KR910005897B1

KR910005897B1 - 신규 아미카신의 합성 방법

Info

Publication number: KR910005897B1
Application number: KR1019860008418A
Authority: KR
Inventors: 만기아 알베르토; 센쪼 지오비오 빈; 오르나토 기오르기오
Original assignee: 피에렐 에스.피.에이.; 에토레 보펠리
Priority date: 1985-10-10
Filing date: 1986-10-08
Publication date: 1991-08-06
Also published as: IT1200774B; PL147396B1; AU603998B2; ATE55391T1; AU6363386A; DE3673305D1; NO864011D0; JPS6293297A; EP0218292B1; CS257292B2; ZA867440B; NZ217862A; JPH0212958B2; EP0218292A1; PL260615A1; DK475186A; NO864011L; NO165297B; YU44579B; US4902790A

Abstract

내용 없음.

Description

신규 아미카신의 합성 방법

본 발명은 신규 아미카신의 합성 방법에 관한 것이다. 하기 구조식(Ⅰ)

을 갖는 아미카신[O-3-아미노-3-]-데옥시-알파-D-글루코 피라노실-(1→6)-O-[6-아미노-6-데옥시-알파-D-글루코 피라노실-(1→4)-N¹-(4-아미노-2-히드록시-1-옥소부틸)-2-데옥시-D-스트렙트아민)은 치료에서 널리 사용되는 반합성 항생제이며, 이것은 하기 구조식(Ⅱ)

의 카나마이신 A를 하기 구조식(Ⅲ)

의 L-(-)-4-아미노-2-히드록시부티르산(이후, L-HABA로 칭함)으로 아실화시켜서 정식으로 유도된다.

아미카신은 문헌에 있어서는 에이취.가와구찌(H.Kawaguchi) 등의 ＂Journ.of Antib.＂제XXV호, (1972년), 제695페이지 및 특허 문헌에서는 미합중국 특허 제3,781,268호에 최초로 기재되었다.

그러나, 특허 및 비특허 문헌 모두에서 보다 더 높은 수율 및 순도를 갖는 아미카신의 제조를 목적으로 다수의 방법들이 기재되어 왔었다.

실제로, 카나마이신 A(Ⅱ)의 분자에서 알 수 있는 바와 같이, 4개의 아실화할 수 있는 아미노기가 있고, 이들중 2개는 2-데옥시스트렙트아민의 중심 싸이클에 있고, 각각 N-1 및 N-3으로 칭하여, 6-아미노-5-데옥시-D-글루코오스의 싸이클 중의 아미노기는 N-6'로, 3-아미노-3-데옥시-D-글루코오스의 싸이클 중의 아미노기는 N-3＂로 칭한다.

아미카신의 화학적 합성에 있어서 어려운 점은 제1위치에서 아미노기의 부위 선택적 아실화 반응에 있고, 다른 3개의 아미노기는, 아실화된 경우, 주 생성물 즉 아미카신의 화학 양론적 수율의 감소와는 별개로 더 적은 al생물학적 활성을 갖는 위치 이성질체로 유도된다.

또한, 아미카신과의 합성에서 존재하는 위치 이성질체들은, 주생성물의 수율의 추가 손실과 함께 이온 교환 수지 상에서 크로마토그래피에 의해서만 얻을 수 있는 수개의 생성물 중에서 정밀한 정제를 필요로 한다.

실제로, 아미카신 이외에, 다음과 같은 다른 이성질체들이 형성될 수 있으며, 이들은 L-(-)-4-아미노-2-히드록시부티르산의 동일한 기를 사용하여 아실화된다[티.나이또(T.Naito) 등의 Journal of Antib. 제XXVI호, 제297페이지, (1973년) 참조].

