LU87202A1

LU87202A1 - Utilisation de certains 17-cetosteroides,eventuellement avec un immuno-modulateur et/ou un agent antiviral,pour fabriquer un medicament pour le traitement et la prevention des infections retrovirales

Info

Publication number: LU87202A1
Application number: LU87202A
Authority: LU
Inventors: Patrick Thomas Prendergast
Original assignee: Patrick Thomas Prendergast; Colthurst Ltd
Priority date: 1987-04-16
Filing date: 1988-04-15
Publication date: 1988-11-17
Also published as: DE3812595C2; DE3812595A1; JPS6425722A; PT87259B; FI881773A0; CA1325594C; FI881773A; KR880012233A; DK208188A; DK208188D0; KR960014988B1; GB8808864D0; BE1004315A5; JP2577771B2; IL86089A; NL8800926A; SE503482C2; GR1002240B; ATA98488A; GB2204237B

Description

, „ ,, ^ -r„ ^ ^-.Doa/ > Γ ; ft 7 9 0-2 GRAND-DUCHÉ DE LUXEMBOURG " - - -

Brevet N° , ...... Monsieur le Ministre du 15 avril 1988_ , de l’Économie et des Classes Moyennes =«>i§ , Service de la Propriété Intellectuelle

............................—— I.....|jp LUXEMBOURG

Demande de Brevet d’invention ---:---_— ------------------------------------------------ (i) I. Requête

La société.......dite:.......COLTHURST LIMITED.„„„Baybush,......StraffanCountyr 2)

Kildare. Irlande et Monsieur Patrick Thomas PRENDERGAST, Baybush Straffan. Countv Kildare. Irlande, représentés par Maître Alain RUKAVINA, avocat-avoué, demeurant à Luxembourg.__10A. boulevarffi) de la Foire, agissant en sa qualité de mandataire,_____________________ déposefnt)ce Quinze avril 1900 auatre-vingt-huit__________________________________________ ( 4) à -15. Q0___heures, au Ministère de l’Économie et des Classes Moyennes, à Luxembourg: 1. la présente requête pour l’obtention d’un brevet d’invention concernant: "Ut 11 isation_,de.......certains 17-cétostéroïdes,........éventuellement_______ ( 5) avec.......un.......imm.ynQ-niQ.dul.at.e.ur-.....e..ti.Qu.....uri-.r.agerit......antiyl.r.al..,..._..p.Q.ur._______________ fabriquer un.....médicament pour.......le traitement......et-la.-préven.t.ion......des infections rétrovirales"_______________________________________________________________________ 2. la description en langue _____________________de l’invention en trois exemplaires; 3............t.E.Q.i.s_______planches de dessin, en trois exemplaires; 4. la quittance des taxes versées au Bureau de l’Enregistrement à Luxembourg, le 1.5..„..av.r.i..l.....i„9..8.8.__________; 5. la délégation de pouvoir, datée de .„Dublin_________________________________ le .1.8—mars 19-88________________; 6. le document d’ayant cause (autorisation); déclare(nt) en assumant la responsabilité de cette déclaration, que l’(es) inventeurs) est (sont): ( 6)

Monsieur......Eatrick-..T.hamas-...P.REND.E.RGAS.T...,...-Ba-y:busb.,.........Straffan·,____________ .C.o.untyi.....K.ild.are..t.......I.rl.and.e__________________________________:._____________________________ revendique(nt) pour la susdite demande de brevet la priorité d’une (des) demande(s) de ( 7) .fe.E.eve.t...âLinvênt..ion_______________________________________......déposée(s) en(8) ...Irlande...........................- ______________ le (9).......(.1,.)........ifi......jmill......1..9..8..Z......et.....,(,.2.).-2.?...-aQ.û.t„..l.,9A2_________________________________________________________________________________ sous le N° (10).....(.1.).......99Z/aZ.....^__________.....

au nom de (11) C..1...).—E.l.xzah.e±ii.^HANAHÀN=i?.REND.ERGÂS.T..v—Ρη·1·ρ1ο1ΐ···"·Ε1:ν/'&ΐ!?·ά-······(···ν·Θ·'ΐ·Γ c ; élit(élisent) domicile pour lui (elle) et, si désigné, pour son mandataire, ^Luxembourg —______________________contre ' lM.r......JbQ.uievârd......de.....i.a.....£oire...Î±..:::..:.............Z:..::......______: (12) sollicite(nt) la délivrance d’un brevet d’invention pour l’objet décrit et représenté dans les annexes susmentionnées, avec ajoumemontde cette délivrance à ........................______________________________________________________________________________________________________________________________mois. (13)

Le déposant/m|mmtairer/.............................................................χ___________________________________________________________________.1...............^.............................................................. (14) 1 (IAA/Μ AjV Π. Pbocès-verbal de Dépôt

La susdite ^demande de brevet .d’inveirtiaQ a été apposée au Ministère de l’Économie et des Classes Moyennes, Service de/la Propriété Intellécfù Jfîe a*î^e^obourg, en date du: 15 avr i 11988 ii $§(&··, ' I a S t 8Γ· le Ministre de l’Économie et des Classes Moyennes, _ - - à 15,..,00,,1,.heares. Mj I M- xi Le chef.du service^uria propriété intellectuelle, A68007 -_- - - / Y__~ .

üf Λ !j- EXPLICATIONS RELATIVES AU FORMULAIRE DE DÉPÛT. / 1 - / I I K _ (1) s’il y a lieu “Demande de certificat d’addition au brevet principal, à la demande de brevet principal No..yrM, jr. du. J.........(2) inscrire les nom, prénom, profession, ' T \ - - adresse du demandeur, lorsque celui-ci est un particulier ou les dénomination socialeHonne juridique» adresse du si&^ocial, lorsque le demandeur est une personne morale- (3) inscrire _ g les nom, prénom, adresse du mandataire agrée, conseil en propriété industrielle, muni d’un pouvoir spécial, s’il y bL/Tu: "représenté par .......agissant en qualité de mandataire” - w "-f — =^4) date de dépôt en toutes lettres - (5) titre de l’invention - (6) inscrire les noms, prénoms, adresses des inventeurs ouf indication "(voir) désignation séparée (suivra)”, lorsque la dési- —( i) -r / gnation se fait ou se fera dans un document séparé, ou encore l’indication ”ne pas mentionner”, lorsque l’inventeur signe ou sigriëraun document de non-meruion à joindre à une désignation i * liLSt Λ , *

Revendication ds la priorité de(s) la dc-rrrrq..'-) correspondante(s) déposéc(s) e.i JaMaüL·.--.

le s-ÀL û^JÂ .-- sous lein°j d'ûïiïSm'__

BREVET D'INVENTION

Utilisation de certains 17-cétostéroîdes, éventuellement avec un immunomodulateur et/ou un agent antiviral, pour fabriquer un médicament pour le traitement et la prévention des infections rétrovirales

COLTHURST LIMITED ET PATRICK THOMAS PRENDERGAST

« » ' ‘ 1 / m

s I

La présente invention concerne L'utilisation des certains 17-cétostéroïdes, éventuellement avec un immunomodulateur et/ou un agent antiviral, pour fabriquer un médicament pour le traitement et la prévention des 5 infections rétrovirales.

