[go: up one dir, main page]

KR20210016407A - 대사 장애 및 비알코올성 지방 간 질환의 치료를 위한 활성제 및 그 사용 방법 - Google Patents

대사 장애 및 비알코올성 지방 간 질환의 치료를 위한 활성제 및 그 사용 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20210016407A
KR20210016407A KR1020207037346A KR20207037346A KR20210016407A KR 20210016407 A KR20210016407 A KR 20210016407A KR 1020207037346 A KR1020207037346 A KR 1020207037346A KR 20207037346 A KR20207037346 A KR 20207037346A KR 20210016407 A KR20210016407 A KR 20210016407A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
acylated
ketone
active agent
containing group
acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
KR1020207037346A
Other languages
English (en)
Inventor
스티븐 존 테일러
존 로버트 프로드풋
미정 김
카틀린 누델
티모티 에프. 브릭스
애프랜드 카말리 사베스타니
레오나드 벅바인더
베르나드 란터
퍼디난드 에드워드 마사리
코지 야수다
스펜서 코리 펙
체리 스네데커
다이아나 레
제시카 알렉산더
안나 리앙
다이나라 구나세케라
데이비드 아더 베리
존 패트릭 주니어 케이시
Original Assignee
플래그쉽 파이어니어링 이노베이션스 브이, 인크.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 플래그쉽 파이어니어링 이노베이션스 브이, 인크. filed Critical 플래그쉽 파이어니어링 이노베이션스 브이, 인크.
Publication of KR20210016407A publication Critical patent/KR20210016407A/ko
Ceased legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/047—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates having two or more hydroxy groups, e.g. sorbitol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/222—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin with compounds having aromatic groups, e.g. dipivefrine, ibopamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/225—Polycarboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/23—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms
    • A61K31/232—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms having three or more double bonds, e.g. etretinate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/235—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids having an aromatic ring attached to a carboxyl group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/235—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids having an aromatic ring attached to a carboxyl group
    • A61K31/24—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids having an aromatic ring attached to a carboxyl group having an amino or nitro group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A61K31/355—Tocopherols, e.g. vitamin E
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A61K31/37—Coumarins, e.g. psoralen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/385—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having two or more sulfur atoms in the same ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/59—Compounds containing 9, 10- seco- cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems
    • A61K31/593—9,10-Secocholestane derivatives, e.g. cholecalciferol, i.e. vitamin D3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/655—Azo (—N=N—), diazo (=N2), azoxy (>N—O—N< or N(=O)—N<), azido (—N3) or diazoamino (—N=N—N<) compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7004—Monosaccharides having only carbon, hydrogen and oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7012—Compounds having a free or esterified carboxyl group attached, directly or through a carbon chain, to a carbon atom of the saccharide radical, e.g. glucuronic acid, neuraminic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/545—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C403/00—Derivatives of cyclohexane or of a cyclohexene or of cyclohexadiene, having a side-chain containing an acyclic unsaturated part of at least four carbon atoms, this part being directly attached to the cyclohexane or cyclohexene or cyclohexadiene rings, e.g. vitamin A, beta-carotene, beta-ionone
    • C07C403/24—Derivatives of cyclohexane or of a cyclohexene or of cyclohexadiene, having a side-chain containing an acyclic unsaturated part of at least four carbon atoms, this part being directly attached to the cyclohexane or cyclohexene or cyclohexadiene rings, e.g. vitamin A, beta-carotene, beta-ionone having side-chains substituted by six-membered non-aromatic rings, e.g. beta-carotene
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/20—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D309/10—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/22—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4
    • C07D311/26—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3
    • C07D311/28—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only
    • C07D311/30—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only not hydrogenated in the hetero ring, e.g. flavones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
    • C07D311/60—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2
    • C07D311/62—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2 with oxygen atoms directly attached in position 3, e.g. anthocyanidins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/04—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes
    • C07D319/06—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D333/76—Dibenzothiophenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2121/00—Preparations for use in therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

본원에 개시되는 것은 활성제, 이를 함유하는 조성물, 이를 함유하는 단위 투여량 형태, 및 그 사용 방법, 예를 들어 대사 장애 또는 비알코올성 지방 간 질환을 치료하기 위한 방법, 또는 대사 마커 또는 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하기 위한 방법이다.

