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KR20230028710A - Composition for preventing, improving or treating of muscular disease containing Angelica dahurica extract - Google Patents

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KR20230028710A
KR20230028710A KR1020220104666A KR20220104666A KR20230028710A KR 20230028710 A KR20230028710 A KR 20230028710A KR 1020220104666 A KR1020220104666 A KR 1020220104666A KR 20220104666 A KR20220104666 A KR 20220104666A KR 20230028710 A KR20230028710 A KR 20230028710A
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KR
South Korea
Prior art keywords
muscle
composition
extract
active ingredient
present
Prior art date
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Ceased
Application number
KR1020220104666A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
안지윤
김영인
서효덕
엄민영
이현정
정창화
하태열
함정훈
Original Assignee
한국식품연구원
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Filing date
Publication date
Application filed by 한국식품연구원 filed Critical 한국식품연구원
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Abstract

The present invention relates to a composition for preventing, improving or treating muscular diseases containing angelica dahurica extract as an active ingredient; a composition for strengthening muscle; a composition for promoting muscle differentiation; and a composition for enhancing athletic performance. The composition can be usefully used for preventing, improving, or treating muscle diseases by promoting muscle differentiation and inhibiting muscle atrophy factors and muscle differentiation inhibitors.

Description

구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물{Composition for preventing, improving or treating of muscular disease containing Angelica dahurica extract}Composition for preventing, improving or treating muscular disease containing Angelica dahurica extract}

본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물; 근육강화용 조성물; 근육분화 촉진용 조성물; 및 운동능력 증진용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for the prevention, improvement or treatment of muscle diseases, comprising an extract of copperhead as an active ingredient; composition for muscle strengthening; a composition for promoting muscle differentiation; And it relates to a composition for enhancing athletic performance.

근육(muscle)은 인체에서 가장 구성량이 많은 조직으로서 인체의 기능적 능력(functional capacity)을 유지하고, 대사성 질환을 예방하기 위해서는 적정 근육량의 확보가 필수적으로 요구된다. 근육 크기(muscle size)는 근육 내에서 일어나는 동화작용(anabolism)이나 이화작용(catabolism)을 유도하는 세포 내 신호전달 과정(signalling pathways)에 의해 조절된다. 근육 단백질의 분해보다 합성을 유도하는 신호전달 반응이 많이 일어날 경우 근육 단백질 합성이 증가되며, 결과적으로 근육의 크기가 증가하는 근 비대(hypertrophy)나 근섬유 수의 증가(hyperplasia)가 발생한다(The Korea Journal of Sports Science, 20(3): 1551-1561, 2011).Muscle is a tissue with the largest composition in the human body, and it is essential to secure an appropriate amount of muscle in order to maintain the functional capacity of the human body and prevent metabolic diseases. Muscle size is regulated by intracellular signaling pathways that induce anabolism or catabolism in muscle. When more signal transduction reactions that induce muscle protein synthesis than degradation occur, muscle protein synthesis increases, resulting in hypertrophy, which increases muscle size, or increases in the number of muscle fibers (hyperplasia) (The Korea Journal of Sports Science, 20(3): 1551-1561, 2011).

신체는 노화하면서 구성성분의 변화로써 체지방과 체단백질의 재분포가 일어나며, 약 50세가 되면 근세포 내 단백질의 합성속도가 분해속도보다 느려져 근육이 급격하게 퇴화를 시작하게 되며, 근육 감소 질환에 노출될 수 있다.As the body ages, redistribution of body fat and body proteins occurs as a result of changes in composition. At the age of about 50, the synthesis rate of protein in muscle cells slows down compared to the rate of degradation, and muscles begin to degenerate rapidly, and are exposed to muscle loss diseases. can

근육 감소 질환의 하나인 근육 감소증은 평소 자기 체질량의 약 13~24%가 감소한 상태를 말하는 것으로서, 단백질 함량, 섬유 직경, 근력 생산 및 피로 저항(fatigue resistance)의 감소를 나타낸다. 근육 감소증은 패혈증, 암, 신부전증, 글루코코르티코이드의 과다, 신경제거, 근육의 미사용 그리고 노화과정 등 다양한 원인에 의해 발생한다. 주로, 노화가 진행됨에 따라 일어나는 골격근의 양과 질의 점진적 감소 및 부적절한 식이에너지 섭취에 따른 지방과 체지방성분을 포함하는 체중감소 등을 원인으로 꼽을 수 있으며, 흔히 노화에 따른 것으로 연령과의 상관관계가 깊다.Sarcopenia, which is one of muscle loss diseases, refers to a state in which about 13 to 24% of one's usual body mass is reduced, and represents a decrease in protein content, fiber diameter, muscle strength production, and fatigue resistance. Sarcopenia is caused by a variety of causes, including sepsis, cancer, renal failure, excess glucocorticoids, denervation, muscle disuse, and the aging process. Mainly, the gradual decrease in the quantity and quality of skeletal muscle as aging progresses and weight loss including fat and body fat components due to inadequate dietary energy intake can be cited as causes, and it is often caused by aging and is closely related to age. .

근육 감소증은 단백질 합성 및 분해 사이의 불평형으로부터 발생한다. 근육 감소증이 있으면 행동량이 현격하게 줄어 정신건강을 해칠뿐만 아니라, 생활의 만족도도 떨어지며, 용이한 일상생활에서도 쉽게 부상을 입고 심각한 중상에 이르기도 한다.Sarcopenia results from an imbalance between protein synthesis and breakdown. If you have sarcopenia, the amount of action is significantly reduced, which not only harms mental health, but also reduces satisfaction with life, and easily gets injured even in easy daily life and leads to serious serious injuries.

