NL8002860A

NL8002860A - ORGANOMETAL COMPLEX WITH GAMMA RADIATION EMITTING ISOTOPE.

Info

Publication number: NL8002860A
Application number: NL8002860A
Authority: NL
Original assignee: Univ Sherbrooke
Priority date: 1979-05-18
Filing date: 1980-05-16
Publication date: 1980-11-20
Also published as: IT8083377A0; DE3018472A1; GB2051817A; FR2456742A1

Description

Λ h t ] VO k95 - Titel: Org anometaalcamplex met een gammastraling emitterende isotoop.Λ h t] VO k95 - Title: Org anometal camplex with a gamma-ray emitting isotope.

De uitvinding betreft een nieuw organcmetaalcomplex met een kort levende gamn&emitterende metaalisotoop. Meer in bet bijzonder betreft de uitvinding de productie van nieuwe complexen van ftalocyanine-tetrasulfonzuur met kort levende, gammastraling emitterende metaal-5 isotopen. Deze nieuwe produkten zijn bruikbaar voor injectie in de bloedstroom van een zoogdier, indien opgelost of gedispergeerd in een biologisch steriel waterig medium, dat liefst isotonisch is met de lichaamsvloeistoffen van het zoogdier, een en ander met het oogmerk maligne groei via een gebruikelijke scanningprocedure te ontdekken.The invention relates to a new organ metal complex with a short-lived gamma-emitting metal isotope. More particularly, the invention relates to the production of new phthalocyanine tetrasulfonic acid complexes with short-lived gamma-emitting metal isotopes. These new products are useful for injection into the bloodstream of a mammal when dissolved or dispersed in a biologically sterile aqueous medium, which is most preferably isotonic with the mammalian body fluids, with the aim of detecting malignant growth via a conventional scanning procedure .

10 De radiochemie wordt uitgebreid toegepast in de therapie en de biologie. Het is reeds lang bekend, dat de invoering in organismen van verbindingen met een radioisotoop meer inzicht kunnen verschaffen in de processen van het organisme. Deze verbindingen, gewoon lijk aangeduid als radiofarmaca, zijn bijzonder bruikbaar bij een diagnose 15 waarbij speciaal de structuur of de functie van diverse inwendige organen te pas kernen, zoals de hersenen, de nier of de lever en wel met behulp van stralingsgevoelige opvangers. Voor diagnostisch werk geeft men de voorkeur aan isotopen met een korte halveringstijd en een emissiespectrum, dat rijk is aan gammastraling (in plaats van o -20 of jö-straling).10 Radiochemistry is widely used in therapy and biology. It has long been known that the introduction into organisms of compounds with a radioisotope can provide more insight into the processes of the organism. These compounds, commonly referred to as radiopharmaceuticals, are particularly useful in a diagnosis involving especially the structure or function of various internal organs, such as the brain, kidney or liver, using radiation-sensitive receptors. For diagnostic work, isotopes with a short half-life and an emission spectrum, which is rich in gamma radiation (instead of o-20 or j-radiation) are preferred.

De metastabiele isotoop Tc-99m heeft een halveringstijd van 6 uren en een emissiespectrum voor 99% gamma bij lh-0 KeV, dat bijzonder geschikt is voor diagnosetechnieken in de kern-therapie. Zo heeft Tc-99m een hoge specifieke activiteit van 5j28 x 10 millicurie per 25 gram (mc/g) en een bijzonder geschikte snelle ontledingstijd; terwijl het dochterprodukt, Tc-99 een specifieke activiteit heeft, die ongeveer negen orden van grootte lager ligt en een halveringstijd die grofweg negen orden van grootte hoger ligt. Voor de te onderzoeken organismen zal een langzame ontleding van het betrekkelijk stabiele Tc-99 niet 30 een lage specifieke activiteit tot zijn afbraakprodukt ruthenium gewoonlijk geen gevaarlijke straling opleveren, ongeacht het biologisch medium of de route waarlangs het Tc-99m wordt geëlimineerd. Voor de onderzoeker of de dokter kan het emissiespectrum van Tc-99m zeer nauwkeurige radiodiagnostische metingen en berekeningen mogelijk maken.The metastable isotope Tc-99m has a half-life of 6 hours and an emission spectrum for 99% gamma at lh-0 KeV, which is particularly suitable for diagnostic techniques in nuclear therapy. Thus, Tc-99m has a high specific activity of 5j28 x 10 millicurie per 25 grams (mc / g) and a particularly suitable fast decomposition time; while the daughter product, Tc-99 has a specific activity about nine orders of magnitude lower and a half-life roughly nine orders of magnitude higher. For the organisms to be investigated, slow decomposition of the relatively stable Tc-99 will not produce a low specific activity to its degradation ruthenium, not dangerous radiation irrespective of the biological medium or the route by which the Tc-99m is eliminated. For the investigator or the physician, the emission spectrum of Tc-99m can enable highly accurate radiodiagnostic measurements and calculations.

35 Onlangs is Tc-99m voor ziekenhuizen beschikbaar gekemen via de toepassing 800 2 8 60 -2- van een selectieve eluering uit een z.g. molybdeen-99 (Mo-99) generator.Recently, Tc-99m has become available to hospitals through the application of 800 2 8 60 -2- of a selective elution from a so-called molybdenum-99 (Mo-99) generator.

De isotoop Mo-99 produceert Tc-99m. als een radioactief ontledingsprodukt.The Mo-99 isotope produces Tc-99m. as a radioactive decomposition product.

Hoewel Tc-99m ideale radiofarmaca lijken voor diagnostische doeleinden, vereisen bepaalde organen toch een goede selectie van de Tc-verbindingen 5 of complexen, die men speeifiek dient te gebruiken. Zo zijn b.v. verbindingen met een lage ED 50 gewenst voor humaan of veterinair gebruik, zelfs indien kleine hoeveelheden voor diagnostisch werk worden gebruikt. Ook verbindingenmet een ontoereikende stabiliteit in vivo vormen slechte diagnostische hulpmiddelen, aangezien radioactieve ionen of andere che-10 mische lichamen met een ontoereikende of ongewenste orgaanspecificiteit vrij kunnen kamen. Stabiele verbindingen, die over het gehele organisme worden verdeeld zijn ondanks hun stabiliteit minder geschikt, dit geldt ook voor verbindingen, die de gewenste bestemming in het organisme niet bereiken; dit laatste geldt vooral voor lever- en galblaasonder-15 zoek. Voor het onderzoeken van orgaanfuncties moeten verbindingen, die specifiek zijn voor een orgaan, maar daardoor niet worden uitgescheiden (of indien uitgescheiden, gemakkelijk worden herabsorbeerd) eveneens als slechte kandidaten worden beschouwd.Although Tc-99m seem ideal radiopharmaceuticals for diagnostic purposes, certain organs still require a good selection of the Tc compounds or complexes, which should be used specifically. For example, e.g. low ED 50 compounds desirable for human or veterinary use, even if small amounts are used for diagnostic work. Also compounds with inadequate stability in vivo are poor diagnostic tools, since radioactive ions or other chemical bodies with insufficient or undesired organ specificity can freely come out. Stable compounds, which are distributed over the entire organism, are less suitable despite their stability, this also applies to compounds, which do not reach the desired destination in the organism; The latter is especially true for liver and gallbladder research. For the investigation of organ functions, compounds which are specific to an organ, but are therefore not excreted (or if excreted, readily reabsorbed) should also be considered as bad candidates.

