MXPA04006217A - Granulados que contienen enzimas para alimentos animales. - Google Patents

Abstract

La presente invencion describe un procedimiento para la obtencion de un granulado que contiene enzima, en donde un liquido acuoso conteniendo enzima, opcionalmente suplementado con un soporte solido y/o ingredientes activos, es elaborado en granulado, secado y luego recubierto con una dispersion que contiene particulas de una sustancia hidrofoba. La sustancia hidrofoba puede ser una sustancia en forma de grasa o cera o compuesto polimero hidrofobo. Preferentemente, el polimero hidrofobo es una poliolefina, especialmente, polietileno y/o polipropileno. El granulado de enzima asi recubierto es apropiado para la preparacion de composiciones de alimentos animales, mezclando el granulado con los ingredientes del alimento, tratando con vapor y pelletizando. Los granulados recubiertos presentan una alta estabilidad enzimatica durante las condiciones de pelletizado y durante el almacenamiento. Al mismo tiempo, el tiempo de disolucion del granulado es muy corto, con lo que se mejora la disponibilidad biologica de la enzima al animal.

Description

GRANULADOS QUE CONTIENEN ENZIMAS PARA ALIMENTOS ANIMALES Campo de la invención La presente invención se refiere a la formulación de enzimas, preferentemente enzimas para alimentos animales, en granulados. Estos granulados (comestibles) pueden ser usados en alimentos animales .

Antecedentes de la invención Los alimentos animales representan los costos más altos que se incurren en la cria de ganado y otros animales . El uso de diferentes enzimas en la nutrición animal, p.ej. de ganado; se ha convertido casi en una práctica común. Estas enzimas suelen ser producidas por cultivo de microorganismos en termentadores de gran escala, operados por productores de enzimas industriales. En el lado de la fermentación se suele someter el "caldo" resultante a una serie de etapas de filtración para separar la biomasa (los microorganismos) de la enzima deseada (en solución) . A continuación, se concentra la solución de enzima y se procesa como un liquido (frecuentemente, tras adición de varios estabilizantes) o se convierte en una formulación seca. Por razones ...económicas y prácticas se prefieren, frecuentemente,, las formulaciones secas de enzima a las formulaciones liquidas de enzima. Sin embargo, aún cuando se escoge una formulación de enzima seca, algunas etapas del proceso de pelletizado, como p.ej. el acondicionamiento, pueden ser perjudiciales a la enzima. Algunos fabricantes de enzimas han desarrollado métodos de formulación alternativos para mejorar la estabilidad de los productos de enzima secos durante el pelletizado y almacenamiento de los alimentos. Por ejemplo, una alternativa consiste en recubrir el granulado conteniendo enzima con un agente de recubrimiento adecuado . La EP 0 569 468 se refiere a una formulación, que se compone de un granulado conteniendo enzima, que está recubierto con una cera o grasa de alto punto de fusión que supuestamente mejora la resistencia a las condiciones de pelletizado. Una desventaja de un recubrimiento de este tipo es que el tiempo de disolución del granulado es largo (aprox. una hora) , fenómeno que disminuye la disponibilidad biológica de la enzima al animal. Además, los granulados tienen una amplia distribución de tamaño de partícula, lo que dificulta la obtención de una concentración en enzima uniformemente distribuida después del recubrimiento, puesto que las partículas pequeñas contienen una cantidad relativamente alta de agente de recubrimiento, en comparación con las partículas grandes . La WO 00/47060 revela el uso de polietilenglicol (PEG) como material de recubrimiento. Estos recubrimientos de PEG tienen la desventaja, que no aumentan la estabilidad al pelletizado del granulado de enzima al nivel deseado. Todavía hay se bus-can formulaciones estables de enzima para ser usadas en alimentos animales, que son baratas, fáciles de producir y combinan una estabilidad al pelletizado satisfactoria con una buena disponibilidad biológica de la enzima al animal.

