KR20200110684A - 궤양성 대장염을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 조성물, 및 약물로서의 조성물의 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 조성물에 관한 것이며, 상기 조성물은 GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하는 적어도 하나의 DNAzyme을 포함한다. 본 발명의 추가의 양태는 약물로서의 상기 조성물의 용도에 관한 것이다.

Description

궤양성 대장염을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 조성물, 및 약물로서의 조성물의 용도

본 발명은 제1항에 청구된 바와 같은 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 조성물 및 제9항에 청구된 바와 같은 약물로서의 이러한 조성물의 용도에 관한 것이다.

달리 나타내지 않는 한, 용어 "발현" 및 "유전자 발현"은 하기에서 동의어로 사용된다.

만성 염증은 의학에서 매우 중요하다. 따라서, 예를 들어,만성 염증과 관련된 장 질환과 같은 질환에 대한 요법을 밝혀내는 것이 중요하다. 이러한 장 질환의 알려진 예는 궤양성 대장염이다.

크론병을 제외하고, 궤양성 대장염은 전세계적으로 가장 일반적으로 발생하는 특발성 및 염증-의존적 장 질환 중 하나이다. 이는 대장 또는 결장에 대한 염증성 공격을 특징으로 하고, 염증성 공격은 예로써 크론병의 경우와는 달리, 대장에 대해서만 국한되고, 그 중에서도 장점막에만 국한된다.

(또한 대개 염증-의존적인) 자가면역 질환의 만성 염증 반응의 발생은, 무엇보다도, Th1 세포-특이적 전사 인자 Tbet 및 Th2 세포-특이적 전사 인자 GATA-3의 2개의 전사 인자와 관련된다. 이와 관련하여, Tbet는 Th1 세포의 특이적 발달을 유도하고; 반면, GATA-3는 Th2 세포의 특이적 발달을 유도한다. 따라서, Th1 세포와 Th2 세포 사이의 균형은 GATA-3의 발현에 의해 및/또는 Tbet의 억제에 의해 Th2 세포에 유리하게 변화한다. 유사하게, GATA-3의 억제 및/또는 Tbet의 발현은 Th1 세포 수준의 증가를 보장한다. 궤양성 대장염은, 예를 들어, 대장 점막의 염증 영역을 기반으로 하며, 이의 GATA-3 mRNA 수준은 상당히 증가하고 (= 증가된 GATA-3 발현) 그리고 이에 따라 Th2-의존적이다.

수많은 과학 간행물이 GATA-3과 Tbet 사이 또는 Th1 세포와 Th2 세포 사이의 특이적 평형과 관련하여 공개되어 있다. 결과적으로, 최근에, 전사 인자 GATA-3 및 Tbet를 "스위치 오프(switch off)시키려는" 시도가 이루어졌다. 이를 달성하는 한 가지 방법은 이러한 2가지 전사 인자의 유전자 발현의 억제이며, 현대 유전자 기술은 이 목적을 위해 다양한 "수단"을 제공한다. 이들 수단 중 하나는 DNAzyme이다.

DNAzyme는 비교적으로 신규한 부류의 안티센스 분자를 제공한다. 안티센스 분자는 단일-가닥 핵산 (일반적으로 mRNA)를 결합시킬 수 있는 분자를 지칭한다. 동시에, DNAzyme의 특이성은 이들이 이의 결합 기능뿐만 아니라 촉매 기능을 나타낸다는 것이다. 따라서, 이들은 단일-가닥 표적 DNA 또는 표적 RNA를 특이적으로 절단할 수 있고, 그리하여 이들을 분해할 수 있다 (Sel 등 2008). 이 경우에, 또한 유전자 발현의 억제가 mRNA 수준에서, 즉, 단백질로의 mRNA의 번역이 후속되기 전이라도 억제가 이루어진다는 점에서 전사-후 억제가 언급된다.

