NL8003496A - Nieuwe pyridylaminotriazoolderivaten, alsmede genees- middelen die deze bevatten. - Google Patents

Description

ï r' y' * >' y ' * ‘

Nieuwe pyridylaminotriazoolderivaten, alsmede geneesmiddelen die deze bevatten.

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe, nuttige pyridylaminotriazoolderivaten die op de eerste plaats van belang zijn voor de medicinale chemie en/of de chemotherapie.

Meer in het bijzonder heeft de uitvinding betrekking op een 5 nieuwe reeks van 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazool-verbin dingen, welke van bijzondere waarde zijn gezien hun unieke anti-maagzweer-eigenschappen. De uitvinding omvat tevens een nieuwe methode van therapie.

In het verleden zijn diverse pogingen gedaan door 10 talrijke onderzoekers op het gebied van de organische medicinale chemie om nieuwe en betere anti-maagzweer-middelen te verkrijgen. Grotendeels hielden deze inspanningen in het synthetiseren en testen van tot dan toe nieuwe en niet voorhanden zijnde organische verbindingen, in het bijzonder op het gebied van organi-15 sche heterocyclische basen, in een poging het vermogen daar van de afscheiding van maagzuur in de maag af te remmen zonder enige substantiële anticholinergische neveneffecten te veroorzaken welke mogelijkerwijs als ongewenst zouden kunnen worden beschouwd uit farmacologisch oogpunt. Bij het zoeken naar nieuwere 20 en nog betere of sterker verbeterde anti-maagzweer-middelen is echter veel minder bekend omtrent het effect (in het bijzonder op zweren in het maagdarmkanaal) van andere organische verbindingen op dit gebied welke in het lichaam zouden kunnen voortgaan via een niet-anti-cholinergisch mechanisme en toch maag-25 zuur-antisecretoire eigenschappen hebben. Niettemin wordt in de

Amerikaanse octrooischriften 4.022.797, 4.024.271 en 4.027.026 beschreven dat bepaalde histamine-I^-receptor-inhibitoren in de 8003496 4 2 thioalkyl-, aminoalkyl- en oxyalkylguanidine-reeks en in de pyridyl-gesubstitueerde thioalkyl- en oxyalkylthioureum-reeks bruikbaar zijn voor deze doeleinden, alhoewel deze speci—fieke verbindingen niet bekend zijn als anticholinergisch als zodanig.

5 Deze specifieke nistamine-^-receptor-inhibitoren fungeren alle door die reeponsen op histamine te antagoniseren, zoals de stimulering van de afscheiding van maagzuur in de maag, welke niet geblokkeerd kunnen worden door de werking van een histamine Hj-receptor-antagonist zoals bijvoorbeeld mepyramine. Als resultaat 10 zijn deze verbindingen beslist van waarde als histamine I^-re- ceptor-inhibitoren voor het beheersen van de gastrische acidi-teit en zijn derhalve bruikbaar bij de behandeling van zweren in het maagdarmkanaal en andere soortgelijke omstandigheden van het lichaam, enz.

15 Volgens de uitvinding is nogal verrassend gevon den dat diverse nieuwe 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazool-derivaten uiterst bruikbaar zijn bij gebruik in therapie als histamine E^-receptor-inhibitoren voor het beheersen van zweren in het maagdarmkanaal en andere omstandigheden veroorzaakt of 20 verergerd door gastrische hyperaciditeit. Meer in het bijzonder worden alle nieuwe verbindingen volgens de uitvinding gekozen uit de groep bestaande uit 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazool-basen van formule 1, en de farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan, waarbij Rj een amino-, lagere N-mono-25 alkylamino- of lagere Ν,Ν-dialkylaminogroep is; R2 amino, N-monoalkylamino met 1 tot 12 koolstofatomen, N,N-dialkylamino waarin tenminste één van de genoemde alkylgroepen methyl of ethyl is en de andere alkyl met 1 tot 12 koolstofatomen is, N-monoallyl amino, N-monomethallylamino, N-methyl-N-allylamino, 30 N-ethyl-N-allylamino, N-mono(β-hydroxyethyl)-amino, N-mono(γ- hydroxypropyl)-amino, N-mono/β-(lager alkoxy)ethyl/amino, N-mono-/γ—(lager alkoxy)propyl/amino, N-mono(2,2,2-trifluorethyl)-amino, N-monobenzylamino, N-methyl-N-benzylamino, N-ethyl-N-benzylamino, N-mono(β-feny1ethyl)amino, N-mono((3-fenyl-0-hydroxy-35 ethyl)amino of ring-gesubstitueerd N-monobenzylamino, ring- gesubstitueerd N-methyl-N-benzylamino, ring-gesubstitueerd 8003496 / ƒ

V

3 N-ethyl-N-benzylamino of ring-gesubstitueerd N-mono((3-f enyl-ethyl)amino is, waarbij elke ring ten hoogste twee substituenten aan de fenylgroep heeft, waarbij elk van de genoemde ring-substituenten identiek is gekozen uit de groep bestaande uit 5 fluor, chloor, broom, trifluormethyl, lager alkyl, lager alkoxy, hydroxy, carbamoyl, sulfamoyl, lager alkylsulfonyl en methaan-sulfonamido, of afzonderlijk is gekozen uit de groep bestaande uit chloor, methyl,methoxy, hydroxy en trifluormethyl; en R^ waterstof, lager alkyl, amino of lager N-monoalkylamino is.

10 Deze nieuwe verbindingen hebben alle anti-ulcer-activiteit in een statistisch significante mate, in het bijzonder gezien hun vermogen de afscheiding van maagzuur in het lichaam te remmen, en zijn derhalve uiterst bruikbaar bij de behandeling van maagzweren en andere soortgelijke toestanden.

15 Van bijzonder belang in dit verband zijn zulke typische en voorkeur verdienende verbindingen volgens de uitvinding als 3-amino-5-/2-(N-monomethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, 3-amino-5-/2-(N-monoethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, 3-amino-5-/2-(N,N-dimethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-20 triazool, 3-amino-5-/2-(N-ethyl-N-methylamino)-4-pyridyl/- 1,2,4-triazool en 3-amino-5-/2-(N,N-diethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool. Deze specifieke verbindingen hebben alle een sterke anti-maagzweer-werking, in het bijzonder gezien hun vermogen de maagzuurafscheiding in het lichaam te inhibiteren in een tame-25 lijk hoge mate.

Volgens het voornaamste proces gebruikt voor het bereiden van de nieuwe verbindingen volgens de uitvinding wordt een op de geschikte wijze gesubstitueerd 2-halogeenisonicotine-zuur-2-amidino-hydrazide van formule 2, waarin X chloor of 30 broom is, en X' waterstof, lager alkyl, chloor of broom is, gecondenseerd met een geschikte aminebase van de overeenkomstige formule R^H, waarin R2 de voomoemde betekenis heeft, ter verschaffing van het gewenste 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazool-eindprodukt van formule 1. Deze specifieke reactie wordt normali-35 ter uitgevoerd door gebruikmaking van een overmaat van de orga nische aminebase ten opzichte van de vereiste mono- of dimolaire 8003496 4 reactïeverhouding, daar hierdoor het reactie-evenwicht verschuift naar de produktkant van de vergelijking voor de onderhavige doeleinden. Daarnaast kan de overmaat amine ook werken als oplosmiddel voor de reactie, waarbij een voorkeur verdienen-5 de overmaat voor deze doeleinden is van ongeveer 3 tot ongeveer 10 molen amine per mol halogeen uitgangsmateriaal. Anderzijds kan ook een reactie-inert organisch oplosmiddel worden gebruikt voor de reactie en dit brengt gewoonlijk het gebruik met zich mede van een aromatisch koolwaterstofoplosmiddel, zoals benzeen, 10 tolueen en xyleen, of een cyclische ether, zoals dioxan en tetra- hydrofuran, of een lagere alkanol, zoals methanol, ethanol of isoamylalkohol, enz. Daarnaast kan de reactie worden uitgevoerd in een waterig oplosmiddelmedium. De temperatuur waarbij de reactie kan worden uitgevoerd varieert enorm en valt in het alge-15 meen binnen het temperatuurtraject van ongeveer 80 tot ongeveer 250°C, gedurende een periode van ongeveer 5 tot ongeveer 120 uren (dat wil zeggen tot alle reactiewater nagenoeg is verwijderd uit het reactiemengsel). Een voorkeur verdienende reactietijd en temperatuur voor het proces is ongeveer 150 tot 200°C 20 voor een periode van ongeveer 12 tot 72 uren. In het geval dat een specifiek oplosmiddel wordt gebruikt en/of het kookpunt van het amine beneden het gewenste reactietemperatuurtraject is is het vaak handig in de praktijk een afgesloten drukvat te gebruiken voor het uitvoeren van de reactie. Na voltooiing van deze 25 stap vindt vervolgens winning plaats van het gewenste produkt door een aantal conventionele middelen. Bijvoorbeeld wordt het gekoelde reactiemengsel eerst onder vacuum geconcentreerd ter verwijdering van het oplosmiddel en wordt het produkt vervolgens geïsoleerd door middel van filtreren of tritureren met 30 een ander organisch oplosmiddel, zoals ethylacetaat of ethanol, gevolgd door verdere zuivering (indien noodzakelijk) via kristallisatie, herkristallisatie en kolomchromatografie, enz. Op deze wijze worden gemakkelijk hoge opbrengsten van het zuivere pyri-dylaminotriazool-eindprodukt verkregen. Ook moet in dit verband 35 worden opgemerkt dat de 2-halogeen- en 2,6-dihalogeen-isonico- tinezuur-2-amidinohydrazide-uitgangsmaterialen en de aminen 8003496 ♦ Jt \ 5 (R^H) gebruikt als reagens in deze reactie grotendeels bekende verbindingen zijn of anders gemakkelijk kunnen worden bereid door de deskundige op dit gebied uit gemakkelijker te verkrijgen uitgangsmaterialen, onder toepassing van de standaardprocedures 5 van de organische chemie.

Een andere en gelijkelijk gemakkelijke route die leidt tot de produktie van de nieuwe 3-amino-5-(4-pyridyl)- 1,2,4-triazool-base-verbindingen volgens de uitvinding houdt in dat men het overeenkomstige 2-amino-isonicotinezuur-2-amidino-10 hydrazide van formule 3, waarin R2 en de genoemde betekenis hebben, verwarmt, waarop de gewenste ringsluitingsstap op geschikte wijze plaats vindt (via een interne condensatiereactie) ter verschaffing van een verbinding van formule 1. Deze specifieke condensatiereactie wordt normaliter uitgevoerd in afwezigheid 15 van een oplosmiddel bij een temperatuur die in het algemeen bin nen het traject van ongeveer 150 tot ongeveer 300°C ligt, gedurende ongeveer 5 minuten tot ongeveer 6 a 8 uren. De reactie kan ook worden uitgevoerd in een afgesloten drukvat in aanwezigheid van oplosmiddel, zoals een aromatisch koolwaterstof-20 oplosmiddel, zoals benzeen, tolueen, xyleen, enz., of elk ander reactie-inert organisch oplosmiddel, zoals een cyclische ether, zoals tetrahydrofuran of dioxan. Na voltooiing van de reactie wordt het gewenste pyridylaminotriazool-eindprodukt gemakkelijk geïsoleerd uit het reactiemengsel op een conventionele wijze, 25 bijvoorbeeld door koelen ervan tot kamertemperatuur en vervol gens herkristalliseren uit een geschikt oplosmiddelsysteem, zoals ethylacetaat/methanol of zelfs uit zuiver water alleen. Wat betreft de 2-aminoisonicotinezuur-2-amidinohydraziden, gebruikt als uitgangsmaterialen in de bovengenoemde reactie, moet zijn 30 hetzij bekende verbindingen of anders kunnen ze gemakkelijk worden bereid door de deskundige op dit gebied uitgaande van de overeenkomstige 2-aminoisonicotinezuurhydraziden door verbindingen van het laatstgenoemde type te laten reageren met het geschikte 2-gesubstitueerde 2-thiopseudo-ureum naar keuze.