R'=-CO-CH(OH)-CH₂CH₂NH₂R=R＂=H(BB-K6으로 기재함)

R＂=-CO-CH(OH)-CH₂CH₂NH₂R=R'=H(BB-K11으로 기재함)

R=-CO-CH(OH)-CH₂CH₂NH₂R'=R＂=H(BB-K29으로 기재함)

카나마이신 A의 직접 아실화 반응[예를 들면, T.Naito 등의 Journ.of Antib., 제XXVI호, 제297페이지, (1973년) 참조]은 주로 보다 용이하게 반응하는 아미노기를 나타내는 N-6'아실화 유도체로의 수율을 높여주며, 이 사실은 아미카신이 L-(-)-4-D-아미노-2-히드록시-부티르산과의 직접 아실화반응에 의해 얻어지는 것을 방지해 준다.

실제로, L-(-)-4-아미노-2-히드록시부티르산과의 반응을 참조할 경우, 이 반응은 그의 유도체와의 반응을 의미하며, 여기에서, 카나마이신의 아미노기와 쉽게 반응하고, 높은 수율을 얻기 위해서 4위치에서 아미노기를 보호시키고, 카르복실기는 활성화시킨다.

더욱 구체적으로, 보호기로서, 아미노기 기능의 통상적인 보호기를 선택할 수 있고, 이 기들은 이 분야에서 숙련된 사람들에게 공지되어 있으며, 예를 들면, 묽은 산으로 처리하여 반응 종결시 쉽게 제거시킬 수 있는 t-부톡시카르보닐기, 또는 팔라듐 또는 백금 촉매상에서 접촉 수소첨가 분해시켜서 제거시킬 수 있는 벤질옥시카르보닐기 또는 4-니트로벤질옥시카르보닐기, 또는 기타 유사 보호기들[유기 합성에 있어서 보호기(Protective Groups in Organic Synthesis), 티.더블유.그린(T.W. Greene), 제이.윌리+썬즈 인크(J. Wiley+Sons Inc) 출판사, 1981년, 제218-287페이지 참조]을 들수 있다. 그러나, 카르복실기가 적합하게 활성화된 형태중의 하나는 N-히드로프탈이미드, N-히드록시-5-노르보르넨-2-3-디카르복시이미드와의 활성 에스테르, 또는 피발산, 벤조산 또는 벤질카르복실산과의 혼합 무수물이다.

아미카신의 출발 합성은 에이취가와구찌(H.Kawaguchi) 등의(인용된 참고문헌)에 의하여 행하여서, 6'위치에서 카나마이신의 아미노기를 보호기(예, 벤질옥시카르보닐기)와 반응시켜서 이 아미노기의 보다 큰 반응성으로 인한 심각한 불리한 점을 제거한다. 다음과 같은 구조식으로 표시되는 N-6'벤질옥시카르보닐 카나마이신(Ⅳ)이 형성되며,

이것은 이어서 아실화된다. 그러나, 이 아실화반응은 부위 선택적이 아니므로 아미카신 이외의 모든 N-벤질옥시카르보닐 보호기를 제거하기 위한 뒤 이은 수소첨가반응 후, 또한 위치 이성질체 BB-K11, BB-K29 및 약간의 폴리아실화 생성물이 형성된다. 이와 같은 선택율의 결여로 인해, 형성된 복합 혼합물의 분리가 필요하게 되었고, 분리는 이온 교환 크로마토그래피 수지 상에서 행해서 화학양론적 수율 22%의 조아미카신을 얻으며, 이것은 순수한 아미카신을 얻기 위해서 후속 정제에 의해 더 감소된다. 이 합성의 극히 낮은 수율은 다수의 합성 단계를 사용해서라도 수율을 증가시키고, 그 결과로 가격을 낮추기 위해서 연구되어야할 새로운 경로의 원인이 되었다.