Descripción detallada de la invención La presente invención describe un procedimiento para la preparación de un granulado conteniendo enzima, apropiado para ser usado en la nutrición animal, cuyo procedimiento comprende la obtención de un granulado seco conteniendo enzima y el recubrimiento del granulado con una dispersión que comprende partículas de una sustancia hidrófoba dispersada en un disolvente apropiado. Mediante el recubrimiento de un granulado de enzima con tal dispersión se alcanza una baja absorción de agua durante la etapa de acondicionamiento del procedimiento de preparación del alimento animal y, sorprendentemente, un tiempo de disolución atractivamente corto del granulado de enzima. Por tanto, el uso de una capa de poliolefinaa según la presente invención combina la ventaja de un recubrimiento de tipo grasa (estabilidad al pelletizado) con la ventaja de un recubrimiento hidrófilo (corto tiempo de disolución) . Para que se forme una capa adecuada sobre el granulado a recubrir, la dispersión según la invención tiene, preferentemente, el tamaño de partícula especificado más abajo y/o . es homogénea y/o es físicamente estable. Más preferentemente, las partículas de poliolefina en la dispersión tienen un tamaño que oscila de 10 a 1000 nm (inclusive valores límite), especialmente, 10 a 500 nm, sobre todo, de 10 a 200 nm. La dispersión según la invención, ventajosamente, es capaz de formar una capa homogénea sobre los granulados a recubrir . La dispersión según la invención, ventajosamente, también es capaz de formar una capa no soluble en agua cuando es secada a una 'temperatura relativamente baja, típicamente, a una temperatura muy por debajo del punto de fusión de la sustancia hidrófoba. Adicionalmente, la dispersión de poliolefina, ventajosamente, es capaz de formar una capa delgada que no se resquebraja en el secado. La capa delgada tiene, típicamente, un grosor de 50 ]im o más bajo, preferentemente, de 20 um o más bajo, especialmente, 10 µ?a o más bajo. El limite inferior del grosor de la capa puede ser de 1-2 µp?. El grosor de la capa puede ser influenciado por el contenido en poliolefina de la dispersión. La sustancia hidrófoba usada en la dispersión para el recubrimiento de un granulado de enzima según la invención tiene, preferentemente, un punto de fusión suficientemente alto para evitar que se funda la capa de recubrimiento de la sustancia hidrófoba bajo las condiciones de la preparación del pellet de alimento animal. El punto de fusión de la sustancia hidrófoba varia, especialmente, entre 40 y 200 °C, sobre todo, entre 50 y 180 °C. Un disolvente apropiado para la dispersión de las partículas de la sustancia hidrófoba es un disolvente, en que la poliolefina no es soluble, p.ej. un disolvente hidrófilo, como p.ej. agua o etanol. Preferentemente, se usa agua como disolvente. La dispersión puede contener, típicamente,. 10 a 60 % de sustancia hidrófoba en el disolvente, preferentemente, 20 a 40 % de sustancia hidrófoba en el disolvente. Para que la dispersión permanezca estable, se pueden adicionar agentes de estabilización, tales como tensoactivos a la dispersión. La sustancia hidrófoba, preferentemente, es insoluble en agua. Puede ser una sustancia hidrófoba de grasa o cera, como p.ej. un éster triglicidílico, diglicidílico o monoglicidílico de un ácido graso superior, un alcohol graso superior, un ácido graso superior o puede ser un compuesto polímero hidrófobo .. El compúesto polímero hidrófobo es, pre erentemente, una poliolefina, especialmente, una poliolefina en la que los monómeros olefínicos (hidrocarburo) tienen una longitud de 2 a 10 átomos de carbono. Preferentemente, los monómeros de olefina tienen una longitud de 2 a 4 átomos de carbono, estando previsto a incluir, opcionalmente, monómeros con una longitud de cadena de 5 a 10 átomos de carbono en el proceso de polimerización para obtenor un polímero con ramificaciones de cadena corta. En una modalidad preferida, la poliolefinaa usada como polímero hidrófobo en la dispersión según la invención es seleccionada del grupo, que comprende: polietileno, polipropileno, polibutileno y/o polibutadieno (de acuerdo con la nueva nomenclatura, estos polímeros se denominan: polieteno, polipropeno, polibuteno, polibutadieno) . Más preferentemente, la poliolefina es polietileno y/o polipropileno . La poliolefina puede ser un polímero substancialmente lineal, es decir, un polímero no ramificado o con bajo grado de ramificación. Un polímero substancialmente lineal puede incluir, por tanto, un polímero lineal con cortas cadenas laterales, es decir, cadenas laterales con, como máximo unos 10 átomos de carbono. Preferentemente, la poliolefina tiene un . intervalo de fusión que termina a una temperatura de 100 a 200 °C (inclusive valores límite) , especialmente, de 105 a 190 °C, sobre todo, de 120 a 180 °C. En caso de polietileno, el peso molecular puede variar de 3000 - 20,000 Da. · - En una modalidad preferida de la invención, la dispersión de poliolefina es una dispersión de poliolefinas que contienen grupos acídicos estabilizados con una amina, preferentemente una amina volátil. Los grupos acídicos son, preferentemente, grupos carboxílieos y .la amina volátil es, preferentemente, amoníaco. Los grupos carboxílicos pueden ser introducidos, convenientemente, en la poliolefina, por ejemplo, por oxidación. La cantidad de grupos acídicos introducidos en la poliolefina está caracterizada por el llamado índice de ácido.

