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KR20250031204A - 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물, 약학적 조성물 및 이를 사용하는 방법 - Google Patents

올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물, 약학적 조성물 및 이를 사용하는 방법 Download PDF

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KR20250031204A
KR20250031204A KR1020257002708A KR20257002708A KR20250031204A KR 20250031204 A KR20250031204 A KR 20250031204A KR 1020257002708 A KR1020257002708 A KR 1020257002708A KR 20257002708 A KR20257002708 A KR 20257002708A KR 20250031204 A KR20250031204 A KR 20250031204A
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KR
South Korea
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alkylene
alkyl
arylene
cycloalkylene
heteroarylene
Prior art date
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Pending
Application number
KR1020257002708A
Other languages
English (en)
Inventor
주바오 간
롱청 리
Original Assignee
락티젠 세러퓨틱스
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 락티젠 세러퓨틱스 filed Critical 락티젠 세러퓨틱스
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Abstract

본 발명은 시험관 내 및 생체 내 모두에서 다양한 대상체에 대한 올리고뉴클레오티드의 전달 효율을 크게 향상시켜 표적 유전자의 발현 조절을 향상시킬 수 있는 특정 구조를 갖는 화합물을 개시한다. 또한, 해당 화합물을 포함하는 약학적 조성물 및 이를 사용하여 표적 유전자의 발현을 조절하는 방법도 개시된다.

