KR20180095051A - 코르티스타틴 유사체 및 그의 용도 - Google Patents

Abstract

그를 필요로 하는 인간을 포함하는 숙주에게 생체내 투여를 위한 유리한 특성을 갖는 특정한 코르티스타틴 유도체가 제공된다. 이들 신규 종은 유리한 약동학, 저 독성, 낮은 내지 중간의 hERG 활성 및/또는 이들을 코르티스타틴의 부류 중에서 인간 투여를 위한 우수한 후보로서 두드러지게 하는 다른 약리학적 특성을 갖는다.

Description

코르티스타틴 유사체 및 그의 용도

관련 출원의 선언

본 출원은 2015년 12월 23일에 출원된 미국 특허 가출원 번호 62/387,246 및 2016년 2월 19일에 출원된 미국 특허 가출원 번호 62/297,494의 이익을 청구한다. 이들 가출원의 전문은 모든 목적을 위해 본원에 참조로 포함된다.

본 발명은 CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애의 치료를 위한, 인간에서 생체내 투여로 수정가능한 약리학적 특성을 갖는 코르티스타틴 유사체를 제공한다.

코르티스타틴 패밀리는 해양 해면 코르티시움 심플렉스(Corticium simplex)로부터 2006년에 단리된 항혈관신생 스테로이드성 알칼로이드의 군을 나타낸다. 예를 들어, 문헌 [AoKi, et al., JACS (2006) 128: 3148-9]을 참조한다. 패밀리는 초기에 4종의 화합물: 코르티스타틴 A, 코르티스타틴 B, 코르티스타틴 C 및 코르티스타틴 D로 분류되었고, 이들은 D 고리의 치환이 상이하다. 초기 연구는 모든 4종의 화합물이 인간 제대 정맥 내피 세포 (HUVEC) 증식의 강력한 억제제이며, 코르티스타틴 A가 가장 강한 항-증식성 활성 (IC₅₀ = 1.8 nM)을 나타낸다는 것을 보여주었다. 아오키의 첫번째 작업으로부터 현재까지, 이들 천연 산물은, 특히 전체 합성 및 신규 합성 생물학적 활성 유사체의 개발에서 연구의 대상이 되어 왔다.

문헌 [Shair et al., Nature (2015), 526: 273-276, "Mediator Kinase Inhibition Further Activates Super-Enhancer-Associated Genes in AML"]은 코르티스타틴 A에 의한 CDK8 및 CDK19의 억제가 급성 골수성 백혈병 (AML)의 수퍼-인핸서-연관 유전자를 활성화하는 것으로 기재한다. 수퍼-인핸서-연관 유전자의 활성화는 CEBPA, IRF8, IRF1 및 ETV6을 포함하여 여러 종양 억제 및 계통-제어 전사 인자의 상향조절을 유발한다. 게다가, 백혈병 세포는 수퍼-인핸서-연관 유전자의 투여량에 감수성인 것으로 제시된 바 있다. 함께 취해진 이들 관찰은 CDK8 및 CDK19가 AML, 더 나아가 유사한 메카니즘을 통해 작용하는 다른 비정상적 세포 증식의 치료에 대한 약리학적 관련 표적임을 나타낸다.

코르티스타틴 A (CA)는 현재 시클린-의존성 키나제 8 (CDK8) 및 시클린-의존성 키나제 19 (CDK19)에 대해 자연 발생 코르티스타틴 패밀리 중 가장 선택적인 구성원이며, 상기 2종의 키나제는 많은 RNA 폴리머라제 II-의존성 유전자의 조절에 수반되는 매개자 복합체를 공동활성화한다. 코르티스타틴 A를 사용하여 CDK8 및 CDK19를 억제함으로써 급성 골수성 백혈병 (AML) 성장이 감소될 수 있는 것으로 제시된 바 있다.

표제 "Synthesis of (+)-Cortistatin A"의 문헌 [Baran, et al., JACS (2008), 130: 7241-7243]은 목적하는 탄소 원자의 70% 및 상응하는 코르티스타틴 A의 거울상이성질체적으로 순수한 키랄성을 이미 함유하는 프레드니손으로부터 출발하는 코르티스타틴 A에 대한 반합성 경로를 기재한다. 합성 공정은 9-(10,19)-아베오-안드로스탄 골격을 구성하는 이소힙식 (산화-상태 보존) 캐스케이드 뿐만 아니라 이전에 보고되지 않은 알콜-유도의 디브로민화 반응을 사용하여 대략 3% 전체 수율로 코르티스타틴 A를 수득하였다. 이 합성은, 고리 A에서의 3-치환된 아미노 유도체와 함께, 표제 "Synthesis of (+) Cortistatin A and Related Compounds"의 미국 특허 8,642,766에 기재된다. 레트로바이러스 복제의 억제를 위한 코르티스타틴의 적용은 표제 "Inhibitors of Retroviral Replication"의 WO 2012/096934에 기재된다.

표제 "Total Synthesis of (+)-Cortistatin A"의 문헌 [Nicolaou, et al., Angew. Chem. Int. Ed. (2008), 47: 7310-7313]에 따른 간행물은 거울상이성질체적으로 풍부한 비시클릭 에논 (하기 나타냄)으로부터 출발하여 소노가시라 커플링 뿐만 아니라 스즈키-미야우라 커플링을 사용하는 코르티스타틴 A로의 전체 합성 경로를 기재한다.

표제 "Enantioselective Synthesis of (+)-Cortistatin A, a Potent and Selective Inhibitor of Endothelial Cell Proliferation"의 문헌 [Shair, et al., JACS (2008), 130: 16864-16866]의 간행물은 하조스-패리시 (Hajos-Parrish) 케톤으로부터 2 단계로 유래된 상이한 비시클릭 에논 (하기 나타냄)으로부터 출발하는 코르티스타틴 A의 거울상이성질체선택적 합성을 기재한다. 합성은 트랜스환상 에테르화 (transannular etherification)에 의해 커플링되는 고도의 부분입체선택적 아자-프린스 (aza-Prins) 고리화를 이용하였다. 또한, 합성은 A, B, C 및 D 고리가 코르티스타틴 A의 항혈관신생 활성에 대한 그의 기여에 대해 조사될 수 있는 방법으로 설계되었다.

표제 "Synthesis of Cortistatins A, J, K, and L"의 문헌 [Myers et al., Nature Chemistry (2010), 2: 886-892]의 간행물은 코르티스타틴 패밀리 중 A, J, K, 및 L 구성원의 합성을 기재한다. 합성은 소수의 단계 내에 코르티스타틴 A, J, K 또는 L 중 어느 하나로 유도체화될 수 있는 중간체 (하기 나타냄)를 특징으로 한다. 중간체는 9 단계로 합성되고, 7-이소퀴놀릴 유기금속 중간체의 첨가에 이어서 탈보호를 포함하는 3 또는 4 단계 순서에서 최종 코르티스타틴으로 전환된다.

플라이어 (Flyer) 등에 의해 출원되고 프레지던트 및 펠로우즈 오브 하바드 칼리지 (President and Fellows of Harvard College)에 양도된 발명의 명칭 "Cortistatin Analogs and Synthesis Thereof"의 US 특허 9,127,019는, 화학식 I을 갖는 코르티스타틴 A, J, K 및 L의 유사체 및 그의 염, 및 그의 합성을 기재하고 있으며, 여기서 R₁, R₂, R₃, R₄, n, 및 m은 그에 기재된 바와 같다.

새어 (Shair) 등에 의해 출원되고 프레지던트 및 펠로우즈 오브 하바드 칼리지에 양도된 발명의 명칭 "Cortistatin Analogs and Syntheses and Uses Thereof"의 WO 2015/100420은 코르티스타틴의 추가의 유사체 및 하기 나타낸 화학식 A 및 화학식 E를 포함하는 화학식 I의 다양한 하위 화학식의 개선된 모듈 합성을 기재하며, 사용된 가변기는 그에 정의된다.

새어 등에 의해 출원되고 프레지던트 및 펠로우즈 오브 하바드 칼리지에 양도된 발명의 명칭 "Targeted Selection of Patients for Treatment with Cortistatin Derivatives"의 WO 2016/182904는 코르티스타틴 유사체에 의한 치료에 대한 환자의 선택을 기재한다. 새어 등에 의해 출원되고 프레지던트 및 펠로우즈 오브 하바드 칼리지에 양도된 발명의 명칭 "Cortistatin Analogues, Syntheses, and Uses Thereof"의 WO 2016/182932는 추가의 코르티스타틴 유사체를 기재한다.

코르티스타틴 A 및 코르티스타틴 A의 유사체의 다른 합성적 및 생물학적 상세설명은 표제 "Formal Total Synthesis of (+)-Cortistatins A and J"의 문헌 [Chiu et al., Chemistry (2015), 21: 14287-14291]; 표제 "Didehydro-Cortistatin A Inhibits HIV-1 Tat Mediated Neuroinflammation and Prevents Potentiation of Cocaine Reward in Tat Transgenic Mice"의 문헌 [Valente et al., Current HIV Research (2015), 13: 64-79]; 표제 "Synthetic Studies of Cortistatin A Analog from the CD-ring Fragment of Vitamin D2"의 문헌 [Motomasa et al., Chemical & Pharma. Bulletin (2013), 61: 1024-1029]; 표제 "An Analog of the Natural Steroidal Alkaloid Cortistatin A Potently Suppress Tat-dependent HIV Transcription"의 문헌 [Valente et al., Cell Host & Microbe (2012), 12: 97-108]; 표제 "Creation of Readily Accessible and Orally Active Analog of Cortistatin A"의 문헌 [Motomasa et al., ACS Med. Chem. Lett. (2012), 3: 673-677]; 표제 "Synthetic Studies Toward (+)-Cortistatin A"의 문헌 [Danishefsky et al., Tetrahedron (2011) 67: 10249-10260]; 표제 "Synthetic Study of Carbocyclic Core of Cortistatin A, an Anti-angiogenic Steroidal Alkaloid from Marine Sponge"의 문헌 [Motomasa et al., Heterocycles (2011), 83: 1535-1552]; 표제 "Stereoselective Synthesis of Core Structure of Cortistatin A"의 문헌 [Motomasa et al., Org. Lett. (2011), 13: 3514-3517]; 표제 "Scalable Synthesis of Cortistatin A and Related Structures"의 문헌 [Baran et al., JACS (2011), 133: 8014-8027]; 표제 "Total Synthesis of Cortistatins A and J"의 문헌 [Hirama et al., JOC (2011), 76: 2408-2425]; 표제 "Concise Synthesis of the Oxapentacyclic Core of Cortistatin A"의 문헌 [Zhai et al., Org. Lett. (2010), 22: 5135-5137]; 표제 "Efforts Toward Rapid Construction of the Cortistatin A Carbocyclic Core via Enyne-ene Metathesis"의 문헌 [Stoltz et al., Org. Biomol. Chem. (2010), 13: 2915-2917]; 표제 "Formal Total Synthesis of (+-)-Cortistatin A"의 문헌 [Sarpong et al., Tetrahedron (2010), 66: 4696-4700]; 표제 "Cortistatin A is a High-Affinity Ligand of Protein Kinases ROCK, CDK8, and CDK11"의 문헌 [Nicolaou et al., Angewandte Chemie (2009), 48: 8952-8957]에 기재되어 있다.

표제 "Cyclin C Expression is Involved in the Pathogenesis of Alzheimer's Disease"의 문헌 [Hessel et al., Neurobiology of Aging (2003), 24: 427-435]의 간행물은 시클린 C가 알츠하이머병 (AD) 환자의 뉴런 및 성상세포에서 보다 높게 발현됨을 제시하였고, 따라서 CDK8의 특정한 소분자 억제는 또한 퇴행성 장애 예컨대 AD를 치료하는데 유익하다고 할 수 있다.

파이어스타인 (Firestein) 등에 의해 출원된 발명의 명칭 "Methods of Using CDK8 Antagonists"의 미국 출원 공개 US2013/0217014 및 PCT 출원 WO2013/122609는, 다양한 암에 대한 일반적인 CDK8 길항제의 사용을 기재하고 있다. 그에 기재된 바와 같이, 매개자 복합체 CDK8의 부분은 문헌 [Taatjes, D. J., Trends Biochem Sci 35, 315-322 (2010); 및 Conaway, R. C. and Conaway, J. W., Curr Opin Genet Dev 21, 225-230 (2011)]에 기재된 바와 같이 전사에서의 보존된 기능을 갖는다. CDK8은 또한 결장암 (Firestein R. et al., Nature 455:547-51 (2008); Morris E. J. et al., Nature 455:552-6 (2008); Starr T. K. et al., Science 323:1747-50 (2009)), 및 흑색종 (Kapoor A. et al., Nature 468:1105-9 (2010))) 둘 다에서 종양유전자로서 보고된 바 있다. 인간 결장 종양의 하위세트에서 상향 조절되고 증폭된 CDK8은 불멸화 세포를 변형시키는 것으로 공지되어 있고, 시험관내 결장암 증식에 대해 요구된다. 유사하게, CDK8은 또한 흑색종에서 과다발현되며 증식에 필수적인 것으로 밝혀진 바 있다. 문헌 [Kapoor, A. et al., Nature 468, 1105-1109 (2010)]. CDK8은 ES 다능성 및 암 둘 다의 주요 조절자인 여러 신호전달 경로를 조절하는 것으로 나타난 바 있다. CDK8은 β-카테닌 표적 유전자의 발현을 촉진하거나 (Firestein, R. et al., Nature 455, 547-551 (2008)), 또는 β-카테닌 전사 활성의 강력한 억제제인 E2F1을 억제함으로써 Wnt 경로를 활성화시킨다. 문헌 [Morris, E. J. et al., Nature 455, 552-556 (2008)]. CDK8은 Notch 세포내 도메인을 인산화하여, Notch 인핸서 복합체를 표적 유전자에서 활성화함으로써 Notch 표적 유전자 발현을 촉진한다. 문헌 [Fryer C. J. et al., Mol Cell 16:509-20 (2004)].

코르티스타틴 A의 독특한 생물학적 프로파일 및 코어 구조에 대한 다수의 연구에도 불구하고, 이는 그의 높은 독성 및/또는 약동학적 문제로 인해 잠재적 약물로서 적합하지 않다. 실제로, 코르티스타틴 A 및 특정한 유사체의 강력한 나노몰 수준의 CDK8 및 CDK19 억제 활성에도 불구하고, 어느 것도 암의 치료 또는 임의의 다른 적응증에 대한 임상 시험으로 진전된 바 없었다. 예를 들어, 코르티스타틴 A가 생체내 CDK8 키나제 활성을 완전히 억제하는 용량으로 1일-1회 마우스에게 투여될 때, 실험은 동물에서 허용되지 않는 체중 감소로 인해 종결되어야 했다. 게다가, 특정한 코르티스타틴 유도체는 동물에서 허용되지 않는 hERG 활성을 발생시킨다. 칼륨 이온 채널의 부분인 hERG 단백질은 심장 박동 활성을 조정하는 심장의 전기 활성에 기여한다. 전기 활성이 손상되는 경우, 긴 QT 연장으로 언급되는 위험한 상태를 초래할 수 있다.

WO 2015/100420 (제91면의 제224 단락)에서 종으로서 기재된 화합물 중 1개는 화합물 A ((3S,3aR,9R,10aR,12aS,12bR)-3-(이소퀴놀린-7-일)-3a-메틸-1,2,3,3a,4,7,8,9,10,11,12,12b-도데카히드로-10a,12a-에폭시벤조[4,5]시클로헵타[1,2-e]인덴-9-올)이다.

화합물 A는, 낮은 hERG 활성 (여기서 낮은 hERG 활성은 IC₅₀ > 1 μM로 정의됨), 오프-타겟 효소 및 수용체에 대항한 높은 선택성 및 낮은 독성의 조합을 나타내기 때문에, 코르티스타틴 A 유사체 중에 매우 특별한 것으로 발견된 바 있다 (유의한 체중 감소 없음, 예를 들어, 7일 투여에 걸쳐 <15%의 체중 감소). 낮은 독성은 약물의 보다 높은 내약성을 제공하며, 이는 보다 높은 수준으로 투여되고, 따라서 보다 우수한 효능이 되도록 할 수 있다.

이들 효소에 의해 매개된 종양, 암, 및 다른 장애의 치료에서 CDK8 및/또는 CDK19 억제의 치료적 중요성을 고려하면, 본 발명의 목적은 CDK8 및/또는 CDK19를 선택적으로 억제하고 유리한 의약 특성을 갖는 화합물을 확인하는 것이다.

따라서, 본 발명의 목적은 인간 투여 및 요법에 유리하며, 종양, 암, 비정상적 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애, 자가면역 장애 및 유사한 경로를 통해 작용하는 다른 장애를 비롯한 CDK8 및 CDK19에 의해 매개된 장애의 치료를 위한 신규 화합물, 방법 및 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 그를 필요로 하는 인간을 비롯한 숙주에게의 생체내 투여에 유리한 특성을 갖는 특정한 코르티스타틴 유도체를 제공한다. 특히, 이들 신규 종은 인간 투여를 위한 우수한 후보로서 코르티스타틴의 부류 중에서 자신을 두드러지게 하는 유리한 약동학, 낮은 독성 및/또는 다른 약리학적 특성을 갖는다. 화합물은 단지 낮은 내지 중간의 hERG 활성을 나타내는 것을 확인되었으며, 유의한 체중 감소 또는 허용되지 않는 독성 없이 치료 유효량으로 투여될 수 있다. 이들 화합물의 낮은 독성 때문에 보다 높은 Cmax 및/또는 AUC가, 높은 효능을 제공하는 범위에서 투여를 허용하는 방식으로 달성될 수 있다.

특히, 본 발명은 하기 제시된 화합물 B, 화합물 C 및 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물을 제공한다. 각각의 화합물은 A-고리의 3-위치에 독특한 치환기를 갖는다. 화합물 B는 (R)-피롤리딘-3-아민을 갖고, 화합물 C는 아제티딘-3-아민을 갖고, 화합물 D는 (3S,4S)-피롤리딘-3,4-디올을 갖는다.

한 실시양태에서, 종양, 암, 비정상적 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애 또는 자가면역 장애를 포함하는 CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애의 치료를 필요로 하는 숙주에게 임의로 제약상 허용되는 담체 중 유효량의 화합물 B, C 또는 D 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 그의 제약상 허용되는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 장애를 치료하는 방법이 제공된다.

실시예 3, 4, 6, 7, 12, 13, 14는 화합물 B, C, 및 D와, 코르티스타틴 A, 화합물 E (A 고리의 3-위치에 비치환된 피롤리딘을 가짐) 및 화합물 F (A 고리의 3-위치에서 비치환된 아제티딘을 가짐)와의 비교 데이터를 제공한다. 이들 실시예에 나타낸 바와 같이, 화합물은 우수한 특성을 나타낸다. 예를 들어, 화합물 B가 단지 1개의 아민 기에 의해 및 화합물 D가 단지 2개의 히드록실 기에 의해 상이하더라도, 화합물 E는 허용되지 않는 서브-마이크로몰 hERG 활성을 갖는다. 실제로, hERG 활성은 때때로 염기성 기의 존재에 의해 증가되고, 따라서 아미노 치환된 화합물 B가 그의 비치환된 피롤리딘 유사체보다 더 적은 hERG 활성을 갖는 것을 발견한 것은 매우 놀라웠다.

또한 화합물 F는 허용되지 않는 서브-마이크로몰 hERG 활성을 갖는다.

WO 2015/100420은 히드록실이 코르티스타틴의 A-고리의 3-위치에 R- 또는 S- 배위일 수 있음을 나타내고 있지만, 실제로 놀랍게도 인간 투여를 위한 우수한 특성을 달성하기 위해서는 3-히드록실 기가 R-키랄성으로 존재해야만 한다는 것을 밝혀내었다.

A 및 D 고리에서의 화합물 A, B, C, 및 D의 구체적 유사체는 본 발명의 일부로서 또한 제공된다. 한 실시양태에서, 종양, 암, 비정상적 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애 또는 자가면역 장애를 비롯한 CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애의 치료를 필요로 하는 숙주에게 임의로 제약상 허용되는 담체 중 유효량의 하기 정의된 바와 같은 화합물 A, B, C 또는 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 장애를 치료하는 방법이 제공된다.

또 다른 실시양태에서, 화합물 A, B, C 또는 D 또는 그의 유사체의 중수소화 유도체가 제공된다. 중수소는 화합물 내의 1개 이상의 수소를 대체할 수 있다. 한 실시양태에서, 중수소는 A 고리의 3-위치 상의 치환기 내 1개 이상의 위치에서 수소를 치환한다. 예를 들어, 화합물 A에서, 히드록실 내의 수소가 중수소로 대체될 수 있다. 예를 들어, 화합물 B에서, (R)-피롤리딘-3-아민 내의 수소가 중수소로 대체될 수 있다. 예를 들어, 화합물 C에서, 아제티딘-3-아민 히드록실 내의 수소가 중수소로 대체될 수 있다. 예를 들어, 화합물 D에서, (3S,4S)-피롤리딘-3,4-디올 내의 수소가 중수소로 대체될 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 중수소는 A 고리 내 1개 이상의 위치에서 수소를 치환한다. 또 다른 실시양태에서, 중수소는 B 고리 내 1개 이상의 위치에서 수소를 치환한다. 또 다른 실시양태에서, 중수소는 C 고리 내 1개 이상의 위치에서 수소를 치환한다. 또 다른 실시양태에서, 중수소는 C와 D 고리 사이의 가교 탄소에서의 메틸 기 내 수소를 치환한다. 또 다른 실시양태에서, 중수소는 D 고리 내 1개 이상의 위치에서 수소를 치환한다. 또 다른 실시양태에서, 중수소는 이소퀴놀린 고리 내 1개 이상의 위치에서 수소를 치환한다.

본원에 기재된 바와 같은 활성 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 그의 제약상 허용되는 조성물은 또한 본원에 보다 상세하게 기재된 바와 같은 1종 이상의 추가의 제약 작용제와 조합하여 또는 교대로 투여하는데 유용하다.

따라서 본 발명은 적어도 하기 특징을 포함한다:

(i) 본원에 기재된 바와 같은 화합물 B, C, D, 및 화합물 A, B, C 및 D의 유사체;

(ii) CDK8 및/또는 CDK19와 연관된 의학적 장애 예컨대 종양, 암, 비정상적 세포 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애 또는 자가면역 장애를 치료하는데 사용하기 위한, 화합물 B, C 및 D, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물;

(iii) CDK8 및/또는 CDK19와 연관된 의학적 장애, 예컨대 종양, 암, 비정상적 세포 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애 또는 자가면역 장애를 치료하는데 사용하기 위한, A 고리가 부분 불포화이거나, 1개의 추가의 히드록실 기로 치환되거나, 2개의 추가의 히드록실 기로 치환되거나, 3개의 추가의 히드록실 기로 치환되거나, 또는 상기한 것의 입체화학적 배위의 임의의 조합인 화합물 A, B, C 및 D의 유사체, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물;

(iv) CDK8 및/또는 CDK19와 연관된 의학적 장애 예컨대 종양, 암, 비정상적 세포 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애 또는 자가면역 장애를 치료하기 위한, D 고리가 1개의 추가의 히드록실 기, 2개의 추가의 히드록실 기 또는 시클로프로판 융합된 고리로 치환된 화합물 A, B, C 및 D의 유사체, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물;

(v) 화합물 A, B, C 또는 D 또는 그의 유사체의 중수소화 유도체 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물;

(vi) 바이러스 감염 예컨대 HIV를 치료하기 위한, 화합물 B, C 및 D, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물;

(vii) 바이러스 감염 예컨대 HIV를 치료하는데 사용하기 위한, A 고리가 부분 불포화이거나, 1개의 추가의 히드록실 기로 치환되거나, 2개의 추가의 히드록실 기로 치환되거나, 3개의 추가의 히드록실 기로 치환되거나, 또는 상기한 것의 입체화학적 배위의 임의의 조합인 화합물 A, B, C 및 D의 유사체, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물;

(viii) 바이러스 감염 예컨대 HIV를 치료하기 위한, 고리 D가 1개의 추가의 히드록실 기, 2개의 추가의 히드록실 기 또는 시클로프로판 융합된 고리로 치환된 화합물 A, B, C 및 D의 유사체, 또는 그의 제약상 허용되는 염, 전구약물, N-옥시드 및/또는 제약상 허용되는 조성물;

(ix) 상기 기재된 화합물 또는 활성 화합물의 한 실시양태가 제조에 사용되는 것을 특징으로 하는, 치료 방법에 열거된 장애를 치료 또는 예방하기 위한 또는 일반적으로 CDK8 또는 CDK19에 의해 매개된 장애를 치료 또는 예방하기 위한 치료 용도로 의도된 의약을 제조하는 방법;

(x) 실질적으로 순수한 형태 (예를 들어, 적어도 90 또는 95%)의 본원에 기재된 바와 같은 상기 기재된 화합물 또는 그의 염;

(xi) 본원에 기재된 장애를 상이한 작용 메카니즘을 통해 치료하는 상기 기재된 화합물;

(xii) 본원에 기재된 화합물을 제조하는 방법.

