KR20190103231A

KR20190103231A - 야누스 키나아제 억제제로서 신규한 아미노-이미다조피리딘 유도체 및 그의 약제학적 용도

Info

Publication number: KR20190103231A
Application number: KR1020197021697A
Authority: KR
Inventors: 옌스 라르센; 모겐스 라르센; 라르스 퀸 라스무센; 안드레아스 리첸; 티네 마리안네 두스
Original assignee: 레오 파마 에이/에스
Priority date: 2017-01-11
Filing date: 2018-01-10
Publication date: 2019-09-04
Anticipated expiration: 2038-01-10
Also published as: MY195576A; AU2018208516A1; ES2846741T3; CN110167938A; US20190367512A1; JP2020504186A; CN110167938B; RS61317B1; IL267829A; EP3568396A1; ZA201904190B; SI3568396T1; RU2019125177A3; CY1123864T1; HRP20210095T1; TW201829407A; AU2018208516B2; MX2019008331A; DK3568396T3; LT3568396T

Abstract

본 발명은 화학식 (I)에 따른 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물, 또는 용매화합물에 관한 것이고

; 여기서 R₁은 C₁-알킬, R₂은 C₁-알킬, R₃은 C₂-알킬, R₄은 수소, R₅은 수소이다. 본 발명은 추가로 치료요법에 사용하기 위한 상기 화합물, 상기 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 자가면역 질환 치료에 사용하기 위한 상기 화합물 및 상기 화합물의 제조를 위한 중간체에 관한 것이다.

Description

야누스 키나아제 억제제로서 신규한 아미노-이미다조피리딘 유도체 및 그의 약제학적 용도

본 발명은 야누스 키나아제의 억제제인 화합물 및 그의 유도체, 상기 화합물의 제조를 위한 중간체, 치료요법에 사용하기 위한 상기 화합물 및 상기 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명은 단백질 티로신 키나아제 가령 야누스 키나아제 (JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2) 및 특히 야누스 키나아제 1 (JAK1)의 억제제인 신규한 화합물에 관한 것이다.

단백질 티로신 키나아제는 단백질 기질 내 티로신 잔류물로 아데노신 삼인산의 말단 포스페이트를 전달하는 것을 촉매하는 효소계이다. 단백질 기질 상에서의 티로신 잔류물의 인산화는 광범위한 공정 가령 세포 성장 분화 및 활성화, 대사, 조혈, 숙주 방어 및 면역-조절을 조절하는 세포 내 신호 전달로 이어진다. 면역계의 다수의 염증성 병태 및 다른 장애 (예를 들어 자가면역 질환) 내 분자 메커니즘의 설명은 이들 세포 내 신호 경로의 중요한 역할 강조하면서, 단백질 티로신 키나아제의 활성의 조절은 염증성 질환의 관리를 위한 매력적인 경로인 것으로 나타난다. 다수의 단백질 티로신 키나아제가 수용체 단백질 티로신 키나아제, 예를 들어 인슐린 수용체, 또는 비-수용체 단백질 티로신 키나아제일 수 있는 것으로 확인되었다.

단백질 티로신 키나아제 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2는 다양한 사이토카인 수용체 사슬의 세포질 영역과 선택적으로 결합시키고 조직 항상성의 사이토카인-의존성 조절, 내재 면역력의 개시, 적응 면역 반응 형성 및 염증성 공정에 필수 역할을 갖는다. 그들은 사이토카인 수용체의 자극에 의해 티로신 인산화를 통한 그들의 활성화에 반응하는 신호 전달에 중요하다. (1) Schindler C. et al. JAK-STAT signaling: from interferons to cytokines. J. Biol. Chem 2007; 282(28):20059; (2) O'Shea J.J. Targeting the Jak/STAT pathway for immunosuppression; Ann. Rheum. Dis. 2004; 63 Suppl 2:ii67; (3) Schindler C. Series introduction. JAK-STAT signaling in human disease; J. Clin. Invest. 2002; 109(9):1133); (4) O'Shea et. Al. Cell, Vol. 109, S121-S131, 2002; (5) Schwartz D.M. et al. Nat. Rev. Rheumatol., 2016; 12(1): 25-36; (6) O'Shea et al. New. Eng. J. Med. 2013; 368(2): 161-170.

JAK1, JAK2 및 TYK2가 편재하여 발현되면서 JAK3은 조혈 세포 내에서 우세하게 발현된다.

JAK1는 생물학적 반응의 매개에 중요한 역할을 하고 JAK1는 폭넓게 발현되고 몇몇 주요 사이토카인 수용체 계와 연관된다. IL-2 수용체 서브유닛 계 (IL-2, IL-4, IL-7R, IL-9R, IL-15R 및 IL-21R), IL-4 수용체 계 (IL-4R, IL-13R), gp130 수용체 계의 일원 및 IL-10 수용체 계 및 유형 I 및 유형 II IFN 수용체 계 둘 모두를 포함하는 분류 II 사이토카인 수용체에 의한 신호전달에 관련된다.

JAK2는 몇몇 단일 사슬 수용체 (Epo-R, GHR, PRL-R를 포함하는), IL-3 수용체 계, gp130 수용체 계, IL-12 수용체 계 (IL-12 및 IL-23) 및 몇몇의 분류 II 수용체 사이토카인 계에 의한 신호전달에 관련된다. 따라서, JAK2는 Epo, IL-3, GM-CSF, IL-5 및 IFNγ에 대한 형질도입 신호에 중요한 역할을 한다. JAK2 녹아웃 생쥐는 배아 치사 표현형을 나타낸다.

JAK3는 IL-2 수용체 계 (예를 들어 IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 및 IL-21)로서 또한 공지된 유형 I 사이토카인 수용체 계의 감마 사슬을 흔히 이용하는 수용체에 의한 신호 전달에 관련된다. XSCID 환자 집단은 JAK3 단백질의 감소된 수치로 또는 흔히 감마 사슬에 유전적 결함으로 확인되었고, 이는 면역 억제는 JAK3 경로를 통해 신호전달 차단으로 야기되어야 하는 것을 암시한다. 동물 연구는 JAK3는 오로지 B 및 T 림프구 성숙에만 중요한 역할을 하지 않고, JAK3은 T 세포 기능을 유지하기 위해 항구적으로 요구되는 것을 암시했다. 이 신규한 메커니즘 통한 면역 활성의 조절은 T 세포 증식성 장애 가령 면역계 질환, 특히 자가면역 질환의 치료에 유용할 수 있다.

TYK2는 유형 I 인터페론, IL-6, IL-10, IL-12 및 IL-23 신호전달에 관련된다. TYK2 결핍을 갖는 사람 환자는 기술되어있고 이 환자는 바이러스, 세균 및 곰팡이에 의한 많은 기회 감염으로 과-IgE-유사 증후군을 특징으로 하는 원발성 면역결핍 장애를 가졌다. IL-23은 많은 만성 염증성 병태에 중요한 역할을 하는 것이 발견되었기 때문에, TYK2 억제제는 IL-23에 의해 영향을 받은 병을 치료하는데 생각할 수 있는 바로는 매우 효과적일 수 있었다.

빈혈 및 호중구감소증은, 이들 두 사이토카인에 의한 생물학적 영향은 JAK2 활성화에 배타적으로 분명히 의존하기 때문에, 각각, EPO 및 GM-CSF의 억제에 관련될 수 있다. 유사하게, IL-12 및 IL-23는 바이러스, 세균, 및 곰팡이에 대한 내재 및 적응 면역 방어에 관여하는 것을 포함한다. 이들 사이토카인은 그들의 신호전달 캐스케이드 내 JAK2 및 TYK2를 모집하는 수용체에 결합되기 때문에 선택적인 JAK1 억제제는 그들의 생물학적 활성에 영향을 미치지 않을 것이고 따라서 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2를 억제하는 화합물과 비교하여 더욱 안전한 프로파일을 갖는 것이 가능하다.

JAK의 활성화는 STAT 분자의 활성화로 이어지고 따라서 JAK/STAT 신호전달 경로의 유도로 이어지고, 이는 인산화 사건에 의해 고도로 조절된다. STAT 분자의 활성화는 JAK 활성에 대해 유효한 약역학적 마커로 간주되고 특정한 JAK 분자의 활성은 우선적 모집된 활성인 STAT 분자의 수치에 의해 평가될 수 있다.

특히, 면역 세포에 의해 발현된 IL-4의 수용체는 리간드 결합 시 각각 JAK1 및 JAK3를 활성화시키는, 두 상이한 사슬, 리간드 높은 친화성 및 신호 변환체 IL-4Ra 및 공통-γ사슬에 의해 구성되고, 이는 모집 및 STAT6의 활성화로 이어진다. 유사하게, IL-6 수용체는 JAK1이 우선적으로 결합하는 IL-6 높은 친화성 수용체 사슬 (IL-6Ra) 및 신호 변환체 당단백질 130 (gp130) 사슬에 의해 형성된 이형이량체 수용체이다. gp130 사슬은 리간드 결합 시 JAK1 및 STAT3 신호전달 경로를 활성화시킨다. 그러므로, JAK1의 활성을 조사하기 위해, 활성인 STAT6 또는 STAT3의 수치는 각각, IL-4 또는 IL-6을 이용한 자극 후 면역 세포 내에서 평가될 수 있다.

게다가, 에리스로포이에틴 (EPOR)에 대한 수용체는 두 동일한 수용체 사슬에 의해 구성된 동형이량체 수용체이다. 그러므로, EPOR 사슬은 높은 친화성 리간드 결합 및 신호 변환체 사슬 둘 모두이고 리간드 결합 시 결합된 JAK2 분자만을 활성화시키고, 이는 STAT5의 모집 및 활성화로 이어진다. GM-CSF에 대한 수용체는 GM-CSF 높은 친화성 수용체 사슬 (GM-CSFRα) 및 신호 변환체 사슬 (GM-CSFRβ)에 의해 구성된 이형이량체 수용체이고, 이는 JAK2가 특이적으로 결합한다. 리간드 결합 시, α 및 β 수용체 사슬의 조합은 JAK2 및 STAT5 신호전달 경로의 활성화를 야기한다. 그러므로, JAK2의 활성을 조사하기 위해, 활성 STAT5의 수치는 GM-CSF 또는 에리스로포이에틴 (EPO)을 이용한 자극 후 면역 세포 내에서 평가될 수 있다.

야누스 키나아제의 억제제는 이들 키나아제가 관련된 염증성 및 비-전염성 자가면역 질환의 치료에서 유용성을 보여주는 것으로 예상된다. 최근에 pan-JAK 억제제 토파시티닙 및 룩소리티닙이 각각, 류마티스 관절염 및 골수섬유증의 치료를 위해 개시되었다. JAK1 억제제 PF-04965842는 아토피 피부염의 치료를 위해 현재 III 상 임상 시험 중이고, JAK1 억제제 바리시티닙은 류마티스 관절염의 치료를 위해 개시되었고 아토피 피부염의 치료를 위해 III 상 시험 중이고 JAK1 억제제 유파다시티닙은 류마티스 관절염 및 건선성 관절염의 치료를 위해 현재 III 상 임상 시험 중이고 아토피 피부염, 크론병 및 궤양성 대장염의 치료를 위해 II 상 시험 중이다.

이런 이유로, 게다가 JAK 억제제는, 예를 들어 건선, 아토피 피부염, 경피증, 장미증, 피부 암, 피부염, 포진상 피부염, 피부근염, 백반증, 원형 탈모, 접촉성 피부염, 습진, 건조증, 어린선, 두드러기, 만성 특발성 소양증, 농피증 괴저성, 피부 홍반성 루푸스 및 편평 태선과 같은 피부 질환; 천식, 만성 폐색성 폐 질환, 폐 섬유증, 낭포성 섬유증, 비염, 세기관지염, 면폐증, 진폐증, 기관지 확장증, 과민성 폐렴, 폐암, 중피종 및 유육종증과 같은 호흡기 질환; 염증성 장질환, 궤양성 대장염, 크론병, 후복막 섬유증, 복강 질환 및 암과 같은 위장관 질환; 중증 근무력증, 쇼그렌　 증후군, 결막염, 공막염, 포도막염, 안구 건조증, 각막염, 홍채염과 같은 안질환; 루푸스, 다발성 경화증, 류마티스 관절염, 유형 I 당뇨병 및 당뇨병으로부터의 합병증, 암, 강직성 척추염 및 건선성 관절염과 같은 전신성 징후; 뼈 및 연조직 종양, 두경부 암과 같은 암 뿐만 아니라 면역억제가 요망되는 예를 들어 장기 이식에서의 다른 자가면역 질환 및 징후를 포함하는, 야누스 키나아제의 활성에 관련된 질환의 치료에 유용할 수 있다.

WO2013007768는 트리시클릭 헤테로시클릭 화합물, 조성물 및 JAK 억제제로서 그의 사용의 방법을 개시한다.

WO2013007765는 야누스 키나아제의 억제제로서 사용하기 위한 융합된 트리시클릭 화합물을 개시한다.

WO2011086053는 트리시클릭 헤테로시클릭 화합물, 조성물 및 그의 사용의 방법을 개시한다.

Zak, M. et. Al, J. Med . Chem ., (2013), 56, 4764-85는 JAK1 억제제로서 이미다조피롤로피리딘을 개시한다.

특정한 JAK 효소를 효과적으로 및 선택적으로 억제하는 새로운 화합물, 특히 JAK1 대 JAK2를 선택적으로 억제하여 전체 항-염증성 효능에 영향을 미치는 것 없이 부작용을 감소시키는 억제제에 대한 필요가 남아 있다.

본 발명의 화합물은 야누스 키나아제에 대한 저해 활성을 나타내고; 특히 본 발명의 화합물은 JAK1에 대한 저해 활성을 나타낸다. 따라서 본 발명의 화합물은 JAK 키나아제 저해 선택성을 보여주고; 특히 화합물은 JAK1 대 JAK2의 저해 선택성을 보여준다. 결과적으로 본 발명의 화합물은 STAT6 또는 STAT3 대 STAT5의 저해 선택성을 또한 보여줄 수 있다. 본 발명의 몇몇의 화합물은 전신성 용도를 위한 특히 바람직한 약동학 특징, 가령 높은 대사 안정성 및 높은 수성 가용성을 갖는다. 본 발명의 몇몇의 화합물은 특히 바람직한 독성학적 특징 가령 높은 키나아제 뿐만 아니라 일반적인 비표적 선택성, CYP 억제 없음, 낮은 또는 무 CYP 유도, 낮은 세포독성을 갖고; 뿐만 아니라 반복된 투여량 독성학적 연구에 잘 견딘다.

따라서, 본 발명은 화학식 (I)에 따른 화합물에 관한 것이고

여기서

A는 C₆-시클로알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₆-시클로알킬은 임의로 하나 또는 그 이상의 중수소로 치환되고;

R₁은 C₁-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₁-알킬은 임의로 하나 또는 그 이상의 중수소로 치환되고;

R₂은 C₁-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₁-알킬은 R₆ 로부터 선택된 치환기로 치환되고; 및 여기서 상기 C₁-알킬은 임의로 하나 또는 그 이상의 중수소로 치환되고;

R₃은 C₂-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₂-알킬은 R₇ 로부터 선택된 치환기로 치환되고 여기서 상기 C₂-알킬은 임의로 하나 또는 그 이상의 중수소로 치환되고;

R₄은 수소 또는 중수소를 나타내고;

R₅은 수소 또는 중수소를 나타내고;

R₆은 시아노를 나타내고;

R₇은 히드록실을 나타내고;

또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물로부터 선택된 화합물이다.

또 다른 양상에서, 본 발명은, 약제학적으로 허용 가능한 비히클 또는 부형제 또는 약제학적으로 허용 가능한 담체(들)와 함께, 임의로 하나 또는 그 이상의 다른 치료적으로 활성 화합물(들)과 함께, 본 명세서에서 정의된 것과 같은 일반식 (I)의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

여전히 또 다른 양상에서, 본 발명은 약제로서 사용하기 위한 본 명세서에서 정의된 것과 같은 일반식 (I)에 따른 화합물에 관한 것이다.

여전히 또 다른 양상에서, 본 발명은, 면역계 질환 가령 자가면역 질환의, 또는 면역계의 탈조절에 관련된 질환의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한, 본 명세서에서 정의된 것과 같은 일반식 (I)에 따른 화합물에 관한 것이다.