또한, 과도한 운동은 근육의 피로와 손상을 가져오고 운동 능력을 떨어뜨린다. 근육 손상에는 타박상(멍), 열상, 국소 빈혈, 좌상(strain) 및 골격근에 대한 심각한 손상이 포함된다. 이러한 손상은 굉장한 통증을 유발할 뿐 아니라, 손상을 입은 사람은 운동 및 작업을 지속할 수 없으며, 정상적인 일상 활동조차 할 수 없도록 만들 수 있다. 골격근에 심각한 손상이 있는 경우, 좌상이 가장 흔한데, 근육 좌상 손상은 근육-건 유닛의 파괴를 특징으로 한다. 이러한 근육-건 유닛의 파괴는 근육 어느 부위에서나 발생할 수 있다. 좌상은 직업적으로 또는 스포츠 의학 전문가에 의해 처치되는 모든 손상의 30% 이상을 차지한다.In addition, excessive exercise causes muscle fatigue and damage and reduces exercise capacity. Muscle injuries include contusion (bruise), laceration, ischemia, strain, and severe damage to skeletal muscle. Not only does this damage cause great pain, but it can also make it impossible for the injured person to continue to exercise, work, or even perform normal daily activities. With severe injuries to skeletal muscle, strains are the most common, and muscle strain injuries are characterized by destruction of muscle-tendon units. Disruption of these muscle-tendon units can occur anywhere in the muscle. Strain accounts for more than 30% of all injuries treated professionally or by sports medicine professionals.

근육 손상을 감소시키거나 또는 근육 조직 회복을 빠르게 할 수 있는 처치는 운동 후 근력 발생 회복을 빠르게 할 가능성이 있다. 이는 또한 질병 후 근육 회복을 도울 수도 있다.Treatments that can reduce muscle damage or speed up muscle tissue recovery have the potential to speed recovery of muscle power generation after exercise. It may also aid in muscle recovery after an illness.

그러나, 최근 외모와 다이어트에 관한 관심이 높아지면서 연령에 상관없이 급격한 체중감소로 근육 감소증이 유발될 수도 있고, 격한 운동으로 근육이 손상될 수 있다. 이에 일반적인 근육 감소 질환으로 인한 근육 감소를 치료하거나 근육을 증가시키기 위한 연구와 노력이 집중되고 있으며, 여전히 근육 감소 질환의 치료와 근육강화에 대한 연구가 요구되고 있는 실정이다.However, with the recent increase in interest in appearance and diet, rapid weight loss may cause sarcopenia regardless of age, and intense exercise may damage muscles. Therefore, studies and efforts are being focused on treating muscle loss caused by general muscle loss diseases or increasing muscles, and research on the treatment of muscle loss diseases and muscle strengthening is still required.

본 발명의 목적은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다. An object of the present invention is to provide a food composition for the prevention or improvement of muscle diseases, comprising a copper rod extract as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 목적은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of muscle diseases comprising a copper rod extract as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 목적은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육강화용 조성물을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a composition for strengthening muscles containing copper rod extract as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 목적은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육분화 촉진용 조성물을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a composition for promoting muscle differentiation comprising copper rod extract as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 목적은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동능력 증진용 조성물을 제공하는 것이다. Another object of the present invention is to provide a composition for enhancing exercise capacity comprising copper bamboo extract as an active ingredient.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention provides a food composition for the prevention or improvement of muscle disease containing copper rod extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of muscle diseases, comprising a copper rod extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육강화용 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a composition for strengthening muscles containing copper rod extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육분화 촉진용 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a composition for promoting muscle differentiation comprising copper bamboo extract as an active ingredient.

또한, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동능력 증진용 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a composition for enhancing exercise capacity containing copper rod extract as an active ingredient.

본 발명에 따른 조성물은 근육분화를 증진 또는 회복시켜 근육을 강화시키고, 근위축을 감소시켜 근육 감소를 억제하며, 운동수행능력을 증진 또는 개선시키는 효과가 있어, 근육 질환을 예방, 개선 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있다.The composition according to the present invention has the effect of enhancing or restoring muscle differentiation to strengthen muscles, reducing muscle atrophy to suppress muscle loss, and enhancing or improving exercise performance, which is useful in preventing, improving or treating muscle diseases. can be useful

도 1은 구릿대 추출물의 처리에 따른 세포생존율을 측정한 결과이다.
도 2는 분화 유도된 마우스 유래 근아세포에 구릿대 추출물을 처리한 후, (a) 미오신 중쇄(myosin heavy chain, MHC)에 대한 면역 염색 결과; 및 (b) 융합지수를 계산한 결과이다.
도 3는 분화 유도된 마우스 유래 근아세포에 구릿대 추출물을 처리한 후, qPCR을 통해 Atrogin-1, MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1) 및 Myostatin의 mRNA 발현량을 확인한 결과이다.
도 4는 마우스 동물모델에 구릿대 추출물을 급여한 후, 악력(Grip Strength)을 측정한 결과이다.
Figure 1 is the result of measuring the cell viability according to the treatment of copper rod extract.
FIG. 2 shows the result of immunostaining for myosin heavy chain (MHC) after treating the myoblasts derived from mice derived from differentiation with copper rod extract; and (b) the result of calculating the convergence index.
Figure 3 is the result of confirming the mRNA expression levels of Atrogin-1, MuRF-1 (Muscle RING-finger protein-1) and Myostatin through qPCR after treating the copper rod extract to the differentiated mouse-derived myoblasts.
Figure 4 is a result of measuring grip strength after feeding copper rod extract to a mouse animal model.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 구릿대(Angelica dahurica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.The present invention provides a food composition for preventing or improving muscle diseases comprising an extract of Angelica dahurica as an active ingredient.