35 Nog andere methoden die kunnen worden gebruikt voor de bereiding van de nieuwe 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazool- 8003496 6 verbindingen volgens de uitvinding omvatten roeten welke niet uitgaan van de voornoemde 2-halogeen- of 2-amino-isonicotine-zuur-2-amidinohydrazide-uitgangsmaterialen, en deze omvatten de volgende: (1) de versmeltingsreactie van een op geschikte wijze 5 gesubstitueerd 2-aminoisonicotinezuur met een geschikt amino- guanidinezout, zoals het sulfaat, bij verhoogde temperaturen (bijvoorbeeld 200-220°C); (2) de reactie van een geschikt 2-aminoisonicotinezuurhydrazide met het geëigende 2-gesubstitu-eerde 2-thiopseudo-ureumzout (bijvoorbeeld een hydrohalogenide-10 zout) in aanwezigheid van een waterige base; en (3) de omzet ting van een op geschikte wijze gesubstitueerd 3-amino-5-(2-halo- of 2,6-dihalo-4-pyridyl)-l,2,4-triazool in het overeenkomstige 3-amino-5-(2-amino- of 2,6-diamino-4-pyridyl)-l,2,4-triazool-eindprodukt door behandeling met een geschikt amine 15 bij verhoogde temperaturen (bijvoorbeeld 150 tot 250°C).

Van deze drie overige alternatieve routes die hierboven kort besproken zijn verdient de tweede methode, waarbij men een geschikt gesubstitueerd 2-amino-isonicotinezuurhydrazite laat reageren met een geschikt 2-gesubstitueerd 2-thiopseudo-ureum-20 zout in aanwezigheid van een waterige base de voorkeur. Deze specifieke reactie wordt normaliter uitgevoerd in een geschikt waterig oplosmiddelmedium bij een temperatuur lopend van ongeveer 20 tot ongeveer 100°C gedurende een periode van ongeveer 2 tot ongeveer 100 uren. Geschikte waterige oplosmiddelen voor 25 deze doeleinden omvatten in het aLgemeen reactie-inerte polaire oplosmiddelen zoals water, alsmede diverse mengsels daarvan met cyclische ethers, zoals dioxan en tetrahydrofuran, enz. De gebruikte base kan elke anorganische or organische base zijn die oplosbaar in het systeem en is bij voorkeur een alkalimetaal-30 hydroxyde, zoals lithium-, natrium- of akliumhydroxyde. Deze moet aanwezig zijn in een voldoende hoeveelheid om het 2-ge-substitueerde 2-thiopseudo-ureum vrij te maken uit het zout daarvan en is bij voorkeur aanwezig in een hoeveelheid voldoende om de pH van het resulterende waterige mengsel te houden in een 35 traject dat tenminste boven ongeveer pH 8,0 is. Na voltooiing van de reactie wordt het gewenste produkt gemakkelijk gewonnen 8003496 * t \ 7 door elk aantal conventionele middelen, zoals filtreren van het reactiemengsel of kolomchromatografie daarvan, indien absoluut nood-zakelijk.

Met betrekking tot de alternatieve route waarbij 5 een condensatiereactie plaats vindt van een op geschikte wijze gesubstitueerd 2-aminoisonicotinezuur met een geschikt amino-guanidinezout, deze stap kan worden uitgevoerd op in wezen de zelfde wijze als hiervoor is beschreven voor de versmeitingsre-actie van het overeenkomstige 2-aminoisonicotinezuur-2-amidino-10 hydrazide (dat vervolgens leidde tot het gewenste eindprodukt via een inwendige condensatie). In dit specifieke geval wordt de condensatie- en ringsluitings-stap uitgevoerd bij een temperatuur die in het algemeen ligt in het traject van ongeveer 150 tot ongeveer 250°C gedurende een periode van ongeveer I 15 tot ongeveer 20 uren. Isolatie van het gewenste pyridylamino- triazool-eindprodukt uit het verbruikte reactiemengsel wordt vervolgens gemakkelijk bewerkstelligd door profijt te trekken van de zure aard van het 2-amino-isonicotinezuuruitgangsmateriaal, zoals vollediger wordt beschreven in de experimentele gedeelten 20 van de onderhavige aanvrage (zie de voorbeelden XXII tot XXIV en XXX).

Wat betreft de alternatieve route inhoudende de omzetting van een op geschikte wijze gesubstitueerde 3-amino-5-(2-halo- of 2,6-dihalo-4-pyridyl)-I,2,4-triazool-verbinding in het 25 overeenkomstige 3-amino-5-(2-amino- of 2,6-diamino-4-pyridyl)- 1,2,4-triazool via een metathetische reactie met de geschikte aminebase, deze stap kan worden verwezenlijkt op nagenoeg dezelfde wijze als reeds eerder is beschreven voor de voornaamste werkwijze volgens de uitvinding, inhoudende de reactie tussen 30 een op geschikte wijze gesubstitueerd 2-halogeenisonicotinezuur- 2-amidinohydrazide en hetzelfde overeenkomstige amine (B^H).

In dit specifieke geval is de uitgangshalogeenverbinding hetzij een mono- of di-chloor- of - broom-derivaat en wordt het eindprodukt geïsoleerd op een tamelijk conventionele wijze 35 (bijvoorbeeld door verdelen van het reactieresidu tussen twee niet met elkaar mengbare oplosmiddelen of onder toepassing van 8003496 8 dunnelaagchromatografie, enz.).

De farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten van de 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazoolbaseverbindingen volgens de uitvinding worden bereid door de voornoemde organische 5 basen eenvoudigweg te behandelen met diverse minerale en organische zuren die niet-toxische zuuradditiezouten met farmacologisch aanvaardbare anionen vormen, zoals de hydrochloride-, hydrobromide-, hydrojodide-, sulfaat- of bisulfaat-, fosfaat- of zuur-fosfaat-, acetaat-, lactaat-, maleaat-, fumaraat-, citraat- of 10 zuur citraat-, tartraat of bitartraat-, succinaat-, gluconaat-, saccharaat-, methaansulfonaat-, ethaansulfonaat-, benzeensulfo-naat- en p-tolueensulfonaatzouten. Bijvoorbeeld kan de zout-vormingsstap worden uitgevoerd door eenvoudigweg toepassen van de geschikte molaire hoeveelheid van het geëigende zuur in een wa-15 terig oplosmiddelmedium of in een geschikt organisch oplosmiddel, zoals methanol of ethanol. Bij voorzichtige verdamping van het oplosmiddel wordt het vaste zout gemakkelijk verkregen.

Zoals hiervoor aangegeven zijn de 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazoolverbindingen volgens de uitvinding alle 20 zonder meer geschikt voor therapeutisch gebruik als histamine I^- receptor-inhibitoren voor de beheersing van maagzweren, in het bijzonder gezien hun vermogen de afscheiding van maagzuur in het lichaam in een statistisch significante mate te inhibiteren. Bijvoorbeeld is gevonden dat 3-amino-5-/2-(N-monoëthylamino)-4-25 pyridyl)-l,2,4-triazool, een typisch en voorkeur verdienend middel volgens de uitvinding, consistent de pentagastrine-geïndu-ceerde afscheiding van maagzuur in de maag van "Heidenhain pouch dogs" in een significant hoge mate inhibiteert bij toediening langs intraveneuze weg in doseringen lopend van 1,0 tot 30 10 mg per kg, zonder dat zich enige substantiële tekenen van toxische neveneffecten voordoen. De andere verbindingen volgens de uitvinding geven vergelijkbare resultaten. Verder kunnen alle verbindingen volgens de.uitvinding oraal worden toegediend, voor de beoogde doeleinden, zonder enige significante ongewenste farma-35 cologische nevenreacties te doen plaats vinden bij het subject waaraan ze aldus worden toegediend. In het algemeen worden deze 8003496 9 verbindingen gewoonlijk toegediend in doseringen lopend van ongeveer 0,5 tot ongeveer 50 mg per kg lichaamsgewicht per dag, ofschoon variaties noodzakelijkerwijs zullen optreden afhankelijk van de conditie en de individuele respons van het behandel-5 de subject en het specifieke type van farmaceutisch preparaat dat gekozen is.

Met betrekking tot het gebruik van de 3-amino-5-(4-py-ridyl)-l,2,4-triazool-verbindingen volgens de uitvinding voor de behandeling van patiënten die aan maagzweren lijden moet worden 10 opgemerkt dat ze hetzij alleen hetzij in combinatie met farmaceu tisch aanvaardbare dragers kunnen worden toegediend en dat deze toediening kan worden uitgevoerd zowel in enkele als in meervoudige doseringen. Meer in het bijzonder kunnen de nieuwe verbindingen volgens de uitvinding worden toegediend in een grote 15 verscheidenheid van verschillende doseringsvormen, dat wil zeg gen ze kunnen worden gecombineerd met diverse farmaceutisch aanvaardbare inerte dragers in de vorm van tabletten, capsules, ruitjes, artsenij tabletjes, harde snoepjes, poeders, waterige suspensies, elixers, siropen en dergelijke. Zulke dragers omvat-20 ten vaste verdunningsmiddelen of vulstoffen, steriele waterige media en diverse niet-toxische organische oplosmiddelen, enz. Bovendien kunnen zulke standaard farmaceutische preparaten op geschikte wijze worden gezoet en/of gearomatiseerd door middel van diverse middelen van het type dat gewoonlijk wordt gebruikt 25 voor zo’n doel. In het algemeen zijn de therapeutisch effectieve verbindingen volgens de uitvinding aanwezig in zulke doseringsvormen in concentratieniveaus van ongeveer 0,5 tot ongeveer 90 gew.% van het totale preparaat, dat wil zeggen in hoeveelheden die voldoende zijn om de gewenste eenheidsdosering te verschaffen.