Een aantal Tc-verbindingen of complexen is ontwikkeld voor spe-20 cifieke onderzoekingen. Er is b.v. een lever-specifiek 99m-Tc 6,8-dihydrothiozuurcomplex ontwikkeld, dat een duidelijk beeld geeft van de leverfunctie door het meten van de radioactiviteit afkomstig van de lever, galblaas, darmen en feces van het organisme of de betreffende patiënt (Amerikaans octrooischrift 3.873.680). Technetium-99m tezamen 25 met calciumorganochelaten bij aanwezigheid van ferrosulfaat is voorts bijzonder bruikbaar gebleken voor het zichtbaar maken van de nier, de nierfunctie en vaatstudies (Amerikaans octrooischrift 3.^16.361).A number of Tc compounds or complexes have been developed for specific studies. There is e.g. developed a liver specific 99m-Tc 6,8-dihydrothioic acid complex, which provides a clear picture of liver function by measuring the radioactivity from the liver, gallbladder, intestines and faeces of the organism or subject (U.S. Patent 3,873). 680). Furthermore, technetium-99m together with calcium organochelates in the presence of ferrous sulfate has been found to be particularly useful for visualizing kidney, renal function and vascular studies (US Patent 3,116,361).

Een preparaat van ethaan-l-hydroxy-1,1-difosforaat in een zure oplossing van stannochloride en gemengd met 99m TcO^ is voorgesteld voor een 30 radiografisch onderzoek van skeletbotten (Amerikaans octrooischrift 3.735.001). Hersenen en nieren kunnen worden onderzocht met een ijzer-complex, gemerkt met 99m-Tc (Amerikaans octrooischrift 3.787.565).A preparation of ethane-1-hydroxy-1,1-diphosphorate in an acid solution of stannous chloride and mixed with 99m TcO4 has been proposed for a radiographic examination of skeletal bones (US Pat. No. 3,735,001). Brains and kidneys can be tested with an iron complex labeled with 99m-Tc (U.S. Pat. No. 3,787,565).

Tevens is bekend, dat macro-aggregaten van serumalbumine gemerkt met 99mTc bijzonder bruikbaar zijn bij lcugfunctieanderzcek (Amerikaanse 35 octrooischriften 3.803.299 en 3.862.299)· Andere derivaten van 99m- 8002860 * Λ -3-It is also known that macroalbumin aggregates of serum albumin labeled with 99mTc are particularly useful in lcugfunctionanderzcek (U.S. Pat. Nos. 3,803,299 and 3,862,299) · Other derivatives of 99m- 8002860 * Λ -3-

Technetium zijn voorgesteld voor diverse andere toepassingen en vel in de Amerikaanse octrooischriften 3.812.26k, 3.852.H13, 3.863.00k en 3.683.066.Technetium has been proposed for various other applications and sheet in U.S. Pat. Nos. 3,812.26k, 3,852.H13, 3,863.00k and 3,683,066.

Voorts is veergegeven in de J. Mud. Med._5, k62 (l96k) dat Co-57 gemerkte derivaten van tetrafenylporfynesulfaat "bruikbaar kunnen zijn bij het aantonen van hersentumoren maar niet van andere tumoren. Ca. kQ% van het Co-57 "werd gedissocieerd ^hetgeen gedeeltelijk het falen van deze radioisotoop ter localisering in tumoren verklaarde.Furthermore, spring is given in the J. Mud. Med., 5, k62 (196k) that Co-57 labeled derivatives of tetraphenylporphynesulfate "may be useful in detecting brain tumors but not other tumors. Approx. KQ% of Co-57" has been dissociated partially causing failure of these radioisotope for localization in tumors.

Ondanks deze ontwikkelingen bestaat er behoefte aan radiofarmaca die snel en selectief in specifieke veefsels accumuleren. Het is derhalve bijzonder gewenst te kunnen beschikken over radiofarmaca die een duidelijke affiniteit vertonen voor maligne veefsels of tumorcellen, waardoor een vroege diagnose van tumoren, en tumormetastasen mogelijk wordt.Despite these developments, there is a need for radiopharmaceuticals that quickly and selectively accumulate in specific fibers. It is therefore particularly desirable to have radiopharmaceuticals that show a clear affinity for malignant fibers or tumor cells, allowing for early diagnosis of tumors and tumor metastases.

Het is tevens bekend, dat ftalocyaninen en speciaal de tetra-sulfonzuurderivaten daarvan een duidelijke neiging hebben om zich te gedragen als de natuurlijke porfyrinen. Ftalocyanine is een heterocyclisch ringsysteem bestaande uit vier benzisoindoolkemen gebonden via stikstofbruggen. Van hun is bekend, dat de stabiele chelaten vormen 20 met metaalionen en bepaalde metaaloxiden. Metaalftalocyaninen kunnen worden bereid door uitwisseling van het gewenste metaalion met het centrale ion van lithiumftalocyanine. Een klasse van metaalftalocyaninen, die is bereid zijn de actinide- en lanthanide-zeldzame aardftalo-cyaninen en meer in het bijzonder uranyl gesulfoneerdf talocyanine, 2^ dat is beschreven in Amerikaans octrooischrift 3.027.391 als een bruikbaar middel bij de behandeling van een aantoonbare tumor door een directe injectie van dit ur any If talocyanine in de tumor van het dier.It is also known that phthalocyanines and especially their tetra-sulfonic acid derivatives have a clear tendency to behave like the natural porphyrins. Phthalocyanine is a heterocyclic ring system consisting of four benzisoindole nuclei bonded via nitrogen bonds. They are known to form stable chelates with metal ions and certain metal oxides. Metal phthalocyanines can be prepared by exchanging the desired metal ion with the central ion of lithium phthalocyanine. A class of metal phthalocyanines that have been prepared are the actinide and lanthanide rare earth phthalocyanines, and more particularly uranyl sulfonated talocyanine, 2, which is described in U.S. Patent 3,027,391 as a useful agent in the treatment of a detectable tumor by a direct injection of this ur any If talocyanine into the tumor of the animal.