Description

올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물, 약학적 조성물 및 이를 사용하는 방법
발명의 분야
본 개시는 유전적 조절의 기술 분야, 특히 시험관 내 및 생체 내 올리고뉴클레오티드의 전달 효율을 향상시키는 데 유용한 고유한 화합물에 관한 것이다.
배경 기술
올리고뉴클레오티드 기반 치료법은 그 작용 메커니즘을 통해 거의 무한한 표적 유전자의 발현을 조절하기 때문에 떠오르는 기술이다. 올리고뉴클레오티드를 환자, 장기, 조직 또는 세포에 투여하면 다양한 생화학적 반응을 유발하거나 영향을 미쳐, 유전자 발현을 침묵, 억제, 활성화 및 조절하는 기능을 달성할 수 있다. 올리고뉴클레오티드 기반 치료제는 전통 의약품으로는 해결할 수 없었던 의학적 문제에 대한 해결책을 제시할 수 있는 중요한 가능성을 가지고 있다. 그러나, 올리고뉴클레오티드 기반 의약품의 상용화에 대한 주요 장애물 중 하나는 이를 적절한 장기, 조직 또는 세포에 전달하는 효과적인 방법이 부족하다는 점이다. 올리고뉴클레오티드 치료제는 일반적으로 분자량이 7 kDa에서 14 kDa 사이이며, 백본에 포스포디에스테르 또는 포스포로티오에이트가 포함되어 있기 때문에 강한 음전하를 띠고 있다. 상대적으로 큰 분자량과 높은 음전하 밀도는 올리고뉴클레오티드가 세포막을 통과하는 것을 억제한다. 올리고뉴클레오티드 전달을 촉진하기 위해 많은 전략이 활용되었지만, 전달 효율성은 여전히. 어려운 과제로 남아 있다.
따라서, 우수한 효율성으로 올리고뉴클레오티드를 더 넓은 범위의 장기, 조직 및 세포, 특히 종래 기술에서는 올리고뉴클레오티드를 거의 얻을 수 없는 장기, 조직 및 세포에 우수한 효율로 전달할 수 있는 고유한 기술 개발에 대한 오랜 요구가 계속되고 있다.
지속적인 탐구 끝에, 위의 목표를 달성할 수 있는 독특한 전달 강화 화합물을 개발하였다.
발명의 내용
본 개시는 질소 함유 5원 헤테로시클릭 고리 부분을 포함하는 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물(DEC)을 제공하며, DEC는 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 부착되어 시험관 내 및 생체 내 모두에서 대상체로의 올리고뉴클레오티드 전달 효율을 향상시키는 데 사용될 수 있다. 특정 실시예에서, DEC 식 AI 또는 식 AII에 표시되는 구조를 갖는다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물은 식 BI에 표시되는 부분을 포함한다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물은 식 BII에 표시되는 구조이다.
또한, 본 개시의 DEC에서 유래된 DEC 모이어티와 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드를 포함하는 올리고뉴클레오티드 전달제가 제공되며, 여기서, DEC 모이어티는 적어도 하나의 연결 모이어티를 통해 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 연결된다. 올리고뉴클레오티드는 안티센스 올리고뉴클레오티드 (ASO), 안티센스 RNA, 짧은 간섭 RNA (siRNA), 마이크로 RNA (miRNA), 작은 활성화 RNA (saRNA), 이중 사슬 RNA (dsRNA) 및 작은 가이드 RNA (sgRNA) 일 수 있다.
또한, 본 개시의 DEC를 포함하는 약학적 조성물이 제공되며, 약학적 조성물은 선택적으로 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 용매, 희석제, 안정제, 분산제, 완충제, 상용화제, 방부제 및 이들의 조합과 같은 추가 성분을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명에는 시험관 내 또는 생체 내에서 대상체의 표적 유전자 발현을 조절하는 방법을 제공되며, 여기서 이 방법은 생체 내 분석 또는 치료적 처치의 경우, 본 개시의 약학적 조성물을 대상체에 투여하는 단계, 또는 시험관 내 분석의 경우, 약학적 조성물을 세포와 접촉시키는 단계를 포함한다.
앞서 언급한 일반적인 설명과 다음의 상세한 설명은 모두 예시적이고 설명적인 것일 뿐, 청구된 바와 같이 본 발명을 제한하는 것이 아님을 이해해야 한다.
도면의 간단한 설명
본 발명의 특징 및 이점은 본 발명의 원리가 활용되는 예시적인 실시예를 설명하는 다음의 상세한 설명과 첨부된 도면을 참조함으로써 더 잘 이해될 수 있다:
도 1. 은 일차 마우스 간세포 (PMH) 세포에서 마우스 인자 VII (mFVII) mRNA 발현에 대한 전달 강화 화합물 접합 siRNA (즉, DEC 접합 siRNA 또는 DEC-siRNA) 의 녹다운 활성을 나타내는 도이다. PMH 세포는 리포펙타민 (lipofectamine)?? RNAiMax를 통해 표시된 DEC 접합 올리고뉴클레오티드 (DCO) (즉, RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 Rd-12712) 각각을 0.1 nM 및 1.0 nM으로 24시간 동안 형질감염시킨다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염되었다. dsCon2는 비특이적 듀플렉스 콘트롤로 사용되었다. mFVII mRNA 수준은 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR로 정량화하였다. Tbp는 내부 참조로 증폭되었다. Tbp로 정규화한 후, Mock 처리에 대한 세포 내 mFVII mRNA의 평균값을 표시하였다[두 개의 복제된 웰의 평균 ± 평균의 표준 오차 (SEM)].
도 2. 는 PMH 세포에서 자유 흡수에 의한 마우스 FVII mRNA 발현에 대한 DEC-접합 siRNA의 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 DCO (즉, 도 1. 에 설명된 바와 같이 RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712) 를 0.01, 0.05, 0.20, 0.78, 3.13, 12.50, 50 및 200 nM의 농도로 PMH 세포 배지에 직접 24시간 동안 첨가하였다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염시켰다 (미도시). dsCon2 듀플렉스는 비특이적 듀플렉스 콘트롤로 사용하였다 (미도시). mFVII mRNA 수준은 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR로 정량화하였다. Tbp는 내부 참조로 증폭되었다. Tbp로 정규화한 후, Mock 처리에 대한 세포 내 mFVII mRNA의 평균값을 나타낸다 (두 개의 복제 웰의 평균 ± SEM).
도 3. 은 C57BL/6J 마우스에서 피하 주사 (SC) 를 통해 마우스 FVII mRNA 발현에 대한 DEC 접합 siRNA의 생체 내 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 DCO (즉, 도 1에 설명된 바와 같이 RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712 ) 를 출생 후 (PND) 40일째에 0.2, 1 및 5 mg/kg 용량으로 C57BL/6J 마우스에 SC 주사를 통해 투여하였다. 식염수는 mFVII mRNA 발현의 기준선을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 주입되었다. 투여 후 3일째에 마우스를 희생시키고, 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 간 조직 제조물에서 분리한 총 RNA에서 mFVII mRNA 수준을 정량화하였다. Tbp는 내부 참조로 증폭되었다. 각 치료 그룹의 간 조직에서 평균 mFVII mRNA 수준은 Tbp로 정상화한 후, 식염수 그룹과 비교하여 표시하였다 (그룹당 3마리 동물의 평균 ± SEM).
도 4. 는 C57BL/6J 마우스에서 SC 주입을 통해 마우스 FVII 단백질 발현에 대한 DEC 접합 siRNA의 생체 내 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 DCO (즉, 도 1에 설명된 바와 같이 RD-12339, RD-12585 및 RD-12586) 를 0.2, 1 및 5 mg/kg 용량으로 PND 40의 C57BL/6J 마우스에 SC 주사를 통해 투여하였다. 식염수는 mFVII 단백질 발현의 기준선을 확립하기 위해 매개체 콘트롤로 주입되었다. 치료 후 3일째에 마우스를 희생시키고, ELISA 분석법을 통해 마우스 혈장에서 mFVII 단백질 수준을 정량화하였다. 각 치료 그룹의 OD 값을 검출하여 마우스 혈장에서 평균 mFVII 단백질 수준을 식염수 그룹과 비교하여 나타냈다 (그룹당 3마리 동물의 평균 ± SEM). *는 p < 0.05를 나타내고, **는 p < 0.01을 나타내며, ***는 p < 0.001을 나타내고, ****는 p < 0.0001을 나타낸다.
도 5. 는 C57BL/6J 마우스에서 SC 주사를 통해 마우스 FVII 단백질 발현에 대한 DEC-접합 siRNA 녹다운 활성의 지속 시간을 나타내는 도이다. 표시된 DCO (즉, RD-12710 및 RD-12712) 를 3 mg/kg으로 PND 40의 C57BL/6J 마우스에 89일 동안 SC 주사를 통해 투여하였다. RD-11706은 3 mg/kg으로 주입하여 콘트롤로 사용되었다. 식염수는 mFVII 단백질 발현의 기준선을 확립하기 위해 매개체 콘트롤로 주입되었다. 치료 후 10일, 31일, 54일, 61일, 80일 및 89일째에 마우스 혈장을 수집하여 ELISA 분석법을 통해 마우스 혈장에서 mFVII 단백질 수준을 정량화하였다. 각 그룹의 각 시점에서 3마리 동물의 OD 값을 검출하여, 마우스 혈장에서 평균 mFVII 단백질 수준을 식염수 그룹 (각 그룹의 각 시점에서 3마리 동물의 평균 ± SEM) 과 비교하여 나타냈다.
도 6A-6B는 PMH 세포에서 자유 흡수에 의한 마우스 Sod1 (Sod1) mRNA 발현에 대한 DEC-siRNA의 시험관 내 녹다운 활성을 나타내는 도이다. DEC-siRNAs (즉, RD-13110, RD-13115 및 RD-13118) 를 표시된 농도 구배 (즉, 1.56, 6.25, 25, 100, 400 및 1600 nM) 로 PMH 세포 배지에 첨가하여 도 6A에 표시된 용량 반응 곡선을 생성하였다. 발현 데이터를 정규화하기 위해 올리고뉴클레오티드가 없는 처리를 사용하였다. Sod1 mRNA 수준은 RNA 분리 및 RT 반응 후 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 정량화하였다. Tbp는 내부 참조로 증폭되었다. RD-12556을 처리한 것은 DEC 접합이 없을 경우, 용량 의존적 녹다운을 비교하기 위한 비접합 콘트롤로 사용되었으며, 이는 도 6B (두 개의 복제 웰의 평균 ± SEM) 에 표시되었다.
도 7은 성인 C57BL/6J 마우스에서 뇌실 내 (ICV) 주사를 통해 Sod1 mRNA 발현에 대한 다양한 DEC-siRNA의 생체 내 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 DEC-siRNA (즉, RD-13110, RD-13115 및 RD-13118) 는 200μg의 일방적인 ICV 주사를 통해 투여되었다. 식염수는 기준선을 확립하기 위해 매개체 콘트롤로 주입되었다. RD-12556은 비접합 콘트롤로 200 μg 주입되었다. 투여 후 7일째에 마우스를 희생시키고, RNA 분리 및 RT 반응 후 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 뇌 (즉, 뇌-전두엽 피질, 대뇌 및 뇌-소뇌), 척수 (즉, 경부, 흉부 및 요추) 및 말초 조직 (즉, 간) 에서 Sod1 mRNA 녹다운을 정량화하였다. Tbp는 내부 참조로 증폭되었다. 평균 Sod1 mRNA 수준은 Tbp로 정규화한 후 식염수 그룹의 mRNA 수준과 비교하여 표시된 각 조직에서 표시된다 (그룹당 2-3마리 동물의 평균 ± SEM).
도 8은 성인 C57BL/6J 마우스의 측면 꼬리 정맥에 정맥 주사 (IV) 한 후, Sod1 mRNA 발현을 녹다운하는 다양한 DEC-siRNA의 생체 내 활성을 나타내는 도이다. 표시된 DEC-siRNA (즉, RD-13110, RD-13115 및 RD-13118) 는 IV 주사를 통해 20 mg/kg으로 투여되었다. 식염수는 기준선을 확립하기 위해 매개체 콘트롤로 주입되었다. RD-12556은 비접합 콘트롤로 20 mg/kg으로 주입되었다. 치료 후 7일째에 마우스를 희생시키고, RNA 분리 및 RT 반응 후 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 선택된 말초 조직 (즉, 심장, 간, 비장, 폐, 신장 및 방광) 에서 Sod1 mRNA 녹다운을 정량화하였다. Tbp는 내부 참조로 증폭되었다. 평균 Sod1 mRNA 수준은 Tbp로 정상화한 후, 식염수 그룹의 mRNA 수준과 비교하여 표시된 각 조직에서 표시된다 (그룹당 3마리 동물의 평균 ± SEM).
도 9는 성인 C57BL/6J 마우스에 IV 주사한 후, Sod1 mRNA 발현에 대한 다양한 DEC-siRNA의 생체 내 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 DEC-siRNA (즉, RD-13110, RD-13115 및 RD-13118) 는 IV 주사를 통해 20 mg/kg으로 투여되었다. 식염수는 기준선을 설정하기 위해 매개체 콘트롤로 주입되었다. RD-12556은 비접합 콘트롤로 20 mg/kg 주입되었다. 투여 후 7일째에 마우스를 희생시키고, RNA 분리 및 RT 반응 후 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 다양한 위치 (예를 들어, 이두근, 반건양근, 광경근 및 둔근) 의 골격근 조직에서 Sod1 mRNA 수준을 정량화하였다. Tbp는 RNA 로딩을 위한 내부 기준으로 증폭되었다. 그룹당 3마리 동물의 골격근 조직에서, 평균 Sod1 mRNA 수준은 Tbp로 정상화한 후 식염수 그룹의 mRNA 수준과 비교하여 표시된다 (그룹당 3마리 동물의 평균 ± SEM).
도 10은 성인 SD 쥐에서 유리체내 (IVT) 주사를 통해 쥐 Sod1 mRNA 발현에 대한 다양한 DEC-siRNA의 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 DEC-siRNA (즉, RD-13115 및 RD-13118) 는 IVT 주사를 통해 왼쪽 눈당 30 μg씩 투여되었다. 각 쥐의 오른쪽 눈은 주사하지 않은 순수한 눈으로 사용되었다. 식염수는 기준선을 확립하기 위해 매개체 콘트롤로 주입되었다. RD-12556는 비접합 콘트롤로 주입되었다. 치료 후 14일째에 쥐를 희생시키고, RNA 분리 및 RT 반응 후 쥐 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 눈에서 Sod1 mRNA 수준을 정량화하였다. Hprt1 및 Hmbs의 mRNA 수준의 기하학적 평균은 RNA 로딩을 위한 내부 기준으로 사용되었다. 각 그룹의 3마리 동물의 망막 조직에서 평균 Sod1 mRNA 수준은 Hprt1 및 Hmbs로 정상화한 후, 식염수 그룹의 mRNA 수준과 비교하여 표시된다. 데이터는 그룹당 3마리 마우스의 평균 ± SEM을 나타낸다.
도 11은 방광 내 방광 (IVB) 주입 후 성인 C57BL/6J 마우스 방광에서 DEC-saRNA의 saRNA 농도를 나타낸다. 표시된 DEC-saRNA (즉, RD-13520) 는 주사를 통해 3mg으로 IVB 투여되었다. RD-10773은 비접합 saRNA 콘트롤 (즉, DEC가 없는 경우) 로 주입되었다 치료 후 2시간, 6시간, 12시간, 1일째, 4일째에 마우스를 희생시키고, RD-13520 및 RD-10773의 농도는 유전자 특이적 프라이머 세트 (R1-40-AS-SL-RT, R1-40-AS-SL-F1 및 SL-RT-qPCR-Uni-R2, 표 13을 참조) 를 사용하여 스템-루프 RT-qPCR을 통해 방광 조직에서 정량화되었다. 2마리 동물 (n=2) 의 마우스 방광 조직 샘플에서 두 saRNA의 평균 농도 (ng/g) 가 표시된 시점에서 표시된다 (평균 ± SEM).
도 12A-12C는 성인 C57BL/6J 마우스에서 IV 주입을 통한 DEC-siRNA의 체중 변화와 Sod1 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 siRNA (즉, RD-15135, RD-15136, RD-15137 및 RD-15138) 를 C57BL/6J 마우스에 10 mg/kg으로 투여하였다. RD-15135는 비접합 콘트롤로 사용되었다. RD-15136은 지질 (즉, C16) 접합 siRNA였다. 전형적인 DEC 구조 (즉, C5X5)를 가진 RD-15137은 전형적인 DEC-siRNA 역할을 하였다. 전형적인 DEC 구조 (즉, C5X5)와 지질 (즉 C16) 을 가진 RD-15138은 조합 siRNA (즉, DEC-C16-siRNA) 로 사용되었다. 식염수만을 사용한 처리는 기준 발현을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 사용되었다. 도12A는 치료 후 28일째까지 C57BL/6J 마우스의 체중 변화를 나타내는 도이다. 도12B는 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 주변 조직 (즉, 심장, 간, 신장, 지방 조직, 췌장, 횡격막), 혈관 (즉, 정맥이 있는 흉부 대동맥) 및 골격근 (즉, 이두박근, 반건양근, 광경근 및 둔근) 에서 정량화된 투여 후 14일째의 남아 있는 마우스 Sod1 mRNA를 나타내는 도이다. 도12C는 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 말초 조직 (즉, 심장, 간, 신장, 지방 조직, 췌장, 횡격막), 혈관 (즉, 정맥이 있는 흉부 대동맥) 및 골격근 (즉, 이두박근, 반건양근, 광경근 및 둔근) 에서 정량화된 투여 후 28일째의 남아 있는 마우스 Sod1 mRNA를 나타내는 도이다. Rpl13a는 내부 기준으로 증폭되었다. 선택된 마우스 조직에서 평균 Sod1 mRNA 수준은 Rpl13a로 정상화한 후 상대적 식염수 콘트롤로 표시되어 있다. 데이터는 그룹당 3마리 마우스의 평균 ± SEM을 나타낸다.
도 13A-13C는 성인 SD 암컷 쥐에서 척추내 (IT) 주사를 통한 DEC-siRNA의 체중의 변화와 Sod1 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 siRNA (즉, RD-15135, RD-15136, RD-15137 및 RD-15138) 를 C57BL/6J 마우스에 0.9 mg 투여하였다. RD-15135는 비접합 콘트롤로 사용되었다. RD-15136은 지질 (즉, C16) 접합 siRNA였다. 전형적인 DEC 구조 (즉, C5X5) 를 가진 RD-15137은 전형적인 DEC-siRNA로 사용되었다. 전형적인 DEC 구조 (즉, C5X5) 와 지질 (즉 C16)을 가진 RD-15138은 조합 siRNA (즉, DEC-C16-siRNA) 로 사용되었다. 인공 뇌척수액 (aCSF) 만을 사용한 치료는 기준 발현을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 사용되었다. 도13A는 는 치료 후 28일째까지 SD 쥐의 체중 변화를 나타내는 도이다. 도13B는 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 뇌 (즉, 전두엽 피질, 소뇌 및 대뇌), 척수 (즉, 경부, 흉부 및 요추) 및 말초 (즉, 간 및 신장) 조직에서 정량화된 투여 후 14일째의 남은 쥐 Sod1 mRNA를 나타내는 도이다. 도13C는 뇌 (즉, 전두엽 피질, 소뇌 및 뇌간), 척수 (즉, 경부, 흉부 및 요추) 및 말초 (즉, 간 및 신장) 조직에서 정량화된 투여 후 28일째의 남은 쥐 Sod1 mRNA를 나타내는 도이다. Actb 및 B2m의 mRNA 수준의 기하 평균은 RNA 로딩을 위한 내부 기준으로 사용되었다. 선택된 쥐 조직에서 평균 Sod1 mRNA 수준은 Actb 및 B2m으로 정상화된 후 aCSF 그룹의 mRNA 수준과 비교하여 표시된다. 데이터는 그룹당 3마리 마우스의 평균 ± SEM을 나타낸다.
도14A-14B는 SK-N-AS 및 T98G 세포에서 인간 SOD1 (즉, SOD1) mRNA 발현에 대한 보조 올리고뉴클레오티드 (즉, DEC-siRNA-ACO) 를 갖는 DEC-siRNA의 시험관 내 녹다운 활성을 나타내는 도이다. 표시된 DEC-siRNA-ACO (즉, RD-16149, RD-16099, RD-16100, RD-16101, RD-16150, RD-16103, RD-16104 및 RD-16105) 를 표시된 농도 (즉, 1.56, 6.25, 25, 100, 400 및 1600 nM) 로 SK-N-AS 및 T98G 세포에 형질감염시켜 도 14A-14B에 표시된 바와 같은 용량 반응 곡선을 생성한다. RD-16106은 형질감염되어 siRNA-ACO 콘트롤로 사용된다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염되었다 (표시되지 않음). SOD1 mRNA 수준은 RNA 분리 및 RT 반응 후 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 정량화하였다. B2M은 내부 참조로 증폭되었다. B2M으로 정상화한 후, Mock 처리에 비해 세포에 남아 있는 SOD1 mRNA의 평균값을 나타낸다 (두 개의 복제된 웰의 평균 ± SEM).
도 15A-15B는 성인 hSOD1 G93A 마우스에서 ICV 주입을 통한 SOD1 녹다운 활성과 siRNA의 조직 농도를 나타내는 도이다. 표시된 siRNAs (즉, RD-14851, RD-12500, RD-16145 및 RD-16334) 를 hSOD1 G93A 마우스에 200 μg로 투여하였다. RD-14851, RD-12500 및 RD-16145는 siRNA-ACO로 투여된다. DEC 구조 (즉, L17) 를 갖는 RD-16334를 투여하여 DEC-siRNA-ACO로 사용한다. aCSF만을 사용한 치료는 기준 발현을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 사용된다. 도 15A는 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 뇌 조직 (즉, 전두엽 피질, 소뇌 및 대뇌), 척수 및 말초 조직 (즉, 간) 에 투여한 후 30일째에 남아 있는 SOD1 mRNA를 정량화한 결과를 나타내는 도이다. Rpl13a는 내부 참조로 증폭되었다. 선택된 마우스 조직에서 평균 SOD1 mRNA 수준은 Rpl13a로 정상화한 후 aCSF 그룹의 mRNA 수준과 비교하여 나타낸다. 도 15B는 유전자 특이적 프라이머 세트 (R17-02-AS-SL-RT, R17-02-AS-SL-F3 및 SL-RT-qPCR-Uni-R1, 표 13 참조) 를 사용하여 투여 후 30일째에 스템-루프 RT-qPCR을 통해 뇌 (전두엽 피질, 소뇌 및 대뇌), 척수 및 말초 조직 (간) 에서 각 siRNA의 안티센스 사슬 농도를 나타내는 도이다. 각 치료에서 5마리 동물 (n=5) 의 siRNA 농도의 평균값을 나타낸다. 데이터는 그룹당 5마리 마우스의 평균 ± SEM을 나타낸다.
도 16A-16B는 GM03813 세포에서 SMN2 7 mRNA 동형체를 통해 SMN2 전 mRNA를 SMN2FL로 전환하는 "saRNA-ASO" DEC 접합 이중 작용 올리고뉴클레오티드 (DEC-DAO) 구조의 스플라이싱 활성을 나타내는 도이다. L21 링커 (즉, RD-16939 및 RD-16940), DEC-saSMN2 (즉, RD-16424) 및 DEC-안티센스 올리고뉴클레오티드 (DEC-ASO) (즉, RD-14644) 를 갖는 표시된 DEC-DAO 연결을 3일 동안 표시된 농도 (0.1, 1 및 10 nM) 로 GM03813 세포에 형질감염시킨다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드 가 없는 상태에서 형질감염된다. RD-16381은 비특이적 DEC 콘트롤로 형질감염된다. 조합 치료 (즉, RD-16424+RD-14644) 와 조합 치료 콘트롤 (즉, RD-16381+RD-16424, RD-16381+RD-14644) 도 GM03813 세포에 형질감염된다. 도 16A-16B는 각 PCR 반응에서 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR로 정량화된 SMN2FL 및 SMN2 7 의 mRNA 수준을 나타내는 도이다. SDHA는 발현 데이터를 정상화하는 데 사용되는 내부 참조로 증폭된다. 데이터는 SDHA로 정상화한 후, Mock 처리에 대한 SMN2FL 또는 SMN2 7의 평균 발현 수준을 나타낸다 (두 개의 복제된 형질감염 웰의 평균 ± SEM).
도 17A-17C는 두 가지 다른 인간 유전자 (SMN2 및 SOD1) 를 표적으로 하는 "saRNA-siRNA" DEC-DAO 구조가 GM03813 세포에서 SMN2 (SMN2FL 및 SMN2 7) 및 SOD1의 발현에 미치는 영향을 나타내는 도이다. L21 링커 (즉, RD-16941), DEC-saSMN2 (즉, RD-16424) 및 DEC-siSOD1 (즉, RD-13115) 를 갖는 표시된 DEC-DAO 연결은 3일 동안 표시된 농도 (즉, 0.1, 1 및 10 nM) 로 GM03813 세포에 형질감염된다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염된다. RD-16381은 비특이적 DEC 콘트롤로 형질감염된다. 조합 처리 (즉, RD-16424+RD-13115) 와 조합 처리 콘트롤 (즉, RD-16381+RD-16424, RD-16381+RD-13115) 도 3일 동안 표시된 농도 (즉, 0.1, 1 및 10 nM) 로 GM03813 세포에 형질감염된다. 도 17A-17B는 각 PCR 반응에서 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR로 정량화된 SMN2FL 및 SMN2 7의 mRNA 수준을 나타내는 도이다. 도 17C는 각 PCR 반응에서 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 정량화된 남아 있는 SOD1 mRNA 수준을 나타내는 도이다. SDHA는 발현 데이터를 정상화하는 데 사용되는 내부 참조로 증폭된다. 데이터는 SDHA로 정상화한 후, Mock 처리에 대한 SMN2FL, SMN2 7 또는 SOD1의 평균 발현 수준을 나타낸다 (두 개의 복제된 형질감염 웰의 평균 ± SEM).
도 18A-18B는 마우스 근모세포 세포주 (C2C12) 에서 마우스 Sod1과 마우스 Ppig의 발현에 대한 두 가지 다른 마우스 유전자(Sod1과 Ppig)를 표적으로 하는 "siRNA-siRNA" DEC-DAO 구조의 녹다운 활성을 나타내는 도이다. L21 링커 (즉, RD-16942), DEC-siSod1 (즉, RD-13115) 및 DEC-siPpig (즉, RD-14672) 를 갖는 표시된 DEC-DAO 연결은 표시된 농도 (즉, 0.01, 0.1 및 1 nM) 로 24시간 동안 C2C12 세포에 형질감염된다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염된다. RD-16381은 비특이적 DEC 콘트롤로 형질감염된다. 조합 처리 (즉, RD-13115+RD-14672) 와 조합 처리 콘트롤 (즉, RD-16381+RD-13115, RD-16381+RD-14672) 도 표시된 농도 (즉, 0.01, 0.1 및 1 nM) 로 24시간 동안 C2C12 세포에 형질감염된다. 도 18A는 각 PCR 반응에서 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR로 정량화된 남아 있는 마우스 Sod1 mRNA 수준을 나타내는 도이다. 도 18B는 각 PCR 반응에서 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR로 정량화된 남아 있는 마우스 Ppig mRNA 수준을 나타내는 도이다. 마우스 Rpl13a는 발현 데이터를 정상화하는 데 사용되는 내부 참조로 증폭된다. 데이터는 Rpl13a로 정상화한 후, Mock 처리에 대한 Sod1 및 Ppig의 평균 발현 수준을 나타낸다 (두 개의 복제된 형질감염 웰의 평균 ± SEM).
도19는 성인 C57BL/6J 마우스에서 두 개의 다른 마우스 유전자 (Sod1 및 Ppig) 를 표적으로 하는 "siRNA-siRNA" DEC-DAO 구조의 녹다운 활성이 마우스 Sod1 및 마우스 Ppig 발현에 미치는 영향을 나타내는 도이다. L21 링커 (즉, RD-16942), DEC-siSod1 (즉, RD-13115) 및 DEC-siPpig (즉, RD-14672) 를 갖는 표시된 DEC-DAO 연결은 IV 주사를 통해 10 mg/kg으로 C57BL/6J 마우스에 투여된다. 조합 치료 (즉, RD-13115+RD-14672) 는 IV 주사를 통해 10 mg/kg 투여된다. 식염수만 처리하여 기준 발현을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 사용된다. 투여 후 14일째에 남아 있는 마우스 Sod1 mRNA는 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 말초 조직 (즉, 심장, 간, 신장, 지방 조직, 횡격막), 혈관 (즉, 정맥이 있는 흉부 대동맥) 및 골격근 (즉, 이두박근, 반건양근, 광경근 및 둔근) 에서 정량화된다. Tbp는 발현 데이터를 정규화하는 데 사용되는 내부 참조로 증폭된다. 선택된 마우스 조직에서 평균 Sod1 mRNA 수준은 Tbp로 정상화한 후 식염수 그룹의 mRNA 수준과 비교하여 표시된다. 데이터는 그룹당 3-4마리 마우스의 평균 ± SEM을 나타낸다.
도 20A-20B는 유리체액 (IVT) 주사 후, 성인 SD 쥐의 망막과 유리체에서 DEC-saRNA의 올리고뉴클레오티드 농도를 비접합 saRNA와 비교한 것을 나타내는 도이다. 표시된 DEC-saRNA (즉, RD-16447) 와 비접합 saRNA (즉, RD-12173) 는 0.03 mg의 IVT 주사를 통해 투여된다. 치료 후 1시간, 1일째, 3일째, 7일째, 14일째 및 28일째에 쥐를 희생시키고, 유전자 특이적 프라이머 세트 (R1C-0M4-AS-SL-RT, R1C-0M4-AS-SL-F4 및 SL-RT-qPCR-Uni-R1, 표 13을 참조) 를 사용하여 스템-루프 RT-qPCR을 통해 망막 및 유리체액에서 RD-16447 및 RD-12173의 농도를 정량화한다. 각 그룹의 올리고뉴클레오티드 농도 평균 값을 나타낸다 (그룹당 3마리 동물의 평균 ± SEM).
도 21은 T98G 세포에서 SOD1 mRNA 발현에 대한 DEC-siRNA의 시험관 내 녹다운 활성을 나타낸다. 표시된 DEC-siRNA (즉, RD-17138) 를 0.1 nM 및 1 nM에서 24시간 동안 T98G 세포에 형질감염시킨다. RD-11566은 형질감염되어 비특이적 듀플렉스 콘트롤로 사용된다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염시켰다. SOD1 mRNA 수준은 RNA 분리 및 RT 반응 후, 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 정량화한다. B2M은 발현 데이터를 정상화하는 데 사용되는 내부 참조로 증폭된다. B2M으로 정상화한 후 Mock 처리에 대한 세포 내 남아 있는 SOD1 mRNA의 평균값을 나타낸다 (4개의 복제된 웰의 평균 ± SEM).
발명의 상세한 설명
새로 개발된 올리고뉴클레오티드 전달제는 종래 기술의 올리고뉴클레오티드 전달 기술에 비해, 원하는 양 또는 더 높은 수준의 올리고뉴클레오티드를 상기 표시된 표적 조직에 보다 효율적으로 전달할 수 있으므로 생물학적 활성 및 약리학적 특성 (예를 들어, 생체 분포, 생물학적 이용률, 약동학, 활성, 효능 등) 을 개선할 수 있다. 일부 실시예에서, 생물학적 활성 특성의 개선은 향상된 세포 흡수율, 더 높은 효능 및 더 긴 지속 시간/반감기를 초래할 수 있다. 일부 실시예에서, 약리학적 특성의 개선은 또한 낮은 독성, 낮은 용량, 덜 빈번한 투여 및 덜 바람직하지 않은 면역 반응으로 이어질 수 있다. 일부 실시예에서, 본 올리고뉴클레오티드 전달제는 더 간단한 합성 공정을 포함하기 때문에, 제조 시 가공성이 더 우수하다. 일부 실시예에서, 본 올리고뉴클레오티드 전달제는 양성자 펌프 (가역적 및 비가역적 양성자 펌프 억제제, PPI), 도파민 수용체 (DRD), 안지오텐신 II 유형 1 수용체 (AT1), 히스타민 수용체 (HRH), 이중 특정 미토겐 활성화 단백질 키나제 (MEK) 및/또는 사이클린 의존성 키나제 (CDK) 등을 표적으로 하는 자유 벤즈이미다졸 또는 벤즈이미다졸 유도체의 고유한 약리학적 특성을 보유한다. 일부 실시예에서, 고유한 약리학적 특성으로 인해 본 올리고뉴클레오티드 전달제가 소화성 궤양, 고혈압, 정신분열증, 기생충 감염, 박테리아 감염, 바이러스 감염 및 암 등을 포함한 약물에 잠재적으로 사용될 수 있다.
일부 실시예에서, 본 명세서에 개시된 새로 개발된 올리고뉴클레오티드 전달제는 중추 신경계 (예: 뇌 및 척수), 간, 폐, 신장, 장, 췌장, 담낭, 심장, 림프절, 비장, 위, 방광, 근육 및 뼈와 같은 표적 조직 또는 세포에 도달하여 기능하도록 효과적인 양의 올리고뉴클레오티드 전달을 용이하게 할 수 있다. 일부 실시예에서, 세포 내 표적 유전자의 발현을 상향 조절하거나 하향 조절하는 것과 같은, 올리고뉴클레오티드 전달제의 활성 조절은 종래 기술의 기술에 비해 개선될 수 있다. 따라서, 본 명세서에 제공된 결과에 비추어, 당업자는 본 명세서에 설명된 올리고뉴클레오티드 전달제를 사용하면 다양한 질환, 장애 및/또는 상태의 발병을 예방, 치료 및/또는 온셋을 지연하기 위해, 위에서 언급한 바와 같이 다양한 표적 또는 세포에서 치료용 올리고뉴클레오티드의 생물학적 분포를 개선할 수 있음을 이해할 것이다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자가 일반적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 또한, 본 명세서에 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허 및 기타 참고 문헌은 참조로 통합된다.
본 명세서에 개시된 바와 같이, "일" 및 "이것"과 같은 단수 형태는 맥락에서 명확하게 달리 명시되지 않는 한 복수의 객체를 포함한다.
본 명세서에 개시된 바와 같이, "대략적으로", "약", "실질적으로" 및 이와 유사한 용어는 본 명세서의 주제와 관련된 당업자에 의해 일반적으로 통용되는 용법과 조화를 이루는 넓은 의미를 갖도록 의도된다.
본 명세서에 개시된 바와 같이, "및/또는"은 "및 또는 대안적으로"를 의미한다. 수치 범위가 제공되는 경우, 범위에는 범위 내의 모든 수치 값 (상한 및 하한 값 포함) 과 범위 내의 모든 하위 범위가 포함된다. 예를 들어, 1에서 3까지의 범위는 수치 값 1, 2 및 3 중 어느 하나뿐만 아니라 1에서 2까지의 하위 범위 및 2에서 3까지의 하위 범위를 포함할 수 있다.
용어 "올리고뉴클레오티드", "폴리뉴클레오티드" 또는 "올리고"는 상호 교환적으로 사용될 수 있으며, 뉴클레오티드의 중합체를 지칭하며, DNA, RNA 또는 DNA/RNA 하이브리드의 단일 사슬, 이중 사슬 또는 부분 이중 사슬 핵산 분자, 규칙적 또는 불규칙적으로 번갈아 나타나는 데옥시리보실 부분과 리보실 부분을 포함하는 올리고뉴클레오티드 사슬, 그리고 이러한 올리고뉴클레오티드에 대한 변형되고 자연적 또는 비자연적으로 존재하는 프레임워크를 포함하되 이에 국한되지 않는다. 일 실시예에서, 올리고뉴클레오티드는 안티센스 올리고뉴클레오티드 (ASO), 안티센스 RNA, 짧은 간섭 RNA (siRNA), 마이크로 RNA (miRNA), 작은 활성화 RNA (saRNA), dsRNA 및 작은 가이드 RNA (sgRNA) 로 구성된 그룹에서 선택될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 용어 "올리고뉴클레오티드 사슬", "사슬" 및 "올리고뉴클레오티드 서열"은 상호 교환적으로 사용될 수 있으며, 50개 미만의 염기, 예를 들어 45개 미만, 40개 미만, 35개 미만의 염기, 예를 들어 2-50개 염기, 또는 5-45개 염기, 또는 10-40개 염기, 또는 15-35개 염기, 또는 20-30개 염기 (데옥시리보핵산 (DNA) 또는 리보핵산 (RNA) 의 뉴클레오티드 포함) 를 갖는 짧은 뉴클레오티드 서열의 총칭을 지칭한다. 일부 비제한적 예에서, 사슬의 길이는 5~50개 뉴클레오티드, 10~40개 뉴클레오티드, 15~35개 뉴클레오티드, 18~30개 뉴클레오티드 또는 20~25개 뉴클레오티드 중 임의의 길이일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "표적 유전자"는 유기체에 자연적으로 존재하거나, 세포 및/또는 그 크로마틴에 일시적으로 또는 안정적으로 혐질감염되거나 통합될 수 있는 핵산 서열, 형질감염 유전자, 바이러스 또는 박테리아 서열, 염색체 또는 염색체 외 유전자를 지칭할 수 있다. 표적 유전자는 단백질 코딩 유전자 또는 마이크로RNA 유전자 및 긴 비코딩 RNA 유전자와 같은 비단백질 코딩 유전자일 수 있다.
본 출원의 실시예에서, 하나의 표적 유전자는 SOD1이다. 정의에 따르면, "표적 서열"은 siRNA 또는 saRNA의 센스 사슬 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드가 상동성 또는 상보성을 갖는 서열 단편이다. 예를 들어, 특정 실시예에서, SOD1 siRNA는 인간 SOD1 전사체 내의 표적 선택 서열과 상동하거나 상보적이다.
본 명세서에 사용되는 용어 "가이드 사슬" 또는 "G 사슬"은 아르고뉴 (AGO) 단백질과 조립되는 작은 RNA 듀플렉스의 사슬을 지칭한다. 가이드 사슬에 부분적으로 또는 완전히 상보적인 다른 사슬을 "패신저 사슬" 또는 "P 사슬"이라고 한다. 특정 이론에 국한되지 않고, 표적에 상보적 서열을 운반하는 사슬은 안티센스 사슬이며, 적절하게 설계된 경우, 가이드 사슬로 우선적으로 선택된다. 이 경우, 패신저 사슬은 센스 사슬이다. 그러나, 사슬의 5' 말단이 AGO2의 MID 도메인 내에 포획될 때까지는 사슬을 가이드 사슬이라고 말할 수 없다. 따라서, 센스 사슬은 가이드 사슬로 선택되어 안티센스 패신저 사슬로 될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "LNA"는 2'-산소와 4'-탄소 원자가 추가 가교로 연결된 잠긴 핵산을 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "BNA"는 N-O 연결을 가진 5원자 또는 6원자 가교 구조를 포함할 수 있는 2'-O 및 4'-아미노에틸렌 가교 핵산을 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "PNA"는 카르보닐 메틸렌 링커를 통해 글리신 질소에 부착된 핵염기를 갖는 N-(2-아미노에틸) 글리신 단위로 구성된 유사 펩티드 (pseudopeptide) 백본을 갖는 핵산 모방체를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "안티센스 올리고뉴클레오티드" 또는 "ASO"는 올리고뉴클레오티드 또는 이와 유사한 염기의 서열을 갖거나, 포함하거나, 이로 구성된 단일 사슬 올리고뉴클레오티드 또는 이와 유사한 염기를 지칭하며, 이를 통해 올리고뉴클레오티드 또는 이와 유사한 염기가 다른 핵산, 변형된 핵산 또는 핵산 유사체와 같은 표적 분자에 왓슨-크릭 염기 쌍 또는 비왓슨-크릭 염기 쌍과 같은 염기 쌍을 통해 하이브리드화되도록 허용한다. 일부 실시예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 표적 분자에 완전히 상보적이거나 거의 완전히 상보적이다. 일부 실시예에서, 본 명세서에 기술되거나 당업계에 알려진 모든 유형의 올리고뉴클레오티드는 안티센스 올리고뉴클레오티드로 사용될 수 있다. 다양한 실시예에서, 안티센스 올리고뉴클레오티드는 본 명세서에 기술되어 있거나 본 분야에 공지된 바와 같이, RNA 간섭, RNase H 매개 절단, 엑손 스키핑, 엑손 스키핑 방지, 약제(예: 단백질, RNA, 단백질-RNA 복합체 또는 기타 분자)가 다른 핵산에 결합하는 것을 향상 또는 차단하는 것, 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드에 의해 수행되는 기타 생물학적 기능을 포함하며, 다양한 생물학적 기능 중 임의의 것을 수행하거나 이에 참여할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "작은 간섭 RNA", "siRNA" 및 "억제 RNA (iRNA)"는 상호 교환적으로 사용될 수 있으며, 표적 유전자 발현을 하향 조절, 녹다운 또는 침묵시킬 수 있는 리보핵산 분자를 지칭한다. 이는 이중 사슬 핵산 분자일 수 있다. 전사 후, mRNA를 분해하여 번역을 방지함으로써 상보적 뉴클레오티드 서열을 가진 특정 유전자의 발현을 방해한다. siRNA는 주로 세포질에 있는 표적 mRNA에 결합하여 RNA 간섭 (RNAi) 메커니즘을 통해 전사 후 유전자 발현을 하향 조절한다. siRNA는 ALS 환자의 경우 치료 효과를 극대화하기 위해, SOD1과 같이 RNAi 메커니즘을 통해 유전자의 mRNA 서열을 표적으로 하여 발현을 침묵시키도록 설계될 수 있다. siRNA는 내인성 RNA 염기 또는 화학적으로 변형된 뉴클레오티드를 가진 분자이다. 변형은 세포 활성을 제거하지 않으며, 오히려 안정성 및/또는 세포 효력을 증가시킨다. 화학적 변형의 예로 포스포로티오에이트, 2'-디옥시뉴클레오티드, 2'-OCH3-함유 리보뉴클레오티드, 2'-F-리보뉴클레오티드, 2'-메톡시에틸 리보뉴클레오티드 및 이의 조합 등을 포함한다. siRNA는 다양한 길이 (예: 10-200bps) 와 구조(예: 헤어핀, 단일/이중/부분 이중 사슬, 돌출부, 틈새/간격, 불일치)를 가질 수 있으며, 세포에서 처리되어 활성 유전자 침묵을 제공한다. 이중 사슬 siRNA는 각 사슬 (블런트(blunt) 말단) 또는 비대칭 말단 (오버행) 에 동일한 수의 뉴클레오티드를 가질 수 있다. 예를 들어, 1-2 뉴클레오티드의 오버행은 센스 및/또는 안티센스 사슬에 존재할 수 있고, 주어진 사슬의 5' 및/또는 3' 말단에도 존재할 수 있다. siRNA 분자의 길이는 일반적으로 약 10개 내지 60개, 약 10개 내지 50개, 약 15개 내지 30개, 약 17개 내지 29개, 약 18개 내지 28개, 약 19개 내지 27개, 약 20개 내지 26개, 약 21개 내지 25개, 및 약 22개 내지 24개의 염기쌍이고 일반적으로 약 15개, 16개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 23개, 25개, 30개, 40개 또는 50개의 염기쌍이다. 또한, "작은 간섭 RNA", "침묵 RNA" 및 "siRNA"라는 용어는 변형된 뉴클레오티드 또는 유사체가 포함되지만 이에 국한되지 않는 리보뉴클레오티드 이외의 핵산도 포함할 수도 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "작은 활성화 RNA", "saRNA" 및 "작은 활성화 리보핵산"은 상호 교환적으로 사용될 수 있으며, 표적 유전자 발현을 상향 조절할 수 있는 리보핵산 분자를 지칭한다. 이는 표적 유전자의 비코딩 핵산 서열 (예컨대, 프로모터, 인핸서) 과 상동성을 갖는 리보뉴클레오티드 서열을 포함하는 첫 번째 핵산 사슬 및 첫 번째 사슬과 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 두 번째 핵산 사슬으로 구성된 이중 사슬 핵산 분자일 수 있다. saRNA는 또한, 분자 내에서 2개의 상보적인 영역에 의해 헤어핀 구조를 형성하기 쉬운 합성 또는 벡터 발현 단일 사슬 RNA 분자로 구성될 수 있으며, 여기서 첫 번째 영역은 유전자 프로모터의 표적 서열과 상동성을 갖는 리보뉴클레오티드 서열을 포함하고, 두 번째 영역에 포함된 리보뉴클레오티드 서열은 첫 번째 영역과 상보적이다. saRNA 분자의 듀플렉스 영역 길이는 일반적으로 약 10개 내지 60개, 약 10개 내지 50개, 약 10개 내지 40개, 약 12개 내지 30개, 약 14개 내지 28개, 약 16개 내지 26개, 약 18개 내지 24개, 및 약 20개 내지 22개의 염기쌍이고 일반적으로 약 10개, 13개, 15개, 17개, 18개, 19개, 20개, 21개, 22개, 25개, 30개, 40개, 50개 또는 60개의 염기쌍이다. 또한, "작은 활성화 RNA", "saRNA" 및 "작은 활성화 리보핵산"이라는 용어는 변형된 뉴클레오티드 또는 유사체가 포함되지만 이에 국한되지 않는 리보뉴클레오티드 이외의 핵산도 포함한다.
본 명세서에 사용되는 "ODV" 및 "올리고뉴클레오티드 전달 수단"은 상호 교환적으로 사용되며, 이는 이중 또는 이중 사슬 RNA (예: siRNA 또는 saRNA) 와 링커를 통해 이중 사슬 RNA에 공유 결합된 보조 올리고뉴클레오티드 (ACO) 를 포함하는 올리고뉴클레오티드 분자를 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 용어 "전달 강화 화합물" 및 "DEC"는 상호 교환적으로 사용되며 본 개시의 화합물을 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 용어 "DEC-접합 올리고뉴클레오티드" 및 "DCO"는 상호 교환적으로 사용될 수 있으며, DEC에서 유래된 적어도 하나의 모이어티가 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드에 예를 들어 공유 결합으로 부착된 조합을 지칭한다. 또한, DCO는 올리고뉴클레오티드가 세포 내 표적 부위를 표적화하거나, 세포 내 표적 부위에 축적되거나 접근하는 데 도움이 되는 적어도 하나의 표적 모이어티를 추가로 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 "투여", "비경구 투여", "투여된" 및 "비경구 투여"라는 문구는 일반적인 장내 투여, 국소 투여 및 특히 주사 투여를 지칭하는 당업계에서 이해되는 의미를 가지며, 정맥 내, 근육 내, 동맥 내, 척추강 내, 캡슐 내, 안와 내, 심장 내, 피내, 복강 내, 기관 내, 피하, 표피하, 관절 내, 피막하, 거미막하, 척수 내 및 흉골 내 주사 및 주입을 포함하되 이에 국한되지 않는다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "약학적 조성물"은 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 담체 및 기타 첨가제와 함께 제형화된 활성제를 지칭한다. 일부 실시예에서, 활성제는 관련 집단에 투여될 때 미리 정해진 치료 효과를 달성할 통계적으로 유의미한 확률을 나타내는 치료 요법에 투여하기에 적합한 단위 투여량으로 존재한다. 일부 실시예에서, 약학적 조성물은 고체 또는 액체 형태로 투여하기 위해, 특별히 제형화될 수 있으며, 여기에는 점적제 (수성 또는 비수성 용액 또는 현탁액), 정제 (예를 들어, 협측, 설하 및 전신 흡수를 목표로 하는 것), 볼러스, 분말, 과립, 혀에 적용하기 위한 페이스트와 같은 경구 투여; 피하, 근육 내, 정맥 내 또는 경막외 주사와 같은 멸균 용액 또는 현탁액 또는 서방형 제제 등 비경구 투여; 피부, 폐 또는 구강에 크림, 연고 또는 서방형 패치 또는 스프레이를 적용하는 것과 같은 국소 적용; 페서리, 크림 또는 폼과 같은 질내 또는 직장 내; 설하; 안구; 피부를 통해; 비강을 통해, 폐를 통해, 및 다른 점막 표면에 맞게 조정된 것들이 포함된다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용 가능한 담체"는 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제 또는 용매 캡슐화 물질과 같은 약학적으로 허용 가능한 물질, 조성물 또는 운반체를 의미하며, 이는 대상 화합물을 한 장기 또는 신체의 일부에서 다른 장기 또는 신체의 일부로 운반하거나 수송하는 데 관여한다. 각 담체는 제형의 다른 성분과 호환되고 환자에게 해를 끼치지 않는다는 의미에서 "허용 가능한” 것이어야 한다. 약학적으로 허용 가능한 담체로 사용될 수 있는 물질의 몇 가지 예로는 락토오스, 포도당 및 자당과 같은 당; 옥수수 전분 및 감자 전분과 같은 전분; 카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨, 에틸 셀룰로오스 및 셀룰로오스 아세테이트와 같은 셀룰로오스 및 그 유도체; 분말 트라가칸트; 맥아; 젤라틴; 활석; 코코아 버터 및 좌약 왁스와 같은 부형제; 땅콩 기름, 면실유, 홍화유, 참기름, 올리브유, 옥수수유 및 대두유와 같은 오일; 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜; 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리올; 에틸 올레산 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; 아가; 수산화 마그네슘 및 수산화 알루미늄과 같은 완충제; 알긴산; 발열원 없는 물; 등장성 식염수; 링거액; 에틸 알코올; pH 완충 용액; 폴리에스테르, 폴리카보네이트 및/또는 폴리안하이드라이드; 및 제약 제형에 사용되는 기타 무독성 호환 물질 등이 사용된다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "대상체", "피험자" 및 관련 용어는 본 발명에 따라 제공된 화합물 또는 조성물이 실험, 진단, 예방 및/또는 치료 목적으로 투여되는 모든 유기체를 지칭한다. 전형적인 대상체에는 동물 (예: 마우스, 쥐, 토끼, 비인간 영장류 및 인간과 같은 포유류; 어류; 조류; 곤충; 벌레 등) 및 식물이 포함된다. 일부 실시예에서, 대상체는 질환, 장애 및/또는 컨디션을 앓고 있고/있거나 이에 걸리기 쉬울 수 있다. 일부 실시예에서, 대상체는 인간 또는 다른 포유동물이다. 일부 실시예에서, 대상체는 남성 또는 여성일 수 있다. 제한되지 않은 예에서, 동물은 영장류, 설치류, 가축 또는 사냥 동물과 같은 척추동물이다. 제한되지 않은 예에서, 영장류에는 침팬지, 시노몰구스 원숭이, 거미 원숭이, 붉은털 원숭이와 같은 마카크 원숭이가 포함된다. 설치류에는 마우스, 쥐, 우드척, 흰족제비, 토끼, 햄스터가 포함된다. 제한되지 않은 예에서, 가축 및 사냥 동물에는 소, 말, 돼지, 사슴, 들소, 버팔로, 집고양이와 같은 고양이 종, 견 등 견과 종류, 여우, 늑대, 닭, 에뮤, 타조와 같은 조류, 송어, 메기, 연어와 같은 물고기가 포함된다. 본 명세서에 설명된 측면의 특정 실시예에서, 대상체는 포유류, 예를 들어 영장류, 예를 들어 인간이다. 제한되지 않은 예에서, 포유동물은 인간, 비인간 영장류, 마우스, 쥐, 견, 고양이, 말 또는 소일 수 있지만, 이러한 예에 국한되지는 않는다. 일부 실시예에서, 인간이 아닌 포유류는 자가면역 질환 또는 염증과 관련된 장애의 동물 모델을 나타내는 대상체로서 유리하게 사용될 수 있다. 일부 실시예에서, 본 명세서에 설명된 방법 및 조성물은 가축 및/또는 애완동물을 치료하는 데 사용될 수 있다.
조성물의 "치료 유효량"은 요망하는 치료 효과를 달성하기에 충분한 양이며, 완치 또는 완전 관해에 필요한 양이 아니다. 본원의 구현예에서, 치료 효능은 임의의 질병 지표의 개선을 의미하고, 치료 유효량은 치료된 개체에서 임상적으로 유의한 상태/증상의 개선을 야기하기에 충분한 양을 의미한다. "치료적 유효량" 및 "유효량"이라는 문구는 본 명세서에서 적어도 약 15%, 바람직하게는 적어도 50%, 더 바람직하게는 적어도 90% 감소시키거나 적어도 약 50%, 적어도 약 100%, 적어도 약 200%, 더 바람직하게는 적어도 약 500% 증가시키는 데 충분한 양을 의미하며, 치료를 받는 개인의 활동, 기능 및 반응에서 임상적으로 유의미한 결핍을 예방할 수 있다. 유효량은 대상체의 크기와 체중, 질환의 유형 또는 적용하는 특정 제제와 같은 요인에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 적용 약제의 선택은 "유효량"을 구성하는 요소에 영향을 미칠 수 있다. 당업자는 본원에 포함된 요소들을 연구하고 과도한 실험 없이 본원의 제제의 유효량을 결정할 수 있을 것이다.
투여 방식은 유효량을 구성하는 것에 영향을 미칠 수 있다. 적용 제제는 질병 진단 또는 상태 이전 또는 이후에 대상체에 투여될 수 있다. 또한, 여러 분할 투여량 및 시간차 투여량을 매일 또는 순차적으로 투여하거나, 투여량을 지속적으로 주입하거나 정맥 주사할 수 있다. 또한, 적용 제제의 투여량은 치료 또는 예방 상황의 긴급성에 의해 지시된 바와 같이 비례적으로 증가하거나 감소할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "치료한다", "치료된", "치료하는" 또는 "치료"는 의학계에서 일반적으로 이해되는 의미를 가지며, 따라서 완치 또는 완전 관해를 의미하지 않지 않고, 유익하거나 바람직한 임상 결과를 포함한다. 이러한 유익하거나 바람직한 임상 결과의 예는 치료 없이 예상된 생존 기간보다 연장된 생존 기간, 다음 증상, 즉, 근위 골격근의 약화 및 위축, 독립적으로 앉거나 걸을 수 없음, 연하 곤란, 호흡 곤란 등과 같은 증상 중 하나 이상의 감소를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.
본원에서 사용되는 질병의 "예방" 또는 "지연"은 질병의 진행 억제를 의미한다.
본 개시는 질소 함유 5원 헤테로사이클릭 고리 모이어티를 포함하는 특정 구조를 갖는 화합물이 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 결합되어 대상체에게 올리고뉴클레오티드를 전달하는 것을 돕고, 따라서 시험관 내 및/또는 생체 내에서 표적 유전자의 조절을 개선할 수 있다는 예상치 못한 발견에 기초한다. 예시적인 실시예에서, 본 명세서에 개시된 화합물은 전달 담체 또는 제형이 필요 없이 간에서 올리고뉴클레오티드 전달 효율을 현저하게 향상시키고, 엔도솜 탈출 및 핵 전위 설계를 결합할 수 있다.
예시적인 실시예에서, 질소 함유 5원 헤테로시클릭 고리 모이어티는 다음 공식 중 하나에 표시되는 코어 구조를 가질 수 있으며, 단순화를 위해 코어 구조의 고리 원자에 부착된 모든 화학 결합, 원자 및 치환기는 생략된다.
위에 표시된 코어 구조는 서로 다른 고리 원자를 포함하고, 융합된 고리 코어 구조는 전기적으로 중성이거나 예를 들어 설포늄 또는 4차 암모늄의 형태로 국소적으로 하전될 수 있다. 하나 이상의 불포화 이중 결합이 비국소화된 π-전자 공액 효과로 인해 융합 고리 코어 구조에서 이동할 수 있으며, 치환기의 존재/부재를 포함한 모든 치환기는 치환기가 부착된 각 고리 원자의 범주 및 원자가에 따라 달라질 수 있다. 예를 들어, 추가 치환기는 융합된 고리 코어 구조의 고리 원자로 존재하는 설포늄 또는 4차 암모늄 이온에 부착될 수 있다. 이러한 모든 변형은 본 개시의 개념 내에 있다.
일 실시예에서, 본 개시의 화합물은 식 BI 의 구조를 포함하며, 여기서 X'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; F', G', H' 및 I'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 각 별표는 선택적으로 적어도 하나의 치환기 또는 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 연결된 부위를 지칭한다.
일 실시예에서, 본 개시의 화합물은 식 AI 또는 식 AII에 표시되는 구조를 갖는다:
여기서, 각 는 독립적으로 공유 단일 또는 이중 결합을 나타내고; X는, 각 발생 시, 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택된 원자이고; F, G, H 및 I는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다.
일 실시예에서, m은 1, 2 또는 3의 정수이고, n은 1, 2 또는 3의 정수이며, m+n=4이다. 일부 예시적인실시예, m=1 및 n=3; 또는 m=2 및 n=2; 또는 m=3 및 n=1이다.
일 실시예에서, C는 각 발생 시 존재하지 않거나, 수소; 불소, 염소, 브롬 또는 요오드와 같은 할로겐 원자; 히드록실; -(C2-C22)알킬, 또는 -(C2-C19)알킬, 또는 -(C3-C18)알킬, 또는 -(C4-C16)알킬, 또는 -(C6-C12)알킬, 또는 -(C8-C10)알킬과 같은 (C1-C25)알킬; -(C2-C19)알콕시, 또는 -(C3-C18)알콕시, 또는 -(C4-C16)알콕시, 또는 -(C6-C12)알콕시와 같은 (C1-C20)알콕시; 할로겐화 (C2-C19)알킬, 또는 할로겐화 (C3-C18)알킬, 또는 할로겐화 (C4-C16)알킬, 또는 할로겐화 (C6-C12)알킬, 또는 할로겐화 (C8-C10)알킬과 같은 할로겐화 (C1-C20)알킬; 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시, 예를 들어 할로겐화 (C2-C19)알콕시, 또는 할로겐화 (C3-C18) 알콕시, 또는 할로겐화 (C4-C16)알콕시, 또는 할로겐화 (C6-C12)알콕시, 또는 할로겐화 (C8-C10) 알콕시와 같은 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택되며; 여기서 "할로겐화”는 불소화, 염소화, 브롬화, 요오드화 또는 이들의 조합일 수 있다. 일 실시예에서, 식 I에 표시되는 구조에서, 각 B는 F, G, H 및 I 중 하나에 부착되고, C는 나머지 F, G, H 및 I에 부착된다. 일 실시예에서, B는 H에 부착되고 세 개의 C'는 각각 F, G 및 I에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, B는 G에 부착되고 세 개의 C'는 각각 F, H 및 I에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, B는 F에 부착되고 세 개의 C'는 각각 G, H 및 I에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, B는 I에 부착되고 세 개의 C'는 각각 F, G 및 H에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, 두 개의 B'는 G 및 H에 개별적으로 부착되고, 두 개의 C'는 각각 F 및 I에 개별적으로 부착된다.
일 실시예에서, B는 각 발생 시 히드록실; -C(O)OH; -P(O)2-OH; -P(O)-OH; -P(O)(S)-OH; -CN; -(C2-C20)알킬, 또는 -(C3-C16)알킬, 또는 -(C6-C12)알킬과 같은 -(C1-C22)알킬; -O-(C2-C20)알킬, 또는 -O-(C3-C16)알킬, 또는 -O-(C6-C12)알킬과 같은 -O-(C1-C22)알킬; -(C2-C20)알케닐, 또는 -(C3-C16)알케닐, 또는 -(C6-C12)알케닐과 같은 -(C1-C22)알케닐; -(C2-C20)알킬렌-OH, 또는 -(C3-C16)알킬렌-OH, 또는 -(C6-C12)알킬렌-OH와 같은 -(C1-C22)알킬렌-OH; -(C5-C16)시클로알킬렌-OH, 또는 -(C6-C12)시클로알킬렌-OH, 또는 -(C6-C10)시클로알킬렌-OH와 같은 -(C3-C22)시클로알킬렌-OH; -(C6-C22)아릴렌-OH; -(C6-C22)헤테로아릴렌-OH; -(C2-C18)알킬렌-C(O)OH, 또는 -(C3-C16)알킬렌-C(O)OH, 또는 -(C6-C12)알킬렌-C(O)OH와 같은 -(C1-C22)알킬렌-C(O)OH; -(C3-C22)시클로알킬렌-C(O)OH; -(C6-C22)아릴렌-C(O)OH; -(C5-C22)헤테로아릴렌-C(O)OH; -O-C(O)-(C2-C18)알킬렌-C(O)NH2, 또는 -O-C(O)-(C3-C16)알킬렌-C(O)NH2, 또는 -O-C(O)-(C6-C12)알킬렌-C(O)NH2와 같은 -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2; -(C2-C18)알킬렌-O-C(O)-(C2-C18)알킬렌-C(O)NH2, 또는 -(C3-C16)알킬렌-O-C(O)-(C3-C16)알킬렌-C(O)NH2, 또는 -(C6-C12)알킬렌-O-C(O)-(C6-C12)알킬렌-C(O)NH2와 같은 -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2; -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH; -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH; -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2; -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2; -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-OH; -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH; -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH; -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH; -(C2-C18)알킬렌-O-P(-N(C2-C18 알킬)2)-O-(C2-C18)알킬렌-CN, 또는 -(C3-C16)알킬렌-O-P(-N(C3-C16 알킬)2)-O-(C3-C16)알킬렌-CN, 또는 -(C6-C12)알킬렌-O-P(-N(C6-C12 알킬)2)-O-(C6-C12)알킬렌-CN과 같은 -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN; -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH; -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2; -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH; -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN; -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH; -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH; -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2; -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN; -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH; -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH; -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2; -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH; -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH 및 -(C1-C22)알킬렌-CN로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택된다. B에 포함된 (C1-C22)알킬 또는 (C1-C22)알킬렌은 각각 1 내지 22개의 탄소 원자, 또는 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 16개의 탄소 원자, 또는 4 내지 12개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 또는 알킬렌일 수 있다.
일 실시예에서, A1, A2 및 A3은 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, -O-R1, -SH, -(C1-C25)알킬, 할로겐화 -(C1-C25)알킬, -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -C(O)O-R1, -O-(C1-C22)알킬, -S-(C1-C22)알킬, -C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -O-아다만틸, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -CH(NH-CO-(C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬]3, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1]3, -CH(NH-CO-할로겐화 (C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-(C1-C22)알킬, -C(O)NH-R1, -C(O)NR2-R1, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-COOH, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -NH-C(O)-R1, -NR2-C(O)-R1, -O-P(O)2-O-R1, -OP(O)(S)-O-R1, -O-P(O)-O-R1, -NH-R1, -NR2-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH, -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이며, 여기서, 상기 표시된 고리가 치환될 때, 치환기는 히드록실, 할로겐 원자 (예를 들어 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), (C1-C16)알킬, (C1-C12)알콕시; 및 식 III에 표시되는 치환기를 포함할 수 있다.
일 실시예에서, Y는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; P, Q, S 및 T는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 별표는 식 III로 표시되는 치환기가 식 I 또는 식 II에 표시되는 구조와 연결된 부위를 나타낸다;
일 실시예에서, R3, R4 및 R5는 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, -O-R1, -SH, -(C1-C25)알킬, 할로겐화 -(C1-C25)알킬, -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -C(O)O-R1, -O-(C1-C22)알킬, -S-(C1-C22)알킬, -C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -O-아다만틸, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -CH(NH-CO-(C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬]3, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1]3, -CH(NH-CO-할로겐화 (C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-(C1-C22)알킬, -C(O)NH-R1, -C(O)NR2-R1, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-COOH, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -NH-C(O)-R1, -NR2-C(O)-R1, -O-P(O)2-O-R1, -OP(O)(S)-O-R1, -O-P(O)-O-R1, -NH-R1, -NR2-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH, -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸, 및 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이고, 여기서, 표시된 고리가 치환될 때, 치환기에는 히드록실, 할로겐 원자 (예를 들어 불소, 염소, 브롬 또는 요오드), (C1-C16)알킬, (C1-C12)알콕시가 포함될 수 있다.
일 실시예에서, R7은 각 발생 시 P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되며, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택된다.
일 실시예에서, M은 0, 1, 2 또는 3의 정수이다.
일 실시예에서, R6은 P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, 직접 결합, -O-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -P(O)2-O-, -O-P(O)2-O-, -P(O)(S)-O-, -O-P(O)(S)-O-, -O-P(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-O-, -O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-N((C1-C22)알킬)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-O-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-N((C1-C22)알킬)-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C3-C22)시클로알킬렌-, -(C3-C22)시클로알킬렌-O-, -O-(C3-C22)시클로알킬렌-, -(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-O-, -O-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-NH-, -NH-(C6-C22)아릴렌-, -C(O)-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C22)아릴렌- 및 -C(O)-NH-(C6-C22)아릴렌-C(O)-O-로 구성된 그룹에서 선택된다.
일 실시예에서, R1은 각 발생 시 수소, 히드록실, -(C1-C22)알킬, -(C3-C22)시클로알킬, -(C6-C22)아릴, -(C1-C22)알콕시, -(C3-C22)시클로알콕시, -(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-(C1-C22)알킬, -OC(O)(C1-C22)알킬, -C(O)-O-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C3-C22)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C22)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C22)시클로알킬, -C(O)-(C6-C22)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 글루코실, 아세트아미드글루코실, 아세틸글루코사민, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 클로로퀸 및 알칼로이드로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다.
일 실시예에서, R2는 각 발생 시, 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, (C1-C12)알콕시카르보닐, (C6-C16)아릴 또는 (C6-C16)아릴옥시카르보닐로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다.
일 실시예에서, A1, A2, A3, B, C, R1, R2, R3, R4, R5 및 R7에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 (C1-C22)알킬, (C1-C22)알콕시, (C1-C22)알킬카르보닐, (C1-C22)알콕시카르보닐, (C6-C22)아릴, (C6-C22)아릴옥시, (C6-C22)아릴카르보닐, (C6-C22)아릴옥시카르보닐, 트리((C1-C22)알킬)실릴 및 트리((C1-C22)알콕시)실릴로 구성된 그룹에서 선택된 말단 보호 그룹 RP로 보호될 수 있고, 여기서, 보호 그룹 Rp에 포함된 (C1-C22)알킬은 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 18개의 탄소 원자, 또는 4 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12 탄소 원자와 같이 1 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 알킬일 수 있고, Rp에 포함된 (C1-C22)알콕시는 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 18개의 탄소 원자, 또는 4 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자와 같이 1 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 알콕시일 수 있으며; Rp에 포함된 (C6-C22)아릴은 6 내지 20개의 탄소 원자, 또는 6 내지 18개의 탄소 원자, 또는 6 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10개의 원자와 같이 6 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 아릴일 수 있고; Rp에 포함된 (C6-C22)아릴옥시는 6 내지 20개의 탄소 원자, 또는 6 내지 18개의 탄소 원자, 또는 6 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10개의 원자와 같이 6 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 아릴옥시일 수 있다.
일 실시예에서, A1, A2 및 A3은 동시에 수소가 아니며, R3, R4 및 R5는 동시에 수소가 아니다. 예시적인 실시예에서, X는 탄소이고, A1, A2 및 A3은 모두 존재한다. 다른 실시예에서, X는 질소이고, A1 및 A2는 모두 존재하며 A3은 존재하지 않는다. 다른 실시예에서, X는 양전하를 띤 질소 (즉, 4차 암모늄)이고, A1, A2 및 A3은 모두 존재한다. 다른 실시예에서, X는 황 또는 산소이고, A1 및 A3은 모두 존재하지 않으며 A2는 존재한다. 다른 실시예에서, X는 양전하를 띠는 황(즉. 설포늄)이고, A2 및 A3은 모두 존재하고 A1은 존재하지 않는다.
일 실시예에서, A1, A2, A3, R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 R7에 포함된 (C1-C22)알킬 또는 (C1-C22)알킬렌은 각각 1 내지 22개의 탄소 원자, 또는 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 16개의 탄소 원자, 또는 4 내지 12개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10 탄소 원자를 포함하는 알킬 또는 알킬렌일 수 있다.
일 실시예에서, A1, A2, A3, B, C, R1, R2, R3, R4, R5 및 R7에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 실리카, 실리카겔, 글라스, 세라믹, 폴리머, 셀룰로오스 및 이들의 조합으로 구성된 그룹에서 선택된 지지체 물질과 연결될 수 있다. 일부 실시예에서, 고체 물질은 비드 형태이다. 비드는 제한 없이, 자기 비드, 상자성 비드, 실리카 비드, 아가로스 비드 등을 포함하는 임의의 재료로 만들어질 수 있다.
다른 실시예에서, 본 개시의 화합물은 식 AIV 내지 식 AXIII 중 하나에 표시되는 구조를 가질 수 있다.
여기서, A1, A2, A3, B, C, F, G, H, I, m 및 n은 위에 정의된 바와 같다.
일 실시예에서, 본 개시의 화합물은 식 BII에 표시되는 구조를 갖는다.
여기서, X'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; F', G', H' 및 I'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다.
다른 실시예에서, A1’, A2’ 및 A3’은 각각 존재하지 않거나 -H, - R1’, -O-R1’, -S-R1’, -C(O)-R1’, -C(O)O-R1’, -O-C(O)-R1’, -C(O)NH-R1’, -C(O)NR2’-R1’, -NH-C(O)-R1’, -NR2’-C(O)-R1’, -O-P(O)2-O-R1’, -OP(O)(S)-O-R1’, -O-P(O)-O-R1’, -NH-R1’, -NR2’-R1’, -(CH2)r'-NH-R1’, -(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)O-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-C(O)-R1’, -(CH2)r'-C(O)-R1’; -(CH2)r'-C(O)O-R1’; -(CH2)r'-O-C(O)-R1’, -(CH2)r'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NR2’-C(O)-(CH2)s'-R1’, -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’)(-C(O)-NH-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이거나, A1’과 A2’는 서로 연결되어 A1’, A2’, A1'과 연결된 질소 원자, A2'과 연결된 탄소 원자가 치환되지 않은 또는 치환된 헤테로고리를 형성할 수 있다. A1’, A2’ 및 A3’에 포함된 (C1-C22)알킬렌은 각각 (C2-C20)알킬렌, (C3-C16)알킬렌, (C4-C14)알킬렌, (C6-C12)알킬렌, 또는 (C8-C10)알킬렌일 수 있다. R1’ 및 R3’은 각각 수소; 히드록실; -(C2-C25)알킬, 또는 -(C2-C22)알킬, 또는 -(C3-C18)알킬, 또는 -(C4-C16)알킬, 또는 -(C6-C12)알킬, 또는 -(C8-C10)알킬과 같은 -(C1-C30)알킬; -(C4-C40)시클로알킬, 또는 -(C5-C30)시클로알킬, 또는 -(C6-C20)시클로알킬, 또는 -(C6-C16)시클로알킬과 같은 -(C3-C50)시클로알킬; -(C6-C40)아릴, 또는 -(C6-C30)아릴, 또는 -(C6-C25)아릴, 또는 -(C6-C22)아릴, 또는 -(C6-C16)아릴, 또는 -(C6-C12)아릴과 같은 -(C6-C50)아릴; -(C2-C22)알콕시, 또는 -(C3-C20)알콕시, 또는 -(C4-C16)알콕시, 또는 -(C6-C12)알콕시와 같은 -(C1-C30)알콕시; -(C4-C40)시클로알콕시, 또는 -(C5-C30)시클로알콕시, 또는 -(C6-C20)시클로알콕시, 또는 -(C6-C16)시클로알콕시와 같은 -(C3-C50)시클로알콕시; -(C6-C40)아릴옥시, 또는 -(C6-C30)아릴옥시, 또는 -(C6-C25) 아릴옥시, 또는 -(C6-C22)아릴옥시, 또는 -(C6-C16)아릴옥시, 또는 -(C6-C12)아릴옥시와 같은 -(C6-C50)아릴옥시; -C(O)-(C2-C22)알킬, 또는 -C(O)-(C3-C18)알킬, 또는 -C(O)-(C4-C16)알킬, 또는 -C(O)-(C6-C12)알킬, 또는 -C(O)-(C8-C10)알킬과 같은 -C(O)-(C1-C30)알킬; -OC(O)(C2-C22)알킬, 또는 -OC(O)(C3-C18)알킬, 또는 -OC(O)(C4-C16)알킬, 또는 -OC(O)(C6-C12)알킬, 또는 -OC(O)(C8-C10)알킬과 같은 -OC(O)(C1-C30)알킬; -C(O)-O-(C2-C22)알킬, 또는 -C(O)-O-(C3-C18)알킬, 또는 -C(O)-O-(C4-C16)알킬, 또는 -C(O)-O-(C6-C12)알킬, 또는 -C(O)-O-(C8-C10)알킬과 같은 -C(O)-O-(C1-C30)알킬; -C(O)-(C4-C40)시클로알킬, 또는 -C(O)-(C5-C30)시클로알킬, 또는 -C(O)-(C6-C20)시클로알킬, 또는 -C(O)-(C6-C16)시클로알킬과 같은 -C(O)-(C3-C50)시클로알킬; -OC(O)-(C4-C40)시클로알킬, 또는 -OC(O)-(C5-C30)시클로알킬, 또는 -OC(O)-(C6-C20)시클로알킬, 또는 -OC(O)-(C6-C16)시클로알킬과 같은 -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬; -C(O)-O-(C4-C40)시클로알킬, 또는 -C(O)-O-(C5-C30)시클로알킬, 또는 -C(O)-O-(C6-C20)시클로알킬, 또는 -C(O)-O-(C6-C16)시클로알킬과 같은 -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬; -C(O)-(C6-C40)아릴옥시, 또는 -C(O)-(C6-C30)아릴옥시, 또는 -C(O)-(C6-C25) 아릴옥시, 또는 -C(O)-(C6-C22)아릴옥시, 또는 -C(O)-(C6-C16)아릴옥시, 또는 -C(O)-(C6-C12)아릴옥시와 같은 -C(O)-(C6-C50)아릴옥시; -OC(O)-(C6-C40)아릴옥시, 또는 -OC(O)-(C6-C30)아릴옥시, 또는 -OC(O)-(C6-C25) 아릴옥시, 또는 -OC(O)-(C6-C22)아릴옥시, 또는 -OC(O)-(C6-C16)아릴옥시, 또는 -OC(O)-(C6-C12)아릴옥시와 같은 -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시; -C(O)-O-(C6-C40)아릴옥시, 또는 -C(O)-O-(C6-C30)아릴옥시, 또는 -C(O)-O-(C6-C25) 아릴옥시, 또는 -C(O)-O-(C6-C22)아릴옥시, 또는 -C(O)-O-(C6-C16)아릴옥시, 또는 -(C6-C12)아릴옥시와 같은 -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시; -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 글루코실, N- 아세트아미드글루코실, 아세틸 갈락토사민, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 리간드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 저분자, 항체, 항체 단편, 클로로퀸, 알칼로이드 및 본 명세서에 명시된 바와 같은 타게팅 모이어티로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다.
일부 실시예에서, 하나 이상의 치환기 A1', A2' 및 A3’ 중 하나는 적어도 하나의 타게팅 모이어티를 함유한다. 본 명세서에서 사용되는 용어 "타게팅 모이어티"는 세포, 조직 또는 장기의 특정 영역에 있는 분자 또는 복합체에 결합하는 화학적 신호로 작용하는 분자의 일부 또는 세그먼트를 지칭한다. 일반적으로, 타게팅 모이어티는 약력학, 약동학, 결합, 흡수, 세포 분포, 세포 흡수, 전하 및 제거를 포함하되 이에 국한되지 않는 본 발명의 부착된 올리고뉴클레오티드의 하나 이상의 특성을 변형시킨다.　타게팅 모이어티는 당업계에서 일상적으로 사용되며, 올리고머 화합물과 같은 모 화합물에 직접 또는 선택적 연결 모이어티를 통해 연결된다.
특정 실시예에서, 타게팅 모이어티는 리간드, 펩티드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 저분자, 폴리에틸렌 글리콜, 아미노산, 콜레스테롤, 탄수화물 (예: 포도당, 갈락토사민 또는 N-아세틸 갈락토사민), 항체 또는 항체 단편, 핵 위치 신호 또는 미토콘드리아 위치 신호와 같은 위치화 신호 중 하나 이상에서 선택된다. 특정 실시예에서, 타게팅 모이어티는 인터칼레이터, 리포터 분자, 폴리아민, 폴리아미드, 비타민 모이어티, 폴리에틸렌 글리콜, 티오에테르, 폴리에테르, 티오콜레스테롤, 콜산 모이어티, 엽산, 지질, 지방산, 인지질, 비오틴, 페나진, 페난트리딘, 안트라퀴논, 아다만탄, 아크리딘, 플루오레세인, 로다민, 쿠마린, 형광체, 발광 단백질 및 염료로 구성된 그룹에서 선택된다. 타게팅 모이어티가 형광체인 경우, 유용하다고 판단되는 모든 형광체를 사용할 수 있다. 유용한 형광 단백질의 비제한적 예로는 GFP, EBFP, Azurite, Cerulean, mCFP, Turquoise, ECFP, mKeima-Red, TagCFP, AmCyan, mTFP, TurboGFP, TagGFP, EGFP, TagYFP, EYFP, Topaz, Venus, mCitrine, TurboYFP, mOrange, TurboRFP, tdTomato, TagRFP, dsRed2, mRFP, mCherry, mPlum mRaspberry, mScarlet, 등이 포함되지만 이에 국한되지 않는다. 발광 단백질의 예로는 키프로스 (Cypridinia) 루시페라아제, 가우시안 (Gaussia) 루시페라아제, 레닐라 (Renilla) 루시페라아제, 폰티누스 (Phontinus) 루시페라아제, 루시올라 (Luciola) 루시페라아제, 파이로포러스 (Pyrophorus) 루시페라아제, 프릭소트릭스 (Phrixothrix) 루시페라아제 등이 있지만 이에 국한되지 않는다.
특정 실시 예에서, 타게팅 모이어티는 세포 투과성 펩타이드, 폴리에틸렌 글리콜, 알칼로이드, 트립타민, 벤즈이미다졸, 퀴놀론, 아미노산, 콜레스테롤, 탄수화물 및 리간드 중에서 선택된다.
일 실시예에서, 타게팅 모이어티는 탄수화물이다. 탄수화물은 단당류, 이당류, 삼당류 및 다당류로 구성된 그룹에서 선택될 수 있다. 일부 실시예에서, 탄수화물은 덱스트로스, 포도당, 갈락토스, 만니톨, D-만노스, 소르비톨 및 소르보스로 구성된 그룹에서 선택된 단당류이다. 다른 실시예에서, 탄수화물은 락토스, 말토오스, 수크로스 및 트레할로스로 구성된 그룹에서 선택된 이당류이다. 일 실시예에서, 타게팅 모이어티는 다당류이다. 일 실시예에서, 타게팅 모이어티는 N-아세틸 갈락토사민이다.
다른 실시예에서, 타게팅 모이어티는 아미노산이다. 일 실시예에서, 아미노산은 소수성 아미노산이다. 일부 실시예에서, 소수성 아미노산은 알라닌, 이소류신, 류신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프로린, 트립토판 및 발린으로 구성된 그룹에서 선택된다. 또 다른 실시예에서, 아미노산은 극성 아미노산이다. 일부 실시예에서, 아미노산은 아르기닌, 히스티딘, 라이신, 시스테인, 글리신, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 아스파르트산 및 글루탐산으로 구성된 그룹에서 선택된다.
일 실시예에서, 타게팅 모이어티는 인간 혈청 알부민, α-락트알부민, 트립시노겐 및 폴리알라닌으로 구성된 그룹에서 선택된다.
특정 실시예에서, 타게팅 모이어티는 아스피린, 와파린, 페닐부타존, 이부프로펜, 수프로펜, 펜부펜, 케토프로펜, (S)-(+)-프라노프로펜, 카르프로펜, 단실사르코신, 2,3,5-트리요오드벤조산, 핑골리모드, 플루페남산, 폴린산, 벤조티아디아지드, 클로로티아지드, 디아제핀, 인도메티신, 바르비투르산염, 세팔로스포린, 설파제, 항당뇨제, 항균제 또는 항생제와 같은 활성 약물 물질을 포함한다.
본 명세서에 개시된 타케팅 모이어티는 올리고뉴클레오티드의 흡수를 증가시키고, 도입하고, 전달하고, 특정 세포 또는 조직 유형, 예를 들어 중추 신경계 (예: 뇌 및 척수), 간, 폐, 신장, 장, 췌장, 담낭, 심장, 림프절, 비장, 위, 방광, 근육 및 뼈의 세포 또는 조직에 타겟팅하는 데 사용될 수 있다. 바람직한 타겟팅 모이어티에는 실시예에서 구체적으로 제공된 것들이 포함된다.
일 실시예에서, R1' 및 R3' 중 적어도 하나는 타게팅 모이어티이다. 일 실시예에서, A1', A2' 및 A3'에 포함된 모든 R1은 상기 언급된 바와 같은 타겟팅 모이어티이다. 다른 실시예에서, A1', A2' 및 A3'에 포함된 모든 R3'은 상기 언급된 바와 같은 타겟팅 모이어티이다. 일 실시예에서, A1', A2' 및 A3'에 포함된 모든 R1' 및 R3'은 상기 언급한 바와 같은 타겟팅 모이어티이다.
일부 실시예에서, R1’ 및 R3’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹 및 아미노 그룹은 (C1-C22)알킬, (C1-C22)알콕시, (C1-C22)알킬카르보닐, (C1-C22)알콕시카르보닐, (C6-C22)아릴, (C6-C22)아릴옥시, (C6-C22)아릴카르보닐, (C6-C22)아릴옥시카르보닐, 트리((C1-C22)알킬)실릴 및 트리((C1-C22)알콕시)실릴로 구성된 그룹 중에서 선택된 말단 보호 그룹 RP를 사용하여 선택적으로 보호될 수 있으며, 여기서, 보호 그룹 Rp에 포함된 (C1-C22)알킬은 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 18개의 탄소 원자, 또는 4 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개으l 탄소 원자와 같은 1 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 알킬일 수 있고; Rp에 포함된 (C1-C22)알콕시는 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 18개의 탄소 원자, 또는 4 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자와 같은 1 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 알콕시일 수 있으며; Rp에 포함된 (C6-C22)아릴은 6 내지 20개의 탄소 원자, 또는 6 내지 18개의 탄소 원자, 또는 6 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10 원자와 같은 6 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 아릴일 수 있고; 및 Rp에 포함된 (C6-C22)아릴옥시는 6 내지 20개의 탄소 원자, 또는 6 내지 18개의 탄소 원자, 또는 6 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10 원자와 같은 6 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 아릴옥시일 수 있다.
일부 실시예에서, R2’, R4’, R5’ 및 R6’은 각각 독립적으로 불소, 염소, 브롬 또는 요오드와 같은 할로겐 원자; (C1-C10)알킬, 또는 (C2-C8)알킬, 또는 (C3-C6)알킬, 또는 (C4-C5)알킬과 같은 (C1-C12)알킬; (C1-C10)알콕시, 또는 (C2-C8)알콕시, 또는 (C3-C6)알콕시, 또는 (C4-C5)알콕시와 같은 (C1-C12)알콕시; (C1-C10)알콕시카르보닐, 또는 (C2-C8)알콕시카르보닐, 또는 (C3-C6)알콕시카르보닐, 또는 (C4-C5)알콕시카르보닐과 같은 (C1-C12)알콕시카르보닐; -(C6-C12)아릴, 또는 -(C6-C10)아릴과 같은 (C6-C16)아릴; 또는 (C6-C12)아릴옥시카르보닐, 또는 (C6-C10)아릴옥시카르보닐, 또는 (C6-C8)아릴옥시카르보닐과 같은 (C6-C16)아릴옥시카르보닐이다.
일부 실시예에서, r', s', p' 및 q'는 각각 2 내지 20의 정수, 또는 3 내지 18의 정수, 4 내지 16의 정수, 6 내지 12의 정수, 8 내지 10의 정수와 같은 1 내지 22의 정수이다.
다른 실시예에서, X'가 산소인 경우 A3’는 존재하지 않으며, A1’, A2’ 및 A3’은 동시에 수소가 아니다. 예시적인 실시예에서, X'는 탄소이고, A1’, A2’ 및 A3’은 모두 존재한다. 다른 실시예에서, X'는 질소이고, A1’ 및 A2’는 모두 존재하며, A3’은 존재하지 않는다. 다른 실시예에서, X'는 양전하를 띤 질소(즉, 4차 암모늄)이고 A1’, A2’ 및 A3’은 모두 존재한다. 다른 실시예에서, X'는 황 또는 산소이고, A1’ 및 A3’은 모두 존재하지 않으며 A2’는 존재한다. 다른 실시예에서, X'는 양전하를 띤 황(즉, 설포늄)이고, A2’ 및 A3’은 모두 존재하며 A1’는 존재하지 않는다.
다른 실시예에서, 각 C'는 F', G', H' 및 I' 중 하나에 부착되며, 존재하지 않거나 수소; 불소, 염소, 브롬 또는 요오드와 같은 할로겐 원자; 히드록실; -(C2-C19)알킬 또는 -(C3-C18)알킬 또는 -(C4-C16)알킬 또는 -(C6-C12)알킬 또는 -(C8-C10)알킬과 같은 -(C1-C20)알킬; -(C2-C19)알콕시 또는 -(C3-C18)알콕시 또는 -(C4-C16)알콕시 또는 -(C6-C12)알콕시와 같은 -(C1-C20)알콕시; 할로겐화 (C2-C19)알킬 또는 할로겐화 (C3-C18)알킬 또는 할로겐화 (C4-C16)알킬 또는 할로겐화 (C6-C12)알킬 또는 할로겐화 (C8-C10)알킬과 같은 할로겐화 (C1-C20)알킬; 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시, 예를 들어 할로겐화 (C2-C19)알콕시 또는 할로겐화 (C3-C18) 알콕시 또는 할로겐화 (C4-C16)알콕시 또는 할로겐화 (C6-C12)알콕시 또는 할로겐화 (C8-C10) 알콕시와 같은 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택되며; 여기서, “할로겐화”는 불소화, 염소화, 브롬화, 요오드화 또는 이들의 조합일 수 있다.
일 실시예에서, m'은 1, 2 또는 3의 정수이고, n'은 1, 2 또는 3의 정수이며, m'+n’=4이다. 일부 예시적인 실시예에서, m'=1 및 n'=3; 또는 m'=2 및 n'=2; 또는 m'=3 및 n'=1이다.
일 실시예에서, 각 B'는 F', G', H' 및 I' 중 하나에 부착되고, C'는 나머지 F', G', H' 및 I'에 부착된다. 일 실시예에서, B'는 H'에 부착되고 세 개의 C'는 각각 F', G' 및 I'에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, B'는 G'에 부착되 세 개의 C'는 각각 F', H' 및 I'에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, B'는 F'에 부착되고 세 개의 C'는 각각 G', H' 및 I'에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, B'는 I에 부착되고 세 개의 C'는 각각 F', G' 및 H'에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, 두 개의 B'는 G' 및 H'에 개별적으로 부착되고 두 개의 C'는 각각 F' 및 I'에 개별적으로 부착된다.
다른 실시예에서, 각 B'는 히드록실, -C(O)OH, -(C1-C30)알콕시, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-H (여기서, r'은 1 내지 22의 정수임), -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-(C1-C30)알킬렌-C(O)-OH (여기서, r'은 1 내지 22의 정수임), -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-(C6-C50)아릴렌-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌- C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 클로로퀸, 알칼로이드 및 식 BIII에 표시되는 치환기로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다:
여기서, Y'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; P', Q', S' 및 T'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 별표는 식 BIII에 표시되는 치환기가 식 BII의 F', G', H' 및 I' 중 하나에 연결된 부위를 나타낸다.
일부 실시예에서, R7’은 -O-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -P(O)2-O-, -O-P(O)2-O-, -P(O)(S)-O-, -O-P(O)(S)-O-, -O-P(O)-O-, -(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-O-, -O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)2-O-, -(C1-C30)알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH-, -NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -(C3-C50)시클로알킬렌 -P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-O-, -O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-NH-, -NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -(C6-C50)아릴렌 -P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-O-P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-NH-, -NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -(C5-C50)헤테로아릴렌 -P(O)2-O- 및 -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-P(O)2-O-로 구성된 그룹에서 선택된다.