El índice de ácido de la poliolefina puede ser entre 2 y 30 (inclusive los valores límites) , preferentemente, entre 4 y 30, especialmente, entre 12 y 18, en caso de polietileno. A la dispersión de poliolefina se pueden agregar compuestos adicionales para darle características favorables. Por ejemplo, se pueden estabilizar las partículas de poliolefina físicamente con compuestos específicos para impedir una coagulación y/o una sedimentación. Además, la dispersión puede contener compuestos que facilitan la formación de una película no soluble en agua tras enfriamiento. Ejemplos de compuestos adicionales son tensoactivos o aminas . El recubrimiento de la sustancia hidrófoba se aplica, preferentemente, en 0.1 - 20% (peso de sustancia hidrófoba por peso de los granulados), especialmente, en 0.2 - 10% y, sobre todo, en 0.4 - 5%. Los porcentajes en peso usados en toda esta memoria descriptiva se refieren al peso seco y se basan, salvo indicación en contrario, en el peso del granulado seco, antes del recubrimiento . Para aplicar la sustancia hidrófoba y, opcionalmente, otro(s) material (es) de recubrimiento sobre el granulado se pueden aplicar varios métodos conocidos, que incluyen el uso de un lecho fluidizado, un granulador de alto grado de cizallamiento, un mezclador-granulador o un mezclador tipo Nauta. En un método preferido para la aplicación de la sustancia hidrófoba sobre" el granulado se pulveriza la sustancia hidrófoba como dispersión en un lecho ' fluidizado de los granulados a recubrir. El granulado a recubrir según la presente invención comprende una enzima para alimentos animales, opcionalmente, un soporte sólido y, opcionalmente, uno o más aditivos. El granulado puede comprender, típicamente, partículas de las cuales un 90% tienen un tamaño de 300 pm o más grande, ascendiendo el limite superior a unos 3 mm. Alternativamente, el granulado puede ser un microgranulado, donde el 90% de las partículas tienen un tamaño de 300 pm o menor, ascendiendo el límite inferior a 10-25 mm. El soporte sólido que puede ser usado en la preparación de los granulados es, por ejemplo, un polvo que puede ser compactado en un granulado y que, preferentemente, tiene un tamaño de partícula medio de entre 5 y 20 um. Por ejemplo, el soporte sólido puede constar, substancialmente, de un polímero de carbohidrato comestible. Las numerosas ventajas de usar un polímero de carbohidrato comestible se encuentran en la solicitud de patente WO 98/54980. ün polímero de carbohidrato comestible es un polímero de carbohidrato autorizado para ser usado como aditivo en la nutrición animal . El polímero - de carbohidrato comestible es seleccionado de manera que sea comestible para el animal que se desea alimentar con el correspondiente alimento y, preferentemente, también sea digestible. El polímero comprende, preferentemente, unidades de hexosa polímera, preferentemente unidades de glucosa polímera. Especialmente, el polímero de carbohidrato comprende unidades de a-D-glucopiranosa, amilosa -(un polímero lineal de ,(1?4) a-D-glucano) y/o amilopeclrina (un D-glucano ramificado con enlaces de a-D-(l?4) y CÍ-D-(1?6)). Almidón es el polímero de carbohidrato preferido. Otrós polímeros apropiados conteniendo hexosa , que p'ueden ser usados en lugar de o adicionalmente al almidón, incluyen a-glucanos, ß-glucanos, pectina (p.ej. proto-pectiná) , y glicógeno. Derivados de estos polímeros de carbohidrato, tales como éteres y/o ésteres de los mismos, también son posibles . Convenientemente el polímero de carbohidrato es insoluble en agua.