Men zal begrijpen, dat deze gesulfoneerde zwaalmetaalftalocya-ninen alleen bruikbaar zijn wanneer een tumor reeds onderkend is via 2Q een andere weg en dat ze alleen bruikbaar zijn voor een therapeutische toepassing wanneer het uitgangsmetaal een radioactief nuclide is waarbij de straal de tumor kan vernietigen, of indien het metaal een splijtbaar of een door neutronen activeerbaar nuclide is. Ongelukkigerwijze levert deze methode geen mogelijkheid op de tumor te plaatsen, maar alleen een 25 mogelijkheid hem radioactief te behandelen, zodat met deze stof geen 8002860 -u- tumor kan -worden aangetoond, noch voor "behandeling anderszins in aanmerking kamt.It will be appreciated that these sulfonated metal-metal phthalocyinines are useful only when a tumor has already been recognized by 2Q another way, and that they are useful only for a therapeutic application when the starting metal is a radioactive nuclide where the beam can destroy the tumor, or if the metal is a fissile or neutron-activatable nuclide. Unfortunately, this method does not provide a possibility to place on the tumor, but only a possibility to treat it radioactively, so that no 8002860-u tumor can be detected with this substance, nor qualifies for treatment in any other way.

Aangezien het "bekend is, dat het "belangrijkste probleem "bij maligne groei een vroegs ontdekking is, zodat een goede behandeling, zo spoedig 5 mogelijk kan worden aangevangen, is het bijzonder gewenst te kunnen beschikken over een veilige radioactieve methode voor het ontdekken van maligne groei.Since it is "known that the" major problem "in malignant growth is an early discovery, so that proper treatment can begin as soon as possible, it is particularly desirable to have a safe radioactive method for malignant detection. growth.

Volgens de uitvinding, is nu gevonden, dat maligne tumoren snel kunnen worden ontdekt door toepassing van nieuwe complexen van kort 10 levende gammastraling emitterende metaalisotopen en ftalocyanine- tetrasulfonzuur. Tevens is gevonden, dat deze nieuwe complexen vanwege hun affiniteit voor maligne weefsels bijzonder bruikbaar zijn voor het aantonen van de aanwezigheid,de plaats en de grootte van maligne weefsels via een gebruikelijke radioactieve methode.According to the invention, it has now been found that malignant tumors can be quickly discovered using new complexes of short-lived gamma-radiation emitting metal isotopes and phthalocyanine tetrasulfonic acid. It has also been found that these new complexes, because of their affinity for malignant tissues, are particularly useful in detecting the presence, location and size of malignant tissues by a conventional radioactive method.

15 De kortlevende gammastraling emitterende metaalisotopen die vol gens de uitvinding met ftalocyaninetetrasulfonzuur worden gecombineerd tot nieuwe radiofamaceutische complexen zijn technetium-99m, gallium-675 gallium-68, kwik-197, koper-6^, chroom-51, kobalt-57j indium-111 en zink-62. Voorkeurs complexen voor beeldvorming binnen 12 uren zijn het 20 technetium-99m ftalocyaninetetrasulfonzuur en gallium-68 ftalocyaninetetrasulfonzuur, omdat technetium-99m en gallium-68 gemakkelijk uit een generator worden verkregen en omdat hun halveringstijden resp. zes uren en 68 minuten bedragen. Hoewel technetium-99 de belangrijkste isotoop is die tegenwoordig in de clinische practijk in gebruik is wordt 25 gallium-68 langzamerhand nagenoeg even belangrijk vanwege de recente ontwikkelingen in de positron tetnografische instrumenten. Voor toepassing die beeldvorming met lagere tijdsintervallen vereisen en wel tot 120 uur na de injectie zijn complexen van metaalisotopen met een halveringstijd van ca. 3 dagen gunstiger, zoals gallium-67 ftalocyanine-30 tetrasulfonzuur en indium-111 ftalocyaninetetrasulfonzuur.The short-lived gamma radiation emitting metal isotopes that are combined with phthalocyanine trasulfonic acid according to the invention to form new radiopharmaceutical complexes are technetium-99m, gallium-675 gallium-68, mercury-197, copper-6 ^, chromium-51, cobalt-57j indium-111 and zinc-62. Preferred complexes for imaging within 12 hours are the technetium-99m phthalocyanine tetrasulfonic acid and gallium-68 phthalocyanine tetrasulfonic acid, because technetium-99m and gallium-68 are easily obtained from a generator and because their half-lives are respectively. six hours and 68 minutes. While technetium-99 is the major isotope in use in clinical practice today, 25 gallium-68 is slowly becoming more and more important due to recent advances in positron tetnographic instruments. For applications requiring imaging at lower time intervals up to 120 hours after the injection, metal isotope complexes with a half-life of about 3 days are more favorable, such as gallium-67 phthalocyanine-30 tetrasulfonic acid and indium-111 phthalocyanine tetrasulfonic acid.

De onderhavige verbindingen kunnen ofwel door een condensatie-procedure volgens Inor. Chem. k69 (1965) of via een directe merk-methode worden bereid.The present compounds can be either by Inor condensation procedure. Chem. k69 (1965) or prepared by a direct brand method.

De condensatiemethode omvat een condensatie van mononatrium-35 sulfoftaalzuur met de kortlevende gamma-emitterende metaalisotoop in 800 2 8 60 - * -5- nitrobenzeen van 200°C of meer en wel in een inerte gasatmosfeer "bij aanwezigheid van een reduceermiddel als hydroxylamine, ureum en ammonium-chloride en hij aanwezigheid van een katalysator als ammoniummolybdaat.The condensation method involves a condensation of monosodium 35 sulfophthalic acid with the short-lived gamma-emitting metal isotope in 800 2 8 60 - * -5-nitrobenzene of 200 ° C or more, in an inert gas atmosphere "in the presence of a reducing agent such as hydroxylamine, urea and ammonium chloride and the presence of a catalyst such as ammonium molybdate.

Dit reactiemengsel wordt op ca. 90°C verwarmd en geconcentreerd in een 5 stikstofstroom. Condensatie treedt op hij verhitting van dit residu op 235°C of hoger afhankelijk van de gekozen metaalisotoop en wel gedurende ca. een half uur.This reaction mixture is heated to about 90 ° C and concentrated in a nitrogen stream. Condensation occurs when this residue is heated to 235 ° C or higher depending on the selected metal isotope for about half an hour.

niettemin heeft deze methode duidelijke nadelen, omdat een mengsel van gemerkte isotopen van tetrasulfoftalocyanine complexen worden verkre-10 gen, welke moeten worden gezuiverd cm oncmgezet uitgangsmateriaal en vrije metaalisotoop te elimineren, zodat een zekere hoeveelheid tijd teloorgaat, hetgeen een duidelijk nadeel is wanneer een metaalisotoop met een zeer korte halveringstijd van ca. 3 uren wordt gebruikt. Hierdoor -ontstaat een race tegen de tijd cm de gewenste procedure te verkrijgen 15 voor een in^ctie in de te onderzoeken patiënt, niettemin is deze methode de enig beschikbare, bij gebruik van een metaalisotoop als technetium, die niet bijzonder geschikt is voor toepassing bij de directe merkmetho-de vanwege zijn chemische eigenschappen.nevertheless, this method has obvious drawbacks, since a mixture of labeled isotopes of tetrasulfophthalocyanine complexes are obtained, which must be purified to eliminate unreacted starting material and free metal isotope, so that a certain amount of time is lost, which is a clear disadvantage when a metal isotope with a very short half-life of approx. 3 hours. This creates a race against time to obtain the desired procedure for an instruction in the patient to be examined, nevertheless this method is the only one available, when using a metal isotope as technetium, which is not particularly suitable for use in the direct brand method because of its chemical properties.

