NL1019932C2 - Preparation of reversibly gelling gelatin with increased bloom number for use in food products, e.g. jelly, by partially cross-linking the gelatin with the aid of cross-linking enzyme - Google Patents
Preparation of reversibly gelling gelatin with increased bloom number for use in food products, e.g. jelly, by partially cross-linking the gelatin with the aid of cross-linking enzyme Download PDFInfo
- Publication number
- NL1019932C2 NL1019932C2 NL1019932A NL1019932A NL1019932C2 NL 1019932 C2 NL1019932 C2 NL 1019932C2 NL 1019932 A NL1019932 A NL 1019932A NL 1019932 A NL1019932 A NL 1019932A NL 1019932 C2 NL1019932 C2 NL 1019932C2
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- gelatin
- cross
- linking
- bloom number
- enzyme
- Prior art date
Links
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 title claims abstract description 125
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 title claims abstract description 125
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 title claims abstract description 123
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 title claims abstract description 123
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 title claims abstract description 115
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 title claims abstract description 55
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 33
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 33
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title description 3
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 title description 2
- 239000008274 jelly Substances 0.000 title description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 31
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 24
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 20
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 16
- 108010029541 Laccase Proteins 0.000 claims description 13
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims description 3
- 108010031396 Catechol oxidase Proteins 0.000 claims 1
- 102000030523 Catechol oxidase Human genes 0.000 claims 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 41
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 16
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 6
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 4
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 4
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 3
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000222355 Trametes versicolor Species 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- ZTOJFFHGPLIVKC-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-2-[(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound S1C2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C2N(CC)C1=NN=C1SC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C2N1CC ZTOJFFHGPLIVKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 235000011850 desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 108700041430 link Proteins 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 239000011241 protective layer Substances 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/04—Animal proteins
- A23J3/06—Gelatine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09H—PREPARATION OF GLUE OR GELATINE
- C09H7/00—Preparation of water-insoluble gelatine
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Jellies, Jams, And Syrups (AREA)
Abstract
Description
Titel: Verknoopt gelatineTitle: Cross-linked gelatin
De uitvinding betreft een verknoopt gelatine evenals een werkwijze voor de bereiding daarvan.The invention relates to a cross-linked gelatin as well as a process for the preparation thereof.
Gelatine is een belangrijk voedingsingrediënt dat algemeen wordt geproduceerd vanuit collageen uit de huid en beenderen van dieren. De 5 belangrijkste toepassingen van gelatine zijn in gelei, geconfijte producten, vleesproducten en gekoelde zuivelproducten, waarbij gebruikt gemaakt wordt van de goede gelerende eigenschappen van gelatine.Gelatin is an important food ingredient that is commonly produced from collagen from the skin and bones of animals. The most important applications of gelatin are in jelly, candied products, meat products and refrigerated dairy products, making use of the good gelling properties of gelatin.
De speciale geleereigenschappen van gelatines zijn tot dusver niet te evenaren met andere materialen. In tegenstelling tot gelen van andere 10 eiwitten, die alleen worden gevormd door verhitting (ei-eiwit) of door verhitting gevolgd door afkoeling, kunnen gelatines onder andere gelen vormen door alleen afkoeling. Deze gelatine gelen zijn weer gemakkelijk vloeibaar te maken door verwarming bij relatief lage temperaturen (ca.The special gelling properties of gelatins are so far unmatched with other materials. In contrast to gels of other proteins, which are only formed by heating (egg protein) or by heating followed by cooling, gelatins can, among other things, form gels by cooling alone. These gelatin gels are again easy to liquefy by heating at relatively low temperatures (approx.
40° C).40 ° C).
15 Dit reversibele karakter van een gel op basis van gelatine maakt gelatine bijzonder geschikt voor bijvoorbeeld toetjes, omdat het gegeleerde materiaal smelt in de mond. De bijzondere eigenschappen van gelatine wordt ook gebruikt in de fotografie. De glanzende toplaag van foto's bestaat bijvoorbeeld uit gelatine. Aan dit type gelatine worden hoge eisen gesteld.This reversible nature of a gelatin-based gel makes gelatin particularly suitable for desserts, for example, because the gelled material melts in the mouth. The special properties of gelatin is also used in photography. The glossy top layer of photos, for example, consists of gelatin. High demands are made on this type of gelatin.
20 Het gelatine moet een hoog bloomgetal hebben, dat wil zeggen, het moet een gel met een hoge gelsterkte kunnen opleveren, en bij afkoeling moet het geleergedrag zodanig zijn dat de gel zich snel vormt.The gelatin must have a high bloom number, that is, it must be able to produce a gel with a high gel strength, and upon cooling, the gel behavior must be such that the gel forms quickly.
In het algemeen betekent een hoger bloomgetal dat het bijbehorende gelatine hoger in prijs is. Dit geldt zowel voor de 25 voedingsmiddelenindustrie als voor bijvoorbeeld de fotoindustrie. Bij de productie van gelatine worden, als gevolg van het productieproces, gelatinesoorten met goede en slechte geleereigenschappen verkregen. De ;·; 1 oq;l 2 s U- » V ν' ·· 2 geleereigenschappen van gelatine omvatten naast fysische, ook organoleptische aspecten. De slecht geleerbare gelatinesoorten zijn economisch gezien van mindere betekenis.In general, a higher bloom number means that the corresponding gelatin is higher in price. This applies to both the food industry and, for example, the photo industry. In the production of gelatin, as a result of the production process, gelatin types with good and bad gelling properties are obtained. The; In addition to physical, organoleptic aspects also include gelatin properties of gelatin. The poorly gelatable gelatine types are of less economic importance.