En otras modalidades de la invención, se pueden incorporar uno o más ingredientes adicionales en los granulados, tales como auxiliares de procesamiento y/o para mejorar aún más la estabilidad al pelletizado y/o al almacenamiento de los granulados . Una serie de tales aditivos se discuten más abajo. En una modalidad de la invención, el aditivo comprende una sal inorgánica soluble en agua (tal y como se recomienda en la EP 0 758 018) . Preferentemente, los granulados comprenden por lo menos 0.1% de una sal inorgánica soluble en agua que comprenden un catión divalente, especialmente, cinc. Especialmente, la sal inorgánica es sulfato de cinc. El producto final contiene, preferentemente, de 500 - 1,500 mg de Zn/kg de producto final, especialmente, 700 - 1,300 mg Zn/kg de producto final y, sobre todo, 900 - 1,100 mg Zn/kg de producto final. Cationes divalentes son preferidos porque proporcionan las mejores estabilidades al almacenamiento y procesamiento. El anión preferido es el sulfato porque proporciona el mejor rendimiento de secado. Las sales pueden ser adicionadas (p.ej. a la mezcla) en forma sólida. Alternativamente, se puede (n) disolver la(s) sal (es) en agua o en un liquido conteniendo enzima, por ejemplo, antes de la mezcla con el soporte sólido Se puede mejorar aún más la estabilidad al pelletizado incorporando en la formulación compuestos - hidrófobos, formadores de gel'"y/o de lenta disolución Esto se alcanza adicionando por lo menos 0.1% (p/p) , preferentemente, por lo menos 0.5%, especialmente, por lo menos 1% del compuesto deseado (con ' base en el peso de agua y, si está presente, ingredientes del soporte sólido) a la mezcla a ser elaborada en granulado. Sustancias apropiadas incluyen celulosas derivatizadas, tales como HPMC (hidroxi-propil-metil-celulosa) , CMC (carboxi-metil-celulosa) , HEC (hidroxi-etil-celulosa) , alcoholes polivinilicos (PVA) ; y/o aceites comestibles. Aceites comestibles, tales como aceite de soya o aceite de cánola pueden ser adicionados (p.ej. a la mezcla a ser granulada) como auxiliares de procesamiento. En el procedimiento de preparación del granulado se proveen la enzima y el agua, preferentemente, como liquido (preferentemente acuoso) conteniendo la enzima, como p.ej. solución o como suspensión de o derivada de un procedimiento de fermentación microbiano. Este procedimiento de fermentación es, generalmente, uno en que se produce la enzima. El procedimiento de fermentación puede resultar en un caldo que contiene microorganismos (que produjeron la enzima deseada) y una solución acuosa. Esta solución acuosa, una vez separada de los microorganismos (por ejemplo, por filtración) , puede ser el liquido acuoso, conteniendo enzima usado en la invención. Por tanto, en modalidades preferidas, el liquido acuoso, conteniendo enzima es un filtrado. Generalmente, la enzima es una forma activa. Preferentemente, el liquido es una forma concentrada, p.ej. un ultrafiltrado (ÜF) , que puede facilitar la obtención de un granulado con el nivel de actividad deseado. Si se usa un soporte sólido, entonces la cantidad en liquido contiendo enzima., (y por tanto enzima) que puede ser absorbida por el sopbrte es, generalmente limitada por el contenido de agua que puede ser absorbida. La -solución de enzima puede contener aprox. 25% (p/p) de materia seca. La cantidad de agua adicionada al soporte sólido- es tal, que (substancialmente) toda el agua en el -'líquido acuoso sea absorbida por' todos los componentes presentes en el soporte sólido. La presente invención contempla también el uso de temperaturas más altas para absorber una mayor cantidad de líquido conteniendo enzima, y esto, en efecto, es preferido cuando se trata de enzimas termoestables . Por tanto, para estas enzimas se realiza la mezcla del soporte sólido y el liquido (o enzima y agua) a una temperatura encima de 30 °C, preferentemente, encima de 40 °C y, especialmente, encima de 50 °C. Alternativamente o adicionalmente, el agua puede ser usada a esta temperatura. Generalmente, se prefieren aplicar condiciones no ¦ hinchantes para el soporte sólido (temperaturas más bajas), para minimizar pérdidas resultantes de la inestabilidad de enzimas (sensibles al calor) a estas temperaturas más altas . El liquido conteniendo enzima puede contener una o más enzima(s). Enzima(s) apropiada(s) son enzimas para alimentos animales que pueden ser incluidas en alimentos animales (inclusive alimento para animales domésticos) . La función de estas enzimas para alimentos animales consiste, frecuentemente, en aumentar el grado de conversión del alimento animal, p.ej. reduciendo la viscosidad o reduciendo el efecto anti-nutricional de ciertos compuestos . Enzimas para alimentos animales (como p.ej. fitasa) también pueden ser usadas para reducir la cantidad en compuestos en el abono que pueden ser per udiciales al medio ambiente. En una modalidad, se preparan granulados que contienen una alta concentración en enzima. Las ventajas de preparar composiciones de alta -.concentración de fitasa ya fueron descritas en la WO 98/55599. Enzimas apropiadas incluyen: fosfatasas, -tales como fitasas (tanto 3-fitasas -como 6-fitasas) y/o fosfatasas ácidas, carboñidrasas, tales como enzimas amiloliticas y/o enzimas degradantes de la pared celular- vegetal, inclusive celulasas, taies como ß-glucanasas y/o hemicelulasas, tales como xilanasas o galactanasas y/o pectinasas, proteasas o peptidasas, tales como lisozima galactosidasas, esterasas, lipasas, fosfolipasas, tales como las fosfolipasas ?2 pancreáticas mamiferas y glucosa oxidasa. Preferentemente, la enzima para alimento animal es por lo menos una enzima seleccionada del grupo, que abarca: fitasas, xilanasas, ß-glucanasas, proteasas, fosfolipasas y glucosa oxidasas. Especialmente, la enzima para alimentos animales es por lo menos una enzima seleccionada del grupo de las fitasas y xilanasas . Si la enzima es una fitasa, entonces el granulado final puede tener, preferentemente, una actividad enzimática de 4,000 a 20,000 FTU/g, especialmente, de 5,000 a 20,000 FTU/g, sobre todo, de 5,000 a 15,000 FTU/g. Una unidad de fitasa (FTU) se define en la presente, como la cantidad de enzima que libra 1 umol de fosfato inorgánico por minuto de fitato sódico (0.0051 mol/litro) a 37°C y a un pH de 5.5, siendo preciso que la actividad de fitasa se haya determinado según el procedimiento del "ISL-method 61696" (ensayo manual de molibdato-vanadato) . Si la enzima es una xilanasa, entonces el granulado final puede tener, preferentemente, una actividad enzimática de 5,000 a 100,000 EXU/g, especialmente, de 10,000 a 100,000 EXU/g, y, sobre todo, de 15,000 a 100,000 EXU/g. Una unidad de endo-xilanasa (EXU) se define, en la presente, como la cantidad de enzima que libra 4.53 umol de azúcares reductores, medido como equivalentes de xilosa, por minuto bajo las condiciones del método' "ISL-method 61731". Los métodos ISL se obtienen a pedido de DSM, Food Specialties, Agri Ingredients, A. Fleminglaan 1, P.O. Box 1, 2600 MA, Delft', Holanda. Adicionalmente a estas enzimas para-' alimentos animales, se puede aplicar la presente invención igualmente a polipéptidos no enzimáticos con actividad biológica, tales como determinantes antigénicos a ser usados como vacunas y/o polipéptidos preparados de manera, que contengan un contenido incrementado en aminoácidos esenciales, cuya actividad biológica puede ser sensitiva a un inactivación térmica. El granulado a ser recubierto según la invención puede ser preparado secando una solución acuosa, conteniendo enzima, por ejemplo, un ultrafiltrado descrito más arriba, especialmente por pulverización o secado de múltiples etapas. Opcionalmente, se pueden agregar aditivos antes o durante el secado, por ejemplo, auxiliares de- elaboración o para mejorar la estabilidad al pelletizado. Además, se puede adicionar un compuesto o material inerte durante el secado, por ejemplo, una sal inorgánica, maltodextrinas, harina granulada, resultando en un llamado co-secado. Alternativamente, el granulado a recubrir puede ser preparado por procesamiento mecánico de una mezcla de enzimas, agua (p.ej. liquido contiendo enzima), un soporte sólido y, opcionalmente, aditivos, mediante métodos frecuentemente aplicados en procedimientos de formulación de alimentos, alimentos animales y enzimas Este procesamiento mecánico abarca, por ejemplo: expansión, extrusión, esferonización, pelletizado, granulación desmenuzadora, granulación en tambor, aglomeración en lecho fluidizado o combinaciones de los mismos. Generalmente, estos procedimientos están caracterizados por un aporte de energía mecánica, tal como rotación de un tornillo o un mecanismo de mezcla, la presión de un mecanismo de laminación o un aparato de pelletizado, el movimiento de las "'partículas por medio de una placa base rotativa de un' aglomerador de lecho fluidizado o- el movimiento de las partículas mediante una corriente de gas, o una combinación de estos métodos. Estos procedimientos permiten mezclar el soporte sólido (p.ej. en forma de un polvo) con la enzima y el agua, por ejemplo, un líquido conteniendo enzima (una solución o suspensión acuosa) y, luego granularlos. Alternativamente, se puede mezclar el soporte sólido con la enzima (p.ej. en forma de polvo) a la que se agrega agua, p.ej. un liquido (o una suspensión) (que puede actuar como liquido de granulación) . En otra modalidad de la invención se forma el granulado (p.ej. aglomerado) pulverizando el liquido conteniendo enzima sobre el soporte o recubriendo el soporte con el liquido conteniendo enzima, por ejemplo, en un aglomerador de lecho fluidizado.' En tal caso, los granulados pueden representar aglomerados tal y como pueden ser producidos en un aglomerador de lecho fluidizado. Preferentemente, la mezcla del liquido conteniendo enzima con el soporte sólido comprende, adicionalmente, el amasado de la mezcla antes de la extrusión. Esta medida puede mejorar la plasticidad de la mezcla para facilitar la granulación. Si el granulado es conformado por extrusión, esto se realiza, preferentemente, a baja presión. Esto puede ser ventajoso en el sentido que la temperatura de la mezcla a extrusionar no aumenta o solo aumenta ligeramente. Extrusión a baja presión, incluye, por ejemplo,. la extrusión en una extrusionador Fuji de tipo Paudal o una extrusionadora de césped o de cúpula. El extrudado obtenido puede ser sometido a un redondeamiento (p.ej. . esferonización) , por ejemplo, en un Marumeriser™ y/o una'" compactación. El extrudado puede ser esferonizado antes del secado, ya que de esta manera se puede reducir la formación de polvo en el granulado -final y/o puede facilitar cual'quier recubrimiento del granulado. · Los granulados pueden ser secados, luego, por ejemplo, en un secador de lecho fluidizado, o en caso de la aglomeración, en lecho fluidizado, pueden ser secados inmediatamente (en el aglomerador) para obtener granulados (sólidos, secos) . Otros métodos conocidos para secar granulados en la industria alimentaria, de nutrición animal o enzimas pueden ser aplicados por el perito. Convenientemente, el granulado es de flujo libre. El secado tiene lugar, preferentemente, a una temperatura de producto 25 a 60 °C, preferentemente, de 30 a 50°C. El granulado seco asi obtenido es recubierto, luego, con una dispersión según la invención. La presente invención prevé además, que un granulado pueda ser recubierto con una capa de recubrimiento diferente que la capa de recubrimiento de la sustancia hidrófiba antes de aplicar la dispersión de la invención. Preferentemente, el granulado asi obtenido tras recubrimiento tiene una distribución de tamaño relativamente estrecha (p.ej, es monodisperso) . Esto puede facilitar una distribución homogénea del granulado de enzima en los pellets de alimento animal . El procedimiento de la invención tiende a producir granulados con una estrecha distribución de tamaño de partícula. Los granulados pueden tener una forma irregular (pero, preferentemente, regular) , por ejemplo, aproximadamente esférica. De ser necesario, se puede incluir una etapa adicional en el procedimiento para reducir aún más la distribución de tamaño de los granulados, por ejemplo, cribado. El granulado' conteniendo enzima obtenido mediante el procedimiento de la invención (que representa otro aspecto de la invención) procura resolver o por lo menos reducir los problemas que se existen en- el estado anterior. 'de la técnica. Estos granulados recubiertos tienen una alta estabilidad al pelletizado y un corto tiempo de disolución, en comparación con granulados clásicos recubiertos con grasa. Por tanto, la invención provee un granulado conteniendo enzima, obtenido mediante el procedimiento arriba mencionado y que tiene las características siguientes. El granulado consta de granos que contienen una enzima para alimentos animales, opcionalmente, un soporte sólido, y, opcionalmenre, uno o más aditivos, recubierto con una capa de sustancia hidrófoba.