본 발명의 용어, "구릿대"는 산형과에 속하는 여러해살이풀로서, 동북아시아 지역에 분포해 있으며, 주로 산과 계곡의 가장자리에서 자란다. 높이는 1~1.5m 정도이고 살이 찐 뿌리줄기에는 수염뿌리가 많이 돋아 있다. 잎은 여러갈래로 갈라져나오며 타원형으로 길이는 5~10cm 정도이다. 6~8월에 흰색 꽃이 피며 타원형의 열매는 10월을 전후하여 결실한다. 한방에서 뿌리를 백지라 한다. The term of the present invention, "Kuritdae" is a perennial plant belonging to the umbel family, distributed in Northeast Asia, and mainly grows at the edges of mountains and valleys. The height is about 1~1.5m, and many beard roots sprout on the fat rhizome. The leaves are divided into several branches, oval in shape, and 5 to 10 cm long. White flowers bloom from June to August, and elliptical fruits bear fruit around October. In oriental medicine, the root is called baekji.

본 발명에 따른 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리하는 방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된 "추출물"은 적절한 용매를 이용하여 시계꽃으로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 구릿대의 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다.The extract according to the present invention may be obtained by extraction and separation from nature using an extraction and separation method known in the art, and the "extract" defined in the present invention is extracted from passionflower using an appropriate solvent. And, for example, it includes all of the crude extract, polar solvent-soluble extract, or non-polar solvent-soluble extract of copper stem.

상기 구릿대로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. Any suitable solvent for extracting the extract from the copper rod may be used as long as it is a pharmaceutically acceptable organic solvent, and water or an organic solvent may be used, but is not limited thereto. For example, purified water, methanol ( Alcohols having 1 to 4 carbon atoms including methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, etc., acetone, ether, benzene, chloroform ( chloroform), ethyl acetate, methylene chloride, hexane, and cyclohexane, etc. may be used alone or in combination.

추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다. 본 발명의 구릿대 추출물의 제조 방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다.As an extraction method, any one of methods such as hot water extraction, cold brew extraction, reflux cooling extraction, solvent extraction, steam distillation, ultrasonic extraction, elution, and compression may be selected and used. In addition, the desired extract may be additionally subjected to a conventional fractionation process or may be purified using a conventional purification method. There is no limitation on the preparation method of the copper rod extract of the present invention, and any known method may be used.

예를 들면, 본 발명의 조성물에 포함되는 구릿대 추출물은 상기 열수 추출 또는 용매 추출법으로 추출된 1차 추출물을 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다. 또한, 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.For example, the copper rod extract included in the composition of the present invention can be prepared in a powder state by an additional process such as vacuum distillation and freeze drying or spray drying of the primary extract extracted by the hot water extraction or solvent extraction method. In addition, a fraction further purified from the primary extract using various chromatography methods such as silica gel column chromatography, thin layer chromatography, and high performance liquid chromatography. can also be obtained.

따라서, 본 발명에 있어서, 구릿대 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획물 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.Therefore, in the present invention, copper bamboo extract is a concept that includes all extracts, fractions, and purified products obtained in each step of extraction, fractionation, or purification, and dilutions, concentrates, or dried products thereof.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 근위축을 야기하는 Atrogin-1 및 MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1)의 발현을 억제하는 것일 수 있다. In one embodiment of the present invention, the composition may inhibit the expression of Atrogin-1 and MuRF-1 (Muscle RING-finger protein-1) that cause muscle atrophy.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 근육분화를 억제하는 Myostatin의 발현을 억제하는 것일 수 있다. In one embodiment of the present invention, the composition may inhibit the expression of Myostatin, which inhibits muscle differentiation.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 추출물은 0.1 μg/mL 내지 100 mg/mL의 농도인 것일 수 있고, 바람직하게는 0.1 μg/mL 내지 1 mg/mL의 농도인 것일 수 있으며, 보다 바람직하게는 0.1 μg/mL 내지 100 μg/mL의 농도인 것일 수 있고, 보다 바람직하게는 0.1 μg/mL 내지 10 μg/mL의 농도인 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. In one embodiment of the present invention, the extract may have a concentration of 0.1 μg / mL to 100 mg / mL, preferably a concentration of 0.1 μg / mL to 1 mg / mL, more preferably May be a concentration of 0.1 μg / mL to 100 μg / mL, more preferably a concentration of 0.1 μg / mL to 10 μg / mL, but is not limited thereto.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 추출물은 조성물 100 중량부에 대하여 0.1 내지 50 중량부로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. In one embodiment of the present invention, the extract may be included in 0.1 to 50 parts by weight based on 100 parts by weight of the composition, but is not limited thereto.

상기 근육 질환은 점진적인 근력감소로 인한 보행능력의 상실과 호흡 근력의 약화, 심장 기능의 약화 등을 특징으로 하는 진행성 질환으로서, 결국에는 신체의 장애를 가져와서 모든 일상생활을 남에게 의지하게 되는 만성적인 질환이다. 또한 근육 질환은 선천성 질환과 후천성 질환으로 나눌 수 있고, 이에 제한되지는 않으나, 긴장감퇴증(atony), 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육퇴화증, 근경직증, 근무력증, 악액질(cachexia) 또는 근육감소증(sarcopenia)인 것일 수 있다.The muscle disease is a progressive disease characterized by loss of walking ability due to gradual decrease in muscle strength, weakening of respiratory muscle strength, weakening of heart function, etc. is a human disease In addition, muscle diseases can be divided into congenital diseases and acquired diseases, but are not limited to, atony, muscular atrophy, muscular dystrophy, muscular dystrophy, muscle stiffness, myasthenia, cachexia ( cachexia) or sarcopenia.

본 발명의 식품 조성물은 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있으며, 기능성 식품, 건강기능식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용 가능하다.The food composition of the present invention may include all food in a conventional sense, and may be used interchangeably with terms known in the art, such as functional food and health functional food.

본 발명의 용어, "기능성 식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.The term of the present invention, "functional food" refers to food manufactured and processed using raw materials or ingredients having useful functionalities for the human body according to the Act on Health Functional Foods No. 6727, and "functional" means It refers to intake for the purpose of obtaining useful effects for health purposes, such as regulating nutrients with respect to structure and function or physiological action.