De handelsmarkt van gelatine neemt in onze tijd nog steeds in 5 omvang toe, ondanks het afgenomen imago van dierlijke producten in het algemeen. Met name de vraag naar gelatinesoorten met goede geleereigenschappen neemt toe.The trade market for gelatin is still increasing in our time, despite the reduced image of animal products in general. In particular, the demand for gelatin types with good gelling properties is increasing.
In het verleden is getracht om met behulp van het enzym transglutaminase gelatine te verknopen in de hoop dat daarmee de 10 geleerbaarheid zou verbeteren. Dit zou met name interessant zijn voor de gelatinesoorten van mindere kwaliteit omdat daarmee de prijs aanzienlijk kan worden verhoogd. Helaas is het niet mogelijk gebleken om met behulp van transglutaminase de geleereigenschappen van gelatine te verbeteren. Verknoping van gelatine met transglutaminase resulteert zelfs in 15 verslechterde geleerbaarheid.Attempts have been made in the past to cross-link gelatin using the enzyme transglutaminase in the hope that this would improve gelability. This would be of particular interest for the gelatin types of a lower quality, because it can considerably increase the price. Unfortunately, it has not been possible to improve the gelation properties of gelatin with the help of transglutaminase. Cross-linking of gelatin with transglutaminase even results in deteriorated gelability.
Het is nu gevonden dat de geleerbaarheid van gelatine sterk verbeterd kan worden door het gelatine te verknopen met behulp van een verknopingsenzym. Het gelatine verknoopt volgens een werkwijze van de onderhavige uitvinding heeft een zeer veel hogere gelsterkte. De 20 bloomgetallen die hiermee corresponderen zijn niet eerder gerealiseerd voor gelatine. Hierdoor worden geheel nieuwe toepassingen moge lijk. Ook betekent dit dat lagere concentraties gelatine kunnen worden gebruikt om dezelfde gelsterkte te verkrijgen.It has now been found that the gelatability of gelatin can be greatly improved by cross-linking the gelatin with the aid of a cross-linking enzyme. The gelatin cross-linked according to a method of the present invention has a very much higher gel strength. The 20 bloom numbers corresponding to this have not previously been achieved for gelatin. This makes entirely new applications possible. This also means that lower concentrations of gelatin can be used to achieve the same gel strength.
Zonder beperkt te willen worden door de theorie is het zinvol hier 25 enkele feitelijkheden omtrent eiwitten in het algemeen en gelatine in het bijzonder te bespreken.Without wishing to be limited by theory, it is useful to discuss some facts about proteins in general and gelatin in particular here.
Eiwitten zijn op gebouwd uit individuele aminozuren, in een voor een bepaald eiwit specifieke volgorde, aaneengeschakeld door peptide bindingen. Deze aminozuren omvatten, onder andere, reactieve groepen, 30 zoals sulfhydrylgroepen van cysteïneresiduen waardoor delen van ' .2 3 polypeptideketens of verschillende polypeptideketens onderling verknoopt kunnen zijn. Verder kunnen bepaalde groepen geïoniseerd zijn waardoor lading ontstaat. Door interactie tussen verschillende aminozuren in een eiwit ontstaat voorts een kenmerkende tertiaire structuur. Het 5 waterstofatoom gebonden aan een stikstofatoom in de keten kan een waterstofbrug vormen met een carboxyl groep van de keten.Proteins are built from individual amino acids, in a sequence specific to a particular protein, linked by peptide bonds. These amino acids include, among other things, reactive groups, such as sulfhydryl groups of cysteine residues through which portions of polypeptide chains or different polypeptide chains may be interlinked. In addition, certain groups may be ionized, causing charge. Furthermore, interaction between different amino acids in a protein results in a characteristic tertiary structure. The hydrogen atom bonded to a nitrogen atom in the chain can form a hydrogen bridge with a carboxyl group of the chain.
Collageen, het belangrijkste eiwit in het bindweefsel waaruit onder andere huid, botten, pezen, kraakbeen en bloedvaten zijn opgebouwd heeft een zeer unieke eiwitstructuur waarover relatief veel bekend is. Gelatine 10 kan worden verkregen uit collageen door middel van denaturatie en partiële hydrolyse. Vele fundamentele vragen omtrent het geleringsmechanisme van gelatine blijven echter nochtans onbeantwoord.Collagen, the most important protein in the connective tissue from which skin, bones, tendons, cartilage and blood vessels are built, has a very unique protein structure about which relatively much is known. Gelatin 10 can be obtained from collagen by denaturation and partial hydrolysis. However, many fundamental questions about the gelation mechanism of gelatin remain unanswered.
Gelen van eiwitten kunnen op verschillende wijzen ontstaan. Bij verwarming tot een temperatuur van rond de 80 a 90 °C van een 15 eiwitoplossing breken met name de disulfidebruggen waardoor de eiwitten zich ontvouwen. Bij afkoeling ontstaan opnieuw disulfidebruggen tussen verschillende eiwitmoleculen en vormt zich een netwerk van eiwitten. Afhankelijk van de concentratie eiwit veroorzaakt het netwerk een gelvorming. Deze vorm van gelering noemt men hitte gelering en wordt 20 onder andere gebruikt bij de bereiding van worsten.Protein gels can arise in various ways. When heated to a temperature of around 80 to 90 ° C of a protein solution, in particular the disulfide bridges break, causing the proteins to unfold. Upon cooling, disulfide bridges are created again between different protein molecules and a network of proteins is formed. Depending on the protein concentration, the network causes gel formation. This form of gelling is called heat gelling and is used, among other things, in the preparation of sausages.
Een tweede vorm van gelering is zuur-gelering: Hierbij ontstaat een gel doordat interacties tussen eiwitmoleculen veranderen als gevolg van ladingsverandering.A second form of gelation is acid gelation: A gel is formed because interactions between protein molecules change as a result of charge change.