일반적으로, 10-23 유형의 DNAzyme이 이러한 목적을 위해 사용된다 (Sontoro 등, 1997). 이와 같은 DNAzyme는 2개의 기질-결합 도메인에 의해 측접되는 15개의 뉴클레오타이드의 촉매 도메인을 갖는다. 상기 촉매 도메인은 특히 보존 서열 ggctagctacaacga (서열번호 154)을 포함할 수 있다. 특정 서열 ggctagctacaacga는 단지 바람직한 구현예이다. 당업자는 변형된 촉매 도메인을 갖는 10-23 유형의 DNAzyme이 비슷한 생물학적 활성을 가질 수 있다는 것을 인지하고 있다. 반면, 기질-결합 도메인의 길이는 가변적이며, 또한 2개의 상응하는 기질-결합 도메인이 서로 상이할 수도 있다. 바람직한 구현예에서, 기질-결합 도메인의 길이는 6 내지 14개의 뉴클레오타이드이며, 9개의 뉴클레오타이드의 길이가 특히 바람직하다. 이와 같은 DNAzyme는 특정 서열, 예를 들어, nnnnnnnnnggctagctacaacgannnnnnnnn을 갖는다. 일반적으로, 기질-결합 도메인은 표적 RNA를 결합하고 절단하기 위해 표적 mRNA의 의도된 절단 부위에 측접하는 영역에 완전하게 상보적이지만, 완전하게 상보적인 DNAzyme이 절대적으로 필요한 것은 아니다. 10-23 유형의 DNAzyme는 서열에 퓨린 및 피리미딘을 함유하는 서열에서 표적 mRNA를 절단한다. DNAzyme는 독점적으로 화학적으로 생산되며, 이에 따라 생물학적 활성 성분인 것으로 고려되지 않는다.

DNAzyme는 GATA-3 또는 Tbet의 발현을 특이적으로 억제하기 위한 이의 용도로도 알려져 있다. 예를 들어, WO 2005/033314 A2는 다양한 DNAzyme의 작용 방식을 기술한다. WO 2005/033314의 개시 내용은 본 발명의 기술적 배경인 것으로 고려된다.

활성 성분으로서 DNAzyme을 사용하는 경우에 일어날 수 있는 문제점은 대개 핵산의 민감도 및 비교적 높은 불안정성에 기인할 수 있다. DNAzyme이 생리적으로 바람직한 용액 중에 존재하지 않는 경우, 핵산은 예로써 효소 분해 또는 물리적 스트레스에 의해 빠르게 분해되는 경향이 있고, 이는 특히, DNAzyme을 또한 포함하는 단일-가닥 핵산의 경우에 해당한다. 또한, DNAzyme는 그것의 특이성 그리고 이에 따른 활성 성분으로서의 그것의 유효성에 있어서 상이할 수 있다. 또한, DNAzyme의 안정성은 특히 DNAzyme-함유 용액의 pH의 변화에 의해 손상될 수 있다. 예를 들어, 낮은 pH (산성 환경)은 DNAzyme 분자의 가수분해를 초래할 수 있다. 과도하게 높은 pH (염기성 환경)은 예로써 분자의 2차 구조를 변경함으로써, DNAzyme의 안정성과 이에 따른 기능성에 영향을 줄 수 있다.

장 질환 예를 들어, 궤양성 대장염을 가진 환자에 대한 현재의 일반적인 치료 전략은 질환의 활성, 발생 (직장염, 좌측 대장염 및 광범위한 대장염) 및 패턴 (질환 경과, 이전 약물에 대한 반응, 요법의 가능한 부작용 등)에 의해 결정된다. 치료 결정의 논의에 크게 영향을 미치는 추가의 요인은 질환의 기간, 발병시 연령 및 환자의 동반 질환이다. 질환의 활성은 또한 환자의 입원 필요성에 있어 중요 지표이다.

일반적으로, 궤양성 대장염을 앓고 있는 환자는 우선 메살라진 (5-아미노살리실산)으로 치료되며, 이는 직장으로 그리고 경구로 투여가능하다. 질환의 증상이 그 이후에도 지속되는 경우, 코르티코스테로이드가 일반적으로 투여되며, 중증의 궤양성 대장염을 가진 환자는 대개 코르티코스테로이드 요법을 강화하기 위해서 병원에서의 치료가 필요해진다. 코르티코스테로이드 조차도 작용하지 않고, 환자의 상태에서 임의의 개선이 초래되지 않는 경우, 현재의 최종 선택사항으로서 수행될 수 있는 것은, 예로써, 사이클로스포린 또는 타크롤리무스를 사용하거나 또는 예를 들어 TNF에 대해 유도되는 단클론성 항체를 사용하는 칼시뉴린-억제 요법이다.