본 발명의 용어, "건강기능식품"은 건강보조의 목적으로 특정성분을 원료로 하거나 식품 원료에 들어있는 특정성분을 추출, 농축, 정제, 혼합 등의 방법으로 제조, 가공한 식품을 말하며, 상기 성분에 의해 생체방어, 생체리듬의 조절, 질병의 방지와 회복 등 생체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발휘할 수 있도록 설계되고 가공된 식품을 말하는 것으로서, 상기 건강식품용 조성물은 질병의 예방 및 질병의 회복 등과 관련된 기능을 수행할 수 있다. The term of the present invention, "health functional food" refers to a food manufactured and processed by methods such as extracting, concentrating, refining, mixing, etc., using specific ingredients as raw materials or specific ingredients contained in food raw materials for the purpose of health supplementation. It refers to a food designed and processed to sufficiently exert biological control functions such as biological defense, regulation of biological rhythm, prevention and recovery of disease, etc. It can perform related functions, etc.

본 발명의 조성물이 사용될 수 있는 식품의 종류에는 제한이 없다. 아울러, 본 발명의 조성물은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림 류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 추출물 및 이의 분획물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.There are no restrictions on the types of foods in which the composition of the present invention can be used. In addition, the composition of the present invention may be prepared by mixing suitable other auxiliary ingredients that may be included in food and known additives according to the selection of those skilled in the art. Examples of foods that can be added include meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, chewing gum, dairy products including ice cream, various soups, beverages, tea, drinks, alcoholic beverages, and Vitamin complexes, etc., can be prepared by adding the extract and its fractions according to the present invention to juices, teas, jellies, juices, etc. prepared as main components.

또한, 본 발명에 적용될 수 있는 식품에는 예컨대, 특수영양식품(예: 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예: 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예: 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예:스낵류), 유가공품(예: 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예: 과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면스프 등) 등 모든 식품을 포함할 수 있다.In addition, foods that can be applied to the present invention include, for example, special nutritional foods (e.g., formula milk, infant, baby food, etc.), processed meat products, fish meat products, tofu, jelly, noodles (e.g., ramen, noodles, etc.), health supplement food , seasonings (eg soy sauce, soybean paste, gochujang, mixed paste, etc.), sauces, confectionery (eg snacks), dairy products (eg fermented milk, cheese, etc.), other processed foods, kimchi, pickled foods (various types of kimchi, pickled vegetables, etc.) ), beverages (eg fruit, vegetable drinks, soy milk, fermented beverages, etc.), and natural seasonings (eg, ramen soup, etc.).

본 발명의 건강기능식품 조성물이 음료의 형태로 사용될 경우에는 통상의 음료와 같이 여러 가지 감미제, 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.When the health functional food composition of the present invention is used in the form of a beverage, it may contain various sweeteners, flavoring agents, or natural carbohydrates as additional components, like conventional beverages. In addition to the above, the health functional food composition of the present invention contains various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and its salts, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, and glycerin. , alcohol, a carbonating agent used in carbonated beverages, and the like. In addition, it may contain fruit flesh for the manufacture of natural fruit juice, fruit juice beverages and vegetable beverages.

또한, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of muscle diseases, comprising a copper rod extract as an active ingredient.

본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에서 용어, "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제, 기제, 부형제, 윤활제 등 당업계에 공지된 것이라면 제한없이 사용할 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention may further include a pharmaceutically acceptable carrier. As used herein, the term "pharmaceutically acceptable" means that it exhibits non-toxic properties to cells or humans exposed to the composition. The carrier may be used without limitation as long as it is known in the art such as a buffer, a preservative, a pain reliever, a solubilizer, an isotonic agent, a stabilizer, a base, an excipient, a lubricant, and the like.

또한, 본 발명의 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 나아가, 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태의 피부 외용제의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.In addition, the pharmaceutical composition of the present invention is formulated in the form of oral formulations such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, external preparations, suppositories and sterile injection solutions according to conventional methods, respectively. can be used Furthermore, it may be used in the form of ointments, lotions, sprays, patches, creams, powders, suspensions, gels, or skin external preparations in the form of gels. Carriers, excipients and diluents that may be included in the composition of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, gum acacia, alginates, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. When formulated, it is prepared using diluents or excipients such as commonly used fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants, and surfactants.

경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 구릿대 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, etc., and these solid preparations include at least one excipient, for example, starch, calcium carbonate, sucrose ( It is prepared by mixing sucrose, lactose, or gelatin. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Liquid preparations for oral use include suspensions, solutions for oral use, emulsions, and syrups. In addition to water and liquid paraffin, which are commonly used simple diluents, various excipients such as wetting agents, sweeteners, aromatics, and preservatives may be included. there is. Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, freeze-dried formulations, and suppositories. Propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, and injectable esters such as ethyl oleate may be used as non-aqueous solvents and suspending agents. As a base for the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogeratin and the like may be used.

본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명의 용어 "투여"란 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.The pharmaceutical composition of the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount. The term "administration" of the present invention means introducing a predetermined substance into a subject by an appropriate method, and the administration route of the composition may be administered through any general route as long as it can reach the target tissue. Intraperitoneal administration, intravenous administration, intramuscular administration, subcutaneous administration, intradermal administration, oral administration, topical administration, intranasal administration, intrapulmonary administration, intrarectal administration, but not limited thereto.

상기 용어, "개체"란 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 바람직하게는, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.The term "individual" refers to all animals such as rats, mice, livestock, and the like, including humans. Preferably, it may be a mammal including a human.

상기 용어, "약학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강 상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 투여는 상기 권장 투여량을 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.The term "pharmaceutically effective amount" means an amount that is sufficient to treat a disease at a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment and does not cause side effects, and the effective dose level is determined by the patient's gender, age, Factors including body weight, health condition, type of disease, severity, activity of the drug, sensitivity to the drug, method of administration, time of administration, route of administration, and rate of excretion, duration of treatment, drugs used in combination or concurrently, and other medical disciplines. It can be easily determined by a person skilled in the art according to well-known factors. Administration may be administered once a day at the recommended dose, or may be administered in several divided doses.