여전히 또 다른 양상에서 본 발명은 일반식 (I)의 화합물의 제조에 유용한 중간체에 관한 것이다.

정의

용어 "C_a-알킬"는 1 개의 수소 원자가 분지형 또는 선형 탄화수소로부터 제거될 때 얻어진 라디칼을 명시하는 것으로 의도된다. 상기 알킬은 1-2 개의 탄소 원자, 가령 메틸 및 에틸을 포함한다. "알킬" 내 탄소 원자의 숫자는 접두어 "C_a"에 의해 명시되고, 여기서 a는 탄화수소 라디칼 내 탄소 번호이다. 따라서, C_1-알킬은 1 개의 탄소 원자, 즉 메틸을 포함하는 알킬 라디칼을 명시하는 것으로 의도된다. C₂-알킬은 2 개의 탄소 원자, 즉 에틸을 포함하는 알킬 라디칼을 명시하는 것으로 의도된다.

용어 "시아노"는 탄소 원자를 통해 모분자 모이어티에 부착된 -CN기를 명시하는 것으로 의도된다.

용어 "C₆-시클로알킬"는, 6 개의 탄소 원자, 즉 시클로헥실을 포함하는 포화된 시클로알칸 탄화수소 라디칼을 명시하는 것으로 의도된다.

용어 "탄화수소 라디칼"는 오로지 수소 및 탄소 원자를 함유하는 라디칼을 명시하는 것으로 의도되고, 하나 또는 그 이상의 이중 및/또는 삼중 탄소-탄소 결합을 함유할 수 있고, 분지형 또는 선형 모이어티와의 조합인 시클릭 모이어티를 포함할 수 있다. 상기 탄화수소는 1-10 개의 탄소 원자를 포함하고, 바람직하게는 1-6 개, 예를 들어 1-4 개, 예를 들어 1-3 개, 예를 들어 1-2 개, 예를 들어 6 개의 탄소 원자를 포함한다. 용어는, 본 명세서에서 명시된 것과 같이 알킬 및 시클로알킬을 포함한다.

용어 "히드록시" 또는 "히드록실"는 -OH기를 명시하는 것으로 의도된다.

BrettPhos는 2-(디시클로헥실포스피노)3,6-디메톡시-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-비페닐을 명시하는 것으로 의도된다.

tBuBrettPhos는 2-(디-tert-부틸포스피노)-2',4',6'- 트리이소프로필-3,6-디메톡시-1,1'-비페닐을 명시하는 것으로 의도된다.

tBuXPhos는 2-디-tert-부틸포스피노-2',4',6'-트리이소프로필비페닐을 명시하는 것으로 의도된다.

BrettPhos Pd G1는 클로로[2-(디시클로헥실포스피노)-3,6-디메톡시-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-비페닐][2-(2-아미노에틸)페닐]팔라듐(II을 명시하는 것으로 의도된다.

BrettPhos Pd G3는 [(2-디-시클로헥실포스피노-3,6-디메톡시-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-비페닐)-2-(2'-아미노-1,1'-비페닐)]팔라듐(II) 메탄설포네이트를 명시하는 것으로 의도된다.

tBuBrettPhos Pd G3는 [(2-디-tert-부틸포스피노-3,6-디메톡시-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-비페닐)-2-(2'-아미노-1,1'-비페닐)]팔라듐(II) 메탄설포네이트를 명시하는 것으로 의도되고,

tBuXPhos Pd G1는 [2-(디-tert-부틸포스피노)-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-비페닐][2-(2-아미노에틸)페닐)]팔라듐(II) 클로라이드를 명시하는 것으로 의도된다.

tBuXPhos Pd G3는 [(2-디-tert-부틸포스피노-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-비페닐)-2-(2'-아미노-1,1'-비페닐)] 팔라듐(II) 메탄설포네이트를 명시하는 것으로 의도된다.

치환기는 그룹으로부터 독립적으로 선택되는 것과 같이 기술된다면, 각각 치환기는 다른 하나와는 관계없이 선택된다. 그러므로 각각 치환기는 다른 치환기(들)로부터 동일하거나 상이할 수 있다.

용어 "임의로 치환된"은 "비치환된 또는 치환된"을 의미하고, 그러므로 본 명세서에서 기술된 일반식은 명시된 임의의 치환기(들)를 함유하는 화합물 뿐만 아니라 임의의 치환기(들)를 함유하지 않는 화합물을 포함한다.

용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"는 화학식 (I)의 화합물을 반응시키는 것에 의해 제조된 염을 명시하는 것으로 의도되고, 이는, 적합한 무기 또는 유기산, 가령 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 질산, 인산, 포름산, 아세트산, 2,2-디클로로아세트산, 아디프산, 아스코르브산, L-아스파르트산, L-글루탐산, 갈락타르산, 젖산, 말레산, L-말산, 프탈산, 시트르산, 프로피온산, 벤조산, 글루타르산, 글루콘산, D-글루쿠론산, 메탄설폰산, 살리실산, 숙신산, 말론산, 타르타르산, 벤젠설폰산, 에탄-1,2-디설폰산, 2-히드록시 에탄설폰산, 톨루엔설폰산, 설팜산, 푸마르산, 아세투르산, L-젖산, 글리콜산, 옥살산, 사카린산, DL-만델산 또는 L-타르타르산을 갖는 염기성 모이어티를 포함한다. 약제학적 허용 가능한 염의 추가적인 예시는 Berge, S.M.; J. Pharm. Sci.; (1977), 66(1), 1-19 내에 열거되고, 이는 본 명세서에 참조로서 포함된다.

용어 "용매화합물"는 화합물, 예를 들어 화학식 (I)의 화합물, 및 용매, 예를 들어 알코올, 글리세롤, 디옥산 또는 물 사이 상호작용에 의해 형성된 종을 명시하는 것으로 의도되고, 여기서 상기 종은 결정질 형태 무정형 형태이다. 물은 용매일 때, 상기 종은 수화물로서 나타내어진다.

본 명세서에서 사용되는 것과 같은 용어 "치료"는 질환, 장애 또는 병태와 싸우기 위한 환자의 관리 및 보살핌을 의미한다. 용어는 질환, 장애 또는 병태의 진행을 지연시키는 것, 증상 및 합병증의 개선, 경감 또는 완화, 및/또는 질환, 장애 또는 병태의 치료 또는 제거를 포함하는 것으로 의도된다. 용어는 병태의 예방을 또한 포함하고, 여기서 예방은 질환, 병태 또는 장애와 싸우기 위한 환자의 관리 및 보살핌으로서 이해되어야 하고 증상 또는 합병증의 시작을 방지하는 활성 화합물의 투여를 포함한다. 그렇기는 하지만, 예방적 (방지) 및 치료요법 (치유적) 치료는 별도의 두 양상이다.

본 명세서에서 인용된, 출원, 특허 출원 및 특허를 포함하는 모든 참조는, 마치, 본 명세서 내 다른 곳에서 만들어진 특정한 문서의 임의의 각기 제공된 혼입에 관계없이 각각 참조는 참조로써 포함되도록 개별적으로 및 구체적으로 명시된 것처럼, 그들의 전체가 및 동일한 규모로 참조로써 본원에 포함된다.

본 발명의 구체예

구체예에서 본 발명은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고 여기서 화학식 (I)은 일반식 (Ia)이다

여기서 R₁-R₂, R₄-R₇은 상기와 같이 정의되고 여기서 Ra, Rb, Rc 및 Rd은 각각 독립적으로 수소 및 중수소로부터 선택되고;

구체예에서 본 발명은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고; 여기서 화학식 (I)은 일반식 (Ib)이다

구체예에서 본 발명은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고; 여기서 화학식 (I)은 일반식 (Ic)이다

구체예에서 본 발명은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고; 여기서 화학식 (I)은 일반식 (Id)이다

구체예에서 본 발명은 본 명세서에서 정의된 것과 같은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고;

여기서 A는 C₆-시클로알킬을 나타내고; R₁은 C₁-알킬을 나타내고; R₂은 C₁-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₁-알킬은 R₆로부터 선택된 치환기로 치환되고; R₃은 C₂-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₂-알킬은 R₇로부터 선택된 치환기로 치환되고; R₄은 수소를 나타내고; R₅은 수소를 나타내고; R₆은 시아노를 나타내고; R₇은 히드록실을 나타내고;

구체예에서 본 발명은 본 명세서에서 정의된 것과 같은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고; 여기서

A는 C₆-시클로알킬을 나타내고; R₁은 하나 또는 그 이상의 중수소로 임의로 치환된 C₁-알킬을 나타내고; R₂은 C₁-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₁-알킬은 R₆로부터 선택된 치환기로 치환되고; R₃은 C₂-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₂-알킬은 R₇로부터 선택된 치환기로 치환되고; R₄은 수소를 나타내고; R₅은 수소를 나타내고; R₆은 시아노를 나타내고; R₇은 히드록실을 나타내고;

본 명세서에서 기술된 구체예의 둘 또는 그 이상의 임의의 조합은 본 발명의 범위 이내로 간주된다.

본 발명은 모든 구체예를 포함하고 여기서 R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆ 및 R₇ 은 본 명세서에서 기술된 것과 같은 임의의 조합으로 조합된다.

구체예에서 본 발명은 본 명세서에서 정의된 것과 같은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고; 화합물은 다음으로부터 선택된다

트랜스-2-[4-[2-[1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,

트랜스-2-[4-[2-[(1S)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(트리중수소메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,

트랜스-2-[4-[2-[1,2,2,2-테트라중수소-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,

시스-2-[4-[2-[1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 및

시스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,

구체예에서 본 발명은, 다음으로부터 선택된, 본 명세서에서 정의된 것과 같은 일반식 (I)의 화합물을 제공한다

트랜스-2-[4-[2-[(1S)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 및

또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물로부터 선택된 화합물.

구체예에서 본 발명은, 다음의 중수소화 형태로부터 선택된, 본 명세서에서 정의된 것과 같은 일반식 (I)의 화합물을 제공한다

본 발명의 구체예는 화학식 (I)의 화합물을 제공하고, 상기 화합물은 트랜스-2-[4-[2-[1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,

본 발명의 구체예는 화학식 (I)의 화합물을 제공하고, 상기 화합물은 트랜스-2-[4-[2-[(1S)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물이다.

본 발명의 구체예는 화학식 (I)의 화합물을 제공하고, 상기 화합물은 트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물이다.

본 발명의 구체예는 화학식 (I)의 화합물을 제공하고, 상기 화합물은 트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(트리중수소메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물이다.

본 발명의 구체예는 화학식 (I)의 화합물을 제공하고, 상기 화합물은 트랜스-2-[4-[2-[1,2,2,2-테트라중수소-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물이다.

본 발명의 구체예는 화학식 (I)의 화합물을 제공하고, 상기 화합물은 시스-2-[4-[2-[1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물이다.

본 발명의 구체예는 화학식 (I)의 화합물을 제공하고, 상기 화합물은 시스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴, 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물이다.

구체예에서 본 발명은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고; 여기서 상기 화합물은

또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염인 화합물이다.

또는 그의 수화물이다.

또는 그의 용매화합물이다.

구체예에서 본 발명은 일반식 (I)의 화합물을 제공하고; 여기서 상기 화합물은 트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴의 중수소화 형태이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 말론산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 글리콜산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 L-타르타르산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 L-말산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 황산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 염산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 숙신산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 옥살산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 푸마르산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 1,5-나프탈렌디설폰산 염이다.

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 DL-만델산 염이다.

하나 또는 그 이상의 구체예에서 본 발명은 일반식 (II)의 중간체를 제공하고

여기서

A는 C₆-시클로알킬을 나타내고;

R₄은 수소 또는 중수소를 나타내고;

R₅은 수소 또는 중수소를 나타내고;

R₆은 시아노를 나타내고;

R₈은 할로겐을 나타내고;

또는 그의 염인;

일반식 (I)의 화합물의 제조에 유용하다.

구체예에서 본 발명은 다음으로부터 선택된 중간체를 제공한다

2-[트랜스-4-[(5-아미노-2-클로로피리딘-4-일)아미노]시클로헥실]아세토니트릴

및 그의 염.

하나 또는 그 이상의 구체예에서 본 발명은 일반식 (III)의 중간체를 제공한다

여기서

R₄은 수소 또는 중수소를 나타내고;

R₅은 수소 또는 중수소를 나타내고;

R₆은 시아노를 나타내고;

R₇은 히드록실을 나타내고;

Ra, Rb, Rc 및 Rd은 각각 독립적으로 수소 및 중수소로부터 선택되고;

R₈은 할로겐을 나타내고;

또는 그의 염인;

일반식 (Ia)의 화합물의 제조에 유용하다.

2-[트랜스-4-[6-클로로-2-(1-히드록시에틸)-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,

2-[트랜스-4-[6-클로로-2-[(1R)-1-히드록시에틸]-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 및

트랜스-2-[4-[6-클로로-2-(1,2,2,2-테트라중수소-1-히드록시-에틸)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

또는 그의 염.

구체예에서 본 발명은 팔라듐 촉매의 존재 하에 화합물 (III)의 아민화를 포함하는 화합물 (III)로부터 화합물 (Ia)의 제조를 위한 공정에 관한 것이고,

여기서

R₄은 수소 또는 중수소를 나타내고;

R₅은 수소 또는 중수소를 나타내고;

R₆은 시아노를 나타내고;

R₇은 히드록실을 나타내고;

Ra, Rb, Rc 및 Rd은 각각 독립적으로 수소 및 중수소로부터 선택되고

R₈은 할로겐을 나타내고;

또는 그의 염이다.

구체예에서 본 발명은 팔라듐 촉매의 존재 하에 화합물 (III)로부터 화합물 (III)의 아민화를 포함하는 화합물 (Ia)의 제조를 위한 공정에 관한 것이고, 여기서 팔라듐 촉매는 BrettPhos, tBuBrettPhos 또는 tBuXPhos 리간드를 포함한다.

구체예에서 본 발명은 팔라듐 촉매의 존재 하에 화합물 (III)로부터 화합물 (III)의 아민화를 포함하는 화합물 (Ia)의 제조를 위한 공정에 관한 것이고, 여기서 팔라듐 촉매는 BrettPhos Pd G1, BrettPhos Pd G3, tBuBrettPhos Pd G3, tBuXPhos Pd G1 또는 tBuXPhos Pd G3로부터 선택된다.

구체예에서 본 발명은 팔라듐 촉매의 존재 하에 화합물 (III)로부터 화합물 (III)의 아민화를 포함하는 화합물 (Ia)의 제조를 위한 공정에 관한 것이고, 여기서 팔라듐 촉매는 BrettPhos, tBuBrettPhos 또는 tBuXPhos 리간드와의 조합으로 팔라듐 공급원 가령 PdCl₂, Pd₂(dba)₃, 또는 Pd(OAc)₂로부터 제조된다.

화학식 (I)의 화합물은 유기 용매로부터의 농도에 의해 즉시 또는 유기 용매로부터의 결정화 또는 재결정화에 의해 결정질 형태 또는 상기 용매 및 유기 또는 무기일 수 있는 공용매, 가령 물의 혼합물로 얻어질 수 있다. 결정은 본질적으로 무-용매 형태로 또는 용매화합물, 가령 수화물로서 분리될 수 있다. 본 발명은 모든 결정질 형태, 가령 다형체 및 유사다형체, 및 또한 그의 혼합물을 포함한다.