그럼에도 불구하고, 상술된 치료 방법 중 어느 것도 특히 염증과 관련된 장 질환을 치료하는 데 적합하지 않다. 반면, 이에 사용되는 물질은 그것의 높은 면역억제제 작용에 대해 알려져 있다. 또한, 상기 물질은 일반적으로 발생되는 부작용, 예를 들어, 단지 몇몇만 언급하자면 - 증가된 면역억제, 간독성, 심근 비대, 위장 통증, 피로 및 현기증, 설사, 구토, 신독성, 신경독성, 떨림, 고혈압, 불면증, 우울증, 경련, 감염의 은폐(masking), 고칼륨혈증, 고혈당증, 종양의 증가된 위험과 관련된다.

따라서, 본 발명의 목적은 선행기술에서의 단점을 없애고, 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하는 데 적합한 조성물을 제공하는 것이다. 특히, 이와 관련하여, 상당한 2차 통증을 야기하지 않는 동시에 궤양성 대장염을 효과적으로 치료하기 위해 적합한 활성 성분이 제공된다. 또한, 개선된 차도가 보장된다.

본 발명에 따르면, 상기 목적은 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 조성물에 의해 달성되며, 상기 조성물은 GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하는 적어도 하나의 DNAzyme을 포함한다. 특이적 DNAzyme는 생체내에서 전사 인자 GATA-3의 mRNA를 분리하고 절단하고, 이는 단백질로서 Th2-의존적 만성 염증성 질환의 발생에 있어 중추적 역할을 한다. 이러한 절단의 결과로서, mRNA는 더 이상 기능성 단백질로 번역되지 않을 수 있다. 결과적으로, GATA-3 단백질 수준은 상당히 축소된다.

당업자는 발현의 하향조절이 발현의 부분적인 억제 또는 완전한 억제를 의미하는 것으로 이해될 수 있음을 인지하고 있다. 임의의 경우에서, 발현은 자연 발현 수준과 비교하여 상당히 감소된다.

이와 관련하여, 바람직한 구현예에 따라 서열 hgd40 (GTGGATGGAggctagctacaacgaGTCTTGGAG)를 갖는 DNAzyme이 제공될 수 있다. 이러한 서열은 특히 높은 효소 활성을 나타내고, 매우 높은 특이성으로 그리고 높은 효율로 GATA-3 mRNA를 절단한다. 결과적으로, 서열 hgd40을 갖는 DNAzyme는 Th2-의존적인, 즉, 증가된 GATA-3 수준에 해당하는 장 질환의 특이적이고 효과적인 치료에 매우 적합하다. 그러나, GATA-3의 발현이 유사하게 특이적으로 억제될 수 있는 다른 서열을 갖는 DNAzyme이 또한 고려될 수 있다.

본 발명의 유리한 구현예에 따라, 조성물에서의 DNAzyme의 농도가 0.75 mg/ml 내지 75 mg/ml인 것이 제공된다. 특히 이와 관련하여, 조성물에서의 DNAzyme의 농도가 대략 7.5 mg/ml인 것이 제공된다. 이와 같은 농도는 특히 효율적인 것으로 입증된다. 0.75 mg/ml 미만의 DNAzyme 농도는 조성물의 작용의 높은 손실과 연관될 수 있다. 동시에, 조성물이 투여되는 경우에 존재할 수 있는 독성의 위험은 농도가 75 mg/ml 초과인 경우에 증가될 수 있다. 절대적인 양과 관련하여, 본 발명에 따라 DNAzyme hgd40이 환자마다 1일당 10 mg 내지 500 mg의 용량으로 투여되는 것이 제공될 수 있다. 특히, 환자마다 1일당 50 mg 내지 250 mg의 용량이 제공될 수 있다. 놀랍게도, 이러한 조성물은 활성 성분의 긍정적인 효과가 조성물의 투여 이후 수주 후에도 여전히 관찰되는 결과를 갖는다. 따라서, 상기 조성물은 이러한 방식으로 투여된 DNAzyme이 장기간에 걸쳐 작용을 나타낸다는 점에서 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓는 환자를 치료하는 데 매우 적합하다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물은 조성물로 치료된 환자에서 높은 정도의 차도를 야기한다.

이는 또한 조성물이 수용액의 형태인 경우에 유리하다. 이러한 용액의 제조는 경제적이며 간단하다. 또한, 수용액은 증가된 독성을 갖지 않으며, 이는 이것이 치료제에 사용하기에 적합하다는 것을 의미한다.