Plus particulièrement, l'invention concerne l'utilisation de certains 17-cétostéroides dans la prophylaxie et le traitement des infections rétrovirales ou d'une complication ou d'une conséquence de celles-ci, 10 notamment dans La prophylaxie et le traitement des infections rétrovirales conduisant à une déficience du système immunitaire entraînant le développement d'infections opportunistes et de certains cancers. L'invention concerne notamment l'utilisation des 17-cétostéroïdes 15 dans la prophylaxie et le traitement des infections rétrovirales semblant être responsables du syndrome immunodéficitaire acquis (SIDA) et de la maladie apparentée, le para-SIDA (ARC). Le SIDA et le para-SIDA semblent résulter d'une infection par Le virus HIV (HUMAN 20 IMMUNODEFICIENCY VIRUS), des anticorps contre celui-ci étant présents dans le sérum de presque toutes les personnes pour lesquelles le diagnostic de SIDA ou de para-SIDA a été porté. Le virus LAV CLymphadenopathy Associated Virus) et Le virus HTLV-III (Human T-lympho-25 tropic Virus Type III), de même que des rétrovirus apparentés, ont été isolés d'un grand nombre de patients atteints de SIDA. Tous ces virus ont en commun des caractéristiques importantes. On considère maintenant qu'HTLV-III et LAV sont des souches du même virus que 30 l'on a appelé HIV (Human Immunodeficiency Virus).

Le SIDA est une maladie caractérisée par une perte de l'immunité à médiation cellulaire et le développement d'infections opportunistes fréquentes et finalement mortelles. La définition permettant de porter le 35 diagnostic clinique du SIDA est l'"apparition d'une * *4 λ 2 maladie permettant de prévoir une déficience de l'immunité à médiation cellulaire apparaissant chez un individu ne présentant aucune cause connue de diminution de la résistance à cette maladie" CLane H.C. et Fauci A.S., 5 Ann. Rev. Immunol. 1985, 3, 477-500).

Le terme HIV tel qu'on l'utilise englobe les rétrovirus HIV-1 ou HIV-2 (Human Immunodeficiency Virus Type 1 et Human Immunodeficiency Virus Type 2) qui ont été découverts en 1983. L'HIV attaque, en en réduisant 10 le nombre, un sous-groupe des globules blancs du sang appelés lymphocytes T. Une molécule appelée CD.4 est exprimée sur la surface cellulaire de ces lymphocytes T (ces cellules sont également appelées cellules T4). Ces lymphocytes, qui, pour la plupart, font partie du sous-15 groupe fonctionnel défini comme auxiliaire/inducteur, constituent La majeure portion des cellules T matures.

Un autre sous-groupe majeur des cellules T exprime La molécule CD8 sur la surface cellulaire (ces cellules sont également appelées cellules T8). La plupart de ces 20 cellules font partie du sous-groupe suppresseur/cytotoxique. Normalement, le rapport T4/T8 est de 1,5 à 2,0. Cependant, chez les patients atteints de SIDA, ce rapport est inversé par suite d'une diminution du nombre absolu des cellules T4, tandis que le nombre normal des 25 cellules T8 est généralement maintenu.

Les cellules T4 reconnaissent spécifiquement les antigènes qu'elles rencontrent dans l'organisme et prolifèrent par réaction avec eux et en même temps libèrent diverses protéines appelées lymphokines qui assurent la 30 régulation d'autres cellules du système immunitaire. Sur l'indication des cellules T4, les cellules lymphocytaires B reconnaissent Les antigènes et secrétent des anticorps spécifiques pour neutraliser ou éliminer les bactéries ou virus antigéniques lorsqu'ils passent dans les 35 liquides de l'organisme entre les cellules. De façon * ' ‘ * 3 semblable, sur l'indication des cellules T4, les cellules T cytotoxiques ("T8") sont activées pour tuer les cellules infectées par des agents pathogènes intracellulaires. De plus, les cellules T4 modulent les activités 5 des cellules du système immunitaire appelées cellules tueuses naturelles et macrophages qui interviennent dans la réponse à l'infection et peut-être aux affections malignes à leur début.

Un phénomène critique précoce dans l'infection à 10 HIV comprend la fixation du virus par l'intermédiaire de la glycoprotéine de son enveloppe à un récepteur sur la surface d'une cellule T4 sensible, la molécule CD4. La molécule CD4 à la surface des cellules T4 semble caractériser les cellules cibles potentielles de l'HIV et 15 agir comme une molécule réceptrice qui fixe le virus et permet l'infection et la réplication virale ultérieure, de même que les conséquences cytopathogènes de l'infec-ti on vi raie.

L'immunodéficience du SIDA établit clairement 20 l'importance des lymphocytes T4. Par suite de la perte de ces cellules, Les lymphocytes T restants des patients atteints de SIDA présentent une diminution ou une absence de réponse aux antigènes et assurent une production inférieure à la normale des facteurs immunorégula-25 teurs essentiels. Par suite de la diminution de Leur nombre et de leur capacité fonctionnelle, Les cellules T4 sont incapables de jouer leur rôle nécessaire en assurant la direction de la maturation des cellules B et des cellules T cytotoxiques. La capacité des patients 30 atteints de SIDA à élaborer des anticorps par réaction à de nouveaux antigènes est fortement compromise, bien que, paradoxalement, des taux élevés d'anticorps dirigés contre des antigènes précédemment rencontrés, y compris l'HIV, soient souvent présents dans les sérums des 35 patients (Institute of Medicine, National Academy of . k ' * * 4

Science, Confronting AIDS, Washington DC National Academy Press 1986, pages 37-44 et 177-199).

Actuellement, le SIDA et le para-SIDA sont principalement observés dans certains groupes à risques éle-5 vés, tels que Les homosexuels, les drogués par injection intraveineuse et les personnes ayant reçu des transfusions multiples ou des produits dérivés du sang, tels que le facteur VIII. Les donneurs de sang font actuellement l'objet d'un dépistage systématique des anticorps 10 anti-HIV et par conséquent, dans L'avenir, la propagation de l’HIV par les transfusions sanguines et tes produits dérivés du sang ne devrait pas, espérons-le, contribuer à la transmission du SIDA. Le SIDA s'observe également de plus en plus dans la population hétéro-15 sexuelle.

Il est de plus en plus établi que l'infection des macrophages/monocytes est un facteur capital de la persistance et de La progression de L'infection par l 'HIV, de l'amorce des lésions cérébrales observées dans 20 le SIDA et dans le déclenchement de l'effondrement du système immunitaire, qui se manifeste finalement par une chute profonde des Lymphocytes T4. Crowe et coll. ont démontré, en utilisant l'anticorps anti-HIV p24 que les monocytes/macrophages peuvent être infectés par l'HIV.

25 Us ont démontré que jusqu'à 70 % des cellules des donneurs individuels peuvent être infectées (AIDS Research and Human Retroviruses, Vol. 3, No.2, 1987, page 135). Nicholson et coll. ont proposé un effet induit par l'HTLV-III/LAV sur la fonction des monocytes 30 plutôt que Cou en plus de) une déficience intrinsèque des cellules T survivantes pour expliquer les anomalies observées des déterminations relatives aux cellules T qui sont dépendantes des monocytes telles que la synthèse d'Ig induite par le mythogène pokeweed et les 35 réactions prolifératives aux antigènes solubles. Ces * * v * * 5 déterminations relatives aux cellules T ont été précédemment indiquées comme anormales, même lorsque la détermination porte sur des sous-groupes des cellules T (The Journal of Immunology, Vol. 137, No. 1, 1986, page 5 323).

Comme il est bien établi que le premier phénomène qui appara+t lorsqu'une matière étrangère (par exemple un virus) pénètre dans l'organisme est sa fixation par des phagocytes mononucléaires, il est concevait) ble que ces cellules représentent une cible principale de l'HIV. Gartner et coll. ont montré que la production de virus par des macrophages infectés par HTLV III/LAV est importante et prolongée, ce qui indique que ces cellules peuvent jouer un rôle dans la dissémination et 15 la persistance du virus. Ils ont démontré que la réplication d1HTLV-III/LAV dans les macrophages est intense dans les cas qu'ils ont évalués (Science, Vol. 233, 1986, page 215).

Salahuddin et coll. ont observé, qu'in vitro, 20 les macrophages pulmonaires peuvent être infectés par HTLV-IÏI et semblent être moins sensibles aux effets cytopathogènes de ce rétrovirus, ce qui suggère que les macrophages tissulaires peuvent être considérés comme des réservoirs potentiels d'HTLV-III in vivo CBlood, 25 Vol. 68, No. 1, 1986, page 281).