30 Voor doeleinden van orale toediening kunnen tablet ten die diverse aanlengmiddelen bevatten, zoals natriumcitraat, calciumcarbonaat en dicalciumfosfaat, worden gebruikt tezamen met diverse desintegreermiddelen, zoals zetmeel en bij voorkeur aardappel- of_tapiocazetmeel, algininezuur en bepaalde complexe 35 silicaten, tezamen met bindmiddelen, zoals polyvinylpyrrolidon, gelatine en acacia. Daarnaast zijn glijmiddelen, zoals magnesium- 8003496 10 stearaat, natriumlaurylsulfaat en talk vaak zeer nuttig voor tabletteerdoeleinden. Vaste preparaten van een vergelijkbaar type kunnen ook worden gebruikt als vulstoffen in zachte en hard-gevulde gelatinecapsules; voorkeur verdienende materialen in dit 5 verband omvatten tevens lactose of melksuiker alsmede hoog moleculaire polyethyleenglycolen. Wanneer waterige suspensies en/of elixers worden gewenst voor orale toediening kan het wezenlijke-' actieve bestanddeel daarin worden gecombineerd met diverse zoetmakende of aromatiserende middelen, kleurstoffen en, desge-10 wenst, emulgeer- en/of suspendeermiddelen, tezamen met verdun- ningsmiddelen, zoals water, ethanol, propyleenglycol, glycerine en diverse soortgelijke combinaties daarvan.

De activiteit van de verbindingen volgens de uitvinding, als anti-maagzweer-middelen, wordt bepaald door hun ver-15 mogen tenminste een van de volgende twee standaardbiologische en/of farmacologische tests te doorstaan, namelijk: (J) het meten van het vermogen ervan die specifieke werkingen van histamine te antagon-iseren welke niet worden geblokkeerd door een antihistamine zoals mepyramine, dat wil zeggen een maat voor hun vermogen 20 bepaalde histamine H^-receptorplaatsen te blokkeren, en (2) het meten van het vermogen ervan de maagzuurafscheiding te inhibite-ren in de magen van honden ("Heidenhain pouch dogs") die te voren zijn behandeld met pentagastrine om de afscheiding van het genoemde zuur (in de magen) te stimuleren voor deze specifieke 25 doeleinden.

Bereiding A

Een mengsel, bestaande uit 35,8 g (0,2086 mol) 2-chloorisonicotinezuur-hydrazide en 58,4 g (0,4196 mol) 2-methyl-2-thiopseudo-ureumsulfaat werd gesuspendeerd in een oplossing 30 van 8,4 g (0,21 mol) natriumhydroxyde, opgelost in 250 ml water.

De resulterende suspensie werd vervolgens geroerd bij 25°C gedurende een periode van 20 uren en gefiltreerd. Het zo verkregen lichtbruine vaste produkt werd vervolgens gewassen op de filtertrechter met water en daarna met diëthylether. Na drogen 35 aan de lucht tot constant gewicht werd uiteindelijk verkregen 44,5 g (95 %) zuiver 2-chloorisonicotinezuur-2-amidinohydrazide, 8003496 π smp. 198-200 C (onder herstolling bij 204 C en daaropvolgende hersmelting bij 233 tot 234°C). Het uiteindelijke produkt werd daarna gekarakteriseerd door middel van infraroodabsorptie-spectroscopie.

5 Bereiding B

Een mengsel, bestaande uit 1,97 g (0,0129 mol) 2-aminoisonicotinezuurhydrazide en 3,59 g (0,0258 mol) 2-methyl-2-thiopseudo-ureumsulfaat, werd opgelost in een oplossing bestaande uit 0,56 g (0,014 mol) natriumhydroxyde in 20 ml water.

10 De resulterende oplossing werd vervolgens 1,5 uren geroerd bij 25°C, na welke tijd zich een precipitaat begon te vormen in de heldere oplossing. De resulterende suspensie werd vervolgens verder geroerd bij 25°C gedurende 18,5 uren en tenslotte gefiltreerd. Het vaste produkt dat zo verkregen werd werd vervol-15 gens gewassen op de filtertrechter met een kleine hoeveelheid water en daarna gewassen met diëthylether. Na drogen aan de lucht tot constant gewicht werd uiteindelijk verkregen 1,58 g (63 %) zuiver 2-aminoisonicotinezuur-2-amidinohydrazide, smp.

175-177°C (onder herstolling bij 184-185°C en daaropvolgende 20 hersmelting bij 251°C). Het eindprodukt werd daarna gekarakteriseerd door middel van infraroodabsorptiespectroscopie.

Bereiding C

Een mengsel, bestaande uit 6,5 g (0,039 mol) 2-(N-monomethylamino)isonicotinezuur-hydrazide en 10,5 g (0,075 mol) 25 2-methyl-2-thiopseudo-ureumsulfaat , werd gebracht in een oplos sing van 1,5 g (0,037 mol) natriumhydroxyde in 100 ml water.

De resulterende oplossing werd vervolgens 24 uren bij 25°C geroerd. Het aldus verkregen neerslag werd vervolgens gewonnen door afzuigfiltratie, goed gewassen met water en daarna aan de lucht ge-30 droogd tot constant gewicht. Aldus werd uiteindelijk verkregen 2,9 g (35 %) zuiver 2-(N-monomethylamino)isonicotinezuur-2-amidinohydrazide dat daarna werd gekarakteriseerd door middel van infraroodabsorptiespectroscopie.

Bereiding D

35 Een mengsel, bestaande uit^6,6 g (0,0366 mol) 2-(N-monoëthylamino)isonicotinezuurhydrazide en 10,0 g (0,0718 mol) 8003496 / 12 2-methyl-2-thiopseudo-ureumsulfaat, werd gebracht in een oplossing van 1,43 g (0,0366 mol) natriumhydroxyde in 30 ml water. Het resulterende mengsel werd vervolgens 5 uren geroerd bij 25°C. Op dit tijdstip werd nogeens 5,0 g (0,0359 mol) 2-methyl-2-thio-5 pseudo-ureumsulfaat aan het mengsel toegevoegd en de resulterende suspensie werd daarna nog 20 uren bij 25°C geroerd. Het vaste neerslag dat zo verkregen werd, werd daarna gewonnen door af-zuigfiltratie, goed gewassen met water en daarna met diëthylether. Na droging aan de lucht tot constant gewicht werd uiteindelijk 10 6,1 g (93 %) zuiver 2-(N-monoëthylamino)isonicotinezuur-2-amidino- hydrazide verkregen, dat vervolgens werd gekarakteriseerd door middel van infraroodabsorptiespectroscopie.

Bereiding E

Een mengsel, bestaande uit 5,5 g (0,030 mol) 2-(N,N-16 dimethylamino)isonicotinezuur-hydrazide en 8,5 g (0,060 mol) 2-methyl-2-thiopseudo-ureumsulfaat, werd gebracht in een oplossing van 1,2 g (0,030 mol) natriumhydroxyde, opgelost in 30 ml .water. De resulterende oplossing werd daarna een uur geroerd bij 25°G, gedurende welke periode zich.spoedig een neerslag vormde.

20 Het roeren werd nog 5 uren voortgezet, gevolgd door toevoeging van nog 4,0 g (0,014 mol) 2-methyl-2-thiopseudo-ureumsulfaat aan het geroerde mengsel. De resulterende suspensie werd nog 20 uren geroerd bij 25°C. Het zo verkregen neerslag werd daarna gewonnen door middel van afzuigfiltratie en gewassen en gedroogd op 25 de gebruikelijke wijze. Aldus werd uiteindelijk 3,1 g (46 %) zuiver 2-(N,N-dimethylamino)isonicotinezuur-2-amidinohydrazide, smp. 254-256°C verkregen. Het eindprodukt werd daarna gekarakteriseerd door middel van infraroodabsorptiespectroscopie.

Bereiding F

30 Een mengsel, bestaande uit 20,0 g (0,127 mol) 2-chloorisonicotinezuur en 100 ml isopropylamine werd gebracht in een stalen buis die 400 mg koperpoeder en 100 ml water bevatte.

Het resulterende mengsel werd daarna 48 uren op 170°C en tenslotte 14 uren op 210°C verwarmd. Na voltooiing van de reactie 35 werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ca 25°C en het afgewerkte reactiemengsel werd vervolgens aangezuurd ter 8003496 13 verschaffing van een ruw vast materiaal dat daarna werd verzameld door afzuigfiltratie. Aldus werd gemakkelijk een opbrengst van 4,0 g ruw 2-(N-mono-isopropylamino)isonicotinezuur, snip. 275-280°C, verkregen.

5 Bereiding G

Een mengsel, bestaande uit 20 g (0,127 mol) 2-chloor-isonicotinezuur en 30 g (0,220 mol) 2,2,2-trifluorethylamine-hydro-chloride, werd gebracht in een afgesloten stalen buis die tevens 13,8 g (0,347 mol) natriumhydroxyde opgelost in 70 ml water be- ]0 vatte. De inhoud van de buis werd daarna 18 uren op 160°C verwarmd. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud gekoeld tot kamertemperatuur (ca 25°C) en het afgewerkte reactiemengsel werd verdund met water, dat wil zeggen tot een totaal volume van 500 ml.

Het resulterende neerslag werd vervolgens verzameld door middel 15 van afzuigfiltratie en het werd daarna getritureerd met diethyl- ether/methanol ter verschaffing van 6,8 g (24 %) zuiver 2-(2,2,2-trifluorethylamino)isonicotinezuur, smp. 300-302°C. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van infra-roodabsorptiespectroscopie.

20 Sen monster van 6,0 g (0,027 mol) 2-(2,2,2-tri- fluorethylamino)isonicotinezuur (bereid als hierboven beschreven) werd toegevoegd aan 200 ml van een etherische oplossing van diazomethaan, dat eerder vers was bereid uit 25 g (0,17 mol) N-methyl-N’-nitro-N-nitroisoguanidine op een conventionele wijze.

25 Na laten staan van het etherische reactiemengsel bij 25°C gedurende 1 uur werd 100 ml methanol aan het mengsel toegevoegd en de resulterende suspensie werd zacht geroerd gedurende 20 minuten. Aan het einde van deze periode werd de geroerde suspensie voorzichtig gefiltreerd in 50 ml IN waterig zoutzuur ter ver- 30 schaffing van een heldere oplossing. Concentratie van de laatst genoemde waterige oplossing onder vacuum gaf vervolgens 6,8 g zuiver 2-(2,2,2-trifluorethylamino)isonicotinezuur-methylester-hydrochloride, dat vervolgens werd gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

35 De gehele opbrengst (6,8 g, 0,025 mol) aan 2- (2,2,2-trifluorethylamino)isonicotinezuur-methylester-hydrochlori- 8003496 14 de (bereid als hierboven beschreven) werd vervolgens gecombineerd met 70 ml 85 %-ig hydrazinehydraat en het resulterende mengsel zachtjes opgewarmd tot het terugvloeipunt ter verschaffing van een heldere oplossing. De oplossing werd vervolgens 5 gekoeld tot kamertemperatuur (ca 25°C) en daarna onder vacuum geconcentreerd om uiteindelijk ruw 2-(2,2,2-trifluorethylamino)-isonicotinezuur-hydrazide te verschaffen, zoals bevestigd door dunnelaagchromatografie (de silicagel/ethylacetaat-eluant had een R^-waarde van 0,20).