도 1은 판랩 (Panlab) 검정 (실시예 3)에 의해 결정된 바와 같은 포스포디에스테라제 PDE3 활성의 퍼센트 억제 대 화합물 A (동그라미) 또는 실로스타미드 (네모)의 농도 (μM)의 그래프이다. x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 화합물 A의 IC₅₀ 값은 3.26 μM이고, 실로스타미드의 IC₅₀ 값은 0.059 μM이었다.
도 2는 판랩 검정 (실시예 3)에 의해 결정된 바와 같은 아데노신 수송체 활성의 퍼센트 억제 대 화합물 A (동그라미) 또는 니트로벤질티오이노신 (네모)의 농도 (μM)의 그래프이다. x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 화합물 A의 IC₅₀ 값은 3.61 μM이고, 니트로벤질티오이노신의 IC₅₀ 값은 0.35 nM이었다. 화합물 A의 K_i 값은 1.23 μM이고, 니트로벤질티오이노신의 K_i 값은 0.12 nM이었다. 화합물 A의 n_H 값은 1.30이고, 니트로벤질티오이노신의 n_H 값은 1.10이었다.
도 3은 판랩 검정 (실시예 3)에 의해 결정된 바와 같은 도파민 수송체 활성의 퍼센트 억제 대 화합물 A (동그라미) 또는 GBR-12909 (네모)의 농도 (μM)의 그래프이다. x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 화합물 A의 IC₅₀ 값은 4.90 μM이고, GBR-12909의 IC₅₀ 값은 0.61 nM이었다. 화합물 A의 K_i 값은 3.89 μM이고, GBR-12909의 K_i 값은 0.49 nM이었다. 화합물 A의 n_H 값은 0.97이고, GBR-12909의 n_H 값은 0.77이었다.
도 4는 판랩 검정 (실시예 3)에 의해 결정된 바와 같은 타키키닌 NK₁ 활성의 퍼센트 억제 대 화합물 A (동그라미) 또는 L-703-606 (네모)의 농도 (μM)의 그래프이다. x-축은 μM로 결정된 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 화합물 A의 IC₅₀ 값은 5.94 μM이고, L-703,606의 IC₅₀ 값은 3.60 nM이었다. 화합물 A의 K_i 값은 4.30 μM이고, L-703,606의 K_i 값은 2.60 nM이었다. 화합물 A의 n_H 값은 1.01이고, L-703,606의 n_H 값은 0.88이었다.
도 5는 판랩 검정 (실시예 3)에 의해 결정된 바와 같은 오피에이트μ (OP3, MOP) 활성의 퍼센트 억제 대 화합물 A (동그라미) 또는 DAMIGO (네모)의 농도 (μM)의 그래프이다. x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 화합물 A의 IC₅₀ 값은 5.73 μM이고, DAMGO의 IC₅₀ 값은 13.8 nM이었다. 화합물 A의 K_i 값은 2.33 μM이고, DAMGO의 K_i 값은 5.61 nM이었다. 화합물 A의 n_H 값은 0.90이고, DAMGO의 n_H 값은 0.75였다.
도 6은 hERG 이온 채널의 퍼센트 억제 대 화합물 B의 농도 (μM)의 그래프이며, 여기서 피팅된 곡선이 대략 11 μM의 IC₅₀을 나타낸다 (실시예 4). x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다.
도 7은 hERG 이온 채널의 퍼센트 억제 대 화합물 C의 농도 (μM)의 그래프이며, 여기서 피팅된 곡선이 대략 11 μM의 IC₅₀을 나타낸다 (실시예 4). x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다.
도 8은 hERG 이온 채널의 퍼센트 억제 대 화합물 D의 농도 (μM)의 퍼센트 억제의 그래프이며, 여기서 피팅된 곡선이 대략 6 μM의 IC₅₀을 나타낸다 (실시예 4). x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다.
도 9는 hERG 이온 채널의 퍼센트 억제 대 화합물 E의 농도 (μM)의 그래프이며, 여기서 피팅된 곡선이 대략 0.6 μM의 IC₅₀을 나타낸다 (실시예 4). x-축은 μM로 결정된 약물 농도이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다.
도 10은 터보솔 (TurboSol) 검정에서 광 산란 유닛 대 화합물 A 및 E의 농도 (μM)의 막대 그래프이다. 도 10은 hERG 검정에서 시험 농도에서의 화합물 A 및 E의 용해도를 근사화하며, 이는 측정된 광 산란 유닛 (LSU)에 의해 결정되었다. x-축은 μM로 결정된 화합물 E 및 화합물 A 농도이고 (60% TS 및 80% TS가 각각 60% 및 80% 투과도에 대한 표준임), y-축은 x1000으로 결정된 광 산란 유닛 (LSU)이다. 화합물 A의 30 μM 용액은 30 μM에서 시각적으로 혼탁하지만, 80% TS 표준보다 빛을 훨씬 덜 산란하였다. 화합물 A는 3 μM에서 유의한 LSU 측정치를 갖지 않았고, 단지 이 수준에서 hERG를 9% 억제하였다 (실시예 5).
도 11은 터보솔 검정에서 광 산란 유닛 대 화합물 B 및 C의 농도 (μM)의 막대 그래프이다. 도 11은 hERG 검정에서 시험 농도에서의 화합물 B 및 C의 용해도를 근사화하며, 이는 측정된 광 산란 유닛 (LSU)에 의해 결정되었다. x-축은 μM로 결정된 화합물 B 및 화합물 C 농도이고 (60% TS 및 80% TS는 각각 60% 및 80% 투과도를 위한 표준임), y-축은 x1000로 결정된 광 산란 유닛 (LSU)이다. 화합물 B 및 C의 30 μM 용액은 LSU 역치를 약간 초과하였다. 10μM 용액 (대략 IC₅₀ 농도)은 유의한 광 산란을 갖지 않았다 (실시예 5).
도 12는 터보솔 검정에서 광 산란 유닛 대 화합물 D의 농도 (μM)의 막대 그래프이다. 도 12는 hERG 검정에서 시험 농도에서의 화합물 D의 용해도를 근사화하며, 이는 측정된 광 산란 유닛 (LSU)에 의해 결정되었다. x-축은 μM로 결정된 화합물 D 농도이고 (60% TS 및 80% TS는 각각 60% 및 80% 투과도를 위한 표준임), y-축은 x1000으로 결정된 광 산란 유닛 (LSU)이다. 화합물 D의 30 μM 용액은 LSU 역치를 약간 초과하였다. 10μM 용액 (대략 IC₅₀ 농도)은 유의한 광 산란을 갖지 않았다 (실시예 5).
도 13은 화합물 A의 다양한 농도에 따른 투여 동안 및 투여 후의 마우스의 체중 (g) 대 시간 (일)의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 그램으로 결정된 체중이다. 도시된 바와 같이, 오직 10 mg/kg QD x7 용량에서 유의한 체중 감소가 관찰되었다. 마우스는 7일 동안 처리되었다. 체중 감소는 내약성의 한 측정법이다 (실시예 6).
도 14는 화합물 A의 다양한 농도에 따른 투여 동안 및 투여 후의 마우스의 정규화된 체중 (%) 대 시간 (일)의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 퍼센트로 결정된 정규화된 체중이다. 도시된 바와 같이, 오직 10 mg/kg QD x7 용량에서 유의한 체중 감소가 관찰되었다. 마우스는 7일 동안 처리되었다. 체중 감소는 내약성의 한 측정법이다 (실시예 6).
도 15는 화합물 D의 다양한 농도에 따른 투여 동안 및 투여 후의 마우스의 체중 (g) 대 시간 (일)의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 그램으로 결정된 체중이다. 도시된 바와 같이, 오직 10 mg/kg QD x7 용량에서 유의한 체중 감소가 관찰되었다. 마우스는 7일 동안 처리되었다. 체중 감소는 내약성의 한 측정법이다 (실시예 6).
도 16은 화합물 D의 다양한 농도에 따른 투여 동안 및 투여 후의 마우스의 정규화된 체중 (%) 대 시간 (일)의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 퍼센트로 결정된 정규화된 체중이다. 도시된 바와 같이, 오직 10 mg/kg QD x7 용량에서 유의한 체중 감소가 관찰되었다. 마우스는 7일 동안 처리되었다. 체중 감소는 내약성의 한 측정법이다 (실시예 6).
도 17은 화합물 F의 다양한 농도에 따른 투여 동안 및 투여 후의 마우스의 정규화된 체중 (%) 대 시간 (일)의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 퍼센트로 결정된 정규화된 체중이다. 마우스는 빠른 체중 감소 후에 휴약기를 받은 3 mg/kg 및 10 mg/kg 투여군을 제외하고 7일 동안 처리되었다. 체중 감소는 내약성의 한 측정법이다 (실시예 7).
도 18은 내약성을 결정하기 위하여 코르티스타틴 A의 다양한 농도에 따른 투여 동안 및 투여 후의 MV4;11 백혈병-보유 NSG 마우스의 정규화된 체중 (%) 대 시간 (일)의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 퍼센트로 결정된 정규화된 체중이다. 마우스는 다르게 나타낸 경우를 제외하고는 (빠른 체중 감소로 인한 1.25 mg/kg, 0.0625 mg/kg 및 0.31 mg/kg) 실험 전체 동안 처리되었다. 체중 감소는 내약성의 한 측정법이다 (실시예 7). 0.16 mg/kg IP qD의 용량이 효능 연구로 선택되었다.
도 19는 320종의 상이한 키나제에 대한 1 μM의 농도에서의 화합물 A의 퍼센트 억제 활성의 막대 그래프이다. x-축은 키나제이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 도시된 바와 같이, 단지 5종의 키나제만이 초기에 50% 초과의 억제를 가졌다 (실시예 8).
도 20은 320종의 상이한 키나제에 대한 1 μM의 농도에서의 화합물 B의 퍼센트 억제 활성의 막대 그래프이다. x-축은 키나제이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 도시된 바와 같이, 단지 CDK8/시클린 C만이 50% 초과의 억제를 가졌다 (실시예 8).
도 21은 320종의 상이한 키나제에 대한 1 μM의 농도에서의 화합물 C의 퍼센트 억제 활성의 막대 그래프이다. x-축은 키나제이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 도시된 바와 같이, 단지 CDK8/시클린 C만이 50% 초과의 억제를 가졌다 (실시예 8).
도 22는 320종의 상이한 키나제에 대한 1 μM의 농도에서의 화합물 D의 퍼센트 억제 활성의 막대 그래프이다. x-축은 키나제이고, y-축은 퍼센트로 결정된 억제이다. 도시된 바와 같이, 단지 CDK8/시클린 C만이 50% 초과의 억제를 가졌다 (실시예 8).
도 23은 CDK8의 억제를 위한 용량 의존성 반응을 보여주는 화합물 A 및 D의 웨스턴 블롯 연구이다. 감소된 염색은 표적의 억제로부터 유래한다 (실시예 9).
도 24는 CDK8의 억제를 위한 용량 의존성 반응을 보여주는 화합물 B 및 C의 웨스턴 블롯 연구이다. 감소된 염색은 표적의 억제로부터 유래한다 (실시예 9).
도 25는 화합물 A의 다양한 농도에서 CDK8 W105M 돌연변이 세포 (적색)/야생형 세포 (녹색)의 비 대 증식의 일수의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 야생형 세포에 대한 CDK8 W105M 세포의 비이다. 도 25는 야생형 AML 세포 (녹색 형광) 및 W105M CDK8 돌연변이 세포 (적색 형광)에 대항한 화합물 A의 항증식 효과를 시험함으로써 화합물 A에 대한 작용 메카니즘을 설명한다. 녹색에 대한 적색 형광의 증가는 돌연변이된 AML 세포가 야생형보다 더 빨리 증식한 것을 나타낸다. 이러한 관찰은 용량 의존성이었고, 이는 CDK8이 화합물 A의 세포 표적 및 화합물 A의 항백혈병 활성을 담당하는 표적임을 뒷받침한다 (실시예 11).
도 26은 화합물 B의 다양한 농도에서 CDK8 W105M 돌연변이 세포 (적색)/야생형 세포 (녹색)의 비 대 증식의 일수의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 야생형 세포에 대한 CDK8 W105M 세포의 비이다. 도 26은 야생형 AML 세포 (녹색 형광) 및 W105M CDK8 돌연변이 세포 (적색 형광)에 대항한 화합물 B의 항증식 효과를 시험함으로써 화합물 B에 대한 작용 메카니즘을 설명한다. 녹색에 대해 적색 형광의 증가는 돌연변이된 AML 세포가 야생형보다 더 빨리 증식한 것을 나타낸다. 이러한 관찰은 용량 의존성이었고, 이는 CDK8이 화합물 B의 세포 표적 및 화합물 B의 항백혈병 활성을 담당하는 표적임을 뒷받침하였다 (실시예 11).
도 27은 화합물 C의 다양한 농도에서 CDK8 W105M 돌연변이 세포 (적색)/야생형 세포 (녹색)의 비 대 증식의 일수의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 야생형 세포에 대한 CDK8 W105M 세포의 비이다. 도 27은 야생형 AML 세포 (녹색 형광) 및 W105M CDK8 돌연변이 세포 (적색 형광)에 대항한 화합물 C의 항증식 효과를 시험함으로써 화합물 C에 대한 작용 메카니즘을 설명한다. 녹색에 대해 적색 형광의 증가는 돌연변이된 AML 세포가 야생형보다 더 빨리 증식한 것을 나타낸다. 이러한 관찰은 용량 의존성이었고, 이는 CDK8이 화합물 C의 세포 표적 및 화합물 C의 항백혈병 활성을 담당하는 표적임을 지지하였다 (실시예 11).
도 28은 화합물 D의 다양한 농도에서 CDK8 W105M 돌연변이 세포 (적색)/야생형 세포 (녹색)의 비 대 증식의 일수의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 야생형 세포에 대한 CDK8 W105M 세포의 비이다. 도 28은 야생형 AML 세포 (녹색 형광) 및 W105M CDK8 돌연변이 세포 (적색 형광)에 대항한 화합물 D의 항증식 효과를 시험함으로써 화합물 D에 대한 작용 메카니즘을 설명한다. 녹색에 대해 적색 형광의 증가는 돌연변이된 AML 세포가 야생형보다 더 빨리 증식한 것을 나타낸다. 이러한 관찰은 용량 의존성이었고, 이는 CDK8이 화합물 A의 세포 표적 및 화합물 A의 항백혈병 활성을 담당하는 표적임을 뒷받침하였다 (실시예 11).
도 29는 화합물 A를 투여하는 다양한 용량 및 방법에서의 생물발광 (원래의 %) 대 치료 일수의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 원래의 퍼센트로 결정된 생물발광이다. 검정에서, 상승된 생물발광이 AML 세포 증식에서의 증가를 시사하고, 따라서 그래프는 화합물 A의 생체내 효능을 도시하며, 여기서 보다 낮은 생물발광은 보다 높은 효능을 나타낸다 (실시예 13).
도 30은 화합물 A, F, 및 코르티스타틴 A에 대한 log(2) 스케일 생물발광 (원래의 %) 대 치료 일수의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 원형의 퍼센트로 결정된 생물발광이다. 검정에서, 상승된 생물발광이 AML 세포 증식에서의 증가를 시사하고, 따라서 그래프는 화합물 A, F, 및 코르티스타틴 A의 생체내 효능을 도시하며, 여기서 보다 낮은 생물발광은 보다 높은 효능을 나타낸다. 3종의 화합물 모두는 그의 가장 높은 허용 용량으로 투여되었다 (실시예 13).
도 31은 화합물 B, C, D, F 및 코르티스타틴 A에 대한 log(2) 스케일 생물발광 (원래의 %) 대 치료 일수의 그래프이다. x-축은 일로 결정된 시간이고, y-축은 원래의 퍼센트로 결정된 생물발광이다. 검정에서, 상승된 생물발광이 AML 세포 증식에서의 증가를 시사하고, 따라서 그래프는 화합물 B, C, D, F 및 코르티스타틴 A의 생체내 효능을 도시하며, 여기서 보다 낮은 생물발광은 보다 높은 효능을 나타낸다. 5종의 화합물 모두는 그의 가장 높은 허용 용량으로 투여되었다 (실시예 13).

I. 용어

화합물은 표준 명명법을 사용하여 기재된다. 달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 과학 용어는 본 발명이 속하는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다.

단수 용어는 양의 제한을 나타내는 것이 아니라, 오히려 언급된 항목 중 적어도 하나의 존재를 나타낸다. 용어 "또는"은 "및/또는"을 의미한다. 값의 범위에 대한 언급은 본원에 달리 나타내지 않는 한, 단지 상기 범위 내에 해당하는 각각의 개별 값을 개별적으로 언급하기 위한 약칭 방법으로서 기능하도록 의도된 것이며, 각각의 개별 값은 본원에 개별적으로 열거된 것처럼 본 명세서에 포함된다. 모든 범위의 종점이 상기 범위 내에 포함되며, 독립적으로 조합가능하다. 본원에 기재된 모든 방법은 본원에 달리 나타내지 않거나 또는 달리 문맥에 의해 명백하게 모순되지 않는 한, 적합한 순서로 수행될 수 있다. 예 또는 예시적인 어휘 (예를 들어, "예컨대")의 사용은 단지 본 발명을 더 잘 예시하도록 의도된 것이며, 달리 청구되지 않는 한, 본 발명의 범주에 대한 제한을 부여하지는 않는다. 달리 언급이 없는 한, 본원에서 사용되는 전문적이고 과학적인 용어들은 본 발명이 속하는 해당 분야의 숙련자들이 통상적으로 알고 있는 것과 동일한 의미를 갖는다.

본 발명은 동위원소의 천연 존재비 초과, 즉 풍부한 양의 원자의 적어도 1개의 목적하는 동위원소 치환을 갖는 화합물을 포함한다. 동위원소는, 원자 번호가 동일하지만 질량수가 상이한, 즉 양성자의 수가 동일하지만 중성자의 수가 상이한 원자이다.

본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오린 및 염소의 동위원소, 예컨대 각각 ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸F ³¹P, ³²P, ³⁵S, ³⁶CI, 및 ¹²⁵I를 포함한다. 한 실시양태에서, 동위원소 표지된 화합물은 약물 또는 기질 조직 분포 검정을 포함한 대사 연구 (¹⁴C 사용), 반응 동역학 시험 (예를 들어 ²H 또는 ³H 사용), 검출 또는 영상화 기술, 예컨대 양전자 방출 단층촬영 (PET) 또는 단일-광자 방출 컴퓨터 단층촬영 (SPECT)에서, 또는 환자의 방사능 치료에서 사용될 수 있다. 특히, ¹⁸F 표지된 화합물은 PET 또는 SPECT 연구에 특히 바람직할 수 있다. 동위원소 표지된 본 발명의 화합물 및 그의 전구약물은 일반적으로 동위원소 표지되지 않은 시약을, 용이하게 입수가능한 동위원소 표지된 시약으로 치환함으로써 반응식 또는 하기 기재된 실시예 및 제조예에 기재된 절차를 수행함으로써 제조될 수 있다.

일반적 예로서 및 비제한적으로, 수소의 동위원소, 예를 들어 중수소 (²H) 및 삼중수소 (³H)가 기재된 구조 내의 어느 곳에서나 사용되고, 이는 목적하는 결과를 달성한다. 대안적으로 또는 추가로, 탄소의 동위원소, 예를 들어 ¹³C 및 ¹⁴C가 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 동위원소 치환은 약물의 성능, 예를 들어 약역학, 약동학, 생체분포, 반감기, 안정성, AUC, T_max, C_max 등을 개선시키기 위한, 분자 상의 1개 이상의 위치에서의 수소의 중수소로의 치환이다. 예를 들어, 중수소는 대사 동안 결합 파손 위치 (α-중수소 동역학적 동위원소 효과) 또는 결합 파손 부위 옆 또는 근처 (β-중수소 동역학적 동위원소 효과)의 탄소에 결합될 수 있다.

동위원소 치환, 예를 들어 중수소 치환은 부분적이거나 완전할 수 있다. 부분 중수소 치환은 적어도 1개의 수소가 중수소로 치환되는 것을 의미한다. 특정 실시양태에서, 동위원소는 임의의 관심 위치에서 90%, 95% 또는 99% 또는 그 초과로 동위원소 풍부화된다. 한 실시양태에서, 중수소는 원하는 위치에서 90%, 95% 또는 99% 풍부화된다. 달리 언급되지 않는 한, 임의의 지점에서의 풍부화는 천연 존재비 초과이며, 인간에서 약물의 검출가능한 특성을 변경시키기에 충분하다.

본 발명의 화합물은 용매 (물 포함)와 용매화물을 형성할 수 있다. 따라서, 한 실시양태에서, 본 발명은 활성 화합물의 용매화 형태를 포함한다. 용어 "용매화물"은 본 발명의 화합물 (그의 제약상 허용되는 염 포함)과 1종 이상의 용매 분자와의 분자 착물을 지칭한다. 용매의 비제한적 예는 물, 에탄올, 디메틸 술폭시드, 아세톤 및 다른 통상의 유기 용매이다. 용어 "수화물"은 본 발명의 화합물 및 물을 포함하는 분자 복합체를 지칭한다. 본 발명에 따른 제약상 허용되는 용매화물은 결정화의 용매가 동위원소 치환될 수 있는 것들, 예를 들어 D₂O, d₆-아세톤, d₆-DMSO를 포함한다. 용매화물은 액체 또는 고체 형태로 존재할 수 있다.

안정적 활성 화합물은 단리될 수 있고, 적어도 1개월의 보관 수명을 갖는 투여 형태로 제제화될 수 있는 화합물을 지칭한다. 중간체 또는 전구체를 활성 화합물로 안정적으로 제조하는 것은 반응 또는 다른 용도에 요구되는 기간 내에 분해되지 않는 경우에 안정적이다. 안정적 모이어티 또는 치환기는 분해되지 않거나, 반응하지 않거나 또는 사용에 필요한 주기 내에 분리되지 않는 것이다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 전형적으로 공지되고 확인불가능한 바와 같이, 불안정한 모이어티의 비제한적 예는 불안정한 배열에서 헤테로원자를 결합하는 것들이다.

"투여 형태"는 활성제의 투여 단위를 의미한다. 투여 형태의 예는 정제, 캡슐, 주사, 현탁액, 액체, 에멀젼, 임플란트, 입자, 구체, 크림, 연고, 흡입가능한 형태, 경피 형태, 협측, 설하, 국소, 겔, 점막 등을 포함한다. "투여 형태"는 또한 임플란트, 예를 들어 광학 임플란트를 포함할 수 있다.

"제약 조성물"은 적어도 1종의 활성제, 및 적어도 1종의 다른 물질, 예컨대 담체를 포함하는 조성물이다. "제약 조합물"은 단일 투여 형태로 조합되거나 또는 개별 투여 형태로 지침서와 함께 제공될 수 있는 적어도 2종의 활성제의 조합물이며, 활성제는 본원에 기재된 임의의 장애를 치료하기 위해 함께 사용된다.

"제약상 허용되는 염"은 모 화합물이 그의 무기 및 유기, 비-독성, 산 또는 염기 부가염을 제조함으로써 변형된 개시된 화합물의 유도체이다. 일반적으로, 이러한 염은 이들 화합물의 유리 염기 형태를 화학량론적 양의 적절한 산과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 이러한 반응은 전형적으로 물 중에서 또는 유기 용매 중에서, 또는 상기 둘의 혼합물 중에서 수행된다. 일반적으로, 실행가능한 경우에, 비-수성 매질 예컨대 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 이소프로판올, 또는 아세토니트릴이 전형적이다. 본 발명의 화합물의 염은 또한 화합물의 및 화합물 염의 용매화물을 포함한다.

제약상 허용되는 염은, 예를 들어 비-독성 무기 또는 유기 산으로부터 형성된, 모 화합물의 통상적인 비-독성 염 및 4급 암모늄 염을 포함한다. 예를 들어, 통상적인 비-독성 산 염은 무기 산 예컨대 염산, 브로민화수소산, 황산, 술팜산, 인산, 질산 등으로부터 유래한 염; 및 유기 산 예컨대 아세트산, 프로피온산, 숙신산, 글리콜산, 스테아르산, 락트산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 파모산, 말레산, 히드록시말레산, 페닐아세트산, 글루탐산, 벤조산, 살리실산, 메실산, 에실산, 베실산, 술파닐산, 2-아세톡시벤조산, 푸마르산, 톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 에탄 디술폰산, 옥살산, 이세티온산, HOOC-(CH₂)_n-COOH (여기서 n은 0-4임) 등으로부터, 또는 동일한 반대이온을 생성하는 상이한 산을 사용하여 제조된 염을 포함한다. 추가의 적합한 염의 목록은, 예를 들어 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., p. 1418 (1985)]에서 찾아볼 수 있다.

본 발명의 제약 조성물/조합물에 적용되는 용어 "담체"는 희석제, 부형제 또는 비히클을 지칭하며, 활성 화합물은 이들과 함께 제공된다.

"제약상 허용되는 부형제"는, 일반적으로 안전하고 비-독성이고 생물학적으로도 또는 다르게도 숙주에게 투여하는데 적합하지 않은 것이 아닌 제약 조성물/조합물을 제조하기에 유용한 부형제를 의미한다. 한 실시양태에서, 수의학적 용도에 허용되는 부형제가 사용된다.

