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KR910700354A - 핵산 테스트 제품 및 이것을 이용해 미리 알고있는 핵산을 검출하는 방법 - Google Patents

핵산 테스트 제품 및 이것을 이용해 미리 알고있는 핵산을 검출하는 방법 Download PDF

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KR910700354A
KR910700354A KR1019900702180A KR900702180A KR910700354A KR 910700354 A KR910700354 A KR 910700354A KR 1019900702180 A KR1019900702180 A KR 1019900702180A KR 900702180 A KR900702180 A KR 900702180A KR 910700354 A KR910700354 A KR 910700354A
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존 브루스 핀들레이.
재니스 마리 메이어.
마렌 마리 킹.
프레드 테리 오크스.
추-안 창.
코리 하워드 리벤슨
Original Assignee
존 디. 후써
이스트만 코닥 컴퍼니
알버트 피. 할루인
시터스 코포레이션
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Abstract

내용 없음.

Description

핵산 테스트 제품 및 이것을 이용해 미리 알고있는 핵산을 검출하는 방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 기판의 일부에 수불용성 프로브가 고정화되어있는 본 발명의 테스트 제품의 평면도이다.
제2도는 제1도의 II-II 선을 따라 본 단면도이다.
제3도는 다수의 프로브들이 기판상에 부분적으로 위치해있는 본 발명의 다른 테스트 제품의 구체예에 대한 제2도와 유사한 단면도이다.

Claims (27)

