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KR890006814A - 형질전환 성장인자 β2의 클로닝 및 발현 - Google Patents

형질전환 성장인자 β2의 클로닝 및 발현 Download PDF

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KR890006814A
KR890006814A KR1019880012986A KR880012986A KR890006814A KR 890006814 A KR890006814 A KR 890006814A KR 1019880012986 A KR1019880012986 A KR 1019880012986A KR 880012986 A KR880012986 A KR 880012986A KR 890006814 A KR890006814 A KR 890006814A
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에프.퍼치오 안토니
매디센 린다
웹 낸시
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원본미기재
온코겐,어 리미티드 파트너쉽
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Abstract

내용 없음

Description

형질전환 성장인자2의 클로및 발현
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제2도는 인체 TGF-β1과 TGF-β2-442전구체 배열의 상동성을 나타낸 도면.

Claims (30)

  1. 제1a도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드 잔기 약1번에서 약1326번까지의 뉴클레오티드 암호 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체를 코딩 하는 뉴클레오티드 배열.
  2. 제1a도에 도시된 바와 같이 그 사이의 뉴클레오티드 잔기 346번에서 432번까지가 설정되고 그대신 뉴클레오티드 배열"AAT"로 대치된 뉴클레오티드 잔기 약1번에서 약 1326번까지의 뉴클레오티드 암호 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체를 코딩하는 뉴클레오티드 배열.
  3. 제1a도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드 잔기 약991번에서 약 1326번까지의 뉴클레오티드 배열로 이루어진 성숙한 형질전환 성장인자-β2 를 코딩하는 뉴클레오티드 배열.
  4. 제1a도에서 도시된 바와 같이 아미노산잔기 약1번에서 약44번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.
  5. 제1a도에 도시된 바와 같이 그 사이의 아미노산 잔기 116번에서 144번까지가 결실되고 그 대신 하나의 아스파라긴 잔기로 대치된 아미노산 잔기 약 1번에서 약442번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.
  6. 제1a도에 도시된 바와 같이 아미노산 잔기 약 20번에서 약 442번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.
  7. 제1a도에 도시된 바와 같이 그 사이의 아미노산 잔기 116번에서 144번까지가 결실되고 그 대신 하나의 아스파라긴 잔기로 대치된 아미노산 잔기 약 20번에서 약442번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.
  8. 제1a도에 도시된 바와 같이 아미노산 잔기 약331번에서 약 442번까지의 아미노산 배열로 이루어진 형질전환 성장인자-β2 전구체.
  9. 제1b도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드 잔기 약-70번에서 약 1755번까지의 뉴클레오티드 암호 배열로 이루어진 하이브리드 형질전환 성장인자-β1/형질전환 성장인자-β2를 코딩 하는 뉴클레오티드 배열.
  10. 제1b도에 도시된 바와 같이 아미노산 잔기 약 1번에서 약 390번까지의 아미노산 배열로 이루어진 하이브리드 형질전환 성장인자-β1/형질전환 성장인자-β2전구체.
  11. 제1b도에 도시된 바와 같이 아미노산 잔기 약 30번에서 약 390번까지의 아미노산 배열로 이루어진 하이브리드 형질전환 성장인자-β1/형질전환 성장인자-β2전구체.
  12. (a)형질전환 성장인자-β2활성을 갖는 펩티드 또는 단백질이 성숙핵 세포에 의해 생산되도록 유전자 발현을 조절 하는 제2 뉴클레오티드 배열의 조절하에서 형질전환 성장인자-β2를 코딩하는 뉴클레오티드 배열을 함유 하는 성숙핵 세포를 배양하고; (b) 이 배양체로부터 형질전환 성장인자-β2를 회수 하는 단계로 이루어지는 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  13. 제12항에 있어서, 형질전환 성장인자-β2를 코딩 하는 뉴클레오티드 배열이 제1a도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드 1번에서 1339번까지의 뉴클레오티드 배열로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  14. 제12항에 있어서, 형질전환 성장인자-β2를 코딩하는 뉴클레오티드 배열이 제1b도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드-70번에서 1775번까지의 뉴클레오티드 배열로 이루어진 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  15. 제12항에 있어서, 성숙핵 세포가 중국산 햄스터 난소 세포로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  16. 제12항에 있어서, 유전자 발현을 조절 하는 제2 뉴클레오티드 배열이 SV 40프로모터로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  17. 제12항에 있어서, 형질전환 성장인자-β2암호 배열을 함유 하는 성숙핵 세포가 동정될 수 있도록, 제 2뉴클레오티드 배열이 성숙핵 세포에는 결여된 선택 가능한 표식자와 프로모터로 이루어진 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  18. 제17항에 있어서,선별 가능한 표식자가 디히드로폴레이트 환원효소(dihydrofolate reductase)로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  19. 제18항에 있어서, 디히드로폴레이트 환원효소와 형질전환 성장인자-β2에 대한 암호 배열을 증폭된 수준으로 함유 하는 저항성 집락이 선택되도록, 성숙핵 세포를 메토트랙세이트에 노출시키는 단계가 추가됨을 특징으로 하는 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  20. 제19항에 있어서, 성숙핵 세포가 디히드로폴레이트 환원효소가 결여된 중국산 햄스터 난소 세포로 된 것이 특징인 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  21. (a)ATCC에 기탁된 형질도입체 1β9,12,5, 클론 36을 배양하여, (b) 이 배양체로부터 형질전환 성장인자-β2를 회수 하는 단계로 이루어지는 형질전환 성장인자 β2의 제조방법.
  22. 제21항에 있어서, 형질도입체를 메토트랙세이트 존재하에서 배양함을 특징으로 하는 형질전환 성장인자-β2의 제조방법.
  23. 성숙핵 세포가 활성 형질전환 성장인자-β2를 생산하도록 유전자 발현을 조절 하는 제2 뉴클레오티드 배열의 조절하에서 형질전환 성장인자-β2를 코딩하는 뉴클레오티드 배열을 함유 하는 성숙핵 세포.
  24. 제23항에 있어서, 형질전환 성장인자-β2를 코딩하는 뉴클레오티드 배열이 제1b도에 도시된 바와 같이 뉴클레오티드-70번에서 1755번까지의 뉴클레오티드 배열로 이루어진 것이 특징인 성숙핵 세포.
  25. 제23항에 있어서, 중국산 햄스터 난소 세포로 된 것이 특징인 성숙핵 세포.
  26. 제23항에 있어서, 유전자 발현을 조절 하는 제2 뉴클레오티드 배열이 SV 40 프로모터로 된 것이 특징인 성숙핵 세포.
  27. 제23항에 있어서, 제2 뉴클레오티드 배열이 시미안 형질전환 성장인자-β2 암호 배열을 함유 하는 성숙핵 세포가 동정될 수 있도록 성숙핵 세포에는 결여된 선택 가능한 표식자와 프로모터로 이루어진 것이 특징인 성숙핵 세포.
  28. 제27항에 있어서, 선택 가능한 표식자가 디히드로폴레이트 환원효소로 된 것이 특징인 성숙핵 세포.
  29. 제28항에 있어서, 디히드로폴레이트 환원효소가 결여된 중국산 햄스터 난소 세포로 된 것이 특징인 성숙핵 세포.
  30. ATCC에 기탁된 1β9,12,5, 클론 36 세포주.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019880012986A 1987-10-06 1988-10-05 형질전환 성장인자 β2의 클로닝 및 발현 KR970001236B1 (ko)

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