"환자" 또는 "숙주" 또는 "대상체"는 CDK8 및/또는 CDK19의 조정을 포함하나 이에 제한되지 않는, 본원에 명시적으로 기재된 장애 중 임의의 것의 치료 또는 예방을 필요로 하는 인간 또는 비-인간 동물이다. 전형적으로 숙주는 인간이다. "환자" 또는 "숙주" 또는 "대상체"는 또한 예를 들어, 포유동물, 영장류 (예를 들어, 인간), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류, 닭 등을 지칭한다.

본원에 사용된 "전구약물"은 숙주에게 투여 시에 생체내에서 모 약물로 전환되는 화합물을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "모 약물"은 본원에 기재된 현재 기재된 화학적 화합물 중 임의의 것을 의미한다. 전구약물은, 모 약물의 특성을 향상시키거나 또는 모 약물의 제약학적 또는 약동학적 특성을 개선시키는 것을 포함한 임의의 원하는 효과를 달성하기 위해 사용될 수 있다. 모 약물의 생체내 생성을 위한 조건을 조정함에 있어서 선택을 제공하는 전구약물 전략이 존재하며, 이들 모두는 본원에 포함된 것으로 간주된다. 전구약물 전략의 비제한적 예는 제거가능한 기, 또는 기의 제거가능한 부분의 의 공유 부착, 예를 들어 특히, 아실화, 인산화, 포스포닐화, 포스포르아미데이트 유도체, 아미드화, 환원, 산화, 에스테르화, 알킬화, 다른 카르복시 유도체, 술폭시 또는 술폰 유도체, 카르보닐화 또는 무수물를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본 발명의 제약 조성물/조합물의 "치료 유효량"은 숙주에게 투여 시에, 치료 이익 예컨대 증상의 호전 또는 질환 그 자체의 감소 또는 축소를 제공하기에 유효한 양을 의미한다. 한 비-제한적인 실시양태에서, 치료 유효량은 환자의 혈액, 혈청, 또는 조직 내의 암의 검출가능한 수준의 유의한 증가를 방지하거나 또는 이를 유의하게 감소시키기에 충분한 양이다.

II. 활성 화합물

본 발명은 또한 화합물 B, 화합물 C 및 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염, N-옥시드, 중수소화 유도체, 전구약물 및/또는 제약상 허용되는 조성물을 포함한다.

본 발명은 또한 하기 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염, N-옥시드, 중수소화 유도체, 전구약물 및/또는 제약상 허용되는 조성물, 뿐만 아니라 화합물 A의 중수소화 유도체를 포함한다.

본 발명은 또한 하기 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염, N-옥시드, 중수소화 유도체, 전구약물 및/또는 제약상 허용되는 조성물을 포함한다.

본 발명은 또한 하기 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염, N-옥시드, 중수소화 유도체, 전구약물 및/또는 제약상 허용되는 조성물을 포함한다.

본 발명은 또한 하기 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염, N-옥시드, 중수소화 유도체, 전구약물 및/또는 제약상 허용되는 조성물을 포함한다.

III. 제약 조성물

특정 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 예컨대 중수소화 유도체 또는 전구약물, 및 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 특정 실시양태에서, 화합물은 유효량, 예를 들어 치료 유효량 또는 예방 유효량으로 존재한다.

제약상 허용되는 부형제는 목적하는 특정의 투여 형태에 적합한 바와 같이, 용매, 희석제 또는 다른 액체 비히클, 분산 또는 현탁 보조제, 표면 활성제, 등장화제, 증점제 또는 유화제, 보존제, 고체 결합제, 윤활제 등을 포함한다. 제약 조성물 작용제의 제제화 및/또는 제조에 대한 일반적 고찰은 예를 들어 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980), and Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21^st Edition (Lippincott Williams & WilKins, 2005)]에서 찾아볼 수 있다.

본원에 기재된 제약 조성물은 약리학 기술분야에 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 일반적으로, 이러한 정제용 방법은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물 ("활성 성분")을 부형제, 및/또는 1종 이상의 다른 보조 성분과 회합하도록 한 다음, 필요한 경우에 및/또는 바람직한 경우에, 생성물을 목적하는 단일- 또는 다중-용량 단위로 성형 및/또는 포장하는 단계를 포함한다.

제약 조성물은 단일 단위 용량으로서 및/또는 복수의 단일 단위 용량으로서 벌크로 제조, 포장 및/또는 판매될 수 있다. 본원에 사용된 "단위 용량"은 미리 결정된 양의 활성 성분을 포함하는 제약 조성물의 개별 양이다. 활성 성분의 양은 일반적으로 대상체에게 투여될 활성 성분의 투여량, 및/또는 이러한 투여량의 편리한 분획, 예컨대, 예를 들어, 이러한 투여량의 1/2 또는 1/3과 동등하다.

본 발명의 제약 조성물 내 활성 성분, 제약상 허용되는 담체, 및/또는 임의의 추가적 성분의 상대적인 양은 치료될 대상체의 정체, 크기, 및/또는 상태에 따라 및 추가로, 조성물이 투여되는 경로에 따라 달라질 것이다. 예로서, 조성물은 0.1% 내지 100% (w/w) 활성 성분을 포함할 수 있다.

제공된 제약 조성물의 제조에 사용되는 제약상 허용되는 부형제는 불활성 희석제, 분산제 및/또는 과립화제, 표면 활성제 및/또는 유화제, 붕해제, 결합제, 보존제, 완충제, 윤활제, 및/또는 오일을 포함한다. 부형제 예컨대 코코아 버터 및 좌제 왁스, 착색제, 코팅제, 감미제, 향미제, 및 퍼퓸제가 또한 조성물 내에 존재할 수 있다.

예시적인 희석제는 탄산칼슘, 탄산나트륨, 인산칼슘, 인산이칼슘, 황산칼슘, 인산수소칼슘, 인산나트륨 락토스, 수크로스, 셀룰로스, 미세결정질 셀룰로스, 카올린, 만니톨, 소르비톨, 이노시톨, 염화나트륨, 건조 전분, 옥수수 전분, 분말화된 당 등, 및 그의 조합물을 포함한다.

예시적인 과립화제 및/또는 분산화제는 감자 전분, 옥수수 전분, 타피오카 전분, 소듐 스타치 글리콜레이트, 점토, 알긴산, 구아 검, 시트러스 펄프, 한천, 벤토나이트, 셀룰로스 및 목재 생성물, 천연 스폰지, 양이온-교환 수지, 탄산칼슘, 규산염, 탄산나트륨, 가교된 폴리(비닐-피롤리돈) (크로스포비돈), 소듐 카르복시메틸 전분 (소듐 스타치 글리콜레이트), 카르복시메틸 셀룰로스, 가교된 소듐 카르복시메틸 셀룰로스 (크로스카르멜로스), 메틸셀룰로스, 예비젤라틴화 전분 (전분 1500), 미세결정질 전분, 수불용성 전분, 칼슘 카르복시메틸 셀룰로스, 규산알루미늄마그네슘 (비검(Veegum)), 소듐 라우릴 술페이트, 4급 암모늄 화합물 등, 및 그의 조합물을 포함한다.

예시적인 표면 활성제 및/또는 유화제는 천연 유화제 (예를 들어, 아카시아, 한천, 알긴산, 알긴산나트륨, 트라가칸트, 콘드룩스, 콜레스테롤, 크산탄, 펙틴, 젤라틴, 난황, 카세인, 양모 지방, 콜레스테롤, 왁스 및 레시틴), 콜로이드성 점토 (예를 들어, 벤토나이트 [규산알루미늄] 및 비검 [규산알루미늄마그네슘]), 장쇄 아미노산 유도체, 고분자량 알콜 (예를 들어, 스테아릴 알콜, 세틸 알콜, 올레일 알콜, 트리아세틴 모노스테아레이트, 에틸렌 글리콜 디스테아레이트, 글리세릴 모노스테아레이트 및 프로필렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리비닐 알콜), 카르보머 (예를 들어, 카르복시 폴리메틸렌, 폴리아크릴산, 아크릴산 중합체 및 카르복시비닐 중합체), 카라기난, 셀룰로스성 유도체 (예를 들어, 카르복시메틸셀룰로스 소듐, 분말화 셀룰로스, 히드록시메틸 셀룰로스, 히드록시프로필 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 메틸셀룰로스), 소르비탄 지방산 에스테르 (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트 [트윈(Tween) 20], 폴리옥시에틸렌 소르비탄 [트윈 60], 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트 [트윈 80], 소르비탄 모노팔미테이트 [스팬(Span) 40], 소르비탄 모노스테아레이트 [스팬 60], 소르비탄 트리스테아레이트 [스팬 65], 글리세릴 모노올레에이트, 소르비탄 모노올레에이트 [스팬 80]), 폴리옥시에틸렌 에스테르 (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 모노스테아레이트 [미르즈(Myrj) 45], 폴리옥시에틸렌 수소화 피마자 오일, 폴리에톡실화 피마자 오일, 폴리옥시메틸렌 스테아레이트 및 솔루톨), 수크로스 지방산 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 지방산 에스테르 (예를 들어, 크레모포르), 폴리옥시에틸렌 에테르, (예를 들어, 폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르 [브리즈(Brij) 30]), 폴리(비닐-피롤리돈), 디에틸렌 글리콜 모노라우레이트, 트리에탄올아민 올레에이트, 올레산나트륨, 칼륨 올레에이트, 에틸 올레에이트, 올레산, 에틸 라우레이트, 소듐 라우릴 술페이트, 플루로닉(Pluronic) F 68, 폴록사머(Poloxamer) 188, 세트리모늄 브로마이드, 세틸피리디늄 클로라이드, 벤즈알코늄 클로라이드, 도큐세이트 소듐 등 및/또는 그의 조합물을 포함한다.

예시적인 결합제는 전분 (예를 들어 옥수수 전분 및 전분 페이스트); 젤라틴; 당 (예를 들어 수크로스, 글루코스, 덱스트로스, 덱스트린, 당밀, 락토스, 락티톨, 만니톨 등); 천연 및 합성 검 (예를 들어 아카시아, 알긴산나트륨, 아이리쉬 모스의 추출물, 판워 검, 가티 검, 이사폴 후스크스의 점액, 카르복시메틸셀룰로스, 메틸셀룰로스, 에틸셀룰로스, 히드록시에틸셀룰로스, 히드록시프로필 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 미세결정질 셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트, 폴리(비닐-피롤리돈), 규산알루미늄마그네슘 (비검), 및 라치 아라보갈락탄); 알기네이트; 폴리에틸렌 옥시드; 폴리에틸렌 글리콜; 무기 칼슘 염; 규산; 폴리메타크릴레이트; 왁스; 물; 알콜 등, 및/또는 그의 조합물을 포함한다.

예시적인 보존제는 항산화제, 킬레이트화제, 항미생물 보존제, 항진균 보존제, 알콜 보존제, 산성 보존제, 및 다른 보존제를 포함한다.

예시적인 항산화제는 알파 토코페롤, 아스코르브산, 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화 히드록시아니솔, 부틸화 히드록시톨루엔, 모노티오글리세롤, 메타중아황산칼륨, 프로피온산, 프로필 갈레이트, 아스코르브산나트륨, 중아황산나트륨, 메타중아황산나트륨, 및 아황산나트륨을 포함한다.

예시적인 킬레이트화제는 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA) 및 그의 염 및 수화물 (예를 들어, 에데트산나트륨, 에데트산이나트륨, 에데트산삼나트륨, 에데트산이나트륨 칼슘, 에데트산 이칼륨 등), 시트르산 및 그의 염 및 수화물 (예를 들어, 시트르산 1수화물), 푸마르산 및 그의 염 및 수화물, 말산 및 그의 염 및 수화물, 인산 및 그의 염 및 수화물, 및 타르타르산 및 그의 염 및 수화물을 포함한다. 예시적인 항미생물 보존제는 벤즈알코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드, 벤질 알콜, 브로노폴, 세트리미드, 세틸피리디늄 클로라이드, 클로르헥시딘, 클로로부탄올, 클로로크레졸, 클로로크실레놀, 크레졸, 에틸 알콜, 글리세린, 헥세티딘, 이미드우레아, 페놀, 페녹시에탄올, 페닐에틸 알콜, 질산페닐제2수은, 프로필렌 글리콜, 및 티메로살을 포함한다.

예시적인 항진균 보존제는 부틸 파라벤, 메틸 파라벤, 에틸 파라벤, 프로필 파라벤, 벤조산, 히드록시벤조산, 벤조산칼륨, 소르브산칼륨, 벤조산나트륨, 프로피온산나트륨, 및 소르브산을 포함한다.

예시적인 알콜 보존제는 에탄올, 폴리에틸렌 글리콜, 페놀, 페놀계 화합물, 비스페놀, 클로로부탄올, 히드록시벤조에이트, 및 페닐에틸 알콜을 포함한다.

예시적인 산성 보존제는 비타민 A, 비타민 C, 비타민 E, 베타-카로틴, 시트르산, 아세트산, 데히드로아세트산, 아스코르브산, 소르브산, 및 피트산을 포함한다.

다른 보존제는 토코페롤, 토코페롤 아세테이트, 데테르옥심 메실레이트, 세트리미드, 부틸화 히드록시아니솔 (BHA), 부틸화 히드록시톨루엔 (BHT), 에틸렌디아민, 소듐 라우릴 술페이트 (SLS), 나트륨 라우릴 에테르 술페이트 (SLES), 중아황산나트륨, 메타중아황산나트륨, 아황산칼륨, 메타중아황산칼륨, 글리단트 플러스(Glydant Plus), 페노닙(Phenonip), 메틸파라벤, 저몰(Germall) 115, 게르마벤(Germaben) II, 네올론(Neolone), 카톤(Kathon) 및 에욱실(Euxyl)을 포함한다. 특정 실시양태에서, 보존제는 항산화제이다. 다른 실시양태에서, 보존제는 킬레이트화제이다.

예시적인 완충제는 시트레이트 완충제 용액, 아세테이트 완충제 용액, 포스페이트 완충제 용액, 염화암모늄, 탄산칼슘, 염화칼슘, 시트르산칼슘, 글루비온산칼슘, 글루셉트산칼슘, 글루콘산칼슘, D-글루콘산, 글리세로인산칼슘, 락트산칼슘, 프로판산, 레불린산칼슘, 펜탄산, 이염기성 인산칼슘, 인산, 삼염기성 인산칼슘, 수산화인산칼슘, 아세트산칼륨, 염화칼륨, 글루콘산칼륨, 칼륨 혼합물, 이염기성 인산칼륨, 일염기성 인산칼륨, 인산칼륨 혼합물, 아세트산나트륨, 중탄산나트륨, 염화나트륨, 시트르산나트륨, 락트산나트륨, 이염기성 인산나트륨, 일염기성 인산나트륨, 인산나트륨 혼합물, 트로메타민, 수산화마그네슘, 수산화알루미늄, 알긴산, 발열원 무함유수, 등장성 염수, 링거액, 에틸 알콜 등 및 그의 조합물을 포함한다.

예시적인 윤활제는 스테아르산마그네슘, 스테아르산칼슘, 스테아르산, 실리카, 활석, 맥아, 글리세릴 베하네이트, 수소화 식물성 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 벤조산나트륨, 아세트산나트륨, 염화나트륨, 류신, 마그네슘 라우릴 술페이트, 소듐 라우릴 술페이트 등, 및 그의 조합물을 포함한다.

예시적인 천연 오일은 아몬드, 살구 커넬, 아보카도, 바바수, 베르가모트, 블랙 커런트 종자, 보리지, 케이드, 카모마일, 카놀라, 캐러웨이, 카르나우바, 피마자, 시나몬, 코코아 버터, 코코넛, 대구 간, 커피, 옥수수, 목화 종자, 에뮤, 유칼립투스, 달맞이꽃, 어류, 아마씨, 게라니올, 고드, 포도씨, 헤이즐넛, 히솝, 이소프로필 미리스테이트, 호호바, 쿠쿠이 넛, 라반딘, 라벤더, 레몬, 리트세아 쿠베바, 마카데미아 넛, 아욱, 망고씨, 메도우폼씨, 밍크, 넛멕, 올리브, 오렌지, 오렌지 라피, 팜, 팜핵, 복숭아 커넬, 땅콩, 양귀비씨, 호박씨, 평지씨, 쌀겨, 로즈마리, 홍화, 샌달우드, 사스쿠아나, 세이보리, 산자나무, 참깨, 시어 버터, 실리콘, 대두, 해바라기, 티트리, 엉겅퀴, 츠바키, 베티버, 호두, 및 밀 배아 오일을 포함한다. 예시적인 합성 오일은 부틸 스테아레이트, 카프릴산 트리글리세리드, 카프르산 트리글리세리드, 시클로메티콘, 디에틸 세바케이트, 디메티콘 360, 이소프로필 미리스테이트, 미네랄 오일, 옥틸도데칸올, 올레일 알콜, 실리콘 오일, 및 그의 조합물을 포함하나 그에 제한되지는 않는다.

경구 및 비경구 투여를 위한 액체 투여 형태는 제약상 허용되는 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르를 포함한다. 활성 성분 뿐만 아니라, 액체 투여 형태는 관련 기술분야에서 통상적으로 사용되는 불활성 희석제, 예컨대, 예를 들어 물 또는 다른 용매, 가용화제 및 유화제, 예컨대 에틸 알콜, 이소프로필 알콜, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 디메틸포름아미드, 오일 (예를 들어, 목화씨, 땅콩, 옥수수, 배아, 올리브, 피마자, 및 참깨 오일), 글리세롤, 테트라히드로푸르푸릴 알콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 그의 혼합물을 포함할 수 있다. 불활성 희석제 이외에도, 경구 조성물은 아주반트, 예컨대 습윤제, 유화제 및 현탁화제, 감미제, 향미제, 및 퍼퓸제를 포함할 수 있다. 비경구 투여를 위한 특정 실시양태에서, 본 발명의 접합체는 가용화제, 예컨대 크레모포르, 알콜, 오일, 변형 오일, 글리콜, 폴리소르베이트, 시클로덱스트린, 중합체, 중합체 접합체 (예를 들어, IT-101/CLRX101), 및 그의 조합물과 혼합된다.

주사가능한 제제, 예를 들어 멸균 주사가능한 수성 또는 유질 현탁액은 관련 기술분야에 공지된 바에 따라 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 제제화될 수 있다. 멸균 주사가능한 제제는 또한 예를 들어 1,3-부탄디올 중의 용액으로서 비독성의 비경구로 허용되는 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사가능한 용액, 현탁액 또는 에멀젼일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액, U.S.P. 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 추가로, 멸균 고정 오일이 용매 또는 현탁 매질로서 통상적으로 사용된다. 이러한 목적을 위해, 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함한 임의의 무자극 고정 오일이 사용될 수 있다. 추가로, 지방산 예컨대 올레산이 주사제의 제조에 사용된다.

주사가능한 제제는, 예를 들어 박테리아-잔류 필터를 통한 여과에 의해, 또는 사용 전에 멸균수 또는 다른 멸균 주사가능한 매질 중에 용해 또는 분산될 수 있는 멸균 고체 조성물 형태로 멸균제를 혼입함으로써 멸균될 수 있다.

활성 성분의 효과를 연장시키기 위해, 종종 피하 또는 근육내 주사로부터의 활성 성분의 흡수를 둔화시키는 것이 바람직하다. 이는 불량한 수용해도를 갖는 결정질 또는 무정형 물질의 액체 현탁액의 사용에 의해 달성될 수 있다. 이때, 활성 성분의 흡수 속도는 그의 용출 속도에 따라 달라지며, 이는 결국 결정 크기 및 결정 형태에 따라 달라질 수 있다. 대안적으로, 비경구 투여된 약물 형태의 지연된 흡수는, 활성 성분을 오일 비히클 중에 용해 또는 현탁시킴으로써 달성된다.

직장 또는 질 투여를 위한 조성물은 전형적으로 본 발명의 접합체를, 주위 온도에서는 고체이지만 체온에서는 액체이고 따라서 직장 또는 질강에서 용융되어 활성 성분을 방출하는 적합한 비-자극성 부형제 또는 담체, 예컨대 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜 또는 좌제 왁스와 혼합하여 제조될 수 있는 좌제이다.

경구 투여를 위한 고체 투여 형태는 캡슐, 정제, 환제, 분말, 및 과립을 포함한다. 이러한 고체 투여 형태에서, 활성 성분은 적어도 1종의 불활성, 제약상 허용되는 부형제 또는 담체 예컨대 시트르산나트륨 또는 인산이칼슘 및/또는 a) 충전제 또는 증량제 예컨대 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 및 규산, b) 결합제 예컨대, 예를 들어, 카르복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리디논, 수크로스, 및 아카시아, c) 함습제 예컨대 글리세롤, d) 붕해제 예컨대 한천, 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정한 실리케이트 및 탄산나트륨, e) 용해 지연제 예컨대 파라핀, f) 흡수 촉진제 예컨대 4급 암모늄 화합물, g) 습윤제 예컨대, 예를 들어, 세틸 알콜 및 글리세롤 모노스테아레이트, h) 흡수제 예컨대 카올린 및 벤토나이트 점토, 및 i) 윤활제 예컨대 활석, 스테아르산칼슘, 스테아르산마그네슘, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 술페이트, 및 그의 혼합물과 혼합된다. 캡슐, 정제 및 환제의 경우에, 투여 형태는 완충제를 포함할 수 있다.

유사한 유형의 고체 조성물은 부형제, 예컨대 락토스 또는 유당뿐만 아니라 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등을 사용하여 연질 및 경질-충전된 젤라틴 캡슐에서 충전제로서 사용될 수 있다. 정제, 당의정, 캡슐, 환제 및 과립의 고체 투여 형태는 코팅 및 쉘 예컨대 장용 코팅 및 제약 제제화 기술분야에 널리 공지된 다른 코팅을 갖도록 제조될 수 있다. 이들은 불투명화제를 임의로 포함할 수 있고, 이들이 활성 성분(들)을 단지 또는 우선적으로 장관의 특정 부분에서 임의로 지연된 방식으로 방출하는 조성을 가질 수 있다. 사용될 수 있는 포매 조성물의 예는 중합체 물질 및 왁스를 포함한다. 유사한 유형의 고체 조성물은 부형제, 예컨대 락토스 또는 유당, 뿐만 아니라 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등을 사용하여 연질 및 경질-충전된 젤라틴 캡슐에서 충전제로서 사용될 수 있다.

활성 성분(들)은 상기 언급된 바와 같은 하나 이상의 부형제와 함께 마이크로-캡슐화된 형태일 수 있다. 정제, 당의정, 캡슐, 환제 및 과립의 고체 투여 형태는 코팅 및 쉘 예컨대 장용 코팅, 방출 제어 코팅, 및 제약 제제화 기술분야에 널리 공지된 다른 코팅을 갖도록 제조될 수 있다. 이러한 고체 투여 형태에서 활성 성분은 적어도 1종의 불활성 희석제, 예컨대 수크로스, 락토스 또는 전분과 혼합될 수 있다. 이러한 투여 형태는, 통상적인 실시에서와 같이, 불활성 희석제 이외의 추가의 물질, 예를 들어 타정 윤활제 및 다른 타정 보조제 예컨대 스테아르산마그네슘 및 미세결정질 셀룰로스를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제 및 환제의 경우, 투여 형태는 완충제를 포함할 수 있다. 이들은 불투명화제를 임의로 포함할 수 있고, 이들이 활성 성분(들)을 단지 또는 우선적으로 장관의 특정 부분에서 임의로 지연된 방식으로 방출하는 조성을 가질 수 있다. 사용될 수 있는 포매 조성물의 예는 중합체 물질 및 왁스를 포함한다.

본 발명의 화합물의 국소 및/또는 경피 투여를 위한 투여 형태는 연고, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 분말, 용액, 스프레이, 흡입제 및/또는 패치를 포함할 수 있다. 일반적으로, 활성 성분은 멸균 조건 하에 제약상 허용되는 담체 및/또는 요구될 수 있는 경우에 필요한 임의의 보존제 및/또는 완충제와 혼합된다. 추가로, 본 발명은 활성 성분의 신체로의 제어된 전달을 제공하는 부가의 이점을 종종 갖는 경피 패치의 사용을 고려한다. 이러한 투여 형태는, 예를 들어 활성 성분을 적절한 매질 중에 용해 및/또는 분배함으로써 제조될 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 속도는 속도 제어 막을 제공하고/거나 활성 성분을 중합체 매트릭스 및/또는 겔 중에 분산시킴으로써 제어될 수 있다.

본원에 기재된 피내 제약 조성물을 전달하는데 사용하기에 적합한 장치는 짧은 바늘 장치, 예컨대 미국 특허 4,886,499; 5,190,521; 5,328,483; 5,527,288; 4,270,537; 5,015,235; 5,141,496; 및 5,417,662에 기재된 것들을 포함한다. 피내 조성물은 피부 내로의 바늘의 효과적인 침투 길이를 제한하는 장치, 예컨대 PCT 공개 WO 99/34850에 기재된 것들 및 그의 기능적 등가물에 의해 투여될 수 있다. 각질층을 뚫고 진피에 도달하는 제트를 생성하는 액체 제트 분사기를 통해 및/또는 바늘을 통해 액체 백신을 진피에 전달하는 제트 주사 장치가 적합하다. 제트 주사 장치는, 예를 들어 미국 특허 5,480,381; 5,599,302; 5,334,144; 5,993,412; 5,649,912; 5,569,189; 5,704,911; 5,383,851; 5,893,397; 5,466,220; 5,339,163; 5,312,335; 5,503,627; 5,064,413; 5,520,639; 4,596,556; 4,790,824; 4,941,880; 4,940,460; 및 PCT 공개 WO 97/37705 및 WO 97/13537에 기재되어 있다. 분말 형태로의 백신을 피부의 외부 층을 통해 진피로 가속화시키기 위해 압축 기체를 사용하는 탄도 분말/입자 전달 디바이스가 적합하다. 대안적으로 또는 추가적으로, 통상적인 시린지는 피내 투여의 전형적 망투 방법에 사용될 수 있다.

