 39,4 25 " 100 21,0 35,1 51,8 23,1 39,3 60,2 l-o 50 12,0 23,1 35,2 13,0 27,5 39,6 " 75 16,0 25,2 40,2 18,0 27,0 49,6 100 29,1 33,7 59,0 30,1 45,0 62,1 30 _;_ 3-a 50 15,5 23,0 32,1 16,0 26,0 36,7 75 16,2 29,1 39,4 19,0 30,2 39,4 " 100 22,0 29,5 56,1 21,3 36,1 58,1 35 ______ ‘ 3-b 50 13,1 21,0 36,2 12,9 23,0 38,3 - 75 19,0 29,1 40,6 23,4 29,0 48,5 - 100 27,0 35,0 59,7 32,9 39,0 60,1 40 ______ 830 0 69 3 26

Antisecretie activiteit

Het experiment werd uitgevoerd volgens de methode beschreven door Y.Kasê (Folia Pharmacol. Jap. 73, (1977) 605 met het doel te onderzoeken of de verbindingen onder onderzoek al of niet veranderingen bepalen 5 in het voltime van het slijm, dat door de ademhalingsweg wordt afgescheiden. Groepen van 4 mannelijke Nieuw-Zeeland albinoratten (gemiddeld gewicht: 2,5 kg) werden voor het onderzoek van elke doses per afzonderlijke groep gebruikt. De dieren werden met urethan (1,1 g/kg lichaamsgewicht) geanesthetiseerd via de intraperitoneale weg en een Y 10 canule werd in de trachea opgenomen. Teneinde slijmsecretie te stimuleren werd een bevochtiger met de canule verbonden om de dieren spontaan lucht te doen inademen met een vochtigheid van 100% bij een constante temperatuur van 39°C. Het afgescheiden slijm werd door een andere opening in de canule verzameld en 3 en 6 uren na toediening van de te on-15 derzoeken verbinding of van de drager alleen toegediend in een orde van grootte van 2 mg/kg (controledieren) gemeten. Berekening van de toename of afname in slijmsecretie was gebaseerd op de percentageverschillen tussen de groepen behandeld met de te onderzoeken verbinding en de controlegroep. Tabel G geeft de percentageverschillen in slijmsecretie en 20 de onderzochte verbindingen met relatieve doses en toedieningswegen.

* 8300693 / TATtKT. G - Antisecretie activiteit van N-monogesubstitueerde en N, N-digesubs titueerde derivaten van l-methyl-5-p-toluoyl- pyrrool-2-aceetamide 27 5 I I % verschil in slijmsecretie_

]Dosis I I

Verbindingen |mg/kg|_per os_|_i-p·_ _[ I 3 h 1 6h 1 3 h I 6 h 10 Tolmetin Na.2H20 50 +5% +10% +3% +7% * 75 0,0 +2% +8% +10% 100 +5% 0,0 +7% 0,0 i 15 1-c 50 0,0 +6% 0,0 0,0 " 75 -10% -8% -12% -7% 100 -35% -22% -37% -25% 20 1-d 50 0,0 0,0 -5% -5% " 75 -15% -10% -18% -15% " 100 -32% -27% -38% -30% 25 1-h 50 -5% 0,0 -8% -3% 75 -19% -16% -26% -20% 100 -39% -32% -41% -38% 30 3-a 50 -7% -8% -10% -7% ” 75 -15% -10% -20% -18% 100 -32% -25% -38% -29% 35 3-b 50 -9% -5% -12% -10% '* 75 -18% -10% -25% -22% 100 -36% -30% -40% -36% 83 0 0 69 3 28

Antitussieve activiteit

Het antitussieve effect op albino cavia's met een gewicht van 300 g werd gewaardeerd volgens de methode beschreven door Y.Kasê (Selected Pharmacological Testing Methods, biz.. 363, Marcel Dekker Inc., 5 New York, 1968). Elke dosis werd beproefd bij een groep dieren met een Y canule opgenomen in de trachea. Teneinde hoesten te veroorzaken, werd het slijmvlies van de tracheavertakking mechanisch gestimuleerd door opname van een haar van een wild zwijn jdoor een opening in de canule, terwijl de andere opening verbonden werd met een kymograaf om de ampli-10 tude en/of frequentie uit te zetten. De reductie in het aantal hoestop-wekkingen werd 1 uur na toediening van de te onderzoeken verbindingen geëvalueerd door de uitzettingen gedurende 20 min. te volgen en te vergelijken met de reactie van de controledieren. Tabel H somt de onderzochte verbindingen, doses, toedieningswegen en percentage hoestopwek-15 kingen op.