상기 조성물이 적어도 하나의 염을 포함하는 설계 변형예로부터 추가의 장점이 초래된다. 특히, 이와 관련하여, 상기 염이 염화나트륨 및/또는 염화칼륨 및/또는 인산염인 것이 제공된다. 본 발명에 따르면, hgd40이 사용하기 위해 PBS에 용해된 상태로 존재하도록 의도되고, 이에 따라 상기 조성물은 본질적으로 활성 성분으로서 DNAzyme을 함유하는 인산 완충 용액 (PBS)이다. 그러나, 생화학에서 일반적인 다른 완충제가 또한 고려될 수 있다. 또한, 추가의 첨가제 예를 들어, EDTA가 첨가될 수 있다.

본 발명의 유리한 추가의 개발에 따라, 직장 투여에 적합한 조성물이 제공된다. 이는 DNAzyme 활성 성분 hgd40이 염증 부위에서, 즉, 대장의 표면 점막에서 직접적으로 작용할 수 있다는 장점을 갖는다. 대장의 표면 점막에서 활성 성분이 염증 점막에 흡수된다. 그 결과 치료제의 빠르고 효율적인 작용이 이루어진다. 그러나, 예를 들어경구 형태의 투여, 예컨대, 캡슐, 알약 또는 정제가 또한 고려될 수 있다.

조성물의 추가의 특징으로서, 필요한 요법 기간이 n일인 경우, 조성물이 n일 이하의 투여 기간에 걸쳐 투여되는 것이 제공될 수 있다. 이와 관련하여, 필요한 요법 기간이 n일인 경우, 투여 기간이 필요한 요법 기간의 3n/4 이하의 일수를 포함하는 것이 의도될 수 있다. 특히, 필요한 요법 기간의 n/2 이하의 일수의 투여 기간이 제공될 수 있다. 상기 요법 기간은 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자가 치료되는 (즉, 조성물의 활성 성분이 환자에서 작용하고, 이에 따라 질환 증상을 조절하는) 기간을 의미하는 것으로 이해되어야 한다.

필요한 요법 기간이 n일인 경우, 조성물이 n일 이하의 투여 기간에 걸쳐 투여되는 이러한 투약 계획이 특히 가능하며, 이는 조성물이 치료되는 환자에서 높은 정도의 차도를 야기하기 때문이다. 이는 결국 환자에 있어 필요 이상으로 장기간의 치료를 받지 않아도 된다는 유리한 효과를 유발한다. 이것은 치료되는 환자에게 안도감을 준다는 점에서 바람직하다.

본 발명의 추가의 양태는 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 약물로서의 조성물의 용도로 이루어진다. 또한, 상기 조성물은 이것이 약물로서 사용되는 경우에 SB012로 지칭될 수 있다. 특히, 이와 관련하여, 본 발명에 의해 조성물이 좌약의 형태로 투여되는 것이 제공될 수 있다. 대안적으로, 조성물이 관장 또는 직장 폼 (rectal foam)의 형태로 투여되는 것이 제공될 수 있다. 유리하게는, 조성물 SB012는 이에 따라 지지 요법에서 또는 그것 자체의 요법 과정에서 약물로서 영향을 받은 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 이에 따라, 특히, 좌약, 관장 또는 직장 폼과 같은 조성물 또는 약물의 형태로부터 약물의 간단하고 신속한 투여가능성이 초대된다. 결과적으로, 약물은, 필요한 경우, 심지어 숙련된 직원의 도움 없이, 외래환자 기준으로 투여될 수 있다.

바람직한 용도 변형예에서, DNAzyme의 투여 용량이 환자마다 1일당 10 mg 내지 500 mg이도록 조성물이 투여된다. 특히, 이와 관련하여, 환자마다 1일당 50 mg 내지 250 mg인 용량이 제공될 수 있다. 놀랍게도, 조성물의 이러한 용도는 활성 성분의 긍정적인 효과가 조성물의 투여 이후 수주 후에도 여전히 관찰되는 결과를 갖는다. 따라서, 이러한 방식으로 투여된 DNAzyme이 장기간에 걸쳐 작용을 나타낸다는 점에서 상기 용도는 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하는 데 매우 적합하다. 따라서, 바람직한 용도는 조성물로 치료되는 환자에서 높은 정도의 차도를 야기한다.