Description

대사 장애 및 비알코올성 지방 간 질환의 치료를 위한 활성제 및 그 사용 방법
본 발명은 화합물 및 그의 의약용 사용 방법에 관한 것이다.
비만 발생률의 증가는 서구 세계에서 그리고 최근에는 개발 도상국에서도 전염병 비율에 도달했다. 비만은 심혈관 질환 및 II 형 당뇨와 같은 상당한 동반질환과 연관된다. 비만대사 수술(bariatric surgery)은 비만에 대해 알려진 치료법이지만, 이 치료는 고가이며 위험하다. 약리학적 개입은 일반적으로 덜 효과적이며, 종종 부작용과 연관된다.
비알코올성 지방 간 질환(NAFLD, Nonalcoholic fatty liver disease)은 가장 흔한 형태의 만성 간 질환 중 하나이며, 이는 미국에서 12% 내지 25%의 추정된 사람들에 영향을 끼치고 있다. NAFLD의 주된 특징은 간에 있는 지방 축적이다(지방증(steatosis)). NAFLD에서, 지방 축적은 과도한 알코올 소비와 관련이 없다.
비알코올성 지방간염(NASH, Nonalcoholic steatohepatitis)은 NAFLD의 진보된 형태이다. NASH는 간 염증으로 표시되며, 이는 흉터와 되돌릴 수 없는 간 손상으로 발전할 수도 있다. 가장 심각한 경우, NASH는 간경화 및 간부전으로 발전할 수 있다.
대사 장애 관리 및/또는 NAFLD 및 NASH를 치료하기 위한 방법 및 조성물에 대한 필요성이 존재한다.
일반적으로, 본 발명은 아실화된 활성제(예, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 엘라그산, 아실화된 엘라그산 유사체, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 아미노산, 아실화된 담즙산, 아실화된 메살라민, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 비타민 또는 아실화된 하이드록시벤조산), 활성제 조합(예, 제1 제는 스틸베노이드, 카테킨 폴리페놀, 카로티노이드산, 담즙산, 아미노산, 하이드록시벤조산, 쉬킴산, 단당류 또는 메살라민, 메트포르민, 비타민 및 S-아데노실-L-메티오닌이고 및 제2 제는 케톤체 또는 프리-케톤체인 조합), 이들을 함유하는 조성물(예, 단위 투여량 형태로서임), 및 대상체에서 대사 마커 또는 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 방법이나 대상체에서 대사 장애 또는 비알코올성 지방 간 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시예에서, 본 발명은 아실화된 활성제(예, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 메살라민, 아실화된 당, 아실화된 쉬킴산 및 아실화된 하이드록시벤조산), 활성제 조합(예, 스틸베노이드 및 프리-케톤체), 이들을 함유하는 조성물(예, 단위 투여량 형태로서임), 및 대상체에서 대사 마커를 조절하는 방법이나 대상체에서 대사 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 소정의 실시예들에서, 본 발명은 아실화된 활성제(예, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 비타민, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 담즙산, 아실화된 아미노산, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당 또는 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체), 활성제 조합(예, 스틸베노이드 및 프리-케톤체), 이들을 함유하는 조성물(예, 단위 투여량 형태로서임), 및 대상체에서 비알코올성 지방 간 질환(예, 비알코올성 지방간염) 마커를 조절하기 위한 방법이나 대상체에서 비알코올성 지방 간 질환(예, 섬유증이 있거나 없는 비알코올성 지방간염(NASH), 간 지방증 또는 진행성 섬유증이 있는 NASH)을 치료하는 방법을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 유효량의 활성제를 대상체에 투여함으로써 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 마커 또는 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 방법을 제공한다. 관련된 일 측면에서, 본 발명은 유효량의 활성제를 대상체에 투여함으로써 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 장애 또는 비알코올성 지방 간 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시예에서, 상기 방법은 대사 마커를 조절하는 것이다. 특정 실시예에서, 본 방법은 비알코올성 지방 간 질환(예, 비알코올성 지방간염) 마커를 조절하는 것이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 유효량의 제1 활성제 및 유효량의 제2 활성제를 대상체에게 투여함으로써 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 마커 또는 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 방법을 제공한다. 관련된 다른 측면에서, 본 발명은 유효량의 제1 활성제 및 유효량의 제2 활성제를 대상체에 투여함으로써 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 장애 또는 비알코올성 지방 간 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시예에서, 상기 방법은 대사 장애를 치료하는 것이다. 소정의 실시예들에서, 상기 방법은 비알코올성 지방 간 질환(예, 비알코올성 지방간염)을 치료하는 것이다.
일부 실시예에서, 상기 대사 마커는 비만 장애에 대한 것이다. 다른 실시예들에서, 상기 대사 마커는 II형 당뇨병, 당뇨병전기(prediabetes), 인슐린 저항성, 대사 증후군, 고콜레스테롤혈증(hypercholesterolemia), 동맥경화증 또는 고지혈증에 대한 것이다.
특정 실시예들에서, 상기 대사 장애는 비만 장애다. 소정의 실시예들에서, 상기 대사 장애는 II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 대사 증후군, 고콜레스테롤혈증 또는 고지혈증이다.
일부 실시예에서, 총 지방 비율, 세포 지방과다(adiposity), 체질량 지수, 체중 증가율, 복부 지방량, 백색 대 갈색 지방 비율, 지방합성(lipogenesis) 수준 또는 지방 저장 수준이 투여 단계 후에 감소된다.
소정의 실시예들에서, 상기 대상체는 과체중이다. 다른 실시예들에서, 대상체는 비만을 앓고 있다. 또 다른 실시예들에서, 대상체는 중증(severe) 비만, 고도(morbid) 비만 또는 초(super) 비만을 앓고 있다. 또 다른 실시예들에서, 대상체는 적어도 25kg/m2, 적어도 28kg/m2, 적어도 30kg/m2, 적어도 35kg/m2 또는 적어도 45kg/m2의 체질량 지수를 갖는다.
다른 실시예들에서, 인슐린, GLP-1 또는 PYY의 수준은 투여 단계 후에 증가된다. 또 다른 실시예들에서, 혈당 또는 헤모글로빈 A1c의 수준은 투여 단계 후에 감소된다. 또 다른 실시예들에서, 포도당 내성은 투여 단계 후에 증가된다.
일부 실시예에서, 상기 방법은 대상체의 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 수준을, 투여 단계 전 대상체의 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 수준에 비해 또는 대조군에 비해 적어도 1% (예, 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 적어도 98% 이상; 예컨대, 최대 100%) 만큼 감소시킨다. 다른 실시예들에서, 상기 방법은 대상체의 혈중 아스파르테이트 트랜스아미나제의 수준을, 투여 단계 전 대상체의 혈중 아스파르테이트 트랜스아미나제의 수준에 비해 또는 대조군에 비해 적어도 1% (예, 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 적어도 98% 이상; 예컨대, 최대 100%) 만큼 감소시킨다. 또 다른 실시예들에서, 상기 방법은 대상체의 간 중량을 투여 단계 전 대상체의 간 중량에 비해 또는 대조군에 비해 적어도 1%만큼 감소시킨다. 추가 실시예들에서, 상기 방법은 간 섬유증을 치료하거나 감소시킨다.
또 다른 실시예들에서, 상기 대상체는 비알코올성 지방 간 질환을 앓고 있다(예를 들어, 상기 대상체는 비알코올성 지방 간 질환 진단을 받는다). 또 다른 실시예들에서, 상기 대상체는 비알코올성 지방간염을 앓고 있다(예를 들어, 비알코올성 지방간염 진단을 받는다).
특정 실시예에서, 상기 대상체는 인간이다. 특정 실시예들에서, 상기 대상체는 고양이 또는 개다.
일부 실시예에서, 상기 아실화된 활성제는 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 비타민, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 담즙산, 아실화된 아미노산, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당, 또는 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체다.
일부 실시예에서, 상기 아실화된 활성제는 아실화된 스틸베노이드이다. 추가의 실시예들에서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1개, 2개, 또는 3개의 하이드록실기를 갖는 레스베라트롤(resveratrol)이다.
또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 활성제는 아실화된 카로티노이드이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카로티노이드는 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1개 또는 2개의 하이드록실기를 갖는 아스타잔틴(astaxanthin)이다.
특정 실시예들에서, 상기 아실화된 활성제는 아실화된 비타민이다. 특정 실시예들에서, 상기 아실화된 비타민은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 하이드록실기를 갖는 토코페롤 또는 토코트리엔놀이다. 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 비타민은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1개, 2개, 3개 또는 4개의 하이드록실기를 갖는 아스코르브산이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 비타민은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 하이드록실기를 갖는 비타민 D이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 비타민 D는 콜레칼시페롤(cholecalciferol)이다.
일부 실시예에서, 상기 활성제는 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 메살라민, 아실화된 당, 아실화된 하이드록시벤조산, 또는 아실화된 쉬킴산이다. 특정 실시예들에서, 대상체에게 경구 투여 후, 활성제는 대상체의 위장관에서 가수분해될 수 있다. 소정의 실시예들에서, 상기 활성제는 적어도 하나의 지방산을 방출한다. 추가 실시예들에서, 상기 활성제는 상기 대상체에게 경구로 투여된다.
소정의 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 메살라민이다. 일부 실시예에서, 상기 활성제는 아실화된 카테킨 폴리페놀이다. 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 스틸베노이드이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 하이드록시벤조산이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 당류이다. 특정 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 쉬킴산이다.
다른 실시예들에서, 상기 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 메살라민, 아실화된 당, 아실화된 하이드록시벤조산, 또는 아실화된 쉬킴산은 지방산 함유 기를 포함한다. 또 다른 실시예들에서, 상기 지방산 함유 기는 단당류(예, 지방산 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 아라비노오스, 자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, 글루코오스, 리보오스, 타가토오스, 푸코오스 및 람노오스), 글루코시놀레이트, 당 알코올, 또는 당산(sugar acid))이다. 특정 실시예들에서, 상기 지방산 함유 기는 단당류(예, 지방산 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 아라비노오스, 자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, 글루코오스, 리보오스, 타가토오스, 푸코오스 및 람노오스), 당 알코올, 또는 당산)이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 단당류는 L-아라비노오스, D-자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, D-글루코오스, D-리보오스, D-타가토오스, L-푸코오스, 또는 L-람노오스이다 (예를 들어, 단당류는 D-자일로오스임). 추가 실시예들에서, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 지방산은 단쇄 지방산(예, 아세틸, 프로피오닐, 또는 부티릴)이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 단쇄 지방산은 아세틸이다. 특정한 실시예에서, 상기 단쇄 지방산은 부티릴이다.
소정의 실시예들에서, 상기 활성제(예, 아실화된 스틸베노이드)는 케톤체 또는 프리-케톤체를 함유하는 적어도 1개의 기를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 활성제(예를 들어, 아실화된 스틸베노이드)는 프리-케톤체를 함유하는 적어도 1개의 기를 포함한다. 추가의 실시예들에서, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 케톤체 함유 기다. 또 다른 실시예들에서, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 프리-케톤체 함유 기다.
특정 실시예들에서, 상기 아실화된 활성제는 아실화된 카테킨 폴리페놀이다. 소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1 내지 8개의 하이드록실기를 갖는 에피갈로카테킨 갈레이트(epigallocatechin gallate)이다. 추가의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1 내지 5개의 하이드록실기를 가지는 실리비닌(silibinin)이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I)의 화합물:
Figure pct00001
(I)
또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
여기서
Figure pct00002
은 단일 탄소-탄소 결합 또는 이중 탄소-탄소 결합이고;
Q는 -CH2- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R1 및 각각의 R3은 독립적으로 H, 할로겐, -ORA, 인산염, 또는 황산염이고;
R2는 H 또는 -ORA이고;
각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 단당류, 당산, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고;
m은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고; 그리고
n은 1, 2, 3, 또는 4이다.
또 다른 실시예들에서, n과 m의 각각은 독립적으로 0, 1, 2, 3, 또는 4이다. 일부 실시예에서, 적어도 1개의 R1은 -ORA이다. 또 다른 실시예들에서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 단당류, 당산, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고; 또 다른 실시예들에서, 적어도 1개의 RA는 지방산 함유 기다. 특정 실시예에서, 적어도 1개의 RA는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기다. 소정의 실시예들에서, 적어도 1개의 RA는 적어도 1개의 지방산 함유 기로 치환된 벤조일이다. 추가 실시예에서, 적어도 1개의 RA는 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 벤조일이다. 소정의 실시예들에서, 적어도 1개의 RA는 적어도 1개의 아미노산 대사물질 함유 기로 치환된 벤조일이다.
일부 실시예에서, 적어도 1개의 R1은 -ORA이고, 이때 RA는 지방산 함유 기거나, 상기 화합물이 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기를 포함하는 것을 전제로 한다.
소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-a)의 화합물이다:
Figure pct00003
.
(I-a)
특정 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-b)의 화합물이다:
Figure pct00004
.
(I-b)
또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-c)의 화합물이다:
Figure pct00005
.
(I-c)
또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-d)의 화합물이다:
Figure pct00006
.
(I-d)
소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 식 (I-f)의 화합물이다:
Figure pct00007
.
(I-f)
또 다른 실시예들에서, n은 2이다. 소정의 실시예들에서, m은 1이다. 특정 실시예들에서, m은 2이다. 일부 실시예에서, m은 3이다. 특정 실시예들에서, 각각의 R1은 독립적으로 -ORA이다. 소정의 실시예들에서, 각각의 R3은 독립적으로 H 또는 -ORA이다. 추가 실시예들에서, R2는 H 또는 -ORA이다. 또 다른 실시예들에서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 함유 기, 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기다.
다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-e)의 화합물:
Figure pct00008
,
(I-e)
또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
여기서 R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 R1에 대해 정의된 바와 같고; 그리고 R3A, R3B 및 R3C의 각각은 독립적으로 R3에 대해 정의된 바와 같다.
또 다른 실시예들에서, R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 -ORA이다. 또 다른 실시예들에서, R3A, R3B 및 R3C의 각각은 독립적으로 H, 할로겐, 또는 -ORA이다. 일부 실시예에서, R2는 하기 식의 기이고:
Figure pct00009
, 여기서 p는 1, 2, 3, 또는 4이고, 각각의 R4는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
소정의 실시예들에서, p는 3이다. 특정 실시예들에서, 각각의 R4는 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시이다. 소정의 실시예들에서, R2는 하기 식의 기이고:
Figure pct00010
, 그리고
R4A, R4B, 및 R4C의 각각은 R4에 정의된 바와 같다.
또 다른 실시예들에서, R4A, R4B, 및 R4C의 각각은 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시이다. 또 다른 실시예들에서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 아실, 또는 임의로 아실화된 단당류이다.
또 다른 실시예들에서, 상기 활성제(예, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 엘라그산, 아실화된 엘라그산 유사체, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 아미노산, 아실화된 담즙산, 아실화된 메살라민, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 비타민, 또는 아실화된 하이드록시벤조산)는 적어도 1개의 지방산 아실(예, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)을 포함한다. 또 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 메살라민, 아실화된 하이드록시벤조산, 아실화된 당, 또는 아실화된 쉬킴산이다. 소정의 실시예들에서, 적어도 1개의 지방산 아실은 단쇄 지방산 아실이다. 일부 실시예에서, 상기 단쇄 지방산 아실은 아세틸, 프로피오닐 또는 부티릴이다. 소정의 실시예들에서, 상기 단쇄 지방산 아실은 아세틸이다. 특정한 실시예에서, 상기 단쇄 지방산 아실은 부티릴이다. 추가의 실시예에서, 상기 단쇄 지방산 아실은 프로피오닐이다. 또 다른 실시예들에서, 적어도 1개의 지방산 아실은 중쇄 지방산 아실(예, 옥타노일)이다.
일부 실시예에서, 상기 활성제는 아실화된 당(예, 단당류 코어를 포함하는 아실화된 당)이다. 소정의 실시예들에서, 상기 단당류 코어는 자일로오스, 아라비노오스, 람노오스, 푸코오스, 글루코사민, 또는 타가토오스다. 특정 실시예들에서, 상기 활성제는알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환된 하나 이상의 하이드록실기를 갖는 단당류이다.
소정의 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 하이드록시벤조산 (예, 갈산을 포함하는 아실화된 하이드록시벤조산)이다.
일부 실시예에서, 상기 제1 활성제는 카테킨 폴리페놀, 스틸베노이드, 단당류, 하이드록시벤조산, 쉬킴산, 또는 메살라민이고, 제2 활성제는 케톤체 또는 프리-케톤체다. 소정의 실시예들에서, 상기 제1 활성제는 대상체에게 경구로 투여된다. 특정 실시예들에서, 상기 제2 활성제는 대상체에게 경구로 투여된다. 추가 실시예들에서, 상기 제1 및 제2 활성제는 대상체에게 개별적으로 투여된다(예를 들어, 제1 활성제와 제2 활성제가 서로 24시간 이내에 대상체에게 투여된다). 또 다른 실시예들에서, 상기 제1 및 제2 활성제는 동시에 대상체에게 투여된다(예를 들어, 제1 활성제와 제2 활성제가 동일한 단위 투여량 형태로 대상체에게 투여된다). 다른 실시예들에서, 상기 제1 활성제는 스틸베노이드(예, 레스베라트롤)이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 제2 활성제는 케톤체다. 또 다른 실시예들에서, 상기 제2 활성제는 프리-케톤체다. 일부 실시예들에서, 상기 제1 활성제 대 제2 활성제의 몰비는 1:1 내지 1:10이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 활성제를 포함하는 조성물(예를 들어, 약제학적 조성물, 기능성식품 조성물, 식품 제품, 식품 첨가제 또는 식이 보충제)을 제공한다. 일부 실시예에서, 상기 조성물은 단위 투여량 형태로 제공된다. 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 메살라민, 아실화된 하이드록시벤조산, 아실화된 쉬킴산, 또는 아실화된 당이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 제1 활성제 및 제2 활성제의 조합이고, 여기서 제1 활성제는 스틸베노이드, 카테킨 폴리페놀, 하이드록시벤조산, 쉬킴산, 단당류, 또는 메살라민이고, 제2 활성제는 케톤체 또는 프리-케톤체다.
또 다른 실시예들에서, 상기 단위 투여량 형태는 적어도 0.5g(예를 들어, 적어도 0.7g, 적어도 1g, 또는 적어도 2g)의 활성제를 함유한다. 소정의 실시예들에서, 상기 단위 투여량 형태는 10g 이하(예를 들어, 9g 이하, 8g 이하, 7g 이하, 5g 이하)의 활성제를 함유한다. 특정 실시예들에서, 상기 단위 투여량 형태는 0.5-10 g (예를 들어, 0.7-10 g, 1-10 g, 2-10 g, 0.5-9 g, 0.7-9 g, 1-9 g, 2-9 g, 0.5-8 g, 0.7-8 g, 1-8 g, 2-8 g, 0.5-7 g, 0.7-7 g, 1-7 g, 2-7 g, 0.5-6 g, 0.7-6 g, 1-6 g, 2-6 g, 0.5-5 g, 0.7-5 g, 1-10 g, 또는 2-5 g)의 활성제를 함유한다.
일부 실시예에서, 상기 단위 투여량 형태는 약제학적 단위 투여량 형태이다. 추가의 실시예에서, 상기 단위 투여량 형태는 기능성식품 투여량 형태이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 단위 투여량 형태는 식품 제품 제공분이다.
또 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀이다. 일부 실시예에서, 상기 활성제는 아실화된 스틸베노이드 (예, 아실화된 레스베라트롤)이다. 소정의 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 메살라민이다. 소정의 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 하이드록시벤조산 (예, 갈산을 포함하는 아실화된 하이드록시벤조산)이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 당(예를 들어, 단당류 코어, 예컨대, 자일로오스, 아라비노오스, 람노오스, 푸코오스, 글루코사민, 타가토오스, 또는 리보오스(예를 들어, 자일로오스, 아라비노오스, 람노오스, 푸코오스, 글루코사민, 또는 타가토오스)를 포함하는 아실화된 당)이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 아실화된 쉬킴산이다.
다른 실시예들에서, 상기 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 또는 아실화된 메살라민은 지방산 함유 기를 포함한다. 또 다른 실시예들에서, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 단당류(예를 들어, 아라비노오스, 자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, 글루코오스, 리보오스, 타가토오스, 푸코오스 및 람노오스), 글루코시놀레이트, 당 알코올, 또는 당산이다. 특정 실시예에서, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 단당류(예를 들어, 아라비노오스, 자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, 글루코오스, 리보오스, 타가토오스, 푸코오스 및 람노오스), 당 알코올, 또는 당산이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 단당류는 L-아라비노오스, D-자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, D-글루코오스, D-리보오스, D-타가토오스, L-푸코오스, 또는 L-람노오스이다 (예를 들어, 단당류는 D-자일로오스임). 추가 실시예들에서, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 지방산은 단쇄 지방산(예, 아세틸, 프로피오닐, 또는 부티릴)이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 단쇄 지방산은 아세틸이다. 특정한 실시예에서, 상기 단쇄 지방산은 부티릴이다.
소정의 실시예들에서, 상기 활성제(예, 아실화된 스틸베노이드)는 케톤체 또는 프리-케톤체를 함유하는 적어도 1개의 기를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 활성제(예를 들어, 아실화된 스틸베노이드)는 프리-케톤체를 함유하는 적어도 1개의 기를 포함한다. 추가의 실시예들에서, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 케톤체 함유 기다. 또 다른 실시예들에서, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 프리-케톤체 함유 기다.
또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I)의 화합물:
Figure pct00011
,
(I)
또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
여기서
Figure pct00012
은 단일 탄소-탄소 결합 또는 이중 탄소-탄소 결합이고;
Q는 -CH2- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R1 및 각각의 R3은 독립적으로 H, 할로겐, -ORA, 인산염, 또는 황산염이고;
R2는 H 또는 -ORA이고;
각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 단당류, 당산, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고;
m은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고; 그리고
n은 0, 1, 2, 3, 또는 4이다.
일부 실시예에서, 적어도 1개의 R1은 -ORA이고, RA는 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 상기 화합물이 적어도 1개의 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기를 포함하는 것을 전제로 한다. 일부 실시예에서, 적어도 1개의 R1은 -ORA이고, 이때 RA는 지방산 함유 기거나, 상기 화합물이 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기를 포함하는 것을 전제로 한다.
소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-a)의 화합물이다:
Figure pct00013
.
(I-a)
특정 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-b)의 화합물이다:
Figure pct00014
.
(I-b)
또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-c)의 화합물이다:
Figure pct00015
.
(I-c)
또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-d)의 화합물이다:
Figure pct00016
.
(I-d)
소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 식 (I-f)의 화합물이다:
Figure pct00017
.
(I-f)
또 다른 실시예들에서, n은 2이다. 소정의 실시예들에서, m은 1이다. 특정 실시예들에서, m은 2이다. 일부 실시예에서, m은 3이다. 특정 실시예들에서, 각각의 R1은 독립적으로 -ORA이다. 소정의 실시예들에서, 각각의 R3은 독립적으로 H 또는 -ORA이다. 추가 실시예들에서, R2는 H 또는 -ORA이다. 또 다른 실시예들에서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 함유 기, 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기다.
다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-e)의 화합물:
Figure pct00018
,
(I-e)
또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
여기서 R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 R1에 대해 정의된 바와 같고; 그리고 R3A, R3B 및 R3C의 각각은 독립적으로 R3에 대해 정의된 바와 같다.
또 다른 실시예들에서, R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 -ORA이다. 또 다른 실시예들에서, R3A, R3B, 및 R3C의 각각은 독립적으로 H, 할로겐, 또는 -ORA이다. 일부 실시예에서, R2는 하기 식의 기이고:
Figure pct00019
, 여기서 p는 1, 2, 3, 또는 4이고, 각각의 R4는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
소정의 실시예들에서, p는 3이다. 특정 실시예들에서, 각각의 R4는 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시이다. 소정의 실시예들에서, R2는 하기 식의 기이고:
Figure pct00020
, 그리고
R4A, R4B, 및 R4C의 각각은 R4에 정의된 바와 같다.
또 다른 실시예들에서, R4A, R4B, 및 R4C의 각각은 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시이다. 또 다른 실시예들에서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 아실, 또는 임의로 아실화된 단당류이다.
또 다른 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 적어도 1개의 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실)을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 단쇄 지방산 아실은 아세틸, 프로피오닐 또는 부티릴이다. 소정의 실시예들에서, 상기 단쇄 지방산 아실은 아세틸이다. 특정한 실시예에서, 상기 단쇄 지방산 아실은 부티릴이다.
일부 실시예에서, 상기 활성제는 스틸베노이드 또는 카테킨 폴리페놀과 케톤체 또는 프리-케톤체의 조합이다. 소정의 실시예들에서, 상기 스틸베노이드 또는 카테킨 폴리페놀 대 케톤체 또는 프리-케톤체의 몰비는 1:1 내지 1:10이다. 특정한 실시예들에서, 상기 활성제는 스틸베노이드와 케톤체 또는 프리-케톤체의 조합이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 활성제는 스틸베노이드와 프리-케톤체의 조합이다. 또 다른 실시예들에서, 상기 스틸베노이드는 레스베라트롤이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 구조의 아실화된 스틸베노이드를 제공하며:
Figure pct00021
,
이때
n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
m은 1, 2, 3, 또는 4이고;
각각의 R1은 독립적으로 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고
각각의 R2는 독립적으로 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
여기서 각각의 지방산 함유 기는 독립적으로 지방산 아실로 치환된 1개, 2개, 3개 또는 4개의 하이드록실기를 갖는 단당류이고;
적어도 1개의 R1 또는 적어도 1개의 R2가 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 포함하는 것을 전제로 한다.
소정의 실시예들에서, n은 1이다. 특정 실시예들에서, m은 2이다. 추가의 실시예들에서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 하기 구조의 화합물이다:
Figure pct00022
.
또 다른 실시예들에서, 적어도 1개의 R1은 지방산 함유 기다. 또 다른 실시예들에서, 적어도 1개의 R1은 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기다. 특정 실시예들에서, 적어도 1개의 R1은 아미노산 대사물질 함유 기다. 소정의 실시예들에서, 적어도 1개의 R2는 지방산 함유 기다. 일부 실시예에서, 적어도 1개의 R2는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기다. 추가 실시예들에서, 적어도 1개의 R2는 아미노산 대사물질 함유 기다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 화합물 및 이를 함유하는 조성물(예를 들어, 약제학적 조성물 또는 기능성식품 조성물)을 제공한다. 본 발명의 화합물은 본원에서 설명된 화합물, 예를 들어, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 엘라그산, 아실화된 엘라그산 유사체, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 아미노산, 아실화된 담즙산, 아실화된 메살라민, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 비타민, 또는 아실화된 하이드록시벤조산이다.
정의
본원에서 사용되는 용어 "활성제(active agent)"는 아실화된 활성제, 카테킨 폴리페놀(catechin polyphenol), 스틸베노이드(stilbenoid), 케톤체(ketone body), 프리-케톤체(pre-ketone body), 또는 지방산을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "활성제 조합"은 제1 활성제 및 제2 활성제를 포함하는 병용 요법을 지칭한다. 제1 활성제는, 예컨대, 카테킨 폴리페놀, 스틸베노이드, 메살라민(mesalamine), 하이드록시벤조산(hydroxybenzoic acid), 쉬킴산(shikimic acid), 또는 단당류일 수 있다. 제2 활성제는 예를 들어, 케톤체 또는 프리-케톤체일 수 있다. 활성제 조합의 비제한적인 예는 스틸베노이드(예를 들어, 레스베라트롤(resveratrol)) 및 프리-케톤체(예컨대, 1,3-부탄디올)를 포함한다. 제1 및 제2 활성제는 함께(예를 들어, 동일한 단위 투여량 형태로) 또는 개별적으로(예를 들어, 서로 24시간 이내에) 투여될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "아실(acyl)"은 식 -C(O)-R의 화학적 치환체를 나타내며, 이때 R은 알킬, 알케닐, 아릴, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클릴 알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로아릴 알킬이다. 임의로 치환된 아실은 각각의 기 R에 대해 본원에서 설명되는 바와 같이 임의로 치환되는 아실이다. 부가적으로, 아실은 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 메살라민 아실, 및 레티노산 아실로 이루어진 군으로부터 선택된 화학적 치환체일 수 있다. 아실의 비제한적인 예는 지방산 아실 (예를 들어, 단쇄 지방산 아실 (예를 들어, 아세틸)), 벤조일 (예컨대, 임의로 치환된 벤조일), 케톤체 아실, 프리-케톤체 아실, 당산 아실 (예를 들어, 알도닐(aldonyl), 우로닐(uronyl), 울로소닐(ulosonyl)), 아미노산 아실, 및 아미노산 대사물질 아실을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 활성제"는 에스테르 결합(들), 아미드 결합(들), 카보네이트 링커(들), 카바메이트 링커(들), 및/또는 글리코시드 결합(들)을 통해 연결된 둘 이상의 제제를 포함하는 화합물을 나타낸다. 아실화된 활성제의 비제한적인 예는 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 엘라그산, 아실화된 엘라그산 유사체, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 아미노산, 아실화된 담즙산, 아실화된 메살라민, 아실화된 메트포르민, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 당, 아실화된 비타민, 또는 아실화된 하이드록시벤조산을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 “아실화된 S-아데노실-L-메티오닌"은 적어도 1개의 하이드록실기가 치환기 -OR로 대체되는 S-아데노실-L-메티오닌을 나타내며, 이때 각각의 R은 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 및 아미노산 대사물질 함유 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 아미노산"은, 적어도 1개의 알코올 하이드록실기(존재하는 경우) 또는 아미노기가 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환되는, 아미노산을 나타낸다. 아실화된 아미노산의 비제한적인 예는 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환되는 아미노기를 갖는 L-알라닌을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 담즙산"은 적어도 1개의 하이드록실기가 치환기 -OR로 대체되는 담즙산을 나타내며, 이때 각각의 R은 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다. 아실화된 담즙산의 비제한적인 예는아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 독립적으로 치환되는 1개 또는 2개의 알코올 하이드록실기를 갖는, 우르소데옥시콜산(ursodeoxycholic acid) 또는 오베티콜산(obeticholic acid)을 포함하며, 적어도 1개의 하이드록실기가 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환되는 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 카로티노이드"는 적어도 1개의 하이드록실기가 치환기 -OR로 대체되는 카로티노이드를 나타내며, 이때 각각의 R은 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 및 아미노산 대사물질 함유 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 적어도 1개의 R이 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다,. 아실화된 카로티노이드의 비제한적인 예는 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 독립적으로 치환되는 1개 또는 둘 모두의 하이드록실기를 갖는, 아스타잔틴(astaxanthin)을 포함하며, 적어도 1개의 하이드록실기가 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환되는 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 카테킨 폴리페놀"은 식 (A)의 코어를 갖는 치환된 화합물:
Figure pct00023
,
(A)
또는 그의 다량체, 또는 그의 염을 나타내고,
이때 치환체는 -ORA, -OCOO-RA, -NHRB, 옥소, 할로겐, 임의로 치환된 C1-20 알킬, 임의로 치환된 C2-20 알케닐, 임의로 치환된 티오알킬, 임의로 치환된 알킬술포닐, 임의로 치환된 알킬술페닐, 임의로 치환된 알킬술피닐, 임의로 치환된 티오아릴, 임의로 치환된 아릴 티오알킬, 임의로 치환된 티오알케닐, 디알킬아미노, 황산염, 인산염, 아스코르브산, 임의로 치환된 헤테로시클릴, 니트로, 아미노산, 아미노산의 C1-6 에스테르, 임의로 아실화된 단당류, 및 임의로 아실화된 당산으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 치환되고, 이때 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록실, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알콕시, 임의로 치환된 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고, 이때 RB는 독립적으로 H 또는 임의로 치환된 알킬이고;
이때 식 (A)에서 2번 탄소 및 3번 탄소를 연결하는 탄소-탄소 결합은 단일 결합 또는 이중 결합이고;
이때 상기 다량체는 식 (A)의 총 2 또는 3개의 코어를 포함하고, 각각의 코어는 전술한 바와 같이 독립적으로 치환되고; 그리고
이때 코어 (A)의 2개의 근접 중심이 -(O)q-L1-L2- 기로 추가로 치환될 수 있으며, 이때 q는 0 또는 1이고, L1은 임의로 치환된 알킬렌, 임의로 치환된 알케닐렌, 또는 임의로 치환된 헤테로시클릴렌이고; 및 L2는 공유 결합, 임의로 치환된 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 시클로알킬렌이고;
5, 6, 7, 및 8 위치 중 적어도 하나가 -ORA인 것을 전제로 하며, 이때 RA는 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록실, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 프리-케톤체 함유 기, 임의로 치환된 알콕시, 임의로 치환된 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고; 그리고
상기 치환된 화합물이 적어도 1개의 지방산 함유 기, 케톤체 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 포함하는 것을 전제로 한다.
또한 용어 "아실화된 카테킨 폴리페놀"은 적어도 1개의 하이드록실기가 치환기 -OR로 독립적으로 대체되는 카테킨 폴리페놀을 나타내며, 이때 각각의 R은 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 및 아미노산 대사물질 함유 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다. 아실화된 카테킨 폴리페놀의 비제한적인 예는 아실, 알킬, 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1 내지 8개의 하이드록실기를 갖는 에피갈로카테킨 갈레이트(epigallocatechin gallate)을 포함하며, 적어도 1개의 하이드록실기가 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체를 포함하는 기로 치환되는 것을 전제로 한다. 예를 들어, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I)의 화합물:
Figure pct00024
,
(I)
또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
이때
Figure pct00025
은 단일 탄소-탄소 결합 또는 이중 탄소-탄소 결합이고;
Q는 -CH2- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R1 및 각각의 R3은 독립적으로 H, 할로겐, -ORA, 인산염, 또는 황산염이고;
R2는 H 또는 -ORA이고;
각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 단당류, 당산, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고; 그리고
n과 m의 각각은 독립적으로 0, 1, 2, 3, 또는 4이다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 엘라그산(acylated ellagic acid)"은 하기 구조의 화합물:
Figure pct00026
또는
Figure pct00027
, 또는 그의 염을 나타내고,
이때 RA는 독립적으로 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고 각각의 RB는 독립적으로 H, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 적어도 1개의 RA 및/또는 적어도 1개의 RB는, 존재하는 경우, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 엘라그산 유사체(acylated ellagic acid analogue)"는 하기 구조의 화합물:
Figure pct00028
, 또는 그의 염을 나타내고,
이때
R2, R3, 및 R4의 각각은 독립적으로 H 또는 -ORA이고;
R6은 H 또는 -(CO)-R5B이고;
R1A는 H 또는 -ORA이고, R5A는 -OH 또는 -ORB이고; 또는 R1A 및 R5A는 결합하여 -O-를 형성하고;
R1B는 H 또는 -ORA이고, R5B는 부재하거나, -OH, 또는 -ORB이고; 또는 R1B 및 R5B는 결합하여 -O-를 형성하고;
각각의 RA는 독립적으로 H, O-보호기, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
각각의 RB는 독립적으로 H, O-보호기, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
적어도 1개의 RA 및/또는 적어도 1개의 RB가 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 하이드록시벤조산(acylated hydroxybenzoic acid)"은 하기 식의 화합물:
Figure pct00029
,
또는 그의 염을 나타내고,
이때
n은 1, 2, 또는 3이고;
각각의 R1은 독립적으로 H, 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고
R2는 H, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
상기 화합물이 적어도 1개의 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 포함하는 것을 전제로 한다.
아실화된 하이드록시벤조산의 비제한적인 예는, 1, 2 또는 3개의 페놀 하이드록실들이 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 독립적으로 치환되는, 갈산을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 메살라민(acylated mesalamine)"은 -NH2, -OH, 또는 -COOH 중 1개 이상에서 1개의 H가 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 대체되는 메살라민을 나타내며, 아실화된 메살라민이 적어도 1개의 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 함유하는 것을 전제로 한다. 일부 실시예에서, 아실화된 메살라민은 하기 식 (II)의 화합물이고:
Figure pct00030
,
(II)
이때
R1은 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
R2는 H, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고
각각의 R3은 독립적으로 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기거나; 또는 R3 기 모두가 결합하여 다음을 형성한다:
Figure pct00031
.
아실화된 메살라민은 적어도 1개의 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 메트포르민(acylated 메트포르민)"는 적어도 1개의 질소가 아실, 알킬, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환되는, 메트포르민을 나타내며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 쉬킴산(acylated shikimic acid)"은 하기 식:
Figure pct00032
, 또는 그의 염을 나타내고,
이때
각각의 R1은 독립적으로 H, 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고
R2는 H, 알킬, 또는 지방산 함유 기고;
상기 화합물이 적어도 1개의 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 포함하는 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 스틸베노이드(acylated stilbenoid)"는 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 하이드록실기가 치환기 -OR로 독립적으로 대체되는, 스틸베노이드를 나타내며, 이때 각각의 R은 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 당(acylated sugar)"은 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환된 1개 이상의 하이드록실을 갖는 단당류 또는 글루코시놀레이트를 나타낸다. 단당류 기반 아실화된 당은 아실화된 단당류다. 글루코시놀레이트 기반 아실화된 당은 아실화된 글루코시놀레이트다. 바람직하게는, 상기 아실화된 당은 아실화된 단당류다. 상기 단당류는 피라노오스 또는 푸라노오스 형태로 존재한다. 바람직하게는, 상기 단당류는 피라노오스 형태로 존재한다. 상기 단당류는 알도오스 또는 케토오스일 수 있다. 단당류의 비제한적인 예는 아라비노오스, 자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, 글루코오스, 리보오스, 타가토오스, 푸코오스, 글루코사민 및 람노오스다. 일부 실시예에서, 상기 단당류는 L-아라비노오스, D-자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, D-글루코오스, D-리보오스, D-타가토오스, L-푸코오스, 또는 L-람노오스다. 바람직하게는, 상기 단당류는 자일로오스, 아라비노오스, 람노오스, 푸코오스, 글루코사민, 또는 타가토오스다. 상기 단당류는 -OR에 결합된 아노머 탄소(anomeric carbon)를 포함할 수 있으며, 이때 R은 H, 알킬, 아실, 또는 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기다.
본원에서 사용되는 용어 "아실화된 비타민(acylated vitamin)"은 적어도 1개의 하이드록실기가 치환기 -OR로 독립적으로 대체되는 비타민을 나타내며, 이때 각각의 R은 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기인 것을 전제로 한다. 아실화된 비타민의 비제한적인 예는, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환된 하이드록실기를 가지는 토코페롤 (예를 들어, α-토코페롤, β-토코페롤, γ-토코페롤, 또는 δ-토코페롤), 토코트리엔놀, 또는 비타민 D (예를 들어, 콜레칼시페롤)를 포함한다. 아실화된 비타민의 다른 비제한적인 예는, 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 및 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 1개, 2개, 3개, 또는 4개의 하이드록실기를 갖는 아스코르브산이며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다.
본원에서 사용되는 용어 "아실옥시(acyloxy)"는 식 -OR의 화학적 치환체를 나타내며, 이때 R은 아실이다. 임의로 치환된 아실옥시는 아실에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 아실옥시다.
본원에서 사용되는 용어 "알코올 산소 원자(alcohol oxygen atom)"는 2가 산소 원자를 지칭하며, 이때 알코올 산소 원자의 하나의 원자가가 제1 탄소 원자에 결합되고, 다른 하나의 원자가가 제2 탄소 원자에 결합되며, 이때 제1 탄소 원자는 sp 3-혼성화 탄소 원자이고, 및 제2 탄소 원자는 카르보닐기의 sp 3-혼성화 탄소 원자 또는 sp 2-혼성화 탄소 원자다.
본원에서 사용되는 용어 "알도닐(aldonyl)"은 카르복실레이트 하이드록실기가 원자가로 대체되는 알돈산(aldonic acid)인 1가 치환체를 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "알카노일(alkanoyl)"은 식 -C(O)-R의 화학적 치환체를 나타내며, 이때 R은 알킬이다. 임의로 치환된 알카노일은 알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 알카노일이다.
본원에서 사용되는 용어 "알콕시(alkoxy)"는 식 -OR의 화학적 치환체를 나타내며, 이때 R은 달리 명시되지 않는 한, C1-6 알킬기다. 임의로 치환된 알콕시는 알킬에 대해 본원에서 정의된 바와 같이 임의로 치환되는 알콕시기다.
본원에서 사용되는 용어 "알케닐(alkenyl)"은 1개, 2개 또는 3개의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 비환형 1가 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 기들을 나타낸다. 알케닐은, 미치환된 경우, 달리 명시되지 않는 한, 2 내지 22개의 탄소를 갖는다. 소정의 바람직한 실시예들에서, 알케닐은, 미치환된 경우, 2 내지 12개의 탄소 원자(예를 들어, 1 내지 8개의 탄소)를 갖는다. 알케닐기의 비제한적인 예는 에테닐, 프로프-1-에닐, 프로프-2-에닐, 1-메틸에테닐, 부트-1-에닐, 부트-2-에닐, 부트-3-에닐, 1-메틸프로프-1-에닐, 2-메틸프로프-1-에닐, 및 1-메틸프로프-2-에닐을 포함한다. 알케닐기는 알킬에 대해 본원에서 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "알케닐렌(alkenylene)"은 1개의 수소가 제거되어, 이 기를 2가로 만드는, 직쇄 또는 분지쇄 알케닐기를 지칭한다. 알케닐렌기의 비제한적인 예는 에텐-1,1-디일; 에텐-1,2-디일; 프로프-1-엔-1,1-디일, 프로프-2-엔-1,1-디일; 프로프-1-엔-1,2-디일, 프로프-1-엔-1,3-디일; 프로프-2-엔-1,1-디일; 프로프-2-엔-1,2-디일; 부트-1-엔-1,1-디일; 부트-1-엔-1,2-디일; 부트-1-엔-1,3-디일; 부트-1-엔-1,4-디일; 부트-2-엔-1,1-디일; 부트-2-엔-1,2-디일; 부트-2-엔-1,3-디일; 부트-2-엔-1,4-디일; 부트-2-엔-2,3-디일; 부트-3-엔-1,1-디일; 부트-3-엔-1,2-디일; 부트-3-엔-1,3-디일; 부트-3-엔-2,3-디일; 부타-1,2-디엔-1,1-디일; 부타-1,2-디엔-1,3-디일; 부타-1,2-디엔-1,4-디일; 부타-1,3-디엔-1,1-디일; 부타-1,3-디엔-1,2-디일; 부타-1,3-디엔-1,3-디일; 부타-1,3-디엔-1,4-디일; 부타-1,3-디엔-2,3-디일; 부타-2,3-디엔-1,1-디일; 및 부타-2,3-디엔-1,2-디일을 포함한다. 임의로 치환된 알케닐렌은 알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 알케닐렌이다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬(alkyl)"은, 달리 명시되지 않는 한, 미치환된 경우 1 내지 22개의 탄소(예를 들어, 1 내지 20개의 탄소)를 갖는 비환형 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소기를 지칭한다. 소정의 바람직한 실시예들에서, 알킬은, 미치환된 경우, 1 내지 12개의 탄소(예를 들어, 1 내지 8개의 탄소)를 갖는다. 알킬기는 메틸; 에틸; n- 및 이소-프로필; n-, 이차-, 이소- 및 삼차-부틸; 네오펜틸 등에 의해 예시되고; 원자가가 허용하는 한, 다음으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된, 1, 2, 3개, 또는 2개 이상의 탄소를 갖는 알킬기의 경우, 4개 이상의 치환체로 임의로 치환될 수 있다: 알콕시; 아실옥시; 알킬술페닐; 알킬술피닐; 알킬술포닐; 아미노; 아릴; 아릴옥시; 아지도; 시클로알킬; 시클로알콕시; 할로; 헤테로시클릴; 헤테로아릴; 헤테로시클릴알킬; 헤테로아릴알킬; 헤테로시클릴옥시; 헤테로아릴옥시; 하이드록시; 니트로; 티오알킬; 티오알케닐; 티오아릴; 티올; 실릴; 시아노; 옥소 (=O); 티오 (=S); 및 이미노 (=NR'), 이때 R'는 H, 알킬, 아릴, 또는 헤테로시클릴이다. 각각의 치환체는 그 자체가 미치환되거나, 원자가가 허용하는 한, 각각 그 각각의 기에 대해 본원에서 정의된 미치환된 치환체(들)로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬렌(alkylene)"은2개의 원자가가 2개의 수소 원자를 대체하는, 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소인 포화된 2가 탄화수소기를 지칭한다. 알킬렌기의 비제한적인 예는 메틸렌, 에탄-1,2-디일, 에탄-1,1-디일, 프로판-1,3-디일, 프로판-1,2-디일, 프로판-1,1-디일, 프로판-2,2-디일, 부탄-1,4-디일, 부탄-1,3-디일, 부탄-1,2-디일, 부탄-1,1-디올, 및 부탄-2,2-디일, 부탄-2,3-디일을 포함한다. 임의로 치환된 알킬렌은 알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 알킬렌이다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬술페닐(alkylsulfenyl)"은 식 -S-(알킬)의 기를 나타낸다. 임의로 치환된 알킬술페닐은 알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 알킬술페닐이다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬술피닐(alkylsulfinyl)"은 식 -S(O)-(알킬)의 기를 나타낸다. 임의로 치환된 알킬술피닐은 알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 알킬술피닐이다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬술포닐(alkylsulfonyl)"은 식 -S(O)2-(알킬)의 기를 나타낸다. 임의로 치환된 알킬술포닐은 알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 알킬술포닐이다.
본원에서 사용되는 용어 "아미드 결합(amide bond)"은 다른 탄소 원자에 추가로 결합되는 카르보닐기의 질소 원자와 탄소 원자 사이의 공유 결합을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "아미노산(amino acid)"은 프롤린, 타우린, 또는 임의로 치환된 알킬렌 또는 임의로 치환된 아릴렌에 의해 분리된 카르복실레이트 또는 술포네이트 기를 갖는 화합물을 나타낸다. 아미노산은 작은 분자이며 < 900 g/몰(바람직하게는 <500 g/몰)의 분자량을 가진다. 바람직하게는, 링커가 알킬렌일 때, 링커는 알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 일부 실시예에서, 임의로 치환된 알킬렌은 독립적으로 하이드록실, 티올, 아미노, 구아니딘, 카르바모일아미노, 이미다졸릴, 인돌릴, -SeH, 옥소, 4-하이드록시페닐, 페닐, 또는 -SMe인 1 또는 2개 기로 치환된 알킬렌이다. 아미노산의 비제한적인 예는 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 셀레노시스테인, 세린, 트레오닌, 티로신, 트립토판, 오르니틴, 시트룰린, 아미노벤조산 및 타우린을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "아미노산 대사물질(amino acid metabolite)"은 단백질생성(proteinogenic) 아미노산을 나타내며, 여기서 α-아미노기가 -OH 또는 -H로 대체되고, 여기서 1-카르복실기는 H로 대체되고, 여기서 α-(CHNH2) 기는 카르보닐로 대체되고, 여기서 α-아미노기 및 β-수소 원자가 이중 결합으로 대체되거나, 여기서 1카르복실기가 히드록실로 대체되고 α-(CHNH2) 기가 카르보닐로 대체된다. 아미노산 대사물질의 비제한적인 예는 인돌-3-아세트산, 인돌-3-프로피온산, 3-(인돌-3-일)-아크릴산, 인돌-3-피루브산 및 3-(인돌-3-일)-2-하이드록시프로피온산을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "아미노산 대사물질 아실"은 카르복실레이트 -OH가 원자가로 대체되는 아미노산 대사물질을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴(aryl)"은 1개 또는 2개의 방향족 고리를 갖는 모노-, 이환 또는 다환 탄소환 고리 시스템을 나타낸다. 아릴기는 6 내지 10개의 탄소 원자를 포함할 수 있다. 미치환된 탄소환 아릴기 내의 모든 원자들은 탄소 원자이다. 탄소환 아릴기의 비제한적인 예는 페닐, 나프틸, 1,2-디하이드로나프틸, 1,2,3,4-테트라하이드로나프틸, 플루오레닐, 인다닐, 인데닐 등을 포함한다. 아릴기는 미치환되거나 알킬; 알케닐; 알콕시; 아실옥시; 아미노; 아릴; 아릴옥시; 아지도; 시클로알킬; 시클로알콕시; 할로; 헤테로시클릴; 헤테로아릴; 할로; 헤테로시클릴; 헤테로아릴; 헤테로시클릴알킬; 헤테로아릴알킬; 헤테로시클릴옥시; 헤테로아릴옥시; 하이드록시; 니트로; 티오알킬; 티오알케닐; 티오아릴; 티올; 실릴; 및 시아노로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환체로 치환될 수도 있다. 각각의 치환체는 그 자체가 미치환되거나, 각각 그 각각의 기에 대해 본원에서 정의된 미치환된 치환체(들)로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴 알킬(aryl alkyl)"은 아릴기로 치환된 알킬기를 나타낸다. 임의로 치환된 아릴 알킬은 아릴 알킬이고, 여기서 아릴 및 알킬 부분은 본원에서 설명된 바와 같은 개별 기로서 임의로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴렌(arylene)"은 1개의 수소 원자가 원자가로 대체되는, 아릴기인 2가 기이다. 아릴렌은 아릴에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다. 아릴렌의 비제한적인 예는 페닐렌(예를 들어, 1,2-페닐렌, 1,3-페닐렌, 및 1.4-페닐렌)을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴옥시(aryloxy)"는 기 -OR을 나타내며, 이때 R은 아릴이다. 아릴옥시는 임의로 치환된 아릴옥시일 수 있다. 임의로 치환된 아릴옥시는 아릴에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 아릴옥시다.
본원에서 사용되는 용어 "담즙산(bile acid)"은 하기 식의 화합물을 나타내고:
Figure pct00033
,
이때
R1은 하이드록실이고;
R2 및 R3의 각각은 독립적으로 H 또는 하이드록실이고;
R4는 H 또는 알킬이고;
R5는 하이드록실, -NH-CH(RA)-COOH, 또는 아미노 술폰산이고; 그리고
RA는, 존재하는 경우, 단백질생성 아미노산의 측쇄다.
담즙산의 비제한적인 예는 다음과 같다:
Figure pct00034
및
Figure pct00035
.
오베티콜산(obeticholic acid) 우르소데옥시콜산(ursodeoxycholic acid)
담즙산이 아실화될 때, 담즙산 내의 하이드록실기 중 1개 이상은 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 것으로 독립적으로 치환된다.
본원에서 사용되는 용어 "담즙산 아실(bile acid acyl)"은 카르복실레이트를 갖는 담즙산인 1가 기를 지칭하며, 여기서 -OH는 원자가로 대체된다.
본원에서 사용되는 용어 "카바메이트 링커(carbamate linker)"는 기 R1-(CO)-R2를 지칭하고, 이때 R1은 알코올 또는 페놀 산소 원자에 대한 결합이고, R2는 질소 원자에 대한 결합이다.
본원에서 사용되는 용어 "카보네이트 링커(carbonate linker)"는 기 R1-C(O)-R2를 지칭하고, 이때 R1은 제1 알코올 또는 페놀 산소 원자에 대한 결합이고, R2는 제2 알코올 또는 페놀 산소 원자에 대한 결합이다.
본원에서 사용되는 용어 "카르보닐(carbonyl)"은 2가 기 -C(O)-을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "카르복실레이트(carboxylate)"는 기 -COOH 또는 그의 염을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "카로티노이드(carotenoid)"는 하기 식의 화합물을 나타내고:
Figure pct00036
,
이때
R1은
Figure pct00037
,
Figure pct00038
,
Figure pct00039
, 또는
Figure pct00040
이고; 그리고
R2는
Figure pct00041
,
Figure pct00042
, 또는
Figure pct00043
이다.
카로티노이드의 비제한적인 예는 다음을 포함한다:
Figure pct00044
카로티노이드가 아실화될 때, 카로티노이드 내의 하이드록실기 중 1개 또는 둘 모두는 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된다.
본원에서 사용되는 용어 "카테킨 폴리페놀(catechin polyphenol)"은 하기 식의 화합물을 지칭하고:
Figure pct00045
,
이때
Figure pct00046
은 단일 탄소-탄소 결합 또는 이중 탄소-탄소 결합이고;
Q는 -CH2- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R1 및 각각의 R3은 독립적으로 H, 할로겐, -ORA, 인산염, 또는 황산염이고;
R2는 H 또는 -ORA이고;
각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 단당류, 당산, 또는 H, 하이드록시, 할로겐, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고;
m은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고; 그리고
n은 1, 2, 3, 또는 4이다.
바람직하게, n과 m의 각각은 독립적으로 1, 2, 3, 또는 4이다. 카테킨 폴리페놀의 비제한적인 예는 에피갈로카테킨 갈레이트를 포함한다. 카테킨 폴리페놀이 아실화될 때, 카테킨 폴리페놀의 하이드록실기 중 1개 이상은 지방산을 포함하는 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체를 포함하는 기로 독립적으로 치환된다.
본원에서 사용되는 표현 "Cx-y"은, 미치환된 경우, 명칭이 그 표현 바로 뒤에 오는 기가 총 x에서 y개의 탄소 원자를 함유하는 것을 표시한다. 상기 기가 복합 기(예, 아릴 알킬)인 경우, Cx-y는, 미치환된 경우, 명칭이 그 표현 바로 뒤에 오는, 부분이 총 x에서 y개의 탄소 원자를 함유하는 것을 표시한다. 예를 들어, (C6-10-아릴)-C1-6-알킬은, 미치환된 경우, 아릴 부분이 총 6 내지 10개의 탄소 원자를 함유하고, 미치환된 경우, 알킬 부분이 총 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 기다.
본원에서 사용되는 용어 "시클로알킬(cycloalkyl)"은 달리 명시되지 않는 한, 3 내지 10개의 탄소(예를 들어, C3-C10 시클로알킬)을 갖는 환식 알킬(cyclic alkyl)을 지칭한다. 시클로알킬기는 단일환식 또는 이환식일 수 있다. 이환 시클로알킬기는 p와 q의 합이 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8인 경우, 비시클로[p.q.0]알킬 유형, 및 p 및 q 각각이 독립적으로, 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7일 수 있다. 대안적으로, 이환 시클로알킬기는 브릿지형 시클로알킬 구조, 예를 들어, 비시클로[p.q.r]알킬을 포함할 수 있으며, 여기서 r은 1, 2, 또는 3이고, p 및 q의 각각은 독립적으로 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이며, p, q, 및 r의 합이 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8인 것을 전제로 한다. 시클로알킬기는 스피로환기이고, 예를 들어, 스피로[p.q]알킬이고, 여기서 p 및 q의 각각은 독립적으로 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7이고, p 및 q의 합이 4, 5, 6, 7, 8, 또는 9인 것을 전제로 한다. 시클로알킬의 비제한적인 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 1-비시클로[2.2.1.]헵틸, 2-비시클로[2.2.1.]헵틸, 5-비시클로[2.2.1.]헵틸, 7-비시클로[2.2.1.]헵틸 및 데칼리닐(decalinyl)을 포함한다. 시클로알킬기는 미치환되거나, 다음으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된, 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환체로 치환될 수 있다(예를 들어, 임의로 치환된 시클로알킬): 알킬; 알케닐; 알콕시; 아실옥시; 알킬술페닐; 알킬술피닐; 알킬술포닐; 아미노; 아릴; 아릴옥시; 아지도; 시클로알킬; 시클로알콕시; 할로; 헤테로시클릴; 헤테로아릴; 헤테로시클릴알킬; 헤테로아릴알킬; 헤테로시클릴옥시; 헤테로아릴옥시; 하이드록시; 니트로; 티오알킬; 티오알케닐; 티오아릴; 티올; 실릴; 시아노; 옥소 (=O); 티오 (=S); 이미노 (=NR'), 이때 R'는 H, 알킬, 아릴, 또는 헤테로시클릴이다. 각각의 치환체는 그 자체가 미치환되거나, 각각 그 각각의 기에 대해 본원에서 정의된 미치환된 치환체(들)로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "시클로알킬렌(cycloalkylene)"은 1개의 수소 원자가 원자가(valency)로 대체되는, 시클로알킬기인 2가 기를 나타낸다. 임의로 치환된 시클로알킬렌은 시클로알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 시클로알킬렌이다.
본원에서 사용되는 용어 "시클로알콕시(cycloalkoxy)"는 기 -OR을 나타내며, 이때 R은 시클로알킬이다. 임의로 치환된 시클로알콕시는 시클로알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 시클로알콕시다.
본원에서 사용되는 용어 "디알킬아미노(dialkylamino)"는 기 -NR2를 지칭하며, 이때 각각의 R은 독립적으로 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "엘라그산(ellagic acid)" 및 "엘라그산 유사체(ellagic acid analogue)"는 집합적으로 하기 구조의 화합물을 지칭하고:
Figure pct00047
,
이때
R2, R3, 및 R4의 각각은 독립적으로 H 또는 -ORA이고;
R6은 H 또는 -(CO)-R5B이고;
R1A는 H 또는 -ORA이고, R5A는 -OH 또는 -ORA이며, 또는 R1A 및 R5A는 결합하여 -O-를 형성하고;
R1B는 H 또는 -ORA이고, R5B는 부재하거나, -OH, 또는 -ORA이며, 또는 R1B 및 R5B는 결합하여 -O-를 형성하고;
각각의 RA는 독립적으로 H 또는 O-보호기다.
만약 엘라그산 또는 그의 유사체가 아실화된 엘라그산 또는 아실화된 엘라그산 유사체에 존재할 때, 엘라그산 또는 그의 유사체 중의 1개로부터 모든 하이드록실이 지방산 함유 기로 치환된다. 용어 "엘라그산 유사체"는 엘라그산이 아닌 상기 구조의 화합물 및 기를 지칭한다. 용어 "엘라그산"은 하기 2개의 화합물을 지칭한다:
Figure pct00048
또는
Figure pct00049
, 또는 컨쥬게이트의 구조 내의 이들 화합물.
엘라그산 유사체의 비제한적인 예는 유로리틴(urolithin) A, 유로리틴 B, 유로리틴 C, 유로리틴 D, 유로리틴 E, 및 유로리틴 M5를 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "에스테르 결합"은 알코올 또는 페놀 산소 원자와 탄소 원자에 추가로 결합되는 카르보닐기 사이의 공유 결합을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "지방산"은 단쇄 지방산, 중쇄 지방산, 장쇄 지방산, 초장쇄 지방산, 또는 그의 불포화 유사체, 또는 그의 페닐-치환된 유사체를 지칭한다. 단쇄 지방산은 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하고, 중쇄 지방산은 7 내지 13개의 탄소 원자를 함유하고, 장쇄 지방산은 14 내지 22개의 탄소 원자를 함유한다. 지방산은 포화 또는 불포화될 수 있다. 불포화 지방산은 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 탄소-탄소 이중 결합을 포함한다. 바람직하게는, 불포화 지방산 내의 탄소-탄소 이중 결합은 Z 입체화학을 갖는다.
본원에서 사용되는 용어 "지방산 아실"은 하이드록실기가 원자가로 대체되는 지방산을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "지방산 아실옥시"는 기 -OR을 지칭하며, 이때 R은 지방산 아실이다.
본원에서 사용되는 용어 "글리코시드 결합"은 산소 원자와 단당류 또는 아노머 탄소 원자를 갖는 당산 중 아노머 탄소 원자 사이의 공유 결합을 지칭한다.
본원에서 상호호환적으로 사용되는 용어 "아미노산 대사물질 함유 기(group containing an amino acid metabolite)" 및 "아미노산 대사물질 포함 기(group including an amino acid metabolite)"는, 그 구조 내에 적어도 1개의 아미노산 대사물질을 포함하고 카르보닐기의 탄소 원자 상 또는 아노머 탄소 원자 상에 원자가를 갖는 1가 치환체를 나타낸다. 아미노산 대사물질 함유 기는 카보네이트 링커, 카바메이트 링커, 에스테르 결합, 글리코시드 결합 또는 아미드 결합을 통해 코어에 결합한다. 아미노산 대사물질 함유 기는 단당류, 케톤체, 프리-케톤체, 알도닐, 우로닐, 울로소닐 및 아미노산 대사물질 아실로 이루어진 군으로부터 선택된 기일 수 있으며, 이때 단당류, 케톤체, 프리-케톤체, 알도닐, 우로닐, 및 울로소닐 중 각각의 하이드록실기가 임의로 그리고 독립적으로 아미노산 대사물질 아실로 치환된다.
본원에서 상호호환적으로 사용되는 용어 "지방산 함유 기(group containing a fatty acid)" 및 "지방산 포함 기(group including a fatty acid)"는, 그 구조 내에 적어도 1개의 지방산을 포함하고 카르보닐기의 탄소 원자 상 또는 아노머 탄소 원자 상에 원자가를 갖는 1가 치환체를 나타낸다. 지방산 함유 기는 카보네이트 링커, 카바메이트 링커, 에스테르 결합, 글리코시드 결합 또는 아미드 결합을 통해 코어에 결합한다. 지방산 함유 기는 단당류, 케톤체, 프리-케톤체, 알도닐, 우로닐, 울로소닐 및 지방산 아실로 이루어진 군으로부터 선택된 기일 수 있으며, 이때 단당류, 케톤체, 프리-케톤체, 알도닐, 우로닐 및 울로소닐 중 각각의 하이드록실기가 임의로 그리고 독립적으로 지방산 아실로 치환된다.
본원에서 상호호환적으로 사용되는 용어 "케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기(group containing a ketone body or pre-ketone body)" 및 "케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기(group including a ketone body or pre-ketone body)"는, 그 구조 내에 적어도 1개의 케톤체 및/또는 적어도 1개의 프리-케톤 체를 포함하고 카르보닐기의 탄소 원자 상 또는 아노머 탄소 원자 상에 원자가를 갖는 1가 치환체를 나타낸다. 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기는 카보네이트 링커, 에스테르 결합, 또는 글리코시드 결합을 통해 코어에 결합한다. 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기는 단당류, 케톤체, 알도닐, 우로닐, 울로소닐 및 -C(O)-R로 이루어진 군으로부터 선택된 기일 수 있으며, 이때 R은 프리-케톤체 또는 케톤체고, 이때 단당류, 케톤체, 프리-케톤체, 알도닐, 우로닐 및 울로소닐 중 각각의 하이드록실은 임의로 그리고 독립적으로 아실 또는 케톤체, 존재하는 경우, 아실로 임의로 치환된 하이드록실기로 치환된다.
본원에서 사용되는 용어 "할로겐"은 브롬, 염소, 요오드 및 불소로부터 선택된 할로겐을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴"은 단일환 5-, 6-, 7-, 또는 8-원 고리 시스템, 또는 융합되거나 가교하는 이환, 삼환 또는 사환 고리 시스템을 나타내며; 상기 고리 시스템은 질소, 산소 및 황으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 함유하며; 고리의 적어도 1개는 방향족 고리이다. 헤테로아릴기의 비제한적인 예는 벤즈이미다졸릴, 벤조푸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티에닐, 벤조옥사졸릴, 푸릴, 이미다졸릴, 인돌릴, 이소인다졸릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 옥사디아졸릴, 옥사졸릴, 푸리닐, 피롤릴, 피리디닐, 피라지닐, 피리미디닐, 퀴나졸리닐, 퀴놀리닐, 티아디아졸릴 (예, 1,3,4-티아디아졸), 티아졸릴, 티에닐, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 디하이드로인돌릴, 테트라하이드로퀴놀릴, 테트라하이드로이소퀴놀릴 등을 포함한다. 용어 이환, 삼환 및 사환 헤테로아릴은 전술한 바와 같은 적어도 1개의 헤테로원자를 갖는 적어도 1개의 고리 및 적어도 1개의 방향족 고리를 포함한다. 예를 들어, 적어도 1개의 헤테로원자를 갖는 고리는 1, 2 또는 3개의 탄소환 고리, 예를 들어, 아릴 고리, 시클로헥산 고리, 시클로헥센 고리, 시클로펜탄 고리, 시클로펜텐 고리, 또는 다른 단일환 헤테로환 고리에 융합될 수 있다. 융합된 헤테로아릴의 예로는 1,2,3,5,8,8a-헥사하이드로인돌리진; 2,3-디하이드로벤조퓨란; 2,3-디하이드로인돌; 및 2,3-디하이드로벤조티오펜을 포함한다. 헤테로아릴은 알킬; 알케닐; 알콕시; 아실옥시; 아릴옥시; 알킬술페닐; 알킬술피닐; 알킬술포닐; 아미노; 아릴알콕시; 시클로알킬; 시클로알콕시; 할로겐; 헤테로시클릴; 헤테로시클릴 알킬; 헤테로아릴; 헤테로아릴 알킬; 헤테로시클릴옥시; 헤테로아릴옥시; 하이드록시; 니트로; 티오알킬; 티오알케닐; 티오아릴; 티올; 시아노; =O; -NR2 (이때 각각의 R은 독립적으로 수소, 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 또는 헤테로아릴임); -COORA (이때 RA는 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 또는 헤테로아릴임); 및 -CON(RB)2 (이때 각각의 RB는 독립적으로 수소, 알킬, 아릴기, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 또는 헤테로아릴임);로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환체로 임의로 치환될 수 있다. 각각의 치환체는 그 자체가 미치환되거나, 각각 그 각각의 기에 대해 본원에서 정의된 미치환된 치환체(들)로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴옥시"는 R이 헤테로아릴인, 구조 -OR을 지칭한다. 헤테로아릴옥시는 헤테로아릴에 대해 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로시클릴"은, 달리 명시되지 않는 한, 융합되거나 가교하는 4-, 5-, 6-, 7-, 또는 8-원 고리 시스템을 갖는, 단일환, 이환, 삼환 또는 사환 비-방향족 고리 시스템을 나타내며, 상기 고리 시스템은 질소, 산소 및 황으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 함유한다. 비-방향족 5-원 헤테로시클릴은 0개 또는 1개의 이중 결합을 가지고, 비-방향족 6- 및 7-원 헤테로시클릴기는 0에서 2개의 이중 결합을 가지고, 비-방향족 8-원 헤테로시클릴기는 0부터 2개의 이중 결합 및/또는 0개 또는 1개의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는다. 헤테로시클릴기는 달리 명시되지 않는 한 1 내지 16개 탄소 원자의 탄소 계수를 갖는다. 특정 헤테로시클릴기는 최대 9개의 탄소 원자 탄소 계수를 가질 수 있다. 비-방향족 헤테로시클릴기는 피롤리닐, 피롤리디닐, 피라졸리닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸리디닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐, 피페라지닐, 피리다지닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 모폴리닐, 티오모폴리닐, 티아졸리디닐, 이소티아졸리디닐, 티아졸리디닐, 테트라하이드로퓨라닐, 디하이드로퓨라닐, 테트라하이드로티에닐, 디하이드로티에닐, 피라닐, 디하이드로피라닐, 디티아졸릴 등을 포함한다. 용어 "헤테로시클릴"은 또한 1개 이상의 탄소 및/또는 헤테로원자가 단일환 고리의 2개의 비인접한 구성원을 가교하는 브릿지형 다환 구조를 갖는 헤테로환 화합물을 나타낸다, 예, 퀴누클리딘(quinuclidine), 트로판(tropane) 또는 디아자-비시클로[2.2.2]옥탄. 용어 "헤테로시클릴"은 상기 헤테로환 고리 중 어느 하나가 1, 2 또는 3개의 카보환 고리, 예, 시클로헥산 고리, 시클로헥센 고리, 시클로펜탄 고리, 시클로펜텐 고리, 또는 다른 헤테로환 고리에 융합되는 이환, 삼환 및 사환 기를 포함한다. 융합된 헤테로시클릴의 예로는 1,2,3,5,8,8a-헥사하이드로인돌리진; 2,3-디하이드로벤조퓨란; 2,3-디하이드로인돌; 및 2,3-디하이드로벤조티오펜을 포함한다. 헤테로시클릴기는 미치환되거나 알킬; 알케닐; 알콕시; 아실옥시; 알킬술페닐; 알킬술피닐; 알킬술포닐; 아릴옥시; 아미노; 아릴알콕시; 시클로알킬; 시클로알콕시; 할로겐; 헤테로시클릴; 헤테로시클릴 알킬; 헤테로아릴; 헤테로아릴 알킬; 헤테로시클릴옥시; 헤테로아릴옥시; 하이드록시; 니트로; 티오알킬; 티오알케닐; 티오아릴; 티올; 시아노; =O; =S; -NR2 (이때 각각의 R은 독립적으로 수소, 알킬, 아실, 아릴, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴 또는 헤테로아릴임); -COORA (이때 RA는 수소, 알킬, 아릴, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 또는 헤테로아릴임); 및 -CON(RB)2 (이때 각각의 RB는 독립적으로 수소, 알킬, 아릴기, 아릴알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 또는 헤테로아릴임);로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환체로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로시클릴 알킬"은 헤테로시클릴기로 치환된 알킬기를 나타낸다. 임의로 치환된 헤테로시클릴 알킬의 헤테로시클릴 및 알킬 부분은 헤테로시클릴 및 알킬 각각에 대해 설명된 바와 같이 임의로 치환된다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로시클릴렌"은 1개의 수소 원자가 원자가로 대체되는 헤테로시클릴을 나타낸다. 임의로 치환된 헤테로시클릴렌은 헤테로시클릴에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 헤테로시클릴렌이다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로시클릴옥시"는 R이 헤테로시클릴인 구조 -OR을 지칭한다. 헤테로시클릴옥시는 헤테로시클릴에 대해 설명된 바와 같이 임의로 치환될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "하이드록시벤조산"은 하기 구조의 화합물:
Figure pct00050
,
또는 그의 염을 나타내고,
이때
n은 1, 2, 또는 3이고;
각각의 R1은 독립적으로 H 또는 알킬이고; 그리고
R2는 H 또는 알킬이다.
하이드록시벤조산의 비제한적인 예는 갈산(gallic acid)을 포함한다.
본원에서 상호호환적으로 사용되는 용어 "하이드록실" 및 "하이드록시"는 -OH를 나타낸다. 아실로 치환된 하이드록실은 아실옥시(acyloxy)이다. 보호된 하이드록실은 수소 원자가 O-보호기로 대체되는, 하이드록실이다.
본원에서 사용되는 용어 "히드록시메틸"은 기 -CH2OH을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "케톤체(ketone body)"는 (i) β-하이드록시부티르산 또는 아세토아세트산, 또는 (ii) 적어도 1개의 하이드록실 수소 원자가 원자가로 대체되거나 또는 카르복실레이트 -OH가 원자가로 대체되는, β-하이드록시부티르산 또는 아세토아세트산인 기를 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "케톤체 아실(ketone body acyl)"은 카르복실레이트 -OH 기가 원자가로 대체되는, 케톤체를 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "α-리포산 아실(α-lipoic acid acyl)"은 하기 식의 1가 기를 지칭한다:
Figure pct00051
.
본원에서 사용되는 용어 "대사 마커(metabolic marker)"는 대사 장애의 존재, 부재 또는 위험을 표시하는 관찰 가능한 것을 의미한다. 대사 마커의 수준은 비만 상태와 직접적으로 또는 역으로 상관될 수 있다. 대사 마커의 비제한적인 예는 총 지방 백분율, 세포 지방과다(adiposity), 체중 증가율, 복부 지방량, 피하 지방 양, 서혜부 지방(inguinal fat) 양, 부고환 지방(epididymal fat) 양, 백색 대 갈색 지방 비율, 콜레스테롤(예, 고밀도 리포단백질(HDL) 또는 저밀도 리포단백질(LDL)) 수준, 및 트리글리세리드 수준이다. 일부 실시예에서, 대사 마커는 총 지방 백분율, 세포 지방과다, 체중 증가율, 복부 지방량, 백색 대 갈색 지방 비율, 콜레스테롤(예, 고밀도 리포단백질(HDL) 또는 저밀도 리포단백질(LDL)) 수준, 및 트리글리세리드 수준이다. 총 지방 백분율은 체질량 지수를 사용하여 평가될 수 있다. 복부 지방은 허리 둘레를 측정하여 평가될 수 있다. 백색 대 갈색 지방 비율은, 예를 들어 Chen 등의 Nat. Commun., 7:11420에 기술된 기법 및 방법을 사용하는, miRNA-92a 수준 측정; 예를 들어 Gerngroß 등의 J. Nucl. Med., 58:1104-1110, 2017에 기술된 기법 및 방법을 사용하는, 18F-fluorodeoxyglucose 양전자방출 전산화 단층촬영(positron emission tomography/computed tomography); 예를 들어 Chen 등의 J. Nucl. Med., 54:1584-1587, 2013에 기술된 기법 및 방법을 사용하는, 자기공명영상(magnetic resonance imaging)에 의해 평가될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "4-메틸-1,3-디옥산-2-일(4-methyl-1,3-dioxan-2-yl)"은 하기 식의 1가 기를 지칭하고:
Figure pct00052
,
이때 R1은 임의로 치환된 C1-6 알킬 (예, 메틸)이다.
본원에서 사용되는 용어 "조절(modulating)"은 마커의 측정을 위해 당업계에 공지된 기술 및 방법을 사용하여 측정했을 때, 대상체 내의 마커의 수준의 관찰 가능한 변화를 지칭한다. 대상체 내의 마커 수준을 조절하면 투여 전에 비해 적어도 1%의 변화를 초래할 수 있다(예를 들어, 투여 전에 비해 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 적어도 98% 이상; 예를 들어, 투여 전에 비해 최대 100%). 일부 실시예에서, 조절은 대상체 내의 마커의 수준을 증가시킨다. 대상체 내의 마커 수준을 증가시키면 투여 전에 비해 적어도 1%의 증가를 초래할 수 있다(예를 들어, 투여 전에 비해 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 적어도 98% 이상; 예를 들어, 투여 전에 비해 최대 100%). 다른 실시예들에서, 조절은 대상체 내의 마커의 수준을 감소시킨다. 대상체 내의 마커 수준을 감소시키면 투여 전에 비해 적어도 1%의 감소를 초래할 수 있다(예를 들어, 투여 전에 비해 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 적어도 98% 이상; 예를 들어, 투여 전에 비해 최대 100%). 본원에서 설명되는 조성물을 투여하는 단계 이후 대상체 내에서 매개변수가 증가 또는 감소되는(또는 줄어드는) 실시예들에서, 증가 또는 감소는 투여 후 소정의 시간 범위 이내에 (예컨대, 6시간, 24시간, 3일, 1주 이상 이내에) 발생하고/하거나 검출가능할 수 있고, 1회 이상의 투여 후(예를 들어, 대상체에 대한 투여 요법의 일부로서, 예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10회 또는 그 이상의 투여 후) 발생하고/하거나 검출가능할 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "비알코올성 지방 질환 마커(nonalcoholic fatty disease marker)"는 비알코올성 지방 질환(예를 들어, 비알코올성 지방간염)의 존재 또는 부재를 표시하는 관찰가능한 것을 나타낸다. 비알코올성 질환 마커의 수준은 비알코올성 질환 상태와 직접적으로 또는 역으로 상관될 수 있다. 비알코올성 질환 마커의 비제한적인 예는 알라닌 트랜스아미나제 레벨 (ALT), 아스파르테이트 트랜스아미나제 레벨 (AST), γ-글루타밀트랜스퍼라제 레벨, 간 중량 및 섬유성 마커이다. 알라닌 트랜스아미나제 레벨, 아스파르테이트 트랜스아미나제 레벨, γ-글루타밀트랜스퍼라제 레벨, 및 섬유성 마커는 당업계에 공지된 방법을 사용하여 대상체로부터의 혈액 샘플에서 측정될 수 있다. 비알코올성 지방 질환 마커는 비침습성 시험, 영상 방법 및 생검을 사용하여 평가될 수 있다. 간 섬유증은 간 생검을 통해 침습적으로, 또는 대안적으로, 비-침습성 방법, 예를 들어, 혈청 마커의 복합 점수/알고리즘(Fibrotest, Hepatscore, Fibrometet FIB-4 점수, NAFLDD 섬유증 점수), 또는 순간 탄성측정법(Transient elastography), 자기 공명 탄성측정법, 음향 복사력 임펄스(acoustic radiation force impulses), 및 초음파측정(sonography)을 포함하는 영상 기법을 통해 평가될 수 있다 (Almpanis, Z., Annals of Gastroenterology, 29:1-9, 2016). BAAT는 비알코올성 지방 간 질환(예: 비알코올성 지방간염)에 대한 대상체의 평가를 위해 간 생검으로부터 이익을 얻을 수 있는 대상체를 식별하는 데 사용될 수 있는 전체적인 임상 점수다. BAAT는 체질량 지수, 연령, ALT 및 혈청 트리글리세리드를 조합한다. 또한, 음향 복사력 임펄스는 간 경직도를 측정하는 데에 사용될 수 있으며, 이는 섬유증 점수와 상관된다. 자기 공명 영상(MRI)은 간 밀도 및 간 지방 분율(hepatic fat fraction)을 확인하는 데 사용되고; 간 경직도는 MR 탄성측정법에 의해 측정될 수 있다 (Neuman 등, J. Pharm. Pharm. Sci., 19:8-24, 2016).
본원에서 사용되는 용어 "옥소(oxo)"는 2가 산소 원자를 나타낸다(예를 들어, 옥소의 구조는 =O로 표시될 수 있다).
본원에서 사용되는 용어 "페놀 산소 원자(phenolic oxygen atom)"는, 페놀 산소 원자의 1개의 원자가가 제1 탄소 원자에 결합되고, 다른 1개의 원자가가 제2 탄소 원자에 결합되는, 화합물 구조 내의 2가 산소를 지칭하며, 이때 제1 탄소 원자는 벤젠 고리 내의 sp 2-혼성화 탄소 원자이고, 제2 탄소 원자는 sp 3-혼성화 탄소 원자 또는 sp 2-혼성화 탄소 원자다.
본원에서 사용되는 용어 “인산염(phosphate)”은 기 -OPO(OH)2 또는 그의 염을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "프리-케톤체(pre-ketone body)"는 (i) 카르복실레이트 대신에 하이드록시메틸을 갖는 케톤체, 또는 (ii) 카르복실레이트 대신에 하이드록시메틸을 갖는 케톤체인 기를 나타내고, 이때 적어도 1개의 하이드록실은 -OR로 대체되고, 이때 R은 원자가다. 본원에서 사용되는 용어 "프리-케톤체"는 또한 (4-메틸-1,3-디옥산-2-일)-(알킬렌)n-CO-RA을 나타내며, 이때 n은 0 또는 1이고, RA은 -OH (프리-케톤체가 아실화된 활성제의 일부가 아닌 경우), 또는 원자가 (프리-케톤체가 프리-케톤체를 포함하는 기의 일부인 경우(예, 프리-케톤체 아실))다. 프리-케톤체의 비제한적인 예는 부탄-1,3-디올 또는 4-하이드록시부탄-2-온이다.
본원에서 사용되는 용어 "프리-케톤체 아실"은 카르복실레이트 -OH 기가 원자가로 대체되는 프리-케톤체를 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "보호기"는 화학 합성 동안 하이드록시, 아미노 또는 카르보닐이 하나 이상의 바람직하지 않은 반응에 참여하는 것으로부터 보호하기 위한 작용기를 나타낸다. 본원에서 사용되는 용어 "O-보호기는 화학 합성 동안 하이드록시 또는 카르보닐 기가 하나 이상의 바람직하지 않은 반응에 참여하는 것으로부터 보호하기 위한 작용기를 나타낸다. 본원에서 사용되는 용어 "N-보호기는 화학 합성 동안 질소 함유(예, 아미노 또는 히드라진) 기가 하나 이상의 바람직하지 않은 반응에 참여하는 것으로부터 보호하기 위한 작용기를 나타낸다. 흔히 사용되는 O- 및 N-보호기는 Greene, “Groups in Organic Synthesis,”3rd Edition (John Wiley & Sons, New York, 1999)에 개시되어 있으며, 이는 참고로 본원에 원용된다. 예시적인 O- 및 N-보호기는 알카노일, 아릴로일, 또는 카르바밀기, 예컨대, 포르밀, 아세틸, 프로피오닐, 피발로일, t-부틸아세틸, 2-클로로아세틸, 2-브로모아세틸, 트리플루오로아세틸, 트리클로로아세틸, 프탈릴, o-니트로페녹시아세틸, α-클로로부티릴, 벤조일, 4-클로로벤조일, 4-브로모벤조일, t-부틸디메틸실릴, 트리-이소-프로필실록시메틸, 4,4'-디메톡시트리틸, 이소부티릴, 페녹시아세틸, 4-이소프로필페녹시아세틸, 디메틸포름아미디노 및 4-니트로벤조일을 포함한다.
카르보닐 함유 기를 보호하기 위한 예시적인 O-보호기는, 아세탈, 아실알, 1,3-디티안, 1,3-디옥산, 1,3-디옥솔란, 및 1,3-디티오올란을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
기타 O-보호기는, 치환된 알킬, 아릴, 및 아릴-알킬 에테르류(예를 들어, 트리틸; 메틸티오메틸; 메톡시메틸; 벤질옥시메틸; 실록시메틸; 2,2,2,-트리클로로에톡시메틸; 테트라하이드로피라닐; 테트라하이드로푸라닐; 에톡시에틸; 1-[2-(트리메틸실릴)에톡시]에틸; 2-트리메틸실릴에틸; t-부틸 에테르; p-클로로페닐, p-메톡시페닐, p-니트로페닐, 벤질, p-메톡시벤질, 및 니트로벤질); 실릴 에테르류(예를 들어, 트리메틸실릴; 트리에틸실릴; 트리이소프로필실릴; 디메틸이소프로필실릴; t-부틸디메틸실릴; t-부틸디페닐실릴; 트리벤질실릴; 트리페닐실릴; 및 디페닐메틸실릴); 카보네이트(예를 들어, 메틸, 메톡시메틸, 9-플루오레닐메틸; 에틸; 2,2,2-트리클로로에틸; 2-(트리메틸실릴)에틸; 비닐, 알릴, 니트로페닐; 벤질; 메톡시벤질; 3,4-디메톡시벤질; 및 니트로벤질)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
기타 N-보호기는 카이랄 보조물(chiral auxiliaries), 예컨대 보호되거나 보호되지 않은 D, L 또는 D, L-아미노산, 예컨대 알라닌, 류신, 페닐알라닌 등; 술포닐 함유 기, 예컨대 벤젠술포닐, p-톨루엔술포닐 등; 카바메이트 형성 기, 예컨대 벤질옥시카르보닐, p-클로로벤질옥시카르보닐, p-메톡시벤질옥시카르보닐, p-니트로벤질옥시카르보닐, 2-니트로벤질옥시카르보닐, p-브로모벤질옥시카르보닐, 3,4-디메톡시벤질옥시카르보닐, 3,5-디메톡시벤질옥시카르보닐, 2,4-디메톡시벤질옥시카르보닐, 4-메톡시벤질옥시카르보닐, 2-니트로-4,5-디메톡시벤질옥시카르보닐, 3,4,5-트리메톡시벤질옥시카르보닐, 1-(p-비페닐릴)-1-메틸에톡시카르보닐, α,α-디메틸-3,5-디메톡시벤질옥시카르보닐, 벤즈히드릴옥시카르보닐, t-부틸옥시카르보닐, 디이소프로필메톡시카르보닐, 이소프로필옥시카르보닐, 에톡시카르보닐, 메톡시카르보닐, 알릴옥시카르보닐, 2,2,2,-트리클로로에톡시카르보닐, 페녹시카르보닐, 4-니트로페녹시카르보닐, 플루오레닐-9-메톡시카르보닐, 시클로펜틸옥시카르보닐, 아다만틸옥시카르보닐, 시클로헥실옥시카르보닐, 페닐티오카르보닐 등, 아릴-알킬기, 예컨대 벤질, 트리페닐메틸, 벤질옥시메틸 등 및 실릴기, 예컨대 트리메틸실릴 등을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다 유용한 N-보호기는, 포르밀, 아세틸, 벤조일, 피발로일, t-부틸아세틸, 알라닐, 페닐술포닐, 벤질, t-부틸옥시카르보닐 (Boc), 및 벤질옥시카르보닐 (Cbz)이다.
본원에서 사용되는 용어 "스틸베노이드(stilbenoid)"는 아실화되지 않을 때, 알콕시 (예를 들어, 메톡시) 및 하이드록실로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 치환되는 트랜스-스틸베노이드를 나타낸다. 스틸베노이드의 비제한적인 예는 레스베라트롤(resveratrol), 프테로스틸벤(pterostilbene), 라폰티게닌(rhapontigenin), 피노스틸벤(pinostilbene), 옥시레스베라트롤(oxyresveratrol), 4-메톡시레스베라트롤, 및 피세아타놀(piceatannol)을 포함한다. 스틸베노이드가 아실화될 때, 스틸베노이드 내의 하이드록실기 중 하나 또는 둘 모두는 지방산 아실 포함 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기로 독립적으로 치환된다.
본원에서 사용되는 용어 "대상체(subject)"는 대상체로부터의 샘플(들)의 해당 기술분야에 공지된 실험실 테스트(들)가 있거나 없이 자격을 갖춘 전문가(예, 의사 또는 간호 실무자)가 결정한대로 질환, 장애 또는 병태를 앓고 있거나 그 위험에 처한 인간 또는 비인간 동물 (예, 포유류)을 나타낸다. 질환, 장애 또는 병태의 비제한적인 예는 본원에서 설명하는 바와 같이, 대사 장애, 비알코올성 지방 간 질환, 및 비알코올성 지방간염(예, 섬유증 유무에 따른 NASH, 간 지방증 또는 진행성 섬유증을 갖는 NASH)을 포함한다. 진단은 해당 기술분야에 공지된 기술 및 방법에 의해 수행될 수 있다. 본 발명의 방법에 따라 치료될 대상체는, 혈액 내 표준 시험(예를 들어, 간 효소 수치 시험(알라닌 트랜스아미나제 또는 아스파르테이트 트랜스아미나제), 간 중량 시험, 혈중 트리글리세리드 및/또는 콜레스테롤 수치 시험, 체지방 함량 시험, 및/또는 인슐린 저항성)을 받았거나, 이러한 시험 없이, 하나 이상의 위험 인자의 존재로 인해 고위험군으로 확인될 수 있었다.
본원에서 사용되는 용어 "당산(sugar acid)"은 단당류를 지칭하며, 그 선형 형태는 하나 또는 모두의 말단 위치가 카르복실산으로 산화된다. 4 가지 종류의 당산이 있다: 알돈산(aldonic acid), 우로소닉산(ulosonic acid), 우론산(uronic acid) 및 알다르산(aldaric acid). 4 가지 당산 분류 중 어느 것도 본원에서 개시된 아실화된 카테킨 폴리페놀에 사용될 수 있다. 당산의 비제한적인 예는 글루콘산을 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "당산 아실"은 카르복실레이트를 갖는 당산인 1가 기를 지칭하며, 여기서 -OH는 원자가로 대체된다.
본원에서 사용되는 용어 "황산염"은 기 -OSO3H 또는 그의 염을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "티오알케닐(thioalkenyl)"은 기 -SR을 나타내며, 이때 R은 알케닐이다. 임의로 치환된 티오알케닐은 알케닐에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 티오알케닐이다.
본원에서 사용되는 용어 "티오알킬(thioalkyl)"은 기 -SR을 나타내며, 이때 R은 알킬이다. 임의로 치환된 티오알킬은 알킬에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 티오알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "티오아릴(thioaryl)"은 기 -SR을 나타내며, 이때 R은 아릴이다. 임의로 치환된 티오아릴은 아릴에 대해 본원에서 설명된 바와 같이 임의로 치환되는 티오아릴이다.
본원에서 사용되는 “치료(Treatment)”및 “치료하는”은 질환, 장애 또는 병태를 개선, 완화, 안정화, 예방 또는 치유하려는 의도의 대상체의 의료 관리를 지칭한다. 이 용어는 능동 치료(질환, 장애 또는 병태를 개선하기 위한 치료); 원인 치료(관련 질환, 장애 또는 병태의 원인에 대한 치료); 고식적 치료(질환, 장애 또는 병태의 증상 완화를 위해 설계된 치료); 예방적 치료(관련 질환, 장애 또는 병태의 진행을 최소화하거나 부분적으로나 완전히 억제하기 위한 치료); 및 보조 치료(다른 요법을 보충하기 위해 사용되는 치료)를 포함한다.
본원에서 사용되는 용어 "트리메틸글리신 아실(trimethylglycine acyl)"은 하기 식 1의 1가 기를 지칭한다:
Figure pct00053
.
본원에서 사용되는 용어 "우로소닐(ulosonyl)"은 카르복실레이트 하이드록실이 원자가로 대체되는 우로소닉산인 1가 치환기를 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "우로닐(uronyl)"은 카르복실레이트 하이드록실이 원자가로 대체되는 우론산인 1가 치환기를 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "비타민(vitamin)"은 토코페롤(예를 들어, α-토코페롤, β-토코페롤, γ-토코페롤, 또는 δ-토코페롤), 토코트리엔놀, 비타민 D(예를 들어, 콜레칼시페롤), 및 아스코르브산을 지칭한다. 비타민이 아실화될 때, 비타민 중의 1개 이상의 하이드록실기는 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된다.
본원에서 설명되는 화합물은, 달리 언급되지 않는 한, 동위원소가 풍부한 화합물(예, 중수소화 화합물), 호변이성질체 및 모든 입체이성질체 및 이형태체(예, 거울상 이성질체, 부분입체이성질체 등), E/Z 이성질체, 아트로피이성질체 등) 뿐만 아니라, 그의 라세미체 및 상이한 비율의 거울상 이성질체 또는 부분입체이성질체의 혼합물, 또는 상기한 형태들 중 임의의 것의 혼합물 뿐만 아니라 염(예를 들어, 약제학적으로 허용 가능한 염)을 포괄한다.
본 발명의 다른 특징부들 및 이점들은 도면, 상세한 설명 및 청구범위로부터 명백할 것이다.
도 1은 세 가지 동물 코호트의 중량 변화율을 보여주는 차트이다: (1) 고지방 식이를 받은 미처리 동물, (2) 고지방 식이와 함께 에피갈로카테킨 갈레이트 옥타아세테이트(EGCG-8A)를 받는 동물, 및 (3) 고지방 식이와 로시글리타존을 받는 동물.
도 2는 세 가지 동물 코호트의 포도당 내성 수준을 보여주는 차트이다: (1) 고지방 식이를 받은 미처리 동물, (2) 고지방 식이와 로시글리타존을 받는 동물, 및 (3) 고지방 식이와 함께 에피갈로카테킨 갈레이트 옥타아세테이트(EGCG-8A)를 받는 동물.
도 3은 하기 코호트로 나눈 마우스들에 대한 지방증 점수를 나타내는 그래프이다: (ND) 정상 식이 그룹, (HFD) 고지방 식이 그룹, (HFD + 아세테이트) 아세트산을 투여한 고지방 식이 그룹, (HFD + EGCG) 에피갈로카테킨 갈레이트를 투여한 고지방 식이 그룹, (HFD + 아세테이트 + EGCG) 에피갈로카테킨 갈레이트 및 아세트산 조합을 투여한 고지방 식이 그룹, (HFD + EGCG-8A) 에피갈로카테킨 갈레이트 옥타아세테이트를 투여한 고지방 식이 그룹, 및 (HFD + 로시글리타존) 로시글리타존을 투여한 고지방 식이 그룹.
도 4는 하기 코호트로 나눈 마우스들에 대한 풍선 변성 점수를 나타내는 그래프이다: (ND) 정상 식이 그룹, (HFD) 고지방 식이 그룹, (HFD + 아세테이트) 아세트산을 투여한 고지방 식이 그룹, (HFD + EGCG) 에피갈로카테킨 갈레이트를 투여한 고지방 식이 그룹, (HFD + 아세테이트 + EGCG) 에피갈로카테킨 갈레이트 및 아세트산 조합을 투여한 고지방 식이 그룹, (HFD + EGCG-8A) 에피갈로카테킨 갈레이트 옥타아세테이트를 투여한 고지방 식이 그룹, 및 (HFD + 로시글리타존) 로시글리타존을 투여한 고지방 식이 그룹.
도 5a는 도 4의 (ND) 정상 식이 그룹으로부터의 간 조직학적 분석 이미지다.
도 5b는 도 4의 (HFD) 고지방 식이 그룹으로부터의 간 조직학적 분석 이미지다.
도 5c는 도 4의 (HFD + 아세테이트) 아세트산을 투여한 고지방 식이 그룹으로부터의 간 조직학적 분석 이미지다.
도 5d는 도 4의 (HFD + EGCG) 에피갈로카테킨 갈레이트를 투여한 고지방 식이 그룹으로부터의 간 조직학적 분석 이미지다.
도 5e는 도 4의 (HFD + 아세테이트 + EGCG) 에피갈로카테킨 갈레이트 및 아세트산 조합을 투여한 고지방 식이 그룹으로부터의 간 조직학적 분석 이미지다.
도 5f는 도 4의 (HFD + EGCG-8A) 에피갈로카테킨 갈레이트 옥타아세테이트를 투여한 고지방 식이 그룹으로부터의 간 조직학적 분석 이미지다.
도 5g는 도 4의 (HFD + 로시글리타존) 로시글리타존을 투여한 고지방 식이 그룹으로부터의 간 조직학적 분석 이미지다.
도 6은 다섯 가지 동물 코호트의 복부 지방 수준을 보여주는 차트이다: (없음) 대조군 그룹 동물, (BHB) β-하이드록시부티레이트를 받는 동물, (레스베라트롤 + BH) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트의 조합을 받는 동물, (부탄디올) 1,3-부탄디올을 받는 동물, 및 (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올을 받는 동물.
도 7은 다섯 가지 동물 코호트의 트리글리세리드 수준을 보여주는 차트이다: (없음) 대조군 그룹 동물, (BHB) β-하이드록시부티레이트를 받는 동물, (레스베라트롤 + BH) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트의 조합을 받는 동물, (부탄디올) 1,3-부탄디올을 받는 동물, 및 (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올을 받는 동물.
도 8은 다섯 가지 동물 코호트의 콜레스테롤 수준을 보여주는 차트이다: (없음) 대조군 그룹 동물, (BHB) β-하이드록시부티레이트를 받는 동물, (레스베라트롤 + BH) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트의 조합을 받는 동물, (부탄디올) 1,3-부탄디올을 받는 동물, 및 (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올을 받는 동물.
도 9는 다섯 가지 동물 코호트에 대한 일일 음식 소비를 보여주는 차트이다: (없음) 대조군 그룹 동물, (BHB) β-하이드록시부티레이트를 받는 동물, (레스베라트롤 + BH) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트의 조합을 받는 동물, (부탄디올) 1,3-부탄디올을 받는 동물, 및 (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올을 받는 동물.
도 10은 다음 코호트로 나눈 FATZO 마우스들에 대한 지방증 점수를 보여주는 그래프이다: (없음) 대조군 그룹, (BHB) β-하이드록시부티레이트 그룹, (레스베라트롤 + BHB) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트 조합 그룹, (부탄디올) 1,3-부탄디올 그룹, (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올 조합 그룹, 및 (오베티콜산) 오베티콜산 그룹.
도 11은 다음 코호트로 나눈 FATZO 마우스들에 대한 소엽 염증 점수를 보여주는 그래프이다: (없음) 대조군 그룹, (BHB) β-하이드록시부티레이트 그룹, (레스베라트롤 + BHB) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트 조합 그룹, (부탄디올) 1,3-부탄디올 그룹, (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올 조합 그룹, 및 (오베티콜산) 오베티콜산 그룹.
도 12는 다음 코호트로 나눈 FATZO 마우스들에 대한 풍선변성 점수를 보여주는 그래프이다: (없음) 대조군 그룹, (BHB) β-하이드록시부티레이트 그룹, (레스베라트롤 + BHB) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트 조합 그룹, (부탄디올) 1,3-부탄디올 그룹, (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올 조합 그룹, 및 (오베티콜산) 오베티콜산 그룹.
도 13은 다음 코호트로 나눈 FATZO 마우스들에 대한 섬유증 점수를 보여주는 그래프이다: (없음) 대조군 그룹, (BHB) β-하이드록시부티레이트 그룹, (레스베라트롤 + BHB) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트 조합 그룹, (부탄디올) 1,3-부탄디올 그룹, (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올 조합 그룹, 및 (오베티콜산) 오베티콜산 그룹.
도 14는 다음 코호트로 나눈 FATZO 마우스들에 대한 간 중량을 보여주는 그래프이다: (없음) 대조군 그룹, (BHB) β-하이드록시부티레이트 그룹, (레스베라트롤 + BHB) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트 조합 그룹, (부탄디올) 1,3-부탄디올 그룹, (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올 조합 그룹, 및 (오베티콜산) 오베티콜산 그룹.
도 15는 다음 코호트로 나눈 FATZO 마우스들에 대한 알라닌 트랜스아미나제 혈액 수준을 보여주는 그래프이다: (없음) 대조군 그룹, (BHB) β-하이드록시부티레이트 그룹, (레스베라트롤 + BHB) 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트 조합 그룹, (부탄디올) 1,3-부탄디올 그룹, (레스베라트롤 + 부탄디올) 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올 조합 그룹, 및 (오베티콜산) 오베티콜산 그룹.
도 16은 모사장액에서 화합물 78 절단에 의해 생성된 1,3-부탄디올에 대한 HPLC 트레이스를 보여주는 그래프이다.
도 17은 예 15에 기술된 연구의 개요를 보여주는 개략도이다. 약어는 다음과 같다: QD는 하루에 1회를 의미하며; BIW는 주 2회를 의미하며; BW는 체중을 의미하며; FI는 식품 섭취를 의미하며; WI는 물 섭취를 의미하며; ALT는 알라닌 트랜스아미나제를 의미하며; AST는 아스파르테이트 트랜스아미나제를 의미하며; TG는 트리글리세리드를 의미하며; TC는 총 콜레스테롤을 의미하며; HP는 하이드록시프롤린을 의미하며; HE는 헤마톡실린 및 에오신을 의미하며; PSR은 Picrosirius red를 의미하며; IHC는 면역조직화학을 의미하며; Gal-3은 갈렉틴-3을 의미하며; Col1a1은 콜라겐 1a1을 의미하며; α-SMA는 알파-평활근 액틴을 의미한다.
도 18a는 예 15 연구가 시작되기 4주 전에 취한 간 생검에서 간 콜라겐 1a1(Col1a1)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 12-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 유의성 수준 0.05에서 차이가 없었음.
도 18b는 예 15 연구가 시작되기 4주 전에 취한 간 생검에서 개별 간 콜라겐 1a1 (Col1a1)을 보여주는 차트이다. 지점들은 개별 측정치를 보여준다. 박스는 평균 (중간 선) 및 SEM (상단 및 하단)의 위치를 나타낸다.
도 19a는 연구 기간 동안 절대 체중을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 10-13 + SEM의 평균으로 표현된다. 통계적 분석을 실시하지 않았다.
도 19b는 연구 종결 시 절대 체중을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 *: P < 0.05, ***: P < 0.001.
도 20a는 연구 기간 동안 상대 체중(BW)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 10-12 + SEM의 평균으로서 표현된다. 통계적 분석을 실시하지 않았다.
도 20b는 연구 종료 시 상대 체중(BW)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 *: P < 0.05, ***: P < 0.001.
도 21a는 연구 1-2주 동안 일일 음식 섭취를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. 통계적 분석을 실시하지 않았다.
도 21b는 연구 1-2주 동안 누적 음식 섭취를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 10-12 + SEM의 평균으로 표현된다. 통계적 분석을 실시하지 않았다.
도 22는 연구 3-8주 동안 주 2회 측정된 주간 음식 섭취를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. 통계적 분석을 실시하지 않았다.
도 23a는 연구 1-2주 동안 치료 시 일일 물 섭취를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 10-12 + SEM의 평균으로 표현된다. 통계적 분석을 실시하지 않았다.
도 23b는 연구 1-2주 동안 누적 물 섭취를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 9-12 + SEM의 평균으로 표현된다. 통계적 분석을 실시하지 않았다.
도 24는 연구 3-8주 동안 주 2회 측정된 주간 물 섭취 (24시간 측정됨)를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 10-12 + SEM의 평균으로 표현된다. 통계적 분석을 실시하지 않았다.
도 25a는 종결 시 혈장 알라닌 트랜스아미나제 (ALT)를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 *: P < 0.05, **: P < 0.01, ***: P < 0.001.
도 25b는 종결 시 혈장 아스파르테이트 트랜스아미나제 (AST)를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 *: P < 0.05, **: P < 0.01, ***: P < 0.001.
도 26a는 종결 시 혈장 트리글리세리드(TG)를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 *: P < 0.05, ***: P < 0.001.
도 26b는 종결 시 혈장 총 콜레스테롤(TC)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 **: P < 0.01.
도 27a는 종결 시 총 장 중량(함량 포함)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 **: P < 0.01, ***: P < 0.001.
도 27b는 종결 시 간 중량을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 *: P < 0.05.
도 28a는 종결 시 상대적 간 트리글리세리드(TG)를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 ***: P < 0.001.
도 28b는 총 간 트리글리세리드(TG)를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 **: P < 0.01, ***: P < 0.001.
도 29a는 종결 시 상대적 간 총 콜레스테롤(TC)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 ***: P < 0.001.
도 29b는 종결 시 총 간 총 콜레스테롤(TC)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 **: P < 0.01.
도 30a는 종결 시 상대적 간 하이드록시프롤린(HP)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 ***: P < 0.001.
도 30b는 종결 시 총 간 하이드록시프롤린(HP)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 ***: P < 0.001.
도 31a는 그룹 1에 대한 종결 시 간 형태 (간 HE 염색) (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm)의 이미지이다.
도 31b는 그룹 2에 대한 종결 시 간 형태 (간 HE 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 31c는 그룹 3에 대한 종결 시 간 형태 (간 HE 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 31d는 그룹 4에 대한 종결 시 간 형태 (간 HE 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 31e는 그룹 5에 대한 종결 시 간 형태 (간 HE 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 31f는 그룹 6에 대한 종결 시 간 형태 (간 HE 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 31g는 그룹 7에 대한 종결 시 간 형태 (간 HE 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 31h는 그룹 8에 대한 종결 시 간 형태 (간 HE 염색)의 이미지이다(배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 32a는 그룹 1에 대한 종결 시 간 형태 (간 Picro Sirius 레드 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 32b는 그룹 2에 대한 종결 시 간 형태 (간 Picro Sirius 레드 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 32c는 그룹 3에 대한 종결 시 간 형태 (간 Picro Sirius 레드 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 32d는 그룹 4에 대한 종결 시 간 형태 (간 Picro Sirius 레드 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 32e는 그룹 5에 대한 종결 시 간 형태 (간 Picro Sirius 레드 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 32f는 그룹 6에 대한 종결 시 간 형태 (간 Picro Sirius 레드 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 32g는 그룹 7에 대한 종결 시 간 형태 (간 Picro Sirius 레드 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 32h는 그룹 8에 대한 종결 시 간 형태 (간 Picro Sirius 레드 염색)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 33a는 연구-전 및 -후 생검의 조직병리학적 점수 (섬유증 단계)의 요약을 보여주는 차트이다. 각 그룹에 대해, 연구-전과 비교하여 연구-후에 점수가 높거나(악화), 동일하거나 낮은(개선) 동물 수가 막대의 높이로 표시되어 있다. 각 화합물 그룹에 대해 적절한 비히클에 비해 더 낮은 점수를 갖는 동물들의 수의 유의성을 피셔 정확도(Fisher’Exact) 테스트를 사용하여, 그리고 이어서 본페로니(Bonferroni) 방법을 이용한 다중 비교에 대한 보정에 의해 평가하였다. 대조군 대비 ***: P < 0.001.
도 33b는 연구-전 및 -후 생검의 조직병리학적 점수(NAFLD 활성 점수)의 요약을 보여주는 차트이다. 각 그룹에 대해, 연구-전과 비교하여 연구-후에 점수가 높거나(악화), 동일하거나 낮은(개선) 동물 수가 막대의 높이로 표시되어 있다. 각 화합물 그룹에 대해 적절한 비히클에 비해 더 낮은 점수를 갖는 동물들의 수의 유의성을 피셔 정확도(Fisher’Exact) 테스트를 사용하여, 그리고 이어서 본페로니(Bonferroni) 방법을 이용한 다중 비교에 대한 보정에 의해 평가하였다. 대조군 대비 ***: P < 0.001.
도 34a는 섬유증 단계의 결과에 대한 개요를 보여주는 챠트이다. 각 동물에 대해 연구-전에서 연구-후 생검으로의 변화가 선으로 표시되어 있다. 각 점수 단계에서의 지점들은 동물들의 시각적 분리를 허용하기 위해 약간 이동되며, 이는 시각화 목적만을 위한 것이며 점수에서의 어떠한 차이도 반영하지 않는다.
도 34b는 NAFLD 활성 점수의 결과에 대한 개요를 보여주는 차트이다. 각 동물에 대해 연구-전에서 연구-후 생검으로의 변화가 선으로 표시되어 있다. 각 점수 단계에서의 지점들은 동물들의 시각적 분리를 허용하기 위해 약간 이동되며, 이는 시각화 목적만을 위한 것이며 점수에서의 어떠한 차이도 반영하지 않는다.
도 35a는 연구-전 및 -후 생검의 지방증, 소엽 염증 및 풍선 변성에 대한 개별 점수를 보여주는 NAFLD 활성 점수 (지방증 점수)의 요약을 보여주는 차트이다. 각 그룹에 대해, 연구-전과 비교하여 연구-후에 점수가 높거나(악화), 동일하거나 낮은(개선) 동물 수가 막대의 높이로 표시되어 있다. Bonferroni 보정과 함께 단측 피셔 정확도 테스트. 대조군 대비 *: P < 0.05.
도 35b는 연구-전 및 -후 생검의 지방증, 소엽 염증 및 풍선 변성에 대한 개별 점수를 보여주는 NAFLD 활성 점수 (소엽 염증)의 요약을 보여주는 차트이다. 각 그룹에 대해, 연구-전과 비교하여 연구-후에 점수가 높거나(악화), 동일하거나 낮은(개선) 동물 수가 막대의 높이로 표시되어 있다. Bonferroni 보정과 함께 단측 피셔 정확도 테스트. 대조군 대비 *: P < 0.05.
도 35c는 연구-전 및 -후 생검의 지방증, 소엽 염증 및 풍선 변성에 대한 개별 점수를 보여주는 NAFLD 활성 점수 (간세포 풍선화)의 요약을 보여주는 차트이다. 각 그룹에 대해, 연구-전과 비교하여 연구-후에 점수가 높거나(악화), 동일하거나 낮은(개선) 동물 수가 막대의 높이로 표시되어 있다. Bonferroni 보정과 함께 단측 피셔 정확도 테스트. 대조군 대비 *: P < 0.05.
도 36a는 지방증 점수의 결과에 대한 개요를 보여주는 챠트이다. 각 동물에 대해 연구-전에서 연구-후 생검으로의 변화가 선으로 표시되어 있다. 각 점수 단계에서의 지점들은 동물들의 시각적 분리를 허용하기 위해 약간 이동되며, 이는 시각화 목적만을 위한 것이며 점수에서의 어떠한 차이도 반영하지 않는다.
도 36b는 염증 점수의 결과에 대한 개요를 보여주는 차트이다. 각 동물에 대해 연구-전에서 연구-후 생검으로의 변화가 선으로 표시되어 있다. 각 점수 단계에서의 지점들은 동물들의 시각적 분리를 허용하기 위해 약간 이동되며, 이는 시각화 목적만을 위한 것이며 점수에서의 어떠한 차이도 반영하지 않는다.
도 36c는 풍선 변성 점수의 결과에 대한 개요를 보여주는 차트이다. 각 동물에 대해 연구-전에서 연구-후 생검으로의 변화가 선으로 표시되어 있다. 각 점수 단계에서의 지점들은 동물들의 시각적 분리를 허용하기 위해 약간 이동되며, 이는 시각화 목적만을 위한 것이며 점수에서의 어떠한 차이도 반영하지 않는다.
도 37a는 저배율로 조직의 미정제 검출을 보여주는 이미지이다(조직학적 정량적 평가의 첫번째 단계).
도 37b는 고배율로 지방증(분홍색) 및 조직(청색)의 검출을 보여주는 이미지이다.
도 38a는 형태 계측에 의해 정량화된 말단 상대 지방증을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 ***: P < 0.001.
도 38b는 형태 계측에 의해 정량화된 말단 총 간 지방증을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 **: P < 0.01, ***: P < 0.001.
도 38c는 형태 계측에 의해 정량화된 지질 액적 크기를 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 *: P < 0.05, ***: P < 0.001.
도 39a는 그룹 1에 대한 종결 시 간 형태 (항-I 형 콜라겐으로 염색된 간 (Southern Biotech, cat. no. 1310-01)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 39b는 그룹 2에 대한 종결 시 간 형태 (항-I 형 콜라겐으로 염색된 간 (Southern Biotech, cat. no. 1310-01)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 39c는 그룹 3에 대한 종결 시 간 형태 (항-I 형 콜라겐으로 염색된 간 (Southern Biotech, cat. no. 1310-01)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 39d는 그룹 4에 대한 종결 시 간 형태 (항-I 형 콜라겐으로 염색된 간 (Southern Biotech, cat. no. 1310-01)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 39e는 그룹 5에 대한 종결 시 간 형태 (항-I 형 콜라겐으로 염색된 간 (Southern Biotech, cat. no. 1310-01)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 39f는 그룹 6에 대한 종결 시 간 형태 (항-I 형 콜라겐으로 염색된 간 (Southern Biotech, cat. no. 1310-01)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 39g는 그룹 7에 대한 종결 시 간 형태 (항-I 형 콜라겐으로 염색된 간 (Southern Biotech, cat. no. 1310-01)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 39h는 그룹 8에 대한 종결 시 간 형태 (항-I 형 콜라겐으로 염색된 간 (Southern Biotech, cat. no. 1310-01)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 40a는 저배율로 조직의 미정제 검출을 보여주는 이미지이다(조직학적 정량적 평가의 첫번째 단계).
도 40b는 고배율로 콜라겐 1A1 (녹색) 및 조직 (적색)의 검출을 보여주는 이미지이다.
도 41a는 형태 계측에 의해 정량화된 말단 상대 콜라겐 1A1 (Col1a1)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 유의성 수준 0.05에서 차이가 없었음.
도 41a는 형태 계측에 의해 정량화된 말단 총 콜라겐 1A1 (Col1a1)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 유의성 수준 0.05에서 차이가 없었음.
도 42a는 그룹 1에 대한 종결 시 간 형태 (항-α-평활근 근육 액틴 (α-SMA)로 염색된 간, AbCam, cat. no. ab124964)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 42b는 그룹 2에 대한 종결 시 간 형태 (항-α-평활근 근육 액틴 (α-SMA)로 염색된 간, AbCam, cat. no. ab124964)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 42c는 그룹 3에 대한 종결 시 간 형태 (항-α-평활근 근육 액틴 (α-SMA)로 염색된 간, AbCam, cat. no. ab124964)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 42d는 그룹 4에 대한 종결 시 간 형태 (항-α-평활근 근육 액틴 (α-SMA)로 염색된 간, AbCam, cat. no. ab124964)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 42e는 그룹 5에 대한 종결 시 간 형태 (항-α-평활근 근육 액틴 (α-SMA)로 염색된 간, AbCam, cat. no. ab124964)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 42f는 그룹 6에 대한 종결 시 간 형태 (항-α-평활근 근육 액틴 (α-SMA)로 염색된 간, AbCam, cat. no. ab124964)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 42g는 그룹 7에 대한 종결 시 간 형태 (항-α-평활근 근육 액틴 (α-SMA)로 염색된 간, AbCam, cat. no. ab124964)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 42h는 그룹 8에 대한 종결 시 간 형태 (항-α-평활근 근육 액틴 (α-SMA)로 염색된 간, AbCam, cat. no. ab124964)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 43a는 저배율로 조직의 미정제 검출을 보여주는 이미지이다(조직학적 정량적 평가의 첫번째 단계).
도 43b는 고배율로 α-SMA (녹색) 및 조직 (적색)의 검출을 보여주는 이미지이다.
도 44a는 형태 계측에 의해 정량화된 말단 상대 알파-평활근 근육 액틴 (α-SMA)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 **: P < 0.01.
도 44a는 형태 계측에 의해 정량화된 총 알파-평활근 근육 액틴 (α-SMA)을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 ***: P < 0.001.
도 45a는 그룹 1에 대한 종결 시 간 형태 (항-갈렉틴 3으 로 염색된 간, Biolegend, cat. no. 125402)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 45b는 그룹 2에 대한 종결 시 간 형태 (항-갈렉틴 3으 로 염색된 간, Biolegend, cat. no. 125402)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 45c는 그룹 3에 대한 종결 시 간 형태 (항-갈렉틴 3으 로 염색된 간, Biolegend, cat. no. 125402)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 45d는 그룹 4에 대한 종결 시 간 형태 (항-갈렉틴 3으 로 염색된 간, Biolegend, cat. no. 125402)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 45e는 그룹 5에 대한 종결 시 간 형태 (항-갈렉틴 3으 로 염색된 간, Biolegend, cat. no. 125402)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 45f는 그룹 6에 대한 종결 시 간 형태 (항-갈렉틴 3으 로 염색된 간, Biolegend, cat. no. 125402)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 45g는 그룹 7에 대한 종결 시 간 형태 (항-갈렉틴 3으 로 염색된 간, Biolegend, cat. no. 125402)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 45h는 그룹 8에 대한 종결 시 간 형태 (항-갈렉틴 3으 로 염색된 간, Biolegend, cat. no. 125402)의 이미지이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 46a는 저배율로 조직의 미정제 검출을 보여주는 이미지이다(조직학적 정량적 평가의 첫번째 단계).
도 46b는 고배율로 갈렉틴-3 (녹색) 및 조직 (적색)의 검출을 보여주는 이미지이다.
도 47a는 형태 계측에 의해 정량화된 말단 상대 갈렉틴-3을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 *: P < 0.05.
도 47a는 형태 계측에 의해 정량화된 말단 총 갈렉틴-3을 보여주는 차트이다. 값들은 n = 11-13 + SEM의 평균으로 표현된다. Dunnett의 테스트 단일-요인 선형 모델. 대조군 대비 **: P < 0.01.
도 48a는 DIO-NASH 대조군에서의 간 형태를 보여주는 이미지이다. NASH CRN(임상 연구 네트워크) 점수 기준에 따라 지방증을 평가할 때 지질 액포의 크기에 관계없이 지방 액적을 함유하는 간세포의 수를 평가한다. DIO-NASH 비히클에서 지질 액포는 보통 크다. 지질 액포가 두 동물 그룹의 모든 간세포의 66% 이상에 존재하므로, 그것들은 평가 점수가 3점일 것이다. 대조적으로, 지방증 영역 분률을 정량화하는 이미지 분석 또는 간 지질의 생화학적 분석은 Elafibranor 처리된 동물에서 지질 분율이 더 낮을 것이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 48b는 Elafibranor 처리된 동물에서의 간 형태를 보여주는 이미지이다. NASH CRN(임상 연구 네트워크) 점수 기준에 따라 지방증을 평가할 때 지질 액포의 크기에 관계없이 지방 액적을 함유하는 간세포의 수를 평가한다. Elafibranor 처리된 동물에서 액포는 더 작다. 지질 액포가 두 동물 그룹의 모든 간세포의 66% 이상에 존재하므로, 그것들은 평가 점수가 3점일 것이다. 대조적으로, 지방증 영역 분률을 정량화하는 이미지 분석 또는 간 지질의 생화학적 분석은 Elafibranor 처리된 동물에서 지질 분율이 더 낮을 것이다 (배율 20x, 스케일 바 = 100 μm).
도 49a는 콜라겐 1a1 (Col1a1) 분석의 상단의DIO-NASH 대조군에서 간 섬유증 (Picro Sirius red 염색 슬라이드)을 보여주는 이미지이다. Brunt 점수 기준에 따라 섬유증을 평가할 때, 섬유증을 국소화에 기초하여 평가한다. DIO-NASH 비히클에서 동물 섬유증은 브리징없이 사인파 및 문맥 영역에 국소화된다. Elafibranor 처리된 동물에서 섬유증은 더 미세하지만, 여전히 브리징없이 사인파 및 문맥 영역 모두에 국소화된다. 대조적으로, 섬유증 영역 분률을 정량화하는 이미지 분석은 이 Elafibranor 처리된 동물에서 섬유증 분율이 더 낮을 것이다 (배율 10x, 스케일 바 = 200 μm).
도 49b는 Col1a1 분석 하단의 Elafibranor 처리된 동물에서 간 섬유증 (Picro Sirius red 염색 슬라이드)을 보여주는 이미지이다. Brunt 점수 기준에 따라 섬유증을 평가할 때, 섬유증을 국소화에 기초하여 평가한다. DIO-NASH 비히클에서 동물 섬유증은 브리징없이 사인파 및 문맥 영역에 국소화된다. Elafibranor 처리된 동물에서 섬유증은 더 미세하지만, 여전히 브리징없이 사인파 및 문맥 영역 모두에 국소화된다. 대조적으로, 섬유증 영역 분률을 정량화하는 이미지 분석은 이 Elafibranor 처리된 동물에서 섬유증 분율이 더 낮을 것이다 (배율 10x, 스케일 바 = 200 μm).
본 발명은 아실화된 활성제(예, 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 엘라그산, 아실화된 엘라그산 유사체, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 아미노산, 아실화된 담즙산, 아실화된 메살라민, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 비타민 또는 아실화된 하이드록시벤조산), 활성제 조합(예, 제1 제는 스틸베노이드, 카테킨 폴리페놀, 카로티노이드산, 담즙산, 아미노산, 하이드록시벤조산, 쉬킴산, 단당류 또는 메살라민, 메트포르민, 비타민 및 S-아데노실-L-메티오닌이고 및 제2 제는 케톤체 또는 프리-케톤체인 조합), 이들을 함유하는 조성물(예, 단위 투여량 형태로서임), 및 대상체에서 대사 마커 또는 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 방법이나 대상체에서 대사 장애 또는 비알코올성 지방 간 질환(예, 비알코올성 지방간염)을 치료하는 방법을 제공한다. 이론에 구속되고자 하지 않고, 본 발명의 아실화된 활성제는 대상체의 미생물총(microbiota)과 함께 또는 그 대신에 작용하는 것으로 여겨진다.
본원에서 설명되는 바와 같이, 본 발명의 화합물 및 병용 요법은 예상치 않게 대사 마커를 조절하거나 대사 장애(예, 비만, II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 대사증후군, 고콜레스테롤혈증, 동맥경화증 또는 고지혈증)를 치료하기 위한 생체 내 활성을 나타내는 것으로 관찰되었다. 놀랍게도, 대상체에게 고지방 식사를 공급하더라도, 대상체에게 아실화된 카테킨 폴리페놀(예를 들어, 에피갈로카테킨-3-갈레이트 옥타아세테이트)를 투여하면 체중 감소를 유도할 수 있다고 발견되었다. 놀랍게도, 아실화된 카테킨 폴리페놀의 투여는 동일한 용량의 아실화된 카테킨 폴리페놀 성분을 별도의 화합물로서 투여하는 것에 비해 우수한 활성을 생성하는 것으로 밝혀졌다.
아실화된 카테킨 폴리페놀의 성분 (예, 단쇄 지방산 아실 (예, 아세틸) 및 에피갈로카테킨 갈레이트)은, 예를 들어, 아실화된 카테킨 폴리페놀을 받는 대상체의 GI 관에서 가수분해 시, 대사 마커를 조절하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다. 아실화된 카르티틴 폴리페놀의 성분 (예, 단쇄 지방산 아실 (예, 아세틸) 및 에피갈로카테킨 갈레이트)은, 예를 들어, 아실화된 카테킨 폴리페놀을 받는 대상체의 GI 관에서 가수분해 시, 대사 장애를 치료하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다.
본원에서 설명되는 바와 같이, 본 발명의 화합물 및 병용 요법은 예상치 않게 비알코올성 지방 간 질환(예를 들어, 비알코올성 지방간염) 마커를 조절하거나 비알코올성 지방 간 질환(예, 섬유증 유무에 따른 비알코올성 지방간염 (NASH), 간 지방증, 진행성 섬유증을 갖는 NASH)을 치료하기 위한 생체 내 활성을 나타내는 것으로 관찰되었다. 예를 들어, 예시적인 조합, 스틸베노이드 및 케톤체 또는 프리-케톤체를 투여한, FATZO 마우스(NAFLD/NASH에 대한 질환 모델)는, 스틸베노이드 및 케톤체 또는 프리-케톤체를 받지 않은 FATZO 마우스에 비해 통계학적으로 유의한 지방증 감소, 감소된 간 중량, 및 감소된 간 효소(예를 들어, 알라닌 트랜스아미나제(ALT)의 감소된 수준)를 나타냈다. 본원에서 설명되는 다른 연구에서, 본원에 개시된 아실화된 활성제(예를 들어, 에피갈로카테킨 갈레이트 옥타아세테이트)를 투여한 시험 마우스는 간 조직학에서 통계학적으로 유의한 개선을 나타냈다(예, 지방증 감소 및 풍선변성(ballooning degeneration) 감소).
추가로, 그리고 놀랍게도, 본원에 개시된 화합물 및 병용 요법은 비알코올성 지방 간 질환(예를 들어, 비알코올성 지방간염) 마커를 조절하거나 비알코올성 지방 간 질환(예를 들어, 비알코올 지방간염 (NASH), 간 지방증, 진행성 섬유증을 갖는 NASH)을 치료하기 위한 상승작용 활성을 나타낼 수 있다. 예를 들어, 본원에서 설명되는 바와 같이, 예시적인 조합, 스틸베노이드 및 프리-케톤체를 투여한 FATZO 마우스는, 오베티콜산(obeticholic acid)(NAFLD/NASH의 치료를 위한 조사 중인 제제)을 투여한 마우스보다, 우수한 지방성 감소를 나타냈다.
유리하게는, 본원에 개시된 아실화된 활성제는 우수한 관능 특성(예를 들어, 감칠맛)을 가질 수 있다. 이는 개별 성분(예를 들어, 아세트산 또는 에피갈로카테킨 갈레이트)이 덜 바람직한 관능 특성(예를 들어, 감칠맛)을 나타낼 수 있기 때문에 중요한 이점을 제공한다. 개선된 관능 특성은 경구 투여를 용이하게 하며, 높은 단위 용량(예를 들어, 0.5g 이상의 단위 용량)의 전달에 특히 유리하다.
본 발명은 또한 활성제 조합을 제공한다.
놀랍게도, 본원에 개시된 화합물 및 병용 요법은 대사 장애 마커를 조절하거나 대사 장애를 치료하기 위한 상승작용 활성을 나타낼 수 있다. 예를 들어, 본원에서 설명되는 바와 같이, 예시적인 조합, 스틸베노이드 및 프리-케톤체를 투여한 FATZO 마우스는, 상기 예시적인 조합을 투여하지 않은 FATZO 마우스의 대조군 그룹에 비해 복부 지방, 혈중 트리글리세리드, 및 혈중 콜레스테롤의 감소를 나타냈다.
아실화된 활성제(Acylated Active Agents)
본원에 개시된 아실화된 활성제는 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 엘라그산, 아실화된 엘라그산 유사체, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 아미노산, 아실화된 담즙산, 아실화된 메살라민, 아실화된 메트포르민, 아실화된 하이드록시벤조산, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 비타민, 또는 아실화된 당일 수 있다.
일반적으로, 아실화된 활성제는 에스테르 결합(들), 아미드 결합(들), 카보네이트 링커(들), 카바메이트 링커(들), 및/또는 글리코시드 결합(들)을 통해 연결된 2개 이상의 활성제를 포함한다. 예를 들어, 아실화된 활성제는 코어(예를 들어, 카테킨 폴리페놀, 스틸베노이드, 쉬킴산, 하이드록시벤조산, 단당류, 또는 글루코시놀레이트)를 포함할 수 있고, 상기 코어는 알킬, 아실, 지방산(예를 들어, 단쇄 지방산 또는 중쇄 지방산) 포함 기 및 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1개 이상의 치환체로 치환될 수 있다.
본원에 개시된 아실화된 활성제는 예를 들어, 적어도 1개의 지방산 포함 기를 포함할 수 있다. 지방산 포함 기는, 예를 들어, 지방산(예를 들어, 단쇄 지방산 또는 중쇄 지방산), 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 단당류, 또는 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 치환된 1개 이상의 알코올 하이드록실기를 갖는 당산(예를 들어, 알돈산)일 수 있다.
본원에 개시된 아실화된 활성제는 예를 들어, 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기를 포함할 수 있다. 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기는, 임의로 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 임의로 치환된 하이드록실기를 갖는 케톤체; 케톤(예컨대, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실); 임의로 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 임의로 치환된 하이드록실기를 갖는 프리-케톤체; 케톤체 아실 및/또는 프리-케톤체 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 단당류 (이때 각각의 케톤체 아실 및 프리-케톤체 아실은 임의로 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 임의로 치환된 하이드록실기를 가짐); 또는 케톤체 아실 및/또는 프리-케톤체 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 당산 (예를 들어, 알돈산 또는 우론산) (이때 각각의 케톤체 아실 및 프리-케톤체 아실은 임의로 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 임의로 치환된 하이드록실기를 가짐)일 수 있다. 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기는 예를 들어 케톤체 포함 기일 수 있다. 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기는 예를 들어 프리-케톤체 포함 기일 수 있다. 케톤체 포함 기는 적어도 1개의 케톤체 잔기를 포함한다. 프리-케톤체 포함 기는 적어도 1개의 프리-케톤체 잔기를 포함한다.
본원에 개시된 아실화된 활성제는 예를 들어, 적어도 1개의 아미노산 대사물질 함유 기를 포함할 수 있다. 아미노산 대사물질 함유 기는 예를 들어, 아미노산 대사물질 기(예를 들어, 아미노산 대사물질 아실)일 수 있다. 아미노산 대사물질 함유 기는 예를 들어, 아미노산 대사물질 아실일 수 있다. 대안적으로, 아미노산 대사물질은 아미노산 대사물질 아실로 치환된 하이드록실기를 갖는 프리-케톤체; 아미노산 대사물질 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 단당류 (이때 각각의 아미노산 대사물질 아실은 임의로 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 임의로 치환된 하이드록실기를 가지고, 단당류 상의 1개 이상의 나머지 하이드록실은, 존재하는 경우, 임의로 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 치환됨); 아미노산 대사물질 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 당산(예를 들어, 알돈산 또는 우론산) (이때 각각의 아미노산 대사물질 아실은 임의로 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 임의로 치환된 하이드록실기를 가지고, 당산 상의 1개 이상의 나머지 하이드록실은, 존재하는 경우, 임의로 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)로 치환됨)일 수 있다. 아미노산 대사물질 함유 기는 적어도 1개의 아미노산 대사물질 잔기를 포함한다.
특정 실시예들에서, 상기 기는 하기 식의 1가 기일 수 있으며:
Figure pct00054
,
(B)
이때
L은 부재하거나, 카바메이트 링커, 또는 카보네이트 링커이고;
A 기는 지방산 아실, 케톤체, 프리-케톤체, 단당류, 당산, 또는 글루코시놀레이트이고 (예를 들어, A 기는 아실, 케톤체, 프리-케톤체, 단당류, 또는 당산이다);
각각의 R은 독립적으로 임의로 아실(예컨대, 지방산 아실)로 임의로 치환되는 하이드록실기를 갖는 케톤체, 아실(예컨대, 지방산 아실)로 임의로 치환되는 하이드록실기를 갖는 프리-케톤체, 임의로 아실(예컨대, 지방산 아실)로 임의로 치환되는 하이드록실기를 갖는 아미노산 대사물질, 또는 아실이고; 그리고
m은 0에서 A 기에서 이용가능한 하이드록실기의 총 개수(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 또는 5)까지의 정수이고;
L은 A 기가 비-글리코시드 알코올 산소 원자 상에 원자가를 갖는 경우, 카보네이트 링커 또는 카바메이트 링커인 것을 전제로 하고; 그리고
A 기가 카르보닐 탄소 원자 상에 원자가를 갖는 경우, L은 없다.
상기 기의 식 (B)이 지방산 함유 기일 때, 식 (B)의 기는 적어도 1개의 지방산을 포함한다. 식 (B)의 기가 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기일 때, 상기 기는 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체를 포함한다. 상기 기의 식 (B)이 아미노산 대사물질 포함 기일 때, 식 (B)의 기는 적어도 1개의 아미노산 대사물질을 포함한다.
일부 실시예에서, 지방산(들)은 단쇄 지방산 아실들(예를 들어, 부티릴이다). 특정 실시예들에서, 지방산 함유 기 내의 지방산(들)은 중쇄 지방산 아실(예를 들어, 옥타노일)이다.
지방산 포함 기의 비제한적인 예는 다음과 같다:
Figure pct00055
및
Figure pct00056
,
이때
R은 H, -CH3, 또는 -CH2ORFA이고;
각각의 RFA는 독립적으로 H 또는 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)이고;
적어도 1개의 RFA가 지방산 아실(예, 단쇄 지방산 아실 또는 중쇄 지방산 아실)인 것을 전제로 한다.
케톤체 포함 기의 비제한적인 예는 다음을 포함한다:
Figure pct00057
및
Figure pct00058
,
이때 RA는 H 또는 알킬이고; RFA는 지방산 아실이고; 1개의 RMe은 메틸이고 나머지 RMe는 H다.
아실화된 카테킨 폴리페놀(Acylated Catechin Polyphenols)
본 발명의 아실화된 카테킨 폴리페놀은 식 (A)의 코어를 갖는 치환된 화합물:
Figure pct00059
,
(A)
또는 그의 다량체, 또는 그의 염일 수 있고,
이때 치환체는 -ORA, -OCOO-RA, -NHRB, 옥소, 할로겐, 임의로 치환된 C1-20 알킬, 임의로 치환된 C2-20 알케닐, 임의로 치환된 티오알킬, 임의로 치환된 알킬술포닐, 임의로 치환된 알킬술페닐, 임의로 치환된 알킬술피닐, 임의로 치환된 티오아릴, 임의로 치환된 아릴 티오알킬, 임의로 치환된 티오알케닐, 디알킬아미노, 황산염, 인산염, 아스코르브산, 임의로 치환된 헤테로시클릴, 니트로, 아미노산, 아미노산의 C1-6 에스테르, 임의로 아실화된 단당류, 및 임의로 아실화된 당산으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 치환되고, 이때 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 H, 하이드록실, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 임의로 치환된 알콕시, 및 임의로 치환된 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고, 이때 RB는 독립적으로 H 또는 임의로 치환된 알킬이고;
이때 식 (A)에서 2번 탄소 및 3번 탄소를 연결하는 탄소-탄소 결합은 단일 결합 또는 이중 결합이고;
이때 상기 다량체는 식 (A)의 총 2 또는 3개의 코어를 포함하고, 각각의 코어는 전술한 바와 같이 독립적으로 치환되고; 그리고
이때 코어 (A)의 2개의 근접 중심이 -(O)q-L1-L2- 기로 추가로 치환될 수 있으며, 이때 q는 0 또는 1이고, L1은 임의로 치환된 알킬렌, 임의로 치환된 알케닐렌, 또는 임의로 치환된 헤테로시클릴렌이고; 및 L2는 공유 결합, 임의로 치환된 헤테로시클릴렌, 또는 임의로 치환된 시클로알킬렌이다.
일부 실시예에서, 5, 6, 7, 및 8 위치 중 적어도 하나는 -ORA이며, 이때 RA는 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 H, 하이드록실, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 프리-케톤체 함유 기, 임의로 치환된 알콕시, 임의로 치환된 알킬로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이다. 일부 실시예에서, 식 (A)의 화합물은 적어도 1개의 지방산 함유 기, 케톤체 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 포함한다.
본 발명의 아실화된 카테킨 폴리페놀은, 1개 이상의 하이드록실기가 -OR로 독립적으로 대체되는 카테킨 폴리페놀일 수 있으며, 이때 각각의 R은 아실, 알킬, 지방산 함유 기 및 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기인 것을 전제로 한다.
아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I)의 화합물:
Figure pct00060
,
(I)
또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염일 수 있고,
이때
Figure pct00061
은 단일 탄소-탄소 결합 또는 이중 탄소-탄소 결합이고;
Q는 -CH2- 또는 -C(O)-이고;
각각의 R1 및 각각의 R3은 독립적으로 H, 할로겐, -ORA, 인산염, 또는 황산염이고;
R2는 H 또는 -ORA이고;
각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 단당류, 당산, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고;
m은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고; 그리고
n은 0, 1, 2, 3, 또는 4이다.
바람직하게, n과 m의 각각은 독립적으로 0, 1, 2, 3, 또는 4이다. 보다 바람직하게는, n과 m의 각각은 독립적으로 1, 2, 3, 또는 4이다.