국소 투여에 적합한 제제는 액체 및/또는 반액체 제제 예컨대 도찰제, 로션, 수중유 및/또는 유중수 에멀젼 예컨대 크림, 연고 /또는 페이스트 및/또는 용액 및/또는 현탁액을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 국소적으로 투여가능한 제제는, 예를 들어 약 1% 내지 약 10% (w/w)의 활성 성분을 포함할 수 있지만, 활성 성분의 농도는 용매 중 활성 성분의 용해도 한계만큼 높을 수 있다. 국소 투여를 위한 제제는 본원에 기재된 추가의 성분 중 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 협강을 통한 폐 투여에 적합한 제제로 제조, 패키징, 및/또는 판매될 수 있다. 이러한 제제는 활성 성분을 포함하고 약 0.5 내지 약 7 나노미터 또는 약 1 내지 약 6 나노미터 범위의 직경을 갖는 건조 입자를 포함할 수 있다. 이러한 조성물은 편리하게는, 추진제의 스트림을 유도하여 분말을 분산시킬 수 있는 건조 분말 저장소를 포함하는 장치를 사용하고/거나 자기-추진 용매/분말 분배 용기 예컨대 저비점 추진제 중에 용해/또는 현탁된 활성 성분을 밀봉된 용기 내에 포함하는 장치를 사용하는 투여를 위한 건조 분말 형태이다. 이러한 분말은 중량 기준으로 입자의 적어도 98%가 0.5 나노미터 초과의 직경을 갖고, 수 기준으로 입자의 적어도 95%가 7 나노미터 미만의 직경을 갖는 입자를 포함한다. 대안적으로, 중량 기준으로 입자의 적어도 95%는 1 나노미터 초과의 직경을 갖고, 수 기준으로 입자의 적어도 90%는 6 나노미터 미만의 직경을 갖는다. 건조 분말 조성물은 고체 미세 분말 희석제 예컨대 당을 포함할 수 있고, 편리하게는 단위 투여 형태로 제공된다.

저비점 추진제는 일반적으로 대기압 하에 65℉ 미만의 비점을 갖는 액체 추진제를 포함한다. 일반적으로 추진제는 조성물의 50 내지 99.9% (w/w)를 구성할 수 있고, 활성 성분은 조성물의 0.1 내지 20% (w/w)를 구성할 수 있다. 추진제는 추가의 성분, 예컨대 액체 비-이온성 및/또는 고체 음이온성 계면활성제 및/또는 고체 희석제 (이는 활성 성분을 포함하는 입자와 동일한 정도의 입자 크기를 가질 수 있음)를 추가로 포함할 수 있다.

폐 전달을 위해 제제화된 제약 조성물은 활성 성분을 용액 및/또는 현탁액의 액적 형태로 제공할 수 있다. 이러한 제제는 활성 성분을 포함하는, 임의로 멸균된 수성 및/또는 묽은 알콜성 용액 및/또는 현탁액으로서 제조, 포장 및/또는 판매될 수 있고, 편리하게는 임의의 연무화 및/또는 분무화 장치를 사용하여 투여될 수 있다. 이러한 제제는 향미제 예컨대 사카린 소듐, 휘발성 오일, 완충제, 표면 활성제 및/또는 보존제 예컨대 메틸히드록시벤조에이트를 포함하나 이에 제한되지는 않는 1종 이상의 추가의 성분을 추가로 포함할 수 있다. 이 투여 경로로 제공되는 액적은 약 0.1 내지 약 200 나노미터 범위의 평균 직경을 가질 수 있다.

폐 전달에 유용한 본원에서 기술한 제제는 본 발명의 제약 조성물의 비강내 전달에 유용하다. 비강내 투여에 적합한 또 다른 제제는, 활성 성분을 포함하고 약 0.2 내지 500 마이크로미터의 평균 입자를 갖는 조대 분말이다. 이러한 제제는 비공에 근접하게 놓인 분말 용기로부터 비도를 통해 빠른 흡입에 의해 투여된다.

비강 투여에 적합한 제제는 예를 들어 약 0.1% (w/w)만큼 적게 및 100% (w/w)만큼 많은 활성 성분을 포함할 수 있으며, 본원에 기재된 하나 이상의 추가의 성분을 포함할 수 있다. 본 발명의 제약 조성물은 협측 투여를 위한 제제로 제조, 포장 및/또는 판매될 수 있다. 이러한 제제는, 예를 들어 통상적인 방법을 사용하여 제조된 정제 및/또는 로젠지 형태일 수 있고, 예를 들어 0.1 내지 20% (w/w)의 활성 성분을 함유할 수 있으며, 나머지는 경구로 용해가능한 및/또는 분해가능한 조성물 및 임의로 본원에 기재된 추가의 성분 중 1종 이상을 포함한다. 대안적으로, 협측 투여를 위한 제제는 활성 성분을 포함하는 분말 및/또는 에어로졸화 및/또는 분무화 용액 및/또는 현탁액을 포함할 수 있다. 이러한 분말화, 에어로졸화 및/또는 에어로졸화 제제는 분산되는 경우에, 약 0.1 내지 약 200 나노미터 범위의 평균 입자 및/또는 액적 크기를 가질 수 있고, 본원에 기재된 추가의 성분 중 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물은 안과적 투여를 위한 제제로 제조, 패키징, 및/또는 판매될 수 있다. 이러한 제제는, 예를 들어 수성 또는 유성 액체 담체 중 활성 성분의 0.1/1.0% (w/w) 용액 및/또는 현탁액을 포함하는 점안제의 형태일 수 있다. 이러한 점안제는 완충제, 염, 및/또는 본원에 기재된 다른 추가의 성분 중 1종 이상을 추가로 포함할 수 있다. 유용한 다른 안과적으로 투여가능한 제제는 미세결정질 형태 및/또는 리포솜 제제로 활성 성분을 포함하는 것들을 포함한다. 점이제 및/또는 점안제는 본 발명의 범주 내인 것으로 고려된다.

본원에 제공된 제약 조성물의 설명은 주로 인간에게 투여하기에 적합한 제약 조성물에 관한 것이긴 하지만, 통상의 기술자는 이러한 조성물이 일반적으로 비-인간 동물에게 투여하기에 또한 적합함을 이해할 것이다. 인간에 대한 투여에 적합한 제약 조성물을 변형시켜 조성물을 다양한 동물에 대한 투여에 적합하게 하는 것이 잘 이해되어 있고, 통상의 숙련된 수의학 약리학자는 이러한 변형을 통상의 실험으로 설계 및/또는 수행할 수 있다. 제약 조성물의 제제화 및/또는 제조에 대한 일반적 고찰은 예를 들어 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21st ed., Lippincott Williams & WilKins, 2005]에서 찾아볼 수 있다.

제약 팩 및/또는 키트가 본 발명에 의해 추가로 포괄된다. 제공된 제약 팩 및/또는 키트는 제공된 조성물 및 용기 (예를 들어, 바이알, 앰플, 병, 시린지, 및/또는 분배기 패키지, 또는 다른 적합한 용기)를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제공된 키트는 대상체에게 투여되는 제제를 위해 제공된 조성물의 희석 또는 현탁에 적합한 수성 담체를 포함하는 제2 용기를 임의로 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제공된 제제 용기 및 용매 용기의 내용물은 조합되어 적어도 1개의 단위 투여 형태를 형성한다.

임의로, 단일 용기는 제공된 조성물 및/또는 현탁 또는 희석에 적절한 수성 담체를 함유하기 위한 1개 이상의 구획을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 단일 용기는, 구획 및/또는 개별 구획의 성분의 조합이 가능하도록 용기가 물리적 변형을 수용할 수 있는 정도의 변형에 적절할 수 있다. 예를 들어, 호일 또는 플라스틱 백은, 일단 밀봉부를 파괴하기 위한 신호가 생성되면, 2개의 개별 구획의 내용물의 조합이 가능하도록 파괴될 수 있는 천공된 밀봉부에 의해 분리된 2개 이상의 구획을 포함할 수 있다. 따라서, 제약 팩 또는 키트는 제공된 조성물 및 적절한 용매 및/또는 현탁에 적절한 수성 담체를 포함하는 이러한 다중-구획 용기를 포함할 수 있다.

임의로, 사용에 대한 지침서가 본 발명의 이러한 키트에 추가로 제공된다. 이러한 지침서는 일반적으로, 예를 들어 투여량 및 투여에 대한 지침을 제공할 수 있다. 다른 실시양태에서, 지침서는 투여를 위한 특정한 용기 및/또는 시스템에 대한에 대한 특수 지침과 관련된 추가의 세부사항을 추가로 제공할 수 있다. 추가로, 지침서는 추가의 요법과 함께 및/또는 그와 조합하여 사용하는 것에 대한 특수 지침을 제공할 수 있다.

IV. 치료 방법

한 측면에서, 임의로 제약상 허용되는 담체 중의 본원에 기재된 바와 같이 유효량의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, N-옥시드, 중수소화 유도체, 전구약물 및/또는 제약상 허용되는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 인간을 포함하는 숙주에서 CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성에 의해 매개된 장애를 치료하는 방법이 제공된다. CDK8 및 CDK19에 의해 매개된 장애의 비제한적 예는 종양, 암, 비정상적 세포 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애, 및 자가면역 장애를 포함한다.

또 다른 측면에서, 임의로 제약상 허용되는 담체 중의 본원에 기재된 바와 같이 유효량의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, N-옥시드, 중수소화 유도체, 전구약물 및/또는 제약상 허용되는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 인간을 포함하는 숙주에서 CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성에 의해 매개되지 않으나, 그렇더라도 본원에 기재된 1종 이상의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염에 의해 조정되는 장애를 치료하는 방법이 제공된다.

특정 실시양태에서, 방법은 시험관내 방법이다. 특정 실시양태에서, 방법은 생체내 방법이다. 또 다른 측면에서, CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성과 연관된 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 예컨대 중수소화 유도체 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 상태를 치료하는 방법이 제공된다.

특정 실시양태에서, CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성과 연관된 상태는 비정상적 세포 증식과 관련된 장애이다.

비정상적 세포 증식, 특히 과다증식은, 유전자 돌연변이, 감염, 독소에 대한 노출, 자가면역 장애, 및 양성 또는 악성 종양 유도를 비롯한 매우 다양한 인자의 결과로서 일어날 수 있다.

세포의 과다증식과 연관된 수많은 피부 장애가 존재한다. 건선은, 예를 들어 일반적으로 두꺼워진 각질에 의해 덮힌 플라크를 특징으로 하는 인간 피부의 양성 질환이다. 질환은 원인 불명의 표피 세포의 증가된 증식에 의해 유발된다. 만성 습진은 또한 표피의 상당한 과다증식과 연관된다. 피부 세포의 과다증식으로 인한 다른 질환은 아토피성 피부염, 편평 태선, 사마귀, 심상성 천포창, 광선 각화증, 기저 세포 암종 및 편평 세포 암종을 포함한다.

다른 과다증식성 세포 장애는 혈관 증식 장애, 섬유화 장애, 자가면역 장애, 이식편-대-숙주 거부, 종양 및 암을 포함한다.

혈관 증식성 장애는 혈관신생 및 맥관형성 장애를 포함한다. 혈관 조직에서 플라크의 발생의 과정에서 평활근 세포의 증식은 예를 들어 재협착, 망막병증 및 아테롬성동맥경화증을 유발한다. 세포 이동 및 세포 증식의 둘 다는 아테롬성동맥경화성 병변의 형성에서 역할을 한다.

섬유화 장애는 종종 세포외 매트릭스의 비정상적 형성으로 인한 것이다. 섬유화 장애의 예는 간 경변증 및 혈관간 증식성 세포 장애를 포함한다. 간경화는 세포외 기질 성분의 증가로 간 반흔이 생기는 것을 특징으로 한다. 간경화는 간의 경화증과 같은 질환을 유발할 수 있다. 간 반흔에 기인한 증가된 세포외 매트릭스는 또한 바이러스 감염, 예컨대 간염을 유발할 수 있다. 지방 세포가 간경화에 있어 주요 역할을 하는 것으로 보인다.

혈관간 장애는 혈관간 세포의 비정상적 증식에 의해 초래된다. 혈관간 과다증식성 세포 장애는 다양한 인간 신질환, 예컨대 사구체신염, 당뇨병성 신병증, 악성 신경화증, 혈전성 마이크로-혈관병증 증후군, 이식 거부 및 사구체병증을 포함한다.

증식성 요인을 갖는 또 다른 질환은 류마티스 관절염이다. 류마티스 관절염은 자가반응성 T 세포의 활성과 연관되고 콜라겐 및 IgE에 대하여 생산된 자가항체에 의해 유발된다고 여겨지는 자가면역 질환이라고 일반적으로 생각된다.

비정상적 세포 증식성 요인을 포함할 수 있는 다른 장애는 일반적으로 베체트 증후군, 급성 호흡 곤란 증후군 (ARDS), 허혈성 심장 질환, 투석후 증후군, 백혈병, 후천성 면역 결핍 증후군, 혈관염, 지질 조직구증, 패혈성 쇼크 및 염증을 포함한다.

특정 실시양태에서, CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성과 연관된 상태는 당뇨병성 상태이다.

특정 실시양태에서, CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성과 연관된 상태는 바이러스성 질환이다.

전사 시클린-의존성 키나제 (CDK)을 비롯한 인간 숙주 단백질은 단순 포진 바이러스 (HSV), 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 및 인간 시토메갈로바이러스 (HCMV)를 포함하여, 여러 바이러스의 복제에 기여한다는 것이 공지되어 있다. CDK8 활성은 암 세포 생존에서 또한 중요한 인터페론 반응에서 역할을 한다. 코르티스타틴 A에 의한 치료는 인터페론 감마 신호전달 유전자 및 인터페론 반응성 유전자로서 식별된 MOLM-14 AML 세포에서 유전자의 발현을 증가시킨다. 바이러스 예컨대 HIV 차단 인터페론 유도는 보다 효과적인 복제를 허용한다. 또한, 코르티스타틴 A는 HIV 바이러스 뿐만 아니라 HIV 바이러스 단백질 TAT-1을 억제하는 것으로 제시된 바 있다.

특정 실시양태에서, CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성과 연관된 상태는 감염이다. 특정 실시양태에서, 감염은 박테리아 감염이다. 특정 실시양태에서, 감염은 진균 감염이다. 특정 실시양태에서, 감염은 원충 감염이다. 특정 실시양태에서, 감염은 바이러스 감염이다. 특정 실시양태에서, 바이러스 감염은 레트로바이러스 감염이고, 바이러스는 즉, 레트로비리다에(Retroviridae) 과의 레트로바이러스이다. 특정 실시양태에서, 바이러스 감염은 레트로바이러스 감염이고, 바이러스는 레트로비리다에(Retroviridae) 과 및 오르토레트로비리나에(Orthoretrovirinae), 알파레트로바이러스(Alpharetrovirus), 베타레트로바이러스(Betaretrovirus), 델타레트로바이러스(Deltaretrovirus), 엡실론레트로바이러스(Epsilonretrovirus), 감마레트로바이러스(Gammaretrovirus) 또는 렌티바이러스(Lentivirus) 아과의 것이다. 특정 실시양태에서, 바이러스 감염은 레트로바이러스 감염이고, 바이러스는 레트로비리다에(Retroviridae) 과 및 렌티바이러스(Lentivirus) 아과의 것이다. 렌티바이러스(Lentivirus) 아과의 예시적인 바이러스는 인간 면역결핍 바이러스 (HIV), 원숭이 면역결핍 바이러스 (SIV), 고양이 면역결핍 바이러스 (FIV), 말 감염성 빈혈 바이러스 (EIAV) 및 비스나 바이러스를 포함하고 모두 렌티바이러스의 예이다. 특정 실시양태에서, 바이러스 감염은 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 감염이다. 고려된 다른 바이러스 감염은 단순 포진 바이러스 (HSV), 인간 면역결핍 바이러스 (HIV) 또는 인간 시토메갈로바이러스 (HCMV)에 의한 감염이다. 특정 실시양태에서, 바이러스는 온코바이러스 즉, 종양발생과 연관되고/거나, 암을 유발하는 바이러스이다. 특정 실시양태에서, 바이러스 감염의 치료는 CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성의 억제와 연관된다.

특정 실시양태에서 본 발명의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 유도체 또는 염 또는 이들 화합물을 함유하는 제약상 허용되는 제제는 HIV 감염 및 다른 관련 상태 예컨대 AIDS-관련 복합체 (ARC), 지속성 전신 림프절병증 (PGL), AIDS-관련 신경계 상태, 항-HIV 항체 양성 및 HIV-양성 상태, 카포시 육종, 혈소판감소증 자반증 및 기회 감염의 예방 및 치료에 유용하다. 이들 화합물 또는 제제는 또한 항- HIV 항체 또는 HIV-항원 양성이거나 또는 HIV에 노출된 적이 있는 개체에서 임상적 질병의 진행을 예방 또는 지연시키기 위해 예방적으로 사용될 수 있다.

특정 실시양태에서 본 발명의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 유도체 또는 이들 화합물을 포함하는 제약상 허용되는 제제는 또한 HBV 감염 및 다른 관련 상태 예컨대 항-HBV 항체 양성 및 HBV-양성 상태, HBV, 간경변증, 급성 간염, 전격성 간염, 만성 지속성 간염 및 피로에 의해 유발된 만성 간 염증의 예방 및 치료에 유용하다. 이들 화합물 또는 제제는 또한 항-HBV 항체 또는 HBV-항원 양성이거나 또는 HBV에 노출된 적이 있는 개체에서 임상적 질병의 진행을 예방 또는 지연시키기 위해 예방적으로 사용될 수 있다.

특정 실시양태에서, 상태는 면역 반응과 연관된다.

피부 접촉성 과민성 및 천식은 유의한 이환율과 연관될 수 있는 면역 반응의 단 2가지의 예시이다. 다른 것은 아토피성 피부염, 습진, 쇼그렌 증후군에 속발성인 건성 각결막염을 포함하는 쇼그렌 증후군, 원형 탈모증, 절지동물 교상 반응으로 인한 알레르기 반응, 크론병, 아프타성 궤양, 홍채염, 결막염, 각결막염, 궤양성 결장염, 피부 홍반성 루푸스, 경피증, 질염, 직장염, 및 약물 발진을 포함한다. 이들 상태는 하기 증상 또는 징후 중 어느 하나 이상을 생성할 수 있다: 가려움증, 종창, 발적, 물집, 딱지, 궤양화, 통증, 낙설, 갈라짐, 탈모, 반흔형성 또는 피부, 눈 또는 점막을 포함하는 유체의 삼출.

일반적으로 아토피성 피부염, 및 습진에서, 피부 내로 면역적으로 매개된 백혈구 침윤 (특히 단핵 세포, 림프구, 호중구 및 호산구의 침윤)은 중요하게 이들 질환의 발병기전에 기여한다. 만성 습진은 또한 표피의 유의한 과다증식과 연관된다. 면역적으로 매개된 백혈구 침윤은 또한 피부 이외의 다른 부위 예컨대 천식 시 기도 및 건성 각결막염 시 눈의 눈물샘에서 발생한다.

한 비-제한적인 실시양태에서 본 발명의 화합물은 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 습진성 피부염, 건선, 쇼그렌 증후군에 속발성인 건성 각결막염을 포함하는 쇼그렌 증후군, 원형 탈모증, 절지동물 교상 반응으로 인한 알레르기 반응, 크론병, 아프타성 궤양, 홍채염, 결막염, 각결막염, 궤양성 결장염, 천식, 알레르기성 천식, 피부 홍반성 루푸스, 경피증, 질염, 직장염, 및 약물 발진을 치료하는데 국소 작용제로서 사용된다. 신규 방법은 또한 질환 예컨대 균상 식육종에서 악성 백혈구만큼 피부의 침윤을 감소시키는데 유용할 수 있다. 이들 화합물은 또한 화합물을 눈에 국소로 투여함으로써, 이를 앓는 환자에서 수분 부족성 안구 건조 상태 (예컨대 면역 매개 각결막염)를 치료하는데 사용될 수 있다.

특정 실시양태에서, CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성과 연관된 상태는 퇴행성 장애, 예를 들어 알츠하이머병 (AD) 또는 파킨슨병이다.

또 다른 측면에서, β-카테닌 경로-연관 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 (예컨대 중수소화 유도체) 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 상태를 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 측면에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 (예컨대 중수소화 유도체) 또는 전구약물을 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 β-카테닌 경로를 조절하는 방법 (예를 들어, 베타-카테닌 표적 유전자의 발현을 억제하는 것에 의함)이 제공된다. 특정 실시양태에서, 방법은 시험관내 방법이다. 특정 실시양태에서, 방법은 생체내 방법이다.

또 다른 측면에서, JAK-STAT 경로-연관 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 (예컨대 중수소화 유도체) 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 상태를 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 측면에서, 세포와, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 STAT1 활성을 조절하는 방법 (예를 들어, JAK-STAT 경로에서 STAT1 S727의 인산화를 억제하여, 특정한 STAT1-연관 유전자의 상향- 또는 하향-조절을 유도하는 것에 의함)이 제공된다. 특정 실시양태에서, 방법은 시험관내 방법이다. 특정 실시양태에서, 방법은 생체내 방법이다.

핵 CDK, 예컨대 CDK8이 BMP 및 TGF-베타에서 SMAD 전사 활성화 및 전환을 일으킨다는 것이 보고된 바 있다. 예를 들어, 문헌 [Alarcon et al., Cell (2009), 139: 757-769]을 참조한다. 따라서, 또 다른 측면에서, TGF-베타/BMP 경로-연관 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 (예컨대 중수소화 유도체) 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 상태를 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 측면에서, 세포와, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 TGF-베타/BMP 경로를 조절하는 방법 (예를 들어, TGF-베타/BMP 경로에서 CDK8/CDK19 인산화 SMAD 단백질을 억제하여, 특정한 SMAD 단백질-연관 유전자의 상향- 또는 하향-조절을 유도하는 것에 의함)이 제공된다. 특정 실시양태에서, 방법은 시험관내 방법이다. 특정 실시양태에서, 방법은 생체내 방법이다.

CDK8은 HIF-1-A (HIF-1-알파) 표적 유전자의 유도시 역할을 하는, 저산소증 반응의 조절에 결부되어 있다. 이들 유전자는 종양 유지 및 성장에 중요한 과정인 혈관신생, 당분해, 대사 적응, 및 세포 생존에 수반된다. 예를 들어, 문헌 [Galbraith, et al., Cell 153:1327-1339]을 참조한다. 따라서, 한 측면에서, 저산소증과 연관된 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 (예컨대 중수소화 유도체) 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 상태를 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 측면에서, 저산소증 손상의 감소를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 (예컨대 중수소화 유도체) 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 손상을 감소시키는 방법이 제공된다. 또 다른 측면에서, 세포와, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 HIF-1-A (HIF-1-알파) 활성을 조절하는 방법 (예를 들어, HIF-1-알파 연관 유전자의 발현을 억제하는 것에 의함)이 제공된다. 특정 실시양태에서, 방법은 시험관내 방법이다. 특정 실시양태에서, 방법은 생체내 방법이다.

또 다른 측면에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 세포와 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 아포토시스를 유도하는 BIM 발현 (예를 들어, BCLC2L11 발현)을 증가시키는 방법이 제공된다. 특정 실시양태에서, 방법은 시험관내 방법이다. 특정 실시양태에서, 방법은 생체내 방법이다. BCL2L11 발현은 세포에서 엄중히 조절된다. BCL2L11은 BIM, 아폽토시스촉진 단백질을 코딩한다. BCL2L11은 많은 암에서 하향조절되고 BIM은 만성 골수성 백혈병 (CML) 및 비소세포 폐암 (NSCLC)을 포함한 많은 암에서 억제되고, BCL2L11 발현의 그러한 억제는 티로신 키나제 억제제에 내성을 부여할 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Ng et al., Nat. Med. (2012) 18:521-528]을 참조한다.

또 다른 측면에서, 혈관신생과 연관된 상태, 예컨대, 예를 들어 당뇨병성 상태 (예를 들어, 당뇨병성 망막병증), 염증성 상태 (예를 들어, 류마티스 관절염), 황반 변성, 비만, 아테롬성동맥경화증 또는 증식성 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 장애를 치료하는 방법이 제공된다.