Nog een andere wijze waarop een gel van eiwitten kan worden 25 verkregen is door de eiwitten in hoofdzaak volledig enzymatisch te verknopen. Enzymen zoals transglutaminase en laccase kunnen eiwitmoleculen aan elkaar verknopen, waardoor er een netwerk ontstaat. Ook hier geldt dat bij voldoende hoge eiwitconcentratie een gel kan ontstaan.Yet another way in which a gel of proteins can be obtained is by substantially cross-linking the proteins completely enzymatically. Enzymes such as transglutaminase and laccase can link protein molecules together, creating a network. Here, too, it holds that a gel can form if the protein concentration is sufficiently high.
44
De vorm van gelering die verband houdt met de onderhavige uitvinding is een vierde vorm van gelvorming van eiwitten, te weten gelatine gelering. Gelatine gelering is uniek omdat deze gelering plaatsvindt als gevolg van de vorming van waterstofbruggen tussen de 5 polypeptideketens. Bij gelatine gelering worden in de regel geen covalente bruggen gevormd. Dit betekent dat een oplossing met een voldoende hoeveelheid gelatine in de meeste gevallen bij een temperatuur boven ongeveer 35 °C vloeibaar is en daarbeneden een gel vormt. Het proces van oplossen en geleren van gelatine is volledig reversibel. Dit verleent aan 10 gelatine enkele bijzondere toepassingsmogelijkheden.The form of gelation associated with the present invention is a fourth form of gel formation of proteins, namely gelatin gelation. Gelatin gelation is unique because this gelation occurs as a result of the formation of hydrogen bonds between the polypeptide chains. With gelatin gelation, no covalent bridges are usually formed. This means that a solution with a sufficient amount of gelatin is in most cases liquid at a temperature above about 35 ° C and forms a gel below it. The process of dissolving and gelating gelatin is completely reversible. This gives some special applications to 10 gelatine.
Verrassenderwijs is gevonden dat een verknoopt gelatine bereid middels een werkwijze volgens de onderhavige uitvinding sneller tot gelvorming komt en dat tevens een hogere gelsterkte wordt bereikt. Het versnelde geleringsproces is onder andere van groot voordeel voor de 15 fotoindustrie omdat door snellere gelering van de gelatine op de foto de verwerkingsnelheid van foto's aanzienlijk verhoogd kan worden.Surprisingly, it has been found that a cross-linked gelatin prepared by a method according to the present invention gels faster and that a higher gel strength is also achieved. The accelerated gelation process is of great advantage for the photo industry, among others, because faster gelation of the gelatin on the photo can considerably increase the processing speed of photos.
Het is een doel van de uitvinding om de kwaliteit van gelatine en dan met name de gelsterkte en de geleereigenschappen, te verbeteren. Gelatines van relatief lage kwaliteit, en met een laag bloomgetal, kunnen 20 door toepassing van een werkwijze volgens de uitvinding aanzienlijk aan kwaliteit winnen. Tevens kunnen gelatines worden bereid met een bloomgetal dat voorheen niet bereikt werd.It is an object of the invention to improve the quality of gelatin and in particular the gel strength and the gelling properties. Gelatins of relatively low quality, and with a low bloom number, can considerably improve their quality by applying a method according to the invention. Gelatins can also be prepared with a bloom number that was not achieved before.
De onderhavige uitvinding voorziet in een werkwijze voor de bereiding van een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal, 25 waarbij een gelatine gedeeltelijk wordt verknoopt met behulp van een verknopingsenzym ter verkrijging van een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal.The present invention provides a process for the preparation of a reversibly gelling gelatin with increased bloom number, wherein a gelatin is partially cross-linked with the aid of a cross-linking enzyme to obtain a reversibly gelling gelatin with increased bloom number.
De onderhavige uitvinding voorziet tevens in een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal verkregen middels een 30 werkwijze volgens de uitvinding.The present invention also provides a reversible gelling gelatin with increased bloom number obtained by a method according to the invention.
•1,1 j 03-i/• 1.1 y 03-i /
v/ 1 ύ ύ Ov / 1 ύ ύ O
55
Figuur 1 toont het effect op de gelsterkte na verknoping van gelatine met laccase zoals uitgewerkt in één van de voorbeelden.Figure 1 shows the effect on gel strength after crosslinking gelatin with laccase as elaborated in one of the examples.
Figuur 2 geeft in grafiek de gelering weer van een gelatine dat is verknoopt met laccase gedurende kortere en langere tijd. De maximale 5 waarde van de gelsterkte van een gel die is bereid op basis van een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal volgens de uitvinding is hoger dan de corresponderende waarde van een onverknoopt product.Figure 2 graphically shows the gelation of a gelatin that is cross-linked with laccase for shorter and longer time. The maximum value of the gel strength of a gel prepared on the basis of a reversible gelling gelatin with an increased bloom number according to the invention is higher than the corresponding value of an uncrosslinked product.
Figuur 3 is een uitsnede van figuur 2 en geeft de snelheid weer waarmee de gelen zich vormen waarbij te zien is dat een gel op basis van 10 een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal volgens de uitvinding zich sneller vormt dan een vergelijkbare gel op basis van een onverknoopt gelatine.Figure 3 is a sectional view of Figure 2 and shows the speed at which the gels form, showing that a gel based on a reversible gelatin with increased bloom number according to the invention forms faster than a comparable gel based on a uncrosslinked gelatin.