일부 실시예에서, 상기 화합물은 적어도 1개의 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기를 포함한다. 특정 실시예들에서, 적어도 1개의 R1는 -ORA이며, 여기에서 RA는 지방산 함유 기다. 소정의 실시예들에서, 식 (I)의 화합물은 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기를 포함한다. 추가의 실시예에서, 화합물은 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기를 포함한다. 또 다른 실시예들에서, 화합물은 적어도 1개의 프리-케톤체 포함 기를 포함한다.
특정 실시예들에서,
Figure pct00062
은 단일 탄소-탄소 결합이다. 소정의 실시예들에서, Q는 -CH2-이다.
일부 실시예에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-a)의 화합물이다:
Figure pct00063
.
(I-a)
소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-b)의 화합물이다:
Figure pct00064
.
(I-b)
특정 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-c)의 화합물이다:
Figure pct00065
.
(I-c)
추가 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-d)의 화합물이다:
Figure pct00066
.
(I-d)
소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 식 (I-f)의 화합물이다:
Figure pct00067
.
(I-f)
또 다른 실시예들에서, n은 2이다. 소정의 실시예들에서, m은 1이다. 특정 실시예들에서, m은 2이다. 일부 실시예에서, m은 3이다. 특정 실시예들에서, 각각의 R1은 독립적으로 -ORA이다. 소정의 실시예들에서, 각각의 R3은 독립적으로 H 또는 -ORA이다. 추가 실시예들에서, R2는 H 또는 -ORA이다. 또 다른 실시예들에서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 함유 기, 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기다.
일부 실시예에서, R2는 하기 식의 기이고:
Figure pct00068
, 여기서 p는 1, 2, 3, 또는 4이고, 각각의 R4는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
소정의 실시예들에서, p는 3이다. 특정 실시예들에서, 각각의 R4는 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시이다.
일부 실시예에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-e)의 화합물이다:
Figure pct00069
.
(I-e)
소정의 실시예들에서, R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 -ORA다. 특정 실시예들에서, R3A, R3B 및 R3C의 각각은 독립적으로 H, 할로겐, 또는 -ORA다.
추가 실시예들에서, R2는 하기 식의 기다:
Figure pct00070
.
또 다른 실시예들에서, R4A, R4B, 및 R4C는 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시이다.
일부 실시예에서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 아실, 또는 임의로 아실화된 단당류이다.
소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 적어도 1개의 지방산 아실 (예를 들어, 단쇄 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실은 아세틸, 프로피오닐, 또는 부티릴임))을 포함한다. 소정의 실시예들에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 적어도 1개의 케톤체를 포함한다. 특정 실시예에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 적어도 1개의 프리-케톤체를 포함한다. 추가의 실시예에서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 적어도 1개의 아미노산 대사물질을 포함한다.
아실화된 스틸베노이드(Acylated Stilbenoids)
본 발명의 아실화된 스틸베노이드는 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 하이드록실기가 치환기 -OR로 독립적으로 대체되는, 스틸베노이드일 수 있으며, 이때 각각의 R은 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 및 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 적어도 1개의 R이 지방산 함유 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기인 것을 전제로 한다. 스틸베노이드는 아실화되지 않을 때, 알콕시 (예를 들어, 메톡시) 및 하이드록실로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 치환되는 트랜스-스틸베노이드다. 스틸베노이드의 비제한적인 예는 레스베라트롤(resveratrol), 프테로스틸벤(pterostilbene), 라폰티게닌(rhapontigenin), 피노스틸벤(pinostilbene), 옥시레스베라트롤(oxyresveratrol), 4-메톡시레스베라트롤, 및 피세아타놀(piceatannol)을 포함한다. 스틸베노이드가 아실화될 때, 스틸베노이드 내의 하이드록실기 중 하나 또는 둘 모두는 지방산 아실 포함 기 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기로 독립적으로 치환된다. 일부 실시예에서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 아실화된 레스베라트롤이다. 추가의 실시예들에서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 아실화된 피세아타놀이다.
아실화된 메살라민(Acylated Mesalamines)
본 발명의 아실화된 메살라민은 -NH2, -OH, 또는 -COOH 중 1개 이상이 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 대체되는 메살라민일 수 있으며, 아실화된 메살라민이 적어도 1개의 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 함유하는 것을 전제로 한다. 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기는 글리코시드 결합, 에스테르 결합, 아미드 결합, 카보네이트 링커, 또는 카바메이트 링커를 통해 메살라민에 결합된다. 일부 실시예들에서, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기는 글리코시드 결합을 통해 메살라민에 결합된다. 소정의 실시예들에서, 아실화된 메살라민은 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기를 포함한다. 추가의 실시예들에서, 아실화된 메살라민은 지방산 함유 기(예를 들어, 단쇄 지방산 아실(예를 들어, 단쇄 지방산 아실은 아세틸, 프로피오닐, 또는 부티릴임) 또는 중쇄 지방산 아실(예를 들어, 옥타노일))를 포함한다. 일부 실시예에서, 아실화된 메살라민은 하기 식 (II)의 화합물이고:
Figure pct00071
,
(II)
이때
R1은 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
R2는 H, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고
각각의 R3은 독립적으로 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기거나; 또는 R3 기 모두가 결합하여 다음을 형성한다:
Figure pct00072
.
일부 실시예에서, 상기 아실화된 메살라민은 적어도 1개의 지방산 함유 기를 포함한다. 소정의 실시예들에서, 아실화된 메살라민은 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기를 포함한다. 추가의 실시예에서, 아실화된 메살라민은 적어도 1개의 아미노산 대사물질 함유 기를 포함한다.
또 다른 실시예들에서,
R1은 H, 알킬, 아실, 또는 지방산 함유 기고;
R2는 H, 알킬, 또는 지방산 함유 기고; 그리고
각각의 R3은 독립적으로 H, 알킬, 아실, 또는 지방산 함유 기; 또는 R3 기 모두가 결합하여 다음을 형성한다:
Figure pct00073
.
아실화된 엘라그산 및 아실화된 엘라그산 유사체(Acylated Ellagic Acid and Acylated Ellagic Acid Analogues)
아실화된 엘라그산은 아실(예를 들어, 지방산 아실)로 치환된 1개 이상의 하이드록실을 갖는 엘라그산 코어를 포함한다. 아실화된 엘라그산 유사체는 아실(예를 들어, 지방산 아실)로 치환된 1개 이상의 하이드록실을 갖는 엘라그산 유사체 코어를 포함한다.
아실화된 엘라그산은 하기 구조의 화합물:
Figure pct00074
또는
Figure pct00075
, 또는 그의 염이고,
이때 RA는 독립적으로 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고 각각의 RB는 독립적으로 H, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 적어도 1개의 RA 및/또는 적어도 1개의 RB는, 존재하는 경우, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다. 아실화된 엘라그산 유사체는 하기 구조의 화합물:
Figure pct00076
, 또는 그의 염이고,
이때
R2, R3, 및 R4의 각각은 독립적으로 H 또는 -ORA고;
R6은 H 또는 -(CO)-R5B이고;
R1A는 H 또는 -ORA이고, R5A는 -OH 또는 -ORB이고; 또는 R1A 및 R5A는 결합하여 -O-를 형성하고;
R1B는 H 또는 -ORA이고, R5B는 부재하거나, -OH, 또는 -ORB이고; 또는 R1B 및 R5B는 결합하여 -O-를 형성하고;
각각의 RA는 독립적으로 H, O-보호기, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기이고;
각각의 RB는 독립적으로 H, O-보호기, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
적어도 1개의 RA 및/또는 적어도 1개의 RB가 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 한다.
엘라그산 유사체의 비제한적인 예는 유로리틴(urolithin) A, 유로리틴 B, 유로리틴 C, 유로리틴 D, 유로리틴 E, 및 유로리틴 M5를 포함한다.
아실화된 하이드록시벤조산(Acylated Hydroxybenzoic Acids)
아실화된 활성제는 예를 들어, 하기 구조의 아실화된 하이드록시벤조산:
Figure pct00077
,
또는 그의 염일 수 있고,
이때
n은 1, 2, 또는 3이고;
각각의 R1은 독립적으로 H, 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고
R2는 H, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
상기 화합물이 적어도 1개의 지방산 함유 기, 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 포함하는 것을 전제로 한다.
아실화된 하이드록시벤조산의 비제한적인 예는, 1, 2 또는 3개의 페놀 하이드록실들이 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 독립적으로 치환되는, 갈산을 포함한다.
아실화된 당(Acylated Sugars)
아실화된 활성제는 예를 들어, 아실화된 당일 수 있다. 아실화된 당은 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기로 치환된 1개 이상의 하이드록실을 갖는 단당류일 수 있다. 상기 단당류는 피라노오스 또는 푸라노오스 형태로 존재한다. 바람직하게는, 상기 단당류는 피라노오스 형태로 존재한다. 상기 단당류는 알도오스 또는 케토오스일 수 있다. 단당류의 비제한적인 예는 아라비노오스, 자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, 글루코오스, 리보오스, 타가토오스, 푸코오스, 및 람노오스다. 일부 실시예에서, 상기 단당류는 L-아라비노오스, D-자일로오스, 프룩토오스, 갈락토오스, D-글루코오스, D-리보오스, D-타가토오스, L-푸코오스, 또는 L-람노오스다. 바람직하게는, 상기 단당류는 자일로오스, 아라비노오스, 람노오스, 푸코오스, 글루코사민, 또는 타가토오스다. 상기 단당류는 -OR에 결합된 아노머 탄소(anomeric carbon)를 포함할 수 있으며, 이때 R은 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기다. 바람직하게는, R은 알킬 또는 지방산 함유 기다. 대안적으로, R은 알킬 또는 아미노산 대사물질 함유 기다. 아실화된 쉬킴산(Acylated Shikimic Acid) 아실화된 활성제는 예를 들어, 하기 구조의 아실화된 쉬킴산:
Figure pct00078
, 또는 그의 염일 수 있고,
이때
각각의 R1은 독립적으로 H, 아실, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고
R2는 H, 알킬, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
상기 화합물이 적어도 1개의 지방산 함유 기, 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기를 포함하는 것을 전제로 한다.
조합
본 발명은 또한 제1 활성제 및 제2 활성제를 포함하는 병용 요법을 제공한다(예컨대, 방법이나 단위 투여량 형태로서임). 제1 활성제는 예를 들어, 스틸베노이드, 카테킨 폴리페놀, 카로티노이드, 담즙산, 아미노산, 하이드록시벤조산, 쉬킴산, 단당류, 또는 메살라민, 메트포르민, 비타민, S-아데노실-L-메티오닌일 수 있다. 제2 활성제는 예를 들어, 케톤체 또는 프리-케톤체, 핵 수용체 조절제 (예컨대, PPAR 효능제 (그의 알파, 델타/베타, 감마 및 이종이량체 포함), FXR 효능제, 갑상선 호르몬 수용체 1β 효능제), GLP1R 효능제, 또는 ACC1 억제제일 수 있다. 일부 실시예에서, 상기 제1 활성제는 스틸베노이드(예를 들어, 레스베라트롤)다. 추가 실시예들에서, 상기 제2 활성제는 프리-케톤체 (예컨대, 1,3-부탄디올)다. 상기 제1 활성제 및 상기 제2 활성제는 대사 마커를 조절하거나 대사 장애를 치료하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다. 상기 제1 제 및 제2 제는 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하거나 비알코올성 지방 간 질환(예를 들어, 비알코올 지방간염)을 치료하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다. 상기 제1 활성제 및 제2 활성제는, 예를 들어, 2:1 내지 1:20 (예를 들어, 1:1 내지 1:20, 1:1 내지 1:10, 1:1 내지 1:8, 1:1 내지 1:13, 1:2 내지 1:20, 1:2 내지 1:10, 1:2 내지 1:8, 1:2 내지 1:3, 1:3 내지 1:20, 1:3 내지 1:10, 또는 1:3 내지 1:8)의 제1 활성제 대 제2 활성제의 투여량 비로 제공될 수 있다.
방법
본원에서 설명되는 아실화된 활성제 및 활성제 조합은 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 장애를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 추가적으로 또는 대안적으로, 본원에서 설명된 바와 같은 활성제 및 활성제 조합은 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 마커를 조절하는 데 사용될 수 있다.
서구식 식단(Western diets)-고 지방 및 정제된 탄수화물-은 비만으로 이어지는 체중 증가 및 대사 증후군 위험, II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 고콜레스테롤혈증 및 고지혈증과 관련이 있다. 이 식단의 소비로 인해 지방 조직과 간에 지방 축적이 생길 수 있다. 이는 장 미생물군(gut microbiome)의 변화, 관련 마커들의 상승을 초래할 수 있다. 민감한 개인의 경우, 이러한 식단 변화는 완전히 당뇨병으로 이어질 수 있다. II형 당뇨병은 심혈관 및 안과 질환을 유발할 수 있으며, 이는 실명, 말초 혈관 부전, 심장 질환 및 조기 사망을 초래할 수 있다. 또한, 식단 변화는 디스바이오시스(dysbiosis)라고 부르는 장내 미생물군 변화와 상관된다. 장내 디스바이오시스를 바로잡는 것은 체중 손실 및 개선된 혈당 내성을 야기할 수 있으며, 이는 장기간, 건강하지 않은 식단의 유해한 효과 중 많은 것을 막는 것으로 예상될 수 있다. 단쇄 지방산(short chain fatty acid, SFNA)과 같은 인간 장내 미생물군의 대사 산물은 인간 숙주에 대해 유리한 대사 효과를 생성할 수 있다. 몇몇 경우에, 이들 분자는 단쇄 지방산 수용체에 결합함으로써 작용할 수 있다. 다른 경우에, 유익은 PPAR-감마(peroxisome proliferator-activator receptor gamma) 또는 히스톤 탈아세틸효소(HDACi)의 억제와 같은 기작들을 통해 생성될 수 있다.
이를 필요로 하는 대상체에서 대사 장애를 치료하는 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 아실화된 활성제(예를 들어, 아실화된 활성제를 함유하는 약제학적 또는 기능성식품 조성물)를 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 실시예에서, 아실화된 활성제의 성분(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 (예를 들어, 아세틸) 또는 아미노산 대사산물 및 에피갈로카테킨 갈레이트 또는 케르세틴(quercetin)은 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 장애를 치료하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다.
대안적으로, 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 장애를 치료하는 방법은 제1 활성제(예를 들어, 제1 활성제를 함유하는 약제학적 또는 기능성식품 조성물) 및 제2 활성제(예를 들어, 제2 활성제를 함유하는 약제학적 또는 기능성식품 조성물)를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 소정의 실시예들에서, 제1 활성제 및 제2 활성제(예를 들어, 레스베라트롤 및 프리-케톤체)는 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 장애를 치료하기 위해 상승적으로 작용할 수도 있다. 일부 실시예에서, 제1 활성제(예를 들어, 스틸베노이드 또는 카테킨 폴리페놀)은 제2 활성제(예컨대 프리-케톤체, 케톤체, 또는 지방산)와 공동-투여된다. 제1 및 제2 활성제는 동시에 투여될 수 있다. 소정의 실시예들에서, 제2 활성제는 제1 활성제의 투여 전에 (예를 들어, 12시간 이내, 24시간 이내, 3일 이내, 또는 1주 이내에), 그와 동시에, 또는 이후에 (예를 들어, 12시간 이내, 24시간 이내, 3일 이내, 또는 1주 이내에) 투여될 수 있다. 제1 활성제 및 제2 활성제가 동시에 투여될 때, 2개의 제제는 별도의 단위 투여량으로 또는 동일한 단위 투여량으로 투여될 수 있다. 바람직하게는, 제1 활성제는 스틸베노이드(예를 들어, 레스베라트롤)다. 바람직하게는, 제2 활성제는 프리-케톤체다.
대사 장애의 비제한적인 예는 비만, 대사 증후군, II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 고콜레스테롤혈증, 동맥경화증 및 고지혈증을 포함한다.
이를 필요로 하는 대상체에서 대사 마커를 조절하는 방법은 대상체에게 아실화된 활성제(예를 들어, 아실화된 활성제를 함유하는 약제학적 또는 기능성식품 조성물)를 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 실시예들에서, 아실화된 활성제의 성분(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 (예를 들어, 아세틸) 또는 아미노산 대사산물 및 카테킨 폴리페놀(예를 들어, 에피갈로카테킨 갈레이트 또는 케르세틴)은 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 마커를 조절하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다.
대사적으로, 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 마커를 조절하는 방법은 활성제 조합(예를 들어, 제1 활성제 및 제2 활성제)을 대상체에게 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 소정의 실시예들에서, 제1 활성제 및 제2 활성제(예를 들어, 레스베라트롤 및 프리-케톤체)는 이를 필요로 하는 대상체에서 대사 마커를 조절하기 위해 상승적으로 작용할 수도 있다.
대사 마커의 비제한적인 예는 비만, II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 대사 증후군, 고콜레스테롤혈증, 및 고지혈증에 대한 마커를 포함한다. 비만 마커는, 예를 들어 총 지방 백분율, 세포 지방과다(adiposity), 체질량 지수, 체중 증가율, 복부 지방량, 피하 지방 양, 서혜부 지방(inguinal fat) 양, 부고환 지방(epididymal fat) 양, 백색 대 갈색 지방 비율, 지방합성(lipogenesis) 수준 및 지방 저장 수준이다. 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시, 본원에서 설명된 아실화된 활성제 또는 활성제 조합은 총 지방 백분율, 세포 지방과다, 체질량 지수, 체중 증가율, 복부 지방량, 백색 대 갈색 지방 비율, 지방합성 수준, 또는 지방 저장 수준을 감소시킬 수 있다. II 형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 대사 증후군, 고콜레스테롤혈증, 및 고지혈증에 대한 마커는 예를 들어, 인슐린 수준, GLP-1 수준, PYY 수준, 혈당 수준, 헤모글로빈 A1c 수준, 포도당 내성 수준, 콜레스테롤 (예: HDL 또는 LDL) 수준, 혈중 트리글리세리드 수준을 포함한다. 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시, 본원에서 설명된 아실화된 활성제 또는 활성제 조합은 인슐린 수준, GLP-1 수준, 또는 PYY 수준을 증가시킬 수 있다. 부가적으로 또는 대안적으로, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시, 본원에서 설명된 아실화된 활성제 또는 활성제 조합은 혈당 수준 또는 헤모글로빈 A1c 수준을 감소시킬 수 있다. 추가적으로 또는 대안적으로, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시, 본원에서 설명된 아실화된 활성제 또는 활성제 조합은 대상체의 포도당 내성을 증가시킬 수 있다. 부가적으로 또는 대안적으로, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시, 본원에서 설명된 아실화된 활성제 또는 활성제 조합은 혈중 콜레스테롤(예를 들어, LDL) 수준을 감소시킬 수 있다. 부가적으로 또는 대안적으로, 이를 필요로 하는 대상체에게 투여시, 본원에서 설명된 아실화된 활성제 또는 활성제 조합은 혈액 트리글리세리드 수준을 감소시킬 수 있다. 일부 실시예에서, 아실화된 활성제의 성분(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 (예를 들어, 아세틸) 또는 아미노산 대사산물 및 카테킨 폴리페놀(예를 들어, 에피갈로카테킨 갈레이트 또는 케르세틴)은 예를 들어, 아실화된 활성제를 받는 대상체의 GI 관에서 가수분해 시, 대사 마커를 조절하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다. 일부 실시예에서, 활성제 조합(예를 들어, 스틸베노이드 (예를 들어, 레스베라트롤) 및 프리-케톤체) 중의 활성제는 대상체에게 투여 시 대사 마커를 조절하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다.
본원에서 설명되는 마커들은 당 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 예를 들어, 포도당 내성은 MedlinePlus(medlineplus.gov)에 설명된 경구 포도당 내성 테스트(oral glucose tolerance test, OGTT)를 사용하여 평가될 수 있다. 이 테스트에서, 대상체는 미리 정해진 양의 글루코오스(전형적으로, 75g의 글루코오스)를 함유하는 액체를 마시고, 그런 다음 혈당 수준을 글루코오스 복용 후 15분, 30분, 60분, 90분, 120분, 150분 및 180분에 측정한다. 인슐린 민감도는, 예를 들어, Farrnnini 및 Mari, J. Hypertens., 16:895-906, 1998에 설명된 인슐린 클램프(insulin clamp)를 사용하여 측정될 수 있다. 지방합성(Lipogenesis)은, 예를 들어, Rabøl 등 Proc. Nat. Acad. Sci., 108:13705-13709, 2011에 설명된 간 신생 지방형성(de novo lipogenesis) 테스트를 사용하여 평가될 수 있다. 이 테스트는 중수소-표지된 물의 투여 중에 혈장 초저밀도 리포단백질 트리글리세리드(VLDL) 내로의 중수소의 혼입을 평가한다.
본원에 개시된 아실화된 활성제 및 활성제 조합은 비알코올성 지방 간 질환(예를 들어, 비알코올 지방간염 (NASH), 간 지방증, 진행성 섬유증을 갖는 NASH)을 치료하는 방법에 사용될 수 있다. 추가적으로 또는 대안적으로, 본원에 개시된 아실화된 활성제 및 활성제 조합은 이를 필요로 하는 대상체에서 비알코올성 지방 간 질환(예를 들어, 비알코올 지방간염) 마커를 조절하는 방법에 사용될 수 있다.
전형적으로, NAFLD(예를 들어, NASH)를 치료하는 방법 또는 NAFLD(예를 들어, NASH) 마커를 조절하는 방법은, 본원에 개시되는 아실화된 활성제 또는 활성제 조합을 이를 필요로 하는 대상체(예를 들어, NAFLD(예를 들어, NASH)로 진단하거나 고통받는 대상체)에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시예에서, 아실화된 활성제의 성분(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 (예를 들어, 아세틸) 또는 아미노산 대사산물 및 카테킨 폴리페놀(예를 들어, 에피갈로카테킨 갈레이트 또는 케르세틴)은 이를 필요로 하는 대상체에서 NAFLD(예를 들어, NASH)를 치료하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다. 특정한 실시예들에서, 제1 활성제 및 제2 활성제(예를 들어, 레스베라트롤 및 프리-케톤체)는 이를 필요로 하는 대상체에서 NAFLD(예를 들어, NASH)를 치료하기 위해 상승적으로 작용할 수도 있다. 소정의 실시예들에서, 아실화된 활성제의 성분(예를 들어, 단쇄 지방산 아실 (예를 들어, 아세틸) 또는 아미노산 대사산물 및 카테킨 폴리페놀(예를 들어, 에피갈로카테킨 갈레이트 또는 케르세틴)은 이를 필요로 하는 대상체에서 NAFLD 마커를 조절하기 위해 상승적으로 작용할 수도 있다. 또 다른 실시예들에서, 제1 활성제 및 제2 활성제(예를 들어, 레스베라트롤 및 프리-케톤체)는 이를 필요로 하는 대상체에서 NAFLD 마커를 조절하기 위해 상승적으로 작용할 수 있다.
일부 실시예에서, 상기 방법은 투여 단계 전에 대상체의 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 수준에 비해 대상체의 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 수준을 적어도 1% (예, 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 적어도 98% 이상; 예컨대 최대 99% 또는 100%) 감소시킨다. 본원에 개시된 소정의 방법들은 대상체의 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 수준을 대상체(예를 들어, 인간)에 대해 정상으로 간주되는 수준으로 감소시킬 수 있으며; 인간 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 정상 수준은 일반적으로 7-56 유닛/L이다. 소정의 실시예들에서, 상기 방법은 투여 단계 전에 대상체의 혈중 아스파르테이트 트랜스아미나제의 수준에 비해 대상체의 혈중 아스파르테이트 트랜스아미나제의 수준을 적어도 1% (예, 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 적어도 98% 이상; 예컨대 최대 99% 또는 100%) 감소시킨다. 본원에 개시된 소정의 방법들은 대상체의 혈중 아스파르테이트 트랜스아미나제의 수준을 대상체(예를 들어, 인간)에 대해 정상으로 간주되는 수준으로 감소시킬 수 있으며; 인간 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 정상 수준은 일반적으로 10-40 유닛/L이다. 특정 실시예들에서, 상기 방법은 투여 단계 전에 대상체의 간 중량에 비해 대상체의 간 중량을 적어도 1%만큼 감소시킨다.
본원에서 설명되는 방법들은 다수의 활성제(예컨대 프리-케톤체, 케톤체, 또는 지방산과 조합된 예를 들어, 스틸베노이드, 카로티노이드, 비타민, 카테킨 폴리페놀, S-아데노실-L-메티오닌, 담즙산, 또는 메트포르민)을 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 일부 실시예에서, 제1 제(예를 들어, 스틸베노이드, 카로티노이드, 비타민, 카테킨 폴리페놀, S-아데노실-L-메티오닌, 담즙산 또는 메트포르민)은 제2 제(예컨대 프리-케톤체, 케톤체 또는 지방산)와 공동-투여된다. 제1 및 제2 제는 동시에 투여될 수 있다. 소정의 실시예들에서, 제2 제는 제1 제의 투여 전에(예를 들어, 12시간 이내, 24시간 이내, 3일 이내, 또는 1주 이내에), 그와 동시에, 또는 이후에(예를 들어, 24시간 이내, 24시간 이내, 3일 이내, 또는 1주 이내에) 투여될 수 있다. 제1 및 제2 제가 동시에 투여될 때, 두 제제는 별도의 유닛 투여량으로 또는 동일한 단위 용량으로 투여될 수 있다. 바람직하게는, 제1 제는 스틸베노이드(예를 들어, 레스베라트롤)다. 바람직하게는, 제2 제는 프리-케톤체다.
약제학적 및 기능성식품 조성물
본원에 개시된 활성제(예를 들어, 활성제 또는 병용 요법을 위해 의도된 아실화된 활성제, 예컨대, 스틸베노이드 및 프리-케톤체)는 생체 내 투여에 적합한 생물학적으로 호환 가능한 형태로 인간 대상체에게 투여하기 위한 약제학적 또는 기능성식품 조성물로 제형화될 수 있다. 약제학적 및 기능성식품 조성물은 일반적으로 본원에서 설명되는 활성제 및 생리학적으로 허용 가능한 부형제(예를 들어, 약제학적으로 허용 가능한 부형제)를 포함한다.
본원에서 설명되는 활성제는 또한 유리 산/염기 형태, 염, 쌍성이온, 또는 용매화물의 형태로 사용될 수 있다. 모든 형태는 본 발명의 범위 내에 있다. 활성제, 염, 쌍성이온, 용매화물 또는 이의 약제학적 또는 기능성식품 조성물은 당 분야의 숙련자에 의해 이해될 바와 같이, 선택된 투여 경로에 따라 다양한 형태로 대상체에게 투여될 수 있다. 본원에서 설명되는 활성제는, 예를 들어, 경구, 비경구, 협측, 설하, 비강, 직장, 패치, 펌프, 또는 경피 투여에 의해, 그리고 이에 따라 제형화된 약제학적 또는 기능성식품 조성물에 의해 투여될 수 있다. 비경구 투여는 정맥내, 복강 내, 피하, 근육 내, 경피내, 비강, 폐내, 척수내, 직장 및 국소 투여 모드를 포함한다. 비경구 투여는 선택된 시간에 걸쳐 연속 주입에 의한 것일 수 있다.
인간 사용을 위해, 본원에 개시된 활성제는 단독으로 또는 의도된 투여 경로 및 표준 약제학적 실무에 관해 선택된 약제학적 또는 기능성식품 담체와 혼합하여 투여될 수 있다. 따라서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 약제학적 및 기능성식품 조성물은 약제학적으로 사용될 수 있는 제제로 본원에 개시된 활성제의 가공을 용이하게 하는 부형제 및 보조제를 포함하는 하나 이상의 생리학적으로 허용 가능한 담체를 사용하는 통상적인 방식으로 제형화될 수 있다.
본 발명은 또한 하나 이상의 생리학적으로 허용 가능한 담체를 함유할 수 있는 약제학적 및 기능성식품 조성물을 포함한다. 본 발명의 약제학적 또는 기능성식품 조성물을 제조함에 있어서, 활성 성분은 통상적으로 부형제와 혼합되거나, 부형제에 의해 희석되거나, 예를 들어, 캡슐, 봉지(sachet), 종이 또는 다른 용기 형태로 담체 내에 동봉된다. 부형제가 희석제로서 기능할 때, 그것은 활성 성분에 대한 비히클, 담체 또는 매질로서 작용하는, 고체, 반고체, 또는 액체 재료(예를 들어, 정상 식염수)일 수 있다. 따라서, 조성물은 정제, 분말, 로젠지, 봉지, 봉투(cachet), 엘릭시르(elixir), 현탁액, 유화액, 용액, 시럽, 및 연질 및 경질 젤라틴 캡슐의 형태일 수 있다. 당 기술분야에 공지된 바와 같이, 희석제의 유형은 의도된 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 생성된 조성물은 추가 제제, 예를 들어 보존제를 포함할 수 있다. 기능성식품 조성물은 장내(예를 들어, 경구)로 투여될 수 있다. 기능성식품 조성물은 기능성식품 경구 제형(예를 들어, 정제, 분말, 로젠지, 봉지, 봉투, 엘릭시르, 현탁액, 유화액, 용액, 시럽 또는 연질 또는 경질 젤라틴 캡슐), 식품 첨가제(예를 들어, 21 C.F.R§ 170.3에 정의된 바와 같은 식품 첨가제), 식품 제품(예를 들어, 21 C.F.R§ 105.3에 정의된 특수 식품 사용 음식), 또는 식이 보충제(예를 들어, 활성제가 (예를 들어, 21 U.S.C§ 321(ff)에 정의된 바와 같은) 식단 성분인 경우)일 수 있다. 활성제는 기능성식품 응용분야에 및 식품 첨가제 또는 식품 제품으로서 사용될 수 있다. 본 발명의 활성제를 포함하는 조성물의 비한정적 예는 바, 음료, 쉐이크, 분말, 첨가제, 겔 또는 씹는 것(chew)이다.
부형제 또는 담체는 투여 모드와 경로에 기반하여 선택된다. 약제학적 제형에 사용하기 위한 약제학적 필수품 뿐만 아니라 적절한 약제학적 담체가, 본 분야, 및 USP/NF (United States Pharmacopeia and the National Formulary)에서 널리 알려진 참조 텍스트인, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Gennaro, Ed., Lippencott Williams & Wilkins (2005)에 설명되어 있다. 적절한 부형제의 예는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 검 아카시아, 인산칼슘, 알긴산염, 트라가칸스, 젤라틴, 규산칼슘, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 물, 시럽 및 메틸 셀룰로오스이다. 제형은 추가적으로 다음을 포함할 수 있다: 윤활제, 예컨대 탈크, 스테아르산 마그네슘, 및 광유; 습윤제; 유화 및 현탁제; 보존제, 예컨대 메틸- 및 프로필하이드록시-벤조에이트; 감미제; 및 향미제. 다른 예시적인 부형제는 Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th Edition, Rowe 등, Eds., Pharmaceutical Press (2009)에 설명되어 있다.
이들 약제학적 및 기능성식품 조성물은 종래의 방식으로, 예를 들어, 종래의 혼합, 용해, 과립화, 당의정-제조(dragee-making), 가루화(levigating), 에멀젼화(emulsifying), 캡슐화(encapsulating), 포집(entrapping) 또는 동결건조 공정에 의해 제조될 수 있다. 제형을 제조하기 위해 본 분야에 널리 공지된 방법은, 예를 들어, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Gennaro, Ed., Lippencott Williams & Wilkins (2005), 및 Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick 및 J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York에서 발견된다. 적절한 제형은 선택한 투여 경로에 따라 달라진다. 이러한 조성물의 제형 및 제조는 약제학적 및 기능성식품 제형 기술분야의 숙련자에게 주지되어 있다. 제형을 제조함에 있어서, 활성제는 밀링되어 다른 성분과 조합하기 전에 적절한 입자 크기를 제공할 수 있다. 활성제가 실질적으로 불용성인 경우, 그것은 200 메쉬 미만의 입자 크기로 밀링될 수 있다. 활성제가 실질적으로 수용성이면, 입자 크기는 제형에 실질적으로 균일한 분포를 제공하기 위해 밀링에 의해, 예를 들어 약 40 메쉬로 조정될 수 있다.
투여량
본원에서 설명되는 방법에서 사용된 활성제의 투여량, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 또는 전구약물, 또는 이의 약제학적 또는 기능성식품 조성물은, 많은 인자, 예를 들어, 활성제의 약력학적 특성; 투여 방식; 수혜자의 연령, 건강 및 체중; 증상의 성질과 정도; 치료 빈도 및 병행 요법(존재하는 경우); 및 치료될 대상체에서의 활성제의 제거율을 따라 다양할 수 있다. 당 분야의 숙련자는 상기 인자들에 기초하여 적절한 투여량을 결정할 수 있다. 본원에서 설명되는 방법에서 사용되는 활성제는 임상 반응에 따라, 필요에 따라 조정될 수 있는 적절한 투여량으로 초기에 투여될 수 있다. 일반적으로, 본원에 개시된 활성제의 적절한 일일 용량은 치료 효과를 생성하는 데 유효한 최저 용량인 활성제의 양일 것이다. 이러한 유효 용량은 일반적으로 상술한 인자들에 따라 달라질 것이다.
본원에 개시된 활성제는 단일 용량으로 또는 다중 용량으로 대상체에게 투여될 수 있다. 다중 용량이 투여될 때, 용량은 예를 들어, 1-24시간, 1-7일, 또는 1-4주만큼 서로 분리될 수 있다. 활성제는 일정에 따라 투여될 수 있거나, 활성제는 미리 정해진 일정 없이 투여될 수 있다. 임의의 특정 대상체에 대해, 특이적인 투여량 체계는, 조성물의 투여를 관리 또는 감독하는 사람의 전문적인 판단과 개별 요구에 따라 시간 경과에 따라 조정되어야 함을 이해해야 한다.
활성제는 단위 투여량 형태로 제공될 수 있다. 일부 실시예에서, 단위 투여량 형태는 경구 단위 투여량 형태(예를 들어, 정제, 캡슐, 현탁액, 액체 용액, 분말, 결정, 로젠지, 봉지, 봉투, 엘릭시르, 시럽 등) 또는 식품 제품 제공분 (예를 들어, 활성제는 식품 첨가제 또는 식이 원료로서 포함될 수 있음)일 수 있다. 소정의 실시예들에서, 단위 투여량 형태는, 본원에서 개시되는 적어도 1개의 활성제의 투여를 위해 설계되며, 이때 투여된 활성제(들)의 총량은 0.1g 내지 10g이다(예를 들어, 0.5g 내지 9g, 0.5g 내지 8g, 0.5g 내지 7g, 0.5g 내지 6g, 0.5g 내지 5g, 0.5g 내지 1g, 0.5g 내지 1.5g, 0.5g 내지 2g, 0.5g 내지 2.5g, 1g 내지 1.5g, 1g 내지 2g, 1g 내지 2.5g, 1.5g 내지 2g, 1.5g 내지 2.5g, 또는 2g 내지 2.5g). 투여된 활성제가 활성제 조합으로서 제공될 때, 총량은, 예를 들어 0.1g 내지 10g일 수 있다(예를 들어, 0.5g 내지 9g, 0.5g 내지 8g, 0.5g 내지 7g, 0.5g 내지 6g, 0.5g 내지 5g, 0.5g 내지 1g, 0.5g 내지 1.5g, 0.5g 내지 2g, 0.5g 내지 2.5g, 1g 내지 1.5g, 1g 내지 2g, 1g 내지 2.5g, 1.5g 내지 2g, 1.5g 내지 2.5g, 또는 2g 내지 2.5g). 다른 실시예들에서, 활성제는 일일 0.1g 내지 10g(예를 들어, 일일 0.5g 내지 9g, 0.5g 내지 8g, 0.5g 내지 7g, 0.5g 내지 6g, 0.5g 내지 5g, 0.5g 내지 1g, 일일 0.5g 내지 1.5g, 일일 0.5g 내지 2g, 일일 0.5g 내지 2.5g, 일일 1g 내지 1.5g, 일일 1g 내지 2g, 일일 1g 내지 2.5g, 일일 1.5g 내지 2g, 일일 1.5g 내지 2.5g, 일일 2g 내지 2.5g) 또는 그 이상의 비율로 소비된다. 투여된 활성제가 활성제 조합으로서 제공될 때, 일일 총량은, 예를 들어, 0.1g 내지 10g(예를 들어, 일일 0.5g 내지 9g, 0.5g 내지 8g, 0.5g 내지 7g, 0.5g 내지 6g, 0.5g 내지 5g, 0.5g 내지 1g, 일일 0.5g 내지 1.5g, 일일 0.5g 내지 2g, 일일 0.5g 내지 2.5g, 일일 1g 내지 1.5g, 일일 1g 내지 2g, 일일 1g 내지 2.5g, 일일 1.5g 내지 2g, 일일 1.5g 내지 2.5g, 일일 2g 내지 2.5g) 이상일 수 있다. 담당의사는 궁극적으로 적절한 양 및 투여량 체계를 결정할 것이고, 본원에 개시된 활성제의 유효량은 예를 들어, 본원에서 설명되는 임의의 아실화된 활성제 또는 활성제 조합의 총 일일 투여량, 예를 들어, 0.5 내지 10g(예, 0.5 내지 5g)일 수 있다. 대안적으로, 투여량은 대상체의 체중을 사용하여 계산될 수 있다. 바람직하게는, 일일 투여량이 5g/일을 초과하면, 활성제의 투여량은 2회 또는 3회의 일일 투여 이벤트에 걸쳐서 분할될 수 있다.
본 발명의 방법들에서, 본원에 개시된 활성제의 다중 용량이 대상체에게 투여되는 기간은 달라질 수 있다. 예를 들어, 일부 실시예에서, 활성제의 용량은 1-7일; 1-12주; 또는 1-3개월 기간에 걸쳐 대상체에게 투여된다. 다른 실시예들에서, 활성제는 예를 들어, 4-11개월 또는 1-30년인 기간에 걸쳐 대상체에게 투여된다. 또 다른 실시예들에서, 본원에 개시된 활성제는 증상의 발발 시점에 대상체에게 투여된다. 임의의 실시예들에서, 투여되는 활성제의 양은 투여 기간 동안 변할 수 있다. 활성제가 매일 투여될 때, 투여는 일일 1, 2, 3 또는 4회 일어날 수 있다.
제형
본원에서 설명되는 활성제는 약제학적으로 허용 가능한 희석액, 담체 또는 부형제와 함께 단위 투여 형태로 대상체에게 투여될 수 있다. 통상적인 약제학적 실무를 사용하여 장애를 앓고 있는 대상체에게 활성제를 투여하기 위한 적절한 제형 또는 조성물을 제공할 수 있다. 투여는 대상체가 증상을 갖기 전에 시작될 수 있다.
본 발명에 개시된 활성제 또는 본 발명에서 사용되는 약제학적 또는 기능성식품 조성물의 예시적인 투여 경로는 경구, 설하, 협측, 경피, 피내, 근육 내, 비경구, 정맥내, 동맥내, 두개내, 피하, 안와내, 뇌실내, 척수내, 복강내, 비강, 흡입 및 국소 투여를 포함한다. 활성제는 바람직하게는 생리학적으로 허용 가능한 담체(예를 들어, 약제학적으로 허용 가능한 담체)와 함께 투여된다. 본원에서 설명되는 질환의 치료를 위해 제형화된 활성제의 약제학적 제형도 본 발명의 일부이다. 일부 바람직한 실시예에서, 본원에 개시된 활성제는 경구로 대상체에게 투여된다. 다른 바람직한 실시예에서, 본원에 개시된 활성제는 대상체에게 국소 투여된다.
경구 투여용 제형
본 발명에 의해 고려되는 약제학적 및 기능성식품 조성물은 경구 투여를 위해 제형화된 것을 포함한다(“경구 단위 투여량 형태”경구 단위 투여량 형태는, 예를 들어, 생리학적으로 허용 가능한 부형제(예를 들어, 약제학적으로 허용 가능한 부형제)와 혼합하여 활성 성분(들)을 함유하는, 정제, 캡슐, 액체 용액 또는 현탁액, 분말, 또는 액체 또는 고체 결정의 형태로 될 수 있다. 이들 부형제는, 예를 들어, 불활성 희석제 또는 충진제(예를 들어, 수크로오스, 소르비톨, 당, 만니톨, 미정질 셀룰로오스, 감자 전분을 포함하는 전분, 탄산칼슘, 염화나트륨, 락토오스, 인산칼슘, 황산 나트륨, 또는 인산 나트륨); 과립화제 및 붕해제(예를 들어, 미정질 셀룰로오스, 감자 전분을 포함하는 전분, 크로스카멜로오스나트륨(croscarmellose sodium), 알긴산염, 또는 알긴산); 결합제(예를 들어, 수크로오스, 글루코오스, 소르비톨, 아카시아, 알긴산, 알긴산 나트륨, 젤라틴, 전분, 전젤라틴화 전분, 미정질 셀룰로오스, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 카르복시메틸셀룰로오스 나트륨, 메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 또는 폴리에틸렌 글리콜); 및 윤활제, 활택제 및 접착방지제(예를 들어, 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 아연, 스테아르산, 실리카, 수소화 식물유 또는 탈크)일 수 있다. 다른 생리학적으로 허용가능한 부형제(예를 들어, 약제학적으로 허용 가능한 부형제)는 착색제, 향미제, 가소화제, 습윤제, 완충제 등일 수 있다.
경구 투여용 제형은 또한 활성 성분이 불활성 고체 희석제(예를 들어, 감자 전분, 락토오스, 미정질 셀룰로오스, 탄산 칼슘, 인산칼슘 또는 카올린)와 혼합되는, 경질 젤라틴 캡슐 같은 씹는 정제(chewable tablet)로서, 또는 활성 성분이 물 또는 오일 매질, 예를 들어 땅콩 오일, 액체 파라핀, 또는 올리브 오일과 혼합되는 연질 젤라틴 캡슐로서 제시될 수 있다. 분말, 과립 및 펠릿은, 예를 들어, 믹서, 유체 베드 장치 또는 분무 건조 장비를 사용하여 종래의 방식으로 정제 및 캡슐에 상기 언급된 성분들을 사용하여 제조될 수 있다.
경구용을 위한 제어 방출(controlled release) 조성물은 활성 약물 물질의 용해 및/또는 확산을 제어함으로써 활성 약물(active drug)을 방출하도록 구성될 수 있다. 제어 방출 및 목표한 혈장 농도 대 시간 프로파일을 얻기 위해 다수의 전략을 추구할 수 있다. 일례에서, 제어 방출은 예를 들어, 다양한 유형의 제어 방출 조성물 및 코팅을 포함하는, 다양한 제형 매개변수 및 성분들의 적절한 선택에 의해 얻어진다. 예시들은 단일 또는 다중 단위 정제 또는 캡슐 조성물, 오일 용액, 현탁액, 유화액, 마이크로캡슐, 미소구체, 나노입자, 패치 및 리포좀을 포함한다. 소정의 실시예들에서, 조성물은 생분해성, pH 및/또는 온도 감응성 고분자 코팅을 포함한다.
용해 또는 확산 제어된 방출은 활성제의 정제, 캡슐, 펠릿 또는 과립형 제형의 적절한 코팅에 의해, 또는 활성제를 적절한 매트릭스에 통합함으로써 달성될 수 있다. 제어 방출 코팅은 상기 언급한 코팅 물질 및/또는 예를 들어 셸락, 비즈왁스, 글리코왁스, 캐스터 왁스, 카르나우바 왁스, 스테아릴 알코올, 글리세릴 모노스테아레이트, 글리세릴 디스테아레이트, 글리세롤 팔미토스테아레이트, 에틸셀룰로오스, 아크릴 수지, dl-폴리락트산, 셀룰로오스 아세테이트 부티레이트, 폴리비닐 클로라이드, 폴리비닐 아세테이트, 비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌, 폴리메타크릴레이트, 메틸메타크릴레이트, 2-하이드록시메타크릴레이트, 메타크릴레이트 하이드로겔, 1,3 부틸렌 글리콜, 에틸렌 글리콜 메타크릴레이트, 및/또는 폴리에틸렌 글리콜 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 제어 방출 매트릭스 제형에서, 매트릭스 물질은, 예를 들어, 수화된 메틸셀룰로오스, 카르나우바 왁스 및 스테아릴 알코올, 카보폴 934, 실리콘, 글리세릴 트리스테아레이트, 메틸 아크릴레이트-메틸 메타크릴레이트, 폴리비닐 클로라이드, 폴리에틸렌, 및/또는 할로겐화 플루오로카본을 포함할 수도 있다.
본 발명의 활성제 및 조성물이 경구 투여를 위해 혼입될 수 있는 액체 형태는, 수성 용액, 적절하게는 가향 시럽, 수성 또는 오일 현탁액, 및 식용 오일, 예를 들어 면실유, 참기름, 야자유, 또는 땅콩유가 있는 가향 유화액, 뿐만 아니라 엘릭시르 및 유사한 약제학적 및 기능성식품 비히클을 포함한다.
협측 투여용 제형
협측(buccal) 또는 설하(sublingual) 투여량은 일반적으로 필요에 따라 단일 용량 당 0.1-500mg다. 실제로, 의사가 개별 대상체에 가장 적합한 실제 투여 체계를 결정하며, 투여량은 특정 대상체의 연령, 체중 및 반응에 따라 달라진다. 상기 투여량은 평균 사례의 예시이지만, 더 높거나 더 낮은 투여량이 장점인 개별 사례가 존재하며, 이는 본 발명의 범위 내에 있다.
협측 투여를 위해, 조성물은 종래의 방식으로 제형화된 정제, 로젠지 등을 취할 수 있다. 분무기 및 액체 분무 장치 및 전기 유체 역학 장치(EHD) 에어로졸 장치와 함께 사용하기에 적합한 액체 약물 제형은 일반적으로 약제학적으로 허용 가능한 담체와 함께 본원에 개시되는 활성제를 포함할 것이다. 바람직하게는, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 액체, 예를 들어, 알코올, 물, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 퍼플루오로카본이다. 임의로, 다른 물질이 첨가되어 본원에 개시된 활성제의 용액 또는 현탁액의 에어로졸 특성을 변경할 수 있다. 바람직하게는, 이 물질은 액체, 예를 들어 알코올, 글리콜, 폴리글리콜, 또는 지방산이다. 에어로졸 장치에 사용하기에 적합한 액체 약물 용액 또는 현탁액을 제형화하는 다른 방법들은 당 분야의 숙련자에게 공지되어 있다(예를 들어, 각각 참조로서 본원에 통합된 미국특허 번호 5,112,598 및 5,556,611 참조).
비강 또는 흡입 투여용 제형
활성제는 또한 비강 투여를 위해 제형화될 수 있다. 비강 투여용 조성물은 또한 에어로졸, 방울, 겔 및 분말로서 편리하게 제형화될 수 있다. 제형은 단일 또는 다중 용량 형태로 제공될 수 있다. 드롭퍼 또는 피펫의 경우, 투여는 적절한, 미리 결정된 용적의 용액이나 현탁액을 투여하는 대상체에 의해 달성될 수 있다. 스프레이의 경우, 이는, 예를 들어 계량 분무 스프레이 펌프를 사용하여 달성될 수 있다.
활성제는 추가로 에어로졸 투여, 특히 흡입에 의해 그리고 비강내 투여를 포함하는 기도로의 투여를 위해 제형화될 수 있다. 비강 또는 흡입 투여용 활성제는 일반적으로 예를 들어 5μm 이하의 순서로 작은 입자 크기를 가질 것이다. 이러한 입자 크기는 당 기술분야에 공지된 수단, 예를 들어 미분화(micronization)에 의해 얻어질 수 있다. 활성 성분은 적절한 추진제, 예를 들어 클로로플루오로카본(CFC), 예를 들어 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 또는 디클로로테트라플루오로에탄, 또는 이산화탄소, 또는 다른 적절한 가스로 가압 팩 내에 제공된다. 에어로졸은 또한 계면활성제, 예를 들어 레시틴(lecithin)을 함유할 수도 있다. 약물 용량은 계량된 밸브에 의해 제어될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 건조 분말 형태, 예를 들어, 적절한 분말 베이스, 예를 들어 락토오스, 전분 및 전분 유도체, 예를 들어 하이드록시프로필메틸 셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘(PVP) 내의 활성제의 분말 혼합물 형태로 제공될 수 있다. 분말 담체는 비강 내에 겔을 형성할 것이다. 분말 조성물은 예를 들어, 분말이 흡입기에 의해 투여될 수 있는 젤라틴 또는 블리스터 팩의 캡슐 또는 카트리지 내에서 단위 투여량 형태로 제공될 수 있다.
에어로졸 제형은 통상적으로 생리학적으로 허용 가능한 수성 또는 비수성 용매 중의 활성 물질의 용액 또는 미세 현탁액을 포함하며, 일반적으로 밀봉된 용기에서 멸균 형태로 단일 또는 다중 용량으로 제공되는데, 이는 분무화 장치와 함께 사용하기 위한 카트리지 또는 리필 형태를 취할 수 있다. 대안적으로, 밀봉된 용기는 단일 분배 장치, 예를 들어 사용 후 폐기하도록 의도된 계량 밸브가 끼워진 단일 용량 비강 흡입기 또는 에어로졸 분배기일 수 있다. 단위 투여량 형태가 에어로졸 분배기를 포함하는 경우, 압축 가스, 예를 들어 압축 공기 또는 유기 추진제, 예를 들어 플루오로클로로탄화수소일 수 있는, 추진제를 함유할 것이다. 에어로졸 단위 투여량 형태는 또한 펌프-분무기의 형태를 취할 수 있다.
비경구 투여용 제형
본 발명의 방법에서 사용하기 위해 본원에서 기술된 활성제는 본원에서 설명되는 약제학적으로 허용 가능한 비경구(예를 들어, 정맥내 또는 근육 내) 제형으로 투여될 수 있다. 약제학적 제형은 또한 종래의 무-독성 약제학적으로 허용 가능한 담체 및 보강제를 함유하는 단위 투여량 형태 또는 제형으로 비경구(정맥내, 근육 내, 피하 등) 투여될 수 있다. 특히, 비경구 투여에 적합한 제형은, 항-산화제, 완충제, 정균제, 및 제형을 의도된 수혜자의 혈액과 등장성으로 만드는 용해물을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 예를 들어, 이러한 조성물을 제조하기 위해, 본원에 개시된 활성제는 비경구 허용 가능한 액체 비히클에 용해 또는 현탁될 수 있다. 사용될 수 있는 허용 가능한 비히클 및 용매들 중에서, 적절한 양의 염산, 수산화나트륨 또는 적절한 완충액, 1,3-부탄디올, 링거 용액 및 등장성 염화나트륨 용액을 첨가함으로써 적절한 pH로 조정될 수 있는 물이 있다. 수성 제형은 또한 하나 이상의 보존제, 예를 들어 메틸, 에틸 또는 n-프로필 p-하이드록시벤조에이트를 함유할 수 있다. 비경구 제형에 관한 추가 정보는, 예를 들어, 본원에 참고로 원용되는 미국 약전(United States Pharmacopeia-National Formulary, USP-NF)에서 찾을 수 있다.
비경구 제형은 비경구 투여에 적합한 것으로 USP-NF에 의해 확인된 5가지 일반적인 유형 중 어느 하나의 제제를 가질 수 있다:
(1) “약물 주사(Drug Injection):”약물 물질인 액체 제제(예를 들어, 본원에 개시된 활성제 또는 그의 용액);
(2) "주사용 약물(Drug for Injection):" 약물 주사로서 비경구 투여를 위해 적절한 무균 비히클과 조합될 건조 고체로서 약물 물질(예를 들어, 본원에 개시된 활성제);
(3) “약물 주사가능 유화액(Drug Injectable Emulsion):”적절한 유화액 매질에 용해되거나 분산되는 약물 물질(예를 들어, 본원에 개시된 활성제)의 액체 제제;
(4) “약물 주사가능 현탁액(Drug Injectable Suspension):”적절한 액체 매질에 현탁된 약물 물질(예를 들어, 본원에 개시된 활성제)의 액체 제제; 및
(5) “주사가능 현탁액용 약물(Drug for Injectable Suspension):”약물 주사가능 현탁액으로서 비경구 투여를 위해 적절한 무균 비히클과 조합될 건조 고체로서 약물 물질(예를 들어, 본원에 개시된 활성제).
비경구 투여용 예시적인 제형은 계면활성제, 예를 들어 하이드록시프로필셀룰로오스와 적절하게 혼합된 물에 제조된 활성제의 용액을 포함한다. 분산액은 또한 알코올 또는 알코올 없이 글리세롤, 액체 폴리에틸렌 글리콜, DMSO 및 이들의 혼합물로 및 오일로 제조될 수 있다. 보관 및 사용을 위한 일반적인 조건 하에서, 이들 제제는 미생물의 생장을 방지하기 위한 보존제를 함유할 수 있다. 적절한 제형의 선택 및 제조를 위한 종래의 절차 및 성분들은, 예를 들어, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Gennaro, Ed., Lippencott Williams & Wilkins (2005) 및 The United States Pharmacopeia: The National Formulary (USP 36 NF31), (2013년 공개됨)에 설명되어 있다.
비경구 투여용 제형은, 예를 들어, 부형제, 멸균수, 또는 식염수, 폴리알킬렌 글리콜, 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜, 식물 기원의 오일, 또는 수소화 나프탈렌을 함유할 수 있다. 생체적합성, 생분해성 락티드 중합체, 락티드/글리콜리드 공중합체, 또는 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체가 활성제 또는 활성제 내의 생물학적 활성제의 방출을 제어하는데 사용될 수도 있다. 활성제를 위한 잠재적으로 유용한 비경구 전달 시스템은 에틸렌-비닐 아세테이트 공중합체 입자, 삼투압 펌프, 이식형 주입 시스템, 및 리포좀을 포함한다. 흡입용 제형은 부형제, 예를 들어 락토오스를 함유할 수 있거나, 예를 들어 폴리옥시에틸렌-9-라우릴 에테르, 글리코콜레이트 및 데옥시콜레이트를 함유하는 수용액일 수 있거나, 비강 방울 형태 또는 겔로서 투여하기 위한 오일 용액일 수 있다.
비경구 제형은 신속 방출을 위해 또는 활성제의 지속적인/연장된 방출을 위해 제형화될 수 있다. 활성제의 비경구 방출을 위한 예시적인 제형은, 수용액, 재구성용 분말, 공용매 용액, 오일/물 유화액, 현탁액, 오일 기반 용액, 리포솜, 미소구체, 및 고분자 겔을 포함한다.
아실화된 활성제 제조
아실화된 활성제는 당 기술분야에 공지된 합성 방법 및 반응 조건을 사용하여 제조될 수 있다. 최적의 반응 조건 및 반응 시간은 사용된 반응물에 따라 달라질 수 있다. 달리 명시되지 않는 한, 용매, 온도, 압력 및 다른 반응 조건은 당 기술분야의 숙련자에 의해 선택될 수 있다.
에스테르 제조 전략 #1 (아실화)
반응식 1
Figure pct00079
반응식 1에서, 폴리페놀 화합물인, 화합물 1 (이때 n은 1 내지 15의 정수를 나타낸다)을 임의로 촉매의 존재 하에, 적정 용매에서 아실화제인, 화합물 2로 처리한다. 적합한 촉매는 피리딘, 디메틸아미노피리딘, 트리메틸아민 등을 포함한다. 촉매는 화합물 2에 대해, 0.01 내지 1.1 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다. 적합한 용매는 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 톨루엔, 이들의 조합 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다. 적절한 아실화제는 대칭이든지 아니든지 간에 아실 염화물, 아실 불화물, 아실 브롬화물, 카르복실산 무수물을 포함한다. 적절한 아실화제는 또한 EDC 또는 EEDQ 등과 같은 활성화 시약과 카르복실산의 이전 반응에 의해 제 위치에서(in situ) 생성될 수 있다. 아실화제는 화합물 1에 대해 0.5 내지 15 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다.
생성물인, 화합물 3은 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
에스테르 제조 전략 #2 (아실화)
일부 경우에, 폴리페놀 화합물 1은 에스테르 형성 과정에서 반응되지 않은 채로 남아있는 데 필요한, 작용기 Y를 함유할 수 있다. 이 경우, 아실화로부터 폴리페놀 화합물에서 작용기 Y를 보호하는 것이 적절하다. 이 작용기는 아미노기 또는 하이드록실기 또는 헤테로원자에 부착된 불안정 수소(labile hydrogen)를 갖는 다른 작용기일 수 있다. 이러한 폴리페놀 에스테르는 반응식 2에 따라 제조될 수 있다.
반응식 2
Figure pct00080
반응식 2 단계 1에서, 화합물 1인, 보호를 필요로 하는 불안정 수소를 갖는 작용기 Y를 함유하는 폴리페놀 화합물을, 임의로 촉매의 존재 하에 적정한 용매에서, BOC 무수물, 벤질옥시카르보닐 클로라이드, FMOC 염화물, 벤질 브로마이드 등의 보호 시약으로 처리해서 화합물 2 반응식 2를 제공한다. 화합물 2는 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
반응식 2 단계 2에서, 화합물 2를, 임의로 촉매의 존재 하에, 적정 용매에서 아실화제인, 화합물 3로 처리한다. 적합한 촉매는 피리딘, 디메틸아미노피리딘, 트리메틸아민 등을 포함한다. 촉매는 화합물 2에 대해, 0.01 내지 1.1 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다. 적합한 용매는 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 톨루엔, 이들의 조합 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다. 적절한 아실화제는 대칭이든지 아니든지 간에 아실 염화물, 아실 불화물, 아실 브롬화물, 카르복실산 무수물을 포함한다. 적절한 아실화제는 또한 EDC 또는 EEDQ 등과 같은 활성화 시약과 카르복실산의 이전 반응에 의해 제 위치에서(in situ) 생성될 수 있다. 아실화제는 화합물 3에 대해, 0.5 내지 15 당량의 양으로 사용될 수 있다. 화합물 4는 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
반응식 2 단계 3에서, 화합물 4는 보호기, PG를 절단하는 조건을 거친다.
BOC 보호기의 경우, 화합물 4의 보호기는 산성 조건 하에서 제거되어 본 발명의 화합물 5를 얻는다. 적합한 산은 트리플루오로아세트산, 염산, p-톨루엔술폰산 등을 포함한다.
FMOC 보호기의 경우, 화합물 4의 보호기는 염기성 조건 하에서 제거되어 본 발명의 화합물 5를 얻는다. 적합한 염기는 피페리딘, 트리에틸아민 등을 포함한다. 적절한 용매는 DMF, NMP 디클로로메탄 등을 포함한다. FMOC 기는 또한, 예컨대 DMF와 같은 적절한 용매 중의 테트라부틸암모늄 불화물 삼수화물로 처리함에 의해서와 같이 비염기성 조건 하에서 제거된다. FMOC 기는 또한 촉매 수소화에 의해 제거된다. 수소화에 적합한 촉매는 10% 팔라듐-온-챠콜 및 팔라듐 (II) 아세테이트 등을 포함한다. 수소화에 적합한 용매는 DMF, 에탄올 등을 포함한다.
벤질옥시카르보닐 또는 벤질 보호기의 경우 화합물 4의 보호기는 수소화에 의해 제거되어 화합물 5를 얻는다. 수소화에 적합한 촉매는 10% 팔라듐-온-챠콜 및 팔라듐 아세테이트 등을 포함한다. 수소화를 위한 적절한 용매는 DMF, 에탄올, 메탄올, 에틸 아세테이트 등을 포함한다. 생성물인, 화합물 5은 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
에스테르 제조 전략 #3 (아실화)
반응식 3
Figure pct00081
반응식 3 단계 1에서, 화합물 1인, 보호를 필요로 하는 불안정 수소를 갖는 작용기 Y를 함유하는 아실 화합물을, 임의로 촉매의 존재 하에 적정한 용매에서, BOC 무수물, 벤질옥시카르보닐 클로라이드, FMOC 염화물, 벤질 브로마이드 등의 보호 시약으로 처리해서 화합물 2 반응식 3을 제공한다. 화합물 2는 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
반응식 3 단계 2에서, 화합물 2를 티오닐 클로라이드, 인 옥시클로라이드, EDC 또는 EEDQ 등과 같은 활성화 시약으로 처리하여 활성화된 아실 화합물 3을 생성한다.
반응식 3 단계 3에서, 폴리페놀 화합물 4를 임의로 촉매의 존재 하에, 적정 용매에서 활성화된 아실 화합물 3으로 처리한다. 적절한 촉매는 화합물 5를 생성하기 위해 피리딘, 디메틸아미노피리딘, 트리메틸아민 등을 포함한다. 촉매는 화합물 3에 대해, 0.01 내지 1.1 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다. 적합한 용매는 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 톨루엔, 이들의 조합 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다. 활성화된 아실 화합물 3은 화합물 4에 대해 0.5 내지 15 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다.
반응식 3 단계 4에서, 화합물 5는 상기 반응식 2에 예시된, 보호기, PG를 절단하도록 설계된 조건을 거친다. 생성물인, 화합물 6은 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
에스테르 제조 전략 #4 (아실화)
Figure pct00082
반응식 4 단계 1에서, 폴리-올 화합물인, 화합물 1 (이때 R은 비-방향족 환형 또는 비환형 모이어티를 나타내고 n은 1 내지 15의 정수를 나타냄)을 임의로 촉매의 존재 하에 적정한 용매에서, 아실화제인, 화합물 2로 처리한다. 적합한 촉매는 피리딘, 디메틸아미노피리딘, 트리메틸아민 등을 포함한다. 촉매는 화합물 2에 대해, 0.01 내지 1.1 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다. 적합한 용매는 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 톨루엔, 이들의 조합 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다. 적절한 아실화제는 대칭이든지 아니든지 간에 아실 염화물, 아실 불화물, 아실 브롬화물, 카르복실산 무수물을 포함한다. 적절한 아실화제는 또한 EDC 또는 EEDQ 등과 같은 활성화 시약과 카르복실산의 이전 반응에 의해 제 위치에서(in situ) 생성될 수 있다. 아실화제는 화합물 1에 대해, 0.5 내지 15 당량의 양으로 사용될 수 있다. 생성물인, 화합물 3은 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
에스테르 제조 전략 #5 (바이엘-빌리거 산화(Baeyer-Villiger Oxidation))
반응식 5
Figure pct00083
반응식 5 단계 1에서, 케톤 화합물인, 화합물 1 (이때 R과 R1은 비-방향족 환형 또는 비환형 모이어티를 나타냄)를 임의로 촉매의 존재 하에 적정한 용매에서, 예컨대 메타-클로로벤조산, 과포름산, 과아세트산, 과산화수소, 삼차-부틸 하이드로퍼옥시드 등으로 처리한다. 적절한 용매는 메틸렌 클로라이드, 디에틸 에테르, 이들의 조합 등을 포함한다. 적합한 촉매는 BF3, 카르복실산 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다. 생성물인, 화합물 2는 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
반응식 5에서 화합물 1의 R 및 R1 기는 반응을 거칠 수 있는 추가의 케톤 작용기를 임의로 포함할 수 있다. 또한, 화합물 1의 R 및 R1 기는 고리를 형성할 수 있다.
에스테르 제조 전략 #6 (미츠노부 반응(Mitsunobu Reaction))
반응식 6
Figure pct00084
반응식 6 단계 1에서, 알코올 화합물인, 화합물 1 (이때 R은 비-방향족 환형 또는 비환형 모이어티를 나타냄)과, 카르복실산인, 화합물 2 (이때 R1은 임의로 1개 이상의 보호된 하이드록실기 또는 옥소로 치환된 알카노일 기를 나타냄)의 혼합물을 적정 용매에서 트리페닐포스핀 및 디아조 화합물, 예컨대 디에티라술포스디카르복실레이트(DEAD) 등으로 처리한다. 적절한 용매는 메틸렌 클로라이드, THF, 아세토니트릴, 톨루엔, 디에틸 에테르, 이들의 조합 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다. 생성물인, 화합물 3은 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
화합물 3이 1개 이상의 보호된 알코올 기로 임의로 치환되는 경우, 탈보호는 상기 반응식 2에 예시된 방법에 의해 달성된다.
에스테르 제조 전략 #7 (친핵성 알킬화(Nucleophilic Alkylation))
반응식 7
Figure pct00085
반응식 7 단계 1에서, 클로로포르메이트 화합물인, 화합물 1 (이때 R은 방향족 모이어티 또는 비-방향족 환형 또는 비환형 모이어티를 나타냄)을 적정 용매에서, 유기금속 화합물인, 화합물 2 (이때 R1은 1개 이상의 보호된 하이드록실기로 임의로 치환된 알킬기를 나타내고, X는 임의로 염화물과 같은 1개 이상의 반대이온에 의해 배위되는 Cu, Zn, Mg과 같은 금속을 나타냄)으로 처리한다. 적합한 용매는 메틸렌 클로라이드, THF, 아세토니트릴, 톨루엔, 디에틸 에테르, 이들의 조합 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다.
생성물인, 화합물 3은 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
화합물 1은 해당 기술분야의 숙련자에게 익숙한 표준 방법에 의해 상응하는 알코올 또는 폴리올 화합물로부터 제조될 수 있다.
화합물 2가 1개 이상의 보호된 알코올 기로 임의로 치환되는 경우, 탈보호는 상기 반응식 2에 예시된 방법에 의해 달성된다.
본 기술분야에 공지되고 하기 실시예에 예시된 방법에 의한 초기 생성물에 대한 추가 변형이 본 발명의 추가 화합물을 제조하기 위해 사용될 수 있다.
에스테르 제조 전략 #8 (아실화)
반응식 8
Figure pct00086
반응식 8 단계 1에서, 아실화될 하이드록실기를 함유하는 아실 화합물인 화합물 1을, 임의로 촉매의 존재 하에, 적정 용매에서, 벤질 브로마이드 등의 보호 시약으로 처리하여 화합물 2 반응식 8을 제공한다. 화합물 2는 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
반응식 8 단계 2에서, 화합물 2를, 임의로 촉매의 존재 하에 적정 용매에서, 아실화제로 처리한다. 적합한 촉매는 피리딘, 디메틸아미노피리딘, 트리메틸아민 등을 포함한다. 촉매는 화합물 2에 대해, 0.01 내지 1.1 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다. 적합한 용매는 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 톨루엔, 이들의 조합 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다. 적절한 아실화제는 대칭이든지 아니든지 간에 아실 염화물, 아실 불화물, 아실 브롬화물, 카르복실산 무수물을 포함한다. 적절한 아실화제는 또한 EDC 또는 EEDQ 등과 같은 활성화 시약과 카르복실산의 반응에 의해 제 위치에서(in situ) 생성될 수 있다. 아실화제는 화합물 1에 대해 0.5 내지 15 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다.
반응식 8 단계 3에서, 화합물 3은 보호기, PG를 절단하는 조건을 거친다. 벤질 보호기의 경우, 화합물 3의 보호기를 수소화에 의해 제거해서 화합물 4를 얻는다. 수소화에 적합한 촉매는 10% 팔라듐-온-챠콜 및 팔라듐 아세테이트 등을 포함한다. 수소화에 적합한 용매는 DMF, 에탄올, 메탄올, 에틸 아세테이트 등을 포함한다. 생성물인, 화합물 4는 당 분야의 숙련자에게 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
반응식 8 단계 4에서, 화합물 4를 티오닐 클로라이드, 인 옥시클로라이드, EDC 또는 EEDQ 등과 같은 활성화 시약으로 처리하여 활성화된 아실 화합물 5를 생성한다.
반응식 8 단계 5에서, 폴리-하이드록실 화합물인, 화합물 6 (이때 R은 방향족 또는 지방족 환형 또는 비환형 코어를 나타냄)을 임의로 촉매의 존재 하에 적정 용매에서, 활성화된 아실 화합물 5로 처리한다. 적절한 촉매는 화합물 5를 생성하기 위해 피리딘, 디메틸아미노피리딘, 트리메틸아민 등을 포함한다. 촉매는 화합물 3에 대해, 0.01 내지 1.1 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다. 적합한 용매는 메틸렌 클로라이드, 에틸 아세테이트, 디에틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 1,2-디메톡시에탄, 톨루엔, 이들의 조합 등을 포함한다. 반응 온도는 -10℃에서 사용된 용매의 비등점까지 범위이며; 반응 완료 시간은 1에서 96시간 범위이다. 활성화된 아실 화합물 5은 화합물 6에 대해 0.5 내지 15 당량 범위의 양으로 사용될 수 있다.
생성물인, 화합물 7은 당업계에 공지된 방법에 의해 정제될 수 있다.
하기 예시들은 본 발명을 설명하기 위한 것이다. 이들은 어떤 식으로든 본 발명을 한정하려는 것은 아니다.
예
예 1. 예시적인 아실화된 활성제 제조
Figure pct00087
화합물 1: [4-[(E)-2-[3,5-디(부타노일옥시)페닐]비닐]페닐] 부타노에이트
아세토니트릴 (50 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (3 g, 13.14 mmol) 및 K2CO3 (4.54g, 32.86mmol)의 용액에 부타노일 클로라이드 (5.60 g, 52.58 mmol, 5.49 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 10시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=20/1 내지 10:1)로 정제시킨 잔류물을 수득하였다. 화합물 1을 백색 고체로 수득하였다. LC/MS: (M+NH4 +): 456.2
Figure pct00088
화합물 2: [4-[(E)-2-[3,5-비스(4-페닐부타노일옥시)페닐]비닐]페닐] 4-페닐부타노에이트
단계 1
디클로로메탄 (50 mL) 중 4-페닐부탄산 (5 g, 30.45 mmol)의 용액에 0℃에서 SOCl2 (0.87 g, 91.35 mmol, 6.63 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 10시간 동안 교반한다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 톨루엔(15 mL)에 용해된 잔류물을 수득하였다. 용액을 감압 하에 농축시켜 4-페닐부타노일 클로라이드 (4.32 g, 원액)를 황색 오일로서 수득하였으며 다음 단계에 직접 사용했다.
단계 2
아세토니트릴 (30 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.278 g, 1.22 mmol) 및 K2CO3 (420.89 mg, 3.05 mmol)의 용액에 4-페닐부타노일 클로라이드 (1.00 g, 5.48 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 10 시간 동안 교반하고, 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 다른 배치와 합치고 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=20/1 내지 8:1)을 사용하여 백색 고체로 화합물 2 (367mg)를 제공하였다. LC/MS (M+NH4 +): 684.3
Figure pct00089
화합물 3: [(2R,3R)-5,7-디(부타노일옥시)-2-[3,4,5-트리(부타노일옥시)페닐]크로만-3-일] 3,4,5-트리(부타노일옥시)벤조에이트
부티릴 클로라이드 (6.03 mL)를 -5 ℃ 내지 5 ℃에서 2 시간에 걸쳐 디클로로메탄 (20 mL) 중 에피갈로카테킨 갈레이트 (2.0 g) 및 피리딘 (6.28 mL)의 교반된 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서 반응 혼합물을 디클로로메탄 (100 mL)으로 희석하고, 물 (50 mL), 2N HCl (50 mL), 포화 중탄산 나트륨 (50 mL) 및 염수로 순차적으로 세척하였다. 유기층을 진공 중에 증발시키고, 생성된 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (30% 에틸 아세테이트 / 헵탄)에 의해 정제하여 화합물 3 (800 mg, 18%)을 수득하였다. 1HNMR (CDCl3): δ 7.6 (s, 2H), 7.22 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 6.6 (s, 1H), 5.62 (t, 1H), 5.18 (s, 1H), 2.98-3.02 (m, 2H), 2.4-2.6 (m, 16H), 1.6-1.8 (m, 16H), 0.92-1.02 (m, 24H).
Figure pct00090
화합물 4: [(2R,3R)-5,7-디아세톡시-2-(3,4,5-트리아세톡시페닐)크로만-3-일] 3,4,5-트리아세톡시벤조에이트
피리딘 (20mL) 중 에피갈로카테킨 갈레이트 (2.0g)에 0 ℃에서 아세트산 무수물 (6.1mL)을 적가하였으며, 및 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 고체를 여과하고, 수성 1N HCl(10mL) 및 헵탄(20mL)으로 세척하였다. 그런 다음 고체를 디클로로메탄에 용해시키고, 휘발성 물질의 증발시 화합물 4 (1.0 g, 28%)를 공급하기 위해 이동상으로서 디클로로메탄 함유 실리카 겔 필터 칼럼을 통과시켰다. 1HNMR (CDCl3): δ 7.6 (s, 2H), 7.2 (s, 2H), 6.75 (s, 1H), 6.6 (s, 1H), 5.6 (t, 1H), 5.19 (s, 1H), 2.98-3.02 (m, 2H), 2.18-2.28 (m, 24H).
Figure pct00091
화합물 5: [(2R,3R)-5,7-비스(4-페닐부타노일옥시)-2-[3,4,5-트리스(4-페닐부타노일옥시)페닐]크로만-3-일] 3,4,5-트리스(4-페닐부타노일옥시)벤조에이트
단계 1:
디클로로메탄 (50 mL) 중 4-페닐부탄산 (3 g, 18.27 mmol) 및 SOCl2 (10.87 g, 91.35 mmol, 6.63 mL) 용액에 DMF 한 방울을 첨가하고, 그런 다음 혼합물을 20℃에서 5시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하고 혼합물에 톨루엔(20 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 진공 중에 농축시켜 4-페닐부타노일 클로라이드 (3.5g, 원액)를 수득한다.
단계 2:
아세토니트릴 (100 mL) 중 [(2R,3R)-5,7-디하이드록시-2-(3,4,5-트리하이드록시페닐)크로만-3-일] 3,4,5-트리하이드록시벤조에이트 (1 g, 2.18 mmol) 및 K2CO3 (4.52 g, 32.72 mmol)의 용액에 4-페닐부타노일 클로라이드 (7.97 g, 43.63 mmol)의 용액을 첨가한 후, 혼합물을 20℃에서 10시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과물을 진공 중에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트=20:1-1:1)에 의해 정제하여 화합물 5 (2.2 g, 1.28 mmol, 58.7% 수율)를 백색 고체로 수득하였다. LC/MS(M+H3O+): 1645.1
Figure pct00092
화합물 6: [(2R,3R)-5,7-비스(3-하이드록시부타노일옥시)-2-[3,4,5-트리스(3-하이드록시부타노일옥시)페닐]크로만-3-일] 3,4,5-트리스(3-하이드록시부타노일옥시)벤조에이트
Figure pct00093
화합물 7: [4-[(E)-2-[3,5-비스[[(3R)-3-하이드록시부타노일]옥시]페닐]비닐]페닐] (3R)-3-하이드록시부타노에이트
Figure pct00094
화합물 8: [(2R,3R)-5,7-비스(3-옥소부타노일옥시)-2-[3,4,5-트리스(3-옥소부타노일옥시)페닐]크로만-3-일] 3,4,5-트리스(3-옥소부타노일옥시)벤조에이트
Figure pct00095
화합물 9: [4-[(E)-2-[3,5-디(프로파노일옥시)페닐]비닐]페닐] 프로파노에이트
Figure pct00096
화합물 10: [4-[(E)-2-[3,5-비스(3-옥소부타노일옥시)페닐]비닐]페닐] 3-옥소부타노에이트
Figure pct00097
화합물 11: [4-[(E)-2-[3,5-디(옥타노일옥시)페닐]비닐]페닐] 옥타노에이트
ACN (30 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (1 g) 및 K2CO3 (1.8g)의 혼합물에 25℃에서 옥타노일 클로라이드 (2.14 g)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 10시간 동안 교반하였다. 추가의 옥타노일 클로라이드 (1.42g)를 첨가하고 혼합물을 25℃에서 10시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 역상 prep-HPLC (C18, 물(0.05%HCl)-ACN 구배)로 정제하여 화합물 11 (0.53 g, 20%)을 무색 오일로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3). 7.481 (m, 2H), 7.107 - 6.956 (m, 6H), 6.809, (m, 1H), 2.564 (m, 6H), 1.781 (m, 6H), 1.383 (m, 24H), 0.894 (m, 9H).
Figure pct00098
화합물 12: [4-[(E)-2-[3,5-디(데카노일옥시)페닐]비닐]페닐] 데카노에이트
ACN (50mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (1 g) 및 K2CO3 (3.0g)의 용액에 데카노일 클로라이드 (5.85g)를 적가하였다. 그런 다음 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 농축시키고 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르 / EtOAc, 10:1) 다음, prep-TLC (석유 에테르 / EtOAc, 5:1)에 의해 정제하여 화합물 12 (0.062 g, 2%)을 황색 오일로 수득하였다. LCMS: 691.3 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3). δ 7.479 (m, 2H), 7.110 - 6.954 (m, 6H), 6.802, (m, 1H), 2.562 (m, 6H), 1.759 (m, 6H), 1.422 - 1.322 (m, 36H), 0.894 (m, 9H).
Figure pct00099
화합물 13: [4-[(E)-2-[3,5-비스[[(3R)-3-부타노일옥시부타노일]옥시]페닐]비닐]페닐] (3R)-3-부타노일옥시-부타노에이트
단계 1: 벤질 (3R)-3-하이드록시부타노에이트
DMF (500 mL) 중 나트륨 (3R)-3-하이드록시부타노에이트 (50 g)의 용액에 25℃에서 브로모메틸벤젠 (67.8 g)을 적가하였다. 그런 다음 혼합물을 60 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 물 (800 mL)을 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 EtOAc (550 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수 (230 mL)로 세척하고 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 40/1)에 의해 정제하여 벤질 (3R)-3-하이드록시부타노에이트 (57 g, 66.6%)를 다음 단계에 직접 사용한 무색 오일로서 수득하였다.
단계 2: 벤질 (3R)-3-부타노일옥시부타노에이트
DCM (570 mL) 중 피리딘 (55.7 g)의 용액에 벤질 (3R)-3-하이드록시부타노에이트 (57 g) 및 DMAP (1.15 g)를 25 ℃에서 첨가하였다. 부타노일 클로라이드 (43.8g)를 N2 하에 혼합물에 적가한 다음 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (300 mL)로 희석시키고, 유기층을 H2O (550 mL), 염수 (270 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 100:1 내지 70:1)에 의해 정제하여 벤질 (3R)-3-부타노일옥시부타노에이트 (54 g, 62.6%)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: 265.1 (M+H+)
단계 3: (3R)-3-부타노일옥시부탄산
EtOAc (1300 mL) 중 Pd/C 10% (9 g)의 현탁액에 25℃에서 벤질 (3R)-3-부타노일옥시부타노에이트 (54 g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 H2 (15 Psi) 하에 25 ℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 농축시켜 (3R)-3-부타노일옥시부탄산 (30 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
단계 4: [4-[(E)-2-[3,5-비스[[(3R)-3-부타노일옥시부타노일]옥시]페닐]비닐]페닐] (3R)-3-부타노일옥시-부타노에이트
DCM (7.5 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.25 g) 및 (3R)-3-부타노일옥시부탄산 (0.76 g)의 용액에 DCM (5 mL) 중 DCC (0.29 g)를 첨가하였다. DMAP (0.040 g)을 25℃에서 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 석유 에테르 (10 mL)를 첨가하고 혼합물을 15분 동안 교반한 다음, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (5 mL)에 용해시키고, 0.5 N HCl (18 mL) 및 염수 (8 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 prep-HPLC (C18; 물 (0.05%HCl)-ACN 구배)에 의해 정제하여 화합물 13 (0.060 g, 7%)을 무색 오일로 수득하였다. LCMS: 697.4 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3). δ 7.494 (m,2H), 7.12 - 7.042 (m, 6H), 6.824 (m, 1H), 5.428, (m, 3 H), 2.909 - 2.785 (m, 6H), 2.303 (m, 6H), 1.696 - 1.658 (m, 6H), 1.527 (d, 9H), 0.956 (t, 9H).
Figure pct00100
화합물 14: [2-아세톡시-4-(3,5,7-트리아세톡시-4-옥소-크로멘-2-일)페닐] 아세테이트
THF (40 mL) 중 2-(3,4-디히드록시페닐)-3,5,7-트리히드록시-크로멘-4-온 (1 g) 및 아세트산 무수물 (2.36 g)의 혼합물에 25℃에서 K2CO3 (3.2 g)을 첨가한 다음, 그 혼합물을 55℃에서 12시간 동안 교반하였다. 추가의 아세트산 무수물을 첨가하고 (3 당량) 혼합하고 혼합물을 또 다른 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 중에 농축시키고 역상 prep-HPLC (C18; 물 (0.05%HCl)-ACN 구배)로 정제하여 화합물 14 (0.837 g, 49%)을 백색 고체로 수득하였다. LCMS: 513.2 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3). δ 7.742 - 7.703 (m, 2H), 7.373 - 7.346 (m, 2H), 6.888 (s, 1H), 2.443, (s, 3H), 2.356 (s, 6H), 2.350(s, 6H).
Figure pct00101
화합물 15: [2-부타노일옥시-4-[3,5,7-트리(부타노일옥시)-4-옥소-크로멘-2-일]페닐] 부타노에이트
THF (40 mL) 중 2-(3,4-디하이드록시페닐)-3,5,7-트리히드록시-크로멘-4-온 (1 g) 및 부타노일 클로라이드 (3.53 g)의 혼합물에 25℃에서 TEA (3.35 g)를 첨가한 후, 혼합물을 55 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 중에 농축시키고 역상 prep-HPLC (C18, 물(0.05%HCl)-ACN 구배)로 정제하여 화합물 15 (1.13 g, 52% 수율)을 무색 고체로서 수득하였다. LCMS: 653.3 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3). δ 7.666 - 7.608 (m, 2H), 7.292 - 7.210 (m, 2H), 6.880 (s, 1H), 2.542 (t, 2H), 2.535 - 2.484 (m, 8H), 1.753 (m, 10H), 1.020 - 0.997 (m, 12H), 0.949 (t, 3H).
Figure pct00102
화합물 16: [2-옥타노일옥시-4-[3,5,7-트리(옥타노일옥시)-4-옥소-크로멘-2-일] 페닐] 옥타노에이트
THF (20 mL) 중 2-(3,4-디하이드록시페닐)-3,5,7-트리히드록시-크로멘-4-온 (0.32 g) 및 옥타노일 클로라이드 (1.72 g)의 혼합물에 25℃에서 TEA (1.07 g)를 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 55 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 용매의 일부를 진공 중에서 제거하고 침전물을 여과로 수집하여 화합물 16 (0.20 g, 20%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3). δ 7.709 - 7.655 (m, 2H), 7.329 - 7.301 (m, 2H), 6.837 (s, 1H), 2.723 (t, 2H), 2.612 - 2.539 (m, 8H), 1.751 (m, 10H), 1.412 - 1.309 (m, 40H), 0.896 (m, 15H).
Figure pct00103
화합물 17: [2-데카노일옥시-4-[3,5,7-트리스(데카노일옥시)-4-옥소-크로멘-2-일] 페닐] 데카노에이트
THF (50 mL) 중 2-(3,4-디하이드록시페닐)-3,5,7-트리하이드록시-크로멘-4-온 (1 g) 및 데카노일 클로라이드 (6.31 g)의 혼합물에 25℃에서 TEA (3.35 g)를 첨가한 후, 혼합물을 55℃에서 12시간 동안 교반하였다. 용매의 일부를 진공 중에서 제거하고 침전물을 여과로 수집하여 화합물 17 (2.47 g, 69%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3). δ 7.772 - 7.669 (m, 2H), 7.343 - 7.321 (m, 2H), 6.685 (s, 1H), 2.736 (t, 2H), 2.610 - 2.551 (m, 8H), 1.762 (m, 10H), 1.557 - 1.295 (m, 50H), 0.899 (m, 15H).
Figure pct00104
화합물 18: [4-[(E)-2-(3,5-디아세톡시페닐)비닐]페닐] 아세테이트
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6). δ 7.635 (d, 2H), 7.322 - 6.915 (m, 6H), 6.910 (s, 1H), 3.327 (s, 3H), 2.291 (s, 3H), 2.275 (s, 3H). LCMS 355.0 (MH+)
Figure pct00105
화합물 19: [4-[(E)-2-[3,5-비스[[(2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(부타노일옥시)헥사노일]옥시]페닐]비닐]페닐] (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(부타노일옥시)헥사노에이트
THF (5 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.050 g), DCC (0.180 g) 및 DMAP (0.008 g)의 용액에, (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(부타노일옥시)헥산산 (0.479 g)을 첨가하고, 혼합물을 40 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 화합물 19 (0.080 g, 16% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3). δ 7.529 - 7.481 (m, 2H), 7.177 - 7.089 (m, 5H), 6.669 (m, 1H), 6.825 (m, 1H), 5.781 (m, 2H), 5.495 - 5.483 (m , 2H), 5.341- 5.305 (m, 2H), 5.289 - 5.184 (m, 2H), 5.053 (d, 1H), 4.728 (dd, 1H), 4.375 (m, 2H), 4.156 - 3.989 (m, 4H), 2.474 - 2.221 (m, 30H), 1.597 - 1.566 (m, 30H), 0.923 - 0.847 (m, 45H)
Figure pct00106
화합물 20: [4-(3,5,7-트리아세톡시-4-옥소-크로멘-2-일)페닐] 아세테이트
피리딘 (15 mL) 중 3,5,7-트리하이드록시-2-(4-하이드록시페닐)크로멘-4-온 (2 g)의 혼합물에, 아세틸 아세테이트 (30 g)를 첨가하고, 그런 다음 혼합물을 N2 분위기 하에 12시간 동안 15℃에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 격렬하게 교반하면서 분쇄된 얼음 내에 부었다. 고체 침전물을 여과에 의해 수집하고 차가운 물로 세척한 후 메탄올로 세척하였다. 화합물 20 (2.1 g, 65% 수율)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 455.0 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.858 (d, 2H), 7.339 (d, 1H), 7.278 7.257 (m, 2H), 6.883 (d, 1H), 2.447 (s, 3H), 2.357 (s, 6H), 2.333 (s, 3H)
Figure pct00107
화합물 21: (S)-2-(4-아세톡시페닐)-4-옥소크로만-5,7-디일 디아세테이트
5,7-디하이드록시-2-(4-하이드록시페닐)크로만-4-온 (0.500 g)을 피리딘 (10 mL)으로 용해시키고 나서 아세틸 아세테이트 (0.844 g)를 혼합 반응에 첨가하였다. 반응 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)로 정제하여 화합물 21 (0.300 g, 39% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. LCMS: 416.1 (M+H2O+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.468 (d, 2H), 7.166 (d, 2H), 6.793 (d, 1H), 6.551 (d, 1H), 5.497 (dd, 1H), 3.039 (dd, 1H), 2.783 (dd, 1H), 2.393 (s, 3H), 2.326 (s, 3H), 2.308 (s, 3H).
Figure pct00108
화합물 22: (S)-2-(4-(부티릴옥시)페닐)-4-옥소크로만-5,7-디일 디부티레이트
피리딘 (10 mL) 중 5,7-디하이드록시-2-(4-하이드록시페닐)크로만-4-온 (0.500 g)의 용액에, 부타노일 부타노에이트 (1.02 g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)로 정제하여 화합물 22 (0.325 g, 34% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. LCMS: 500.2 (M+H2O+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.463 (d, 2H), 7.158 (d, 2H), 6.786 (d, 1H), 6.536 (d, 1H), 5.483 (m, 1H), 3.031 (m, 1H), 2.662 (m, 1H), 2.586 - 2.524 (m, 6H), 1.837 - 1.785 (m, 6H), 1.089 - 1.021 (m, 9H)
Figure pct00109
화합물 23: [3,5-디아세톡시-4-옥소-2-(3,4,5-트리아세톡시페닐)크로멘-7-일] 아세테이트
피리딘 (10 mL) 중 3,5,7-트리하이드록시-2-(3,4,5-트리하이드록시페닐)크로멘-4-온 (1 g)의 용액에, 아세틸 아세테이트 (15.26 g)을 첨가한 후, 혼합물을 15℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고 혼합물을 얼음 물 속에 교반하면서 부었다. 고체를 여과하고, 물로 세척하고, 진공에서 건조시켜 화합물 23 (1.1 g, 61% 수율)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS 571.1 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.260 (s, 2H), 7.349 (d, 1H), 6.886 (d, 1H), 2.441 (s, 3H), 2.372 (s, 3H), 2.353 (s, 3H), 2.341 (s, 3H), 2.333 (s, 6H)
Figure pct00110
화합물 24: [(3R)-3-[4-[(E)-2-[3,5-비스[[(1R)-3-아세톡시-1-메틸-프로폭시]카르보닐옥시]페닐]비닐]페녹시]카르보닐옥시부틸] 아세테이트
단계 1: 피리딘 (20 mL) 중 (3R)-부탄-1,3-디올 (2.4 g)의 용액에 Ac2O (2.17 g)를 첨가하고 혼합물을 15 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)로 정제하여 [(3R)-3-하이드록시부틸] 아세테이트 (1.4 g, 35.8% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
단계 2: THF (5 mL) 중 트리포스겐 (0.269 g)의 용액에 THF (5 mL) 중 [(3R)-3-하이드록시부틸] 아세테이트 (0.300 g) 및 TEA (0.230 g)의 용액을 0 ℃에서 첨가하고, 혼합물을 15 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. ~0.23 M의 [(3R)-3-클로로카르보닐옥시부틸] 아세테이트 용액 (15 mL)을 수득하였다. 혼합물 반응을 바로 다음 단계에서 사용하였다.
단계 3: THF (3 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.090 g) 및 TEA (0.218 g)의 용액에 THF 중 [(3R)-3-클로로카르보닐옥시부틸] 아세테이트 (0.23 M, 10 mL)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 4:1)로 정제하여 화합물 24 (0.085g, 28.8% 수율을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: 725.1 (M+Na+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.520 (d, 2H), 7.244 - 7.192 (m, 4H), 7.114 (d, 1H), 7.036 - 6.979 (m, 2H), 5.019 (m, 3H), 4.226 (m, 6H), 2.099 - 1.995 (m, 6H), 2.055 (s, 6H), 1.442 - 1.422 (m, 9H).
Figure pct00111
화합물 25: [(1R)-3-[4-[(E)-2-[3,5-비스[[(3R)-3-아세톡시부톡시]카르보닐옥시]페닐]비닐]페녹시]카르보닐옥시-1-메틸-프로필] 아세테이트
단계 1: THF (100 mL) 중 NaH (2.35 g, 60%)의 용액에 0 ℃에서 (3R)-3-[삼차-부틸 (디메틸)실릴]옥시부탄-1-올 (10 g)을 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 벤질 브로마이드 (10.04 g)를 첨가하고 혼합물을 15 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르)로 정제하여 [(1R)-3-벤질옥시-1-메틸-프로폭시]-삼차-부틸-디메틸-실란 (11 g, 55% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다.
단계 2: THF (100 mL) 중 [(1R)-3-벤질옥시-1-메틸-프로폭시]-삼차-부틸-디메틸-실란 (10 g)의 용액에 15 ℃에서 피리딘 하이드로불화물 (8.41 g)을 첨가하였다. 혼합물을 50 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다른 배치와 합치고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 H2O (50 mL)로 희석하고 에틸 아세테이트 (50 mL)로 4회 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)로 정제하여 (2R)-4-벤질옥시부탄-2-올 (5.54 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
단계 3: 피리딘 (50 mL) 중 (2R)-4-벤질옥시부탄-2-올 (5.54 g)의 용액에 15℃에서 Ac2O (4.71 g)를 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)로 정제하여 [(1R)-3-벤질옥시-1-메틸-프로필] 아세테이트 (4.7g, 57% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다.
단계 4: THF (20 mL) 중 [(1R)-3-벤질옥시-1-메틸-프로필] 아세테이트 (2 g)의 용액에 10% Pd/C (0.027 g)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 16시간 동안 H2 (30 psi) 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)로 정제하여 [(1R)-3-하이드록시-1-메틸-프로필] 아세테이트 (1.07 g, 65% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다.
단계 5: THF (5 mL) 중 [(1R)-3-하이드록시-1-메틸-프로필] 아세테이트 (0.300 g)의 용액에 0 ℃에서 THF (5 mL) 중 트리포스겐 (0.337 g) 및 TEA (0.230 g)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 여과하고 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 6: THF (3 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.080 g) 및 TEA (0.194 g)의 용액에 THF 중 [(1R)-3-클로로카르보닐옥시-1-메틸-프로필] 아세테이트 (0.2 M, 10 mL)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 4/1)로 정제하여 화합물 25 (0.056 g, 21% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: 703.1 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.513 (d, 2H), 7.232 - 7.181 (m, 4H), 7.154 (d, 1H), 7.129 - 7.002 (m, 2H), 5.106 (m, 3H), 4.340 (m, 6H), 2.072 (s, 9H), 2.078 - 1.995 (m, 6H), 1.323 - 1.282 (m, 9H)
Figure pct00112
화합물 26: [4-[4-옥소-5,7-디(프로파노일옥시)크로멘-2-일]-2-프로파노일옥시-페닐] 프로파노에이트
프로피온산 무수물 (1.33 mL, 10.4 mmol)을, N2 분위기 하에 0℃에서 무수 피리딘 (2.5 mL, 31.2 mmol) 중 루테올린 (0.3 g, 1.04 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 될 수 있게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 30 mL 에틸 아세테이트로 희석하고 H2O (30 mL), 1M HCl (30 mL), H2O(30 mL), 및 포화 NaHCO3 (30 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 26 (0.073 g, 15% 수율)을 미색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 12.75 (s, 1H), 8.07 (m, 2H), 7.5 (m, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.12 (d, 1H), 6.66 (d, 1H), 2.59-2.66 (m, 6H), 1.11-1.17 (m, 9H)
Figure pct00113
화합물 27: [4-옥소-3,5-디(프로파노일옥시)-2-[3,4,5-트리(프로파노일옥시)페닐]크로멘-7-일] 프로파노에이트
프로피온산 무수물 (2 mL, 15.6 mmol)을 N2 분위기 하에 0 ℃에서 무수 피리딘 (2.78 mL, 47.1 mmol) 중 미리세틴 (0.5 g, 1.56 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 될 수 있게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 30 mL 에틸 아세테이트로 희석하고 H2O (30 mL), 1M HCl (30 mL), H2O(30 mL), 및 포화 NaHCO3 (30 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 27 (0.31 g, 30% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.77 (s, 2H), 7.64 (d, 1H), 7.16 (d, 1H), 2.60-2.70 (m, 12H), 1.07-1.17 (m, 18H)
Figure pct00114
화합물 28: [4-[4-옥소-3,5,7-트리(프로파노일옥시)크로멘-2-일]-2-프로파노일옥시-페닐] 프로파노에이트
프로피온산 무수물 (2.1 mL, 16.5 mmol)을, N2 분위기 하에 0 ℃에서 무수 피리딘 (3.98 mL, 49.5 mmol) 중 케르세틴 (0.5 g, 1.65 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 될 수 있게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 30 mL 에틸 아세테이트로 희석하고 H2O (30 mL), 1M HCl (30 mL), H2O(30 mL), 및 포화 NaHCO3 (30 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 28 (0.1 g, 10% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.85 (m, 2 H), 7.66 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.18 (d, 1H), 2.62-2.89 (m, 10H), 1.09-1.19 (m, 20H)
Figure pct00115
화합물 29: [(2R,3R)-5,7-디(프로파노일옥시)-2-[3,4,5-트리(프로파노일옥시)페닐]크로만-3-일] 3,4,5-트리(프로파노일옥시)벤조에이트
프로피온산 무수물 (2.78 mL, 21.8 mmol)을, N2 분위기 하에 0 ℃에서 무수 피리딘 (2.61 mL, 32.6 mmol) 중 에피갈로카테킨 갈레이트 (0.5 g, 1.09 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 될 수 있게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 30 mL 에틸 아세테이트로 희석하고 H2O (30 mL), 1M HCl (30 mL), H2O (30 mL), 및 포화 NaHCO3 (30 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 29 (0.695 g, 70% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.54 (s, 2H), 7.38 (s, 2H), 6.79 (m, 1H), 6.66 (m, 1H), 5.66 (m, 1H), 5.54 (s, 1H), 3.13-3.17 (m, 1 H), 2.96 (d, 1H), 2.5-2.65 (m, 16H), 1.0-1.2 (m, 24 H)
Figure pct00116
화합물 30: [4-[(E)-2-[3,5-디(프로파노일옥시)페닐]비닐]페닐] 프로파노에이트
프로피온산 무수물 (0.56 mL, 4.4 mmol)을 N2 분위기 하에 0 ℃에서 무수 피리딘 (1 mL, 12.4 mmol) 중 레스베라트롤 (0.1 g, 0.44 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 될 수 있게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 30 mL 에틸 아세테이트로 희석하고 H2O (30 mL), 1M HCl (30 mL), H2O (30 mL), 및 포화 NaHCO3 (30 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-60% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 30 (0.075 g, 43% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.65 (d, 2H), 7.2-7.3 (m, 4H), 7.13 (d, 2H), 6.92 (t, 1H), 2.6 (m, 6H), 1.1-1.3 (m, 9H)
Figure pct00117
화합물 31: 5-아미노-2-부타노일옥시-벤조산 하이드로클로라이드
단계 1:
메탄올 (50 mL) 중 5-아미노-2-하이드록시-벤조산 (3 g, 19.59 mmol)의 혼합물에 N2 하에 15 ℃에서 Boc2O (4.28 g, 19.59 mmol, 4.50 mL)를 한 부분씩 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 5시간 동안 교반하였다. 잔류물을 물(100 mL)에 부었다. 수성 상을 EtOAc (100 mL)로 추출하고, 유기상을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. 5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)-2-하이드록시-벤조산 (4 g, 원액)을 얻었다.
단계 2:
THF (30 mL) 중 5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)-2-하이드록시-벤조산 (4 g, 15.79 mmol) 및 트리에틸아민 (119.87 mg, 1.18 mmol, 164.88 μL)의 용액에 부타노일 클로라이드 (126.22 mg, 1.18 mmol, 123.74 μL)를 0℃에서 적가하면서 첨가한 반면, 온도는 0℃ 아래로 유지하였다. 반응 혼합물을 15 ℃로 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 얼음을 서서히 첨가하여 반응물을 켄칭하고, 그런 다음 혼합물을 EtOAc (100 mL)로 추출하였다. 유기상을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (20 mL)로 재결정화에 의해 정제하여 순수 2-부타노일옥시-5- (삼차-부톡시카르보닐아미노)벤조산 (1.5 g, 4.64 mmol, 29% 수율)을 백색 고체로 수득하였다.
단계 3:
HCl-EtOAc (20 mL, 4 M) 중 2-부타노일옥시-5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)벤조산 (1.5 g, 4.64 mmol)의 용액을 15 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하여 생성물 5-아미노-2-부타노일옥시-벤조산 HCl 염을 미색 고체 (0.74 g, 2.76 mmol, 59.58% 수율)로 수득하였다. LC/MS: (M+H+) 224.1
Figure pct00118
화합물 32: 2-부타노일옥시-5-[(E)-(4-부타노일옥시-3-카르복시-페닐)아조]벤조산
DMF (100 mL) 중 디소듐 (E)-4,4'-(디아젠-1,2-디일)비스(2-카르복시페놀레이트) (2 g, 5.78 mmol), 부타노일 클로라이드 (2.46 g, 23.11 mmol, 2.41 mL), 및 NaOH (462 mg, 11.55 mmol)의 용액을 50 ℃에서 0.5 시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 물 (150 mL)을 여과물에 첨가하고, 혼합물을 다시 여과하였다. 생성된 고형분 필터 케이크를 진공 중 건조시켰다. 2-부타노일옥시-5-[(E)-(4-부타노일옥시-3-카르복시-페닐)아조]벤조산 (0.8 g)을 갈색 고체로 수득하였다. LC/MS: (M+H+): 443.1
Figure pct00119
화합물 33: 5-아미노-2-[(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산
이 화합물을 화합물 34의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00120
화합물 34: 5-아미노-2-[(2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산
단계 1
5-아미노 살리실산(10.0g)을 디옥산(100mL), 물(100mL), 및 NaOH(2.60g)의 혼합물에 용해시키고, 생성된 용액을 빙욕에서 냉각시켰다. 디-삼차-부틸 디카보네이트 (Boc 무수물) (15.60g)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고 1.0시간 동안 교반하였다. 용액을 60 mL로 농축시키고, 에틸 아세테이트 (100 mL)로 희석시키고, 생성된 혼합물을 빙욕에서 냉각시켰다. 혼합물을 수성 KHSO4에 의해 pH 2-3로 산성화시켰다. 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 유기상을 물, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)-2-하이드록시-벤조산 (7.0 g, 42%)을 수득하였다.
단계 2
5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)-2-하이드록시-벤조산 (3 g)을 DMF에 용해시키고, 생성된 용액을 0 ℃로 냉각시켰다. 1,1'-카르보닐디이미다졸 (CDI)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 삼차-부틸알코올(1.7g) 및 DBU(2.1g)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 얼음물 상에 붓고, 고체 생성물인, 삼차-부틸 5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)-2-하이드록시-벤조에이트를 여과에 의해 수집하였다(3.0 g, 81.9%).
단계 3
THF (50 mL) 중 삼차-부틸 5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)-2-하이드록시-벤조에이트, [(3R,4S,5R)-4,5-디(부타노일옥시)-6-하이드록시-테트라하이드로피란-3-일] 부타노에이트 (1.2 g) 및 트리페닐포스펜 (1.2 g)의 혼합물에 디-t-부틸 아조디카르복실레이트 (DTAD)(1.1 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 아세토니트릴-물을 사용하여 역상 크로마토그래피에 의해 생성물을 정제하여 삼차-부틸 5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)-2-[(3R,4S,5R)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조에이트를 끈적끈적한 고체 (0.6 g, 30%)로 수득하였다.
단계 4
삼차-부틸 5-(삼차-부톡시카르보닐아미노)-2-[(3R,4S,5R)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조에이트 (600 mg)를 디옥산 (15 mL) 중 4M HCl에 첨가하고 밤새 실온에서 교반하였다. 출발 물질의 소모 후, 유기상을 증발시키고, 잔류물을 헵탄 및 디클로로메탄과 함께 2회 더 증발시켰다. 얻어진 고체를 높은 진공 하에 건조시켜 표제 생성물을 진한 갈색 고체 (200 mg, 43.8%)로 수득하였다. 생성물의 분별로 2개의 아노머 이성질체 (예 33과 34의 화합물)를 제공하였다. 1H NMR (DMSO d6): Isomer 1: δ 7.62 (d, 1H), 7.45(dd, 1H), 7.38 (d, 1H), 6 (d, 1H), 5.6(t, 1H), 5.0-5.1(m,1H), 4.7-4.75 (m, 1H), 3.6-3.8 (m, 1H), 3.45-3.6 (1H), 2.1-2.3 (m, 6H), 1.4-1.6 (m, 6H), 0.75-0.85 (m, 9H). Isomer 2: δ 7.82 (d, 1H), 7.5(dd, 1H), 7.05 (d, 1H), 5.5 (d, 1H), 5.3 (t, 1H), 5.1-5.15 (m,1H), 4.9-5.0 (m, 1H), 4.0-4.08 (m, 1H), 3.7-3.8 (1H), 2.1-2.3 (m, 6H), 1.4-1.6 (m, 6H), 0.75-0.85 (m, 9H) ppm
Figure pct00121
화합물 35: 5-[(E)-[3-카르복시-4-(3-옥소부타노일옥시)페닐]아조]-2-(3-옥소부타노일옥시)벤조산
Figure pct00122
화합물 36: 5-아미노-2-(3-옥소부타노일옥시)벤조산
Figure pct00123
화합물 37: 5-[(E)-[3-카르복시-4-[(3R)-3-하이드록시부타노일]옥시-페닐]아조]-2-[(3R)-3-하이드록시부타노일]옥시-벤조산
Figure pct00124
화합물 38: 5-아미노-2-[(3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(3-옥소부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산
Figure pct00125
화합물 39: [(3R)-3-하이드록시부틸] 5-아미노-2-하이드록시-벤조에이트
단계 1: (3R)-3-벤질옥시부탄-1-올
건조 THF (20 mL) 중 LiAlH4 (0.313g)의 현탁액에 0 ℃에서 THF (20 mL) 중 (3R)-3-벤질옥시부탄산 (2 g)의 용액을 적가하고 혼합물을 0 ℃에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O (1 mL) 및 15% 수성 NaOH (1 mL) 및 H2O (3 mL) 적가하고, 그런 다음 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 50:1 내지 20:1 내지 15:1 내지 10:1)로 정제해서 (3R)-3-벤질옥시부탄-1-올 (0.90 g, 43%)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS: 181.2 (M+H+)
단계 2: 벤질 2-벤질옥시-5-니트로-벤조에이트
DMF (16 mL) 중 2-하이드록시-5-니트로-벤조산 (1 g)의 용액에 Cs2CO3 (4.45 g)를 첨가한데 이어서 벤질 브로마이드 (2.10 g)를 적가하고 반응 혼합물을 80 ℃에서 10 시간 동안 교반하였다. 물 (20 mL)을 첨가하고 혼합물을 EtOAc (10 mL)로 3회 추출하였다. 유기층을 염수 (10 mL)로 3회 세척하고 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 80:1 내지 20:1)로 정제하여 벤질 2-벤질옥시-5-니트로-벤조에이트 (1.3 g, 59%)를 황색 고체로 수득하였다.
단계 3: 2-벤질옥시-5-니트로-벤조산
THF (50 mL) 중 벤질 2-벤질옥시-5-니트로-벤조에이트 (0.800 g,)의 용액에 H2O (50 mL) 중 LiOH (0.527 g) 용액을 첨가하였다. 혼합물을 25 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 2N HCl (30 mL)로 pH 5로 산성화시켰다. 황색 침전물을 여과에 의해 수집하고, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 (30 ml, 30:1)로 세척하고 감압 하에 건조시켜 2-벤질옥시-5-니트로-벤조산 (0.600 g, 90%)을 황색 고체로 수득하였다.
단계 4: [(3R)-3-벤질옥시부틸] 2-벤질옥시-5-니트로-벤조에이트
CH2Cl2 (4 mL) 중 (3R)-3-벤질옥시부탄-1-올 (0.195 g), N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (0.335 g) 및 4-디메틸아미노피리딘 (0.039 g)의 용액에 2-벤질옥시-5-니트로-벤조산 (0.591 g)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, N2로 3회 퍼징하고 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 50:1 내지 20:1)로 정제하여 [(3R)-3-벤질옥시부틸] 2-벤질옥시-5-니트로-벤조에이트를 갈색 오일로 수득하였다. LCMS: 458.2 (M+Na+).
단계 5: [(3R)-3-하이드록시부틸] 5-아미노-2-하이드록시-벤조에이트
THF (20 mL) 중 [(3R)-3-벤질옥시부틸] 2-벤질옥시-5-니트로-벤조에이트 (0.450 g)의 용액에 10% Pd/C (0.200 g)를 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고, H2로 3회 퍼징하고 50 psi에서 5시간 동안 50℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 50:1 내지 0:1)로 정제하여 [(3R)-3-하이드록시부틸] 5-아미노-2-하이드록시-벤조에이트 (0.174 g, 71%)를 황색 고체로 수득하였다. LCMS: 226.1 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.820 (s, 1H), 7.448 (m, 1H), 6.116 (m, 1H), 5.986 (m, 1H), 4.591 (m, 1H), 4.271 (m, 2H), 3.769 (m, 1H), 1.728 (m, 2H), 1.106 (d, 3H) ppm
Figure pct00126
화합물 40: 5-(부타노일아미노)-2-하이드록시-벤조산
디옥산 (20 mL) 및 H2O (10 mL) 중 5-아미노-2-하이드록시-벤조산 (1 g) 및 트리에틸아민 (0.991 g)의 용액에 무수 부티르산 (1.24 g)을 첨가하고, 혼합물을 20 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 디옥산을 감압 하에 제거하고, 0℃에서 수성 3N HCl을 첨가함으로써 pH를 5-6로 조정하였다. 고체를 여과하고, 물(20 mL)로 3회 세척하고 진공 중에 농축시켰다. 미정제 생성물을 역상 prep-HPLC (C18, 물 (0.05%HCl)-아세토니트릴 구배)에 의해 정제하여 5-(부타노일아미노)-2-하이드록시-벤조산 (0.3 g, 20%)을 밝은 분홍색 고체로서 수득하였다. LCMS: 224.1 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.015 (br, 1H), 9.807 (s, 1H), 8.106 (d, 1H), 7.652 (dd, 1H), 6.893 (d, 1H), 2.239 (m, 2H), 1.604 (m, 2H), 0.902 (t, 3H) ppm
Figure pct00127
화합물 41: 5-아미노-2-(((2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
단계 1. 리보오스 테트라부티레이트
무수 피리딘 (24.2 mL) 중 D-(+)-리보오스 1 (5 g)의 교반 용액에 0-5℃에서 디클로로메탄 (50 mL) 중 부티릴 클로라이드 (23.70 g)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가져와서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 디클로로메탄 (100 ml)으로 희석하고 물 (100 mL), 2N 수성 HCl (300 mL), 포화 중탄산 나트륨 용액 (300 mL) 및 염수 (100 mL)로 연속해서 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 위의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (5-10% EtOAc-헥산 기울기) 리보오스 테트라부티레이트를 무색 오일로서 수득하였다 (7.5 g, 52%, α/β 아노머 혼합물).
단계 2. 리보오스 트리부티레이트
수산화 암모늄 (11 mL)을 실온에서 아세토니트릴 (60 mL) 중 리보오스 테트라부티레이트 2 (7.5 g)의 혼합물에 서서히 첨가하고 생성된 반응 혼합물을 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 MTBE (75 mL)로 희석하고 15분 동안 교반하였다. 유기층을 분리시키고 감압 하에 농축시키고 잔류물을 MTBE (100 mL)와 물 (75 mL) 사이에 분별시켰다. MTBE 층을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 [실리카 겔 100-200 메쉬 및 용리액으로 10-20% EtOAc-헥산을 사용하여] 정제하여 리보오스 트리부티레이트를 무색 오일로 수득하였다 (1.1g, 17%).
단계 3. 5-삼차-부톡시카르보닐아미노-2-하이드록시-벤조산
1,4-디옥산 및 물 (1:1; 100 mL) 중 5-아미노 살리실산 4 (5g)의 교반 용액에 0 ℃에서 NaOH (1.3g) 및 Boc-무수물 (7.83g)을 첨가하고 생성된 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (50 mL)로 희석시키고, pH를 0 ℃에서 0.5N 수성 HCl의 적하 첨가(dropwise add)에 의해 ~3-4로 조정하였다. 유기층을 분리하고, 수성층을 EtOAc (50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켜 5-삼차-부톡시카르보닐아미노-2-하이드록시-벤조산을 미색 고체 (5.3 g, 64%)로 제공하였다.
단계 4. 5-삼차-부톡시카르보닐메틸-2-하이드록시-벤조산 삼차-부틸 에스테르
DMF (50 mL) 중 5-삼차-부톡시카르보닐아미노-2-하이드록시-벤조산 5 (5.3g)의 교반 용액에 CDI (3.39g)를 0-5℃에서 첨가하고 혼합물을 2 시간 동안 교반하고, 삼차-부탄올 (4.025 mL) 및 DBU (2.54 mL)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (100 mL)로 희석하고 EtOAc (200 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리시키고, 황산나트륨 상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔[100-200 메쉬; 5-10% EtOAc-헥산 구배 용리 하]를 사용하여 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 5-삼차-부톡시카르보닐메틸-2-하이드록시-벤조산 삼차-부틸 에스테르를 미색 고체 (2 g, 31%)로 수득하였다.
단계 5. (2R,3R,4R,5R)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)-4-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트
THF (5 mL) 중 하이드록시-벤조산 삼차-부틸 에스테르 6 (0.850 g) 및 리보오스 트리부티레이트 (1.04 g)에 실온에서 트리페닐포스핀 (1.03 g) 및 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (0.948 g)를 순차적으로 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고 잔류물을 실리카 겔 (5 내지 18 % EtOAc-헥산 구배) 위에서 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 미정제 (2R,3R,4R,5R)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)-4-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (1.3g)를 제공하였으며, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
단계 6. 5-아미노-2-[(2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산
1,4-디옥산 (7 mL) 중 미정제 (2R,3R,4R,5R)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)-4-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (1.3g, 위에서 실험으로부터의 원액)의 교반 용액에 1,4-디옥산 (10 mL) 중 4N HCl를 0 ℃에서 첨가하고 생성된 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 역상 prep-HPLC에 의해 정제하여 5-아미노-2-[(2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산 (0.05g)을 제공하였다. LCMS: 496.5 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.919 - 6.898 (m, 2H), 6.658 (m, 1H), 5.431 (m, 1H), 5.350 (m, 1H), 5.234 (m, 1H), 5.161 (m, 1H), 4.213 (m 1H), 3.749 (m, 1H), 2.497 - 2.268 (m, 4H), 2.197 (m, 1H), 1.620 - 1.487 (m, 6H), 0.926 - 0.888 (m, 9H) ppm
Figure pct00128
화합물 42: 5-아미노-2-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산
단계 1: 2-하이드록시-4-니트로-벤조산 (20 g) 및 KHCO3 (13.1 g)을 DMF(100 mL)에 현탁시켰다. 현탁액에 벤질 브로마이드 (22.4 g)를 첨가하고 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 물 (150 mL)을 첨가하고 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트 (250 mL)로 추출하였다. 유기상을 분리하고 물, 염수로 2회 세척하고 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (헥산/에틸 아세테이트 구배)로 정제하였다. 헥산 중 15% 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 벤질 2-하이드록시-4-니트로-벤조에이트 (10.5 g)를 제공하였다.
단계 2: 벤질 2-하이드록시-4-니트로-벤조에이트 (8.5 g), 아라비노오스 트리부티레이트 (7.5 g) 및 트리페닐포스핀 (8.2 g)을 THF (150 mL)에 용해시키고 0 ℃에서 교반하였다. 이 혼합물에 디-t-부틸 아조디카르복실레이트 (7.2 g)를 첨가하고, 교반을 1 시간 동안 0 ℃에서, 이어서 실온에서 밤새 계속하였다. 반응 혼합물을 농축시키고 칼럼 크로마토그래피 (헥산 / 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 벤질 5-니트로-2-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조에이트 (1.78 g, 14%)를 제공하였다.
단계 3: 5-니트로-2-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조에이트 (0.095 g)를 메탄올 (15 mL)에 용해시키고 실온에서 교반하였다. 이 혼합물에 10% Pd/C (0.05g)를 첨가하였다. 현탁액을 실온에서 수소 분위기 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 Celite를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 합쳐진 여과물 및 세척을 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피 (C-18, 아세토니트릴 중 0.1% 트리플루오로아세트산 및 물 중 0.1% 트리플루오로아세트산)에 의해 정제하여 5-아미노-2-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산 (0.045 g, 59%)을 수득하였다. MS 494.2 (M-H) NMR (DMSO d6): δ 7.223 (m, 1H), 7.139 (m, 1H), 6.997 (s, 1H), 7.851 (d, 1H), 5.469 (m, 1H), 5.350 (m, 1H), 5.239 (m, 1H) 4.127 (d, 1H), 3.672 (d, 1H), 2.490 - 2.369 (M, 6H), 1.596 - 1.485 (m, 6H), 0.924 - 0.818 (m, 9H) ppm
Figure pct00129
화합물 43: (3R,4S,5R)-3,4,5-트리아세톡시시클로헥스-1-엔-1-카르복실산
아세트산 무수물 (1.61 mL, 17.2 mmol)을, N2 분위기 하에 0℃에서 무수 피리딘 (1.38 mL, 17.2 mmol) 중 쉬킴산 (0.300 g, 1.72 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 물 중 10-90% 아세토니트릴)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 43 (0.18 g, 34.8% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 12.90 (s, 1H), 6.61 (dt, 1H), 5.60 (m, 1H), 5.18 (dd, 1H), 5.12 (dt, 1H), 2.76 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.04 (s, 5H), 2.01 (s, 3H). LC-MS: 299.1 (M-H)-
Figure pct00130
화합물 44: 3,4,5-트리아세톡시벤조산
아세트산 무수물 (1.65 mL, 17.6 mmol)을, N2 분위기 하에 0℃에서 무수 피리딘 (1.41 mL, 17.6 mmol) 중 갈산 (0.300 g, 1.76 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 물 중 10-90% 아세토니트릴)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 44 (0.259 g, 49.7% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 13.44 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.30 (s, 6H). LC-MS: 319.0 (M+Na)+
Figure pct00131
화합물 45: (2R,3R,4S,5R)-2-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
아세트산 무수물 (2.28 mL, 24.2 mmol)을 N2 분위기 하에 0℃에서 무수 피리딘 (2.92 mL, 36.3 mmol) 중 (2R,3R,4S,5R)-2-메톡시테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 (0.200 g, 1.21 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 두었고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 45 (0.217 g, 61.8% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.21 (t, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.79 (dd, 1H), 4.62 (d, 1H), 4.01 (dd, 1H), 3.53 (dd, 1H), 3.40 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.01 (s, 3H). LC-MS: 313.0 (M+Na)+
Figure pct00132
화합물 46: (2S,3R,4S,5R)-2-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
아세트산 무수물 (2.28 mL, 24.2 mmol)을 N2 분위기 하에 0 ℃에서 무수 피리딘 (2.92 mL, 36.3 mmol) 중 (2S,3R,4S,5R)-2-메톡시테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 (0.200 g, 1.21 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 두었고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 46 (0.216 g, 61.5% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.30 (t, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.88 (d, 1H), 4.84 (dd, 1H), 3.77 (dd, 1H), 1.27 (dd, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 2.00 (s, 3H). LC-MS: 313.0 (M+Na)+
Figure pct00133
화합물 47: (2R,3S,4R,5R)-2-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
아세트산 무수물 (378 μL, 4.02 mmol)을 N2 분위기 하에 0℃에서 무수 피리딘 (484 μL, 6.02 mmol) 중 교반된 용액 (2R,3S,4R,5R)-2-메톡시테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 (0.033 g, 201 μmol)에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 두었고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 47 (0.0263 g, 45.1% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.25 (m, 1H), 5.22 (dd, 1H), 5.02 (dd, 1H), 4.91 (d, 1H), 3.89 (dd, 1H), 3.64 (dd, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.97 (s, 3H). LC-MS: 313.0 (M+Na)+
Figure pct00134
화합물 48: (2S,3S,4R,5R,6R)-2-(아세톡시메틸)-6-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
아세트산 무수물 (1.92 mL, 20.4 mmol)을 N2 분위기 하에 0℃에서 무수 피리딘 (2.46 mL, 30.6 mmol) 중 (2S,3R,4R,5R,6R)-2-(하이드록시메틸)-6-메톡시-테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 (0.200 g, 1.02 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 두었고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 48 (0.197 g, 53.3% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.12 (m, 3H), 4.79 (d, 1H), 4.18(dd, 1H), 4.08 (dd, 1H), 3.94-3.90 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.95 (s, 3H). LC-MS: 385.1 (M+Na)+
Figure pct00135
화합물 49: (2R,3S,4S,5R,6R)-2-(아세톡시메틸)-6-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
아세트산 무수물 (1.92 mL, 20.4 mmol)을 N2 분위기 하에 0℃에서 무수 피리딘 (2.46 mL, 30.6 mmol) 중 (2R,3R,4S,5R,6R)-2-(하이드록시메틸)-6-메톡시-테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 (0.200 g, 1.02 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 두었고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 헥산 중 10-90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 49(0.153 g, 41.4 % 수율)를 오일로서 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.28 (dd, 1H), 5.17 (dd, 1H), 4.95 (dd, 1H), 4.63 (d, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.40 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.93 (s, 3H). LC-MS: 85.1 (M+Na)+
Figure pct00136
화합물 50: (2R,3R,4S,5R,6R)-2-(아세톡시메틸)-6-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
아세트산 무수물 (1.92 mL, 20.4 mmol)을 N2 분위기 하에 0 ℃에서 무수 피리딘 (2.46 mL, 30.6 mmol) 중 (2R,3S,4S,5R,6R)-2-(하이드록시메틸)-6-메톡시-테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 (0.200 g, 1.02 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 두었고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 50 (0.148 g, 40.1% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.27 (t, 1H), 4.91 (t, 1H), 4.75 (m, 2H), 4.20 (dd, 1H), 4.05-3.93 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.95 (s, 3H). LC-MS: 385.1 (M+Na)+
Figure pct00137
화합물 51: (2R,3S,4S,5R,6S)-2-(아세톡시메틸)-6-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
아세트산 무수물 (1.92 mL, 20.4 mmol)을, N2 분위기 하에 0 ℃에서 무수 피리딘 (2.46 mL, 30.6 mmol) 중 (2R,3R,4S,5R,6S)-2-(하이드록시메틸)-6-메톡시-테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 수화물 (1:1) (0.200 g, 1.02 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 두었고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 51 (0.157 g, 42.5% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.36 (dd, 1H), 5.22 (dd, 1H), 4.99(m, 2H), 4.18 (m, 1H), 4.06 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.95 (s, 3H). LC-MS: 385.1 (M+Na)+
Figure pct00138
화합물 52: (2S,3S,4R,5S,6R)-2-(아세톡시메틸)-6-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
아세트산 무수물 (1.92 mL, 20.4 mmol)을, N2 분위기 하에 0 ℃에서 무수 피리딘 (2.46 mL, 30.6 mmol) 중 (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(하이드록시메틸)-6-메톡시-테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 (0.200 g, 1.02 mmol)의 교반된 용액에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 되게 두었고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카, 헥산 중 10-90% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 52 (0.230 g, 62.3% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.29 (dd, 1H), 4.96 (dd, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.82 (dd, 1H), 4.15 (dd, 1H), 4.05 (dd, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 2.01 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.96 (s, 3H). LC-MS: 385.2 (M+Na)+
Figure pct00139
화합물 53: (2R,3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라아세테이트
L-아라비노오스 (50 g) , N,N-디메틸피리딘-4-아민 (6 g) , 및 트리에틸아민 (367 mL)을 700 mL DCM에 용해시키고 N2 분위기 하에 0℃에서 교반하였다. 아세트산 무수물 (217 mL)을 30분에 걸쳐 적가하고 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트에 재용해시키고, 1M HCl, H2O 및 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고 증발시켰다. 헥산 중 0-100% 에틸 아세테이트로 정상 상에서 정제하여 화합물 53을 밀랍/비정질 고체 (50% 수율)로 얻었다. 1H-NMR (DMSO-CDCl3, 400 MHz): δ 6.35 (d, 1H), 5.37 (m, 3H), 4.06 (dd, 1H), 3.82 (dd, 1H), 2.155 (s, 3H) 2.15 (s, 3H), 2.02 (s, 6H). LC-MS: 341.1 (M+Na)+
Figure pct00140
화합물 54: [(2R,3S,4S,5R)-2,3,4,5-테트라아세톡시테트라하이드로피란-2-일]메틸 아세테이트
피리딘 (50 mL) 중 (3S, 4S, 5R)-2-(하이드록시메틸) 테트라하이드로피란-2, 3, 4, 5-테트롤 (6 g, 33.3 mmol)의 용액에, 아세트산 무수물 (65.4 g, 640.6 mmol, 60.00 mL)을 첨가하고, 혼합물을 15 ℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 칼럼 크로마토그래피(용리액: 석유 에테르 / 에틸 아세테이트=50:1 내지 1:1 기울기)에 의해 정제하여 [(2R,3S,4S,5R)-2,3,4,5-테트라아세톡시테트라하이드로피란-2-일]메틸 아세테이트 (6 g, 14.60 mmol, 43.85% 수율)를 황색 고체로 수득하였다. 1H-NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 5.461 (d, 1H), 5.336 (dd, 1H), 5.250 (m, 1H), 4.797 (d, 1H), 4.415 (d, 1H), 4.102 (d, 1H), 3.496 (t, 1H), 2.165 (s, 3H), 2.134 (s, 3H), 2.050 (s, 3H), 2.019 (s, 3H), 1.999 (s, 3H). LCMS: (M+Na+): 413.1
Figure pct00141
화합물 55: (2S,3R,4R,5S,6R)-6-(아세톡시메틸)-3-아미노테트라하이드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트 HCl 염.
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.760 - 8.675 (br m, 3H), 5.901 (m, 1H), 5.346 (t, 1H), 4.932 (t, 1H), 4.190 (m, 1H), 4.051 - 3.976 (m, 3H), 3.582 (m, 1H), 2.170 (s, 3H), 2.028 (s, 3H), 1.996 (s, 3H), 1.977 (s, 3H). LCMS: (M+Na+)：370.1
Figure pct00142
화합물 56: [(2R,3R)-5,7-디(부타노일옥시)-2-[3,4,5-트리(부타노일옥시)페닐]크로만-3-일] 3,5-비스[(4-아미노-2-하이드록시-벤조일)옥시]-4-하이드록시-벤조에이트
Figure pct00143
화합물 57: [(1S)-4-[(1E,3E,5E,7E,9E,11E,13E,15E,17E)-18-[(4S)-4-아세톡시-2,6,6-트리메틸-3-옥소-시클로헥센-1-일]-3,7,12,16-테트라메틸-옥타데카-1,3,5,7,9,11,13,15,17-노나에닐]-3,5,5-트리메틸-2-옥소-시클로헥스-3-엔-1-일] 아세테이트
Figure pct00144
화합물 58: [(1S)-4-[(1E,3E,5E,7E,9E,11E,13E,15E,17E)-18-[(4S)-4-부타노일옥시-2,6,6-트리메틸-3-옥소-시클로헥센-1-일]-3,7,12,16-테트라메틸-옥타데카-1,3,5,7,9,11,13,15,17-노나에닐]-3,5,5-트리메틸-2-옥소-시클로헥스-3-엔-1-일] 부타노에이트
Figure pct00145
화합물 59: [(1S)-3,5,5-트리메틸-2-옥소-4-[(1E,3E,5E,7E,9E,11E,13E,15E,17E)-3,7,12,16-테트라메틸-18-[(4S)-2,6,6-트리메틸-3-옥소-4-(3-옥소부타노일옥시)시클로헥센-1-일]옥타데카-1,3,5,7,9,11,13,15,17-노나에닐]시클로헥스-3-엔-1-일] 3-옥소부타노에이트
Figure pct00146
화합물 60: [(1S)-4-[(1E,3E,5E,7E,9E,11E,13E,15E,17E)-18-[(4S)-4-[(3R)-3-하이드록시부타노일]옥시-2,6,6-트리메틸-3-옥소-시클로헥센-1-일]-3,7,12,16-테트라메틸-옥타데카-1,3,5,7,9,11,13,15,17-노나에닐]-3,5,5-트리메틸-2-옥소-시클로헥스-3-엔-1-일] (3R)-3-하이드록시부타노에이트
Figure pct00147
화합물 61: [(1S)-3,5,5-트리메틸-2-옥소-4-[(1E,3E,5E,7E,9E,11E,13E,15E,17E)-3,7,12,16-테트라메틸-18-[(4S)-2,6,6-트리메틸-4-옥타노일옥시-3-옥소-시클로헥센-1-일]옥타데카-1,3,5,7,9,11,13,15,17-노아에닐]시클로헥스-3-엔-1-일] 옥타노에이트
Figure pct00148
화합물 62: [(1S)-4-[(1E,3E,5E,7E,9E,11E,13E,15E,17E)-18-[(4S)-4-데카노일옥시-2,6,6-트리메틸-3-옥소-시클로헥센-1-일]-3,7,12,16-테트라메틸-옥타데카-1,3,5,7,9,11,13,15,17-노나에닐]-3,5,5-트리메틸-2-옥소-시클로헥스-3-엔-1-일] 데카노에이트
Figure pct00149
화합물 63: [(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리아세톡시-6-[(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일]옥시-테트라하이드로피란-2-일]메틸 아세테이트
단계 1: 3-브로모피리딘-2-올 (5 g)을 수성 NaOH (0.34 M, 84.52 mL) 및 수성 AgNO3 (0.68 M, 42.26 mL)에 15 ℃에서 첨가하였다. 혼합물을 10 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 고체를 H2O (800 mL) 및 냉각된 메탄올 (200 mL)로 세척하고 감압 하에 건조시켜 은 3-브로모피리딘-2-올레이트 (6.5 g, 80.5% 수율)를 백색 고체로 수득하였다.
단계 2: 톨루엔 (10 mL) 중 [(1R,2R,3S,4R,5S)-2,3,4-트리아세톡시-5-브로모-시클로헥실]메틸 아세테이트 (0.488 g)의 용액에 15 ℃에서 은 3-브로모피리딘-2-올레이트 (1 g)를 첨가하였다. 혼합물을 120 ℃에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시키고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 1:1)로 정제하여 [(1R,2R,3S,4S,5S)-2,3,4-트리아세톡시-5-[(3-브로모-2-피리딜)옥시]시클로헥실]메틸 아세테이트 (0.500 g, 75% 수율)를 백색 고체로 수득하였다.
단계 3: DCM (5 mL) 중 [(1R,2R,3S,4S,5S)-2,3,4-트리아세톡시-5-[(3-브로모-2-피리딜)옥시]시클로헥실]메틸 아세테이트 (0.350 g) 및 α-토코페롤 (0.598 g)의 용액에 15℃에서 BF3.Et2O (47%, 0.629 g, 3 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 중탄산 나트륨 용액 (5 mL)으로 켄칭시키고, 디클로로메탄 (10 mL)으로 3회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 5:1)로 정제하여 [(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리아세톡시-6-[(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일]옥시-테트라하이드로피란-2-일]메틸 아세테이트 (0.400 g, 75.7% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 5.362 - 5.179 (m, 3H), 4.724 (d, 1H), 4.191 - 4.049 (m, 3H), 3.536 (m, 1H), 2.568 (m, 2H), 2.152 (s, 3H), 2.120 (s, 3H), 2.105 (s, 3H), 2.082 (s, 3H), 2.054 - 2.027 (m, 9H), 1.838 - 1.737 (m, 2H), 1.572 - 1.042 (m, 24H), 0.882 - 0.842 (m, 12H)
Figure pct00150
화합물 64: [(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)-6-[(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일]옥시-테트라하이드로피란-2-일]메틸 부타노에이트
단계 1: MeOH (30 mL) 중 [(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리아세톡시-6-[(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일]옥시-테트라하이드로피란-2-일]메틸 아세테이트 (2.7 g)의 용액에, 15 ℃에서 MeOH (25%, 192 mg) 중 NaOMe를 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 양이온 교환 수지와 중화시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 3:1 내지 에틸 아세테이트/MeOH, 20:1 구배)에 의해 정제하여 (2R,3S,4S,5R,6S)-2-(하이드록시메틸)-6-[(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일]옥시-테트라하이드로피란-3,4,5-트리올 (1.3 g, 62% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
단계 2: DCM (5 mL) 중 (2R,3S,4S,5R,6S)-2-(하이드록시메틸)-6-[(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일]옥시-테트라하이드로피란-3,4,5-트리올의 용액에 15℃에서 피리딘 (0.107 g) 및 부타노일 클로라이드 (0.144 g)를 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트,4:1)로 정제하여 [(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)-6-[(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일]옥시-테트라하이드로피란-2-일]메틸 부타노에이트 (0.075 g, 51% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 5.362 (m, 1H), 5.284 (m, 1H), 5.201 (m, 1H), 4.733 (d, 1H), 4.107 (m, 2H), 3.529 (m, 1H), 2.562 (m, 2H), 2.336 (m, 2H), 2.28 - 2.21 (m, 6H), 2.147 (s, 3H), 2.100 (s, 3H), 2.076 (s, 3H), 1.852 - 1.01 (m, 37H), 0.963 0.842 (m, 24H)
Figure pct00151
화합물 65: [4-[(E)-2-[3,5-비스[[(4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르보닐]옥시]페닐]비닐]페닐] (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트