El granulado de la invención es apropiado para ser usado en la preparación de alimentos animales . En estos procedimientos, el granulado es mezclado con sustancias alimenticias, como tal, como parte de una premezcla o como precursor de un alimento animal. Las características del granulado según la invención permiten su uso como componente en una mezcla bien apropiada como alimento animal, especialmente, si la mezcla es tratada con vapor, luego pelletizada y, opcionalmente secada. Por tanto otro aspecto de la presente invención se refiere a un procedimiento para la preparación de un alimento animal o una premezcla o precursor de alimento animal, cuyo procedimiento comprende mezclar el granulado proporcionado por la presente invención con una o más sustancias o ingredientes nutritivos para animales . La presente invención se refiere, adicionaImente, a un procedimiento .para fomentar el crecimiento de un animal, que comprende alimentar el animal con una dieta que comprende el granulado de la presente invención. Aquí la dieta para el animal puede incluir el granulado mismo, o el granulado presente en el alimento.. Animales apropiados son: ganado, cerdos y aves y peces."-- Otro aspecto de la invención se refiere a una composición, que comprende el granulado de la invención, cuya composición es, preferentemente, una composición comestible, por ejemplo, un alimento animal. Todavía -otro aspecto de la presente invención se refiere al uso del granulado de la invención en, o como componente de un alimento animal a ser usado en una dieta animal.