  1. 적어도 서로 반대면에 있는 제1 및 제2면을 가지며 서로 반대면에 있는 최소한 하나의 면의 최소 하나의 별개 부분에 부착된 수불용성 핵산 프로브를 갖는 기판으로 구성된 핵산 테스트 제품에 있어서, 상기 프로브가 미리 알고있는 핵산에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되고 이 올리고누클레오타이드가 수불용성 입자에 공유결합하며 실질적으로 프로브중 어떤 것도 서로 반대면에 있는 면에 삽입되지 않는 핵산 테스트 제품.
  2. 제1항에 있어서, 상기 기판이 실질적으로 상기 모든 프로브가 기판면상에 남아있도록 하는 평균 공극 크기를 지닌 다공성 막인 테스트 제품.
  3. 제1항에 있어서, 상기 기판이 실질적으로 비다공성이고 피복되지 않은 페이퍼인 테스트 제품.
  4. 제1항에 있어서, 상기 기판이 중합체인 필름인 테스트 제품.
  5. 제1항에 있어서, 미리 알고있는 별개의 핵산에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되고 상기 서로 반대면에 있는 면상의 별개 부분에 부착되어 있는 다수의 수불용성 프로브들을 갖는 테스트 제품.
  6. 제1항에 있어서, 일체 완비된 테스트 장치에 설치된 테스트 제품.
  7. 제1항에 잇어서, 상기 수불용성 입자가 약 0.1-10㎛의 직경을 지닌 중합체 입자인 테스트 제품.
  8. 제1항에 있어서, 상기 고정화된 프로브가 HIV-I DNA에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되는 테스트 제품.
  9. 제1항에 있어서, 상기 각각의 별개 부분들이 약 1-30㎟의 면적을 포함하는 테스트 제품.
  10. 미세다공성 막의 한면의 최소 하나의 별개 부분에 수불용성 핵산 프로브가 부착되어있는 것으로 구성된 테스트 제품에 있어서, 상기 프로부가 HIV-I DNA에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되고 이 올리고누클레오타이드가 약 0.1-10㎛의 평균 직경을 지닌 중합체 입자에 공유결합하며 실질적으로 상기 프로브중 어떤것도 상기 막 표면내에 삽입되지 않는 테스트 제품.
  11. 제10항에 있어서, 상기 프로브가 상기 막 표면에 하나 이상의 별개 부분에 부착되어 있는 테스트 제품.
  12. 제10항에 있어서, 상기 막이 숙시닐화된 카세인으로 미리 피복되어있는 테스트 제품.
  13. 제10항에 있어서, 상기 프로브 올리고누클레오타이드가 HIV-I 게놈의 gag 부분의 누클레오타이드 단편에 상보적인 테스트 제품.
  14. A. 적어도 서로 반대면에 잇는 제1 및 제2면을 가지며 서로 반대면에 있는 최소한 하나의 면의 최소 하나의 별개 부분에 부착된 수불용성 핵산 프로브를 갖는 기판으로 구성된 핵산 테스트 제품에 있어서, 상기 프로브가 미리 알고있는 핵산의 제1핵산 서열에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되고 이 올리고누클레오타이드가 수불용성 입자에 공유결합하며 실질적으로 프로브중 어떤 것도 서로 반대면에 있는 면에 삽입되지 않는 핵산 테스트 제품을 미리 알고있는 핵산을 함유하고 있는 샘플과 접촉시켜 미리 알고있는 핵산과 상기 수불용성 프로브의 잡종형성 생성물을 형성시키고, B. 단계 A 전에, 단계 A와 동시에 또는 연속해서 샘플을 상기 미리 알고있는 핵산에 상보적이며 검출가능하게 라벨링된 프로브와 접촉시켜 수불용성 프로브 및 라벨링된 프로브 둘다와 잡종분자를 형성한 미리 알고있는 핵산의 고정화된 샌드위치 생성물을 형성시키며, C. 상기 고정화된 샌드위치 생성물을 고정화되지않은 물질로부터 분리하고, D. 샘플내 미리 알고있는 핵산의 양의 표시로서 상기 고정화된 샌드위치 생성물을 검출하는 것으로 구성되는, 미리 알고있는 핵산의 검출 방법.
  15. 제14항에 이어서, 상기 테스트 제품이 미리 알고있는 별개의 핵산에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되고 서로 반대면에 있는 면상의 별개 부분에 부착되어있는 다수의 수불용성 프로브를 포함하는, 다수의 미리 알고있는 핵산을 검출하는 방법.
  16. 제14항에 있어서, 상기 수불용성 프로브가 HIV-I DNA에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되는 방법.
  17. 제14항에 있어서, 상기 테스트 제품상의 각각의 별개 부분이 약 1-30㎟의 면적을 갖는 방법.
  18. A. 상보적인 프라이머, 데옥시리보누클레오타이드 트리포스페이트 및 중합체의 존재에서 샘플내 미리 알고있는 핵산을 증폭시키고, B. 적어도 서로 반대면에 있는 제1 및 제2면을 가지며 서로 반대면에 있는 최소한 하나의 면의 최소 하나의 별개 부분에 부착된 수불용성 핵산 프로브를 갖는 기판으로 구성된 핵산 테스트 제품에 있어서, 상기 프로브가 미리 알고있는 핵산에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되고 이 올리고누클레오타이드가 수불용성 입자에 공유결합하여 실질적으로 프로브중 어떤 것도 서로 반대면에 있는 면에 삽입되지 않는 핵산 테스트 제품을 상기 증폭된 미리 알고있는 핵산과 접촉시켜 미리 알고있는 핵산과 상기 수불용성 프로브의 고정화된 잡종형성 생성물을 형성시키며, C. 상기 고정화된 생성물을 고정화되지 않는 물질로부터 분리하고, D. 샘플내 미리 알고있는 핵산의 양의 표시로서 상기 고정화된 생성물을 검출하는 것으로 구성되는 미리 알고있는 핵산의 검출 방법.
  19. 제18항에 있어서, 단계 A에 사용된 상기 프라이머 중 최소한 하나가 검출가능하게 라벨링되는 방법.
  20. 제18항에 있어서, 상기 고정화된 생성물의 검출가능하게 라벨링된 제2프로브를 이용해 검출되는 방법.
  21. 제18항에 있어서, 일체 완비된 테스트 장치에서 행해지는 방법.
  22. 제18항에 있어서, 상기 기판이 미세다공성 여과막인 방법.
  23. 제18항에 있어서, 상기 기판이 실질적으로 비다공성이고 피복되지 않은 페이퍼인 방법.
  24. 제18항에 있어서, 상기 수불용성 입자가 약 5㎛ 미만의 직경을 갖는 중합체 입자인 방법.
  25. A. 상보적인 프라이머, 데옥시리보누클레오타이드 트리포스페이트 및 Thermus aquaticus로부터 유도된 중합효소의 존재에서 생물학적 샘플내 HIV-I DNA를 증폭시키고 B. 미세다공성 막의 한면의 최소 하나의 별개 부분에 수불용성 핵산 프로브가 부착되어있는 것으로 구성된 테스트 제품에 있어서, 상기 프로부가 HIV-I DNA에 상보적인 올리고누클레오타이드로 구성되고 이 올리고누클레오타이드가 약 0.1-5㎛의 평균 직경을 지닌 중합체 입자에 공유결합하며 실질적으로 상기 프로브중 어떤것도 상기 막 표면내에 삽입되지 않는 테스트 제품을 상기 증폭된 HIV-I DNA와 접촉시켜 HIV-I DNA와 상기 수불용성 프로브와의 고정화된 자총내 형성 생성물을 형성시키며, C. 상기 고정화된 생성물을 고정화되지않은 물질로부터 분리하고, D. 상기 샘플내 HIV-I DNA의 양의 표시로서 상기 고정화된 생성물을 검출하는 것으로 구성되는 HIV-I DNA의 검출방법.
  26. 제25항에 있어서, 최소한 하나의 프라이머가 비오티닐화되고 상기 고정화 생성물의 검출이 이것을 아비딘과 효소의 접합체와 접촉시킴에 의해 행해지는 방법.
  27. 제26항에 있어서, 상기 접합제가 피옥시다제를 포함하여 상기 접합제와 생성물과의 접촉이 생성물을 과산화수소와 퍼옥시다제의 존재에서 염료를 제공하는 루코 염료 조성물과 접촉시킴에 의해 행해지는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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Patent event date: 19900928

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