Ho D.D. et coll. ont observé que les monocytes/ macrophages dérivant du sang normal sont sensibles à l'infection in vitro par l'HTLV-III (Human T Lymphotro-pic Virus III), l'agent étiologique du SIDA. De plus, 30 L'HTLV-III a été récupéré à partir de monocytes/macro-phages de patients infectés par ce virus. On a donc émis l'hypothèse que les monocytes/macrophages infectés par HTLV-ÏÏI peuvent servir de véhicule pour La dissémination du virus aux organes cibles et de réservoir de la 35 persistance virale, comme cela a été observé pour . » ‘ * i , 6 d'autres virus Lents, tels que Le virus du visna ou le virus de l'arthrite-encéphaLite caprine CJ. Clin. Invest., Vol. 77, 1986, page 1712).

Bien qu'un agent antiviral susceptibLe de tuer 5 tous Les HIV infectieux ou d'inhiber complètement Leur réplication Cet possédant simultanément un profîL de toxicité acceptable) soit très souhaitable, la situation actuelle est qu'on ne dispose pas d'un tel agent.

Grèce à la meilleure compréhension du rôle que 10 les macrophages peuvent jouer dans la pathogenèse du SIDA, il est évident qu'une stratégie antivirale efficace nécessite une approche permettant de traiter les macrophages infectés et d'inhiber l'infection de ces cellules. Actuellement, les seuls agents antiviraux 15 approuvés par la F.D.A. pour Le traitement du SIDA sont l 'azidothymidine CAZT) et l'iséthionate de pentamidine CPENTAM 300). Comme démontré ci-après, l'AZT est totalement inefficace pour inhiber l'infection des macrophages ou moduler la production d'HIV par les macrophages 20 infectés. L'administration d'AZT pendant des périodes prolongées s'est révélée provoquer des effets secondaires indésirables, tels qu'une anémie nécessitant une transfusion sanguine, une leucopénie et une neutropénie.

La grande majorité des composés antiviraux sont 25 des nucléosides, y compris par exemple l'AZT.

Beaucoup des 17-cétostéroïdes agissent comme des hormones et comprennent Les hormones sexuelles ou leurs précurseurs et les hormones qui règlent le métabolisme. La déhydroépiandrostérone (DHEA) est un de ces 17-céto-30 stéroïdes qui est un précurseur des androgènes et des oestrogènes et a de plus des effets métaboliques importants. Ces effets résultent de son activité inhibitrice d'enzymes telles que 1a glucose-6-phosphate dés'nydrogé-nase et la NADH oxydase. De plus, la DHEA a un effet 35 inhibiteur sur l'activité mitotique et sur la perméabi- , I v » , 7

Lité des membranes CJiri Sonka, Acta Universitatis Carolinae Medica Monographie LXXI - 1976). L'effet de la DHEA sur des enzymes, telles que la glucose-6-phosphate déshydrogénase et la NADH oxydase, provoque principale-5 ment une inhibition de la voie des pentoses et une inhibition du système du cytochrome, qui toutes deux limitent l'apport des constituants et de l'énergie nécessaires aux processus de biosynthèse, en particulier pour la croissance et la régénération des tissus. Une des condi-10 tions principales de la croissance est un apport approprié d'énergie CATP) et de constituants pour la synthèse des acides nucléiques. La DHEA commande ces deux processus en tant qu'inhibiteur de la NADH oxydase et de la glucose-6-phosphate déshydrogénase. La DHEA s'est révé-15 lée inhiber certains troubles métaboliques et la cirrhose du foie et réduire la douleur des cardiopathies ischémiques, en particulier de l'angine de poitrine, par Limitation de La respiration tissulaire. La DHEA a été utilisée dans le traitement de La ménopause, de l'insta-20 bilité émotionnelle, de la dépression et du stress.

Les individus présentant une carence génétique en glucose-6-phosphate déshydrogénase possèdent une résistance relative au paludisme à falciparum et présentent un nombre bien plus faible de protozoaires dans 25 leurs érythrocytes que Les sujets normaux CMotulski A.G. 1975 dans "The Rôle of Natural Sélection in Human Evolution", Ed. Salzano S. Amsterdam, New Holland, p. 271 et Luzzato L. et coll., Science, 164, 839, 1969).

La DHEA et tes composés apparentés sont capables 30 de réduire La capacité de former des colonies des cellules mononucléaires du sang périphérique humain infectées par le virus d1 Epstein-Barr Cun herpèsvirus) à des concentrations de 10-100 μ.Μ C Ca r c i nogenesi s, Vol. 2, pp 883-886, 1981).

35 La DHEA inhibe également l'activation du compté-

• * ' A

e , 8 ment et est donc utile dans la prophylaxie de l'oedème angioneurotique héréditaire (Hidvegi et coll., Complément 1 ; 201, 1984). La DHEA empêche également la formation d'autoanticorps dans le modèle murin du lupus éry-5 thémateux disséminé (LED) et beaucoup des caractéristiques du SIDA constitué sont considérées comme semblables à celles du LED (Lucas et coll., J. Clin. Invest., 75 : 2091, 1985).

L'invention fournit donc un composé utile dans 10 la prophylaxie et le traitement d'une infection rétro-virale ou d'une complication ou d'une conséquence de celle-ci, ce composé répondant à la formule générale (I) '~t~.........

CH3 I (I) 20 dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou de brome et R<l est un atome d'hydrogène, un groupe SC^OM, dans lequel M est un atome d'hydrogène ou de sodium, un groupe sulfatide 25 -so2o-ch2. ch.ch2 o.co.r3 O. CO. r2 ou un groupe phosphatîde

O

30 -p-o.ch2.çh.ch2.o.co.r3 ο O.CO.R2 dans lesquels chacun de R2 et R3, qui peuvent être semblables ou différents, est un radical alkyle à chatne droite ou ramifiée de 1 à 14 atomes de carbone, ou un groupe glucuromde . * ' i 9

COOH

ι/~°\ \oh / 5 h^L/

Le trait discontinu représente une double liaison facultative et l'atome d'hydrogène de la position 5 est présent en la configuration a. ou β, ou le composé comprend 10 un mélange des deux configurations.

Lorsque est autre qu'un atome d'hydrogène, les composés sont des composés conjugués.

De préférence, dans le composé de formule CI), R et R.j sont chacun un atome d'hydrogène. Un composé 15 particulièrement préféré est la déhydroépiandrostérone, dans laquelle R et R«j sont chacun un hydrogène et la double liaison est présente.

Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le composé est la 16a-bromoépiandrostérone, dans 20 laquelle R est Br, R^ est H et la double liaison est présente. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, Le composé est L'étiocholanolone, dans laquelle R et R-j sont chacun un atome d'hydrogène et La double liaison est absente.

25 D'autres composés préférés sont te sulfate de déhydroépiandrostérone, dans Lequel R est H, R-j est SC>2.0M, M est comme précédemment défini et la double liaison est présente, et La 5ß-androstane~3ß-ol-17-one.

Sinon, le composé est choisi parmi les sulfa-3Q tides, phosphatides ou glucuronide de déhydroépiandrostérone, où R est H et R-j est un groupe sulfatide, phos-phatide ou glucuronide, comme précédemment défini, et la double liaison est présente.

De plus, l'invention fournit une préparation 33 pharmaceutique utile dans la prophylaxie et le traite- . 4 ' * , 10 ment d'une infection rétrovirale, ou d'une complication ou d'une conséquence de celle-ci/ comprenant une quantité prophylactique ou thérapeutique efficace d'au moins un composé de formule CI) comme principe actif.