Propiedades y características preferidas de un aspecto de la invención son igualmente aplicables mutatis mutandis a otras . Los siguientes Ejemplos son meramente ilustrativos de la invención y no deben entenderse como limitativos de la misma.

EJEMPLOS Métodos generales Preparación de granulado que contiene fitasa Granulado que contiene fitasa se prepara de acuerdo con el procedimiento descrito en la WO98/54980.

Etapa de acondicionamiento/pelletizado : 50 gramos de granulado se mezclan con 10 kg del alimento de la premezcla elegida y recién antes del ensayo con 240 kg de la misma receta. Esta mezcla de 250 kg es dosificada mediante un tornillo de dosificación con una velocidad de 600 kg/h en un mezclador/acondicionador, donde es calentada mediante una corriente directa a unos 80 °C. El tiempo de residencia asciende a unos 30-40 segundos, después de lo cual se empuja la mezcla caliente en la. prensa de pelletizado. Los pellets que salen de la tobera tienen una temperatura de entre 80 y 82°C y caen en una cinta de enfriamiento. De esta cinta se sacan muestras para' la medida de la estabilidad. Alimento de aves usado para el análisis de la estabilidad al pelletizado: Maíz (50%), "'alverjas (5%), harina de soya (28%), tapioca (1.98%), harina de pescado (2.5%), harina de pluma (1.5%), aceite de soya (1.75%), grasa animal (3.5%), Mervit (Premervo, Utrecht, Holanda) 100 (1%), piedra caliza (1.1%), fosfato de monocalcio (1.22%), sal (0.3%), Mervit 394 (0.65%), Mervit 393 (1.5%), hasta un total de 100%.