83 0 0 69 3 TABEL Η - Antitussieve activiteit van N-monogesubstitueerde en Ν,Ν-digesubstitueerde derivaten van l-methyl-5-p-toluoyl- pyrrool-2-aceetamide 29 5 | 1 % remming_ |Dosis| |

Verbindingen |mg/kg|_per os_|_i.p._ 1_1 amplitude|frequentie 1 amplitude|frequentie 10 Tolmetin Na.2H20 50 0 0 0 0 " 75 7 0 0 10 " 100 , 5 5 7 10 15 1-c 50 12 20 10 25 " 75 20 22 15 27 * 100 38 45 40 51 20 1-d 50 10 18 12 15 75 22 29 20 ‘ 36 " 100 30 49 30 45 25 l-h 50 13 10 20 18 75 22 18 29 35 " 100 40 50 45 53 30 3-a 50 15 - 16 20 15 " 75 30 18 30 16 100 35 45 40 56 35 3-b 50 18 29 20 28 " 75 30 18 30 20 100 45 39 52 40 8300693 30

Ulcerogene activiteit

Mannelijke ratten van de Wistarstam met een gewicht van 180 g werden willekeurig in groepen van 10 verdeeld. Drie doses van elke verbindingen werden toegediend. Eén groep ontving alleen de drager (10 ml/kg 5 lichaamsgewicht). Elke dosis werd oraal toegediend gedurende vier achtereenvolgende dagen en de ratten werden op de vijfde dag voor necrop-sie opgeofferd. Het ulcerogene effect werd volgens de volgende schaal gewaardeerd: - aantal kwetsuren: 10 1) elk bloedingspunt met ten minste een diameter van 1 mm werd geteld , als 1 kwetsuur, 2) bloedingspunten met een kleinere diameter dan 1 mm werden op de volgende wijze geteld: a) 1 tot 9 = een kwetsuur 15 b) 10 tot 19 = twee kwetsuren c) 20 tot 29 = drie kwetsuren - ernst van de kwetsuren: 1) geen kwetsuur 0 2) maagslijmvliesirritatie zonder bloeding 1 20 3) bloedingspunten met een diameter kleiner dan 1 mm 2 4) bloedingspunten met een diameter tussen 1 en 3 mm 3 5) bloedingspunten met een grotere diameter dan 3 mm 4 6) perforaties 5

Door middel van deze schaal was het mogelijk de maagbeschadigings-25 index te verkrijgen: I = gemiddeld aantal kwetsuren + gemiddelde ernst + % verspreiding 10

De resultaten zijn in tabel I gegeven.

83 0 0 69 3 TABF.L I - Ulcerogene activiteit van N-monogesubstitueerde en Ν,Ν-digesubstitueerde derivaten, van l-methyl-5-p-toluoyl-* pyrrool-2-aceetamide 31 » .....* 5 I Dosis I gem. | gem. |% verspreiding) maag-

Tolmetin Na.21^0 50 2 2 7 11 " 100 2,5 3,5 10 16 15 ” 200 3 4 10 17 1-c 50 1 1,5 7 9,5 " 100 2 2 8 12 20 " 200 2,5 2 9 13,5 1-d 50 1,5 1 6 8,5 * 100 2 1,5 9 12,5 25 ' ** 200 2 2 9 13 1-h 50 1 1 7 9 " * 100 1,5 1 8 10,5 30 " 200 2 1,5 8 11,5 l-o 50 1 1 7 9 100 2 1 9 12 35 200 2 2 8 12 * 8300693 32 TABEL I - (vervolg) IDosis I gem. | gem, |% verspreiding! maag-5 Verbindingen |mg/kg| aantal | ernst| 10 | bescha- | | kwetsuren| | | digings- | · 1_| 1 | index 3-a 50 1 1 7 9 10 " 100 1,5 2 8 11,5 " 200 1,5 2 9 12,5 3-b 50 1 1 7 9 15 " 100 1 2 7 10 ” 200 2 3 8 13 8300693 * * «β* 33

Toxiciteit

De acute toxiciteit van de onderzochte verbindingen werd bepaald bij mannelijke Zwitserse albinomuizen (23 + 1 g) en mannelijke ratten van de Wistarstam (110 g) via de orale en intraperitoneale wegen. Tabel 5 J somt de LD50 waarden (mg/kg) op.