단계 1: ACN (100 mL) 중 (3R)-부탄-1,3-디올 (2 g) 및 메틸 2-옥소프로파노에이트 (4.53 g)의 용액에 BF3.Et2O (47%, 13.40 g, 2 eq)를 적가한 후, 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용액의 pH를 포화 NaHCO3로 7-8로 조정하고 수성 상을 에틸 아세테이트 (30 mL)로 3회 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수 (20 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 메틸 (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (2.5 g, 64.7% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 2: MeOH (40 mL) 및 H2O (10 mL) 중 메틸 (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (2.5g)의 용액에 NaOH (1.15 g)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. MeOH를 제거하고 혼합물의 pH을 수성 HCl (6M)로 pH=2-3으로 조정하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트 (30 mL)로 4회 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수 (30 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공 중에 농축시켜 (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실산 (1.5 g, 65% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3: DCM (30 mL) 중 레스베라트롤 (0.2g), (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실산 (0.561 g), DCC (0.723 g) 및 DMAP (0.054 g)의 용액을 16 시간 동안 15℃에서 교반하였다. 고체를 여과에 의해 제거하고 용액을 진공 중에 농축시켰다. 미정제 생성물을 역상 prep-HPLC (C18, [물(0.1%TFA)-AC]0)에 의해 정제하여 [4-[(E)-2-[3,5-비스[[(4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르보닐]옥시]페닐]비닐]페닐] (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (0.1 g, 17% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: 672.3 (M+18) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 7.552 (d, 2H), 7.211 (d, 2H), 7.170 - 7.104 (m, 3H), 7.034 (m, 1H), 6.944 (m, 1H), 4.163 - 4.005 (m, 9H), 1.975 - 1.709 (m, 12H), 1.549 - 1.513 (m, 3H), 1.318 (d, 9H)
Figure pct00152
화합물 66: [(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일] (4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트
DCM (10 mL) 중 α-토코페롤 (1 g), (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실산 (0.169 g), EDCI (0.223 g) 및 DMAP (0.071 g)의 용액을 15℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고 미정제 생성물을 prep-TLC (석유 에테르 / 에틸 아세테이트. 5:1)에 의해 정제하여 [(2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-[(4R,8R)-4,8,12-트리메틸트리데실]크로만-6-일] (4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (0.12 g, 9% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: 576.4 (M+18) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 5.297 (s, 1H), 4.306 (dd, 1H), 3.972 - 3.900 (m, 2H), 2.575 (t, 2H), 2.075 (s, 3H), 2.024 (s, 3H), 1.983 (s, 3H), 1.95 - 1.00 (m, 32H), 0.874 - 0.835 (m, 12H)
Figure pct00153
화합물 67: [(1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥실] (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(부타노일옥시)헥사노에이트
DCM (2 mL) 중 (1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥사놀 (0.200 g) 및 (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(부타노일옥시)헥산산 (0.341 g)의 용액에 15℃에서 DCC (0.129 g) 및 DMAP (0.013 g)를 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 prep-TLC (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 5:1)로 정제하여 [(1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥실] (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(부타노일옥시)헥사노에이트 (0.300 g, 63% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 6.231 (d, 1H), 6.014 (d, 1H), 5.641 (dd, 1H), 5.511 (m, 1H), 5.262 (d, 1H), 5.121 - 5.066 (m, 2H), 4.967 (m, 1H), 4.847 (d, 1H), 4.317 (dd, 1H), 4.111 (m, 1H), 2.818 (m, 1H), 2.597 (m, 1H), 2.274 - 2.185 (m, 13H), 2.055 - 1.955 (m, 5H), 1.733 - 1.129 (m, 29H), 1.001 - 0.870 (m, 24H)
Figure pct00154
화합물 68: [(1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥실] (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(프로파노일옥시)헥사노에이트
DCM (5 mL) 중 (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(프로파노일옥시) 헥산산 (0.5g)의 용액에 (1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실] -7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥사놀 (0.484 g), DCC (0.433 g) 및 DMAP (0.038 g)를 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)로 정제하여 [(1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥실] (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타(프로파노일옥시)헥사노에이트 (0.24 g, 25% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 6.228 (d, 1H), 6.104 (d, 1H), 5.649 (m, 1H), 5.523 (m, 1H), 5.272 (d, 1H), 5.123 - 5.068 (m, 2H), 4.989 (m, 1H), 4.852 (m, 1H), 4.299 (m, 1H), 4.129 (m, 1H), 2.834 (m, 1H), 2.65 - 0.95 (m, 68H), 0.94 - 0.869 (m, 12H)
Figure pct00155
화합물 69: [(1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥실] (4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트
DCM (20 mL) 중 (1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥사놀 (0.3g), (4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르복실산 (0.228 g), DCC (0.322 g) 및 DMAP (0.095 g)의 용액을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고 여과물을 진공 중에 농축시켰다. 미정제 생성물을 prep-TLC (석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 5:1)에 의해 정제하여 [(1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥실] (4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (0.090 g, 21% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: 513.3 (M+H+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 6.230 (d, 1H), 6.030 (d, 1H), 5.068 - 5.035 (m, 2H), 4.990 (s, 1H), 4.844 (s, 1H), 4.233 (m, 1H), 3.868 - 3.801 (m, 2H), 2.798 (m, 1H), 2.612 (m, 1H), 2.442 (m, 2H), 2.2 (m, 1H), 2.050 - 0.095 (m, 29H), 0.925 (d, 3H), 0.875 (d, 3H), 0.870 (d, 3H), 0.546 (s, 3H)
Figure pct00156
화합물 70: [(1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥실] (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트
DCM (20 mL) 중 (1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥사놀 (0.3g), (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실산 (0.250 g), DCC (0.322 g) 및 DMAP (0.048 g)의 용액을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 [(1S,3Z)-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(1R)-1,5-디메틸헥실]-7a-메틸-2,3,3a,5,6,7-헥사하이드로-1H-인덴-4-일리덴]에틸리덴]-4-메틸렌-시클로헥실] (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (0.050 g, 12% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: 549.4 (M+Na+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 6.130 (d, 1H), 5.938 (d, 1H), 5.026 - 4.978 (m, 2H), 4.784 (d, 1H), 3.843 - 3.772 (m, 3H), 2.730 (m, 1H), 2.552 - 0.995 (35H), 0.848 (d, 3H), 0.799 (d, 3H), 0.795 (d, 3H0, 0.469 (s, 3H)
Figure pct00157
화합물 71: (2R,3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라부티레이트
DCM(30 mL) 중 (3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라올 (3 g, 19.98 mmol, 1 eq), TEA (16.18 g, 159.86 mmol, 22.25 mL, 8 eq) 및 DMAP (488.25 mg, 4.00 mmol, 0.2 eq)의 용액에 0℃에서 부티르산 무수물(19.34 g, 122.25 mmol, 20 mL, 6.12 eq)을 첨가하였다. 그런 다음 용액을 1 시간 동안 0℃로 교반한 다음 15℃에서 다른 15 시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=1:0으로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라부티레이트 (8 g, 18.58 mmol, 93.00% 수율, 100% 순도)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+Na+): 453 1H-NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 6.3 (1H, d) 5.3 (2H, M). 3.8-4.0 (dd, 2H), 2.2 (m, 8 H), 1.6 (m, 8H), 0.97 (m, 12H).
Figure pct00158
화합물 72: (3R,4S,5S)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트
THF (20 mL) 및 H2O (1 mL) 중 [(3S,4S,5R)-4,5,6-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-3-일] 부타노에이트 (1g)의 용액에 THF (2 M, 1.51 mL) 중 메탄아민을 첨가하고 혼합물을 15 ℃에서 24 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 [(3S,4S,5R)-4,5-디(부타노일옥시)-6-하이드록시-테트라하이드로피란-3-일] 부타노에이트 (0.15 g, 17.7% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: 383.1 (M+Na+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3) (mixture of anomers): δ 5.411(d, 1H, major anomer), 5.370 (dd, 1H, major anomer), 5.300 (br, 1H, major anomer), 5.235 (br, 1H, minor anomer), 5.154 (dd, 1H, major anomer), 5.040 (m, 1H) 5.557 (br, 1H, minor anomer) 4.139 (d, 1H, major anomer) 3.959 (dd, 1H, minor anomer), 3.642 (dd, 1H, major anomer), 3.620 (d, 1H, minor anomer), 3.350 (br d, 1H, minor anomer), 2.619 (br, 2H, minor anomer), 2.330 - 2.116 (m, 6H, major and minor anomer), 1.666 - 1.496 (m, 6H, major and minor anomer), 0.931 - 0.834 (9H, major and minor anomer).
Figure pct00159
화합물 73: (R)-3-(부티릴옥시)부틸 (R)-3-(부티릴옥시)부타노에이트
아세토니트릴 (5 mL) 중 [(3R)-3-하이드록시부틸] (3R)-3-하이드록시부타노에이트 (0.400 g), K2CO3 (0.784 g)의 용액에 부타노일 클로라이드 (0.532 g)를 첨가하고, 혼합물을 15 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 [(3R)-3-부타노일옥시부틸] (3R)-3-부타노일옥시부타노에이트 (0.220 g, 27.5% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.197 (m, 1H), 4.965 (m, 1H), 4.045 (m, 2H), 2.528 (m, 1H), 2.449 (m, 1H), 2.222 - 2.158 (m, 4H), 1.799 (m, 2H), 1.602 - 1.546 (m, 4H), 1.222 (d, 3H), 1.182 (d, 3H), 0.884 (t, 3H), 0.874 (t, 3H) ppm
Figure pct00160
화합물 74: (R)-부탄-1,3-디일 디부티레이트
아세토니트릴 (50mL) 중 (3R)-부탄-1,3-디올 (6 g) 및 K2CO3 (23.92g)의 용액에 부타노일 클로라이드 (18.44 g)를 첨가하고, 혼합물을 15 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 [(3R)-3-부타노일옥시부틸] 부타노에이트 (11 g, 64.57% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: 248.1 (M+H3O+) 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.022 (m, 1H), 4.101 (m, 2H), 2.300 - 2.247 (m, 4H), 1.885 (m, 2H), 1.679 - 1.594 (m, 4H), 1.260 (d, 3H), 0.949 (t, 6H) ppm
Figure pct00161
화합물 75: (2R,2'R)-((((5-((E)-4-((((R)-3-(부티릴옥시)부톡시)카르보닐)옥시)스티릴)-1,3-페닐렌)비스(옥시))비스(카르보닐))비스(옥시))비스(부탄-4,2-디일) 디부티레이트
THF (10 mL) 중의 트리포스겐 (0.185 g, 0.624 mmol)의 용액에 THF (5 mL) 중 [(1R)-3-하이드록시-1-메틸-프로필] 부타노에이트 (0.200 g, 1.25 mmol) 및 TEA (0.189 g, 1.87 mmol)의 용액을 0 ℃에서 첨가하였다. 반응을 0 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. TLC는 출발 반응물이 소비되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 농축시키고 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 2
THF (5 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.050 g, 0.219 mmol) 및 TEA (0.111 g, 1.10 mmol)의 용액에 THF 중 [(1R)-3-클로로카르보닐옥시-1-메틸-프로필] 부타노에이트의 상기 용액을 첨가하였다. 반응물을 20 ℃에서 2 시간 동안 교반하고, 이어서 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC에 의해 정제하여 [(1R)-3-[4-[(E)-2-[3,5-비스[[(3R)-3-부타노일옥시부톡시]카르보닐옥시]페닐]비닐]페녹시]카르보닐옥시-1-메틸-프로필] 부타노에이트 (0.084 g, 41% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H2O+): 804.3 1H NMR (400 Mhz, CDCl3): δ 7.511 (m, 2H), 7.270 - 6.970 (m, 7H), 5.167 - 5.087 (m, 3H), 4.360 - 4.307 (m, 6H), 2.299 (t, 6H), 2.012 (m, 6H), 1.703 - 1.647 (m, 6H), 1.301 (d, 9H), 0.965 (t, 9H)
Figure pct00162
화합물 76: (3R,3'R)-((((5-((E)-4-(((((R)-4-(프로피오닐옥시)부탄-2-일)옥시)카르보닐)옥시)스티릴)-1,3-페닐렌)비스(옥시))비스(카르보닐))비스(옥시))비스(부탄-3,1-디일) 디프로피오네이트
DCM (10 mL) 중 (3R)-부탄-1,3-디올 (2 g, 22.2 mmol) 및 TEA (2.47 g, 24.4 mmol)의 용액에, 프로파노일 프로파노에이트 (3.18 g, 24.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25 ℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=10/1 내지 5:1)로 정제하여 [(3R)-3-하이드록시부틸] 프로파노에이트 (1.8 g, 55% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
THF (10 mL) 중 트리포스겐 (0.203g, 0.68 mmol)의 용액에 THF (5 mL) 중 [(3R)-3-하이드록시부틸] 프로파노에이트 (0.20 g, 1.37 mmol) 및 TEA (0.21 g, 2.1 mmol)의 용액을 0 ℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 다음 여과하고 다음 단계에 직접 사용하였다.
THF (5 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.050 g, 0.219 mmol) 및 TEA (0.111 g, 1.10 mmol)의 용액에 THF 중 [(3R)-3-클로로카르보닐옥시부틸] 프로파노에이트의 상기 용액을 0 ℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC에 의해 정제하여 [(3R)-3-[4-[(E)-2-[3,5-비스[[(1R)-1-메틸-3-프로파노일옥시-프로폭시]카르보닐옥시]페닐]비닐]페녹시]카르보닐옥시부틸] 프로파노에이트 (0.060 g, 35% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+Na+): 767.3 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.518 (d, 2H), 7.270 - 6.976 (m, 7H), 5.032 - 4.968 (m, 3H), 4.267 - 4.189 (m, 6H), 2.384 - 2.328 (m, 6H), 2.066 - 1.980 (m, 6H), 1.430 (d, 9H), 1.555 (t, 9H)
Figure pct00163
화합물 77: (2R,2'R)-((((5-((E)-4-((((R)-3-(프로피오닐옥시)부톡시)카르보닐)옥시)스티릴)-1,3-페닐렌)비스(옥시))비스(카르보닐))비스(옥시))비스(부탄-4,2-디일) 디프로피오네이트
단계1
DCM (10 mL) 중 피리딘 (1.05 g, 13.3 mmol)의 용액에 0℃에서 (2R)-4-벤질옥시부탄-2-올 (1 g, 5.6 mmol) 및 DMAP (0.022 g, 0.18 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 0℃에서 혼합물에 프로파노일 클로라이드 (0.719 g, 7.77 mmol)를 첨가하고 혼합물을 N2 하에 3시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르 / 에틸 아세테이트 = 100/1 내지 70/1)에 의해 정제하여 [(1R)-3-벤질옥시-1-메틸-프로필] 프로파노에이트 (1.2 g, 4.6 mmol, 82% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
단계 2
THF (200 mL) 중 10% Pd/C 0.4 g)의 용액에 [(1R)-3-벤질옥시-1-메틸-프로필] 프로파노에이트 (1.2 g, 5.1 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 3회 탈기하고 H2로 퍼징한 다음, 40℃에서 H2, 15Psi 하에 12시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 여과하고 농축시켜 [(1R)-3-하이드록시-1-메틸-프로필] 프로파노에이트 (0.70 mg)를 무색 오일로서 수득하였다.
단계 3
THF (10 mL) 중 트리포스겐 (0.203 g, 0.684 mmol)의 용액에 THF (5 mL) 중 [(1R)-3-하이드록시-1-메틸-프로필] 프로파노에이트 (0.200 g, 1.37 mmol) 및 TEA (0.208 g, 2.05 mmol)의 용액을 0 ℃에서 첨가하였다. 반응을 0 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 4
THF (5 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.050 g, 0.219 mmol) 및 TEA (0.111 g, 1.10 mmol)의 용액에, THF 중 [(1R)-3-클로로카르보닐옥시-1-메틸-프로필] 프로파노에이트의 상기 용액을 0 ℃에서 첨가하였다. 반응을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 여과하고 농축시키고, 잔류물을 prep-TLC에 의해 정제하여 [(1R)-3-[4-[(E)-2-[3,5-비스[[(3R)-3-프로파노일옥시부톡시]카르보닐옥시]페닐]비닐]페녹시]카르보닐옥시-1-메틸-프로필] 프로파노에이트 (0.030 g, 14.71% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+Na+): 767.3 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.506 (d, 2H), 7.232 - 6.997 (m, 7H), 5.149 - 5.070 (m, 3H), 4.363 4.290 (m, 6H), 2.368 - 2.312 (m, 6H), 2.062 - 1.993 (m, 6H), 1.308 (d, 9H), 1.555 (t, 9H)
Figure pct00164
화합물 78: (3R,3'R)-((((5-((E)-4-(((((R)-4-(부티릴옥시)부탄-2-일)옥시)카르보닐)옥시)스티릴)-1,3-페닐렌)비스(옥시))비스(카르보닐))비스(옥시))비스(부탄-3,1-디일) 디부티레이트
THF (10 mL) 중 트리포스겐 (0.185 g, 0.62 mmol)의 용액에 THF (5 mL) 중 [(3R)-3-하이드록시부틸] 부타노에이트 (0.200 g, 1.25 mmol 및 TEA (0.189 g, 1.87 mmol)의 용액을 0 ℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 여과하고 다음 단계에 직접 사용하였다.
THF (5 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (0.050 g, 0.219 mmol) 및 TEA (0.111 g, 1.10 mmol)의 용액에 THF 중 [(3R)-3-클로로카르보닐옥시부틸] 부타노에이트의 상기 용액을 0 ℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 농축시키고, 잔류물을 prep-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=5/1)로 정제하여 [(3R)-3-[4-[(E)-2-[3,5-비스[[(1R)-3-부타노일옥시-1-메틸-프로폭시]카르보닐옥시]페닐]비닐]페녹시]카르보닐옥시부틸] 부타노에이트 (0.080mg, 45% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H2O+): 804.4 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.517 (m, 2H), 7.270 - 7.018 (m, 7H), 5.103 (m, 3H), 4.260 - 4.203 (m, 6H), 2.313 (m, 6H), 2.054 (m, 6H), 1.698 - 1.643 (m, 6H), 1.431 (d, 9H), 0.957 (t, 9H)
Figure pct00165
화합물 79: (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5,6-테트라키스(프로파노일옥시)옥산-2-카르복실산
Figure pct00166
화합물 80: (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5,6-테트라키스(프로파노일옥시)옥산-2-카르복실산
Figure pct00167
단계 1
프로피온산 무수물 (25 mL) 중 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라하이드록시테트라하이드로피란-2-카르복실산 (5 g, 25.75 mmol, 1 eq)의 용액에 I2 (653.68 mg, 2.58 mmol, 518.79 uL, 0.1 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라하이드록시테트라하이드로피란-2-카르복실산이 완전히 소모되었음을 표시하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 그런 다음, 잔류물을 톨루엔에 녹인 다음 진공 중에 증류시켰다. 미정제 생성물 프로피오닉 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라키스(프로피오닐옥시) 테트라하이드로-2H-피란-2-카르복실산 무수물 (7 g, 원액)을 갈색 액체로서 수득하였다.
단계 2
DCM (70 mL) 중 프로피오닉 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라키스(프로피오닐옥시)테트라하이드로-2H-피란- 2-카르복실산 무수물 (7 g, 16.73 mmol, 1 eq)의 용액에 BnOH (3.62 g, 33.46 mmol, 3.48 mL, 2 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 (프로피오닉 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라키스(프로피오닐옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-카르복실산 무수물이 완전히 소모되었고 하나의 주요 새로운 스팟이 검출되었음을 표시하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=20/1 내지 6:1)에 의해 정제하였다. 화합물 벤질 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-카르복실레이트 (1.5 g, 원액)를 황색 오일로서 수득하였다. 잔류물을 prep-HPLC([물 (10mM NH4HCO3)-ACN])에 의해 정제하였다. 벤질 (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5,6-테트라(프로파노일옥시) 테트라하이드로피란-2-카르복실레이트 (30 mg)를 백색 고체로서 수득하였다. 벤질 (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5,6-테트라(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-카르복실레이트 (100 mg)를 백색 고체로 수득하였다. 화합물 ID는 임시로 할당되었다.
단계 3
THF (5 mL) 중 벤질 (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5,6-테트라(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-카르복실레이트 (30 mg, 59.00 umol, 1 eq)의 용액에 Pd/C (3 mg, 59.00 umol, 10% 순도, 1.00 eq)를 첨가하였다. 현탁액을 탈기하고 H2로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 12시간 동안 25 ℃에서 H2 (15 Psi) 하에 교반하였다. LC-MS는 원하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 얻었다. 잔류물을 prep-HPLC([물 (0.1%TFA)-ACN])에 의해 정제하였다. 화합물 79, (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5,6-테트라 (프로파노일옥시) 테트라하이드로피란-2-카르복실산 (5.3 mg, 12.67 umol, 21.47% 수율, 100% 순도)을 황색 고체로 수득하였다. 화합물 ID는 임시로 할당되었다. 구조는 2D NMR에 의해 더 이상 확인되지 않았다. LCMS: (M+18)+: 436.1. @ 3.215 min. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.35 (s, 1H), 5.49 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.22 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 5.07 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.42 (s, 1H), 2.50 - 2.36 (m, 2H), 2.34 - 2.14 (m, 6H), 1.13 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 1.07 - 0.97 (m, 9H)
단계 4
THF (5 mL) 중 벤질 (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5,6-테트라(프로파노일옥시)테트라하이드로피란- 2-카르복실레이트 (50.00 mg, 98.33 umol, 1 eq)의 용액에 Pd/C (3 mg, 98.33 umol, 10% 순도, 1.00 eq)를 첨가하였다. 현탁액을 탈기하고 H2로 3회 퍼징하였다. 혼합물을 12시간 동안 25 ℃에서 H2 (15 Psi) 하에 교반하였다. LC-MS는 원하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 prep-HPLC([물(0.1%TFA)-ACN])에 의해 정제하였다. 화합물 80, (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5,6-테트라 (프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-카르복실산 (11 mg, 26.29 umol, 26.74% 수율, 100% 순도)을 황색 오일로서 수득하였다. 화합물 ID는 임시로 할당되었다. 구조는 2D NMR에 의해 더 이상 확인되지 않았다. LCMS: (M+18)+: 436.1 @ 3.125 min. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.84 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.42 - 5.27 (m, 2H), 5.19 (t, J = 8.3 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 2.46 - 2.24 (m, 8H), 1.18 - 1.06 (m, 12H)
Figure pct00168
화합물 81: (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5,6-테트라키스(부타노일옥시)옥산-2-카르복실산
이 화합물을 화합물 79 및 80의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+Na+): 492.2. 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.26 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.49 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 5.16 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 10.2, 3.7 Hz, 1H), 4.12 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 2.34 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.28 - 2.09 (m, 6H), 1.69 - 1.58 (m, 2H), 1.58 - 1.42 (m, 6H), 0.95 - 0.78 (m, 12H)
Figure pct00169
화합물 82: (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5,6-테트라키스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})옥산-2-카르복실산
Figure pct00170
DCM (10 mL) 중 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라하이드록시테트라하이드로피란-2-카르복실산 (0.2 g, 1.03 mmol, 1 eq) 및 3-(1H-인돌-3-일)프로판산 (1.17 g, 6.18 mmol, 6 eq)의 혼합물에 DIPEA (1.07 g, 8.24 mmol, 1.44 mL, 8 eq) 및 COMU (2.65 g, 6.18 mmol, 6 eq)를 N2 하에 25 ℃에서 한 부분씩 첨가하였다. 혼합물을 50 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 원하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge Prep OBD C18 150*40 10u;이동상: [물(10mM NH4HCO3)-ACN];B%: 30%-55%,11분)로 정제하여 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라키스[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일옥시]테트라하이드로피란-2-카르복실산 (88 mg, 8.77 umol, 8.51e-1% 수율, 96.37% 순도)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M-H+) 877.2 @ 1.375 min. LCMS: (M+18) 896.3 @ 2.832 min. 1 H NMR: (400 MHz, Methanol-d4): δ 7.5-6.8 (m, 20H), 5.8 (d, 1H), 5.4-5.3 (m, 1H), 5.3-5.2 (m, 1H), 5.2-5.1 (m, 1H), 4.1 (d, 1H), 3.0-2.0 (m, 16H)
Figure pct00171
화합물 83: (2R,3R,4R,5R)-3,5-비스(부타노일옥시)-2-메톡시옥산-4-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (m+H+) = 375.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.28 (t, 1H), 5.08 (q, 1H), 4.90 (td, 1H), 4.69 (d, 1H), 3.92 (dd, 1H), 3.68 (dd, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.39 - 2.16 (m, 6H), 1.54 (m, 6H), 0.88 (m, 9H).
Figure pct00172
화합물 84: (2R,3R,4R,5R)-2-메톡시-3,5-비스(프로파노일옥시)옥산-4-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (m+H+) = 355.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.26 (t, 1H), 5.07 (q, 1H), 4.94 - 4.84 (m, 1H), 4.71 (d, 1H), 3.92 (dd, 1H), 3.69 (dd, 1H), 3.35 (s, 3H), 2.45 - 2.17 (m, 6H), 1.02 (dt, 9H)
Figure pct00173
화합물 85: (2S,3R,4S,5S)-3,5-비스(부타노일옥시)-2-메톡시옥산-4-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 397.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.27 (dt, 1H), 5.24 (dd, 1H), 5.04 (dd, 1H), 4.90 (d, 1H), 3.89 (dd, 1H), 3.61 (dd, 1H), 3.32 (s, 3H), 2.39 - 2.13 (m, 6H), 1.65 - 1.42 (m, 6H), 0.97 - 0.80 (m, 9H).
Figure pct00174
화합물 86: (2S,3R,4S,5S)-2-메톡시-3,5-비스(프로파노일옥시)옥산-4-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 355.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.27 (dt, 1H), 5.23 (dd, 1H), 5.04 (dd, 1H), 4.90 (d, 1H), 3.89 (dd, 1H), 3.62 (dd, 1H), 3.32 (s, 3H), 2.45 - 2.10 (m, 6H), 1.12 - 0.91 (m, 9H).
Figure pct00175
화합물 87: [(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메톡시옥산-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 497.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 5.34 (dd, 1H), 5.00 (t, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.83 (dd, 1H), 4.14 (dd, 1H), 4.10 - 3.88 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 2.35 - 2.08 (m, 8H), 1.60 - 1.40 (m, 8H), 0.93 - 0.78 (m, 12H)
Figure pct00176
화합물 88: [(2R,3R,4S,5R,6S)-6-메톡시-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 441.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.32 (dd, 1H), 4.99 (t, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.85 (dd, 1H), 4.17 (dd, 1H), 4.06 (dd, 1H), 3.93 (ddd, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.39 - 2.11 (m, 8H), 1.09 - 0.92 (m, 12H)
Figure pct00177
화합물 89: [(2R,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메톡시옥산-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 497.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 5.40 (dd, 1H), 5.27 (dd, 1H), 5.04 (dd, 1H), 4.97 (d, 1H), 4.22 (t, 1H), 4.15 - 3.97 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.47 - 2.07 (m, 8H), 1.69 - 1.38 (m, 8H), 1.01 - 0.77 (m, 12H)
Figure pct00178
화합물 90: [(2R,3S,4S,5R,6S)-6-메톡시-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+): 441.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 5.40 (dd, 1H), 5.27 (dd, 1H), 5.05 (dd, 1H), 4.98 (d, 1H), 4.22 (ddd, 1H), 4.07 (d, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.49 - 2.11 (m, 8H), 1.15 - 0.94 (m, 12H)
Figure pct00179
화합물 91: [(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메톡시옥산-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+): 497.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 5.33 (t, 1H), 4.96 (t, 1H), 4.81 (dd, 1H), 4.19 (dd, 1H), 4.12 - 3.97 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.38 - 2.10 (m, 8H), 1.64 - 1.38 (m, 8H), 0.97 - 0.77 (m, 12H)
Figure pct00180
화합물 92: [(2R,3R,4S,5R,6R)-6-메톡시-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 441.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 5.31 (t, 1H), 4.95 (t, 1H), 4.80 (dd, 1H), 4.74 (d, 1H), 4.24 (dd, 1H), 4.10 - 3.99 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.41 - 2.13 (m, 8H), 1.09 - 0.91 (m, 12H)
Figure pct00181
화합물 93: [(2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메톡시옥산-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 497.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.30 (dd, 1H), 5.22 (dd, 1H), 4.99 (dd, 1H), 4.64 (d, 1H), 4.28 - 4.20 (m, 1H), 4.15 - 3.96 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 2.43 - 2.06 (m, 8H), 1.53 (ddq, 8H), 0.99 - 0.79 (m, 12H).
Figure pct00182
화합물 94: [(2R,3S,4S,5R,6R)-6-메톡시-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS (M+Na): 441.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.30 (dd, 1H), 5.20 (dd, 1H), 4.98 (dd, 1H), 4.65 (d, 1H), 4.24 (td, 1H), 4.18 - 4.01 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.48 - 2.08 (m, 8H), 1.03 (ddt, 12H)
Figure pct00183
화합물 95: (2S,3R,4R,5S)-6-하이드록시-4,5-비스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})-2-메틸옥산-3-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 95이 생산된 단계에서 합성이 정지된 것을 제외하고는 화합물 197에 대해 기술된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M-H): 676.3. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.77 - 6.47 (m, 18H), 5.42 - 5.32 (m, 1H), 5.29 - 5.22 (m, 1H), 5.12 - 5.03 (m, 1H), 4.69 - 4.62 (m, 1H), 4.41 - 4.35 (m, 1H), 3.87 - 3.81 (m, 1H), 3.20 - 3.00 (m, 4H), 2.90 - 2.75 (m, 4H), 2.74 - 2.59 (m, 2H), 2.12 - 1.97 (m, 2H), 1.22 - 1.07 (m, 3H)
Figure pct00184
화합물 96: (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5,6-테트라키스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})옥산-2-카르복실산
Figure pct00185
DCM (10 mL) 중 (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5,6-테트라하이드록시테트라하이드로피란-2-카르복실산 (200 mg, 1.03 mmol, 1 eq) 및 2-(1H-인돌-3-일)아세트산 (1.08 g, 6.18 mmol, 6 eq)의 혼합물에 COMU (2.65 g, 6.18 mmol, 6 eq) 및 DIPEA (1.07 g, 8.24 mmol, 1.44 mL, 8 eq)을 N2 하에 25℃에서 한 부분씩 첨가하였다. 혼합물을 50 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 원하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 prep-HPLC(칼럼: Waters Xbridge Prep OBD C18 150*40 10u;이동상: [물(10mM NH4HCO3)-MeOH];B%: 25%-45%,11분)로 정제하여 (2S,3S,4S,5R)-3,4,5,6-테트라키스(2-(1H-인돌-3-일)아세톡시)테트라하이드로-2H-피란-2-카르복실산 (5 mg, 5.48 μmol, 0.532% 수율, 90.23% 순도)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+18)+ 840.2 @ 2.594 min. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4) δ 7.53 - 6.79 (m, 20H), 5.69 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.39 - 5.02 (m, 3H), 4.61 (s, 1H), 3.67 - 3.18 (m, 4H), 3.15 - 2.90 (m, 4H).
Figure pct00186
화합물 97: (2S,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})-6-메틸옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.88 - 6.20 (m, 24H), 5.45 - 5.20 (m, 3H), 5.15 - 4.88 (m, 1H), 4.16 - 3.89 (m, 1H), 3.24 - 2.99 (m, 4H), 2.99 - 2.65 (m, 8H), 2.41 - 1.99 (m, 4H), 1.37 - 0.91 (m, 3H).
Figure pct00187
화합물 98: [(2R,3R,4S,5S,6S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메톡시옥산-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 497.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.28 - 5.08 (m, 3H), 4.78 (d, 1H), 4.21 - 4.07 (m, 2H), 3.94 (ddd, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.44 - 2.11 (m, 8H), 1.69 - 1.40 (m, 8H), 0.89 (m, 12H)
Figure pct00188
화합물 99: [(2R,3R,4S,5S,6S)-6-메톡시-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 441.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.25 - 5.15 (m, 1H), 5.14 (m, 2H), 4.80 (d, 1H), 4.20 (dd, 1H), 4.10 (dd, 1H), 3.95 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 2.48 - 2.18 (m, 8H), 1.14 - 0.93 (m, 12H)
Figure pct00189
화합물 100: (2R,3S,4R,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-메톡시옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 397.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.31 - 5.20 (m, 2H), 5.04 (dd, 1H), 4.90 (d, 1H), 3.89 (dd, 1H), 3.62 (dd, 1H), 3.32 (s, 3H), 2.40 - 2.13 (m, 6H), 1.65 - 1.42 (m, 6H), 0.97 - 0.78 (m, 9H)
Figure pct00190
화합물 101: (2R,3S,4R,5R)-2-메톡시-3,5-비스(프로파노일옥시)옥산-4-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 355.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.31 - 5.22 (m, 2H), 5.06 (dd, 1H), 4.92 (d, 1H), 3.91 (dd, 1H), 3.64 (dd, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.47 - 2.12 (m, 6H), 1.13 - 0.95 (m, 9H)
Figure pct00191
화합물 102: (2S,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+H+):835.3. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.84 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.69 (s, 1H), 7.59 - 7.45 (m, 5H), 7.34 - 7.25 (m, 2H), 7.22 - 7.06 (m, 10H), 7.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.68 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.37 - 5.28 (m, 2H), 5.07 (dd, J = 9.2, 3.4 Hz, 1H), 3.95 (dd, J = 13.0, 3.7 Hz, 1H), 3.74 (dd, J = 13.0, 2.0 Hz, 1H), 3.20 - 2.57 (m, 12H), 2.55 - 2.39 (m, 2H), 2.24 - 1.98 (m, 2H).
Figure pct00192
화합물 103: (2R,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})-6-메틸옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.78 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.54 - 7.46 (m, 2H), 7.51 - 7.37 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.26 - 7.16 (m, 2H), 7.16 - 6.92 (m, 11H), 6.87 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.67 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.36 (dd, J = 10.5, 8.3 Hz, 1H), 5.27 - 5.21 (m, 1H), 4.98 (dd, J = 10.5, 3.3 Hz, 1H), 3.98 - 3.86 (m, 1H), 3.18 - 2.51 (m, 12H), 2.40 - 2.22 (m, 2H), 1.99 - 1.76 (m, 2H), 1.21 - 1.11 (m, 3H)
Figure pct00193
화합물 104: (2S,3R,4S,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-메톡시옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 397.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 5.37 (t, 1H), 4.97 (ddd, 1H), 4.91 (d, 1H), 4.86 (dd, 1H), 3.80 (dd, 1H), 3.50 (t, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.37 - 2.13 (m, 6H), 1.53 (qd, 6H), 0.89 (td, 9H)
Figure pct00194
화합물 105: (2S,3R,4S,5R)-2-메톡시-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 355.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 5.35 (t, 1H), 4.96 (ddd, 1H), 4.91 (d, 1H), 4.87 (dd, 1H), 3.80 (dd, 1H), 3.51 (t, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.37 - 2.23 (m, 6H), 1.02 (td, 9H)
Figure pct00195
화합물 106: (2R,3R,4S,5R)-2-메톡시-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+) 355.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.24 (t, 1H), 4.90 (td, 1H), 4.81 (dd, 1H), 4.64 (d, 1H), 4.01 (dd, 1H), 3.55 (dd, 1H), 3.40 (s, 3H), 2.38 - 2.22 (m, 6H), 1.08 - 0.96 (m, 9H).
Figure pct00196
화합물 107: (2S,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
단계 1
프로피온산 무수물 (500 mL, 4 mol, 10 eq)을 교반막대가 구비된 2L 둥근 바닥 플라스크에서 L-아라비노오스 (60g, 0.4 mol, 1 eq)에 첨가하였다. 피리딘 (320 mL, 4 mol, 10 eq)을 플라스크에 가하고, 반응을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응을 1M HCl, 포화 중탄산 나트륨 및 염수로 세척하였다. 다음으로 프로피온산 무수물을 회전 증발에 의해 제거하여 170g의 미정제 (2S,3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라프로피오네이트를 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계로 전달하였다.
단계 2
벤질아민 (78.5 mL, 720 mmol, 5 당량)을 THF (500 mL) 중 (2S,3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라프로피오네이트 (62 g, 144 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 RT에서 첨가하였다. TLC가 출발 물질 (4-8 시간)의 완전한 소멸을 나타낸 경우, 반응을 1M HCl (375 mL)의 첨가에 의해 켄칭시키고, 혼합물을 에틸 아세테이트 (3X 500 mL)로 추출하였다. 유기상을 건조시키고, 실리카 플러그를 통해 당기고, 농축시켰다. 미정제 생성물을 칼럼 크로마토그래피 (헥산 중 100% 헥산 대 50% 에틸 아세테이트)를 사용하여 정제하여 (3R,4S,5S)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리프로피오네이트 (16 g, 44.3 mmol, 30.8% 수율)를 수득하였다.
단계 3
인돌-프로피온산 (23.0 g, 122 mmol, 1.5 eq), EDC HCl (23.4g, 122 mmol, 1.5 eq), 및 DMAP (15g, 122 mmol, 1.5 eq)을 실온에서 DCM (200 mL)에서 몇 분 동안 교반하였다. 화합물 (3R,4S,5S)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리프로피오네이트 (26 g, 81.6 mmol, 1 eq)를 첨가하고 용액을 밤새 교반하였다. 용액을 포화 염화 암모늄, 포화 중탄산 나트륨 및 염수로 세척한 다음, 실리카 상에 로딩하고 칼럼 크로마토그래피 (헥산 중 100% 헥산 대 50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물 (10.7 g, 21.8 mmol, 26.8% 수율)을 끈적한 고체로서 수득하였다. LCMS (M+Na+): 512.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.78 (s, 1H), 7.48 (dd, J = 7.7, 1.0 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 8.1, 1.1 Hz, 1H), 7.10 - 7.01 (m, 2H), 7.00 - 6.91 (m, 1H), 5.77 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.28 (dd, J = 9.7, 3.6 Hz, 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H), 5.09 (dd, J = 9.7, 7.6 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 13.2, 1.7 Hz, 1H), 3.87 (dd, J = 13.0, 2.8 Hz, 1H), 2.92 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.70 (td, J = 7.8, 7.4, 2.9 Hz, 2H), 2.37 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.27 - 2.05 (m, 4H), 1.04 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 0.95 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 0.89 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
Figure pct00197
화합물 108: (2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.79 (s, 1H), 7.56 - 7.43 (m, 1H), 7.31 (m, 1H), 7.13 (d, 1H), 7.05 (ddd, 1H), 6.96 (ddd, 1H), 6.13 (d, 1H), 5.33 (t, 1H), 5.06 - 4.92 (m, 2H), 3.80 (dd, 1H), 3.52 (t, 1H), 3.05 - 2.79 (m, 4H), 2.32 - 2.03 (m, 6H), 0.97 (m, 6H), 0.89 (t, 3H)
Figure pct00198
화합물 109: (2S,3R,4S,5R)-2-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+Na+):498.2. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.07 (s, 1H), 7.60 - 7.53 (m, 1H), 7.35 (dt, J = 8.2, 1.0 Hz, 1H), 7.24 - 7.16 (m, 2H), 7.16 - 7.09 (m, 1H), 5.74 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.19 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.05 (dd, J = 8.6, 7.0 Hz, 1H), 5.02 - 4.93 (m, 1H), 4.11 (dd, J = 12.0, 5.0 Hz, 1H), 3.81 (d, J = 0.9 Hz, 2H), 3.49 (dd, J = 12.0, 8.7 Hz, 1H), 2.36 - 2.17 (m, 4H), 2.12 - 1.85 (m, 2H), 1.14 - 1.03 (m, 6H), 0.94 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
Figure pct00199
화합물 110: (2R,3S,4R,5R,6S)-6-메틸-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+Na+):526.2. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.97 (s, 1H), 7.57 - 7.47 (m, 1H), 7.32 - 7.23 (m, 1H), 7.11 (ddd, J = 8.1, 7.1, 1.3 Hz, 1H), 7.04 (ddd, J = 8.0, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 6.97 - 6.89 (m, 1H), 5.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.28 (dd, J = 10.4, 8.3 Hz, 1H), 5.21 (dd, J = 3.5, 1.1 Hz, 1H), 5.03 (dd, J = 10.4, 3.4 Hz, 1H), 3.89 (qd, J = 6.4, 1.2 Hz, 1H), 3.13 - 2.95 (m, 2H), 2.79 - 2.61 (m, 2H), 2.49 - 2.30 (m, 2H), 2.21 - 1.93 (m, 4H), 1.26 - 1.09 (m, 6H), 1.00 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 0.91 (t, J = 7.6 Hz, 3H)
Figure pct00200
화합물 111: (2S,3R,4R,5S,6S)-6-메틸-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+Na+):411.1. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 6.03 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.33 (dd, J = 10.1, 3.5 Hz, 1H), 5.27 (dd, J = 3.5, 2.0 Hz, 1H), 5.15 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 4.00 - 3.88 (m, 1H), 2.51 - 2.37 (m, 4H), 2.37 - 2.19 (m, 4H), 1.27 - 1.04 (m, 15H).
Figure pct00201
화합물 112: (2R,3R,4S,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)옥사-2-일]옥시}옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00202
화합물 113: (2S,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (M+H+): 835.3. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.77 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.1 Hz, 3H), 7.46 - 7.38 (m, 2H), 7.25 (t, J = 8.4 Hz, 3H), 7.19 - 6.92 (m, 10H), 6.83 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.75 - 6.67 (m, 1H), 6.65 - 6.60 (m, 1H), 6.03 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.52 (s, 1H), 5.08 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 5.03 - 4.94 (m, 1H), 3.76 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.51 (dd, J = 11.2, 4.7 Hz, 1H), 3.06 - 2.86 (m, 8H), 2.67 - 2.38 (m, 8H).
Figure pct00203
화합물 114: (2R,3R,4S,5S)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+H+): 532.2. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4) δ 7.56 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.12 - 7.05 (m, 2H), 7.05 - 6.97 (m, 1H), 6.26 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.36 - 5.26 (m, 2H), 5.21 (dd, J = 10.5, 3.6 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 13.4, 1.3 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 13.4, 1.9 Hz, 1H), 3.21 - 3.04 (m, 2H), 2.87 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.44 - 2.34 (m, 2H), 2.22 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.06 - 1.95 (m, 2H), 1.73 - 1.61 (m, 2H), 1.64 - 1.52 (m, 2H), 1.45 (h, J = 7.3 Hz, 2H), 0.98 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.91 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.80 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Figure pct00204
화합물 115: (2S,3R,4S,5S)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+H+): 532.2. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4) δ 7.41 (dt, J = 7.9, 1.1 Hz, 1H), 7.21 (dt, J = 8.2, 1.0 Hz, 1H), 7.02 - 6.94 (m, 1H), 6.93 - 6.85 (m, 2H), 5.63 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.24 - 5.17 (m, 1H), 5.17 - 5.05 (m, 2H), 3.83 (dd, J = 13.1, 3.3 Hz, 1H), 3.76 (dd, J = 13.1, 1.9 Hz, 1H), 3.03 - 2.89 (m, 2H), 2.73 - 2.58 (m, 2H), 2.34 - 1.90 (m, 6H), 1.64 - 1.53 (m, 2H), 1.52 - 1.43 (m, 2H), 1.41 - 1.31 (m, 2H), 0.94 - 0.84 (m, 3H), 0.84 - 0.76 (m, 3H), 0.73 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Figure pct00205
화합물 116: (2S,3R,4R,5S,6S)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}-6-메틸옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00206
화합물 117: (2S,3S,4R,5R,6S)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}-6-메틸옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.05 (s, 1H), 7.61 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 7.19 (ddd, J = 8.2, 7.0, 1.3 Hz, 1H), 7.13 (td, J = 7.5, 1.2 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 5.40 - 5.22 (m, 3H), 4.01 - 3.91 (m, 1H), 3.20 - 3.08 (m, 2H), 2.84 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.47 - 2.32 (m, 2H), 2.20 (td, J = 7.3, 1.8 Hz, 2H), 2.04 (td, J = 7.3, 1.2 Hz, 2H), 1.76 - 1.41 (m, 6H), 1.04 - 0.87 (m, 9H), 0.83 (t, J = 7.4 Hz, 3H)
Figure pct00207
화합물 118: [(2R,3R,4S,5R,6S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}옥산-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.93 (s, 1H), 7.49 (dd, J = 7.8, 1.1 Hz, 1H), 7.28 (dt, J = 8.1, 1.0 Hz, 1H), 7.12 (ddd, J = 8.1, 7.0, 1.3 Hz, 1H), 7.04 (ddd, J = 8.1, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.68 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.26 - 5.17 (m, 1H), 5.14 - 5.05 (m, 2H), 4.14 (qd, J = 12.5, 3.4 Hz, 2H), 3.77 (ddd, J = 10.0, 4.5, 2.4 Hz, 1H), 3.06 - 2.97 (m, 2H), 2.78 - 2.61 (m, 2H), 2.30 - 2.22 (m, 2H), 2.24 - 2.09 (m, 4H), 2.03 (td, J = 7.4, 2.7 Hz, 2H), 1.63 - 1.36 (m, 8H), 0.91 - 0.72 (m, 12H).
Figure pct00208
화합물 119: (2R,3R,4R,5S,6S)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}-6-메틸옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00209
화합물 120: (2R,3S,4R,5R,6S)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}-6-메틸옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.96 (s, 1H), 7.57 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.23 - 7.15 (m, 1H), 7.15 - 7.07 (m, 1H), 7.00 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.41 - 5.30 (m, 1H), 5.32 - 5.27 (m, 1H), 5.10 (dd, J = 10.4, 3.4 Hz, 1H), 4.02 - 3.93 (m, 1H), 3.15 - 3.00 (m, 2H), 2.87 - 2.68 (m, 2H), 2.51 - 2.34 (m, 2H), 2.27 - 2.16 (m, 2H), 2.16 - 2.00 (m, 2H), 1.78 - 1.66 (m, 2H), 1.62 - 1.43 (m, 4H), 1.27 - 1.18 (m, 3H), 0.99 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.89 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.83 (t, J = 7.4 Hz, 3H)
Figure pct00210
화합물 121: (2R,3R,4S,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-메톡시옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 79 및 80에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+Na+) 397.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.26 (t, 1H), 4.90 (td, 1H), 4.82 (dd, 1H), 4.63 (d, 1H), 4.00 (dd, 1H), 3.54 (dd, 1H), 3.40 (s, 3H), 2.34 - 2.18 (m, 6H), 1.59 - 1.48 (m, 6H), 0.97 - 0.81 (m, 9H)
Figure pct00211
화합물 122: [(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}옥산-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.04 (s, 1H), 7.54 (dd, J = 7.8, 1.2 Hz, 1H), 7.29 (dt, J = 8.2, 1.0 Hz, 1H), 7.12 (ddd, J = 8.2, 7.0, 1.3 Hz, 1H), 7.09 7.00 (m, 2H), 6.26 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.37 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 5.05 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 4.97 (dd, J = 10.3, 3.7 Hz, 1H), 3.97 (dd, J = 12.5, 3.9 Hz, 1H), 3.86 (dd, J = 12.5, 2.3 Hz, 1H), 3.71 (ddd, J = 10.3, 4.0, 2.2 Hz, 1H), 3.17 3.00 (m, 2H), 2.81 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.23 (td, J = 7.4, 1.7 Hz, 2H), 2.20 2.08 (m, 4H), 2.00 1.87 (m, 2H), 1.62 1.46 (m, 6H), 1.47 1.34 (m, 2H), 0.91 0.80 (m, 9H), 0.74 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Figure pct00212
화합물 123: (2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.50 (s, 1H), 7.98 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 7.94 - 7.88 (m, 1H), 7.54 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 1H), 7.35 - 7.24 (m, 2H), 6.41 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 5.87 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.31 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 5.21 (dd, J = 8.8, 7.2 Hz, 1H), 5.07 (td, J = 8.7, 5.2 Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 11.9, 5.2 Hz, 1H), 3.58 (dd, J = 11.9, 9.0 Hz, 1H), 2.38 - 2.25 (m, 6H), 1.22 - 1.04 (m, 9H).
Figure pct00213
화합물 124: (2S,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.58 (s, 1H), 7.99 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 7.95 - 7.89 (m, 1H), 7.55 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.48 - 7.38 (m, 1H), 7.35 - 7.24 (m, 2H), 6.44 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.62 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 5.27 - 5.18 (m, 2H), 4.11 (dd, J = 12.3, 3.4 Hz, 1H), 3.95 (dd, J = 12.4, 5.8 Hz, 1H), 2.39 (ddd, J = 9.8, 4.8, 2.2 Hz, 6H), 1.21 - 1.10 (m, 9H)
Figure pct00214
화합물 125: (2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00215
화합물 126: (2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00216
화합물 127: (2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)-6-[(프로파노일옥시)메틸]옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.48 (s, 1H), 7.91 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 7.87 - 7.79 (m, 1H), 7.47 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.41 - 7.32 (m, 1H), 7.28 - 7.16 (m, 2H), 6.33 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.84 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.32 - 5.19 (m, 2H), 5.15 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 4.27 (dd, J = 12.5, 4.6 Hz, 1H), 4.08 (dd, J = 12.5, 2.2 Hz, 1H), 3.86 (ddd, J = 10.0, 4.6, 2.2 Hz, 1H), 2.37 - 2.14 (m, 8H), 1.11 - 0.95 (m, 12H).
Figure pct00217
화합물 128: (2R,3R,4S,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4) δ 7.58 (dt, J = 7.8, 1.1 Hz, 1H), 7.34 (dt, J = 8.1, 1.0 Hz, 1H), 7.15 - 7.07 (m, 2H), 7.03 (ddd, J = 8.0, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 6.28 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 5.41 - 5.28 (m, 2H), 5.23 (dd, J = 10.5, 3.6 Hz, 1H), 3.83 (dd, J = 13.3, 1.4 Hz, 1H), 3.65 (dd, J = 13.3, 2.0 Hz, 1H), 3.23 - 3.05 (m, 2H), 2.89 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 2.49 - 2.31 (m, 2H), 2.24 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.08 - 1.98 (m, 2H), 1.76 - 1.54 (m, 4H), 1.54 - 1.41 (m, 2H), 1.06 - 0.89 (m, 6H), 0.83 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Figure pct00218
화합물 129: (2S,3R,4S,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Methanol-d 4) δ 7.56 - 7.47 (m, 1H), 7.37 - 7.30 (m, 1H), 7.10 (ddd, J = 8.1, 6.9, 1.3 Hz, 1H), 7.06 - 6.97 (m, 2H), 5.79 - 5.70 (m, 1H), 5.37 - 5.29 (m, 1H), 5.29 - 5.17 (m, 2H), 3.95 (dd, J = 13.1, 3.3 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 13.1, 1.9 Hz, 1H), 3.15 - 3.00 (m, 2H), 2.83 - 2.72 (m, 2H), 2.48 - 2.34 (m, 2H), 2.22 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.18 - 2.00 (m, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 2H), 1.68 - 1.52 (m, 2H), 1.55 - 1.42 (m, 2H), 1.06 - 0.96 (m, 3H), 0.99 - 0.80 (m, 6H).
Figure pct00219
화합물 130: (2S,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00220
화합물 131: (2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)-6-[(프로파노일옥시)메틸]옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.59 (s, 1H), 8.09 - 7.99 (m, 2H), 7.61 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 1H), 7.39 - 7.31 (m, 2H), 6.58 - 6.49 (m, 2H), 5.68 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 5.29 - 5.18 (m, 2H), 4.33 (dd, J = 12.4, 4.2 Hz, 1H), 4.26 (ddd, J = 10.3, 4.2, 2.1 Hz, 1H), 4.15 (dd, J = 12.3, 2.1 Hz, 1H), 2.46 - 2.25 (m, 8H), 1.20 - 1.07 (m, 12H).
Figure pct00221
화합물 132: (2S,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00222
화합물 133: (2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00223
화합물 134: (2S,3R,4R,5S,6S)-6-메틸-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00224
화합물 135: (3S,4S,5R,6S)-6-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00225
화합물 136: (2S,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00226
화합물 137: (3R,4R,5R)-2-하이드록시-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00227
화합물 138: (2S,3R,4R,5R)-2-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00228
화합물 139: (2R,3R,4R,5S,6S)-6-메틸-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00229
화합물 140: (3S,4S,5R,6R)-6-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00230
화합물 141: [(2R,3R,4S,5R,6R)-6-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00231
화합물 142: [(2R,3R,4S,5R)-6-하이드록시-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00232
화합물 143: [(2R,3R,4S,5R,6S)-6-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00233
화합물 144: [(2R,3R,4S,5R,6S)-6-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS (M+Na+): 598.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 1H), 7.34 - 7.27 (m, 1H), 7.09 - 7.00 (m, 2H), 6.95 (ddd, J = 7.9, 6.9, 1.1 Hz, 1H), 5.99 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.45 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.02 - 4.89 (m, 2H), 4.27 - 4.15 (m, 2H), 4.03 - 3.94 (m, 1H), 2.97 - 2.84 (m, 2H), 2.79 - 2.63 (m, 2H), 2.34 - 1.98 (m, 8H), 1.05 - 0.82 (m, 12H).
Figure pct00234
화합물 145: (3R,4R,5S,6S)-2-하이드록시-6-메틸-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00235
화합물 146: [(2R,3R,4S,5R,6R)-6-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일]메틸 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00236
화합물 147: (2S,3R,4R,5S,6S)-2-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-6-메틸-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00237
화합물 148: (2S,3S,4R,5R,6S)-6-메틸-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 (2E)-3-(1H-인돌-3-일)프로프-2-에노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00238
화합물 149: (2R,3R,4S,5R)-2-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS (M+Na+): 498.2. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.10 (s, 1H), 7.63 - 7.56 (m, 1H), 7.33 - 7.26 (m, 1H), 7.18 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.17 - 7.06 (m, 2H), 6.21 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.42 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 4.98 - 4.87 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.74 (dd, J = 11.1, 5.9 Hz, 1H), 3.40 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 2.22 (qd, J = 7.6, 1.9 Hz, 4H), 1.96 (qd, J = 7.5, 4.2 Hz, 2H), 1.08 - 0.99 (m, 6H), 0.88 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
Figure pct00239
화합물 150: (2S,3S,4R,5R,6S)-2-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}-6-메틸-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
Figure pct00240
화합물 151: (2R,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메틸옥산-2-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.05 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 5.38 (dd, J = 3.5, 1.2 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 10.1, 3.4 Hz, 1H), 4.89 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 3.90-3.81 (m, 1H), 2.41-2.36 (m, 2H), 2.33-2.22 (m, 4H), 2.15 (td, J = 7.2, 1.2 Hz, 2H), 1.65-1.56 (m, 2H), 1.55-1.41 (m, 6H), 1.11 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.88-0.80 (m, 9H)
Figure pct00241
화합물 152: (2S,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메틸옥산-2-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00242
화합물 153: (2R,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})-6-메틸옥산-2-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 63에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00243
화합물 154: (2S,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})-6-메틸옥산-2-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00244
화합물 155: (2S,3S,4R,5R,6S)-6-메틸-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS (M+Na+): 526.2. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.08 (s, 1H), 7.65 - 7.57 (m, 1H), 7.35 (dt, J = 8.1, 1.0 Hz, 1H), 7.24 - 7.09 (m, 2H), 7.09 - 7.04 (m, 1H), 6.33 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.36 - 5.26 (m, 2H), 5.26 - 5.22 (m, 1H), 4.01 - 3.91 (m, 1H), 3.20 - 3.08 (m, 2H), 2.84 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.44 (qd, J = 7.6, 0.9 Hz, 2H), 2.24 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.09 (qd, J = 7.6, 1.8 Hz, 2H), 1.18 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 1.09 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 1.05 - 0.96 (m, 6H)
Figure pct00245
화합물 156: (3S,4R,5R,6S)-2-하이드록시-6-메틸-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00246
화합물 157: (3S,4R,5R,6S)-6-메틸-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00247
화합물 158: (2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS (M+Na+): 512.2. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.00 (s, 1H), 7.57 - 7.48 (m, 1H), 7.32 - 7.25 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.17 - 6.93 (m, 3H), 6.28 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 5.32 - 5.21 (m, 3H), 3.74 (dd, J = 13.2, 1.4 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 13.2, 1.9 Hz, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 2H), 2.77 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.35 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.19 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.04 (qd, J = 7.6, 1.6 Hz, 2H), 1.15 - 1.00 (m, 6H), 0.94 (t, J = 7.6 Hz, 3H)
Figure pct00248
화합물 159: (3S,4S,5R,6R)-6-하이드록시-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00249
화합물 160: (2S,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00250
화합물 161: (2R,3R,4S,5R)-2-하이드록시-4,5-비스(프로파노일옥시)옥산-3-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00251
화합물 162: (3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 프로파노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00252
화합물 163: [(3S,4S,5R)-2,3,4,5-테트라키스(부타노일옥시)옥산-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00253
화합물 164: (2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (m+Na+) 512.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.89 - 10.66 (m, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.10 - 7.01 (m, 2H), 6.95 (m, 1H), 5.84 (d, 1H), 5.30 (t, 1H), 4.96 - 4.84 (m, 2H), 3.97 (dd, 1H), 3.67 (dd, 1H), 2.92 (t, 2H), 2.70 (td, 2H), 2.31 - 2.10 (m, 6H), 1.05 - 0.85 (m, 9H)
Figure pct00254
화합물 165: [(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-하이드록시옥산-2-일]메틸 부타노에이트
Figure pct00255
화합물 166: [(2R,3R,4S,5R)-3,4,5,6-테트라키스(부타노일옥시)옥산-2-일]메틸 부타노에이트
Figure pct00256
단계 1:
DMF(50 mL) 중 2-하이드록시벤조산 (6 g, 43.44 mmol, 7.50 mL, 1eq) 및 CDI (8.45 g, 52.13 mmol, 1.2 eq)의 용액에 DBU(7.94 g, 52.13 mmol, 7.86 mL, 1.2eq) 및 t-BuOH (6.47 g, 87.32 mmol, 8.35 mL, 2.01 mL eq)를 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (ET14826-364-P1A)는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=1:0-2:1로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 삼차-부틸 2-하이드록시벤조에이트 (5 g, 25.74 mmol, 59.26% 수율)를 1H NMR에 의해 나타나는 무색 오일로 수득하였다. LCMS: (M-H+）：193.1 @ 1.988 min
단계 2:
DCM (500 mL) 중 (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥사날 (20 g, 111.02 mmol, 1 eq)의 용액에 부티릴 클로라이드 (94.63 g, 888.12 mmol, 92.77 mL, 8 eq)를 첨가하고 혼합물을 15℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음 피리딘 (70.25 g, 888.12 mmol, 71.68 mL, 8 eq)을 용액에 서서히 적가하였다. 첨가 후, 혼합물을 15℃에서 또 다른 16시간 동안 교반하였다. LCMS (ET14826-367-P1A)는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=1:0-5:1로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (3R,4S,5R,6R)-6-((부티릴옥시)메틸) 테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라부티레이트 (58 g, 109.31 mmol, 98.46% 수율)를 1H NMR에 의해 나타나는 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+18）：548.3 @ 1.640 min
단계 3:
THF (85 mL) 및 H2O (5 mL) 중 (3R,4S,5R,6R)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라부티레이트 (10 g, 18.85 mmol, 1 eq)의 용액에 메탄아민/THF (2 M, 12.25 mL, 1.3 eq)를 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (ET14826-370-P1A2)는 대부분의 출발 물질을 소비하였고 원하는 MS가 검출되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=10:1-1:1로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (2R,3R,4S,5R)-2-((부티릴옥시)메틸)-6-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (10 g, 21.50 mmol, 57.03% 수율, 99% 순도)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+18): 478.3 @ 1.478 min; LCMS: (M+Na+): 483.1 @ 3.678, 3.742 min
Figure pct00257
화합물 167: (3R,4R,5R)-6-하이드록시-4,5-비스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})옥산-3-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 표제 화합물을 생산하는 단계에서 합성이 정지된 것을 제외하고는 화합물 197에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00258
화합물 168: (3S,4R,5R,6S)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-하이드록시-6-메틸옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00259
화합물 169: (3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메틸옥산-2-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00260
화합물 170: (3R,4R,5R)-6-하이드록시-4,5-비스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})옥산-3-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 표제 화합물을 생산하는 단계에서 합성이 정지된 것을 제외하고는 화합물 197에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00261
화합물 171: (3S,4S,5R)-6-하이드록시-4,5-비스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})옥산-3-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 표제 화합물을 생산하는 단계에서 합성이 정지된 것을 제외하고는 화합물 197에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00262
화합물 172: (2S,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})옥산-2-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 107에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00263
화합물 173: (2S,3S,4R,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-6-하이드록시-2-메틸옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00264
화합물 174: (3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-메틸옥산-2-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00265
화합물 175: (2S,3S,4R,5R)-6-하이드록시-4,5-비스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})-2-메틸옥산-3-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 표제 화합물을 생산하는 단계에서 합성이 정지된 것을 제외하고는 화합물 197에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00266
화합물 176: (3S,4S,5R)-6-하이드록시-4,5-비스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})옥산-3-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 표제 화합물을 생산하는 단계에서 합성이 정지된 것을 제외하고는 화합물 197에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00267
화합물 177: (2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})옥산-2-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00268
화합물 178: (2S,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})옥산-2-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00269
화합물 179: (3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})-6-메틸옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00270
화합물 180: (2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})옥산-2-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00271
화합물 181: (2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS (M+H+): 835.3. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.68 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 10.5 Hz, 2H), 7.54 - 7.48 (m, 2H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.20 - 6.98 (m, 12H), 6.92 (dd, J = 13.6, 2.4 Hz, 2H), 6.60 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.27 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.32 (dd, J = 10.7, 3.5 Hz, 1H), 5.25 (s, 1H), 5.24 - 5.17 (m, 1H), 3.75 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.59 (dd, J = 13.2, 2.0 Hz, 1H), 3.13 - 2.94 (m, 4H), 2.90 - 2.67 (m, 8H), 2.31 - 2.02 (m, 4H)
Figure pct00272
화합물 182: (2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})옥산-2-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS (M+H+): 835.3. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.79 (d, J = 15.3 Hz, 3H), 7.69 (s, 1H), 7.53 - 7.43 (m, 4H), 7.27 - 7.14 (m, 4H), 7.14 - 7.06 (m, 4H), 7.02 (t, J = 7.4 Hz, 4H), 6.82 (s, 2H), 6.76 (s, 2H), 5.97 (s, 1H), 5.17 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 5.06 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 4.04 (s, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 1H), 3.81 (dd, J = 12.1, 5.7 Hz, 1H), 3.03 - 2.88 (m, 8H), 2.65 - 2.56 (m, 6H), 2.44 (t, J = 7.5 Hz, 2H)
Figure pct00273
화합물 183: (3S,4S,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-6-하이드록시옥산-3-일 부타노에이트
Figure pct00274
화합물 184: (2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)옥산-2-일 부타노에이트
Figure pct00275
단계 1:
DCM(100 mL) 중 (3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라올 (10 g, 66.61 mmol, 1 eq), TEA (53.92 g, 532.87 mmol, 74.17 mL, 8 eq) 및 DMAP (1.63 g, 13.32 mmol, 0.2 eq)의 용액에 부티르산 무수물 (52.69 g, 333.05 mmol, 54.48 mL, 5eq)을 0℃에서 첨가하였다. 용액을 1 시간 동안 0℃에 교반하고 15℃에서 다른 15 시간 동안 교반하였다. TLC는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=1:0으로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 184 (3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라부티레이트 (28 g, 65.04 mmol, 97.65% 수율, 100% 순도)를 황색 오일로 수득하였다. LCMS: (M+Na+）：453 @ 1.592 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 6.4 (m, 1H), 5.4-5.3 (m, 3H), 4.1-3.8 (m, 2H), 3.7-3.3 (m, 2H), 2.4 - 2.2 (m, 8H), 1.7 - 1.6 (m, 8H), 1.0 - 0.9 (m, 12H).
단계 2:
THF (200 mL) 및 H2O (10 mL) 중 화합물 184 (3R,4S,5S)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라부티레이트 (25 g, 58.07 mmol, 1 eq) 용액에 메탄아민/THF (2 M, 37.75 mL, 1.3 eq)를 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원하는 MS를 보였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=1:0-2:1로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 화합물 183 (3R,4S,5S)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트(14 g, 38.85 mmol, 33.45% 수율)를 황색 오일로 수득하였다. LCMS: (M+H2O+）：378 @ 2.833,2.934 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 5.5-5.4 (m, 1H), 5.4-5.3 (m, 1H), 5.3-5.1 (m, 2H), 4.6 (m, 1H) 4.3-4.0 (m, 1H), 3.7-3.6 (m, 1H), 2.4 - 2.3 (m, 6H), 1.7 - 1.6 (m, 6H), 1.0 - 0.9 (m, 9H)
Figure pct00276
화합물 185: (3R,4R,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-하이드록시옥산-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 21의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00277
화합물 186: [(2R,3R,4S,5R)-4-(부타노일옥시)-5-[(부타노일옥시)메틸]-5-하이드록시-3-{[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-[(부타노일옥시)메틸]옥산-2-일]옥시}옥솔란-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00278
화합물 187: [(2R,3R,4S,5S)-4,5-비스(부타노일옥시)-5-[(부타노일옥시)메틸]-3-{[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-[(부타노일옥시)메틸]옥산-2-일]옥시}옥솔란-2-일]메틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00279
화합물 188: (3R,4S,5R)-6-하이드록시-4,5-비스[(4-페닐부타노일)옥시]옥산-3-일 4-페닐부타노에이트
이 화합물을 WO 2018/226732의 설명에 따라 제조하였다. 1H NMR (CDCl3): δ 7.0-7.2 (m, 15H) 5.5 (dd, 1H), 5.4 (m, 1H), 4.8-5.0 (m, 2H), 4.1 (brs, 1 H), 3.8, (dd, 2H), 2.5-2.6 (m, 6H), 2.2-2.3 (m, 6H), 1.8-0.9 (m, 6H) ppm
Figure pct00280
화합물 189: (3R,4S,5R)-4,5,6-트리스[(4-페닐부타노일)옥시]옥산-3-일 4-페닐부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00281
화합물 190: (3R,4S,5R)-4,5-비스(부타노일옥시)-2-하이드록시옥산-3-일 부타노에이트
Figure pct00282
단계 1
CHCl3 (1 L) 중 피리딘 (316.13 g, 4.00 mol, 322.58 mL, 6 eq) 용액에 부타노일 클로라이드 (425.83 g, 4.00 mol, 417.48 mL, 6 eq) 및 DMAP (2.44 g, 19.98 mmol, 0.03 eq)을 0 ℃에서 첨가하였다. (2R,3S,4R)-2,3,4,5-테트라하이드록시펜타날 (100 g, 666.09 mmol, 1 eq)을 0 ℃에서 혼합물 내에 첨가하고 혼합물을 25 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 출발 반응물이 소모되었음을 나타냈다. 혼합물 반응을 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=20/1 내지 10:1 내지 3/1)에 의해 정제하였다. [(3R,4S,5R)-4,5,6-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-3-일] 부타노에이트 (165 g, 325.79 mmol, 48.91% 수율, 85% 순도)를 무색 오일로서 수득하였다.
단계 2
THF (800 mL) 중 [(3R,4S,5R)-4,5,6-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-3-일] 부타노에이트 (55 g, 127.76 mmol, 1 eq) 용액에 H2O 중 MeNH2 (14.88 g, 191.64 mmol, 40% 순도, 1.5 eq)를 첨가하였다. 혼합물을 25 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 출발 반응물이 소모되었음을 나타냈다. 혼합물 반응을 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=10/1 내지 5:1)에 의해 정제하였다. [(3R,4S,5R)-4,5-디(부타노일옥시)-6-하이드록시- 테트라하이드로피란-3-일] 부타노에이트 (50 g, 124.86 mmol, 48.87% 수율, 90% 순도)를 얻었다. 화합물을 다른 배치와 합쳤다. 총 99g을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+Na+): 383.1 @ 3.490 min. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.2-7.0 (m, 1H), 5.4-5.1 (m, 2H), 4.9-4.7 (m, 2H), 3.7-3,3 (m, 2H), 2.4 - 2.2 (m, 6H), 1.5 - 1.4 (m, 6H), 0.9 - 0.8 (m, 9H)
Figure pct00283
화합물 191: (2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)옥산-2-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00284
화합물 192: (3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)옥산-2-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00285
화합물 193: (2R,3R,4S,5S,6S)-2-(아세톡시메틸)-6-메톡시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트
이 화합물을 화합물 53의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
LCMS: (m+Na+) 385.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.16 - 5.07 (m, 3H), 4.79 (d, 1H), 4.17 (dd, 1H), 4.07 (dd, 1H), 3.95 - 3.87 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.04 (d, 6H), 1.95 (s, 3H)
Figure pct00286
화합물 194: (2S,3R,4R,5S,6R)-6-(아세톡시메틸)-3-아미노테트라하이드로-2H-피란-2,4,5-트리일 트리아세테이트
Boc 보호된 글루코사민을 아세트산 무수물에서 교반하고 정제한다. 그런 다음, 디옥산 중 HCl으로 탈보호하여 표제 화합물을 HCl 염으로 수득한다. LCMS: (M+Na+): 370.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 8.94 - 8.54 (m, 3H), 6.01 - 5.82 (m, 1H), 5.42 - 5.27 (m, 1H), 4.94 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 12.5, 4.4 Hz, 1H), 4.13 - 3.92 (m, 2H), 3.67 - 3.51 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.08 - 1.95 (m, 9H)
Figure pct00287
화합물 195: (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5,6-테트라아세톡시테트라하이드로-2H-피란-2-카르복실산
이 화합물을 화합물 79 및 80에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+NH4 +): 380.1. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 6.40 (s, 1H), 5.52 (t, J = 9.5 Hz, 1H), 5.32 - 5.22 (m, 1H), 5.16 - 5.08 (m, 1H), 4.46 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.08 - 2.00 (m, 9H).
Figure pct00288
화합물 196: (2S,3S,4S,5R,6S)-3,4,5,6-테트라아세톡시테트라하이드로-2H-피란-2-카르복실산
이 화합물을 화합물 79 및 80에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+NH4+): 380.0. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 5.81 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.39 - 5.26 (m, 2H), 5.22 - 5.10 (m, 1H), 4.32 - 4.22 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 2.12 - 2.03 (m, 9H).
Figure pct00289
화합물 197: 5-아미노-2-(((2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스((3-(1H-인돌-3-일)프로파노일)옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
3-인돌프로피온산 (20.0 g, 104 mmol) 및 디시클로헥실카르보디이미드 (10.3 g, 49.3 mmol)를 테트라하이드로푸란(345 mL)에 용해시켰다. 반응을 질소 하에 2 d간 교반하였다. 용액을 여과하고, 테트라하이드로푸란에 의해 세척하고, 여과물을 농축시켜 미정제 3-(1H-인돌-3-일)프로판산 무수물 (26 g, 69%)을 수득하였다.
미정제 3-(1H-인돌-3-일)프로판산 무수물 (26.0g, 72.1mmol)을 피리딘 (150 mL)에 질소 하에 용해시켰다. 4-디메틸아미노피리딘 (450 mg, 3.61 mmol) 및 d-(+)-자일로오스 (1.11 g, 7.43 mmol)를 추가하였다. 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 1 N 수성 염산을 첨가하고 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 농축시켰다. 미정제 물질을 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 60% 내지 65% 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3R,4S,5R)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라키스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트 (3.49g, 58%)를 황색 현탁액으로서 수득하였다. LCMS calcd for C49H46N4O9 834.33, found 833.6 [M-H] at 2.05 min.
(3R,4S,5R)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라키스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트) (1.06g, 1.27mmol)를 실온에서 아세토니트릴 (13.0 mL)에 용해시켰다. 수성 과염소산 (70 중량%, 110 μL, 1.27 mmol)을 첨가하고 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 물질을 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10mM 수성 암모늄 포르메이트 중 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, (3R,4S,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트 (121 mg, 14%)를 황색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, 3H), 7.46 - 7.34 (m, 3H), 7.25 (d, J = 10.6 Hz, 3H), 7.02 (m, 8H), 6.94 - 6.82 (m, 4H), 5.41 (t, J = 9.8 Hz, 0.5H), 5.26 (s, 0.3H), 5.16 (s, 1H), 4.92 - 4.69 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 2.84 (dd, J = 15.8, 7.8 Hz, 6H), 2.53 - 2.49 (m, 6H). LCMS calcd for C38H37N3O8 663.26, found 681.2 [M+NH4] at 1.80 min.
(3R,4S,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트) (121 mg, 182 μmol)를 N N-디메틸포름아미드 (600 μL)에 용해시켰다. 벤질 2-플루오로-5-니트로벤조에이트 (65.2mg, 237μmol)에 이어서 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (102 mg, 912 μmol)가 첨가되었을 때 용액을 실온에서 교반하였다. 교반을 2 d간 계속하였다. 그런 다음, 물을 첨가하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(SiO2, 헥산 중 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 (3R,4S,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트) (36.0mg, 21%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS calcd for C52H46N4O12 918.31, found 936 [M+NH4] at 2.10 min.
(3R,4S,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트) (36.0 mg, 39.2 μmol)을 메탄올 (800 μL)에 용해시키고 질소 하에 실온에서 교반하였다. 이 교반용액에, 탄소 상 팔라듐 (10 중량% 4.17 mg, 3.92 μmol)을 첨가하였다. 현탁액을 수소로 탈기하고 수소 하에 2시간 동안 교반되게 하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 분취 HPLC-MS (CSH 칼럼, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 3-카르복시-4-(((2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스((3-(1H-인돌-3-일)프로파노일)옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤젠암미늄 포르메이트 (4.20 mg, 13%)를 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.77 (t, J = 12.5 Hz, 3H), 8.40 (s, 3H), 7.53 - 7.38 (m, 3H), 7.28 (dd, J = 8.0, 4.8 Hz, 3H), 7.03 (dd, J = 13.2, 4.9 Hz, 6H), 6.96 - 6.85 (m, 3H), 6.82 - 6.67 (m, 2H), 6.53 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.29 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.06 - 5.01 (m, 1H), 4.91 (dd, J = 13.5, 8.3 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 11.6, 4.9 Hz, 1H), 3.60 - 3.51 (m, 1H), 2.91 - 2.79 (m, 7H), 2.74 - 2.67 (m, 1H), 2.63 - 2.54 (m, 4H). LCMS calcd for C45H42N4O10 798.29, found 816 [M+NH4] at 1.80 min.
Figure pct00290
화합물 198: 4-[3,5,7-트리스(부타노일옥시)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]페닐 부타노에이트
Figure pct00291
THF (20 mL) 중 3,5,7-트리하이드록시-2-(4-하이드록시페닐)크로멘-4-온(500 mg, 1.75 mmol, 1eq), TEA (883.80 mg, 8.73 mmol, 1.22 mL, 5 eq)의 혼합물에 부타노일 클로라이드 (930.62 mg, 8.73 mmol, 912.37 uL, 5 eq)을 0℃에서 서서히 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 N2 분위기 하에 5시간 동안 50℃에서 교반하였다. LC-MS는 반응물이 완전히 소모되었고 원하는 질량을 가진 하나의 주요 피크가 검출되었음을 보여주었다. 반응 혼합물을 25℃에서 H2O 200 mL를 첨가하여 켄칭한 다음 EtOAc 180 mL(60 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수 20 mL로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 얻었다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=5/1 내지 3:1)로 정제하였다. [4-[3,5,7-트리(부탄- 일옥시)-4-옥소-크로멘-2-일]페닐]부타노에이트 (437 mg, 734.02 umol, 42.02% 수율, 95.17% 순도)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H+) 567.2 @ 1.577 min; LCMS: (M+H+) 567.2 @ 3.520 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 12.10 (s, 1H), 7.88 - 7.58 (m, 2H), 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 2.87 - 2.37 (m, 8H), 1.41 - 1.12 (m, 12H)
Figure pct00292
화합물 199: 5-하이드록시-4-옥소-2-[4-(프로파노일옥시)페닐]-4H-크로멘-7-일 프로파노에이트
프로피온산 무수물 (641 uL, 5.03 mmol)을 1 mL 피리딘 중 5,7-디하이드록시-2-(4-하이드록시페닐)-4H-크로멘-4-온 (170 mg, 0.63 mmol)의 교반된 용액에 질소 하에 0℃에서 적가하였다. 반응을 실온에서 16시간 동안 교반한 후 20 mL 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기층을 10 mL 1M HCl로 2회 세척한 후 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 DMSO에 용해시키고 역상 플래쉬 크로마토그래피 (물 속의 10-90% 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 분획을 동결건조로 농축시켜 5-하이드록시-4-옥소-2-[4-(프로파노일옥시)페닐]-4H-크로멘-7-일 프로파노에이트 (48 mg, 20% 수율)를 백색 고체로 수득하였다. LCMS: (M+H) 383.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.83 (s, 1H), 8.21 - 8.15 (m, 2H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 7.11 (d, 1H), 6.68 (d, 1H), 2.65 (qd, 4H), 1.16 (t, 6H)
Figure pct00293
화합물 200: 3,5-비스(부타노일옥시)-4-옥소-2-[3,4,5-트리스(부타노일옥시)페닐]-4H-크로멘-7-일 부타노에이트
Figure pct00294
피리딘 (5 mL) 중 3,5,7-트리하이드록시-2-(3,4,5-트리하이드록시페닐)크로멘-4-온 (0.2 g, 628.47 umol, 1 eq), 부타노일 부타노에이트 (795.36 mg, 5.03 mmol, 822.50 uL, 8 eq)의 혼합물을 탈기하고 N2로 3회 퍼징하고, 그런 다음 혼합물을 N2 분위기 하에 20 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 반응이 완료되었고 하나의 새로운 스팟이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O (5 mL)로 세척하고, 여과하고 필터 케이크를 감압 하에 농축시켜 잔류물을 얻었다. 화합물 [3,5-디(부타노일옥시)-4-옥소-2-[3,4,5- 트라이(부타노일옥시)페닐]크로멘-7-일] 부타노에이트 (0.378 g, 501.43 μmol, 79.79% 수율, 98% 순도)를 미색 고체로 수득하였다. LCMS: (M+H+) 739.2 @ 3.587 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.62 (s, 2H), 7.35 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 2.74 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.69 - 2.52 (m, 10H), 1.91 - 1.70 (m, 12H), 1.12 - 0.98 (m, 18H).
Figure pct00295
화합물 201: 5-(부타노일옥시)-2-[4-(부타노일옥시)페닐]-4-옥소-4H-크로멘-7-일 부타노에이트
Figure pct00296
Py. (5 mL) 중 5,7-디하이드록시-2-(4-하이드록시페닐)크로멘-4-온 (500 mg, 1.85 mmol, 1eq)의 용액에 부타노일 부타노에이트 (1.76 g, 11.10 mmol, 1.82 mL, 6 eq)를 25℃에서 첨가하였다. 혼합물을 12 시간 동안 25 ℃에서 교반하였다. LCMS는 원하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 H2O (20 mL) 및 석유 에테르(20 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 화합물 [4-[5,7-디(부타노일옥시)-4-옥소-크로멘-2-일]페닐] 부타노에이트 (167 mg, 340.60 umol, 18.41% 수율, 98% 순도)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H+) 481.1 @ 3.244 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.92 - 7.83 (m, 2H), 7.34 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.28 - 7.22 (m, 2H), 6.83 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 2.72 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.58 (td, J = 7.4, 1.8 Hz, 4H), 1.87 - 1.74 (m, 6H), 1.12 - 1.02 (m, 9H)
Figure pct00297
화합물 202: 2-[3,4-비스(부타노일옥시)페닐]-5-(부타노일옥시)-4-옥소-4H-크로멘-7-일 부타노에이트
Figure pct00298
피리딘 (10 mL) 중 2-(3,4-디하이드록시페닐)-5,7-디하이드록시-크로멘-4-온 (500 mg, 1.75 mmol, 1 eq)의 용액에 부타노일 부타노에이트 (2.21 g, 13.97 mmol, 2.29 mL, 8 eq)를 25℃에서 첨가하였다. 혼합물을 12 시간 동안 25 ℃에서 교반하였다. LCMS는 원하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 H2O (20 mL) 및 석유 에테르(20 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 화합물 [2-부타노일옥시-4-[5,7-디(부타노일옥시)-4-옥소- 크로멘-2-일]페닐] 부타노에이트 (155 mg, 270.83 umol, 15.50% 수율, 99% 순도)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H+) 567.1 @ 3.385 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.76 - 7.66 (m, 2H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 6.83 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 2.72 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.62 - 2.51 (m, 6H), 1.91 - 1.72 (m, 8H), 1.11 - 1.01 (m, 12H).
Figure pct00299
화합물 203: 4-옥소-7-(프로파노일옥시)-2-[4-(프로파노일옥시)페닐]-4H-크로멘-5-일 프로파노에이트
Figure pct00300
피리딘 (5 mL) 중 5,7-디하이드록시-2-(4-하이드록시페닐)크로멘-4-온 (500 mg, 1.85 mmol, 1 eq)의 용액에 프로파노일 프로파노에이트 (1.44 g, 11.10 mmol, 1.43 mL, 6 eq)를 25℃에서 첨가하였다. 혼합물을 12 시간 동안 25 ℃에서 교반하였다. LCMS는 원하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 H2O (20 mL) 및 석유 에테르(20 mL)로 세척하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 화합물 [4-[4-옥소-5,7-디(프로파노일옥시)크로멘- 2-일]페닐] 프로파노에이트 (156 mg, 351.73 umol, 19.01% 수율, 98.85% 순도)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H+) 439.1 @ 3.130 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.94 - 7.86 (m, 2H), 7.38 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.32 - 7.24 (m, 2H), 6.87 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 2.80 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.66 (qd, J = 7.5, 1.8 Hz, 4H), 1.38 - 1.26 (m, 9H)
Figure pct00301
화합물 204: 5-아미노-2-[(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산
이 화합물을 화합물 34의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS[M-H]- : 494.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.83 - 6.75 (m, 2H), 6.64 - 6.53 (m, 1H), 5.58 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.53 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 5.03 - 4.90 (m, 2H), 3.89 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 3.73 (dd, J = 10.9, 5.9 Hz, 1H), 2.38 - 2.12 (m, 6H), 1.58 - 1.39 (m, 6H), 0.92 - 0.76 (m, 9H)
Figure pct00302
화합물 205: 5-아미노-2-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산
단계 1: 2-하이드록시-4-니트로-벤조에이트 (20g) 및 KHCO3 (13.1g)을 DMF(100 mL)에 현탁시켰다. 현탁액에 벤질 브로마이드 (22.4 g)을 첨가하고 반응 혼합물을 밤새 실온에서 교반하였다. 물 (150 mL)을 첨가하고 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트 (250 mL)로 추출하였다. 유기상을 분리하고 물, 염수로 2회 세척하고 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (헥산/에틸 아세테이트 구배)로 정제하였다. 헥산 중 15% 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 벤질 2-하이드록시-4-니트로-벤조에이트 (10.5 g)를 제공하였다.
단계 2: 벤질 2-하이드록시-4-니트로-벤조에이트 (8.5 g), 아라비노오스 트리부티레이트 (7.5 g) 및 트리페닐포스핀 (8.2 g)을 THF (150 mL)에 용해시키고 0 ℃에서 교반하였다. 이 혼합물에 디-t-부틸 아조디카르복실레이트 (7.2 g)를 첨가하고, 교반을 1 시간 동안 0 ℃에서, 이어서 실온에서 밤새 계속하였다. 반응 혼합물을 농축시키고 칼럼 크로마토그래피 (헥산 / 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 벤질 5-니트로-2-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조에이트 (1.78 g, 14%)를 제공하였다.
단계 3: 5-니트로-2-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조에이트 (0.095 g)를 메탄올 (15 mL)에 용해시키고 실온에서 교반하였다. 이 혼합물에 10% Pd/C (0.05g)를 첨가하였다. 현탁액을 실온에서 수소 분위기 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 Celite를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 합쳐진 여과물 및 세척을 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피 (C-18, 아세토니트릴 중 0.1% 트리플루오로아세트산 및 물 중 0.1% 트리플루오로아세트산)에 의해 정제하여 5-아미노-2-[(2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산 (0.045 g, 59%)을 수득하였다. MS 494.2 (M-H) NMR (DMSO d6): δ 7.223 (m, 1H), 7.139 (m, 1H), 6.997 (s, 1H), 7.851 (d, 1H), 5.469 (m, 1H), 5.350 (m, 1H), 5.239 (m, 1H) 4.127 (d, 1H), 3.672 (d, 1H), 2.490 - 2.369 (M, 6H), 1.596 - 1.485 (m, 6H), 0.924 - 0.818 (m, 9H) ppm
Figure pct00303
화합물 206: 2-(((2S,3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
단계 1:
THF (10 mL) 중 [(2S,3R,4R,5S)-4,5-디(부타노일옥시)-6-하이드록시-2-메틸-테트라하이드로피란-3-일] 부타노에이트 (0.95 g, 2.54 mmol) 및 삼차-부틸 2-하이드록시벤조에이트 (0.468 g, 2.41 mmol)의 혼합물에 삼차-부틸 (NE)-N-삼차-부톡시카르보닐이미노카르바메이트 (0.876 g, 3.81 mmol) 및 PPh3 (0.952 g, 3.63 mmol)을 N2 하에 15℃에서 한 부분씩 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜, prep-HPLC [물(10mM NH4HCO3)-ACN]로 정제하여 삼차-부틸 2-[(3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)-6-메틸- 테트라하이드로피란-2-일]옥시벤조에이트 (0.3 g, 0.544 mmol, 21% 수율)를 백색 고체로 수득하였다.
단계 2:
DCM (5 mL) 중 삼차-부틸 2-[(3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리(부타노일옥시)-6-메틸-테트라하이드로피란-2-일] 옥시벤조에이트 (0.15 g, 0.272 mmol)의 용액에 TFA (0.031 g, 0.27 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 prep-HPLC [물(0.1%TFA)-ACN]에 의해 정제하여 화합물 205 및 화합물 211을 얻었다.
화합물 205을 무색 오일로 제조하였다 (0.003 g, 1.9% 수율). LCMS: 517.2 (M+Na+); 1H NMR CDCl3 8.192 (m, 1H), 7.565 (m, 1H0, 7.441 (m, 1H), 7.255 (m, 1H), 5.813 (m, 1H), 5.525 - 5.444 (m, 3H), 4.413 (m, 1H), 2.460 (t, 2H), 2.356 (t, 2H), 2.233 (t, 2H), 1.627 (m, 6H), 1.225 (d, 3H), 1.028 (t, 3H), 0.938 (t, 3H), 0.919 (t, 3H)
Figure pct00304
화합물 207: 2-(((3S,4R,5R,6S)-6-메틸-3,4,5-트리스(프로피오닐옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
단계1
THF (10 mL) 중 [(2S,3R,4R,5S)-6-하이드록시-2-메틸-4,5-디(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-3-일] 프로파노에이트 (1 g, 3.01 mmol) 및 삼차-부틸 2-하이드록시벤조에이트 (1.17 g, 6.01 mmol)의 혼합물에 N2 분위기 하에 15℃에서 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (1.04 g, 4.51 mmol) 및 트리페닐포스핀 (2.77 g, 4.51 mmol)을 한 부분씩 첨가하였다. 혼합물을 15 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 prep-HPLC. [물(10mM NH4HCO3)-ACN]로 정제하여 삼차-부틸 2-[(3S,4R,5R,6S)-6-메틸-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시벤조에이트 (0.6 g, 39% 수율)를 황색 고체로 수득하였다.
단계 2
DCM (5 mL) 중 삼차-부틸 2-[(3S,4R,5R,6S)-6-메틸-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란 -2-일]옥시벤조에이트 (0.44 g, 0.865 mmol)의 혼합물에 TFA (0.099 g, 0.865 mmol)를 N2 분위기 하에 0℃에서 한 부분씩 첨가하였다. 혼합물을 12시간 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 prep-HPLC [물(0.1%TFA)-ACN]에 의해 정제하였다. 백색 고체로 2-[(3S,4R,5R,6S)-6-메틸-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-일] 옥시벤조산 (0.067 g, 15% 수율). MS 475.1 (M+Na) NMR (DMSO d6): δ 8.1 (m, 1H), 7.5 (m, 1H), 7.1 (m, 2H), 5.6 (m, 1H), 5.4 (m,1 H), 5.3 (m, 1H), 5.1 (m , 1H) 4.0 (m, 1H), 2.2 (m, 6H), 1.2 (m, 12H).
Figure pct00305
화합물 208: 2-(((2S,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스(프로피오닐옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
단계 1
THF (10 mL) 중 (3R,4S,5S)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리프로피오네이트 (188.47 mg, 592.09 umol, 1 eq), 삼차-부틸 2-하이드록시벤조에이트 (230 mg, 1.18 mmol, 2 eq) 및 트리페닐포스핀 (545.97 mg, 888.14 umol, 1.5 eq)의 용액에 디-삼차부티아조디카르복실레이트 (204.50 mg, 888.14 umol, 1.5 eq)를 0 ℃에서 첨가하였다. 혼합물을 16 시간 동안 15 ℃에서 교반하였다. TLC는 새로운 스팟이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트= 10:1 내지 1:1)에 의해 정제하였다. 화합물 삼차-부틸 삼차-부틸 2-[(3R,4S,5S)-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시벤조에이트 (200 mg, 404.42 umol, 68.30% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
단계 2
CH2Cl2 (1 mL) 중 삼차-부틸 2-[(3R,4S,5S)-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-일] 옥시벤조에이트 (100 mg, 202.21 umol, 1 eq)의 용액에 TFA (138.34 mg, 1.21 mmol, 89.83 uL, 6 eq)를 15 ℃에서 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 15 ℃에서 교반하였다. LCMS는 원하는 MS가 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 prep-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트= 1:1)에 의해 정제하였다. 화합물 2-[(3R,4S,5S)-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시벤조산 (30 mg, 32.84 μmol, 16.24% 수율, 46.66% 순도)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M-1) 437.1 NMR (CDCl3): δ8.2 (m, 1H), 7.4 (m, 1H), 7.2 (m, 2H), 5.3 (m, 4H), 4.0 (dd, 2H), 2.47 1.1 (m, 9H) ppm.
Figure pct00306
화합물 209: 2-(((2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(프로피오닐옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
단계 1:
THF (10 mL) 중 [(3R,4S,5R)-6-하이드록시-4,5-디(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-3-일] 프로파노에이트 (0.500 g, 1.57 mmol), 삼차-부틸 2-히드록시벤조에이트 (0.610 g, 3.14 mmol) 및 PPh3 (0.824 g, 3.14 mmol)의 용액에 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (0.723 g, 3.14 mmol)를 0 ℃에서 첨가하였다. 반응을 15 ℃에서 12 시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=30/1 내지 5:1)로 정제해서 삼차-부틸 2-[(3R, 4S, 5R)-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시벤조에이트 (0.320 g, 37% 수율)를 갈색 고체로 수득하였다.
단계 2:
CH2Cl2 (30 mL) 중 TFA(10mL) 용액에 삼차-부틸 2-[(3R,4S,5R)-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시벤조에이트 (0.300 g, 606 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 15 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물 반응을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 prep-HPLC (칼럼: Waters Xbridge Prep OBD C18 150*40 10u;이동상: [물(10mM NH4HCO3)-ACN];B%: 1%-50%,11분)에 의해 정제하여 2-[(3R,4S,5R)-3,4,5-트리(프로파노일옥시)테트라하이드로피란 -2-일]옥시벤조산 (0.010 g, 3.4% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. MS 437.1 (M-H) NMR (DMSO d6): δ 7.5 (m, 1H), 7.3 (m, 1H), 7.1 (m, 1H), 7.0 (m, 1H), 5.9 (m, 1H), 5.6 (1H) 5.0 (m, 2H), 4.0 (m, 1H), 3.7 (m, 1H), 2.2 (m, 6 H), 0.97 (m, 9 H).
Figure pct00307
화합물 210: 2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
DMF(50 mL) 중 2-하이드록시벤조산 (6 g, 43.44 mmol, 7.50 mL, 1eq) 및 CDI (8.45 g, 52.13 mmol, 1.2 eq)의 용액에 DBU(7.94 g, 52.13 mmol, 7.86 mL, 1.2eq) 및 t-BuOH (6.47 g, 87.32 mmol, 8.35 mL, 2.01 mL eq)를 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS(ET14826-364-P1A)는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=1:0-2:1로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 삼차-부틸 2-하이드록시벤조에이트 (5 g, 25.74 mmol, 59.26% 수율)를 수득하였다
DCM (500 mL) 중 (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-펜타하이드록시헥사날 (20 g, 111.02 mmol, 1 eq)의 용액에 부티릴 클로라이드 (94.63 g, 888.12 mmol, 92.77 mL, 8 eq)를 첨가하고 혼합물을 15℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음 피리딘 (70.25 g, 888.12 mmol, 71.68 mL, 8 eq)을 용액에 서서히 적가하였다. 첨가 후, 혼합물을 15℃에서 또 다른 16시간 동안 교반하였다. LCMS(ET14826-367-P1A)는 반응이 완료되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=1:0-5:1로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (3R,4S,5R,6R)-6-((부티릴옥시)메틸) 테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라부티레이트 (58 g, 109.31 mmol, 98.46% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
THF (85 mL) 및 H2O (5 mL) 중 (3R,4S,5R,6R)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라부티레이트 (10 g, 18.85 mmol, 1 eq)의 용액에 메탄아민/THF (2 M, 12.25 mL, 1.3 eq)를 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (ET14826-370-P1A2)는 대부분의 출발 물질을 소모하였고 원하는 MS가 검출되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트=10:1-1:1로 용리된 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (2R,3R,4S,5R)-2-((부티릴옥시)메틸)-6-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (10 g, 21.50 mmol, 57.03% 수율, 99% 순도)를 황색 오일로서 수득하였다.
THF (20 mL) 중 (2R,3R,4S,5R)-2-((부티릴옥시)메틸)-6-하이드록시테트라하이드로-2H-피란- 3,4,5-트리일 트리부티레이트 (0.85 g, 1.85 mmol, 1 eq) 및 삼차-부틸 2-하이드록시벤조에이트 (340.57 mg, 1.75 mmol, 0.95 eq)의 용액에 PPh3 (692.29 mg, 2.64 mmol, 1.43 eq) 및 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (637.51 mg, 2.77 mmol, 1.5 mmol eq)를 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응을 완료하였고 원하는 MS가 검출되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 p-HPLC (칼럼: Phenomenex Luna C18 200*40mm*10um; 이동상: [물 (0.1%TFA)-ACN]; B%: 75%-95%,10분)에 의해 정제하여 (3R,4S,5R,6R)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)페녹시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (0.2 g, 314.11 umol, 17.02% 수율)을 갈색 오일로서 수득하였다.
DCM(10 mL) 중 (3R,4S,5R,6R)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)페녹시)-6-((부티릴옥시)메틸) 테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (0.2 g, 314.11 umol, 1 eq)의 용액에 TFA (1.54 g, 13.51 mmol, 1 mL, 43.00 eq)를 첨가하였다. 그런 다음 용액을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응을 완료하였고 원하는 MS가 검출되었음을 보여주었다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 p-HPLC (칼럼: Nano-마이크로 Kromasil C18 100*30mm 5um;이동상: [물(0.1%TFA)-ACN];B%: 60%-78%,10분)에 의해 정제하여 표제 화합물 (24 mg, 40.10 umol, 12.76% 수율, 97% 순도, 임시로 할당됨)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+ 18): 598.2 NMR (DMSO d6): δ 8.1 (d, 1H), 7.5 (dd, 1H), 7.4 (d, 1H), 7.2 (m, 1H), 5.8 (m, 1H), 5.6 (t, 1H), 5.2 (m, 2H), 4.1 (m, 3H), 2.3 (m, 8H), 1.6 (m, 8H), 0.87 (m, 12H) ppm.
Figure pct00308
화합물 211: 2-(((3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