일부 실시예에서, R8’ 및 R9’는 각각 존재하지 않거나 -H, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH2, -(C6-C50)아릴렌-NH2, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-인산, -(C3-C50)시클로알킬렌-인산, -(C6-C50)아릴렌-인산로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택된 치환기이다. 일부 실시예에서, R8’ 및 R9’각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 본 명세서에 정의된 보호 그룹 Rp에 의해 선택적으로 보호된다. 일 실시예에서, R8’ 및 R9’는 서로 연결되어 R8’, R9’, R8'과 연결된 탄소 원자 및 R9'과 연결된 Y' 원자가 치환되지 않았거나 치환된 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있다. 다른 실시예에서, Y'가 산소인 경우, R9’는 존재하지 않는다.
일 실시예에서, 각 R10’은 P', Q', S' 및 T' 중 하나에 부착되며, 히드록실, -C(O)OH, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌- C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌- NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고, 여기서, R10’에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 본 명세에 정의된 Rp에 의해 보호되거나 지지체 물질에 연결된다.
일 실시예에서, B', R7’ R8’, R9’ 및 R10’에 포함된 -(C1-C30)알킬렌-은 -(C1-C28)알킬렌-, 또는 -(C1-C26)알킬렌-, 또는 -(C1-C24)알킬렌-, 또는 -(C2-C22)알킬렌-, 또는 -(C3-C20)알킬렌-, 또는 -(C4-C18)알킬렌-, 또는 -(C5-C17)알킬렌-, 또는 -(C6-C16)알킬렌-, 또는 -(C7-C14)알킬렌-, 또는 -(C8-C12)알킬렌-을 포함할 수 있다. 다른 실시예에서, B', R7’ R8’, R9’ 및 R10에 포함된 -(C3-C50)시클로알킬렌-은 -(C3-C40)시클로알킬렌-, 또는 -(C3-C30)시클로알킬렌-, 또는 -(C3-C22)시클로알킬렌-, 또는 -(C4-C20)시클로알킬렌-, 또는 -(C5-C18)시클로알킬렌-, 또는 -(C6-C16)시클로알킬렌-, 또는 -(C7-C14)시클로알킬렌-, 또는 -(C8-C12)시클로알킬렌-을 포함할 수 있다. 다른 실시예에서, B', R7’ R8’, R9’ 및 R10’에 포함된 -(C6-C50)아릴렌-은 -(C6-C40)아릴렌-, 또는 -(C6-C30)아릴렌-, 또는 -(C6-C22)아릴렌-, 또는 -(C6-C20)아릴렌-, 또는 -(C6-C18)아릴렌-, 또는 -(C6-C16)아릴렌-, 또는 -(C6-C12)아릴렌-을 포함할 수 있다. 다른 실시예에서, B', R7’ R8’, R9’ 및 R10에 포함된 -(C5-C50)헤테로아릴렌-은 -(C5-C40)헤테로아릴렌-, 또는 -(C5-C30)헤테로아릴렌-, 또는 -(C5-C22)헤테로아릴렌-, 또는 -(C5-C18)헤테로아릴렌-, 또는 -(C6-C16)헤테로아릴렌-을 포함할 수 있다. 다른 실시예에서, 각 치환기 R8’ 및 R9’에서, 용어 "-(C1-C30)알킬”은 -(C2-C22)알킬, 또는 -(C3-C18)알킬, 또는 -(C4-C16)알킬, 또는 -(C6-C12)알킬, 또는 -(C8-C10)알킬을 포함할 수 있고; 용어 "-(C3-C50)시클로알킬”은 -(C4-C40)시클로알킬, 또는 -(C5-C30)시클로알킬, 또는 -(C6-C20)시클로알킬, 또는 -(C6-C16)시클로알킬을 포함할 수 있으며; 용어 "-(C6-C50)아릴”은 -(C6-C40)아릴, 또는 -(C6-C30)아릴, 또는 -(C6-C25)아릴, 또는 -(C6-C22)아릴, 또는 -(C6-C16)아릴, 또는 -(C6-C12)아릴을 포함할 수 있고; 용어 "-(C6-C50)아릴옥시”는 -(C6-C40)아릴옥시, 또는 -(C6-C30)아릴옥시, 또는 -(C6-C25) 아릴옥시, 또는 -(C6-C22)아릴옥시, 또는 -(C6-C16)아릴옥시, 또는 -(C6-C12)아릴옥시를 포함할 수 있다.
다른 실시예에서, 각 R11’은 P', Q', S' 및 T' 중 하나에 부착되며, 존재하지 않거나 수소; 히드록실; 불소, 염소, 브롬 또는 요오드와 같은 할로겐 원자; -(C2-C19)알킬, 또는 -(C3-C18)알킬, 또는 -(C4-C16)알킬, 또는 -(C6-C12)알킬, 또는 -(C8-C10)알킬과 같은 -(C1-C20)알킬; -(C2-C19)알콕시, 또는 -(C3-C18)알콕시, 또는 -(C4-C16)알콕시, 또는 -(C6-C12)알콕시와 같은 -(C1-C20)알콕시; (C1-C16)알콕시카르보닐, 또는 (C2-C12)알콕시카르보닐, 또는 (C3-C8)알콕시카르보닐, 또는 (C4-C6)알콕시카르보닐과 같은 (C1-C20)알콕시카르보닐; 할로겐화 (C2-C19)알킬, 또는 할로겐화 (C3-C18)알킬, 또는 할로겐화 (C4-C16)알킬, 또는 할로겐화 (C6-C12)알킬, 또는 할로겐화 (C8-C10)알킬과 같은 할로겐화 (C1-C20)알킬; 할로겐화 (C2-C19)알콕시, 또는 할로겐화 (C3-C18) 알콕시, 또는 할로겐화 (C4-C16)알콕시, 또는 할로겐화 (C6-C12)알콕시, 또는 할로겐화 (C8-C10) 알콕시와 같은 할로겐화 (C1-C20)알콕시; 할로겐화 (C2-C19)알콕시카르보닐, 또는 할로겐화 (C3-C18) 알콕시카르보닐, 또는 할로겐화 (C4-C16)알콕시카르보닐, 또는 할로겐화 (C6-C12)알콕시카르보닐, 또는 할로겐화 (C8-C10) 알콕시카르보닐과 할로겐화 (C1-C20)알콕시카르보닐로 구성된 그룹에서 선택되며; 여기서, “할로겐화”는 불소화, 염소화, 브롬화, 요오드화 또는 이들의 조합일 수 있다.
다른 실시예에서, Y'가 산소인 경우 R9’는 존재하지 않는다. 예시적인 실시예에서, Y'는 탄소이고, R8’과 R9’는 모두 존재한다. 다른 실시예에서, Y'는 질소이고, R8’은 존재하며 R9’는 존재하지 않는다. 다른 실시예에서, Y'는 양전하를 띤 질소(즉, 4차 암모늄)이고, R8'과 R9'는 모두 존재한다. 다른 실시예에서, Y'는 황 또는 산소이고, R9’는 존재하지 않는다. 다른 실시예에서, Y'는 양전하를 띤 황(즉, 설포늄)이고 R9'가 존재한다.
일 실시예에서, M'은 1, 2 또는 3의 정수이고, N'은 1, 2 또는 3의 정수이며, M'+N'=4이다. 일부 예시적인실시예, M'=1 및 N'=3; 또는 M'=2 및 N'=2; 또는 M'=3 및 N'=1이다.
일 실시예에서, 각 R10’은 P', Q', S' 및 T' 중 하나에 부착되고, R11’은 나머지 P', Q', S' 및 T'에 부착된다. 일 실시예에서, R10’은 S'에 부착되고, 3개의 R11'은 각각 P', Q', T'에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, R10’은 Q'에 부착되고, 3개의 R11'은 각각 P', S' 및 T'에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, R10’은 P'에 부착되고 3개의 R11’은 각각 Q', S' 및 T'에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, R10’은 T'에 부착되고 3개의 R11’은 각각 P', Q' 및 S'에 개별적으로 부착된다. 다른 실시예에서, 두 개의 R10’은 Q' 및 S'에 개별적으로 부착되고, 두 개의 R11’은 각각 P' 및 T'에 개별적으로 부착된다.
특정 실시예에서, R8’, R9’ 및 R10’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 (C1-C22)알킬, (C1-C22)알콕시, (C1-C22)알킬카르보닐, (C1-C22)알콕시카르보닐, (C6-C22)아릴, (C6-C22)아릴옥시, (C6-C22)아릴카르보닐, (C6-C22)아릴옥시카르보닐, 트리((C1-C22)알킬)실릴 및 트리((C1-C22)알콕시)실릴로 구성된 그룹에서 선택된 말단 보호 그룹 RP에 의해 보호되며, 여기서 Rp에 포함된 (C1-C22)알킬은 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 18개의 탄소 원자, 또는 4 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자와 같은 1 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 알킬일 수 있고; Rp에 포함된 (C1-C22)알콕시는 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 18개의 탄소 원자, 또는 4 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자와 같은 1 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 알콕시일 수 있으며; Rp에 포함된 (C6-C22)아릴은 6 내지 20개의 탄소 원자, 또는 6 내지 18개의 탄소 원자, 또는 6 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10개의 원자와 같은 6 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 아릴일 수 있고; 및 Rp에 포함된 (C6-C22)아릴옥시는 6 내지 20개의 탄소 원자, 또는 6 내지 18개의 탄소 원자, 또는 6 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10개의 원자와 같은 6 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 아릴옥시일 수 있다.
예시적인 실시예에서, R10’에 부착된 지지체 물질은 실리카, 실리카겔, 글라스, 세라믹, 폴리머, 셀룰로오스 및 이들의 조합으로 구성된 그룹에서 선택될 수 있다. 일부 실시예에서, 상기 고체 물질은 비드 형태이다. 비드는 제한 없이, 자기 비드, 상자성 비드, 실리카 비드, 아가로스 비드 등을 포함하되 이에 국한되지 않는 모든 물질로 만들어질 수 있다.
다른 실시예에서, 본 개시의 화합물은 식 BIV 내지 식 BXIV 중 하나에 표시되는 구조를 가질 수 있다.
여기서, A1’, A2’, A3’, B', C', F', G', H', I', R7’, R8’, R10’, R11’, P', Q', S', T', m', n', M' 및 N'은 본 설명서에 정의된 바와 같다.
일 실시예에서, RING I은 A1’ 및 A2’를 연결하여 형성될 수 있으며, 따라서 A1’이 부착된 질소 원자, A2’가 부착된 탄소 원자, A1’의 적어도 일부 및 A2’의 적어도 일부로 구성될 수 있다. RING I은 4, 5, 6, 7, 8 또는 9원 고리, 특히 코어 구조에 융합된 고리일 수 있다. 예를 들어, RING I은 질소 원자, 코어 구조의 탄소 원자 및 A1’ 및 A2’에서 파생된 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개의 추가 고리 원자로 구성될 수 있으며, 여기서 추가 고리 원자 각각은 탄소, 질소, 산소, 황 및 이들의 조합으로 구성된 그룹에서 선택될 수 있다. 다른 실시예에서, 모든 추가적인 고리 원자는 탄소 원자일 수 있다.
A4’는 RING I의 모든 원자에 부착된 치환기일 수 있으며, A4’, A5’ 및 A6’은 각각 -R1’, -O-R1’, -S-R1’, -C(O)-R1’, -C(O)O-R1’, -O-C(O)-R1’, -C(O)NH-R1’, -C(O)NR2’-R1’, -NH-C(O)-R1’, -NR2’-C(O)-R1’, -O-P(O)2-O-R1’, -OP(O)(S)-O-R1’, -O-P(O)-O-R1’, -NH-R1’, -NR2’-R1’, -(CH2)r'-NH-R1’, -(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)O-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-C(O)-R1’, -(CH2)r'-C(O)-R1’; -(CH2)r'-C(O)O-R1’; -(CH2)r'-O-C(O)-R1’, -(CH2)r'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NR2’-C(O)-(CH2)s'-R1’, -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고; 여기서 R1’, R2’, R3’, R4’, R5’, R6’, r', s', p' 및 q'는 각각 본 명세서에서 정의된 바와 같다.
일 실시예에서, RING II는 R8’과 R9’를 연결하여 형성될 수 있으며, 따라서 R9’가 부착된 질소 원자, R8’이 부착된 탄소 원자, R8’의 적어도 일부 및 R9’의 적어도 일부로 구성될 수 있다. RING II는 4, 5, 6, 7, 8 또는 9원 고리, 특히 치환기 B'의 코어 구조에 융합된 고리일 수 있다. 예를 들어, RING II는 질소 원자, 치환기 B'의 코어 구조에서 유래된 탄소 원자 및 R8’ 및 R9’에서 유래된 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개의 추가 고리 원자로 구성될 수 있으며, 여기서 추가 고리 원자는 각각 탄소, 질소, 산소, 황 및 이들의 조합으로 구성된 그룹에서 선택될 수 있다. 다른 실시예에서, 모든 추가적인 고리 원자는 탄소 원자일 수 있다.
일 실시예에서, R12’는 RING II의 임의의 원자에 부착되고, -H, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH2, -(C6-C50)아릴렌-NH2, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-인산, -(C3-C50)시클로알킬렌-인산, -(C6-C50)아릴렌-인산으로 구성된 그룹에서 선택되며; 여기서 R12’에 포함된 각 -(C1-C30)알킬은 -(C2-C22)알킬, 또는 -(C3-C18)알킬, 또는 -(C4-C16)알킬, 또는 -(C6-C12)알킬, 또는 -(C8-C10)알킬을 포함할 수 있고; 여기서 R12’에 포함된 각 -(C3-C50)시클로알킬은 -(C4-C40)시클로알킬, 또는 -(C5-C30)시클로알킬, 또는 -(C6-C20)시클로알킬, 또는 -(C6-C16)시클로알킬을 포함할 수 있고; R12’에 포함된 각 -(C6-C50)아릴은 -(C6-C40)아릴, 또는 -(C6-C30)아릴, 또는 -(C6-C25)아릴, 또는 -(C6-C22)아릴, 또는 -(C6-C16)아릴, 또는 -(C6-C12)아릴을 포함할수 있으며; R12’에 포함된 각 -(C1-C30)알콕시는 -(C2-C22)알콕시, 또는 -(C3-C20)알콕시, 또는 -(C4-C16)알콕시, 또는 -(C6-C12)알콕시를 포함할수 있고; R12’에 포함된 각 -(C3-C50)시클로알콕시는 -(C4-C40)시클로알콕시, 또는 -(C5-C30)시클로알콕시, 또는 -(C6-C20)시클로알콕시, 또는 -(C6-C16)시클로알콕시를 포함할수 있으며; R12’에 포함된 각 -(C6-C50)아릴옥시는 -(C6-C40)아릴옥시, 또는 -(C6-C30)아릴옥시, 또는 -(C6-C25) 아릴옥시, 또는 -(C6-C22)아릴옥시, 또는 -(C6-C16)아릴옥시, 또는 -(C6-C12)아릴옥시를 포함할수 있고; R12’에 포함된 각 -(C1-C30)알킬렌-은 -(C1-C28)알킬렌-, 또는 -(C1-C26)알킬렌-, 또는 -(C1-C24)알킬렌-, 또는 -(C2-C22)알킬렌-, 또는 -(C3-C20)알킬렌-, 또는 -(C4-C18)알킬렌-, 또는 -(C5-C17)알킬렌-, 또는 -(C6-C16)알킬렌-, 또는 -(C7-C14)알킬렌-, 또는 -(C8-C12)알킬렌-을 포함할 수 있으며; R12’에 포함된 -(C3-C50)시클로알킬렌-은 -(C3-C40)시클로알킬렌-, 또는 -(C3-C30)시클로알킬렌-, 또는 -(C3-C22)시클로알킬렌-, 또는 -(C4-C20)시클로알킬렌-, 또는 -(C5-C18)시클로알킬렌-, 또는 -(C6-C16)시클로알킬렌-, 또는 -(C7-C14)시클로알킬렌-, 또는 -(C8-C12)시클로알킬렌-을 포함할수 있고; R12’에 포함된 -(C6-C50)아릴렌-은 -(C6-C40)아릴렌-, 또는 -(C6-C30)아릴렌-, 또는 -(C6-C22)아릴렌-, 또는 -(C6-C20)아릴렌-, 또는 -(C6-C18)아릴렌-, 또는 -(C6-C16)아릴렌-, 또는 -(C6-C12)아릴렌-을 포함할수 있다.
일 실시예에서, R12’에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 (C1-C22)알킬, (C1-C22)알콕시, (C1-C22)알킬카르보닐, (C1-C22)알콕시카르보닐, (C6-C22)아릴, (C6-C22)아릴옥시, (C6-C22)아릴카르보닐, (C6-C22)아릴옥시카르보닐, 트리((C1-C22)알킬)실릴 및 트리((C1-C22)알콕시)실릴로 구성된 그룹에서 선택된 말단 보호 그룹 RP에 의해 보호되며, 여기서 보호 그룹 Rp에 포함된 (C1-C22)알킬은 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 18개의 탄소 원자, 또는 4 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자와 같은 1 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 알킬일 수 있고; 보호 그룹 Rp에 포함된 (C1-C22)알콕시는 2 내지 20개의 탄소 원자, 또는 3 내지 18개의 탄소 원자, 또는 4 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자와 같은 1 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 알콕시일 수 있으며; 보호 그룹 Rp에 포함된 (C6-C22)아릴은 6 내지 20개의 탄소 원자, 또는 6 내지 18개의 탄소 원자, 또는 6 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10개의 원자와 같은 6 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 아릴일 수 있고; 보호 그룹 Rp에 포함된 (C6-C22)아릴옥시는 6 내지 20개의 탄소 원자, 또는 6 내지 18개의 탄소 원자, 또는 6 내지 16개의 탄소 원자, 또는 6 내지 12개의 탄소 원자, 또는 8 내지 10개의 원자와 같은 6 내지 22개의 탄소 원자를 포함하는 아릴옥시일 수 있다. 특정 실시예에서, 보호 그룹 RP는 벤질옥시카르보닐 (Cbz), tert-부틸디메틸실릴 (TBS), 4,4'-디메톡시트리틸 (DMTr), t-부틸옥시 카르보닐 (Boc), 벤질 (Bn) 및 벤질옥시 (BnO)로 구성된 그룹에서 선택될 수 있다.
일 실시예에서,식 BI 또는 식 BII의 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 가질 수 있으며, 각 키랄 중심은 독립적으로 R 키랄, S 키랄, 메조머 또는 라세미 형태일 수 있다. 예를 들어, A1’, A2’ 및 A3’ 중 하나 이상이 -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’)(-C(O)-NH-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)에서 선택되는 경우, 그 안에 포함된 중심 탄소 원자는 키랄 중심일 수 있다.
일부 실시예에서, 본 개시의 화합물은 식 BXV 내지 식 BXX 중 하나에 표시되는 구조를 갖는다:
여기서, A1’, A2’, B', R7’, R8’ 및 R10’ 각각은 여기에 정의된 바와 같다.
다른 실시예에서, 위에 표시된 치환기 중 하나 이상이 적어도 하나의 이중 결합을 포함하는 경우, 이중 결합과 이에 부착된 원자 또는 부분은 각각 E 형태 또는 Z 형태일 수 있다.
예시적인 실시예에서, 본 개시의 화합물은 다음 식 중 하나에 표시되는 구조를 갖는다:
여기서, 는 위에 정의된 바와 같은 지지체 물질을 나타낸다.
본 개시의 다른 실시양태는 본 출원에 의해 개시된 DEC 화합물과 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드를 포함하는 올리고뉴클레오티드 전달제를 제공한다. DEC가 올리고뉴클레오티드에 직접 연결되거나 적어도 하나의 연결 모이어티를 통해 올리고뉴클레오티드에 간접적으로 연결될 경우, DEC의 하나 이상의 말단 원자(수소, 할로겐, 질소, 산소, 황, 인 등) 또는 말단 그룹 (히드록실 그룹, 아미노 그룹, 에스테르 그룹, 에테르 그룹, 아실 그룹 등)이 분리되어 연결 모이어티 또는 올리고뉴클레오티드에 연결할 수 있는 활성 부위를 제공할 수 있다는 것을 충분히 이해할 수 있다.
일 실시예에서, 연결 모이어티는 존재하는 경우, -O-, -S-, -C(O)-, -NH-, -N((C1-C12)알킬)-, -N((C1-C12)알킬)-C(O)-O-, -O-C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-O-, -C(O)-NH-, -OP(O)2O-, -P(O)(O-)O-, -OP(O)O-, -OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-, -S(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-(C1-C22)알킬렌-NH-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(O-)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(O-)O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-, -O-P(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -O-P(O)-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -OP(O)(S)O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O- 및 -O-S(O)-(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-로 구성된 그룹에서 선택될 수 있고; 여기서 연결 모이어티에 포함된 -(C1-C22)알킬렌-은 2~20개의 탄소 원자, 또는 3~18개의 탄소 원자, 또는 4~16개의 탄소 원자, 또는 5~12개의 탄소 원자, 또는 6~10개의 탄소 원자와 같은 1~22개의 탄소 원자를 포함하는 알킬렌 그룹일 수 있다. 일 실시예에서, 전달 강화 화합물 연결 모이어티가 직접 결합일 때 올리고뉴클레오티드와 직접 연결된다.
본 개시의 다른 실시예는 식 AA에 표시되는 구조를 포함하는 전달 강화 화합물(DEC) 접합 올리고뉴클레오티드를 제공하며, 이는 시험관 내 및 생체 내 모두에서 올리고뉴클레오티드를 보다 효율적으로 전달할 수 있다.
식 AA에 표시된 "전달 강화 화합물 모이어티”는 상기에 언급된 본 개시의 DEC 화합물 중 하나에서 유래된다. 본 발명의 화합물의 하나 이상의 말단 원자 (수소, 할로겐, 질소, 산소, 황, 인, 등) 또는 말단 그룹 (히드록실 그룹, 아미노 그룹, 에스테르 그룹, 에테르 그룹, 아실 그룹 등)이 표적 모이어티 또는 올리고뉴클레오티드에 연결될 수 있는 활성 부위를 제공하기 위해 분리되어야 한다는 것을 이해할 수 있으며, 식 BA의 "전달 강화 화합물"은 본 발명의 화합물에서 상기 하나 이상의 원자 또는 말단 그룹을 빼서 얻은 모이어티로 간주될 수 있다.
본 개시의 일 실시예에서, 전달 강화 화합물 (DEC)이 접합된 올리고뉴클레오티드는 식 BB에 표시되는 구조를 갖는다.
여기서, A1’, A2’, A3’, X', F', G', H', I', C', m' 및 n'은 각각 위에 정의된 바와 같다. 일 실시예에서, 적어도 하나의 A1’, A2’ 및 A3’는 하나 이상의 타게팅 모이어트를 포함하고, DEC는 B" 그룹을 통해 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드에 부착된다. 위에서 언급된 바와 같이, B" 그룹은 식 BII에 포함된 B" 그룹에서 하나 이상의 말단 원자 (수소, 할로겐, 질소, 산소, 황, 인 등) 또는 하나 이상의 말단 그룹 (히드록실 그룹, 아미노 그룹, 에스테르 그룹, 에테르 그룹, 아실 그룹 등)을 분리하여 유도될 수 있다.
본 개시의 다른 실시예에서, 전달 강화 화합물 (DEC)이 접합된 올리고뉴클레오티드는 식 BC에 표시되는 구조를 갖는다.
여기서, A1’, A2’, A3’, R7’, R9’, R10’, R11’, X', Y', F', G', H', I', C', R', Q', S', T', m', n', M' 및 N' 각각은 위에 정의된 바와 같다. 일 실시예에서, 적어도 하나의 A1’, A2’ 및 A3’은 하나 이상의 타게팅 모이어티를 포함하고, DEC는 R8” 그룹을 통해 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드에 부착된다. 위에서 언급된 바와 같이, R8” 그룹은 식 BIII에 포함된 R8’ 그룹에서 하나 이상의 말단 원자 (수소, 할로겐, 질소, 산소, 황, 인 등) 또는 하나 이상의 말단 그룹 (히드록실 그룹, 아미노 그룹, 에스테르 그룹, 에테르 그룹, 아실 그룹 등)을 분리하여 유도될 수 있다.
본 개시의 일부 실시예에서, 전달 강화 화합물 (DEC)이 접합된 올리고뉴클레오티드는 식 E1 내지 E15 중 하나에 표시되는 구조를 갖는다.
여기서, A1’, A2’, R7’ 및 R10’은 각각 위에서 정의된 바와 같다. 일 실시예에서, 적어도 하나의 A1’ 및 A2’는 하나 이상의 타게팅 모이어티를 포함하거나, A2’는 하나 이상의 타게팅 모이어티를 포함하고; DEC는 B" 그룹 또는 R8” 그룹을 통해 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드에 부탁된다. 위에서 언급한 바와 같이, R8”그룹은 R8 그룹에서 하나 이상의 말단 원자 (예를 들어 수소, 할로겐, 질소, 산소, 황, 인, 등) 또는 하나 이상의 말단 그룹 (히드록실 그룹, 아미노 그룹, 에스테르 그룹, 에테르 그룹, 아실 그룹 등)을 분리하여 유도될 수 있고, B" 그룹은 B' 그룹에서 하나 이상의 말단 원자 (수소, 할로겐, 질소, 산소, 황, 인 등) 또는 하나 이상의 말단 그룹 (히드록실 그룹, 아미노 그룹, 에스테르 그룹, 에테르 그룹, 아실 그룹 등)을 분리하여 유도될 수 있다.
일 실시예에서, 타게팅 모이어티는 DEC 화합물의 분자 구조에 포함되어 있으며, 예를 들어, A1’, A2’ 또는 A3’의 일부로 존재하고, 바람직하게는 R1’ 또는 R3’ 그룹으로 존재한다. 다른 실시예에서, 타게팅 모이어티는 DEC 화합물과 독립적이며, DEC 화합물을 합성한 후 또는 합성 중에 추가로 첨가된다.
일 실시예에서, 타게팅 모이어티와 전달 강화 화합물 모이어티는 첫 번째 연결 모이어티에 의해 연결될 수 있다. 일 실시예에서, 전달 강화 화합물 모이어티와 올리고뉴클레오티드는 두 번쩨 연결 모이어티에 의해 연결될 수 있다. 첫 번째 및 두 번째 연결 모이어티는 각각 직접 결합, -O-, -S-, -C(O)-, -NH-, -N((C1-C12)알킬)-, -N((C1-C12)알킬)-C(O)-O-, -O-C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-O-, -C(O)-NH-, -OP(O)2O-, -OP(O)O-, -OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-, -S(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-(C1-C22)알킬렌-NH-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -NH-(C1-C22)알킬렌-CH((C1-C22)알킬렌-OH)-OP(O)2O-, -NH-(C1-C22)알킬렌-CH((C1-C22)알킬렌-OH)-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-, -O-P(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -O-P(O)-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -OP(O)(S)O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O- 및 -O-S(O)-(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-로 구성된 그룹에서 선택될 수 있으며; 여기서, 연결 모이어티에 포함된 -(C1-C22)알킬렌-은 -(C1-C20)알킬렌-, 또는 -(C1-C18)알킬렌-, 또는 -(C1-C16)알킬렌-, 또는 -(C2-C12)알킬렌-, 또는 -(C3-C10)알킬렌-, 또는 -(C4-C8)알킬렌-, 또는 -(C5-C6)알킬렌-일 수 있다. 일 실시예에서, 식 A의 전달 강화 화합물 (DEC)이 접합된 올리고뉴클레오티드에서, 전달 강화 화합물 모이어티는 연결 모이어티가 직접 결합인 경우, 올리고뉴클레오티드에 직접 연결된다. 일 실시예에서, 식 BA의 전달 강화 화합물 (DEC)이 접합된 올리고뉴클레오티드에서, 타게팅 모이어티는 연결 모이어티가 직접 결합일 경우, 전달 강화 화합물 모이어티에 직접 연결된다.
올리고뉴클레오티드 위에 개시된 것을 포함할 수 있으며, 특히 안티센스 올리고뉴클레오티드 (ASO), 안티센스 RNA, 짧은 간섭 RNA (siRNA), 마이크로 RNA (miRNA), saRNA, dsRNA, scRNA, sgRNA 또는 적어도 하나의 핵산 서열을 표적으로 하는 임의의 다른 올리고뉴클레오티드로 구성된 그룹에서 선택될 수 있다.
본 명세서에 기재된 올리고뉴클레오티드의 모든 뉴클레오티드는 자연적 뉴클레오티드, 즉, 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드, 또는 적어도 하나의 뉴클레오티드는 화학적으로 변형된 뉴클레오티드일 수 있다. 화학적 변형의 비제한적 실시예에는:
1) 올리고뉴클레오티드 서열의 뉴클레오티드 인산디에스테르 결합의 변형;
2) 뉴클레오티드에서 리보스의 2'-OH 변형,
3) 뉴클레오티드에서 염기의 변형 중 하나 이상의 조합을 포함하며;
4) 올리고뉴클레오티드 서열의 적어도 하나의 뉴클레오티드는 잠금 핵산이고,
5) 올리고뉴클레오티드 서열의 적어도 하나의 뉴클레오티드는 데옥시리보뉴클레오티드 (DNA)이다.
본 개시에서 뉴클레오티드 또는 올리고뉴클레오티드의 화학적 변형은 당업자에게 널리 공지되어 있으며, 포스포디에스테르 결합의 변형은 포스포디에스테르 결합에서 산소의 변형을 의미하며, 포스포로티오에이트 변형 및 보라노포스페이트 변형을 포함한다. 본 개시의 변형은 올리고뉴클레오티드 구조를 안정화시켜 염기쌍에 대한 높은 특이성과 높은 친화성을 유지한다. 본 명세서에 개시된 변형은 또한 핵산 구조를 안정화하고 전두엽 피질, 소뇌, 척수(예를 들어, 경부, 흉부, 요추), 근육, 간 및 신장과 같은 다양한 조직에서 올리고뉴클레오티드 제제의 생체 이용률, 생체 분포 및/또는 세포 흡수를 포함한 전달 보조적 특성을 유지한다.
일부 실시예에서, 화학적 변형은 본 명세서에 개시된 올리고뉴클레오티드의 백본에서 인산디에스테르 결합을 인산티오에이트(PS) 결합으로 치환하는 것이다. 일부 실시예에서, 본 명세서에 개시된 올리고뉴클레오티드는 하나의 올리고뉴클레오티드 사슬에 적어도 하나의 PS 백본 변형을 포함한다. 일부 실시예에서, 올리고뉴클레오티드는 하나의 올리고뉴클레오티드 사슬에 적어도 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 24, 28, 32, 또는 40개의 PS 백본 변형을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 출원의 뉴클레오티드 또는 올리고뉴클레오티드는 뉴클레오티드 펜토스의 2'-OH에서 변형된 적어도 하나의 화학적으로 변형된 뉴클레오티드, 즉, 리보스의 하이드록실 위치에 특정 치환기를 도입되는 2'-플루오로 변형, 2'-옥시메틸 변형, 2'-옥시에틸리덴 메톡시 변형, 2,4'-디니트로페놀 변형, 잠금 핵산(LNA), 2'-아미노 변형 또는 2'-디옥시-2'-플루오로 변형 뉴클레오티드, 2'-디옥시 변형 뉴클레오티드와 같은 2'-디옥시 변형을 포함한다.
일부 구현예에서, 본원의 뉴클레오티드 또는 올리고뉴클레오티드는 뉴클레오티드의 염기에서 변형된 적어도 하나의 화학적으로 변형된 뉴클레오티드를 포함한다(예를 들어,5'-브로모우라실 변형, 5'-요오드우라실 변형, N-메틸우라실 변형, 또는 2,6-디아미노퓨린 변형).
일부 구현예에서, 본원의 뉴클레오티드 또는 올리고뉴클레오티드의 화학적 변형은 센스 또는 안티센스 서열의 5' 말단에 (E)-비닐포스포네이트 모이어티를 추가하는 것이다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 화학적으로 변형된 뉴클레오티드의 화학적 변형은 센스 또는 안티센스 서열의 5' 말단에 5'-메틸 시토신 모이어티를 추가하는 것이다. 본 개시에서 사용되는 올리고뉴클레오티드는 다양한 공급업체에서 상업적으로 구입할 수 있거나, 실험실 규모 또는 산업적 규모로 합성할 수 있다. 예시적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드는 상용화된 합성기 또는 특히 독일 샤프하임의 K&A Laborgeraete GbR에서 구입한 K&A DNA 합성기와 같은 맞춤형 합성기를 사용하여 일반적인 합성 절차를 사용하여 합성할 수 있다. 예를 들어, 당업계에 알려진 고체 지지체에 원료 (예: 다양한 링커 및 접합체를 포함하는 인산아미다이트 단량체) 를 순차적으로 첨가하는 단계와 각 염기 첨가를 탈트리틸화, 커플링, 산화/티올화 및 캡핑의 4가지 화학 반응으로 구성된 제조 주기를 거치는 단계로 구성된 고체상 합성 기술을 통해 원하는 전장의 올리고뉴클레오티드를 생산한다.
올리고뉴클레오티드 전달제는 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 이상의 전달 강화 화합물과 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 이상의 연결 모이어티를 통해 별도로 연결된 1, 2, 3, 4, 5, 6개 또는 그 이상의 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 예를 들어, 올리고뉴클레오티드 전달제는 아래 식 AAI 내지 AAXXIV 중 어느 하나에 표시되는 구조를 가질 수 있다.
여기서, L은 연결 모이어티를 나타내고, 는 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물을 나타내고, 기호 는 각 말단에서 독립적으로 대칭 또는 비대칭인 이중 사슬 올리고뉴클레오티드를 나타낸다. 는 단일 사슬 올리고뉴클레오티드를 나타내고, a, b 및 c는 각각 독립적으로 2~45의 정수, 또는 3~40의 정수, 또는 4~35의 정수, 또는 5~30의 정수, 또는 10~20의 정수와 같은 1~50의 정수이다. 각 연결 모이어티, 그리고 전달 강화 화합물은 이중 또는 단일 사슬 올리고뉴클레오티드의 3' 말단, 5' 말단 또는 n번째 뉴클레오티드와 같은 내부 위치에서 연결될 수 있다.
일 실시예에서, 전달 강화 화합물의 치환기 A1, A2, A3, B, C, A1’, A2’, A3’, B' 및 C' 중 하나 이상이 연결 모이어티 또는 올리고뉴클레오티드 (연결 모이어티가 직접 결합인 경우) 와 연결될 수 있다. 예를 들어, A1, A2, A3, B, A1’, A2’, A3’ R8’, R12’ 및 B' 중 하나, 바람직하게는 A2 A2’, B, B', R8’ 또는 R12’는 연결 모이어티 또는 올리고뉴클레오티드에 연결된다. 어떠한 이론에 구애받지 않고, 위에서 언급된 치환기의 하나 이상의 말단 그룹(예를 들어, DMTrO-C1-C22 알킬렌- 또는 -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN)는 절단되거나 가수분해되어 활성 부위 (예를 들어 -(C1-C22)알킬렌-OH 그룹)의 캡핑을 제거한 후, 연결 모이어티(예: -P(O)(O-)O-)를 통해 올리고뉴클레오티드에 연결될 수 있다. 예를 들어, 올리고뉴클레오티드 전달제의 예시적인 구조는 아래 도면과 같이 O1 내지 O25를 포함한다:
여기서 J는 O 또는 S로 나타낸다.
모든 구조 O1 내지 O25에서 전달 강화 화합물은 이중 사슬 RNA(dsRNA) 듀플렉스(siRNA 또는 saRNA를 포함하되 이에 국한되지 않음) 및/또는 단일 사슬 안티센스 올리고뉴클레오티드(ASO)와 3'-말단 또는 5'-말단의 패신저(P) 사슬에 -OP(O)2O- (-P(O)(O-)-O-)와 같은 연결 모이어티를 통해 연결되어 있으며, 여기서, P는 패신저 사슬이고 G는 가이드 사슬이고 전자 재배열도 발생할 수 있다.
일부 실시예에서, 전달 강화 화합물, 전달 강화 화합물 모이어티, 연결 모이어티 및/또는 올리고뉴클레오티드에 포함된 적어도 하나의 수소 원자(즉, H)는 듀테륨 원자(즉, D)에 의해 치환된다. 예시적인 실시예에서, 전달 강화 화합물, 전달 강화 화합물 모이어티, 연결 모이어티 및 올리고뉴클레오티드 중 적어도 하나는 1~15개, 또는 1~12개, 또는 1~10개, 또는 1~8개, 또는 1~6개, 또는 1~3개, 또는 1~2개와 같은 1~20개의 중수소 원자를 포함한다. 예시적인 실시예에서, 전달 강화 화합물, 전달 강화 화합물 모이어티, 연결 모이어티 및/또는 올리고뉴클레오티드에 포함된 수소 원자의 몰 기준으로 1% 내지 100%, 또는 2% 내지 90%, 또는 5% 내지 80%, 또는 10% 내지 70%, 또는 20% 내지 60%, 또는 30% 내지 50%, 또는 40% 내지 45%가 듀테륨 원자에 의해 치환된다. 다른 실시예에서, 듀테륨 치환율은 위에서 언급된 종말점 값 중 임의의 두 값을 조합하여 얻은 수치 범위 내에 있을 수 있다.
본 개시의 다른 실시예는 올리고뉴클레오티드 전달제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 다른 실시예에서,약학적 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 용매, 희석제, 안정제, 분산제, 완충액, 상용화제, 방부제 및 이들의 조합과 같은 하나 이상의 추가 성분을 포함할 수 있다.
본 개시의 다른 실시에는 약학적 조성물을 대상체에게 투여하거나 약학적 조성물을 대상체의 세포와 접촉시키는 단계를 포함하는 시험관 내 또는 생체 내에서 표적 유전자의 발현을 조절하는 방법을 제공한다 예를 들어, 올리고뉴클레오티드 전달제 및 약학적 조성물은 간, 폐, 신장, 장, 췌장, 담낭, 심장, 림프절, 비장, 위, 방광, 근육, 뼈, 중추신경계 (CNS) 와 같은 다양한 장기, 조직 및 세포에 적용될 수 있으며, 세포에서 하나 이상의 표적 유전자의 발현을 조절할 수 있다고 추정된다.
특정 실시예
특정 실시예에서, 본 개시는 질소 함유 5원 헤테로시클릭 고리 모이어티 및 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 부착될 수 있는 적어도 하나의 치환기를 포함하는 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물을 제공한다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물은 식 AI 또는 식 AII에 표시되는 구조를 갖는다.
여기서, 각 는 독립적으로 공유 단일 또는 이중 결합을 나타내며; X는 각 발생 시, 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택된 원자이고; F, G, H 및 I는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다;
여기서, m은 1, 2 또는 3의 정수이고, n은 1, 2 또는 3의 정수이며, m+n=4이다.
여기서, C는 각 발생 시, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택된다.
여기서, B는 각 발생 시, 히드록실, -C(O)OH, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬렌-OH, -(C6-C22)아릴렌-OH, -(C6-C22)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C22)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C22)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C22)헤테로아릴렌-C(O)OH, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH, -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C22)알킬렌-CN으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다.
여기서, A1, A2 및 A3은 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, -O-R1, -SH, -(C1-C25)알킬, 할로겐화 -(C1-C25)알킬, -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -C(O)O-R1, -O-(C1-C22)알킬, -S-(C1-C22)알킬, -C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -O-아다만틸, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -CH(NH-CO-(C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬]3, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1]3, -CH(NH-CO-할로겐화 (C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-(C1-C22)알킬, -C(O)NH-R1, -C(O)NR2-R1, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-COOH, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -NH-C(O)-R1, -NR2-C(O)-R1, -O-P(O)2-O-R1, -OP(O)(S)-O-R1, -O-P(O)-O-R1, -NH-R1, -NR2-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH, -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸, 및 식 AIII에 표시되는 치환기로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이다.
여기서 Y는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; P, Q, S 및 T는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 별표는 식 AIII에 표시되는 치환기가 식 AI 또는 식 AII에 표시되는 구조와 연결된 부위를 지칭한다;
여기서, R3, R4 및 R5는 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, -O-R1, -SH, -(C1-C25)알킬, 할로겐화 -(C1-C25)알킬, -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -C(O)O-R1, -O-(C1-C22)알킬, -S-(C1-C22)알킬, -C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -O-아다만틸, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -CH(NH-CO-(C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬]3, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1]3, -CH(NH-CO-할로겐화 (C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-(C1-C22)알킬, -C(O)NH-R1, -C(O)NR2-R1, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-COOH, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -NH-C(O)-R1, -NR2-C(O)-R1, -O-P(O)2-O-R1, -OP(O)(S)-O-R1, -O-P(O)-O-R1, -NH-R1, -NR2-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH, -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸 및 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이다,
여기서, R7은 각 발생 시, P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택된다;
여기서, M은 0, 1, 2 또는 3의 정수이다;
여기서, R6은 P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, 직접 결합, -O-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -P(O)2-O-, -O-P(O)2-O-, -P(O)(S)-O-, -O-P(O)(S)-O-, -O-P(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-O-, -O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-N((C1-C22)알킬)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-O-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-N((C1-C22)알킬)-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C3-C22)시클로알킬렌-, -(C3-C22)시클로알킬렌-O-, -O-(C3-C22)시클로알킬렌-, -(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-O-, -O-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-NH-, -NH-(C6-C22)아릴렌-, -C(O)-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C22)아릴렌- 및 -C(O)-NH-(C6-C22)아릴렌-C(O)-O-로 구성된 그룹에서 선택된다;
여기서, R1은 각 발생 시, 수소, 히드록실, -(C1-C22)알킬, -(C3-C22)시클로알킬, -(C6-C22)아릴, -(C1-C22)알콕시, -(C3-C22)시클로알콕시, -(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-(C1-C22)알킬, -OC(O)(C1-C22)알킬, -C(O)-O-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C3-C22)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C22)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C22)시클로알킬, -C(O)-(C6-C22)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 글루코실, 아세트아미드글루코실, 갈락토사민, N-아세틸 갈락토사민, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 클로로퀸 및 알칼로이드로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다,
여기서, R2는 각 발생 시, 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, (C1-C12)알콕시카르보닐, (C6-C16)아릴 또는 (C6-C16)아릴옥시카르보닐로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다;
여기서, A1, A2, A3, B, C, R1, R2, R3, R4, R5 및 R6에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 지지체 물질에 연결되거나 말단 보호 그룹에 의해 보호되며; 그리고
조건부는 A1, A2 및 A3이 동시에 수소가 아니고, R3, R4 및 R5가 동시에 수소가 아니라는 것이다.
다른 구체적인 실시예에서, 청구항 제1항에 따른 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물은 식 BI에 표시되는 모이어티와 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 부착될 수 있는 적어도 하나의 치환기를 포함하며,
여기서, X'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; F', G', H' 및 I'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 각 별표는 선택적으로 적어도 하나의 치환기 또는 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 연결되는 부위를 나타낸다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물은 식 BII에 표시되는 구조를 가진다.
여기서, X'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; F', G', H' 및 I'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다;
여기서, A1’, A2’ 및 A3’은 각각 존재하지 않거나 -H, -R1’, -O-R1’, -S-R1’, -C(O)-R1’, -C(O)O-R1’, -O-C(O)-R1’, -C(O)NH-R1’, -C(O)NR2’-R1’, -NH-C(O)-R1’, -NR2’-C(O)-R1’, -O-P(O)2-O-R1’, -OP(O)(S)-O-R1’, -O-P(O)-O-R1’, -NH-R1’, -NR2’-R1’, -(CH2)r'-NH-R1’, -(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)O-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-C(O)-R1’, -(CH2)r'-C(O)-R1’; -(CH2)r'-C(O)O-R1’; -(CH2)r'-O-C(O)-R1’, -(CH2)r'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NR2’-C(O)-(CH2)s'-R1’, -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’)(-C(O)-NH-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이거나, A1’ 및 A2’는 서로 연결되어 A1’, A2’, A1’과 연결된 질소 원자 및 A2’와 연결된 탄소 원자가 치환되지 않았거나 치환된 헤테로시클릭 고리를 형성하며; 여기서, R1’ 및 R3’은 각각 수소, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-(C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 글루코실, 아세트아미드글루코실, 갈락토사민, N-아세틸 갈락토사민, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 리간드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 저분자, 항체, 항체 단편, 클로로퀸, 알칼로이드 및 타게팅 모이어티로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며, 여기서, R1’ 및 R3’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹 및 아미노 그룹은 선택적으로 보호되고; 여기서, R2’, R4’, R5’ 및 R6’은 각각 독립적으로 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, (C1-C12)알콕시카르보닐, (C6-C16)아릴 또는 (C6-C16)아릴옥시카르보닐이며; 여기서, r', s', p' 및 q'는 각각 1 내지 22의 정수이고; 조건부는 X'가 산소인 경우 A3’는 존재하지 않고 A1’, A2’ 및 A3’이 동시에 수소가 아니라는 것이다.
여기서, 각 C'는 F', G', H' 및 I' 중 하나에 부착되고, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택된다;
여기서, m'은 1, 2 또는 3의 정수이고, n'은 1, 2 또는 3의 정수이며, m'+n’=4이다;
여기서, 각 B'는 F', G', H' 및 I' 중 하나에 부착되고, 히드록실, -C(O)OH, -(C1-C30)알콕시, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-H (여기서, r'은 1 내지 22의 정수임), -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-(C1-C30)알킬렌-C(O)-OH (여기서, r'은 1 내지 22의 정수임), -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-(C6-C50)아릴렌-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 클로로퀸, 알칼로이드 및 식 BIII에 표시되는 치환기로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다:
여기서, Y'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; P', Q', S' 및 T'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 별표는 식 BIII에 표시되는 치환기가 식 BII의 F', G', H' 및 I' 중 임의의 하나에 연결된 부위를 지칭한다;
여기서, R7’은 -O-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -P(O)2-O-, -O-P(O)2-O-, -P(O)(S)-O-, -O-P(O)(S)-O-, -O-P(O)-O-, -(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-O-, -O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)2-O-, -(C1-C30)알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH-, -NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -(C3-C50)시클로알킬렌 -P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-O-, -O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-NH-, -NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -(C6-C50)아릴렌 -P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-O-P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-NH-, -NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -(C5-C50)헤테로아릴렌 -P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-P(O)2-O-로 구성된 그룹에서 선택되고; 여기서, R8’ 및 R9’는 각각 존재하지 않거나 -H, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH2, -(C6-C50)아릴렌-NH2, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-인산, -(C3-C50)시클로알킬렌-인산, -(C6-C50)아릴렌-인산으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환이며; 여기서, R8’ 및 R9’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 말단 보호 그룹에 의해 보호되거나; 또는 R8’과 R9’는 서로 연결되어 R8’, R9’, R8’에 연결된 탄소 원자 및 R9'에 연결된 Y' 원자가 치환되지 않았거나 치환된 헤테로시클릭 고리를 형성하며; 조건부로는 Y'가 산소 또는 황일 경우, R9’는 존재하지 않는다는 것이다;
각 R10’은 P', Q', S' 및 T' 중 하나에 부착되며, 히드록실, -C(O)OH, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌- C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌- NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고, 여기서, R10’에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 지지체 물질에 연결되거나 말단 보호 그룹에 의해 보호된다;
여기서, 각 R11’은 P', Q', S' 및 T' 중 하나에 부착되고, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, (C1-C20)알콕시카르보닐, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시카르보닐로 구성된 그룹에서 선택된다;
여기서, M'은 1, 2 또는 3의 정수이고, N'은 1, 2 또는 3의 정수이며, M'+N'=4이다.
다른 구체적인 실시예에서, A1, A2, A3, B, C, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R1’, R2’, R3’, R4’, R5’, R6’, R7’, R8’, R9’, R10’ 및 R11’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 (C1-C22)알킬, (C1-C22)알콕시, (C1-C22)알킬카르보닐, (C1-C22)알콕시카르보닐, (C6-C22)아릴, (C6-C22)아릴옥시, (C6-C22)아릴카르보닐, (C6-C22)아릴옥시카르보닐, 글루코실, 아세트아미드글루코실, 갈락토사민, N-아세틸 갈락토사민, 트리((C1-C22)알킬)실릴 및 트리((C1-C22)알콕시)실릴로 구성된 그룹 중에서 선택된 말단 보호 그룹 RP로 보호된다;
여기서, 지지체 물질은 실리카, 실리카겔, 글라스, 세라믹, 폴리머, 셀룰로오스, 및 이들의 조합으로 이루어진 그룹에서 선택된다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물은 식 AIV 내지 식 AXIII 및 식 BIV 내지 BXIV 중 하나에 표시되는 구조를 갖는다.
여기서, A1, A2, A3, A4, F, G, H, I, B, C, P, Q, S, T, R6, R7, m, n 및 M은 본 명세서에 정의된 바와 같다,
여기서, RING I 및 RING II는 각각 4, 5, 6, 7, 8 또는 9원 고리이다;
여기서 A4’는 RING I의 임의의 원자에 부착되고, A4’, A5’ 및 A6’은 각각 -R1’, -O-R1’, -S-R1’, -C(O)-R1’, -C(O)O-R1’, -O-C(O)-R1’, -C(O)NH-R1’, -C(O)NR2’-R1’, -NH-C(O)-R1’, -NR2’-C(O)-R1’, -O-P(O)2-O-R1’, -OP(O)(S)-O-R1’, -O-P(O)-O-R1’, -NH-R1’, -NR2’-R1’, -(CH2)r'-NH-R1’, -(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)O-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-C(O)-R1’, -(CH2)r'-C(O)-R1’; -(CH2)r'-C(O)O-R1’; -(CH2)r'-O-C(O)-R1’, -(CH2)r'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NR2’-C(O)-(CH2)s'-R1’, -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고; 여기서, R1’ 및 R3’은 각각 수소, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O) -(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 리간드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 저분자, 항체, 항체 단편, 폴리에틸렌글리콜, 탄수화물, 항체, 항체 단편, 클로로퀸, 알칼로이드 및 타게팅 모이어티로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며, 여기서, R1’ 및 R3' 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹 및 아미노 그룹은 선택적으로 보호되며; 여기서, R2’, R4’, R5’ 및 R6’은 각각 독립적으로 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, a (C6-C16)아릴 또는 a (C6-C16)아릴옥시이고; 여기서 r', s', p' 및 q'는 각각 1 내지 22의 정수이다;
여기서, R12’는 RING II의 모든 원자에 부착되고 -H, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH2, -(C6-C50)아릴렌-NH2, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-인산, -(C3-C50)시클로알킬렌-인산, -(C6-C50)아릴렌-인산으로 구성된 그룹에서 선택되고; 여기서, R12’에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 보호된다.
다른 구체적인 실시예에서, F, G, H 및 I는 각각 탄소이고, m은 1이며 n은 3이고, B는 G 또는 H에 부착되며, P, Q, S 및 T는 각각 탄소이고, R6은 Q 및 S 중 하나에 부착된다;
여기서, 보호 그룹 RP는 벤질옥시카르보닐 (Cbz), tert-부틸디메틸실릴 (TBS), 4,4'-디메톡시트리틸 (DMTr), t-부틸옥시 카르보닐 (Boc), 벤질 (Bn) 및 벤질옥시 (BnO)로 구성된 그룹에서 선택된다;
여기서 C는 각 발생 시, 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, 할로겐화 (C1-C12)알킬 및 할로겐화 (C1-C12)알콕시로 구성된 그룹에서 선택된다;
여기서 B는 각 발생 시, -(C1-C22)알킬렌-OH, -O-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C16)알킬렌-O-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)NH2, -O-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C16)알킬렌-O-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)NH2, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-CN, -(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-OH, -(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-NH2, -(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, 및 -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-CN로 구성된 그룹에서 선택된다,
여기서 A1, A2 및 A3 각각은 존재하지 않거나 -H, -OH, 선형 또는 분지형 -(C6-C22)알킬, 선형 또는 분지형 -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -O-(C1-C22)알킬, -(C6-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸, 및 식 AIII에 표시되는 치환기로 구성으된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이다,
여기서, Y는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; P, Q, S 및 T는 각각 탄소이다;
여기서, 각 R3, R4 및 R5는 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, 선형 또는 분지형 -(C6-C22)알킬, 선형 또는 분지형 -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -O-(C1-C22)알킬, -(C6-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸, 및 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이다,
여기서, R7은 각 발생 시, P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택된다;
여기서, M은 0, 1, 2 또는 3의 정수이다;
여기서 R6은 P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, -(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-O-, -O-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-C(O)-N((C1-C16)알킬)-, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-O-, -N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-N((C1-C16)알킬)-C(O)-, -(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-로 구성된 그룹에서 선택된다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물은 식 BXV 내지 식 BXXIX 중 하나에 표시되는 구조를 갖는다.
여기서 A1’ 및 A2’는 각각 -R1’, -O-R1’, -S-R1’, -C(O)-R1’, -C(O)O-R1’, -O-C(O)-R1’, -C(O)NH-R1’, -C(O)NR2’-R1’, -NH-C(O)-R1’, -NR2’-C(O)-R1’, -O-P(O)2-O-R1’, -OP(O)(S)-O-R1’, -O-P(O)-O-R1’, -NH-R1’, -NR2’-R1’, -(CH2)r'-NH-R1’, -(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)O-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-C(O)-R1’, -(CH2)r'-C(O)-R1’; -(CH2)r'-C(O)O-R1’; -(CH2)r'-O-C(O)-R1’, -(CH2)r'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NR2’-C(O)-(CH2)s'-R1’, -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’)(-C(O)-NH-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), 및 -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이며; 여기서 R1’ 및 R3’은 각각 수소, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-(C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 리간드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 저분자, 항체, 항체 단편, 폴리에틸렌글리콜, 항체, 항체 단편, 클로로퀸, 알칼로이드 및 타게팅 모이어티로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며, 여기서 R1’ 및 R3’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹 및 아미노 그룹은 선택적으로 보호되고; 여기서 R2’, R4’, R5’ 및 R6’은 각각 독립적으로 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, a (C1-C12)알콕시카르보닐, (C6-C16)아릴 또는 a (C6-C16)아릴옥시카르보닐이고; 여기서 r', s', p' 및 q'은 각각 1 내지 22의 정수이다;
여기서, m'은 1, 2 또는 3의 정수이고, n'은 1, 2 또는 3의 정수이며, m'+n’=4이다;
여기서, 각 B'는 히드록실, -C(O)OH, -(C1-C30)알콕시, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-H (여기서, r'은 1 내지 22의 정수임), -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-(C1-C30)알킬렌-C(O)-OH (여기서, r'은 1 내지 22의 정수임), -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-(C6-C50)아릴렌-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 클로로퀸 및 알칼로이드로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된다;
여기서, 각 R7’은 -O-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -P(O)2-O-, -O-P(O)2-O-, -P(O)(S)-O-, -O-P(O)(S)-O-, -O-P(O)-O-, -(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-O-, -O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)2-O-, -(C1-C30)알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH-, -NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -(C3-C50)시클로알킬렌 -P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-O-, -O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-NH-, -NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -(C6-C50)아릴렌 -P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-O-P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-NH-, -NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -(C5-C50)헤테로아릴렌 -P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-P(O)2-O-로 구성된 그룹에서 선택되며; 여기서 각 R8’은 -H, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH2, -(C6-C50)아릴렌-NH2, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-인산, -(C3-C50)시클로알킬렌-인산, -(C6-C50)아릴렌-인산으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이며; 여기서 R8’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 말단 보호 그룹에 의해 보호된다;
여기서, 각 R10’은 히드록실, -C(O)OH, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌- C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌- NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고, 여기서, R10’에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 지지체 물질에 연결되거나 말단 보호 그룹에 의해 보호된다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물은 다음 구조를 가지며:
여기서, 는 지지체 물질을 나타낸다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물에 포함된 적어도 하나의 수소 원자는 듀테륨 원자에 의해 치환된다.
다른 구체적인 실시예에서, 본 개시는 본 명세서에서 표시된 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물로부터 유도될 수 있는 전달 강화 화합물(DEC) 모이어티와 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드를 포함하는 올리고뉴클레오티드 전달제를 제공한다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물 모이어티는 직접 결합, -O-, -S-, -C(O)-, -NH-, -N((C1-C12)알킬)-, -N((C1-C12)알킬)-C(O)-O-, -O-C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-O-, -C(O)-NH-, -OP(O)2O-, -P(O)(O-)O-, -OP(O)O-, -OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-, -S(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-(C1-C22)알킬렌-NH-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(O-)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(O-)O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-, -O-P(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -O-P(O)-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -OP(O)(S)O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O- 및 -O-S(O)-(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-로 구성된 그룹에서 선택된 적어도 하나의 연결 모이어티를 통해 올리고뉴클레오티드와 연결되고;
올리고뉴클레오티드는 안티센스 올리고뉴클레오티드 (ASO), 안티센스 RNA, 짧은 간섭 RNA (siRNA), 마이크로 RNA (miRNA), 작은 활성화 RNA (saRNA), 이중 사슬 RNA (dsRNA), 및 작은 가이드 RNA (sgRNA)로 구성된 그룹에서 선택된다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO 1 내지 53에 표시된 서열의 적어도 일부를 포함한다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달제는 식 AA에 표시되는 구조를 포함한다.
여기서, 전달 강화 화합물 (DEC) 모이어티는 청구항 제1항 내지 제9항 중 하나에 따른 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물에서 유래되고, 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 연결된다.
다른 구체적인 실시예에서, DEC는 적어도 하나의 첫 번째 연결 모이어티를 통해 올리고뉴클레오티드에 연결된다.
다른 구체적인 실시예에서, TM은 적어도 하나의 두 번째 연결 모이어티를 통해 DEC에 연결된다.
다른 구체적인 실시예에서, 첫 번째 연결 모이어티와 두 번째 연결 모이어티는 각각 직접 결합, -O-, -S-, -C(O)-, -NH-, -N((C1-C12)알킬)-, -N((C1-C12)알킬)-C(O)-O-, -O-C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-O-, -C(O)-NH-, -OP(O)2O-, -OP(O)O-, -OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-, -S(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-(C1-C22)알킬렌-NH-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -NH-(C1-C22)알킬렌-CH((C1-C22)알킬렌-OH)-OP(O)2O-, -NH-(C1-C22)알킬렌-CH((C1-C22)알킬렌-OH)-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-, -O-P(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -O-P(O)-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -OP(O)(S)O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O- 및 -O-S(O)-(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 및/또는
여기서, 올리고뉴클레오티드는 짧은 간섭 RNA (siRNA), 작은 활성화 RNA (saRNA), 마이크로 RNA (miRNA), 안티센스 올리고뉴클레오티드 (ASO) 및 작은 가이드 RNA (sgRNA)로 구성된 그룹에서 선택된다.
다른 구체적인 실시예에서, 타게팅 모이어티는 리간드, 펩티드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 지질,지방산, 저분자, 폴리에틸렌글리콜, 아미노산, 콜레스테롤, 탄수화물, 및 항체 또는 항체 단편으로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상이다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 전달제는 식 AAI 내지 AAXXIV 중 하나에 표시되는 구조를 갖는다:
여기서, L은 연결 모이어티를 나타내고, 는 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물을 나타내며, 기호 는 각 사슬이 양쪽 말단에서 대칭 또는 비대칭으로 상호 교환 가능한 센스 사슬 또는 안티센스 사슬인 이중 사슬 올리고뉴클레오티드를 나타내고; 기호 는 단일 사슬 올리고뉴클레오티드를 나타내며, a, b 및 c는 각각 독립적으로 1 내지 50의 정수이다.
다른 구체적인 실시예에서, 전달 강화 화합물 모이어티, 연결 모이어티, 타게팅 모이어티 및/또는 올리고뉴클레오티드에 포함된 적어도 하나의 수소 원자는 듀테륨 원자에 의해 치환된다.
다른 구체적인 실시예에서, 본 개시는 a) 본 명세서에서 표시된 올리고뉴클레오티드 전달제; 및 b) 선택적으로, 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 용매, 희석제, 안정제, 분산제, 완충액, 상용화제, 방부제 및 이들의 조합으로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상의 성분을 포함하는, 약학적 조성물을 제공한다.
다른 구체적인 실시예에서, 본 개시는 본 명세서에서 표시된 바와 같은 약학적 조성물을 대상체에 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 표적 유전자의 발현을 조절하는 방법을 제공한다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 또는 표적 유전자는 SEQ ID NO 1 내지 53에 표시된 서열의 적어도 일부에 표시된 서열의 적어도 일부를 포함한다.
다른 구체적인 실시예에서, 약학적 조성물은 표적 유전자의 발현을 증가시킨다. 다른 구체적인 실시예에서, 약학적 조성물은 표적 유전자의 발현을 감소시킨다. 다른 구체적인 실시예에서, 대상체는 포유동물이다. 다른 구체적인 실시예에서, 포유동물은 설치류이다. 다른 구체적인 실시예에서, 설치류는 마우스이다. 다른 구체적인 실시예에서, 설치류는 쥐이다. 다른 구체적인 실시예에서, 포유동물은 비인간 영장류이다. 다른 구체적인 실시예에서, 포유동물은 인간이다. 다른 구체적인 실시예에서, 표적 유전자는 질환 또는 장애와 관련된다. 다른 구체적인 실시예에서, 표적 유전자는 중추 신경계 (CNS), 뇌, 척수, 간, 폐, 신장, 장, 췌장, 담낭, 심장, 림프절, 비장, 위, 방광, 근육 또는 뼈의 질환 또는 장애와 연관된다. 다른 구체적인 실시예에서, 질환은 암이다.
다른 구체적인 실시예에서, 본 개시는 본 명세서에서 표시된 바와 같은 약학적 조성물과 세포를 접촉시키는 단계를 포함하는, 표적 유전자의 발현을 조절하는 방법을 제공한다.
다른 구체적인 실시예에서, 올리고뉴클레오티드 또는 표적 유전자는 SEQ ID NO: 1 내지 53에 표시된 서열의 적어도 일부에 표시된 서열의 적어도 일부를 포함한다.
다른 구체적인 실시예에서, 약학적 조성물은 표적 유전자의 발현을 증가시킨다. 다른 구체적인 실시예에서, 약학적 조성물은 표적 유전자의 발현을 감소시킨다. 다른 구체적인 실시예에서, 세포는 포유류 세포이다. 다른 구체적인 실시예에서, 포유류 세포는 마우스 세포이다. 다른 구체적인 실시예에서, 포유류 세포는 쥐 세포이다. 다른 구체적인 실시예에서, 포유류 세포는 비인간 영장류 세포이다. 다른 구체적인 실시예에서, 포유류 세포는 인간 세포이다. 다른 구체적인 실시예에서, 표적 유전자는 질환 또는 장애와 관련된다. 다른 구체적인 실시예에서, 표적 유전자는 중추 신경계 (CNS), 뇌, 척수, 간, 폐, 신장, 장, 췌장, 담낭, 심장, 림프절, 비장, 위, 방광, 근육 또는 뼈의 질환 또는 장애와 연관된다. 다른 구체적인 실시예에서, 질환은 암이다.
실시예
본 발명의 일부 실시예는 이제 다음 실시예에서 설명될 것이며, 여기서 모든 부분과 백분율은 달리 명시되지 않는 한 중량을 기준으로 한다. 그러나, 본 개시의 범위는 물론 이러한 실시예에 제시된 제형에 국한되지 않는다. 오히려, 실시예는 단순히 개시의 발명품일 뿐이다.
하기 실시예는 당업자에게 본 발명의 제조 및 사용 방법에 대한 완전한 개시 및 설명을 제공하기 위한 것이며, 본 발명의 범위를 한정하는 것도, 하기 실험들이 수행된 전부 또는 유일한 실험임을 나타내려는 것도 아니다. 사용된 숫자(예를 들어, 양, 온도 등)와 관련하여 정확성을 보장하기 위한 노력이 이루어졌지만, 일부 실험 오류 및 편차 가능성이 고려되어야 한다. 달리 명시되지 않는 한, 부분은 중량 단위이고, 분자량은 중량 평균 분자량이며, 온도는 섭씨이고, 압력은 대기압 또는 대기압에 가깝다. 표준 약어, bp는 염기쌍; kb는 킬로베이스; nM은 나노몰; s 또는 sec은 초; min은 분; h 또는 hr은 시간; aa는 아미노산; nt는 뉴클레오티드; i.m.은 근육 (내); i.p.는 복강 (내); s.c.는 피하 (내); ivt 또는 IVT는 유리체내; iv 또는 IV는 꼬리 정맥, 정맥내; i.c.v. 또는 icv 또는 ICV는 뇌실내 등을 사용할 수 있다.
이후 사용된 모든 출발 물질, 시약 및 용매는 상업적 공급원에서 구입하여 달리 명시되지 않는 한 그대로 사용한다. 반응 생성물의 정제는 실리카겔 (200~300메시) 과 헥산/에틸 아세테이트, DCM/MeOH 용출제를 사용한 컬럼 크로마토그래피를 통해 수행된다. 박층 크로마토그래피 (TLC) 는 미리 코팅된 실리카겔 GF 플레이트를 사용하여 수행되었고, KMnO4 염색을 사용하여 시각화하였다. 1H-NMR 스펙트럼은 TMS가 포함된 CDCl3을 사용하여 400 또는 500MHz (바리안) 에서 기록되었다. 고분해능 질량 스펙트럼 (HRMS) 은 LC/MS (Agilent Technologies 1260 Infinity II/6120 Quadrupole) 와 ESI 또는 매트릭스 보조 레이저 탈착/이온화 (MALDI) 를 통한 비행시간형 질량 분석기로 기록되었다.
실시예 1 . 본 개시의 화합물 A1의 제조
본 실시예에서, 화합물 A1은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A62의 제조
무수 THF (250 mL)의 Fmoc-L-히드록시프롤린 A61 (13.3 g, 37.6 mmol, 1.0 eq) 용액에 보란-메틸 설파이드 복합체 (THF에 10 M 8.0 mL, 80 mmol, 2.1 eq) 를 상온에서 천천히 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 5분 동안 교반한 후, 약 1시간 가열하여 환류시킨다. 반응 화합물에 메탄올 (15 mL) 을 조심스럽게 첨가하고 15분 동안 환류시킨 후, 반응 화합물을 감압 하에 농축시킨다. 조생성물을 메탄올 (각 100 mL) 로 3회 증발시킨다. 조생성물 A62는 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용된다.
(2) 화합물 A63의 제조
얼음 욕조에서, 무수 피리딘 (200 mL) 의 화합물 A62 (37.6 mmol, 1.0 eq) 용액에 DMTrCl (14 g, 41.4 mmol, 1.1 eq) 를 천천히 첨가한다. 반응물을 질소 분위기에서 밤새 교반한 다음 감압 하에 농축시킨다. 조생성물을 건조한 MeCN (300 mL) 에 용해시킨 후, 화합물을 Et3N (15.6 mL, 113 mmol, 3.0 eq) 에 첨가하고 60
Figure pct00127
에서 4시간 동안 가열한다. 감압 하에 농축시킨 후 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체의 원하는 생성물 A63 (7.57 g, 수율 48%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 419.21; MW Found: 303.2 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 7.28 - 7.22 (m, 2H), 7.18 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 4.34 (s, 1H), 3.75 (d, J = 11.1 Hz, 6H), 3.60 (dd, J = 12.7, 6.7 Hz, 1H), 3.10 - 2.92 (m, 5H), 2.86 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 1.85 (dd, J = 13.5, 7.1 Hz, 1H), 1.63 (ddd, J = 13.7, 7.9, 5.9 Hz, 1H).
(3) 화합물 A66의 제조
질소 분위기에서, DCM (30 mL) 의 화합물 A64 (1.4 g, 7.2 mmol, 2.0 eq) 용액에 화합물 A65 (1.0 g, 3.6 mmol, 1.0 eq), O-벤조트리아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBTU) (2.7 g, 7.2 mmol, 2.0 eq) 및 N, N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA) (0.93 g, 7.2 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반하였다. 그 다음, 30 mL의 H2O를 반응 혼합물에 첨가하고 혼합물을 DCM (3*30mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A66 (1.7 g, 수율 94%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 453.31; MW Found: 454.29 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.69 - 3.61 (m, 5H), 3.59 - 3.53 (m, 8H), 3.48 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.35 (dd, J = 10.7, 5.3 Hz, 2H), 3.15 (qd, J = 7.4, 4.4 Hz, 3H), 2.43 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.92 - 1.85 (m, 5H), 1.54 - 1.52 (m, 4H), 1.37 (s, 12H).
(4) 화합물 A67의 제조
DCM (10 mL) 의 화합물 A66 (0.8 g, 1.7 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCl/디옥산 (4M, 10 mL) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 황색 오일인 조 생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (10 mL)에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 화합물 A63 (583mg, 1.7mmol, 1.0eq), HBTU (1.28g, 3.4mmol, 2.0eq) 및 DIPEA (439mg, 3.4mmol, 2.0eq) 를 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 10 mL의 H2O를 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*20mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 A67 (261 mg, 수율 21%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 798.45; MW Found: 303.31 [DMT]-, 519.62 [DMT off + Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.26 - 7.23 (m, 6H), 7.17 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 6.81 (dd, J = 11.4, 5.1 Hz, 4H), 3.85 - 3.81 (m, 1H), 3.77 (s, 6H), 3.62 - 3.56 (m, 8H), 3.53 (dd, J = 9.1, 4.5 Hz, 2H), 3.44 - 3.32 (m, 4H), 2.73 (q, J = 7.2 Hz, 6H), 2.45 - 2.33 (m, 1H), 2.26 - 2.16 (m, 1H), 2.15 - 2.02 (m, 1H), 1.99 - 1.90 (m, 5H), 1.72 - 1.66 (m, 3H), 1.63 - 1.58 (m, 9H).
(5) 화합물 A68의 제조
질소 분위기에서, DCM (6 mL) 의 화합물 A67 (666 mg, 0.92 mmol, 1.0 eq) 및 DMAP (393 mg, 3.22 mmol, 3.5 eq) 용액에 석신산 무수물 (282 mg, 2.76 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*10 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A68 (447 mg, 수율 59%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 898.46; MW Found: 303.15 [DMT]-, 597.98 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36 - 7.32 (m, 2H), 7.27 - 7.25 (m, 6H), 7.19 - 7.16 (m, 1H), 6.85 - 6.76 (m, 4H), 5.46 - 5.32 (m, 1H), 3.82 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.77 (s, 6H), 3.60 (dd, J = 9.3, 4.5 Hz, 8H), 3.53 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.44 - 3.40 (m, 2H), 3.14 (dd, J = 9.2, 2.9 Hz, 1H), 2.99 - 2.93 (m, 6H), 2.62 - 2.45 (m, 5H), 2.34 - 2.28 (m, 1H), 2.19 - 2.04 (m, 1H), 1.96 - 1.92 (m, 5H), 1.69 - 1.66 (m, 3H), 1.62 - 1.58 (m, 9H).
(6) 화합물 A1의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (30 mL) 의 화합물 A68 (200 mg, 0.223 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (3.9 g) 및 DIPEA (111 μL, 0.669 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (169 mg, 0.446 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 순차적으로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (18 mL) 의 아세트산 무수물 (12 mL), 피리딘 (28 mL) 및 NEt3 (401 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 순차적으로 세척하여 본 개시의 화합물 A1 (3.67g) 을 생성한다.
실시예 2 . 본 개시의 화합물 A2의 제조
본 실시예에서 화합물 A2는 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A70의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (100 mL) 의 메틸 4-플루오로-3-니트로벤조에이트 A69 (8.0 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (5.5 g, 40.2 mmol) 용액에 벤질 (3-아미노프로필)카바메이트 (8.3 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 6시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (100mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 황색 고체인 화합물 A70을 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 A72의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 100 mL) 의 화합물 A70 (10 g, 25.84 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (9.78 g, 155.04 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (10.14 g, 155.04 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (100 mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시켜, 밝은 붉은색 고체인 화합물 A72를 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(3) 화합물 A73의 제조.
질소 분위기에서, EtOH (200 mL) 의 화합물 A72 (8.0 g, 22.5 mmol, 1.0 eq) 용액에 3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판알 (4.2 g, 22.5 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (5.1 mL, 90 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류 화합물 A73은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 A73은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 525.27; MW. Found: 526.59 [M+H]+.