5 La composition pharmaceutique selon l'invention peut être administrée par voie locale ou générale. On entend par administration générale un mode ou une voie quelconque d'administration qui assure l'apparition de teneurs efficaces en principe actif dans le sang ou en 10 un site éloigné du site d'administration dudit principe actif.

La composition pharmaceutique pour l'administration par voie générale selon L'invention peut être présentée pour l'administration entérale, parentérale ou 15 locale. En fait, ces trois types de présentation peuvent être utilisés simultanément pour assurer l'administration par voie générale du principe actif.

Des présentations appropriées à l'administration orale comprennent les capsules de gélatine dures ou 20 molles, les dragées, les pilules, les comprimés, y compris les comprimés enrobés, les élixirs, les suspensions, les sirops ou les inhalations et les formes à libération contrôlée correspondantes.

Les formes solides d'administration, en plus de 25 celles présentées pour L'administration orale, comprennent les suppositoires.

Le composé de formule (I) peut également être administré sous forme d'un implant.

Des présentations appropriées à l'administration 30 locale comprennent les crèmes, les gels, les gelées, les mucilages, les pôtes et les pommades. Les composés peuvent également être présentés pour l'administration transdermique, par exempLe sous forme de timbres, afin d'assurer une administration générale.

35 Des solutions injectables appropriées compren- Λ ' * 11 <» nent les solutions injectables par voie intraveineuse, sous-cutanée et intramusculaire.

Le composé de formule CI) peut également être administré sous forme d'une solution pour perfusion ou 5 d'une inhalation ou pulvérisation nasales.

Une composition pharmaceutique selon l'invention est administrée sous forme de doses unitaires comprenant de 1 à 1 000 mg de principe actif. De préférence, chaque dose unitaire comprend de 50 à 500 mg de principe actif. 10 Selon un mode de réalisation de l'invention, le composé de formule Cl) est administré à raison de 1 à 10 doses unitaires par jour. L'administration du composé de formule Cl) selon l'invention est poursuivie pendant une période d'au moins cinq jours et dans certains cas 15 peut être administrée pendant la vie entière du sujet.

L'invention concerne également l'utilisation d'un composé de formule CI) dans la fabrication d'un médicament pour l'emploi dans la prophylaxie ou Le traitement d'une infection rétrovirale ou d'une complication 20 ou conséquence de celle-ci.

L'invention concerne également un procédé de traitement d'une infection rétrovirale chez un patient humain ou non-humain, comprenant l'administration à ce patient d'une quantité thérapeutique efficace d'une 25 composition pharmaceutique contenant un composé de formule Cl).

L'invention concerne également un procédé de prophylaxie d'une infection rétrovirale chez un patient humain ou non-humain, comprenant l'administration à ce 30 patient d'une quantité prophylactique efficace d'une composition pharmaceutique contenant un composé de formule CI).

Les composés répondant à La formule CI) présentés et définis ci-dessus sont particulièrement utiles 35 pour la prophylaxie et le traitement d'une infection ' " i 12 i ' ! provoquée par un HIV ou d'une complication ou conséquence de celle-ci.

Selon un autre aspect, l'invention concerne un procédé pour la prophylaxie et le traitement du SIDA 5 chez un patient, qui comprend l'administration à ce patient d'une quantité prophylactique ou thérapeutique efficace d'un composé de formule CI) ou d'une composition pharmaceutique le contenant.

Egalement, selon un autre de ses aspects, 10 l'invention concerne un procédé pour la prophylaxie et le traitement du para-SIDA (ARC) chez un patient, qui comprend l'administration à ce patient d'une quantité prophylactique ou thérapeutique efficace d'un composé de formule CI) ou d'une composition pharmaceutique le 15 contenant.

Les composés de formule CI) peuvent également être utilisés, simultanément ou en association avec un renforçateur ou immunomodulateur du système immunitaire, comme agent dans la prophylaxie et le traitement d'une 20 infection rétrovirale ou d'une complication ou conséquence de celle-ci. De la sorte, le renforçateur ou immunomodulateur peut être utilisé pour accroître la production des cellules T par La moelle osseuse.

L'immunomodulateur peut être administré avant 25 ledit composé de formule CI) et en des quantités suffisantes pour stabiliser ou accroître préalablement la production des cellules T. En particulier, on administre l'immunomodulateur jusqu'à ce que le taux de production des cellules T4 se stabilise ou commence à augmenter.

30 Le composé de formule CI) et l'immunomodulateur peuvent être associés dans une forme unitaire d'administration ou être dans des formes d'administration distinctes.

Les renforçateurs ou immunomodulateurs appro-35 priés du système immunitaire utiles selon l'invention . * * ë 13 sont choisis parmi l'ABPP CBropirimi ne) ; l'Ampligen (ARN à un défaut d'appariement) mis au point par DuPont/HEM Research ; l'anticorps ant i -«.-i nter f éron humain fabriqué par Advance Biotherapy and Concepts ; un 5 anticorps anti-SIDA (Nisshon Food) ; L'AS—101 (immuno-stimulant à base de métal lourd) ; l'acide ascorbique et ses dérivés ; le (3-1 nterféron ; le Carrosyn (polymanno-acétate) ; le Ciamexon fabriqué par Boehringer Mannheim ; le Cyclosporin ; la cimétidine ; le CL246, 10 738 fabriqué par American Cyanamid ; le facteur de stimulation des colonies (CM-CSF) fabriqué par Sandoz and Genetics Institute ; le dinitrochlorobenzène (DNCB) ; l'α-interféron ; le r-interféron ; un glucane ; l'Hyperimmue (Ύ-globuline) fabriqué par Bayer ; 15 l'ÏMREG-1 (dialysat leucocytaire) et l'IMREG-2 fabriqués par IMREG ; l'Immuthiol (diéthyIthiocarbamate de sodium) fabriqué par l'Institut Mérieux ; l 'Inter leukin-1 et L'InterLeukin-2 fabriqués par Cetus Corporation, Hoffmann-La Roche et Immunex ; l'isoprinosine (inosine 20 pranobex) ; le Krestin fabriqué par Sankyo ; le LC-9018 mis au point par Yakult ; le Lentinan fabriqué par Ajinomoto/Yamanouchi ; le LF-1695 fabriqué par Fournier, la MET-ENK (méthionine-enképhaline) fabriquée par TNÏ Pharmaceutical et Sygma Chemicals ; le Minophagen C ; le 25 MTP-PE (muramyltripeptide) fabriqué par Ciba-Geigy ; le Trexan (Naltrexone) fabriqué par DuPont ; le Neutropin ; L'immunomodulateur de l'ARN mis au point par Nippon Shingaku ; le shosaikoto et le ginseng ; Le facteur humoral thymique, le TP-5 (Thymopentin) fabriqué par 30 Ortho PharmaceuticaIs ; la fraction 5 et la fraction 1 de la thymosine ; la thymostimuline ; le TNF (facteur de nécrose tumorale) fabriqué par Genentech et les préparations de vitamines B.

La majorité des immunomodulateurs mentionnés 35 ci-dessus sont administrés par voie orale. Le dinitro- » 14 chlorobenzène est normalement appliqué localement par badigeonnage de la peau du patient.

L'invention concerne donc également une composition pharmaceutique comprenant un composé de formule Cl) 5 avec une quantité efficace d'un renforçateur ou immunomodulateur du système immunitaire.

L'invention concerne également un composé de formule Cl) pour l'utilisation concomitante ou en association avec un agent antiviral dans la prophylaxie et 10 le traitement d'une infection rétrovirale ou d'une complication ou d'une conséquence de celle-ci.