Ook kunnen de gewenste produkten worden verkregen door een directe 20 merkmethode. Bij deze methode wordt het tetrasulfoftalocyanine verkregen dooreen sulfonering van ftalocyanine dat wordt afgescheiden om hei;hoofdbestanddeel te winnen, dat vervolgens direct met de gewenste metaalisotoop wordt gemerkt volgens op zichzelf bekende methoden. Deze methode verdient de voorkeur bij andere metaalisotopen dan technetium. Bij de 25 directe merkmethode wordt de metaalisotoop toegevoegd aan een waterige oplossing van tetrasulfonftalocyanine en 10-30 min op 100°C verhit, nadat de pH cp neutraal of licht alkalisch is gebracht.Also, the desired products can be obtained by a direct marking method. In this method, the tetrasulfophthalocyanine is obtained by a sulfonation of phthalocyanine which is separated to recover the major constituent, which is then directly labeled with the desired metal isotope by methods known per se. This method is preferred for metal isotopes other than technetium. In the direct labeling method, the metal isotope is added to an aqueous solution of tetrasulfonphthalocyanine and heated to 100 ° C for 10-30 min after the pH is adjusted neutral or slightly alkaline.

De nieuwe ftalocyaninetetrasulfonzuurcomplexen van kortlevende gammastraling emitterende metaalisotopen zijn bijzonder bruikbaar bij 30 injectie in de bloedstroom voor het diagnostiseren van de aanwezigheid van tumoren in een dierlichaam.The new phthalocyanine tetrasulfonic acid complexes of short-lived gamma-emitting metal isotopes are particularly useful when injected into the bloodstream to diagnose the presence of tumors in an animal body.

Ftalocyaninen en hun gesulfoneerde analoga zijn niet giftig en zelfs hun complexen met giftige metalen resulteren in niet giftige metaalccmplexen. Omdat bovendien de hoeveelheden kortlevende metaal-35 isotopen nodig voor deze doeleinden in dieren te verwaarlozen zijn, 800 2 8 60 -6- zi jn de corresponderende ftalocyaninetetrasulf on zuur complexen volkomen onschuldig gebleken wat betreft farmacologische bij-effecten bij toediening voor detectiedoeleinden in levende organismen.Phthalocyanines and their sulfonated analogs are non-toxic and even their toxic metal complexes result in non-toxic metal complexes. In addition, because the amounts of short-lived metal isotopes needed for these purposes in animals are negligible, the corresponding phthalocyanine trasulfonic acid complexes have been found to be completely harmless in pharmacological side effects when administered for detection purposes in living organisms. .

De uitvinding wordt nader toegelicht door de volgende voorbeelden.The invention is further illustrated by the following examples.

5 Voorbeeld I:5 Example I:

Technetium-99m ftalocyaninetetrasulfonzuur (Tc-99m-PcTs).Technetium-99m Phthalocyanine Tetrasulfonic Acid (Tc-99m-PcTs).

Aan een vers geëlueerd pertechnetaat ("“TcO^ )—oplossing (2 cm^ met daarin 50-150 juCi 99mTc, uit een 99 Mo/99mTc-generator) werd mononatrium- sulfoftaalzuur (8,0¼ mg, 3x1ο"5 mol), 6 mg ureum (10- mol) en 0,1 cnr ; ‘ 10 van een oplossing met daarin 6xl0-^ M ammoniummolybdaat (NH^gMo^Ogi^^O) toegevoegd alsmede 10”^ M ammoniumchloride. Na een toevoeging van 8,3¼ mg hydroxylamide (12x10"^ mol) dat het pertechnetaat reduceert,Monosodium sulfophthalic acid (8.0¼ mg, 3 × 10 5 mol), was added to a freshly eluted pertechnetate ("TcO 2) solution (2 cm 2 containing 50-150 µCi 99mTc, from a 99 Mo / 99mTc generator), 6 mg urea (10-mol) and 0.1 cm-2; 10 of a solution containing 6x10- ^ M ammonium molybdate (NH ^ gMo ^ Ogi ^ ^ O) and 10 ”^ M ammonium chloride. After adding 8.3¼ mg of hydroxylamide (12x10 "^ mol) which reduces the pertechnetate,

waarschijnlijk tot technetiumoxide (99mTc02) werd het mengsel op 99°Cprobably to technetium oxide (99mTcO2), the mixture was at 99 ° C

verwarmd en geconcentreerd in een stikstofstrocm. Het residu werd binnen 15 25 min op 235°C verhit, waardoor condensatie optrad. Nadat het mengsel . . 3 was afgekoeld op kamertemperatuur werd het residu opgenomen in 1 cmheated and concentrated in a nitrogen stream. The residue was heated to 235 ° C within 15 min, causing condensation to occur. After the mixture. . 3 was cooled to room temperature, the residue was taken up in 1 cm

OO

water en aangebracht op een zwakke anionenuitwisselende kolom (l cnrwater and applied to a weak anion exchange column (1 cnr

Amberlite IR^5-(0H), aangebracht in een plastic injectiespuit, kolcm A).Amberlite IR ^ 5- (0H), placed in a plastic syringe, column A).

33

Deze kolom werd uitgewassen met 9 cm gedestilleerd water en geëlueerd 3 20 in omgekeerde richting met 0,1 N natriumhydroxide en wel 10 cm .This column was washed with 9 cm distilled water and eluted reverse with 0.1 N sodium hydroxide 10 cm.

Het eluaat werd direct geleid over een kationenuitwisselende kolomThe eluate was passed directly through a cation exchange column

OO

(0,5 cm Amberlite 12-120 (H), kolom B), waarbij 5 fracties van elk 3 2 cm werden verkregen. Het gezuiverde Tc-99mPcTs (10#'s opbrengst berekend op de radioactiviteit van het oorspronkelijke pertechnetaat-25 monster), werd opgevangen in de derde fractie (fractie III, kolom B).(0.5 cm Amberlite 12-120 (H), column B), yielding 5 fractions of 3.2 cm each. The purified Tc-99mPcTs (10 # yield based on the radioactivity of the original pertechnetate-25 sample) was collected in the third fraction (fraction III, column B).