(4) 화합물 A74의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (50 mL) 의 화합물 A73 (5.0 g, 9.5 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (14.25 mL, 14.25 mmol, 1.5 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 물 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 DCM으로 3회 추출한 다음, 유기상을 합쳐 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 50mL 피리딘에 용해시키고, DMTrCl (3.86g, 11.4mmol, 1.2eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 A74 (4.1 g, 수율 60%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 713.31; MW Found: 303.17 [DMT]-, 412.36 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.39 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.96 (dd, J = 8.5, 1.3 Hz, 1H), 7.38 - 7.27 (m, 8H), 7.20 (dq, J = 6.7, 2.5 Hz, 7H), 6.76 - 6.70 (m, 4H), 5.10 (s, 2H), 4.19 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.74 (s, 6H), 3.65 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.20 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.09 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.00 - 1.90 (m, 2H).
(5) 화합물 A75의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (50 mL) 의 화합물 A74 (4.0 g, 5.6 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (319 mg, 8.4 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (30mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 50mL DMF에 용해시킨 다음, 이미다졸 (572mg, 8.4mmol, 1.5eq) 및 TBSCl (1.27g, 8.4mmol, 1.5eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 A75 (4.03 g, 수율 90%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 799.40; MW. Found: 303.17 [DMT]. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.65 (s, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 7H), 7.19 (ddd, J = 8.4, 7.9, 3.7 Hz, 9H), 6.78 - 6.71 (m, 4H), 5.10 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.16 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.75 (s, 6H), 3.61 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.18 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.07 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.95 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 0.94 (s, 9H), 0.10 (s, 6H).
(6) 화합물 A78의 제조
질소 분위기에서, MeOH (8 mL) 의 화합물 A75 (220 mg, 0.276 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (22 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (8 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 화합물 A77 (64 mg, 0.33 mmol, 1.2 eq), HBTU (209 mg, 0.552 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (155 μL, 0.938 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (10 mL) 를 반응에 첨가하고 혼합물을 DCM (3*10mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 오일인 화합물 A78 (199 mg, 수율 86%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법 및 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 841.48; MW Found: 303.2 [DMT]-, 540.3 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.64 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.34 - 7.27 (m, 4H), 7.22 - 7.17 (m, 6H), 6.83 (dd, J = 8.1, 2.7 Hz, 1H), 6.81 - 6.65 (m, 4H), 4.84 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 4.23 - 4.15 (m, 2H), 3.87 - 3.78 (m, 2H), 3.77 (s, 6H), 3.72 - 3.48 (m, 2H), 3.29 - 3.19 (m, 2H), 3.17 - 3.06 (m, 2H), 1.87 - 1.81 (m, 6H), 1.68 - 1.57 (m, 11H), 0.95 (s, 9H), 0.11 (s, 6H).
(7) 화합물 A79의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (5mL) 의 화합물 A78 (165 mg, 0.196 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (1.18 mL, 1.18 mmol, 6.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (8 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 DMAP (84 mg, 0.686 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (39 mg, 0.392 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*10mL) 으로 추출하고, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A79 (97 mg, 수율 60%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 827.41; MW Found: 303.2 [DMT]-, 527.3 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.66 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.33 - 7.29 (m, 2H), 7.24 (s, 2H), 7.23 - 7.14 (m, 7H), 6.75 (dd, J = 8.1, 5.6 Hz, 4H), 5.22 (s, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.75 (s, 6H), 3.61 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.23 (s, 2H), 3.08 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 2.95 (dd, J = 14.6, 7.3 Hz, 2H), 2.71 - 2.55 (m, 4H), 1.98 - 1.92 (m, 4H), 1.85 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 1.70 - 1.59 (m, 6H), 1.33 - 1.16 (m, 5H).
(8) 화합물 A2의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (14 mL) 의 화합물 A79 (85 mg, 0.103 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (1.8 g) 및 DIPEA (51 μL, 0.31 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (78 mg, 0.206 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (7.9 mL) 의 아세트산 무수물 (6.2 mL), 피리딘 (12 mL) 및 NEt3 (186 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A2 (1.62g) 를 생성한다.
실시예 3 . 본 개시의 화합물 A3의 제조
본 개시의 화합물 A3은 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A81의 제조
질소 분위기에서, MeOH (30 mL) 의 화합물 A75 (1.44 g, 1.8 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (144 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (40 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, 팔미트산 (508 mg, 1.98 mmol, 1.1 eq), HBTU (1.36 g, 3.6 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (1.01 mL, 6.12 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (30 mL) 를 반응에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*40mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 오일인 화합물 A81 (1.43 g, 수율 88%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 903.59; MW Found: 303.2 [DMT]-, 488.4 [DMT 및 TBS off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.33 - 7.27 (m, 4H), 7.22 - 7.16 (m, 7H), 6.74 (dd, J = 8.1, 5.6 Hz, 4H), 4.83 (s, 2H), 4.23 - 4.16 (m, 2H), 3.76 (s, 6H), 3.62 (dd, J = 11.9, 5.3 Hz, 2H), 3.27 - 3.21 (m, 2H), 3.15 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.11 - 2.05 (m, 2H), 2.03 - 1.90 (m, 2H), 1.34 - 1.25 (m, 29H), 0.95 (s, 9H), 0.11 (s, 6H).
(2) 화합물 A82의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (30 mL) 의 화합물 A81 (1.4 g, 1.55 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (4.65 mL, 4.65 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (40 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (660 mg, 5.4 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (465 mg, 4.65 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (30 mL) 를 반응에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3Х30 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A82 (827 mg, 수율 60%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.:889.52; MW Found: 303.1 [DMT]-, 588.3 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.65 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.34 - 7.28 (m, 2H), 7.25 - 7.14 (m, 9H), 6.74 (dd, J = 8.1, 5.5 Hz, 4H), 5.21 (s, 2H), 4.34 - 3.90 (m, 2H), 3.74 (s, 6H), 3.60 (dd, J = 12.1, 5.4 Hz, 2H), 3.22 - 3.16 (m, 2H), 3.09 - 3.04 (m, 2H), 2.63 - 2.60 (m, 4H), 2.16 - 2.01 (m, 2H), 1.97 - 1.84 (m, 2H), 1.33 - 1.23 (m, 26H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz, 3H).
(3) 화합물 A3의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (15 mL) 의 화합물 A82 (120 mg, 0.13 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (2.29 g) 및 DIPEA (65 μL, 0.39 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (99 mg, 0.26 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (10 mL) 의 아세트산 무수물 (7.8 mL), 피리딘 (15 mL) 및 NEt3 (234 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A3 (2.1g) 을 생성한다.
실시예 4. 본 개시의 화합물 A4 및 화합물 A5의 제조
본 실시예에서 화합물 A4 및 화합물 A5는 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A85의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (200 mL) 의 메틸 2-(4-플루오로-3-니트로페닐)아세테이트 A84 (17.3 g, 81 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (11.2 g, 81 mmol) 용액에 화합물 A83 (19.56 g, 81 mmol, 1.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 55 °C에서 6시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (100 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 황색 오일인 화합물 A85를 형성하고, 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 A86의 제조
얼음 욕조에서. THF/H2O (9:1, 280 mL) 의 화합물 A85 (35.18 g, 81 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (30.67 g, 486 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (31.78 g, 486 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (200mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시킨 후, 생성물 A86을 추가 정제 없이 다음 단계에서 바로 사용한다. 화합물 A86은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 404.34; MW. Found: 405.3 [M+H]+.
(3) 화합물 A88의 제조
질소 분위기에서, EtOH (200mL) 의 화합물 A86 (19.36 g, 48 mmol, 1.0 eq) 용액에 3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판알 A87 (9.0 g, 48 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (11 mL, 192 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류 화합물 A88은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(4) 화합물 A89의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (50 mL) 의 화합물 A88 (10 g, 17.5 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (26.3 mL, 26.3 mmol, 1.5 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 물 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 DCM으로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 50mL 피리딘에 용해시키고, DMTrCl (7.12g, 21mmol, 1.2eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-3%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 A89 (8.1 g, 수율 61%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 760.48; MW. Found: 761.8 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.59 - 7.53 (m, 1H), 7.38 - 7.31 (m, 2H), 7.23 - 7.19 (m, 6H), 7.18 - 7.14 (m, 3H), 6.76 (dd, J = 7.8, 5.6 Hz, 4H), 4.17 - 4.02 (m, 2H), 3.76 (s, 6H), 3.73 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.59 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.19 - 3.05 (m, 2H), 1.29 - 1.25 (m, 28H), 0.88 (t, J = 6.5 Hz, 3H).
(5) 화합물 A90의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (20 mL) 의 화합물 A89 (2.7 g, 3.55 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (202 mg, 5.33 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (20mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 조생성물 (300 mg, 0.41 mmol, 1.0 eq) 을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (175 g, 1.44 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (123 mg, 1.23 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*20 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A90 (113 mg, 수율 33%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 832.50; MW Found: 303.2 [DMT]-, 531.3 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.63 (s, 1H), 7.31 (dd, J = 7.6, 4.1 Hz, 2H), 7.28 - 7.11 (m, 9H), 6.74 (dd, J = 7.9, 5.6 Hz, 4H), 4.35 - 4.32 (m, 2H), 4.12 - 4.08 (m, 2H), 3.75 (s, 6H), 3.59 (dd, J = 11.8, 5.1 Hz, 2H), 3.24 - 3.10 (m, 2H), 3.09 - 2.96 (m, 2H), 2.63 (dd, J = 7.2, 3.0 Hz, 4H), 1.37 - 1.25 (m, 28H), 0.88 (t, J = 6.5 Hz, 3H).
(6) 화합물 A4의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (14 mL) 의 화합물 A90 (90 mg, 0.108 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (1.89 g) 및 DIPEA (54 μL, 0.324 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (82 mg, 0.216 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (8.3 mL) 의 아세트산 무수물 (6.5 mL), 피리딘 (12.6 mL) 및 NEt3 (195 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A4 (1.7g) 를 생성한다.
(7) 화합물 A5의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (20 mL) 의 화합물 A89 (2.7 g, 3.55 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (202 mg, 5.33 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (20mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 조생성물 (300 mg, 0.41 mmol, 1.0 eq) 을 무수 DCM (5 mL) 에 용해시킨 다음, 25°C, 질소 분위기에서, DIPEA (204 μL, 1.23 mmol, 3.0 eq), 3-((클로로(디이소프로필아미노)포스파닐)옥시)프로판니트릴 (274 μL, 1.23 mmol, 3.0 eq.) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 다음 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM, 1% Et3N) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A5 (299 mg, 수율 78%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 946.61; MW Found: 303.2 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (s, 1H), 7.32 (dd, J = 7.6, 4.1 Hz, 2H), 7.27 - 7.11 (m, 9H), 6.73 (dd, J = 7.9, 5.6 Hz, 4H), 4.34 - 4.31 (m, 2H), 4.10 - 4.06 (m, 2H), 3.75 (s, 6H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 3.58 (dd, J = 11.8, 5.1 Hz, 2H), 3.24 - 3.18 (m, 2H), 3.09 - 2.88 (m, 4H), 2.65 -2.55 (m, 4H), 1.37 - 1.28 (m, 28H), 1.22 (dd, J = 6.8, 3.2 Hz, 12H), 0.88 (t, J = 6.5 Hz, 3H).
실시예 5 . 본 개시의 화합물 A6의 제조
본 실시예의 화합물 A6은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A92의 제조
질소 분위기에서, EtOH (220 mL) 의 화합물 A72 (8.87 g, 24.84 mmol, 1.0 eq) 용액에 5-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)펜탄알 A91 (5.4 g, 24.84 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (5.73 mL, 99.36 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 붉은색 고체인 화합물 A92 (6.3 g, 수율 46%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법, 1H NMR 및 13C NMR을 통해 특성화화였다. MW calc.: 553.30; MW Found: 554.29 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 8.5, 1.1 Hz, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 5H), 7.26 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.16 (dd, J = 12.6, 5.3 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.67 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.28 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.04 - 1.88 (m, 4H), 1.67 (dd, J = 14.7, 6.6 Hz, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.04 (s, 6H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 167.72, 156.63, 142.35, 138.19, 136.30, 128.60, 128.24, 124.10, 123.87, 121.63, 108.66, 66.96, 62.71, 60.41, 52.06, 41.31, 38.57, 32.46, 30.43, 27.30, 25.97, 24.15, 21.07, 18.34, 14.21.
(2) 화합물 A93의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (50 mL) 의 화합물 A92 (6.3 g, 11.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (17.1 mL, 17.1 mmol, 1.5 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 물 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 DCM으로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 50mL 피리딘에 용해시키고, DMTrCl (4.6g, 13.68mmol, 1.2eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 A93 (6.23 g, 수율 74%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법, 1H NMR 및 13C NMR로 특성화하였다. MW calc.: 741.34; MW. Found: 303.11 [DMT]-, 440.14 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.63 (dd, J = 5.7, 1.5 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 8.5, 1.1 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.37 - 7.28 (m, 11H), 7.21 (dd, J = 8.1, 6.1 Hz, 1H), 6.83 (t, J = 5.9 Hz, 4H), 5.13 (s, 2H), 4.12 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.79 (s, 6H), 3.24 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.14 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.83 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.01 (dd, J = 16.0, 8.5 Hz, 4H), 1.79 (dd, J = 14.1, 6.6 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 167.81, 158.43, 156.64, 149.95, 145.34, 142.43, 138.26, 136.57, 136.05, 130.11, 128.69, 128.39, 128.26, 128.23, 127.84, 126.75, 124.17, 123.89, 121.70, 113.11, 108.75, 85.93, 67.02, 62.90, 55.31, 52.16, 41.37, 38.64, 30.50, 29.76, 27.30, 24.53.
(3) 화합물 A94의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (60mL) 의 화합물 A93 (5.0 g, 6.74 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (384 mg, 10.11 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 약 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (30mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분간 반응시킨 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 20mL의 DMF에 용해시킨 다음, 이미다졸 (688 mg, 10.11 mmol, 1.5 eq) 및 TBSCl (1.524 g, 10.11 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한다. 감압 하에 농축한 후, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 A94 (4.78 g, 수율 86%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법, 1H NMR 및 13C NMR로 특성화하였다. MW calc.: 827.43; MW. Found: 303.16 [DMT]-, 526.50 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.69 (s, 1H), 7.47 - 7.42 (m, 2H), 7.40 - 7.28 (m, 11H), 7.22 (t, J = 3.5 Hz, 3H), 6.86 - 6.80 (m, 4H), 5.13 (s, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.15 (dd, J = 14.3, 7.2 Hz, 2H), 3.79 (s, 6H), 3.13 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.82 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.05 - 1.94 (m, 4H), 1.81 - 1.74 (m, 2H), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 0.97 (s, 9H), 0.13 (s, 6H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 171.27, 158.45, 156.60, 154.95, 145.40, 142.93, 136.66, 135.52, 134.14, 130.14, 128.70, 128.37, 128.28, 127.85, 126.74, 120.93, 117.18, 113.13, 108.73, 85.93, 67.00, 65.53, 63.00, 60.51, 55.32, 53.55, 41.19, 38.74, 30.51, 29.85, 27.33, 26.14, 24.78, 21.17, 18.57, 14.33.
(4) 화합물 A96의 제조
질소 분위기에서, MeOH (5 mL) 의 화합물 A94 (264 mg, 0.319 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (16 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (8 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 화합물 A77 (74 mg, 0.38 mmol, 1.2 eq), HBTU (242 mg, 0.64 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (179 μL, 1.08 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (10 mL) 를 반응에 첨가하고 혼합물을 DCM (3*10mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여, 황색 고체인 화합물 A96 (236 mg, 수율 85%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 869.52; MW. Found: 303.2 [DMT]-, 568.4 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.67 (s, 1H), 7.44 - 7.39 (m, 2H), 7.32 - 7.27 (m, 5H), 7.26 - 7.14 (m, 4H), 6.83 - 6.78 (m, 4H), 4.83 (s, 2H), 4.11 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.25 (dd, J = 13.2, 6.7 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.86 (dd, J = 9.5, 5.9 Hz, 2H), 1.97 (d, J = 13.0 Hz, 6H), 1.85 (s, 2H), 1.74 - 1.65 (m, 6H), 1.59 (dd, J = 13.7, 7.1 Hz, 9H), 0.94 (s, 9H), 0.10 (s, 6H).
(5) 화합물 A97의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (7 mL) 의 화합물 A96 (223 mg, 0.26 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (1.54 mL, 1.54 mmol, 6.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (110 mg, 0.90 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (52 mg, 0.52 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*10 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A97 (116 mg, 수율 53%) 를 얻는다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 855.45; MW. Found: 303.2 [DMT]-, 554.3 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (s, 1H), 7.42 (dd, J = 7.0, 1.5 Hz, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 6H), 7.18 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 6.82 - 6.79 (m, 4H), 5.19 (s, 2H), 4.28 - 4.12 (m, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.24 (s, 2H), 3.09 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.88 - 2.83 (m, 2H), 2.64 (t, J = 3.9 Hz, 4H), 1.96 (d, J = 13.0 Hz, 6H), 1.84 (s, 2H), 1.73 - 1.66 (m, 6H), 1.57 (dd, J = 13.7, 7.1 Hz, 9H).
(6) 화합물 A6의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (16 mL) 의 화합물 A97 (100 mg, 0.117 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (2.05 g) 및 DIPEA (58 μL, 0.35 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (89 mg, 0.234 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (9 mL) 의 아세트산 무수물 (7.02 mL), 피리딘 (13.5 mL) 및 NEt3 (211 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A6 (1.76g) 을 생성한다.
실시예 6 . 본 개시의 화합물 A7의 제조
본 실시예의 화합물 A7은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A99의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (100 mL) 의 메틸 4-플루오로-3-니트로벤조에이트 A69 (8.0 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (5.5 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 A98 (8.57 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 25 °C에서 6시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (100 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1번 세척한다. 그 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 갈색 오일인 화합물 A99를 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 A100의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 165 mL) 의 화합물 A99 (15.76 g, 40.17 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (15.21 g, 241 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (15.76 g, 241 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (100mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 후 감압 하에 농축시켜 생성된 갈색 고체 화합물 A100을 형성하여 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용한다. 화합물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 362.29; MW. Found: 363.4 [M+H]+.
(3) 화합물 A102의 제조
질소 분위기에서, EtOH (100 mL) 의 화합물 A100 (6.0 g, 16.56 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 A101 (1.69 g, 16.56 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (3.8 mL, 66.24 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류 화합물은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 444.34; MW. Found: 445.4 [M+H]+.
생성된 잔류물 (1.0g, 2.25mol, 1.0eq) 을 10mL DCM에 용해시키고, Et3N (0.47 mL, 3.37 mmol, 1.5 eq) 및 DMTrCl (915 mg, 2.7 mmol, 1.2 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류 화합물은 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용한다. 생성물 A102는 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 746.47; MW. Found: 303.2 [DMT]-.
(4) 화합물 A103의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (13 mL) 의 화합물 A102 (1.6 g, 2.16 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (123 mg, 3.24 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (10mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 조생성물 (500 mg, 0.70 mmol, 1.0 eq) 을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (298 mg, 2.45 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (140 mg, 1.40 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*10 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A103 (285 mg, 수율 53%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 818.49; MW. Found: 303.2 [DMT]-, 517.4 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.81 (s, 1H), 7.41 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.8 Hz, 5H), 7.25 - 7.15 (m, 4H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.26 (s, 2H), 4.04 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.77 (s, 6H), 3.11 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.90 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.69 (dd, J = 8.4, 4.5 Hz, 4H), 2.02 - 1.95 (m, 2H), 1.74 (dd, J = 13.4, 6.9 Hz, 4H), 1.28 - 1.24 (m, 22H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz, 3H).
(5) 화합물 A7의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (20 mL) 의 화합물 A103 (124 mg, 0.15 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (2.66 g) 및 DIPEA (75 μL, 0.45 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (115 mg, 0.30 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (11.6 mL) 의 아세트산 무수물 (9.06 mL), 피리딘 (17.4 mL) 및 NEt3 (272 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A7 (2.4g) 을 생성한다.
실시예 7 . 본 개시의 화합물 A8의 제조
본 실시예의 화합물 A8은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A105의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (240 mL) 의 메틸 4-플루오로-3-니트로벤조에이트 A104 (15 g, 75.3 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (10.4 g, 75.3 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 69 (18.18 g, 75.3 mmol, 1.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25 °C에서 6시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (100 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 갈색 오일 화합물 A105를 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 A106의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 300 mL) 의 화합물 A105 (31.65 g, 75.3 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (28.5 g, 451.8 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (29.5 g, 451.8 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (100mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축한 후, 갈색 고체 화합물 A106을 형성하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(3) 화합물 A107의 제조
질소 분위기에서, EtOH (90 mL) 의 화합물 A106 (6.0 g, 15.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 A101 (1.57 g, 15.4 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (3.54 mL, 61.6 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (80 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물은 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용한다. 생성된 잔류물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 472.37; MW. Found: 473.4 [M+H]+.
생성된 잔류물 (1.0g, 2.12mol, 1.0eq) 을 10mL DCM에 용해시키고, Et3N (0.44 mL, 3.17 mmol, 1.5 eq) 및 DMTrCl (860 mg, 2.54 mmol, 1.2 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체 화합물 A107 (1.27 g, 수율 77%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 774.50; MW. Found: 303.2 [DMT]-, 473.4 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 8.5, 1.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 5H), 7.25 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.19 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 9.4, 2.4 Hz, 4H), 4.05 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.78 (s, 6H), 3.12 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.92 - 2.80 (m, 2H), 2.07 - 1.97 (m, 2H), 1.82 - 1.71 (m, 4H), 1.28 - 1.24 (m, 26H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
(4) 화합물 A108의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (10mL) 의 화합물 A107 (1.27 g, 1.64 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (93 mg, 2.46 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (10mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 조생성물 (500 mg, 0.67 mmol, 1.0 eq) 을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (286 mg, 2.34 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (134 mg, 1.34 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*10 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일 화합물 A108 (425 mg, 수율 62%) 을 제공한다다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 846.52; MW. Found: 303.2 [DMT]-, 545.4 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.81 (s, 1H), 7.42 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 7.25 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 7.19 (dd, J = 14.9, 7.9 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.26 (s, 2H), 4.03 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.77 (s, 6H), 3.11 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.90 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.73 - 2.66 (m, 4H), 1.99 (dt, J = 15.3, 7.7 Hz, 2H), 1.74 (dd, J = 13.5, 6.9 Hz, 4H), 1.29 - 1.25 (m, 26H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz, 3H).
(5) 화합물 A8의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (18 mL) 의 화합물 A108 (114 mg, 0.134 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (2.36 g) 및 DIPEA (67 μL, 0.4 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (102 mg, 0.268 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (10 mL) 의 아세트산 무수물 (8.04 mL), 피리딘 (15.5 mL) 및 NEt3 (241 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A8 (2.2g) 을 생산한다.
실시예 8 . 본 개시의 화합물 A9의 제조
본 실시예의 화합물 A9은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A110의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (128 mL) 의 메틸 4-플루오로-3-니트로벤조에이트 A69 (8.0 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (5.55 g, 40.2 mmol) 용액에 화합물 A109 (10.83 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25 °C에서 6시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (100 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1번 세척한다. 그 다음, 무수 Na2SO4 로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 갈색 오일 화합물 A110을 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 A111의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 120 mL) 의 화합물 A110 (13 g, 29 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (10.98 g, 174 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (11.38 g, 174 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (100mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 후 감압 하에 농축시켜 갈색 고체 화합물 A111을 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용한다.
(3) 화합물 A112의 제조
질소 분위기에서, EtOH (80 mL) 의 화합물 A111 (6.0 g, 14.34 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 A101 (1.46 g, 14.34 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (3.3 mL, 57.36 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (80 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물은 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용한다. 생성된 잔류물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 500.40; MW. Found: 501.4 [M+H]+.
생성된 잔류물 (1.5g, 3.0mol, 1.0eq) 을 10mL의 DCM에 용해시키고, Et3N (0.625 mL, 4.5 mmol, 1.5 eq) 및 DMTrCl (1.2 g, 3.6 mmol, 1.2 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류 화합물은 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용한다. 생성물 A112는 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 802.53; MW. Found: 303.2 [DMT]-.
(4) 화합물 A113의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (15 mL) 의 화합물 A112 (1.7 g, 2.12 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (121 mg, 3.18 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (10mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 조생성물 (500 mg, 0.65 mmol, 1.0 eq) 을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (276 mg, 2.27 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (129 mg, 1.29 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*10 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A113 (340 mg, 수율 60%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 874.55; MW. Found: 303.2 [DMT]-, 573.4 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.79 (s, 1H), 7.42 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 7.26 - 7.22 (m, 4H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.81 (t, J = 5.8 Hz, 4H), 5.26 (s, 2H), 4.02 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.77 (s, 6H), 3.11 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.88 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.69 (dt, J = 10.5, 5.3 Hz, 4H), 1.97 (dd, J = 15.0, 7.6 Hz, 2H), 1.74 (dd, J = 13.5, 6.9 Hz, 4H), 1.28 - 1.25 (m, 30H), 0.87 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
(5) 화합물 A9의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (15 mL) 의 화합물 A113 (100 mg, 0.114 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (2.0 g) 및 DIPEA (57 μL, 0.342 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (86 mg, 0.228 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (9 mL) 의 아세트산 무수물 (6.8 mL), 피리딘 (13 mL) 및 NEt3 (210 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A9 (1.87g) 를 생성한다.
실시예 9 . 본 개시의 화합물 A10 및 A13의 제조
본 실시예의 화합물 A10 및 A13은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A115의 제조
질소 분위기에서, EtOH (30 mL) 의 화합물 A106 (2.0 g, 5.12 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 A114 (790 mg, 5.12 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (1.18 mL, 20.48 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (20 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-25%의 EA/헥산) 로 정제하여 황색 오일인 화합물 A115 (1.46 g, 수율 54%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 524.43; MW Found: 525.5 [M+H]+.
(2) 화합물 A116의 제조
상온에서, MeOH (18mL) 의 화합물 A115 (500 mg, 0.95 mmol, 1.0 eq) 용액에 0.5 M의 NaOH 수용액 18 mL를 첨가한다. 혼합물을 밤새 교반한다. 그 다음, 반응물을 2M의 HCl로 산성화하고 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 유기층을 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 본 개시의 흰색 고체 화합물 A116 (400 mg, 수율 82%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 510.42; MW Found: 511.4 [M + H]+.
(3) 화합물 A117의 제조
질소 분위기에서, MeOH (5 mL) 의 화합물 A94 (298 mg, 0.36 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (30 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물 A95를 제공한다. 조생성물 A95를 DCM (5mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, 화합물 A116 (220 mg, 0.432 mmol, 1.2 eq), HBTU (273 mg, 0.72 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (203 μL, 1.224 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (10 mL) 를 반응에 첨가하고 혼합물을 DCM (3*10mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 오일인 화합물 A117 (400 mg, 수율 94%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 1185.80; MW. Found: 303.2 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.05 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.43 - 7.40 (m, 2H), 7.32 - 7.26 (m, 8H), 7.23 (dd, J = 11.0, 4.3 Hz, 3H), 7.18 (dd, J = 7.9, 1.8 Hz, 1H), 6.81 - 6.78 (m, 4H), 6.38 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 5.09 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.18 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 4.11 - 4.07 (m, 2H), 3.76 (s, 6H), 3.49 (dd, J = 13.0, 6.6 Hz, 2H), 3.09 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.91 - 2.83 (m, 4H), 2.14 - 2.01 (m, 5H), 1.80 - 1.73 (m, 4H), 1.67 (s, 3H), 1.59 (s, 3H), 1.32 - 1.25 (m, 30H), 0.99 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.94 (s, 9H), 0.87 (d, J = 4.6 Hz, 3H), 0.10 (s, 6H).
(4) 화합물 A118의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (8 mL) 의 화합물 A117 (400 mg, 0.337 mmol, 1.0 eq) 용액에 1M의 TBAF THF 용액 (2.02 mL, 2.02 mmol, 6.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (144 mg, 1.18 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (67 mg, 0.674 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*20 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 흰색 고체 화합물 A118 (235 mg, 수율 60%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 1171.73; MW Found: 303.2 [DMT]-, 871.3 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.41 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.31 - 7.24 (m, 9H), 7.18 (dd, J = 7.9, 5.6 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.20 (s, 2H), 5.07 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 4.13 (dt, J = 15.1, 7.1 Hz, 4H), 3.76 (s, 6H), 3.33 (dd, J = 11.3, 5.6 Hz, 4H), 3.09 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.83 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.72 - 2.68 (m, 4H), 2.15 - 2.04 (m, 5H), 1.76 (dd, J = 15.1, 7.9 Hz, 4H), 1.67 (s, 3H), 1.60 (s, 3H), 1.31 - 1.26 (m, 30H), 0.96 (s, 3H), 0.87 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
(5) 화합물 A10의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (15 mL) 의 화합물 A118 (170 mg, 0.145 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (2.54 g) 및 DIPEA (72 μL, 0.435 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (110 mg, 0.29 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (11 mL) 의 아세트산 무수물 (8.67 mL), 피리딘 (16.8 mL) 및 NEt3 (260 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A10 (2.38g) 을 생성한다.
(6) 화합물 A13의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (5 mL) 의 화합물 A116 (400 mg, 0.76 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (43 mg, 1.14 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (10mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축하여 조생성물을 생성한다. 25°C, 질소 분위기에서, 무수 DCM (5 mL) 의 조 화합물 및 DIPEA (378 μL, 2.28 mmol, 3.0 eq) 용액에 3-((클로로(디이소프로필아미노)포스파닐)옥시)프로판니트릴 (540 mg, 2.28 mmol, 3.0 eq.) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 다음, 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM, 1% NEt3) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A13 (397 mg, 수율 75%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 696.55; MW Found: 614.4 [M - 디이소프로필아민 + 2H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.68 (s, 1H), 7.25 (dd, J = 8.6, 3.9 Hz, 2H), 4.85 (dd, J = 11.9, 8.3 Hz, 1H), 4.75 (dd, J = 11.9, 9.0 Hz, 1H), 4.10 - 4.04 (m, 2H), 3.90 - 3.78 (m, 2H), 3.73 - 3.60 (m, 2H), 2.73 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.61 (td, J = 6.5, 1.4 Hz, 2H), 1.98 - 1.92 (m, 1H), 1.88 - 1.52 (m, 8H), 1.36 - 1.23 (m, 31H), 1.21 (dd, J = 6.8, 0.7 Hz, 12H), 1.15 - 0.98 (m, 3H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 10 . 본 개시의 화합물 A11 및 A15의 제조
본 실시예의 화합물 A11 및 A15는 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A120의 제조
질소 분위기에서, EtOH (30mL) 의 화합물 A106 (2.0 g, 5.12 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 A119 (958 mg, 5.12 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (1.18 mL, 20.48 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (30 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류 화합물 A120은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 A120은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 557.36; MW. Found: 558.4 [M + H]+.
(2) 화합물 A122의 제조
상온에서, MeOH (18mL) 의 화합물 A121 (500 mg, 0.9 mmol, 1.0 eq) 용액에 0.5 M의 NaOH 수용액 18 mL를 첨가한다. 혼합물을 밤새 교반한다. 그 다음, 반응물을 2M의 HCl로 산성화하고 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 본 개시의 흰색 고체 화합물 A122 (330 mg, 수율 68%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 543.35; MW. Found: 544.5 [M + H]+.
(3) 화합물 A123의 제조
질소 분위기에서, MeOH (5 mL) 의 화합물 A94 (273 mg, 0.33 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (27 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축하여 조생성물 A95를 제공한다. 조생성물 A95를 DCM (5mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, 화합물 A122 (229 mg, 0.33 mmol, 1.0 eq), HBTU (250 mg, 0.66 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (186 μL, 1.12 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (5 mL) 를 반응에 첨가하고 혼합물을 DCM (3*10mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시키고 농축시킨다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 흰색 고체 화합물 A123 (249 mg, 수율 62%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 1218.73; MW Found: 303.2 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.19 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.73 - 7.69 (m, 2H), 7.56 (s, 1H), 7.29 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 7.18 - 7.15 (m, 6H), 7.07 (dt, J = 9.2, 8.5 Hz, 6H), 6.67 (d, J = 8.9 Hz, 4H), 4.72 (s, 2H), 4.12 - 4.05 (m, 2H), 3.96 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.64 (s, 6H), 3.12 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.95 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.70 - 2.63 (m, 7H), 1.82 (dd, J = 17.3, 10.5 Hz, 4H), 1.59 (dd, J = 12.8, 6.9 Hz, 4H), 1.18 - 1.04 (m, 24H), 0.83 (s, 9H), 0.75 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.03 (s, 6H).
(4) 화합물 A124의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (5 mL) 의 화합물 A123 (230 mg, 0.19 mmol, 1.0 eq) 용액에 1M의 TBAF THF 용액 (1.13 mL, 1.13 mmol, 6.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음 감압 하에 농축시켜 조생성물을 얻는다. 조생성물을 DCM (6 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (81 mg, 0.66 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (38 mg, 0.38 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*10 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일 형태의 화합물 A124 (126 mg, 수율 55%) 를 얻는다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 1204.66; MW Found: 303.2 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 8.07 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 11.5 Hz, 4H), 7.28 (t, J = 8.1 Hz, 6H), 7.16 (t, J = 6.8 Hz, 4H), 6.79 (d, J = 8.7 Hz, 4H), 5.16 (s, 2H), 4.30 - 4.20 (m, 4H), 3.75 (s, 6H), 3.58 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 3.43 - 3.41 (m, 7H), 3.07 (s, 2H), 2.86 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.61 (d, J = 3.4 Hz, 4H), 2.21 - 2.15 (m, 2H), 1.98 - 1.93 (m, 2H), 1.27 - 1.20 (m, 26H), 0.86 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
(5) 화합물 A11의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (12 mL) 의 화합물 A124 (126 mg, 0.104 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (1.83 g) 및 DIPEA (52 μL, 0.312 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (79 mg, 0.208 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (7.9 mL) 의 아세트산 무수물 (6.2 mL), 피리딘 (12 mL), NEt3 (186 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A11 (1.7g) 을 생성한다.
(6) 화합물 A15의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (5 mL) 의 화합물 A121 (300 mg, 0.538 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (31 mg, 0.8 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (5 mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축하여 조생성물을 생성한다. 25°C, 질소 분위기에서, 무수 DCM (5 mL) 의 화합물 및 DIPEA (265 μL, 1.6 mmol, 3.0 eq) 용액에 3-((클로로(디이소프로필아미노)포스파닐)옥시)프로판니트릴 (379 mg, 1.6 mmol, 3.0 eq.) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 다음, 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM, 1% NEt3) 로 정제하여 무색 오일 형태의 화합물 A15 (274 mg, 수율 70%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 729.47; MW Found: 669.5 [M - 디이소프로필아민 + Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.28 (s, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.56 (s, 1H), 7.18 - 7.15 (m, 4H), 4.72 (s, 2H), 4.12 - 4.05 (m, 4H), 2.70 - 2.63 (m, 7H), 1.92 - 1.88(m, 2H), 1.27 - 1.23 (m, 26H), 1.21 (dd, J = 6.8, 0.7 Hz, 12H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 11 . 본 개시의 화합물 A12의 제조
본 실시예에서 화합물 A12는 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A126의 제조
질소 분위기에서, MeOH (5 mL) 의 화합물 A94 (298 mg, 0.36 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (30 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물 A95를 제공한다. 조생성물 A95를 DCM (5mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, 화합물 A125 (111 mg, 0.43 mmol, 1.2 eq), HBTU (273 mg, 0.72 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (203 μL, 1.22 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (5 mL) 를 반응에 첨가하고 혼합물을 DCM (3*10mL) 로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 오일인 화합물 A126 (295 mg, 수율 88%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 931.63; MW Found: 303.2 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.68 (s, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 2H), 7.32 - 7.23 (m, 9H), 6.83 - 6.77 (m, 4H), 4.83 (s, 2H), 4.10 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.24 (dd, J = 13.2, 6.7 Hz, 2H), 3.11 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.06 (dd, J = 12.4, 4.5 Hz, 2H), 2.02 - 1.93 (m, 4H), 1.79 - 1.72 (m, 2H), 1.56 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.29 - 1.23 (m, 26H), 0.94 (s, 9H), 0.87 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.10 (s, 6H).
(2) 화합물 A127의 제조
질소 분위기에서, 무수 THF (6 mL) 의 화합물 A126 (270 mg, 0.29 mmol, 1.0 eq) 용액에 1M의 TBAF THF 용액 (1.74 mL, 1.74 mmol, 6.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조생성물을 얻는다. 조생성물을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (124 mg, 1.02 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (58 mg, 0.58 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*10 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A127 (120 mg, 수율 45%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 917.56; MW Found: 303.2 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.64 (s, 1H), 7.46 - 7.40 (m, 3H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 7.25 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.20 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.18 (s, 2H), 4.31 - 4.18 (m, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.42 - 3.40 (m, 4H), 3.09 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.67 - 2.62 (m, 4H), 2.34 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.05 - 1.92 (m, 4H), 1.29 - 1.23 (m, 26H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
(3) 화합물 A12의 제조
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (15 mL) 의 화합물 A127 (120 mg, 0.13 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (2.29 g) 및 DIPEA (65 μL, 0.39 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (99 mg, 0.26 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (10 mL) 의 아세트산 무수물 (7.8 mL), 피리딘 (15 mL) 및 NEt3 (234 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 A12 (2.1g) 를 생성한다
실시예 12 . 본 개시의 화합물 A14의 제조
본 실시예의 화합물 A14은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 A129의 제조
질소 분위기 하에서 EtOH (20 mL) 의 화합물 A106 (1.55 g, 3.96 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 A128 (500 mg, 3.96 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (913 μL, 15.84 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (20 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류 화합물 A129는 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용된다. 화합물 A129는 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 496.40; MW. Found: 497.5 [M+H]+.
(2) 화합물 A14의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (5 mL) 의 화합물 A129 (400 mg, 0.806 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (46 mg, 1.2 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (5 mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축하여 조생성물을 생성한다. 25°C, 질소 분위기에서, 무수 DCM (5 mL) 의 조 화합물 및 DIPEA (401 μL, 2.42 mmol, 3.0 eq) 용액에 3-((클로로(디이소프로필아미노)포스파닐)옥시)프로판니트릴 (573 mg, 2.42 mmol, 3.0 eq.) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 다음, 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-3%의 MeOH/DCM, 1% NEt3) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 A14 (339 mg, 수율 63%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 668.52; MW Found: 607.4 [M - 디이소프로필아민 + Na]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (s, 1H), 7.19 (dd, J = 6.9, 2.8 Hz, 2H), 5.03 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.81 - 4.79 (m, 1H), 4.71 - 4.66 (m, 1H), 4.04 - 3.98 (m, 2H), 3.79 (dd, J = 6.9, 2.8 Hz, 1H), 3.60 (ddd, J = 13.6, 6.8, 3.4 Hz, 2H), 2.82 - 2.78 (m, 1H), 2.61 - 2.53 (m, 3H), 1.63 - 1.60 (m, 3H), 1.54 - 1.52 (m, 3H), 1.33 - 1.17 (m, 30H), 1.14 (dd, J = 6.8, 2.0 Hz, 12H), 0.92 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.82 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 13 . 본 개시의 화합물 B1의 제조
본 실시예의 화합물 B1은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 4-플루오로-3-니트로벤조산으로부터 화합물 B12의 제조.
질소 분위기에서, 무수 DMF (500mL) 의 4-플루오로-3-니트로벤조산 (35 g, 189.1 mmol, 1.0 eq) 및 Na2CO3 (30.6 g, 283.6 mmol, 1.5 eq) 용액에 벤질 브로마이드 (35.6 g, 207.98 mmol, 1.1 eq) 를 천천히 첨가한다. 반응 혼합물을 45°C에서 3시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (200mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 황색 오일 (화합물 B12) 을 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) tert-부틸(3-아미노프로필)카바메이트의 SNAr 반응을 통해 화합물 B12로부터 화합물 B13을 제조한다.
질소 분위기에서, 무수 DMF (500mL) 의 화합물 B12 (52 g, 189.1 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (26.13 g, 189.1 mmol, 1.0 eq) 용액에 tert-부틸 (3-아미노프로필)카바메이트 (32.9 g, 189.1 mmol, 1.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (200mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 황색 고체 B13을 형성하고, 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 사용한다.
(3) 화합물 B14는 화합물 B13의 환원에 의해 생성된다.
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 666mL) 의 화합물 B13 (81.16 g, 189.1 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (71.58 g, 1.134 mol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (74.19 g, 1.134 mol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (200mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 유기 염수를 무수 NaSO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 밝은 붉은색 고체 (화합물 B14) 를 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(4) 화합물 B15는 N2,N6-비스(tert-부톡시카르보닐)-L-리신을 사용하여 화합물 B14를 아실화하여 생성한다.
질소 분위기에서, DCM (300 mL) 의 화합물 B14 (16.8 g, 42 mmol, 1.0 eq) 용액에 N2,N6-비스(tert-부톡시카르보닐)-L-리신 (21.82 g, 63 mmol, 1.5 eq), EDCI (12.08 g, 63 mmol, 1.5 eq) 및 DMAP (2.565 g, 21 mmol, 0.5 eq) 를 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 200 mL의 H2O를 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*100mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-50%의 EA/헥산) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 15 (27.5 g, 수율 90%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 727.42; MW Found: 728.47 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.88 (dd, J = 8.6, 1.9 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.35 (ddt, J = 9.8, 7.1, 5.5 Hz, 5H), 6.62 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.29 (s, 2H), 4.16 (s, 1H), 3.37 - 2.97 (m, 6H), 1.78 (d, J = 25.4 Hz, 4H), 1.51 (s, 2H), 1.48 - 1.35 (m, 27H), 1.36 - 1.13 (m, 2H).
(5) 벤즈이미다졸 구조를 포함하는 화합물 B16은 화합물 B15로부터 제조된다.
화합물 B15 (20 g, 27.5 mmol, 1.0 eq) 를 질소 분위기 하에 AcOH (100mL) 에 첨가한다. 반응 혼합물을 95°C에서 4시간 동안 교반한다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 여기에 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 포화 NaHCO3 용액 (3*100 mL) 으로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-50의 EA/헥산) 로 정제하여, 흰색 고체인 화합물 B16 (8.78 g, 수율 45%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 709.41; MW Found: 710.57 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 8.04 (dd, J = 8.5, 1.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.38 - 7.34 (m, 3H), 5.39 (s, 2H), 5.02 (dd, J = 15.8, 7.7 Hz, 1H), 3.20 - 3.10 (m, 6H), 2.08 - 1.96 (m, 4H), 1.57 - 1.48 (m, 4H), 1.41 (d, J = 8.6 Hz, 27H).
(6) 화합물 B17은 (2S,3R,4R,5R,6R)-3-아세트아미도-6-(아세톡시메틸)테트라하이드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트의 출발 물질을 사용하여 제조된다.
질소 분위기에서, DCM (300 mL) 의 (2S,3R,4R,5R,6R)-3-아세트아미도-6-(아세톡시메틸)테트라하이드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트 (30 g, 77 mmol, 1.0 eq) 용액에 TMSOTf (15.3 mL, 84.7 mmol, 1.1 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한다. 그 다음, 얼음 욕조에서 NaHCO3 용액 (200 mL의 물에 21 g NaHCO3) 을 첨가하고 반응물을 상온으로 옮긴다. 30분 동안 교반한 후, 혼합물을 DCM으로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-50%의 EA/Hexane) 로 정제하여 화합물 B17 (19.8 g, 수율 78%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 329.11; MW Found: 330.33 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.97 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 5.39 (s, 1H), 5.26 (dd, J = 11.4, 3.2 Hz, 1H), 4.53 (td, J = 11.4, 3.4 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.11 - 4.08 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.00 (d, J = 7.3 Hz, 6H).
(7) 비닐 그룹으로 종결된 알콕시 그룹을 화합물 B17에 부착시킨다.
질소 분위기에서, DCE (200mL) 의 화합물 B17 (15 g, 45.6 mmol, 1.0 eq) 용액에 dec-9-엔-1-올 (8.5 g, 54.7 mmol, 1.2 eq) 및 TMSOTf (1.6 mL, 9.1 mmol, 0.2 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 여기에 첨가하고, 혼합물을 DCM으로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 B20 (19.6 g, 수율 89%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 485.26; MW Found: 486.48 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.84 - 5.74 (m, 1H), 5.49 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 5.33 - 5.25 (m, 2H), 5.01 - 4.88 (m, 2H), 4.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.20 - 4.07 (m, 2H), 3.94 - 3.80 (m, 3H), 3.47 (dt, J = 9.5, 6.9 Hz, 1H), 2.13 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.98 (d, J = 9.7 Hz, 3H), 1.95 (d, J = 10.1 Hz, 3H), 1.56 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.35 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.27 (s, 8H).