티.나이또(T.Naito), 에스.나까가와(S.Nakagawa) 및 엠.오까(M.Oka)의 프랑스 특허 제2,272,009호에 앞서 합성의 경우와 동일한 6'-N-벤질옥시카르보닐 카나마이신 A(Ⅳ)를 약간의 방향족 알데히드와 6'-N-벤질옥시카르보닐 카나마이신 A 1몰당 알데히드 적어도 3몰의 비로 반응시켜서, 1,3 및 3＂위치에서 3개의 유리 아미노기와 각 알데히드 사이에 각각 쉬프(shiff) 염기를 형성하는 추가 합성 경로가 기재되어 있다. 그 후에, 6'-N-벤질옥시카르보닐 카나마이신 A 1몰당 3개의 알데히드 잔기를 함유하는 생성 화합물(Ⅴ)

을, 보호기의 수소첨가분해 후, L-HABA의 적합한 유도체로 아실화시켜서 아미카신을 얻는다.

그러나, 3개의 아미노기(1, 3 및 3＂에서)의 아실화 반응은 선택성이 아니며, 주로 BB-K29 및 BB-K11로 부터 아미카신을 분리하기 위해서 이온 교환 수지 상에서 크로마토그래피 분리를 행할 필요가 있다.

더우기, 아미카신의 화학양론적 총 수율은 단지 23%이며, 따라서 이 수율은 상기 방법의 수율과 비교된다.

또한, 이 수율은 중간 물질(Ⅳ), 6'-벤질옥시카르보닐 카나마이신에 대해서 계산한 것이며, 이것은 다시 카나마이신 A로 부터 45-56%의 화학양론적 수율로 얻어진다.

요약하면, 이들 두 합성 경로는 카나마이신 A에서 출발하여 아미카신 10-13%의 전체 수율을 얻으며, 이 값은 명백히 매우 낮다. 아미카신을 얻기 위한 카나마이신 A의 선택적 아실화 반응에 있어서 관련 개발은 엠.제이.크론(M.J.Cron) 등의 연구로 성취되었다[Chem.Comm., 제266페이지(1979년), 및 미합중국 특허 제4,347,354호 및 동 4,424,343호 참조].

이들 특허에는, 카나마이신 A의 폴리실릴화 유도체의 아실화에 의한 아미카신의 제조가 기재되어 있으며, 이것은 실릴과 다른 보호기로서 6' 또는 6'- 및 3-에서 얻는 것이 가능하다. 더욱 구체적으로, 카나마이신 또는 보호된 카나마이신의 폴리실릴화 유도체의 제조는 적합한 유기 용매(아세토니트릴이 적합함)중에서 카나마이신 기질을 여러 가지 실란화제(헥사메틸디실라잔이 적합함)와 반응시켜서, 카나마이신의 히드록시기 모두가 또는 그의 일부가 -Si(CH₃)₃기로 보호된 유도체를 얻음으로써 행할 수가 있다. 통상적인 수소첨가 분해후, L-HABA 산의 보호기만을 제거하는 경우에 있어서, 출발 카나마이신 및 폴리아실화 생성물 이외에, 위치 이성질체의 혼합물이 여전히 얻어지므로, 여전히 생성물의 크로마토그래피 분리가 필요하다. 이 방법은 아미카신의 수율이 현저하게 증가할 지라도 환경 안전의 측면에서 중대한 결점을 나타낸다. 더욱 구체적으로, 실제로, 이 반응에 적합한 용매인 아세토니트릴은 매우 독성이 높은 용매이고, 공업적 수준에서 이 용매의 용도는 매우 적당하지 않으며, 또한 헥사메틸디실라잔은 반응 도중에 기상 암모니아를 형성하는데, 이것은 대기 오염을 막기 위해서 적합하게 제거되어야만 한다.

아미카신의 제조를 위한 추가의 방법은 티.쓰찌야(T.Tsuchiya) 등이 [Tet.Lett., 제4951페이지(1979년) 참조] 연구 논문 및 자이단 호진 비세이부쓰 가가꾸 켄큐 카이의 벨기에 특허 제879,925호에 기초한 것이다.

이 합성 경로는 N-6' 및 N-3 위치에서 통상적인 N-벤질옥시카르보닐기로 보호된 중간 물질 유도체(Ⅳ)의 형성에 기초한 것이다.