OO

Nadat de pH met 0,1 N zoutzuur (ca. 0,1 cm ) op 7,0 was gebracht, was het preparaat klaar voor injectie in laboratoriumdieren.After the pH was adjusted to 7.0 with 0.1 N hydrochloric acid (about 0.1 cm), the preparation was ready for injection into laboratory animals.

.•Gaat men op dezelfde wijze tewerk maar uitgaande van het nitraat of het chloridezout van gallium-67, koper-6^ chroam-51, kobalt-30 57, indium-111 of zink-62, dan verkrijgt men de overeenkomstige gallium- 67, koper-6^ chroam-51, kobalt-57, indium-111 en zink-62 ftalocyaninetetrasulf on zuurccmplexen .If one proceeds in the same way, but starting from the nitrate or the chloride salt of gallium-67, copper-6-chromam-51, cobalt-30 57, indium-111 or zinc-62, the corresponding gallium-67 is obtained. copper-chromium-51, cobalt-57, indium-111 and zinc-62 phthalocyanine tetrasulfon acid complexes.

Voorbeeld II:Example II:

Om de chemische aard van het Tc-99m bestanddeel van de gezuiverde 35 Tc-99m-PcTs-fraetie (voorbeeld I, fractie III, uit kolom B) te bepalen, 800 2 8 60 Λ' -τ- werd een condensatieexperiment met Tc-99, een lang -levend afbraakpro-dokt van Tc-99m uitgevoerd. Technetium-99 metaal (2*9,5 mg, 0,5x10 mol) werd daartoe opgelost in enkele druppels geconcentreerd salpeterzuur, waarna een kleine hoeveelheid ureum werd toegevoegd cm het gevormde . 5 nitriet te ontleden. Ha de toevoeging van een kleine hoeveelheid hydrox-ylamine werd het mengsel in vacuum gedroogd tot een lichtgroen vast materiaal. Dit materiaal werd opgencmen. in een waterige oplossing vanTo determine the chemical nature of the Tc-99m component of the purified 35 Tc-99m-PcTs fraction (Example I, fraction III, from column B), 800 2 8 60 Λ '-τ-, a condensation experiment with Tc- 99, a long-life degradation project of Tc-99m has been performed. Technetium-99 metal (2 * 9.5 mg, 0.5x10 mol) was dissolved for this purpose in a few drops of concentrated nitric acid, after which a small amount of urea was added to the formed. Decompose nitrite. After the addition of a small amount of hydroxyl ylamine, the mixture was dried in vacuo to a light green solid. This material was recorded. in an aqueous solution of

OO

hydroxylamine (2 cm )met daarin lj-32 mg 3-sulfoftaalzuur, 600 mg ureum, 7,2* mg ammoniummolyhdaat en 53 mg ammoniumchloride. Dit reactiemengsel 10 werd overdekt met nitrobenzeen (kpt. 210,9°C) en op een oliebad onder een stikstof atmosfeer verhit. Hadat het water was verdampt werd de hydroxylamine ontleed, zoals blijkt uit een plotseling gasontwikkeling.hydroxylamine (2 cm) containing 1-32 mg of 3-sulfophthalic acid, 600 mg of urea, 7.2 * mg of ammonium molydate and 53 mg of ammonium chloride. This reaction mixture was covered with nitrobenzene (bp 210.9 ° C) and heated on an oil bath under a nitrogen atmosphere. After the water had evaporated, the hydroxylamine was decomposed, as shown by a sudden gas evolution.

De kleur van het reactiemengsel wisselde daarbij van lichtviolet tot zwart. Ha toevoeging van nog 5 cm^ nitrobenzeen werd het mengsel 20 min 15 gekookt. Het zwarte neerslag werd opgevangen, gesuspendeerd in absolute methanol, gefiltreerd, met absolute methanol gewassen en gedroogd tot 235 mg van een zwart poeder. De specifieke activiteit (i>-ontleding van de Tc-99) duidde op de aanwezigheid van 15,3# Tc oftewel een 5,6#'s crermaat van Tc berekend op een Tc :PcTs-verhouding van 1:1. Het preparaat 20 was dus of verontreinigd met andere Tc-zouten, of het complex bevatte meer dan 1 mol Tc per mol PcTs.The color of the reaction mixture varied from light violet to black. After adding an additional 5 cm. Of nitrobenzene, the mixture was boiled for 20 min. The black precipitate was collected, suspended in absolute methanol, filtered, washed with absolute methanol and dried to 235 mg of a black powder. The specific activity (i> decomposition of the Tc-99) indicated the presence of 15.3 # Tc or a 5.6 # crermate of Tc based on a Tc: PcTs ratio of 1: 1. Thus, the formulation 20 was either contaminated with other Tc salts, or the complex contained more than 1 mole Tc per mole PcTs.

Cochromatografie van Tc-99-PcTs (l mg) en een Tc-99m-FcTs-preparaat in een ionenuitwisselingssysteem (voorbeeld i) gevolgd door UV-analyse van het gezuiverde Tc-99m-PcTs (fractie III uit 25 kolom B) werd uitgevoerd. Het UV-spectrum vertoonde karakteristieke absorptiemaxima bij 685 en 595 nM tezamen met een sterke absorptie beneden 300 nM en easchouder bij 305 nM, hetgeen de sulfoftalocyanine-- aard van het geëlueerde materiaal bevestigt.Cochromatography of Tc-99-PcTs (1mg) and a Tc-99m-FcTs preparation in an ion exchange system (Example i) followed by UV analysis of the purified Tc-99m-PcTs (fraction III from 25 column B) was performed . The UV spectrum showed characteristic absorption maxima at 685 and 595 nM together with a strong absorption below 300 nM and ea shoulder at 305 nM, confirming the sulfophthalocyanine nature of the eluted material.

Voorbeeld III: 30 In vivo verdeling van Tc-99m-PcTs (fractie III uit kolom B van voorbeeld i)_Example III: In vivo distribution of Tc-99m-PcTs (fraction III from column B of example i)

Vrouwelijke konijnen van 2 kg werden geanesthetiseerd door een i.p. injectie van natrium Hembutal (30 mg/kg). De gezuiverde Tc-99m-PcTs-2 kg female rabbits were anesthetized by an i.p. injection of sodium Hembutal (30 mg / kg). The purified Tc-99m-PcTs-

OO

fractie (2 cm » 30yUCi) werd i.p. toegediend via de oorader. De ver-35 deling van de radioactiviteit werd zichtbaar gemaakt door scintillatie 800 2 8 60 -8- met een Dyna-IY camera van Picker Nuclear. Deze camera was voorzien van een hoog oplossend vermogen, een parallelcollimator en bevatte een matrix van 37 fotobuizen waardoor een intrinsieke oplossing van 1/8” werd verkregen.fraction (2 cm »30yUCi) was injected i.p. administered through the ear vein. The radioactivity distribution was visualized by scintillation 800 2 8 60 -8- with a Dyna-IY camera from Picker Nuclear. This camera was equipped with a high resolution, a parallel collimator and contained a matrix of 37 photo tubes, giving an intrinsic 1/8 ”solution.