Le composé de formule CI) et l'agent antiviral peuvent être combinés en une forme d'administration unique ou être dans des formes d'administration distinctes. 15

Les agents antiviraux appropriés comprennent l'AL-721 Cmélange de lipides) fabriqué par Ethigen Corporation and Matrix Research Laboratories ; l'ester méthylique de L'amphotéricine B ; l'Ampligen CARN à défaut d'appariement) mis au point par DuPont/HEM

20

Research ; un anticorps anti-SIDA CNisshon Food) ;

l'AS-101 Cimmunostimu lant à base de métal lourd) ; l'AZT

Cazidothymidine/Retrovir/Zidovudine) fabriquée par

Burroughs Wellcome ; le Betaseron Cß-interféron) fabri- ^ qué par Triton Biosciences CShell Oil) ; L'hydroxy- toluène butylé ; Le Carrosyn Cpolymannoacétate) ; La

Castanospermine ; le Contracan Cdérivé d'acide stéarique) ; la Crème Pharmatex Ccontient du chlorure de benza l konium) fabriquée par Pharmelac ; le CS-87 Cdérivé non substitué sur la position 5 de la Zidovudine) ; le 30

Cytovene Cganciclovir) fabriqué par Syntex Corporation ; la DDC Cdidésoxycytidine) fabriquée par Hoffmann-La Roche et d'autres analogues nueLéosidiques ; le sulfate de dextran ; la D-pénici l lamine C3-mercapto-D-valine) fabriquée par Carter-Wallis et Degussa Pharmaceutical ; le Foscarnet Cphosphonoformiate trisodique) fabriqué par • ' * 15

Astra AB ; l'acide fusidique fabriqué par Leo Lovens ; la glycyrrhizi ne (un constituant de la racine de réglisse) ; l'HPA-23 Cammonium-21-tungsto-9-antimoniate) fabriqué par Rhône-Poulenc Santé ; L'agent antiviral à 5 virus immun humain mis au point par Porton Products International ; l'Ornidyl Céflornithine) fabriqué par Merrell Dow ; le Nonoxinol ; l'iséthionate de pentamidine (PENTAM 300) fabriqué par Lypho Med ; le Peptide T (séquence octapeptidique) fabriqué par Peninsula Labora-10 tories ; la phénytoine fabriquée par Park-Davis (Warner-Lambert Company) ; le Ribavirin ; Le Rifabutin (ansamycine) fabriqué par Adria Laboratories ; le rsT4 (T4 soluble recombinant) fabriqué par Biogen, Genentech et Smith Kline & French , Le Trimetrexate fabriqué par 15 Warner-Lambert Company ; le SK-818 (agent antiviral dérivé du germanium) fabriqué par Sanwa Kagaku ; la suramine et ses analogues fabriqués par Miles Pharmaceuticals ; l'UAOOl fabriqué par Ueno Fine Chemicals Industry ; le WeLlferon (a-interféron) fabriqué par 20 Burroughs Wellcome ; le Zovirex (acyclovir) fabriqué par Burroughs Wellcome.

On notera que les agents antiviraux précités comprennent certains des agents précédemment mentionnés pour L'utilisation comme immunomodulateur avec un 25 composé de formule (I) selon l'invention. On sait par exemple que L'isoprinosine agit comme un immunomoduLa-teur et également possède des propriétés antivirales. Le terme "agent antiviral" tel qu'on l'emploie ici comprend les agents qui gênent la pénétration des rétrovirus dans 30 une cellule.

L'invention concerne également un composé de formule (I) pour l'utilisation concomitante ou en association avec un médicament utile dans la prophylaxie et le traitement des infections opportunistes associées au 35 SIDA.

* * * 16

Comme indiqué ci-après, les composés de formule Cl) sont particulièrement appropriés à l'utilisation comme inhibiteur des rétrovirus, en particulier de L'HIV dans les macrophages.

5 Dans les dessins annexés : la figure 1 est une représentation schématique du pourcentage d'effet cytopathogène en fonction de la concentration du médicament dans la lignée de cellules tumorales VB pour deux composés appelés A et B utilisés 10 selon l'invention ; la figure 2 est une représentation schématique du pourcentage d'expression de p24 en fonction de la concentration du médicament dans des lymphocytes activés du sang périphérique pour deux composés appelés A et B 15 utilisés selon l'invention ; la figure 3 est une représentation schématique du pourcentage d'expression de p24 en fonction de la concentration du médicament dans des macrophages humains pour deux composés appelés A et B utilisés selon 20 l'invention ; la figure 4 est une représentation schématique du pourcentage d'expression de p24 en fonction de la concentration du médicament dans des macrophages infectés par HIV pour deux composés appelés A et B utilisés 25 selon l'invention ; et ta figure 5 est une représentation schématique du pourcentage d'expression de p24 en fonction de la concentration du médicament pour des macrophages humains présentant une infection chronique pour deux composés 30 appelés A et B utilisés selon l'invention.

L'invention est de plus illustrée par les exemples suivants.

Dans les exemples 1 à 7 suivants, le composé A correspond à la déhydroépiandrostérone et le composé B 35 correspond à la 16a-bromoépiandrostérone.

I ’ · 17

Relativement aux exemples 1 à 7, les matières utilisées et les analyses et déterminations effectuées sont comme suit : 1. Source d'HIV : pour analyser les effets anti-5 viraux dans les exemples 1 à 7, on utilise trois souches secondaires d’HIV : la souche HTLV-IIIB d'HIV, actuellement entretenue en culture tissulaire dans la lignée de cellules H9 ; l’isolat HIV-DV à faibles passages, une souche qui s'est révélée infecter les macrophages 10 humains ; et La souche ARV-2 HIV, isolée pour La première fois par le docteur Jay Levy de San Francisco. Ces trois souches virales ont été cultivées au Laboratoire de Culture Tissulaire de La Division d'Activité du SIDA de l'Hôpital Général de San Francisco, des titres 15 de 10-^ à 10-^ unité infectieuse/ml étant couramment obtenus.

2. Sources de cellules : la lignée de cellules VB utiLisée dans l'exemple 1 est une lignée de cellules de Lymphome T très sensible à l'infection par HIV et qui 20 exprime des taux élevés de molécules de surface cellulaire CD4. Cette lignée cellulaire forme des syncytiums en deux jours après l'infection par toutes les souches d'HIV étudiées à ce jour. La lignée de cellules H9 est constituée de cellules T ALL sensibles à l'infection par 25 pratiquement toutes les souches d'HIV, mais qui cependant ne forment pas de cellules syncytiales. On l'utilise pour l'évaluation quantitative de l'infection en l'absence de formation de syncytium, l'infection étant évaluée quantitativement par des déterminations 30 d'immunofluorescence. La lignée des cellules HXB/H9 Cexemple 6) consiste en une population de cellules H9 produisant chroniquement la souche HTLV-IIIB d'HIV et qui est utilisée dans les expériences de détermination des effets antiviraux sur des lignées cellulaires à 35 infection chronique. On prépare les macrophages humains

, « ' I

18 à partir de cellules mononucléaires du sang périphérique soit provenant d'une banque de sang sous forme d'une couche leucocytaire, soit sous forme d'une préparation obtenue par Leucaphérèse. Crowe et coll., supra, ont mis 5 au point un système de détermination qui permet l'évaluation quantitative de l'infection à HIV et l'inhibition de l'infection par analyse immunocytofluorographi-que. Pour évaluer quantitativement l'infection à HIV des macrophages, on cultive les macrophages dans des réci-10 pients de culture en Téflon (marque de fabrique), les macrophages étant entretenus en culture en suspension in vitro jusqu'à six mois. On effectue ensuite une coloration par immunofluorescence de la surface cellulaire et du cytoplasme pour évaluer quantitativement les anti-15 gènes des macrophages par cytométrie en flux.

3. Cytométrie en flux : on utilise, pour L'analyse des échantillons infectés par HIV, un Ortho Cvtofluorgraf II-S (marque de fabrique) ayant une cellule à écoulement munie d'une protection contre les 20 risques biologiques. On détecte les antigènes HIV p24 en utilisant un anti-p24 monoclonal de souris (DuPont) et on identifie les anticorps de souris en utilisant une IgG de chèvre anti-souris conjuguée à de l'isothiocya-nate de fluorescéine (FITC).