83 0 0 69 3 TABEL J — Acute toxiciteit van N-monogesubstitueerde en Ν,Ν-digesubstitueerde derivaten van l-methyl-5-p-toluoyl- pyrrool-2-aceetamide 34 5 | | LD50 (mg/kg)

Verbindingen | dier- | _ . I · soorten | per os | p.i.

_I........................... 1_!_ 10 Tolmetin Na. 21^0 muizen 899 550 ratten 914 612 1-c muizen 1000 700 15 ratten 1300 780 1-d muizen 1500 1370 ratten 1450 1100 20 _ 1-h muizen 2400 2000 ratten 1800 1609 25 l-o muizen 910 590 ratten 978 700 30 3-a muizen 2000 1500 ratten 2400 1370 3-b muizen 1200 770 35 ratten 1000 590 83 0 0 69 3 * 35

De in de tabellen D-H vermelde gegevens laten het aanzienlijke farmaco-therapeutische effect zien van N-monogesubstitueerde en N,N-di-gesubstitueerde derivaten van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-aceetamide bij de onderzochte doses en in vergelijking met de controleprodukten.

5 In het bijzonder met betrekking tot de anti-ontstekingsactiviteit werd flogosis gedurende meer dan 24 uren geremd bij de met carrageenine opgewekte oedeemproef. De geringe toxiciteit van de bovengenoemde derivaten verleent daaraan een hoge therapeutische waarde: in feite kan worden waargenomen, dat de acute toxiciteitswaarden (tabel J) verscheidene 10 orden van grootte hoger zijn dan die gebruikt voor het bereiken van farmacologisch actieve doses. Bovendien is het belangrijk waar te nemen, dat het ulcerogene effect matig is met betrekking tot het aantal maagkwetsuren en hun ernst (Tabel I) in tegenstelling tot de anti-ont-stekingsmiddelen in het algemeen, die een opmerkelijk ulcerogeen effect 15 voortbrengen. Toediening aan gezonde dieren bij de in de experimenten gebruikte doses en toedieningswegen veroorzaakten geen dood op de lange of korte termijn en evenmin duidelijke tekenen van toxische effecten.

De in de tabellen D-H gegeven resultaten getuigen van het therapeutische belang van de farmaceutische samenstellingen van de onderhavige 20 uitvinding.

De patiënten, die behoefte hebben aan een anti-ontstekende, anal-getische, antipyretische en antisecretieve farmaceutische samenstelling zullen oraal of parenteraal een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een verbinding van de algemene formule 1 toegediend krijgen.

25 De oraal of parenteraal toegediende dosis van de verbinding van de algemene formule 1 zal in het algemeen tussen ongeveer 2 en ongeveer 15 mg/kg lichaamsgewicht/dag liggen, hoewel hogere of lagers doses toegediend kunnen worden door de behandelende arts met betrekking tot de leeftijd, het gewicht en de algemene toestand van de patiënt, onder ge-30 bruikmaking van gedegen professionele beoordeling.

In de praktijk worden de verbindingen oraal of parenteraal toegediend in elk van de gebruikelijke farmaceutische vormen, die volgens gebruikelijke methoden voor deskundigen op het gebied van de farmaceutische technologie bereid worden. Tot deze vormen behoren vaste en 35 vloeibare eenheidsdoseringsvormen zoals tabletten, capsules, supposito-ria, oplossingen, siropen en dergelijke alsmede injecteerbare vormen, zoals steriele oplossingen voor ampullen en flesjes. Hierna worden enkele niet beperkende voorbeelden van samenstellingen, die orale of pa-renterale toediening geschikt zijn, gegeven.