(8) 화합물 B20의 말단 비닐 그룹은 카르복시 그룹에 의해 산화된다.
얼음 욕조에서, ACN/DCM/H2O (50mL/50mL/60mL) 의 화합물 B20 (19.6 g, 40.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 NaIO4 (34.6 g, 161.6 mol, 4.0 eq) 및 RuCl3●3H2O (1.66 g, 8.0 mol, 0.2 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (50mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 DCM으로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축한 후, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 B21 (17 g, 수율 84%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 503.24; MW Found: 504.49 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.65 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.31 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.18 - 4.12 (m, 2H), 3.91 (dd, J = 11.8, 5.4 Hz, 2H), 3.48 (dd, J = 9.7, 6.7 Hz, 1H), 2.35 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.15 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 1.63 (s, 2H), 1.32 (s, 10H).
(9) 화합물 B16과 B21은 서로 연결된다.
DCM (10 mL) 의 화합물 B16 (4.56 g, 6.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCl/디옥산 (4M, 30 mL) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 황색 고체인 조 생성물을 제공한다. 조생성물을 50 mL의 DCM에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, 화합물 21 (9.66 g, 19.2 mmol, 3.0 eq), HBTU (8.49 g, 22.4 mmol, 3.5 eq) 및 DIPEA (12.72 mL, 76.8 mmol, 12.0 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물에 50 mL의 H2O를 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*50 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 B22 (10.4 g, 수율 87%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 1864.93; MW Found: 1895.54 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 8.04 (dd, J = 8.5, 1.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.36 (dd, J = 13.2, 7.3 Hz, 4H), 5.39 (s, 2H), 5.35 (d, J = 3.2 Hz, 4H), 5.29 (s, 6H), 4.75 - 4.63 (m, 4H), 4.14 (qd, J = 11.1, 6.8 Hz, 9H), 3.92 (dd, J = 13.0, 6.4 Hz, 6H), 3.64 (dd, J = 13.0, 6.6 Hz, 4H), 3.49 - 3.42 (m, 4H), 3.12 - 3.06 (m, 3H), 2.19 (dd, J = 11.6, 7.5 Hz, 6H), 2.13 (s, 9H), 2.03 (s, 9H), 1.99 (s, 9H), 1.93 (d, J = 2.6 Hz, 9H), 1.54 - 1.50 (m, 12H), 1.45 (s, 6H), 1.25 (s, 18H).
(10) 화합물 B22를 환원시켜 본 개시의 화합물 B1을 생성한다.
질소 분위기에서, MeOH (25 mL) 의 화합물 B22 (1.4 g, 0.75 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (100 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소 가스로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 그래디언트 용출액: 1-15%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 B1 (1.2 g, 수율 90%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 1774.88; MW Found: 1775.32 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.73 (s, 1H), 8.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.36 - 5.27 (m, 6H), 4.69 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 4.56 - 4.37 (m, 2H), 4.17 - 4.08 (m, 6H), 4.00 - 3.88 (m, 6H), 3.88 - 3.77 (m, 3H), 3.65 (dd, J = 13.3, 6.6 Hz, 2H), 3.50 - 3.39 (m, 4H), 3.11 - 3.03 (m, 2H), 2.20 (dd, J = 17.0, 9.2 Hz, 8H), 2.13 (d, J = 1.5 Hz, 9H), 2.04 - 2.02 (m, 9H), 1.98 (d, J = 1.9 Hz, 9H), 1.94 - 1.89 (m, 9H), 1.60 - 1.52 (m, 16H), 1.44 (d, J = 6.4 Hz, 6H), 1.31 - 1.20 (m, 24H).
실시예 14 . 본 개시의 화합물 B2의 제조
본 실시예의 화합물 B2은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 이 단계는 메틸 4-플루오로-3-니트로벤조에이트로부터 화합물 B38을 제조하는 단계를 포함한다.
질소 분위기에서, 무수 DMF (100 mL) 의 메틸 4-플루오로-3-니트로벤조에이트 (8.0 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (5.5 g, 40.2 mmol) 용액에 벤질 (3-아미노프로필)카바메이트 (8.3 g, 40.2 mmol, 1.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25 °C에서 6시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (100 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 황색 고체 (화합물 B38) 를 형성하고, 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용한다.
(2) 화합물 B38은 화합물 B39로 전환된다.
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 100 mL) 의 화합물 B38 (10 g, 25.84 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (9.78 g, 155.04 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (10.14 g, 155.04 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (100mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 형성된 밝은 붉은색 고체 (화합물 B39) 를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(3) 벤즈이미다졸 구조를 포함하는 화합물 B40은 화합물 B39로부터 제조된다.
질소 분위기에서, EtOH (200mL) 의 화합물 B39 (8.0 g, 22.5 mmol, 1.0 eq) 용액에 3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판알 (4.2 g, 22.5 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (5.1 mL, 90 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물 (화합물 B40) 은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 B40은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 525.27; MW. Found: 526.59 [M+H]+.
(4) 화합물 B40에 포함된 tert-부틸디메틸실릴 (TBS) 보호 그룹을 4,4'-디메톡시트리틸 (DMT) 그룹으로 대체한다.
질소 분위기에서, 무수 THF (50 mL) 의 화합물 B40 (5.0 g, 9.5 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (14.25 mL, 14.25 mmol, 1.5 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 약 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 물 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 DCM으로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 50mL의 피리딘에 용해시키고, DMTrCl (3.86g, 11.4mmol, 1.2eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 B41 (4.1 g, 수율 60%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 713.31; MW Found: 303.17 [DMT]-, 412.36 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.39 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.96 (dd, J = 8.5, 1.3 Hz, 1H), 7.38 - 7.27 (m, 8H), 7.20 (dq, J = 6.7, 2.5 Hz, 7H), 6.76 - 6.70 (m, 4H), 5.10 (s, 2H), 4.19 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.74 (s, 6H), 3.65 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.20 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.09 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.00 - 1.90 (m, 2H).
(5) 화합물 B41에 포함된 카르보닐옥시 그룹을 메틸렌옥시 그룹으로 환원시켜 화합물 B42를 생성한다.
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (50mL) 의 화합물 B41 (4.0 g, 5.6 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (319 mg, 8.4 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (30mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 50mL의 DMF에 용해시킨 다음, 이미다졸 (572mg, 8.4mmol, 1.5eq) 과 TBSCl (1.27g, 8.4mmol, 1.5eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 B42 (4.03 g, 수율 90%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 799.40; MW. Found: 303.17 [DMT]. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.65 (s, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 7H), 7.19 (ddd, J = 8.4, 7.9, 3.7 Hz, 9H), 6.78 - 6.71 (m, 4H), 5.10 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.16 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.75 (s, 6H), 3.61 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.18 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.07 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.95 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 0.94 (s, 9H), 0.10 (s, 6H).
(6) 화합물 B22는 실시예 13의 단계 (1)-(9)에서 유래된다.
(7) 화합물 B42의 환원에서 유래된 화합물 B43은 화합물 B22에 연결된다.
질소 분위기에서, MeOH (15 mL) 의 화합물 B22 (1.36 g, 0.732 mmol, 1.1 eq) 용액에 Pd/C (136 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (15mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, HBTU (508 mg, 1.34 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (375 μL, 2.28 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 5분 후, 화합물 B42를 환원시켜 생성된 화합물 B43 (446mg, 0.67mmol, 1.0eq) 을 반응에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (20 mL) 를 반응에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*50mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 B24 (1.5 g, 수율 93%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 2422.23; MW Found: 1212.47 [M+2]/2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.96 (s, 1H), 8.81 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.02 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.63 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.54 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 7.29 (s, 2H), 7.18 (s, 4H), 6.72 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.35 (s, 2H), 5.29 (d, J = 11.0 Hz, 3H), 4.83 (s, 2H), 4.70 - 4.67 (m, 2H), 4.28 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.17 - 4.09 (m, 6H), 3.94 - 3.80 (m, 8H), 3.74 (s, 6H), 3.70 - 3.57 (m, 8H), 3.46 (d, J = 4.9 Hz, 4H), 3.12 - 3.06 (m, 4H), 2.78 - 2.65 (m, 3H), 2.20 (d, J = 8.1 Hz, 3H), 2.14 (d, J = 14.6 Hz, 6H), 2.12 (s, 9H), 2.02 (s, 9H), 1.98 (s, 9H), 1.92 (s, 9H), 1.54 - 1.50 (m, 12H), 1.28 (s, 6H), 1.22 - 1.16 (m, 24H), 0.93 (s, 9H), 0.10 (s, 6H).
(8) 화합물 B25는 화합물 B24의 TBS 그룹을 보호 해제한 다음 석신산 무수물로 아실화하여 생성된다.
질소 분위기에서, 무수 THF (35 mL) 의 화합물 B24 (1.5 g, 0.62 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (1.87 mL, 1.87 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조생성물을 얻는다. 조생성물을 DCM (15 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (265 mg, 2.17 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (124 mg, 1.24 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (20 mL) 를 반응물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*50 mL) 으로 추출한 다음, 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 B25 (794 mg, 수율 53%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 2408.12; MW Found: 1205.60 [M+2]/2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.30 (s, 1H), 7.92 - 7.84 (m, 2H), 7.59 (s, 2H), 7.31 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.22 - 7.14 (m, 8H), 6.74 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.32 - 5.25 (m, 3H), 5.20 (s, 2H), 4.77 - 4.71 (m, 2H), 4.28 (s, 2H), 4.13 (dd, J = 9.6, 4.8 Hz, 6H), 4.01 (dd, J = 8.7, 6.2 Hz, 3H), 3.92 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 3.88 - 3.83 (m, 2H), 3.75 (s, 6H), 3.61 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.39 - 3.30 (m, 14H), 3.13 (d, J = 6.1 Hz, 4H), 2.70 (dd, J = 19.6, 12.8 Hz, 4H), 2.34 - 2.20 (m, 6H), 2.12 (s, 9H), 2.02 (s, 9H), 1.98 (s, 9H), 1.93 (s, 9H), 1.68 (dd, J = 10.1, 6.1 Hz, 12H), 1.48 - 1.43 (m, 12H), 1.31 - 1.22 (m, 24H).
(9) 화합물 B25를 고체 지지체인 Controlled Pore Glass(CPG) 에 연결하여 본 개시의 화합물 B2를 생성한다.
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (40 mL) 의 화합물 B25 (754 mg, 0.33 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (5.58 g), N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA) (160 uL, 0.99 mmol, 3.0 eq) 용액에 O-(1H-벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (HBTU) (250 mg, 0.66 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (26.2 mL) 의 아세트산 무수물 (17.7 mL), 피리딘 (40 mL) 및 NEt3 (580 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 B2 (5.3g) 를 생성한다.
실시예 15 . 본 개시의 화합물 B3의 제조
본 개시의 화합물 B3은 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 B39는 실시예 14의 단계 (1)-(2)에서 유래된다.
(2) 벤즈이미다졸 구조를 포함하는 화합물 B44는 화합물 B39로부터 제조된다.
질소 분위기에서, EtOH (220mL) 의 화합물 B39 (8.87 g, 24.84 mmol, 1.0 eq) 용액에 5-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)펜탄알 B11 (5.4 g, 24.84 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (5.73 mL, 99.36 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 여기에 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한다. 유기상을 합하여 염수로 세척하고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 붉은색 고체인 화합물 B44 (6.3 g, 수율 46%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법, 1H NMR 및 13C NMR로 특성화하였다. MW calc.: 553.30; MW Found: 554.29 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 8.5, 1.1 Hz, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 5H), 7.26 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.16 (dd, J = 12.6, 5.3 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.67 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.28 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.04 - 1.88 (m, 4H), 1.67 (dd, J = 14.7, 6.6 Hz, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.04 (s, 6H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 167.72, 156.63, 142.35, 138.19, 136.30, 128.60, 128.24, 124.10, 123.87, 121.63, 108.66, 66.96, 62.71, 60.41, 52.06, 41.31, 38.57, 32.46, 30.43, 27.30, 25.97, 24.15, 21.07, 18.34, 14.21.
(3) 화합물 B44에 포함된 tert-부틸디메틸실릴 (TBS) 보호 그룹을 4,4'-디메톡시트리틸 (DMT) 그룹으로 대체한다.
질소 분위기에서, 무수 THF (50 mL) 의 화합물 B44 (6.3 g, 11.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (17.1 mL, 17.1 mmol, 1.5 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 물 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 DCM으로 3번 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 50mL의 피리딘에 용해시키고, DMTrCl (4.6g, 13.68mmol, 1.2eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 B45 (6.23 g, 수율 74%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법, 1H NMR 및 13C NMR로 특성화하였다. MW calc.: 741.34; MW. Found: 303.11 [DMT]-, 440.14 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.63 (dd, J = 5.7, 1.5 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 8.5, 1.1 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.37 - 7.28 (m, 11H), 7.21 (dd, J = 8.1, 6.1 Hz, 1H), 6.83 (t, J = 5.9 Hz, 4H), 5.13 (s, 2H), 4.12 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.79 (s, 6H), 3.24 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.14 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.83 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.01 (dd, J = 16.0, 8.5 Hz, 4H), 1.79 (dd, J = 14.1, 6.6 Hz, 2H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 167.81, 158.43, 156.64, 149.95, 145.34, 142.43, 138.26, 136.57, 136.05, 130.11, 128.69, 128.39, 128.26, 128.23, 127.84, 126.75, 124.17, 123.89, 121.70, 113.11, 108.75, 85.93, 67.02, 62.90, 55.31, 52.16, 41.37, 38.64, 30.50, 29.76, 27.30, 24.53.
(4) 화합물 B45에 포함된 카르보닐옥시 그룹을 메틸렌옥시 그룹으로 환원시켜 화합물 B46을 생성한다.
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (60mL) 의 화합물 B45 (5.0 g, 6.74 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (384 mg, 10.11 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 약 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (30mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 동안 반응시킨 후, 반응물을 Et2O로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 20mL의 DMF에 용해시킨 다음, 이미다졸 (688 mg, 10.11 mmol, 1.5 eq) 및 TBSCl (1.524 g, 10.11 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한다. 감압 하에 농축한 후, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 B46 (4.78 g, 수율 86%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법, 1H NMR 및 13C NMR로 특성화하였다. MW calc.: 827.43; MW. Found: 303.16 [DMT]-, 526.50 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.69 (s, 1H), 7.47 - 7.42 (m, 2H), 7.40 - 7.28 (m, 11H), 7.22 (t, J = 3.5 Hz, 3H), 6.86 - 6.80 (m, 4H), 5.13 (s, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.15 (dd, J = 14.3, 7.2 Hz, 2H), 3.79 (s, 6H), 3.13 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.82 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.05 - 1.94 (m, 4H), 1.81 - 1.74 (m, 2H), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 0.97 (s, 9H), 0.13 (s, 6H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 171.27, 158.45, 156.60, 154.95, 145.40, 142.93, 136.66, 135.52, 134.14, 130.14, 128.70, 128.37, 128.28, 127.85, 126.74, 120.93, 117.18, 113.13, 108.73, 85.93, 67.00, 65.53, 63.00, 60.51, 55.32, 53.55, 41.19, 38.74, 30.51, 29.85, 27.33, 26.14, 24.78, 21.17, 18.57, 14.33.
(5) 화합물 B22는 실시예 13의 단계 (1)-(9)에서 유래된다.
(6) 화합물 B22는 화합물 B46에서 유래된 화합물 B47과 연결되어 화합물 B27을 형성한다.
질소 분위기에서, MeOH (20 mL) 의 화합물 B22 (2.24 g, 1.2 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (224 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소 가스로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (20mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, HBTU (910 mg, 2.4 mmol, 2.0) 및 DIPEA (676 μL, 4.08 mmol, 3.4 eq) 를 반응에 첨가한다. 5분 후, 화합물 B46을 환원시켜 생성된 화합물 B47 (849mg, 1.2mmol) 을 반응에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (20 mL) 를 반응에 첨가한 후, 혼합물을 DCM (3*50 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 흰색 고체인 화합물 B27 (1.48 g, 수율 50%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 2450.26; MW. Found: 1074.76 [DMT off]-/2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.09 (s, 1H), 7.73 - 7.59 (m, 2H), 7.39 (t, J = 10.1 Hz, 3H), 7.29 (d, J = 8.6 Hz, 5H), 7.25 - 7.15 (m, 4H), 6.78 (t, J = 8.2 Hz, 4H), 5.42 - 5.16 (m, 9H), 4.83 (s, 2H), 4.68 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 4.42 - 4.25 (m, 2H), 4.22 - 4.06 (m, 8H), 4.02 - 3.79 (m, 10H), 3.80 - 3.74 (m, 6H), 3.70 - 3.30 (m, 8H), 3.21 (s, 2H), 3.09 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.86 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 2.31 - 2.14 (m, 10H), 2.12 (s, 9H), 2.05 - 2.02 (m, 9H), 1.99 (s, 9H), 1.93 (s, 9H), 1.75 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 1.60 - 1.50 (m, 12H), 1.26 (d, J = 12.4 Hz, 24H), 0.93 (s, 9H), 0.10 (s, 6H).
(7) 화합물 B28은 화합물 B27의 TBS 그룹을 보호 해제한 다음, 석신산 무수물로 아실화하여 생성된다.
질소 분위기에서, 무수 THF (10 mL) 의 화합물 B27 (1.22 g, 0.5 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (1.5 mL, 1.5 mmol, 3 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조생성물을 얻는다. 조생성물을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, DMAP (212 mg, 1.75 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (150 mg, 1.5 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*20 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 B28 (380 mg, 수율 31%)을 제공한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 2436.19; MW. Found: 1067.52 [DMT off]-/2.
(8) 화합물 B28을 고체 지지체인 Controlled Pore Glass (CPG) 에 연결하여 본 개시의 화합물 B3을 생성한다.
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (14 mL) 의 화합물 B28 (250 mg, 0.103 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (1.8 g) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA) (51 μL, 0.309 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (78 mg, 0.206 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 순차적으로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (7.9 mL) 의 아세트산 무수물 (6.2 mL), 피리딘 (12 mL) 및 NEt3 (186 uL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 순차적으로 세척하여 본 개시의 화합물 B3 (1.84g) 을 생성한다.
실시예 16 : 본 개시의 화합물 B4의 제조
본 개시의 화합물 B4는 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 B17은 실시예 13의 단계 (6)에서 유래된다.
(2) 비닐 그룹으로 종결된 알콕시 그룹을 화합물 B17에 부착시킨다.
질소 분위기에서, DCE (260 mL) 의 화합물 B17 (19.7 g, 59.8 mmol, 1.0 eq) 용액에 헥스-5-엔-1-올 (7.2 g, 71.8 mmol, 1.2 eq) 및 TMSOTf (2.2 mL, 12 mmol, 0.2 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고 혼합물을 DCM으로 3회 추출한다. 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 B18 (18.7 g, 수율 73%) 을 제공한다.
(3) 화합물 B18의 말단 비닐 그룹을 카르복시 그룹로 산화시킨다.
얼음 욕조에서, ACN/DCM/H2O (140mL/140mL/210mL) 의 화합물 B18 (18.7g, 43.6 mmol, 1.0 eq) 용액에 NaIO4 (37.3 g, 174.4 mol, 4.0 eq) 및 RuCl3●3H2O (1.8 g, 8.72 mol, 0.2 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 반응 혼합물을 상온으로 옮기고 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (100mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 DCM으로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 B19 (19 g, 수율 97%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 447.17; MW Found: 448.36 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.15 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.33 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.29 - 5.26 (m, 1H), 4.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.13 (dd, J = 9.3, 6.8 Hz, 2H), 3.92 (dd, J = 8.4, 5.4 Hz, 2H), 3.50 (dd, J = 5.7, 4.0 Hz, 1H), 2.35 (dd, J = 14.3, 7.0 Hz, 2H), 2.13 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.95 (s, 3H), 1.69 - 1.61 (m, 4H).
(4) 화합물 B16은 실시예 13의 단계 (1)-(5)에서 유래된다.
(5) 화합물 B16을 화합물 B19와 연결하여 화합물 B30을 생성한다.
DCM (10 mL) 의 화합물 B16 (1.8 g, 2.54 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCl/디옥산 (4M, 20 mL) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 황색 고체의 조 생성물을 제공한다. 그 후, 조생성물을 25 mL의 DCM에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, 화합물 B19 (3.4 g, 7.62 mmol, 3.0 eq), HBTU (3.37 g, 8.89 mmol, 3.5 eq) 및 DIPEA (5.05 mL, 30.48 mmol, 12.0 eq) 를 반응에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 20 mL의 H2O를 반응 혼합물에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*30 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 B30 (3.67 g, 수율 85%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 1697.80; MW Found: 1698.53 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J = 22.5 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.40 - 7.31 (m, 4H), 5.42 - 5.26 (m, 7H), 5.19 (td, J = 11.0, 3.3 Hz, 2H), 4.64 - 4.55 (m, 2H), 4.24 - 3.99 (m, 10H), 3.94 - 3.75 (m, 6H), 3.68 - 3.62 (m, 1H), 3.35 - 3.16 (m, 4H), 3.11 - 3.06 (m, 1H), 2.35 - 2.26 (m, 3H), 2.23 - 2.15 (m, 6H), 2.12 (d, J = 6.9 Hz, 9H), 2.03 (s, 9H), 1.99 (s, 9H), 1.92 (dd, J = 11.6, 5.2 Hz, 9H), 1.78 (s, 2H), 1.71 - 1.61 (m, 6H), 1.51 (dd, J = 12.6, 6.5 Hz, 8H), 1.42 (d, J = 6.6 Hz, 4H).
(6) 화합물 B47은 실시예 15의 단계 (3)-(5)에서 유래된다.
(7) 화합물 B30은 화합물 B46에서 유래된 화합물 B47에 연결되어 화합물 B31을 형성한다.
질소 분위기에서, MeOH (20 mL) 의 화합물 B30 (1.85 g, 1.09 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (185 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소 가스로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다.
조생성물을 DCM (20mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 HBTU (826 mg, 2.18 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (614 μL, 3.7 mmol, 3.4 eq) 를 반응에 첨가한다. 5분 후, 화합물 B46을 환원시켜 생성된 화합물 47 (849mg, 1.2mmol, 1.1eq) 을 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (20 mL) 를 반응에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*50mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 백색 고체인 화합물 B31 (1.8 g, 수율 72%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 2282.08; MW Found: 1142.33 [M+2H]+/2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.38 (dd, J = 12.7, 8.1 Hz, 4H), 7.28 (d, J = 8.8 Hz, 5H), 7.23 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.20 - 7.15 (m, 2H), 6.78 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.33 (s, 3H), 5.23 - 5.11 (m, 2H), 4.81 (s, 2H), 4.58 (dd, J = 8.4, 2.1 Hz, 2H), 4.18 (d, J = 10.6 Hz, 3H), 4.17 - 4.04 (m, 8H), 3.96 - 3.80 (m, 6H), 3.75 (s, 6H), 3.63 (dd, J = 13.3, 6.6 Hz, 1H), 3.57 - 3.40 (m, 5H), 3.22 (s, 3H), 3.07 (dd, J = 10.9, 4.7 Hz, 2H), 2.85 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.42 (s, 6H), 2.20 (dd, J = 34.7, 6.1 Hz, 8H), 2.10 (d, J = 7.6 Hz, 9H), 2.06 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 2.01 (d, J = 3.3 Hz, 9H), 1.97 (dd, J = 7.5, 2.4 Hz, 9H), 1.89 (dd, J = 28.9, 13.9 Hz, 9H), 1.80 - 1.64 (m, 6H), 1.62 - 1.46 (m, 12H), 1.40 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.08 (s, 6H).
(8) 화합물 B32는 화합물 B31의 TBS 그룹을 보호 해제한 다음, 석신산 무수물로 아실화하여 생성된다.
질소 분위기에서, 무수 THF (10 mL) 의 화합물 B31 (1.57 g, 0.687 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (2.06 mL, 2.06 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축하여 조생성물을 생성한다.
조생성물을 DCM (15mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 DMAP (587mg, 4.8mmol, 3.5eq) 및 석신산 무수물 (137mg, 1.374mmol, 2.0eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (20 mL) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*50 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 B32 (1.0 g, 수율 64%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 2268.01; MW Found: 1135.22 [M+2H]+/2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.17 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.40 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.30 - 7.26 (m, 5H), 7.24 (s, 2H), 7.18 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 6.50 (s, 2H), 5.32 (s, 2H), 5.29 (s, 5H), 5.25 - 5.12 (m, 4H), 4.60 (dd, J = 15.7, 8.3 Hz, 2H), 4.17 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 4.14 - 3.96 (m, 8H), 3.87 (dd, J = 15.1, 6.5 Hz, 5H), 3.76 (s, 6H), 3.45 (s, 6H), 3.19 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 3.08 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.01 (s, 10H), 2.90 - 2.77 (m, 2H), 2.63 (d, J = 17.4 Hz, 4H), 2.19 (dd, J = 24.8, 17.2 Hz, 9H), 2.12 - 2.08 (m, 9H), 2.01 (d, J = 3.7 Hz, 9H), 1.98 - 1.94 (m, 9H), 1.87 (dd, J = 24.8, 13.3 Hz, 9H), 1.76 - 1.62 (m, 6H), 1.55 (d, J = 15.4 Hz, 12H).
(9) 화합물 B32를 고체 지지체인 Controlled Pore Glass (CPG) 에 연결하여 본 개시의 화합물 B4를 생성한다.
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (14 mL) 의 화합물 B32 (233 mg, 0.103 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (1.8 g), N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA) (51 μL, 0.309 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (78 mg, 0.206 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 순차적으로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다.
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (7.9 mL) 의 아세트산 무수물 (6.2 mL), 피리딘 (12 mL) 및 NEt3 (186 uL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 B4 (1.84g) 를 생성한다.
실시예 17 : 본 개시의 화합물 B5의 제조
본 개시의 화합물 B5는 본 실시예에서 다음의 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 B46은 실시예 15의 단계 (3)-(5)에서 유래된다.
(2) 화합물 B48은 화합물 B46을 환원한 다음 6-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)헥산산으로 아실화하여 생성된다.
질소 분위기에서, MeOH (30 mL) 의 화합물 B46 (1.0 g, 1.2 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (100 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 그 후, 조생성물을 20mL의 DCM에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 6-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)헥산산 (350mg, 1.32mmol, 1.1eq), HBTU (682mg, 1.8mmol, 1.5eq) 및 DIPEA (675μL, 4.08mmol, 3.4eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 20 mL의 H2O를 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*50mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 오일인 화합물 B48 (1.0 g, 수율 88%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 940.52; MW. Found: 303.29 [DMT]-, 639.64 [DMT off + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 5.3, 3.3 Hz, 2H), 7.29 (dtd, J = 7.8, 4.7, 2.2 Hz, 14H), 6.80 (dt, J = 9.0, 5.7 Hz, 4H), 5.06 (s, 2H), 4.81 (s, 2H), 4.11 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.77 (s, 6H), 3.18 - 3.08 (m, 4H), 2.88 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.09 - 1.92 (m, 6H), 1.60 - 1.25 (m, 10H), 0.93 (s, 9H), 0.10 (s, 6H).
(3) 화합물 B22는 실시예 13의 단계 (1)-(9)에서 유래된다.
(4) 화합물 B22는 화합물 B48에서 유래된 화합물 B49에 연결되어 화합물 B34를 형성한다.
질소 분위기에서, MeOH (20 mL) 의 화합물 B22 (2.4 g, 1.28 mmol) 용액에 Pd/C (240mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소 가스로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 얻는다.
조생성물을 DCM (20 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 HBTU (971 mg, 2.56 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (721 μL, 4.352 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 5분 후, 화합물 B48을 환원시켜 얻은 화합물 B49 (1.04 g, 1.27 mmol, 1.0 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (20 mL) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*30 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 흰색 고체인 화합물 B34 (1.07 g, 수율 33%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 2563.35; MW Found: 1283.20 [M+2H]+/2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.10 (s, 1H), 7.73 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.39 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 8.9 Hz, 5H), 7.25 - 7.21 (m, 3H), 7.19 - 7.15 (m, 2H), 6.78 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.34 (s, 4H), 5.29 (s, 2H), 5.27 (s, 2H), 4.80 (s, 2H), 4.68 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 4.13 (dt, J = 17.5, 10.8 Hz, 9H), 4.03 - 3.96 (m, 3H), 3.92 (d, J = 6.2 Hz, 4H), 3.76 (s, 6H), 3.67 - 3.63 (m, 2H), 3.44 (d, J = 5.4 Hz, 6H), 3.08 (t, J = 6.1 Hz, 3H), 2.79 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.15 (d, J = 7.7 Hz, 12H), 2.12 (s, 9H), 2.07 (s, 3H), 2.02 (d, J = 3.1 Hz, 9H), 1.98 (d, J = 1.8 Hz, 9H), 1.97 (s, 5H), 1.91 (s, 9H), 1.56 - 1.49 (m, 18H), 1.42 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.24 (d, J = 15.2 Hz, 24H), 0.92 (s, 9H), 0.08 (s, 6H).
(5) 화합물 B35는 화합물 B34의 TBS 그룹을 보호 해제한 다음 석신산 무수물로 아실화하여 생성된다.
질소 분위기에서, 무수 THF (10 mL) 의 화합물 B34 (873 mg, 0.346 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (2.07 mL, 2.07 mmol, 6.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음 감압 하에 농축시켜 조생성물을 생성한다.
조생성물을 DCM (10 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 DMAP (148 mg, 1.21 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (104 mg, 1.038 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (20 mL) 를 반응물에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*30 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 B35 (293 mg, 수율 33%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 2549.28; MW Found: 1276.36 [M+2H]+/2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.10 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.28 (s, 4H), 7.25 - 7.10 (m, 5H), 6.78 (d, J = 8.6 Hz, 4H), 6.70 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 5.33 (s, 2H), 5.29 (s, 6H), 4.70 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 4.17 - 3.98 (m, 11H), 3.87 (d, J = 35.7 Hz, 6H), 3.75 (s, 6H), 3.46 (s, 4H), 3.31 - 3.24 (m, 2H), 3.20 (s, 8H), 3.07 (s, 4H), 2.72 (d, J = 51.3 Hz, 4H), 2.14 (s, 6H), 2.09 (d, J = 16.8 Hz, 12H), 2.01 (s, 9H), 1.96 (s, 12H), 1.92 (s, 9H), 1.67 (dd, J = 16.4, 7.7 Hz, 6H), 1.61 - 1.40 (m, 18H), 1.37 - 1.03 (m, 30H).
(6) 화합물 B35를 고체 지지체인 Controlled Pore Glass (CPG) 에 연결하여 본 개시의 화합물 B5를 생성한다.
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (14 mL) 의 화합물 B35 (262 mg, 0.103 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (1.8 g) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA) (51 μL, 0.309 mmol, 3.0 eq) 의 용액에 HBTU (78 mg, 0.206 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 고체 지지체를 생성한다.
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (7.9 mL) 의 아세트산 무수물 (6.2 mL), 피리딘 (12 mL) 및 NEt3 (186 μL) 용액에 조 고체 지지체를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새 교반한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 본 개시의 화합물 B5 (1.78g) 를 생성한다.
실시예 18 : 본 개시의 화합물 B6의 제조.
본 개시의 화합물 B6은 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 B22는 실시예 13의 단계 (1)-(9)에서 유래된다.
(2) 화합물 B37은 화합물 B22를 환원시킨 다음, 6-아미노헥산-1-올로 아실화하여 생성된다.
질소 분위기에서, MeOH (25 mL) 의 화합물 B22 (1.0 g, 0.54 mmol, 1.0 eq) 용액에 Pd/C (100 mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소 가스로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다.
질소 분위기에서, 조생성물을 DCM (20 mL) 에 용해시킨 다음, HBTU (410 mg, 1.08 mmol, 2.0 eq) 및 DIPEA (305 μL, 1.84 mmol, 3.4 eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 5분 후, 6-아미노헥산-1-올 (70 mg, 0.594 mmol, 1.1 eq) 을 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (20 mL) 를 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*50 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 흰색 고체인 화합물 B37 (0.9 g, 수율 90%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 1873.98; MW Found: 1874.16 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.39 - 5.26 (m, 9H), 4.73 - 4.66 (m, 3H), 4.14 (dt, J = 18.0, 11.1 Hz, 8H), 3.95 - 3.88 (m, 4H), 3.64 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 3.47 (dd, J = 14.8, 8.0 Hz, 6H), 3.25 (dd, J = 13.8, 6.8 Hz, 6H), 2.14 (s, 9H), 2.04 (d, J = 3.4 Hz, 9H), 2.00 - 1.98 (m, 9H), 1.93 (s, 9H), 1.68 (s, 10H), 1.60 - 1.53 (m, 14H), 1.44 (s, 8H), 1.27 (d, J = 12.4 Hz, 24H).
(3) 본 개시의 화합물 B6은 화합물 B37을 사용하여 제조된다.
25°C, 질소 분위기에서, 무수 DCM (10 mL) 의 화합물 B37 (0.9 g, 0.48 mmol, 1.0 eq) 및 DIPEA (238 μL, 1.44 mmol, 3.0 eq) 용액에 3-((클로로(디이소프로필아미노)포스파닐)옥시)프로판니트릴 (341 mg, 1.44 mmol, 3.0 eq.) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 다음, 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM, 1% Et3N )로 정제하여, 본 개시의 흰색 고체 화합물 B6 (495 mg, 수율 50%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 2074.09; MW Found: 987.54 [M - 디이소프로필아민]/2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.38 - 5.18 (m, 8H), 4.74 - 4.63 (m, 3H), 4.23 - 4.06 (m, 8H), 4.05 - 3.94 (m, 4H), 3.95 - 3.88 (m, 4H), 3.87 - 3.73 (m, 5H), 3.64 - 3.54 (m, 4H), 3.47 (dd, J = 13.8, 6.6 Hz, 5H), 2.64 (t, J = 6.4 Hz, 6H), 2.17 (d, J = 5.8 Hz, 6H), 2.13 (s, 9H), 2.03 (d, J = 2.9 Hz, 9H), 2.00 - 1.98 (m, 9H), 1.93 (s, 9H), 1.56 (dd, J = 26.2, 20.3 Hz, 16H), 1.42 (d, J = 7.3 Hz, 6H), 1.27 (d, J = 11.1 Hz, 24H), 1.18 (d, J = 2.3 Hz, 6H), 1.16 (d, J = 2.3 Hz, 6H), 1.10 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
실시예 19 : 본 개시의 화합물 tC2의 제조.
(1) 화합물 C3은 다음 절차에 따라 제조된다:
디카르복실산 (20g, 86.8mmol) 을 건조한 CH2Cl2 (100 mL) 에 용해/현탁시킨다. 그 다음, 염화옥살릴 (16.2 mL, 190.96 mmol) 및 DMF (5 drops) 를 용액에 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 조 화합물 C2를 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
THF (200 mL) 의 벤질 알코올 (9.39 g, 86.8 mmol) 및 Et3N (12 mL, 86.8 mmol) 용액을 THF (100 mL) 의 얼음처럼 차가운 화합물 C2 (86.8 mmol) 용액에 2시간 동안 적가한다. 그 다음, 용액을 상온으로 데우고 밤새 동안 교반한다. H2O (80 mL), Et3N (12 mL, 86.8 mmol) 및 THF (80 mL) 의 혼합물을 1시간 동안 용액에 천천히 첨가하고, 2시간 동안 계속 교반한다. 그 다음, THF를 제거하고 20 mL의 H2O를 잔류물에 첨가한다. 혼합물을 에틸 에테르 (3*100 mL) 로 추출하고 유기상을 합하여 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 에틸 아세테이트 (20mL) 를 잔류물에 첨가하고, 현탁액을 여과하여 도데칸디오산을 제거한다. 여과액을 농축한 후 크로마토그래피 (헥산: 에틸 아세테이트 = 4:1~2:1) 를 수행하여 12.5g (수율 45%) 의 흰색 고체의 화합물 C3을 얻는다. MW calc.: 320.20; MW Found: 319.02 [M-H]-.
(2) 화합물 C6은 다음 절차에 따라 합성된다:
상온에서, 무수 THF (250 mL) 의 Fmoc-L-히드록시프롤린 화합물 C4 (13.3 g, 37.6 mmol) 용액에 보란 메틸 설파이드 복합체 (6.16 g, 80 mmol) 를 천천히 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 5분 동안 교반한 다음, 약 1시간 동안 가열하여 환류시킨다. 메탄올 (15mL) 을 반응 혼합물에 조심스럽게 첨가한 후, 용기에 있는 물질을 15분 동안 환류시킨다. 그 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 조생성물을 메탄올 (각각 100mL) 로 3회 증발시켜 붕소 관련 불순물을 제거한다. 얻어진 조생성물 화합물 C5는 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
얼음 욕조에서, 무수 피리딘 (200 mL) 의 화합물 C5 (37.6 mmol) 용액에 DMTrCl (14 g, 41.4 mmol) 를 천천히 첨가한다. 반응 혼합물을 질소 분위기에서 밤새 교반한 다음 감압 하에 농축시킨다. 조생성물을 건조한 MeCN (300mL) 에 용해시킨 후, Et3N (112.8 mmol, 15.6 mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 반응 혼합물을 60 oC로 가열하고, 그 온도에서 4시간 동안 유지시킨다. 감압 하에 농축시킨 후, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 C6 (7.57 g, 수율 48%) 을 제공한다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 7.28 - 7.22 (m, 2H), 7.18 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 4.34 (s, 1H), 3.75 (d, J = 11.1 Hz, 6H), 3.60 (dd, J = 12.7, 6.7 Hz, 1H), 3.10 - 2.92 (m, 5H), 2.86 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 1.85 (dd, J = 13.5, 7.1 Hz, 1H), 1.63 (ddd, J = 13.7, 7.9, 5.9 Hz, 1H).
(3) 화합물 C9는 다음 절차에 따라 제조된다:
DMSO (50 mL) 의 2-아미노-2-(히드록시메틸)프로판-1,3-디올 화합물 C7 (25 g, 206 mmol) 용액에 수산화나트륨 용액 (0.83 g NaOH in 4 mL H2O) 을 천천히 첨가한다. 그 다음, 질소 하에 3-(tert-부톡시)-3-옥소프로프-1-엔-1-일륨 (90 g, 700 mmol) 을 천천히 첨가한다. 반응물을 상온에서 2일 동안 교반한다. 그 다음, 반응물에 100 mL의 H2O를 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트 (3Х150mL) 로 추출한 다음, 유기상을 합하여 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 C9 (42 g, 수율 40%) 를 제공한다.
(4) 화합물 C10은 다음 절차에 따라 제조된다:
질소 분위기에서, DCM (50mL) 의 12-(벤질옥시)-12-옥소도데칸산 화합물 C3 (3.3 g, 10.3 mmol) 용액에 HBTU (7.81 g, 20.6 mmol) 및 DIPEA (5.1 mL, 30.9 mmol) 를 첨가한다. 5분 후, 화합물 C9 (7.8g, 15.45mmol) 를 반응 시스템에 첨가한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 4시간 동안 교반한다. 그 다음, 50 mL의 H2O를 반응 시스템에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*100mL) 으로 추출하고, 유기상을 합치고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 그래디언트 용출액: 1-30%의 EA/HX) 로 정제하여, 무색 오일인 화합물 C10 (7.16 g, 수율 86%) 을 제공한다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 - 7.27 (m, 5H), 6.00 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.70 (s, 6H), 3.64 (t, J = 6.3 Hz, 6H), 2.44 (t, J = 6.3 Hz, 6H), 2.34 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.17 - 2.09 (m, 2H), 1.59 (d, J = 11.6 Hz, 4H), 1.45 (s, 27H), 1.26 (s, 12H).
(5) 화합물 12는 다음 절차에 따라 제조된다:
질소 분위기에서, DCM (100 mL) 의 화합물 C10 (7.0 g, 8.67 mmol) 용액에 CF3COOH (50 mL) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축하여 무색 오일의 조생성물을 제공한다. 그 후, 무색 오일을 100 mL의 DCM에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, HBTU (19.73 g, 52.02 mmol) 및 DIPEA (13 mL, 78.03 mmol) 를 반응 시스템에 첨가한다. 5분 후, tert-부틸 (3-아미노프로필)카바메이트 화합물 C11 (6.8 g, 39 mmol) 을 반응 시스템에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 50 mL의 H2O를 반응 시스템에 첨가하고, 혼합물을 DCM (3*100mL) 으로 추출하고, 유기상을 합하여 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 무색 오일인 화합물 C12 (6.7 g, 수율 70%) 를 제공한다.
(6) 화합물 C14는 다음 절차를 사용하여 제조된다:
DCM (8 mL) 의 화합물 C12 (1.0 g, 0.9 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCl/디옥산 (4M, 8 mL) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반한 다음, 감압 하에 농축시켜 황색 고체의 조생성물을 제공한다. 그 후, 조생성물을 15 mL의 DCM에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, 화합물 C13 (1.81 g, 4.05 mmol, 4.5 eq), HBTU (1.53 g, 4.05 mmol, 4.5 eq) 및 DIPEA (1.79 mL, 10.8 mmol, 12.0 eq) 를 반응 시스템에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 10 mL의 H2O를 반응 혼합물에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*20 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 백색 고체인 화합물 C14 (0.99 g, 수율 52%) 를 제공한다. 생성물은 1H NMR로 특성화하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.37 - 7.32 (m, 5H), 5.34 (d, J = 2.9 Hz, 3H), 5.29 (s, 2H), 5.19 (dd, J = 11.2, 3.2 Hz, 3H), 5.10 (s, 2H), 4.59 (d, J = 8.4 Hz, 3H), 4.12 (dd, J = 13.4, 5.8 Hz, 6H), 3.90 (d, J = 6.2 Hz, 4H), 3.67 (s, 12H), 3.47 (s, 6H), 3.26 (d, J = 5.3 Hz, 10H), 3.06 (q, J = 7.4 Hz, 4H), 2.42 (t, J = 5.4 Hz, 6H), 2.34 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 2.22 (dd, J = 16.2, 7.7 Hz, 5H), 2.13 (s, 9H), 2.03 (s, 9H), 1.98 (s, 9H), 1.94 (s, 9H), 1.40 - 1.35 (m, 22H), 1.27 - 1.22 (m, 12H).
(7) 화합물 C15는 다음 절차를 사용하여 제조된다:
질소 분위기에서, MeOH (10 mL) 의 화합물 C14 (0.98 g, 0.47 mmol) 용액에 Pd/C (98mg) 를 천천히 첨가한다. 그 다음, 반응 분위기를 수소 가스로 3회 교체한다. 그 후, 반응 혼합물을 상온에서 밤새도록 수소 풍선으로 퍼징하여 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 조생성물을 제공한다. 조생성물을 DCM (20 mL) 에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, HBTU (267 mg, 0.705 mmol, 1.5 eq) 및 DIPEA (265 μL, 1.598 mmol, 3.4 eq) 를 반응 시스템에 첨가한다. 5분 후, 화합물 C6 (236 mg, 0.564 mmol, 1.2 eq) 을 반응 혼합물에 첨가한다. 반응 화합물을 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, H2O (10 mL) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*20 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-10%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 황색 고체인 화합물 C15 (0.79 g, 수율 69%) 를 제공한다. 생성물은 1H NMR로 특성화하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.34 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.25 - 7.20 (m, 5H), 6.97 - 6.89 (m, 2H), 6.80 (t, J = 8.6 Hz, 4H), 5.33 (s, 3H), 5.17 (ddd, J = 11.0, 7.7, 3.2 Hz, 3H), 4.60 (t, J = 9.1 Hz, 3H), 4.19 - 4.06 (m, 9H), 3.95 - 3.85 (m, 6H), 3.78 (d, J = 3.5 Hz, 6H), 3.67 (s, 12H), 3.48 (t, J = 10.8 Hz, 4H), 3.26 (s, 12H), 2.42 (t, J = 5.2 Hz, 6H), 2.24 (dd, J = 26.4, 11.2 Hz, 11H), 2.14 (s, 9H), 2.03 (s, 9H), 1.98 (s, 9H), 1.93 (s, 9H), 1.72 - 1.51 (m, 22H), 1.38 - 1.31 (m, 6H), 1.27 (d, J = 8.6 Hz, 12H).
(8) 화합물 C16은 다음 절차를 사용하여 제조된다:
질소 분위기에서, 무수 DCM (6 mL) 의 화합물 C15 (780 mg, 0.324 mmol, 1.0 eq) 용액에 DMAP (138 mg, 1.13 mmol, 3.5 eq) 및 석신산 무수물 (97 mg, 0.97 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, H2O (10 mL) 를 반응 시스템에 첨가한다. 혼합물을 DCM (3*20 mL) 으로 추출한다. 유기상을 합치고 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-15%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 흰색 고체인 화합물 C16 (690 mg, 수율 85%) 을 제공한다. 생성물은 1H NMR로 특성화하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38 - 7.31 (m, 4H), 7.21 - 7.12 (m, 5H), 6.80 (dd, J = 13.7, 5.2 Hz, 4H), 5.33 (d, J = 2.7 Hz, 3H), 5.19 (d, J = 11.2 Hz, 3H), 4.63 (dd, J = 8.2, 4.9 Hz, 3H), 4.16 - 4.07 (m, 9H), 3.78 (s, 6H), 3.77 (s, 6H), 3.67 (s, 12H), 3.51 - 3.45 (m, 4H), 3.25 (s, 12H), 2.58 (d, J = 7.7 Hz, 4H), 2.43 (t, J = 5.2 Hz, 6H), 2.25 (td, J = 15.1, 7.7 Hz, 11H), 2.13 (s, 9H), 2.03 (s, 9H), 1.97 (s, 9H), 1.94 (s, 9H), 1.83 - 1.51 (m, 24H), 1.46 - 1.29 (m, 6H), 1.26 (d, J = 12.0 Hz, 12H).
(9) 화합물 tC2는 다음 절차를 사용하여 제조된다:
질소 분위기에서, 아세토니트릴 (40 mL) 의 화합물 C16 (690 mg, 0.275 mmol, 1.0 eq), Controlled Pore Glass (CPG) (Code:C3006-1000, Hebei DNA chem Biotechnology Co., Ltd, China) (4.8 g), N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA) (137 μL, 0.825 mmol, 3.0 eq) 용액에 HBTU (208 mg, 0.55 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 밤새도록 진탕한 다음, DCM과 에틸 에테르로 세척하여 조 지지체 물질을 생성한다. 질소 분위기에서, 아세토니트릴 (22 mL) 의 아세트산 무수물 (15 mL), 피리딘 (34 mL) 및 NEt3 (500 μL) 용액에 조 지지체 물질을 첨가한다. 반응 혼합물을 25°C에서 1시간 동안 진탕한 다음, DCM과 에틸 에테르로 차례로 세척하여 본 개시의 화합물 tC2 (4.7g) 를 생성한다.
실시예 20. 본 개시의 화합물 D1의 제조
본 실시예에서 화합물 D1은 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 2의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (40 mL) 의 메틸 2-(4-플루오로-3-니트로페닐)아세테이트 1 (5 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (4.85 g, 35.1 mmol, 1.5 eq) 용액에 물(4.36mL, 35.1mmol, 1.5eq) 의 25 wt% 메틸아민을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (80 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 화합물 2를 붉은색 고체로 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 2는 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 224.08; MW Found: 225.17 [M+H]+.
(2) 화합물 3의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 111 mL) 의 화합물 2 (23.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (8.86 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (9.18 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 얼음 욕조에서 꺼내 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (100 mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 후 감압 하에 농축시켜 생성된 생성물 3을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 3은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 194.11; MW Found: 195.26 [M+H]+.
(3) 화합물 5의 제조
질소 분위기에서, EtOH (50mL) 의 화합물 3 (23.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 4 (2.39 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (5.39 mL, 93.6 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (50 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 5 (2.64 g, 수율 41%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 276.15; MW Found: 277.25 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58 (s, 1H), 7.30 - 7.20 (m, 1H), 7.17 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.73 (s, 2H), 3.70 - 3.63 (m, 8H), 2.90 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.09 - 1.94 (m, 2H), 1.71 (dt, J = 13.0, 6.3 Hz, 2H).
(4) 화합물 6의 제조
질소 분위기에서, DCM (20 mL) 의 화합물 5 (2.6 g, 9.41 mmol, 1.0 eq) 및 트리에틸아민 (TEA, 1.43 g, 14.12 mmol, 1.5 eq) 용액에 DMTrCl (3.5 g, 10.35 mmol, 1.1 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (50 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물 6은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 578.28; MW. Found: 579.30 [M + H]+.
(5) 화합물 39의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (50mL) 의 화합물 6 (9.41 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (536 mg, 14.12 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (10 mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 39 (2.4 g, 수율 46%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 550.28; MW Found: 551.63 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (s, 1H), 7.46 - 7.40 (m, 2H), 7.34 - 7.28 (m, 4H), 7.25 (dd, J = 8.3, 5.7 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.10 (dd, J = 8.2, 1.3 Hz, 1H), 6.84 - 6.76 (m, 4H), 3.87 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.76 (s, 6H), 3.62 (s, 3H), 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.96 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.87 - 2.80 (m, 2H), 1.99 - 1.89 (m, 2H), 1.83 - 1.70 (m, 2H).
(6) 화합물 D1의 제조
질소 분위기에서, 화합물 39 (2.3 g, 4.18 mmol, 1.0 eq) 및 디이소로필 암모늄 테트라졸라 (2.15 g, 12.54 mmol, 3.0 eq) 를 무수 DCM (40mL) 에 용해시키고, 상온에서 3-((비스(디이소프로필아미노)포스피노)옥시)프로판니트릴 (3.78 g, 12.54 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 화합물을 6시간 동안 교반한다. 화합물을 DCM으로 2회 추출한 후 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM, 1% Et3N) 로 정제하여 황색 오일인 화합물 D1 (2.9 g, 수율 91%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 750.39; MW Found: 303.22 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.52 (s, 1H), 7.46 - 7.40 (m, 2H), 7.34 - 7.29 (m, 4H), 7.28 - 7.23 (m, 2H), 7.22 - 7.16 (m, 2H), 7.11 (dd, J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 6.83 - 6.77 (m, 4H), 3.78 (s, 6H), 3.76 - 3.72 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.61 - 3.48 (m, 4H), 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.04 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.87 - 2.80 (m, 2H), 2.57 - 2.47 (m, 2H), 2.03 - 1.90 (m, 2H), 1.79 - 1.72 (m, 2H), 1.19 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.14 (s, 3H).
실시예 21 . 본 개시의 화합물 D2의 제조
화합물 D2는 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 8의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (40 mL) 의 메틸 2-(4-플루오로-3-니트로페닐)아세테이트 1 (5 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (3.56 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) 용액에 화합물 7 (3.58 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, 차가운 물 (100 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에서 농축시켜 황색 오일인 화합물 8을 형성하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 332.15; MW Found: 333.22 [M + H]+.
(2) 화합물 9의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 111 mL) 의 화합물 8 (23.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (8.86 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (9.18 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 얼음 욕조에서 꺼내 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (200 mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시켜 생성된 생성물 9를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 9은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 302.17; MW Found: 303.22 [M + H]+.
(3) 화합물 10의 제조
질소 분위기에서, EtOH (50 mL) 의 화합물 9 (23.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 5-하이드록펜탄알 4 (2.39 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (5.39 mL, 93.6 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 4시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 생성물 10은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 384.22; MW Found: 385.30 [M + H]+.
(4) 화합물 11의 제조
질소 분위기에서, DCM (20 mL) 의 화합물 10 (8.27 mmol, 1.0 eq) 및 트리에틸아민 (TEA, 1.26 g, 12.41 mmol, 1.5 eq) 용액에 DMTrCl (3.36 g, 9.92 mmol, 1.2 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (50 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물 11은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 686.35; MW. Found: 385.27 [M - DMT + H]+.
(5) 화합물 40의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (40 mL) 의 화합물 11 (8.27 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (471 mg, 12.4 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (20 mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-8%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 40 (1.15 g, 수율 21%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 658.35; MW Found: 357.27 [M - DMT + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.44 - 7.40 (m, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 4H), 7.26 (s, 2H), 7.19 (dd, J = 7.8, 3.7 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.82 - 6.78 (m, 4H), 6.77 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 4.07 - 4.00 (m, 2H), 3.88 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.81 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 3.77 (s, 6H), 3.11 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.97 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.78 - 2.70 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.22 - 2.15 (m, 2H), 1.98 (dd, J = 15.2, 7.4 Hz, 2H), 1.80 - 1.70 (m, 2H).
(6) 화합물 D2의 제조
질소 분위기에서, 화합물 40 (1.1 g, 1.67 mmol, 1.0 eq) 및 디이소로필 암모늄 테트라졸라이드 (858 mg, 5.01 mmol, 3.0 eq) 를 무수 DCM (15 mL) 에 용해시키고, 상온에서 3-((비스(디이소프로필아미노)포스피노)옥시)프로판니트릴 (1.51 g, 5.01 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 화합물을 6시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 후 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM, 1% Et3N) 로 정제하여 화합물 D2 (1.15 g, 수율 80%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 858.46; MW Found: 303.22 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (s, 1H), 7.45 - 7.39 (m, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 4H), 7.27 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.22 - 7.17 (m, 1H), 7.10 (dd, J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.85 - 6.78 (m, 4H), 6.78 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 4.21 - 4.11 (m, 2H), 4.07 - 4.00 (m, 2H), 3.81 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.57 - 3.51 (m, 2H), 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.03 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.79 - 2.72 (m, 4H), 2.61 - 2.51 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.22 - 2.13 (m, 2H), 2.02 - 1.95 (m, 2H), 1.80 - 1.69 (m, 2H), 1.19 - 1.11 (m, 12H).
실시예 22 . 본 개시의 화합물 D3의 제조
화합물 D3는 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 13의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (40 mL) 의 메틸 2-(4-플루오로-3-니트로페닐)아세테이트 1 (5 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (3.56 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) 용액에 화합물 12 (2.65 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 50 °C에서 밤새 교반한 다음, 차가운 물 (100 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에서 농축시켜 황색 오일인 화합물 13을 형성하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 296.14; MW Found: 297.77 [M + H]+.
(2) 화합물 14의 제조
질소 분위기에서, DCM (50 mL) 의 화합물 47 (23.4 mmol, 1.0 eq) 및 트리에틸아민 (TEA, 3.55 g, 35.1 mmol, 1.5 eq) 용액에 DMTrCl (8.72 g, 25.74 mmol, 1.1 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 3시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (50 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물 14는 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 598.27; MW. Found: 303.12 [DMT]-.