Gelatine van iedere willekeurige oorsprong kan worden toegepast in uitvoeringsvormen van de onderhavige uitvinding. Zowel gelatine 15 afkomstig van collageen uit de huid of beenderen van varkens of runderen, maar ook gelatines van bijvoorbeeld vis, kunnen worden toegepast. In een alternatieve uitvoeringsvorm volgens de uitvinding kan ook een recombinant gelatine uit bijvoorbeeld bacteriën of gisten worden toegepast. Dergelijke recombinant geproduceerde gelatines kunnen een veilig 20 alternatief bieden voor materiaal van dierlijke oorsprong, aangezien mogelijke besmetting van het materiaal met ziekteverwekkers daardoor is uitgesloten. Bij voorkeur wordt in de onderhavige uitvinding een runder-, varkens- of visgelatine toegepast, of een combinatie daarvan.Gelatin of any origin can be used in embodiments of the present invention. Both gelatin derived from collagen from the skin or bones of pigs or cattle, but also gelatins from, for example, fish can be used. In an alternative embodiment according to the invention, a recombinant gelatin from, for example, bacteria or yeasts can also be used. Such recombinantly produced gelatins can offer a safe alternative to material of animal origin, since this prevents possible contamination of the material with pathogens. Preferably a bovine, pork or fish gelatin is used in the present invention, or a combination thereof.
Ter verkrijging van een reversibel gelerend gelatine volgens de 25 uitvinding wordt een enzymatische verknopingsreactie uitgevoerd. Een reactiemengsel voor het uitvoeren van een enzymatische verknopingsreactie volgens de uitvinding kan worden bereid door van de gelatine, bij voorkeur in de vorm van een gedroogd gelatinepoeder te suspenderen, bij voorkeur op te lossen in een oplosmiddel. Bij voorkeur is het oplosmiddel water.An enzymatic cross-linking reaction is carried out to obtain a reversible gelling gelatin according to the invention. A reaction mixture for carrying out an enzymatic cross-linking reaction according to the invention can be prepared by suspending the gelatin, preferably in the form of a dried gelatin powder, preferably dissolving in a solvent. Preferably the solvent is water.
66
Een geschikte hoeveelheid gelatine die wordt toegepast in een reactie mengsel volgens de uitvinding is tussen 1 en 99 gew.% gelatine, gebaseerd op het gewicht van het reactiemengsel. Bij voorkeur wordt tussen 1 en 20 gew.% gelatine toegepast. Bij grotere voorkeur wordt een 5 hoeveelheid gelatine van ongeveer 10 gew.% toegepast.A suitable amount of gelatin used in a reaction mixture according to the invention is between 1 and 99% by weight of gelatin, based on the weight of the reaction mixture. Preferably, between 1 and 20% by weight of gelatin is used. More preferably, an amount of gelatin of about 10% by weight is used.
Aan een reactiemengsel voor het uitvoeren van een verknopingsreactie kunnen optioneel bufferende stoffen worden toegevoegd om de zuurgraad te handhaven. De pH van de oplossing bevindt zich bij voorkeur in een bereik tussen ongeveer 4 en ongeveer 10. Bij grotere 10 voorkeur is de pH tussen ongeveer 5 en ongeveer 8, bij nog grotere voorkeur is de pH ongeveer 6 tot ongeveer 7.Optionally, buffering agents may be added to a reaction mixture for carrying out a cross-linking reaction to maintain acidity. The pH of the solution is preferably in a range between about 4 and about 10. More preferably, the pH is between about 5 and about 8, even more preferably the pH is about 6 to about 7.
De aanwezigheid van emulgatoren en oppervlakte actieve stoffen zoals stabilisatoren en eventueel andere additieven kan de verknopingsreactie bevorderen doordat zij de enzymen in een actieve vorm 15 houden en vormt een onderdeel van de onderhavige uitvinding.The presence of emulsifiers and surfactants such as stabilizers and optionally other additives can promote the cross-linking reaction by keeping the enzymes in an active form and forms part of the present invention.
Aan een reactiemengsel dat een gelatine omvat wordt vervolgens een verknopingsenzym toegevoegd. De volgorde waarin de verschillende bestanddelen aan het reactiemengsel worden toegevoegd is echter niet beperkend.A crosslinking enzyme is then added to a reaction mixture comprising a gelatin. However, the order in which the various components are added to the reaction mixture is not limiting.
20 De verknopingsreactie kan worden uitgevoerd bij een temperatuur van tussen de 5°C en 80°C, bij voorkeur tussen 35°C en 40°C.The cross-linking reaction can be carried out at a temperature of between 5 ° C and 80 ° C, preferably between 35 ° C and 40 ° C.
De verknopingsreactie kan worden uitgevoerd gedurende een periode variërend van enkele minuten tot enkele dagen. Bij voorkeur wordt een verknopingsreactie uitgevoerd voor een periode van tussen 10 minuten 25 en 24 uren.The cross-linking reaction can be carried out for a period ranging from a few minutes to a few days. Preferably, a cross-linking reaction is carried out for a period of between 10 minutes and 24 hours.
Verknopingsenzymen die in de onderhavige uitvinding kunnen worden toegepast zijn onder andere, maar niet uitsluitend, polyp he noloxidases, zowel afzonderlijk als in combinatie. Bij voorkeur wordt als verknopingsenzym laccase (EC 1.10.3.2) toegepast.Cross-linking enzymes that can be used in the present invention include, but are not limited to, polyoloxidases, both individually and in combination. Preferably, laccase (EC 1.10.3.2) is used as the cross-linking enzyme.