또한, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육강화용 조성물을 제공한다. In addition, the present invention provides a composition for strengthening muscles containing copper rod extract as an active ingredient.

본 발명의 용어, "근육강화"는 근육의 근력 및/또는 크기를 증가시키는 효과를 의미하며, 근육의 종류를 제한하지 않는다. 바람직하게는 근육량을 증가시키는 효과를 나타내고, 근육 감소를 억제시키는 효과를 나타내는 것을 특징으로 한다.As used herein, the term "muscle strengthening" refers to an effect of increasing muscle strength and/or size, and does not limit the type of muscle. Preferably, it exhibits an effect of increasing muscle mass and is characterized in that it exhibits an effect of inhibiting muscle loss.

상기 근육량의 증가는 근육의 성능을 향상시키는 것으로, 육체적 운동 및 지구력 향상을 통해 근육량을 증가시킬 수 있고, 근육 증가 효과를 가지는 물질을 체내에 투여하는 방식으로 근육량을 증가시킬 수 있다. 또한 상기 근육 감소는 근육량의 점진적 손실, 근육, 특히 골격근 또는 수의근 및 심장근육의 약화 및 퇴행을 특징으로 하며, 유전적 요인, 후천적 요인. 노화 등이 원인일 수 있다.The increase in muscle mass is to improve muscle performance, and can increase muscle mass through physical exercise and endurance improvement, and can increase muscle mass by administering a substance having a muscle increasing effect into the body. In addition, the muscle loss is characterized by a gradual loss of muscle mass, weakness and degeneration of muscles, especially skeletal or voluntary muscles and cardiac muscles, genetic factors, acquired factors. Aging may be the cause.

또한, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육분화 촉진용 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a composition for promoting muscle differentiation comprising copper bamboo extract as an active ingredient.

본 발명의 용어, "근육분화"는 근육을 형성하기 위한 과정으로서, 근육분화는 먼저 위성세포(satellite cell)가 활성화되고, 활성화된 위성세포가 근아세포(myoblast)로 분화된다(Morgan, JE, et al, 2003). 분화된 근아세포는 분열이 일어나고, 근아세포들의 융합(fusion)이 일어나 근관세포(myotube)로 발달하고, 이러한 근관세포들이 모여 근섬유(muscle fiber)를 형성하며, 근섬유는 다발을 이루어 최종적으로 근육을 형성하게 된다.The term of the present invention, "muscle differentiation" is a process for forming muscles, and muscle differentiation first activates satellite cells (satellite cells), and the activated satellite cells are differentiated into myoblasts (Morgan, JE, et al, 2003). Differentiated myoblasts divide, and fusion of myoblasts occurs to develop into myotubes. These myotubes gather to form muscle fibers, which are bundled to form muscles. will form

또한, 본 발명은 구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동능력 증진용 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a composition for enhancing exercise capacity containing copper rod extract as an active ingredient.

본 발명의 용어, "운동능력"은 일상생활이나 스포츠에서 볼 수 있는 신체동작을 외형적으로 달리기, 뛰기, 던지기, 헤엄치기 등으로 구분할 때, 상기 동작을 빠르게, 강하게, 정확하게, 오래, 능숙하게 할 수 있는 정도를 나타내는 것으로서, 운동수행능력은 근력, 민첩성 및 지구력 등의 인자로 규정된다. The term of the present invention, "exercise ability" refers to the ability to quickly, strongly, accurately, for a long time, and skillfully classify the body movements seen in daily life or sports into running, jumping, throwing, swimming, etc. As an indication of the degree to which one can perform, exercise performance is defined by factors such as muscular strength, agility, and endurance.

본 발명의 용어, "운동능력 증진"은 운동능력을 개선하거나 향상시키는 것을 말한다. 바람직하게는 상기 식품 조성물은 근력을 증가시키는 효과를 나타내고, 근 지구력을 증가시키는 효과를 나타내는 것을 특징으로 한다. 또한, 이에 제한되지는 않으나, 퇴행성 질환, 미토콘드리아 이상 질환, 지구력 저하증, 순발력 저하증, 무기력증, 근육 폐기 또는 우울증의 증상을 예방 또는 개선시키는 것일 수 있다.The term of the present invention, "exercise capacity enhancement" refers to improving or enhancing the exercise capacity. Preferably, the food composition exhibits an effect of increasing muscle strength, and is characterized in that it exhibits an effect of increasing muscle endurance. In addition, it may be to prevent or improve symptoms of, but not limited to, degenerative diseases, abnormal mitochondrial diseases, hypostamina, hypoacuity, lethargy, muscle wasting or depression.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are intended to explain the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited to these examples.

실시예 1. 실험방법Example 1. Experimental method

1.1. 통계적 분석1.1. statistical analysis

모든 연구결과는 GraphPad Prism 7 (GraphPad Software Inc., SanDiego, CA, USA)을 이용하여 one-way ANOVA를 실시하였고, 통계적 유의성은 Boneferroni multiple comparison post test로 검증하였으며, *p<0.05, **p<0.01 및 ***p<0.001로 표기하였다.For all study results, one-way ANOVA was performed using GraphPad Prism 7 (GraphPad Software Inc., SanDiego, CA, USA), and statistical significance was verified by Boneferroni multiple comparison post test, *p<0.05, **p Marked as <0.01 and ***p<0.001.