5 Vijf minuten na de injectie accumuleerde de activiteit in het ge bied van het hart en lever. De nieren werden zichtbaar evenals de botten, en in. het bijzonder de botgewrichten bij de achterpoten konden goed worden onderkend. Zes uren na de injectie werd een sterke fixatie waargenomen bij de lever, het hartgebied, de nieren en de milt. De stabi-10 liteit van hetTc-9Sta-PcTs-ccmplex was duidelijk uit een afwezigheid van activiteit bij de maag, de schildklier en de speekselklieren.Five minutes after the injection, the activity accumulated in the area of the heart and liver. The kidneys became visible as well as the bones, and in. in particular the bone joints at the hind legs could be recognized well. Six hours after the injection, a strong fixation was observed in the liver, heart area, kidneys and spleen. The stability of the Tc-9Sta-PcTs complex was evident from an absence of activity in the stomach, thyroid and salivary glands.

Ter vergelijking werd een scintillatieopname gemaakt van een konijn, geïnjecteerd met een overeenkomstige activiteitsdosis in de vorm van het vrije pertechnetaat. Dit toonde aan, dat in tegenstelling tot het 15 experiment met Tc-99ni-PcTs nu ook de maag, de speekselklieren en de schildklier duidelijk waren gemerkt.For comparison, a scintillation shot of a rabbit was injected with a corresponding activity dose in the form of the free pertechnetate. This showed that, in contrast to the experiment with Tc-99ni-PcTs, the stomach, salivary glands and thyroid were now clearly marked as well.

Voorbeeld IV:Example IV:

Om de orgaanverdeling van Tc-99m-PcTs als functie van de lijd te onderzoeken werden 7 vrouwelijke Fisher-3UU CHBL-ratten geïnjecteerd 3 20 via de caudale ader met het gezuivere radiofarmacon (^5juCi in 0,2 cm fysiologische zoutoplossing per rat). De dieren weiden gedood op verschillende tijdsintervallen en aan sectie onderworpen. Monsters van de lever, de nieren, de longen, spieren, de milt en het bloed werden opgevangen, gewogen en geteld op hun gehalte aan Tc-99m in een Spectron-25 100 multichannel analyser, gecalibreerd voor lUO KeV fotonen (PiekerTo investigate the organ distribution of Tc-99m-PcTs as a function of suffering, 7 female Fisher-3UU CHBL rats were injected through the caudal vein with the purified radiopharmaceutical (5 5 µCi in 0.2 cm saline per rat). The animals graze killed at different time intervals and sectioned. Samples of the liver, kidneys, lungs, muscles, spleen and blood were collected, weighed and counted for their Tc-99m content in a Spectron-25 100 multichannel analyzer, calibrated for lUO KeV photons (Pieker

Nuclear). De waarden werden ingesteld op Tc-99m-ontleding en voor gewicht sverschillen tussen de dieren; de wisselingen in specifieke activiteiten werden op een diagram uitgezet. Een aantal duidelijke distributiepatronen kunnen uit de verkregen grafiek worden afgeleid.Nuclear). The values were adjusted for Tc-99m decomposition and for weight differences between animals; the changes in specific activities are plotted on a diagram. A number of clear distribution patterns can be derived from the graph obtained.

30 Een hoge specifieke activiteit in de nieren wordt tijdens het gehele onderzoek gehandhaafd, hetgeen duidt op een irreversibele binding van Tc-99m-PcTs in deze organen. De leverfixatie met een maximale opname na 12 uren is eveneens significant. De milt en de longen zijn minder actief, hoewel hun specifieke aciviteiten tijdens het experiment con-35 stant bleven. De activiteit van het opgevangen bloed neemt exponentieel 80 0 2 8 60 * - ·? *« · /· , ·? ··.„.«··.·.» *· ✓ · * ·'*.ƒ. . t , i, ♦ . . - . *- · ...... . · . * . .· * · -** '. · * *»* ' . , ·· ’ .-- *-.*-- *- ^ -9- af met een halveringseliminatietijd van 12 uren. De opname van Tc-99m-PcTs door de spieren is insignificant en parallel met de activiteit vanhet hloed.High specific activity in the kidneys is maintained throughout the study, indicating an irreversible binding of Tc-99m-PcTs in these organs. The liver fixation with a maximum uptake after 12 hours is also significant. The spleen and lungs are less active, although their specific activities remained constant throughout the experiment. The activity of the collected blood increases exponentially 80 0 2 8 60 * - ·? * «· / ·, ·? ··. ".« ··. ·. » * · ✓ · * · '*. Ƒ. . t, i, ♦. . -. * - · ....... ·. *. . * * - ** '. * * »* '. , ·· ’.-- * -. * - * - ^ -9- with a half-life elimination time of 12 hours. The uptake of Tc-99m-PcTs by the muscles is insignificant and parallel to the activity of the blood.

Concluderend geven deze resultaten aan, dat het nierweefsel een 5 sterke affiniteit bezit voor het Tc-99m-PcTs. Een aantal andere organen zoals de lever, milt, longen en hart houden dit produkt eveneens vast.In conclusion, these results indicate that the renal tissue has a strong affinity for the Tc-99m-PcTs. A number of other organs such as the liver, spleen, lungs and heart also retain this product.

Het distributiepatroon duidt op een significante binding op het niveau van het reticulo-endotheliale systeem.The distribution pattern indicates significant binding at the level of the reticuloendothelial system.

Voorbeeld V; 10 De fixatie van het Tc-99n.-PcTs door de diverse organen kan even eens worden bekeken via het uitscheidingspatroon van dit radiofarmacon.Example V; The fixation of the Tc-99n.-PcTs by the various organs can also be viewed via the excretion pattern of this radiopharmaceutical.

De uitscheiding van Tc-99®· werd bepaald met 3 mannelijke ratten (Sprague-Dawley) van elk ca. 100 g. Om een uniform patroon te verkrijgen werden de dieren gecystectomiseerd volgens Helv. Acta 2b, 2b (1966).The secretion of Tc-99® was determined with 3 male rats (Sprague-Dawley) of approximately 100 g each. To obtain a uniform pattern, the animals were cystectomized according to Helv. Acta 2b, 2b (1966).