또한, 본 발명에 따른 용도에서, 필요한 요법 기간이 n일인 경우, 조성물이 n일 이하의 투여 기간에 걸쳐 투여되는 것이 제공될 수 있다. 이와 관련하여, 필요한 요법 기간이 n일인 경우, 투여 기간이 요법 기간의 3n/4 이하의 일수를 포함하는 것이 의도될 수 있다. 특히, 필요한 요법 기간의 n/2 이하의 일수의 투여 기간이 제공될 수 있다. 이는 조성물이 높은 정도의 차도를 갖기 때문에 가능한 것이다. 이러한 투여 계획에 따라 투여되는 약물로서, 즉, 필요한 요법 기간이 n일인 경우, 바람직하게는 n/2일 이하의 투여 기간에 걸쳐 투여되는 약물은, 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자가 필요 이상으로 장기간의 치료를 받지 않아도 된다는 긍정적인 효과를 갖는다. 더 짧은 투여 기간은 치료받는 환자의 스트레스를 줄이고, 이에 따라 유리하다.

상기 기재된 장점 및 효과는 특히 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자의 치료시 본 발명에 따른 조성물을 사용하는 경우에 초래된다.

본 발명의 추가의 특징, 세부사항 및 장점은 청구항의 문구로부터 그리고 예시적인 구현예의 후속 설명 및 도면으로부터 분명해지며, 여기서:
도 1은 본 발명에 따른 조성물을 시험하기 위한 일련의 실험의 총 MAYO 점수의 평균 값을 그래프로 나타낸 것이고;
도 2는 도 1로부터의 일련의 실험의 총 MAYO 점수의 평균 값을 표로 나타낸 것이고;
도 3은 본 발명에 따른 조성물을 시험하기 위한 일련의 실험의 S자형 내시경 MAYO 점수의 평균 값을 막대형 차트로 나타낸 것이고; 그리고
도 4는 도 3으로부터의 일련의 실험의 내시경 MAYO 점수의 평균 값을 표로 나타낸 것이다.

일 구현예에서, DNAzyme hgd40을 함유하는 조성물은 부형제 및/또는 충전제와 함께 또는 용매로서 약리학적으로 상용가능한 담체에 존재한다.

조성물은, 예를 들어, 좌약, 드롭스, 구강 스프레이, 비강 스프레이, 알약, 정제, 필름-코팅 정제, 층상형 정제, 좌약, 겔, 연고, 시럽, 흡입용 분말, 과립, 에멀션, 분산물, 마이크로캡슐, 캡슐, 분말, 또는 주사용 용액의 형태로 제조되어 투여될 수 있다. 또한, 약리학적으로 상용가능한 담체의 그룹은 활성 성분의 제어 및/또는 지속 방출을 위한 층상형 정제 및 또한 특정 투약 형태로서의 미세캡슐형과 같은 제형을 포괄한다.

이러한 제형은 직장 투여에 매우 적합하다. 그러나, 또한, 다른 형태의 투여, 예를 들어, 흡입 또는 정맥내, 복강내, 근육내, 피하, 점막피부, 경구, 경피, 국소, 구강, 진피내, 위내, 피부내, 비강내, 구강내, 경피 또는 설하 투여가 제공될 수 있다.

부형제의 첨가는 특정 용도를 위한 조성물의 약제학적 특성을 개선한다. 사용될 수 있는 약리학적으로 상용가능한 부형제의 예는 락토스, 전분, 소르비톨, 수크로스, 셀룰로스, 스테아르산마그네슘, 인산제이칼슘, 황산칼슘, 탈크, 만니톨, 에틸 알코올 등이다. 상술된 담체는 최대 95% (w/w)의 범위까지 이러한 부형제로 이루어질 수 있다. 좌약을 제조하기 위해, 저-용융 왁스, 지방산 에스테르 및/또는 글리세라이드를 사용하는 것이 바람직하다.

소량 내지 극소량을 처리하는 경우에, 충전제가 일반적으로 필요하며, 이는 본 발명에 따른 조성물이 필요한 크기/질량을 수용하고, 임의의 문제없이 사용될 수 있는 것을 보장한다. 사용되는 충전제는 전분 (옥수수, 감자 및 밀 전분), 락토스, 글루코스, 만니톨, 소르비톨 및 푸룩토스를 포함하는 군으로부터의 물질이다.