본원에 사용된 "당뇨병성 상태"는 당뇨병 및 당뇨병전기를 지칭한다. 당뇨병은 신체가 충분한 인슐린을 생산하지 못하기 때문에, 또는 세포가 생산된 인슐린에 반응하지 않기 때문에 사람이 높은 혈당을 갖게 되는 일군의 대사 질환을 지칭한다. 이러한 높은 혈당은 다뇨 "빈뇨", 다음증 "갈증 증가" 및 대식증 "공복감 증가"의 통상의 증상을 발생시킨다. 여러 유형의 당뇨병이 존재한다. 제I형 당뇨병은 신체가 인슐린을 생산하지 못해 발생하고, 현재 사람에게 인슐린을 주사하거나 또는 인슐린 펌프를 착용하게 할 것을 요구한다. 제2형 당뇨병은 세포가 인슐린을 적절하게 사용하지 못하고, 때때로 절대적 인슐린 결핍이 수반되는 상태인 인슐린 저항성으로 인해 발생한다. 임신성 당뇨병은 이전에 당뇨병 진단을 받은 적이 없는 임산부에서 높은 혈액 글루코스 수준이 발생하는 경우에 생긴다. 당뇨병의 다른 형태는 인슐린 분비의 유전적 결함으로 인한 선천성 당뇨병, 낭성 섬유증-관련 당뇨병, 고용량의 글루코코르티코이드에 의해 유발되는 스테로이드 당뇨병, 및 몇몇 형태의 단일유전자 당뇨병, 예를 들어 연소자의 성인형 당뇨병 (예를 들어, MODY 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10)을 포함한다. 당뇨병전기는 사람의 혈액 글루코스 수준이 정상보다는 높지만 당뇨병으로 진단하기에는 충분히 높지 않은 경우에 발생하는 상태를 나타낸다.

모든 형태의 당뇨병은 장기 합병증의 위험을 증가시킨다 (본원에 당뇨병 상태의 "연관된 합병증"으로 지칭됨). 이들은 전형적으로 수년 후에 발생하지만, 그 시점 이전에 달리 진단받은 적이 없는 사람에서의 최초의 증상일 수 있다. 주요 장기 합병증은 혈관 손상과 관련된다. 당뇨병은 심혈관 질환 및 대혈관 질환, 예컨대 허혈성 심장 질환 (협심증, 심근경색), 졸중 및 말초 혈관 질환의 위험을 배가시킨다. 당뇨병은 또한 미세혈관 합병증, 예를 들어 소혈관 손상을 일으킨다. 눈의 망막에서의 혈관 형성에 영향을 주는 당뇨병성 망막병증은, 시각적 증상, 시력 감소, 및 잠재적으로는 실명으로 이어질 수 있다. 당뇨병이 신장에 영향을 준 당뇨병성 신병증은, 신장 조직에서의 반흥형성 변화, 소변 내의 단백질의 소량 또는 점진적으로 보다 많은 양의 단백질의 손실, 결국에는 투석을 필요로 하는 만성 신장 질환으로 이어질 수 있다. 당뇨병성 신경병증은 신경계가 당뇨병에 영향을 받아 발생하고, 가장 통상적으로 족부의 무감각, 아린감 및 통증을 유발하며, 또한 변경된 감각으로 인해 피부 손상의 위험이 증가한다. 하지의 혈관 질환과 함께, 신경병증은 치료하기 어렵고 때로는 절단수술을 필요로 할 수 있는 당뇨병-관련 족부 문제, 예를 들어 당뇨병성 족부 궤양의 위험을 유발한다.

특정 실시양태에서, 연관된 합병증은 당뇨망막병증이다. 예를 들어, 특정 실시양태에서, 당뇨병성 망막병증의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 당뇨병성 망막병증을 치료하는 방법이 제공된다.

특정 실시양태에서, 혈관신생과 연관된 상태는 황반 변성이다. 특정 실시양태에서, 황반 변성의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는 황반 변성을 치료하는 방법이 제공된다.

특정 실시양태에서, 혈관신생과 연관된 상태는 비만이다. 본원에 사용된 바와 같이, 본원에 사용된 바와 같은 "비만" 및 "비만한"은, 세계 보건 기구에 의해 정의된 바와 같은 부류 I 비만, 부류 II 비만, 부류 III 비만 및 비만 전단계 (예를 들어, "과체중")를 지칭한다. 특정 실시양태에서, 비만의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 비만을 치료하는 방법이 제공된다.

특정 실시양태에서, 혈관신생과 연관된 상태는 아테롬성동맥경화증이다. 특정 실시양태에서, 아테롬성동맥경화증의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 아테롬성동맥경화증을 치료하는 방법이 제공된다.

특정 실시양태에서, 혈관신생과 연관된 상태는 증식성 장애이다. 특정 실시양태에서, 증식성 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 투여하는 것을 포함하는, 증식성 장애를 치료하는 방법이 제공된다.

예시적인 증식성 장애는 종양 (예를 들어, 고형 종양), 양성 신생물, 전암성 신생물 (상피내 암종) 및 악성 신생물 (암)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

예시적인 암은, 청신경종, 선암종, 부신암, 항문암, 혈관육종 (예를 들어, 림프관육종, 림프관내피육종, 혈관육종), 충수암, 양성 단일클론성 감마글로불린혈증, 담도암 (예를 들어, 담관암종), 방광암, 유방암 (예를 들어, 유방의 선암종, 유방의 유두상 암종, 유선암, 유방의 수질성 암종), 뇌암 (예를 들어, 수막종; 신경교종, 예를 들어, 성상세포종, 핍지교종; 수모세포종), 기관지암, 유암종, 자궁경부암 (예를 들어, 자궁경부 선암종), 융모막암종, 척삭종, 두개인두종, 결장직장암 (예를 들어, 결장암, 직장암, 결장직장 선암종), 상피 암종, 상의세포종, 내피육종 (예를 들어, 카포시 육종, 다발성 특발성 출혈성 유육종), 자궁내막암 (예를 들어, 자궁암, 자궁 육종), 식도암 (예를 들어, 식도의 선암종, 바렛 선암종), 유잉 육종, 안암 (예를 들어, 안내 흑색종, 망막모세포종), 가족성 과다호산구증가증, 담낭암, 위암 (예를 들어, 위 선암종), 위장관 기질 종양 (GIST), 두경부암 (예를 들어, 두경부 편평 세포 암종, 구강암 (예를 들어, 구강 편평 세포 암종 (OSCC), 인후암 (예를 들어, 후두암, 인두암, 비인두암, 구인두암)), 조혈암 (예를 들어, 백혈병 예컨대 급성 림프구성 백혈병 (ALL) - 또한 급성 림프모구성 백혈병 또는 급성 림프성 백혈병 (예를 들어, B-세포 ALL, T-세포 ALL), 급성 골수구성 백혈병 (AML) (예를 들어, B-세포 AML, T-세포 AML), 만성 골수구성 백혈병 (CML) (예를 들어, B-세포 CML, T-세포 CML), 및 만성 림프구성 백혈병 (CLL) (예를 들어, B-세포 CLL, T-세포 CLL)로도 공지됨; 림프종, 예컨대 호지킨 림프종 (HL) (예를 들어, B-세포 HL, T-세포 HL) 및 비-호지킨 림프종 (NHL) (예를 들어, B-세포 NHL, 예컨대 미만성 대세포 림프종 (DLCL) (예를 들어, 미만성 대 B-세포 림프종 (DLBCL)), 여포성 림프종, 만성 림프구성 백혈병/소림프구성 림프종 (CLL/SLL), 외투 세포 림프종 (MCL), 변연부 B-세포 림프종 (예를 들어, 점막-연관 림프성 조직 (MALT) 림프종, 결절성 변연부 B-세포 림프종, 비장 변연부 B-세포 림프종), 원발성 종격 B-세포 림프종, 버킷 림프종, 림프형질세포성 림프종 (즉, "발덴스트롬 마크로글로불린혈증")), 모발상 세포 백혈병 (HCL), 면역모세포 대세포 림프종, 전구 B-림프모구 림프종 및 원발성 중추신경계 (CNS) 림프종; 및 T-세포 NHL, 예컨대 전구 T-림프모구성 림프종/백혈병, 말초 T-세포 림프종 (PTCL) (예를 들어, 피부 T-세포 림프종 (CTCL) (예를 들어, 균상식육종, 세자리 증후군), 혈관면역모세포성 T-세포 림프종, 결절외 자연 킬러 T-세포 림프종, 장병증형 T-세포 림프종, 피하 지방층염-유사 T-세포 림프종, 역형성 대세포 림프종); 상기 기재된 바와 같은 1종 이상의 백혈병/림프종의 혼합; 및 다발 골수종 (MM)), 중쇄 질환 (예를 들어, 알파쇄 질환, 감마쇄 질환, 뮤쇄 질환), 혈관모세포종, 염증성 근섬유모세포성 종양, 면역세포성 아밀로이드증, 신장암 (예를 들어, 윌름즈 종양으로 공지된 신모세포종, 신세포 암종), 간암 (예를 들어, 간세포성암 (HCC), 악성 간세포암), 폐암 (예를 들어, 기관지원성 암종, 소세포 폐암 (SCLC), 비소세포 폐암 (NSCLC), 폐의 선암종), 평활근육종 (LMS), 비만세포증 (예를 들어, 전신 비만세포증), 골수형성이상 증후군 (MDS), 중피종, 골수증식성 장애 (MPD) (예를 들어, 진성 다혈구혈증 (PV), 본태성 혈소판증가증 (ET), 골수섬유증 (MF)로 공지된 원인불명 골수 화생 (AMM), 만성 특발성 골수섬유증, 만성 골수구성 백혈병 (CML), 만성 호중성 백혈병 (CNL), 과다호산구성 증후군 (HES)), 신경모세포종, 신경섬유종 (예를 들어, 신경섬유종증 (NF) 1형 또는 2형, 슈반세포종증), 신경내분비암 (예를 들어, 위장췌장 신경내분비 종양 (GEP-NET), 유암종), 골육종, 난소암 (예를 들어, 낭선암종, 난소 배아 암종, 난소 선암종), 유두상 선암종, 췌장암 (예를 들어, 췌장 선암종, 관내 유두상 점액성 신생물 (IPMN), 도세포 종양), 음경암 (예를 들어, 음경 및 음낭의 파제트병), 송과체종, 원시 신경외배엽 종양 (PNT), 전립선암 (예를 들어, 전립선 선암종), 직장암, 횡문근육종, 타액선암, 피부암 (예를 들어, 편평 세포 암종 (SCC), 각화극세포종 (KA), 흑색종, 기저 세포 암종 (BCC)), 소장암 (예를 들어, 충수암), 연부 조직 육종 (예를 들어, 악성 섬유성 조직구증 (MFH), 지방육종, 악성 말초 신경초 종양 (MPNST), 연골육종, 섬유육종, 점액육종), 피지선 암종, 한선 암종, 활막종, 고환암 (예를 들어, 정상피종, 고환 배아성 암종), 갑상선암 (예를 들어, 갑상선의 유두상 암종, 유두갑상선 암종 (PTC), 수질성 갑상선암), 요도암, 질암 및 외음부암 (예를 들어, 외음의 파제트병)을 포함하나 이에 제한되지 않는다.

또 다른 실시양태에서, 장애는 골수이형성 증후군 (MDS)이다.

특정 실시양태에서, 암 또는 종양은 CDK8 및/또는 CDK19 키나제 활성과 연관된다. 특정 실시양태에서, 암 또는 종양은 CDK8 키나제 활성과 연관된다. 특정 실시양태에서, 암 또는 종양은 CDK19 키나제 활성과 연관된다. 특정 실시양태에서, 암 또는 종양은 이상 CDK8 키나제 활성과 연관된다. 특정 실시양태에서, 암 또는 종양은 이상 CDK19 키나제 활성과 연관된다. 특정 실시양태에서, 암 또는 종양은 상승된 CDK8 키나제 활성과 연관된다. 특정 실시양태에서, 암은 상승된 CDK19 키나제 활성과 연관된다.

특정 실시양태에서, 암은 조혈암이다. 특정 실시양태에서, 조혈암은 림프종이다. 특정 실시양태에서, 조혈암은 백혈병이다. 특정 실시양태에서, 백혈병은 급성 골수구성 백혈병 (AML)이다.

특정 실시양태에서, 증식성 장애는 골수증식성 신생물이다. 특정 실시양태에서, 골수증식성 신생물 (MPN)은 원발성 골수섬유증 (PMF)이다.

특정 실시양태에서, 암은 고형 종양이다. 본원에 사용된 바와 같은 고형암은, 대개 낭종 또는 액체 영역을 함유하지 않는 조직의 비정상적인 덩어리를 지칭한다. 고형 종양의 상이한 유형은 이들을 형성하는 세포 유형에 대해 명명된다. 고형암의 부류의 예는, 본원에서 상기 기재된 바와 같은, 육종, 암종, 및 림프종을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 고형암의 추가적 예는 편평 세포 암종, 결장암, 유방암, 전립선암, 폐암, 간암, 췌장암, 및 흑색종을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본 발명의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물은 투여가 용이한 투여 단위 형태 및 균일한 투여량으로 제제화될 수 있다. 그러나, 본원에 기재된 바와 같은 화합물을 포함하는 조성물의 총 1일 용법은 타당한 의학적 판단 범위 내에서 담당의에 의해 결정될 것으로 이해될 것이다. 임의의 특정한 대상체 또는 유기체에 대한 구체적 치료 유효 용량 수준은 치료되는 질환, 장애, 또는 상태 및 장애의 중증도; 사용되는 구체적 화합물의 활성; 사용되는 특정 조성물; 대상체의 연령, 체중, 전반적 건강, 성별 및 식이; 투여 시간, 투여 경로, 및 사용되는 구체적 화합물의 배출 속도; 치료 지속기간; 사용되는 구체적 화합물과 조합하여 또는 동시에 사용되는 약물; 및 의학 분야에 널리 공지된 유사 인자를 포함한 여러가지 인자에 따라 달라질 것이다.

본원에 제공된 화합물 및 조성물은 경장 (예를 들어, 경구), 비경구, 정맥내, 근육내, 동맥내, 수질내, 척수강내, 피하, 뇌실내, 경피, 피내, 직장, 질내, 복강내, 국소 (분말, 연고, 크림 및/또는 점적제에 의해서와 같이), 점막, 비강, 협측, 설하를 포함한 임의의 경로에 의해; 기관내 점적주입, 기관지 점적주입 및/또는 흡입에 의해; 및/또는 경구 스프레이, 비강 스프레이 및/또는 에어로졸로서 투여될 수 있다. 구체적으로 고려되는 경로는 경구 투여, 정맥내 투여 (예를 들어, 전신 정맥내 주사), 혈액 및/또는 림프 공급을 통한 국부 투여, 및/또는 이환 부위로의 직접 투여이다. 일반적으로, 투여의 가장 적절한 경로는 작용제의 성질 (예를 들어, 위장관 환경에서의 그의 안정성), 대상체의 상태 (예를 들어, 대상체가 경구 투여를 인용할 수 있는지 여부)를 포함한 여러가지 인자에 따라 달라질 것이다.

유효량을 달성하기 위해 필요한 화합물의 정확한 양은, 예를 들어 대상체의 종, 연령 및 일반적 상태, 부작용 또는 장애의 중증도, 특정 화합물(들)의 정체, 투여 방식 등에 따라 대상체마다 달라질 것이다. 목적하는 투여량은 1일 3회, 1일 2회, 1일 1회, 격일, 3일마다, 매주, 2주마다, 3주마다 또는 4주마다를 포함하여, 건강 관리 제공자에 의해 유용하도록 결정된 임의의 빈도를 사용하여 전달될 수 있다. 특정 실시양태에서, 목적하는 투여량은 다중 투여 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14회 또는 그 초과의 투여)를 사용하여 전달될 수 있다.

특정 실시양태에서, 1일에 1회 이상 투여하기 위한 화합물의 유효량은 단위 투여 형태당 약 0.0001 mg 내지 약 3000 mg, 약 0.0001 mg 내지 약 2000 mg, 약 0.0001 mg 내지 약 1000 mg, 약 0.001 mg 내지 약 1000 mg, 약 0.01 mg 내지 약 1000 mg, 약 0.1 mg 내지 약 1000 mg, 약 1 mg 내지 약 1000 mg, 약 1 mg 내지 약 100 mg, 약 0.1 mg 내지 약 10 mg, 또는 약 0.1 mg 내지 약 15 mg의 화합물을 포함할 수 있다. 특정 실시양태에서, 투여를 위한 활성제의 유효량은 적어도 약 1 mg, 약 5 mg, 약 10 mg, 약 15 mg, 약 20 mg, 약 25 mg, 약 30 mg, 약 40 mg, 약 50 mg, 약 60 mg, 약 70 mg, 약 75 mg, 약 80 mg, 약 90 mg, 약 100 mg, 약 125 mg, 약 150 mg, 약 175 mg, 약 200 mg, 약 225 mg, 약 250 mg, 약 275 mg, 약 300 mg, 약 325 mg, 약 350 mg, 약 375 mg, 약 400 mg, 약 425 mg, 약 450 mg, 약 475 mg, 약 500 mg, 약 550 mg, 약 600 mg, 약 650 mg, 약 700 mg, 약 750 mg, 약 800 mg, 약 850 mg, 약 900 mg, 약 950 mg, 또는 약 1000 mg을 포함한다.

특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 경구로 또는 비경구로 성인 인간에게, 1일에 대상체 체중의, 약 0.001 mg/kg 내지 약 100 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 50 mg/kg, 바람직하게는 약 0.1 mg/kg 내지 약 40 mg/kg, 약 0.5 mg/kg 내지 약 30 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 및 약 0.01 mg/kg 내지 약 1 mg/kg으로 1일에 1회 이상 전달하기에 충분한 투여 수준으로 투여하여 목적하는 치료 효과를 얻을 수 있다.

본원에 기재된 바와 같은 용량 범위는 제공된 제약 조성물의 성인에 대한 투여 지침을 제공하는 것으로 인지될 것이다. 예를 들어, 유아 또는 청소년에게 투여되는 양은 의료 진료의 또는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있고, 성인에게 투여되는 것보다 더 적거나 그와 동일할 수 있다.

또한, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조성물은 하나 이상의 추가의 치료 활성제와 조합되어 투여될 수 있는 것으로 인지될 것이다. 화합물 또는 조성물은 그의 생체이용률을 개선하고/거나, 그의 대사를 감소 및/또는 변형시키고/거나, 그의 배출을 억제하고/거나, 신체내 그의 분포를 변형시키는 추가의 치료 활성제와 조합되어 투여될 수 있다. 또한, 사용되는 요법이 동일한 장애에 대해 목적하는 효과를 달성할 수 있는 것 (예를 들어, 화합물은 항염증제, 항암제 등과 조합으로 투여될 수 있는 것), 및/또는 이것이 상이한 효과를 달성할 수 있는 것 (예를 들어, 유해 부작용의 제어, 예를 들어 항구토제에 의해 제어된 구토)으로 인식될 것이다.

화합물 또는 조성물은 하나 이상의 추가의 치료 활성제와 공동으로, 이전 또는 이후에 투여될 수 있다. 일반적으로, 각각의 작용제는 그러한 작용제에 대해 결정된 용량 및/또는 시간 스케줄로 투여될 것이다. 추가로, 이러한 조합물에서 사용되는 추가의 치료 활성제는 단일 조성물로 함께 투여되거나 또는 상이한 조성물로 개별적으로 투여될 수 있는 것으로 인지될 것이다. 요법에 사용하기 위한 특정한 조합물은 본 발명의 화합물과 추가의 치료 활성제의 상용성 및/또는 달성하고자 하는 목적하는 치료 효과를 고려할 것이다. 일반적으로, 조합물에서 사용되는 추가의 치료 활성제는 이들이 개별적으로 사용되는 경우의 수준을 초과하지 않는 수준으로 사용되는 것으로 기대된다. 일부 실시양태에서, 조합되어 이용되는 수준은 개별적으로 이용되는 것들보다 낮을 것이다.

예시적인 추가의 치료 활성제는 유기 소분자 예컨대 약물 화합물 (예를 들어, 미국 연방 규정집 (CFR)에 제공된 바와 같은 미국 식품 의약품국에 의해 승인된 화합물), 펩티드, 단백질, 탄수화물, 모노사카라이드, 올리고사카라이드, 폴리사카라이드, 핵단백질, 뮤코단백질, 지단백질, 합성 폴리펩티드 또는 단백질, 단백질에 연결된 소분자, 당단백질, 스테로이드, 핵산, DNA, RNA, 뉴클레오티드, 뉴클레오시드, 올리고뉴클레오티드, 안티센스 올리고뉴클레오티드, 지질, 호르몬, 비타민 및 세포를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 특정 실시양태에서, 예시적인 추가적 치료 활성제는 항암제, 예를 들어 방사서 요법 및/또는 하나 이상의 화학요법제이다.

V. 조합 요법

한 측면에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 (예컨대 중수소화 유도체) 또는 전구약물을, 적어도 1종의 추가의 치료제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는 치료 요법이 제공된다. 본원에 개시된 조합 및/또는 교대는 비정상적 세포 증식성 장애의 치료에서 유익한, 상가적 또는 상승작용적 효과를 위해 투여될 수 있다.

이러한 실시양태의 한 측면에서, 제2 활성 화합물은 체크포인트 억제제를 포함하나 이에 제한되지 않는 면역 조정제이다. 본원에 기재된 방법에 사용하기 위한 체크포인트 억제제는 PD-1 억제제, PD-L1 억제제, PD-L2 억제제, CTLA-4 억제제, LAG-3 억제제, TIM-3 억제제, 및 T-세포 활성화의 V-도메인 Ig 억제자 (VISTA) 억제제 또는 그의 조합을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

한 실시양태에서, 체크포인트 억제제는 PD-1 수용체에 결합함으로써 PD-1 및 PD-L1의 상호작용을 차단하고, 차례로 면역 억제를 억제하는 PD-1 억제제이다. 한 실시양태에서, 체크포인트 억제제는 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, AMP-224 (아스트라제네카(AstraZeneca) 및 메드이뮨(MedImmune)), PF-06801591 (화이자(Pfizer)), MEDI0680 (아스트라제네카), PDR001 (노파르티스(Novartis)), REGN2810 (레게네론(Regeneron)), SHR-12-1 (지앙수 헨루리 메디칼 캄파니 앤드 인사이트 코포레이션(Jiangsu Hengrui Medicine Company and Incyte Corporation)), TSR-042 (테사로(Tesaro)) 및 PD-L1/VISTA 억제제 CA-170 (큐리스 인크.( Curis Inc.))으로부터 선택된 PD-1 체크포인트 억제제이다.

한 실시양태에서, 체크포인트 억제제는 PD-L1 수용체에 결합함으로써 PD-1과 PD-L1의 상호작용을 차단하고, 차례로 면역 억제를 억제하는 PD-L1 억제제이다. PD-L1 억제제는 아벨루맙, 아테졸리주맙, 두르발루맙, KN035 및 BMS-936559 (브리스톨-마이어스 스큅(Bristol-Myers Squibb))를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

이러한 실시양태의 한 측면에서, 체크포인트 억제제는 CTLA-4에 결합하고, 면역 억제를 억제하는 CTLA-4 체크포인트 억제제이다. CTLA-4 억제제는 이필리무맙, 트레멜리무맙 (아스트라제네카 및 메드이뮨), AGEN1884 및 AGEN2041 (아제누스(Agenus))를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

또 다른 실시양태에서, 체크포인트 억제제는 LAG-3 체크포인트 억제제이다. LAG-3 체크포인트 억제제의 예는 BMS-986016 (브리스톨-마이어스 스큅), GSK2831781 (글락소스미스클라인(GlaxoSmithKline)), IMP321 (프리마 바이오메드(Prima BioMed)), LAG525 (노파르티스) 및 이중 PD-1 및 LAG-3 억제제 MGD013 (마크로제닉스(MacroGenics))를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 이러한 실시양태의 또 다른 측면에서, 체크포인트 억제제는 TIM-3 체크포인트 억제제이다. 구체적인 TIM-3 억제제는 TSR-022 (테사로)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

또 다른 실시양태에서, 조합 요법에 사용하기 위한 화합물은 LAG-3 표적화 리간드이다. 또 다른 실시양태에서, 조합 요법에 사용하기 위한 화합물은 TIM-3 표적화 리간드이다. 또 다른 실시양태에서, 조합 요법에 사용하기 위한 화합물은 아로마타제 억제제이다. 또 다른 실시양태에서, 조합 요법에 사용하기 위한 화합물은 프로게스틴 수용체 표적화 리간드이다. 또 다른 실시양태에서, 조합 요법에 사용하기 위한 화합물은 CYP3A4 표적화 리간드이다. 또 다른 실시양태에서, 조합 요법에 사용하기 위한 화합물은 TORC1 또는 TORC2 표적화 리간드이다.

구체적 실시양태에서, 치료 요법은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을, 적어도 1종의 추가의 키나제 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함한다. 한 실시양태에서, 적어도 1종의 추가의 키나제 억제제는 포스포이노시티드 3-키나제 (PI3K) 억제제, 브루톤 티로신 키나제 (BTK) 억제제, 또 다른 시클린-의존성 키나제 억제제 또는 비장 티로신 키나제 (Syk) 억제제 또는 그의 조합으로부터 선택된다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물은 PIk3 억제제와 투여 형태 내에서 조합된다.