3＂ 및 1위치의 아미노기 사이에서 아세트산 아연 및 관련 히드록실기를 반응시켜서 이 아미노기와 관련하여 인접 위치에서 착화합물을 형성해서 얻어지는 이 중간 물질은 티.엠.나가브후산 등 [J.Amer.Chem.Soc., 제100호, 제5254페이지 (1978년) 참조]의 논문 및 여러 금속과의 착물 형성에 의한 제조방법이 기재된 미합중국 특허 제4,136,254호에 이미 기재되어 있다.

그러나, 미합중국 특허 제4,136,254호에 기재된 바와 같이, 이 중간물질, 즉 ＂이-보호된 것(di-protected)＂은 L-HABA의 아실화 유도체로 직접 아실화시켜서 아미노글리코시드계 항생제로 전환되지만, 아미카신의 경우에서는 불만족스러운 전체 수율을 얻는 반면, 벨기에 특허 제879,925호에서 이 중간 물질은 처음에 3＂에서 에틸트리플루오르아세테이트와 반응해서 아미노기를 보호시키고, 이어서, 적합하게 선택된 L-HABA의 유도체와 반응해서, 1위치에서 단 1개의 유리 아미노기의 선택적 아실화를 행한다. 이어서 2개의 상이한 보호기, 트리플루오로아세틸기 및 벤질옥시카르보닐기는 각각 암모니아 및 수소로 제거시켜서 반응을 종결시킨다. 이 경우, 아미카산 수율도 적당히 증가하지만, 그러나 이 방법은 매우 독성이 높고 극히 비싼 반응물질인 에틸트리플루오로아세테이트의 사용으로 인해서 공업적 규모로 편리하게 사용할 수 없다.

본 발명자들은 아미카신의 새로운 합성법을 개발하였으며, 이 방법은 거의 무해한 반응물질 및 용매가 사용되므로, 공업 위생적 측면에서 특히 안전하고, 형성되는 중간 물질은 반드시 분리시킬 필요가 없으므로 용이하게 행해지며, 동시에 종래 기술에서 사용된 반응물질보다 훨씬 저렴한 반응물질을 사용함으로써 아미카신의 수율을 만족스럽게 높여준다.

더욱 구체적으로, 6'- 및 3-위치에서 보호된 카나마이신 A에서 출발하는 본 발명의 방법은, 이것을 반응의 용매 또는 공용매로서 물 존재하에서, 아연, 니켈, 철 코발트, 망간, 구리 및 카드뮴, 또는 이들의 혼합물 중에서 선택되는 2가 금속 양이온의 염과 반응시키고, 이어서 생성된 착물을 적합하게 선택된 L-HABA의 반응성 유도체와 반응시키는 것으로 된다. 이어서 pH가 9-10에 이를때까지 염기성 용액을 첨가하여 금속 양이온을 제거한다. 이어서, 아실화 생성물을 종래의 방법으로 분리시키고, 6'와 3-위치 및 측쇄에서 아미노 기능을 보호하는 기들을 제거하고, 얻어진 조 생성물을 크로마토그래피로 정제시켜서, 아미카신을 50%에 근접하는 수율로 얻었다.

더욱 구체적으로, 출발 생성물로서, 카나마이신 A의 유도체의 어느 것이든 사용될 수 있으며, 여기에서 6'- 및 3-위치의 아미노기는 수소 원자를 아실기[예, 벤질옥시카르보닐기 또는 치환된 벤질옥시카르보닐기(예, p-니트로벤질옥시카르보닐 또는 p-메톡시벤질옥시카르보닐)], 알콕시카르보닐기(예, t-부톡시카르보닐 또는 t-아밀옥시카르보닐, 프탈로일기) 및 할로알킬 카르보닐기(예, 트리플루오로아세틸 또는 클로로아세틸) 또는 기타 적합한 보호기로 치환시킴으로써 보호될 수 있다. 그러나, 6' 및 3위치의 아미노기는 벤질옥시카르보닐기 또는 치환된 벤질옥시카르보닐기로 보호시키는 것이 적합하며, 그 이유는 이미 지적한 바와 같이, 이 기들이 반응 종기에 접촉 환원 반응에 의해서 용이하게 제거될 수 있기 때문이다.