10 Bereiding H

Aan een oplossing, bestaande uit 1,24 g (0,031 mol) natriumhydroxyde in 150 ml water, werd achtereenvolgens toegevoegd 8,34 g (0,030 mol) S-methylthiopseudo-ureumsulfaat en 5,15 g (0,030 mol) 2-chloor-isonicotinezuurhydrazide (in deze 15 volgorde). Het resulterende heterogene mengsel werd vervolgens bij kamertemperatuur (ongeveer 25°C) gedurende 24 uren geroerd en daarna gefiltreerd. Het zo verzamelde vaste produkt werd daarna goed gewassen op de filtertrechter met water en vervolgens onder vacuum tot constant gewicht gedroogd ter verschaffing van 20 5,8 g (90 %) zuiver 2-chloorisonicotinezuur-2-amidinohydrazide, smp. 203°C (met herstelling bij 204°C en vervolgens hersmelting bij 239°C). Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Een monster van 10 g (0,0468 mol) 2-chlooriso-25 nicotinezuur-2-amidinohydrazide (bereid als hierboven beschreven) werd geplaatst in een sublimatie-inrichting en bij 210°C onder hoog vacuum (6,666 Pa) verwarmd gedurende 14 uren. De kleine hoeveelheid materiaal die feitelijk sublimeerde werd vervolgens weggegooid en het resterende materiaal werd getritureerd met 30 koude methanol om enige vaste verontreinigingen te verwijderen. Concentratie van het resulterende methanolische filtraat leverde vervolgens 4,8 g (53 %) zuiver 3-amino-5-(2-chloor-4-pyridyl)-l,2,4-triazool op in de vorm van een witte vaste stof, smeltpunt 232-235°C. Een analytisch zuiver monster in de vorm 35 van een wit poeder (smeltpunt 237-238°C) werd bereid door kolom-chromatografie over silicagel onder toepassing van ethylacetaat/ 8003496 J5 methanol (volumeverhoudlng 4:1) als elueermiddel. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Bereiding I

5 Een vast monster, bestaande uit 12,5 g (0,05 mol) 2,6-dichloorisonicotinezuur-2-amidinohydrazide werd verwarmd in een rondbodemreactiekolf bij 250°C gedurende 15 minuten, gevolgd door een verdere verwarmingsperiode bij 270°C gedurende nogeens 15 minuten. Na afkoeling van het afgewerkte reactie-10 mengsel tot nabij kamertemperatuur, dat wil zeggen 25°C, stolde de smelt spoedig ter verschaffing van ruw 3-amino-5-(2,6-di-chloor-4-pyridyl)-l,2,4-triazool in de vorm van een licht bruine vaste stof, smp. 240-250°C. Het produkt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van dunnelaagchromatografie (het silicagel/ 15 ethylacetaat-eluaat had een R^-waarde van 0,38).

Voorbeeld I

Een mengsel, bestaande uit 10 g (0,0468 mol) 2-chloorisonicotinezuur-2-amidinohydrazide (bereid als beschreven in bereiding A) en 100 ml 50 %-ig n-propylamine, werd ge-20 bracht in een 300 ml stalen buis en verwarmd op 160°C gedurende 38 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis, inhoudende het afgewerkte reactiemengsel, gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en daarna onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een ruw vast residu. Dit laatstgenoemde ma-25 teriaal werd vervolgens getritureerd met water, gedroogd en daar na opgenomen in ethylacetaat/methanol. Filtratie van de laatstgenoemde organische oplossing door een korte kolom van Florisil (merknaam van The Floridin Company te Tallahasee, Florida voor een synthetisch magnesia-silica-gel dat in hoofdzaak bestaat uit 30 geactiveerd magnesiumsilicaat, bereid volgens het Amerikaande octrooischrift 2.393.625), gevolgd door concentratie van het resulterende filtraat onder verminderde druk leverde vervolgens een vast produkt op, dat vervolgens werd getritureerd met heet ethylacetaat en daarna geherkristalliseerd uit water ter ver-35 schaffing van 844 mg (8 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono-(- propyl)amino/-4-pyridyl}—1,2,4-triazool, smp. 188-191°C. Het 8003496 16 eindprodukt werd daarna gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld II

De in voorbeeld I beschreven procedure werd her-5 haald, uitgezonderd dat n-hexylamine (gebruikmakend van 100 ml van een 50 %-ige waterige oplossing) het reagens was dat gebruikt werd in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd bij 170°C gedurende 17 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (onge-10 veer 25°C) en vervolgens verdund met water ter vorming van een tweefasen-systeem. De bovenlaag werd afgescheiden en vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een bruine olie, die vervolgens werd gechromatografeerd op een silicagelkolom gebruikmakend van ethylacetaat/methanol (volumeverhouding 85:15) 15 als elueermiddel, ter verschaffing van 3,6 g ruw produkt (smp.

151-153°C) en 568 mg (4,6 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(n-hexyl)-amino/-4-pyridyl}-l,2,4-triazool, smp. 154-157°C. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door kernspinresonantie. Voorbeeld III

20 De in voorbeeld I beschreven procedure werd herhaald, uitgezonderd dat n-decylamine (40 ml van het genoemde reagens in 100 ml water) het gebruikte reagens was in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd bij 165°C gedurende 48 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis 25 gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het resulterende halfvaste materiaal liet men 18 dagen staan bij dezelfde temperatuur. Op dit punt had zich een vaste stof gevormd en deze vaste stof werd vervolgens verzameld op een filtrertrechter door middel van afzuigfiltratie en daarna gewassen met diëthylether.

30 Na één herkristallisatie uit ethylacetaat/methanol werd uiteinde lijk verkregen 2,1 g (14 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(n-decyl)-amino/-4-pyridyl}-l,2,4-triazool, smp. 152-154°C. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kern-sp inresonantie.

35 Voorbeeld IV

De in voorbeeld I beschreven procedure werd her- 8003496 17 haald, uitgezonderd dat allylamine (100 ml van een 50 %-ige waterige oplossing daarvan) het reagens was dat gebruikt werd in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd bij 170°C gedurende 22 uren. Na voltooiing van de reactie werd 5 de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het afgewerkte reactiemengsel werd vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een ruw residu dat daarna werd gechromatografeerd op een silicagelkolom onder toepassing van ethylacetaat/methanol (volumeverhouding 95:5) als 10 elueermiddel. Aldus werd uiteindelijk een opbrengst van 779 mg (7,7 %) zuiver 3-amino-5-/2-monoallylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-tria-zool, smp. 198-200°C verkregen. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld V

15 De in voorbeeld I beschreven procedure werd her haald uitgezonderd dat 2-aminoethanol (2,9 ml oftewel 0,0478 mol) van het genoemde reagens in 100 ml water als reagens werd gebruikt in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd bij 170°C gedurende 20 uren. Na voltooiing van de re-20 actie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en werd de pH van het resulterende reactiemengsel bijgesteld tot pH 9,0 met behulp van IN waterige natrium-hydroxyde-oplossing. Het basisch gemaakte waterige mengsel werd vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van 25 een ruwe wasachtige vaste stof, welke vervolgens werd gechroma tografeerd op een silicagelkolom onder toepassing van ethylacetaat/methanol (volumeverhouding 85:15) als elueermiddel.

Aldus werd een ruw produkt verkregen dat na ëën herkristallisatie uit ethylacetaat/methanol uiteindelijk 276 mg (2,6 Z) zuiver 30 3-amino-5-{2-/N-mono(6-hydroxyethyl)amino/-4-pyridyl}-l,a,4-tria-

zool, smp. 223-225°C, opleverde. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie. Voorbeeld VI

De in voorbeeld I beschreven procedure werd her-35 haald, uitgezonderd dat 3-amino-l-propanol (3,6 ml oftewel 0,0479 mol van het genoemde reagens in 100 ml water) als rea- 8003496 18 gens werd gebruikt in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd bij 170°C gedurende 21 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en werd de pH van het resulterende reactie-5 mengsel bij gesteld tot 9,0 met behulp van IN waterig natrium-hydroxyde. Het basisch gemaakte waterige mengsel werd vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een ruwe olie, welke vervolgens werd gechromatografeerd op een silica-gelkolom onder toepassing van ethylacetaat/methanol (volume-10 verhouding 9:1) als elueermiddel. Aldus werd uiteindelijk 114 mg (1 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(Y-hydroxypropyl)amino/- 4-pyridyl}-l,2,4-triazool, smp. 216-218°C, verkregen. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van massa-spectroscopie.

15 Voorbeeld VII

De procedure beschreven in voorbeeld I werd herhaald, uitgezonderd dat 2-methoxyethylamine (100 ml van een 50 %-ige waterige oplossing daarvan) als reagens werd gebruikt in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd 20 bij 170°C gedurende 64 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het afgewerkte reactiemengsel werd vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een ruw residu dat daarna werd gechromatografeerd op een silicagelkolom onder toe-25 passing van ethylacetaat/methanol (volumeverhouding 4:1) als elueermiddel. Aldus werd een ruw produkt verkregen dat na êên herkristallisatie uit ethylacetaat/methanol uiteindelijk 2,48 g (22 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(β-methoxyethyl)amino/-4-pyridyl}-1,2,4-triazool, smp. 154-156°C, opleverde. Het eind-30 produkt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie .

Voorbeeld VIII

De in voorbeeld I beschreven procedure werd herhaald, uitgezonderd dat dimethylamine (100 ml van een 25 %-ige 35 waterige oplossing daarvan) als reagens werd gebruikt in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd bij 170°C

8003496 19 gedurende 41 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en daarna snel daaruit verwijderd, terwijl het resulterende lege vat daarna werd gewassen met twee opeenvolgende hoeveelheden van 5 50 ml methanol respectievelijk twee opeenvolgende hoeveelheden van 50 ml water. De gecombineerde inhouden (inhoudende het afgewerkte reactiemengsel) en de wasvloeistoffen werden daarna geleid door een filter en het resulterende filtraat werd vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een ruw 10 bruin vast materiaal als residu. Dit laatstgenoemde materiaal werd tenslotte gesuspendeerd in een minimale hoeveelheid water en vervolgens gefiltreerd ter verschaffing van 3,95 g (41 %) zuiver 3-amino-5-/2-(N,N-dimethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, smp. 255-257°C.