15 Elke rat ontving een dosis van 0,U pCi/g aan Tc-99m-PcTs via de caudale ader. De totale activiteit van de dieren werd op diverse tijdsintervallen gemeten met een PHO-V-camera (Searle) voorzien van een sterk oplossende parallelcollimator. De dieren werden opgesloten in een nauwe kooi om hut geometrie te regelen in relatie tot de detector. Tijdens het ge-20 hele experiment konden zij eten en drinken. Het gemiddelde van de ver-.... kregen waarden bij de drie dieren werd uitgezet als een percentage van de activiteit op het tijdstip van de injectie en wel op een semi-lo-garitmische schaal.Each rat received a dose of 0.00U pCi / g of Tc-99m-PcTs through the caudal vein. The total activity of the animals was measured at various time intervals with a PHO-V camera (Searle) equipped with a highly dissolving parallel collimator. The animals were confined in a narrow cage to control hut geometry in relation to the detector. They were able to eat and drink during the whole experiment. The mean of the obtained values in the three animals was plotted as a percentage of the activity at the time of the injection on a semi-loghythmic scale.

De waarden werden gecorrigeerd voor het verval van Tc-99m en 25 geven dus alleen de biologische uitscheiding van TcPcTs weer. Een twee ccmpartimentskrcmme werd daarbij verkregen, hetgeen duidt op het feit, dat een verdelingsevenwicht binnen 3 uren werd bereikt. Dit punt van intersectie van de twee krammen valt samen met de maximale opname in de diverse organen en het verzamelde bloed. Het is duidelijk dat ge-30 durende de eerste 3 uren na de injectie ca. 20% van het Tc-99m direct uit het verzamelde bloed wordt uitgescheiden. De rest van het Tc-99m wordt vrijgegeven door de doelweefsels en wel met een bijzonder lage snelheid (0,5$ per uur). Deze waarnemingen tezamen met een afwezigheid van activiteit in de maag, de schildklier en de speekselklieren duidt 35 erop, dat geen pertechnetaat uit het TcPcTs-complex vrijkomt. Dit toont 8 00 2 8 60 '.'·· .: ..·. · ·'-· •ν-··.:“·' ' ' ' ·.; ·.*·· ’\. .·: · ·"' V »"'·'·Ί·: ' i» ;; '·' -10- eveneens aan, dat er een irreversibele "binding plaatsvindt van TcPcTs op de receptorplaatsen van de doelorganen.The values were corrected for the decay of Tc-99m and thus only reflect the biological secretion of TcPcTs. A two compartment curve was thereby obtained, indicating that a distribution equilibrium was reached within 3 hours. This point of intersection of the two staples coincides with the maximum uptake in the various organs and the collected blood. Obviously, during the first 3 hours after the injection, about 20% of the Tc-99m is excreted directly from the collected blood. The rest of the Tc-99m is released by the target tissues at a particularly slow rate (0.5 $ per hour). These observations, together with an absence of activity in the stomach, thyroid and salivary glands, indicate that no pertechnetate is released from the TcPcTs complex. This shows 8 00 2 8 60 '.' ··.: .. ·. · · '- · • ν- ··.: "·" "" ". ·. * ·· ’\. . ·: · · "'V» "' · '· Ί ·:' i» ;; Also indicates that there is an irreversible binding of TcPcTs at the receptor sites of the target organs.

Voorbeeld 71:Example 71:

Om Tc-99m-PcTs als een tumor-ontdekkend middel te beoordelen 5 werden de voor hormonen gevoelige 13762 borstadrenocarcincmen bijTo evaluate Tc-99m-PcTs as a tumor-detecting agent, the hormone-sensitive 13762 breast renocarcinomas were tested in

Fisher 3I1VCRBL vrouwelijke ratten als model gekozen. Deze tumor wordt gehouden in de ascitesvorm. Evenwel eenmaal s.c. geinoculeerd of in een zacht weefsel ontwikkelt zich een vaste tumor. Bij deze studie werden 3 5 dieren van elk 150 g geinoculeerd in de dij en wel met 0,5 cm 10 ascitesvloeistof (10 cellen). Op tijdsintervallen van 3, 6, 8 en 11 dagen na de inoculatie werden de dieren via de caudale ader gexnjec-Fisher 3I1VCRBL female rats selected as model. This tumor is held in the ascites form. However, once s.c. inoculated or in soft tissue, a solid tumor develops. In this study, 3 animals of 150 g each were inoculated into the thigh with 0.5 cm of 10 ascites fluid (10 cells). Animals were injected through the caudal vein at time intervals of 3, 6, 8 and 11 days after inoculation.

OO

teerd met Tc-99m-PcTs (500 jxCi in 1 cm ). De activiteitsverdeling in de dieren werd gevolgd door scintillatieopnamen met een Dyna-IV camera gekoppeld met een Cybernéx ordinatorsysteem (Crhcmemco). Bepaalde beelden 15 werden geregistreerd op een magnetische schijf, welke hun weergave op een matrix van 128 bij 128 punten mogelijk maakt. De activiteit van elk punt wordt via een schaal van 8 kleuren overgebracht, welke viermalen werden herhaald cm een activiteit van 0-256 tellingen te bestrijken. Bovendien maakt deze techniek een duidelijke zichtbaarmaking van de 20 scintillatieopnamen voor een kwantitatieve bestudering van de resultaten mogelijk.tar with Tc-99m-PcTs (500 µCi in 1 cm). The activity distribution in the animals was followed by scintillation recordings with a Dyna-IV camera coupled to a Cybernéx ordinator system (Crhcmemco). Certain images 15 were recorded on a magnetic disk, which allows their display on a matrix of 128 by 128 points. The activity of each point is transferred on a scale of 8 colors, which were repeated four times to cover an activity of 0-256 counts. In addition, this technique allows a clear visualization of the 20 scintillation images for a quantitative study of the results.

De beelden na 3 en 6 dagen na de tumorinoculatie onthulden slechts een lichte toename in de activiteit op de inoculatieplaats.The images at 3 and 6 days after tumor inoculation revealed only a slight increase in inoculation site activity.