25 4. Détection de l'antigène HIV p24 soluble : on mesure les antigènes p24 solubles avec un système de détection de L'antigène HIV Abbott.

5. Inhibition de l'infection aiguë : on utilise plusieurs déterminations pour évaluer l'inhibition de 30 l'infection aiguë : elles comprennent : a) l'inhibition de la formation d'une cellule géante multinucléée dans les cellules VB à infection aiguë infectées à raison d'un virus par cellule et, deux jours après l'infection en présence ou non de diverses 35 concentrations de médicaments, détermination de la t 1 ' * 19 formation des cellules géantes multinueléées. (On élimine le virus Libre par lavage après un prétraitement d’incubation d'une heure à la température ambiante). L'anticorps monoclonal anti-Leu3a inhibe complètement la 5 formation des cellules syncytiales et on l'utilise comme témoin positif*de l'inhibition de l'infection. On isole également les surnageants et on détermine Le taux d'antigène HIV p24. On mesure le virus infectieux dans les cultures traitées à l'aide d'une détermination syn-10 cytiale, comme décrit ci-dessus.

b) Bien que la lignée de cellules de lymphome T VB se comporte de façon semblable aux lymphocytes T CD4-positifs du sang périphérique en ce qui concerne les effets cytopathogènes provoqués par l'HIV, les expérien- 15 ces décrites ci-dessus ont été effectuées sur des lymphocytes activés par la phytohémagglutinine (PHA) pour déterminer si les lymphocytes étaient plus ou moins sensibles aux composés A et B que la lignée de cellules VB. Dans ce système de détermination, au moment où les cel-20 Iules géantes multinucléées apparaissent dans les cultures de lymphocytes infectés, on analyse les surnageants pour déterminer la présence d'antigènes HIV p24 et on les titre sur des cellules indicatrices de lymphome VB pour déterminer le titre du virus infectieux présent en 25 chaque point.

c) Pour déterminer si les composés A et B sont efficaces pour inhiber l'infection aiguë des macrophages, on expose des macrophages de culture en Téflon à raison de un virus par cellule à l'HIV-DV en présence ou 30 non de diverses concentrations du médicament (exemples 3 à 5). Normalement, L'expression d'HIV atteint un maximum dans les macrophages humains environ dix jours après L'infection initiale. Donc, après une heure d'infection è la température ambiante suivie d'un lavage et d'une 35 remise en suspension des macrophages à diverses concen- « I ‘ * 20 trations de médicament, on colore les macrophages pour rechercher la présence de l'antigène p2A au dixième jour. On analyse les surnageants de culture de ces macrophages pour rechercher la présence de p24 soluble 5 et du virus infectieux, comme décrit ci-dessus.

6. Analyse des cellules à infection chronique : pour déterminer si les composés A et B sont efficaces pour inhiber l'expression d'HIV dans les macrophages et les cellules T à infection chronique, on effectue les 10 expériences suivantes. On soumet la Lignée de cellules T 4 à infection chronique HXB/H9 à l'action de diverses concentrations du médicament pendant quatre jours in

vitro. Au quatrième jour, on analyse les cellules HXB

* pour rechercher la présence de p 2 4 à l'intérieur du 15 cytoplasme et on analyse les surnageants pour rechercher la présence du virus infectieux comme décrit ci-dessus. On effectue ces mêmes expériences sur des macrophages infectés in vitro et qui se sont révélés présenter une infection chronique selon l'analyse cytofluorographique. 20 7. Analyse de la toxicité non spécifique pour les cellules cibles avec les composés A et B. On expose des lignées de cellules VB, H9 et HXB à différentes concentrations des composés A et B, de même que des macrophages humains normaux, pendant le temps où le 25 médicament est au contact de chaque lignée cellulaire, comme décrit dans les déterminations ci-dessus. On dénombre les cellules et on détermine le nombre des cellules vivantes relativement aux cellules mortes par l'exclusion du bleu Trypan. Ces analyses sont nécessai-30 res pour déterminer un index thérapeutique entre les effets toxiques non spécifiques sur les cellules décrites par rapport aux effets antiviraux potentiels efficaces in vitro (exemple 6).

Exemple 1 35 inhibition des effets cytopathogènes liés à HIV dans la , < 4 * 21

lignée de cellules tumorales VB

On étudie les composés A et B pour déterminer l'inhibition de l'effet cytopathogène relatif aux cellules de lymphome T à diverses concentrations médicamen-5 teuses après infection aiguë avec HIV pendant 48 heures. La figure 1 indique le pourcentage d'effet cytopathogène observé dans des cultures exposées à diverses concentrations des composés A et B. On voit que le composé B est plus actif pour inhiber la formation de cellules syncy-10 tiales multinucléées provoquée par HIV que le composé A. Les valeurs de l'effet cytopathogène illustrées par la figure 1 sont la moyenne de deux expériences. Deux expériences ultérieures utilisant Les composés A et B après dilution dans Le diméthylsulfoxyde (DMSO) ont révélé un 15 effet moins net. IL est possible que la diminution de l'effet notée dans les expériences ultérieures soit secondaire à des problèmes de stabilité du médicament. A la concentration molaire de 10~^, le composé B semble extrêmement toxique pour la lignée des cellules de 20 lymphome T VB, une caractéristique que L'on n'observe pas avec les lymphocytes normaux du sang périphérique ou les macrophages exposés à une concentration molaire de 10-/* du composé B comme indiqué ci-après dans les exemples 2 et 3.

25 Exemple 2

Inhibition des effets cytopathogènes liés à HIV dans des lymphocytes activés du sang périphérique

Pour déterminer si les effets des composés A et B sur l'infection aiguë des cellules de lymphomes T VB 30 qui apparaissent dans les lymphocytes du sang périphérique, on ajoute de l'HIV à raison d'un virus par cellule à des lymphocytes activés pendant 48 heures avec 2 |j.g/ml de PHA. Après l'infection initiale d'une heure, on lave les lymphocytes activés et on les remet en sus-35 pension pour les cultiver pendant une semaine. Des cel- 22 Lûtes géantes multinucléées commencent à se former environ 7 jours après L'infection initiaLe et on recueiLLe aLors Les surnageants des cuLtures pour y déterminer La présence des antigènes HIV p24. L1 accumuLation des anti-5 gènes HIV p24 dans Le surnageant iLLustre La production d'HIV par Les ceLLuLes infectées. On notera sur La figure 2 que La production de L'antigène p24 est modérément inhibée à La concentration moLaire de 10~4 des deux composés A et B et est Légèrement moins inhibée à La 10 concentration moLaire de 10”^. Aucune toxicité notabLe n'est observée pour L'une ou L'autre des concentrations des médicaments avec Les cuLtures de Lymphocytes du sang périphérique.

Exemple 3 15 Inhibition de La production d'HIV dans Les macrophages humains normaux

Pour déterminer si Les composés A et B sont susceptibles d'inhiber activement L'infection des macrophages humains normaux, on étudie, avec un spectre de 20 concentrations des médicaments, L'inhibition de L'infection aiguë et L'inhibition de L'expression d'HIV dans des macrophages à infection chronique. La figure 3 indique La présence d'antigènes HIV p24 dans Le surnageant des macrophages qui ont été infectés puis lavés et dont 25 on a Laissé L'infection se poursuivre pendant une semaine. Après L'infection aiguë (une heure), on incube Les ceLLuLes dans diverses concentrations des composés A et B et, 7 jours après L'infection initiaLe, on recueiLLe Les surnageants pour déterminer quantitative-30 ment L'antigène p24. Dans une gamme très étendue de concentrations des médicaments (concentration moLaire de 10~4 à 10“8), on observe une diminution notabLe d'environ 50 % de La production des antigènes HIV p24. Des macrophages traités avec du DMS0 (pour La concentra-35 tion moLaire du médicament de 1Q“4, La concentration „ 4 * 23 < finale du DMSO est de 0,05 %) aux concentrations requises pour dissoudre Les composés A et B, on n'observe pas d'effets, donc ces effets sont apparemment secondaires aux actions des composés A et B.