15 Voorbeeld IX

De in voorbeeld I beschreven procedure werd herhaald, uitgezonderd dat N-methyl-N-ethylamine (14,0 g oftewel 0,236 mol van het genoemde reagens in 100 ml water) als reagens werd gebruikt in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd 20 uitgevoerd bij 170°C gedurende 19 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en daarna snel daaruit verwijderd, terwijl het resulterende lege vat daarna grondig werd gewassen met 50 ml water. De gecombineerde inhouden (dat wil zeggen afgewerkt reac-25 tiemengsel en wasvloeistof) werden vervolgens gefiltreerd en het groene filtraat dat zo verkregen werd werd vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een groene olie als residu. Dit laatstgenoemde materiaal werd vervolgens opgenomen in water en geëxtraheerd met twee porties van 100 ml ethylace-30 taat. De organische extracten werden na te zijn gecombineerd gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en gefiltreerd en het resulterende filtraat werd vervolgens drooggedampt onder verminderde druk ter verschaffing van een ruwe gele vaste stof. Tritureren van het laatstgenoemde materiaal met ethylacetaat/ 35 diethylether, gevolgd door filtratie, gaf vervolgens 5,49 g (54 %) zuiver 3-amino-5-/2-(N-methyl-N-ethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4- 8003496 / 20 triazool, smp. 199-201°C. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld X

De in voorbeeld I beschreven procedure werd her-5 haald, uitgezonderd dat diëthylamine (100 ml van een 60 %-ige waterige oplossing daarvan) als reagens werd gebruikt in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd bij 170°G gedurende 18 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en 10 het afgewerkte reactiemengsel vervolgens onder vacuum geconcen treerd ter verschaffing van een ruwe dikke olie die daarna werd gechromatografeerd op een Florisil-kolom onder toepassing van ethylacetaat/methanol (volumeverhouding 85:15) als elueermiddel. Aldus werd een ruw produkt verkregen in de vorm van een glas, 15 dat uiteindelijk na herkristallisatie uit water 3,6 g (33 %) zui ver 3-amino-5-/2-(N,N-diëthylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, smp. 193-196°C, opleverde. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld XI

20 De in voorbeeld I beschreven procedure werd her haald, uitgezonderd dat men 60 g (0,963 mol) 2-chloorisonicotine-zuur-2-amidinohydrazide en 600 ml 70 %-ig waterig ethylamine liet reageren bij 160°C gedurende 40 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur 25 (ongeveer 25°C) en het afgewerkte reactiemengsel wordt ver volgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een dikke stroop welke daarna werd gechromatografeerd op een silica-gel-kolom onder toepassing van chloroform/methanol als elueermiddel. De eerste fractie die aldus werd verzameld werd gespaard 30 en vervolgens ontdaan van oplosmiddel door verdamping onder verminderde druk ter verschaffing van een ruwe vaste stof. Tri-tureren van deze vaste stof met ethylacetaat/methanol, gevolgd door filtreren gaf vervolgens een witte vaste stof op de filter-trechter en een donkere organische oplossing als filtraat. Het 35 filtraat werd gespaard en vervolgens drooggedampt onder ver minderde druk ter verschaffing van 36,1 g van een ruwe olie.

8003496 21

Deze olie werd vervolgens gechromatografeerd op silicagel onder toepassing van ethylacetaat/methanol (volumeverhouding 95:5) als elueermiddel, ter verschaffing van een ruwe witte vaste stof. Tritureren van dit produkt met ethylacetaat/diethylether 5 en daarna met methanol gaf tenslotte 369 mg (0,165 %) zuiver 3-(monoëthylamino)-5-/2-(N-monoëthylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, smp. 224-226°C. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld XII

10 De procedure, beschreven in voorbeeld I, werd her haald, uitgezonderd dat men 6,4 g (0,03 mol) 2-chloor-isonico-tinezuur-2-amidinohydrazide en 100 ml 20 %-ig waterig 6-fenyl-ethylamine (20 ml van het genoemde reagens in 10 ml water) liet reageren bij 175°C gedurende 40 uren. Na voltooiing van de re-15 actie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het afgewerkte reactiemengsel werd daarna geëxtraheerd met 60 ml ethylacetaat. Het zo verkregen organische extract werd daarna gedroogd boven watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en het resulterende filtraat daarna drooggedampt 20 onder verminderde druk ter verschaffing van een ruwe olie.

Tritureren van deze olie met 200 ml tolueen, gevolgd door krassen met een glazen staaf, leverde vervolgens een vast produkt op dat daarna werd gedroogd onder vacuum tot constant gewicht. Aldus werd 3-amino-5-{2-/N-mono($-fenylethyl)amino/-4-pyridyl}-25 J,2,4-triazool verkregen, smeltpunt 183-184°C na herkristalli-satie uit water. De opbrengst aan zuiver produkt bedroeg 3,0 g (36 %) en het produkt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van massaspectroscopie.

Voorbeeld XIII

30 De in voorbeeld I beschreven procedure werd her haald, uitgezonderd dat 2-amino-l-fenylethanol (6,5 g oftewel 0,0474 mol van het genoemde reagens in 100 ml water) werd gebruikt als reagens in plaats van n-propylamine en dat de reactie werd uitgevoerd bij 170°C gedurende 40 uren. Na voltooiing 35 van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamer temperatuur (ongeveer 25°C) en daarna snel daaruit verwijderd, 8003496 22 terwijl het resulterende lege vat daarna werd gewassen met een kleine hoeveelheid water. De gecombineerde inhouden (dat wil zeggen afgewerkt reactiemengsel en wasvloeistof) werden daarna gefiltreerd en het resulterende filtraat werd vervolgens onder 5 vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een ruwe gele vaste stof als residu. Deze vaste stof werd vervolgens gechromatogra-feerd op silicagel onder toepassing van ethylacetaat/methanol (volumeverhouding 95:5) als elueermiddel, ter verschaffing van 2,6 g 3-amino-5-(2-chloor-4-pyridyl)-l,2,4-triazool (smp.

10 201“203°C) en 0,541 g (3,9 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(3- fenyl-|3-hydroxyethyl) amino/-4-pyridyl}-1,2,4-triazool, smp. 201-203°C. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld XIV

15 De in voorbeeld I beschreven procedure werd her haald, uitgezonderd dat men 1,20 g (0,0056 mol) 2-chloor-isonicotinezuur-2-amidinohydrazide en 10 ml benzylamine liet reageren in 15 ml water bij 185°C gedurende 40 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot 20 kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en daarna daaruit verwijderd, gevolgd door concentratie ervan onder verminderde druk ter verschaffing van een residu. Dit residu werd vervolgens verdeeld tussen 50 ml ethylacetaat en 50 ml water en de ethylacetaat-laag werd vervolgens verzameld en gedroogd boven watervrij na-25 triumsulfaat. Na verwijdering van het droogmiddel door middel van filtratie en het oplosmiddel door middel van verdamping onder verminderde druk werd een olie-achtig residu verkregen dat werd opgenomen in diethylether onder roeren. De olie werd aldus behandeld gedurende ongeveer een uur, gedurende welke 30 periode de olie spoedig stolde. Het vaste materiaal dat zo verkregen was werd vervolgens gechromatografeerd op silicagel onder toepassing van chloroform/methanol (volumeverhouding 19:1) als elueermiddel, om uiteindelijk 650 mg (44 %) zuiver 3-amino- 5-/2-(N-monobenzylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool te verschaf-35 fen in de vorm van een witte donzige glasachtige vaste stof, smeltpunt 115°C (ontleding). Het eindprodukt werd vervolgens ge- 8003496 23 karakteriseert!, zowel met massaspectroscopie als met kernspinresonantie.

Voorbeeld XV

De in voorbeeld I beschreven procedure werd her-5 haald, uitgezonderd dat men 1,20 g (0,0056 mol) 2-chloorisonicotine-zuur-2-amidinohydrazide en 8 ml p-chloorbenzylamine liet reageren in 20 ml water bij 75°C gedurende 60 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het afgewerkte reactiemengsel 10 werd daarna geëxtraheerd met 50 ml ethylacetaat. Het zo verkregen organische extract werd daarna gedroogd boven watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en het resulterende filtraat daarna drooggedampt onder verminderde druk ter verschaffing van een ruwe olie. Deze ruwe olie werd daarna gechromatografeerd op 15 silicagel onder toepassing van chloroform/methanol (volume- verhouding J9:l) als elueermiddel ter verschaffing van 720 mg (43 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(p-chloorbenzyl)amino/-4-pyridyl}-1,2,4-triazool in de vorm van een witte vaste stof, smeltpunt 176 tot 177°C na ëên herkristallisatie uit acetonitril-20 tolueen. Het zuivere eindprodukt (smeltpunt 176 tot J77°C) werd

vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie. Voorbeeld XVI

De in voorbeeld I beschreven procedure werd herhaald, uitgezonderd dat men 1,20 g (0,0056 mol) 2-chloor-25 isonicotinezuur-2-amidinohydrazide en 5 ml p-methylbenzylamine liet reageren in 20 ml water bij 175°C gedurende 48 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het afgewerkte reactiemengsel werd vervolgens geëxtraheerd met 50 ml ethylacetaat.

30 Het zo verkregen organische extract werd vervolgens gedroogd boven watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en het resulterende filtraat daarna drooggedampt onder verminderde druk ter verschaffing van een olie als residu. Deze olie werd vervolgens gechromatografeerd op silicagel onder toepassing van chloroform/ 35 methanol (volumeverhouding 19:1) als elueermiddel ter verschaffing van 1,8 g van een amberkleurige olie, welke daarna langzaam 8003496 24 werd opgelost in 2 ml hete acetonitril. Behandeling van de laatstgenoemde oplossing met 5 ml tolueen, gevolgd door afkoeling gaf een vast precipitaat dat in we2en uit ruw produkt bestond. Na twee herkristallisaties uit acetonitril/tolueen werd tenslotte 5 518 mg (33 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono-p-methylbenzyl)amino/- 4-pyridyl}-l,2,4-triazool verkregen in de vorm van een wit vast materiaal, smeltpunt 161,5 tot 162,5°C. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

10 Voorbeeld XVII

De in voorbeeld I beschreven procedure werd herhaald, uitgezonderd dat men 1,20 g (0,0056 mol) 2-chlooriso-nicotinezuur-2-amidinohydrazide en 5 ml p-methoxybenzylamine liet reageren in 20 ml water bij 175°C gedurende 48 uren. Na vol-15 tooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het afgewerkte reactiemeng-sel werd vervolgens geëxtraheerd met 50 ml ethylacetaat. Het zo verkregen organische extract werd vervolgens gedroogd boven watervrij natriumsulfaat, gefiltreerd en het resulterende filtraat 20 daarna drooggedampt onder verminderde druk ter verschaffing van een olie als residu. Dit residu werd vervolgens gechromatogra-feerd in silicagel onder toepassing van chloroform/methanol (volumeverhouding 19:1) als elueermiddel, ter verschaffing van 1,0 g van een olie, die vervolgens werd opgelost in 2 ml heet 25 acetonitril. Behandeling van deze oplossing met tolueen als in het voorgaande voorbedd gaf een precipitaat dat in wezen uit ruw eindprodukt bestond. Dit precipitaat werd gewonnen door middel van afzuigfiltratie en onder vacuum tot constant gewicht gedroogd. Na herkristallisatie uit acetonitril/tolueen werd uit-30 eindelijk 352 mg (21 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(p-methoxy- benzyl)amino/-4-pyridyl}-l,2,4-triazool verkregen in de vorm van een witte vaste stof, smeltpunt 136 tot 139°C. Het zuivere eindprodukt werd daarna gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

35 Voorbeeld XVIII

Een monster, bestaande uit 1,15 g (0,007 mol) zuiver 8003496 25 2-aminoisonico tinezuur-2-amidinohydrazide-monohydraat (bereid als beschreven in bereiding B) werd gebracht in een geschikte reactiekolf en verwarmd op 185°C gedurende 1 uur. De zo verkregen vaste stof werd vervolgens tot kamertemperatuur (ongeveer 5 25°C) gekoeld ter verschaffing van een taankleurig produkt, smeltend bij 244 tot 246°C. Herkristallisatie van dit materiaal uit water gaf 760 mg (56 %) zuiver 3-amino-5-(2-aminopyridyl)-1,2,4-triazool-monohydraat, smp. 246-247°C. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

10 Voorbeeld XIX

Een monster, bestaande uit 2,9 g (0,0139 mol) zuiver 2-(N-monomethylamino)isonicotinezuur-2-amidinohydrazide (bereid als beschreven in bereiding C) werd gebracht in een geschikt reactievat en verwarmd op 230°C gedurende 10 minuten.