Análisis de la actividad de fitasa en pellets de alimentos animales : La actividad de fitasa fue determinada según el procedimiento del método "ISL-method 61696" (ensayo manual de molibdato-vanadato) .

Ejemplo 1 300 gramos de granulado no recubierto (carga NPHG 498) se colocaron en un aparato de lecho fluidizado STREA de NIRO-AEROMATIC. Con un dispositivo de pulverización en la cabeza (husillo de dos fases) se pulverizaron varias capas sobre los granulados a como se indica en la Tabla 1. Estos granulados recubiertos se examinaron en el ensayo de pelletizado a como se describe bajo "Métodos generales".. Granulado HS es un granulado recubierto con una capa de grasa + anti-apelmazado (>30%) (obtenido de Novo Nordisk, No de carga. HF 98011450) .

Tabla 1 : Actividad de fitasa residual en alimento para aves en % tras acondicionamiento/pelletizado a 80/81°C.

Sorprendentemente, el tiempo de disolución del granulado no parece tener correlación con su estabilidad al pelletizado. El parámetro ' más importante para la optimización es el tiempo de disolución, ya que este determina la disponibilidad biológica de enzima para el animal. Los recubrimientos de las muestras C y F se compraron de Paramelt B.V. (Heerhugowáard, Holanda) y las muestras D y E de DSM Research (DSM N.V., Geleen, Holanda).

Ejemplo 2 El efecto de la dispersión de recubrimiento 1205 sobre la estabilidad al pelletizado de granulado conteniendo fitasa se examinó en una producción a alta escala En una máquina de lecho fluidizado GPCG 300 de Glatt se recubrieron 300 kg de granulado no recubierto, preparado en la forma descrita bajo "Métodos generales", con 120 kg de dispersión 1205 á 19.5% de materia seca (muestra L) y otra carga con 60 kg de solución de PEG 6000 á 50% de materia seca (muestra K) . Este granulado recubierto fue examinado en un ensayo de pelletizado junto con el producto no recubierto (muestra H) y granulado HS de un competidor (muestra M) en la forma descrita bajo "Métodos generales". Los resultados figuran en la Tabla 2.

Tabla 2: Actividad de fitasa residual en alimentos para aves en % tras acondicionamiento/pelletizado a 80/80°C.

Ejemplo 3 En una máquina de recubrimiento de lecho fluidizado Glatt GPCG 1.1, se recubrió 1 kg de granulado no recubierto, preparado en la forma descrita bajo "Métodos generales", con diferentes recubrimientos indicados en la* Tabla 3. Las muestras O fueron recubiertas con una fusión a una temperatura de 80 °C. La muestra P fue recubierta con una dispersión de caseinato de sodio y grasa de coco hidrogenada hecha en casa.

Tabla 3 : Actividad de fitasa residual en alimentos para aves en % tras acondicionamiento/pelletizado a 80/80°C.

Los varios recubrimientos de grasa examinados (con excepción del recubrimiento M del granulado HS) proporcionan un corto tiempo de disolución al granulado, pero la estabilidad al pelletizado del granulado recubierto no es mejorado significantemente, en comparación con el granulado no recubierto (muestra N) .

Ejemplo 4 Se examinó la influencia de diferentes concentraciones de la dispersión 1205 (2 a 24%, muestras S a V) sobre la estabilidad al pelletizado y el tiempo de disolución del granulado. Se prepararon granulados en la forma descrita bajo "Métodos generales". Los granulados fueron recubiertos en la forma indicada en la Tabla 4 y examinados en un ensayo de pelletizado en la forma descrita bajo "Métodos generales". Los resultados figuran en la Tabla 4.

Tabla 4: Actividad de fitasa residual en alimentos para aves en % tras acondicionamiento/pelletizado a 80/80 °C.

La concentración del polietileno aplicado para el recubrimiento del granulado parece tener una correlación positiva con el tiempo de disolución del granulado.

Ejemplo 5 En este Ejemplo se examinó la influencia de una dispersión de polipropileno (PP) y de dispersiones de polietileno (PE) de diferentes proveedares . Se preparó granulado no recubierto en la forma descr-ita bajo "Métodos generales". Luego se recubrió el granulado en la forma descrita bajo "Métodos generales". Entonces se examinó el granulado en l forma indicada en la Tabla 5 y se examinó en un ensayo de pelletizado en la forma descrita bajo "Métodos generales". Los resultados figuran en la Tabla 5.

Tabla 5 : Actividad de fitasa residual en alimentos para aves en % tras acondicionamiento/pelletizado a 80/80 °C.