화합물 211을 무색 오일로 제조하였다 (0.03 g, 22% 수율). LCMS: 517.2 (M+Na+); 1H NMR CDCl3 8.080 (m, 1H), 7.491 (m, 1H), 7.164 (m, 1H), 7.086 (m, 1H), 5.494 (m, 1H), 5.292 (m, 1H), 5.197 (m, 1H), 5.133 (m, 1H), 3.946 (m, 1H), 2.413 - 2.153 (m, 6H), 1.653 - 1.546 (m, 6H), 1.204 (d, 3H), 0.946 (t, 3H), 0.869 (t, 3H), 0.850 (t, 3H).
Figure pct00309
화합물 212: 2-(((2S,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
화합물 212을 화합물 211에 대해 유사한 물질로 제조하였다. 화합물 212을 27% 수율 (15 mg)로 제조하였다. LCMS: 503 (M+Na+); 1H NMR CDCl3 8,095 (m, 1H), 7.484 (m, 1H), 7.326 (m, 1H), 7.154 (m, 1H), 5.775 (d, 1H), 5.482 - 5.404 (m, 3H), 4.084 (d, 1H), 3.840 (d, 1H), 2.372 - 2.276 (m, 6H), 1.658 - 1.497 (m, 6H), 0.937 (t, 3H), 0.863 (t, 3H), 0.823 (t, 3H).
Figure pct00310
화합물 213: 2-(((2R,3R,4S,5S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
단계 1:
THF (50 mL) 중 DCC (8 g, 38.8 mmol)의 용액을 t-BuOH (100 mL) 중 2-하이드록시벤조산 (5 g, 36.2 mmol) 및 DMAP (0.17 g, 1.39 mmol)의 용액에 적가하고, 혼합물을 15 ℃에서 16 시간 동안 교반하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (석유 에테르/에틸 아세테이트=1:0)로 정제하여 삼차-부틸 2-하이드록시벤조에이트 (3 g, 42.7%)를 무색 오일로 수득하였다.
단계 2:
THF (30 mL) 중 (3R,4S,5S)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (0.7 g, 1.94 mmol) 및 삼차-부틸 2-하이드록시벤조에이트 (0.358 g, 1.85 mmol)의 용액에 PPh3 (0.728 g, 2.78 mmol) 및 DBAD (0.671 g, 2.91 mmol)을 부분씩 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 15 ℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 prep-HPLC (칼럼: Agela innoval ods-2 250*80mm;이동상: [물(0.1%TFA)-ACN];B%: 37%-67%,20분)에 의해 정제하여 (3R,4S,5S)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (0.4 g, 0.745 mmol, 38.4%)를 황색 오일로서 수득하였다.
단계 3:
DCM (10 mL) 중 (3R,4S,5S)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (0.2 g, 0.37 mmol)의 용액에 TFA (3.08 g, 27 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음 혼합물을 15 ℃에서 16시간 동안 N2 하에 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 prep-HPLC (칼럼: Waters Xbridge 150*25 5u;이동상: [물(0.1%TFA)-ACN];B%: 47%-67%,12분)에 의해 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. LCMS: 503 (M+Na+); 1H NMR CDCl3 8.202 (m, 1H), 7.567 (m, 1H), 7.264 - 7.213 (m, 2H), 5.480 - 5.351 (m, 4H), 4.061 (m, 1H), 3.8 (m, 1H), 2.425 - 2.297 (m, 6H), 1.688 - 1.650 (m, 6H), 0.959 (m, 9H)
Figure pct00311
화합물 214: 5-아미노-2-(((2S,3R,4S,5R)-3,4-비스(부티릴옥시)-5-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
돼지 췌장(200 mg) 유래의 판크레아틴 및 FaSSIF/FeSSIF/FaSSGF 분말(44.8 mg, biorelevant.com으로부터 구함)을 20 mL의 SIF 완충액(10.5 mM 수산화나트륨, 28.6 mM 제일인산나트륨 일수화물, 106 mM 염화나트륨, pH 6.5)에 현탁시키고 37℃에서 30분 동안 실험실 로커(laboratory rocker)에서 배양하였다. 그런 다음 화합물 34 (200 mg, 0.404 mmol, 1 eq)를 SIF 현탁액 20 mL에 첨가하고 37℃에서 밤새 락킹하였다. 현탁액을 분별 깔때기에 첨가하고 추가 물(20 mL)로 희석시켰다. 생성물을 디클로로메탄 (40 mL)으로 3회 추출한 후, 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 염을 여과해낸 후, 용액을 회전 증발에 의해 농축시키고, 주사 및 역상 C18 칼럼 크로마토그래피 (기울기: 탈이온화된 물 중 10% 아세토니트릴 내지 100% 아세토니트릴)에 의한 정제 전에 DMSO에 재용해시켰다. 분획 함유 생성물을 동결건조시켜 표제 화합물을 백색 분말로 수득하였다 (95 mg, 0.223 mmol, 55% 수율). LCMS[M-H]- : 424.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.84 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 8.7, 2.9 Hz, 1H), 5.41 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 5.02 - 4.93 (m, 2H), 4.84 (dd, J = 9.7, 7.8 Hz, 1H), 3.83 (dd, J = 11.3, 5.5 Hz, 1H), 3.71 - 3.59 (m, 1H), 3.38 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.33 - 2.08 (m, 4H), 1.56 - 1.40 (m, 4H), 0.89 - 0.77 (m, 6H).
Figure pct00312
화합물 215: 5-아미노-2-(((2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리아세톡시테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
(3R,4S,5R)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라아세테이트 (3.90g, 12.3mmol)를 테트라하이드로푸란 (80.0 mL)에 용해시켰다. 메틸아민 (물 중 40 중량%, 1.59 mL, 18.4 mmol)이 적가되었을 때 용액을 실온에서 교반하였다. 혼합물을 밤새 교반하고 농축시켜 미정제 (3R,4S,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트를 갈색 오일로서 수득하였다.
미정제 (3R,4S,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (500 mg, 1.81 mmol)를 실온에서 N N-디메틸포름아미드 (4.00 mL)에 용해시켰다. 벤질 2-플루오로-5-니트로벤조에이트 (752 mg, 2.73 mmol)에 이어서 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (1.06 g, 9.36 mmol)이 첨가되었을 때 용액을 교반하였다. 교반을 90시간 동안 계속하였다. 물 (50 mL)을 첨가하고 혼합물을 에틸 아세테이트 (5 x 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물 (20 mL), 염수 (2 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(40 g, SiO2, 헥산 중 0 내지 60% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (2S,3R,4S,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (413 mg, 43%)를 담황색 발포체로서 수득하였다. LCMS calcd for C25H25O12 531.14, found 554.4 [M+Na] at 1.86 min.
(2S,3R,4S,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (413mg, 0.777mmol)를 실온에서 메탄올 (3.00 mL)에 용해시켰다. 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 50.0 mg, 0.0470 mmol)이 첨가되었을 때 용액을 질소 하에 교반하였다. 혼합물을 수소로 탈기한 다음 수소 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 celite 상에서 여과하고 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 미정제 물질을 N N-디메틸포름아미드(10% 물) 중의 용액으로서 자동화 역상 크로마토그래피(24 g, C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 5 내지 40% 아세토니트릴)로 정제하였다. 동결건조 후, 5-아미노-2-(((2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리아세톡시테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (59.8 mg, 19%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.62 (dd, J = 8.7, 2.9 Hz, 1H), 5.21 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.96 (dd, J = 9.0, 7.0 Hz, 1H), 4.89 (td, J = 8.9, 5.2 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 11.6, 5.2 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 11.6, 9.1 Hz, 1H), 2.02 - 1.97 (m, 9H). LCMS calcd for C18H21O10 411.12, found 410.3 [M-H] at 1.10 min.
Figure pct00313
화합물 216: 5-아미노-2-(((2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리아세톡시테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
D-(-)-리보오스 (1.99 g, 13.1 mmol)를 질소 하에 피리딘(40 mL)에 용해시켰다. 아세트산 (10.0 mL, 106 mmol)에 이어서 4-디메틸아미노피리딘 (126 mg, 1.01 mmol)이 첨가되었을 때 용액을 교반하였다. 교반을 밤새 계속하고 물 (150 mL)을 첨가하고, 1시간 동안 추가 교반한 후, 혼합물을 에틸 아세테이트 (3 x 40 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 포화 수성 NaHCO3 (3 x 50 mL), 물 (50 mL), 염수 (2 x 50 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 담황색 오일을 수득하였다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(80 g, SiO2, 헵탄 중 0 내지 80% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (3R,4R,5R)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라아세테이트 (3.90 g, 93%)를 무색 오일로서 수득하였다.
(3R,4R,5R)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라아세테이트 (3.6 g, 11.3 mmol)을 실온에서 아세토니트릴 (14.0 mL)에 용해시켰다. 수성 과염소산 (70 중량%, 974 μL, 11.3 mmol)을 한 부분에 첨가하고 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 수성 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 미정제 (3R,4R,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (1.11 g, 36%)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.02 (s, 1H, OH), 5.93 - 5.82 (m, 1H), 5.51 - 5.04 (m, 1H), 4.99 - 4.44 (m, 2H), 3.98 - 3.38 (m, 2H), 2.12 - 1.91 (m, 9H).
(3R,4R,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (1.11g, 4.02mmol)를 N N-디메틸포름아미드 (7.0 mL)에 용해시켰다. 벤질 2-플루오로-5-니트로벤조에이트 (1.11g, 4.02mmol)에 이어서 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (2.28 g, 20.1 mmol)이 첨가되었을 때 실온에서 용액을 교반하였다. 교반을 2 d간 계속하였다. 그런 다음, 물을 첨가하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(SiO2, 헥산 중 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 (3R,4R,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (295 mg, 14%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.70 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.31 (dd, J = 9.2, 2.9 Hz, 1H), 7.44 - 7.27 (m, 6H), 6.00 (d, J = 4.8 Hz, 0.5 Ha), 5.73 (d, J = 2.7 Hz, 1Ha'), 5.46 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 5.38 (app q, J = 12.1 Hz, 2H), 5.29 - 5.26 (m, 1H), 5.15 - 4.99 (m, 2H), 4.02 - 3.94 (m, 2H), 3.80 (dd, J = 12.9, 3.1 Hz, 1H), 2.20 - 1.97 (m, 9H). LCMS calcd for C25H25NO12 531.14, found 554.3 [M+Na] at 1.79 min.
(3R,4R,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리아세테이트 (280 mg, 527 μmol)를 메탄올 (5.0 mL)에 용해시켰다. 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 22.4 mg, 21.1 μmol)를 질소 하에 교반 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소로 탈기하고 수소 하에 2 시간 동안 교반되게 하였다. 혼합물을 celite 패드를 통해 여과하고 메탄올 및 디클로로메탄으로 세척하였다. 여과물을 농축시키고 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 15 내지 25% 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 백색 고체로서 5-아미노-2-(((2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리아세톡시테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (26.7 mg, 12%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.85 (dd, J = 5.6, 2.7 Hz, 2H), 6.60 (dd, J = 8.6, 2.5 Hz, 1H), 5.36 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 5.31 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.15 (t, J = 3.3 Hz, 1H), 5.09 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 4.18 (dd, J = 12.8, 1.9 Hz, 1H), 3.73 (dd, J = 12.7, 3.7 Hz, 1H), 2.04 (d, J = 4.3 Hz, 7H), 1.93 (s, 3H). LCMS calcd for C18H21NO10 411.12, found 412.1 [M+H] at 1.02 min
Figure pct00314
화합물 217: 5-아미노-2-(((2R,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
(3R,4R,5S,6S)-2-하이드록시-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (316 mg, 0.844 mmol), 벤질 2-하이드록시-5-니트로벤조에이트 (355 mg, 1.30 mmol) 및 트리페닐포스핀 (374 mg, 1.43 mmol)을 실온에서 질소 하에 건조 테트라하이드로푸란 (2.50 mL)에 용해시켰다. 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (299 mg, 1.27 mmol)가 한 부분에 첨가되었을 때 용액을 0℃에서 교반하였다. 30분 동안 추가 교반한 후, 플라스크를 냉각 욕으로부터 제거하고, 혼합물을 실온까지 가온하고 밤새 교반되게 하였다. 혼합물을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(40 g, SiO2, 헥산 중 0 내지 30% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (2R,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (197 mg, 37%)를 수득하였다. LCMS calcd for C32H39NO12 629.25, found 647.0 [M+NH4] at 2.20 min.
(2R,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (197 mg, 0.313 mmol)를 실온에서 메탄올 (2.50 mL)에 용해시켰다. 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 2.30 mg, 0.0216 mmol)이 한 부분에 첨가되었을 때 용액을 질소 하에 교반하였다. 현탁액을 교반하고, 수소로 탈기하고, 수소 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 celite 상에 여과시켰다. 미정제 물질을 농축시키고 N N-디메틸포름아미드 (10% 물) 중 용액으로서 자동화된 역상 크로마토그래피 (12 g, C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 10 내지 60% 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 5-아미노-2-(((2R,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (78.4 mg, 49%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.89 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.65 (dd, J = 8.7, 2.9 Hz, 1H), 5.58 (dd, J = 3.3, 0.9 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 5.18 (dd, J = 10.2, 3.4 Hz, 1H), 5.05 (br s, 2H), 4.90 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 3.80 - 3.70 (m, J = 6.2 Hz, 1H), 2.41 - 2.34 (m, 2H), 2.33 - 2.22 (m, 2H), 2.14 (td, J = 7.2, 3.2 Hz, 2H), 1.66 - 1.56 (m, 2H), 1.56 - 1.42 (m, 4H), 1.12 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.89 - 0.80 (m, 6H). LCMS calcd for C25H35NO10 509.23, found 508.3 [M-H] at 1.74 min.
Figure pct00315
화합물 218:5-아미노-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
2R,3R,4S,5R)-2-((부티릴옥시)메틸)-6-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (239 mg, 519 μmol)를 N N-디메틸포름아미드 (1 mL)에 용해시켰다. 벤질 2-플루오로-5-니트로벤조에이트 (186 mg, 675 μmol)에 이어서 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (294 mg, 2.59 mmol)가 첨가되었을 때 용액을 실온에서 교반하였다. 교반을 2 d간 계속하고 물을 첨가하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(SiO2, 헥산 중 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 (3R,4S,5R,6R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (169 mg, 45%)를 수득하였다. LCMS calcd for C36H45NO14 715.28, found 733.6 [M+NH4] at 2.26 min.
(3R,4S,5R,6R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (169 mg, 236 μmol)을 실온에서 메탄올 (5.0 mL)에 용해시켰다. 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 25.1 mg, 23.6 μmol)이 한 부분에 첨가되었을 때 용액을 질소 하에 교반하였다. 그런 다음, 용매를 수소로 탈기하고 반응을 수소 하에 2시간 동안 교반되게 하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 celite 상에 여과시켰다. 미정제 물질을 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 25% 내지 65% 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 5-아미노-2-(((2S,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (32.3 mg, 23%)을 백색 고체로 수득하였다 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.88 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 8.8, 2.8 Hz, 1H), 5.36 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.03 - 4.93 (m, 3H), 4.18 - 4.05 (m, 2H, H), 2.30 - 2.09 (m, 8H), 1.58 - 1.39 (m, 8H), 0.90 - 0.77 (m, 12H). LCMS calcd for C29H41NO12 595.26, found 613.3 [M+NH4].
Figure pct00316
화합물 219: 5-아미노-2-(((2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스((3-(1H-인돌-3-일)프로파노일)옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
3-인돌프로피온산 (20.0 g, 104 mmol) 및 디시클로헥실카르보디이미드 (10.3 g, 49.3 mmol)를 테트라하이드로푸란(345 mL)에 용해시켰다. 반응을 질소 하에 2 d간 교반하였다. 용액을 여과하고, 테트라하이드로푸란에 의해 세척하고, 여과물을 농축시켜 미정제 3-(1H-인돌-3-일)프로판산 무수물 (26 g, 69%)을 수득하였다.
미정제 3-(1H-인돌-3-일)프로판산 무수물 (26.0g, 72.1mmol)을 피리딘 (150 mL)에 질소 하에 용해시켰다. 4-디메틸아미노피리딘 (450 mg, 3.61 mmol) 및 d-(+)-자일로오스 (1.11 g, 7.43 mmol)을 추가하였다. 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 1 N 수성 염산을 첨가하고 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 농축시켰다. 미정제 물질을 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 60% 내지 65% 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3R,4S,5R)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라키스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트 (3.49g, 58%)를 황색 현탁액으로서 수득하였다. LCMS calcd for C49H46N4O9 834.33, found 833.6 [M-H] at 2.05 min.
(3R,4S,5R)-테트라하이드로-2H-피란-2,3,4,5-테트라일 테트라키스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트) (1.06g, 1.27mmol)를 실온에서 아세토니트릴 (13.0 mL)에 용해시켰다. 수성 과염소산 (70 중량%, 110 μL, 1.27 mmol)을 첨가하고 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 물질을 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10mM 수성 암모늄 포르메이트 중 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, (3R,4S,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트 (121 mg, 14%)를 황색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.75 (s, 3H), 7.46 - 7.34 (m, 3H), 7.25 (d, J = 10.6 Hz, 3H), 7.02 (m, 8H), 6.94 - 6.82 (m, 4H), 5.41 (t, J = 9.8 Hz, 0.5H), 5.26 (s, 0.3H), 5.16 (s, 1H), 4.92 - 4.69 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 2.84 (dd, J = 15.8, 7.8 Hz, 6H), 2.53 - 2.49 (m, 6H). LCMS calcd for C38H37N3O8 663.26, found 681.2 [M+NH4] at 1.80 min.
(3R,4S,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트) (121 mg, 182 μmol)를 N N-디메틸포름아미드 (600 μL)에 용해시켰다. 벤질 2-플루오로-5-니트로벤조에이트 (65.2mg, 237μmol)에 이어서 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (102 mg, 912 μmol)가 첨가되었을 때 용액을 실온에서 교반하였다. 교반을 2 d간 계속하였다. 그런 다음, 물을 첨가하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(SiO2, 헥산 중 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 (3R,4S,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트) (36.0mg, 21%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS calcd for C52H46N4O12 918.31, found 936 [M+NH4] at 2.10 min.
(3R,4S,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리스(3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트) (36.0 mg, 39.2 μmol)을 메탄올 (800 μL)에 용해시키고 질소 하에 실온에서 교반하였다. 이 교반용액에, 탄소 상 팔라듐 (10 중량% 4.17 mg, 3.92 μmol)을 첨가하였다. 현탁액을 수소로 탈기하고 수소 하에 2시간 동안 교반되게 하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 분취 HPLC-MS (CSH 칼럼, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 3-카르복시-4-(((2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스((3-(1H-인돌-3-일)프로파노일)옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤젠암미늄 포르메이트 (4.20 mg, 13%)를 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.77 (t, J = 12.5 Hz, 3H), 8.40 (s, 3H), 7.53 - 7.38 (m, 3H), 7.28 (dd, J = 8.0, 4.8 Hz, 3H), 7.03 (dd, J = 13.2, 4.9 Hz, 6H), 6.96 - 6.85 (m, 3H), 6.82 - 6.67 (m, 2H), 6.53 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.29 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.06 - 5.01 (m, 1H), 4.91 (dd, J = 13.5, 8.3 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 11.6, 4.9 Hz, 1H), 3.60 - 3.51 (m, 1H), 2.91 - 2.79 (m, 7H), 2.74 - 2.67 (m, 1H), 2.63 - 2.54 (m, 4H). LCMS calcd for C45H42N4O10 798.29, found 816 [M+NH4] at 1.80 min.
Figure pct00317
화합물 220: 2-(((2R,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
(3R,4R,5S,6S)-2-하이드록시-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (1.20 g, 3.20 mmol), 벤질 2-하이드록시벤조에이트 (1.10 g, 4.81 mmol) 및 트리페닐포스핀 (1.27 g, 4.81 mmol)을 테트라하이드로푸란 (54.0 mL)에 용해시키고 0 ℃에서 교반하였다. 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (1.11 g, 4.81 mmol)을 부분씩 첨가하고 반응 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반하고, 실온이 될 때까지 가온하고 밤새 교반하였다. 혼합물을 실리카 상에 흡착시켜 자동화 크로마토그래피 (100 g, SiO2, 헥산 중 0 내지 35% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하였다. (2S,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (165 mg, 8.1%) 및 (2R,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (427 mg, 21%)를 분리시켰으나 다른 불순물을 함유하고 있었다.
(2S,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (166 mg, 284 μmol)를 메탄올 (9.00 mL)에 용해시키고 질소 하에 실온에서 교반하였다. 이 혼합물에 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 11.0 mg, 73.0 μmol)을 첨가하였다. 현탁액을 수소로 탈기하고 수소 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 디클로로메탄 중 용액으로서 자동화 크로마토그래피(25g, SiO2, 헥산 중 0 내지 100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 2-(((2S,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (9 mg, 6%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.71 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.14 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 3.1 Hz, 2H), 5.43 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.02 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 1.54 (ddt, J = 22.7, 14.8, 7.4 Hz, 6H), 1.05 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.95 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.85 (q, J = 7.4 Hz, 6H). LCMS calcd for C25H34O10 494.22, found 512.3 [M+NH4] at 1.94 min.
(2R,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (427mg, 711μmol)를 메탄올 (9.00 mL)에 용해시키고 질소 하에 실온에서 교반하였다. 이 혼합물에 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 11.0 mg, 73.0 μmol)을 첨가하였다. 현탁액을 수소로 탈기하고 수소 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 디클로로메탄 중 용액으로서 자동화 크로마토그래피(50 g, SiO2, 헥산 중 0 내지 100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 2-(((2R,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (18 mg, 5%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.62 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.08 (td, J = 7.6, 0.8 Hz, 1H), 5.68 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 5.55 (dd, J = 3.5, 1.0 Hz, 1H), 5.22 (dd, J = 10.2, 3.4 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 3.90 - 3.82 (m, 1H), 2.38 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.27 (m, 2H), 2.13 (td, J = 7.2, 2.7 Hz, 2H), 1.60 (m, 2H), 1.48 (m, 4H), 1.12 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.85 (t, J = 8.5 Hz, 3H), 0.83 (t, J = 8.1 Hz, 3H). LCMS calcd for C25H34O10 494.22, found 493.3 [M-H] at 1.87 min.
Figure pct00318
화합물 221: 5-아미노-2-(((2S,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
(3R,4R,5S,6S)-2-하이드록시-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (197 mg, 0.526 mmol) 및 벤질 2-플루오로-5-니트로벤조에이트 (194 mg, 0.705 mmol)를 실온에서 N N-디메틸포름아미드 (1.0mL)에 용해시켰다. 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (282 mg, 2.51 mmol)가 한 부분에 첨가되었을 때 용액을 교반하고 교반을 88시간 동안 계속하였다. 물 (60 mL)을 첨가하고 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수 (3 x 20 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(12 g, SiO2, 헥산 중 0 내지 20% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (2S,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (136 mg, 41%)를 무색 고무질로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.75 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.33 (dd, J = 9.2, 2.9 Hz, 1H), 7.51 - 7.46 (m, 2H), 7.41 - 7.30 (m, 4H), 5.66 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 5.61 (dd, J = 10.2, 3.5 Hz, 1H), 5.58 - 5.44 (m, 3H), 5.23 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.99 - 3.91 (m, 1H), 2.51 - 2.38 (m, 2H), 2.31 - 2.20 (m, 4H), 1.77 - 1.67 (m, 2H), 1.67 - 1.57 (m, 4H), 1.18 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.01 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.97 - 0.90 (m, 6H). LCMS calcd for C32H39NO12 629.25, found 647.1 [M+NH4] at 2.25 min.
(2S,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (136 mg, 0.216 mmol)를 질소 하에 실온에서 메탄올 (2.00 mL)에 용해시켰다. 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 2.30 mg, 0.0216 mmol)을 한 부분에 첨가하였다. 현탁액을 교반하고, 수소로 탈기하고, 수소 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 celite 상에 여과시켰다. 여과물을 농축시키고, 이 물질을 N N-디메틸포름아미드 (10% 물) 중 용액으로서 분취 HPLC-MS (CSH 칼럼, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 40 내지 60% 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결 건조 후, 5-아미노-2-(((2S,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (70.9 mg, 64%)를백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.93 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.66 (dd, J = 8.7, 2.9 Hz, 1H), 5.45 (dd, J = 3.4, 1.8 Hz, 1H), 5.32 (dd, J = 10.2, 3.4 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 5.21 - 5.03 (m, 2H), 5.00 (t, J = 10.1 Hz, 1H), 4.20 - 4.12 (m, 1H), 2.40 - 2.22 (m, 4H), 2.15 (td, J = 7.2, 1.3 Hz, 2H), 1.64 - 1.43 (m, 6H), 1.08 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.89 - 0.81 (m, 6H). LCMS calcd for C25H35NO10 509.23, found 508.3 [M-H] at 1.78 min.
Figure pct00319
화합물 222: 2-(((2S,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
(3R,4R,5S,6S)-2-하이드록시-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (1.20 g, 3.20 mmol), 벤질 2-하이드록시벤조에이트 (1.10 g, 4.81 mmol), 트리페닐포스핀 (1.27 g, 4.81 mmol)을 테트라하이드로푸란 (54.0 mL)에 용해시키고 0℃에서 교반하였다. 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (1.11 g, 4.81 mmol)을 부분씩 첨가하고 반응 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반하고, 실온이 될 때까지 가온하고 밤새 교반하였다. 혼합물을 실리카 상에 흡착시켜 자동화 크로마토그래피 (100 g, SiO2, 헥산 중 0 내지 35% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하였다. (2S,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (165 mg, 8.1%) 및 (2R,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (427 mg, 21%)를 분리시켰으나 다른 불순물을 함유하고 있었다.
(2S,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (166 mg, 284 μmol)를 메탄올 (9.00 mL)에 용해시키고 질소 하에 실온에서 교반하였다. 이 혼합물에 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 11.0 mg, 73.0 μmol)을 첨가하였다. 현탁액을 수소로 탈기하고 수소 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 디클로로메탄 중 용액으로서 자동화 크로마토그래피 (25g, SiO2, 헥산 중 0 내지 100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 2-(((2S,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (9 mg, 6%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.71 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.14 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 3.1 Hz, 2H), 5.43 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.02 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 1.54 (ddt, J = 22.7, 14.8, 7.4 Hz, 6H), 1.05 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.95 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.85 (q, J = 7.4 Hz, 6H). LCMS calcd for C25H34O10 494.22, found 512.3 [M+NH4] at 1.94 min.
(2R,3R,4R,5S,6S)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (427 mg, 711 μmol)를 메탄올 (9.00 mL)에 용해시키고 질소 하에 실온에서 교반하였다. 이 혼합물에 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 11.0 mg, 73.0 μmol)을 첨가하였다. 현탁액을 수소로 탈기하고 수소 하에 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 디클로로메탄 중 용액으로서 자동화 크로마토그래피 (50g, SiO2, 헥산 중 0 내지 100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 2-(((2R,3R,4R,5S,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (18 mg, 5%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.62 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.08 (td, J = 7.6, 0.8 Hz, 1H), 5.68 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 5.55 (dd, J = 3.5, 1.0 Hz, 1H), 5.22 (dd, J = 10.2, 3.4 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 3.90 - 3.82 (m, 1H), 2.38 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.27 (m, 2H), 2.13 (td, J = 7.2, 2.7 Hz, 2H), 1.60 (m, 2H), 1.48 (m, 4H), 1.12 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.85 (t, J = 8.5 Hz, 3H), 0.83 (t, J = 8.1 Hz, 3H). LCMS calcd for C25H34O10 494.22, found 493.3 [M-H].
Figure pct00320
화합물 223: 5-아미노-2-(((3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
(3S,4R,5R,6S)-2-하이드록시-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (500mg, 1.34mmol), 삼차-부틸 5-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)-2-하이드록시벤조에이트 (620mg, 2.00mmol) 및 트리페닐포스핀 (531 mg, 2.00 mmol)를 테트라하이드로푸란 (22.0 mL)에 용해시키고 0℃에서 교반하였다. 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (471 mg, 2.00 mmol)를 첨가하고 교반을 0 ℃에서 1시간 동안 계속한 다음 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 미정제 물질을 자동화 크로마토그래피(SiO2, 헥산 중 30% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (3S,4R,5R,6S)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)-4-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (213 mg, 24%)를 수득하였다. [M+NH4 +]= 683, room temperature=2.21. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58 - 6.95 (m, 3H), 5.48 (dd, J = 10.5, 8.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 10.4, 3.4 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.88 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 2.55 - 2.15 (m, 2H), 1.76 - 1.56 (m, 3H), 1.55 (s, 4H), 1.49 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.26 - 1.14 (m, 2H), 0.99 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 0.89 (t, J = 7.4 Hz, 2H).
(3S,4R,5R,6S)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)-4-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (200 mg, 300 μmol)를 0℃에서 디클로로메탄 (2.00 mL)에 용해시켰다. 용액에 염산(1,4-디옥산 중 4 M, 158 μL, 631 μmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0 ℃에서 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 아세토니트릴)에 의해 정제하였다 동결건조 후, 5-아미노-2-(((3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (10.0 mg, 13%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.86 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 9.8, 2.1 Hz, 1H), 5.21 - 5.06 (m, 4H), 5.01 - 4.91 (m, 1H), 2.67 - 2.63 (m, 1H), 2.53 (s, 1H), 2.45 - 2.07 (m, 7H), 1.60 (dt, J = 14.6, 7.3 Hz, 2H), 1.52 - 1.39 (m, 4H), 1.07 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.92 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.80 (t, J = 7.4 Hz, 6H). LCMS calcd for C25H35NO10 509.23, found 508.2 [M-H] at 1.68 min.
Figure pct00321
화합물 224: 2-(((3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산(3R,4R,5R)-2-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (200 mg, 555 μmol), 벤질 2-하이드록시벤조에이트 (190 mg, 832 μmol) 및 트리페닐포스핀 (221 mg, 832 μmol)을 테트라하이드로푸란 (4.0 mL)에 용해시키고 0℃에서 교반하였다. 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (196 mg, 832 μmol)를 첨가하고 교반을 1시간 동안 0℃에서 계속한 다음, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고 자동화 크로마토그래피 (SiO2, 헥산 중 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (2R,3R,4R,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (229 mg, 72%)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.74 (dd, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.46 - 7.31 (m, 6H), 7.19 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.08 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.57 (broad s, 1H), 5.51 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 29.5, 12.5 Hz, 2H), 5.22 (broad s, 1H), 5.15 - 5.09 (m, 1H), 4.21 (dd, J = 11.3, 8.8 Hz, 1H), 3.65 (dd, J = 11.3, 4.2 Hz, 1H), 2.50 - 2.26 (m, 6H), 1.74 - 1.57 (m, 6H), 1.01 - 0.84 (m, 9H). LCMS calcd for C31H38O10 570.25, found 588.4 [M+NH4] at 2.19 min.
(2R,3R,4R,5R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)페녹시)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (229 mg, 401 μmol)를 실온에서 메탄올 (4.0 mL)에 용해시켰다. 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 42.7 mg, 40.1 μmol)이 한 부분씩 첨가되었을 때 용액을 질소 하에 교반하였다. 혼합물을 수소로 탈기하고 수소 하에 3시간 동안 교반되게 하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 celite 상에 여과시켰다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 2-(((2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산을 오일(92.0mg, 48%)로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (dd, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.51 - 7.44 (m, 1H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.09 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.63 (broad d, J = 2.7 Hz, 1H), 5.45 (broad t, J = 3.4 Hz, 1H), 5.31 (broad t, J = 2.9 Hz, 1H), 5.09 (broad dt, J = 6.6, 3.5 Hz, 1H), 4.00 (dd, J = 12.0, 6.3 Hz, 1H), 3.81 (dd, J = 12.0, 3.2 Hz, 1H), 2.38 - 2.19 (m, 6H), 1.62 - 1.44 (m, 6H), 0.86 (td, J = 7.4, 2.9 Hz, 9H). UP-LCMS calcd for C24H32O10 480.20, found 503.2 [M+Na] at 1.72 min.
화합물 225 5-아미노-2-(((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
화합물 225을 화합물 218의 제조 동안 마이너 이성질체로서 분리하였다.
(2R,3R,4S,5R)-2-((부티릴옥시)메틸)-6-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (239 mg, 519 μmol)을 N N-디메틸포름아미드 (1 mL)에 용해시켰다. 벤질 2-플루오로-5-니트로벤조에이트 (186 mg, 675 μmol)에 이어서 1,4-디아자비시클로[2.2.2]옥탄 (294 mg, 2.59 mmol)가 첨가되었을 때 용액을 실온에서 교반하였다. 교반을 2 d간 계속하고 물을 첨가하였다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 미정제 물질을 celite 상에 흡착시키고 자동화 크로마토그래피(SiO2, 헥산 중 에틸 아세테이트 구배)에 의해 정제하여 (3R,4S,5R,6R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (169 mg, 45%)를 수득하였다. LCMS calcd for C36H45NO14 715.28, found 733.6 [M+NH4] at 2.26 min.
(3R,4S,5R,6R)-2-(2-((벤질옥시)카르보닐)-4-니트로페녹시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (169 mg, 236 μmol)을 실온에서 메탄올 (5.0 mL)에 용해시켰다. 탄소 상 팔라듐 (10 중량%, 25.1 mg, 23.6 μmol)이 한 부분에 첨가되었을 때 용액을 질소 하에 교반하였다. 그런 다음, 용매를 수소로 탈기하고 반응을 수소 하에 2시간 동안 교반되게 하였다. 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고 celite 상에 여과시켰다. 미정제 물질을 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 25% 내지 65% 아세토니트릴)에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 5-아미노-2-(((2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-((부티릴옥시)메틸)테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (9 mg, 6%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.58 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.56 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.52 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 5.04 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 4.93 (dd, J = 10.3, 3.6 Hz, 1H), 4.38 (broad s, 1H), 4.10 (dd, J = 12.4, 5.1 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 12.4, 2.0 Hz, 1H), 2.37 - 2.15 (m, 8H), 1.56 - 1.39 (m, 8H), 0.90 - 0.73 (m, 12H). LCMS calcd for C29H41NO12 595.26, found 613.3 [M+NH4] at 1.84 min.
Figure pct00322
화합물 226: 5-아미노-2-[(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리(부타노일옥시)테트라하이드로피란-2-일]옥시-벤조산
이 화합물을 화합물 34의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS[M-H]- : 494.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.83 - 6.75 (m, 2H), 6.64 - 6.53 (m, 1H), 5.58 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.53 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 5.03 - 4.90 (m, 2H), 3.89 (t, J = 10.9 Hz, 1H), 3.73 (dd, J = 10.9, 5.9 Hz, 1H), 2.38 - 2.12 (m, 6H), 1.58 - 1.39 (m, 6H), 0.92 - 0.76 (m, 9H).
Figure pct00323
화합물 227: 2-{[(2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)옥산-2-일]옥시}벤조산
Figure pct00324
화합물 228: 2-{[(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)옥산-2-일]옥시}벤조산
Figure pct00325
단계 1
Figure pct00326
Figure pct00327
화합물 A, B 및 TPP를 THF에 용해시키고 0 ℃에서 교반하였다. 이 혼합물에 DTAD를 첨가하고 교반을 0 ℃에서 1시간 동안 계속한 다음 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 미정제 생성물의 NMR은 C와 D의 혼합물을 나타냈다 (비 1:0.9). 헥산 중 0-30% 에틸 아세테이트를 사용하는 칼럼 크로마토그래피에 의한 다수 정제로 원하는 β 이성질체 C (7 g, 32%) 및 α 이성질체 D (4.6 g, 21%)를 제공하였다.
단계 2A:
Figure pct00328
Figure pct00329
화합물 C를 메탄올에 용해시키고 실온에서 교반하였다. 이 혼합물에 10% Pd/C를 첨가하였다. 현탁액을 밤새 실온에서 수소 분위기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 Celite를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 합쳐진 여과물 및 세척을 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중 0-5% MeOH를 사용하여 ISCO에 의해 정제하여 2.1 g (60%)의 순수 생성물 227 및 850 mg의 불순한 생성물을 수득하였다.
단계 2B:
Figure pct00330
Figure pct00331
화합물 4를 메탄올에 용해시키고 실온에서 교반하였다. 이 혼합물에 10% Pd/C를 첨가하였다. 현탁액을 밤새 실온에서 수소 분위기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 Celite를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 합쳐진 여과물 및 세척을 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중 0-5% MeOH를 사용하여 ISCO로 정제하여 936mg(40%)의 순수한 생성물 228을 수득하였다.
Figure pct00332
화합물 229: 5-부탄아미도-2-{[(2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)옥산-2-일]옥시}벤조산
화합물 34 (50 mg, 0.10 mmol, 1 당량)을 0.25 mL의 DCM에 용해시킨 다음, 부티르산 무수물 (0.05 mL, 0.3 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 반응을 실온에서 40분 동안 교반한 다음 칼럼 크로마토그래피 (헥산 중 0-100% EtOAc)에 의해 정제하여 표제 화합물을 백색 고체 (42.5 mg, 0.075 mmol, 75% 수율)로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 12.71 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 7.86 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 9.0, 2.7 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.36 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.29 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 5.04 (dd, J = 9.2, 7.2 Hz, 1H), 4.94 (td, J = 9.2, 5.4 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 11.5, 5.4 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 11.6, 9.4 Hz, 1H), 2.33 - 2.11 (m, 8H), 1.65 - 1.41 (m, 8H), 0.93 - 0.77 (m, 12H).
Figure pct00333
화합물 230: 5-아미노-2-{[(2S,3R,4S,5R)-3,4,5-트리스[(3,3,4, 4,4-2H5)부타노일옥시]옥산-2-일]옥시}벤조산
이 화합물을 출발 물질이 적절하게 중수소가 풍부하다는 것을 제외하고는 화합물 34에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+H+) 511.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.41 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.64 (dd, 1H), 5.27 (t, 1H), 5.14 (d, 1H), 5.00 (dd, 1H), 4.92 (td, 1H), 4.02 (dd, 1H), 3.63 (dd, 1H), 2.33 - 2.14 (m, 6H)
Figure pct00334
화합물 231: 5-아미노-2-(((3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산
(3S,4R,5R,6S)-2-하이드록시-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (500mg, 1.34mmol), 삼차-부틸 5-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)-2-하이드록시벤조에이트 (620mg, 2.00mmol) 및 트리페닐포스핀 (531 mg, 2.00 mmol)를 테트라하이드로푸란 (22.0 mL)에 용해시키고 0℃에서 교반하였다. 디-삼차-부틸 아조디카르복실레이트 (471 mg, 2.00 mmol)를 첨가하고 교반을 0 ℃에서 1시간 동안 계속한 다음 밤새 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 미정제 물질을 자동화 크로마토그래피(SiO2, 헥산 중 30% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (3S,4R,5R,6S)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)-4-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (213 mg, 24%)를 수득하였다. [M+NH4 +]= 683, room temperature=2.21. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58 - 6.95 (m, 3H), 5.48 (dd, J = 10.5, 8.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.10 (dd, J = 10.4, 3.4 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.88 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 2.55 - 2.15 (m, 2H), 1.76 - 1.56 (m, 3H), 1.55 (s, 4H), 1.49 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.26 - 1.14 (m, 2H), 0.99 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 0.89 (t, J = 7.4 Hz, 2H).
(3S,4R,5R,6S)-2-(2-(삼차-부톡시카르보닐)-4-((삼차-부톡시카르보닐)아미노)페녹시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-3,4,5-트리일 트리부티레이트 (200 mg, 300 μmol)를 0℃에서 디클로로메탄 (2.00 mL)에 용해시켰다. 용액에 염산(1,4-디옥산 중 4 M, 158 μL, 631 μmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0 ℃에서 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 자동화된 역상 크로마토그래피 (C18, 10 mM 수성 암모늄 포르메이트 중 아세토니트릴)에 의해 정제하였다 동결건조 후, 5-아미노-2-(((3S,4R,5R,6S)-3,4,5-트리스(부티릴옥시)-6-메틸테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)벤조산 (10.0 mg, 13%)을 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.86 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 9.8, 2.1 Hz, 1H), 5.21 - 5.06 (m, 4H), 5.01 - 4.91 (m, 1H), 2.67 - 2.63 (m, 1H), 2.53 (s, 1H), 2.45 - 2.07 (m, 7H), 1.60 (dt, J = 14.6, 7.3 Hz, 2H), 1.52 - 1.39 (m, 4H), 1.07 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.92 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.80 (t, J = 7.4 Hz, 6H). LCMS calcd for C25H35NO10 509.23, found 508.2 [M-H] at 1.68 min.
Figure pct00335
화합물 232: 2-{[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)-6-[(부타노일옥시)메틸]옥산-2-일]옥시}벤조산
이 화합물을 화합물 223의 제조에 대한 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00336
화합물 233: 5-아미노-2-{[(2R,3R,4R,5R)-3,4,5-트리스[(3,3,4,4,4-2H5)부타노일옥시]옥산-2-일]옥시}벤조산
이 화합물을 화합물 41의 제조에 대한 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00337
화합물 234: 5-아미노-2-{[(2S,3R,4S,5R)-3,4-비스[(3,3,4,4,4-2H5)부타노일옥시]-5-하이드록시옥산-2-일]옥시}벤조산
이 화합물을 화합물 214의 제조에 대한 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M-H-) 434.2. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.46 (d, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.85 (dd, 1H), 5.35 (d, 1H), 5.15 (dd, 1H), 5.06 (t, 1H), 4.17 (dd, 1H), 3.84 (td, 1H), 3.61 (dd, 1H), 2.41 (s, 2H), 2.36 (s, 2H)
Figure pct00338
화합물 235: (2R,3R)-2-[3,4-비스(부타노일옥시)페닐]-5,7-비스(부타노일옥시)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일 부타노에이트
Figure pct00339
THF (8 mL) 중 (2R,3R)-2-(3,4-디하이드록시페닐)크로만-3,5,7-트리올 (300 mg, 1.03 mmol, 1 eq) 및 TEA (627.50 mg, 6.20 mmol, 863.13 uL, 6 eq)의 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고 N2 하에 교반하였다. 그런 다음 부타노일 클로라이드 (110.12 mg, 1.03 mmol, 107.96 μL, 1.00 eq)를 혼합물에 떨어뜨린 다음 50 ℃로 가열하고 10시간 동안 교반하였다. LCMS는 원하는 화합물이 검출되었음을 보여주었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 prep-HPLC (칼럼: Phenomenex Luna C18 200*40mm*10um;이동상: [물(0.05%HCl)-ACN];B%: 70%-90%,10분)에 의해 정제하여 WX-0637 (2R,3R)-2-(3,4-비스(부티릴옥시)페닐)크로만-3,5,7-트리일 트리부티레이트 (154 mg, 216.61 umol, 20.96% 수율, 90.12% 순도)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H+) 641.4 @ 1.476 min; LCMS: (M+Na+) 663.3 @ 2.346 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.32 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 1H), 7.19 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.43 - 5.37 (m, 1H), 5.12 (s, 1H), 2.97 (dd, J = 17.8, 4.5 Hz, 1H), 2.86 (dd, J = 17.9, 2.3 Hz, 1H), 2.57 - 2.47 (m, 8H), 2.14 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.77 (hd, J = 7.4, 2.3 Hz, 8H), 1.44 (h, J = 7.3 Hz, 2H), 1.08 - 0.99 (m, 12H), 0.74 (t, J = 7.4 Hz, 3H)
Figure pct00340
화합물 236: (2R,3R)-2-[3,4-비스(프로파노일옥시)페닐]-5,7-비스(프로파노일옥시)-3,4-디하이드로-2H-1-벤조피란-3-일 프로파노에이트
Figure pct00341
THF (8 mL) 중 (2R,3R)-2-(3,4-디하이드록시페닐)크로만-3,5,7-트리올 (300 mg, 1.03 mmol, 1 eq) 및 TEA (627.50 mg, 6.20 mmol, 863.13 uL, 6 eq)의 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고 N2 하에 교반하였다. 그런 다음, 프로파노일 클로라이드 (573.76 mg, 6.20 mmol, 573.76 uL, 6 eq)를 혼합물에 떨어뜨리고 혼합물을 50 ℃로 가열하고 10시간 동안 교반하였다. LCMS는 원하는 화합물이 검출되었음을 보여주었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 prep-HPLC (칼럼: Phenomenex Luna C18 200*40mm*10um;이동상: [물(0.05%HCl)-ACN];B%: 55%-75%,10분)에 의해 정제하여 [2-프로파노일옥시-4- [(2R,3R)-3,5,7-트리(프로파노일옥시)크로만-2-일]페닐] 프로파노에이트 (151 mg, 258.48 umol, 25.01% 수율, 97.67% 순도)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H+) 571.3 @ 1.342 min; LCMS: (M+Na+) 593.3 @ 2.147 min. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 7.33 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 1H), 7.19 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.43 - 5.37 (m, 1H), 5.12 (s, 1H), 2.97 (dd, J = 17.8, 4.5 Hz, 1H), 2.86 (dd, J = 17.9, 2.3 Hz, 1H), 2.63 - 2.51 (m, 8H), 2.18 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.30 - 1.20 (m, 12H), 0.95 (t, J = 7.5 Hz, 3H)
Figure pct00342
화합물 237: 3,4,5-트리스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})벤조산
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (M+H+) 642.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.06 (dd, 3H), 7.65 (s, 2H), 7.46 (dd, 3H), 7.37 (dd, 3H), 7.22 (dd, 3H), 7.14 - 7.07 (m, 3H), 7.05 - 6.97 (m, 3H), 3.71 (s, 4H), 3.43 (s, 2H)
Figure pct00343
화합물 238: 3,4,5-트리스(부티릴옥시)벤조산
갈산 (400 mg, 2.35 mmol)을 건조 둥근 바닥 플라스크에 피리딘 (15 eq, 2.83 mL, 35.2 mmol)에 용해시켰다. 플라스크를 N2으로 세척하고 용액을 빙욕에서 0℃로 냉각시켰다. 부티르산 무수물 (6 eq, 2.30 mL, 14.1 mmol)을 N2 하에 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 될 수 있게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 20 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고 1M HCl (20 mL) 및 포화 NaCl (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (C18, 물 중 10-90% 아세토니트릴)에 의해 정제하고 분획을 농축시키고 동결 건조시켜 화합물 238 (740 mg, 82.8% 수율)을 백색 고체로 수득하였다. LCMS[M-H]- : 379.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.45 (bs, 1H), 7.74 (s, 2H), 2.62-2.55 (m, 6H), 1.70-1.58 (m, 6H), 0.99 - 0.93 (m, 9H).
Figure pct00344
화합물 239: 3,4,5-트리스(프로파노일옥시)벤조산
이 화합물을 화합물 44에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS (M-H-) 337.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.43 (s, 1H), 7.75 (s, 2H), 2.62 (m, 6H), 1.13 (m, 9H)
Figure pct00345
화합물 240: 3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})벤조산
이 화합물을 화합물 44에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다. LCMS: (m+H+) 684.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.48 (s, 1H), 10.85 (d, 3H), 7.70 (s, 2H), 7.50 (dd, 3H), 7.38 - 7.29 (m, 3H), 7.13 (dd, 3H), 7.10 - 7.02 (m, 3H), 6.94 (m, 3H), 3.00 (m, 6H), 2.83 (m, 6H)
Figure pct00346
화합물 241: 6-옥소-6H-벤조[c]크로멘-3,8,9-트리일 트리아세테이트
DCM (10 mL) 중 3,8,9-트리하이드록시벤조[c]크로멘-6-온 (0.3 g, 1.23 mmol, 1 eq) 및 아세틸 아세테이트 (501.67 mg, 4.91 mmol, 460.25 uL, 4 eq)의 혼합물에 트리에틸아민 (TEA) (372.94 mg, 3.69 mmol, 512.98 uL, 3 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 25 ℃에서 10시간 동안 교반하였다. TLC는 하나의 새로운 스팟이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 추가 물 10 mL로 켄칭시키고 EtOAc (10 mL ×3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수 20 mL로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=3/1 내지 1:1)에 의해 정제하였다. 화합물 (8,9-디아세톡시-6-옥소-벤조[c]크로멘-3-일) 아세테이트 (0.36 g)을 회색 고체로서 수득하였다. LCMS: (M+H+): 371.0 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.2 (s, 1H), 9.9 m, 2H), 7.1 (m, 2H), 2.3 (s, 9H).
Figure pct00347
화합물 242: [6-옥소-8,9-디(프로파노일옥시)벤조[c]크로멘-3-일] 프로파노에이트
프로피온산 무수물 (2.61 mL, 20.4 mmol)을 무수 피리딘 (4.92 mL, 61.2 mmol) 중 유로리틴(urolithin) C (0.5 g, 2.04 mmol)의 교반된 용액에 N2 분위기 하에 0℃에서 적가하였다. 생성된 교반된 용액을 실온으로 될 수 있게 하였고 반응 완성까지 LCMS에 의해 모니터링하였다. 용액을 30 mL 에틸 아세테이트로 희석하고 H2O (30 mL), 1M HCl (30 mL), H2O (30 mL) 및 포화 NaHCO3 (30 mL)로 세척하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전 증발에 의해 농축시켰다. 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 헥산 중 10-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하고 분획을 회전 증발에 의해 농축시켜 화합물 242 (0.05 g, 6% 수율)을 분홍색 고체로 수득하였다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8.4 (s, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.23 (m, 1H) , 2.73 -2.63 (m, 6H), 1.21 - 1.14 (m, 9H) ppm
Figure pct00348
화합물 243: [8,9-디(옥타노일옥시)-6-옥소-벤조[c]크로멘-3-일] 옥타노에이트
아세토니트릴 (10 mL) 중 3,8,9-트리하이드록시벤조[c]크로멘-6-온 (0.3g)의 용액에 K2CO3 (0.68 g)에 이어서 옥타노일 클로라이드 (0.8 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 24시간 동안 50℃에서 교반하였다. 추가의 옥타노일 클로라이드 (0.8 g)를 첨가하고 혼합물을 50 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭시키고 에틸 아세테이트 (10 mL)로 3회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르 / 에틸 아세테이트, 9:1 내지 1:1)로 정제하여 [8,9-디(옥타노일옥시)-6-옥소-벤조[c]크로멘-3-일]옥타노에이트 (0.45 g, 55.5%)를 백색 고체로 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.186 (s, 1H), 7.926 (d, 1H), 7.908 (s, 1H), 7.157 - 7.096 (m, 2H), 2.621 - 2.573 (m, 6H), 1.79 - 1.75 (6H, m), 1.5 - 1.25 (m, 24H), 0.916 - 0.878 (m, 9H) ppm
Figure pct00349
화합물 244: 8,9-비스({[(3R)-3-(부타노일옥시)부타노일]옥시})-6-옥소-6H-벤조[c]크로멘-3-일 (3R)-3-(부타노일옥시)부타노에이트
이 화합물을 화합물 242에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00350
화합물 245: 8,9-비스(데카노일옥시)-6-옥소-6H-벤조[c]크로멘-3-일 데카노에이트
이 화합물을 화합물 242에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00351
화합물 246: 8,9-비스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})-6-옥소-6H-벤조[c]크로멘-3-일 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00352
화합물 247: 8,9-비스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})-6-옥소-6H-벤조[c]크로멘-3-일 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00353
화합물 248: 8,9-비스(부타노일옥시)-6-옥소-6H-벤조[c]크로멘-3-일 부타노에이트
이 화합물을 화합물 242에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00354
화합물 249: (1R)-1-[(2R,3R,4S)-3,4-비스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})옥솔란-2-일]-2-{[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시}에틸 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00355
화합물 250: (1R)-1-[(2R,3R,4S)-3,4-비스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})옥솔란-2-일]-2-{[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시}에틸 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00356
화합물 251: (1R)-1-[(2R,3R,4S)-3,4-비스(부타노일옥시)옥솔란-2-일]-2-(부타노일옥시)에틸 부타노에이트
이 화합물을 화합물 242에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00357
화합물 252: (1R)-2-(아세틸옥시)-1-[(2R,3R,4S)-3,4-비스(아세틸옥시)옥솔란-2-일]에틸 아세테이트
이 화합물을 화합물 242에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00358
화합물 253: (3R,4S,5R)-3,4,5-트리스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})시클로헥스-1-엔-1-카르복실산
이 화합물을 화합물 96에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00359
화합물 254: (3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(프로파노일옥시)시클로헥스-1-엔-1-카르복실산
이 화합물을 화합물 43에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00360
화합물 255: (3R,4S,5R)-3,4,5-트리스(부타노일옥시)시클로헥스-1-엔-1-카르복실산
이 화합물을 화합물 43에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00361
화합물 256: 4-[(1E)-2-{3-하이드록시-5-[(2S,4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르보닐옥시]페닐}에테닐]페닐 (2S,4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트
Figure pct00362
화합물 257: 3-[(2S,4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르보닐옥시]-5-[(1E)-2-{4-[(2S,4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르보닐옥시]페닐}에테닐]페닐 (2S,4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트
Figure pct00363
단계 1:
ACN (500 mL) 중 (3R)-부탄-1,3-디올 (10 g, 110.96 mmol, 1 eq) 및 메틸 2-옥소프로파노에이트 (22.66 g, 221.92 mmol, 20.05 mL, 2 eq)의 혼합물에 N2 하에 20℃에서 BF3.Et2O (67.02 g, 221.92 mmol, 58.27 mL, 47% 순도, 2 eq)를 적가하였다. 혼합물을 20 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 한 개의 새로운 스팟이 형성되었음을 나타냈다. 첨가 포화 NaHCO3 용액에 의해 용액의 pH를 7-8로 조정하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트 (100 mL*3)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공 중에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=100/1 내지 10:1)에 의해 정제하였다. 1H NMR는 원하는 화합물 메틸 (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (13.8 g, 79.22 mmol, 71.40% 수율)이 황색 오일로서 수득되었음을 나타냈다.
단계 2:
MeOH (220mL) 및 H2O (55 mL) 중 메틸 (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (13.8 g, 79.22 mmol, 1 eq)의 혼합물에 NaOH (6.34 g, 158.44 mmol, 2 eq)를 N2 하에 80℃에서 한 부분씩 첨가하였다. 혼합물을 80 ℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 반응이 완료되었음을 보여주었다. MeOH를 감압 하에 제거하였다. 첨가 수성 HCl (6 M)로 혼합물의 pH을 2-3으로 조정하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트 (100 mL*4)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수 (100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공 중에 농축시켰다. 화합물 (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실산 (12 g, 74.92 mmol, 94.57% 수율)을 황색 고체로 수득하였다.
단계 3:
DCM(40 mL) 중 5-[(E)-2-(4-하이드록시페닐)비닐]벤젠-1,3-디올 (2 g, 8.76 mmol, 1 eq) 및 (4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실산 (5.61 g, 35.05 mmol, 4 eq)의 혼합물에 DCC(7.23 g, 35.05 mmol, 7.09 mL, 4 eq) 및 DMAP (535.25 mg, 4.38 mmol, 0.5 eq)를 N2 하에 20℃에서 한 부분씩 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 보여주었다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 prep-HPLC [물(0.1%TFA)-ACN]에 의해 정제하였다. [4-[(E)-2-[3,5-비스[[(4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르보닐]옥시] 페닐]비닐]페닐](4R)-2,4-디메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트 (2.8 g, 3.64 mmol, 41.49% 수율, 85% 순도)를 백색 고체로 수득하였다. LCMS: (M+H3O+): 672.2 @ 2.990
Figure pct00364
화합물 258: 3-[(4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르보닐옥시]-5-[(1E)-2-{4-[(4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르보닐옥시]페닐}에테닐]페닐 (4R)-4-메틸-1,3-디옥산-2-카르복실레이트
이 화합물을 화합물 257의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00365
화합물 259: 4-[(1E)-2-[3,5-비스({[3-(1H-인돌-3-일)프로파노일]옥시})페닐]에테닐]페닐 3-(1H-인돌-3-일)프로파노에이트
이 화합물을 화합물 2의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00366
화합물 260: 4-[(1E)-2-[3,5-비스({[2-(1H-인돌-3-일)아세틸]옥시})페닐]에테닐]페닐 2-(1H-인돌-3-일)아세테이트
이 화합물을 화합물 2의 제조에 대해 기술된 변형된 절차에 따라 제조하였다.
Figure pct00367
화합물 261: 3-{[(2E,4E,6E,8E)-3,7-디메틸-9-(2,6,6-트리메틸시클로헥스-1-엔-1-일)노나-2,4,6,8-테트라에노일]옥시}-5-[(1E)-2-(4-{[(2E,4E,6E,8E)-3,7-디메틸-9-(2,6,6-트리메틸시클로헥스-1-엔-1-일)노나-2,4,6,8-테트라에노일]옥시}페닐)에테닐]페닐 (2E,4E,6E,8E)-3,7-디메틸-9-(2,6,6-트리메틸시클로헥스-1-엔-1-일)노나-2,4,6,8-테트라에노에이트
하기 화합물을 본원에서 설명되는 합성 전략을 사용하여 제조할 수 있다:
Figure pct00368
예 2. 시험관 내 분석
본원에 개시한 아실화된 활성제들은, 다양한 생리적 pH 수준의 범위 하에 안정적일 수 있고, 국소 미세환경에 존재하는 효소에 의해 원하는 작용 부위(예를 들어, 위장 관 내, 예를 들어, 위, 소장, 또는 대장 내)에서 임의로 절단될 수 있다. 아실화된 활성제들은 다양한 pH 수준에서 화학적 안정성과 대표적으로 시험관 내 시스템에서 분해되는 능력에 대해 테스트된다. 선택된 아실화된 활성제를 위한 데이터가 아래에 나타나 있다.
분석 1. 모사 위액(Simulated Gastric Fluid, SGF)에서 아실화된 활성제의 안정성. 이 분석은 위에서 아실화된 활성제의 안정성을 평가하기 위해 사용되었다.
2g의 염화나트륨을 0.6L의 초순수 물(MilliQ®, Millipore Sigma, 독일 다름스타트)에 용해시켜서 배지를 제조했다. pH를 1 N 염산으로 1.6으로 조정하고, 그 후 부피를 정제수로 1L로 조정하였다.
60 mg FaSSIF 분말(Biorelevant™, 영국 런던)을 500 mL 완충액(상기)에 용해시켰다. 펩신을 첨가하고 (0.1mg/mL) (Millipore Sigma, 독일 다름스타트), 용액을 교반하였다. 생성된 SGF 배지를 각각의 실험에 대해 신선하게 사용하였다.
시험 화합물을 DMSO 스톡에 1 mM로 용해시켰다. DMSO 스톡 용액의 분취액을 제거하고 15 mL 팔콘 튜브 내의 SGF 배지 내에서 희석하여 1 μM의 화합물 농도를 생성하였다. 1 mL 분취액을 즉시 제거하고, T0 시점에 대해 1 부피의 아세토니트릴로 1회 희석하였다. 혼합물을 밀봉하고 37 ℃에서 인큐베이터에서 혼합하였다. 분취액(1 mL)을 정기적인 간격으로 제거하고 1 부피의 아세토니트릴을 첨가하여 즉시 켄칭하였다. 생성된 샘플들을 LC/MS에 의해 분석하여 SGF의 분해율을 결정하였다.
분석 2. 모사 장액(Simulated Intestinal Fluid, SIF)에서 아실화된 활성제의 안정성. 이 분석은 소장에서 아실화된 활성제의 안정성을 평가하기 위해 사용되었다.
0.42g의 수산화나트륨 펠릿 및 3.95g의 제일인산나트륨 일수화물 및 6.19g의 염화나트륨을 초순수 물(MilliQ®, Millipore Sigma, 독일 다름스타트)에 용해시켜서 인산염 완충액을 제조했다. pH를 수성 HCl 및 필요시, 수성 NaOH을 사용하여 6.7로 조정하고, 용액을 초순수 물로 희석하여 pH 6.7 완충액 1L을 생성하였다.
112mg FaSSIF 분말(Biorelevant™, 영국 런던)을 pH 6.7 완충액 50mL에 용해시켰다. 그런 다음 생성된 용액 2 내지 3mL을 500 mg 판크레아틴 (Millipore Sigma, 독일 다름스타트)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을, 유백색 현탁액이 형성될 때까지 혼합물이 들어있는 용기를 손가락으로 두드려 교반하였다. 이때, 50mL의 FaSSiF/pH 6.7 완충 용액 나머지를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 10회 뒤집어 SIF를 생성하여 신선하게 사용했다.
시험 화합물을 DMSO 스톡에 1 mM로 용해시켰다. DMSO 스톡 용액의 분취액을 제거하고 15 mL 팔콘 튜브 내의 SIF 배지 내에서 희석하여 시험된 화합물 농도 1 μM과 혼합물을 제조하였다. 1 mL 분취액을 즉시 제거하고, T0 시점에 대해 1 부피의 아세토니트릴로 1회 희석하였다. 혼합물을 밀봉하고 37 ℃에서 인큐베이터에서 교반하였다. 분취액(1 mL)을 정기적인 간격으로 제거하고 1 부피의 아세토니트릴을 첨가하여 즉시 켄칭하였다. 생성된 샘플들을 LC/MS에 의해 분석하여 분해율을 결정하였다.
분석 3. 분변 배양 안정성. 이 분석은 대장에서 아실화된 활성제의 안정성을 평가하기 위해 사용되었다. 90% 질소, 5% 수소 및 5% 이산화탄소가 함유된 혐기성 챔버 내에서 모든 실험을 수행하였다. 슬러리(15% WV) 내의 인간 분변을 YCFA 배지 또는 다른 적절한 배지(1.6 mL)를 함유하는 96 웰 플레이트에 첨가한다. 화합물을 각각의 개별 웰에 첨가하여 1 또는 10μM의 최종 분석물 농도에 도달시키고, 물질을 피펫팅에 의해 혼합하였다. 설정된 시점에, 샘플을 제거하고, 아세토니트릴로 켄칭하고, LC/MS에 의해 분석하였다.
완충액 분석 완충액에서의 아실화된 활성제의 안정성. 이 분석은 상이한 생리적 pH 수준에서 아실화된 활성제의 안정성에 대한 평가를 제공한다.
화합물들을 DMSO에서 희석시키고, 적정 양으로 인산염 완충액(pH 수준 2, 4, 6 및 8)에 첨가하여 2 μM의 총 샘플 농도에 도달시킨다. 화합물들을 RT에서 인큐베이션하고, 분취액을 0, 60, 120, 360 및 1440분 시점에 제거하고, LC/MS/MS에 의해 순도를 분석한다.
화합물 분석 1 (SGF)
(1시간에서의 잔류%) 		분석 2 (SIF)
(4시간에서의 잔류%) 		분석 3
(24시간에서의 잔류%)
1 C B
2 C
3 C C C
4 C A A
11 C
12 C
13 C B
14 C A
15 C B
18 C C
19 B B
20 C A
21 C A
22 B A
23 C A
24 C A
31 C C
32 A A
33 C C
34 C C
39 C C
40 C C
41 C C
42 C
43 C C B
44 C B
45 C B B
46 C B B
53 C A A
63 C C
65 C C
66 C A
67 B A
69 C C
70 B C
72 C A
75 C B
76 B A
77 B A
78 C A
79 C A A
80 C A A
82 실행 1: B, 실행 2: C A A
83 C A A
84 C C B
85 B B B
86 C B C
87 B A A
88 C A A
89 A A
90 C A A
91 A A
92 A A
93 A A
94 A A
95 C A C
97 A A
101 C A B
102 B A A
103 B A 실행 1: A, 실행 2: B
104 B A A
105 C B A
106 C A A
107 C A A
108 C
109 C A A
110 C C A
111 B A A
113 C A A
114 B A
116 C A A
117 C A A
118 B A A
119 B A
120 B A
121 A A
122 C B A
123 C A A
124 C A A
125 C A A
126 C A A
127 B
128 C A A
129 B A
130 B A A
131 B A
132 B A
133 C A A
134 C B A
135 C A A
136 C A A
137 C B B
138 C A A
139 B A B
140 C A A
141 C A A
142 C A
143 C A A
144 C A A
145 C A C
146 C A A
147 C A A
148 C
149 C A A
150 C A
151 A
152 A
153 A
154 A
155 배치 1: C; 배치 2: B C A
156 C A
157 C A
158 C A A
159 C B
160 C
161 C A
162 C A
162 A
163 C
167 C A
172 C
178 A
180 B A A
181 A A
182 C A
190 A A
191 C
193 C C B
194 C A C
195 C C B
199 B A A
200 C C
201 B A A
202 C A
203 C A B
204 B
227 C A A
229 A
230 B
234 B
235 C A A
236 B A A
237 C A A
239 C A A
240 A C
242 C A
246 B B
248 A
253 B B
254 B
255 C C B
256 A
257 C A A
258 A
259 C C B
260 A
표 1에서, A: 시험된 화합물의 <25% 잔류; B: 시험된 화합물의 25-75% 잔류; C: 시험된 화합물의 >75% 잔류.
표 1은, 예를 들어, 화합물 1, 4, 13-15, 20-24, 44-46, 53, 66, 67, 72, 및 75-78이 장 상부에 선택적으로 전달될 수 있음을 보여준다.
예 3. 대사 장애에 대한 아실화된 카테킨 폴리페놀의 생체 내 평가
본원에 개시된 활성제(예를 들어, 아실화된 활성제 또는 활성제 조합)는 대사 마커를 조절하고 대사 장애를 치료하는 데에 유용할 수 있다. 본원에 개시된 활성제(예를 들어, 아실화된 활성제 또는 활성제 조합)는 NAFLD 마커를 조절하고 NAFLD(예를 들어, NASH)를 치료하는 데에 유용할 수도 있다. 본 예시는 예시적인 아실화된 활성제, 화합물 4가 대상체에서 체중 손실을 유도하고 대사 마커를 개선(예를 들어, 포도당 내성 개선)하는 능력을 입증한다. 본 예시는 또한 예시적인 활성제 조합, 레스베라트롤 및 프리-케톤체가, 대상체에서 NAFLD 마커(예를 들어, 간 중량, 지방증, 풍선화, 간 염증, 또는 간 효소 수준)를 개선하는 능력을 입증한다.
C57BL/6 마우스를 표 2에 열거된 바와 같이, 7개의 코호트로 나누었다.
모델 치료* 동물 수 용량** 빈도 경로
HFD-섭취
C57BL/6
마우스		 ND 10 자유식이
(Ad libitum) 		식이
HFD 10 자유식이 식이
HFD + 아세테이트 10 5% 자유식이 식이
HFD + EGCG 10 1% 자유식이 식이
HFD + 아세테이트 + EGCG 10 5% + 1% 자유식이 식이
HFD + 화합물 4 10 6% 자유식이 식이
HFD + 로시글리타존(rosiglitazone) 10 0.45mg/g 자유식이 식이
* 표 2에서, ND는 정상 식이를 의미하고, HFD는 고지방 식이를 의미하고, EGCG은 에피갈로카테킨 갈레이트를 의미한다.
** 표 2에서, 용량 백분율은 고지방 식이에 대한 중량 백분율을 나타낸다.
동물들을 전체 8주 연구 동안 음식 및 식수에 자유롭게 접근할 수 있게 했다. 동물들을 매주 체중을 측정하고 음식 및 식수 소비를 모니터링하였다. 연구 시작, 중간 연구 및 종료 일자에 혈장 및 대변 샘플을 채취하였다. 이들 샘플은 질환 마커의 측정을 위해 사용되었다.
이 연구의 결과가 도 1 및 도 2에 도시되어 있다. 도 1은 HFD + 화합물 4 코호트 내의 동물들이 고지방 식이 섭취에도 불구하고 체중 손실을 겪었음을 보여준다. 도 2는 HFD + 화합물 4 코호트 내의 동물들의 포도당 내성이 HFD + 로시글리타존의 동물들의 포도당 내성을 초과하였음을 보여주며; 후자는 항당뇨병 약물로서 사용하도록 승인된 알려진 인슐린 민감제 약물이다.
이 연구의 결과는 예시적인 아실화된 활성제, 화합물 4가, 대상체에서 체중 손실을 유도할 수 있고 대사 마커(예: 포도당 내성)를 개선할 수 있음을 보여준다.
또한 질환 마커들을 다음과 같이 마우스로부터 채취한 간 조직에서 평가하였다. 마우스로부터의 간 조직을 채취하고, 10% 중성 완충 포르말린에 침지하여 고정하였다. 고정한 조직 시편을 조직학 처리 실험실(Premier Laboratory, 콜로라도 롱먼트)로 보냈으며, 여기에서 파라핀 포매, 절편화(약 4 μm), 마운팅하고, 헤마톡실린 및 에오신(H&E)으로 표준 방법을 사용하여 염색시켰다.
각 동물에 대한 간 절편(2)을 염증, 지방증(거대수포 공포화) 및 풍선화(미세혈관 공포화)에 대한 H&E 염색 슬라이드 스캔으로부터 인간 생검 점수에 기초하여 변형된 등급 척도를 사용하여 점수를 부여했다 (Brunt 등, Am J Clin Pathol, 128:837-47, 2007). 염증은 0= 염증 없음, 1=최소 (산재된 (엽) 염증 세포 중 1-3개 병소), 2=경증(문맥/문맥주위 염증이 있거나 없는 염증 세포 중 3-10개 산재된 병소), 3= 중간 (염증 세포 및/또는 표시된 문맥/문맥주위 염증 중 >10 산재된 (엽) 병소로 점수를 부여했다. 지방증을 다음과 같이 등급을 부여했다 (Brunt 등의 Am J Clin Pathol, 128:837-47, 2007): 0= 지방증 없음, 등급 1: < 33%; 등급 2: >33%, <66%; 3: > 66%. 풍선화는 다음과 같이 점수를 부여했다: 0= 풍선화 없음, 1= 희소/거의없음, 2= 미세수포 공포화 현상을 갖는 다수의 간세포.
이 연구의 결과가 도 3 내지 도 5g에 나타나 있다. 도 3은 고지방 식이와 예시적인 아실화된 활성제, 화합물 4 (EGCG-8A)을 받는 동물들이, 고지방 식이만을 섭취한 동물들보다 낮은 지방증 점수를 나타냈으며; 고지방 식이와 화합물 4(EGCG-8A)을 받는 동물들에 대해 관찰된 지방증 점수가 정상 식이를 섭취한 동물들의 대조군과 유사하였다. 도 4는 고지방 식이와 예시적인 아실화된 활성제, 화합물 4 (EGCG-8A)을 받는 동물들이, 고지방 식이만을 섭취한 동물들보다 낮은 풍선화 점수를 나타냈으며; 고지방 식이와 화합물 4(EGCG-8A)을 받는 동물들에 대해 관찰된 풍선화 점수가 정상 식이를 섭취한 동물들의 대조군과 유사하였다. 도 5a 내지 도 5g는 시험된 동물들로부터의 간의 조직학적 분석을 보여준다; 고지방 식이를 받는 동물들로부터의 간은 상당한 지방증을 나타낸 반면(도 5b), 고지방 식이와 화합물 4(EGCG-8A)를 받는 동물들로부터의 간은 상당히 낮은 지방증을 나타냈다.
예 4. 활성제 조합의 생체 내 평가
본원에 개시된 활성제(예를 들어, 아실화된 활성제 또는 활성제 조합)는 대사 마커를 조절하고 대사 장애를 치료하는 데에 유용할 수 있다. 본 예시는 예시적인 활성제 조합, 레스베라트롤 및 프리-케톤체가, 대상체에서 대사 마커(예를 들어, 복부 지방 축적뿐만 아니라 트리글리세리드 및 콜레스테롤 수준)를 개선하는 능력을 나타낸다.
음식 및 역삼투 식수에 대한 자유로운 접근을 포함하여, 시설에 대한 표준 사육 관행을 따랐다. 일차 인클로저는 접촉 또는 일시 중단된 케이지였다. 물을 병 또는 자동 랙 시스템에 공급하였다. 실내를 22-25℃에서 그리고 12시간 광 사이클 하에 유지하였다. 각 동물은 질병의 임상적 징후에 대한 도착 시점부터 연구 끝까지 매일 관찰되었다. 각 그룹은 8마리의 FATZO 마우스(근친교배 AKR/J 및 C57BL/6J)로 구성된다. 마우스에 5% 프룩토오스(Fructose)를 그들의 식수에 제공하였다. 1,3-부탄디올 또는 β-하이드록시부티레이트를 받는 동물들의 경우, 프룩토오스에 더하여 각각 4.2%(w/v) 또는 3%(w/v)에서 화합물을 식수에 용해시켰다. 레스베라트롤을 0.78%(w/w)의 용량 수준으로 식이에 전달하였다. 연구에 사용한 양성 대조군은 식이 내의 오베티콜산, 0.0523%(w/w)이었다. 1일차에, 동물들을 체중을 측정하고 치료군으로 무작위 배정하였다. 동물들을 연구의 전체 8주 동안 음식 및 식수에 자유롭게 접근될 수 있게 했다. 동물들을 매주 체중을 측정하고 음식 및 식수 소비를 모니터링하였다. 연구 시작, 중간 연구 및 종료 일자에 혈장 및 대변 샘플을 채취하였다. 이들 샘플은 질환 마커의 측정을 위해 사용되었다. 이 연구의 결과가 도 6-15에 나타나 있다.
도 6은 레스베라트롤 및 1,3-부탄디올의 조합을 섭취한 동물들이 대조군의 동물들보다 더 적은 복부 지방을 가졌음을 보여준다. 도 7은 β-하이드록시부티레이트 또는 1,3-부탄디올과 레스베라트롤의 조합을 섭취한 동물들이 대조군에 비해 혈청 트리글리세리드 레벨을 감소시켰음을 보여준다. 도 8은 β-하이드록시부티레이트 또는 1,3-부탄디올과 레스베라트롤의 조합을 섭취한 동물들이 대조군에 비해 감소된 혈청 콜레스테롤 수치를 가졌음을 보여준다. 도 9는 모든 그룹 내의 동물들이 동일한 일일 음식 소비를 가졌기 때문에, 도 3 내지 도 5에 나타낸 효과가 식욕 억제로부터 초래되지 않았음을 보여준다. 도 10은 예시적인 활성제 조합, 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트 또는 1,3-부탄디올을 받는 동물들이, 대조군 또는 NASH에 대한 잠재적 치료제로서 현재 조사중인 화합물인, 오베티콜산을 받는 동물들보다 더 낮은 평균 지방증 점수를 나타냈음을 보여준다. 도 11은 예시적인 활성제 조합, 레스베라트롤 및 β-하이드록시부티레이트를 받는 동물들이, 대조군 또는 오베스티콜산을 받는 동물들보다 낮은 평균 간 염증 점수를 나타냈음을 보여준다. 도 12는 오베스티콜산을 받는 동물들을 제외하고는, 시험된 요법을 받는 동물들에 대해 풍선화 점수가 실질적으로 동일하다는 것을 보여준다. 도 13은 섬유증 점수가 모든 시험된 동물에 대해 실질적으로 동일하다는 것을 보여준다. 도 14는 예시적인 활성제 조합(레스베라트롤 및 1,3-부탄디올)을 받는 동물들이 대조군 또는 β-하이드록시부티레이트 단독, 1,3-부탄디올 단독, 또는 레스베라트롤과 β-하이드록시부티레이트의 조합을 받는 동물들에 비해 감소된 간 중량을 나타냈음을 보여준다. 도 15는 예시적인 활성제 조합(레스베라트롤 및 1,3-부탄디올)을 받는 동물들이 대조군 또는 β-하이드록시부티레이트 단독, 1,3-부탄디올 단독, 또는 레스베라트롤과 β-하이드록시부티레이트의 조합을 받는 동물들에 비해 감소된 ALT 수준을 나타냈음을 보여준다.
예 5: 생체 내 FATZO DM2/비만 연구
11-12주령의 수컷 FATZO 마우스(Crown Bio)를 제2형 당뇨병(Diabetes Mellitus Type 2, DM2) 및 비만 연구를 위해 선택하였다. 마우스를 아래 나타낸 바와 같이 체중 및 혈당 수준에 기초하여 9개의 그룹으로 무작위 배정하였다. 화합물을 고지방 식이(HFD: D12492)에 투여하고 연구 종결 시까지 자유식이로 마우스에 제공하였다. 체중을 기준선에서 기록한 후, 그 후 주 2회 기록하였다. 연구 종료 시 0, 15, 30, 60, 90, 및 120분에 혈당 수준을 측정하였다. 28일 후 결과를 표 3에 나타낸다.
화합물 중량 차 VS 대조군 식이 (p-값) P 값 (중량 차) OGTT (AUC)
4 - 1.19 g 0.04 59443
14 - 1.58 g 0.05 65323
식이 중 로시글리타존 0.045% + 9.17 0.00 25222
대조군 식이 0 73800
P-값은 Benjamini-Hochberg FDR을 사용하여 보정된다.
위의 데이터는 본 발명의 접합체들이 II형 당뇨병, 당뇨병전기, 대사 증후군 또는 비만 치료에 유용할 수 있음을 입증한다.
예 6: 인슐린 민감성 모델에서 인간 피하 지방세포 내 포도당 흡수 및 인슐린 저항성 모델에서 인간 피하 지방세포 내 포도당 흡수
인슐린 민감성 모델에서 인간 피하 지방세포 내 포도당 흡수
일차 인간 피하 지방세포(Zen Bio, Research Triangle Park, 노스캐롤라이나)를 치료 전 2주 동안에 분화시켰다. 세포를 3회 24시간 동안 무혈청 배지에서 (디메틸-술폭시드) DMSO로 희석시킨 표시된 화합물로 처리하였다. 24시간 후, 완충액 분석을 위해 배지를 교환하고, 대략 1nM 인슐린 존재 하에 화합물을 다시 첨가하였다. 2-데옥시글루코오스 및 3H-2-데옥시글루코오스를 함유하는 칵테일을 첨가하여 포도당 흡수를 개시하고 2시간 동안 배양할 수 있도록 하였다. 세포를 세척하고, 용리시키고, 포도당 흡수를 웰당 계수로서 측정하였다. 분석 대조군으로서, 2시간의 포도당 흡수 동안 100nM의 인슐린을 사용하였다. 화합물 (R)-BHB 및 (R)-1,3-부탄디올은 인슐린-매개 포도당 흡수를 상당히 향상시켰다 (표 4). 포도당 흡수의 통계적 변화는 ANOVA에 의해 결정되었고 DMSO와 비교되었다.
인슐린 저항성 모델에서 인간 피하 지방세포 내 포도당 흡수
상술한 바와 같이, 일차 인간 피하 지방세포를 치료 전 2주 동안 분화시켰다. 인슐린 저항성 상태를 유도하기 위해, 세포들을 무 혈청 Dulbecco’Modified Eagle 배지 (고 포도당) 및 1μM 인슐린에서 24시간 동안 처리하였다. 세포를 DMSO에 희석된 화합물로 24시간 동안 동시에 처리하였다. 전술한 바와 같이, 24시간 후, 완충액 분석을 위해 배지를 교환하고, 대략 1nM 인슐린의 존재 하에 화합물을 다시 첨가하였다. 세포를 세척하고 2시간 후에 용리시키고 포도당 흡수를 측정하였다. 인슐린-저항성 상태에서, 화합물 (R)-BHB는 인슐린-매개 포도당 흡수를 상당히 향상시켰다(표 4). 포도당 흡수의 통계적 변화는 ANOVA에 의해 결정되었고 DMSO와 비교되었다.
인슐린 민감성 인슐린 저항성
화합물 DMSO % DMSO %
DMSO 100.0 100%
아세테이트 1 mM = =
아세테이트 3 mM = =
아라비노오스 0.5 mM = =
아라비노오스 1 mM ++ =
EGCG 100 nM = +
EGCG 10 μM = =
케르세틴 100 nM = =
케르세틴 1 μM = =
(R) 1,3 부탄디올 100 μM = =
(R) 1,3 부탄디올 500 μM ++ =
(R) BHB 2 mM ++ +
(R) BHB 20 mM ++ =
부티레이트 3 mM - +
프로피오네이트 3 mM = =
레스베라트롤 10 μM = =
레스베라트롤 100 μM - -
로시글리타존 10 μM = =
로시글리타존 100 μM ++ -
인슐린 100 nM +++ +
<50%: -
50%> <110%: =
110%> <140%: +
140% > <200%: ++
200%>: +++
결론: 이 분석에서 양성은 이 성분들이 인슐린-저항성 지방세포 내 인슐린-매개 포도당 흡수를 향상시키고, 이에 의해 제2형 당뇨병, 당뇨병전기, 대사 증후군, 및 비만 요법에서 포도당 내성을 개선할 수 있음을 나타낸다.
예 7: CYP1A1 mRNA 발현을 통한 Caco-2 세포 내 AhR 활성화 조사:
ATCC(American Type Culture Collection)의 Caco-2 세포들을 무균 조직 배양 처리된 96-웰 플레이트 (ThermoFisher)에 웰당 8.0 x 105 세포로 도말하고, 합류(confluence)를 달성하기 위해, DMEM 완성 (Gibco)에서 37OC, 5% CO2에서 밤새 생장시켰다. 인큐베이션 배지를 Caco-2 단층으로부터 흡인한 후, 조직을 200 μL의 데운 PBS 용액으로 세척하고, 이어서 190 μL의 미리-데운 생장 배지를 각각의 웰에 첨가하였다. 관심 화합물을 2% DMSO 함유 생장 배지에서 20X 농도로 희석하고, 10 μL의 화합물 용액을 각각의 웰에 3회 첨가하였다. 화합물을 37OC, 5% CO2에서 밤새 배양하였다. 2-(1'H-인돌-3'-카르보닐)-티아졸-4-카르복실산 메틸 에스테르 (ITE)를 1 및 100 μM 농도에서의 AhR 활성화를 위한 양성 대조군으로서 사용하였다. 배양 종료 시, 배지를 Caco-2 세포로부터 흡인해내고, 100 μL의 차가운 PBS 용액으로 세척하였다. 제조업체 프로토콜에 따라 TaqMan™ 유전자 발현 세포-대-CT™ Kit (ThermoFisher)를 통해 RNA를 추출하였다. QuantStudio 6 Flex (Applied Biosciences)를 사용하여 GAPDH를 내인성 대조군으로서 사용하여 CYP1A1의 mRNA 수준을 분석하였다. 양쪽 유전자에 대해 TaqMan™ 프로브 세트를 ThermoFisher로부터 얻었다. 샘플을 3회 실행하고 QuantStudio 소프트웨어를 사용하여 데이터를 분석하였으며 선형(표 1) 및 log2(ΔΔCT)값으로 보고하였다. 각각의 개별 화합물의 존재 시에 CYP1A1 수준을 비히클 음성 대조군에 비교하여 양측 t-검정 (two-tailed t-test)을 사용하여 통계적 분석을 수행하였다.
AHR의 활성화는 면역 조절과 연관되어 있으며 활성 화합물 (+, ++, +++)은 궤양성 대장염, 다발성 경화증, 류마티스성 관절염을 포함하는 다양한 염증 및 자가면역 질환 뿐만 아니라 다양한 대사 질환을 치료하는 데 유익할 수 있다.
농도 (μM) 평균 CYP1A1 mRNA 수준
비히클 대조군 N/A -
아세테이트 1000.0 -
아세테이트 3000.0 -
L-아라비노오스 1000.0 -
EGCG 0.1 -
EGCG 1.0 -
케르세틴 0.1 -
케르세틴 1.0 +
부탄디올 500.0 -
베타-하이드록시부티르산 2000.0 -
레스베라트롤 100.0 -
부티레이트 1000.0 -
부티레이트 3000.0 -
프로피오네이트 1000.0 -
프로피오네이트 3000.0 -
인돌-3-아세트산 500.0 -
인돌-3-아세트산 1000.0 -
인돌-3-부티르산 500.0 -
인돌-3-부티르산 1000.0 -
인돌-3-프로피온산 500.0 -
인돌-3-프로피온산 1000.0 -
인돌 1000.0 +
인돌-3-알데히드 1000.0 +
인돌-3-카르비놀 1000.0 +
인돌-3-아세트산 500.0 +++
인돌-3-아세트산 1000.0 ++
인돌-3-카르복실산 1000.0 -
인돌-3-아크릴산 10.0 +++
인돌-3-아크릴산 100.0 +++
인돌-3-아크릴산 1000.0 +++
인돌-3-피루브산 10.0 +++
인돌-3-피루브산 100.0 +++
인돌-3-피루브산 1000.0 +++
ITE 1uM 1.0 +++
유로리틴 B 10.0 ++
유로리틴 B 100.0 +++
유로리틴 C 10.0 ++
유로리틴 C 100.0 ++
4-하이드록시-3-메틸벤조산 10.0 +++
4-하이드록시-3-메틸벤조산 100.0 +++
벤조산 10.0 +
벤조산 100.0 +
하이드로신남산 10.0 +
하이드로신남산 100.0 +
L-트립토판 10.0 ++
L-트립토판 100.0 +++
D-트립토판 10.0 ++
D-트립토판 100.0 +++
L-호모세린 5.0 +
L-호모세린 50.0 +
L-아르기닌 5.0 +
L-아르기닌 50.0 +
미리세틴 10.0 +
미리세틴 100.0 ++
인돌-3-락트산 10.0 +
인돌-3-락트산 100.0 +++
4-하이드록시페닐피루브산 10.0 ++
4-하이드록시페닐피루브산 100.0 +++
프테로스틸벤 10.0 ++
프테로스틸벤 100.0 ++
아스타잔틴 10.0 +
아스타잔틴 100.0 +
3,4-디하이드록시페닐아세트산 10.0 +
3,4-디하이드록시페닐아세트산 100.0 ++++
δ-토코페롤 10.0 +
δ-토코페롤 100.0 +++
1-메틸인돌-3-알라닌 10.0 +
1-메틸인돌-3-알라닌 100.0 +++
피세아타놀 10.0 +
피세아타놀 100.0 +++
키뉴레닌 10.0 +
키뉴레닌 100.0 ++
비히클 = 기준선
- = < 2배 비히클
+ = > 2배 비히클
++ = > 5배 비히클
+++ = > 10배 비히클
예 8: 인간 Caco-2 장벽 무결성 분석
Caco-2 콜로니 세포를 DMEM (Dulbecco’Modified Eagle Medium)에서 37℃ 및 5% CO2에서 유지시키고 10% FBS, 1% NEAA, 1% 페니실린-스트렙토마이신을 보충하였다. 70-80% 합류에서, 세포를 트립신 처리하고 정점 및 기저측 구획 둘 다에서 보충된 DMEM으로 0.4cm2 트랜스-웰(transwell) 콜라겐 I 코팅된 막에 시딩하였다. 세포를 웰당 200,000개 세포 밀도로 시딩하고 10일 동안 유지시켜 1000Ω이 넘는 TEER(TransEpithelial Electrial Resistance) 판독을 갖는 편광된 배리어를 형성하였다W. 분석 첫째 날에, 초기 TEER 판독을 취하고 사이토카인을 기저측 배지(50 ng/mL TNFa, 25ng/mL IFNγ 및 10 ng/mL IL-1β)에 첨가하여 (디메틸술폭시드) DMSO에 희석된 화합물을 3회 정점 배지에 첨가하는 동안 장벽 무결성을 감소시켰다. 48시간 후, TEER 판독을 다시 취하고 CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay(세포 증폭 분석) (Promega)에 의해 생존력을 측정하였다. 48시간에 걸친 TEER의 백분율 변화를 결정하고 0.1% DMSO 대조군으로 정규화하였다 (표 6). 어떠한 화합물도 증식을 감소시키지 않으므로 세포 생존력을 변경시키지 않았다.
DMSO에서 TEER 변화 %
처리 없음 ++ (170%)
DMSO + 사이토카인 - (100%)
아세테이트 1 mM+ 사이토카인 -
아세테이트 3 mM + 사이토카인 -
아라비노오스 0.5 mM + 사이토카인 -
아라비노오스 1 mM + 사이토카인 -
EGCG 100 nM + 사이토카인 -
EGCG 1 μM + 사이토카인 -
케르세틴 100 nM + 사이토카인 -
케르세틴 1 μM + 사이토카인 +
부탄디올 100 μM + 사이토카인 -
부탄디올 0.5mM + 사이토카인 -
BHB200 μM + 사이토카인 +
BHB 2 mM + 사이토카인 -
레스베라트롤 10 μM + 사이토카인 -
레스베라트롤 100 μM + 사이토카인 +++
부티레이트 1 mM + 사이토카인 -
부티레이트 3 mM + 사이토카인 -
부티레이트 5 mM + 사이토카인 ++
프로피오네이트 1 mM + 사이토카인 +
프로피오네이트 3 mM + 사이토카인 ++
TEER의 통계적 변화는 ANOVA에 의해 결정되었고 DMSO와 비교하였다.
<125%: -
125%> <150%: +
150% > <200%: ++
200%>: +++
장벽 기능 및 무결성은 다양한 질환의 중요한 특징이며 손상된 GI 관의 각인일 수 있다. 염증은 장벽 기능의 감소를 유발할 수 있다. TEER를 개선함으로써, 세균 및 세균 산물의 전위가 덜 일어나며, 따라서 면역 반응과 GI 관 및 전신 면역계에 대한 손상을 약화시킨다. 이는 다음의 질환 영역에 있어서 중요하다: 제2형 당뇨병, 비만, 당뇨병전기, 및 대사 증후군.
예 9: 마우스 지방세포 지방분해 분석
마우스 3T3-L1 세포를 ATCC로부터 얻은 후 10% 초생 송아지 혈청 (NCS) 및 페니실린/스트렙토마이신 (P/S)을 함유한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's medium)에서 37℃에, 5% CO2가 있는 인큐베이터에서 배양하였다. 일단 세포들이 합류하게 되었다면, 이들을 조직 배양 처리한 96 웰 플레이트 내에 시딩하였다. 그런 다음 10% 소태아혈청, P/S, IBMS, 덱사메타손, 및 인슐린을 함유한 DMEM을 사용하여 분화를 개시하였다. 14일의 분화 후, 세포를 관심 화합물로 처리하였다. 처리 후 24시간 후에, 세포 생존력을 Promega 사의 CellTiter-Glo 발광 세포 생존력 검정을 사용하여 평가하였으며, ZenBio 사의 지방분해 검정 키트를 사용하여 지방분해를 결정하였다. 나트륨 BHB 0.2mM (DMSO 대조군의 86%)를 제외하고는, 어떠한 처리도 세포 생존력 (DMSO 대조군의 90% 초과)에 유의한 영향을 미치지 않았다.
지방분해
유리 지방산 글리세롤
DMSO % 변화 %
아세트산 1 mM ++ +
아세트산 3 mM ++ +
L-아라비노오스 0.5 mM ++ +
L-아라비노오스 1 mM ++ +
EGCG 100 nM ++ +
EGCG 1 μM ++ +
케르세틴 100 nM ++ +
케르세틴 1 μM ++ +
(R)-1,3-부탄디올 100 μM ++ +
(R)-1,3-부탄디올 0.5 mM ++ +
나트륨 BHB 0.2 mM ++ +
나트륨 BHB 2 mM ++ ++
나트륨 BHB 20 mM + ++
부티르산 3 mM ++ ++
프로피온산 3 mM +++ ++
로시글리타존 10 μM +++ ++
로시글리타존 100 μM +++ +++
레스베라트롤 1 μM + +
레스베라트롤 10 μM = ++
오베티콜산 100 μM = =
DMSO = (100%) = (100%)
90%> <100%: =
70% ><90%: +
50 > <70%: ++
50%<: +++
표 7은 유리 지방산 및 글리세롤의 방출을 감소시킨 화합물을 나타낸다(+, ++, 또는 +++). 인슐린 저항성 및 간 지방증을 포함하는 대사 기능이상과 연관된 백색 지방 조직의 지방분해율. 지방세포의 지방분해를 낮추는 화합물은 인슐린 민감도를 개선하고 간 지방증을 감소시키고, 이에 따라 당뇨병, 당뇨병 전기, 비만, II형 당뇨병, 및 고지혈증을 앓는 환자에서 결과를 개선하는 것을 포함하여 대사 기능을 개선할 수 있다.
예 10: 마우스 근세포 지방분해 분석
세포를 ATCC로부터 얻은 후 20% 우태혈청 및 1% 페니실린/스트렙토마이신을 함유한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's medium)에서 37℃에, 5% CO2가 있는 인큐베이터에서 배양하였다. 일단 세포들이 합류하게 되었다면, 이들을 조직 배양 처리한 96 웰 플레이트 내에 시딩하였다. 다음 날, 2% 말(equine) 혈청이 있는 DMEM을 함유한 배지를 사용하여 분화를 시작하였다. 세포가 완전히 분화되었으면, 그것은 표시된 화합물로 처리되었다.
처리 유리 글리세롤
%DMSO
아세트산 1 mM =
아세트산 3 mM =
L-아라비노오스 0.5 mM +
L-아라비노오스 1 mM +
EGCG 100 nM +
EGCG 1 μM +
케르세틴 100 nM +
케르세틴 1 μM +
(R)-1,3-부탄디올 100 μM +
(R)-1,3-부탄디올 0.5 mM +
나트륨 BHB 0.2 mM ++
나트륨 BHB 2 mM ++
부티르산 3 mM +++
프로피온산 3 mM ++
로시글리타존 10 μM ++
로시글리타존 100 μM ++
레스베라트롤 1 μM +
레스베라트롤 10 μM ++
오베티콜산 100 μM =
DMSO = (100.0%)
90%> <100%: =
70% ><90%: +
50 > <70%: ++
50%<: +++
표 8은 글리세롤의 방출을 감소시킨 화합물을 나타낸다(+, ++, 또는 +++). 근육 트리글리세리드의 지방분해율은 인슐린 저항성 및 간 지방증을 포함하는 대사 기능이상과 연관된다. 지방세포의 지방분해를 낮추는 화합물은 인슐린 민감도를 개선하고 간 지방증을 감소시키고, 이에 따라 당뇨병, 당뇨병 전기, 비만, II형 당뇨병, 및 고지혈증을 앓는 환자에서 결과를 개선하는 것을 포함하여 대사 기능을 개선할 수 있다.
예 11: 포도당 이용 및 지질혈증에 대한 아실화된 카테킨 폴리페놀의 생체 내 평가
방법
수컷 DIO 마우스(14-15주령, n=107)를 Jackson Labs(#380050)로부터 구입하였다. 수컷 C57BL/6 마우스에 6-14주령의 고지방 식이(HFD, 연구 식이 D12492)를 공급함으로써 DIO 마우스를 준비하였다. DIO 마우스를 개별적으로 수용하고 연구 기간 동안 HFD로 유지하였다. 12 시간의 광 주기를 22-5℃로 실내 온도를 유지하면서 유지시켰다. 모든 마우스를 연구 시작 전 5일 동안 시설에 순응시켰다.
5일 간의 시설 순응 후에, 하기 표 9에 나타낸 바와 같이, DIO 마우스를 처리에 대한 할당을 위한 체중 및 혈당에 기초하여 10의 8개 그룹으로 무작위 배정하였다:
그룹 처리
1 대조군
2 화합물 4 (6%)
3 화합물 4 (2%)
4 화합물 4 (0.6%)
5 화합물 53 (5%)
6 화합물 14 (6%)
7 레스베라트롤 (0.78%) + 1,3 부탄디올 (3%)
8 로시글리타존 0.045%
모든 처리를 HFD(Research Diets, 뉴저지 뉴브런즈윅)에서 혼합하여 투여하였으며, 자유식이로 30일 동안 제공하였다. 그룹 7에 대한 식수에 3% 농도로 1, 3 부탄디올을 보충하였다.
체중을 기준선에서 기록하고 그 후 주 2회 기록하였다. 섭식과 물 섭취를 매주 월요일, 수요일 및 금요일에 기록했다.
StatStrip에 의한 섭식 혈당 측정을 위해 투여 후 1시간에 기준선에서, 그 후 매주 꼬리 집게로 혈액 샘플(<3μL)을 얻었다. 기준선, 14일차 및 30일차에 투여 후 1시간에 꼬리 집게로 추가 항-응고 혈액 샘플(100μl, EDTA 디-칼륨 염)을 얻었다. 항-응고 샘플을 신속하게 냉동시키고 드라이 아이스에 보관하였다.
분변 샘플을 0, 14 및 27/28일차에 화합물 투여 6시간 후에 수집했다. 분변 샘플을 동결시켰다.
동물들은 28일차에 경구 포도당 내성 테스트 (OGTT)를 수행하기 위해 16시간 금식에 처해졌다. 전혈 포도당 분석(StatStrip)을 위해 포도당 로드(2.0g/kg, PO) 직전(8am) 및 15, 30, 60, 90분 후에 꼬리 집게를 통해 혈액 샘플을 얻었다. 마지막 샘플 다음에 먹이를 반환했다.
CO2 흡입 및 기흉 유도를 이용하여 30-31일째에 동물들을 종료시켰다. 말단 혈액 샘플을 심장 천자에 의해 수득하였다. 전혈을 혈청으로 처리하고 AU480 임상 분석기를 사용하여 혈청 콜레스테롤, 트리글리세리드, 고밀도 리포단백질(HDL), 저밀도 리포단백질(LDL) 및 비-에스테르화 지방산(NEFA)을 분석하였다.
기관 무게 (간, 비장, 피하 지방, 서혜부 지방, 복부 지방, 및 부고환 지방)을 기록하였다. 각 지방의 절편을 동결하거나 4% 파라포름알데히드/PBS, pH 6.9에 고정시켰다; 지방 샘플을 드라이 아이스 위에 놓았다. 고정된 간 샘플(4% 파라포름알데히드)을 H&E 염색 및 지방증, 염증 및 섬유증 점수를 부여하기 위해 Premier Laboratories에 보냈다. 비장 샘플은 PBS 또는 4% 파라포름알데히드 중 얼음처럼 차가운 5% 소 혈청 알부민(BSA)에서 준비되었다. 뇌, 심장, 폐, 소장 및 대장의 절편은 10% 포르말린으로 고정되었다.
병행하여, 27마리의 동물 (용량 그룹당 9 마리)에게 약동학적 샘플링을 위해 식이에서 화합물 4를 0.6, 2.0 및 6.0%로 투여하였다. 심장 천자에 의한 EDTA 디-칼륨염 혈장 채취를 위해 각 그룹에서 3마리 마우스를 1, 14 및 28일차에 종결시켰다. 혈장을 동결시켰다.
결과
모든 데이터는 그룹 평균 ±SEM으로 표시된다. JMP(SAS 소프트웨어)를 사용하여 데이터를 분석하였다. 모든 정규화는 말단 체중(terminal body weight)을 사용하여 계산하였다. 배정된 모든 마우스는 연구를 완료했다.
포도당에 대한 곡선 하 면적(AUC)은 OGTT 데이터로부터의 각각의 동물에 대응하는 0, 15, 30, 60, 90 및 120분 시점 사이의 사다리꼴 영역의 합으로 계산하였다. 그룹 간 기준선 차이는 Tukey-Kramer Hsd <0.05를 사용하여 확인하였다. 대조군과 비교한 치료 효과는 단방향 ANOVA (*, p<0.05) 다음에 적절한 경우 Dunnett의 테스트를 사용하여 결정하였다.
체중
16 주령의 DIO 마우스의 체중은 평균적으로 38.8 ±0.3g이었고 기준선에서 그룹 간에 유의한 차이가 없었다 (대조군의 경우 38.9 ±1.1, 38.8 ±0.9, 38.8 ±0.9, 38.6 ±0.9, 38.7 ±0.9, 38.8 ±1.1, 38.8 ±0.9 및 38.8 ±0.9g, 화합물 4는 6, 2 및 0.6%, 화합물 43, 화합물 14, 레스베라트롤/부탄디올 및 로시글리타존, 각각).
체중은 대조군 동물 및 화합물 4 (0.6-6 %), 레스베라트롤/부탄디올 및 로시글리타존을 투여한 동물에서 연구 과정 동안 기준선에 비해 증가하였다; 대조적으로, 화합물 43 및 화합물 14를 투여한 동물에서는 기준선과 비교하여 체중 감소가 관찰되었다.
기준선으로부터 체중의 변화는 화합물 43 (17.7 ±1.4 대 -1.8 ±3.2 %) 및 화합물 14 (17.7 ±1.4 대 -11.9 ±1.3 %)로 처리한 동물들의 대조군과 비교하여 유의하게 달랐다. 대조군과 비교하여 어떠한 다른 유의한 차이도 발견되지 않았다 (대조군의 경우 17.7 ±1.4, 13.5 ±2.0, 16.4 ±1.1, 15.7 ±1.0, 12.0 ±1.3 및 22.8 ±1.9 %, 화합물 4는 0.6, 2.0 및 6.0%, 레스베라트롤/부탄디올 및 로시글리타존, 각각).
혈당
15주령의 마우스의 기준선 혈당(섭취)은 평균적으로 170.0 ±2.3 mg/dL이었고 연구 시작 시 그룹 간에 기준선 수준에서는 유의한 차이가 없었다 (대조군의 경우 163.0 ±6.0, 162.5 ±5.2, 170.5 ±5.2, 167.7 ±6.5, 173.2 ±5.9, 177.3 ±7.3, 172.2 ±5.9 및 173.5 ±10.0, 화합물 4는 6%, 2%, 및 0.6%, 화합물 43, 화합물 14, 레스베라트롤/부탄디올 및 로시글리타존, 각각).
혈당은 모든 치료군에서의 기준선 값에 비해 감소하였다. 이 효과는 대조군(-3.2 ±5.3%)과 비교하여 화합물 14(-23.1 ±4.9%) 및 로시글리타존(-22.8 ±3.7%)을 투여한 동물에서 상당히 더 컸다. 대조군과 비교하여 어떠한 다른 유의한 차이도 발견되지 않았다 (대조군의 경우 -3.2 ±5.3, -4.3 ±3.0, -9.0 ±3.9, -15.6 ±3.1, -12.5 ±2.2 및 -10.9 ±4.0%, 화합물 4는 6,2 및 0.6%, 화합물 43, 및 레스베라트롤/부탄디올, 각각).
혈당 항상성
화합물 14를 투여한 동물에서 28일의 화합물 투여 후 공복 혈당 수준(OGTT로부터의 시간 0)은 대조군에 비해 유의하게 낮았다(90.3 ±4.0 대 63.1 ±1.9 mg/dL). 대조군에 비해 공복 포도당에 대한 다른 유의한 효과는 관찰되지 않았다(대조군의 경우 90.3 ±4.0, 95.1 ±4.4, 104.7 ±4.3, 107.3 ±5.3, 90.8 ±5.7, 100.5 ±6.7 및 91.3 ±2.5, 화합물 5는 6, 2 및 0.6 %, 화합물 53, 레스베라트롤/부탄디올 및 로시글리타존, 각각).
포도당 AUC(0-120분)는 대조군 (25196.3 ±678.8 mg/dL/분)과 비교하여 0.6%에서 화합물 5 (29628.0 ±1791.7 mg/dL/분) 및 화합물 53(30151.5 ±1680 mg/dL/분) 투여 후 유의하게 더 높았다. 대조군과 비교하여 어떠한 다른 유의한 차이도 발견되지 않았다 (대조군의 경우 25196.3 ±678.8, 26049.0 ±455.4, 27648.8 ±866.3, 25720.5 ±895.5, 28347.8 ±1220.9 및 24540.0 ±806.3 mg/dL/분, 화합물 14, 레스베라트롤/부탄디올 및 로시글리타존, 각각).
혈청 화학
말단 (섭취) 혈청 화학 값이 표 10에 제시되어 있다. 혈청 콜레스테롤, 트리글리세리드, LDL 및 NEFA는 대조군에 비해 화합물 14의 투여 후 상당히 낮았다. 혈청 LDL 및 NEFA는 대조군에 비해 화합물 53을 투여한 동물뿐만 아니라 레스베라트롤/부탄디올 처리 후 상당히 낮았다. 혈청 콜레스테롤, HDL 및 NEFA의 유의한 감소는 로시글리타존에 의한 치료 후에 분명했다.
기관 중량
기관 중량(%BW)과 관련하여, 서혜부 지방량 또는 비장 중량에 대한 어떠한 처리에서도 대조군에 비해 유의한 효과는 관찰되지 않았다. 로시글리타존은 대조군에 비해 피하 지방, 복부 지방 및 간 중량의 상당한 감소를 유발하였다. 화합물 14의 투여는 대조군에 비해 피하, 복부, 및 부고환 지방량의 감소를 유발한 반면 대조군에 비해 복부 지방의 상당한 감소는 화합물 53과 레스베라트롤/부탄디올로 처리된 후 관찰되었다(표 11). 표 10과 표 11의 데이터는 화합물 14 및 53이 특히, 대사 마커, 예를 들어, 콜레스테롤 수준(특히 LDL 수준), 트리글리세리드 수준, 피하 지방 양, 서혜부 지방 양, 및 부고환 지방 양을 감소시키는 데 있어서 높은 효능을 나타냈다. 따라서, 화합물 14 및 53는 대사 장애의 치료에 특히 유용할 수 있다.
말단 (섭취) 임상 화학
콜레스테롤
(mg/dL) 		트리글리세리드
(mg/dL) 		DL
(mg/dL) 		LDL
(mg/dL) 		NEFA
(mEq/L)
대조군 188.3 ±11.4 101.3 ±3.8 90.5 ±5.3 9.9 ±0.7 1.2 ±0.06
화합물 4 (6%) 200.4 ±14.2 89.9 ±5.7 91.5 ±5.1 12.3 ±0.9 1.1 ±0.04
화합물 4 (2%) 208.2 ±7.2 91.1 ±8.4 99.0 ±3.6 10.7 ±0.9 1.2 ±0.06
화합물 4 (0.6%) 193.9 ±11.0 97.7 ±10.1 94.4 ±4.0 9.2 ±0.9 1.2 ±0.04
화합물 53 (5%) 163.3 ±10.3 84.8 ±5.5 88.9 ±2.7 *6.5 ±0.7 *0.98 ±0.05
화합물 14 (6%) *121.5 ±9.4 *64.0 ±2.8 79.4 ±4.0 *4.9 ±0.4 *0.69 ±0.03
레스베라트롤 (0.78%) + 1,3 부탄디올 (3%) 169.2 ±10.2 88.0 ±6.7 82.5 ±4.2 *6.5 ±0.6 *0.97 ±0.06
로시글리타존 (0.045%) *121.5 ±7.3 91.3 ±4.8 *60.5 ±3.0 8.0 ±0.5 *0.71 ±0.04
*대조군 대비, Dunnett’(p<0.05)
기관 중량 (%BW)
피하 지방 (%BW) 서혜부 지방 (%BW) 복부 지방 (%BW) 부고환 지방 (%BW)
대조군 5.2 ±0.4 0.90 ±0.07 2.8 ±0.4 4.2 ±0.4
화합물 4 (6%) 5.0 ±0.6 0.95 ±0.08 2.2 ±0.1 4.7 ±0.3
화합물 4 (2%) 5.5 ±0.5 0.93 ±0.08 2.4 ±0.1 4.5 ±0.2
화합물 4 (0.6%) 4.9 ±0.4 0.99 ±0.17 2.1 ±0.2 4.7 ±0.2
화합물 53 (5%) 4.0 ±0.6 0.84 ±0.11 *1.9 ±0.2 4.1 ±0.4
화합물 14 (6%) *2.2 ±0.4 *0.40 ±0.06 *0.98 ±0.2 *2.6 ±0.3
레스베라트롤 (0.78%) + 1,3 부탄디올 (3%) 4.8 ±0.5 0.58 ±0.04 *1.9 ±0.2 4.4 ±0.2
로시글리타존 (0.045%) *7.6 ±0.5 0.78 ±0.05 *1.6 ±0.1 4.1 ±0.2
*대조군 대비, Dunnett’(p<0.05)
표 11에서, BW는 체중을 나타낸다.
예 12: 인간 조절 T 세포 분화 분석
건강한 자원자가 기증한 전혈 유래의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 Ficoll-Paque 기울기 원심분리에 의해 분리하고, 미처리(naive) CD4+ T 세포를 순차적으로 자석 비드 (EasySep™ 인간 미처리 CD4+ T 세포 분리 키트, 매사추세츠주 캠브리지)를 사용하여 단리하였다. 조절 T 세포 (Treg) 분화 분석을 위해, 미처리 CD4+ T 세포를 6일 동안 CTS OpTmizer 배지에서 배양하고 (1-10 × 104 세포) 5 ng/ml TGF-β, 100 U/ml IL-2 및 ImmunoCultTM 인간 CC3/CD28/CD2 T 세포 활성제; 화합물 포함/불포함 상태의 줄기세포 #10990)로 자극시켰다. 1:500 희석에서 생존력 염료(eBioscience Fixable Viability Dye eFluor 780: ThermoFisher 65-0865-14)를 사용하여 세포 생존력을 결정하였다. 세포를 Treg에 대해 게이팅하고, Live, CD11c-, CD14-, CD19-, CD8-, CD4+, CD3+, CD25+, FOXP3+로 정의하였다. Treg의 백분율(%)을 총 CD4+ T 세포에 대한 CD4+, CD25+, FOXP3+ 세포의 백분율로 계산하였다. 일방향 ANOVA를 사용하여 GraphPad Prism 소프트웨어로 통계 분석을 수행하였다.
처리 Treg 유도 세포 생존력
DMSO % DMSO %
아세트산 1 mM + =
아세트산 3 mM ++ =
L-아라비노오스 0.5 mM = =
L-아라비노오스 1 mM = =
EGCG 100 nM = =
EGCG 1 uM = =
케르세틴 100 nM = =
케르세틴 1 uM = =
(R)-1,3-부탄디올 100 uM = =
(R)-1,3-부탄디올 0.5 mM = =
나트륨 BHB 2 mM + =
나트륨 BHB 20 mM = -
부티르산 3 mM - -
프로피온산 3 mM ++ =
로시글리타존 10 uM = =
로시글리타존 100 uM = -
레스베라트롤 1 uM + -
레스베라트롤 10 uM + -
오베티콜산 100 uM + =
DMSO = (100.0) = (100.0)
<90%: -
90%> <110%: =
110%> <130%: +
130%>: ++
표 12는 미처리 CD4+ T 세포의 Tregs로의 분화를 증가시킨 화합물(+, ++), 또는 미처리 CD4+ T 세포의 Tregs로의 분화를 감소시킨 화합물(-)을 나타낸다. Tregs를 감소시키는 화합물(-)이 NASH 및 NAFLD에 유용할 수 있다.
예 13. 인간 말초 혈액 단핵구(PBMC)로부터의 사이토카인 방출에 대한 화합물 처리의 효과
인간 공여자 혈액(8 mL)을 구연산나트륨 CPT 튜브에 수집하고 실온에서 20분 동안 1,600 ×g에서 원심분리하였다. PBMC를 함유하는 버피 코트를 수집하고 실온에서 30 mL의 RPMI-1640 배지를 함유하는 50 mL 원뿔형 튜브로 옮겼다(페니실린-스트렙토마이신으로 보충됨). PBMC 샘플을 10℃에서 10분 동안 400 ×g에서 원심분리하였다. 펠릿화된 PBMC를 10 ml의 RPMI-1640 배지 (페니실린-스트렙토마이신으로 보충함)에서 두 번 세척한 다음, RPMI-1640 배지 (페니실린-스트렙토마이신, 소태아혈청, 및 L-글루타민으로 보충함)에 재현탁시켰다. PBMC를 70 마이크론 메쉬를 통해 여과하여 임의의 세포 파편을 제거하였다. 1.66 × 106 세포/mL을 달성하도록 부피를 조정하였으며, 여기서부터 180 μl (300,000 PBMC)을 96-웰 플레이트 (멸균, 조직 배양 처리한, 둥근 바닥)의 각각의 웰에 첨가하였다. 96-웰 플레이트에 있는 PBMC를 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 30분 동안 쉬게 한 다음, 10 μl의 표시된 화합물로 순차적으로 처리했다. 2시간 후 10 μL의 LPS(O111:B4) 1 mg/mL을 테스트 웰에 첨가하였다. 37℃, 5% CO2에서 24시간 배양 후, 100 μL 세포 상청액을 수집하고 96-웰 플레이트(비-조직 처리된, 평평한 바닥)로 옮겼다. 플레이트를 실온에서 5분 동안 350 ×g에서 원심분리한 다음, 투명한 상청액을 새로운 96-웰 플레이트(비-조직 처리된, 평평한 바닥)로 옮겼다. 나머지 세포를 CellTiter-Glo® Luminescent 세포 생존력 분석(Promega)를 사용하여 생존력을 시험하였다. Luminex Immunoassay Technology (MAGPIX System)를 사용하여 TNFα, IL-6 및 IL-1β (키트 LXSAHM-03; R&D Systems)에 대해 상청액을 분석하였다. LPS 처리된 DMSO 대조군 샘플의 사이토카인 수준을 100%로 설정하였고, 화합물 처리된 샘플들을 이에 대해 상대적으로 표현하였다 (표 13).
화합물 농도
(μM)		 TNFα
DMSO의 %
대조군 		IL6
DMSO %
대조군 		IL1β
DMSO %
대조군
프로피오네이트 100 + + +
아라비노오스 100 + + =
부탄디올 100 = = =
베타-하이드록시부티레이트 (BHB) 100 - = -
부티레이트 100 ++ + -
아세테이트 100 = = =
케르세틴 100 + + +
레스베라트롤 100 + + =
(-) >110% DMSO;
(=) 90% > < 110% DMSO
(+) 50% >< 90% DMSO
(++) < 50% DMSO
이 데이터들은 아실화된 활성제(예를 들어, 프로피오네이트, 부티레이트, 아라비노오스, 케르세틴 및/또는 레스베라트롤 포함)가 TNFα, IL6, 및/또는 IL1β 수준을 감소시킬 수 있음을 입증한다. 이 분석에서 활성인 화합물은 분비된 전염증성 사이토카인의 감소로 나타낸 바와 같이 인간 단핵구 배양물에서 항-염증 활성을 보여준다. 이것은 NAFLD 및 NASH의 처리에 유용하다.
예 14. 시험관 내 1,3 부탄 디올 전환 및 검출:
화합물 78의 스톡 용액을 DMSO 중에서 10 mM로 준비하였다. FaSSIF는 나트륨 타우로콜레이트(3.0mM), 레시틴(0.75mM), 및 판크레아틴(10mg/mL)을, pH 6.5에서, 제1 인산 나트륨(28.4mM), 수산화나트륨(8.7mM), 염화나트륨(105.9mM)의 준비된 용액에 혼합하여 제조되었다. 화합물 78을 FaSSIF에 첨가하여 최종 농도가 100 μM이 되도록 하였다. 중수소 표지된 화합물 d3-1,3 부탄디올을 인큐베이션 혼합물에 첨가하였다. 1,3-부탄디올의 방출을 UHPLC-MSMS를 통해 모니터링하고, 방출된 1,3-부탄디올의 보유 시간과 상응하는 단편화(fragmentation)를 스파이킹된 d3-1,3-부탄디올의 단편화와 비교하였다. 1,3-부탄디올의 방출을 0 시간, 2 시간 및 24 시간 시점에서 측정하였다. 매 주어진 시점에, 샘플들을 4 ℃에서 10분 동안 14000rpm으로 원심분리하였다. 상청액을 HPLC 바이알로 옮기고 즉시 분석하였다.
이 데이터들은 화합물 78이 위장관에서 전형적인 체류와 일치하는 기간 내에 모사 장액에서 1,3-부탄디올을 방출한다는 것을 입증한다.
예 15. NAFLD/NASH의 DIO 동물 모델에서 아실화된 활성제의 활성
생검 전 43주령 수컷 DIO-NASH 마우스에서의 대사성 간 질환에 대해 표시된 화합물에 대한 8주의 치료 효과를 평가하였다(그룹 당 12마리 동물). 수컷 C57BL/6JRj 마우스에 38주간 40% 지방(18% 트랜스 지방), 40% 탄수화물(20% 프룩토오스), 및 2% 콜레스테롤(AMLN) 식단을 공급하였다. 실험에 들어가는 모든 마우스를 간 생검을 기반으로 생검 전 층화하였다 (섬유증 1단계 이상, 지방증 점수가 2점 이상인 동물만 포함). Col1a1 면역 염색에 기초하여 동물들을 그룹으로 무작위 배정하였다. 총 8주의 투여(식단 중 약물, 자유식이)로 마우스를 치료하였다. 그룹: 1) NASH 대조군, 2) 화합물 4, AMLN 식단 내 6%, 3) 화합물 14, AMLN 식단 내 6%, 4) 화합물 53, AMLN 식단 내 5%, 5) 화합물 78, AMLN 식단 내 1.5%, 6) 화합물 15, AMLN 식단 내 7%, 7) 레스베라트롤, AMLN 식단 내 0.78%, 식수 내 부탄-1,3-디올 3%, 8) Elafibranor, AMLN 식단 내 0.03 %. Elafibranor는 공급 업체에서 공급했다. 체중을 전체 연구 기간 동안 매일 측정하였다. 음식 섭취량을 처음 14일 동안 매일 모니터링한 후, 연구가 끝날 때까지 주 2회 모니터링하였다. 28일째 꼬리 정맥 혈액/혈청 및 분변 채취. 간 트랜스아미나제(ALT, AST), 트리글리세리드 및 콜레스테롤의 바이오마커 결정을 위해 말단 혈장을 수집하였다. 말단 간을 제거하고, 무게를 재고, 1) FFPE(조직학), 2) 동결(생화학 및 핵산)을 샘플링하였다. 간 생검 조직학: 섬유증 단계(PSR)를 포함하는 치료 전 및 후 NAFLD 활성 점수 (HE), 2) 치료 후 지방증 (HE), 3) 치료 후 지질 방울 # + 크기 (HE), 4) 치료 후 갈렉틴-3 (IHC), 5) 치료 전 및 후 콜라겐 1a1 (IHC), 6) 치료 후 a-SMA (IHC). TG/TC/HP 함량에 대한 간 생화학 분석.
이 연구의 결과를 표 14에 나타낸다. 음식 섭취량은 임의의 화합물로 처리되는 영향을 받지 않았지만 (도 7), 모든 활성제 처리에 의해 체중이 상당히 감소했다. 간 손상의 혈청 바이오마커 (간 트랜스아미나제, ALT 및/또는 AST) 또한 모든 활성제 처리에 의해 상당히 감소했다.
그룹 # Comp. 동물
모델 		동물
수 		용량
[식단 내
% w/w] 		투약
빈도 		투약
방법
1 대조군 DIO-NASH 12 NA 자유식이 식단 내
2 4 DIO-NASH 11 6 자유식이 식단 내
3 14 DIO-NASH 12 6 자유식이 식단 내
4 53 DIO-NASH 12 5 자유식이 식단 내
5 78 DIO-NASH 12 1.5 자유식이 식단 내
6 15 DIO-NASH 12 7 자유식이 식단 내
7 레스베라트롤 DIO-NASH 13 0.78 자유식이 식단 내
1,3-부탄디올 3 물 속
8 Elafibranor DIO-NASH 12 0.03 자유식이 식단 내
예 16. 어린 마우스에서 NAFLD/NASH의 DIO 동물 모델에서 아실화된 활성제의 활성
종(수, 성별, 연령/체중): Jackson Laboratories, 스톡 #380050의 C57BL/6 DIO 마우스 (120 + 10 예비, 수컷, ~18주령). 참고: 최소 체중이 39g인 18주령 DIO 마우스를 보냈다. 예비 동물은 필요에 따라, 연구 동물을 대체하는 데 사용될 수 있으며, 용량 투여 완료 후 안락사 처리하거나, 시험 시설 목록 07-12로 옮겨질 수 있다.
화합물의 종류: 합성, 소분자
위험: 알 수 없음, 표준 PPE를 사용한다.
케이지 측면 관찰 (동물 건강 검사): 케이지 측면 동물의 건강 검사는 일반적인 건강, 치사율 및 병적 상태를 확인하기 위해 적어도 하루 한번 수행될 것이다. 임상 관찰: 예외에 따라 임상 관찰을 수행한다. 체중: 모든 동물에 대한 체중은 부검 전을 포함하여, 1일차 이전 및 그 후 주 2회 기록될 것이다 (~84일).
용량 관리: 그룹 3-8에 대한 투약량을 식이에서 자유식이로 제공할 것이다. 5 mL/kg 부피의 그룹 9(식염수) 및 10(123.4 μg/kg 세마글루타이드)에 대한 투약은 1일차에 시작하여, SC 투여에 의해 12주 동안 매주 3회 수행된다. 잔류 시험 물품: 모든 잔류 고지방 식단을 명목상 -20℃에서 냉동할 것이며, 연구 종료 시, 2-9 그룹(50ml 원뿔형 튜브 내)에 대한 여러 펠릿의 식단을 의뢰자에게 배송하고 나머지는 폐기할 것이다. 잔류 대조구 식단 (1 그룹)은 주변에 보관될 것이고, 연구 종료 시 50 rnL 원뿔형 튜브 내 여러 펠릿을 의뢰자에게 배송하고 나머지는 폐기할 것이다. 그룹 10에 대한 잔류 시험 재료는 명목상 -70℃에서 보관될 것이고, 연구 종료 시, 시험 재료의 분취물을 의뢰자에게 배송하고 나머지는 폐기할 것이다.
분변 펠릿 수집: 2 - 3개의 분변 펠릿을 섭식 후 대략 6시간에 1일차, 및 42, 84일에 (안락사 전) 모든 동물로부터 수집할 것이다. 분변 펠릿을 명목상 -70℃에서 보관하고 연구 종료 시 의뢰자에게 배송할 것이다.
음식 소비 : 1일차부터, 음식 소비를 각각의 시험 시설 연구 번호 UDI 18-01 9케이지 중 4페이지에서 측정할 것이다. 케이지 내부에서 제거되고 케이지 내로 놓이는 음식의 중량을 연구 기간 동안 주 3회(g) 기록한다. 각각의 측정시 큰 차우 조각이 있는지 침구를 검사할 것이다. 측정은 데이터 제출에 제공될 것이다.
인슐린 내성 테스트 (ipITT): 75일차 (+/- 2 일)에 ipITT가 수행될 것이다. 대략 4시간 금식 후, 0.5 Units/kg 체중의 인슐린 (Humulin R 멸균 희석제에서 0.1 Unit/mL의 농도로 희석된 Humulin R)을 IP 주사를 통해 5 mL/kg으로 투여할 것이다. 혈액은 인슐린 공격접종 전 (t = 0) 및 인슐린 공격접종 후 t = 15, 30, 60, 90 및 120분에 채취한다. 전 혈당 수치는 휴대용 혈당계에 의해 모든 시점에 평가되며 데이터 제출에 보고될 것이다. 이는 그룹 9/10 투약일을 피하기 위해 화요일에 또는 목요일에 예정된다.
경구 포도당 내성 테스트(oGTT) 82일째(+/- 2 일)에 oGTT가 수행될 것이다. 대략 4시간 금식 후, 2 g/kg 포도당 (0.4g/mL 농도로 주사를 위해 멸균수에 희석된 50% 덱스트로스)을 경구 섭식(PO)을 통해 5 mL/kg으로 투여할 것이다. 혈액은 포도당 공격접종 전 (t = 0) 및 포도당 공격접종 후 t = 15, 30, 60, 90 및 120분에 채취한다. 전 혈당 수치는 휴대용 혈당계에 의해 모든 시점에 평가되며 데이터 제출에 보고될 것이다. 이는 그룹 9/10 투약일을 피하기 위해 화요일에 또는 목요일에 예정된다.
중간 혈액 채취: 전혈(~0.125 mL)을 1일차(섭식 전환 후 6시간±5%), 42 및 84에 꼬리를 잘라 모든 동물로부터 K.2-EDTA 마이크로베트(microvettes) 또는 동등한 것으로 채취할 것이다. 전혈은 시험 시설 SOP 당 혈장으로 처리된다. 혈장은 각각 대략 0.025 mL의 두 분취물로 나누어 명목상 -70℃에서 보관하고 연구 종료 시 의뢰자에게 배송할 것이다. 3 그룹에 대한 예외: 혈장은 새로 준비된 300mg/mL 아스코르브산을 함유하는 튜브에 분취할 것이다: 물 속의 Sigma 95209-S0G (3 μL 아스코르브산/25 μL 혈장).
포도당용 전혈: 1일째부터 시작하여, 그리고 그 후 적어도 매주, 중간 전혈 샘플(~5 μL)을 채취하고 휴대용 혈당계를 사용하여 직접 판독할 것이다. 결과는 데이터 제출에 기록되어 보고된다.
안락사 및 말단 혈액 수집: 그룹 1-10은 ~84일에 안락사시킬 것이다. 모든 동물은 CO2 질식 후 개흉술 및 말단 혈액 채취에 의해 안락사될 것이다. 전혈을 심장 천자를 통해 혈청 분리기 튜브로 수집하고 시설 SOP 당 혈청으로 처리할 것이다. 혈청 샘플은 5개의 분취물로 나누어질 것이고; 하나는 ALT/AST 용 30μL (분취물 #1), 지질 패널 분석용 75 μL (분취물 #2), TNF-a/IL-6 분석용 70 μL (분취물 #3), TGF-~ 분석용 70 μL (분취물 #4), 의뢰자용 잔여 혈청 (가능한 경우, 분취물 #5). 모든 혈청 샘플은 시험 시설에서 분석할 때까지 명목상 -70℃에서 보관하거나 분석을 위해 하도급자에게 배송하거나, 분석을 위해 드라이 아이스에 담아 의뢰자에게 배송될 것이다 (의뢰자의 분석은 데이터 제출에 포함되지 않음).
조직 수집 : 외혈 후 모든 동물에 대해 간 전체와 피하/복부 지방 패드를 수확할 것이다. 각 조직의 무게를 잴 것이다. 6 엽 중 좌측 간 검사 시설 연구 번호 UDI 18-01 5페이지를 카세트에 넣고 4% PF A에 고정하고, 추가 처리를 위해 하청업체로 배송할 때까지 2-5℃에서 보관한다. 간 중위 및 우측 엽은 액체 질소에서 동결될 것이다. 샘플은 드라이 아이스에 담아 의뢰자에게 배송할 때까지 명목상 -70℃에서 보관될 것이다.
피하 및 복부 지방 패드는 반으로 나누어질 것이다. 각 패드의 절반을 카세트에 넣고 4% PF A에 고정하고, 연구 종료 시 의뢰자에게 배송할 때까지 2-8℃에 보관한다. 각 지방 패드의 다른 절반은 액체 질소에서 동결될 것이다. 샘플은 드라이 아이스에 담아 의뢰자에게 배송할 때까지 명목상 -70℃에서 보관될 것이다.
ALT/AST 혈청 분석: 말단 혈청 분취물 #1은 시험 시설에서 ELISA에 의해 ALT 및 AST 수준에 대해 측정되며, 그 결과는 데이터 제출에 포함될 것이다.
지질 패널 혈청 분석: 말단 혈청 분취물 #2는 하청업자에 의해 HDL, LDL, 트리글리세리드 및 총 콜레스테롤에 대해 측정되며, 그 결과는 데이터 제출에 포함될 것이다.
혈청 사이토카인: 말단 혈청 분취물 #3은 TNF-a., TGF-/3 수준에 대해 멀티플렉스로 측정하고, 말단 혈청 분취물 #4는 하청업자에 의해 IL-6에 대해 개별적으로 측정하고, 그 결과는 데이터 제출에 포함될 것이다.
데이터 제출: 동물 할당, 용량 투여 및 안락사 시간에 대한 개인 및 그룹 수단 (해당되는 경우), 체중, 음식 소비 데이터, 임상 관찰, 치사율 (해당되는 경우), 혈청 화학, 최종 수집 데이터 및 해당되는 경우 기타 데이터를 포함한, 데이터 제출 (Excel™)이 본 연구를 위해 발행될 것이다.
데이터 보존: 본 연구의 데이터는 연구 데이터 발행일로부터 6개월의 기간 동안 시험 시설에서 보존될 것이다. 의뢰자에게 6개월의 보존 기간이 만료되기 전에 데이터 처분을 결정하기 위해 연락을 취할 것이며; 처분 옵션은 의뢰자에게 배송하거나 시험 시설(유료 기반)에 의해 보유하는 것이다. 통지 후 60일 이내에 데이터 처분이 해결되지 않을 경우, 시험 시설은 데이터를 폐기한다.
경구 포도당 내성 테스트 (oGTT) 82일째 (+/- 2 일)에 oGTT가 수행될 것이다. 대략 4시간 금식 후, 2 g/kg 포도당 (0.4g/mL 농도로 주사를 위해 멸균수에 희석된 50% 덱스트로스)을 경구 섭식(PO)을 통해 5 mL/kg으로 투여할 것이다. 혈액은 포도당 공격접종 전 (t = 0) 및 포도당 공격접종 후 t = 15, 30, 60, 90 및 120분에 채취한다. 전 혈당 수치는 휴대용 혈당계에 의해 모든 시점에 평가되며 데이터 제출에 보고될 것이다. 결과를 표 15, 16 및 17에 나타낸다.
체중 변화 % 대조군 대비 차이% P -값
HFD 22.9 대조군
ND -18.9 -41.8 0.0001 (일방향 ANOVA)
화합물 4 19 -4 0.799 (일방향 ANOVA)
화합물 14 16 -7 0.2537 (일방향 ANOVA)
화합물 15 23 0 0.9999 (일방향 ANOVA)
화합물 53 10 -13 0.0024 (일방향 ANOVA)
화합물 184 11 -12 0.0121 (일방향 ANOVA)
화합물 78 21 -2 0.9935 (일방향 ANOVA)
식염수 26 대조군
%HbA1c P -값 통계적 방법
HFD 7.18 대조군
ND 6.55 0.9271 일방향 ANOVA
화합물 4 4.89 0.0169 일방향 ANOVA
화합물 14 6.93 0.9994 일방향 ANOVA
화합물 15 6.50 0.8255 일방향 ANOVA
화합물 53 4.35 0.0006 일방향 ANOVA
화합물 184 5.96 0.2976 일방향 ANOVA
화합물 78 6.14 0.4839 일방향 ANOVA
식염수 5.96 대조군
세마글루타이드 7.90 0.8797 스튜던트 t 테스트
OGTT P -값 P -값
HFD 28853
ND 20182 0.0001 (일방향 ANOVA) <0.0001 (스튜던트 t 시험)
화합물 4 25072 0.0665 (일방향 ANOVA) 0.0036 (스튜던트 t 시험)
화합물 14 32591 0.0813 (일방향 ANOVA) 0.0816 (스튜던트 t 시험)
화합물 15 32722 0.0574 (일방향 ANOVA) 0.0257 (스튜던트 t 시험)
화합물 53 25779 0.1912 (일방향 ANOVA) 0.0131 (스튜던트 t 시험)
화합물 184 27257 0.8100 (일방향 ANOVA) 0.1801 (스튜던트 t 시험)
화합물 78 29944 0.9637(일방향 ANOVA) 0.4304 (스튜던트 t 시험)
식염수 33551
세마글루타이드 18214 <0.0001 (스튜던트 t 시험)
기타 실시예
본 발명의 범주 및 사상을 벗어나지 않고 기술된 본 발명의 다양한 수정 및 변형이 당 분야의 숙련자에게 명백할 것이다. 본 발명이 특정 실시예와 관련하여 설명되었지만, 청구된 본 발명은 이러한 특정 실시예에 부당하게 한정되지 않아야 한다는 것을 이해해야 한다. 실제로, 당 분야의 숙련자에게 명백한 본 발명을 수행하기 위한 설명된 모드의 다양한 변형은 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 의도된다.
다른 실시예들은 청구범위에 있다.