이 유형의 출발 생성물은 벨기에 특허 제855,704호 또는 캐나다 특허 제1,131,628호에 기재된 방법에 의해 제조할 수 있다. 더욱 구체적으로 본 발명의 방법 중 제1단계는 출발 생성물 즉, 3 및 6'위치 모두에서 보호된 카나마이신 A 및 2가 금 속의 선택된 염의 적어도 등몰량을 물 중에서, 또는 물과 불활성 물과 혼용할 수 있는 유기 용매(예, 디메틸술폭시드, 디메틸포름아미드, 저급 지방족 알코올, 테트라히드로푸란, 아세톤, 아세토니트릴 등)의 혼합물 중에서 용해시켜서 행한다.

2가 금속 양이온은 아연, 니켈, 철, 코발트, 망간, 구리 및 카드뮴 중에서 선택되고, 이 중에서 독성이 덜 하고 보다 경제적인 양이온이 명백히 적합한 반면에, 음이온은 약산에서 유도되는 음이온, 특히 약한 유기산(예, 아세트산, 프로피온산 및 벤조산)에서 유도되는 음이온이 적합할지라도, 이 음이온은 유기 음이온이나 무기 음이온 어떠한 것이라도 사용할 수 있으며, 그 이유는 일반적으로 이들 산의 금속염들이 더욱 큰 착화 활성을 갖기 때문이다. 염은 일반적으로 출발 기질에 대하여 1 : 1 내지 10 : 1의 몰비, 적합하기로는 2 : 1 내지 6 : 1의 몰비로 사용된다.

반응은 교반하의 실온에서 행하는 것이 적합하다. 일단 착물이 형성되면, 방법의 제2단계는 극성 및 비양성자성 유기 용매 중에서 L-HABA의 예정된 반응성 유도체의 용액 또는 현탁액을 교반하에서 첨가하는 것으로 된다. 적합하게 사용할 수 있는 유기 용매의 예로서 디메틸술폭시드, 아세토니트릴, 테트라히드로푸란, 디메틸포름아미드를 들 수 있으며, 본 발명의 적합한 특징에 의하여, 할로겐화 지방족 탄화수소(예, 염화메틸렌, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등)를 들 수 있다. 또한 본 발명의 방법 중의 제2단계는 실온에서 행하는 것이 적합하다. 그러나, 상기 양단계에 있어서, 반응을 촉진시키기 위하여 적당히 가열시킬 수 있다.

몇시간 동안 교반시킨 후, 존재 가능한 유기상은, 용매가 저비점을 갖을 경우 증류에 의해 제거시키거나, 또는 기계적 분리에 의해 제거시키고, 이어서 pH가 9 내지 10이 될 때까지 반응 혼합물에 염기성 수용액을 첨가한다. 염기제로서 임의의 알칼리 수산화물 또는 탄산염을 사용하거나, 또는 본 발명의 적합한 특징에 의하여 NH₄OH를 사용할 수 있다. 염기제를 첨가하여 착물은 금속 양이온의 해리와 함께 파괴되고 3,6'-이보호 아실화 생성물의 침전을 만든다.

후자를 여과시켜서 회수하고, 3 및 6'위치에서의 보호기 및 측쇄에서의 보호기는 종래의 방법에 의하여 제거시킨다. 예를 들면, 본 발명의 적합한 실시 방법에 의하여, 보호기들이 치환가능한 벤질옥시 카르보닐기들인 경우, 이들은 백금, 팔라듐, 산화팔라듐 또는 산화백금 촉매를 사용해서 종래의 접촉 수소첨가반응에 의해 제거시키고, 또는 이들 보호기들이 프탈로일기인 경우, 이들은 히드라진을 사용해서 가수분해에 의해 간단히 제거시키거나 또는 보호 t-부톡시카르보닐기들은 포름산 등으로 적합하게 제거시킨다.