(3) 화합물 15의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 111 mL) 의 화합물 14 (23.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (8.86 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (9.18 g, 140.4 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 얼음 욕조에서 꺼내 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 혼합물에 물 (100 mL) 을 첨가한 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시켜 생성된 생성물 15를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 15은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 568.29; MW Found: 267.19 [M - DMT + H]+.
(4) 화합물 16의 제조
질소 분위기에서, EtOH (50 mL) 의 화합물 15 (23.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 파라포름알데히드 (2.1 g, 23.4 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (5.4 mL, 93.6 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 3시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (50 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 16 (6.6 g, 수율 49%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 578.28; MW Found: 579.40 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.83 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.44 - 7.37 (m, 2H), 7.34 - 7.24 (m, 7H), 7.23 - 7.17 (m, 2H), 6.84 - 6.77 (m, 4H), 4.10 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.75 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.04 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.88 - 1.78 (m, 2H), 1.69 - 1.58 (m, 2H), 1.50 - 1.36 (m, 2H).
(5) 화합물 41의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (50mL) 의 화합물 16 (6.6 g, 9.32 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (531 mg, 14 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (20 mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 41 (5.72 g, 수율 90%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 550.28; MW Found: 551.46 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.82 (s, 1H), 7.65 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.3, 3.3 Hz, 2H), 7.30 - 7.24 (m, 7H), 7.22 - 7.12 (m, 2H), 6.84 - 6.77 (m, 4H), 4.12 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.90 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.02 (dt, J = 16.5, 6.5 Hz, 4H), 1.84 (dt, J = 15.0, 7.3 Hz, 2H), 1.63 (dd, J = 14.4, 6.8 Hz, 2H), 1.49 - 1.35 (m, 2H).
(6) 화합물 D3의 제조
질소 분위기에서, 화합물 41 (2 g, 3.63 mmol, 1.0 eq) 및 디이소로필 암모늄 테트라졸라이드 (1.86 g, 10.89 mmol, 3.0 eq) 를 무수 DCM (20mL) 에 용해시키고, 상온에서 3-((비스(디이소프로필아미노)포스피노)옥시)프로판니트릴 (3.28 g, 10.89 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 화합물을 6시간 동안 교반한다. 화합물을 DCM으로 2회 추출한 후 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM, 1% Et3N) 로 정제하여 화합물 D3 (2.48 g, 수율 91%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 750.39; MW Found: 303.21 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.82 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.42 - 7.38 (m, 2H), 7.30 - 7.26 (m, 7H), 7.20 (dd, J = 7.8, 3.7 Hz, 1H), 7.17 - 7.13 (m, 1H), 6.83 - 6.78 (m, 4H), 4.11 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.60 - 3.50 (m, 4H), 3.04 (t, J = 6.5 Hz, 4H), 2.75 (td, J = 6.3, 2.0 Hz, 1H), 2.55 (td, J = 6.6, 3.5 Hz, 2H), 1.84 (dt, J = 15.0, 7.4 Hz, 3H), 1.69 - 1.58 (m, 2H), 1.50 - 1.37 (m, 2H), 1.18 - 1.13 (m, 12H).
실시예 23 . 본 개시의 화합물 D4의 제조
화합물 D4는 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 18의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (40 mL) 의 화합물 17 (5 g, 25.12 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (3.8 g, 27.6 mmol, 1.1 eq) 용액에 화합물 12 (2.84 g, 27.6 mmol, 1.1 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, 차가운 물 (100 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에서 농축시켜 황색 오일인 화합물 18을 형성하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 282.12; MW Found: 283.86 [M + H]+.
(2) 화합물 19의 제조
질소 분위기에서, DCM (50 mL) 의 화합물 18 (25.12 mmol, 1.0 eq) 및 트리에틸아민 (TEA, 3.81 g, 37.68 mmol, 1.5 eq) 용액에 DMTrCl (8.51 g, 27.63 mmol, 1.1 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 4시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (50 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물 19는 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 584.25; MW. Found: 303.12 [DMT]-.
(3) 화합물 20의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 111 mL) 의 화합물 19 (25.12 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (9.51 g, 150.72 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (9.86 g, 150.72 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 얼음 욕조에서 꺼내 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 혼합물에 물 (100 mL) 을 첨가한 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시켜 생성된 생성물 20를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 20은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 554.28; MW Found: 253.19 [M - DMT + H]+.
(4) 화합물 22의 제조
질소 분위기에서, EtOH (140 mL) 의 화합물 20 (25.12 mmol, 1.0 eq) 용액에 5-하이드록펜탄알 4 (2.57 g, 25.12 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (5.8 mL, 100.48 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 6시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM)로 정제하여 화합물 22 (9.4 g, 수율 60%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 636.32; MW Found: 637.51 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 2H), 7.30 - 7.25 (m, 6H), 7.24 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.22 - 7.16 (m, 1H), 6.83 - 6.78 (m, 4H), 4.08 (dd, J = 10.1, 4.7 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.77 (s, 6H), 3.67 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.04 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.88 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.78 - 1.70 (m, 4H), 1.66 - 1.61 (m, 2H), 1.53 - 1.41 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 2H).
(5) 화합물 D4의 제조
질소 분위기에서, 화합물 22 (2 g, 3.14 mmol, 1.0 eq) 및 디이소로필 암모늄 테트라졸라이드 (1.61 g, 9.43 mmol, 3.0 eq) 를 무수 DCM (20mL) 에 용해시키고, 상온에서 3-((비스(디이소프로필아미노)포스피노)옥시)프로판니트릴 (2.85 g, 9.43 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 화합물을 6시간 동안 교반한다. 화합물을 DCM으로 2회 추출한 후, 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM, 1% Et3N) 로 정제하여 화합물 D4 (2.4 g, 수율 93%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 836.43; MW Found: 303.70 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 2H), 7.30 - 7.26 (m, 7H), 7.23 - 7.16 (m, 1H), 6.83 - 6.78 (m, 4H), 4.10 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.78 (s, 6H), 3.64 - 3.49 (m, 5H), 3.04 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.91 - 2.85 (m, 2H), 2.65 - 2.55 (m, 3H), 2.00 (dt, J = 15.3, 7.6 Hz, 2H), 1.82 - 1.76 (m, 4H), 1.64 (dd, J = 14.2, 6.7 Hz, 2H), 1.51 - 1.44 (m, 2H), 1.17 - 1.13 (m, 12H).
실시예 24 . 본 개시의 화합물 D5의 제조
화합물 D5는 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 24의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (700 mL) 의 화합물 1 (50.77 g, 238.3 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (32.9 g, 238.3 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 23 (57.5 g, 238.3 mmol, 1.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 다음, 차가운 물 (500 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에서 농축시켜 황색 오일인 화합물 24을 형성하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 25의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (160mL) 의 화합물 24 (15.6 g, 35.87 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (1.36 g, 35.87 mmol, 1.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (50 mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다.
생성된 잔류물을 140 mL의 DMF에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서, 이미다졸 (3.66 g, 53.8 mmol, 1.5 eq) 및 TBSCl (6.5 g, 43.04 mmol, 1.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반한 다음, H2O (100 mL) 를 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한 다음, 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시켜 황색 오일인 화합물 25를 형성하고, 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 520.41; MW Found: 521.31 [M + H]+.
(3) 화합물 26의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 178 mL) 의 화합물 25 (35.87 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (13.58 g, 215.22 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (14.1 g, 215.22 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 얼음 욕조에서 꺼내 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (150 mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시켜 생성된 생성물 26를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 26은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 490.43; MW Found: 491.40 [M + H]+.
(4) 화합물 42의 제조
질소 분위기에서, EtOH (20mL) 의 화합물 26 (2.0 g, 4.08 mmol, 1.0 eq) 용액에 5-하이드록시펜탄알 4 (417 mg, 6.12 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (0.94 mL, 16.32 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 6시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (50 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 42 (1.3 g, 수율 56%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 572.47; MW Found: 573.31 [M + H]+.
(5) 화합물 43의 제조
질소 분위기에서, DCM (15 mL) 의 화합물 42 (1.3 g, 2.26 mmol, 1.0 eq) 및 트리에틸아민 (TEA, 343 mg, 3.39 mmol, 1.5 eq) 용액에 DMTrCl (919 mg, 2.71 mmol, 1.2 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반한 후, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (30 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다.
생성된 잔류물을 10mL의 THF에 용해시킨 다음, 질소 분위기에서 1 M의 TBAF THF 용액 (3.39 mL, 3.39 mmol, 1.5 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반한 다음, H2O (20 mL) 를 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 염수로 1회 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 43 (0.8 g, 수율 46%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 760.52; MW Found: 303.05 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.55 (s, 1H), 7.42 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.33 - 7.29 (m, 4H), 7.26 - 7.26 (m, 2H), 7.24 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.09 (dd, J = 8.3, 1.4 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.9 Hz, 4H), 4.05 - 3.99 (m, 2H), 3.92 - 3.85 (m, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.11 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.85 - 2.79 (m, 2H), 2.04 - 1.94 (m, 2H), 1.76 (dd, J = 13.9, 7.1 Hz, 4H), 1.30 - 1.25 (m, 27H), 0.89 - 0.85 (m, 3H).
(6) 화합물 D5의 제조
화합물 43 (800 mg, 1.05 mmol, 1.0 eq) 및 디이소로필 암모늄 테트라졸라이드 (360 mg, 2.1 mmol, 2.0 eq) 를 질소 분위기에서 무수 DCM (10mL) 에 용해시키고, 상온에서 3-((비스(디이소프로필아미노)포스피노)옥시)프로판니트릴 (634 mg, 2.1 mmol, 2.0 eq) 을 첨가한다. 반응 화합물을 6시간 동안 교반한다. 화합물을 DCM으로 2회 추출한 후 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM, 1%의 Et3N) 로 정제하여 화합물 D5 (660 mg, 수율 65%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 960.63; MW Found: 303.04 [DMT]-. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.52 (s, 1H), 7.46 - 7.40 (m, 2H), 7.34 - 7.28 (m, 4H), 7.26 (s, 2H), 7.19 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.11 - 7.05 (m, 1H), 6.85 - 6.75 (m, 4H), 4.22 - 4.12 (m, 2H), 4.01 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.78 (s, 6H), 3.61 - 3.48 (m, 4H), 3.11 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.85 - 2.79 (m, 2H), 2.76 (td, J = 6.3, 2.0 Hz, 2H), 2.56 (td, J = 6.6, 3.7 Hz, 1H), 1.98 (dt, J = 15.3, 7.7 Hz, 2H), 1.83 - 1.67 (m, 4H), 1.27 - 1.21 (m, 27H), 1.20 - 1.13 (m, 12H), 0.90 - 0.84 (m, 3H).
실시예 25 . 화합물 D6의 제조
화합물 D6은 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 5의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (80 mL) 의 메틸 2-(4-플루오로-3-니트로페닐)아세테이트 4 (9.9 g, 46.4 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (6.4 g, 46.4 mmol, 1.0 eq) 용액에 화합물 3 (11.2 g, 46.4 mmol, 1.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 55°C에서 8시간 동안 교반한 다음, 차가운 물(100 mL)을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에서 농축시켜 황색 오일인 화합물 5을 형성하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 16의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (160mL) 의 화합물 5 (15.58 g, 35.87 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (1.36 g, 35.87 mmol, 1.0 eq) 를 천천히 첨가한다. 10분 후, 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (30mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 EtOAc로 3번 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 그 다음, 조 잔류물을 무수 DMF (140mL) 에 용해시킨다. 그 다음, 질소 분위기에서 이미다졸 (3.66 g, 53.8 mmol, 1.5 eq) 및 TBSCl (6.5 g, 43.04 mmol, 1.2 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반한 다음, H2O (100 mL) 를 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축킨다. 생성된 잔류물 16은 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 520.41; MW Found: 521.4 [M + H]+.
(3) 화합물 17의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 178 mL) 의 화합물 16 (35.87 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (13.58 g, 215.2 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (14.1 g, 215.2 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 얼음 욕조에서 꺼내 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (200 mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시켜 생성된 생성물 17를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다. 화합물 17은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 490.43; MW Found: 491.40 [M+H]+.
(4) 화합물 18의 제조
질소 분위기에서, EtOH (25 mL) 의 화합물 17 (5 g, 10.2 mmol, 1.0 eq) 용액에 5-하이드록시펜탄알 (1.04 g, 10.2 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (2.35 mL, 40.8 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (25 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 18 (1.9 g, 수율 33%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 572.47; MW Found: 573.61 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.53 (s, 1H), 7.21 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 8.2, 1.4 Hz, 1H), 4.07 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.84 (dd, J = 9.3, 5.6 Hz, 2H), 3.69 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.93 (dt, J = 19.8, 7.3 Hz, 4H), 2.13 - 2.03 (m, 2H), 1.84 - 1.70 (m, 4H), 1.40 - 1.21 (m, 26H), 0.93 - 0.85 (m, 12H), 0.03 (s, 6H).
(5) 화합물 19의 제조
질소 분위기에서. DCM (10 mL) 의 화합물 18 (1.9 g, 3.32 mmol, 1.0 eq) 용액에 데스-마틴 페리오디난 (DMP) (1.69 g, 3.98 mmol, 1.2 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 6시간 동안 교반한다. 반응 후, NaHCO3 용액 (20 mL) 을 혼합물에 첨가하고 혼합물을 30분 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 3회 추출한 다음, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에서 농축시켜 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 갈색 오일인 화합물 19 (619 mg, 수율 33%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 570.46; MW Found: 571.61 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.98 (s, 1H), 7.35 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 4.25 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.89 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.18 - 3.12 (m, 2H), 3.01 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.55 - 2.50 (m, 2H), 2.32 - 2.24 (m, 2H), 1.85 (dd, J = 14.3, 7.2 Hz, 2H), 1.36 - 1.28 (m, 26H), 0.93 - 0.86 (m, 12H), 0.03 (s, 6H).
(6) 화합물 20의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (5 mL) 의 화합물 8 (733 mg, 1.16 mmol, 1.2 eq) 용액에 NaH (60% 미네랄 오일에 분산,77 mg, 1.93 mmol, 2.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 얼음 욕조에서 15분 동안 교반한 다음, 화합물 19 (550mg, 0.964mmol, 1.0eq) 를 반응 혼합물에 첨가한다. 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반한 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고, 포화 염화암모늄 (5mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 5분 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 20 (699 mg, 수율 81%)을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 876.58; MW. Found: 877.96 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (s, 1H), 7.22 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.15 - 7.10 (m, 1H), 6.97 - 6.84 (m, 1H), 5.73 - 5.65 (m, 5H), 4.07 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.85 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.96 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.88 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.18 - 2.06 (m, 2H), 1.85 - 1.70 (m, 3H), 1.33 - 1.18 (m, 48H), 0.90 (s, 9H), 0.03 (s, 6H).
(7) 화합물 21의 제조
THF (2mL) 의 화합물 20 (690 mg, 0.77 mmol, 1.0 eq) 용액에 2 M의 HCl (2 mL) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 4시간 동안 교반한다. 5 mL의 H2O를 반응에 첨가한다. 그 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 염수로 세척한 후 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-5%의 MeOH/DCM) 로 정제하여 화합물 21 (488 mg, 수율 82%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 762.49; MW Found: 763.76 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.72 (s, 1H), 7.33 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.87 - 6.74 (m, 1H), 5.75 - 5.59 (m, 5H), 4.14 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.91 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.09 - 2.95 (m, 4H), 2.46 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 2.17 (dt, J = 14.4, 7.3 Hz, 2H), 1.87 - 1.75 (m, 3H), 1.31 - 1.17 (m, 44H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
(8) 화합물 D6의 제조
질소 분위기에서, 무수 DCM (5 mL) 의 화합물 21 (480 mg, 0.62 mmol, 1.0 eq) 및 디이소로필 암모늄 테트라졸라이드 (212 mg, 1.24 mmol, 2.0 eq) 용액에 3-((비스(디이소프로필아미노)포스피노)옥시)프로판니트릴 (374 mg, 1.24 mmol, 2.0 eq) 을 상온에서 첨가한다. 반응 화합물을 4시간 동안 교반한다. 화합물을 DCM으로 2회 추출한 후 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 1-3%의 MeOH/DCM, 1%의 Et3N) 로 정제하여 황색 오일인 화합물 D6 (514 mg, 수율 84%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 962.60; MW Found: 880.82 [M - 83+ H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.53 (s, 1H), 7.22 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 8.2, 1H), 6.95 - 6.82 (m, 1H), 5.83 - 5.59 (m, 5H), 4.05 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.83 - 3.73 (m, 2H), 3.51 - 3.46 (m, 2H), 3.04 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.86 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.76 (td, J = 6.2, 1.9 Hz, 5H), 2.10 (dd, J = 15.1, 7.6 Hz, 2H), 1.81 - 1.72 (m, 3H), 1.26 - 1.24 (m, 26H), 1.21 (s, 18H), 1.18 -1.34 (m, 12H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
실시예 26 . 본 개시의 화합물 D7의 제조
화합물 D7는 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 24의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (40 mL) 의 화합물 1 (2.24 g, 10.50 mmol, 0.9 eq) 및 K2CO3 (4.84 g, 35.01 mmol, 3.0 eq) 용액에 화합물 27 (3.8 g, 11.67 mmol, 1.0 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 60°C에서 밤새 교반한 다음, 차가운 물 (120 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축하여 노란색 오일인 화합물 28을 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 29의 제조
MeOH (60 mL) 의 화합물 28 (6.15 g, 11.96 mmol) 용액에 10%의 Pd/C (615 mg) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 수소 분위기 하에 상온에서 16시간 동안 교반한 다음 여과한다. 여과액을 감압 하에 농축한다. 생성된 잔류물 29는 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용한다. 생성된 잔류물 29는 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 488.43; MW. Found: 489.54 [M + H]+.
(3) 화합물 31의 제조
질소 분위기에서, EtOH (59 mL) 의 화합물 29 (5.79 g, 11.86 mmol, 1.0 eq) 용액에 30 (2.23 g, 11.86 mmol, 1.0 eq) 및 AcOH (2.73 mL, 47.44 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 2시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 10-50%의 에틸 아세테이트/석유 에테르) 로 정제하여 화합물 31 (1.8 g, 수율 26%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법으로 특성화하였다. MW calc.: 656.53; MW Found: 657.70 [M + H]+.
(4) 화합물 32의 제조
질소 분위기에서, THF (14mL) 의 화합물 31 (1.80 g, 2.74 mmol, 1.0 eq) 용액에 1 M의 TBAF THF 용액 (4.11 mL, 4.11 mmol, 1.5 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반한 다음, H2O (20 mL) 를 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 염수로 1회 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시킨다.
질소 분위기에서, DCM (14 mL) 의 생성된 잔류물과 트리에틸아민 (TEA, 0.57 mL, 4.11 mmol, 1.5 eq) 을 DMTrCl (1.11 g, 3.29 mmol, 1.2 eq) 에 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 다음, NaHCO3 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 10-50%의 에틸 아세테이트/석유 에테르) 로 정제하여 화합물 32 (1.44 g, 수율 62%) 를 제공한다. 생성물은 1H NMR로 특성화하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.37 - 7.32 (m, 2H), 7.27 - 7.22 (m, 6H), 7.21 - 7.13 (m, 3H), 6.78 - 6.72 (m, 4H), 4.14 - 4.06 (m, 2H), 3.76 (s, 6H), 3.73 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.59 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.11 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.77 - 1.68 (m, 2H), 1.30 - 1.20 (m, 38H), 0.87 (t, 3H).
(5) 화합물 43의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (8mL) 의 화합물 32 (1.34 g, 1.59 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (90 mg, 2.38 mmol, 1.5 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응물을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (10 mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고 농축한다.
질소 분위기에서, 조생성물 및 디이소로필 암모늄 테트라졸라이드 (817 mg, 4.77 mmol, 3.0 eq) 를 무수 DCM (8mL) 에 용해시키고, 상온에서 3-((비스(디이소프로필아미노)포스피노)옥시)프로판니트릴 (1.44 g, 4.77 mmol, 3.0 eq) 을 첨가한다. 반응 화합물을 6시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 후 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 10-50%의 에틸 아세테이트/석유 에테르, 1%의 Et3N) 로 정제하여 담황색 오일인 화합물 D7 (1.45 g, 수율 90%) 을 제공한다. 생성물은 1H NMR로 특성화하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.50 (s, 1H), 7.37 - 7.31 (m, 2H), 7.29 - 7.21 (m, 6H), 7.18 (d, J = 11.0 Hz, 2H), 7.12 - 7.07 (m, 1H), 6.78 - 6.71 (m, 4H), 4.16 - 4.05 (m, 4H), 3.76 (s, 6H), 3.62 - 3.56 (m, 4H), 3.11 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.03 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.61 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.57 - 2.49 (m, 2H), 1.74 - 1.68 (m, 2H), 1.27 - 1.23 (m, 38H), 1.18 - 1.16 (m, 12H), 0.88 (t, J = 6.7 Hz, 3H).
실시예 27 . 화합물 F69의 제조
화합물 F69는 본 실시예에서 다음 절차를 사용하여 제조된다.
(1) 화합물 45의 제조
질소 분위기에서, 무수 DMF (80 mL) 의 메틸 2-(4-플루오로-3-니트로페닐)아세테이트 4 (5 g, 23.5 mmol, 1.0 eq) 및 K2CO3 (4.9 g, 35.3 mmol, 1.5 eq) 용액에 화합물 51 (6.9 g, 25.8 mmol, 1.1 eq) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 55 °C에서 6시간 동안 교반한 다음, 차가운 물 (200 mL) 을 첨가한다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 포화 LiCl 용액으로 3회, 염수로 1회 세척한다. 그 다음, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에서 농축시켜 황색 오일인 화합물 45를 형성하고 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(2) 화합물 46의 제조
얼음 욕조에서, THF/H2O (9:1, 130 mL) 의 화합물 45 (10.8 g, 23.5 mmol, 1.0 eq) 용액에 HCOONH4 (8.9 g, 141 mmol, 6.0 eq) 및 Zn 파우더 (9.2 g, 141 mmol, 6.0 eq) 를 첨가한다. 10분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 얼음 욕조에서 꺼내 상온에서 밤새 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시킨다. 그 후, 물 (200 mL) 을 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출하고, 유기상을 염수로 1회 세척한다. 무수 Na2SO4로 건조시킨 다음 감압 하에 농축시켜 생성된 생성물 46를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용한다.
(3) 화합물 47의 제조
질소 분위기에서, EtOH (60 mL) 의 화합물 46 (5 g, 11.6 mmol, 1.0 eq) 용액에 3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로판알 7 (3.3 g, 17.4 mmol, 1.5 eq) 및 AcOH (2.7 mL, 46.4 mmol, 4.0 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 80°C에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시킨다. 그 다음, 포화 NaHCO3 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 생성된 잔류 화합물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 10-40%의 에틸 아세테이트/석유 에테르) 로 정제하여 담황색 오일인 화합물 47 (1.5 g, 수율 22%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 598.99; MW. Found: 599.72 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.59 (s, 1H), 7.24 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.40 - 5.31 (m, 2H), 4.17 - 4.09 (m, 4H), 3.74 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.09 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.06 - 1.92 (m, 4H), 1.81 - 1.72 (m, 2H), 1.39 - 1.19 (m, 22H), 0.88 (t, J = 6.5 Hz, 3H), 0.86 (s, 9H) , 0.01 (s, 6H).
(4) 화합물 48의 제조
질소 분위기에서, THF (10mL) 의 화합물 47 (1.5 g, 2.5 mmol, 1.0 eq) 용액에 2 M의 HCl 용액 (10 mL) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반한다. 20mL의 포화 NaHCO3 용액을 반응에 첨가한다. 그 다음, 혼합물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하고, 염수로 세척한 후 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류물을 DCM (10 mL) 에 용해시키고, 트리에틸아민 (0.4 g, 3.8 mmol, 1.5 eq) 및 DMTrCl (1.1 g, 3.3 mmol, 1.3 eq) 를 첨가한다. 반응 혼합물을 상온에서 6시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축시킨다. 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 구배 용출액: 20-50%의 에틸 아세테이트/석유 에테르) 로 정제하여 담황색 오일인 화합물 48 (1.5 g, 수율 76%) 을 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 787.1; MW. Found: 788.1 [M + H]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.34 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.25 - 7.13 (m, 9H), 6.75 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.41 - 5.30 (m, 2H), 4.13 - 4.07 (m, 2H), 3.76 (s, 6H), 3.73 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.60 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.11 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.99 (t, J = 15.9 Hz, 4H), 1.77 - 1.65 (m, 2H), 1.33 - 1.23 (m, 22H), 0.87 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
(5) 화합물 F69의 제조
얼음 욕조에서 질소 분위기 하에, 무수 THF (20 mL) 의 화합물 48 (1.5 g, 1.9 mmol, 1.0 eq) 용액에 LiAlH4 (73 mg, 1.9 mmol, 1.0 eq) 를 첨가한다. 10분 후, 혼합물을 상온으로 옮기고 1시간 동안 교반한다. 그 다음, 반응을 얼음 욕조로 옮기고 포화된 타르트르산 칼륨 나트륨 용액 (10 mL) 을 혼합물에 천천히 첨가한다. 30분 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 3회 추출한 다음, 유기상을 합하여 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시킨 다음 농축한다. 질소 분위기에서, 조생성물 (1.3 g, 1.7 mmol, 1.0 eq) 및 디이소로필 암모늄 테트라졸라이드 (587 mg, 3.4 mmol, 2 eq) 를 무수 DCM (10mL) 에 용해시키고, 상온에서 3-((Bis(비스(디이소프로필아미노)포스피노)옥시)프로판니트릴 (1.0 g, 3.4 mmol, 2 eq) 을 첨가한다. 반응 화합물을 6시간 동안 교반한다. 혼합물을 DCM으로 2회 추출한 후 염수로 세척하고 무수 Na2SO4로 건조시킨다. 유기층을 감압 하에 농축시키고, 생성된 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카 겔, 구배 용출액: 10-30%의 에틸 아세테이트/석유 에테르, 1%의 Et3N) 로 정제하여 담황색 오일인 화합물 F69 (1.2 g, 수율 78%) 를 제공한다. 생성물은 질량 분석법과 1H NMR로 특성화하였다. MW calc.: 959.31; MW Found: 876.75　[M-디이소로필 + H] + . 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.50 (s, 1H), 7.34 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.25 - 7.14 (m, 8H), 7.09 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.41 - 5.31 (m, 2H), 4.13 - 4.05 (m, 2H), 3.93 - 3.83 (m, 1H), 3.81 - 3.70 (m, 9H), 3.64 - 3.54 (m, 4H), 3.11 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.03 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.57 - 2.47 (m, 2H), 2.07 - 1.92 (m, 4H), 1.77 - 1.66 (m, 2H), 1.34 - 1.24 (m, 22H), 1.18 - 1.12 (m, 12H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz, 3H).
실시예 28 . 올리고뉴클레오티드의 설계 및 합성
다음 실시예에서 세포 또는 동물 치료에 사용된 올리고뉴클레오티드 서열은 표 1에 표시되었다.
실시예 29 . 마우스 FVII 유전자에 대한 DEC-접합 siRNA의 시험관 내 녹다운 활성의 특성화.
본 실시예에서, 마우스 FVII mRNA에 대한 DEC-접합 siRNA (즉, RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712) 의 시험관 내 녹다운 활성을 특성화하였다.
PMH 세포는 각 표시된 DCO (즉, RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712) 를 0.1 nM 및 1 nM에서 Lipofectamine?? RNAiMAX (Thermofisher) 를 사용하여, 제조업체의 지침에 따라 24시간 동안 형질감염하였으며, 이는 도 1에 도시되어 있다. 도 2에 도시된 바와 같이, DCOs (즉, RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712) 도 0.01, 0.05, 0.20, 0.78, 3.13, 12.50, 50 및 200 nM의 농도로 PMH 세포를 함유하는 배지에 직접 첨가하였다. Mock 처리법에서는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염시켰다. dsCon2는 비특이적 듀플렉스 콘트롤로 사용된다. 마우스 FVII mRNA 수준은 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR 로 정량화하였다. Tbp는 RNA 로딩을 위한 내부 기준으로 증폭되었다. Mock 처리에 대한 FVII mRNA의 평균 발현 값은 Tbp로 정상화된다.
도 1에 도시된 바와 같이, RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712의 형질감염은 0.1 nM에서 FVII mRNA 발현을 94%, 85%, 91%, 80%, 78% 및 84% 감소시켰고, 1 nM 처리에서는 각각 98%, 96%, 97%, 89%, 91% 및 89% 감소시켰다. 모든 테스트된 DCO는 용량 의존적 방식으로 비슷한 녹다운 활성을 달성했으며, RD-12339, RD-12585 및 RD-12586은 최대 활성이 약간 더 컸다.
리포펙타민이 없는 상태에서 자유 흡수를 위해, RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712를 PMH 세포 배지에 농도를 높여서 (즉, 0.01, 0.05, 0.20, 0.78, 3.13, 12.50, 50 및 200 nM) 24시간 동안 첨가한다. 처리된 세포는 역전사 (RT) 반응에 의한 cDNA 변환 후, RT-qPCR에 의해 FVII mRNA 발현을 검출하는 데 사용된 분리된 총 세포 RNA로 수확되었다. 도 2에 도시된 바와 같이, 모든 DCO는 FVII mRNA 수준에 대해 용량 의존적 녹다운을 유발했으며, 계산된 IC50은 0.2308 내지 0.6005 nM 범위였고, RD-12585는 0.2308 nM에서 가장 낮은 IC50를 나타냈으며, 이는 표 2에 요약되어 있다.
전반적으로 이러한 결과는 DCO가 PMH 세포에서 lipofectamineTM RNAiMax를 사용하거나 사용하지 않고 시험관 내 표적 유전자 녹다운 활성을 가지고 있음을 나타낸다.
실시예 30 . DEC-접합 siRNAs의 마우스 FVII 유전자 발현에 대한 생체 내 녹다운 활성의 특성화.
간 조직에서 DEC-접합 siRNA의 생체 내 전달 효율 (녹다운 활성) 을 특성화하기 위해, 표시된 DCO (즉, RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712) 를 성인 C57BL/6J 마우스에 PND 40일째에 주사를 통해 0.2, 1 및 5 mg/kg 투여한다. 모든 테스트 DCO는 식염수에 용해시켰다. 간 조직에서 기준 발현을 확립하기 위해 염수만을 매개체 콘트롤로 주입한다. 투여 후, 3일째에 마우스를 희생시키고, 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RNA 분리 및 RT-qPCR을 통한 RT 반응을 거친 후, 간 조직에서 FVII mRNA 수준을 정량화한다.
도 3에 도시된 바와 같이, 저용량 (0.2 mg/kg) 에서 RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712를 처리하면, FVII mRNA 수준이 25%, 0%, 2%, 22%, 0% 및 0% 감소되었으며, 그 중 RD-12339와 RD-12710만이 녹다운 활성을 나타냈다. 중간 용량 (1 mg/kg) 에서 모든 siRNA 접합체는 FVII mRNA의 상당한 녹다운을 나타냈다. RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712는 각각 FVII mRNA의 67%, 47%, 64%, 60%, 43% 및 62% 녹다운을 유발하였다. RD-12339, RD-12586, RD-12710 및 RD-12712는 60% 이상의 녹다운 활성을 나타냈으며, RD-12339가 가장 큰 녹다운 활성을 나타냈다. 고용량 (5 mg/kg) 에서, RD-12339, RD-12585, RD-12586, RD-12710, RD-12711 및 RD-12712는 FVII mRNA의 81%, 82%, 89%, 80%, 81% 및 89% 녹다운을 유발하였다.
또한, 치료된 마우스의 혈장에서 FVII 단백질 발현 수준은 ELISA 분석법으로 검출한다. 도 4에 도시된 바와 같이, 저용량 (0.2 mg/kg) 에서 3개의 DCO (즉, RD-12339, RD-12585 및 RD-12586) 는 FVII 단백질 발현을 각각 44%, 3% 및 21% 감소시켰다. 중간 용량 (1 mg/kg) 의 RD-12339, RD-12585 및 RD-12586은 각각 FVII 단백질 발현을 67%, 51% 및 65% 감소시켰다. 고용량 (5 mg/kg) 에서, 녹다운 활성은 모든 테스트된 DCO에서 유사했으며 RD-12339, RD-12585 및 RD-12586은 각각 FVII 단백질 수준을 89%, 87% 및 93% 감소시켰다.
전반적으로, 데이터는 DCO가 간에 성공적으로 전달될 수 있고, 용량 의존적 방식으로 표적 유전자 FVII mRNA와 단백질 발현을 상당히 녹다운할 수 있음을 나타낸다.
실시예 31 . C57BL/6J 마우스 혈장에서 마우스 FVII 단백질에 대한 DEC-접합 siRNA의 강력하고 지속적인 녹다운
표시된 DCOs (즉, RD-12710 및 RD-12712) 는 SC 주사를 통해 PND 40의 C57BL/6J 마우스에 3 mg/kg으로 89일 동안 투여하였다. RD-11706은 3 mg/kg으로 주사하여 콘트롤로 사용하였다. 식염수를 매개체 콘트롤에 주입하여 mFVII 단백질 발현의 기준선을 확립하였다. 투여 후 10, 31, 54, 61, 80 및 89일째에 마우스 혈장을 채취하고 ELISA 분석법으로 마우스 혈장에서 mFVII 단백질 수준을 정량화하였다. 혈장에서 마우스 FVII 단백질에 대한 DEC-siRNA의 강력하고 지속적인 녹다운 결과는 도 5에 도시되었다.
실시예 32 . 자유 흡수를 통한 PMH 세포에서 DEC-siRNA의 시험관 내 녹다운 활성
예시적인 DEC-siRNA (즉, RD-13110, RD-13115, 및 RD-13118) 의 시험관 내 녹다운 활성을 테스트하기 위해, PMH 세포를 72시간 동안 추가 전달 시스템 (즉, 자유 흡수) 이 없는 상태에서 농도 (즉, 1.56, 6.25, 25, 100, 400 및 1600 nM) 를 점차 높여가며 처리한다. Sod1 수준은 RT-qPCR을 통해 평가하여 용량 반응 곡선을 생성하고 효능을 추정한다. 도 6A에 도시된 바와 같이, 모든 DEC-siRNA는 용량 의존적 녹다운을 나타냈으며, 여기서 효능 (점선) 은 기저 발현에 비해 50% Sod1 수준과 관련된 농도에서 나타났다. 이에 비해, 비접합 콘트롤 (즉, RD-12556) 로 치료할 경우, Sod1 수준이 50% 감소하지 않는 최고 시험 용량까지 녹다운이 입증되지 않았다 (도 6B). 표 3은 각 시험 항목에 대해 가장 높은 시험 용량에서의 효능과 녹다운 활성을 요약한 것을 나타낸다. 일반적으로 모든 DEC-siRNA (즉, RD-13110, RD-13115 및 RD-13118) 는 접합체와 관계없이 비접합 콘트롤 RD-12556보다 효능이 더 좋았다. C5x5 접합체 (즉, RD-13115 및 RD-13118) 는 C5x1 변형체 RD-13110보다 약 11배 낮은 효능에서 녹다운을 제공한다. RD-13118에 ACO를 포함시키면 효능이 약 2.5배 향상되었으며, 이는 DEC 기술과 ODV-siRNA (PCT/CN2022/104037) 를 조합하여 사용할 시, 전달 효과가 있음을 나타낸다.
실시예 33 . CNS 조직에서 Sod1 mRNA 수준에 대한 DEC-siRNA의 생체 내 녹다운
DEC-siRNAs (즉, RD-13110, RD-13115 및 RD-13118) 의 생체 내 녹다운 활성을 비접합 콘트롤 (즉, RD-12556) 과 바교하여 테스트하기 위해, 성인 C57BL/6J 마우스에 단측 ICV 주사를 통해 총 용량 200 μg을 투여한다. 모든 테스트 항목은 식염수에 제형화되었으며, 식염수만을 사용한 치료는 CNS 조직에서 기준 발현을 확립하기 위한 절차적 콘트롤로 작용하였다. 투여 후 7일째에 마우스를 희생시키고 뇌 (즉, 전두엽 피질, 소뇌, 및 대뇌), 척수 (즉, 경부, 흉부, 및 요추) 및 말초 (즉, 간) 의 CNS 조직을 수집하여 RT-qPCR을 통한 mRNA 발현 분석을 실시하였다. 도 7에 도시된 바와 같이, RD-12556 및 RD-13110은 각각 43-73% 및 40-63%의 녹다운 범위로 표시된 CNS 조직에서 유사한 활성을 나타냈다. 반면, RD-13115 및 RD-13118은 200 μg 용량에서 모든 조직에서 향상된 녹다운이 개선되었으며, 이는 C5x5 접합체가 비접합 콘트롤 (즉, RD-12556) 과 C5x1 변이체 RD-13110에 비해 ICV 주사를 통한 생체 내 효능이 더 우수함을 나타냈다. 말초 조직(즉, 간)에서의 분석에서도 C5x5 접합체 (즉, RD-13115 및 RD-13118) 의 활성은 CNS 내에서 잘 유지되지 않았으며, CNS 배수를 통한 전신 노출은 CNS 조직과 유사한 수준으로 간에서 녹다운을 제공하였다. 이에 비해, RD-12556과 RD-13110 활성은 CNS 전체에서 선택적으로 농축되어 간에서 각각 약 11%와 3%의 녹다운만을 제공하였다. 전반적으로, C5x5 접합체는 모든 CNS 조직에서 활성과 생체 분포가 개선되었다. 전신 독성을 제한하기 위해, CNS에 국한되는 것이 중요할 수 있는 적응증의 경우, C5x1은 다른 지질 (즉, C5x5) 에 비해 더 이상적일 수 있다.
실시예 34 . 전신 투여 후, Sod1 mRNA 수준에서 DEC-siRNA의 생체 내 녹다운
전신 노출 후, 생체 내 녹다운을 테스트하기 위해, 성인 C57BL/6J 마우스에 20 mg/kg 용량의 DEC-siRNAs (즉, RD-13110, RD-13115 및 RD-13118) 또는 비접합 콘트롤 (즉, RD-12556) 을 IV 주사로 투여한다. 치료 후 7일째에 마우스를 희생시키고, Sod1 녹다운은 선택된 장기 (즉, 심장, 간, 비장, 폐, 신장 및 방광) 에서 RT-qPCR을 통해 정량화한다. 도 8에 도시된 바와 같이, RD-12556은 신장에서만 Sod1 수준을 56%까지 크게 감소시키는 반면, RD-13110은 비장에서만 선택적으로 활성이 증가하였다. RD-13115 및 RD-13118은 방광을 제외한 모든 조직에서 광범위한 활성을 나타냈으며, RD-13118만이 Sod1 수준을 약 21% 감소시킬 수 있었다. 전반적으로, 이러한 결과는 C5x1 접합체는 비장에 선택적 표적을 제공하는 전신 투여를 통해 고유한 전달 기능을 가질 수 있는 반면, C5x5는 더 광범위한 조직에 대한 녹다운을 제공할 수 있음을 나타낸다. 특히, RD-13118에 ACO를 포함시킨 것은 방광에서 측정 가능한 녹다운을 제공하는 유일한 DEC-siRNA로, DEC 기술을 ODV-siRNA와 조합하면 생체 내에서 함께 사용할 때 추가적인 전달 이점이 있을 수 있음을 나타낸다.
실시예 35 . 골격근에서 Sod1 mRNA 수준에 대한 DEC-siSOD1의 생체 내 녹다운
골격근 조직에서 생체 내 녹다운 활성을 테스트하기 위해, 성인 C57BL/6J 마우스에 20 mg/kg 용량의 DEC-siRNA (즉, RD-13110, RD-13115 및 RD-13118) 또는 비접합 콘트롤 (즉, RD-12556) 을 IV 주사로 처리한다. 투여 후 7일째에 마우스를 희생시키고, 근육 조직 (즉, 이두박근, 반건양근, 광경근 및 둔근) 에서 RT-qPCR을 통해 Sod1 mRNA 수준을 정량화한다. 도 9에 도시된 바와 같이, RD-12556은 식염수 처리 그룹에 비해 어떤 근육 조직에서도 유의미한 녹다운을 나타내지 않았다. RD-13110은 선택된 조직에서 약간의 활성을 나타냈지만 20 mg/kg 용량에서 Sod1 mRNA 수준의 25%를 초과하지 않았다. 반면, RD-13115는 이두박근, 반건양근, 광경근 및 둔근 조직에서 각각 Sod1 mRNA 수준을 각각 82%, 84%, 78%, 및 76% 감소시켰다. 마찬가지로, RD-13118은 이두박근, 반건양근, 광경근 및 둔근 조직에서 각각 Sod1 mRNA 수준을 76%, 84%, 61%, 및 67% 감소시켰다. 일반적으로, DEC 접합체는 IV 주사를 통해 근육 조직에서 녹다운을 제공하지만, C5x5 접합체 (즉, RD-13115 및 RD-13118) 는 기존 전달 기술 (즉, LNP 및 GalNAc) 로는 얻을 수 없었던 20 mg/kg 용량으로 siRNA 녹다운을 가능하게 하였다.
실시예 36 . 망막 조직에서 Sod1 mRNA 수준에 대한 DEC-siSOD1의 생체 내 녹다운 활성
눈에서 DEC-siRNA의 생체 내 녹다운 활성을 테스트하기 위해, 성인 SD 쥐에게 국소 IVT 주사를 통해 DEC-siRNA (즉, RD-13115 및 RD-13118) 또는 비접합 콘트롤 (즉, RD-12556) 을 30 ┢g 용량으로 눈에 처리한다. 투여 후 14일째에 쥐를 희생시키고, 망막 조직에서 RT-qPCR을 통해 Sod1 mRNA 수준을 정량화한다. 도 10에 도시된 바와 같이, RD-12556은 39%만 녹다운시킨 반면, RD-13115와 RD-13118은 Sod1 mRNA 수준을 각각 74%와 71% 감소시켰다. DEC-siRNA (즉, RD-13115와 RD-13118) 는 비접합 콘트롤 (즉, RD-12556) 에 비해 30 μg 용량에서 거의 두 배의 녹다운 활성을 제공했으며, 이는 DEC 기술이 유전자 발현을 조작하기 위해, 올리고뉴클레오티드를 눈에 전달하는 데 이점이 있음을 나타냈다.
실시예 37 . IVB 주사를 통한 DEC-saRNA 처리 후, 성인 C57BL/6J 마우스의 방광 조직에서 DEC-saRNA의 약동학
성인 C57BL/6J 마우스에 3 mg의 RD-13520 (DEC-saRNA) 및 RD-10773 (비-DEC-saRNA) 을 IVB 주사를 통해 투여하고, 처리 후 2시간, 6시간, 12시간, 1일째 및 4일째에 방광 조직을 수집한다. 방광 조직 준비물에서 스템-루프 RT-qPCR을 통해 RD-10773 및 RD-13520을 검출한다. 방광에서 RD-13520 및 RD-10773의 농도를 도 11에 표시하여 약동학 (PK) 을 평가하고 표 4에 요약하였다.
실시예 38 . C57BL/6J 마우스에서 DEC-접합 siRNA에 의한 마우스 Sod1 mRNA의 강력하고 지속적인 녹다운
C16-siRNA와 비교하여 DEC-siRNA의 녹다운 내구성을 추가로 평가하기 위해, 표시된 siRNA (즉, RD-15135, RD-15136, RD-15137 및 RD-15138) 를 C57BL/6J 마우스에 10 mg/kg 투여한다. RD-15135는 비접합 콘트롤로 사용한다. RD-15136은 지질 (즉, C16) 접합 siRNA이다. 전형적인 DEC 구조 (즉, C5X5) 의 RD-15137은 전형적인 DEC-siRNA로 사용된다. 전형적인 DEC 구조 (즉, C5X5) 와 지질 (즉 C16) 을 가진 RD-15138은 조합 siRNA (즉, DEC-C16-siRNA) 로 사용된다. 식염수만 처리하여 기준 발현을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 사용한다. 투여 후 14일째 및 28일째의 마우스 Sod1 mRNA 수준은 각각 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 정량화한다. 도12A는 치료 후 28일까지 C57BL/6J 마우스의 체중 변화를 나타내는 도이다. 투여 후 14일째 및 28일째에 말초 조직 (즉, 심장, 간, 신장, 지방 조직, 췌장, 횡격막), 혈관 (즉, 정맥이 있는 흉부 대동맥) 및 골격근 (즉, 이두박근, 반건양근, 광경근 및 둔근) 에서 Sod1 mRNA 발현은 도 12B-12C에 표시되었다.
실시예 39 . DEC-접합 siRNA에 의한 SD 쥐에서 쥐 Sod1 mRNA의 강력하고 지속적인 녹다운
C16-siRNA와 비교하여 DEC-siRNA의 녹다운 내구성을 추가로 평가하기 위해, 표시된 siRNA (즉, RD-15135, RD-15136, RD-15137 및 RD-15138) 를 성인 SD 암컷 쥐에게 0.9 mg 투여한다. RD-15135는 비접합 콘트롤로 사용한다. RD-15136은 지질 (즉, C16) 접합 siRNA이다. 전형적인 DEC 구조 (즉, C5X5) 를 가진 RD-15137은 전형적인 DEC-siRNA로 사용된다. 전형적인 DEC 구조 (즉, C5X5) 와 지질 (즉 C16) 을 가진 RD-15138은 조합 siRNA (즉, DEC-C16-siRNA) 로 사용된다. aCSF만을 사용한 치료는 기준 발현을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 사용된다. 투여 후 14일째 및 28일째의 쥐 Sod1 mRNA 수준은 각각 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 정량화한다. 도 13A는 는 치료 후 28일까지 SD 쥐의 체중 변화를 나타내는 도이다. 투여 후 14일째의 뇌 조직 (즉, 전두엽 피질, 소뇌 및 대뇌), 척수 (즉, 경부, 흉부 및 요추) 및 말초 (즉, 간 및 신장) 에서 Sod1 mRNA 발현은 도 13B에 도시되었다. 투여 후 28일째의 뇌 조직 (즉, 전두엽 피질, 소뇌 및 뇌stem), 척수 (즉, 경부, 흉부 및 요추) 및 말초 (즉, 간 및 신장) 에서 Sod1 mRNA는 도 13C에 도시되었다.
실시예 40 . siRNA-ACO의 전달 강화 화합물 (DEC) 은 SK-N-AS 및 T98G 세포에서 SOD1 mRNA에 대해 일관되고 강력한 녹다운을 제공한다.
DEC-siRNA-ACO의 시험관 내 녹다운 활성을 평가하기 위해, 표시된 DEC-siRNA-ACO (즉, RD-16149, RD-16099, RD-16100, RD-16101, RD-16150, RD-16103, RD-16104 및 RD-16105) 를 표시된 농도 (즉, 1.56, 6.25, 25, 100, 400 및 1600 nM) 로 SK-N-AS 및 T98G 세포에 형질전환시켜 용량 반응 곡선을 생성한다. RD-16106을 형질전환시켜 siRNA-ACO 콘트롤로 사용한다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염되었다 (표시되지 않음). SOD1 mRNA 수준은 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 정량화한다. SK-N-AS 및 T98G 세포에서 남은 인간 SOD1 mRNA 수준은 도 14A-14B에 나타내었다. EC50 값은 표 5에 요약되어 있다.
실시예 41 . 성인 hSOD1 G93A 마우스에서 ICV 주사를 통한 siRNA의 녹다운 활성 및 조직 농도.
siRNA의 녹다운 활성 및 약동학을 평가하기 위해, 표시된 siRNAs (즉, RD-14851, RD-12500, RD-16145 및 RD-16334) 를 hSOD1 G93A 마우스에 200 μg 투여한다. RD-14851, RD-12500 및 RD-16145는 siRNA-ACO로 투여된다. DEC 구조 (즉, L17) 를 갖는 RD-16334를 투여하여 DEC-siRNA-ACO로 사용한다. aCSF만을 사용한 치료는 기준 발현을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 사용된다. 도 15A는 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 뇌 조직 (즉, 전두엽 피질, 소뇌 및 대뇌), 척수 및 말초 조직 (즉, 간) 에 투여한 후 30일째에 남아 있는 SOD1 mRNA를 정량화한 결과를 나타내는 도이다. 도 15B는 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 스템-루프 RT-qPCR을 통해 뇌 조직 (즉, 전두엽 피질, 소뇌 및 대뇌), 척수 및 말초 조직 (즉, 간) 에서 투여 후 30일째의 농도를 나타내는 도이다. 전두엽 피질, 소뇌, 대뇌, 척수 및 간 조직의 평균 농도는 약동학을 평가하기 위한 것이며, 표 6에 요약되어 있다. 혈청 화학 [즉, 글루타민-피루브산 트랜스아미나제 (ALT), 글루타민산 옥살아세트산 트랜스아미나제 (AST), 총 빌리루빈 (TBIL) 및 크레아티닌 (CRE)] 및 완전 혈구 검사 [즉, 백혈구 (WBC), 적혈구 (RBC), 혈소판 (PLT) 등]가 검출되어 안전성이 입증되었다.
실시예 42 . GM03813 세포에서 "saRNA-ASO" DEC-DAO 구조의 스플라이싱 활성.
GM03813 세포에서 SMN2 7 mRNA 동형체에 비해 SMN2 pre-mRNA를 SMN2FL로 전환할 때 "saRNA-ASO" DEC-DAO 구조의 스플라이싱 활성을 평가한다. 표시된 DEC-DAO 결합과 L21 링커 (즉, RD-16939 및 RD-16940), DEC-saSMN2 (즉, RD-16424) 및 DEC-안티센스 올리고뉴클레오티드 (DEC-ASO) (즉, RD-14644) 를 표시된 농도 (즉, 0.1, 1 및 10 nM) 로 GM03813 세포에 3일 동안 형질전환시킨다. RD-16381은 비특이적 DEC 콘트롤로 형질감염된다. 조합 처리 (즉, RD-16424+RD-14644) 와 조합 처리 콘트롤 (즉, RD-16381+RD-16424, RD-16381+RD-14644) 도 표시된 농도 (즉, 0.1, 1 및 10 nM) 로 3일 동안 GM03813 세포에 형질감염된다. 도 16A-16B에 표시된 바와 같이, "saRNA-ASO" DEC-DAO 구조는 SMN2FL 및 SMN2 7의 mRNA 수준에서 강력한 스플라이싱 활성을 제공하며, 이는 saRNA와 ASO를 DAO에 결합하면 saRNA와 ASO 단위의 활성을 크게 유지하고 심지어 증가시킬 수 있음을 나타낸다.
실시예 43 . 두 가지 다른 인간 유전자 (SMN2 및 SOD1) 를 표적으로 하는 "saRNA-siRNA" DEC-DAO 구조가 GM03813 세포에서 SMN2 (SMN2FL 및 SMN27) 및 SOD1의 발현에 미치는 영향.
두 가지 다른 유전자를 표적으로 하는 "saRNA-siRNA" DEC-DAO 구조의 효과를 평가하기 위해, 표시된 DEC-DAO 결합과 L21 링커 (즉, RD-16941), DEC-saSMN2 (즉, RD-16424) 및 DEC-siSOD1 (즉, RD-13115)를 표시된 농도 (즉, 0.1, 1 및 10 nM)로 GM03813 세포에 3일 동안 형질전환시킨다. RD-16381은 비특이적 DEC 콘트롤로 형질감염된다. 복합 처리 (즉, RD-16424+RD-13115) 와 복합 처리 콘트롤 (즉, RD-16381+RD-16424, RD-16381+RD-13115) 도 표시된 농도 (즉, 0.1, 1 및 10 nM) 로 3일 동안 GM03813 세포에 형질전환된다. 도17A-17B는 SMN2FL 및 SMN2 7 의 mRNA 수준을 나타내고, 도 17C는 나머지 SOD1 mRNA 수준을 나타낸다. 도 17A-17C에 도시된 바와 같이, "saRNA-siRNA" DEC-DAO 구조는 SMN2FL 발현에 강력한 유전자 유도와 SOD1 mRNA의 녹다운을 제공한다. 이 결과는 saRNA와 siRNA를 DAO에 결합하면 각 단위의 활성을 크게 유지하면서 saRNA 단위의 활성을 향상시킬 수 있음을 나타낸다.
실시예 44 . 두 가지 다른 유전자 (마우스 Sod1과 Ppig) 를 표적으로 하는 "siRNA-siRNA" DEC-DAO 구조가 C2C12 세포에서 마우스 Sod1과 Ppig의 발현에 미치는 영향
두 가지 다른 유전자 (마우스 Sod1과 Ppig) 를 표적으로 하는 "siRNA-siRNA" DEC-DAO 구조의 효과를 평가하기 위해, 표시된 DEC-DAO 결합과 L21 링커 (즉, RD-16942), DEC-siSod1 (즉, RD-13115) 및 DEC-siPpig (즉, RD-14672)를 표시된 농도 (즉, 0.01, 0.1 및 1 nM)로 C2C12 세포에 24시간 동안 형질전환시킨다. RD-16381은 비특이적 DEC 콘트롤로 형질감염시킨다. 복합 처리 (즉, RD-13115+RD-14672) 및 복합 처리 콘트롤 (즉, RD-16381+RD-13115, RD-16381+RD-14672) 도 표시된 농도 (즉, 0.01, 0.1 및 1 nM) 로 24시간 동안 C2C12 세포에 형질전환된다. 도 18A-18B에 도시된 바와 같이, "siRNA-siRNA" DEC-DAO 구조는 각각 마우스 Sod1 및 Ppig mRNA 수준에서 강력한 녹다운 활성을 제공한다 이 결과는, 서로 다른 유전자를 표적으로 하는 두 개의 siRNA를 DAO에 결합하면 각 siRNA 단위의 활성을 대부분 유지할 수 있고, 두 siRNA 단위의 활성을 더욱 향상시킬 수 있음을 나타낸다.
실시예 45 . 두 가지 다른 유전자 (마우스 Sod1 및 Ppig) 를 표적으로 하는 "siRNA-siRNA" DEC-DAO 구조가 생체 내 마우스 Sod1 및 Ppig 발현에 미치는 영향
두 가지 다른 유전자 (마우스 Sod1 및 Ppig) 를 표적으로 하는 "siRNA-siRNA" DEC-DAO 구조의 생체 내 효과를 평가하기 위해, 표시된 DEC-DAO 결합과 L21 링커 (즉, RD-16942), DEC-siSod1 (즉, RD-13115) 및 DEC-siPpig (즉, RD-14672) 를 IV 주사를 통해 C57BL/6J 마우스에 10 mg/kg 용량으로 투여한다. 복합 치료 (즉, RD-13115+RD-14672) 는 IV 주사를 통해 10 mg/kg 용량으로 투여한다. 식염수만 처리하여 기준 발현을 확립하기 위한 매개체 콘트롤로 사용한다. 투여 후 14일째에 남은 마우스 Sod1 mRNA는 유전자 특이적 프라이머 세트를 사용하여 RT-qPCR을 통해 말초 조직 (즉, 심장, 간, 신장, 지방 조직, 횡격막, 정맥이 있는 흉부 대동맥) 과 골격근 (즉, 이두근, 반건양근, 광경근 및 둔근) 에서 정량화된다. 도 19에 도시된 바와 같이, "siRNA-siRNA" DEC-DAO 구조 (즉, RD-16942) 는 Sod1 mRNA 발현에 대해 유사한 녹다운 활성을 나타냈다. 이 결과는 서로 다른 유전자를 표적으로 하는 두 개의 siRNA를 DAO 구조로 결합하면 말초 및 골격근 조직에서 단일 개체로 사용되는 단위의 녹다운 활성을 유지할 수 있음을 나타낸다.
실시예 46 . IVT 주사를 통한 DEC-saRNA 처리 후 성인 SD 쥐의 망막 및 유리체액에서 DEC-saRNA의 약동학
DEC-saRNA의 약동학을 평가하기 위해, 성인 SD 쥐에게 0.03 mg의 DEC-saRNA (즉, RD-16447) 와 비접합 saRNA (즉, RD-12173) 를 IVT 주사를 통해 투여한다. 처리한 후 1시간, 1일, 3일, 7일, 14일 및 28일째에 쥐를 희생시키고, 스템-루프 RT-qPCR을 통해 망막 및 유리체액에서 RD-16447 및 RD-12173의 농도를 정량화한다. 망막 및 유리체액에서 RD-16447 및 RD-12173의 농도를 도 20A-20B에 도시되었다. 망막 및 유리체액에서 올리고뉴클레오티드의 평균 농도는 표 7에 요약되어 있다.
실시예 47 . T98G 세포에서 SOD1을 표적으로 하는 DEC-siRNA의 녹다운 활성
새로운 DEC 구조 (즉, C5x34) 를 설계하여 SOD1 유전자를 표적으로 하는 siRNA에 접합하여 새로운 DEC-siRNA (즉, RD-17138) 를 생성한다. DEC-siRNA의 시험관 내 녹다운 활성을 평가하기 위해, 표시된 DEC-siRNA (즉, RD-17138) 를 0.1 nM 및 1 nM에서 24시간 동안 T98G 세포에 형질감염시킨다. RD-11566은 형질감염되어 비특이적 듀플렉스 콘트롤로 사용된다. Mock 처리는 올리고뉴클레오티드가 없는 상태에서 형질감염되었다. SOD1 mRNA 수준은 RT-qPCR을 통해 정량화하였다. 도 21에 도시된 바와 같이, RD-17138은 0.1 nM 및 1 nM에서 SOD1 mRNA 발현에 대한 녹다운 활성이 90% 이상이었고, 이는 새로운 DEC 구조인 C5x34가 시험관 내에서 SOD1 mRNA 수준에서 siRNA의 녹다운 활성을 향상시킬 수 있음을 시사한다.
재료 및 방법
올리고뉴클레오티드의 일반적인 합성 방법
다음 예에서 사용된 올리고뉴클레오티드는 다음의 일반적인 방법을 통해 합성된다.
단일 사슬 합성법
단일 사슬 올리고뉴클레오티드는 고체상 (solid phase) 합성 기술을 사용하여 K&A DNA 합성기 (K&A Laborgeraete GbR, Schaafheim, Germany) 에서 합성되었다.
출발 물질로 시중에서 구매하거나 상기 개시된 바와 같이 합성할 수 있는 범용 고체 지지체 또는 특수 고체 지지체를 사용하였다. 일반적으로, 다양한 링커 및 접합체 (아세토니트릴 또는 디클로로메탄 중 0.1M) 을 포함하는 포스포라미다이트 단량체를 DNA 합성기에서 고체 지지체 상에 순차적으로 첨가하여 원하는 전장 올리고뉴클레오티드를 생성하였다.
아미다이트 첨가: 아미다이트 첨가의 각 사이클은 탈트리틸화, 커플링, 산화/티올화 및 캡핑을 포함한 4가지 화학 반응으로 구성된다. 첫 번째 단계에서, DCM에서 3% 디클로로아세트산 (TCA) 을 사용하여 45초간 탈트리틸화를 수행하였다. 두 번째 단계에서, 모든 아미다이트 (12 eq) 에 대해 6분간 포스포라미다이트 커플링을 수행하였다. 세 번째 단계에서, THF:피리딘:물 (70:20:10, v/v/v) 에 0.02 M 요오드를 사용하여 1분간 산화를 수행하였다. 포스포로티오에이트 변형이 필요한 경우에는 티올화로 산화를 대체하여, 피리딘:can (50:50, v/v) 중 크산탄 수소화물 용액 0.1 M에서 3분간 티올화를 수행하였다. 네 번째 단계에서, THF:아세트산 무수물:피리딘 (80:10:10, v/v/v) (CAP A) 및 N-메틸이미다졸:THF (10:90, v/v), (CAP B) 를 사용하여 20초 동안 캡핑을 수행하였다. 이 4가지 화학 반응의 주기는 단일 올리고뉴클레오티드의 길이에 따라 달라진다.
탈보호 I (핵염기 탈보호): 합성 완료 후, 고체 지지체를 스크루 캡 마이크로센트리퓨지 튜브로 옮겼다. 1 μmol 합성 척도를 위해, 메틸아민과 수산화암모늄의 화합물 1 mL를 첨가하였다. 이어서, 고체 지지체가 들어 있는 튜브를 60°C-65°C의 오븐에서 15분간 가열한 후, 상온으로 냉각시켰다. 절단 용액을 수집하여 speedvac에서 증발시키고 건조시켜 올리고뉴클레오티드의 조단일 사슬을 수득하였다.
탈보호 II (2'-TBDMS기 제거): 2'-TBDMS기를 여전히 가지고 있는 조RNA (crude RNA) 올리고뉴클레오티드를 0.1 mL의 DMSO에 용해시켰다. 트리에틸아민 트리하이드로플루오라이드 1mL를 첨가한 후, 튜브의 뚜껑을 닫고, 혼합물을 완전히 용해시킬 때까지 세게 흔들어 준 다음, 65°C의 오븐에서 15분 동안 가열한다. 튜브를 오븐에서 꺼내어 상온으로 냉각시켰다. 완전히 탈실릴화된 올리고뉴클레오티드를 함유하는 용액을 드라이아이스 위에서 냉각시켰다. 0.5mL에 초저온 n-부탄올(-20℃) 2mL를 조심스럽게 첨가하여 올리고뉴클레오티드를 침전시켰다. 침전물을 여과하고, 1mL의 얼음처럼 차가운 n-부탄올로 세척한 다음, 0.01 M의 트리스 (히드록시메틸) 아미노메탄올 염산염 완충액에 용해시킨다.
(2) 단일 사슬 정제
Source 15Q 4.6/100 PE 컬럼을 갖춘 AKTA explorer 10에서 다음 조건을 사용해 올리고뉴클레오티드를 정제하였다: 완충액 A: (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5), B: (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 2M NaCl, pH 7.5), 구배: 25분 동안 10% B에서 60% B로, 유속: 1 mL/분. 순수한　올리고뉴클레오티드를 수집하여 HiPrep 26/10 탈염 컬럼으로 탈염시킨다.
(3) 듀플렉스 형성을 위한 어닐링
듀플렉스의 경우, 탈염 정제된 단일 사슬 용액을 생성한 후, 센스 사슬 (패신저 사슬) 과 안티센스 사슬 (가이드 사슬) 을 튜브에서 등몰 농도로 동일한 부피로 혼합한다. 튜브를 95ºC의 열 블록에 5분 동안 넣은 다음, 상온으로 식힌 후 동결 건조시켜 분말을 만든다
세포 배양 및 처리
일차 마우스 간세포 (PMH) 는 C57BL/6J 마우스 (베이징 Vital River 실험 동물 기술 유한회사) 의 간에서 분리하여, 1%의 인슐린 (S6955, Selleck, US) 과 1%의 페니실린/스트렙토마이신 (Gibco) 이 보충된 변형된 Willian's Medium E (WME) 배지 (A12176-01, Gibco, Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, Ca) 에서, 37°C, 5%의 CO2 조건에서 배양한다. T98G 세포 (Cobioer, 카탈로그 번호: CBP60301) 는 10% 송아지 혈청 (Sigma-Aldrich) 과 1%의 페니실린/스트렙토마이신이 보충된 변형된 MEM 배지 (Gibco, Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, Ca) 에서, 37°C, 5%의 CO2 조건에서 배양한다. SK-N-AS (Procell, Wuhan, China, 카탈로그 번호: CL-0621) 및 C2C12 (CBP60252, Cobioer, China) 세포는 10%의 FBS 및 1%의 페니실린/스트렙토마이신이 보충된 DMEM 배지에서 유지된다. SMA 환자 유래 섬유아세포 GM03813 세포는 Coriell Institute (Camden, NJ, USA) 에서 구입하여 15%의 송아지 혈청, 1%의 NEAA 및 1%의 페니실린/스트렙토마이신이 보충된 변형 MEM 배지에서, 37°C, 5%의 CO2 조건에서 배양한다. 형질감염은 항생제가 없는 성장 배지에서 Lipofectamine RNAiMax (ThermoFisher, Waltham, MA, USA) 를 사용하여 제조업체의 프로토콜에 따라 수행한다. 자유 흡수는 올리고뉴클레오티드를 PMH 세포가 들어 있는 배지에 직접 첨가하여 수행한다.
일차 마우스 간세포 ( PMH ) 분리
C57BL/6J 마우스 (B204, 베이징, 중국) 를 이소플루란으로 마취시키고 초기 세척 시약과 소화 시약을 차례로 관류한다. 간을 10 cm 접시에 넣고 배지에서 집게를 사용하여 찢는다. 세포 현탁액은 50 mL의 원뿔형 튜브에서 70-75마이크론 멤브레인을 통해 여과하여 수집한 다음, 스윙 암 원심분리기에서 4
Figure pct00320
에서 2분 동안 100Хg로 원심분리한다. 상층액을 제거한 후, 20 mL의 차가운 PBS로 세포를 세척한다 (이 단계를 두 번 반복). 최소 80%의 생존력을 가진 세포는 검정을 진행하도록 한다. 적절한 수의 세포를 세포 배양판에 접종하여 검정을 시작하기 전에 최종 합류율이 90-95%가 되도록 4-12시간 전에 콜라겐 I로 미리 코팅한다.
동물 연구
모든 동물 실험은 지역 및 주의 규정에 부합하는 프로토콜을 사용하여 공인된 실험실 직원에 의해 수행되었으며 동물실험윤리위원회 (Institutional Animal Care 및 Use Committee) 의 승인을 받았다. C57BL/6J 마우스 (4-6 주령) 는 SPF Biotechnology Co., LTD (B204, 베이징, 중국) 에서 구입하였다. Sprague-Dawley 암컷 쥐 (A102, SPF, 중국) 는 SPF (쑤저우) 생물공학유한회사에서 구입하였다. 부모 형질전환 hSOD1G93A 마우스 (균주 ID #004435) 는 Jackson Laboratory (미국 메인주 바하버) 에서 구입하여 난통대학교 (중국 장쑤성 난통시) 를 통해 중국으로 수입하였다. 생체 내 연구를 위한 제형은 동결 건조된 올리고뉴클레오티드의 일부를 식염수나 aCSF에 용해시키고 희석하여 의도한 치료 농도로 스톡 용액을 만든 후 사용 직전에 신선하게 제조한다. 동물은 체중과 성별에 따라 무작위로 연구 그룹에 할당한다.
뇌실 내 ( ICV ) 주사
Avertin (1.2%) 은 신선하게 제조되었고 0.2마이크론 필터를 통해 살균하였다. 마우스는 입체 좌표 기구에서 복강내 (IP) 주사를 통해 체중 10g당 0.30-0.35mL로 투여하여 최대 30분 동안 빠르게 마취를 유도한다. 동물의 두피를 약 11.5mm 절개하고 적절한 siRNA 제형이 들어 있는 Hamilton 주사기에 부착된 25게이지 바늘을 브레그마 수준에 놓는다. 바늘을 적절한 전방/후방 및 내측/외측 좌표 (전방/후방 0.2mm, 오른쪽 내측/외측 1mm) 로 이동한다. 총 10μL를 약 1μL/s의 속도로 측뇌실에 주사한다. 치료 후 바늘을 천천히 빼고 상처를 봉합한다.
척추 강내 (IT) 주사
마취는 유도실에서 3.0%의 이소플루란을 통해 10분 동안 연속 투여한다. 꼬리 밑부분의 주사 부위 주위의 털을 깎고 75% 에탄올로 세척한다. L5-L6 가시돌기 사이의 공간을 확인하고, 적절한 약물 제형이 들어 있는 마이크로리터 주사기에 부착된 30게이지 바늘을 꼬리 움직임이 관찰될 때까지 경막 내 공간에 천천히 삽입한다. 바늘 위치를 고정한 후 1분 동안 총 용액 30 μL를 주입한다.
꼬리 정맥에 정맥 주사 (IV)
마우스를 2~3분 동안 적외선 램프에 노출시켜 정맥을 확장한 다음, 제지장치에 고정하여 꼬리를 곧게 펴도록 한다. 꼬리를 75% 알코올로 닦고 바늘을 꼬리 정맥과 평행하게 2~4mm 루멘에 삽입하여 바늘의 경사면을 위로 향하게 한다. 미리 만들어진 용액을 천천히 주입하며 올바르게 주입되면 저항이 없어야 한다. 시험 항목에 대한 권장 주입량은 200μL이고 주입 속도는 5mL/분을 초과하지 않는다. 투여가 끝나면 투여 용액 및/또는 혈액이 역류하는 것을 방지하기 위해 면봉이나 손가락으로 주입 부위를 단단히 누른다.
유리체내 ( IVT ) 주사
SD 쥐는 Ractigen (중국, 장쑤성, 난퉁) 의 동물 시설에 수용되었고, 화합물을 유리체내 (IVT) 주입하기 전 최소 3일 동안 먹이를 먹인다. SD 쥐는 발가락 꼬집기에 반응이 없을 때까지 이소플루란 (RWD, R510-22-16) 유도 챔버 (100% 의료용 산소에 5% 이소플루란, 2L/분) 에서 마취시킨다. SD 쥐를 실험 운영 플랫폼으로 옮겨 IVT 주입 과정 동안 수제 페이스 마스크를 사용하여 이소플루란 (100% 의료용 산소에 2% 이소플루란, 1.5L/분) 을 투여할 수 있도록 위치를 잡는다. IVT 화합물 주입 전에 국소 마취제인 0.5% 알카인 한 방울을 주입된 눈 (왼쪽 눈) 에 도포한다. 전방 안방 천자는 30게이지 바늘을 사용하여 수행한 후 약 5μL의 수액을 유출시킨다 해당 그룹의 각 화합물을 4 μL의 식염수에 용해시키고 IVT 주입을 위한 30게이지 바늘에 넣는다. 공막을 통해 유리체 내로 바늘을 45° 각도로 삽입하여 화합물을 투여한 다음, 누출을 방지하기 위해 5초 동안 유지하여 후방 챔버에 주입한다. 투여가 끝나면 IVT 주사 후 감염을 방지하기 위해 주사한 눈에 항생제를 투여한다.
방광 내 방광 주입 ( IVB )
마우스를 마취시키고 28-31ºC의 온도 조절 패드 위에 놓는다. 각 마우스는 요도 카테터를 통해 방광에서 소변을 배출하고 IVB 주입 전에 식염수로 방광을 세척한다. 화합물 용액이 들어 있는 1mL 주사기에 부착된 2cm 카테터를 요도를 통해 방광에 삽관한다. 총 50μL의 용액을 ~1.5시간에 걸쳐 요도 카테터 삽입을 통해 방광에 주입한다.
RNA 분리 및 역전사 -정량 중합효소 연쇄 반응 (RT- qPCR )
제조업체의 프로토콜에 따라 RNeasy Plus Mini 키트 (Qiagen, Hilden, Germany) 를 사용하여 세포 배양에서 모든 세포 RNA를 분리한다. 동물 조직은 샘플 처리 전에 RNAlaterTM (AM7021, Thermo Fisher, Carlsbad, CA, USA) 에 보관하였으며, 이때 MagPure Total RNA Micro LQ 키트 (Magen, R6621, Guangzhou, Guangdong, China) 와 auto-pure96 기계 (ALLSHENG, Hangzhou, Zhejiang, China) 를 함께 사용하여 모든 RNA 샘플을 분리한다. 이 RNA (1 μg) 를 gDNA Eraser를 함유하는 PrimeScript RT 키트 (Takara, Shlga, Japan) 를 사용하여 cDNA로 역전사시켰다. 생성된 cDNA는 Roche LightCycler 480 Multiwell Plate 384 (Roche, ref: 4729749001, US) 에서 SYBR Premix Ex Taq II (Takara, Shlga, Japan) 시약과 관심 표적 유전자를 증폭하는 데 특화된 프라이머를 사용하여 증폭한다. 증폭 후, 용융 곡선을 수행하여 프라이머 특이성을 확인한다. 반응 조건은 다음과 같다. 역전사 반응 (1단계 ): 42°C 5분, 95°C 10초; PCR 반응 (2단계): 95°C 5초, 60°C 30초, 72°C 10초; 40주기 증폭; 용융 곡선 (3 단계). PCR 반응 조건은 표 8 및 표 9와 같다. 프라이머 서열은 표 10에 표시되었다.
일 참조 유전자
siRNA 및 saRNA 형질감염 샘플에서 콘트롤 처리 (Mock) 에 비해 표적 유전자 mRNA의 발현 수준 (Erel) 을 계산하기 위해, 표적 유전자와 내부 참조 유전자의 평균 Ct 값을 다음 공식에 대입한다.
여기서, CtTm은 mock-처리 샘플에서 표적 유전자의 Ct 값이고; CtTs는 siRNA-처리 샘플에서 표적 유전자의 Ct 값이며; CtR1m은 mock-처리 샘플에서 내부 참조 유전자 1의 Ct 값이고; CtR1s는 siRNA-처리 샘플에서 내부 참조 유전자 1의 Ct 값이며; CtR2m은 mock-처리 샘플에서 내부 참조 유전자 2의 Ct 값이고; CtR2s는 siRNA-처리 샘플에서 내부 참조 유전자 2의 Ct 값이다.
스템 -루프 RT- qPCR
생체 시료에서 올리고뉴클레오티드를 정량화하기 위해 가열-용해 방법을 사용하여 동물 조직을 수확하고 용해물을 -80
Figure pct00325
에서 저장하였다. 듀플렉스, 안티센스 사슬 및 제형화된 saRNA는 95°C에서 끓인 조직 (100 mg/mL) 또는 혈장 (1:10 희석) 에 1x 용해 완충액으로 10배 연속 희석하여 제조하는 데 사용되었다. saRNA 농도 nM 는 해당 분자량을 사용하여 ng/g로 변환되었다. 모든 실험에는 2개의 비주형 콘트롤이 포함되었다. 첫 번째 대조군은 전사 master mix 제조에 사용되는 물을 함유하고, 두 번째 대조군은 시료 및 표준의 희석액으로 사용되는 용해 완충액을 함유한다.
Takara 역방향 Transcription 키트 (Takara, RR037A) 를 사용하여 역전사 반응을 수행하였다. 이전 단계의 cDNA 총 4 μL (1:40 희석) 를 PCR 증폭 반응 혼합물 (0.5 μM 정방향 프라이머, 0.5 μM 역방향 프라이머, 2 Х TG Green 프리믹스 Ex Taq II) 에 첨가한다. qPCR 반응을 Light cycler 480에서 '표준 곡선' 옵션으로 실행하였다. 스템-루프 RT-qPCR 반응 조건은 표 11 및 표 12에 표시되었다. 스템-루프 프라이머 서열은 표 13에 표시되었다.
ELISA 분석
혈장은 마우스 한 마리당 225 μL의 혈액을 1.5 mL의 EP 튜브에 수집하여 항응고제로 25 μL의 3.2% 구연산염을 첨가한 후, 수집 후 30분 이내에 혼합하고 2500 g에서 15분 동안 원심분리하여 제조하였다. 샘플은 즉시 테스트하거나 분주하여 반복적인 동결-해동 사이클 없이 -80
Figure pct00328
에서 보관하였다. 제안된 1000배 희석액을 Tris-BSA 완충액 (Cord:221304, BioMed, 프랑스) 으로 희석하고 잘 혼합한 후 분석을 시작하였다. FVII 표준 (정상 마우스 혈장) 은 정상 마우스 5마리 (C57BL/6J) 의 혈장 샘플을 모아 만든 풀 혈장 튜브 하나를 취하여 준비한 다음, -80
Figure pct00329
에 보관하고 표준 혈장의 시작으로 사용하였다. 20 μL의 풀 혈장을 480 μL의 Tris-BSA 완충액 (R4) 에 피펫으로 넣어 1.5 mL 튜브에 1:25 Solution A를 얻는다. 그 다음, 50 μL의 Solution A를 950 μL의 Tris-BSA 완충액에 피펫으로 넣어 1:500의 스톡 용액을 얻는다. 이 스톡 용액은 표준 혈장 희석 시리즈를 생성하는 데 사용한다. 각 튜브는 다음으로 이동하기 전에 완전히 혼합한다.
이 분석에서는, 1:1000의 표준 혈장 희석이 100%의 FVII 활성 값으로 할당되었다. 정의에 따라, 스톡 용액에는 200%의 FVII 활성이 할당된다. 동적 범위는 0~200%의 FVII 활성이다. 스톡 용액 (즉, 200%의 FVII 활성) 은 높은 값 표준으로 사용된다. Tris-BSA 완충액 (R4) 은 0 값 표준으로 사용된다. FVII 단백질 발현 수준은 키트 제조업체에서 제공한 지침에 따라 BIOPHEN FVII ELISA 키트 (Cord:221304, BioMed, 프랑스) 를 사용하여 OD 값으로 검출하였다.
통계 분석
일원 분산 분석 (ANOVA) 을 사용한 다음 Dunnett의 다중 비교를 사용하여 연속형 변수의 그룹 간 차이를 비교한다. P 값이 0.05 미만이면 두 그룹 간에 통계적으로 유의미한 것으로 간주된다. *는 p < 0.05를 나타내고, **는 p < 0.01을 나타내며, ***는 p < 0.001을 나타내고, ****는 p < 0.0001을 나타낸다.
본 발명은 바람직한 실시예 및 다양한 대체 실시예를 참조하여 구체적으로 도시되고 설명되었지만, 당업자는 본 발명의 정신과 범위를 벗어나지 않은 범위 내에서 형태 및 세부 사항에 대한 다양한 변경이 이루어질 수 있음을 이해할 것이다.
서열목록 전자파일 첨부