Maar het opnameêxperiment met Tc-99m-PcTs bij dieren 8 dagen na de 25 inoculatie onthulde, duidelijk een selectieve opname van Tc-99m in de tumor. Een van de dieren werd na de scintigrafische opnamen gedood en aan sectie onderworpen. De tumor was ontwikkeld in de dij en wel als een 0,5 cm vast niet gevasculariseerd wit knobbeltje van 25 mg. De activiteit van de tumor was viermaal groter dan die bij het spierweefsel 30 in de gezonde dij. 11 dagen na de inoculatie had de tumor een grootte bereikt van 1 cm (U55 mg) en kon toen even goed zichtbaar worden gemaakt met het onderhavige radiofarmaccn (tumor /spierverhouding 5 ·“ 1) ·However, the uptake experiment with Tc-99m-PcTs in animals 8 days after the inoculation clearly revealed a selective uptake of Tc-99m in the tumor. One of the animals was sacrificed after the scintigraphic shots and sectioned. The tumor was developed in the thigh as a 0.5 cm solid non-vascularized 25 mg white nodule. The tumor activity was four times greater than that of the muscle tissue in the healthy thigh. 11 days after the inoculation, the tumor had reached a size of 1 cm (U55 mg) and could then be visualized just as well with the present radiopharmaceuticals (tumor / muscle ratio 5 · “1) ·

De pertinente fixatie van Tc-99m-PcTs in maligne lesies in bepaalde stadia van tumor ontwikkeling, duidelijk vóór de vacularisatie-35 fase, geeft duidelijk de bruikbaarheid van het nieuwe radiofarmacon aan 8002860 Μ -11- 'M:9tfè^^r?^£^ als een opname middel voor een vroege diagnose van aligne tumoren en . hun metastasen.The pertinent fixation of Tc-99m-PcTs in malignant lesions at certain stages of tumor development, clearly before the vacularization phase, clearly indicates the usefulness of the new radiopharmaceutical to 8002860 11 -11- 'M: 9tfè ^^ r? ^ As a recording agent for early diagnosis of alignment tumors and. their metastases.

Voorbeeld VII;Example VII;

Ga.nittm~67 ftfl-tocyaninetetrasulfonzuur (Ga-67-PcTs) door direct merken.Ga.nittm ~ 67 ftfl-tocyanine trasulfonic acid (Ga-67-PcTs) by direct marking.

5 Ftalocyanine werd omgezet in zijn tetrasulfonderivaat volgens J.Chem. Soc. 2975 (1950) en wel in een oplossing van ftalocyaninetetra-Phthalocyanine was converted to its tetrasulfone derivative according to J. Chem. Soc. 2975 (1950) in a solution of phthalocyanine tetra-

—5 Q—5 Q

sulfonzuur (k mg» 1,5x10 mol) in 0,6 cm van een 0,1 M fosfaathuffer 3 met pH 7,3 waaraan 0,1 cm van dezelfde buffer werd toegevoegd met daar-in dragervrij gallium (67 Ga , 30-50 microcurie) en 1*0 microgram 10 natriumcitraat. Het mengsel werd 10 min cp 100°C verhit, waarna een monster van 10-25 microliter werd aangebracht op een dunnelaagchroma-toplaat met silicagel. Ha ontwikkelen van de plaat in aceton:ethyl-acetaat: water OH (7:3:3:0,3) en een autoradiogram onthulde de aanwezigheid van vier radioactieve zones met idèntiéke migratiepatronen 15 als de belangrijkste opgeloste blauwe bestanddelen van het niet gemerkte ftalocyaninetetrasulfonzuurpreparaat. Qnomgezet gallium bleef op de oorsprong staan (8W terwijl l€% van de radioactiviteit was gehecht aan de Ga-67-PcTs-zones.sulfonic acid (k mg »1.5x10 mol) in 0.6 cm of a 0.1 M phosphate buffer 3 with pH 7.3 to which 0.1 cm of the same buffer was added with carrier-free gallium (67 Ga, 30- 50 microcurie) and 1 * 0 micrograms of sodium citrate. The mixture was heated at 100 ° C for 10 min, after which a sample of 10-25 microliters was applied to a thin layer chromatography top plate with silica gel. Ha developing the plate in acetone: ethyl acetate: water OH (7: 3: 3: 0.3) and an autoradiogram revealed the presence of four radioactive zones with identical migration patterns as the major dissolved blue components of the unlabelled phthalocyanine tetrasulfonic acid preparation . Converted gallium remained at the origin (8W while 1% of the radioactivity was attached to the Ga-67 PcTs zones.

Zuivering van dit Ga-67-PcTs werd uit-geroerd door het reactie-20 mengsel aan te brengen op een silicagelkolom van 2x0,5 cm, gevolgd doorPurification of this Ga-67 PcTs was stirred by applying the reaction mixture to a 2x0.5 cm silica gel column, followed by

OO

êlutie met een 0,9% zoutoplossing (l cnr). Het preparaat was toen klaar voor gebruik.elution with 0.9% saline (l cnr). The preparation was then ready for use.

Door op dezelfde wijze tewerk te gaan maar uit te gaan met nitraat of het chloride van gallium-68, koper-6k, chroom-51, cobalt-57, 25 indium-111, kwik-197 en zink-62 verkreeg men de overeenkomstige gallium-68, koper-6U, chroom-51, cobalt-57, kwik-197, indium-111 en zink-62 ftalocyaninetetrasulfonzuurcamplexen.Proceeding in the same way but proceeding with nitrate or the chloride of gallium-68, copper-6k, chromium-51, cobalt-57, indium-111, mercury-197 and zinc-62, the corresponding gallium was obtained -68, copper-6U, chromium-51, cobalt-57, mercury-197, indium-111 and zinc-62 phthalocyanine tetrasulfonic acid complexes.

30 35 .30 35.

800 2 8 60800 2 8 60

Claims

1. The phthalocyanine tetrasulfon acid metal complex with technetium-99m, gallium-67, gallium-68, copper-6 ^, chromium-51, cobalt-57, indium-111, kvik-197 and zinc-62.

2. The technetium-99m phthalocyanine tetrasulfonic acid.

3. Method for detecting tumors in the body of an animal, characterized in that a diagnostic dose of a phthalocyanine trasulfonic acid metal complex with technetium-99nxs gallium-67 * gallium-68, copper-6U, chrocm-51 is given to this animal administer Kohalt-57, Indium-111, Chromium-197 or Zinc-62, followed by a radiation-sensitive examination to detect the tumor from which the labeled diagnostic is bound. Method for detecting tumors in animal bodies, characterized in that the animal is administered a diagnostic dose of technetium-99m phthalocyanine tetrasulfonic acid followed by an examination with a radiation-sensitive device for the determination of tumors with the labeled has bound diagnostic.

5. The gallium-67 phthalocyanine tetrasulfonic acid.

6. A metabolizable, radioactive tumor-seeking preparation containing a phthalocyanine tetrasulfonic acid radioactive metal complex with 20 active metal technetium-99m, gallium-67, gallium-68, copper-6H, chrocm-51, cobalt-57, indium-111, kvik- 197 or zinc-62, as well as a suitable fluid carrier.

7. Metabolizable, radioactive, tumor-seeking preparation containing technetium-99m phthalocyanine tetrasulfoic acid and an appropriate liquid vehicle.

8. Metabolizable, radioactive, tumor-seeking preparation containing gallium-67 phthalocyanine tetrasulfonic acid and an appropriate fluid vehicle.

9. Metabolizable, radioactive, tumor-seeking preparation containing indium-111 phthalocyanine tetrasulfonic acid and an appropriate fluid vehicle.

10. Metabolizable, radioactive, tumor-seeking preparation containing gallium-68 phthalocyanine tetrasulfonic acid and an appropriate fluid vehicle. 800 2 8 SO