본 발명에 사용될 수 있는 PI3k 억제제는 널리 공지되어 있다. PI3 키나제 억제제의 예는 워트만닌, 데메톡시비리딘, 페리포신, 이델라리십, 픽틸리십, 팔로미드 529, ZSTK474, PWT33597, CUDC-907, 및 AEZS-136, 두벨리십, GS-9820, GDC-0032 (2-[4-[2-(2-이소프로필-5-메틸-1,2,4-트리아졸-3-일)-5,6-디히드로이미다조[1,2-d][1,4]벤족사제핀-9-일]피라졸-1-일]-2-메틸프로판아미드), MLN-1117 ((2R)-1-페녹시-2-부타닐 히드로겐 (S)-메틸포스포네이트; 또는 메틸(옥소) {[(2R)-1-페녹시-2-부타닐]옥시}포스포늄)), BYL-719 ((2S)-N1-[4-메틸-5-[2-(2,2,2-트리플루오로-1,1-디메틸에틸)-4-피리디닐]-2-티아졸릴]-1,2-피롤리딘디카르복스아미드), GSK2126458 (2,4-디플루오로-N-{2-(메틸옥시)-5-[4-(4-피리다지닐)-6-퀴놀리닐]-3-피리디닐}벤젠술폰아미드), TGX-221 ((±)-7-메틸-2-(모르폴린-4-일)-9-(1-페닐아미노에틸)-피리도[1,2-a]-피리미딘-4-온), GSK2636771 (2-메틸-1-(2-메틸-3-(트리플루오로메틸)벤질)-6-모르폴리노-1H-벤조[d]이미다졸-4-카르복실산 디히드로클로라이드), KIN-193 ((R)-2-((1-(7-메틸-2-모르폴리노-4-옥소-4H-피리도[1,2-a]피리미딘-9-일)에틸)아미노)벤조산), TGR-1202/RP5264, GS-9820 ((S)-1-(4-((2-(2-아미노피리미딘-5-일)-7-메틸-4-모노히드록시프로판-1-온), GS-1101 (5-플루오로-3-페닐-2-([S)]-1-[9H-퓨린-6-일아미노]-프로필)-3H-퀴나졸린-4-온), AMG-319, GSK-2269557, SAR245409 (N-(4-(N-(3-((3,5-디메톡시페닐)아미노)퀴녹살린-2-일)술파모일)페닐)-3-메톡시-4 메틸벤즈아미드), BAY80-6946 (2-아미노-N-(7-메톡시-8-(3-모르폴리노프로폭시)-2,3-디히드로이미다조[1,2-c]퀴나즈), AS 252424 (5-[1-[5-(4-플루오로-2-히드록시-페닐)-푸란-2-일]-메트-(Z)-일리덴]-티아졸리딘-2,4-디온), CZ 24832 (5-(2-아미노-8-플루오로-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-6-일)-N-tert-부틸피리딘-3-술폰아미드), 부파를리십 (5-[2,6-디(4-모르폴리닐)-4-피리미디닐]-4-(트리플루오로메틸)-2-피리딘아민), GDC-0941 (2-(1H-인다졸-4-일)-6-[[4-(메틸술포닐)-1-피페라지닐]메틸]-4-(4-모르폴리닐)티에노[3,2-d]피리미딘), GDC-0980 ((S)-1-(4-((2-(2-아미노피리미딘-5-일)-7-메틸-4-모르폴리노티에노[3,2-d]피리미딘-6 일)메틸)피페라진-1-일)-2-히드록시프로판-1-온 (RG7422로도 공지됨)), SF1126 ((8S,14S,17S)-14-(카르복시메틸)-8-(3-구아니디노프로필)-17-(히드록시메틸)-3,6,9,12,15-펜타옥소-1-(4-(4-옥소-8-페닐-4H-크로멘-2-일)모르폴리노-4-윰)-2-옥사-7,10,13,16-테트라아자옥타데칸-18-오에이트), PF-05212384 (N-[4-[[4-(디메틸아미노)-1-피페리디닐]카르보닐]페닐]-N'-[4-(4,6-디-4-모르폴리닐-1,3,5-트리아진-2-일)페닐]우레아), LY3023414, BEZ235 (2-메틸-2-{4-[3-메틸-2-옥소-8-(퀴놀린-3-일)-2,3-디히드로-1H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-1-일]페닐}프로판니트릴), XL-765 (N-(3-(N-(3-(3,5-디메톡시페닐아미노)퀴녹살린-2-일)술파모일)페닐)-3-메톡시-4-메틸벤즈아미드), 및 GSK1059615 (5-[[4-(4-피리디닐)-6-퀴놀리닐]메틸렌]-2,4-티아졸리덴디온), PX886 ([(3aR,6E,9S,9aR,10R,11aS)-6-[[비스(프로프-2-에닐)아미노]메틸리덴]-5-히드록시-9-(메톡시메틸)-9a,11a-디메틸-1,4,7-트리옥소-2,3,3a,9,10,11-헥사히드로인데노[4,5h]이소크로멘-10-일] 아세테이트 (소놀리십으로도 공지됨))을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명에 사용하기 위한 BTK 억제제는 널리 공지되어 있다. BTK 억제제의 예는 이브루티닙 (PCI-32765로도 공지됨)(임브루비카(Imbruvica)™)(1-[(3R)-3-[4-아미노-3-(4-페녹시-페닐)피라졸로[3,4-d]피리미딘-1-일]피페리딘-1-일]프로프-2-엔-1-온), 디아닐리노피리미딘계 억제제 예컨대 AVL-101 및 AVL-291/292 (N-(3-((5-플루오로-2-((4-(2-메톡시에톡시)페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)페닐)아크릴아미드) (아빌라 테라퓨틱스(Avila Therapeutics)) (그 전문이 본원에 포함되는 미국 특허 공개 US2011/0117073 참조), 다사티닙 ([N-(2-클로로-6-메틸페닐)-2-(6-(4-(2-히드록시에틸)피페라진-1-일)-2-메틸피리미딘-4-일아미노)티아졸-5-카르복스아미드], LFM-A13 (알파-시아노-베타-히드록시-베타-메틸-N-(2,5-디브로모페닐) 프로펜아미드), GDC-0834 ([R-N-(3-(6-(4-(1,4-디메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-디히드로피라진-2-일)-2-메틸페닐)-4,5,6,7-테트라히드로벤조[b]티오펜-2-카르복스아미드], CGI-560 4-(tert-부틸)-N-(3-(8-(페닐아미노)이미다조[1,2-a]피라진-6-일)페닐)벤즈아미드, CGI-1746 (4-(tert-부틸)-N-(2-메틸-3-(4-메틸-6-((4-(모르폴린-4-카르보닐)페닐)아미노)-5-옥소-4,5-디히드로피라진-2-일)페닐)벤즈아미드), CNX-774 (4-(4-((4-((3-아크릴아미도페닐)아미노)-5-플루오로피리미딘-2-일)아미노)페녹시)-N-메틸피콜린아미드), CTA056 (7-벤질-1-(3-(피페리딘-1-일)프로필)-2-(4-(피리딘-4-일)페닐)-1H-이미다조[4,5-g]퀴녹살린-6(5H)-온), GDC-0834 ((R)-N-(3-(6-((4-(1,4-디메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐)아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-디히드로피라진-2-일)-2-메틸페닐)-4,5,6,7-테트라히드로벤조[b]티오펜-2-카르복스아미드), GDC-0837 ((R)-N-(3-(6-((4-(1,4-디메틸-3-옥소피페라진-2-일)페닐)아미노)-4-메틸-5-옥소-4,5-디히드로피라진-2-일)-2-메틸페닐)-4,5,6,7-테트라히드로벤조[b]티오펜-2-카르복스아미드), HM-71224, ACP-196, ONO-4059 (오노 파마슈티칼스(Ono Pharmaceuticals)), PRT062607 (4-((3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)페닐)아미노)-2-(((1R,2S)-2-아미노시클로헥실)아미노)피리미딘-5-카르복스아미드 히드로클로라이드), QL-47 (1-(1-아크릴로일인돌린-6-일)-9-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤조[h][1,6]나프티리딘-2(1H)-온), 및 RN486 (6-시클로프로필-8-플루오로-2-(2-히드록시메틸-3-{1-메틸-5-[5-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리딘-2-일아미노]-6-옥소-1,6-디히드로-피리딘-3-일}-페닐)-2H-이소퀴놀린-1-온), 및 BTK 활성을 억제할 수 있는 다른 분자, 예를 들어 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 문헌 [Akinleye et ah, Journal of Hematology & Oncology, 2013, 6:59]에 개시된 이들 BTK 억제제를 포함한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물은 BTK 억제제와 투여 형태 내에서 조합된다.

한 실시양태에서, 추가의 시클린-의존성 키나제 억제제는 CDK7 억제제 예컨대 THZ1 (N-[3-[[5-클로로-4-(1H-인돌-3-일)피리미딘-2-일]아미노]페닐]-4-[[(E)-4-(디메틸아미노)부트-2-에노일]아미노]벤즈아미드)이다. 대안적 실시양태에서, 추가의 시클린-의존성 키나제 억제제는 CDK9 억제제 예컨대 플라보피리돌 (알보시딥)이다.

따라서 한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 Syk 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 C를 유효량의 Syk 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 Syk 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 Syk 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체를 유효량의 Syk 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 Syk 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 Syk 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 이마티닙 (글리벡)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 이마티닙 (글리벡)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 이마티닙 (글리벡)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 이마티닙 (글리벡)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 이마티닙 (글리벡)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 이마티닙 (글리벡)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 이마티닙 (글리벡)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명에 사용하기 위한 Syk 억제제는 널리 공지되어 있고, 예를 들어, 세르둘라티닙 (4-(시클로프로필아미노)-2-((4-(4-(에틸술포닐)피페라진-1-일)페닐)아미노)피리미딘-5-카르복스아미드), 엔토스플레티닙 (6-(1H-인다졸-6-일)-N-(4-모르폴리노페닐)이미다조[1,2-a]피라진-8-아민), 포스타마티닙 ([6-({5-플루오로-2-[(3,4,5-트리메톡시페닐)아미노]-4-피리미디닐}아미노)-2,2-디메틸-3-옥소-2,3-디히드로-4H-피리도[3,2-b][1,4]옥사진-4-일]메틸 디히드로겐 포스페이트), 포스타마티닙 이나트륨 염 (소듐 (6-((5-플루오로-2-((3,4,5-트리메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-2,2-디메틸-3-옥소-2H-피리도[3,2-b][1,4]옥사진-4(3H)-일)메틸 포스페이트), BAY 61-3606 (2-(7-(3,4-디메톡시페닐)-이미다조[1,2-c]피리미딘-5-일아미노)-니코틴아미드 HCl), RO9021 (6-[(1R,2S)-2-아미노-시클로헥실아미노]-4-(5,6-디메틸-피리딘-2-일아미노)-피리다진-3-카르복실산 아미드), 이마티닙 (글리벡; 4-[(4-메틸피페라진-1-일)메틸]-N-(4-메틸-3-{[4-(피리딘-3-일)피리미딘-2-일]아미노}페닐)벤즈아미드), 스타우로스포린, GSK143 (2-(((3R,4R)-3-아미노테트라히드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-(p-톨릴아미노)피리미딘-5-카르복스아미드), PP2 (1-(tert-부틸)-3-(4-클로로페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민), PRT-060318 (2-(((1R,2S)-2-아미노시클로헥실)아미노)-4-(m-톨릴아미노)피리미딘-5-카르복스아미드), PRT-062607 (4-((3-(2H-1,2,3-트리아졸-2-일)페닐)아미노)-2-(((1R,2S)-2-아미노시클로헥실)아미노)피리미딘-5-카르복스아미드 히드로클로라이드), R112 (3,3'-((5-플루오로피리미딘-2,4-디일)비스(아잔디일))디페놀), R348 (3-에틸-4-메틸피리딘), R406 (6-((5-플루오로-2-((3,4,5-트리메톡시페닐)아미노)피리미딘-4-일)아미노)-2,2-디메틸-2H-피리도[3,2-b][1,4]옥사진-3(4H)-온), YM193306 (문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조), 7-아자인돌, 피세아타놀, ER-27319 (그 전문이 본원에 포함된 문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643] 참조), PRT060318 (그 전문이 본원에 포함된 문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643]), 루테올린 (그 전문이 본원에 포함된 문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643]), 아피게닌 (그 전문이 본원에 포함된 문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643]), 퀘르세틴 (그 전문이 본원에 포함된 문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643]), 피세틴 (그 전문이 본원에 포함된 문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643]), 미리세틴 (그 전문이 본원에 포함된 문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643]), 모린 (그 전문이 본원에 포함된 문헌 [Singh et al. Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase (SYK) inhibitors, J. Med. Chem. 2012, 55, 3614-3643])을 포함한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물은 Syk 억제제와 투여 형태 내에서 조합된다.

구체적 실시양태에서, 제공된 치료 방법은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을 적어도 1종의 추가의 화학요법제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함한다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물과 조합되거나 또는 그와 교대되는 적어도 1종의 추가의 화학요법제는 단백질 세포 사멸-1 (PD-1) 억제제이다. PD-1 억제제는 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 니볼루맙 (BMS), 펨브롤리주맙 (머크(Merck)), 피딜리주맙 (큐어테크(CureTech)/테바(Teva)), AMP-244 (암플리뮨(Amplimmune)/GSK), BMS-936559 (BMS), 및 MEDI4736 (로슈(Roche)/제넨테크(Genentech))을 포함한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물은 투여 형태 내에서 PD-1 억제제와 조합된다. 한 실시양태에서 PD-1 억제제는 펨브롤리주맙이다.

한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 PD-1 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 PD-1 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 PD-1 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 PD-1 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 PD-1 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 PD-1 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 PD-1 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

한 실시양태에서, 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 펨브롤리주맙 (키트루다)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 유효량의 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 펨브롤리주맙 (키트루다)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 펨브롤리주맙 (키트루다)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 펨브롤리주맙 (키트루다)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 펨브롤리주맙 (키트루다)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 펨브롤리주맙 (키트루다)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 펨브롤리주맙 (키트루다)과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물과 조합되거나 또는 그와 교대되는 적어도 1종의 추가의 화학요법제는 CTLA-4 억제제이다. CTLA-4 억제제는 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 예를 들어 브리스톨-마이어스 스큅에 의해 시판되는 이필리무맙 (예르보이(Yervoy)) 및 화이자에 의해 시판되는 트레멜리무맙을 포함한다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물과 조합되거나 또는 그와 교대되는 적어도 1종의 추가의 화학요법제는 BET 억제제이다. BET 억제제는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어, JQ1, I-BET 151 (일명 GSK1210151A), I-BET 762 (일명 GSK525762), OTX-015 (일명 MK-8268, IUPAC 6H-티에노[3,2-f][1,2,4]트리아졸로[4,3-a][1,4]디아제핀-6-아세트아미드, 4-(4-클로로페닐)-N-(4-히드록시페닐)-2,3,9-트리메틸-), TEN-010, CPI-203, CPI-0610, RVX-208, 및 LY294002를 포함한다. 한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 위해 본 발명의 화합물과 조합하여 또는 교대로 사용되는 BET 억제제는 JQ1 ((S)-tert-부틸 2-(4-(4-클로로페닐)-2,3,9-트리메틸-6H-티에노[3,2-f][1,2,4]트리아졸로[4,3-a][1,4]디아제핀-6-일)아세테이트)이다. 대안적 실시양태에서 종양 또는 암의 치료를 위해 본 발명의 화합물과 조합하여 또는 교대로 사용되는 BET 억제제는 I-BET 151 (2H-이미다조[4,5-c]퀴놀린-2-온, 7-(3,5-디메틸-4-이속사졸릴)-1,3-디히드로-8-메톡시-1-[(1R)-1-(2-피리디닐)에틸]-)이다.

한 실시양태에서, 추가의 활성제는 소분자 BET 억제제, MK-8628 (CAS 202590-98-5) (6H-티에노(3,2-f)-(1,2,4)트리아졸로(4,3-a)-(1,4)디아제핀-6-아세트아미드, 4-(4-클로로페닐)-N-(4-히드록시페닐)2,3,9-트리메틸, (6S)이다.

한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BET 억제제과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BET 억제제과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BET 억제제과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BET 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BET 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BET 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BET 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

한 실시양태에서, 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 JQ1과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 유효량의 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 JQ1과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 JQ1과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 JQ1과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 JQ1과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 JQ1과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 JQ1과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

한 실시양태에서, 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 I-BET 151과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 유효량의 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 I-BET 151과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 I-BET 151과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 I-BET 151과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 I-BET 151과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 I-BET 151과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 I-BET 151과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물과 조합되거나 또는 그와 교대되는 적어도 1종의 추가의 화학요법제는 MEK 억제제이다. 본 발명에 사용하기 위한 MEK 억제제는 널리 공지되어 있으며, 예를 들어 트라메티닙/GSK1120212 (N-(3-{3-시클로프로필-5-[(2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노]-6,8-디메틸-2,4,7-트리옥소-3,4,6,7-테트라히드로피리도[4,3-d]피리미딘-1(2H-일}페닐)아세트아미드), 셀루메티닙 (6-(4-브로모-2-클로로아닐리노)-7-플루오로-N-(2-히드록시에톡시)-3-메틸벤즈이미다졸-5-카르복스아미드), 피마세르팁/AS703026/MSC 1935369 ((S)-N-(2,3-디히드록시프로필)-3-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)이소니코틴아미드), XL-518/GDC-0973 (1-({3,4-디플루오로-2-[(2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노]페닐}카르보닐)-3-[(2S)-피페리딘-2-일]아제티딘-3-올), 레파메티닙/BAY869766/RDEA119 (N-(3,4-디플루오로-2-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-6-메톡시페닐)-1-(2,3-디히드록시프로필)시클로프로판-1-술폰아미드), PD-0325901 (N-[(2R)-2,3-디히드록시프로폭시]-3,4-디플루오로-2-[(2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노]-벤즈아미드), TAK733 ((R)-3-(2,3-디히드록시프로필)-6-플루오로-5-(2-플루오로-4-아이오도페닐아미노)-8-메틸피리도[2,3-d]피리미딘-4,7(3H,8H)-디온), MEK162/ARRY438162 (5-[(4-브로모-2-플루오로페닐)아미노]-4-플루오로-N-(2-히드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복스아미드), R05126766 (3-[[3-플루오로-2-(메틸술파모일아미노)-4-피리딜]메틸]-4-메틸-7-피리미딘-2-일옥시크로멘-2-온), WX-554, R04987655/CH4987655 (3,4-디플루오로-2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-N-(2-히드록시에톡시)-5-((3-옥소-1,2-옥사지난-2-일)메틸)벤즈아미드), 또는 AZD8330 (2-((2-플루오로-4-아이오도페닐)아미노)-N-(2-히드록시에톡시)-1, 및 5-디메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카르복스아미드)를 포함한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물은 MEK 억제제와 투여 형태 내에서 조합된다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물과 조합되거나 또는 그와 교대되는 적어도 1종의 추가의 화학요법제는 Raf 억제제이다. 본 발명에 사용하기 위한 Raf 억제제는 널리 공지되어 있으며, 예를 들어 베무라페닙 (N-[3-[[5-(4-클로로페닐)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-3-일]카르보닐]-2,4-디플루오로페닐]-1-프로판술폰아미드), 소라페닙 토실레이트 (4-[4-[[4-클로로-3-(트리플루오로메틸)페닐]카르바모일아미노]페녹시]-N-메틸피리딘-2-카르복스아미드;4-메틸벤젠술포네이트), AZ628 (3-(2-시아노프로판-2-일)-N-(4-메틸-3-(3-메틸-4-옥소-3,4-디히드로퀴나졸린-6-일아미노)페닐)벤즈아미드), NVP-BHG712 (4-메틸-3-(1-메틸-6-(피리딘-3-일)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일아미노)-N-(3-(트리플루오로메틸)페닐)벤즈아미드), RAF-265 (1-메틸-5-[2-[5-(트리플루오로메틸)-1H-이미다졸-2-일]피리딘-4-일]옥시-N-[4-(트리플루오로메틸)페닐]벤즈이미다졸-2-아민), 2-브로모알디신 (2-브로모-6,7-디히드로-1H,5H-피롤로[2,3-c]아제핀-4,8-디온), Raf 키나제 억제제 IV (2-클로로-5-(2-페닐-5-(피리딘-4-일)-1H-이미다졸-4-일)페놀), 및 소라페닙 N-옥시드 (4-[4-[[[[4-클로로-3(트리플루오로메틸)페닐]아미노]카르보닐]아미노]페녹시]-N-메틸-2-피리딘카르복스아미드 1-옥시드)를 포함한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물은 Raf 억제제와 투여 형태 내에서 조합된다.

한 실시양태에서, 본 발명의 화합물과 조합되거나 또는 그와 교대되는 적어도 1종의 추가의 화학요법제는 B-세포 림프종 2 (Bcl-2) 단백질 억제제이다. BCL-2 억제제는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어, ABT-199 (4-[4-[[2-(4-클로로페닐)-4,4-디메틸시클로헥스-1-엔-1-일]메틸]피페라진-l-일]-N-[[3-니트로-4-[[(테트라히드로-2H-피란-4-일)메틸]아미노]페닐]술포닐]-2-[(lH- 피롤로[2,3-b]피리딘-5-일)옥시]벤즈아미드), ABT-737 (4-[4-[[2-(4-클로로페닐)페닐]메틸]피페라진-1-일]-N-[4- [[(2R)-4-(디메틸아미노)-1-페닐술파닐부탄-2-일] 아미노]-3- 니트로페닐]술포닐벤즈아미드), ABT-263 ((R)-4-(4-((4'-클로로-4,4-디메틸-3,4,5,6-테트라히드로-[l, l'-비페닐]-2-일)메틸)피페라진-1-일)-N-((4-((4-모르폴리노-1-(페닐티오)부탄-2-일)아미노)-3((트리플루오로메틸)술포닐)페닐)술포닐)벤즈아미드), GX15-070 (오바토클락스 메실레이트, (2Z)-2-[(5Z)-5-[(3,5- 디메틸-lH-피롤-2-일)메틸리덴]-4-메톡시피롤-2-일리덴]인돌; 메탄술폰산))), 2-메톡시-안티마이신 A3, YC137 (4-(4,9-디옥소-4,9-디히드로나프토[2,3-d]티아졸-2-일아미노)-페닐 에스테르), 포고신, 에틸 2-아미노-6-브로모-4-(1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸)-4H-크로멘-3-카르복실레이트, 닐로티닙-d3, TW-37 (N-[4-[[2-(1,1-디메틸에틸)페닐]술포닐]페닐]-2,3,4-트리히드록시-5-[[2-(1-메틸에틸)페닐]메틸]벤즈아미드), 아포고시폴론 (ApoG2), 또는 G3139 (오블리메르센)를 포함한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물은 적어도 1종의 BCL-2 억제제와 투여 형태 내에서 조합된다. 한 실시양태에서 적어도 1종의 BCL-2 억제제는 ABT-199 (베네토클락스)이다.