1.2. 구릿대 추출물의 제조1.2. Preparation of Copperhead Extract

구릿대을 열풍건조한 뒤 분쇄하여 파우더로 만들었다. 파우더 중량의 10배 볼륨의 50% 에탄올 용매를 이용하여 2시간 열수 추출하였다. 추출물을 감압농축 후 -80℃에서 동결 후 동결 건조하여 얻은 최종 산물을 곱게 분쇄하여 실험에 사용하였다. The copper rod was dried with hot air and then pulverized to make a powder. Hot water extraction was performed for 2 hours using a 50% ethanol solvent in a volume 10 times the weight of the powder. The final product obtained by concentrating the extract under reduced pressure, freezing at -80 ° C and then freeze-drying was finely pulverized and used in the experiment.

실시예 2. 세포독성 분석Example 2. Cytotoxicity assay

구릿대 추출물을 마우스 유래 근아세포에 처리한 후 세포독성 여부를 확인하는 실험을 수행하였다. 간단히, 마우스 유래 근아세포인 C2C12 세포주 (CRL1772 ATCC, USA)에 구릿대 추출물을 주어진 농도(0.5, 1, 2.5, 5 및 10 μg/mL)로 처리하였고, 24시간 후 세포생장율을 분석하였다. An experiment was performed to confirm whether or not cytotoxicity was observed after treating the copper rod extract to mouse-derived myoblasts. Briefly, mouse-derived myoblasts, C2C12 cell line (CRL1772 ATCC, USA), were treated with copper rod extract at given concentrations (0.5, 1, 2.5, 5, and 10 μg/mL), and cell growth rates were analyzed after 24 hours.

그 결과, 구릿대 추출물은 10 μg/mL 농도까지 세포독성이 나타나지 않았음을 확인하였다 (도 1). As a result, it was confirmed that the copper rod extract did not exhibit cytotoxicity up to a concentration of 10 μg/mL (FIG. 1).

실시예 3. 구릿대 추출물에 의한 근육 분화(myogenesis) 증진 또는 회복 효과Example 3. Muscle differentiation (myogenesis) promoting or restoring effect by copper rod extract

본 발명자들은 구릿대 추출물이 근육분화를 증진시키는 효과가 있는지 확인하기 위하여, 덱사메타손이 처리된 마우스 유래 근아세포에 구릿대 추출물을 처리한 후, 근아세포에서 근관세포로의 분화 정도를 확인하는 실험을 수행하였다. 간단히, 마우스 유래 근아세포인 C2C12 세포주 (CRL1772 ATCC, USA)가 배양용기에 100% confluence로 자라면, 2% HS (horse serum) 및 1% PS (penicillin-streptomycin)가 포함된 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배지로 바꾸고, 근관세포 형성을 위해 총 4일 동안 분화를 진행하였다. 분화 4일 째, 1 및 2.5 μg/mL의 구릿대 추출물과 5 μM의 덱사메타손(dexamethasone)을 24시간 동안 처리한 후, 근관세포로의 분화되는 정도를 확인하기 위하여, 미오신 중쇄(myosin heavy chain, MHC) 면역염색을 수행하였다. The present inventors, in order to confirm whether the copper rod extract has an effect of enhancing muscle differentiation, treated mouse-derived myoblasts treated with dexamethasone with the copper rod extract, and then performed an experiment to confirm the degree of differentiation from myoblasts to myotubes. . Briefly, when C2C12 cell line (CRL1772 ATCC, USA), a mouse-derived myoblast, is grown to 100% confluence in a culture container, DMEM (Dulbecco's Modified Eagle) containing 2% HS (horse serum) and 1% PS (penicillin-streptomycin) Medium) medium, and differentiation was performed for a total of 4 days to form myotubes. On the 4th day of differentiation, after treatment with 1 and 2.5 μg/mL of dexamethasone and 5 μM dexamethasone for 24 hours, to confirm the degree of differentiation into myotubes, myosin heavy chain (MHC) ) immunostaining was performed.

분화된 근관세포는 4% 포름알데히드로 고정하였고, 0.05% 사포닌(saponin)으로 투과(permeabilization)시키고, 1% BSA(bovine serum albumin)로 블러킹(blocking)하였다. 이후, 미오신 중쇄(myosin heavy chain, MHC)에 대한 1차 항체 및 2차 항체를 붙여 염색하였고, DAPI로 핵을 염색하였다. 융합지수(fusion index, %)는 다음의 수식으로 계산하였다: 융합지수(fusion index) = (근관세포 안의 핵 / 전체 세포에 존재 하는 핵) × 100 (%).Differentiated myotubes were fixed with 4% formaldehyde, permeabilized with 0.05% saponin, and blocked with 1% bovine serum albumin (BSA). Thereafter, a primary antibody and a secondary antibody for myosin heavy chain (MHC) were attached and stained, and nuclei were stained with DAPI. The fusion index (%) was calculated by the following formula: fusion index = (nuclei in myotubes / nuclei in all cells) × 100 (%).

그 결과, 덱사메타손이 처리된 그룹(DEX)에서는 MHC 발현량이 감소하고, 융합지수도 현저히 감소한 반면, 구릿대 추출물이 처리된 그룹(1 및 2.5 μg/mL)에서는 덱사메타손이 처리된 그룹에 비해 MHC 발현량이 현저히 증가하고, 융합 지수가 유의적으로 증가하였음을 확인하였다 (도 2a 및 2b).As a result, in the dexamethasone-treated group (DEX), the MHC expression level decreased and the fusion index also significantly decreased, whereas in the dexamethasone-treated group (1 and 2.5 μg/mL), the MHC expression level was higher than that in the dexamethasone-treated group. significantly increased, and it was confirmed that the fusion index significantly increased (Figs. 2a and 2b).

이로써, 구릿대 추출물은 덱사메타손에 의해 감소된 근육 분화정도를 회복시켜 근관 형성을 증가시키는 효과가 있음을 확인하였다. As a result, it was confirmed that the copper rod extract has an effect of increasing root canal formation by restoring the degree of muscle differentiation reduced by dexamethasone.