15 De zo verkregen vaste stof werd vervolgens gekoeld tot kamer temperatuur (ongeveer 25°C) en geherkristalliseerd uit ethylace-taat/methanol om uiteindelijk 1,1 g (38 %) zuiver 3-amino-5-/2-(N-monomethylamino)-4-pyridyl’-l,2,4-triazool, smp. 261-263°C, te verschaffen. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd 20 door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld XX

Een monster, bestaande uit 6,1 g (0,0274 mol) zuiver 2- (N-monoethylamino)isonicotinezuur-2-amidinohydrazide (bereid als beschreven in bereiding D) werd gebracht in een geschikt 25 reactievat en snel tot 270°C verwarmd, gevolgd door afkoeling tot 225°C. Vervolgens werd het op de laatstgenoemde temperatuur gehouden (via hernieuwde verwarming) gedurende 5 minuten. Bij afkoeling van de resulterende reactiemassa tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) werd een vast produkt verkregen dat na herkris- 30 tallisatie uit methanol/ethylacetaat 1,2 g (21 %) zuiver 3- amino~5-/2-(N-monoëthylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool opleverde. Differentiële thermische analyse gaf gelijkelijk scherpe endotherme. overgangen te zien bij 255 en 260°C. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van 35 kernspinresonantie.

8003496 26

Voorbeeld XXI

Een monster, bestaande uit 3,1 g (0,014 mol) zuiver 2-(N,N-dimethylamino)isonicotinezuur-2-amidinohydrazide (bereid als beschreven in bereiding E) werd geplaatst in een 5 geschikte reactiekolf en langzaam verwarmd tot 270°C onder een stikstofatmosfeer. De resulterende reactiemassa werd afgekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het zo verkregen vaste produkt werd daarna geherkristalliseerd uit ethylacetaat/metha-nol ter verschaffing van 470 mg (16 %) zuiver 3-amino-5-/2-(N,N-10 dimethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, snip. 257-260°C. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld XXII

Een mengsel, bestaande uit 2,5 g (0,0108 mol) 15 2-/N-mono(n-butyl)-amino/isonicotinezuur en 2,7 g (0,0219 mol) aminoguanidinesulfaat werd gebracht in een geschikte reactiekolf en verwarmd tot 200°C gedurende 3 uren onder een stikstof-atmosfeer. De smelt werd daarna afgekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C), verdund met water en de pH van het resulterende 20 mengsel bijgesteld tot 8,0 met IN waterig natriumhydroxyde. Het basisch gemaakte waterige mengsel werd vervolgens gefiltreerd en het zo verkregen heldere waterige filtraat werd vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een bruine olie, welke daarna werd getritureerd met methanol. Na verwijde-25 ring van de resulterende vaste stof door middel van afzuig- filtratie werd ethylacetaat toegevoegd aan het filtraat en de laatstgenoemde oplossing werd vervolgens geconcentreerd op een stoombad, gevolgd door afkoeling tot kamertemperatuur. Aldus werd uiteindelijk 1,04 g ruw produkt (smeltpunt 218 tot 220°C) 30 geïsoleerd in de vorm van een beige-kleurig precipitaat. Her- kristallisatie van dit precipitaat uit ethylacetaat/methanol gaf vervolgens 467 mg (18 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(n-butyl)amino/-4-pyridyl}-l,2,4-triazool, smp. 268-270°C. Het eindprodukt werd gekarakteriseerd door middel van kernspin-35 resonantie.

800 3 4 96 27

Voorbeeld XXIII

Een mengsel, bestaande uit 4,0g (0,022 mol) ruw 2-(N-monoisopropylamino)isonicotinezuur (bereid als beschreven in bereiding F) en 5,5 g (0,044 mol) aminoguanidinesulfaat 5 werd op 200°C verwarmd gedurende 9 uren volgens de procedure van voorbeeld XXII. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de kolf gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het resulterende residu werd verdund met water alvorens de pH van het mengsel bij te stellen tot 7,(^aet IN waterig natrium-10 hydroxyde. De zo verkregen basische waterige oplossing werd daarna geëxtraheerd met ethylacetaat en de verkregen organische extracten werden vervolgens gecombineerd, gedroogd en daarna geconcentreerd onder vacuum ter verschaffing van een glas als vast residu. Tritureren van dit residu met ethylacetaat gaf een 15 ruw vast materiaal dat vervolgens werd gekristalliseerd uit hete ethylacetaat ter verschaffing van 1,07 g (22 %) zuiver 3-amino-5-/2-(N-monoisopropylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, smp. 185-186°C. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

20 Voorbeeld XXIV

Een mengsel, bestaande uit 13,55 g (0,0609 mol) 2-(N,N-dimethylamino)isonicotinezuur en 15,0 g (0,1219 mol) aminoguanidine-sulfaat werd verwarmd in hoofdzaak volgens de procedure beschreven in voorbeeld XXII. Bij 150-160°C smolt het 25 reactiemengsel eerst, maar bij stijging van de temperatuur tot 200°C stolde het weer. Tenslotte, na verwarming op 200°C gedurende 7 uren, werd het reactiemengsel afgekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en vervolgens behandeld met IN waterig natriumhydroxyde, tot de pH van het resulterende meng-30 sel was gestegen tot 9,0. Op dit punt werd het oplosmiddel onder vacuum verwijderd en het residu werd daarna getritureerd met methanol en gefiltreerd. Het zo verkregen filtraat werd gespaard en daarna geconcentreerd onder vacuum ter verschaffing van een ruwe vaste stof, welke vervolgens werd geleid door een 35 kolom van Florisil 60/100A (merknaam van The Floridin Company te Tellahasee, Florida voor een synthetisch magnesia-silica-gel 8003496 28 dat in hoofdzaak bestaat uit geactiveerd magnesiumsilicaat, bereid volgens het Amerikaanse octrooischrift 2.393.625) gebruikmakend van chloroform/methanol (volumeverhouding 9:1) als elueermiddel om polaire verontreinigingen te verwijderen. Het 5 resulterende ruwe produkt werd daarna geherkristalliseerd uit ethylacetaat/methanol ter verschaffing van 2,15 g (17 %) zuiver 3- amino-5-/2-(N,N-dimethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, smp, 257-260°C. Dit produkt was in elk opzicht identiek aan dat verkregen in de voorbeelden VIII en XXI.

10 Voorbeeld XXV

Een mengsel, bestaande uit 3,6 g (0,0154 mol) 2-(2,2,2-trifluorethylamino)isonicotinezuur-hydrazide (bereid volgens de procedure beschreven in bereiding G) en 3,11 g (0,0153 mol) 2-benzyl-2-thiopseudo-ureumhypochloride werd gesuspendeerd 15 in een oplossing van 20 ml 50 %-ig waterig dioxan (dat wil zeggen 10 ml water en 10 ml dioxan). De resulterende suspensie werd daarna bijgesteld tot pH 9,5 tot 10 met behulp van 20 %-ig waterig natriumhydroxyde en bij 25°C gedurende 96 uren geroerd. Gedurende deze tijd werden nog 6 porties van 1,0 g 2-benzyl-2-20 thiopseudo-ureum-hydrochloride toegevoegd aan het mengsel en bij elke toevoeging werd de pH weer bijgesteld tot 9,5 tot 10 met 20 %-ig waterig natriumhydroxyde. Na voltooiing van deze stap werd het gehele reactiemengsel geëlueerd door een Florisil-kolom onder toepassing van ethylacetaat/methanol als elueer-25 middel. Het zo verkregen ruwe produkt werd daarna geherkristalliseerd uit ethylacetaat/methanol ter verschaffing van 1,5 g (38 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(2,2,2-trifluorethyl)amino/- 4- pyridyl}-l,2,4-triazool, smp. 198-200°C. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonan-30 tie.

Voorbeeld XXVI

Een mengsel, bestaande uit 8,0 g (0,0444 mol) 2-(N-monoëthylamino)isonicotinezuur-hydrazide en 10,3 g (0,0444 mol) N-methyl-S-methylthiopseudo-ureumhydrojodide werd 35 gebracht in een oplossing van 1,77 g (0,0444 mol) natriumhydroxyde in 50 ml water. Het resulterende mengsel werd daarna 8003496 29 verwarmd op het terugvloeipunt gedurende een periode van 22 uren, gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en gefiltreerd. Het gewonnen vaste produkt werd vervolgens onder vacuum tot constant gewicht gedroogd en uiteindelijk werd 1,9 g (19 %) 5 zuiver 3-(N-monomethylamino)-5-/2-(N-monoëthylamino)-4-pyridyl/- 1,2,4-triazool, smp. 273-276°C, verkregen. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld XXVII

10 Een mengsel, bestaande uit 1,0 g (0,0051 mol) 3-amino-5-(2-chloor-4-pyridyl)-l,2,4-triazool (bereid volgens de procedure beschreven in bereiding H) en 5,0 ml β-fenylethylamine in 15 ml water werd gebracht in een stalen buis en gedurende 15 uren op 175°C verwarmd. Na voltooiing van de reactie werd de 15 inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en daarna homogeen gemaakt door toevoeging van aceton. De resulterende oplossing werd daarna onder vacuum geconcentreerd en het zo verkregen residu werd verdeeld tussen ethylacetaat/water. De ethylacetaatlaag werd afgescheiden en gespaard, gevolgd door 20 droging boven watervrij natriumsulfaat. Na verwijdering van het droogmiddel door middel van filtratie en het oplosmiddel door middel van verdamping onder verminderde druk werd tenslotte een olie verkregen welke stolde bij tritureren met tolueen plus de hulp van krassen met een glazen staaf. Herkristallisatie van het 25 verkregen vaste materiaal uit water gaf vervolgens 0,69 g (49 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(g-fenylethyl)amino/-4-pyridyl}-l,2,4-triazool (smp. 182-184°C) in de vorm van een witte kristallijne vaste stof. Het eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van massaspectroscopie.