화학식 (I)의 화합물은 이성질체 형태, 예를 들어 광학 이성질체 및 부분 입체 이성질체의 존재를 생기게 하는 비대칭으로 치환된 (키랄) 탄소 원자를 포함한다. 본 발명은, 광학적으로 순수한 형태인 또는 그의 혼합물 (예를 들어 라세미 혼합물 또는 부분적으로 정제된 광학 혼합물)과 같은 모든 그러한 이성질체에 관한 것이다. 본 발명의 화합물 및 중간체의 순수한 입체 이성질체 형태는 본 업계에 공지된 과정의 적용에 의해 얻어질 수 있다. 다양한 이성질체 형태는 물리적 분리 방법 가령 선택적인 결정화 및 크로마토그래피 기술, 예를 들어 키랄 고정상을 사용하는 고압 액체 크로마토그래피에 의해 분리될 수 있다. 광학 이성질체는 광학적으로 활성인 산으로 형성될 수 있는 그들의 부분 입체 이성질체 염의 선택적인 결정화에 의해 서로로부터 분리될 수 있다. 광학적으로 정제된 화합물은 상기 정제된 부분 입체 이성질체 염으로부터 그 후에 유리될 수 있다. 광학 이성질체는 부분 입체 이성질체 유도체의 형성에 의해 또한 분해될 수 있다. 그렇지 않으면, 광학 이성질체는 키랄 고정상을 사용하는 크로마토그래피 기술에 의해 분리될 수 있다. 순수한 입체 이성질체 형태는, 반응이 입체선택적으로 또는 입체구체적으로 발생한다면, 적절한 출발 물질의 해당하는 순수한 입체 이성질체 형태로부터 또한 유도될 수 있다. 바람직하게는, 특정한 입체 이성질체가 요망된다면, 상기 화합물은 제조의 입체선택적인 또는 입체특정한 방법에 의해 합성될 것이다. 이들 방법은 키랄 순수한 출발 물질을 유리하게는 이용할 것이다.

게다가, 이중 결합 또는 완전히 또는 부분적으로 포화된 고리계가 내 존재할 때 분자 기하학적 이성질체는 형성될 수 있다. 분리된, 순수한 또는 부분적으로 정제된 기하학적 이성질체 또는 그의 혼합물과 같은, 임의의 기하학적 이성질체는 본 발명의 범위 이내에 포함되는 것으로 의도된다.

이-치환된 시클로알칸, 가령 이-치환된 시클로헥산은 기하학적 이성질체; 즉 시스 - 및 트랜스-이성질체를 형성할 수 있다. 시스-이성질체는 고리의 같은 쪽에 치환기 둘 모두를 갖고, 트랜스-이성질체는 고리의 반대쪽에 치환기를 갖는다. 분리된, 순수한 또는 부분적으로 정제된 기하학적 이성질체 또는 그의 혼합물과 같은, 임의의 기하학적 이성질체는 본 발명의 범위 이내에 포함되는 것으로 의도된다.

일반식 (I)의 화합물에서, 원자는 그들의 천연 동위원소 양을 나타낼 수 있고, 또는 하나 또는 그 이상의 원자는 동일한 원자 번호, 하지만 자연에서 발견되는 원자 질량 또는 질량 번호와 상이한 원자 질량 또는 질량 번호를 갖는 특정한 동위원소로 인공적으로 농축될 수 있다. 본 발명은 일반식 (I)의 화합물의 모든 적합한 동위원소 변형을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 수소의 상이한 동위원소 형태는 ¹H, ²H 및 ³H를 포함하고, 탄소의 상이한 동위원소 형태는 ¹²C, ¹³C 및 ¹⁴C를 포함하고 질소의 상이한 동위원소 형태는 ¹⁴N 및 ¹⁵N을 포함한다. 중수소 (²H)를 농축시키는 것은 예를 들어 생체 내 반감기를 증가시키거나 투여 섭생을 감소시킬 수 있거나, 생물학적 샘플의 특성화에 대한 표준으로서 유용한 화합물을 제공할 수 있다. 동위원소적으로 농축된 일반식 (I) 이내 화합물은 본 업계의 숙련가에게 잘 알려진 종래의 기술에 의해 또는 적절한 동위원소적으로 농축된 시약 및/또는 중간체를 사용하는 본 명세서의 일반적 과정 및 실시예에서 기술된 것과 유사한 공정에 의해 제조될 수 있다.

본 발명의 하나 또는 그 이상의 구체예에서, 상기 정의된 것과 같은 화학식 I 의 화합물은 치료요법에 유용하고 예를 들어 증식성 및 염증성 피부 장애, 건선, 아토피 피부염, 경피증, 장미증, 피부 암, 피부염(dermatis), 포진상 피부염, 피부근염, 백반증, 원형 탈모, 접촉성 피부염, 습진, 건조증, 어린선, 두드러기, 만성 특발성 소양증, 농피증 괴저성, 피부 홍반성 루푸스 및 편평 태선과 같은 피부 질환; 천식, 만성 폐색성 폐 질환, 폐 섬유증, 낭포성 섬유증, 비염, 세기관지염, 면폐증, 진폐증, 기관지 확장증, 과민성 폐렴, 폐암, 중피종 및 유육종증과 같은 호흡기 질환; 염증성 장질환, 궤양성 대장염, 크론병, 후복막 섬유증, 복강 질환 및 암과 같은 위장관 질환; 중증 근무력증, 쇼그렌　 증후군, 결막염, 공막염, 포도막염, 안구 건조증, 각막염, 홍채염과 같은 안질환; 루푸스, 다발성 경화증, 류마티스 관절염, 유형 I 당뇨병 및 당뇨병으로부터의 합병증, 암, 강직성 척추염 및 건선성 관절염과 같은 전신성 징후; 뼈 및 연조직 종양, 두경부 암과 같은 암, 뿐만 아니라 면역억제가 요망되는 예를 들어 장기 이식에서의 다른 자가면역 질환 및 징후의 치료를 위해 특히 유용하다.

구체예에서 본 발명은 건선 또는 아토피 피부염의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 상기 정의된 것과 같은 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

구체예에서 본 발명은 아토피 피부염의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 상기 정의된 것과 같은 화학식 I 의 화합물을 제공한다.

구체예에서 본 발명은 면역계의 질환, 가령 자가면역 질환을 예방하는, 치료하는 또는 개선하는 방법을 제공하고, 방법은 상기 질환 중 적어도 하나를 겪는 사람에 일반식 I에 따른 하나 또는 그 이상의 화합물의 효과적인 양을 상기 임의로 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 하나 또는 그 이상의 부형제와 함께, 임의로 다른 치료적으로 활성 화합물과의 조합으로 투여하는 것을 포함한다.

구체예에서 본 발명은 건선 또는 아토피 피부염을 예방하는, 치료하는 또는 개선하는 방법을 제공하고, 방법은 상기 질환 중 적어도 하나를 겪는 사람에 일반식 I에 따른 하나 또는 그 이상의 화합물의 효과적인 양을 상기 임의로 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 하나 또는 그 이상의 부형제와 함께, 임의로 다른 치료적으로 활성 화합물과의 조합으로 투여하는 것을 포함한다.

구체예에서 본 발명은 아토피 피부염을 예방하는, 치료하는 또는 개선하는 방법을 제공하고, 방법은 상기 질환 중 적어도 하나를 겪는 사람에 일반식 I에 따른 하나 또는 그 이상의 화합물의 효과적인 양을 상기 임의로 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 하나 또는 그 이상의 부형제와 함께, 임의로 다른 치료적으로 활성 화합물과의 조합으로 투여하는 것을 포함한다.

구체예에서 본 발명은 면역계의 질환, 가령 자가면역 질환, 가령 건선 또는 아토피 피부염의 예방 및/또는 치료를 위한 약제의 제조에 사용하기 위한 화학식 I에 따른 화합물을 제공한다.

구체예에서 본 발명은 면역계의 질환, 가령 자가면역 질환, 가령 아토피 피부염의 예방 및/또는 치료를 위한 약제의 제조에 사용하기 위한 화학식 I에 따른 화합물을 제공한다.

본 발명의 하나 또는 그 이상의 구체예에서, 상기 정의된 것과 같은 화학식 I 의 화합물은 단백질 티로신 키나아제, 가령 JAK1, JAK2, JAK3 또는 TYK2 단백질 티로신 키나아제의 JAK 계의 단백질 티로신 키나아제 활성을 조절할 수 있는 항-염증제로서 유용하다.

하나 또는 그 이상의 구체예에서 본 발명은 억제 JAK1 키나아제 활성에 반응성인 질환의 치료에 사용하기 위한 일반식 (I)에 따른 화합물을 제공한다.

사람 치료에 유용한 것 외에, 본 발명의 화합물은 또한 포유동물 가령 말, 소, 양, 돼지, 개, 및 고양이를 포함하는 동물의 수의학적 치료에 유용할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물

치료요법에서의 사용을 위해, 본 발명의 화합물은 전형적으로 약제학적 조성물의 형태이다. 본 발명은 그러므로, 임의로 하나 또는 그 이상의 다른 치료적으로 활성 화합물(들)과 함께, 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 비히클 또는 담체(들)와 함께 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 부형제는 조성물의 다른 성분과 양립할 수 있고 그의 수혜자에게 유해하지 않는 의미에서 "허용 가능"해야 한다.

편리하게, 활성 성분은 제제의 0.0001-99.9 중량%를 포함한다.

투여 단위의 형태에서, 화합물은 하루에 한 번 또는 그 이상 적절한 간격에서 투여될 수 있지만, 항상 환자의 상태에 따라, 및 의학 종사자에 의해 만들어진 처방전에 따라서 투여될 수 있다. 편리하게, 제제의 투여 단위는 0.001 mg 및 1000 mg 사이, 바람직하게는 0.1 mg 및 300 mg 사이, 더욱 바람직하게는 1-150 mg 사이, 가령 3-100 mg 사이의 화학식 (I)의 화합물을 함유한다.

본 발명의 화합물의 적합한 투여는 그 중에서도, 환자의 연령 및 상태, 치료되어야 할 질환의 중증도 및 의사에게 잘 알려진 다른 요소에 의존할 것이다. 화합물은 상이한 투여 일정에 따라, 예를 들어 하루, 한 주 또는 한 달 간격으로 경구적으로, 비경구적으로, 국소적으로, 피부 경유 또는 피 내 및 다른 경로로 투여될 수 있다. 일반적으로 단일 투여량은 0.001 내지 400 mg/체중kg, 가령 0.1 g - 4 mg/kg인 범위일 것이다. 화합물은 한 회 분 (즉 전체 일일 투여량이 한 번에 투여된다)으로서 또는 하루 두 번 또는 그 이상 나뉘어진 투여량으로 투여될 수 있다.

국소적 치료의 맥락에서, 환자에 투여될 수 있는, 및 용이하게 취급되거나 포장될 수 있는 단일 투여량을 나타내는, "용법 단위"로 나타내는 것에 더욱 적절할 수 있고, 이는 따라서 활성인 물질 또는 고체, 반고체 또는 액체 약제학적 희석제 또는 담체와 활성인 물질의 혼합물 각각을 포함하는 물리적으로 및 화학적으로 안정한 단위 투여량으로서 남아있다.

국소적 용도와 관련되어 용어 "용법 단위"는, 단일 즉, 문제의 활성 성분의 0.001 마이크로그램 내지 1 mg 및 바람직하게는 0.05 마이크로그램 내지 0.5 mg의 치료 면적의 평방 센티미터 당 도포로 환자에 국소적으로 투여될 수 있는 단일 투여량을 의미한다.

특정 치료 요법에서, 긴 간격, 예를 들어 매일, 매주, 또는 그보다 더욱 긴 간격을 갖는 투여가 유익할 수 있을 것으로 또한 예상된다.

치료는 또 다른 치료적으로 활성 화합물의 투여를 포함한다면, 상기 화합물의 유용한 투여량을 위해 Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9^th Ed., J.G. Hardman and L.E. Limbird (Eds.), McGraw-Hill 1995를 참고하는 것이 권장될 것이다.

하나 또는 그 이상의 다른 활성 화합물과 함께 본 발명의 화합물의 투여는 수반되거나 순차적일 수 있다.

제제는 예를 들어 경구, 직장, 비경구적 (피하, 복강 내, 근 내, 관절 내 및 정맥 내를 포함하는), 피부 경유, 피 내, 안과적, 국소적, 비강, 설하 또는 볼 투여에 적합한 형태인 것을 포함한다 포함한다.

제제는 편리하게 투여 단위 형태로 제공될 수 있고, 예를 들어 Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21ed ed., 2005 내에 개시된 것과 같은 약학의 업계에 잘 알려진 임의의 방법에 의해 제조될 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 모든 방법은 활성 성분을 담체와 조합하는 단계를 포함하고, 담체는 하나 또는 그 이상의 부수적인 성분을 구성한다. 일반적으로, 제제는 액체 담체, 반고체 담체 또는 미세하게 나누어진 고체 담체 또는 이들의 조합과 결합한 활성 성분을 균일하게 및 친화적으로 유도하는 것, 및 이후, 필요하다면, 요망되는 제제로 생성물을 성형시키는 것에 의해 제조된다.

경구 및 볼 투여에 적합한 본 발명의 제제는 각각, 활성 성분의 선결정된 양을 함유하는, 캡슐, 사쉐, 정제, 추잉껌 또는 로젠즈와 같은 별개의 단위의 형태; 분말, 과립 또는 펠렛의 형태; 수성 액체 또는 비-수성 액체인 용액 또는 현탁액의 형태; 또는 겔, 나노- 또는 미세에멀젼, 수중유 에멀젼, 유중수 에멀젼 또는 다른 분산 시스템의 형태일 수 있다. 수성 현탁액을 위한 적합한 분산제 또는 현탁제는 합성 또는 천연 계면활성제 및 점성화제를 포함한다. 활성 성분은 한 회 분, 연약(electuary) 또는 페이스트의 형태로 투여될 수 있다.

정제를 임의로 하나 또는 그 이상의 부수적인 성분을 갖는 활성 성분의 압축, 몰딩 또는 동결 건조에 의해 제조할 수 있다. 압축된 정제는, 활성 성분(들)을, 임의로 결합제 및/또는 충전제; 윤활제; 그러한 붕해제 또는 분산제에 의해 혼합된, 자유-흐름 형태 가령 분말 또는 과립으로, 적합한 기계에서 압축시키는 것에 의해 제조될 수 있다. 몰딩된 정제는, 분말 활성 성분 및 불활성 액체 희석제로 적셔진 적합한 담체의 혼합물의, 적합한 기계에서의 몰딩에 의해 제조될 수 있다. 동결 건조 정제는 약물 물질의 용액으로부터 동결-건조기에서 형성될 수 있다. 적합한 충전제가 포함될 수 있다.

직장 투여를 위한 제제는 본 발명의 화합물은 낮은 녹는점, 수용성 또는 불용성 고체와 혼합되는 좌제의 형태일 수 있다.

비경구적 투여에 적합한 제제는 활성 성분의 멸균 유성 또는 수성 제제를 편리하게 포함하고, 이는 바람직하게는 수혜자의 혈액과 등장이고, 예를 들어 등장 생리식염수, 등장 글루코오스 용액 또는 완충제 용액이다. 게다가, 제제는 공용매, 가용화제 및/또는 착제를 함유할 수 있다. 제제는 예를 들어 세균 보유 필터를 통한 여과, 제제에 멸균제의 부가, 제제의 조사 또는 제제의 가열에 의해 편리하게 멸균될 수 있다. 예를 들어 Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol.9, 1994 내에 개시된 것과 같은 리포솜 제제는 또한 비경구적 투여에 적합하다.

그렇지 않으면, 화학식 (I)의 화합물은 멸균, 고체 제제, 예를 들어 사용하기 이전에 즉시 멸균 용매 내에 용이하게 용해된 동결-건조 분말로서 제공될 수 있다.

피부 경유 제제는 석고, 패치, 미세바늘, 리포솜 또는 나노입자 전달 시스템 또는 피부에 적용되는 다른 피부 제제의 형태일 수 있다.

안과적 투여에 적합한 제제는, 미세결정질 형태, 예를 들어, 수성 미세결정질 현탁액의 형태일 수 있는 활성 성분의 멸균 수성 제제의 형태일 수 있다. 예를 들어 Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol.2, 1989 내에 개시되는 것과 같은 리포솜 제제 또는 생분해성 중합체 시스템은 안과적 투여를 위한 활성 성분을 제공하는데 또한 사용될 수 있다.

국소적, 가령 피부, 피 내 또는 안과적 투여에 적합한 제제는 액체 또는 반-고체 제제 가령 찰제, 로션, 겔, 도포제, 분무, 폼, 박-형성 시스템, 미세바늘, 미세- 또는 나노-에멀젼, 수중유 또는 유중수 에멀젼 가령 크림, 연고 또는 페이스트; 또는 용액 또는 현탁액 가령 액적을 포함한다.