5 Exemple 4

Inhibition de l'antigène HIV d24 dans des macrophages infectés par HIV

On analyse les cellules de l'expérience décrite dans l'exemple 3 et on analyse le cytoplasme pour déter-10 miner la présente d'HIV p24 afin de déterminer directement si la production d'antigène HIV p24 est inhibée dans ces cellules infectées. La figure 4 illustre globalement trois expériences séparées utilisant des macrophages infectés de trois donneurs différents. On voit 15 que la production cytoplasmique d'antigène HIV p24 est notablement inhibée à la concentration molaire de 10”^ par Les deux médicaments et que le composé A est même actif à des dilutions molaires de 10“6 pour inhiber la production d'antigène HIV p24 dans les macrophages 20 infectés. Donc, La diminution d'HIV p24 dans les surnageants infectés semble être associée à une diminution de la production d'antigène HIV p24 dans les macrophages i nfectés.

Exemple 5 (comparatif) 25 On répète les mêmes expériences que celles décrites dans l'exemple 4 avec l'AZT à des concentrations de 0,05 n^g/ml à 50 p.g/ml sans différence par rapport aux valeurs témoins. L'inhibition de l'antigène HIV p24 semble donc être spécifique, au moins dans cet 30 essai, des composés A et B et ne pas constituer une caractéristique de l'AZT, même à des doses très élevées. Exemple 6

Essai de l'activité antivirale sur la lignée de cellules HXB à infection chronique par HIV 35 On soumet, à une détermination des effets anti- 24 * « * « · viraux des composés A et B, la Lignée de cellules HXB à infection chronique par HIV et, en dehors de la mort des cellules provoquée par Le composé B aux concentrations molaires de 10"^, on n’observe pas d'inhibition spéci-5 tique de la production d'HIV ni des effets cytopathogènes dans la Lignée de cellules de lymphomes à infection chronique.

Exemple 7

Essai de l'activité antivirale sur des macrophages à 10 infection chronique à HIV

Comme les macrophages peuvent être infectés et produire de l'HIV pendant des périodes prolongées sans perte notable de la viabilité, on étudie des cellules à infection chronique, plus particulièrement une popula-15 tion présentant une positivité de l'antigène HIV entre 30 et 50 %, pour étudier l'inhibition de la production cytoplasmique de l'antigène HIV p24. La figure 5 indique les résultats de trois expériences séparées. On notera une certaine inhibition de la production de l'antigène 20 HIV p24 pour les deux concentrations molaires de 10“^ et ΙΟ'5 des composés A et B, qui est cependant un peu inférieure à l'inhibition de L'infection aiguë des macrophages (figure 4). Ces valeurs suggèrent que la présence des composés A et B peut inhiber quelque peu la produc-25 tion d'antigène HIV p24 par des macrophages présentant une infection stable et une production chronique d'antigène.

Etudes de la toxicité

Dans toutes les expériences décrites dans les 30 exemples 1 à 7, la seule toxicité appréciable est la toxicité du composé B à la concentration molaire de 10“^ relativement aux lignées de cellules tumorales. Aucune toxicité appréciable n'a été observée pour les macrophages normaux exposés à des concentrations molaires de 35 10-^ à 10-8 des composés A et B, pas plus qu'une toxi- • * * 25 « cité appréciable pour les Lymphocytes du sang périphérique exposés aux mêmes concentrations de médicaments. Conclus i ons

Les valeurs présentées dans les exemples 1 à 7 ci-dessus sont en accord avec les interprétations suivantes.

1. Les composés A et B semblent exercer un effet antiviral modéré dans les études d’infections aiguës portant sur Les cellules de Lymphome T et sur les lym- 10 phocytes. Par comparaison avec l'AZT, les composés A et B sont inférieurs par leurs effets antiviraux, car l’AZT assure une protection pratiquement complète des Lymphocytes et des cellules de lymphome T contre l'infection aiguë à HIV (comme mesuré à une semaine) dans la gamme 15 de 1 μ-g d’AZT/ml de milieu de culture.

2. Les effets observés des composés A et B sur l’infection à HIV des macrophages sont plus significatifs que l’effet antiviral noté sur la Lignée de cellules de Lymphome T et les lymphocytes du sang périphéri- 2 0 que. Les résultats obtenus dans les exemples 3 à 7 sont certainement significatifs au taux d’inhibition in vitro de l’infection à HIV des macrophages et d’inhibition de La production d’HIV des macrophages. Ces résultats sont ^ reproductibles et on été répétés avec six donneurs séparés de monocytes/macrophages. L’inhibition de l’infection à HIV des macrophages est à ce jour une caractéristique relativement exceptionnelle d’un agent antiviral. Le fait que Les composés A et B inhibent l'infection à HIV et l’expression d’HIV dans les macrophages suggère 30 qu’ils se révèlent utiles pour le traitement des sujets infectés par le SIDA.

Exemple 8

Utilisation du sulfate de déhydroépiandrostérone aans te

traitement du SIDA

35 -

Le sulfate de déhydroépiandrostérone a été . i ' 4 26 divisé en doses unitaires de 300 mg et 100 mg et chaque dose unitaire a été introduite dans une capsule molle de gélatine.

A) On a traité comme suit un patient séropositif 5 pour L * H T V et pour lequel le diagnostic de SIDA avait été porté. Pendant douze jours consécutifs, le patient a été traité par l'administration orale du composé encapsulé. Les onze premiers jours, une dose unitaire de 300 mg a été administrée une fois par jour. Le douzième 10 jour, le patient a reçu une dose unitaire de 100 mg du composé.

B) Des essais ont été effectués pendant une période de 26 jours chez deux patients séropositifs pour L'HIV et pour lesquels le diagnostic de SIDA avait été 15 porté selon le protocole de traitement en douze jours exposé au paragraphe précédent, si ce n'est que le traitement n'a commencé qu'au cinquième jour.

Des échantillons de sang ont été prélevés aux patients à cinq occasions pendant la période de vingt-20 six jours. Les premières analyses ont été effectuées chez chaque patient le premier jour et eLles comprenaient la numération des cellules T1, T4 et T8 et la détermination de la vitesse de sédimentation. Le traitement a commencé le jour 5 et s'est poursuivi jusqu'au 25 jour 17. Du jour 5 au jour 16, chaque patient, comme précédemment exposé, a reçu une seule dose unitaire de 300 mg de sulfate de déhydroépiandrostérone et, le jour 17, 100 mg ont été administrés. Les analyses précitées ont été répétées chez chaque patient les jours 9, 17, 24 30 et 26. La numération des celLules T de chacun des patients X et Y s'est stabilisée par suite du trai tement.

De plus, alors que le sulfate de déhydroépiandrostérone était administré par voie orale aux 35 patients, Les lésions au voisinage de leur bouche et • * * * 27 d'autres parties de Leur corps ont été traitées Localement avec une crème contenant du sulfate de déhydroépiandrostérone. On a observé La disparition des lésions. Exemple 9

5 Utilisation de La déhydroépiandrostérone dans Le traitement du SIDA

Douze patients, tous connus comme séropositifs pour L'HIV et chez Lesquels le diagnostic de SIDA avait été porté, ont été traités par La DHEA pendant une 10 période de six mois. La DHEA a été administrée sous forme de capsules dures de gélatine contenant 100 mg de DHEA à raison de 100 mg à 600 mg par jour. La grande majorité des patients ont reçu 500 mg par jour en doses divisées. Les patients étaient tous des hommes homo-15 sexueLs ou bisexuels ayant un êge moyen de 34,5 ans et un poids moyen de 69,6 kg.