한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BCL-2 억제제과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BCL-2 억제제과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BCL-2 억제제과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BCL-2 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BCL-2 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BCL-2 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 BCL-2 억제제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 ABT-199와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 ABT-199와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 유효량의 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 ABT-199와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 ABT-199와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 ABT-199와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 ABT-199와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 유효량의 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 ABT-199와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

한 실시양태에서, 치료 요법은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을, 이마티닙 메실레이트 (글리벡), 다사티닙 (스프리셀), 닐로티닙 (타시그나), 보수티닙 (보술리프), 트라스투주맙 (헤르셉틴), 페르투주맙 (페르제타(Perjeta)™), 라파티닙 (타이커브), 게피티닙 (이레사), 에를로티닙 (타르세바), 세툭시맙 (에르비툭스), 파니투무맙 (벡티빅스), 반데타닙 (카프렐사), 베무라페닙 (젤보라프), 보리노스타트 (졸린자), 로미뎁신 (이스토닥스), 벡사로텐 (타그레틴), 알리트레티노인 (판레틴), 트레티노인 (베사노이드), 카르필조밉 (키프롤리스(Kyprolis)™), 프랄라트렉세이트 (폴로틴), 베바시주맙 (아바스틴), Ziv-아플리베르셉트 (잘트랩), 소라페닙 (넥사바르), 수니티닙 (수텐트), 파조파닙 (보트리엔트), 레고라페닙 (스티바르가), 및 카보잔티닙 (코메트리크(Cometriq)™)으로부터 선택되나, 이에 제한되지는 않는 적어도 1종의 추가의 화학요법제와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조합물 또는 조성물은 종양 또는 암의 치료를 위한 다른 화학요법제와 조합되거나 또는 추가로 조합되어 대상체에게 투여될 수 있다. 편리한 경우에, 본원에 기재된 제약 조합물 또는 조성물은 치료 요법을 단순화하기 위해, 또 다른 화학요법제와 동시에 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 제약 조합물 또는 조성물 및 다른 화학요법제는 단일 제제로 제공될 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조합물 또는 조성물의 사용은 다른 작용제와 치료 요법에서 조합된다. 이러한 작용제는 타목시펜, 미다졸람, 레트로졸, 보르테조밉, 아나스트로졸, 고세렐린, mTOR 억제제, 상기 기재된 바와 같은 PI3 키나제 억제제, 이중 mTOR-PI3K 억제제, 상기 기재된 바와 같은 MEK 억제제, RAS 억제제, ALK 억제제, HSP 억제제 (예를 들어, HSP70 및 HSP 90 억제제, 또는 그의 조합), 상기 기재된 바와 같은 BCL-2 억제제, 아폽토시스 유발 화합물, MK-2206 (1,2,4-트리아졸로[3,4-f][1,6]나프티리딘-3(2H)-온, 8-[4-(1-아미노시클로부틸)페닐]-9-페닐-), GSK690693, 페리포신, (KRX-0401), GDC-0068, 트리시리빈, AZD5363, 호노키올, PF-04691502, 및 밀테포신을 포함하나, 이에 제한되지는 않는 AKT 억제제, 니볼루맙, CT-011, MK-3475, BMS936558, 및 AMP-514를 포함하나, 이에 제한되지는 않는, 상기 기재된 바와 같은 PD-1 억제제, 또는 P406, 도비티닙, 퀴자르티닙 (AC220), 아무바티닙 (MP-470), 탄두티닙 (MLN518), ENMD-2076, 및 KW-2449를 포함하나, 이에 제한되지는 않는 FLT-3 억제제, 또는 그의 조합을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. mTOR 억제제의 예는 라파마이신 및 그의 유사체, 에베롤리무스 (아피니토르), 템시롤리무스, 리다포롤리무스, 시롤리무스, 및 데포롤리무스를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. RAS 억제제의 예는 레올리신 및 siG12D LODER을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. ALK 억제제의 예는 크리조티닙, AP26113, 및 LDK378을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. HSP 억제제는 겔다나마이신 또는 17-N-알릴아미노-17-데메톡시겔다나마이신 (17AAG), 및 라디시콜을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 특정한 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물은 레트로졸 및/또는 타목시펜과 조합되어 투여된다. 본원에 기재된 화합물과 조합되어 사용될 수 있는 다른 화학요법제는 그의 항신생물성 효과를 위해 세포 주기 활성을 필요로 하지 않는 화학요법제를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

한 실시양태에서, 치료 요법은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 조성물, 염, 동위원소 유사체 또는 전구약물을, 적어도 하나 추가의 요법과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함한다. 제2 요법은 면역요법일 수 있다. 하기 보다 상세히 논의되는 바와 같이, 조합 작용제는 본원에 기재된 바와 같은 활성 화합물을 이환 또는 비정상적 증식성 세포로 향하게 하는 항체, 방사성 작용제 또는 다른 표적화제에 접합될 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 제약 조합물 또는 조성물은 치료 효능을 조합 또는 상승작용적 접근법으로 증가시키기 위해, 또 다른 제약 또는 생물학적 작용제 (예를 들어 항체)와 조합되어 사용된다. 한 실시양태에서, 제약 조합물 또는 조성물은 T-세포 백신접종과 함께 사용될 수 있으며, 이는 전형적으로 본원에 기재된 바와 같이 암 세포 집단을 제거하기 위해 불활성화된 자가반응성 T 세포로의 면역화를 수반한다. 또 다른 실시양태에서, 제약 조합물 또는 조성물은 본원에 기재된 바와 같이 내인성 T 세포 및 암 세포 상의 특이적 항원에 동시에 결합하여 2종의 유형의 세포를 연결시키도록 설계된 항체인 이중특이적 T-세포 연관체 (BiTE)와 조합되어 사용된다.

한 실시양태에서, 추가의 요법은 모노클로날 항체 (MAb)이다. 일부 MAb는 암 세포를 파괴하는 면역 반응을 자극한다. B 세포에 의해 자연적으로 생산되는 항체와 유사하게, 이들 MAb는 암 세포 표면을 "코팅"하여, 면역계에 의한 그의 파괴를 촉발시킨다. 예를 들어, 베바시주맙은 종양 혈관의 발생을 촉진하는 종양의 미세환경에서 종양 세포 및 다른 세포에 의해 분비되는 단백질인 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)를 표적화한다. 베바시주맙과 결합 시에, VEGF는 그의 세포 수용체와 상호작용할 수 없어서, 새로운 혈관의 성장으로 이어지는 신호전달을 막는다. 유사하게, 세툭시맙 및 파니투무맙은 표피 성장 인자 수용체 (EGFR)를 표적화하고, 트라스투주맙은 인간 표피 성장 인자 수용체 2 (HER-2)를 표적화한다. 세포 표면 성장 인자 수용체와 결합하는 MAb는 표적화된 수용체가 그의 정상적인 성장-촉진 신호를 보내는 것을 막는다. 이들은 또한 아폽토시스를 촉발시키고, 면역계를 활성화시켜, 종양 세포를 파괴할 수 있다.

암 치료 MAb의 또 다른 군은 면역접합체이다. 때때로 면역독소 또는 항체-약물 접합체로도 칭하는 이들 MAb는 세포-사멸 물질, 예컨대 식물 또는 박테리아 독소, 화학요법 약물 또는 방사성 분자에 부착된 항체로 이루어진다. 항체는 암 세포의 표면 상의 그의 특이적 항원에 래치되고, 세포-사멸 물질은 세포에 의해 이용된다. 이러한 방식으로 작동하는 FDA-승인된 접합 MAb는 아도-트라스투주맙 엠탄신을 포함하며, 이는 HER-2분자를 표적화하여, 세포 증식을 억제하는 약물 DM1을 전이성 유방암 세포를 발현하는 HER-2에 전달한다.

이중특이적 항체 (bsAb) 또는 키메라 항원 수용체 (CAR)를 통해 암 세포를 인식하도록 조작된 T 세포로의 면역요법은 암 세포의 분열 및 비/느린-분열 하위집단 둘 다를 제거하는 잠재력을 갖는 접근법이다.

이중특이적 항체는, 면역 이펙터 세포의 표면 상의 표적 항원 및 활성화 수용체를 동시에 인식함으로써, 암 세포가 사멸되도록 면역 이펙터 세포를 재지정하는 기회를 제공한다. 또 다른 접근법은 세포외 항체를 세포내 신호전달 도메인에 융합시킴으로써 키메라 항원 수용체를 생성시키는 것이다. 키메라 항원 수용체-조작된 T 세포는 MHC-비의존성 방식으로 종양 세포를 특이적으로 사멸시킬 수 있다.

특정 측면에서, 추가의 요법은 또 다른 치료제, 예를 들어, 항염증제, 화학요법제, 방사선요법제 또는 면역억제제이다.

적합한 화학요법제는 방사성 분자, 세포독소 또는 세포독성제로도 지칭되며 세포의 생존율에 유해한 임의의 작용제를 포함하는 독소, 및 화학요법 화합물을 함유하는 리포솜 또는 다른 소포를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 일반적 항암 제약 작용제는 빈크리스틴 (온코빈) 또는 리포솜 빈크리스틴 (마르퀴보), 다우노루비신 (다우노마이신 또는 세루비딘) 또는 독소루비신 (아드리아마이신), 시타라빈 (시토신 아라비노시드, ara-C, 또는 시토사르), L-아스파라기나제 (엘스파르) 또는 PEG-L-아스파라기나제 (페가스파르가제 또는 온카스파르), 에토포시드 (VP-16), 테니포시드 (부몬), 6-메르캅토퓨린 (6-MP 또는 퓨린톨), 메토트렉세이트, 시클로포스파미드 (시톡산), 프레드니손, 덱사메타손 (데카드론), 이마티닙 (노파르티스(Novartis)에 의해 시판되는 글리벡), 다사티닙 (스프리셀), 닐로티닙 (타시그나), 보수티닙 (보술리프), 및 포나티닙 (이클루식(Iclusig)™)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 추가의 적합한 화학요법제는 1-데히드로테스토스테론, 5-플루오로우라실 데카르바진, 6-메르캅토퓨린, 6-티오구아닌, 악티노마이신 D, 아드리아마이신, 알데스류킨, 알킬화제, 알로퓨리놀 소듐, 알트레타민, 아미포스틴, 아나스트로졸, 안트라마이신 (AMC)), 항유사분열제, 시스-디클로로디아민 백금 (II) (DDP) 시스플라틴), 디아미노 디클로로 백금, 안트라시클린, 항생제, 항대사물, 아스파라기나제, BCG 라이브 (방광내), 베타메타손 인산나트륨 및 베타메타손 아세테이트, 비칼루타미드, 블레오마이신 술페이트, 부술판, 칼슘 류코우오린, 칼리케아미신, 카페시타빈, 카르보플라틴, 로무스틴 (CCNU), 카르무스틴 (BSNU), 클로람부실, 시스플라틴, 클라드리빈, 콜키신, 접합형 에스트로겐, 시클로포스파미드, 시클로포스파미드, 시타라빈, 시타라빈, 시토칼라신 B, 시톡산, 다카르바진, 닥티노마이신, 닥티노마이신 (이전에 악티노마이신), 다우니루비신 HCL, 다우노루비신 시트레이트, 데니류킨 디프티톡스, 덱스라족산, 디브로모만니톨, 디히드록시 안트라신 디온, 도세탁셀, 돌라세트론 메실레이트, 독소루비신 HCL, 드로나비놀, E. 콜라이 L-아스파라기나제, 에메틴, 에포에틴-α, 에르위니아 L-아스파라기나제, 에스테르화 에스트로겐, 에스트라디올, 에스트라무스틴 포스페이트 소듐, 브로민화에티듐, 에티닐 에스트라디올, 에티드로네이트, 에토포시드 시트로로룸 인자, 에토포시드 포스페이트, 필그라스팀, 플록수리딘, 플루코나졸, 플루다라빈 포스페이트, 플루오로우라실, 플루타미드, 폴린산, 겜시타빈 HCL, 글루코코르티코이드, 고세렐린 아세테이트, 그라미시딘 D, 그라니세트론 HCL, 히드록시우레아, 이다루비신 HCL, 이포스파미드, 인터페론 α-2b, 이리노테칸 HCL, 레트로졸, 류코보린 칼슘, 류프롤리드 아세테이트, 레바미솔 HCL, 리도카인, 로무스틴, 메이탄시노이드, 메클로레타민 HCL, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 메게스트롤 아세테이트, 멜팔란 HCL, 메르캅티퓨린, 메스나, 메토트렉세이트, 메틸테스토스테론, 미트라마이신, 미토마이신 C, 미토탄, 미톡산트론, 닐루타미드, 옥트레오티드 아세테이트, 온단세트론 HCL, 파클리탁셀, 파미드로네이트 이나트륨, 펜토스타틴, 필로카르핀 HCL, 플리마이신, 카르무스틴 임플란트를 갖는 폴리페프로산 20, 포르피머 소듐, 프로카인, 프로카르바진 HCL, 프로프라놀롤, 리툭시맙, 사르그라모스팀, 스트렙토조토신, 타목시펜, 탁솔, 테니포시드, 테노포시드, 테스토락톤, 테트라카인, 티오에파 클로람부실, 티오구아닌, 티오테파, 토포테칸 HCL, 토레미펜 시트레이트, 트라스투주맙, 트레티노인, 발루비신, 빈블라스틴 술페이트, 빈크리스틴 술페이트, 및 비노렐빈 타르트레이트를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

적합한 면역억제제는 칼시뉴린 억제제, 예를 들어 시클로스포린 또는 아스코마이신, 예를 들어 시클로스포린 A (네오랄), FK506 (타크롤리무스), 피메크롤리무스, mTOR 억제제, 예를 들어 라파마이신 또는 그의 유도체, 예를 들어 시롤리무스 (라파뮨), 에베롤리무스 (세르티칸), 템시롤리무스, 조타롤리무스, 비올리무스-7, 비올리무스-9, 라파로그, 예를 들어 리다포롤리무스, 아자티오프린, 캄파트 1H, S1P 수용체 조정제, 예를 들어 핑골리모드 또는 그의 유사체, 항 IL-8 항체, 미코페놀산 또는 그의 염, 예를 들어 나트륨 염, 또는 그의 전구약물, 예를 들어 미코페놀레이트 모페틸 (셀셉트), OKT3 (오르토클론 OKT3), 프레드니손, 아트감, 티모글로불린, 브레퀴나르 소듐, OKT4, T10B9.A-3A, 33B3.1, 15-데옥시스페르구알린, 트레스페리무스, 레플루노미드 아라바, CTLAI-Ig, 항-CD25, 항-IL2R, 바실릭시맙 (시뮬렉트), 다클리주맙 (제나팍스), 미조리빈, 메토트렉세이트, 덱사메타손, ISAtx-247, SDZ ASM 981 (피메크롤리무스, 엘리델), CTLA4lg (아바타셉트), 벨라타셉트, LFA3lg, 에타네르셉트 (이뮤넥스(Immunex)에 의해 엔브렐(Enbrel)로서 판매됨), 아달리무맙 (휴미라), 인플릭시맙 (레미케이드), 항-LFA-1 항체, 나탈리주맙 (안테그렌), 엔리모맙, 가빌리모맙, 항흉선세포 이뮤노글로불린, 시플리주맙, 알레파셉트 에팔리주맙, 펜타사, 메살라진, 아사콜, 코데인 포스페이트, 베노릴레이트, 펜부펜, 나프로신, 디클로페낙, 에토돌락 및 인도메타신, 아스피린 및 이부프로펜을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

특정 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조합물 또는 조성물은 또 다른 화학요법제로의 치료 전에, 또 다른 화학요법제로의 치료 동안에, 또 다른 화학요법제의 투여, 또는 그의 조합 후에, 대상체에게 투여된다.

일부 실시양태에서, 선택적 제약 조합물 또는 조성물은 다른 화학요법제가 더 높은 용량으로 (증가된 화학요법제 용량 강도로) 또는 더 빈번하게 (증가된 화학요법제 용량 밀도로) 투여될 수 있도록 대상체에게 투여될 수 있다. 용량-조밀 화학요법은 표준 화학요법 치료 계획에서보다 치료들 사이의 시간이 더 적도록 약물이 주어지는 화학요법 치료 계획이다. 화학요법 용량 강도는 단위 시간당 투여되는 화학요법의 단위 용량을 나타낸다. 용량 강도는 투여되는 용량, 투여 시간 간격 또는 이들 둘 다를 변경하는 것을 통해 증가 또는 감소될 수 있다.

본 발명의 한 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조합물 또는 조성물은 또 다른 작용제 예컨대 비-DNA-손상성인 표적화된 항신생물제 또는 조혈 성장 인자 작용제와의 협동 요법으로 투여될 수 있다. 최근에, 조혈 성장 인자의 비적시 투여는 심각한 부작용을 가질 수 있는 것으로 보고된 바 있다. 예를 들어, 성장 인자의 EPO 패밀리의 사용은 동맥 고혈압, 뇌 경련, 고혈압성 뇌병증, 혈전색전증, 철 결핍, 인플루엔자 유사 증후군 및 정맥 혈전증과 연관된 바 있다. 성장 인자의 G-CSF 패밀리는 비장 확대 및 파열, 호흡 곤란 증후군, 알레르기 반응 및 겸상 적혈구 합병증과 연관된 바 있다. 본원에 기재된 바와 같은 제약 조합물 또는 조성물의 투여를, 예를 들어 이환 세포가 더 이상 성장 정지 하에 존재하지 않는 시점에서의 조혈 성장 인자의 적시 투여와 조합함으로써, 건강 관리 진료의가 성장 인자의 양을 감소시켜서, 원하는 치료 이익을 달성하면서 원치 않는 유해 효과를 최소화하는 것이 가능하다. 이에 따라, 한 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조합물, 조성물 또는 방법의 사용은 과립구 콜로니 자극 인자 (G-CSF, 예를 들어 뉴포젠 (필그라스틴), 뉴라스타 (peg-필그라스틴), 또는 레노그라스틴으로서 판매됨), 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자 (GM-CSF, 예를 들어 몰그라모스팀 및 사르그라모스팀 (류킨)으로서 판매됨), M-CSF (대식세포 콜로니 자극 인자), 트롬보포이에틴 (거핵구 성장 발생 인자 (MGDF), 예를 들어 로미프롤스팀 및 엘트롬보팍으로서 판매됨) 인터류킨 (IL)-12, 인터류킨-3, 인터류킨-11 (지방생성 억제 인자 또는 오프렐베킨), SCF (줄기 세포 인자, 스틸 인자, 키트-리간드, 또는 KL) 및 에리트로포이에틴 (EPO), 및 그의 유도체 (예를 들어 에포에틴-α (예를 들어 다르보포에이틴, 에포셉트, 나노킨, 에포핏, 에프렉스 및 프로크리트로서); 에포에틴-β (예를 들어 네오리코몬, 리코몬 및 미세라로서 판매됨), 에포에틴-델타 (예를 들어 디네포로서 판매됨), 에포에틴-오메가 (예를 들어 에포맥스로서 판매됨), 에포에틴 제타 (예를 들어 실라포 및 리액크리트로서 판매됨) 뿐만 아니라 예를 들어 에포셉트, 에포트러스트, 에리프로 세이프, 레포에이틴, 빈터, 에포핏, 에리킨, 웨폭스, 에스포겐, 렐리포에이틴, 샨포이에틴, 지롭 및 EPIAO로서 판매됨)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는 조혈 성장 인자의 사용과 조합된다. 한 실시양태에서, 제약 조합물 또는 조성물은 조혈 성장 인자의 투여 전에 투여된다. 한 실시양태에서, 조혈 성장 인자 투여는 HSPC에 대한 제약 조합물 또는 조성물의 효과가 소멸되도록 적시에 이루어진다. 한 실시양태에서, 성장 인자는 본원에 기재된 제약 조합물 또는 조성물을 투여하고 적어도 20시간 후에 투여된다.

원하는 경우에, 본원에 기재된 제약 조합물 또는 조성물의 다중 용량이 대상체에게 투여될 수 있다. 대안적으로, 대상체에게 본원에 기재된 제약 조합물 또는 조성물의 단일 용량이 주어질 수 있다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 목적을 위한 활성 화합물의 활성은 이환 또는 비정상적 증식성 세포를 표적화하거나 또는 활성, 전달, 약동학 또는 다른 유익한 특성을 달리 증진시키는 작용제에의 접합을 통해 증대될 수 있다.

본원에 기재된 선택된 화합물은 Fv 단편과 접합 또는 조합되어 투여될 수 있다. Fv 단편은 IgG 및 IgM 클래스 항체의 효소적 절단으로부터 제조된 가장 작은 단편이다. Fv 단편은 VH 및 VC 영역으로 제조된 항원-결합 부위를 갖지만, 이들은 CH1 및 CL 영역이 결여되어 있다. VH 및 VL 쇄는 비-공유 상호작용에 의해 Fv 단편에서 함께 유지된다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 선택된 화합물은 ScFv, 도메인 항체, 디아바디, 트리아바디, 테트라바디, 비스-scFv, 미니바디, Fab2 또는 Fab3 항체 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된 항체 단편과 조합되어 투여될 수 있다. 한 실시양태에서, 항체 단편은 ScFv이다. 유전자 조작 방법은 가요성 펩티드와 연결된 VH 및 VL 도메인을 포함하는 Fv 유형 단편인 단일 쇄 가변 단편 (ScFv)의 생산을 가능하게 한다. 링커가 적어도 12개 잔기 길이인 경우에, ScFv 단편은 주로 단량체이다. V-도메인 배향 및 링커 길이의 조작은 3-11개 잔기 길이인 Fv 분자 링커의 상이한 형태를 생성시켜, 기능적 Fv 도메인으로 폴딩될 수 없는 scFv 분자를 생성시킨다. 이들 분자는 제2 scFv 분자와 회합되어 2가 디아바디를 생성할 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 선택된 화합물과 조합되어 투여되는 항체 단편은 2가 디아바디이다. 링커 길이가 3개 잔기 미만인 경우에, scFv 분자는 트리아바디 또는 테트라바디로 회합된다. 한 실시양태에서, 항체 단편은 트리아바디이다. 한 실시양태에서, 항체 단편은 테트라바디이다. 다가 scFv는 2개 추가의 표적 항원과의 결합을 가짐으로써 그의 1가 대응부보다 더 큰 그의 표적 항원에 대한 기능적 결합 친화도를 보유하며, 이는 항체 단편의 오프-레이트를 감소시킨다. 한 실시양태에서, 항체 단편은 미니바디이다. 미니바디는, 2가 이량체로 조립되는 scFv-CH3 융합 단백질이다. 한 실시양태에서, 항체 단편은 비스-scFv 단편이다. 비스-scFv 단편은 이중특이적이다. 이들 비스-scFv 분자가 2개의 상이한 에피토프와 공동으로 결합하는 것을 가능하게 하는 2개의 상이한 가변 도메인을 갖는 소형화된 ScFv 단편이 생성될 수 있다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 선택된 화합물은 이중특이적 이량체 (Fab2) 또는 삼중특이적 이량체 (Fab3)와 접합 또는 조합되어 투여된다. 유전적 방법이 또한 이중특이적 Fab 이량체 (Fab2) 및 삼중특이적 Fab 삼량체 (Fab3)를 생성시키기 위해 사용된다. 이들 항체 단편은 2개 (Fab2) 또는 3개 (Fab3)의 상이한 항원과 한 번에 결합할 수 있다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 선택된 화합물은 rIgG 항체 단편과 접합 또는 조합되어 투여된다. rIgG 항체 단편은 환원된 IgG (75,000 달톤) 또는 하프-IgG를 지칭한다. 이는 단지 힌지-영역 디술피드 결합만을 선택적으로 환원시킨 산물이다. 여러 디술피드 결합이 IgG에 존재하기는 하지만, 힌지-영역에서의 것들이 가장 접근가능하고 특히 온화한 환원제 예컨대 2-메르캅토에틸아민 (2-MEA)을 사용하여 환원시키기에 가장 용이하다. 하프-IgG는 항체 고정화 또는 효소 표지인 접합을 위해 표적화될 수 있는 노출 힌지-영역 술프히드릴 기를 표적화하는 목적을 위해 빈번하게 제조된다.

다른 실시양태에서, 본원에 기재된 선택된 활성 화합물은 효능을 증가시키기 위해, 관련 기술분야에 널리 공지된 방법을 사용하여 방사성동위원소에 연결될 수 있다. 암 세포에 대해 유용한 임의의 방사성동위원소, 예를 들어 비제한적으로 ¹³¹I, ¹²³I, ¹⁹²Ir, ³²P, ⁹⁰Sr, ¹⁹⁸Au, ²²⁶Ra, ⁹⁰Y, ²⁴¹Am, ²⁵²Cf , ⁶⁰Co, 또는 ¹³⁷Cs 가 접합체에 혼입될 수 있다.

유의하게는, 링커 화학이 약물 접합체의 효능 및 내약성에 중요할 수 있다. 티오-에테르 연결 T-DM1는 디술피드 링커 버전에 비해 혈청 안정성을 증가시키고 세포독성제의 세포내 방출을 초래하는 엔도솜 분해를 겪는 것으로 보이며, 그로 인해 효능 및 내약성이 개선된다, 참조, Barginear, M.F. and Budman, D.R., Trastuzumab-DM1: A review of the novel immune-conjugate for HER2-overexpressing breast cancer, The Open Breast Cancer Journal, 1: 25-30, (2009).

본 발명에 사용될 수 있는 생성물 개발을 위한 약물, 링커 화학 및 표적의 부류를 논의한 초기 및 최근 항체-약물 접합체의 예는 하기 문헌에서의 리뷰에서 찾을 수 있다: Casi, G. and Neri, D., Antibody-drug conjugates: basic concepts, examples and future perspectives, J. Control Release 161(2):422-428, 2012, Chari, R.V., Targeted cancer therapy: conferring specificity to cytotoxic drugs, Acc. Chem. Rev., 41(1):98-107, 2008, Sapra, P. and Shor, B., Monoclonal antibody-based therapies in cancer: advances and challenges, Pharmacol. Ther., 138(3):452-69, 2013, Schliemann, C. and Neri, D., Antibody-based targeting of the tumor vasculature, Biochim. Biophys. Acta., 1776(2):175-92, 2007, Sun, Y., Yu, F., and Sun, B.W., Antibody-drug conjugates as targeted cancer therapeutics, Yao Xue Xue Bao, 44(9):943-52, 2009, Teicher, B.A., and Chari, R.V., Antibody conjugate therapeutics: challenges and potential, Clin. Cancer Res., 17(20):6389-97, 2011, Firer, M.A., and Gellerman, G.J., Targeted drug delivery for cancer therapy: the other side of antibodies, J. Hematol. Oncol., 5:70, 2012, Vlachakis, D. and Kossida, S., Antibody Drug Conjugate bioinformatics: drug delivery through the letterbox, Comput. Math. Methods Med., 2013; 2013:282398, Epub 2013 Jun 19, Lambert, J.M., Drug-conjugated antibodies for the treatment of cancer, Br. J. Clin. Pharmacol., 76(2):248-62, 2013, Concalves, A., Tredan, O., Villanueva, C. and Dumontet, C., Antibody-drug conjugates in oncology: from the concept to trastuzumab emtansine (T-DM1), Bull. Cancer, 99(12):1183-1191, 2012, Newland, A.M., Brentuximab vedotin: a CD-30-directed antibody-cytotoxic drug conjugate, Pharmacotherapy, 33(1):93-104, 2013, Lopus, M., Antibody-DM1 conjugates as cancer therapeutics, Cancer Lett., 307(2):113-118, 2011, Chu, Y.W. and Poison, A., Antibody-drug conjugates for the treatment of B-cell non-Hodgkin's lymphoma and leukemia, Future Oncol., 9(3):355-368, 2013, Bertholjotti, I., Antibody-drug conjugate a new age for personalized cancer treatment, Chimia, 65(9): 746-748, 2011, Vincent, K.J., and Zurini, M., Current strategies in antibody engineering: Fc engineering and pH - dependent antigen binding, bispecific antibodies and antibody drug conjugates, Biotechnol. J., 7(12):1444-1450, 2012, Haeuw, J.F., Caussanel, V., and Beck, A., Immunoconjugates, drug-armed antibodies to fight against cancer, Med. Sci., 25(12):1046-1052, 2009 및 Govindan, S.V., and Goldenberg, D.M., Designing immunoconjugates for cancer therapy, Expert Opin. Biol. Ther., 12(7):873-890, 2012.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 제약 조성물 또는 조합물은 본원에 기재된 임의의 장애를 치료하기 위해 사용될 수 있다.