국소적 투여에 대해, 화학식 (I)의 화합물은 조성물의 0.001 내지 20중량%, 가령 0.01% 내지 약 10 %의 양으로 전형적으로 존재할 수 있지만, 또한 조성물의 약 100%의 양으로 존재할 수 있다.

비강 또는 볼 투여에 적합한 제제는 분말, 자주 및 분무 제제, 가령 에어로졸 및 분무기를 포함한다. 그러한 제제가 예를 들어 Modern Pharmaceutics, 2^nd ed., G.S. Banker and C.T. Rhodes (Eds.), page 427-432, Marcel Dekker, New York; Modern Pharmaceutics, 3^th ed., G.S. Banker and C.T. Rhodes (Eds.), page 618-619 and 718-721, Marcel Dekker, New York and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol. 10, J. Swarbrick and J.C. Boylan (Eds), page 191-221, Marcel Dekker, New York 내에 더욱 자세히 개시되어있다.

전술된 성분에 더하여, 화학식 (I)의 화합물의 제제는 하나 또는 그 이상의 부가적인 성분 가령 희석제, 완충제, 향료제, 염색제, 표면 활성제, 증점제, 침투 향상제, 가용성 향상제 보존제, 예를 들어 메틸 히드록시벤조에이트 (항산화제를 포함하는), 유화제 등을 포함할 수 있다.

제조의 방법

본 발명의 화합물은 합성의 업계의 숙련가에게 잘 알려진 다수의 방식으로 제조될 수 있다. 화학식 (I)의 화합물은 예를 들어 합성 유기 화학의 업계에 공지된 방법, 또는 본 업계의 숙련가에 의해 인식된 것과 같은 그의 변형과 함께 아래 개략된 반응 및 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 바람직한 방법은 아래에 기술된 것을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이용되는 시약 및 물질에 적절한 및 변환을 수행하는데 적합한 용매 내에서 반응을 수행한다. 또한, 아래 기술된 합성 방법에서, 용매의 선택, 반응 대기, 반응 온도, 실험 및 후처리 과정의 지속 기간을 포함하는 모든 제안된 반응 조건은, 본 업계의 숙련가에 의해 용이하게 인식되어야 하는 반응을 위한 표준의 조건으로 선택된다는 것이 이해될 것이다. 주어진 부류 내에 속하는 모든 화합물이 기술된 방법의 일부에서 요구되는 반응 조건의 일부에 적합하지 않는다. 반응 조건에 적합한 치환기에 대한 그러한 제한은 본 업계의 숙련가에게 용이하게 분명할 것이고 대체 방법이 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물 또는 임의의 중간체는 합성 유기 화학자에게 잘 알려진 표준 방법, 예를 들어 "Purification of Laboratory Chemicals", 6^th ed. 2009, W. Amarego and C. Chai, Butterworth-Heinemann에 기술된 방법을 사용하는 것이 요구된다면 정제될 수 있다. 출발 물질은, 상업적으로 이용 가능한, 공지된 화합물이거나, 그들은 본 업계의 숙련가에게 잘 알려진 일반적인 합성 방법에 의해 제조될 수 있다.

일반적인 과정, 제조 및 실시예

출발 물질은 상업적으로 이용 가능하거나 상기 문헌에 공지되어 있다. 시약 및 용매는 상업적으로 이용 가능하고 달리 언급되지 않는 한 정제 없이 사용되었다. 선-포장된 REVELERIS^® 실리카 플래시 카트리지를 갖는 Grace REVELERIS^® 시스템, 또는 Teledyne Isco CombiFlash^® Rf 시스템을 사용하여, 또는 실리카 겔 60을 수동으로 사용하여 크로마토그래피 정제를 수행했다. 내부 표준으로서 테트라메틸실란 (δ = 0.00 ppm)을 이용하여 300, 400, 또는 600 MHz에서 Bruker 장비 상에서 ¹H NMR 스펙트럼을 기록했다. 화학적 이동 값 (δ, ppm으로)은 내부 테트라메틸실란 (δ = 0.00) 표준에 상대적으로 인용된다. 각각 이중선 (d), 삼중선 (t), 사중선 (q) 또는 다중선 (m)으로 정의된 다중선의 값은 범위가 언급되지 않는 한 대략 중간점에서 주어진다. (br)은 넓은 피크를 명시하면서, (s)는 단일선을 명시한다.

다음의 약어가 전반에 걸쳐 사용되었다:

AcOH 아세트산

Boc tert-부톡시카보닐

Cbz 벤질옥시카보닐

DCM 디클로로메탄

dba 디벤질리덴아세톤

DIPEA N,N-디이소프로필에틸아민

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMP 데스-마틴 퍼아이오디난

DMSO 디메틸 설폭시드

DSC 시차 주사 열량 측정법

ee 광학 이성질체 과잉율

Et 에틸

EtOAc 에틸 아세테이트

EtOH 에탄올

h 시간

HATU 1-[bis(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄

3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

HRMS 고해상도 질량 스펙트럼

L 리터

m 밀리

MeCN 아세토니트릴

MeOH 메탄올

min 분

m.p. 녹는점

Ms 메탄 설포닐

MS 질량 분광광도법 또는 질량 스펙트럼

NMR 핵 자기 공명 분광법

rt 실온, 즉 18-30 °C 및 전형적으로 20 °C

RuPhos 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디이소프로폭시비페닐

SFC 초임계 유체 크로마토그래피

TBS tert-부틸디메틸실릴

TFA 트리플루오로아세트산

THF 테트라하이드로푸란

Tj 열 자켓의 온도

TLC 박층 크로마토그래피

tr 체류 시간

Tr 반응 혼합물의 온도

UHPLC 초고성능 액체 크로마토그래피

UPLC 초고성능 액체 크로마토그래피

Xantphos 4,5-bis(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐

분취 HPLC

산성 방법

기기: Gilson UV/VIS-155 검출기를 갖춘 Gilson HPLC 시스템

컬럼 : Waters SunFire™ Prep C18 5 μm OBD 19 x 250 mm

시약: (A) 0.1% 포름산-물 용액; (B) MeCN

펌프:

- 유속: 30 mL/분

염기성 방법

기기: Gilson UV/VIS-155 검출기를 갖춘 Gilson HPLC 시스템

컬럼 : Waters XBridge^® Prep C18 5 μm OBD 19 x 250 mm

시약: (A) 50 mM NH₄HCO₃ 용액; (B) MeCN

펌프:

- 유속: 30 mL/분

분석적인 LC-MS

방법 A

기기: Shimadzu UHPLC 2020

컬럼 : Acquity UPLC HSS C18, 1.8 μm, 2.1 x 50 mm

시약: - 포름산≥98%, Sigma-Aldrich

- HPLC UV/기울기 등급를 위한 아세토니트릴, Baker

- 순수한 디메틸 설폭시드 (DMSO), Chempur

- HPLC를 위해 정제된 물

HPLC 조건: - 파장: 214 nm ± 4 nm, 254 nm ± 4 nm

- 유속: 0.5 ml/분

- 컬럼 온도: 25 ⁰C

- 자동샘플러 온도: 20 ⁰C

- 주입 부피: 3.0 μl

- 분석 시간: 6 분

- 용리: 기울기

이동상 A: 포름산의 0.1 % v/v 수용액

이동상 B: 포름산의 0.1 % v/v 아세토니트릴 용액

주사기 세척을 위한 용액: 20% MeOH

MS 조건:

- 질량 범위: 100 - 1000 m/z

- 이온화: 대체

- 스캔 시간: 0.5 초

방법 B

2.1 Х 50 mm Acquity UPLC^® HSS T3 1.8 μm 컬럼을 갖춘 Waters Acquity UPLC 시스템 및 양이온화 전기분무 방식으로 작동되는 Acquity SQ 검출기를 사용하여 UPLC-MS 분석을 수행했다. 이동상은 완충제 A에 대한 수성 10 mM 암모늄 아세테이트 용액 내 0.1% 포름산 및 완충제 B에 대한 아세토니트릴 내 0.1% 포름산으로 이루어졌다. 1.4 분에 걸친 이원 기울기 (A:B 95:5→5:95)를 1.2 mL/분의 유속으로 사용했고 컬럼 온도는 60　°C이었다.

방법 C

254 nm에서 UV 검출을 갖춘 Waters Acquity UPLC 시스템 및 양이온화 전기분무 방식으로 작동되는 Waters LCT Premier XE 고해상도 TOF 질량 분광계을 사용하여 고해상도 질량 스펙트럼을 이용하여 UPLC-MS 분석을 수행했다. 방법 B에서와 같은 동일한 컬럼 및 이동상 A 및 B가 사용되었지만 더 느린 기울기 (A:B 99:1→1:99 에 대한 4.8 분; 0.7 mL/분; 컬럼 온도 40　°C)가 사용되었다.

방법 D

LC-MS: 전기분무 이온화 및 대기압 화학적 이온화를 사용하여 Shimadzu LCMS-2010EV 분광계 상에서 질량 스펙트럼을 얻었다; 컬럼: Acquity BEH C18 (50 mm x 2.1 mm, 1.7 μm); 이동상: A: 물 내 0.1% 포름산; B: 아세토니트릴 내 0.1% 포름산; 기울기: 시간 (분) / % B: 0/2, 0.2/2, 2.3/98, 3.4 /98, 3.41/2, 3.5/2; 컬럼 유속: 0.8 mL/분.

방법 E

LC-MS: 전기분무 이온화 및 대기압 화학적 이온화를 사용하여 Shimadzu LCMS-2010EV 분광계 상에서 질량 스펙트럼을 얻었다; 컬럼: Acquity BEH C18 (50 mm x 2.1 mm, 1.7 m); 이동상: A: 물 내 0.1% 포름산; B: 아세토니트릴 내 0.1% 포름산; 기울기 시간 (분) / % B: 0/3, 0.4/3, 2.5/98, 3.4/98, 3.5/3, 4/3; 컬럼 온도: 35°C, 유속: 0.6 mL/분.

분석적인 키랄 고정상 SFC

Phenomenex Lux^® 3 μm Cellulose-4 (150 x 4.6 mm) 컬럼 갖춘 Waters UPC2 SFC 장비를 사용하여 키랄 고정상 SFC 분석을 수행했다. CO₂:MeOH 80:20로 이루어진 이동상 및 3 mL/분의 유속을 갖는 등용매 조건이 사용되었다. 분석물의 광학 이성질체 비율을 UV 피크 면적의 통합에 의해 결정했다.

중간체

중간체 1

2-[트랜스-4-[(2-클로로-5-니트로피리딘-4-일)아미노]시클로헥실]아세토니트릴

건조 아세토니트릴 내 트랜스-4-(시아노메틸)시클로헥실]암모늄 트리플루오로아세테이트 (Li, Y.-L. et al. US2014/0121198) (26.7 g, 105.8 mmol) 및 2,4-디클로로-5-니트로피리딘 (22.4 g, 116.3 mmol)의 용액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 N,N-디이소프로필에틸아민 (55.3 mL, 317 mmol)을 적상 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 실온에서 20 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 포화된 수성 NaHCO₃로 희석했고 DCM (3 x 500mL)로 추출했다. 조합된 유기 층을 Na₂SO₄에서 건조시켰고, 여과시켰고 진공 하에서 증발시켰다. 조 생성물을 헥산, 디에틸 에테르 및 물로 연마하여 황색 고체로서 표제 화합물을 수득했다 (29.8 g, 95%).

UPLC-MS (방법 A): t_R = 3.41 분, m/z = 294.9 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.87 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.73 (dtd, J = 11.5, 7.7, 4.2 Hz, 1H), 2.50 (d, J = 4.2 Hz, 2H) 2.04 - 1.91 (m, 2H), 1.86 - 1.75 (m, 2H), 1.64 (ddd, J = 11.6, 5.7, 3.0 Hz, 1H), 1.53 - 1.39 (m, 2H), 1.31 (ddd, J = 25.4, 12.9, 4.2 Hz, 2H).

중간체 2

MeOH:물 9:1 (99 mL) 내 중간체 1 (3.5 g, 11.9 mmol)의 용액에 철 (1.86 g, 33.2 mmol) 및 암모늄 클로라이드 (1.91 g, 35.6 mmol)를 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 환류에서 5 시간 동안 교반했다. 실온까지 냉각시킨 후, 셀라이트 플러그를 통한 여과에 의해 고체를 제거했다. 박(cake)을 MeOH로 세척했고 여과액을 농축시켜 휘발성 물질을 제거했다. 잔류물을 포화된 수용액 NaHCO₃ (50 mL)로 희석했고 EtOAc (3 x 30 mL)로 추출했다. 유기 상을 Na₂SO₄에서 건조시켰고 진공 내에서 농축시켜 갈색 고체로서 표제 화합물을 수득했다 (3.0 g, 95%).

UPLC-MS (방법 A): t_R = 1.85 분, m/z = 265 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 7.37 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 5.38 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 2.48 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.06 - 1.92 (m, 2H), 1.87 - 1.74 (m, 2H), 1.71 - 1.57 (m, 1H), 1.33 - 1.16 (m, 5H).

중간체 3

2-[트랜스-4-[6-클로로-2-(1-히드록시에틸)-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

THF (40 mL) 내 트리에틸옥소늄 테트라플루오로보레이트 (9.3 g, 49.1 mmol) 및 락타미드 (4.4 g, 49.1 mmol)의 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반했다 (투명한 용액). 이 용액을 EtOH (70 mL) 내 중간체 2 (2.6 g, 9.8 mmol)의 용액에 부가했다. 얻어진 혼합물을 환류로 18 시간 동안 가열했다. 반응 혼합물을 농축시켰고 잔류물을 물 (40 mL) 및 EtOAc (25 mL) 사이에 분배시켰다. 수상을 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출했다. 유기 상을 Na₂SO₄에서 건조시켰고 진공 내에서 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (DCM 내 20%의 EtOAc 및 용리액으로서 DCM 내 10%의 MeOH)는, 디에틸 에테르로 연마되어 적색 고체로서 표제 화합물 (2.3 g, 73%)을 수득하는 반고체를 수득했다.

UPLC-MS (방법 A): t_R = 2.52 분, m/z = 319 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.70 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 5.81 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.10 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.74 - 4.60 (m, 1H), 2.55 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.39 - 2.17 (m, 2H), 2.16 - 2.03 (m, 1H), 1.98 - 1.84 (m, 4H), 1.60 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.38 - 1.22 (m, 2H).

실시예

실시예 1

트랜스 -2-[4-[2-[1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일] 시클로헥실 ]아세토니트릴 (화합물 1)

단계 1:

2-[트랜스-4-[6-아미노-2-(1-히드록시에틸)-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

중간체 3 (0.20 g, 0.63 mmol), tert-부틸 카바메이트 (0.15 g, 1.25 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) (0.06 g, 0.06 mmol), 4,5-bis(디페닐포스피노)-9,9-디메틸크산텐 (0.11 g, 0.19 mmol) 및 3염기 포타슘 포스페이트 (0.31 g, 1.44 mmol)를 1,4-디옥산 (15 mL) 내 혼합했다. 얻어진 혼합물을 20 분 동안 아르곤으로 탈기시켰고 이후 극초단파 조사 하에서 45 분 동안 130 °C에서 가열했다. 셀라이트 플러그를 통해 혼합물을 여과했고, 박(cake)을 MeOH/DCM (1:9)로 세척했고 여과액을 농축시켰다. 극초단파 반응기의 부피 제한으로 인해 동일한 양 및 조건을 사용하여 이 반응을 부가적으로 4번 반복했다. 얻어진 잔류물을 조합했다. 짧은 컬럼 크로마토그래피 (용리액으로서 DCM 내 2%의 MeOH)는 DCM (15 mL) 내 용해된 조 혼합물 (0.7 g)을 수득했다. 용액에 적상 TFA을 부가했다 (1.3 mL, 17.5 mmol). 얻어진 혼합물을 실온에서 24 시간 동안 교반했다. 혼합물을 진공 내에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM 내 (15 mL) 용해시켰고 수용액 NaHCO₃ (5 mL)로 세척했다. 수성 상을 DCM (5 x 15 mL)로 추출했다. 유기 상을 Na₂SO₄에서 건조시켰고 진공 내에서 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (MeOH:DCM 5:95 내 MeOH:DCM 4:96 내지 7.5M NH₃ 기울기)는 황색 폼으로서 표제 화합물 (0.195 g, 21%)을 수득했다.