Les manifestations cliniques antérieures et présentes de L'HIV comprenaient : une diarrhée inexpliquée, un sarcome de Kaposi, un zona, une candidiase orale, une 20 Lymphadénopathie, une LeucopLasie villeuse orale, une perte de poids invoLontaire, des mycoses cutanées et des infections cutanées à staphylocoques.

Tous Les patients étaient en un stade avancé du SIDA au début de L'essai et normalement une aggravation 25 de Leur état ou même Leur décès était prévu dans La période d'essai de six mois. Cependant, aucune détérioration sérieuse de L'état n'a été observée chez aucun des patients, quatre patients présentant en fait un gain de poids. Le patient 7 a pris 8 kg en cinq mois.

30 Les composés de formule CI), et notamment La déhydroépiandrostérone et ses dérivés précités, sont particuLièrement avantageux dans Le traitement des patients infectés par l'HIV. Les avantages particuliers de ces composés comprennent L'absence virtuelle de toxi-35 cité, la facilité d'administration et l'action excep- . » s * 28 i tionnelle précitée sur le système des macrophages.

La déhydroépiandrostérone s'est révélée totalement dépourvue d'effets physiques, biochimiques ou hématologiques chez douze sujets ayant reçu des doses jour-5 nalières atteignant 600 mg pendant six mois.

Par suite de l'action exceptionnelle de la déhydroépiandrostérone sur le système des macrophages, il est possible que son utilisation puisse accroître la survie moyenne des sujets infectés par l'HIV, dont la 10 valeur calculée actuelle est de 8,3 ans à partir du moment de l'infection.

De plus, les composés de formule (I) peuvent être utilisés en combinaison synergique avec d'autres agents antiviraux, comme indiqué ci-dessus.

15 Sans pour cela se lier à une quelconque explica tion théorique de l’invention, il semble que, du fait que la déhydroépiandrostérone inhibe la glucose-6-phos-phate déshydrogénase, entraînant une baisse du capital cellulaire de NADHP, les petites modi fications de La 20 biosynthèse des protéines dans la cellule qui en résultent puissent, en raison de la régulation complexe de l'expression du gène de l'HIV, entraîner des modifications notables de la production des protéines virales.

Un exemple d'une telle protéine de régulation virale est 25 L'art/trs qui est présente en très petite quantité dans les cellules infectées, mais qui est responsable de la régulation de l'épissage de L'ARN viral et par conséquent de la production de protéines virales.

30 35

Claims

1. Utilisation d'un composé de formule générale O

2. Utilisation selon la revendication 1/ carac térisée en ce que, dans le composé de formule CI)/ R et R-j sont chacun un hydrogène.

3. Utilisation selon la revendication Z, caractérisée en ce que le composé est ta déhydroépiandrosté- 10 rone/ le composé dans lequel R et sont chacun un hydrogène et une double liaison est présente.

4. Utilisation selon la revendication 1/ caractérisée en ce que le composé est la 16a-bromoépiandro-stérone/ le composé dans lequel R est un atome de brome/

15 R^ est un atome d'hydrogène et la double liaison est présente.

5. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé est le sulfate de déhydroépiandrostérone.

5 CH. Il Vv R _ (I) dans laquelle R est un atome d'hydrogène ou de brome et R<! est un atome d'hydrogène, un groupe S020M dans lequel M est un atome d'hydrogène ou de sodium, un groupe 15 sulfatide -S020-CH2. CH.CH2 O.CO.R3 O.CO. R2 ou un groupe phosphatide 20 il -P-O.CH..CH.CH..O.CO.R_ II 2 I 2 3 O O.CO.R2 dans lesquels chaque R2 et Rj, qui sont semblables ou 25 différents, est un radical alkyle à chaîne droite ou ramifiée de 1 à 14 atomes de carbone, ou un groupe glucuronide COOH 11/- le trait discontinu représente une double liaison facul-^ tative et l'atome d'hydrogène de la position 5 est présent sous la configuration a ou ß ou sous forme d'un • . * 1 ' * 30 « mélange des deux configurations/ pour la fabrication d'un médicament utile dans la prophylaxie et le traitement d'une infection rétrovirale ou d'une complication ou conséquence de celle-ci.

6. Utilisation selon l'une quelconque des reven dications 1 à 5/ caractérisée en ce que le médicament est présenté pour L'administration par voie générale.

7. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 pour l'utilisation concomitante ou en asso- 25 dation avec un immunomodulateur comme agent dans la prophylaxie et le traitement d'une infection rétrovirale ou d'une complication ou conséquence de celle-ci.

8. Agent selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'immunomodulateur est choisi parmi 30 l'Ampligen/ un anticorps anti-α-interféron humain/ un anticorps anti-SIDA/ l'acide ascorbique et ses dérivés/ la Bromopiriminer le Ciamexon/ le Cyclosporin/ la cimé-tidine/ le facteur de stimulation des colonies/ le dini-trochlorobenzène/ l'α-interféron/ le ß-interféron/ le

35 T-interféron/ un glucanne, une T-globuline/ l'Interleu- , 4 J > 31 kin 1, L'InterLeukin 2, l ' isoprinosine, Le Krestin, le Lentinan, La méthionine-enképhaline, Le Minophagen C, Le muramyLtripeptide, La NaLtrexone, Le Neutropin, Le poLy-mannoacétate, un immunomodulateur d'ARN, Le shosaikoto 5 et Le ginseng, Le diéthylthiocarbamate de sodium, Le facteur humoral thymique, Le Thymopentin, La fraction 5 de thymosine et La thymosi ne-a.1, La thymosti muLi ne, Le facteur de nécrose tumoraLe et Les préparations de . vitamine B.

9. Composé selon L'une quelconque des revendica tions 1 à 6 pour L1 utiLisation concomitante ou en association avec un agent antiviraL dans La prophylaxie et Le traitement d'une infection rétroviraLe ou d'une complication ou conséquence de ceLLe-ci.

10. Agent seLon La revendication 9, caractérisé en ce que L'agent antiviraL est choisi parmi L'ester méthylique de L'amphotérici ne B, L'ammonium-21-tungsto- 9-antimoniate, L'AmpLigen, un anticorps anti-SIDA, L'ansamycine, L'azidothymidine ou son dérivé non substi-•20 tué sur La position 5, L'hydroxytoLuène butylé, La Castanospermine, Le Cytovene, La didésoxyadénosine, La didésoxycytidine, Le sulfate de dextran, L'éfLornithine, Le Foscarnet, L'acide fusidique, La glycyrrhi2ine, l'α-interféron, Le ß-i nterf éron, Le NonoxinoL, l'isé- 25 thionate de pentamidine, Le Peptide T, La phénytoîne, Le poLymannoacétate, Le Ribavirin, Le T^ recombinant soLu-ble, Le Trimétrexate, Le Suramin et ses analogues.

11. Composé selon L'une queLconque des revendications 1 à 6 pour La fabrication d'un médicament pour

30 L'empLoi dans La prophylaxie et Le traitement des infections à HIV ou une complication ou conséquence de cel Les-ci.

12. Composé selon L'une queLconque des revendications 1 à 6 pour La fabrication d'un médicament pour

35 L'empLoi dans La prophyLaxie et La traitement du syn- , 32 * φ * - fi drome immunodéficitaire acquis (SIDA).

13. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 pour la fabrication d'un médicament pour l'emploi dans la prophylaxie et la traitement du syn-5 drome immunodéficitaire acquis para-SIDA (ARC). 10 Dessins :__________3......planches 15 ™J..L...pages dent .......4......page de garde .. .QS. psg es de Description —4.....fZ'j'T.z ce revendication descriptif Luxsnbücr:;, le | 5 ^ m Le nmnuexLlro : 7 π Me Âiaïn Rukavina 25 30 35