77
Aangezien verschillende verknopingsenzymen verschillende aminozuren met elkaar verknopen is, met het oog hierop, aanpassing van de reactieomstandigheden mogelijk. De reactiecondities tijdens de verknopingsreactie worden in beginsel zo gekozen dat een optimale 5 verknoping kan plaatsvinden. Deze reactiecondities omvatten condities zoals concentratie van het verknopingsenzym, temperatuur, tijdsduur van de reactie, pH, zoutconcentratie, gelatineconcentratie en de aanwezigheid van eventuele hulpstoffen. De optimale reactieomstandigheden tijdens een verknopingsreactie van gelatine kan voor verschillende 10 verknopingsenzymen uiteenlopen. Zo zal bijvoorbeeld bij een verknopingsreactie met laccase zuurstof aanwezig dienen te zijn, en bij gebruik van peroxidase zal zonodig waterstofperoxide aan het reactiemengsel kunnen worden toegevoegd. Bij instelling van de reactietemperatuur kan rekening gehouden worden met het 15 temperatuursoptimum en de temperatuursstabiliteit van het te gebruiken enzym.Since different cross-linking enzymes cross-link different amino acids with each other, in view of this, adjustment of the reaction conditions is possible. The reaction conditions during the cross-linking reaction are in principle chosen such that an optimum cross-linking can take place. These reaction conditions include conditions such as concentration of the cross-linking enzyme, temperature, duration of the reaction, pH, salt concentration, gelatin concentration and the presence of any excipients. The optimum reaction conditions during a cross-linking reaction of gelatin can vary for different cross-linking enzymes. For example, oxygen will have to be present in a cross-linking reaction with laccase, and if peroxidase is used, hydrogen peroxide can be added to the reaction mixture if necessary. When setting the reaction temperature, the temperature optimum and the temperature stability of the enzyme to be used can be taken into account.
De hoeveelheid enzym die nodig is om een hoeveelheid van 1 gram gelatine te verknopen is doorgaans enkele milligrammen, maar kan voor bepaalde enzymen veel lager liggen. In het geval bijvoorbeeld een 20 laccase van hoge zuiverheid uit Trametes versicolor wordt gebruikt, zoals weergegeven in voorbeeld 1, volstaat een hoeveelheid enzym van ongeveer 0,01 tot ongeveer 100 U/ml reactiemengsel. Bij voorkeur wordt in dat geval een hoeveelheid enzym van ongeveer 1 tot ongeveer 10 U/ml reactiemengsel toegepast, hetgeen overeenkomt met een hoeveelheid van bij voorkeur 2 tot 25 20 pg enzym, waarbij als definitie wordt aangehouden dat 1 U enzym bij optimale zuurgraad en temperatuur de vorming van 1,0 pmol product per minuut katalyseert. In geval van laccase is dit te bepalen door het volgen van de oxidatie van 2,2'-azino-bis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonzuur) (ABTS) bij 420 nm in de aanwezigheid van natriumacetaat, een pH van 4,0 30 en 37°C).The amount of enzyme required to cross-link 1 gram of gelatin is usually a few milligrams, but can be much lower for certain enzymes. For example, in case a high purity laccase from Trametes versicolor is used, as shown in Example 1, an amount of enzyme from about 0.01 to about 100 U / ml of reaction mixture is sufficient. Preferably in that case an amount of enzyme of about 1 to about 10 U / ml of reaction mixture is used, which corresponds to an amount of preferably 2 to 25 µg of enzyme, with the definition being taken that 1 U enzyme at optimum acidity and temperature catalyzes the formation of 1.0 pmol of product per minute. In the case of laccase, this can be determined by monitoring the oxidation of 2,2'-azino-bis- (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) at 420 nm in the presence of sodium acetate, a pH of 4, 0 30 and 37 ° C).
88
Een enzymatische verknopingsreactie van gelatine volgens de uitvinding kan worden uitgevoerd in een pasta, een slurry, een dispersie of in een oplossing van het gelatine. Afhankelijk van het enzym dat voor verknoping wordt toegepast, en de gewenste verknopingsgraad van het 5 gelatine kan de vakman de reactiecondities aanpassen, optimaliseren en bepaalde hulpstoffen daartoe inzetten. Zo kan de reactieduur worden verlengd met het oogmerk om de verknopingsgraad, en daarmee het te behalen bloomgetal, te verhogen.An enzymatic cross-linking reaction of gelatin according to the invention can be carried out in a paste, a slurry, a dispersion or in a solution of the gelatin. Depending on the enzyme used for cross-linking, and the desired degree of cross-linking of the gelatin, the person skilled in the art can adjust the reaction conditions, optimize it and use certain auxiliaries for this purpose. For example, the reaction time can be extended with the intention of increasing the degree of cross-linking, and thereby the bloom number to be achieved.
De hoeveelheid enzym die wordt gebruikt, de tijd en de 10 temperatuur gedurende de reactie en de pH van het reactiemengsel zijn niet beperkend. Afhankelijk van het gewenste eindresultaat, bijvoorbeeld de mate van verknoping, het gewenste bloomgetal, en de periode waarbinnen het gewenst is dat dit bereikt wordt, kunnen de temperatuur van het reactiemengsel en de verknopingstijd worden aangepast.The amount of enzyme used, the time and temperature during the reaction and the pH of the reaction mixture are not limiting. Depending on the desired end result, for example the degree of cross-linking, the desired bloom number, and the period within which it is desired to achieve this, the temperature of the reaction mixture and the cross-linking time can be adjusted.
15 Volgens de onderhavige uitvinding is het essentieel dat het gelatine het vermogen tot reversibele gelvorming behoudt. Het is om die reden niet gewenst dat het gelatine volledig wordt verknoopt. In feite is slechts een gedeeltelijke verknoping gewenst. Wanneer het gelatine als gevolg van de verknopingsreactie zodanig verknoopt wordt dat de oplossing daarbij gaat 20 geleren is in veel gevallen geen sprake meer van een vermogen tot reversibele gelvorming door het gelatine.According to the present invention, it is essential that the gelatin retains the ability to form reversible gel. For that reason it is not desirable that the gelatin is fully cross-linked. In fact, only partial cross-linking is desired. When the gelatin is crosslinked as a result of the cross-linking reaction in such a way that the solution starts to gel, in many cases there is no longer any question of a capacity for reversible gel formation by the gelatin.