UPLC-MS (방법 A): t_R = 1.72 분, m/z = 300 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.26 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 5.59 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.39 (s, 2H), 4.96 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 4.62 - 4.47 (m, 1H), 2.57 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.23 - 2.06 (m, 2H), 2.01 - 1.72 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.40 - 1.22 (m, 2H).

단계 2:

트랜스-2-[4-[2-[1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

메탄올 (5 mL) 내 단계 1의 생성물 (0.195 g, 0.65 mmol)의 용액에 파라포름알데히드 (0.078 g, 2.61 mmol) 및 소듐 메톡시드 (0.176 g, 3.26 mmol)를 부가했다. 얻어진 혼합물을 환류로 가열했다. 2 시간 후, 혼합물을 0 °C까지 냉각시켰고 소듐 보로하이드라이드 (0.099 g, 2.61 mmol)를 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 환류에서 1 시간 동안 가열했다. 실온까지 냉각시킨 후, 포화된 수용액 NaHCO₃ (10 mL)을 조심스럽게 부가하여 반응을 ?칭했다. 수성 상을 EtOAc (3 x 10 mL)로 추출했다. 유기 상을 Na₂SO₄에서 건조시켰고 진공 내에서 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (용리액으로서 DCM 내 4% 내지 10% MeOH)는 백색 폼으로서 표제 화합물 (0.152 g, 76%)을 수득했다.

HPLC-MS (방법 C): t_R = 1.67 분, m/z = 314.1939 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.34 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 5.90 (q, J = 4.9 Hz, 1H), 5.59 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.96 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 4.61 - 4.50 (m, 1H), 2.80 (d, J = 4.9 Hz, 3H), 2.56 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.30 - 2.11 (m, 2H), 1.98 - 1.82 (m, 5H), 1.55 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.39 - 1.23 (m, 2H).

실시예 2 및 3

트랜스 -2-[4-[2-[(1 S )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (화합물 2) 및 트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (화합물 3)

실시예 1의 광학 이성질체 (166 mg)를 다음의 조건을 사용하여 키랄 고정상 SFC에 의해 분리했다:

절대 배열은 (R)-락타미드로부터 제조된 (R) 광학 이성질체의 샘플과의 비교에 의해 확립되었고, 아래의 실시예 3 (대체 제조) 참조.

실시예 2 (화합물 2)

수율: 73 mg, >98% ee

UPLC-MS (방법 C): t_R = 1.67 분, m/z = 314.1908 (M+H⁺).

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.33 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 5.89 (q, J = 5.0 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.96 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.63 - 4.47 (m, 1H), 2.79 (d, J = 5.0 Hz, 3H), 2.55 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.30 - 2.10 (m, 2H), 2.01 - 1.76 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.40 - 1.20 (m, 2H).

실시예 3 (화합물 3)

수율: 67 mg, >98% ee

UPLC-MS (방법 C): t_R = 1.67 분, m/z = 314.1975 (M+H⁺).

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.33 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 5.89 (q, J = 4.9 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 4.96 (p, J = 6.4 Hz, 1H), 4.63 - 4.46 (m, 1H), 2.79 (d, J = 5.0 Hz, 3H), 2.55 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.29 - 2.11 (m, 2H), 2.00 - 1.77 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.39 - 1.19 (m, 2H).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆)δ 8.33 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 5.90 (q, J = 5.0 Hz, 1H), 5.59 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.96 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 4.55 (tt, J = 12.3, 4.0 Hz 1H), 2.79 (d, J = 5.0 Hz, 3H), 2.55 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.20 (qdd, J = 12.8, 10.4, 3.7 Hz, 2H), 1.93 (ddd, J = 13.1, 6.3, 3.2 Hz, 2H), 1.89 - 1.86 (m, 2H), 1.86 - 1.84 (m, 1H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.30 (qdt, J = 12.3, 7.6, 3.6 Hz, 2H).

¹³C NMR (151 MHz, DMSO-d ₆) δ 155.5, 155.4, 141.3, 139.2, 133.3, 119.5, 86.4, 61.9, 54.0, 32.9, 30.7, 30.7, 29.1, 28.8, 28.8, 22.9, 21.5.

실시예 3 (대체 제조 1번)

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (화합물 3)

단계 1

2-[트랜스-4-[6-클로로-2-[(1R)-1-히드록시에틸]-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

100 mL 스크류캡 바이알을 아르곤 하에서 트리에틸옥소늄 테트라플루오로보레이트 (8.00 g, 42.1 mmol) 및 건조 THF (30 mL)로 채웠다. 백색 현탁액에 (R)-락타미드 (3.87 g, 42.1 mmol)를 한번에 부가했다. 결과로 얻은 용액을 실온에서 교반했다. ~6 분 뒤, 약하게 발열 반응이 발생했고 반응 용기를 수조 내에서 냉각시켰다. 2 시간 후 실온에서, 이 용액을 무수 에탄올 (45 mL) 내 중간체 2 (2.23 g, 8.42 mmol)의 현탁액에 부가했고 결과로 얻은 용액을 80 °C에서 밤새 교반했다. 휘발성 물질을 증발시켰고 잔류물을 포화 수용액 소듐 중탄산염 용액 (50 mL)으로 처리했다. 혼합물을 EtOAc (3 x 80 mL)로 추출했고 조합된 유기 상을 소금물 (50 mL)로 세척했고, 소듐 설페이트에 대해 건조시켰고 여과시켰다. 휘발성 물질의 증발은 잔류물 (13.5 g)을 수득했고 플래시 크로마토그래피 (DCM:MeOH 98:2 내지 95:5)를 사용하여 정제하여 갈색 폼 (1.92 g)을 수득했다. 이것을 에테르 (20 mL)로 연마하여 표제 화합물을 고체 (1.62 g, 57%)로서 수득했다.

UPLC-MS (방법 B): t_R = 0.52 분, m/z = 319.2 (M+H⁺).

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.69 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 5.80 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.10 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.74 - 4.59 (m, 1H), 2.54 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.38 - 2.16 (m, 2H), 2.17 - 2.00 (m, 1H), 1.99 - 1.81 (m, 4H), 1.59 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.41 - 1.18 (m, 2H).

표제 화합물의 절대 배열을 단일 결정 X-선 회절에 의해 확정했다.

단계 2

2-[4-[2-[(1R)-1-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸]-6-클로로-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

THF (35 mL) 내 단계 1 (2.47 g, 7.75 mmol)의 생성물의 용액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 이미다졸 (791 mg, 11.6 mmol)을 부가했다. 5 분 후, THF (11 mL) 내 TBSCl (1.28 g, 8.52 mmol)의 용액을 부가했고 얼음 수조를 제거했다. 5 시간 후 실온에서 혼합물을 45 °C로 가온했고 이 온도에서 밤새 교반했다. 완전한 전환을 달성하기 위해, 또 다른 부분의 이미다졸 (791 mg, 11.6 mmol) 및 THF (5 mL) 내 TBSCl (1.28 g, 8.52 mmol)의 용액을 부가했다. 혼합물을 45 °C로 또 다른 24 시간 동안 교반했고 소금물 (35 mL) 및 물 (35 mL)의 혼합물 내로 주입했다. 이를 EtOAc (2 x 80 mL)로 추출했고, 유기 층을 소금물로 세척했고, Na₂SO₄에서 건조시켰고, 여과시켰고, 증발시켰다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (DCM:EtOAc 90:10 내지 80:20)에 의해 정제하여 표제 화합물을 고체로서 수득했다 (2.95 g, 83%).

UPLC-MS (방법 B): t_R = 0.92 분, m/z = 433.3 (M+H⁺).

¹H NMR (600 MHz, CDCl₃) δ 8.75 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 5.34 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 5.00 (tt, J = 12.5, 4.1 Hz, 1H), 2.41 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.31 - 2.19 (m, 2H), 2.17 - 2.09 (m, 2H), 2.09 - 2.03 (m, 2H), 2.00 - 1.91 (m, 1H), 1.62 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.48 - 1.33 (m, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.14 (s, 3H), 0.03 (s, 3H).

단계 3

2-[4-[2-[(1R)-1-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸]-6-[(4-메톡시페닐)메틸-메틸-아미노]이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

2 mL 스크류캡 바이알을 단계 2의 생성물 (46.2 mg, 0.107 mmol) 및 4-메톡시-N-메틸벤질아민 (32.3 mg, 0.213 mmol)로 채웠다. 바이알을 아르곤으로 플러싱했고, 소듐 tert-부톡시드 (12.3 mg, 0.128 mmol), RuPhos (3.0 mg, 0.0064 mmol) 및 팔라듐(II) 아세테이트 (0.72 mg, 0.0032 mmol)의 혼합물을 부가했다. 혼합물을 17 시간 동안 110 °C에서 아르곤 하에서 교반했다. 이를 실온까지 냉각시켰고 디클로로메탄 (0.45 mL)을 부가했다. 혼합물을 소금물:물 2:1 (0.45 mL)로 세척했고 수성 층을 디클로로메탄 (2 x 0.45 mL)으로 추출했다. 조합된 유기 층을 Na₂SO₄에서 건조시켰고, 여과시켰고 증발시켜 표제 화합물 및 해당하는 des-TBS 유사체를 함유하는 조 생성물 (75.3 mg)을 수득했다. 이 물질을 다음 단계에서 정제 없이 사용했다.

UPLC-MS (방법 B): t_R = 0.95 분, m/z = 548.4 (M+H⁺).

단계 4

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

단계 3로부터의 조 생성물을 0 °C에서 TFA (0.25 mL) 내에 용해시켰고 혼합물을 1.5 시간 동안 실온에서 교반했다. 휘발성 물질을 진공 하에서 제거했고 잔류물을 디옥산 (0.25 mL) 내 4 M 염화 수소 내에 용해시켰다. 혼합물을 18 시간 동안 실온에서 교반했고, 휘발성 물질을 증발시켰고, 잔류물을 디클로로메탄 (0.25 mL) 내에 용해시켰다. 이에 메탄올 (0.60 mL) 내 2 M 암모니아를 부가하여 pH를 ~10까지 조절했다. 휘발성 물질을 진공 하에서 제거했고, 잔류물을 DCM:MeOH 95:5 (2 mL) 내에 용해시켰고 혼합물을 여과했다. 여과액을 증발시켰고 잔류물을 크로마토그래피 (DCM:MeOH 96:4 내지 94:6로 용출된 4 g 선-포장된 실리카 겔 컬럼)에 의해 정제하여 약 30%의 4-메톡시-N-메틸벤질아민을 함유하는 반고체로서 표제 화합물 (37.7 mg)을 수득했다.

UPLC-MS (방법 B): t_R = 0.38 분, m/z = 314.3 (M+H⁺).

분석적인 키랄 고정상 SFC: (S) 광학 이성질체 (소수) t_R = 5.37 분; (R) 광학 이성질체 (다수) t_R = 5.78 분.

실시예 3 (대체 제조 2번)

단계 1

기계적인 교반기, 환류 응축기 및 아르곤 주입구를 갖춘, 20 L 유리 반응기를 진공으로 만들었고 아르곤으로 2번 플러싱했다. 반응기를 700 g의 2,4-디클로로-5-니트로피리딘 (3.63 mol, 1.0 당량), 665 g의 트랜스-4-(시아노메틸)시클로헥실]암모늄 하이드로클로라이드 (3.81 mol, 1.05 당량) 및 7.00 L의 2-프로판올로 채웠다. 결과로 얻은 슬러리를 25 °C에서 교반했고 1.90 L의 디이소프로필에틸아민 (1.41 kg, 10.9 mol, 3.0 당량)을 부가했다. 부가 튜브를 0.100 L 2-프로판올로 세척했고 슬러리를 환류까지 가열했다 (Tj 설정값= 95 °C). 혼합물을 환류에서 15 시간 동안 교반했고 이후 25 °C까지 냉각했다. 공정에서 대조군(LCMS)은 99% 전환을 보여주었다.

생성물을 여과에 의해 분리했고 필터 상에서 1.75 L의 2-프로판올 및 이후 3.80 L의 2-프로판올로 세척했다. 필터 박(cake)을 유리 그릇으로 전달했고 50 °C에서 진공 내에서 일정한 중량까지 건조시켰고; 황색 고체로서 1.00 kg (94%) 의 표제 화합물을 수득했고; HPLC 순도는 다음이다: 98.8 면적%.

단계 2

2.0 L Parr-진탕기 반응 플라스크를 아르곤으로 플러싱했고 5.00 g의 5% Pt/C (50% 물을 갖는 페이스트, 0.05 g/g, 1.3 mmol), 100 g의 2-[트랜스-4-[(2-클로로-5-니트로피리딘-4-일)아미노]시클로헥실]아세토니트릴 (339 mmol) 및 1.00 L의 에탄올로 채웠다. Parr-진탕기 반응기 플라스크를 Parr-진탕기에 배치했고 진공으로 만들었고 아르곤으로 2번 재충전했다. 그 다음, 플라스크를 진공으로 만들었고 수소로 재충전했다. 압력을 1.5 bar로 조절했고 진탕기를 시작했다. 부가적인 수소를 몇 차례 부가했지만 2 시간 후 수소의 소비가 중단되었다. 공정에서 대조군 (HPLC)은 >99% 전환을 보여주었고 600 mL의 디클로로메탄을 부가했고 표제 화합물의 침전을 방지하기 위하여. 결과로 얻은 혼합물을 10 분 동안 교반했고 셀라이트에서 여과시켰다. 필터 박(cake)을 250 mL의 디클로로메탄으로 세척했고 조합된 여과액으로부터의 용매를 감소된 압력 하에서 50 °C에서 증발에 의해 제거했다. 잔류물을 유리 그릇으로 전달했고 50 °C에서 일정한 중량까지 진공 내에서 건조시켰고, 갈색 고체로서 85.1 g (95%) 의 표제 화합물을 수득했고; HPLC 순도는 다음이다: 94 면적%.

단계 3

기계적인 교반기, 환류 응축기 및 아르곤 주입구를 갖춘, 20 L 유리 반응기를 진공으로 만들었고 아르곤으로 2번 플러싱했다. 반응기를 409 g의 (R)-락타미드 (4.59 mol, 2.5 당량) 및 4.90 L의 테트라하이드로푸란으로 채웠다. 온도를 23 °C로 조절했고 872 g의 트리에틸옥소늄 테트라플루오로보레이트 (4.59 mol, 2.5 당량)을 한번에 부가했다. NB! 반응은 발열이고 온도는 부가 이후 43 °C에 도달했다. 반응 혼합물을 냉각시켰고 23 °C에서 90 분 동안 교반했다. 혼합물을 10 L 청색 캡 플라스크로 전달했고 아르곤 하에서 저장했다. 반응기를 2.7 L의 에탄올로 세정했고 깨끗한 반응기를 486 g의 2-[트랜스-4-[(5-아미노-2-클로로피리딘-4-일)아미노]시클로헥실]아세토니트릴 (1.84 mol, 1.0 당량) 및 7.3 L의 에탄올로 채웠다. 온도를 23 °C로 조절했고 (R)-락타미드 및 트리에틸옥소늄 테트라플루오로보레이트를 함유하는 테트라하이드로푸란 용액을 약 2-4 분에 걸쳐 부가했다. 반응 혼합물을 환류로 가열했다 (Tr = 70 °C, Tj 설정값= 85 °C). 백색 염의 침전이 관찰되었다. 반응 혼합물은 불투명하고 오렌지색이었다. 6 시간 후, 공정에서 대조군 (HPLC)은 >95% 전환을 보여주었고 반응 혼합물을 23 °C까지 냉각시켰고 부가적으로 16 시간 동안 교반했다. 혼합물을 여과했고 필터 박(cake)을 2.0 L의 테트라하이드로푸란으로 세척했다. 여과액을 다시 반응기 내로 전달했고 감소된 압력 하에서 50 °C에서 증류에 의해 용매를 제거했다. Tr = 31 °C / 17 mbar에서 응축이 중단될 때 7 시간 후 증류를 정지했다. 잔류 슬러리를 7.3 L의 메틸 tert-부틸에테르 및 7.3 L의 10% 수성 소듐 카보네이트로 희석했다. 슬러리를 23 °C에서 14 시간 동안 교반하고 나서 표제 화합물을 여과에 의해 분리했다. 필터 박(cake)을 5.0 L의 물로 세척했고, 흡입 건조시켰고 다시 반응기 내로 전달했다. 그 다음, 5.0 L의 물을 반응기에 부가했고 결과로 얻은 슬러리를 23 °C에서 60 분 동안 교반했고 여과시켰다. 필터 박(cake)을 5.0 L의 물로 세척했고 흡입 건조시켰다. 결과로 얻은 미색 고체를 유리 그릇으로 전달했고 일정한 중량; 미색 고체로서 전형적인 수율 70-90 %의 표제 화합물; HPLC 순도의 습윤 필터 박(cake) 95 면적%까지 진공 내에서 50 °C에서 건조시켰다.