이와 같이 해서 얻어진 조 생성물은 이어서, 아미노카신의 정제에 대해서 문헌에 공지된 크로마토그래피 기술에 의하여 정제시킨다. 아실화 반응은 본 발명의 방법에 의하여 3-6'-디-N-보호 카나마이신 A에서 행하고, 금속 양이온을 사용해서 후자의 착물을 형성한 후에, BB-K11 또는 N-1 및 N-3에서 이중 아실화에서 유도된 생성물이 아닌 아미카신이 적합하게 형성되기 때문에, 예상 밖의 매우 높은 부위-선택도를 얻었다.

이 결과는 필시 예견된 반응 조건 하에서 2개소의 착물 형성 부위의 안정성의 차이(N-3＂〉〉N-1)로 인해서 얻어지는 것이다.

이 결과를 하기 표에 나타냈다. 이 표는 3-6'-디-N-벤질옥시카르보닐-카나마이신의 직접 아실화로부터 또는 후자를 아세트산 아연과 착화시키고, 이어서 N-히드록시숙신이미드와 함께 4-벤질옥시카르보닐아미노-2-히드록시부티르산의 에스테르로 아실화하여 얻은 자료를 비교한 것이다.

직접 아실화 반응 27

착물의 아실화 반응 58

직접 아실화 반응 25

착물의 아실화 반응 25

보호 벤질옥시카르보닐기의 수소첨가분해 후, 최종 반응 혼합물의 조성물을 관찰하는 것이 매우 중요한데, 이것은 표준 조건하에서 실제적으로 정량적이며, 후자는 실험 부분에서 실시예로서 나타낸다.

많은 양에 있어서, 유일한 오염물은 카나마이신 A인데, 이것은 컬럼에서의 체류시간이 아미노카신보다 적기 때문에 이온 교환 크로마토그래피 컬럼에서 성분의 분리를 방해하지 않을 뿐만아니라, 농축시킨 후, 회수되어서 이 합성의 가장 값비싼 반응물인 카나마이신 A에 대하여 80%에 상당하는 아미카신의 화학양론적 수율을 얻는다.

다음의 실시예들은 본 발명의 방법을 더욱 상세히 설명하며, 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.

[실시예 1]

85%의 역가를 갖는 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 카나마이신 A 5.2g(5.87밀리몰)과 무수아세트산 아연 3.9g(21.3밀리몰)을 디메틸술폭시드 25ml와 물 70ml의 혼합물 중에 용해시켰다. 이 용액을 실온에서 2시간 동안 교반시킨 후, 여기에 염화메틸렌 140ml중에 용해시킨 N-히드록시-숙신이미드와의 4-벤질옥시카르보닐아미노-2-히드록시-부티르산의 에스테르 3.28g을 첨가하였다.

5시간 동안 교반시킨 후, 염화 메틸렌을 증류시키고, 20℃하에서 물 125ml와 농축 암모니아 25ml의 혼합물의 삼출(渗出)을 행하여 단리시켰다. 여과, 세척 및 45℃ 오븐에서 건조 후, 출발 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 카나마이신 A 16.8%와 함께 45% 순도를 갖는 3, 6'-디-N-벤질옥시카르보닐-1-N-[L-(-)-γ-벤질옥시카르보닐아미노-α-히드록시부티릴]카나마이신 A 6.7g을 얻었다. 이 수율은 화학양론치의 51.4%에 해당한다.

이와 같이 해서 얻은 생성물의 일부를 포름산 및 Pd/C로 수소첨가 반응시켜서, 아마카신 6.61mg/ml, 카나마이신 0.4ml/ml, BB-K11 0.21mg/ml 및 N-1 및 N-3＂에서 L-HABA와의 디아실화 생성물 1.83mg/ml를 함유하는 수용액 164ml를 얻었다. 아미카신의 상대 순도는 73%이다.