또한, 붕해제, 착색제, 풍미제 및/또는 결합제는 조성물에 추가로 첨가될 수 있다. 사용되는 붕해제는 전분 (옥수수, 감자 및 밀 전분, 나트륨 카복시메틸 전분), 천연 및 합성 검 예를 들어 로커스트 빈 검, 카라야, 구아르, 트라가칸쓰, 한천, 셀룰로스 유도체 예컨대 메틸셀룰로스, 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 미세결정성 셀룰로스, 알기네이트, 알루미나, 벤토나이트, PVP (폴리비닐피롤리돈), 카보폴 및 과산화마그네슘을 포함하는 군으로부터의 물질이다. 이러한 성분은 최대 30% (w/w)의 양으로 사용될 수 있다. 붕해제는 입자 접착성을 개선하여 조성물의 양호한 압축성을 보장한다. 이는 또한 예로써 위장관에서의 후속 분해를 촉진한다. 이는 수분을 흡수하고, 모세관현상 및 팽윤을 증가시키거나, 또는 수분의 영향 하에 가스를 방출하고 발포시킴으로써, 또는 친수성화제로서 정제의 습윤성을 증가시킴으로써 작용한다. 결합제는 과립의 결합력 및 인가된 압력에 따른 정제 강도를 보장한다.

액체 제형은 용액, 현탁액, 스프레이 및 에멀션, 예를 들어, 주사용 수용액 또는 비경구 주입을 위한 물 및 프로필렌 글리콜에 기초한 용액을 포괄한다.

또한, 윤활제가 제공될 수 있다. 윤활제는 유동제, 윤활 제제 및 금형-이형제에 대한 포괄적인 용어이다. 유동제는 일반적으로 벌크 물질의 입자들 사이의 마찰력 및 접착력을 감소시켜 유동 특성을 개선한다. 이는 입자간 마찰을 감소시키고 표면 수분을 감소시킨다.

사용된 윤활제는 붕산, 스테아레이트 (예를 들어, 스테아르산마그네슘, 스테아르산칼슘, 스테아르산칼륨), 스테아르산, 고-용융 왁스를 포함하는 군으로부터의 물질 및 염화나트륨, 벤조산나트륨, 아세트산나트륨, 올레산나트륨, 폴리에틸렌 글리콜 및 아미노산 (예를 들어, 류신)을 포함하는 군으로부터의 수용성 물질일 수 있다. 윤활제는 최대 15% (w/w)의 양으로 사용될 수 있다.

도 1 내지 4는 각각 동일한 일련의 실험에 기초한다. 일련의 실험에서, 환자는 서열 GTGGATGGAggctagctacaacgaGTCTTGGAG (hgd40)을 갖고, GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하거나 또는 하향조절하는 DNAzyme으로 치료되었다. 그러나, GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하거나 또는 하향조절하는 다른 DNAzyme로의 치료가 또한 고려될 수 있다. DNAzyme hgd40으로의 치료를 진행함과 동시에, 대조군 그룹에는 PBS 완충 용액을 투여하였다. 상기 대조군 그룹은 결과적으로 DNAzyme을 받지 않았다.

도 1 및 도 2 둘 모두는 동일한 결과를 도시하고 있다. 도 1에서, 본 발명에 따른 조성물을 시험하기 위한 상술한 일련의 실험으로부터의 총 MAYO 점수의 평균 값은 그래프에 나타나 있다. 도 2에서, 도 1로부터의 일련의 실험으로부터의 총 MAYO 점수의 평균 값은 표에 도시되어 있다. MAYO 점수는 특히 궤양성 대장염의 질환 활성을 결정하기 위해 지표로서 임상 연구에서 사용된다. 이러한 4-레벨 지표는 대변 빈도, 직장 출혈의 중증도, 점막의 내시경 평가 및 의사의 전체적인 평가를 포함한다. 상기 그래프에서, 일련의 실험으로부터의 환자의 MAYO 점수의 평균 값(Y-축)은 일수로 나타낸 치료 기간(X-축)에 대해 플롯팅된다.