8300693 36

FARMACEUTISCHE SAMENSTELLINGEN

(1) CAPSULE

Elke capsule bevat: 5 werkzaam principe 200 mg versnijdingsmiddelen: zetmeel 48 mg lactose 143 mg magnesiumstearaat 1,5 mg 10 natriumlaurylsulfaat 0,2 mg (2) INJECTEERBARE OPLOSSING (3 ml)

Elke flesje bevat: werkzaam principe 175 mg 15 versnijdingsmiddelen: propyleenglycol 250 mg natriummetabisulfiet 9 mg natriumhydroxide 3,6 mg lidocaïnehydrochloride 10 mg 20 tweemaal gedestilleerd steriel water rest tot 3 ml

(3) SUPP0SIT0RIUM

Elk suppositorium bevat: 25 werkzaam principe 200 mg versnijdingsmiddelen: mengsel van triglyceriden van verzadigde plantaardige vetzuren 750 mg polysorbaat 250 mg 83 0 0 69 3

Claims

1. Verbinding met de algemene formule 1, waarin R H, een niet gesubstitueerde alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen of 5 een alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen gesubstitueerd met OH-, SH-of NH2“groepen is of met het stikstofatoom en met R]_ een verzadigde heterocyclische ring met de formule 2 vormt, waarin Z 0, S, NR2 of (CH2)n is, waarin R2 2, CH3, ¢3¾, CH2CH2OH, CH2COOH of CH2CH2NH2 is en n een geheel getal tussen 0 en 3 Is, en 10 (a) wanneer R H is, R-|_ een niet gesubstitueerde alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen, een alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen gesubstitueerd met COOR3, OH, NH2» SH of Cl groepen, waarin R3 H, CH3, C2H5, cycloalkyl met 4 tot 6 koolstofatomen, fenyl, met alkóxy gesubstitueerd fenyl, 15 waarbij de alkoxygroep 1 tot 3 koolstofatomen bevat of alkylfenyl Is, een alkylaminogroep met 1 tot 3 koolstofatomen gesubstitueerd met een COR4 groep waarin R4 een groep met formule 3 is, waarin R5 een alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen is,' een niet gesubstitueerde cycloalkylgroep met 4 tot 6 koolstofatomen, 20 een cycloalkylgroep met 4 tot 6 koolstofatomen, gesubstitueerd met alky Igroepen met 1 tot 3 koolstofatomen of hydroxyIgroepen, een fenylgroep, gesubstitueerd met een of meer alkylgroepen met 1 tot 3 koolstofatomen, hydroxy- of mercaptogroepen of de esters ervan met ver-zadigde organische zuren met 2 tot 4 koolstofatomen, carboxylgroepen of 25 de esters ervan met alcoholen met 1 tot 3 koolstofatomen, halogenen of Νθ2> ϊ®2 of CF3 groepen, of een onverzadigde of aromatische heterocyclische 5- of 6-ring, die hetzij één heteroatoom of meer heteroatomen bevat, die gelijk of verschillend zijn van elkaar, gekozen uit stikstof, zwavel en zuurstof, die 30 niet gesubstitueerd is of gesubstitueerd is met COOCH3, CH3, OCH3, Cl of fenylgroepen, is (b) wanneer R een niet gesubstitueerde alkylgroep of een alkylgroep gesubstitueerd met OH, SH of 11% groepen is, R]_ een niet gesubstitueerde alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen, 35 of een alkylgroep met 1 tot 3 koolstofatomen gesubstitueerd met OH, SH of NH2 groepen, is en de farmacologisch aanvaardbare zouten ervan.

2. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 12.

3. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 8. 8300693 % «Λ .

4. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 7.

5. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 9.

6. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 13.

7. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 14.

8. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 15.

9. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 16.

10. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 17.

11. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 18.

12. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 19.

13. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 20.

14. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 21.

15. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 22.

16. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 23.

17. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 24.