30 Voorbeeld XXVIII

Een mengsel, bestaande uit 1,20 g (0,056 mol) 2-chloorisonicotinezuur-2-amidinohydrazide (bereid als beschreven in bereiding A), 5,0 ml 3,4-dimethylbenzylamine en 20 ml water, werd gebracht in een stalen buis en verwarmd op 160°C ge-35 durende 75 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en daar- 8003496 30 na geëxtraheerd met 50 ml chloroform. Het chloroformextract werd gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en gefiltreerd en het resulterende filtraat werd vervolgens onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een bruine olie. Deze olie 5 werd vervolgens gechromatografeerd over een silicagelkolom on der toepassing van chloroform/methanol (volumeverhouding 19:1) als elueermiddel ter verschaffing van een kleurloze olie. Deze kleurloze (dat wil zeggen gezuiverde) olie werd daarna opgenomen in 10 ml hete chloroform waaraan 5 ml n-hexaan langzaam 10 werd toegevoegd. Na krassen op de gebruikelijke wijze met een glazen staaf sloeg het gewenste produkt spoedig neer uit de oplossing in de vorm van een witte kristallijne vaste stof. Herkristallisatie van deze vaste stof (488 mg, smeltend bij 103-110°C) uit chloroform/isopropylether gaf vervolgens 210 mg 15 (13 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(3,,4,-dimethylbenzyl)amino/- 4-pyridyl}-l,2,4-triazool, smp. 125-127°C. Het zuivere eindprodukt wordt vervolgens gekarakteriseerd door middel van kern-sp inresonantie.

Voorbeeld XXIX

20 Een mengsel, bestaande uit 1,20 g (0,0056 mol) 2-chloorisonicotinezuur-2-amidinohydrazide (bereid als beschreven in bereiding A), 3,5 ml p-tert-butylbenzylamine en 20 ml water werd gebracht in een stalen buis en op 175°C verwarmd gedurende 75 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud 25 van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en daarna geschud met chloroform, hetgeen resulteerde in het neerslaan van een vaste stof uit het tweefasen-systeem. Deze vaste stof, welke werd verzameld door afzuigfiltratie en aan de lucht gedroogd tot constant gewicht, woog 650 mg en smolt bij 30 305 tot 306°C. Herkristallisatie van dit materiaal uit chloro form/methanol (volumeverhouding 1:1) gaf vervolgens 450 mg (23 %) zuiver 3-amino-5-{2-/N-mono(p-tert-butylbenzyl)amino/-4-pyridyl}-1,2,4-triazool in de vorm van een witte vaste stof, smp. 306-307°C. Het zuivere eindprodukt (smeltpunt 306-307°C) 35 werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van kernspin resonantie.

8003496 * 31

Voorbeeld XXX

Een innig mengsel, bestaande uit 913 mg (0,006 mol) 2-amino-6-methylisonicotinezuur en 1,11 g (0,0045 mol) aminoguanidine-sulfaat werd gebracht in een geschikte reactie-5 kolf en verwarmd op 205°C gedurende 16 uren onder een atmosfeer van stikstof. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de kolf gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en het afgewerkte reactiemengsel werd vervolgens behandeld met 50 ml verzadigde waterige natriumbicarbonaatoplossing. Het zo verkregen 10 basisch gemaakte waterige mengsel werd vervolgens gefiltreerd en het resulterende filtraat daarna onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van een halfvast residu. Tritureren van dit residu met hete methanol, gevolgd door filtreren gaf een olie in de vorm van het filtraat. Deze olie werd geconcentreerd onder 15 vacuum en daarna gechromatografeerd over 40 g silicagel onder toepassing van 5 % methanol in ethylacetaat als elueermiddel om uiteindelijk 200 mg (18 %) zuiver 3-amino-5-(2-amino-6-methyl-4-pyridyl)-l,2,4-triazool te verschaffen in de vorm van een gele vaste stof, smeltpunt 98-106°C. Het zuivere eindprodukt 20 werd daarna gekarakteriseerd door middel van massaspectroscopie alsmede door middel van kernspinresonantie.

Voorbeeld XXXI

Een mengsel, bestaande uit 2,0 g (0,0087 mol) 3-amino-(2,6-dichloor-4-pyridyl)-l,2,4-triazool (bereid volgens 25 de procedure beschreven in bereiding I) en 30 ml geconcentreerd ammoniumhydroxyde, werd gebracht in een roestvast stalen buis en verwarmd op 230°C gedurende 6 uren. Na voltooiing van de reactie werd de inhoud van de buis gekoeld tot kamertemperatuur (ongeveer 25°C) en daarna verdund met 200 ml water alvorens te 30 worden gefiltreerd. Het resulterende filtraat werd daarna onder vacuum geconcentreerd en het residu wordt opgenomen in methanol, hetgeen resulteerde in het neerslaan van een ruw vast materiaal uit de oplossing. Dit ruwe materiaal werd onderworpen aan pre-peratieve dunnelaagcgromatografie op silicagel onder toepassing 35 van een oplosmiddelsysteem, bestaande uit 3 vol.dln n-propanol en 1 vol.dl 29 %-ig waterig ammoniumhydroxyde. Het ruwe 800 34 96 32 3-amino-5-(2,6-diamino-4-pyridyl)-l,2,4-triazool eindprodukt werd geïsoleerd door verwijdering van de voornaamste fluorescerende band uit de silicagelplaat (waar de R^-waarde 0,58 was) en vervolgens elueren van het geselecteerde monster met 5 methanol. Behandeling van het zo verkregen heldere methanol- extract met droog waterstofchloridegas leverde vervolgens 80 mg zuiver 3-amino-5-(2,6-diamino-4-pyridyl)-l,2,4-triazool in de vorm van het hydrochloride-zout, smp. >300°C, op. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van 10 massaspectroscopie.

Voorbeeld XXXII

Een mengsel, bestaande uit 3,0 g (0,012 mol) (N-methyl-N-benzylamino)isonicotinezuur en 2,3 g (0,0093 mol) aminoguanidinesulfaat, werd gebracht in een geschikte reactie-15 kolf en verwarmd op 185°C gedurende 16 uren onder een stikstof- atmosfeer. Na voltooiing van deze stap werd de inhoud van de kolf gekoeld tot 25°C en het afgewerkte reactiemengsel werd daarna behandeld met verzadigde waterige natriumbicarbonaat-oplossing. Het basisch gemaakte waterige mengsel werd daarna aan 20 de kook gebracht en heet gefiltreerd en het zo verkregen vaste materiaal werd daarna verzameld op de gebruikelijke wijze en vervolgens getritureerd met aceton. Na verwijdering van de resulterende vaste stof door middel van afzuigfiltratie werd het filtraat onder vacuum geconcentreerd ter verschaffing van 1,7 g 25 ruw materiaal (onzuiver produkt) in de vorm van een vast schuim.

Dit produkt werd vervolgens verder gezuiverd door middel van kolomchromatografie over 40 g silicagel, onder toepassing van chloroform/ethylacetaat als elueermiddel. Aldus werd uiteindelijk 0,44 g (17 %) zuiver 3-amino-5-/2-(N-methyl-N-benzyl-30 amino)-4-pyridyl/-1,2,4-triazool verkregen, in de vorm van een

vast schuim, smeltpunt 85°C. Het zuivere eindprodukt werd vervolgens gekarakteriseerd door middel van massaspectroscopie. Voorbeeld XXXIII

De volgende 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazool-35 base-verbindingen werden bereid door toepassing van de procedures beschreven in de voorgaande voorbeelden, uitgaande van gemakke- 8003496 33 lijk verkrijgbare materialen in elk van de gevallen: 3-amino-5-{2-/N-mono(n-dodecyl)amino/-4-pyridyl}—1,2,4-triazool, 3-(N-monomethy1amino)-5-< 2-/N-mono(n-dodecyl)amino/-4-pyridyl}- 1.2.4- triazool, 5 3-(N-monoisopropylamino)-5-/2-(N-monomethylamino)-4-pyridyl/- 1.2.4- triazool, 3-amino-5-{2-/N-methyl-N-mono-(n-dodecyl)amino/-4-pyridyl}- 1.2.4- triazool, 3-(N-monoëthylamino)-5-/2-amino-6-(n-butyl)-4-pyridyl/-1,2,4-10 triazool, 3-amino-5-/2,6-di(N-monome thylamino)-4-pyridylf-l,2,4-triazool, 3-amino-5-{2-/N-ethyl-N-mono(n-dodecyl)amino/-4-pyridyl}-1,2,4-triazool, 3-(N,N-dimethylamino)-5-/2-(N,N-dimethylamino)-4-pyridyl/-15 1,2,4-triazool, 3-/N, N-di (n-propy 1) -amino/-5-/2- (N-monome thylamino ) -4-pyr idyl /- 1.2.4- triazool, 3-(N-monoëthylamino)-5-(2-amino-4-pyridyl)-1,2,4-triazool, 3-amino-5-{2-/N-methyl-N-(n-dodecyl)amino/-4-pyridyl}-l,2,4-20 triazool, 3-(N-monomethylamino)-5-{2-/N-ethyl-N-(n-dodecyl)-amino/-4-pyridyl}-l,2,4-triazool, 3-(N-monoëthylamino)-5-/2-(N-monoallylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-triazool, 25 3-amino-5-/2-N-monomethallylamino)~4-pyridyl/-l,2,4-triazool 3-(N-monoëthylamino)-5-{2-/N-g-hydroxyethyl)amino/-4-pyridyl}- 1.2.4- triazool, 3-(N-monomethylamino)-5-{2-/N-y-hydroxypropyl)-amino/-4-pyridyl}- 1.2.4- triazool 30 3-(N-monoëthylamino)-5-{2-/Ν-γ-ethoxypropy1)amino/-4-pyridyl}- 1.2.4- triazool, 3-(N-monoëthylamino)-5-{2-/N-mono(2,2,2-trifluorethyl)amino/-4-pyridyl}-l,2,4-triazool, 3-(N-monoëthylamino)-5-/2-(N-monobenzylamino)-4-pyridyl/-l,2,4-35 triazool, 3-(N-monomethylamino)-5-{2-/N-g-fenylethyl)amino/-4-pyridyl}- 800 34 96 34 1.2.4- triazool, 3-(N-monoethylamino)-5-{2-/N-f3-fenyl-B-hydroxyethyl)amino/-4-pyridyl)-1,2,4-triazool, 3-amino-5-/2- (N-mono*ethylamino) -6- (N-monoisopropylamino) -4-5 pyridyl/-l,2,4-triazool, 3- (N-monomethylamino) -5-/ 2-amino-6-(N-monoisopropylamino) -4-pyridy1)-triazool, 3-(N-monoethylamino)-5-{2-/N-mono(o-fluorbenzyl)amino/-4-pyridyl)-l,2,4-triazool, 10 3- (N-monomethylamino )-5-( 2-/N-mono (m-chloor-g-fenylethyl)- amino/-4-pyridyl)-1,2,4-triazool, 3-amino-5-{2-/N-mono(p-broombenzyl)amino/-4-pyridyl)-l,2,4-triazool, 3-amino-5-{2-/N-mono(m-trifluormethyl-g-fenylethyl)amino/-4-pyri-15 dyl)-1,2,4-triazool, 3- (N-monoethylamino)-5-{2-/N-mono(p-isopropylbenzyl)-amino/- 4- pyridyl)-l,2,4-triazool, 3-(N-monomethylamino)-5-{2-/N-mono(p-ethoxy-g-fenylethyl)-amino/-4-pyridyl)-1,2,4-triazool, 20 3-amino-5-{2-/N-mono(2',4'-dichloorbenzyl)amino/-4-pyxidyl)- 1.2.4- triazool, 3-(N,N-dimethylamino)-5-{2-/N-mono(3',4'-dimethoxybenzyl)-amino/-4-pyridyl)-1,2,4-triazool, 3-(N-monoethylamino)-5-{2-/N-mono(5'-chloor-2'-methoxybenzyl)-25 amino/-4-pyridyl)-1,2,4-triazool, 3- (N-monomethylamino )-5-( 2-/N-mono ( 2' -methoxy-5 ’ -me thy lbenzy 1) -amino/-4-pyridyl)-1,2,4-triazool, 3-amino-5-/2-(N-ethyl-N-benzylamino)-4-pyridyl/-1,2,4-triazool, 3-(N,N-dimethylamino)-5-/2-(N-methyl-N-benzylamino)-4-30 pyridyl/-!,2,4-triazool, 3- (N-monomethylamino)-5-{2-/N-ethyl-N-(p-chloorbenzyl)amino/- 4- pyridyl)-1,2,4-triazool, 3-amino-5-{ 2-/N-methyl-N- (p-methoxybenzyl) amino/-4-pyr idyl )- 1.2.4- triazool.