Claims (258)

  1. 필요로 하는 대상체에서 대사 마커 또는 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 방법으로, 상기 방법은 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 엘라그산, 아실화된 엘라그산 유사체, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 아미노산, 아실화된 담즙산, 아실화된 메살라민, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 비타민 및 아실화된 하이드록시벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된 활성제의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 방법은 대사 마커를 조절하는 것인, 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 방법은 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 것인, 방법.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 대사 마커는 비만 장애에 대한 것인, 방법.
  5. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대사 마커는 II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 대사 증후군, 고콜레스테롤혈증, 또는 고지혈증을 위한 것인, 방법.
  6. 필요로 하는 대상체에서 대사 장애 또는 비알코올성 지방 간 질환을 치료하는 방법으로, 상기 방법은 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 엘라그산, 아실화된 엘라그산 유사체, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 아미노산, 아실화된 담즙산, 아실화된 메살라민, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 비타민 및 아실화된 하이드록시벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된 활성제의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  7. 제6항에 있어서, 상기 방법은 대사 장애를 치료하기 위한 것인, 방법.
  8. 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 대사 장애는 비만 장애인, 방법.
  9. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 총 지방 비율, 세포 지방과다(adiposity), 체질량 지수, 체중 증가율, 복부 지방량, 백색 대 갈색 지방 비율, 지방합성(lipogenesis) 수준 또는 지방 저장 수준이 상기 투여 단계 후에 감소되는, 방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 총 지방 비율, 세포 지방과다(adiposity), 체질량 지수, 복부 지방량, 또는 백색 대 갈색 지방 비율이 상기 투여 단계 후에 감소되는, 방법.
  11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 과체중인, 방법.
  12. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 비만을 앓고 있는, 방법.
  13. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 중증(severe) 비만, 고도(morbid) 비만 또는 초(super) 비만을 앓고 있는, 방법.
  14. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 25 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  15. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 28 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  16. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 30 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  17. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 35 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  18. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 45 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  19. 제5항 또는 제6항에 있어서, 상기 대사 장애는 II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 대사 증후군, 고콜레스테롤혈증, 또는 고지혈증인, 방법.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 인슐린, GLP-1 또는 PYY의 수준은 상기 활성제를 상기 대상체에게 투여한 후에 증가되는, 방법.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 혈당 또는 헤모글로빈 A1c의 수준은 상기 활성제를 상기 대상체에게 투여한 후에 감소되는, 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 포도당 내성은 상기 활성제를 상기 대상체에게 투여한 후에 증가되는, 방법.
  23. 제5항 또는 제6항에 있어서, 상기 방법은 비알코올성 지방 간 질환을 치료하기 위한 것인, 방법.
  24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 상기 활성제를 상기 대상체에게 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  25. 제24항에 있어서, 상기 대상체에게 경구 투여 후, 상기 활성제는 상기 대상체의 위장관에서 절단될 수 있는, 방법.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 적어도 1개의 지방산을 방출하는, 방법.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 스틸베노이드인, 방법.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기를 포함하는, 방법.
  29. 제28항에 있어서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 적어도 1개의 프리-케톤체 함유 기를 포함하는, 방법.
  30. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1개, 2개, 또는 3개의 하이드록실기를 갖는 레스베라트롤(resveratrol)인, 방법.
  31. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 메살라민인, 방법.
  32. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 카로티노이드인, 방법.
  33. 제32항에 있어서, 상기 아실화된 카로티노이드는 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1개 또는 2개의 하이드록실기를 갖는 아스타잔틴(astaxanthin)인, 방법.
  34. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체인, 방법.
  35. 제34항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 케톤체 코어를 가지는, 방법.
  36. 제34항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 프리-케톤체 코어를 가지는, 방법.
  37. 제34항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체는 적어도 1개의 지방산 함유 기를 포함하는, 방법.
  38. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌인, 방법.
  39. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 아미노산, 아실화된 엘라그산, 또는 아실화된 엘라그산 유사체인, 방법.
  40. 제39항에 있어서, 상기 아실화된 아미노산은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 1개의 아미노기를 가지는 L-알라닌인, 방법.
  41. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 담즙산인, 방법.
  42. 제41항에 있어서, 상기 아실화된 담즙산은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1개 또는 2개의 알코올 하이드록실기를 갖는 우르소데옥시콜산(ursodeoxycholic acid)인, 방법.
  43. 제41항에 있어서, 상기 아실화된 담즙산은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1개 또는 2개의 알코올 하이드록실기를 갖는 오베티콜산(obeticholic acid)인, 방법.
  44. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 당인, 방법.
  45. 제44항에 있어서, 상기 아실화된 당은 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 1개 이상의 하이드록실을 갖는 단당류인, 방법.
  46. 제45항에 있어서, 상기 단당류는 자일로오스, 아라비노오스, 람노오스, 푸코오스, 글루코사민, 또는 타가토오스인, 방법.
  47. 제44항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 당은 적어도 1개의 지방산 함유 기를 포함하고, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실인, 방법.
  48. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 쉬킴산인, 방법.
  49. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 비타민인, 방법.
  50. 제49항에 있어서, 상기 아실화된 비타민은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 하이드록실기를 갖는, 토코페롤인, 방법.
  51. 제49항에 있어서, 상기 아실화된 비타민은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1, 2, 3, 또는 4개의 하이드록실기를 갖는 아스코르브산인, 방법.
  52. 제49항에 있어서, 상기 아실화된 비타민은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 치환된 하이드록실기를 갖는 비타민 D인, 방법.
  53. 제49항에 있어서, 상기 비타민 D는 콜레칼시페롤(cholecalciferol)인, 방법.
  54. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 하이드록시벤조산인, 방법.
  55. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 메트포르민인, 방법.
  56. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 카테킨 폴리페놀인, 방법.
  57. 제56항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1 내지 8개의 하이드록실기를 갖는 에피갈로카테킨 갈레이트인, 방법.
  58. 제56항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 지방산 아실 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기로 독립적으로 치환된 1 내지 5개의 하이드록실기를 가지는 실리비닌(silibinin)인, 방법.
  59. 제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 적어도 1개의 케톤체를 포함하는, 방법.
  60. 제1항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 적어도 1개의 프리-케톤체를 포함하는, 방법.
  61. 제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 적어도 1개의 α-리포산 아실을 포함하는, 방법.
  62. 제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 적어도 1개의 트리메틸글리신 아실을 포함하는, 방법.
  63. 제1항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 적어도 1개의 담즙산 아실을 포함하는, 방법.
  64. 제63항에 있어서, 상기 담즙산 아실은 오베티콜산 아실 또는 우르소데옥시콜산 아실인, 방법.
  65. 제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 적어도 1개의 지방산 아실을 포함하는, 방법.
  66. 제1항 내지 제65항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 지방산 함유 기를 포함하는, 방법.
  67. 제66항에 있어서, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 단당류, 당 알코올, 또는 당산인, 방법.
  68. 제66항에 있어서, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실인, 방법.
  69. 제66항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 지방산은 단쇄 지방산인, 방법.
  70. 제69항에 있어서, 상기 단쇄 지방산은 아세틸, 프로피오닐, 또는 부티릴인, 방법.
  71. 제69항에 있어서, 상기 단쇄 지방산은 아세틸인, 방법.
  72. 제69항에 있어서, 상기 단쇄 지방산은 프로피오닐 또는 부티릴인, 방법.
  73. 제1항 내지 제72항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기를 포함하는, 방법.
  74. 제73항에 있어서, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 케톤체 함유 기인, 방법.
  75. 제73항에 있어서, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 프리-케톤체 함유 기인, 방법.
  76. 제56항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I)의 화합물:
    Figure pct00369
    ,
    (I)
    또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
    여기서
    Figure pct00370
    은 단일 탄소-탄소 결합 또는 이중 탄소-탄소 결합이고;
    Q는 -CH2- 또는 -C(O)-이고;
    각각의 R1 및 각각의 R3은 독립적으로 H, 할로겐, -ORA, 인산염, 또는 황산염이고;
    R2는 H 또는 -ORA이고;
    각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 단당류, 당산, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고;
    n과 m의 각각은 독립적으로 0, 1, 2, 3, 또는 4이고;
    적어도 1개의 R1은 -ORA이고, 여기에서 RA는 지방산 함유 기인 것을 전제로 하거나, 상기 화합물이 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기를 포함하는 것을 전제로 하는, 방법.
  77. 제76항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-a)의 화합물인, 방법:
    Figure pct00371
    .
    (I-a)
  78. 제76항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-b)의 화합물인, 방법:
    Figure pct00372
    .
    (I-b)
  79. 제76항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-c)의 화합물인, 방법:
    Figure pct00373
    .
    (I-c)
  80. 제76항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-d)의 화합물인, 방법:
    Figure pct00374
    .
    (I-d)
  81. 제76항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-f)의 화합물인, 방법:
    Figure pct00375
    .
    (I-f)
  82. 제76항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, n은 2인, 방법.
  83. 제76항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, m은 1인, 방법.
  84. 제76항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, m은 2인, 방법.
  85. 제76항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서, m은 3인, 방법.
  86. 제76항 내지 제85항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R1은 독립적으로 -ORA인, 방법.
  87. 제76항 내지 제86항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R3은 독립적으로 H 또는 -ORA인, 방법.
  88. 제76항 내지 제87항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 H 또는 -ORA인, 방법.
  89. 제76항 내지 제88항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 함유 기, 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기인, 방법.
  90. 제76항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-e)의 화합물:
    Figure pct00376