Het gelatine wordt in een reactiemengsel volgens de uitvinding bij voorkeur verknoopt tot het niveau waarbij de oplossing in hoofdzaak vloeibaar blijft. Hele lage concentraties gelatine in het reactiemengsel 25 kunnen het optreden van volledige verknoping maskeren doordat bij dergelijke concentraties in het geheel geen gelvorming kan optreden. Toch is het van belang dat een verknoopt gelatine volgens de onderhavige uitvinding zijn vermogen tot reversibele gelvorming zoals boven omschreven behoudt. De mate van verknoping kan onder ander worden vastgesteld door 30 bepaling van het molecuulgewicht. Bij verhoging daarvan is sprake van ; o : 2 9 verknoping. Geschikte wijzen voor het bepalen van het molecuulgewicht, zoals gelfiltratie of SDS/PAGE, zijn bij de vakman bekend.The gelatin is preferably crosslinked in a reaction mixture according to the invention to the level at which the solution remains substantially liquid. Very low concentrations of gelatin in the reaction mixture can mask the occurrence of complete cross-linking because gel formation cannot occur at all at such concentrations. It is nevertheless important that a cross-linked gelatin according to the present invention retains its ability to form reversible gel as described above. The degree of cross-linking can, among other things, be determined by determining the molecular weight. Increasing this means: o: 2 9 cross-linking. Suitable methods for determining molecular weight, such as gel filtration or SDS / PAGE, are known to those skilled in the art.
Een gedeeltelijke verknoping van gelatine volgens de uitvinding kan worden bereikt door de verknopingsreactie tijdig te beëindigen. Dit kan 5 geschieden door het verknopingsenzym te inactiveren door bijvoorbeeld denaturatie of de reactieomstandigheden zodanig te wijzigen dat de activiteit van het verknopingsenzym in hoofdzaak volledig wordt stilgelegd. Een geschikte werkwijze voor het inactiveren van het verknopingsenzym is hitte-inactivering. Bij voorkeur wordt hitte-inactivering uitgevoerd bij een 10 temperatuur van tussen 60 - 150°C. Zeer goed bruikbaar is een hitte- inactivering tussen 70 - 100°C voor een tijdsduur van ongeveer 10 minuten.A partial cross-linking of gelatin according to the invention can be achieved by terminating the cross-linking reaction in time. This can be done by inactivating the cross-linking enzyme by, for example, changing denaturation or reaction conditions such that the activity of the cross-linking enzyme is substantially completely stopped. A suitable method for inactivating the cross-linking enzyme is heat inactivation. Heat inactivation is preferably carried out at a temperature of between 60 - 150 ° C. A heat inactivation between 70 - 100 ° C for a period of approximately 10 minutes is very useful.
Na de inactivering van het verknopingsenzym wordt een in hoofdzaak vloeibare oplossing of dispersie verkregen die een gedeeltelijk verknoopt gelatine volgens de uitvinding omvat. Dit verknoopt gelatine is 15 een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal De oplossing of dispersie kan optioneel worden gedroogd en vermalen ter verkrijging van een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal in poedervorm.After the inactivation of the cross-linking enzyme, a substantially liquid solution or dispersion is obtained which comprises a partially cross-linked gelatin according to the invention. This crosslinked gelatin is a reversible gelling gelatin with increased bloom number. The solution or dispersion can optionally be dried and ground to obtain a reversible gelling gelatin with increased bloom number in powder form.
Het reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal bereid volgens een methode van de uitvinding heeft als een kenmerk dat het 20 bloomgetal, gemeten middels de algemeen geaccepteerde werkwijze volgens de British Standards, ten opzichte van het onverknoopte uitgangsmateriaal hoger is. Bij voorkeur wordt middels een werkwijze van de uitvinding een reversibel gelerend gelatine verkregen met een bloomgetal dat 1,1-20 maal, bij grotere voorkeur 1,5 -10 maal, zo hoog is als het bloomgetal van 25 het gelatine in onverknoopte vorm.The reversible gelling gelatin with increased bloom number prepared according to a method of the invention has the feature that the bloom number, measured by the generally accepted method according to the British Standards, is higher than the uncrosslinked starting material. Preferably a reversible gelling gelatin is obtained by a method of the invention with a bloom number that is 1.1-20 times, more preferably 1.5 -10 times, as high as the bloom number of the gelatin in uncrosslinked form.
Een gel die is bereid op basis van een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal volgens de uitvinding vormt zich sneller dan een vergelijkbare gel op basis van een onverknoopt gelatine. Tevens ligt de maximale waarde van de gelsterkte van een gel die is bereid op basis van 30 een reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal volgens de ,'Δ 10 uitvinding in het algemeen veel hoger dan de corresponderende waarde van een onverknoopt product (zie figuren 2 en 3).A gel prepared on the basis of a reversible gelling gelatin with an increased bloom number according to the invention forms faster than a comparable gel based on an uncrosslinked gelatin. Also, the maximum value of the gel strength of a gel prepared on the basis of a reversible gelling gelatin with an increased bloom number according to the invention is generally much higher than the corresponding value of an uncrosslinked product (see Figs. 2 and 3).