도 1 및 도 2에 나타낸 MAYO 점수에 해당하는 일련의 실험에서, 환자는 서열 GTGGATGGAggctagctacaacgaGTCTTGGAG를 갖고, GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하거나 또는 하향조절하는 DNAzyme으로 치료되었다 (도 1 및 2, hgd40). DNAzyme hgd40으로의 치료를 진행함과 동시에, 대조군 그룹에는 PBS 완충 용액을 투여하였다 (도 1 및 2, 위약). 대조군 그룹은 결과적으로 DNAzyme을 받지 않았다. 환자 및 대조군 그룹을 활성 성분과 위약으로 치료하는 기간은 각각 도 1에 회색으로 강조되어 있다 (28일). MAYO 점수를 3회 측정하였다: 투여 기간의 시작 7일 전 (-7), 투여 기간 시작 후 28일 (28) 및 투여 기간 종료 후 28일 (56).

도 1에는, 도 2로부터의 표의 MAYO 점수가 그래프로서 도시되어 있다. 본원에서 인상적으로 분명한 것은 hgd40으로 치료된 환자의 MAYO 점수의 평균 값이 대조군 그룹으로부터의 MAYO 점수의 평균 값보다 상당히 더 높은 정도로 감소된다는 것이었다. 일련의 실험의 시작(-7) 시점에, 치료되는 환자의 평균 MAYO 점수가 대략 8.4라면, 이는 투여 기간의 시작 이후 28일차에 이미 대략 6.5를 나타낸다. 일련의 실험의 종료 (56) 시점에, hgd40으로 치료된 환자의 평균 MAYO 점수는 대략 5.0이다 (도 2 참조). 전반적으로, 대략 3.4의 환자의 평균 MAYO 점수의 감소가 이에 따라 관찰될 수 있다. 대조적으로, 대조군 그룹의 평균 MAYO 점수는 단지 대략 1.0만큼 감소된다 (10.0에서 9.0으로; 도 2).

도 1 및 도 2에 도시된 결과는 인상적으로 본 발명에 따른 조성물이 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하는 데 적합하다는 것을 입증한다.

이와 관련하여, 특히 유리한 것은 활성 성분의 긍정적인 효과가 조성물의 최종 투여의 종료 이후에도 적어도 28일의 기간에 걸쳐 여전히 관찰될 수 있다는 것이다. 이러한 효과는 치료되는 환자의 MAYO 점수가 28일차 (투여 기간의 최종일) 후에도 추가의 4주 이상의 기간에 걸쳐 여전히 감소된다는 사실로부터 분명해진다. 본 발명에 따른 조성물은 이에 따라 놀랍게도 치료된 환자에서 높은 정도의 차도를 야기한다.

도 3 및 도 4는 도 1 및 도 2에서와 동일한 일련의 실험에 기초한다. 그러나, 도 3 및 도 4에 해당하는 결과는 다른 관점으로부터 얻었다. 도 3에서, S자형 내시경 MAYO 점수의 평균 값은 막대형 차트로서 도시되어 있다. 관련된 측정 데이터를 도 4에서 볼 수 있다. 당업자는 용어 "S자형"은 인간에서의 대장의 마지막 부분, 구불 결장 (colon sigmoideum)을 의미하는 것으로 이해한다. 내시경 MAYO 점수의 경우, 내시경 소견은 질환-전형적 특성과 관련하여 평가된다.

도 1 및 2와 유사하게, 도 3 및 도 4에 나타난 내시경 MAYO 점수에 해당하는 일련의 실험에서, 환자는 서열 GTGGATGGAggctagctacaacgaGTCTTGGAG를 갖고, GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하거나 또는 하향조절하는 DNAzyme으로 치료되었다 (도 3 및 도 4, "hgd40"). 그러나, GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하거나 또는 하향조절하는 다른 DNAzyme으로의 치료는 또한 도 3 및 도 4의 경우에서도 고려될 수 있다. DNAzyme hgd40으로의 치료를 진행함과 동시에, 대조군 그룹에는 PBS 완충 용액을 투여하였다 (도 3 및 도 4, 위약). 상기 대조군 그룹은 결과적으로 DNAzyme을 받지 않았다. 환자 및 대조군 그룹을 활성 성분과 위약으로 치료하는 기간은 각각 28일이었다. MAYO 점수를 2회 측정하였다: 투여 기간의 시작 7일 전 (-7) 및 투여 기간의 28일차 및 최종일 (28).