    (I-e)
    또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
    여기서 R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 R1에 대해 정의된 바와 같고; 그리고 R3A, R3B 및 R3C의 각각은 독립적으로 R3에 대해 정의된 바와 같은, 방법.
  91. 제90항에 있어서, R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 -ORA인, 방법.
  92. 제90항 또는 제91항에 있어서, R3A, R3B 및 R3C의 각각은 독립적으로 H, 할로겐, 또는 -ORA인, 방법.
  93. 제76항 내지 제92항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 하기 식의 기이고:
    Figure pct00377
    , 여기서 p는 1, 2, 3, 또는 4이고, 각각의 R4는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 방법.
  94. 제93항에 있어서, p는 3인, 방법.
  95. 제93항 또는 제94항에 있어서, 각각의 R4는 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시인, 방법.
  96. 제93항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 하기 식의 기이고:
    Figure pct00378
    , 그리고
    R4A, R4B, 및 R4C의 각각은 R4에 대해 정의된 바와 같은, 방법.
  97. 제96항에 있어서, R4A, R4B, 및 R4C의 각각은 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시인, 방법.
  98. 제76항 내지 제97항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 아실, 또는 임의로 아실화된 단당류인, 방법.
  99. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 당인, 방법.
  100. 제99항에 있어서, 상기 아실화된 당은 단당류 코어를 포함하는, 방법.
  101. 제100항에 있어서, 상기 단당류 코어는 자일로오스, 아라비노오스, 람노오스, 푸코오스, 글루코사민, 또는 타가토오스인, 방법.
  102. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 쉬킴산인, 방법.
  103. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 하이드록시벤조산인, 방법.
  104. 제103항에 있어서, 상기 아실화된 하이드록시벤조산은 갈산을 포함하는, 방법
  105. 제76항 내지 제104항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 적어도 1개의 지방산 아실을 포함하는, 방법.
  106. 제105항에 있어서, 상기 지방산 아실은 단쇄 지방산 아실인, 방법.
  107. 제106항에 있어서, 상기 단쇄 지방산 아실은 아세틸, 프로피오닐, 또는 부티릴인, 방법.
  108. 제107항에 있어서, 상기 단쇄 지방산 아실은 아세틸인, 방법.
  109. 제108항에 있어서, 상기 단쇄 지방산 아실은 부티릴인, 방법.
  110. 필요로 하는 대상체에서 대사 마커 또는 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 방법으로, 상기 방법은 유효량의 제1 활성제 및 유효량의 제2 활성제를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제1 활성제는 카테킨 폴리페놀, 스틸베노이드, 단당류, 하이드록시벤조산, 카로티노이드, 비타민, S-아데노실-L-메티오닌, 담즙산, 메트포르민, 쉬킴산, 또는 메살라민이고, 상기 제2 활성제는 케톤체 또는 프리-케톤체인, 방법.
  111. 제110항에 있어서, 상기 방법은 대사 마커를 조절하는 것인, 방법.
  112. 제110항에 있어서, 상기 방법은 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 것인, 방법.
  113. 제110항에 있어서, 상기 대사 마커는 비만 장애에 대한 것인, 방법.
  114. 제110항에 있어서, 상기 대사 마커는 II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 대사 증후군, 고콜레스테롤혈증, 동맥경화증 또는 고지혈증을 위한 것인, 방법.
  115. 필요로 하는 대상체에서 대사 장애 또는 비알코올성 지방 간 질환을 치료하는 방법으로, 상기 방법은 유효량의 제1 활성제 및 유효량의 제2 활성제를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 상기 제1 활성제는 카테킨 폴리페놀, 스틸베노이드, 단당류, 하이드록시벤조산, 카로티노이드, 비타민, S-아데노실-L-메티오닌, 담즙산, 메트포르민, 메살라민 또는 쉬킴산이고, 상기 제2 활성제는 케톤체 또는 프리-케톤체인, 방법.
  116. 제115항에 있어서, 상기 대사 장애는 비만 장애인, 방법.
  117. 제110항 내지 제116항 중 어느 한 항에 있어서, 총 지방 비율, 세포 지방과다(adiposity), 체질량 지수, 체중 증가율, 복부 지방량, 백색 대 갈색 지방 비율, 지방합성(lipogenesis) 수준 또는 지방 저장 수준이 상기 투여 단계 후에 감소되는, 방법.
  118. 제110항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 과체중인, 방법.
  119. 제110항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 비만을 앓고 있는, 방법.
  120. 제110항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 중증(severe) 비만, 고도(morbid) 비만 또는 초(super) 비만을 앓고 있는, 방법.
  121. 제110항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 25 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  122. 제110항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 28 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  123. 제110항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 30 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  124. 제110항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 35 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  125. 제110항 내지 제117항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 적어도 45 kg/m2의 체질량 지수를 가지는, 방법.
  126. 제115항에 있어서, 상기 대사 장애는 II형 당뇨병, 당뇨병전기, 인슐린 저항성, 대사 증후군, 고콜레스테롤혈증, 동맥경화증 또는 고지혈증인, 방법.
  127. 제110항 또는 제126항에 있어서, 인슐린, GLP-1 또는 PYY의 수준은 상기 제1 및 제2 활성제를 상기 대상체에게 투여한 후에 증가되는, 방법.
  128. 제110항 또는 제126항에 있어서, 혈당 또는 헤모글로빈 A1c의 수준은 상기 제1 및 제2 활성제를 상기 대상체에게 투여한 후에 감소되는, 방법.
  129. 제110항 또는 제127항에 있어서, 포도당 내성은 상기 제1 및 제2 활성제를 상기 대상체에게 투여한 후에 증가되는, 방법.
  130. 제110항 내지 제129항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 상기 제1 활성제를 상기 대상체에게 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  131. 제110항 내지 제130항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 상기 제2 활성제를 상기 대상체에게 경구로 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  132. 제110항 내지 제131항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 및 제2 활성제는 상기 대상체에게 개별적으로 투여되는, 방법.
  133. 제132항에 있어서, 상기 제1 및 제2 활성제는 서로 24시간 이내에 상기 대상체에게 투여되는, 방법.
  134. 제110항 내지 제132항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 및 제2 활성제는 상기 대상체에게 동시에 투여되는, 방법.
  135. 제134항에 있어서, 상기 제1 및 제2 활성제는 동일한 단위 투여량 형태로 상기 대상체에게 투여되는, 방법.
  136. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제는 스틸베노이드인, 방법.
  137. 제110항 내지 제136항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스틸베노이드는 레스베라트롤인, 방법.
  138. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제는 카로티노이드인, 방법.
  139. 제138항에 있어서, 상기 카로티노이드는 아스타잔틴(astaxanthin)인, 방법.
  140. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제는 비타민인, 방법.
  141. 제140항에 있어서, 상기 비타민은 토코페롤, 아스코르브산, 또는 비타민 D인, 방법.
  142. 제141항에 있어서, 상기 비타민 D는 콜레칼시페롤(cholecalciferol)인, 방법.
  143. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제는 카테킨 폴리페놀인, 방법.
  144. 제143항에 있어서, 상기 카테킨 폴리페놀은 에피갈로카테킨 갈레이트인, 방법.
  145. 제143항에 있어서, 상기 카테킨 폴리페놀은 실리비닌(silibinin) 또는 케르세틴(quercetin)인, 방법.
  146. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제는 S-아데노실-L-메티오닌인, 방법.
  147. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제는 담즙산인, 방법.
  148. 제147항에 있어서, 상기 담즙산은 우르소데옥시콜산(ursodeoxycholic acid) 또는 오베티콜산(obeticholic acid)인, 방법.
  149. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제는 아미노산인, 방법.
  150. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아미노산은 L-알라닌인, 방법.
  151. 제110항 내지 제135항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제는 메트포르민인, 방법.
  152. 제110항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 활성제는 케톤체인, 방법.
  153. 제110항 내지 제151항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 활성제는 프리-케톤체인, 방법.
  154. 제110항 내지 제153항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 활성제 대 상기 제2 활성제의 몰비는 1:1 내지 1:10인, 방법.
  155. 제1항 내지 제154항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 상기 대상체의 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 수준을, 상기 투여 단계 전 대상체의 혈중 알라닌 트랜스아미나제의 수준에 비해 적어도 1% 감소시키는, 방법.
  156. 제1항 내지 제155항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 상기 대상체의 혈중 아스파르테이트 트랜스아미나제의 수준을, 상기 투여 단계 전 대상체의 혈중 아스파르테이트 트랜스아미나제의 수준에 비해 적어도 1% 감소시키는, 방법.
  157. 제1항 내지 제156항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 상기 대상체의 간 중량을, 상기 투여 단계 전 대상체의 간 중량에 비해 적어도 1% 감소시키는, 방법.
  158. 제1항 내지 제157항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 비알코올성 지방 간 질환을 앓고 있는, 방법.
  159. 제158항에 있어서, 상기 대상체는 비알코올성 지방 간 질환 진단을 받은, 방법.
  160. 제158항 또는 제159항에 있어서, 상기 대상체는 비알코올성 지방간염(steatohepatitis)을 앓고 있는, 방법.
  161. 제160항에 있어서, 상기 대상체는 비알코올성 지방간염 진단을 받은, 방법.
  162. 제1항 내지 제161항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 간 섬유증을 치료하거나 감소시키는, 방법.
  163. 제1항 내지 제162항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 인간인, 방법.
  164. 제1항 내지 제162항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 고양이 또는 개인, 방법.
  165. 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기에 결합된 코어를 갖는 아실화된 활성제로서, 여기서 상기 코어는 스틸베노이드, 카로티노이드, 비타민, 카테킨 폴리페놀, S-아데노실-L-메티오닌, 담즙산, 또는 메트포르민이고, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 에스테르 결합, 아미드 결합, 글리코시드 결합, 카보네이트 링커, 또는 카바메이트 링커를 통해 코어에 결합되는, 아실화된 활성제.
  166. 제165항에 있어서, 상기 코어는 스틸베노이드인, 아실화된 활성제.
  167. 제166항에 있어서, 상기 스틸베노이드는 레스베라트롤인, 아실화된 활성제.
  168. 제165항에 있어서, 상기 코어는 카로티노이드인, 아실화된 활성제.
  169. 제168항에 있어서, 상기 카로티노이드는 아스타잔틴(astaxanthin)인, 아실화된 활성제.
  170. 제165항에 있어서, 상기 코어는 비타민인, 아실화된 활성제.
  171. 제170항에 있어서, 상기 비타민은 토코페롤, 아스코르브산, 또는 비타민 D인, 아실화된 활성제.
  172. 제171항에 있어서, 상기 비타민 D는 콜레칼시페롤(cholecalciferol)인, 아실화된 활성제.
  173. 제165항에 있어서, 상기 코어는 카테킨 폴리페놀인, 아실화된 활성제.
  174. 제173항에 있어서, 상기 카테킨 폴리페놀은 에피갈로카테킨 갈레이트인, 아실화된 활성제.
  175. 제174항에 있어서, 상기 카테킨 폴리페놀은 실리비닌(silibinin) 또는 케르세틴인, 아실화된 활성제.
  176. 제165항에 있어서, 상기 코어는 S-아데노실-L-메티오닌인, 아실화된 활성제.
  177. 제165항에 있어서, 상기 코어는 담즙산인, 아실화된 활성제.
  178. 제177항에 있어서, 상기 담즙산은 우르소데옥시콜산(ursodeoxycholic acid) 또는 오베티콜산(obeticholic acid)인, 아실화된 활성제.
  179. 제165항에 있어서, 상기 코어는 아미노산인, 아실화된 활성제.
  180. 제179항에 있어서, 상기 아미노산은 L-알라닌인, 아실화된 활성제.
  181. 제165항에 있어서, 상기 활성제는 메트포르민인, 아실화된 활성제.
  182. 제165항 내지 제182항 중 어느 한 항의 아실화된 활성제를 포함하는 조성물.
  183. 제182항에 있어서, 상기 조성물은 식품 첨가제, 약제학적 조성물, 또는 식이 보충제인, 조성물.
  184. 아실화된 카테킨 폴리페놀, 아실화된 스틸베노이드, 아실화된 카로티노이드, 아실화된 메살라민, 아실화된 하이드록시벤조산, 아실화된 쉬킴산, 아실화된 비타민, 아실화된 S-아데노실-L-메티오닌, 아실화된 담즙산, 아실화된 아미노산, 아실화된 케톤체 또는 프리-케톤체, 아실화된 메트포르민, 아실화된 당, 및 제1 제 및 제2 제의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 0.5g의 활성제를 포함하는 단위 투여량 형태로, 여기서 상기 제1 제는 스틸베노이드, 카테킨 폴리페놀, 카로티노이드, 담즙산, 아미노산, 하이드록시벤조산, 쉬킴산, 단당류, 또는 메살라민, 메트포르민, 비타민, S-아데노실-L-메티오닌이고, 제2 제는 케톤체 또는 프리-케톤체인, 단위 투여량 형태.
  185. 제184항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 적어도 0.7g의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  186. 제184항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 적어도 1g의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  187. 제184항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 적어도 2g의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  188. 제184항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 10g 이하의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  189. 제184항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 9g 이하의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  190. 제184항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 8g 이하의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  191. 제184항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 7g 이하의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  192. 제184항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 6g 이하의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  193. 제184항 내지 제187항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 5g 이하의 활성제를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  194. 제184항 내지 제193항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 약제학적 단위 투여량 형태인, 단위 투여량 형태.
  195. 제184항 내지 제193항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 기능성식품 투여량 형태인, 단위 투여량 형태.
  196. 제184항 내지 제193항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단위 투여량 형태는 식품 제품 제공분인, 단위 투여량 형태.
  197. 제184항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 카테킨 폴리페놀인, 단위 투여량 형태.
  198. 제184항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 스틸베노이드인, 단위 투여량 형태.
  199. 제198항에 있어서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 아실화된 레스베라트롤인, 단위 투여량 형태.
  200. 제184항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 메살라민인, 단위 투여량 형태.
  201. 제184항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 하이드록시벤조산인, 단위 투여량 형태.
  202. 제184항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 쉬킴산인, 단위 투여량 형태.
  203. 제184항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 아실화된 당인, 단위 투여량 형태.
  204. 제184항 내지 제203항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 지방산 함유 기를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  205. 제204항에 있어서, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실로 치환된 1개 이상의 하이드록실기를 갖는 단당류, 당 알코올, 또는 당산인, 단위 투여량 형태.
  206. 제204항에 있어서, 상기 지방산 함유 기는 지방산 아실인, 단위 투여량 형태.
  207. 제204항 내지 제206항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 지방산은 단쇄 지방산인, 단위 투여량 형태.
  208. 제207항에 있어서, 상기 단쇄 지방산은 아세틸, 프로피오닐, 또는 부티릴인, 단위 투여량 형태.
  209. 제208항에 있어서, 상기 단쇄 지방산은 아세틸인, 단위 투여량 형태.
  210. 제208항에 있어서, 상기 단쇄 지방산은 부티릴인, 단위 투여량 형태.
  211. 제184항 내지 제210항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 활성제는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기를 포함하는, 단위 투여량 형태.
  212. 제211항에 있어서, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 케톤체 함유 기인, 단위 투여량 형태.
  213. 제212항에 있어서, 상기 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기는 프리-케톤체 함유 기인, 단위 투여량 형태.
  214. 제197항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I)의 화합물:
    Figure pct00379
    ,
    (I)
    또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
    여기서
    Figure pct00380
    은 단일 탄소-탄소 결합 또는 이중 탄소-탄소 결합이고;
    Q는 -CH2- 또는 -C(O)-이고;
    각각의 R1 및 각각의 R3은 독립적으로 H, 할로겐, -ORA, 인산염, 또는 황산염이고;
    R2는 H 또는 -ORA이고;
    각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 단당류, 당산, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 또는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 아미노산 대사물질 함유 기, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 알콕시, 단당류, 당산, 인산염, 및 황산염으로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환체로 임의로 치환된 벤조일이고;
    n과 m의 각각은 독립적으로 1, 2, 3, 또는 4이고;
    상기 화합물이 적어도 1개의 지방산 함유 기 또는 적어도 1개의 케톤체 또는 프리-케톤체 포함 기를 포함하는 것을 전제로 하는, 단위 투여량 형태.
  215. 제214항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-a)을 갖는, 단위 투여량 형태:
    Figure pct00381
    .
    (I-a)
  216. 제214항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-b)을 갖는, 단위 투여량 형태:
    Figure pct00382
    .
    (I-b)
  217. 제214항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-c)을 갖는, 단위 투여량 형태:
    Figure pct00383
    .
    (I-c)
  218. 제214항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-d)을 갖는, 단위 투여량 형태:
    Figure pct00384
    .
    (I-d)
  219. 제214항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 하기 식 (I-f)의 화합물인, 단위 투여량 형태:
    Figure pct00385
    .
    (I-f)
  220. 제214항 내지 제219항 중 어느 한 항에 있어서, n은 2인, 단위 투여량 형태.
  221. 제214항 내지 제220항 중 어느 한 항에 있어서, m은 1인, 단위 투여량 형태.
  222. 제214항 내지 제220항 중 어느 한 항에 있어서, m은 2인, 단위 투여량 형태.
  223. 제214항 내지 제220항 중 어느 한 항에 있어서, m은 3인, 단위 투여량 형태.
  224. 제214항 내지 제223항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R1은 독립적으로 -ORA인, 단위 투여량 형태.
  225. 제214항 내지 제224항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R3은 독립적으로 H 또는 -ORA인, 단위 투여량 형태.
  226. 제214항 내지 제225항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 H 또는 -ORA인, 단위 투여량 형태.
  227. 제214항 내지 제226항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 함유 기, 또는 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기인, 단위 투여량 형태.
  228. 제214항에 있어서, 상기 화합물은 하기 식 (I-e)의 화합물:
    Figure pct00386
    ,
    (I-e)
    또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염이고,
    여기서 R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 R1에 대해 정의된 바와 같고; 그리고 R3A, R3B 및 R3C의 각각은 독립적으로 R3에 대해 정의된 바와 같은, 단위 투여량 형태.
  229. 제228항에 있어서, R1A 및 R1B의 각각은 독립적으로 -ORA인, 단위 투여량 형태.
  230. 제228항 또는 제229항에 있어서, R3A, R3B 및 R3C의 각각은 독립적으로 H, 할로겐, 또는 -ORA인, 단위 투여량 형태.
  231. 제214항 내지 제230항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 하기 식의 기이고:
    Figure pct00387
    , 여기서 p는 1, 2, 3, 또는 4이고, 각각의 R4는 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는, 단위 투여량 형태.
  232. 제231항에 있어서, p는 3인, 단위 투여량 형태.
  233. 제231항 또는 제232항에 있어서, 각각의 R4는 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 임의로 치환된 알콕시, 임의로 치환된 아실옥시, 또는 임의로 아실화된 단당류, 임의로 아실화된 당산인, 단위 투여량 형태.
  234. 제231항 내지 제233항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 하기 식의 기이고:
    Figure pct00388
    , 그리고
    R4A, R4B, 및 R4C의 각각은 R4에 대해 정의된 바와 같은, 단위 투여량 형태.
  235. 제234항에 있어서, R4A, R4B, 및 R4C의 각각은 독립적으로 H, 하이드록시, 할로겐, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 임의로 치환된 알콕시인, 단위 투여량 형태.
  236. 제214항 내지 제235항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 RA는 독립적으로 H, 임의로 치환된 알킬, 지방산 아실, 또는 임의로 아실화된 단당류인, 단위 투여량 형태.
  237. 제214항 내지 제236항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아실화된 카테킨 폴리페놀은 적어도 1개의 지방산 아실을 포함하는, 단위 투여량 형태.
  238. 제237항에 있어서, 상기 지방산 아실은 단쇄 지방산 아실인, 단위 투여량 형태.
  239. 제238항에 있어서, 상기 단쇄 지방산 아실은 아세틸, 프로피오닐, 또는 부티릴인, 단위 투여량 형태.
  240. 제239항에 있어서, 상기 단쇄 지방산 아실은 아세틸인, 단위 투여량 형태.
  241. 제239항에 있어서, 상기 단쇄 지방산 아실은 부티릴인, 단위 투여량 형태.
  242. 제184항 내지 제196항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 활성제는 스틸베노이드 또는 카테킨 폴리페놀과 케톤체 또는 프리-케톤체의 조합인, 단위 투여량 형태.
  243. 제242항에 있어서, 상기 스틸베노이드 또는 카테킨 폴리페놀 대 상기 케톤체 또는 프리-케톤체의 몰비는 1:1 내지 1:10인, 단위 투여량 형태.
  244. 제242항 또는 제243항에 있어서, 상기 활성제는 스틸베노이드와 케톤체 또는 프리-케톤체의 조합인, 단위 투여량 형태.
  245. 제244항에 있어서, 상기 활성제는 스틸베노이드와 프리-케톤체의 조합인, 단위 투여량 형태.
  246. 제242항 내지 제245항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 스틸베노이드는 레스베라트롤인, 단위 투여량 형태.
  247. 하기 구조의 아실화된 스틸베노이드로서:
    Figure pct00389
    ,
    여기서
    n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
    m은 1, 2, 3, 또는 4이고;
    각각의 R1은 독립적으로 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고; 그리고
    각각의 R2는 독립적으로 H, 알킬, 아실, 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기고;
    여기서 각각의 지방산 함유 기는 독립적으로 지방산 아실로 치환된 1개, 2개, 3개 또는 4개의 하이드록실을 갖는 단당류이고;
    적어도 1개의 R1 또는 적어도 1개의 R2가 지방산 함유 기, 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기, 또는 아미노산 대사물질 함유 기인 것을 전제로 하는, 아실화된 스틸베노이드.
  248. 제247항에 있어서, n은 1인, 아실화된 스틸베노이드.
  249. 제247항 또는 제248항에 있어서, m은 2인, 아실화된 스틸베노이드.
  250. 제247항에 있어서, 상기 아실화된 스틸베노이드는 하기 구조의 화합물인, 아실화된 스틸베노이드:
    Figure pct00390
    .
  251. 제247항 내지 제250항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 1개의 R1은 지방산 함유 기인, 아실화된 스틸베노이드.
  252. 제247항 내지 제250항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 1개의 R1은 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기인, 아실화된 스틸베노이드.
  253. 제247항 내지 제250항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 1개의 R1은 아미노산 대사물질 함유 기인, 아실화된 스틸베노이드.
  254. 제247항 내지 제253항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 1개의 R2는 지방산 함유 기인, 아실화된 스틸베노이드.
  255. 제247항 내지 제254항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 1개의 R2은 케톤체 또는 프리-케톤체 함유 기인, 아실화된 스틸베노이드.
  256. 제247항 내지 제255항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 1개의 R2은 아미노산 대사물질 함유 기인, 아실화된 스틸베노이드.
  257. 필요로 하는 대상체에서 비알코올성 지방 간 질환 마커를 조절하는 방법으로, 상기 방법은
    Figure pct00391
    ,
    Figure pct00392
    ,
    Figure pct00393
    ,
    Figure pct00394
    ,
    Figure pct00395
    ,
    Figure pct00396
    ,
    Figure pct00397
    ,
    Figure pct00398
    ,
    Figure pct00399
    ,
    Figure pct00400
    ,
    Figure pct00401
    ,
    Figure pct00402
    ,
    Figure pct00403
    ,
    Figure pct00404
    ,
    Figure pct00405
    ,
    Figure pct00406
    ,
    Figure pct00407
    ,
    Figure pct00408
    ,
    Figure pct00409
    ,
    Figure pct00410
    ,
    Figure pct00411
    ,
    Figure pct00412
    ,
    Figure pct00413
    ,
    Figure pct00414
    ,
    Figure pct00415
    ,
    Figure pct00416
    ,
    Figure pct00417
    ,
    Figure pct00418
    ,
    Figure pct00419
    ,
    Figure pct00420
    ,
    Figure pct00421