단계 4

기계적인 교반기, 환류 응축기 및 아르곤 주입구를 갖춘, 400 mL EasyMax 유리 반응기를 아르곤으로 플러싱했다. 반응기를 5.43 g의 소듐 tert-부톡시드 (56.5 mmol, 1.2 당량), 5.54 g의 페놀 (58.8 mmol, 1.25 당량) 및 195 mL의 테트라하이드로푸란으로 채웠다. 혼합물을 25 °C에서 20 분 동안 교반하고 나서 15.0 g의 2-[트랜스-4-[6-클로로-2-[(1R)-1-히드록시에틸]-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (47.1 mmol, 1.0 당량)을 부가했다. 부가 깔때기를 30 mL의 테트라하이드로푸란으로 플러싱했고 테트라하이드로푸란 (188 mmol, 4.0 당량) 내 94.1 mL의 2 M 메틸아민을 부가했다. 결과로 얻은 혼합물을 55 °C까지 가열했다 (Tj 설정값= 55 °C). 별도의 반응 플라스크에서, 0.210 g의 ^t BuBrettPhos Pd G3 (0.235 mmol, 0.005 당량)을 4.0 mL의 테트라하이드로푸란 내에 용해시켰다. ^t BuBrettPhos Pd G3 용액을 55 °C에서 반응 혼합물에 부가했다. 23 시간 후 어두운 균질 용액을 23 °C까지 냉각시켰고 분리 깔때기로 전달했다. 반응 혼합물을 2 x 225 mL의 2 M 수성 소듐 하이드록사이드로 세척했다. 유기 상을 50 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 약 50% 부피로 농축시켰고 125 mL의 헵탄으로 희석했다.

실리카 플러그 여과; 105 g의 실리카 겔 (7.0 g/g)을 250 mL의 헵탄/에틸 아세테이트 (1:1)로 활성화시켰고 유리 필터 (8 cm 지름) 상으로 주입했다. 조 표제 화합물을 함유하는 유기 상을 실리카 플러그 상으로 천천히 로딩했다. 불순물을 2 x 250 mL의 헵탄/에틸 아세테이트 (1:1) 이후 250 mL의 에틸 아세테이트로 용출시켰다. 그 다음, 표제 화합물을 5 x 200 mL의 테트라하이드로푸란으로 용출시켰다. 표제 화합물을 함유하는 분획을 수집했고 감소된 압력 하에서 증발에 의해 용매를 제거했고, 갈색 고체; HPLC 순도 95 면적%로서 12.3 g (83%) 의 조 표제 화합물을 제공했다.

Pd 포집; 100 mL 플라스크를 3.00 g의 조 표제 화합물 (9.57 mmol) 및 45 mL의 메탄올로 채웠다. 모든 고체가 용해될 때까지 혼합물을 교반했고 이후 0.30 g의 SiliaMetS^® DMT (10%w/w 디머캅토트리아진, 40-63 μm, 60 A)을 부가했다. 슬러리를 50 °C까지 가열했고 4 시간 동안 교반했고, 그리고 나서 혼합물을 23 °C까지 냉각시켰고 셀라이트에서 여과시켰다. 필터 박(cake)을 6.0 mL의 메탄올로 세척했고 조합된 여과액으로부터의 용매를 감소된 압력 하에서 증발에 의해 제거했고, 2.75 g (92% 회수) 의 표제 화합물을 수득했다.

재결정화; 100 mL 플라스크를 3.00 g (9.57 mmol; HPLC 순도 96 면적%) 의 표제 화합물 및 20 mL의 에틸 아세테이트로 채웠다. 혼합물을 환류까지 가열했고 모든 고체가 용해될 때까지 교반했다. 혼합물을 냉각시켰고 이후 10 mL의 및 메틸 tert-부틸에테르를 적상 부가하여 용액을 가온했다. 혼합물을 실온까지 냉각시켰고 17 시간 동안 교반했다. 침전물을 여과에 의해 분리했고 2 x 1.0 mL의 메틸 tert-부틸에테르로 필터 상에서 세척했고 50 °C에서 진공 내에서 일정한 중량까지 건조시켰고, 미색 고체로서 1.81 g (60%) 의 표제 화합물 (결정질, m.p. (DSC 시작 온도) 143 ± 2 ^oC)을 수득했고; HPLC 순도는 98 면적%이다.

실시예 4

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (트리중수소메틸아미노)이미다조[4,5- c ] 피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (화합물 4)

단계 1

1,1,1-트리중수소-N-[(4-메톡시페닐)메틸]메탄아민

아르곤 하에서 무수 에탄올 (3.0 mL) 내 4-메톡시벤즈알데히드 (0.243 mL, 2.00 mmol)의 혼합물에 트리중수소메탄아민 하이드로클로라이드 (282 mg, 4.00 mmol) 및 TEA (0.558 mL, 4.00 mmol)를 실온에서 부가했다. 테트라-이소프로폭시티타늄(IV)을 2 분 이상 약간의 냉각 하에서 현탁액에 부가했다. 반응 혼합물을 이후 실온에서 밤새 교반했다. 실온에서 - 17 시간 후 - NaBH₄을 부가했다 (113 mg, 3.00 mmol). 현탁액을 이후 또 다른 6.5 시간 동안 교반했고 2M 수성 암모니아 (6 mL)를 냉각 하에서 조심스럽게 부가했다. 고체 부분을 여과에 의해 제거했고 필터 박(cake)을 디클로로메탄 (10 mL)으로 세척했다. 유기 상을 분리했다. 필터 박(cake)을 다시 한 번 디클로로메탄 (10 mL)으로 세척했다. 조합된 여과액을 물로 세척했고 이후 1M 수용액 HCl (5 mL)로 처리했다. 산성 수상을 디클로로메탄 (10 mL)으로 세척했고 pH을 2M NaOH의 부가에 의해 ~11로 조절했다. 수상을 이후 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출했다. 조합된 유기 상을 소금물로 세척했고, 소듐 설페이트에서 건조시켰고 여과시켰다. 감소된 압력 하에서 (60 mbar/35 °C) 증발은 표제 화합물을 무색 액체로서 수득했다 (268 mg, 83%).

¹H NMR (600 MHz, CDCl₃) δ 7.25 - 7.21 (m, 2H), 6.89 - 6.84 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.68 (s, 2H).

단계 2

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸]-6-[(4-메톡시페닐)메틸-트리중수소메틸-아미노]이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

4 mL 스크류캡 바이알을 트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시에틸]-6-클로로-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (150 mg, 0.346 mmol) 및 1,1,1-트리중수소-N-[(4-메톡시페닐)메틸]메탄아민 (107 mg, 0.693 mmol)로 채웠다. 바이알을 아르곤으로 플러싱했고, 소듐 tert-부톡시드 (40 mg, 0.416 mmol), RuPhos (9.7 mg, 0.021 mmol) 및 팔라듐(II) 아세테이트 (2.3 mg, 0.010 mmol)의 혼합물을 부가했다. 혼합물을 18 시간 동안 110 °C에서 아르곤 하에서 교반했다. 이를 실온까지 냉각시켰고 디클로로메탄/EtOH 95:5 용액 (1.5 mL)을 부가했다. 혼합물을 소금물:물 2:1 (1.2 mL)로 세척했고 수성 층을 디클로로메탄/EtOH 95:5 용액 (2 x 1.5 mL)으로 추출했다. 조합된 유기 층을 Na₂SO₄에서 건조시켰고, 여과시켰고 증발시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (용리액으로서 DCM 내 1% 내지 5%의 MeOH)는 표제 화합물 및 해당하는 des-TBS 유사체 (0.109 g)을 황색 폼으로서 수득했다. 이 물질을 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용했다.

단계 3

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(트리중수소메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

단계 2로부터의 조 생성물을 0 °C에서 TFA (0.75 mL) 내에 용해시켰고 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반했다. 휘발성 물질을 진공 하에서 제거했고 잔류물을 0 °C에서 디옥산 (0.75 mL) 내 4 M 염화 수소 내에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 17 시간 동안 교반했고 휘발성 물질을 증발에 의해 제거했다. 물 (0.5 mL)을 잔류물에 부가했고 수상을 EtOAc (2 x 0.5 mL)로 세척했다. 유기 상을 물 (0.5 mL)로 세척했다. 조합된 수상의 pH를 ~11까지 포화 수용액 소듐 카보네이트로 조절했다. 수상을 이후 DCM:MeOH 95:5 (3 x 0.5 mL)로 추출했고 조합된 유기 상을 Na₂SO₄에서 건조시켰고, 여과시켰고 증발시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (용리액으로서 DCM 내 3% 내지 5%의 MeOH)는 미색 폼으로서 표제 화합물을 수득했다 (48 mg, 42%).

UPLC-MS (방법 B): t_R = 0.38 분, m/z = 317.3 (M+H⁺).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.33 (br s, 1H), 6.47 (br s, 1H), 5.87 (s, 1H), 5.59 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.96 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.59 - 4.49 (m, 1H), 2.55 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 1.96 - 1.80 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.35 - 1.24 (m, 2H).

실시예 5

트랜스 -2-[4-[2-[1,2,2,2- 테트라중수소 -1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[ 4,5- c ]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (화합물 5)

단계 1

트랜스-2-[4-(2-아세틸-6-클로로-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일)시클로헥실]아세토니트릴

DCM 내 (50 mL) 2-[트랜스-4-[6-클로로-2-[(1R)-1-히드록시에틸]-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (5.0 g, 15.6 mmol)의 용액에 DMP (10 g, 23.5 mmol)을 0°C 내지 5°C에서 실온까지 조금씩 부가했다. 반응 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반했다. 완료 시, 반응 혼합물을 셀라이트 베드를 통해 여과했고 DCM로 세척했다. 여과액을 sat로 세척했다. NaHCO₃ (300 mL) 및 소금물 용액을 무수 Na₂SO₄에서 건조시켰고, 감소된 압력 하에서 농축했고 실리카 겔 (100-200 메쉬) 컬럼 크로마토그래피 (용리액으로서 pet. 에테르 내에서 10 내지 20% EtOAc)에 의해 정제하여 미색 고체로서 표제 화합물을 수득했다 (3.5 g, 71%).

LC-MS (방법 D): t_R = 1.84 분, m/z = 316.11 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.98 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 5.23-5.18 (m, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.54 (d, J = 6.5, 2H), 2.31-2.23 (m, 2H), 2.08-2.05 (m, 1H), 1.94-1.89 (m, 4H),　 1.30-1.27 (m, 2H).

단계 2

트랜스-2-[4-[6-클로로-2-(2,2,2-트리중수소아세틸)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

K₂CO₃ (4.5 g, 33.2 mmol)에 DMF (35 mL) 내 트랜스-2-[4-(2-아세틸-6-클로로-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일)시클로헥실]아세토니트릴 (3.5 g, 11.1 mmol)의 현탁액을 실온에서 부가했고 그 후에 그 온도에서 16 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 D₂O (10 mL)로 ?칭했고 실온에서 4 시간 동안 교반했고 얼음 물을 부가했다. 에틸 아세테이트 (70 mL)를 부가했다. 상을 분리했다. 수상을 에틸 아세테이트 (2 x 35 mL)로 추출했고 조합된 유기 상을 소금물로 세척했고, 무수 Na₂SO₄에서 건조시켰고, 감소된 압력 하에서 농축했고 실리카 겔 (100-200 메쉬) (용리액으로서 pet. 에테르 내에서 10 내지 20% EtOAc)을 사용하는 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 미색 고체로서 2.5 g의 조 생성물을 수득했다. 얻어진 물질은 동위원소 이성질체의 혼합물이다. ¹H NMR에 기초하여 동위원소 이성질체의 분포는; 비-중수소화 (CH₃): 7.6%, 단일-중수소화 (CH₂D): 26.33%, 이-중수소화 (CHD₂): 32.34% 및 삼-중수소화 (CD₃): 33.72%이다

상기 과정을 얻어진 조 생성물로 반복하여 미색 고체로서 1.8 g의 새로운 조 생성물을 수득했다. ¹H NMR에 기초하여 동위원소 이성질체의 분포는; 비-중수소화 (CH₃): 0.66%, 단일-중수소화 (CH₂D): 4.47%, 이-중수소화 (CHD₂): 23.84% 및 삼-중수소화 (CD₃): 71.02%이다.

상기 과정을 얻어진 조 생성물로 다시 한 번 반복하여 미색 고체로서 1.2 g (35% 전체 수율) 의 "표제 화합물"을 수득했다. 동위원소 순도: 99.3%. ¹H NMR에 기초하여 동위원소 이성질체의 분포는; 비-중수소화 (CH₃): 0.66%, 단일-중수소화 (CH₂D): 3.47%, 이-중수소화 (CHD₂): 21.85% 및 삼-중수소화 (CD₃): 74.02%이다.

LC-MS (방법 E): t_R = 1.79 분, m/z = 320.19 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.98 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 5.40-5.45 (m, 1H), 2.39 (d, J = 6.5, 2H), 2.27-2.219 (m, 2H), 2.13-2.04 (m, 4H), 1.96-1.90 (m, 1H), 1.45-1.39 (m, 2H).

단계 3

NaBD₄ (0.29 g, 7.04 mmol)에 CD₃OD (15 mL) 내 트랜스-2-[4-[6-클로로-2-(2,2,2-트리중수소아세틸)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (1.5 g, 4.69 mmol)의 현탁액을 0 ^oC 내지 5 ^oC에서 부가했다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반했다. 완료 시, 반응을 D₂O로 ?칭했고 혼합물을 감소된 압력 하에서 농축시켰다. 조 화합물을 H₂O 내에 용해시켰고 DCM 내 (2 x 15 mL) 10% MeOH로 추출했다. 조합된 유기 층을 소금물로 세척했고, 무수 Na₂SO₄에서 건조시켰고, 감소된 압력 하에서 농축했고 실리카 겔 (100-200 메쉬) 컬럼 크로마토그래피 (DCM 내 용리액으로서 1 내지 3% MeOH)에 의해 정제하여 미색 고체로서 표제 화합물을 수득했다 (1.2 g, 80%). 얻어진 화합물은 동위원소 이성질체의 혼합물이다. ¹H NMR에 기초하여 동위원소 이성질체의 분포는; 단일-중수소화 (CDOHCH₃): 0.66%, 이-중수소화 (CDOHCH₂D): 3.47%, 삼-중수소화 (CDOHCHD₂): 21.85% 및 테트라-중수소화 (CDOHCD₃): 74.02%이다.

LC-MS (방법 E): t_R = 1.48 분, m/z = 323.23 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.69 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 5.77 (s, 1H), 4.68-4.63 (m, 1H), 2.54 (d, J = 6, 2H), 2.27-2.21 (m, 2H), 2.10-2.08 (m, 1H), 1.93-1.86 (m, 4H),　 1.32-1.26 (m, 2H).

단계 4

트랜스-2-[4-[2-[1,2,2,2-테트라중수소-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴

밀봉된 튜브 내에서, 탈기된 1,4-디옥산 (5.0 mL) 내 트랜스-2-[4-[6-클로로-2-(1,2,2,2-테트라중수소-1-히드록시-에틸)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (0.10 g, 0.309 mmol)의 용액에 Cs₂CO₃ (0.302 g, 0.927 mmol), Brettphos Pd G1 (0.037 g, 0.046 mmol)을 부가했고 10 분 동안 아르곤과 퍼지했고, 이후 THF (0.60 mL, 1.24 mmol) 내에 2M CH₃NH₂을 부가했다. 반응 혼합물을 80 ^oC에서 16 시간 동안 교반했다. 완료 시, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켰고 셀라이트 패드를 통해 여과시켰고 EtOAc로 세척했다. 여과액을 감소된 압력 하에서 농축시켰다. 얻어진 잔류물을 물 내에 취했고 DCM (2 x 10 mL)로 2번 추출했다. 조합된 유기 상을 소금물로 세척했고, 무수 Na₂SO₄에서 건조시켰고 감소된 압력 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 (100-200 메쉬) 컬럼 크로마토그래피 (3%의 MeOH DCM 내 용리액으로서)에 의해 정제하여 연갈색 고체로서 표제 화합물을 수득했다 (0.04 g, 41%).　