[실시예 2]

85%의 역가를 갖는 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐 카나마이신 A 5.2g(5.87밀리몰)을 메탄올 20ml 중에 현탁시키고, 여기에 물 80ml중에 용해시킨 아세트산 아연(무수 생성물로서) 3.9g을 신속히 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 교반시킨 후, 얻어진 용액에 염화메틸렌 100ml중에 용해시킨 N-히드록시-숙신이미드와의 L-(-)-4-카르보벤질옥시아미노-2-히드록시부티르산의 에스테르 3.28g(9.35밀리몰)을 단번에 첨가하였다.

실온에서 철야 방치시킨 후, 염화 메틸렌을 증발시킨 후 혼합물을 물과 암모니아(5%) 150ml로 희석하였다. 고상물을 여과시키고, 건조시킨 후, 49.8%의 역가를 갖는 3, 6'-N-디-벤질옥시카르보닐-1-N-[L-(-)-γ-벤질옥시카르보닐아미노-α-히드록시부티릴]-카나마이신 A 생성물 6.5g을 얻었고, 이것은 화학양론적 수율 57%에 해당한다.

여전히 존재하는 출발 생성물은 분리된 생성물의 17%에 해당하고, 이 수율은 화학양론치 25%에 해당한다.

아실화 반응에서 얻어진 생성물을 물 100ml 중에 현탁시켰다. 여기에 5% Pd/C 3.5g을 첨가하였다. 물 20ml 중에 용해시킨 포름산 7ml를 삼출시켰다. 이 혼합물을 철야 교반시킨 후, 혼합물을 여과시키고, 고상잔류물을 물로 세척하였다. 얻어진 용액 223ml는 다음과 같은 조성을 갖는다.

* N-1 및 N-3＂ 위치에서 아미카신의 동족체(카나마이신은 별도)에 대하여 아미카신의 상대 순도가 90% 이상인 L-HABA의 잔류물을 갖는 생성물.

이 용액 자체를 pH 7로 조절하고, 이어서 암모니아 형태로 약산 이온교환수지로 채워진 컬럼을 통해 삼출시켰다. 이것을 암모니아 용액으로 용출시키고, 카나마이신 A 및 아미카신을 함유하는 분획물을 분리시켰다.

합해서 증발시키고, 농축시킨 전자로부터, 메탄올을 사용하여 침전시킨 후, 20% 농도 용액에서 카나마이신 황산염 1.1g을 얻었다. 아미카신을 함유하는 분획물을 20%로 농축시키고, 50% 황산으로 산성화시킨 후, 탄소로 처리하고, 메탄올을 첨가하여서 680㎍/mg의 미생물학적 역가를 갖는 아미카신 황산염 2.6g을 얻었다.

[실시예 3]

이 비교예는 착물의 선택율(및/또는 안정도)이 근본적으로 물에 의하여 얼마나 많이 영향을 받는 것인가를 기재한 것이며, 여기에서 카나마이신 A에 대해서 행한 착화(부수 조건)와는 대조적으로, 물은 착화에 손상을 주지 않을 뿐만 아니라, 대조적으로 2개의 착화 부위 사이에서 차이를 증대시켜 준다.

실제로 물이 없을 경우에, 2가 양이온의 존재 하에서 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-카나마이신 A(Ⅵ)의 아실화 반응은 일어나지 않는데, 이것은 N-3＂ 위치 이외에 N-1 위치에서도 안정화 착물이 형성되기 때문이다.

85%의 역가를 갖는 3,6'-디-N-벤질옥시카르보닐-카나마이신 A 5.2g(5.87% 밀리몰)을 디메틸술폭시드 50ml 중에 용해시키고, 이 용액에 무수 아세트산 아연 3.9g(21.9밀리몰)을 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시킨 후, 염화메틸렌 140ml 중에 용해시킨 N-히드록시숙신이미드와의 4-벤질옥시카르보닐아미노-2-히드록시부티르산의 에스테르 3.28g을 첨가하였다.