Claims (46)

  1. 질소-함유 5원 헤테로시클릭 고리 모이어티 및 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 부착될수 있는 적어도 하나의 치환기를 포함하는, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  2. 제1항에 있어서, 식 AI 또는 식 AII에 표시되는 구조를 가지며,

    각 는 독립적으로 공유 단일 또는 이중 결합을 나타내고; X는 각 발생 시 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택된 원자이며; F, G, H 및 I는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고;
    m는 1, 2 또는 3의 정수이며 n은 1, 2 또는 3의 정수이고, m+n=4이며;
    C는 각 발생 시에 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택되고;
    B는 각 발생 시 독립적으로 히드록실, -C(O)OH, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬렌-OH, -(C6-C22)아릴렌-OH, -(C6-C22)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C22)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C22)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C22)헤테로아릴렌-C(O)OH, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)NH2, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH, -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C22)알킬렌-CN으로 구성된 그룹에서 선택되고,
    A1, A2 및 A3은 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, -O-R1, -SH, -(C1-C25)알킬, 할로겐화 -(C1-C25)알킬, -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -C(O)O-R1, -O-(C1-C22)알킬, -S-(C1-C22)알킬, -C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -O-아다만틸, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -CH(NH-CO-(C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬]3, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1]3, -CH(NH-CO-할로겐화 (C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-(C1-C22)알킬, -C(O)NH-R1, -C(O)NR2-R1, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-COOH, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -NH-C(O)-R1, -NR2-C(O)-R1, -O-P(O)2-O-R1, -OP(O)(S)-O-R1, -O-P(O)-O-R1, -NH-R1, -NR2-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH, -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸 및 식 AIII에 표시되는 치환기로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이고,