Reversibel gelerend gelatine met verhoogd bloomgetal bereid volgens een werkwijze van de onderhavige uitvinding vindt zijn bijzondere 5 toepassing in die takken van de industrie waar aan de geleereigenschappen van het gebruikte gelatine hoge eisen worden gesteld, zoals in de fotoindustrie, in het bijzonder als beschermingslaag op foto's. Gelatine dat normaliter als veevoeder zou worden gebruikt vanwege de mindere kwaliteit kan middels een werkwijze volgens de uitvinding worden opgewerkt tot een 10 hoogwaardig gelatine.Reversible gelling gelatin with increased bloom number prepared according to a method of the present invention finds its particular application in those branches of the industry where the gelling properties of the gelatin used are highly demanded, such as in the photo industry, in particular as a protective layer on photos . Gelatin that would normally be used as animal feed because of the lower quality can be worked up by means of a method according to the invention into a high-quality gelatin.
Voorts kan het verknoopt gelatine bereid volgens een werkwijze van de onderhavige uitvinding worden toegepast in de voedingsmiddelenindustrie en in farmaceutische preparaten en tabletten, in het bijzonder in capsules. Ook (bio-)medische materialen kunnen worden 15 vervaardigd op basis van gelatines volgens de uitvinding.Furthermore, the cross-linked gelatin prepared by a method of the present invention can be used in the food industry and in pharmaceutical preparations and tablets, in particular in capsules. (Bio) medical materials can also be manufactured on the basis of gelatins according to the invention.
Een werkwijze volgens de onderhavige uitvinding vindt zeer geschikte toepassing in de gelatineproducerende industrie. Zo kan de kwaliteit van gelatine met slechte geleereigenschappen voortkomend uit het productieproces aanzienlijk worden verbeterd middels een werkwijze 20 volgens de onderhavige uitvinding. Het verknoopte gelatine is van een hogere kwaliteit en kan tegen een hogere prijs verkocht worden. Verder stelt een werkwijze volgens de uitvinding de gelatineproducerende industrie in staat een geheel nieuw product te leveren met een bloomgetal niet eerder bereikt voor gelatines.A method according to the present invention finds very suitable application in the gelatin-producing industry. Thus, the quality of gelatin with poor gelling properties resulting from the production process can be considerably improved by a method according to the present invention. The cross-linked gelatin is of a higher quality and can be sold at a higher price. Furthermore, a method according to the invention enables the gelatin-producing industry to supply an entirely new product with a bloom number not previously achieved for gelatins.
25 De uitvinding zal nu aan de hand van de onderstaande niet als beperkend op te vatten voorbeelden worden geïllustreerd.The invention will now be illustrated with reference to the examples which are not to be construed as limiting.
Voorbeeld 1.Example 1
Werkwijze 11Method 11
Aan een 100 ml oplossing (pH 6) van 10 gew.% rundergelatine (150 bloom) werd 1 ml laccase-oplossing (EC 1.10.3.2) toegevoegd. Het gebruikte enzympreparaat was voor > 95 gew. % zuiver, gebaseerd op het totaal eiwit gehalte van het preparaat en was verkregen uit Trametes versicolor na 5 zuivering over een anionenwisselaar gevolgd door een gelfiltratiestap, volgens werkwijzen die bij de vakman bekend zijn. De specifieke activiteit van het enzympreparaat was 238 U/ml (0,5 mg/ml).To a 100 ml solution (pH 6) of 10 wt% bovine gelatin (150 bloom) was added 1 ml of laccase solution (EC 1.10.3.2). The enzyme preparation used was> 95 wt. % pure, based on the total protein content of the preparation and was obtained from Trametes versicolor after purification on an anion exchanger followed by a gel filtration step, according to methods known to those skilled in the art. The specific activity of the enzyme preparation was 238 U / ml (0.5 mg / ml).
Tijdens de incubatie met laccase bij 37°C werd de oplossing goed geroerd en werd zuurstof in de erlenmeyer geleid. Op verschillende 10 tijdstippen werden monsters genomen. Deze monsters werden 10 min bij 70°C verhit om het enzym te inactiveren. Na de inactive ring werd van alle monsters de gelsterkte gemeten door in een Bohlin rheometer de oplossing af te koelen tot 5°C en in de tijd de gelsterkte te meten. In figuur 1 staan de gelsterktes vermeld van de verschillende gelatine oplossingen na 800 min 15 bij 5°C in de Bohlin rheometer. De waarden staan weergegeven in Pascal eenheden van de elasticiteitsmodulus G'.During the incubation with laccase at 37 ° C, the solution was stirred well and oxygen was introduced into the conical flask. Samples were taken at different time points. These samples were heated at 70 ° C for 10 minutes to inactivate the enzyme. After the inactive ring the gel strength of all samples was measured by cooling the solution to 5 ° C in a Bohlin rheometer and measuring the gel strength over time. Figure 1 shows the gel strengths of the different gelatin solutions after 800 minutes at 5 ° C in the Bohlin rheometer. The values are given in Pascal units of the elastic modulus G '.
ResultaatResult
Tijdens de incubatie van gelatine met laccase nam de viscositeit 20 toe. Uiteindelijk leidde een vergevorderde verknoping tot gelering van de gelatine. Na 300 min was de gelatineoplossing gegeleerd en konden er geen monsters meer worden genomen. De ontstane gel was dus niet meer verwerkbaar tot een goed ingrediënt. De monsters die werden genomen tot een periode van 240 min bleven vloeibaar en bezaten nog steeds de 25 eigenschap dat ze een gel vormden bij afkoeling. Deze oplossingen konden worden gedroogd en waren daarna goed verwerkbaar in meerdere applicaties. De verknoping leidde in dit voorbeeld tot een vier maal sterkere gel en een corresponderende verhoging van het bloomgetal van het gelatine.The viscosity increased during the incubation of gelatin with laccase. Ultimately, advanced cross-linking led to gelation of the gelatin. After 300 minutes, the gelatin solution was gelled and no more samples could be taken. The gel formed could therefore no longer be processed into a good ingredient. The samples taken up to a 240 minute period remained liquid and still had the property of forming a gel on cooling. These solutions could be dried and were then suitable for use in multiple applications. In this example, the crosslinking led to a gel that was four times stronger and a corresponding increase in the gelatin's bloom number.