35 Voorbeeld XXXIV

De niet-toxische waterstofhalogenide-zuuradditie- 8003496

V

35 zouten van elk van de hiervoor gemelde 3-amino-5-(4-pyridyl)- 1,2,4-triazool-base-verbindingen volgens de uitvinding, zoals de overeenkomstige hydrochloride-, hydrobromide- en hydro-jodide-zouten, worden elk afzonderlijk bereid door eerst de 5 betrokken organische baseverbinding op te lossen in absolute ether, gevolgd door de introductie van het juiste waterstofhalo-genidegas in de reactie-oplossing tot de verzadiging daarvan volledig is met betrekking tot het gas, waarna het gewenste zuuradditiezout spoedig neerslaat uit de oplossing. Aldus 10 wordt 1,0 g 3-amino-5-/2-(N,N-dimethylamino)-4-pyridyl/-l,2,4- triazool, verkregen als vrij baseprodukt in voorbeeld VIII, via droog waterstofchloridegas omgezet in het overeenkomstige dihydrochloridezuuradditiezout in nagenoeg kwantitatieve opbrengst.

15 Voorbeeld XXXV

De nitriet-, sulfaat- of bisulfaat-, fosfaat- of zuur fosfaat-, acetaat-, lactaat-, maleaat-, fumaraat-, citraat- of zuur-citraat-, tartraat- of bitartraat-, succinaat-, gluconaat-, saccharaat-, methaansulfonaat-, ethaansulfonaat-, 20 benzeensulfonaat- en p-tolueensulfonaat-zouten van elk van de voornoemde 3-amino-5-(4-pyridyl)-1,2,4-triazool-base-verbindin-gen worden elk bereid door oplossen van de juiste molaire hoeveelheden van het betrokken zuur en de betrokken base in afzonderlijke porties ethanol en vervolgens mengen van de beide 25 oplossingen met elkaar, gevolgd door toevoeging van diethylether aan het resulterende mengsel teneinde neerslaan van het gewenste zuuradditiezout daaruit te bewerkstelligen. Aldus reageren equimolaire hoeveel.heden 3-amino-5-/2-(N-monoëthylamino)-4-pyridyl/- 1,2,4-triazool en geconcentreerd zwavelzuur ter verschaffing 30 van het overeenkomstige zwavelzuuradditiezout. Op soortgelijke wijze wordt elk van de andere zouten bereid.

Voorbeeld XXXVI

Een droog farmaceutisch preparaat wordt verkregen door menging van de volgende materialen met elkaar in de 35 aangegeven gewichtshoeveelheden.

800 34 96 36 3-amino-5-/2-(Ν,Ν-dimethylamino)-4- pyridyl/-l,2,4-triazool-dihydro- chloride 50 natriumcitraat 25 5 alginezuur 10 polyvinylpyrrolidon 10 magnesiumstearaat 5

Nadat het droge mengsel grondig is gemengd worden tabletten geperst uit het resulterende mengsel, waarbij elke 10 tablet van zodanige grootte is dat zij 200 mg van het actieve" bestanddeel bevat. Andere tabletten worden op soortgelijke wijze vervaardigd welke 25, 50 en 100 mg van het actieve bestanddeel bevatten, door gebruik te maken van de juiste hoeveelheid 3-amino-5-(4-pyridyl)-l,2,4-triazool-zout in elk van de ge-15 vallen.

Voorbeeld XXXVII

Een droog vast farmaceutisch preparaat wordt bereid door combineren van de volgende materialen met elkaar in de aangegeven gewichtshoeveelheden: 20 3-amino-5-/2- (N,N-dimethylamino) -4- pyridy1/-1,2,4-triazool-dihydro- chloride 50 calciumcarbonaat 20 polyethyleenglycol, gemiddeld molecuul-25 gewicht 4000 30

Het gedroogde mengsel dat zo wordt verkregen wordt daarna goed geroerd ter verkrijging van een poedervormig produkt dat volledig gelijkmatig is in alle opzichten. Zachte elastische en hard-gevulde gelatine capsules die dit farmaceu-30 tische preparaat bevatten worden vervolgens vervaardigd, onder toepassing van een voldoende hoeveelheid materiaal om in elk van de gevallen een capsule met 250 mg actief bestanddeel te verschaffen.

Voorbeeld XXXVIII

35 De eindprodukten van de voorbeelden I-V, VII-XII, XIV-XVI, XVIII-XX, XXII-XXIII, XXV-XXVI, XXVIII en XXXII werden getest op anti-maagzweer-activiteit in termen van hun vermogen de maagzuurafscheiding te inhibiteren bij groepen van 8003496 37 vastende Heidenhain-pouch-dogs. Er werd geen verdoving toegepast bij deze studie. De dieren werd eerst pentagastrine toegediend teneinde de zuurafscheiding in de magen te stimuleren door continue infusie van het genoemde geneesmiddel in een opper-5 vlakkige poot-ader in doseringen waarvan eerder was vastgesteld dat ze een nagenoeg maximale zuurafgifte uit de maagzak stimuleren. Maagsap wordt vervolgens verzameld met tussentijden van 30 minuten na het begin van een pentagastrine-infusie en gemeten met een nauwkeurigheid van 0,1 ml. Tien verzamelingen 10 vonden plaats bij elke hond tijdens een experiment. De zuur- concentratie werd daarna bepaald door 1,0 ml maagsap te titre-ren tot een pH van 7,4 met 0,1 N waterig natriumhydroxyde, onder toepassing van een Autoburette en een glaselektrode-pH-meter (Radiometer) voor deze doeleinden. Aan de dieren werden 15 vervolgens de testverbindingen toegediend in hoeveelheden van respectievelijk 10, 5,0 en 1,0 mg per kg, of de controle-drager alleen, via de intraveneuze weg van toediening, op 90 minuten na het begin van de pentagastrine-infusie. Maagsap-afscheiding tegengaande effecten werden daarna berekend door 20 vergelijking van de laagste zuurafgifte na de geneesmiddeltoe-diening met de gemiddelde zuurafgifte onmiddellijk voorafgaand daaraan en de aldus verkregen resultaten worden weergegeven in de onderstaande tabel, waarbij de waarden, gegeven voor elke afzonderlijke verbinding zijn uitgedrukt in het percentage 25 inhibitie op het aangegeven doseringsniveau.

8003496 38

Zuur-Antisecretore werking (% inhibitie) Pyridylaminotriazool I,0 mg/kg 5,0 mg/kg 10 mg/kg

Produkt van Vb. I 33 64 " II 0 — 40 5 " III — — 14 " IV 31 " V 23 — 34 " VII 11 " VIII 48 80 96 10 " IX 53 " X — 68 " XI 38 " XII 18 -- 50 " XIV 21 -- 72 15 " XV 21 — 62 " XVI — 33 " XVIII 30 86 94 " XIX 50 " XX 51 89 93 20 " XXII 29 " XXIII 35 52 " XXV 10 " XXVI 32 64 " XXVIII — 49 25 " XXXII — — 25 8003496

Claims (11)

10 N-mono(Y-hydroxypropyl)amino, N-mono/β-(lager alkoxy)ethyl/- amino, N-mono/γ-(lager alkoxy)propyl/-amino, N-mono(2,2,2-tri-fluorethyl)amino, N-monobenzylamino, N-methyl-N-benzylamino, N-ethyl-N-benzylamino, N-mono(3-fenylethyl)amino, N-mono(β-fenyl-β-hydroxyethyl)amino of ring-gesubstitueerd N-monobenzylamino, 15 ring-gesubstitueerd N-methyl-N-benzylamino, ring-gesubstitueerd N-ethyl-N-benzylamino of ring-gesubstitueerd N-mono(β-fenylethyl)-amino, waarbij elke ring ten hoogste twee substituenten heeft aan de fenylgroep, waarbij elk van deze ring-substituenten identiek is gekozen uit fluor, chloor, broom, trifluormethyl, 20 lager alkyl, lager alkoxy, hydroxy, carbamoyl, sulfamoyl, lager alkylsulfonyl en methaansulfonamido, of afzonderlijk is gekozen uit chloor, methyl, methoxy, hydroxy en trifluormethyl; is; en waterstof, lager alkyl, amino of lager N-monoalkylamino is.

2. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, 25 dat Rj amino is, R2 N-monoalkylamino met 1-12 koolstofatomen is en R^ waterstof is.

3. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat Rj amino is, R2 Ν,Ν-dialkylamino, waarin tenminste ëën van de alkylgroepen methyl of ethyl is en de andere alkyl met 1 tot 12 30 koolstofatomen is, is, en R^ waterstof is.

4. Verbinding volgens conclusie 2, met het kenmerk, dat R2 N-monomethylamino is,

5. Verbinding volgens conclusie 2, met het kenmerk, dat R2 N-monoethylamino is.

6. Verbinding volgens conclusie 3, met het kenmerk, dat R2 Ν,Ν-dimethylamino is. 8003496 40.

7. Verbinding volgens conclusie 3, met het kenmerk, dat R2 N-ethyl-N-methylamino is.

8. Verbinding volgens conclusie 3, met het kenmerk, dat R2 N,N-diethylamino is.

9. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de verbinding 3-amino-5-/2-(N-monomethylamino)-4-pyridyl)- 1.2.4- triazool; 3-amino-5-/2-(N-monoëthylamino)-4-pyridyl/- 1.2.4- triazool; of 3-amino-5-/2-(N,N-dimethylamino)-4-pyridyl)- 1.2.4- triazool is.

10. Farmaceutisch preparaat, geschikt voor orale toediening, met het kenmerk, dat het een farmaceutisch aanvaardbare drager en een therapeutisch effectieve hoeveelheid van een anti-maagzweermiddel bevat, waarbij dit middel een verbinding volgens een der voorgaande conclusies is.

11. Werkwijzen en voortbrengselen in hoofdzaak als beschreven in de beschrijving en/of de voorbeelden. / .y 800 34 96 n-cC , RJ n \ 1 H conhnhc/=nh)Ri Λ <Λ,Χχ, 2 CONHNH C(= NH)RT A Re—-% 3 800 34 96 PFIZER INC·, te New York. New York. Ver.St.v.Amerika