도 3에서의 막대형 차트는 일련의 실험의 전체 과정의 개요를 제공한다. 대조군 그룹 (도 3, 위약)의 내시경 MAYO 점수에 해당하는 막대는 짙은 회색으로 도시되어 있다. 도 3에서의 백색 막대는 hgd40으로 치료된 환자의 MAYO 점수에 해당한다 (도 3, hgd40). 도 3에서, 투여 기간의 종료 (투여 기간의 28일차; 28) 시점의 MAYO 점수의 평균 값과 함께 제1 시점 (투여 기간의 시작 7일 전; -7)의 MAYO 점수의 평균 값을 이후 각 경우에 비교하였다. 대조군 그룹 (도 3 참조, 회색 막대)의 경우, 본원에서 유의미한 차이가 나타나지 않을 수 있다. MAYO 점수의 평균 값은 -7일 차에 대략 2.6이었고, 28일차 대략 2.5이었다 (도 4 참조, 위약).

이는 hgd40으로 치료된 환자의 소견과 대조된다. hgd40으로 치료된 환자의 경우에서, MAYO 점수는 유사하게 제1 시점 (-7) 및 투여 기간의 종료 (28일차) 시점에 주어진다. 이러한 MAYO 점수의 평균 값을 도 3에서 비교한다 (도 3, 백색 막대). hgd40으로 치료된 환자의 그룹에서, -7일의 평균 값과 28일의 평균 값 사이의 유의미한 차이가 존재하는 것을 분명하게 볼 수 있다. 평균 MAYO 점수는 이에 따라 대략 2.2 (-7 일)로부터 대략 1.5까지 감소된다 (도 4, hgd40).

따라서, 도 1 내지 4에 도시된 결과는 GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하는 적어도 하나의 DNAzyme을 포함하는 본 발명에 따른 조성물이 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하는 데 적합하다는 것을 인상적으로 입증한다. 특히, 상기 결과는 만성 염증성 장 질환과 관련하여 일반적으로 발생되는 통증이 효과적으로 감소될 수 있다는 것을 나타낸다. 동시에, 도 1 및 2에서의 결과는 특히 조성물이 개선된 차도를 보장한다는 것을 나타낸다.

SEQUENCE LISTING <110> Sterna Biologicals GmbH & Co. KG <120> Zusammensetzung zur Behandlung eines an Colitis ulcerosa leidenden Patienten sowie Verwendung der Zusammensetzung als Arzneimittel <130> 80027-0217-PEP <160> 1 <170> BiSSAP 1.3.6 <210> 1 <211> 33 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 gtggatggag gctagctaca acgagtcttg gag 33

Claims (14)

1. 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 조성물로서, GATA-3의 발현을 특이적으로 억제하는 적어도 하나의 DNAzyme을 포함하는, 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 DNAzyme이 서열 hgd40 (GTGGATGGAggctagctacaacgaGTCTTGGAG)을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 조성물에서의 DNAzyme의 농도가 0.75 mg/ml 내지 75 mg/ml인 것을 특징으로 하는 조성물.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 수용액 형태인 것을 특징으로 하는 조성물.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 적어도 하나의 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
6. 제5항에 있어서, 상기 염은 염화나트륨 및/또는 염화칼륨 및/또는 인산염인 것을 특징으로 하는 조성물.
7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 직장 투여에 적합한 것을 특징으로 하는 조성물.
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 필요한 요법 기간이 n일인 경우, 상기 조성물이 n일 이하의 투여 기간, 특히 n/2일 이하의 투여 기간에 걸쳐 투여되는 것을 특징으로 하는 조성물.
9. 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 약물로서의, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 청구된 바와 같은 조성물의 용도.
10. 제9항에 있어서, 상기 조성물이 좌약의 형태로 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
11. 제10항에 있어서, 상기 조성물이 관장 또는 직장 폼 (rectal foam)의 형태로 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
12. 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은, 상기 DNAzyme의 투여 용량이 환자마다 1일당 10 mg 내지 500 mg이도록 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
13. 제9항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 필요한 요법 기간이 n일인 경우, 상기 조성물이 n일 이하의 투여 기간, 특히 n/2일 이하의 투여 기간에 걸쳐 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
14. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 만성 염증과 관련된 장 질환을 앓고 있는 환자의 치료에 사용하기 위한 것인 조성물.

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