10··;·'-’210 ··; · '-' 2
Claims (12)
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL1019932A NL1019932C2 (en) | 2002-02-08 | 2002-02-08 | Preparation of reversibly gelling gelatin with increased bloom number for use in food products, e.g. jelly, by partially cross-linking the gelatin with the aid of cross-linking enzyme |
| PCT/NL2003/000076 WO2003079805A1 (en) | 2002-02-08 | 2003-02-04 | Cross-linked gelatin |
| AU2003211315A AU2003211315A1 (en) | 2002-02-08 | 2003-02-04 | Cross-linked gelatin |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL1019932 | 2002-02-08 | ||
| NL1019932A NL1019932C2 (en) | 2002-02-08 | 2002-02-08 | Preparation of reversibly gelling gelatin with increased bloom number for use in food products, e.g. jelly, by partially cross-linking the gelatin with the aid of cross-linking enzyme |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL1019932C2 true NL1019932C2 (en) | 2003-08-11 |
Family
ID=28036275
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL1019932A NL1019932C2 (en) | 2002-02-08 | 2002-02-08 | Preparation of reversibly gelling gelatin with increased bloom number for use in food products, e.g. jelly, by partially cross-linking the gelatin with the aid of cross-linking enzyme |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| AU (1) | AU2003211315A1 (en) |
| NL (1) | NL1019932C2 (en) |
| WO (1) | WO2003079805A1 (en) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1801122A1 (en) * | 2005-12-23 | 2007-06-27 | FUJIFILM Manufacturing Europe B.V. | Recombinant gelatin particles for cell adhesion |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2659352A1 (en) * | 1990-03-09 | 1991-09-13 | Nippi Gelatine Ind Ltd | Process for the production of highly polymerised gelatin |
| WO1997040401A1 (en) * | 1996-04-23 | 1997-10-30 | Alliedsignal Inc. | Integrated hazard avoidance system |
| EP0947142A2 (en) * | 1998-03-31 | 1999-10-06 | Amano Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for cross-linking protein by using enzyme |
-
2002
- 2002-02-08 NL NL1019932A patent/NL1019932C2/en not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-02-04 AU AU2003211315A patent/AU2003211315A1/en not_active Abandoned
- 2003-02-04 WO PCT/NL2003/000076 patent/WO2003079805A1/en not_active Application Discontinuation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2659352A1 (en) * | 1990-03-09 | 1991-09-13 | Nippi Gelatine Ind Ltd | Process for the production of highly polymerised gelatin |
| WO1997040401A1 (en) * | 1996-04-23 | 1997-10-30 | Alliedsignal Inc. | Integrated hazard avoidance system |
| EP0947142A2 (en) * | 1998-03-31 | 1999-10-06 | Amano Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for cross-linking protein by using enzyme |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2003079805A1 (en) | 2003-10-02 |
| AU2003211315A1 (en) | 2003-10-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6992172B1 (en) | Recombinant gelatins | |
| EP1232181B1 (en) | Recombinant gelatins | |
| Huang et al. | Fish gelatin modifications: A comprehensive review | |
| Zhang et al. | Immobilization of L-asparaginase on the microparticles of the natural silk sericin protein and its characters | |
| Samatra et al. | Bovidae‐based gelatin: Extractions method, physicochemical and functional properties, applications, and future trends | |
| Gudmundsson | Rheological properties of fish gelatins | |
| Ahmad et al. | Extraction, characterization and molecular structure of bovine skin gelatin extracted with plant enzymes bromelain and zingibain | |
| US3974294A (en) | Process for the production of protein-containing food additives | |
| JPH11276162A (en) | Crosslinking of protein with enzyme | |
| Lin et al. | Effects of pepsin digestion at different temperatures and times on properties of telopeptide-poor collagen from bird feet | |
| JP2619933B2 (en) | Method for producing high polymerization degree gelatin | |
| JPS5926636B2 (en) | Protein modification method | |
| NL1019932C2 (en) | Preparation of reversibly gelling gelatin with increased bloom number for use in food products, e.g. jelly, by partially cross-linking the gelatin with the aid of cross-linking enzyme | |
| FR2659352A1 (en) | Process for the production of highly polymerised gelatin | |
| Gündem et al. | Bulletin of Biotechnology | |
| AU2005246967B2 (en) | Recombinant gelatins | |
| Mohtar et al. | Gelatin from cold water fish species and their functional properties | |
| WO2016012375A1 (en) | Calcium sensitive gelatin gels | |
| NL1017994C2 (en) | Bonding of meat and fish products. | |
| Pei et al. | Milk protein-based hydrogels: Development and biomedical applications | |
| WO2024210747A1 (en) | Gelatin-replacement polypeptides | |
| CN119487129A (en) | Method for increasing gelatin viscosity reduction rate and gelatin composition | |
| Tonial et al. | Alexandre da Trindade Alfaro, Evellin Balbinot, Cleusa I. Weber, Ivane | |
| Order | Collagen manufacturers | |
| FR2606638A1 (en) | Method for the enzymatic hydrolysis of gelatins and replacement solutions obtained |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD2B | A search report has been drawn up | ||
| VD1 | Lapsed due to non-payment of the annual fee |
Effective date: 20060901 |