LC-MS (방법 E): t_R = 1.14 분, m/z = 318 (M+H⁺).

추정된 몰 %의 중수소 동위원소 분포: D₀, D₁, D₂, D₃, D₄ = 0, 0, 3, 21, 76.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ (ppm) 8.32 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 5.93-5.89 (m, 1H), 5.58 (s, 1H), 4.57-4.51 (m, 1H), 2.78 (d, J = 5.2 Hz, 3H), 2.55 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.24-2.17 (m, 2H), 1.94-1.86 (m, 5H), 1.31-1.23 (m, 2H).

실시예 6

시스 -2-[4-[2-[1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일] 시클로헥실 ]아세토니트릴 (화합물 6)

시스-2-[4-[2-[1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴을, 단계 1에서 트랜스-4-(시아노메틸)시클로헥실]암모늄 하이드로클로라이드를 시스-4-(시아노메틸)시클로헥실]암모늄 하이드로클로라이드 (CAS 등록 번호 1461718-40-0)로 대체했고 (R)-락타미드를 단계 3 내 락타미드로 대체하는 주요 차이만을 갖는, 실시예 3의 "대체 제조 2번"에 개략된 것과 유사한 소규모 과정에 따라 얻었다.

UPLC-MS (방법 C): t_R = 1.62 분, m/z = 314.4 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.34 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.97 - 5.88 (m, 1H), 5.56 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.95 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.60 - 4.46 (m, 1H), 2.85 - 2.77 (m, 5H), 2.27 - 2.08 (m, 3H), 1.89 - 1.62 (m, 6H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H).

실시예 7

시스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (화합물 7)

시스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴을, 트랜스-4-(시아노메틸)시클로헥실]암모늄 하이드로클로라이드를 반응 순서의 제1 단계에서 시스-4-(시아노메틸)시클로헥실]암모늄 하이드로클로라이드 (CAS 등록 번호 1461718-40-0)로 대체하는, 주요 차이만을 갖는 실시예 3의 "대체 제조 2번" 내에 개략된 것과 유사한 소규모 과정에 따라 얻었다.

UPLC-MS (방법 C): t_R = 1.62 분, m/z = 314.4 (M+H⁺).

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.35 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 5.98 (br s, 1H), 5.58 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.95 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.60 - 4.46 (m, 1H), 2.86 - 2.76 (m, 5H), 2.27 - 2.07 (m, 3H), 1.89 - 1.62 (m, 6H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H).

실시예 8

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 말론산 염 (화합물 8)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (1.40 g, 4.46 mmol)을 45 °C에서 이소프로판올 (50 mL) 내에 용해시켰다. 이소프로판올 (5.0 mL)내 말론산 (232 mg, 2.23 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~30 mL의 이소프로판올을 증류 제거하였다). 표제 화합물의 약간의 참조 결정의 부가는 결정화를 개시했다. 반응 혼합물의 부피는 추가로 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~15 mL의 이소프로판올을 증류 제거하였다). 얻어진 현탁액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 잠시 후 고체를 여과하여 제거하고 차가운 이소프로판올 (3 x 2 mL)로 세척했다. 감소된 압력 하에서 건조시켜 미색 결정으로서 표제 화합물을 수득했다 (932 mg, ~100%).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.37 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.10 (br s, 1H), 5.66 (br s, 1H), 4.98 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.62 - 4.51 (m, 1H), 3.17 (s, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.55 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 1.97 - 1.81 (m, 5H), 1.55 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.36 - 1.24 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 109 ± 2 °C.

실시예 9

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 글리콜산 염 (화합물 9)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (1.80 g, 5.74 mmol)을 45 °C에서 이소프로판올 (65 mL) 내에 용해시켰다. 이소프로판올 (8.0 mL) 내 글리콜산 (437 mg, 5.74 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~65 mL의 이소프로판올을 증류 제거하였다). 표제 화합물의 약간의 참조 결정의 부가는 결정화를 천천히 개시했다. EtOAc (15 mL)을 부가했다. 얻어진 현탁액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 잠시 후 고체를 여과하여 제거하고 EtOAc:이소프로판올 (2 x 2 mL)의 차가운 9:1 혼합물로 세척했다. 감소된 압력 하에서 건조시켜 미색 결정으로서 표제 화합물을 수득했다 (1.57 g, 70%).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.33 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 5.90 (br s, 1H), 5.58 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.96 (p, J = 5.3 Hz, 1H), 4.59 - 4.51 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.55 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 1.97 - 1.80 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.36 - 1.25 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 100 ± 2 °C.

실시예 10

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 L-타르타르산 염 (화합물 10)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (1.50 g, 4.79 mmol)을 45 °C에서 메탄올 (25 mL) 내 용해시켰다. 메탄올 (10 mL) 내 L-타르타르산 (360 mg, 2.40 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~10 mL의 메탄올을 증류 제거하였다). 표제 화합물의 약간의 참조 결정의 부가는 결정화를 개시했다. 이소프로판올 (30 mL)을 부가했고 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~20 mL을 증류 제거하였다). 얻어진 현탁액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 잠시 후 고체를 여과하여 제거하고 차가운 이소프로판올 (4 x 4 mL)로 세척했다. 감소된 압력 하에서 건조시켜 미색 결정으로서 표제 화합물을 수득했다 (1.55 g, 83%).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.34 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.98 (br s, 1H), 5.60 (br s, 1H), 4.96 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 4.60 - 4.49 (m, 1H), 4.28 (s, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.55 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.26 - 2.13 (m, 2H), 1.97 - 1.80 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.36 - 1.25 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 98 ± 2 °C.

실시예 11

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 L- 말산 염 (화합물 11)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (1.50 g, 4.79 mmol)을 45 °C에서 메탄올 (25 mL) 내에 용해시켰다. 메탄올 (10 mL) 내 L-말산 (332 mg, 2.40 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~20 mL의 메탄올을 증류 제거하였다). 표제 화합물의 약간의 참조 결정의 부가는 결정화를 개시했다. 이소프로판올 (30 mL)을 부가했고 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~10 mL을 증류 제거하였다). 얻어진 현탁액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 잠시 후 고체를 여과하여 제거하고 차가운 이소프로판올 (4 x 4 mL)로 세척했다. 감소된 압력 하에서 건조시켜 미색 결정으로서 표제 화합물을 수득했다 (1.51 g, 79%).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.34 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.95 (br s, 1H), 5.59 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.96 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.59 - 4.51 (m, 1H), 4.23 (dd, J = 7.5, 5.3 Hz, 0.5H), 2.79 (s, 3H), 2.60 (dd, J = 15.6, 5.3 Hz, 0.5H), 2.55 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.43 (dd, J = 15.6, 7.5 Hz, 0.5H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 1.96 - 1.81 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.36 - 1.25 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 94°C ± 2 °C.

실시예 12

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 황산 염 (화합물 12)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (1.50 g, 4.79 mmol)을 45 °C에서 메탄올 (10 mL) 내에 용해시켰다. 이소프로판올 (5.0 mL) 내 황산 (1.0 M, 4.79 mL, 4.79 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~7 mL을 증류 제거하였다). 표제 화합물의 약간의 참조 결정의 부가는 결정화를 개시했다. 얻어진 현탁액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 잠시 후 고체를 여과하여 제거하고 차가운 이소프로판올 (2 x 2 mL)로 세척했다. 감소된 압력 하에서 건조시켜 미색 결정으로서 표제 화합물을 수득했다 (1.57 g).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 13.32 (br s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.49 (br s, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.91 (br s, 1H), 5.07 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.67 - 4.58 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.56 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.26 - 2.14 (m, 2H), 1.99 - 1.87 (m, 5H), 1.57 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.38 - 1.27 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 169 ± 2 °C.

실시예 13

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 염산 염 (화합물 13)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (2.00 g, 6.38 mmol)을 45 °C에서 이소프로판올 (70 mL) 내에 용해시켰다. 메탄올성 염산 (3.0 M, 6.38 mL, 19.1 mmol)을 실온에서 부가했다. 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~45 mL을 증류 제거하였다). 표제 화합물의 약간의 참조 결정의 부가는 결정화를 개시했다. 반응 혼합물의 부피는 감소된 압력 하에서 증발에 의해 추가로 감소되었다 (~5 mL을 증류 제거하였다). 얻어진 현탁액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 잠시 후 고체를 여과하여 제거하고 차가운 이소프로판올 (4 x 4 mL)로 세척했다. 감소된 압력 하에서 건조시켜 미색 결정으로서 표제 화합물을 수득했다 (1.30 g).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 14.06 (br s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.84 (br s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.16 (br s, 1H), 5.07 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.69 - 4.60 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.56 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.27 - 2.16 (m, 2H), 2.01 - 1.86 (m, 5H), 1.57 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.39 - 1.28 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 148 ± 2 °C.

실시예 14

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 숙신산 염 (화합물 14)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (31.3 mg, 0.100 mmol)을 ~50 °C에서 에탄올 (0.20 mL) 내 용해시켰다. 에탄올 (0.25 mL) 내 숙신산 (11.8 mg, 0.100 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물의 부피는 45 °C에서 감소된 압력 하에서 증발에 의해 감소되었다 (~0.14 mL의 에탄올을 증류 제거하였다). 결정화가 일어난 후 에탄올 (0.10 mL)을 부가했다. 얻어진 현탁액을 얼음 수조에서 냉각시켰고 잠시 후 여과하여 미색 결정으로서 표제 화합물을 수득했다 (16 mg, 33%).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.16 (br s, 3H), 8.33 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.91 (br s, 1H), 5.59 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.96 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.55 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.42 (s, 6H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 1.97 - 1.80 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.35 - 1.24 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 162 ± 2 °C.

실시예 15

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 옥살산 염 (화합물 15)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (31.3 mg, 0.100 mmol)을 ~50 °C에서 에탄올 (0.20 mL) 내에 용해시켰다. 에탄올 (0.25 mL) 내 옥살산 (4.5 mg, 0.050 mmol)을 부가했다. 반응 혼합물을 얼음 수조에서 냉각시켰고 잠시 후 미색 결정으로서 여과하여 표제 화합물을 수득했다 (27 mg).

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.39 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.98 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.60 - 4.52 (m, 1H), 2.83 (s, 3H), 2.55 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 1.97 - 1.82 (m, 5H), 1.55 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.36 - 1.25 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 134 ± 2 °C.

실시예 16

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 푸마르산 염 (화합물 16)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 (3.00 g, 9.57 mmol)을 에탄올 (6.0 mL) 내 용해시켰다. ~50 °C에서 에탄올 (12 mL) 내 용해된 푸마르산 (1.11 g, 9.57 mmol)을 천천히 부가했다. 결정화가 발생했다. 얻어진 현탁액을 실온으로 만들었고 잠시 후 고체를 여과하여 제거했고 에탄올 (2 x 0.5 mL)로 세척했다. 감소된 압력 하에서 건조시켜 미색 결정으로서 표제 화합물을 수득했다 (3.26 g, 79%).

1H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.34 (s, 1H), 6.63 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 4.97 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.60 - 4.51 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.55 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.26 - 2.14 (m, 2H), 1.97 - 1.80 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.35 - 1.24 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 111 ± 2 °C.

실시예 17

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 1,5- 나프탈렌디설폰산 염 (화합물 17)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 아세토니트릴 (11.8 mg, 0.037 mmol)을 ~50 °C에서 에틸 아세테이트 (1 mL) 내에 용해시켰다. H₂O (150 μL) 내 1,5-나프탈렌디설폰산 (테트라 수화물) (15.0 mg, 0.042 mmol)을 부가했다. 용액을 매우 천천히 마그넷 교반 장치에서 약 3 일 동안 교반했고, 그 결과 여과에 의해 미색 결정을 분리했다.

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.88 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 8.60 (s, 1H), 7.95 (dd, J = 7.1, 1.2 Hz, 2H), 7.54 (br s, 1H), 7.42 (dd, J = 8.5, 7.1 Hz, 2H), 6.97 (s, 1H), 5.06 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 3H), 2.95 (s, 3H), 2.51 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 2.28 - 2.06 (m, 2H), 1.95 - 1.72 (m, 5H), 1.56 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.38 - 1.18 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 110 ± 2 °C.

실시예 18

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 DL- 만델산 염 (화합물 18)

트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 아세토니트릴 (9.92 mg, 0.032 mmol) 및 DL-만델산 (5.3 mg, 0.035 mmol)을 ~50 °C에서 에틸 아세테이트 (1 mL) 내에 용해시켰다. 용액을 매우 천천히 마그넷 교반 장치에서 약 3 일 동안 교반했고, 그 결과 여과에 의해 미색 결정을 분리했다.

¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.33 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.45 - 7.37 (m, 2H), 7.37 - 7.31 (m, 2H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 6.48 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 5.92 (br s, 1H), 5.59 (br s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.96 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.47 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.55 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.27 - 2.11 (m, 2H), 1.97 - 1.75 (m, 5H), 1.54 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.38 - 1.21 (m, 2H).

M.p. (DSC 시작 온도) 153 ± 2 °C.

실시예 19

트랜스 -2-[4-[2-[(1 R )-1- 히드록시에틸 ]-6- (메틸아미노)이미다조[4,5- c ]피리딘 -1-일]시클로헥실]아세토니트릴 디옥산 용매화합물 (화합물 19)

0.4 mL의 1,4-디옥산:헵탄 (1:1) 혼합물 내 약 15 mg 의 트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴의 현탁액을 소형 마그넷 바를 갖춘 캡핑된 2.5 mL 바이알 내에 만들었다. 바이알을 마그넷 교반 장치에서 배치했고 실온에서 2 주 동안 대략 600 rpm에서 교반했다. 고체 물질을 여과에 의해 분리했고 녹는점 결정 이전에 건조시켰다.

M.p. (DSC 시작 온도) 77 ± 2 °C

JAK 키나아제 분석

사람 바큘로바이러스-발현 야누스 키나아제 (JAK) 1, 2, 3 및 티로신 키나아제 (TYK) 2를 Carna Biosciences, Inc (#08-144, -045, -046, -147 resp.)로부터 구입했다. 모든 4 개의 정제된 효소는 오로지 촉매 도메인만을 함유한다. JAK1 (aa 850-1154) 및 TYK2 (aa 871-1187)는 N-말단 융합된 GST-태그로, 및 JAK2 및 JAK3는 N-말단 융합된 His-태그로 발현된다. 합성 펩타이드의 인산화의 억제를 HTRF-기초 분석 (CisBio #62TK0PEC)에서 측정했다. 첫째로, 75 nL의 테스트 화합물 용액 (100% DMSO)을 Labcyte ECHO 550 액체 핸들러를 사용하여 백색 얕은 384-웰 플레이트 (NUNC #264706)에 부가했다. 그 후, 1 μL의 화합물 희석 완충제 (50 mM HEPES, 0.05% 소 혈청 알부민) 및 2 μL의 TK 용액 (키나아제 완충제 [HTRFKinEASE TK 키트, 1 mM DTT로부터의 1x 효소 완충제] 내 TK 기질-비오틴)을 부가했다. 이후, 5 μL 키나아제-ATP 혼합 (키나아제 완충제에서RT조된)을 웰에 부가했고 플레이트를 실온에서 20 (JAK2, 3 및 TYK2) 내지 40 (JAK1) 분 동안 배양했다. 모든 4 개의 키나아제에 대해, ATP에 대해 K_m에 해당하는 ATP의 농도를 사용했다. 완충제, 기질, 키나아제 및 ATP의 최종 농도는 다음이었다: JAK1: 50 mM Hepes 완충제 pH 7.0, 0.01% BSA, 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 7 μM ATP, 50 nM SEB, 1 μM TK 기질-비오틴 및 5 ng/웰 JAK1; JAK2: 50mM Hepes 완충제 pH 7.0, 0.01% BSA, 5 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 4 μM ATP, 1 μM TK 기질-비오틴 및 0.1 ng/웰 JAK2; JAK3: 50 mM Hepes 완충제 pH 7.0, 0.01% BSA, 5 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 2 μM ATP, 1 μM TK 기질-비오틴 및 0.3 ng/웰 JAK3; TYK2: 50 mM Hepes 완충제 pH 7.0, 0.01% BSA, 5 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 13 μM ATP, 50 nM SEB, 1 μM TK 기질-비오틴 및 0.8 ng/웰 TYK2. 그 후, 4 μL 검출 혼합 (최종 농도: 50 mM Hepes 완충제 pH 7.0, 0.01% BSA, 0.8 M KF, 20 mM EDTA, 42 nM 스트렙트아비딘-XL665 및 1:400 STK Ab 크립테이트)을 부가하는 것에 의해 키나아제 반응을 정지했고 플레이트를 밤새 암소에서 배양했다. PerkinElmer Envision 판독기를 사용하여 다음의 필터를 사용하여 HTRF 신호를 정량화했다; 320 nm 여기(excitation) 필터, 665 nm 방출 필터 및 615 nm 2차 방출 필터. 비율 ((665/615) x 10⁴)을 각각의 웰에 대해 계산했다.