실시예 4. 구릿대 추출물에 의한 근위축 또는 근육분화 조절인자의 발현 조절 효과Example 4. Effects of muscle atrophy or muscle differentiation regulator expression control by copper rod extract

본 발명자들은 구릿대 추출물이 근위축 조절인자 및 근육분화 조절인자의 mRNA 발현량에 변화를 주는지 확인하는 위하여, 분화 유도된 마우스 유래 근아세포에 구릿대 추출물을 처리한 후, 근육 단백질을 파괴하여 근위축(atrophy)을 야기하는 것으로 알려진 Atrogin-1 및 MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1); 및 근육분화 억제인자로 알려진 Myostatin의 mRNA 발현량을 확인하는 실험을 수행하였다. In order to confirm that the copper rod extract changes the mRNA expression level of the muscle atrophy regulator and the muscle differentiation regulator, the present inventors treated the differentiated mouse-derived myoblasts with the rod rod extract, and then destroyed the muscle protein to cause muscle atrophy ( Atrogin-1 and MuRF-1 (Muscle RING-finger protein-1) known to cause atrophy); And an experiment was performed to confirm the mRNA expression level of Myostatin, known as a muscle differentiation inhibitor.

간단히, 마우스 유래 근아세포인 C2C12 세포주 (CRL1772 ATCC, USA)는 10% FBS (fetal bovine serum)가 포함된 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배지에서 배양하였고, 2% HS (horse serum)가 포함된 DMEM 분화 유도 배지를 4일 동안 처리하였다. 분화 유도가 끝난 후, 1 및 2.5 μg/mL의 구릿대 추출물과 5 μM의 덱사메타손(dexamethasone)을 처리하였다. Briefly, the C2C12 cell line (CRL1772 ATCC, USA), a mouse-derived myoblast, was cultured in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) medium containing 10% fetal bovine serum (FBS) and DMEM containing 2% HS (horse serum). The differentiation induction medium was treated for 4 days. After the induction of differentiation, 1 and 2.5 μg/mL of copper rodent extract and 5 μM of dexamethasone were treated.

24시간 후, PBS를 이용하여 세포를 세척한 후 세포를 수득하였고, 제조사의 지침에 따라 NucleoSpin RNA Kit (Nacherey-Nagel,Duren, Germany)를 이용하여 total RNA를 추출하였다. 이후, Synthesize cDNA for real-time PCR Kit (ReverTra Ace qPCR RT Master Mix, FSQ-201, TOYOBO)을 이용하여 cDNA를 합성한 후, SYBR Green MasterMix (TOYOBO Co. Ltd., Osaka, Japan)로 PCR을 실시하여 Atrogin-1, MuRF-1 및 Myostatin의 mRNA 발현량을 측정하였다. 각 유전자에 특이적인 프라이머 서열은 하기 표 1과 같다. After 24 hours, the cells were washed with PBS, and the cells were obtained, and total RNA was extracted using the NucleoSpin RNA Kit (Nacherey-Nagel, Duren, Germany) according to the manufacturer's instructions. Then, cDNA was synthesized using Synthesize cDNA for real-time PCR Kit (ReverTra Ace qPCR RT Master Mix, FSQ-201, TOYOBO), and then PCR was performed with SYBR Green MasterMix (TOYOBO Co. Ltd., Osaka, Japan). The mRNA expression levels of Atrogin-1, MuRF-1 and Myostatin were measured. Primer sequences specific to each gene are shown in Table 1 below.

염기서열 (5' -> 3')Base sequence (5' -> 3') 서열번호sequence number Atrogin-1Atrogin-1 SenseSense GACTGGACTTCTCGACTGCCGACTGGACTTCTCGACTGCC 1One Anti-senseAnti-sense TCAGGGATGTGAGCTGTGACTCAGGGATGTGAGCTGTGAC 22 MuRF-1MuRF-1 SenseSense GCTGGTGGAAAACATCATTGACATGCTGGTGGAAAACATCATTGACAT 33 Anti-senseAnti-sense CATCGGGTGGCTGCCTTTCATCGGGTGGCTGCCTTT 44 MyostatinMyostatin SenseSense ACGCTACCACGGAAACAATCACGCTACCACGGAAACAATC 55 Anti-senseAnti-sense GGAGTCTTGACGGGTCTGAGGGAGTCTTGACGGGGTCTGAG 66 MyoGMyoG SenseSense GCAGGCTCAAGAAAGTGAATGAGCAGGCTCAAGAAAGTGAATGA 77 Anti-senseAnti-sense TAGGCGCTCAATGTACTGGATTAGGCGCTCAATGTACTGGAT 88 MyoDMyoD SenseSense CGGGACATAGACTTGACAGGCCGGGACATAGACTTGACAGGC 99 Anti-senseAnti-sense TCGAAACACGGGTCATCATAGATCGAAACACGGGTCATCATAGA 1010 18s RNA18s RNA SenseSense GTAACCCGTTGAACCCCATTGTAACCCGTTGAACCCCATT 1111 Anti-senseAnti-sense CCATCCAATCGGTAGTAGCGCCATCCAATCGGTAGTAGCG 1212

그 결과, 덱사메타손을 처리한 그룹에서는 대조군(DMSO)에 비해 Atrogin-1, MuRF-1 및 Myostatin의 mRNA 발현량이 유의적으로 증가하였다 (도 3). 반면, 구릿대 추출물(1 및 2.5 μg/mL)을 처리한 군에서는 덱사메타손을 처리한 그룹에 비해 Atrogin-1, MuRF-1 및 Myostatin의 mRNA 발현량이 유의하게 감소하였음을 확인하였다 (도 3).As a result, in the group treated with dexamethasone, the mRNA expression levels of Atrogin-1, MuRF-1 and Myostatin were significantly increased compared to the control group (DMSO) (FIG. 3). On the other hand, it was confirmed that the mRNA expression levels of Atrogin-1, MuRF-1, and Myostatin were significantly decreased in the group treated with copper rod extract (1 and 2.5 μg/mL) compared to the group treated with dexamethasone (FIG. 3).