    Figure pct00422
    Figure pct00423
    Figure pct00424
    Figure pct00425
    Figure pct00426
    Figure pct00427
    Figure pct00428
    Figure pct00429
    Figure pct00430
    ,
    Figure pct00431
    Figure pct00432
    ,
    Figure pct00433
    ,
    Figure pct00434
    Figure pct00435
    Figure pct00436
    및
    Figure pct00437
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 아실화된 활성제의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  258. 필요로 하는 대상체에서 비알코올성 지방 간 질환을 치료하는 방법으로, 상기 방법은
    Figure pct00438
    ,
    Figure pct00439
    ,
    Figure pct00440
    ,
    Figure pct00441
    ,
    Figure pct00442
    ,
    Figure pct00443
    ,
    Figure pct00444
    ,
    Figure pct00445
    ,
    Figure pct00446
    ,
    Figure pct00447
    ,
    Figure pct00448
    ,
    Figure pct00449
    ,
    Figure pct00450
    ,
    Figure pct00451
    ,
    Figure pct00452
    ,
    Figure pct00453
    ,
    Figure pct00454
    ,
    Figure pct00455
    ,
    Figure pct00456
    ,
    Figure pct00457
    ,
    Figure pct00458
    ,
    Figure pct00459
    ,
    Figure pct00460
    ,
    Figure pct00461
    ,
    Figure pct00462
    ,
    Figure pct00463
    ,
    Figure pct00464
    ,
    Figure pct00465
    ,
    Figure pct00466
    ,
    Figure pct00467
    ,
    Figure pct00468

    Figure pct00469
    Figure pct00470
    Figure pct00471
    Figure pct00472
    Figure pct00473
    Figure pct00474
    Figure pct00475
    Figure pct00476
    Figure pct00477
    ,
    Figure pct00478
    Figure pct00479
    ,
    Figure pct00480
    ,
    Figure pct00481
    Figure pct00482
    Figure pct00483
    및
    Figure pct00484
    으로 이루어진 군으로부터 선택된 아실화된 활성제의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
KR1020207037346A 2018-06-05 2019-06-05 대사 장애 및 비알코올성 지방 간 질환의 치료를 위한 활성제 및 그 사용 방법 Ceased KR20210016407A (ko)

Applications Claiming Priority (11)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862680977P 2018-06-05 2018-06-05
US201862680976P 2018-06-05 2018-06-05
US62/680,976 2018-06-05
US62/680,977 2018-06-05
US201862776455P 2018-12-06 2018-12-06
US201862776448P 2018-12-06 2018-12-06
US62/776,455 2018-12-06
US62/776,448 2018-12-06
US201962828958P 2019-04-03 2019-04-03
US62/828,958 2019-04-03
PCT/US2019/035680 WO2019236775A1 (en) 2018-06-05 2019-06-05 Active agents and methods of their use for the treatment of metabolic disorders and nonalcoholic fatty liver disease

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20210016407A true KR20210016407A (ko) 2021-02-15

Family

ID=68769573

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207037346A Ceased KR20210016407A (ko) 2018-06-05 2019-06-05 대사 장애 및 비알코올성 지방 간 질환의 치료를 위한 활성제 및 그 사용 방법

Country Status (13)

Country Link
US (3) US10953027B2 (ko)
EP (1) EP3801496A4 (ko)
JP (2) JP7377220B2 (ko)
KR (1) KR20210016407A (ko)
CN (1) CN112367987A (ko)
AU (1) AU2019282691A1 (ko)
BR (1) BR112020024695A2 (ko)
CA (1) CA3102404A1 (ko)
IL (1) IL279161A (ko)
MX (1) MX2020013104A (ko)
PH (1) PH12020552060A1 (ko)
SG (1) SG11202011698VA (ko)
WO (1) WO2019236775A1 (ko)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3102404A1 (en) 2018-06-05 2019-12-12 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Active agents and methods of their use for the treatment of metabolic disorders and nonalcoholic fatty liver disease
WO2019236772A1 (en) 2018-06-05 2019-12-12 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Acylated active agents and methods of their use for the treatment of autoimmune disorders
JP2021535092A (ja) 2018-08-13 2021-12-16 フラッグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ， インコーポレイテッド 結合体およびその使用方法
CN114901267A (zh) * 2019-12-05 2022-08-12 旗舰创业创新五公司 酰化活性剂及其用于治疗代谢障碍和非酒精性脂肪肝病的方法
JP2021161110A (ja) * 2020-03-31 2021-10-11 大阪瓦斯株式会社 ジオール化合物およびその重合体ならびにそれらの製造方法
WO2021222702A1 (en) * 2020-05-01 2021-11-04 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Crystalline forms, compositions containing them, and methods of their use
RU2742414C1 (ru) * 2020-06-16 2021-02-05 Владимир Сергеевич Понамарёв Препарат комплексный с гепатопротекторной активностью для крупного рогатого скота
TW202216166A (zh) * 2020-06-26 2022-05-01 美商杜瑞克公司 氧合膽固醇硫酸酯用於治療發炎性病況的用途
WO2022140580A1 (en) * 2020-12-24 2022-06-30 Orn Almarsson Xanthophyll derivatives
CN113244208B (zh) * 2021-05-20 2022-07-12 云南中医药大学 Hpa在制备治疗非酒精性脂肪性肝病药物中的应用
WO2023280750A1 (en) * 2021-07-09 2023-01-12 Dsm Ip Assets B.V. Synthesis of butyrate compounds
WO2024100756A1 (ja) * 2022-11-08 2024-05-16 ミヤリサン製薬株式会社 子宮、卵管および卵巣における炎症の予防および／または治療剤
AU2023375510A1 (en) * 2022-11-10 2025-05-29 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Methods of treating or preventing liver diseases or disorders
CN118580213B (zh) * 2024-08-05 2024-10-11 中国农业大学 一种黄酮衍生物及其在制备治疗糖尿病药物中的用途

Family Cites Families (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RO87311B (ro) * 1983-10-04 1985-12-01 Nicolaie Oita Medicament cu actiune metabolica complexa si procedeu de obtinere a acestuia
JPS6081127A (ja) 1983-10-13 1985-05-09 Chugai Pharmaceut Co Ltd 食欲抑制剤
US5385938B1 (en) 1986-12-23 1997-07-15 Tristrata Inc Method of using glycolic acid for treating wrinkles
JP3165279B2 (ja) * 1993-03-29 2001-05-14 三井農林株式会社 ３−アシル化カテキンを含有する油溶性抗酸化剤
EP2283834B1 (en) 1997-03-17 2016-07-13 BTG International Limited Therapeutic compositions comprising ketone bodies or their precursors
JPH11199598A (ja) 1998-01-08 1999-07-27 Yokohama Kokusai Bio Kenkyusho:Kk ウルソデオキシコール酸誘導体とその製造法
DE19860698A1 (de) * 1998-12-30 2000-07-06 Hexal Ag Neue pharmazeutische Zusammensetzung
EP1212053A4 (en) 1999-09-08 2004-08-11 Nitromed Inc METHODS FOR THE TREATMENT AND PROPHYLAXIS OF CONGESTIVE HEART FAILURE BY HYDRALAZIN COMPOUNDS AND ISOSORBIDE DINITRATE OR ISOSORBIDE MONONITRATE
JP2002145875A (ja) 2000-11-06 2002-05-22 Fancl Corp キサンチンオキシダーゼ阻害剤
US20040033480A1 (en) 2002-08-15 2004-02-19 Wong Norman C.W. Use of resveratrol to regulate expression of apolipoprotein A1
WO2004105779A2 (en) 2003-05-27 2004-12-09 Cesare Montecucco Green tea and oplyphenol inhibitors of bacterial proteases
DE10335725A1 (de) 2003-08-05 2005-03-03 Bayer Cropscience Gmbh Safener auf Basis aromatisch-aliphatischer Carbonsäuredarivate
AU2003267173B2 (en) 2003-09-12 2009-09-10 Mitsui Norin Co., Ltd Antimicrobial compositions and methods of use
KR100592796B1 (ko) 2004-03-19 2006-06-26 삼아약품 주식회사 녹차카테킨을 유효성분으로 포함하는 고지혈증 예방 및치료제
JP4874236B2 (ja) 2004-04-26 2012-02-15 ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． トコフェリルアシレートの製造方法
KR20070045221A (ko) 2004-07-05 2007-05-02 산또리 가부시키가이샤 리파아제 저해제
GB0415181D0 (en) 2004-07-06 2004-08-11 School Of Pharmacy The Univers Compounds for use in the treatment of infection
US7544816B2 (en) 2004-08-19 2009-06-09 The Hong Kong Polytechnic University (−)-Epigallocatechin gallate derivatives for inhibiting proteasome
GB0425658D0 (en) 2004-11-22 2004-12-22 Stanford Rook Ltd Immunotherapeutic agent
CA2491763A1 (en) * 2005-01-06 2006-07-06 Tassos P. Anastassiades Blood glucose control with n-acylated glucosamines
JP2006249056A (ja) 2005-03-07 2006-09-21 Mitsui Norin Co Ltd 子宮癌抑制剤
EP1877422A4 (en) 2005-04-26 2011-08-10 Univ South Florida ENHANCER OF GREEN TEA POLYPHENOL ALPHA SECRETASE AND METHOD OF USE
EP1915387B1 (en) 2005-07-07 2010-01-20 Aditech Pharma AG Novel glucopyranose esters and glucofuranose esters of alkyl- fumarates and their pharmaceutical use
WO2007021789A1 (en) 2005-08-11 2007-02-22 Medical College Of Georgia Research Institute Modified green tea polyphenol formulations
EP2129646A2 (en) * 2006-11-01 2009-12-09 Pronova Biopharma Norge AS Omega-3 lipid compounds
JP4592818B2 (ja) * 2007-01-29 2010-12-08 ハナル バイオファーマ カンパニー リミテッド Ｎ，ｎ−ジメチルイミドジカルボンイミド酸ジアミドの酢酸塩、その製造方法、及びそれを含む薬剤学的組成物
US8026285B2 (en) 2007-09-04 2011-09-27 Bezwada Biomedical, Llc Control release of biologically active compounds from multi-armed oligomers
FR2923717B1 (fr) 2007-11-15 2015-01-16 Caudalie Compositions de derives polyphenoliques stilbeniques et leurs applications pour lutter contre les pathologies et le veillissement des organismes vivants
ES2730879T3 (es) 2008-01-04 2019-11-13 Univ Oxford Innovation Ltd Cuerpos de cetona y ésteres de cuerpos de cetona como agentes reductores de lípidos de la sangre
ITRM20080214A1 (it) 2008-04-21 2009-10-22 Uni Degli Studi Di Napoli Federico Ii Derivati dell'acido butirrico somministrabili per via orale, formulazioni che li contengono e loro uso clinico.
KR100918776B1 (ko) * 2009-04-20 2009-09-24 계명대학교 산학협력단 폴리에틸렌 글리콜과 갈레이트 카테킨을 이용한 혈당상승 억제 조성물
ES2343773B1 (es) 2008-11-07 2011-06-24 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas (Csic) Procedimiento enzimatico para la acilacion en posicion 3- del resveratrol.
AU2010289683C1 (en) 2009-09-01 2014-10-16 Catabasis Pharmaceuticals, Inc. Fatty acid niacin conjugates and their uses
EP2619194A4 (en) * 2010-04-08 2014-09-10 Genesis Group Inc CATECHIN FATTY ACID DERIVATIVES AND METHODS OF USE
KR101212612B1 (ko) * 2010-10-12 2012-12-14 전남대학교산학협력단 항산화활성 및 과산화물생성억제활성 중 하나 이상의 활성을 갖는 신규 화합물 및 퉁퉁마디로부터의 상기 신규 화합물 분리방법
EP2721000A4 (en) 2011-06-16 2015-03-25 Univ Mcgill SYNTHETIC EPIGALLOCATECHINGALLATE (EGCG) ANALOGUE
US9187448B2 (en) * 2011-08-05 2015-11-17 Cardero Therapeutics, Inc. Flavonoid compounds
WO2013115742A1 (en) * 2012-01-31 2013-08-08 Mahmut Bilgic Pharmaceutical composition comprising alpha-glucosidase inhibitor
SK50062012A3 (sk) 2012-02-29 2013-09-03 Ustav Experimentalnej Farmakologie A Toxikologie Sav Quercetin derivatives, pharmaceutical compositions comprising them and their use
SG10201610798QA (en) 2012-06-27 2017-02-27 Amazentis Sa Enhancing autophagy or increasing longevity by administration of urolithins or precursors thereof
WO2014029327A1 (en) * 2012-08-20 2014-02-27 The Hong Kong Polytechnic University Prodrug of green tea epigallocatechin-3-gallate (pro-egcg) for use in the treatment of endometriosis
KR101480600B1 (ko) 2013-01-22 2015-01-08 경북대학교 산학협력단 레스베라트롤 유도체의 피부미백 용도
CN105283179A (zh) 2013-04-04 2016-01-27 斯法尔制药私人有限公司 表儿茶素及相关多酚的新类似物
EP3019181A4 (en) 2013-07-09 2016-09-21 Puretech Ventures Llc COMPOSITIONS WITH COMBINATIONS OF BIOACTIVE MOLECULARS DERIVED FROM MICROBOTS FOR TREATING DISEASES
WO2015019193A2 (en) 2013-08-08 2015-02-12 Dalhousie University Acylated derivatives of phloridzin and isoquercetrin as anticancer therapeutics and methods of use thereof
CN104510840A (zh) * 2013-08-21 2015-04-15 乔治亚摄政研究学院有限公司 改性绿茶多酚和其用于治疗肝病的方法
MX363918B (es) * 2014-05-20 2019-04-05 Asta Pharmaceuticals Co Ltd Derivado de carotenoides, sal farmaceuticamente aceptable del mismo, o ester o amida farmaceuticamente aceptables del mismo.
JP6731340B2 (ja) 2014-07-24 2020-07-29 株式会社プロテクティア アレルゲン活性の抑制剤およびその用途
WO2016025668A1 (en) 2014-08-13 2016-02-18 The Regents Of The University Of California Biodegradable trehalose glycopolymers
CN107427489A (zh) * 2014-08-22 2017-12-01 财团法人教育研究基金会 用于治疗非酒精性脂肪肝疾病的药物及应用
WO2016086453A1 (zh) * 2014-12-04 2016-06-09 中国药科大学 五环三萜类胆固醇酯转运蛋白抑制剂、其药物组合物及医药用途
KR101702076B1 (ko) 2015-02-25 2017-02-02 주식회사 휴메딕스 지방산 컨쥬게이션된 7-데하이드로콜레스테롤 유도체
CN104940181B (zh) * 2015-06-29 2018-02-16 齐锦生 β‑羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途
US9545419B1 (en) * 2015-11-24 2017-01-17 Elorac Inc Method and compositions for treating chronic inflammatory disorders
RU2759916C2 (ru) * 2015-12-31 2021-11-18 Цзянсу Тасли Дии Фармасьютикал Ко., Лтд. Применение триацетил-3-гидроксифениладенозина для получения фармацевтического лекарственного средства для предупреждения или лечения неалкогольной жировой болезни печени
WO2017122495A1 (ja) 2016-01-13 2017-07-20 国立大学法人富山大学 セラミド含量増加剤
WO2017132775A1 (en) 2016-02-05 2017-08-10 Viteava Pharmaceuticals Inc. Novel compositions and methods for the treatment of leiomyoma
CN106995474B (zh) * 2017-04-25 2019-11-05 中国海洋大学 双半乳糖基二酰基甘油酯及其制备方法与用途
EP3634430B1 (en) 2017-06-05 2024-08-07 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Multibiotic agents and methods of using the same
CA3102404A1 (en) 2018-06-05 2019-12-12 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Active agents and methods of their use for the treatment of metabolic disorders and nonalcoholic fatty liver disease
JP2021527048A (ja) 2018-06-05 2021-10-11 フラッグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ， インコーポレイテッド 癌治療のためのアシル化カテキンポリフェノールおよびその使用方法
WO2019236772A1 (en) * 2018-06-05 2019-12-12 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Acylated active agents and methods of their use for the treatment of autoimmune disorders
JP2021535092A (ja) 2018-08-13 2021-12-16 フラッグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ， インコーポレイテッド 結合体およびその使用方法
WO2021222702A1 (en) * 2020-05-01 2021-11-04 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Crystalline forms, compositions containing them, and methods of their use

Also Published As

Publication number Publication date
WO2019236775A1 (en) 2019-12-12
AU2019282691A1 (en) 2020-12-24
MX2020013104A (es) 2021-05-12
JP2023184606A (ja) 2023-12-28
EP3801496A4 (en) 2022-07-06
US20200197428A1 (en) 2020-06-25
IL279161A (en) 2021-01-31
JP7377220B2 (ja) 2023-11-09
BR112020024695A2 (pt) 2021-03-02
SG11202011698VA (en) 2020-12-30
JP2021528384A (ja) 2021-10-21
PH12020552060A1 (en) 2021-07-05
CA3102404A1 (en) 2019-12-12
US10953027B2 (en) 2021-03-23
US20240180941A1 (en) 2024-06-06
JP7592140B2 (ja) 2024-11-29
WO2019236775A8 (en) 2020-01-23
EP3801496A1 (en) 2021-04-14
US11813272B2 (en) 2023-11-14
US20210177877A1 (en) 2021-06-17
CN112367987A (zh) 2021-02-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7592140B2 (ja) 代謝障害および非アルコール性脂肪肝疾患の治療のための活性薬剤およびその使用方法
EP3634430B1 (en) Multibiotic agents and methods of using the same
US12115178B2 (en) Acylated active agents and methods of their use for the treatment of autoimmune disorders
CN117964624A (zh) 一种具有治疗病毒感染功效的核苷类化合物及其用途
US20210085640A1 (en) Acylated catechin polyphenols and methods of their use for the treatment of cancer
JP2022500453A (ja) 線維症、ｎａｓｈ、及び、ｎａｆｌｄを治療する方法での使用のためのトリプトリド、及び、そのプロドラッグ
WO2011104584A1 (en) Pyrrolidine substituted flavones for the treatment of inflammatory disorders
EP3368043B1 (en) Furostan-3-ol derivatives as skeletal muscle hypertrophic agents
US20220296563A1 (en) Acylated active agents and methods of their use for the treatment of metabolic disorders and nonalcoholic fatty liver disease
US20220296555A1 (en) Acylated active agents and methods of their use for the treatment of metabolic disorders and nonalcoholic fatty liver disease
EP2240024A1 (en) Compounds for the treatment of metabolic disorders
CN116813562A (zh) 一种小分子化合物及其在制备抗胰腺炎药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

Patent event date: 20201224

Patent event code: PA01051R01D

Comment text: International Patent Application

PG1501 Laying open of application
PA0201 Request for examination

Patent event code: PA02012R01D

Patent event date: 20220603

Comment text: Request for Examination of Application

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event date: 20241108

Patent event code: PE09021S01D

E601 Decision to refuse application
PE0601 Decision on rejection of patent

Patent event date: 20250317

Comment text: Decision to Refuse Application

Patent event code: PE06012S01D