STAT6 분석

550 ng/mL의 CD40 리간드 (Invitrogen #PHP0025)를 함유하는; 분석 배지 (Opti-MEM (Invitrogen #11058-021) + 0.5% 열 불활성화된 소 태아 혈청 (Invitrogen #10082-147) + 1% 비-필수 아미노산 (Invitrogen #11140-050) + 1% 소듐 피루베이트 (Invitrogen #11360-070) + 1% 페니실린/스트렙토마이신 (Invitrogen #15140-122)) 내 투명한 바닥을 갖는 384-웰 블랙 뷰-플레이트 (PerkinElmer #6007460)에 30-40,000 세포/웰의 밀도로 25 μL의 STAT6 bla-RA1 (Invitrogen #K1243) 세포 현탁액을 접종했다. 세포 플레이트를 가습 37 °C 공기/CO₂ (95%/5%) 배양기에서 밤새 배양했다. 다음날, 테스트 화합물 및 참조 화합물의 125 nL의 용액을 Labcyte Echo 550 액체 핸들러를 사용하여 세포 플레이트에 전달했다. 플레이트를 이후 가습 37 °C 공기/CO₂ (95%/5%) 배양기에서 1 시간 동안 배양했다. 이후 재조합 사람 인터류킨 4 (Invitrogen #PHC0045)을 또한 Labcyte Echo 550를 사용하여 10 ng/mL의 최종 농도로 플레이트에 부가했다. 세포를 이후 가습 37 °C 공기/CO₂ (95%/5%) 배양기에서 4½-5 시간 동안 배양했다. 8 μL의 LiveBLAzer 기질 혼합물 (Invitrogen #K1095)을 이후 분석 플레이트에 부가했고, 이를 밤새 실온에서 배양했다. 형광성을 이후 측정했다: 여기(excitation): 405 nm; 방출: 460 nm (녹색 채널), 방출: 535 nm (청색 채널). 방출 채널 둘 모두에서 배경을 제거했고 각각의 웰에 대해 비율 460/535 nm을 계산했다.

STAT5 분석

분석 배지 (Opti-MEM (Invitrogen #11058-021) + 0.5% 열 불활성화된 소 태아 혈청 (Invitrogen #10082-147) + 1% 비-필수 아미노산 (Invitrogen #11140-050) + 1% 소듐 피루베이트 (Invitrogen #11360-070) + 1% 페니실린/스트렙토마이신 (Invitrogen #15140-122)) 내 투명한 바닥을 갖는 384-웰 블랙 뷰-플레이트 (PerkinElmer #6007460)에 약 10,000 세포/웰의 밀도로 25 μL의 STAT5 irf1-bla TF1 (Invitrogen #K1219) 세포 현탁액을 접종했다. 세포 플레이트를 가습 37 °C 공기/CO₂ (95%/5%) 배양기에서 밤새 배양했다. 다음날, 테스트 화합물 및 참조 화합물의 125 nL의 용액을 Labcyte Echo 550 액체 핸들러를 사용하여 세포 플레이트에 전달했다. 플레이트를 이후 가습 37 °C 공기/CO₂ (95%/5%) 배양기에서 1 시간 동안 배양했다. 이후 재조합 사람 에리스로포이에틴 (EPO) (Invitrogen #PHC9634)을 또한 Labcyte Echo 550를 사용하여 10 ng/mL의 최종 농도로 플레이트에 부가했다. 세포를 이후 가습 37 °C 공기/CO₂ (95%/5%) 배양기에서 4½-5 시간 동안 배양했다. 8 μL의 LiveBLAzer 기질 혼합물 (Invitrogen #K1095)을 이후 분석 플레이트에 부가했고, 이를 이후 밤새 실온에서 배양했다. 형광성을 이후 측정했다: 여기(excitation): 405 nm; 방출: 460 nm (녹색 채널), 방출: 535 nm (청색 채널). 방출 채널 둘 모두에서 배경을 제거했고 각각의 웰에 대해 비율 460/535 nm을 계산했다.

본 발명의 화합물을 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2 키나아제 분석 뿐만 아니라 STAT6 및 STAT5 분석에서 테스트했다. 결과가 표 1에서 개시되어있다

*WO2011086053의 실시예 641 및 실시예 644를 WO2011086053에 따라 제조했다

JAK2 또는 JAK3에 대한 JAK1의 선택성을 각각의 EC₅₀의 JAK2:JAK1 또는 JAK3:JAK1 비율로서 계산한다. 유사한 계산을 STAT5에 대한 STAT6의 선택성에 대해 수행한다. 표 1로부터 알 수 있는 것과 같이 본 발명의 화합물은 JAK2 및 JAK3에 대한 JAK1 억제의 높은 선택성; 및 STAT5 (JAK2 억제 반영)에 대한 STAT6 억제 (JAK1 억제 반영)의 높은 선택성을 보여준다.

키나아제 선택성

본 발명의 실시예 3 뿐만 아니라 WO2011086053의 실시예 644 및 641의 키나아제 선택성 프로파일을, JAK1 (ABL, CSK, EGFR, EPHA2, EPHB1, EPHB4, FGFR1, FLT3, IGF1R, ITK, JAK1, JAK3, KDR, LCK, MET, PDGFRα, PDGFRβ, PYK2, SRC, TIE2, TRKA 및 TYRO3)를 포함하는 23 티로신 키나아제, 뿐만 아니라 68 세린 및 트레오닌 키나아제 (LCK, MET, AKT1, AMPKα1/β1/γ1, AurA, AurB, AurC, BRSK2 ([ATP] = Km 값), CaMK1α([ATP] = Km 값), CaMK2α([ATP] = Km 값), CaMK4, CDC2/CycB1, CDC7/ASK, CDK2/CycA2, CDK2/CyE1, CDK3/CyE1 ([ATP] = Km 값), CDK4/CyD3, CDK6/CyD3, CDK7/CycH/MAT1, CDK9/CycT1, CHK1, CK1ε, CK2α1/β, CK2α2/β, CLK1, CLK2, DAPK1, DYRK1B, Erk2, GSK3α, GSK3β, HGK, IKKβ, IRAK4 ([ATP] = Km 값), JNK2, LOK ([ATP] = Km 값), MAPKAP2, MLK1, MLK2, MNK2 ([ATP] = Km 값), MST1, MST2 ([ATP] = Km 값), NEK1, NEK2, NEK6, NEK7, NEK9, p38α, p70S6K, PAK1 ([ATP] = Km 값), PAK2, PAK5 ([ATP] = Km 값), PBK, PDK1, PIM1, PIM2, PKACα, PKCα, OKD2, PKN1 ([ATP] = Km 값), PLK1, PLK2 ([ATP] = Km 값), ROCK1, RSK1, SGK, skMLCK ([ATP] = Km 값) 및 TSSK1)로 이루어진 패널을 이용하여 CARNA Biosciences Inc.에서 평가했다. 평가를 1 mM의 농도 ATP에서 일반적으로 수행했다, 하지만 특정 키나아제에 대해 해당하는 Km-값에 근접한 ATP 농도를 사용했다 (이것은 각각의 관련있는 키나아제에서 괄호 내에 명시되어있다). 억제의 백분율을 대략 1000 배 JAK1 EC₅₀의 억제제 농도에서 측정했다. 결과는 표 2에서 요약된다:

표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 3는 키나아제의 큰 패널을 향한 선택성의 매우 높은 수치를 드러내었고; 즉 JAK1를 제외한 테스트된 키나아제는 50% 이상 억제되지 않았다.

WO2011086053의 실시예 644 및 641는 JAK1 외에 9 개의 다른 키나아제를 50% 또는 그 이상 억제했다.

비표적 키나아제의 억제는 부작용의 위험을 증가시키고, 즉 높은 키나아제 선택성은 부작용의 위험을 감소시킬 수 있다.

CYP 억제 및 CYP 유도

가역 CYP 억제, 시간 의존성 CYP 억제 (TDI) 및 CYP 유도를 당국 지침에 따른 Cyprotex PLC로 테스트했다.

가역 CYP 억제에 대해 IC50을 실시예 3에 대해 50 μM의 기질 농도까지 및 WO2011086053의 실시예 644 및 641에 대해 25 μM까지 측정했다.

가역 CYP 억제 결과는 표 3에서 요약된다.

ND = 결정되지 않음

표 3로부터 알 수 있는 것과 같이, 실시예 3는 50 μM까지의 기질 농도에서 측정될 때 CYP 억제가 없는 것을 드러낸다.

WO2011086053의 실시예 644 및 641는 약한 CYP3A4 억제를 명시한다.

시간 의존성 CYP 억제는 실시예 3에 대해 명시되지 않았다.

CYP3A4 억제는 요망되지 않는 약물-약물 상호작용을 명시할 수 있다. CYP 억제는 혈장 수치에 영향을 미치고 동시 투여된 약물의 노출을 증가시키고 잠재적으로 불리한 약물 반응 또는 독성으로 이어질 수 있다.

CYP1A2, CYP2B6 및 CYP3A4 유전자 발현의 유도는 각각, 아릴 탄화수소 수용체 (AhR), 프레그난 X 수용체 (PXR) 및 항구적 안드로스탄 수용체 (CAR)의 활성화를 위한, 민감한 대표적인 종점의 역할을 할 수 있다. 이들 핵 수용체의 유도를, 관련있는 농도에서, 각각 AhR, CAR, 및 PXR에 대한 mRNA 인코딩의 증가의 측정에 의해 평가했다.

>2-배 변화는 CYP 유도를 명시한다.

세 가장 높은 배양 농도로부터의 결과는 표 4에서 요약된다.

표 4: CYP 유도 내 비히클과 비교하여 평균 배수 변화

표 4로부터 알 수 있는 것과 같이, 실시예 3는 적어도 50 μM의 농도까지 CYP3A4 유도 또는 적어도 10 μM의 농도까지 CYP1A2 및 CYP2B6 유도를 초래하지 않는다

WO2011086053의 실시예 644는 10 μM의 농도에서 CYP3A4 유도 및 10 μM의 농도에서 CYP2B6 유도를 초래하고, WO2011086053의 실시예 641는 20 μM 이상의 농도에서 CYP3A4 유도를 초래한다.

CYP3A4 유도는 요망되지 않는 약물-약물 상호작용을 명시할 수 있다. CYP 유도는 동시 투여된 약물의 노출을 감소시켜 효능의 감소를 야기할 수 있다. 게다가, CYP 유도는 또한 반응성 대사 산물 형성 증가에 의해 독성으로 이어질 수 있다.

결정질 물질의 수성 가용성

상이한 pH에서 WO2011086053의 결정질 실시예 3, 실시예 644 및 641의 수성 가용성이 평가되었다. mg/mL의 가용성은 표 5에서 요약된다:

일반적으로, 수성 가용성은 경구 제제의 개발에 영향을 미치는 주요 양상 중 하나이고 경구 생체 이용률은 약물의 가용성에 고도로 의존한다. 높은 가용성은 위장관 내 화합물의 빠른 용해를 유도할 것이고 도달된 고농도는 장 상피 전반에 걸쳐 흡수를 유도할 것이다. 　이런 이유로, 높은 가용성은 관련있는 투여량에서 높은 경구 생체 이용률 및 요망되는 전신성 노출을 달성할 가능성을 현저하게 증가시킬 수 있다.

Claims

일반식 (I)에 따른 화합물

여기서
A는 C₆-시클로알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₆-시클로알킬은 임의로 하나 또는 그 이상의 중수소로 치환되고;
R₁은 C₁-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₁-알킬은 임의로 하나 또는 그 이상의 중수소로 치환되고;
R₂은 C₁-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₁-알킬은 R₆ 로부터 선택된 치환기로 치환되고; 및 여기서 상기 C₁-알킬은 임의로 하나 또는 그 이상의 중수소로 치환되고;
R₃은 C₂-알킬을 나타내고, 여기서 상기 C₂-알킬은 R₇ 로부터 선택된 치환기로 치환되고 여기서 상기 C₂-알킬은 임의로 하나 또는 그 이상의 중수소로 치환되고;
R₄은 수소 또는 중수소를 나타내고;
R₅은 수소 또는 중수소를 나타내고;
R₆은 시아노를 나타내고;
R₇은 히드록실을 나타내고;
또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물로부터 선택된 화합물.
제1항에 있어서 여기서 화학식 (I)은 일반식 (Ia)이고

여기서 R₁-R₂, R₄-R₇은 제1항과 같이 정의되고 여기서 Ra, Rb, Rc 및 Rd은 각각 독립적으로 수소 및 중수소로부터 선택되는 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서 여기서 화학식 (I)은 일반식 (Ib) 이고

여기서 R₁-R₂, R₄-R₇, Ra, Rb, Rc 및 Rd은 제1항 또는 제2항과 같이 정의되는 화합물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
트랜스-2-[4-[2-[1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
트랜스-2-[4-[2-[(1S)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(트리중수소메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
트랜스-2-[4-[2-[1,2,2,2-테트라중수소-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
시스-2-[4-[2-[1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 및
시스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 용매화합물로부터 선택된 화합물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 여기서 상기 화합물은
트랜스-2-[4-[2-[(1R)-1-히드록시에틸]-6-(메틸아미노)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염인 화합물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서 약제로서 사용하기 위한 화합물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서 면역계 질환 가령 자가면역 질환의, 또는 면역계의 탈조절에 관련된 질환의 예방 및/또는 치료에 사용하기 위한 화합물.
제7항에 있어서 아토피 피부염의 예방 및/또는 치료에서 사용하기 위한 화합물.
약제학적으로 허용 가능한 비히클 또는 부형제 또는 약제학적으로 허용 가능한 담체(들)와 함께 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
제9항에 있어서 하나 또는 그 이상의 다른 치료적으로 활성 화합물(들)과 함께인 약제학적 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서 JAK1 키나아제 활성의 억제에 반응성인 질환의 치료에 사용하기 위한 화합물.
면역계의 질환, 가령 자가면역 질환을 예방하는, 치료하는 또는 개선하는 방법, 상기 방법은 상기 질환 중 적어도 하나를 겪는 사람에 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 하나 또는 그 이상의 화합물의 효과적인 양을 상기 임의로 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 하나 또는 그 이상의 부형제와 함께, 임의로 다른 치료적으로 활성 화합물과의 조합으로 투여하는 것을 포함함.
다음으로부터 선택된 화합물
2-[트랜스-4-[(5-아미노-2-클로로피리딘-4-일)아미노]시클로헥실]아세토니트릴
또는 그의 염.
다음으로부터 선택된 화합물
2-[트랜스-4-[6-클로로-2-(1-히드록시에틸)-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
2-[트랜스-4-[6-클로로-2-[(1R)-1-히드록시에틸]-1H-이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴 및
트랜스-2-[4-[6-클로로-2-(1,2,2,2-테트라중수소-1-히드록시-에틸)이미다조[4,5-c]피리딘-1-일]시클로헥실]아세토니트릴,
또는 그의 염.