    Y는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되며; P, Q, S 및 T는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고; 별표는 식 AIII에 표시되는 치환기가 식 AI 또는 식 AII에 표시되는 구조와 연결된 부위를 나타내며;
    R3, R4 및 R5는 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, -O-R1, -SH, -(C1-C25)알킬, 할로겐화 -(C1-C25)알킬, -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -C(O)O-R1, -O-(C1-C22)알킬, -S-(C1-C22)알킬, -C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-(C1-C22)알킬, -O-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-OH, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -O-아다만틸, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -CH(NH-CO-(C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬]3, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-C[-(C1-C22)알킬렌-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1]3, -CH(NH-CO-할로겐화 (C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-할로겐화 (C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드etr)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-(C1-C22)알킬, -C(O)NH-R1, -C(O)NR2-R1, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)NH-(C1-C22)알킬렌-COOH, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -NH-C(O)-R1, -NR2-C(O)-R1, -O-P(O)2-O-R1, -OP(O)(S)-O-R1, -O-P(O)-O-R1, -NH-R1, -NR2-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)-OH, -(C1-C22)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸 및 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이고,
    R7은 각 발생 시 P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택되며;
    M은 0, 1, 2 또는 3의 정수이고;
    여기서, R6은 P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, 직접 결합, -O-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -P(O)2-O-, -O-P(O)2-O-, -P(O)(S)-O-, -O-P(O)(S)-O-, -O-P(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-O-, -O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C22)알킬)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-N((C1-C22)알킬)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-O-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -N((C1-C22)알킬)-C(O)-(C1-C22)알킬렌-N((C1-C22)알킬)-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌 -P(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C3-C22)시클로알킬렌-, -(C3-C22)시클로알킬렌-O-, -O-(C3-C22)시클로알킬렌-, -(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-O-, -O-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-NH-, -NH-(C6-C22)아릴렌-, -C(O)-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C6-C22)아릴렌-, -(C6-C22)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C22)아릴렌- 및 -C(O)-NH-(C6-C22)아릴렌-C(O)-O-로 구성된 그룹에서 선택되며;
    R1은 각 발생 시 수소, 히드록실, -(C1-C22)알킬, -(C3-C22)시클로알킬, -(C6-C22)아릴, -(C1-C22)알콕시, -(C3-C22)시클로알콕시, -(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-(C1-C22)알킬, -OC(O)(C1-C22)알킬, -C(O)-O-(C1-C22)알킬, -C(O)-(C3-C22)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C22)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C22)시클로알킬, -C(O)-(C6-C22)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C22)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 글루코실, 아세트아미드글루코실, 갈락토사민, N-아세틸 갈락토사민, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 클로로퀸 및 알칼로이드로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며,
    R2는 각 발생 시 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, (C1-C12)알콕시카르보닐, (C6-C16)아릴 또는 (C6-C16)아릴옥시카르보닐로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고;
    A1, A2, A3, B, C, R1, R2, R3, R4, R5 및 R6에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 지지체 물질에 연결되거나 말단 보호 그룹에 의해 보호되며;
    조건부로 A1, A2 및 A3은 동시에 수소가 아니고 R3, R4 및 R5는 동시에 수소가 아닌, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  3. 제1항에 있어서, 식 BI에 표시되는 모이어티와 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 부착될 수 있는 적어도 하나의 치환기를 포함하며,

    X'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; F', G', H' 및 I'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 각 별표는 적어도 하나의 치환기 또는 올리고뉴클레오티드에 선택적으로 직접 또는 간접적으로 연결된 부위를 나타내는, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  4. 제3항에 있어서, 식 BII에 표시되는 구조를 가지며,

    X'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; F', G', H' 및 I'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며;
    A1’, A2’ 및 A3’은 각각 존재하지 않거나 -H, -R1’, -O-R1’, -S-R1’, -C(O)-R1’, -C(O)O-R1’, -O-C(O)-R1’, -C(O)NH-R1’, -C(O)NR2’-R1’, -NH-C(O)-R1’, -NR2’-C(O)-R1’, -O-P(O)2-O-R1’, -OP(O)(S)-O-R1’, -O-P(O)-O-R1’, -NH-R1’, -NR2’-R1’, -(CH2)r'-NH-R1’, -(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)O-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-C(O)-R1’, -(CH2)r'-C(O)-R1’; -(CH2)r'-C(O)O-R1’; -(CH2)r'-O-C(O)-R1’, -(CH2)r'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NR2’-C(O)-(CH2)s'-R1’, -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’)(-C(O)-NH-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이거나, 또는 A1’과 A2’는 서로 연결되어 A1’, A2’, A1’과 연결된 질소 원자, A2'과 연결된 탄소 원자가 치환되지 않았거나 치환된 헤테로시클릭을 형성하고; R1’ 및 R3’은 각각 수소, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-(C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 글루코실, 아세트아미드글루코실, 갈락토사민, N-아세틸 갈락토사민, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 리간드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 저분자, 항체, 항체 단편, 클로로퀸, 알칼로이드 및 타게팅 모이어티로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되며, R1’ 및 R3’각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹 및 아미노 그룹은 선택적으로 보호되고; R2’, R4’, R5’ 및 R6’은 각각 독립적으로 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, (C1-C12)알콕시카르보닐, (C6-C16)아릴 또는 (C6-C16)아릴옥시카르보닐이며; r', s', p' 및 q'는1 내지 22의 정수이고; 조건부는 X'가 산소일 때 A3'가 존재하지 않고 A1', A2', A3'가 동시에 수소가 아니며;
    각 C'는 F', G', H' 및 I' 중 하나에 부착되고, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택되고;
    M'은 1, 2 또는 3의 정수이며, n'은 1, 2 또는 3의 정수이고, m'+n’=4이며;
    각 B'는 F', G', H' 및 I' 중 하나에 부착되고, 히드록실, -C(O)OH, -(C1-C30)알콕시, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-H (여기서 r' is 정수 of 1 to 22), -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-(C1-C30)알킬렌-C(O)-OH (여기서 r' is 정수 of 1 to 22), -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-(C6-C50)아릴렌-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 클로로퀸, 알칼로이드 및 식 BIII에 표시되는 치환기로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며:

    Y'는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; P', Q', S' 및 T'는 각각 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 별표는 식 BIII에 표시되는 치환기가 식 BII의 F', G', H' 및 I' 중 하나와 연결된 부위를 나타내고;
    R7’은 -O-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -P(O)2-O-, -O-P(O)2-O-, -P(O)(S)-O-, -O-P(O)(S)-O-, -O-P(O)-O-, -(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-O-, -O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)2-O-, -(C1-C30)알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH-, -NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -(C3-C50)시클로알킬렌 -P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-O-, -O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-NH-, -NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -(C6-C50)아릴렌 -P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-O-P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-NH-, -NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -(C5-C50)헤테로아릴렌 -P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-P(O)2-O-로 구성된 그룹에서 선택되며; 각 R8’ 및 R9’는 각각 존재하지 않거나 -H, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH2, -(C6-C50)아릴렌-NH2, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-인산, -(C3-C50)시클로알킬렌-인산, -(C6-C50)아릴렌-인산으로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택된 치환기이며; R8’ 및 R9’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 말단 보호 그룹에 의해 보호되거나; 또는 R8’ 및 R9’가 서로 연결되어 R8’, R9’, R8'에 연결된 탄소 원자 및 R9'에 연결된 Y' 원자가 치환되지 않았거나 치환된 헤테로시클릭 고리를 형성하고; 조건부는 Y'가 산소 또는 황인 경우, R9'는 존재하지 않는다는 것이며;
    각 R10’은 P', Q', S' 및 T' 중 하나에 부착되며, 히드록실, -C(O)OH, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌- C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌- NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN으로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고, 여기서, R10’에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 지지체 물질에 연결되거나 말단 보호 그룹에 의해 보호되며;
    각 R11’은 P', Q', S' 및 T' 중 하나에 부착되고, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, (C1-C20)알콕시카르보닐, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시카르보닐로 구성된 그룹에서 선택되며; 및
    M'은 1, 2 또는 3의 정수이고, N'은 1, 2 또는 3의 정수이며, M'+N'=4인, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  5. 제2항 또는 제4항에 있어서, A1, A2, A3, B, C, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R1’, R2’, R3’, R4’, R5’, R6’, R7’, R8’, R9’, R10’ 및 R11’ 각각에 포함된 하나 이상의 하이드록실 그룹, 카르복실 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 (C1-C22)알킬, (C1-C22)알콕시, (C1-C22)알킬카르보닐, (C1-C22)알콕시카르보닐, (C6-C22)아릴, (C6-C22)아릴옥시, (C6-C22)아릴카르보닐, (C6-C22)아릴옥시카르보닐, 글루코실, 아세트아미드글루코실, 갈락토사민, N-아세틸 갈락토사민, 트리((C1-C22)알킬)실릴 및 트리((C1-C22)알콕시)실릴로 구성된 그룹에서 선택된 말단 보호 그룹 RP로 선택적으로 보호되고; 및
    상기 지지체 물질은 실리카, 실리카겔, 글라스, 세라믹, 폴리머, 셀룰로스 및 이들의 조합으로 구성된 그룹에서 선택되는, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  6. 제2항 또는 제4항에 있어서, 식 AIV 내지 식 AXIII 및 식 BIV 내지 BXIV 중 하나에 표시되는 구조를 가지며,



    A1, A2, A3, A4, F, G, H, I, B, C, P, Q, S, T, R6, R7, m, n 및 M은 제2항에 정의된 바와 같고,
    RING I 및 RING II는 각각 4, 5, 6, 7, 8 또는 9원 고리이며;
    A4’는 RING I의 임의의 원자에 부착되고, A4’, A5’ 및 A6’은 각각 -R1’, -O-R1’, -S-R1’, -C(O)-R1’, -C(O)O-R1’, -O-C(O)-R1’, -C(O)NH-R1’, -C(O)NR2’-R1’, -NH-C(O)-R1’, -NR2’-C(O)-R1’, -O-P(O)2-O-R1’, -OP(O)(S)-O-R1’, -O-P(O)-O-R1’, -NH-R1’, -NR2’-R1’, -(CH2)r'-NH-R1’, -(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)O-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-C(O)-R1’, -(CH2)r'-C(O)-R1’; -(CH2)r'-C(O)O-R1’; -(CH2)r'-O-C(O)-R1’, -(CH2)r'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NR2’-C(O)-(CH2)s'-R1’, -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; R1’ 및 R3’ 각각은 수소, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O) -(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 리간드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 저분자, 항체, 항체 단편, 폴리에틸렌글리콜, 탄수화물, 항체, 항체 단편, 클로로퀸, 알칼로이드 및 타게팅 모이어티로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고, R1’ 및 R3' 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹 및 아미노 그룹은 선택적으로 보호되고; R2’, R4’, R5’ 및 R6’은 각각 독립적으로 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, a (C1-C12)알콕시, a (C6-C16)아릴 또는 (C6-C16)아릴옥시이며; r', s', p' 및 q' 각각은 1 내지 22의 정수이고;
    여기서, R12’는 RING II의 임의의 원자에 부착되고 -H, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH2, -(C6-C50)아릴렌-NH2, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-인산, -(C3-C50)시클로알킬렌-인산, -(C6-C50)아릴렌-인산으로 구성된 그룹 중에서 선택되고; R12’에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 보호되는, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  7. 제2항에 있어서, F, G, H 및 I는 각각 탄소이고, m은 1이며 n은 3이고, B는 G 또는 H에 부착되며, P, Q, S 및 T는 각각 탄소이고, R6은 Q 및 S 중 하나에 부착되며;
    상기 보호 그룹 RP는 벤질옥시카르보닐 (Cbz), tert-부틸디메틸실릴 (TBS), 4,4'-디메톡시트리틸 (DMTr), t-부틸옥시카르보닐 (Boc), 벤질 (Bn) 및 벤질옥시 (BnO)로 구성된 그룹에서 선택되고;
    C는 각 발생 시 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, 할로겐화 (C1-C12)알킬 및 할로겐화 (C1-C12)알콕시로 구성된 그룹에서 선택되며;
    B는 각 발생 시 -(C1-C22)알킬렌-OH, -O-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C16)알킬렌-O-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)NH2, -O-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C16)알킬렌-O-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)NH2, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-CN, -(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-OH, -(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-NH2, -(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-C(O)OH, 및 -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-O-P(-N(C1-C16 알킬)2)-O-(C1-C16)알킬렌-CN으로 구성된 그룹에서 선택되고,
    A1, A2 및 A3은 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, 선형 또는 분지형 -(C6-C22)알킬, 선형 또는 분지형 -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -O-(C1-C22)알킬, -(C6-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸, 및 식 AIII에 표시되는 치환기로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이고,
    Y는 탄소, 질소, 산소 및 황으로 구성된 그룹에서 선택되고; P, Q, S 및 T는 각각 탄소이며;
    각 R3, R4 및 R5는 각각 존재하지 않거나 -H, -OH, 선형 또는 분지형 -(C6-C22)알킬, 선형 또는 분지형 -(C2-C22)알케닐, -(C1-C22)알킬렌-OH, -(C3-C22)시클로알킬, -(C3-C22)시클로알케닐, -(C1-C22)알킬렌-(C3-C22)시클로알킬, -(C1-C22)알킬렌-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-R1, -(C1-C22)알킬렌-COOR1, -O-(C1-C22)알킬, -(C6-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-NR2-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -(C1-C22)알킬렌-(C1-C6 알킬렌 옥시드)(1-20)-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-아다만틸, -C(O)NH-R1, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-OH, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-NH2, -(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-O-P(-N(C1-C22 알킬)2)-O-(C1-C22)알킬렌-CN, 치환 또는 치환되지 않은 피롤, 치환 또는 치환되지 않은 피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 옥사졸, 치환 또는 치환되지 않은 티아졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피롤리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸린, 치환 또는 치환되지 않은 벤조피라졸리딘, 치환 또는 치환되지 않은 벤조이미다졸, 치환 또는 치환되지 않은 벤조옥사졸 및 치환 또는 치환되지 않은 벤조티아졸로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이고,
    R7은 각 발생 시 P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, 존재하지 않거나 수소, 할로겐 원자, 히드록실, (C1-C20)알킬, (C1-C20)알콕시, 할로겐화 (C1-C20)알킬 및 할로겐화 (C1-C20)알콕시로 구성된 그룹에서 선택되며;
    M은 0, 1, 2 또는 3의 정수이고;
    R6은 P, Q, S 및 T 중 하나에 부착되고, -(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-O-, -O-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C16)알킬)-(C1-C16)알킬렌-C(O)-N((C1-C16)알킬)-, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C16)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-O-, -N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -N((C1-C16)알킬)-C(O)-(C1-C16)알킬렌-N((C1-C16)알킬)-C(O)-, -(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-, -(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C16)알킬렌-NH-C(O)-로 구성된 그룹에서 선택되는, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  8. 제4항에 있어서, 식 BXV 내지 식 BXXIX 중 하나에 표시되는 구조를 가지며,



    A1’ 및 A2’는 각각 -R1’, -O-R1’, -S-R1’, -C(O)-R1’, -C(O)O-R1’, -O-C(O)-R1’, -C(O)NH-R1’, -C(O)NR2’-R1’, -NH-C(O)-R1’, -NR2’-C(O)-R1’, -O-P(O)2-O-R1’, -OP(O)(S)-O-R1’, -O-P(O)-O-R1’, -NH-R1’, -NR2’-R1’, -(CH2)r'-NH-R1’, -(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-C(O)O-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -C(O)-(CH2)r'-NR2’-C(O)-R1’, -(CH2)r'-C(O)-R1’; -(CH2)r'-C(O)O-R1’; -(CH2)r'-O-C(O)-R1’, -(CH2)r'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)- NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’, -(CH2)r'-NR2’-C(O)-(CH2)s'-R1’, -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-C(O)-NH-(CH2)s'-R1’)(-C(O)-NH-(CH2)q'-R3’), -N(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’(-(CH2)r'-NH-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NH-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CH(-(CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)(-(CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’), 및 -CR4’((CH2)r'-NR5’-C(O)-(CH2)s'-R1’)((CH2)p'-NR6’-C(O)-(CH2)q'-R3’)로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이고; R1’ 및 R3’은 각각 수소, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-(C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-인산 에스테르 그룹, 인산디에스테르 그룹, 포스포라미다이트 그룹, 포화지방산 그룹, 불포화 지방산 그룹, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 리간드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 저분자, 항체, 항체 단편, 폴리에틸렌글리콜, 항체, 항체 단편, 클로로퀸, 알칼로이드 및 타게팅 모이어티로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며, R1’ 및 R3’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹 및 아미노 그룹은 선택적으로 보호되고; R2’, R4’, R5’ 및 R6’은 각각 독립적으로 할로겐 원자, (C1-C12)알킬, (C1-C12)알콕시, (C1-C12)알콕시카르보닐, (C6-C16)아릴 또는 (C6-C16)아릴옥시카르보닐이며; r', s', p' 및 q' 각각은 1 내지 22의 정수이고;
    M'은 1, 2 또는 3의 정수이며, n'은 1, 2 또는 3의 정수이고, m'+n’=4이며;
    각 B'는 히드록실, -C(O)OH, -(C1-C30)알콕시, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-H (여기서, r'은 1 내지 22의 정수임), -C(O)-NH-[(C1-C30)알킬렌-O]r'-(C1-C30)알킬렌-C(O)-OH (여기서, r'은 1 내지 22의 정수임), -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-(C6-C50)아릴렌-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN, 지질, PEG, 스테로이드, 친유성, 탄수화물, 콜레스테롤, 아다만트네, 아미노산, 펩티드, 클로로퀸 및 알칼로이드로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고;
    각 R7’은 -O-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -P(O)2-O-, -O-P(O)2-O-, -P(O)(S)-O-, -O-P(O)(S)-O-, -O-P(O)-O-, -(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-O-, -O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-O-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -N((C1-C20)알킬)-C(O)-(C1-C30)알킬렌-N((C1-C20)알킬)-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-, -(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-(C1-C30)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)2-O-, -(C1-C30)알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH-, -NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-O-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)-NH-, -(C3-C50)시클로알킬렌 -P(O)2-O-, -(C3-C50)시클로알킬렌-O-P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-O-, -O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-NH-, -NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C6-C50)아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C6-C50)아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)-NH-, -(C6-C50)아릴렌 -P(O)2-O-, -(C6-C50)아릴렌-O-P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-NH-, -NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-, -C(O)-O-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-O-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C3-C50) 시클로알킬렌-, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-, -C(O)-N((C1-C20)알킬)-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-N((C1-C20)알킬)-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C6-C50) 아릴렌-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)-NH-, -(C5-C50)헤테로아릴렌 -P(O)2-O-, -(C5-C50)헤테로아릴렌-O-P(O)2-O-로 구성된 그룹에서 선택되고; 각 R8’은 -H, 히드록실, -(C1-C30)알킬, -(C3-C50)시클로알킬, -(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C3-C50)시클로알킬렌-NH2, -(C6-C50)아릴렌-NH2, -(C1-C30)알콕시, -(C3-C50)시클로알콕시, -(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-(C1-C30)알킬, -OC(O)(C1-C30)알킬, -C(O)-O-(C1-C30)알킬, -C(O)-(C3-C50)시클로알킬, -OC(O)-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-O-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)- (C6-C50)아릴옥시, -OC(O)-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-O-(C6-C50)아릴옥시, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴, -(C1-C30)알킬렌-인산, -(C3-C50)시클로알킬렌-인산, -(C6-C50)아릴렌-인산로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택된 치환기이며; R8’ 각각에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 말단 보호 그룹에 의해 보호되며; 및
    각 R10’은 히드록실, -C(O)OH, -P(O)2-OH, -P(O)-OH, -P(O)(S)-OH, -CN, -(C1-C30)알킬렌-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -(C6-C50)아릴렌-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌- C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌- NH2, -(C1-C30)알킬렌-O-C(O)-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C3-C50)시클로알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C6-C50)아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C5-C50)헤테로아릴렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)2-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)2-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)2-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)2-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-CN, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-C(O)OH, -(C1-C30)알킬렌-C(O)-NH-(C1-C30)알킬렌-O-P(-N(C1-C16알킬)2)-O-(C1-C30)알킬렌-NH2, -(C1-C30)알킬렌 -P(O)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)-OH, -(C5-C50) -헤테로아릴렌-P(O)-OH, -(C1-C30)알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C3-C50)시클로알킬렌-P(O)(S)-OH, -(C6-C50)아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C5-C50)헤테로아릴렌-P(O)(S)-OH, -(C1-C30)알킬렌-CN, -(C3-C50)시클로알킬렌-CN, -(C6-C50)아릴렌-CN, -(C5-C50)헤테로아릴렌-CN로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되고, R10’에 포함된 하나 이상의 히드록실 그룹, 카르복시 그룹, 아미노 그룹, 니트릴 그룹 및 인산 그룹은 선택적으로 지지체 물질에 연결되거나 말단 보호 그룹에 의해 보호되는, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  9. 제2항 또는 제4항에 있어서, 다음 구조를 가지며,






































    는 지지체 물질을 나타내는, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물에 포함된 적어도 하나의 수소 원자는 듀테륨 원자로 치환되는, 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 한 항에 따른 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물에서 유도될 수 있는 전달 강화 화합물(DEC) 모이어티와 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드를 포함하는, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  12. 제11항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물 모이어티는 직접 결합, -O-, -S-, -C(O)-, -NH-, -N((C1-C12)알킬)-, -N((C1-C12)알킬)-C(O)-O-, -O-C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-O-, -C(O)-NH-, -OP(O)2O-, -P(O)(O-)O-, -OP(O)O-, -OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-, -S(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-(C1-C22)알킬렌-NH-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(O-)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(O-)O-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-, -O-P(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -O-P(O)-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -OP(O)(S)O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O- 및 -O-S(O)-(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-로 구성된 그룹에서 선택된 적어도 하나의 연결 모이어티를 통해 올리고뉴클레오티드에 연결되고; 및
    상기 올리고뉴클레오티드는 안티센스 올리고뉴클레오티드 (ASO), 안티센스 RNA, 짧은 간섭 RNA (siRNA), 마이크로 RNA (miRNA), 작은 활성화 RNA (saRNA), 이중 사슬 RNA (dsRNA) 및 작은 가이드 RNA (sgRNA)로 구성된 그룹에서 선택되는, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  13. 제11항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오티드는 SEQ ID NO 1 내지 53에 표시된 서열의 적어도 일부를 포함하는, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  14. 제11항에 있어서, 식 AA에 표시되는 구조를 포함하고,

    상기 전달 강화 화합물(DEC) 모이어티는 제1항 내지 제9항 중 어느 하나에 따른 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물로부터 유래되고 적어도 하나의 올리고뉴클레오티드에 직접 또는 간접적으로 연결되는, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  15. 제14항에 있어서, 상기 DEC적어도 하나의 첫 번째 연결 모이어티를 통해 상기 올리고뉴클레오티드에 연결되는, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  16. 제14항에 있어서, 상기 TM은 적어도 하나의 두 번째 연결 모이어티를 통해 상기 DEC에 연결되는, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  17. 제14항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 연결 모이어티와 제2 연결 모이어티는 각각 직접 결합, -O-, -S-, -C(O)-, -NH-, -N((C1-C12)알킬)-, -N((C1-C12)알킬)-C(O)-O-, -O-C(O)-, -C(O)-O-, -O-C(O)-O-, -C(O)-NH-, -OP(O)2O-, -OP(O)O-, -OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-, -S(O)-O-, -(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-, -(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-(C1-C22)알킬렌-NH-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)O-, -O-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-O-, -C(O)-O-(C1-C22)알킬렌-O-C(O)-, -C(O)-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-, -NH-C(O)-(C1-C22)알킬렌-C(O)-NH-, -NH-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -NH-(C1-C22)알킬렌-CH((C1-C22)알킬렌-OH)-OP(O)2O-, -NH-(C1-C22)알킬렌-CH((C1-C22)알킬렌-OH)-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -C(O)-NH-(C1-C22)알킬렌-NH-C(O)-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O-, -(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-, -O-P(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)2O-, -O-P(O)-O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)O-, -OP(O)(S)O-(C1-C22)알킬렌-OP(O)(S)O-, -O-S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-O-S(O)2-O-, -S(O)2-O-(C1-C22)알킬렌-S(O)2-O- 및 -O-S(O)-(C1-C22)알킬렌-S(O)-O-로 구성된 그룹에서 독립적으로 선택되며; 및/또는
    상기 올리고뉴클레오티드는 짧은 간섭 RNA(siRNA), 작은 활성화 RNA(saRNA), 마이크로RNA(miRNA), 안티센스 올리고뉴클레오티드(ASO) 및 작은 가이드 RNA(sgRNA)로 구성된 그룹에서 선택되는, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  18. 제14항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 타게팅 모이어티는 리간드, 펩티드, 핵산, 올리고뉴클레오티드, 앱타머, 지질, 지방산, 저분자, 폴리에틸렌글리콜, 아미노산, 콜레스테롤, 탄수화물, 및 항체 또는 항체 단편으로 구성된 그룹에서 선택되는 하나 이상의 모이어티인, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  19. 제13항에 있어서, 상기 식 AAI 내지 AAXXIV중 하나에 표시되는 구조를 가지며,






    L은 연결 모이어티를 나타내고, 는 올리고뉴클레오티드 전달 강화 화합물을 나타내며, 기호 는 각 사슬이 상호 교환 가능한 센스 사슬 또는 안티센스 사슬을 나타내는 각 끝에서 독립적으로 대칭 또는 비대칭인 이중 사슬 올리고뉴클레오티드를 나타내고; 기호 는 단일 사슬 올리고뉴클레오티드를 나타내고, a, b 및 c는 각각 독립적으로 1~50의 정수인, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  20. 제11항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 전달 강화 화합물 모이어티, 연결 모이어티, 타게팅 모이어티 및/또는 올리고뉴클레오티드에 포함된 적어도 하나의 수소 원자가 듀테륨 원자로 치환되는, 올리고뉴클레오티드 전달제.
  21. 약학적 조성물로서, 상기 조성물은
    a) 제11항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 올리고뉴클레오티드 전달제; 및
    b) 선택적으로, 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 용매, 희석제, 안정제, 분산제, 완충액, 상용화제, 방부제 및 이들의 조합으로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상의 성분을 포함하는, 약학적 조성물.
  22. 제21항에 따른 약학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 표적 유전자의 발현을 조절하는 방법.
  23. 제22항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오티드 또는 상기 표적 유전자는 SEQ ID NO 1 내지 53에 표시된 서열의 적어도 일부에 표시된 서열의 적어도 일부를 포함하는, 방법.
  24. 제22항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 상기 표적 유전자의 발현을 증가시키는, 방법.
  25. 제22항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 상기 표적 유전자의 발현을 감소시키는, 방법.
  26. 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 포유동물인, 방법.
  27. 제26항에 있어서, 상기 포유동물은 설치류인, 방법.
  28. 제27항에 있어서, 상기 설치류는 마우스인, 방법.
  29. 제27항에 있어서, 상기 설치류는 쥐인, 방법.
  30. 제26항에 있어서, 상기 포유동물은 비인간 영장류인, 방법.
  31. 제26항에 있어서, 상기 포유동물은 인간인, 방법.
  32. 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 표적 유전자는 질환 또는 장애와 연관되는, 방법.
  33. 제32항에 있어서, 상기 표적 유전자는 중추 신경계 (CNS), 뇌, 척수, 간, 폐, 신장, 장, 췌장, 담낭, 심장, 림프절, 비장, 위, 방광, 근육 또는 뼈의 질환 또는 장애와 연관되는, 방법.
  34. 제33항에 있어서, 상기 질환은 암인, 방법.
  35. 세포를 제21항에 따른 약학적 조성물과 접촉시키는 단계를 포함하는, 표적 유전자의 발현을 조절하는 방법.
  36. 제35항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오티드 또는 상기 표적 유전자는 SEQ ID NO: 1 내지 53에 표시된 서열의 적어도 일부에 표시된 서열의 적어도 일부를 포함하는, 방법.
  37. 제35항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 상기 표적 유전자의 발현을 증가시키는, 방법.
  38. 제35항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 상기 표적 유전자의 발현을 감소시키는, 방법.
  39. 제35항에 있어서, 상기 세포는 포유동물 세포인, 방법.
  40. 제39항에 있어서, 상기 포유류 세포는 마우스 세포인, 방법.
  41. 제29항에 있어서, 상기 포유류 세포는 쥐 세포인, 방법.
  42. 제39항에 있어서, 상기 포유류 세포는 비인간 영장류 세포인, 방법.
  43. 제39항에 있어서, 상기 포유류 세포는 인간 세포인, 방법.
  44. 제35항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 표적 유전자는 질환 또는 장애와 연관되는, 방법.
  45. 제44항에 있어서, 상기 표적 유전자는 중추 신경계(CNS), 뇌, 척수, 간, 폐, 신장, 장, 췌장, 담낭, 심장, 림프절, 비장, 위, 방광, 근육 또는 뼈의 질환 또는 장애와 연관되는, 방법.
  46. 제44항에 있어서, 상기 질환은 암인, 방법.

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