상기 결과로부터, 본 발명에서는 구릿대 추출물이 근위축을 야기하는 Atrogin-1 및 MuRF-1의 발현량을 억제하고, 근육분화를 억제하는 Myostatin의 발현량을 억제하는 효과가 있음을 확인하였다. From the above results, it was confirmed that the present invention has the effect of inhibiting the expression level of Atrogin-1 and MuRF-1, which cause muscle atrophy, and the expression level of Myostatin, which inhibits muscle differentiation, in the present invention.

실시예 5. 마우스 동물모델에서 구릿대 추출물에 의한 운동수행능력 개선 효과Example 5. Effect of motor performance improvement by copper rod extract in mouse animal model

마우스 동물모델에서 구릿대 추출물이 운동수행능력에 변화를 주는지 확인하기 위하여, 마우스의 악력(Grip Strength)을 측정하는 실험을 수행하였다. 마우스는 8주령의 C57BL/6 수컷 마우스가 사용되었고, AIN-93M Adult maintenance Rodent Diet (Research diet, D10012M) 베이스에 0.1%(w/v)의 구릿대 추출물을 첨가하여 조제한 사료를 8주 동안 급여하였다. 덱사메타손은 마우스가 희생되기 18일 전부터 15 mg/kg/body weight으로 복강투여하였다. 복강투여 17일 차에는 마우스 앞다리로 악력(Grip Strength)을 5회 반복하여 측정한 후 평균값을 계산하였다. 골격근 강도는 g로 나타내었다. In order to confirm whether copper rod extract changes motor performance in mouse animal models, an experiment was performed to measure grip strength of mice. 8-week-old C57BL/6 male mice were used, and 0.1% (w/v) copper rodent extract was added to the AIN-93M Adult maintenance Rodent Diet (Research diet, D10012M) base and fed for 8 weeks. . Dexamethasone was intraperitoneally administered at 15 mg/kg/body weight 18 days before the mice were sacrificed. On the 17th day of intraperitoneal administration, the grip strength was measured 5 times with the forelimbs of the mouse, and then the average value was calculated. Skeletal muscle strength was expressed in g.

그 결과, 덱사메타손이 급여된 마우스(DEX)에서는 대조군에 비해 악력(Grip Strength)이 감소된 반면, 구릿대 추출물이 급여된 마우스(AD)에서는 덱사메타손이 급여된 마우스에 비해 악력이 유의적으로 회복 또는 개선되는 효과가 있음을 확인하였다 (도 4). As a result, grip strength was reduced in mice fed dexamethasone (DEX) compared to the control group, whereas grip strength was significantly recovered or improved in mice fed copper rod extract (AD) compared to mice fed dexamethasone. It was confirmed that there is an effect (FIG. 4).

상기 결과로부터, 본 발명에서는 구릿대 추출물이 운동수행능력을 회복, 증진 또는 개선시키는 효과가 있음을 확인하였다. From the above results, in the present invention, it was confirmed that the copper rod extract has an effect of restoring, enhancing or improving exercise performance.

Claims (11)

구릿대(Angelica dahurica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
A food composition for preventing or improving muscle diseases comprising an extract of Angelica dahurica as an active ingredient.
제 1 항에 있어서,
상기 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물에 의하여 추출된 것인, 조성물.
According to claim 1,
Wherein the extract is extracted with water, an organic solvent or a mixture thereof.
제 2 항에 있어서,
상기 유기 용매는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, 헥산 및 시클로헥산으로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 조성물.
According to claim 2,
Wherein the organic solvent is selected from the group consisting of methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol, acetone, ether, benzene, chloroform, ethyl acetate, methylene chloride, hexane and cyclohexane, composition.
제 1 항에 있어서,
상기 조성물은 근위축을 야기하는 Atrogin-1 및 MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1)의 발현을 억제하는 것인, 조성물.
According to claim 1,
The composition is to inhibit the expression of Atrogin-1 and MuRF-1 (Muscle RING-finger protein-1) causing muscular atrophy, the composition.
제 1 항에 있어서,
상기 조성물은 근육분화를 억제하는 Myostatin의 발현을 억제하는 것인, 조성물.
According to claim 1,
Wherein the composition inhibits the expression of Myostatin, which inhibits muscle differentiation.
제 1 항에 있어서,
상기 근육 질환은 긴장감퇴증(atony), 근위축증(muscular atrophy), 근이영양증(muscular dystrophy), 근육 퇴화, 근경직증, 근무력증, 악액질(cachexia) 및 근육감소증(sarcopenia)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 질환인 것인, 조성물.
According to claim 1,
The muscle disease is at least one disease selected from the group consisting of atony, muscular atrophy, muscular dystrophy, muscle degeneration, muscle stiffness, myasthenia, cachexia and sarcopenia. which is, the composition.
구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of muscle diseases, comprising copper leaf extract as an active ingredient.
구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육강화용 조성물.
A composition for strengthening muscles comprising copper bamboo extract as an active ingredient.
구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육분화 촉진용 조성물.
A composition for stimulating muscle differentiation comprising an extract of copper beetle as an active ingredient.
구릿대 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동능력 증진용 조성물.
A composition for enhancing athletic performance comprising copper bamboo extract as an active ingredient.
제 10 항에 있어서,
상기 운동능력 증진은 퇴행성 질환, 미토콘드리아 이상 질환, 지구력 저하증, 순발력 저하증, 무기력증, 근육 폐기 및 우울증으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 증상을 예방 또는 개선시키는 것인, 조성물.
According to claim 10,
The exercise capacity enhancement is to prevent or improve one or more symptoms selected from the group consisting of degenerative diseases, mitochondrial abnormalities, hypostamina, impotence, lethargy, muscle wasting and depression, composition.
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