이 혼합물을 5시간 동안 교반시킨 후, 염화 메틸렌을 증류시키고, 20℃ 이하에서 물 125ml와 진한 암모니아 25ml의 혼합물을 삼출시킴으로써 단리를 행했다. 생성물을 여과시키고, 45℃ 오븐에서 건조시켰다.

N-1에서 아실화 반응의 흔적 없이 80%의 역가를 갖는 출발 생성물 5.7g을 얻었다.

이들 조건 하에서, 뒤이은 아실화반응을 방해하는 착물이 형성되기 때문에 N-1 및 N-3＂ 위치는 차단시킨다.

Claims

3- 및 6'-에서 보호된 카나마이신 A를, 용매 또는 공용매로서 물 존재하에서 아연, 니켈, 철, 코발트, 망간, 구리 및 카드뮴 또는 이들의 혼합물 중에서 선택된 2가 금속 양이온의 염과 반응시키고, 생성된 착물을 L-(-)-4-아미노-2-히드록시부티르산(여기에서, 아미노기는 보호되고, 카르보닐기는 활성화됨)의 적당한 유도체와 반응시키고, 이어서, 금속 양이온을 제거시킴으로써 착물을 파괴시키고, 보호기를 제거시키는 것을 특징으로 하는 3- 및 6'-위치에서 보호된 카나마이신 A로부터 출발하는 아미카신의 선택적 합성 방법.
제1항에 있어서, 중간 물질 착물을 단리시키지 않는 방법.
제1항에 있어서, 착물의 형성을 물, 또는 물과 유기용매의 혼합물중에서 행하고, 유기 용매를 디메틸술폭시드, 디메틸포름아미드, 아세토니트릴, 아세톤, 테트라히드로푸란 및 저급 지방족 알코올 중에서 선택하는 방법.
제3항에 있어서, 착물의 형성을 물 중에서 행하는 방법.
제1항에 있어서, 2가 금속 양이온을 아연, 구리 및 니켈 중에서 선택하는 방법.
제5항에 있어서, 2가 금속 양이온이 아연(Ⅱ)인 방법.
제1항에 있어서, 염의 음이온이 약한 유기산에서 유도된 음이온 중에서 선택되는 방법.
제7항에 있어서, 음이온이 아세트산염, 프로피온산염 및 벤조산염 중에서 선택되는 방법.
제6항에 있어서, 2가 금속의 염이 아세트산 아연인 방법.
제1항에 있어서, 아미노 기능의 보호기가 치환된 벤질옥시 카르복실기인 방법.
제1항에 있어서, L-(-)-4-아미노-2-히드록시부티르산의 카르복실기를, 활성 에스테르로서 N-히드록시숙신이미드, N-히드록시-5-노르보넨-2,3-디카르복시이미드로 활성화시키거나, 또는 혼합된 무수물로서 프탈산, 벤조산 또는 벤질카르복실산으로 활성화시키는 방법.
제11항에 있어서, 카르복실기를 활성 에스테르로서 활성화시키는 방법.
제1항에 있어서, 2가 금속 양이온의 염을 카나마이신 출발유도체에 대하여 1 : 1 내지 10 : 2의 몰비로 사용하는 방법.
제13항에 있어서, 2가 금속 양이온의 염과 출발 카나마이신 유도체 사이의 몰비가 2 : 1 내지 6 : 1인 방법.
제1항에 있어서, L-(-)-4-아미노-2-히드록시부티르산의 유도체를 과량으로 사용하는 방법.
제15항에 있어서, 상기 과량이 20% 내지 60%인 방법.
제1항에 있어서, 혼합물의 pH를 9 내지 10으로 조절함으로써 착물로부터 2가 금속 양이온을 제거시키는 방법.
제17항에 있어서, NH₄OH 용액을 첨가함으로써 pH를 9 내지 10으로 조절하는 방법.