Todos los tres recubrimientos, las muestras de Permanol (X+Y) de Clariant GmbH, Frankfurt del Meno) y la dispersión 1205 de- Paramelt BV dieron un valor de actividad residual aproximadamente dos veces más alto, que la muestra no recubierta, teniendo todavía el mismo tiempo de disolución. El Permanol 6?1 es un recubrimiento de polipropileno con un punto de fusión más alto (30°C más alto) que el polietileno, pero también con un tamaño de partícula más grande (10 veces más grande) en la dispersión, en comparación con la dispersión 1205.

Ejemplo 6 En este Ejemplo se comparó de diferente una dispersión de polipropileno (PP) con dispersiones y de' olietileno (PE) de diferentes proveedores . Se preparó granulado no recubierto en la forma descrita bajo "Métodos generales". Luego se recubrió el granulado en la forma descrita bajo "Métodos generales". Entonces se examinó el granulado en la forma indicada en la Tabla 6 y se examinó en un ensayo de pelletizado en la forma descrita bajo "Métodos generales". Los resultados figuran en la Tabla 6 Tabla 6 : Actividad de fitasa residual en alimentos para aves en % tras acondicionamiento/pelletizado a 80/80°C.

Todos los tres recubrimientos, las muestras de Permanol (C, D, E) de Clariant GmbH, Frankfurt del Meno, la dispersión 1286 de Paramelt BV (B) y los recubrimientos de Poligen E6 y WE7 (F, G) de BASF Aktiengesellschaft, Ludwigshafen, dieron una actividad residual significantemente más alta que la muestra no recubierta, asegurando a la vez el mismo tiempo de disolución.

Claims (20)

REIVINDICACIONES :

1. Un procedimiento para la obtención de un granulado conteniendo enzima apropiado para ser usado en alimentos animales, que comprende preparar un granulado seco conteniendo enzima y recubrir el granulado con una sustancia hidrófoba dispersada en un disolvente.

2. Un procedimiento según la reivindicación 1, en donde las partículas tienen un tamaño que varía de 10 a 1000 nm (inclusive valores límite) , preferentemente, de 10 a 500 nm, especialmente, de 10 a 200 nm.

3. Un procedimiento según las reivindicaciones 1 ó 2, en donde la sustancia hidrófoba tiene un punto de fusión entre 40 y 200 °C, preferentemente, entre 50 y 180 °C.

4. Un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 - 3, en donde la sustancia hidrófoba es aplica en un 0.1 -20% (peso de sustancia hidrófoba por peso del granulado) , preferentemente, at 0.2 - 10%, especialmente, at 0.4 - 5%.

5. Un procedimiento segú-?· cualquiera de las reivindicaciones 1 - 4, en donde es disolvente es agua.

6. Un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 - 5, en donde la dispersión de sustancia hidrófoba contiene 10 a 60 % (p/p) de sustancia hidrófoba, pfeferentemente, 20 a 40 % de sustancia hidrófoba.

7. Un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 - 6, en donde la sustancia hidrófoba es una sustancia en forma de grasa o cera y/o un polímero hidrófobo.

8. Un procedimiento según la reivindicación 7, en donde el polímero hidrófobo es una poliolefina.

9. Un procedimiento según la reivindicación 8, en donde la poliolefina es polietileno y/o polipropileno.

10. Un procedimiento según las reivindicaciones 8 ó 9, en donde la dispersión de poliolefina es una dispersión de poliolefinas conteniendo grupos acídicos, estabilizada con una amina.

11. Un procedimiento según la reivindicación 10, en donde los grupos acídicos son grupos carboxílicos .

12. Un procedimiento según las reivindicaciones 10 ó 11, en donde la amina es amoníaco.

13. Un procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 1 - 12, en donde la enzima es una fitasa, xilanasa, ß-glucanasa, proteasa, fosfolipasa, amilasa y/o glucosa oxidasa.

14. Un granulado conteniendo enzima recubierto con una dispersión de partículas que constan, esencialmente, de una sustancia hidrófoba' obtenida mediante un procedimiento según cualquiera de -las reivindicaciones 1 a 13.

15. Un procedimiento para la obtención de un alimento animal, o una premezcla o precursor de un alimento animal, cuyo procedimiento comprende mezclar un granulado según la reivindicación 14 con una o más sustancias o ingredientes de alimento animal.

16. El procedimiento según la reivindicación 15, en donde la mezcla de la(s) sustancia (s) de alimento y el granulado es tratada con vapor, pelletizada y enfriada

17. üna composición de alimento animal que comprende un granulado según la reivindicación 14.

18. Un procedimiento para fomentar el crecimiento de un animal, que comprende alimentar el animal con una dieta, que comprende o bien un granulado según la reivindicación 14 o una composición según la reivindicación 17.

19. Uso de un granulado según la reivindicación 14 en un alimento animal o como componente de una dieta para un animal .

20. Uso de un granulado según la reivindicación 14 para mejorar la estabilidad al pelletizado de la enzima.