18. Werkwijze ter bereiding van de verbindingen van conclusie 1, met het kenmerk, dat men (a) een amine met de algemene formule NHRR^, waarin R en R^ de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben, omzet met een geactiveerd derivaat van l-methyl-5-p-toluoylpyrrool-2-azijnzuur van de algemene 20 formule 4, waarin X een activerende groep is, geschikt voor de bevordering van een amidebinding met de hiervoor gespecificeerde aminen, bij een temperatuur tussen ongeveer 0°C en 35°C, in aanwezigheid van apro-tische of protische oplosmiddelen, afhankelijk van de aard van de acti-veringsgroep, en eventueel, in het geval dat het produkt van trap (a) 25 de COOR3 groep bevat, waarin R3 de hiervoor gespecificeerde betekenis heeft, behalve R3 = H is, (b) het produkt van trap (a) hydrolyseert, waarbij derhalve het overeenkomstige zuur wordt vrijgemaakt, en eventueel (c) het zuur van trap (b) verestert met een verbinding met de for-30 mule R3OH, waarin R3 de hiervoor gespecificeerde betekenis heeft, behalve R3 = H.

19. Werkwijze volgens conclusie 18, met het kenmerk, dat men een verbinding toepast waarin X een halogeenatoom, bij voorkeur chloor, is.

20. Werkwijze volgens conclusie 18, met het kenmerk, dat men een 35 verbinding toepast waarin X de groep met formule 5 voorstelt, waarin Rg en R7 alkylgroepen met 1 tot 3 koolstofatomen of cycloalkylgroe-pen met 5 of 6 koolstofatomen, in het bijzonder cyclohexyl, voorstellen.

21. Werkwijze volgens conclusie 18, met het kenmerk, dat men een 40 verbinding toepast waarin X de groep met formule 6 voorstelt. 8300 69 3 "ΐ. .... -..iww*

22. Werkwijze volgens conclusie 20, met het kenmerk, dat men katalysatoren toepast gekozen uit de groep bestaande uit p-tolueensulfon-zuur en 4-dimethylaminopyridine.

23. Werkwijze volgens conclusie 21, met het kenmerk, dat men kata-5 lysatoren toepast gekozen uit de groep bestaande uit natrium- en magne- siumethanolaat.

24. Oraal of parenteraal toe te dienen farmaceutische samenstelling, met het kenmerk, dat de samenstelling een therapeutisch werkzame hoeveelheid van een of meer van de verbindingen volgens conclusies 1 10 tot 17 en een farmacologisch aanvaardbaar versnijdingsmiddel bevat.

25. Werkwijze ter bereiding van een oraal of parenteraal toe te dienen farmaceutische samenstelling, met het kenmerk, dat men een of meer verbindingen van de conclusies 1 tot 17 in een voor een dergelijke toepassing geschikte vorm brengt. 830 0 69 3 - ι C0 Cii2 - C0N \ * J~\ ch3 w i k -N N-R r.—λ r. : V_/ CH3 \ V~ co —\ N /- ch2-co-x \=/ f 5. 6. CH3 -O-C-NH-R f=| J! p —N N N_R7 C^3 ^ ^ C0 MI ch2—conh— ch2cooc 2h5 V_V J CH3 CH3 ^—CO—NjUn2 CONH CH2C00H K 2 ch3 —coJ(jL ch2^conh-ch2coo-!^) CH3 10. ch3 —— co— [JLcH2 CONH X ch3 8 3 0 0 69 3 ii CHo—/ \-CO—J LcH0—COl/ 3\_jY 2 \_y CH3 \l C0 -V-CH2-C0NH \_) ch3 13. CH3 C0 -1N I" CH2-C0NH-CH2-CH2SH Hl ch3 co -Λ N jL CH2-C0NH-CH( ch2sh )cooch3 cn3 1¾ CH3~<(^)>-co ~0~ ClHa'0™11 k 16. CH3 C0 CVC0NH -Q- COOC2H5 ®3 g Cs-C~y~ c° -ck- \_j~ cooh “3 8 3 0 0 6 9 3 18. CH3 C0 -U*- CVC0NH O^oh k ü __ ’ _ /=<CF3 CH3 N > CH2-C0NH -\J k 20. __ _ 0*3 αΗ3^~ν°° n> cvconh \2 K 21 CH3^ ''jj— CO-IQL Ch^-CQNH-NHCHjCOl/NCH3 k 22. /=\ Ij Π ^ C2H5 ch -/ X- co J JJ-ch.-coh cf 3 ΑΓ 2 ^c2h CH3 23. ch3X~^co -O-ch2-cohQ.-ch3 k 24. CH3^^C0 -O-^-cohQ. k 83 0 0 69 3