한 측면에서, 본 발명의 화합물은 유효량의 뉴클레오시드 또는 뉴클레오시드 유사체와의 조합물 또는 조성물로 투여된다. 뉴클레오시드의 비제한적 예는 아자시티딘, 데시타빈, 디다노신, 비다라빈, BCX4430, 시타라빈, 엠트리시타빈, 라미부딘, 잘시타빈, 아바카비르, 아시클로비르, 엔테카비르, 스타부딘, 텔비부딘, 지도부딘, 이독수리딘, 트리플루리딘, 아프리시타빈, 엘부시타빈, 암독소비르, 및 라시비르를 포함한다. 한 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 바이러스 감염을 치료하기 위해 유효량의 뉴클레오시드 또는 뉴클레오시드 유사체와의 조합물 또는 조성물로 사용된다. 대안적 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 종양 또는 암을 치료하기 위해 유효량의 뉴클레오시드 또는 뉴클레오시드 유사체와의 조합물 또는 조성물로 사용된다. 한 실시양태에서, 뉴클레오시드 유사체는 아자시티딘이고, 장애는 종양 또는 암이다.

한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 뉴클레오시드 유사체와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 뉴클레오시드 유사체와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 뉴클레오시드 유사체와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 뉴클레오시드 유사체와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 뉴클레오시드 유사체와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 뉴클레오시드 유사체와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 유효량의 뉴클레오시드 유사체와 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다

한 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염을 아자시티딘과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염을 아자시티딘과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염을 아자시티딘과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시양태에서, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 화합물 A의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 아자시티딘과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 화합물 B의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 아자시티딘과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 화합물 C의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 아자시티딘과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다. 대안적으로, 종양 또는 암의 치료를 필요로 하는 숙주에게 본원에 제공된 바와 같은 화합물 D의 유사체 또는 그의 제약상 허용되는 염을 아자시티딘과 조합하여 또는 교대로 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 종양 또는 암을 치료하는 방법이 제공된다.

VI. 예시적 실시예

실시예 1: 합성의 일반적 경로

본 발명의 화합물은 공지된 중간체 1 (WO 2015/100420)로부터 모듈 방식으로 제조될 수 있다.

반응식 1-1: 다양한 C3 케톤의 A-고리 조작

공지된 화합물 1은 계내 브로민화/제거를 거쳐 DMSO 중 NBS로 처리함으로써 공액 트리에논 1a를 수득한다. 1a의 디히드록실화 조건 (예를 들어, OsO₄)에 의해 디올 1b를 수득한다. 염기성 조건 (예를 들어, DBU)은 C2-OH의 열역학 에피머화에 영향을 미쳐 트랜스 디올 1c를 수득한다. 한편, 트리에논 1a는 에폭시화 (예를 들어, tBuOOH/DBU)하여 화합물 1d를 형성하고, 에폭시드 고리는 수성 매질에서 알릴 C1 위치로부터 개방되어 트랜스 디올 1e를 수득할 수 있다. 다시, 열역학 에피머화는 1e로부터의 시스 디올 1f의 형성을 수득한다.

선택적 알파-히드록실화는 키랄 유도 시약의 존재 하에 진행된다. 예를 들어, C2-베타-OH 1g는 화합물 1이 유기촉매제 D-프롤린의 존재 하에 아이오도소벤젠으로 처리된 경우 선택적으로 생성된다. 동일한 방식에서, L-프롤린은 C2-알파-OH 1h를 수득한다. 다른 한편으로는, C4-알파-OH 1i는 NaHMDS에 의해 탈양성자화한 다음, 데이비스 옥사지리딘을 첨가하여 선택적으로 형성된다. 1i의 염기 촉매화 (예를 들어, DBU) 열역학 에피머화에 의해 C4-베타-OH 1j를 수득한다.

반응식 1-2: C3 케톤 1a의 4종의 상이한 화합물로의 전환

C3 케톤 1a는 반응식 2에 나타난 바와 같이 4종의 화합물로 나뉜다. 예를 들어, LiAlH₄에 의한 케톤 1a의 환원에 의해 화합물 1aa를 수득한다. Ti(OiPr)₄ 보조 환원성 아미노화 ((R)-3-(Boc-아미노)피롤리딘 또는 3-(Boc-아미노)아제티딘)에 이어, TFA로 처리하여 Boc 보호기를 탈보호하여 화합물 1ab 또는 1ac의 합성을 완료한다. 동일한 환원성 아미노화 조건은 (S,S)-3,4-디히드록시피롤리딘을 아민 빌딩 블록으로서 사용하여 수행되어 화합물 1ad를 수득할 수 있다.

공지된 화합물 5로부터, C16-C17 이중 결합은 3개의 상이한 경로 (반응식 3)로 변형된다. 히드로붕소화 (예를 들어, BH₃/H₂O₂) 또는 디히드록실화 (예를 들어, OsO₄), 및 후속적 케탈 탈보호 (예를 들어, HCl)는 각각 화합물 2 및 3을 제공한다. 한편, 시몬스-스미스 조건 (예를 들어, Et₂Zn/CH₂I₂)은 시클로프로판화를 촉진한 다음, bt 케탈 탈보호하여 화합물 4를 수득한다. 다시, 반응식 1-1 및 1-2에 제안된 동일한 조건이 화합물 2, 3 및 4에 적용될 수 있다.

반응식 1-1, 1-2 및 1-3의 모듈 합성에 의해 합성될 수 있는 본 발명의 화합물의 비제한적 예는

를 포함한다.

실시예 2. 합성의 대표 경로

약어

일반적 방법

출발 물질, 중간체 및 최종 생성물의 구조는 NMR 분광분석법 및 질량 분광측정법을 포함한 표준 분석 기술에 의해 확인되었다. 달리 나타내지 않는 한, 시약 및 용매는 상업적 공급업체로부터 제공받은 대로 사용하였다.

반응식 2-1: 케톤 1의 합성

8,9-불포화 메톡시에틸렌케톤 (화합물 6)

그리냐르 반응을 6-메톡시-1-테트랄론 20.0 g (113 mmol, 1.00 당량)을 사용하여 행하고, 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의한 정제 없이 사용하였다. 문헌 [Saraber et al., Tetrahedron 2006, 62, 1726-1742]을 참조한다. 크실렌 (140 mL) 중 그리냐르 반응 생성물 및 2-메틸-1,3-펜타디에논 (12.8 g, 114 mmol, 1.01 당량)의 용액에 AcOH (64.6 mL, 1.13 mol, 10.0 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 환류 하에 가온하였다. 2시간 후, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 톨루엔 및 에틸 에테르의 혼합물 (1:1)을 첨가하여 고체 잔류물을 용해시키고, 혼합물을 여과하였다. 여과물을 포화 NaHCO₃ 용액 (200 mL) 및 염수로 순차적으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 20:1:1 헥산:EtOAc:DCM)에 의해 정제하여 토르고프 디엔을 수득하였다. 스펙트럼 데이터가 이전에 보고된 것들과 일치하였다. 문헌 [Soorukram, D.; Knochel, P. Org. Lett. 2007, 9, 1021-1023]을 참조한다. 토르고프 디엔을 문헌에 공지된 절차에 기초하여 8,9-불포화 메톡시에틸렌케톤 6 (15.0 g, 3개 단계에 걸쳐 47%)로 전환시켰다. 문헌 [Sugahara et al., Tetrahedron Lett. 1996, 37, 7403-7406]을 참조한다.

8,9-불포화 메톡시에틸렌케탈 (화합물 7)

벤젠 (215 mL) 및 에틸렌 글리콜 (72 mL) 중 화합물 6 (15.0 g, 53.1 mmol, 1.0 당량)의 용액에 옥살산 (2.30 g, 12.1 mmol, 0.22 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 가온하고, 물을 딘-스타크 장치에 의해 포획하였다. 16시간 후, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 포화 NaHCO₃ 용액 (150 mL)을 첨가하였다. 유기 및 수성 층을 분리하고, 수성 상을 에틸 아세테이트 (2 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (150mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 15:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 8,9-불포화 메톡시에틸렌케탈 화합물 7 (15.5 g, 89%)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 7.13 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 6.73 - 6.67 (m, 2 H), 4.05 - 3.85 (m, 4 H), 3.79 (s, 3 H), 2.82 - 2.65 (m, 2 H), 2.52 - 2.45 (m, 2 H), 2.23 - 2.17 (m, 2 H), 2.14 (ddd, J = 2.2, 11.6, 14.0 Hz, 1 H), 1.99 - 1.82 (m, 4 H), 1.64 (td, J = 4.2, 12.2 Hz, 1 H), 1.49 (dq, J = 6.8, 11.6 Hz, 1 H), 0.86 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₁H₂₇O₃ [M+H]⁺: 327.1955, 실측치 327.1947.

에폭시 알콜 8 및 8a

CHCl₃ (50 mL) 중 8,9-불포화 에틸렌케탈 7 (1.63 g, 5.00 mmol, 1.0 당량)의 용액을 0℃로 냉각시키고, mCPBA (77% 최대, 2.46 g, 11.0 mmol, 2.2 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하고, 실온으로 가온하였다. 추가로 50분 후, 10% Na₂S₂O₃ 용액 (40 mL) 및 포화 NaHCO₃ 용액 (40 mL)을 순차적으로 첨가하였다. 유기 및 수성 층을 분리하고, 수성 상을 디클로로메탄 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 3:1 → 1:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 에폭시 알콜 8 및 8a (1.40 g, 75%)를 수득하였다. 8 및 8a는 임의의 용매 중에서 평형 하에 존재하고, 대부분의 혼합물을 8로서 존재하였다. H NMR은 에폭시 알콜 8에 대해 분석하였다.

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 7.77 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 6.76 (dd, J = 2.0, 8.3 Hz, 1 H), 6.63 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 4.78 (dd, J = 7.8, 9.8 Hz, 1 H), 3.95 - 3.87 (m, 4 H), 3.78 (s, 3 H), 2.84 (dt, J = 5.9, 14.4 Hz, 1 H), 2.49 (dd, J = 4.4, 15.1 Hz, 1 H), 2.36 - 2.29 (m, 1 H), 2.26 (dd, J = 5.9, 14.2 Hz, 2 H), 2.06 (t, J = 11.7 Hz, 1 H), 1.97 (dd, J = 7.3, 12.2 Hz, 1 H), 1.94 - 1.88 (m, 2 H), 1.75 (dt, J = 5.4, 14.2 Hz, 1 H), 1.63 - 1.53 (m, 1 H), 1.46 (t, J = 11.0 Hz, 1 H), 0.75 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₁H₂₇O₅ [M+H]⁺: 359.1853, 실측치 359.1852.

8,9 및 9,11-불포화 메톡시에틸렌케탈 화합물 7 및 9

DDQ 산화를 에스트론 22.0 g (81.4 mmol, 1.0 당량)에 의해 행하고, 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 문헌 [Stephan et al., Steroid. 1995, 60, 809-811]을 참조한다. 벤젠 (375 mL) 중 9,11-불포화 에스트론의 용액에 에틸렌 글리콜 (110 mL, 1.99 mol, 24.4 당량) 및 PTSA (3.00 g, 16.3 mmol, 0.20 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 가온하고, 물을 딘-스타크 장치에 의해 포획하였다. 18시간 후, 반응물을 실온으로 냉각되도록 하고, 포화 NaHCO₃ 용액 (300 mL)을 적용하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트 (2 x 300 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (200 mL)로 세척하였다. 유기 상을 건조 (Na₂SO₄)시키고, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 생성물을 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.

에틸렌케탈 (8,9 및 9,11-불포화 위치이성질체의 혼합물)을 아세톤 (420 mL) 중에 용해시키고, K₂CO₃ (22.5 g, 163 mmol, 2.00 당량)을 첨가하였다. 이에 이어서, Me₂SO₄ (9.30 mL, 97.6 mmol, 1.20 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 환류 온도로 가온하였다. 18시간 후, 반응물을 실온으로 냉각되도록 하고, 아세톤을 증발시켰다. 2M NaOH 용액을 첨가 (300 mL)하고, 수성 상을 에틸 아세테이트 (2 x 300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 건조 (Na₂SO₄)시키고, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 15:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 8,9 및 9,11-불포화 메톡시에틸렌케탈 화합물 7 및 9 (16.3 g, 3개 단계에서 61%, 8,9-불포화:9,11-불포화 위치이성질체의 ~4:5 혼합물)의 혼합물을 수득하였다.

9,11-불포화 이성질체에 대해, 오직 식별가능한 피크를 할당하였다:

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 7.53 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.60 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 6.13 (td, J = 2.6, 5.0 Hz, 1 H), 3.79 (s, 3 H), 2.59 (td, J = 3.2, 17.6 Hz, 1 H), 2.09 - 2.00 (m, 3 H), 1.45 - 1.33 (m, 2 H), 0.90 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₁H₂₇O₃ [M+H]⁺: 327.1955, 실측치 327.1951.

에폭시 알콜 화합물 8 및 8a

디클로로메탄 (700 mL) 중 8,9 및 9,11-불포화 에틸렌케탈 화합물 7 및 9의 혼합물 (15.7 g, 48.1 mmol, 1.00 당량)의 용액에 마그네슘 모노퍼옥시프탈레이트 6수화물 (68.4 g, 111 mmol, 2.30 당량) 및 물 (4.8 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반한 다음, 10% 수성 Na₂S₂O₃ (300 mL) 및 포화 NaHCO₃ 용액 (300 mL)의 혼합물로 켄칭하였다. 유기 및 수성 층을 분리하고, 수성 상을 디클로로메탄 (2 x 500mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (300 mL)로 세척하고, 건조시켰다 (Na₂SO₄). 용매를 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 3:1 → 2:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 에폭시 알콜 8 및 8a (8.60 g, 50%)를 수득하였다. 스펙트럼 데이터는 8,9-불포화 메톡시에틸렌케탈 6으로부터 구성된 에폭시 알콜 8 및 8a와 일치하였다.

디올 화합물 10

암모니아 기체를 응축시키고 (240 mL), 액체 암모니아에 Li (3.90 g, 565 mmol, 25.0 당량)을 -78℃에서 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, THF (110 mL) 중 에폭시 알콜 8 및 8a (8.10 g, 22.6 mmol, 1.0 당량)를 캐뉼라삽입하고, 추가로 그 온도에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 -78℃에서 t-BuOH (32 mL) 및 THF (16 mL)의 혼합물을 첨가하고, 반응물을 그 온도에서 추가로 20분 동안 교반하였다. t-BuOH (92 mL) 및 THF (38 mL)의 혼합물을 첨가한 다음, 벤젠 (50 mL) 및 물 (50 mL)을 -78℃에서 첨가하고, 플라스크를 개방하여 냉각 조를 제거함으로써 서서히 액체 암모니아를 증발시켰다. 물 (200 mL)을 첨가하고, 수성 상을 에틸 아세테이트 (2 x 250 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (150 mL)로 세척하고, 건조 (Na₂SO₄)시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

THF (300 mL) 및 에틸렌 글리콜 (75 mL) 중 버치 환원 생성물의 용액에 PTSA (430 mg, 2.26 mmol, 0.10 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 포화 NaHCO₃ 용액 (200 mL)을 첨가하였다. 유기 및 수성 층을 분리하고, 수성 상을 에틸 아세테이트 (4 x 250 mL)로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (200mL)로 세척하고, 건조시켰다 (Na₂SO₄). 용매를 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 4:1 헥산:EtOAc → 100% EtOAc → 10:1 EtOAc: MeOH)에 의해 정제하여 디올 10 (4.60 g, 52%)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, C6D6) δ = 3.67 - 3.42 (m, 9 H), 3.25 - 3.14 (m, 1 H), 2.40 (dd, J = 5.9, 13.2 Hz, 1 H), 2.31 (br. s, 2 H), 2.23 - 2.09 (m, 2 H), 2.03 (t, J = 10.7 Hz, 1 H), 1.97 - 1.90 (m, 2 H), 1.89 (dd, J = 8.3, 14.2 Hz, 1 H), 1.85 - 1.75 (m, 4 H), 1.66 - 1.50 (m, 4 H), 1.00 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₂H₃₂NaO₆ [M+Na]⁺: 415.2091, 실측치 415.2076.

반응식 2-1: 에논 화합물 11

디클로로메탄 (230 mL) 중 디올 10 (4.05 g, 10.3 mmol, 1.00 당량)에 -10℃에서 NBS (2.00 g, 11.4 mmol, 1.10 당량)의 용액을 1 부분으로 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 반응물을 TLC에 의해 모니터링하였다 (완료 동안 약 30분). 반응이 완료되면, 반응 혼합물을 -40℃로 냉각시키고, 트리에틸아민 (17.3 mL, 124 mmol, 12.0 당량)을 첨가하였다. DMSO (115 mL) 중 SO_3·Py (16.4 g, 103 mmol, 10.0 당량)을 실온에서 20분 동안 예비교반하고, -40℃에서 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 후속적으로 -10℃로 천천히 가온되도록 하였다. 4시간 후, 포화 NH₄Cl 용액 (130 mL)을 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온되도록 하였다. 유기 및 수성 층을 분리하고, 수성 상을 디클로로메탄 (2 x 200 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (150 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성물을 추가로 정제 없이 사용하였다.

산화 생성물을 디클로로메탄 (300 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물을 -40℃로 냉각한 다음, DBU (3.90 mL, 25.6 mmol, 2.50 당량)를 느리게 첨가하였다. 15분 후, 포화 NH₄Cl 용액 (130 mL)을 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온되도록 하였다. 유기 및 수성 층을 분리하고, 수성 상을 디클로로메탄 (2 x 200 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (150 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 3:1 → 1:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 에논 11 (3.16 g, 3 단계에서 80%)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, C6D6) δ = 3.58 - 3.51 (m, 1 H), 3.49 - 3.34 (m, 6 H), 3.28 - 3.23 (m, 2 H), 3.19 (dt, J = 4.2, 7.7 Hz, 1 H), 2.80 (d, J = 16.1 Hz, 1 H), 2.60 (ddd, J = 6.8, 12.7, 19.0 Hz, 1 H), 2.55 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 2.43 (d, J = 16.1 Hz, 1 H), 2.31 (dd, J = 1.5, 13.2 Hz, 1 H), 1.98 - 1.88 (m, 2 H), 1.88 - 1.80 (m, 3 H), 1.71 (ddd, J = 4.2, 9.6, 11.6 Hz, 1 H), 1.68 - 1.59 (m, 3 H), 1.20 (ddd, J = 3.7, 8.4, 11.4 Hz, 1 H), 0.90 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₂H₂₈NaO₆ [M+Na]⁺: 411.1778, 실측치 411.1786.

알릴 알콜 화합물 12

MeOH (150 mL) 및 THF (20 mL) 중 에논 11 (3.20 g, 8.32 mmol, 1.00 당량)의 용액에 실온에서 CeCl_3·7H₂O (9.20 g, 24.7 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, 반응물을 -20℃로 냉각한 다음, NaBH₄ (623 mg, 16.5 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 30분 후, 포화 NH₄Cl 용액 (50 mL) 및 물 (50 mL)을 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온되도록 하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하고, 합한 유기 상을 염수 (150 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 20:1 DCM:MeOH)에 의해 정제하여 알릴 알콜 12 (2.72 g, 85%)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, C6D6) δ = 4.39 - 4.30 (m, 1 H), 3.58 - 3.36 (m, 8 H), 3.22 (dd, J = 3.7, 16.4 Hz, 1 H), 2.94 (dd, J = 7.1, 12.5 Hz, 1 H), 2.66 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 2.49 - 2.41 (m, 1 H), 2.39 (dd, J = 2.2, 12.9 Hz, 1 H), 2.07 - 1.99 (m, 1 H), 1.96 - 1.79 (m, 6 H), 1.73 (br. s, 3 H), 1.66 - 1.57 (m, 1 H), 1.15 - 1.07 (m, 1 H), 0.86 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₂H₃₀NaO₆ [M+Na]⁺: 413.1935, 실측치 413.1942.

시클로프로판 화합물 13

1,2-디클로로에탄 (140 mL) 중 ClCH₂I (1.98 mL, 27.1 mmol, 4.00 당량)의 용액에 0℃에서 디에틸 에테르 중 Et2Zn의 용액 (1M, 13.6 mL, 13.6 mmol, 2.00 당량)을 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, 1,2-디클로로에탄 (70 mL) 중 알릴 알콜 12 (2.65 g, 6.79 mmol, 1.00 당량)를 0℃에서 반응 플라스크에 첨가하였다. 30분 후, 반응물을 포화 NH₄Cl 용액 (100 mL)에 의해 켄칭하고, 실온으로 가온되도록 하였다. 유기 및 수성 층을 분리하고, 수성 상을 디클로로메탄 (2 x 120 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 2:1 → 1:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 시클로프로판 13 (2.59 g, 93%)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, C6D6) δ = 3.92 (dd, J = 3.7, 11.0 Hz, 1 H), 3.51 - 3.40 (m, 8 H), 2.72 (dd, J = 7.1, 12.9 Hz, 1 H), 2.39 (dd, J = 5.4, 17.6 Hz, 1 H), 2.38 (d, J = 12.2 Hz, 1 H), 2.15 (d, J = 12.2 Hz, 1 H), 2.12 (dt, J = 4.9, 12.2 Hz, 1 H), 2.02 (ddd, J = 2.9, 11.2, 14.6 Hz, 1 H), 1.92 - 1.82 (m, 3 H), 1.82 - 1.73 (m, 2 H), 1.69 - 1.54 (m, 5 H), 1.52 (dd, J = 6.1, 12.0 Hz, 1 H), 1.49 - 1.44 (m, 1 H), 0.98 (s, 3 H), 0.86 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 0.15 (d, J = 2.9 Hz, 1 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₃H₃₂NaO₆ [M+Na]⁺: 427.2091, 실측치 427.2088.

옥사비시클로[3.2.1]옥탄 화합물 14

시클로프로판 13 (2.45 g, 6.06 mmol, 1.00 당량) 및 2,6-디-tert-부틸-4-메틸피리딘 (4.40 g, 21.2 mmol, 3.50 당량)을 벤젠과 공비 건조하고, 디클로로메탄 (120 mL)에 용해시켰다. 4Å 분자체 (3.1 g)를 첨가하고, 반응 플라스크를 0℃로 냉각시켰다. 디클로로메탄 (1 M, 12.1 mL, 12.1 mmol 2.00 당량) 중 트리플산 무수물의 용액을 적가하고, 빙조를 제거하여 반응 플라스크를 실온으로 가온하였다. 2시간 후, 반응물을 트리에틸아민 (20 mL)으로 켄칭하고, 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 포화 NaHCO₃ 용액 (100 mL)을 첨가하고, 수성 상을 디클로로메탄 (2 x 120 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 염수 (100 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 3:1 펜탄:디에틸 에테르)에 의해 정제하여 옥사비시클로[3.2.1]옥탄 화합물 14 (1.42 g, 60%)를 수득하였다. 문헌 [Magnus et al., Org. Lett. 2009, 11, 3938-3941]을 참조한다.

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 5.73 (s, 1 H), 5.29 - 5.26 (m, 1 H), 4.04 - 3.76 (m, 8 H), 2.58 - 2.50 (m, 1 H), 2.46 (t, J = 15.1 Hz, 1 H), 2.31 - 2.24 (m, 2 H), 2.19 (t, J = 11.2 Hz, 1 H), 2.09 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 1.99 (dt, J = 4.4, 13.2 Hz, 1 H), 1.94 (dd, J = 2.4, 13.2 Hz, 1 H), 1.91 - 1.84 (m, 1 H), 1.83 - 1.71 (m, 3 H), 1.71 - 1.53 (m, 5 H), 0.88 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₃H₃₀O₅ [M+H]⁺: 387.2166, 실측치 387.2180.

모노케톤 화합물 15

아세톤 (14.6 mL) 및 물 (3.6 mL) 중 비스에틸렌케탈 14 (110 mg, 285 μmol, 1.0 당량)의 용액에 PTSA (21.6 mg, 85.2 μmol, 0.30 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3일 동안 교반하였다. 포화 NaHCO₃ 용액 (5 mL) 및 에틸 아세테이트 (25 mL)를 반응물에 순차적으로 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트 (2 x 15 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (20 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 이어서, 생성된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 4:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 모노케톤 15 (79.0 mg, 81%)를 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 5.73 (s, 1 H), 5.29 - 5.25 (m, 1 H), 3.98 - 3.90 (m, 4 H), 2.48 (dd, J = 8.8, 19.5 Hz, 1 H), 2.46 - 2.40 (m, 1 H), 2.36 (dd, J = 5.9, 12.7 Hz, 1 H), 2.34 - 2.25 (m, 2 H), 2.24 - 2.08 (m, 5 H), 2.09 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 1.95 (dd, J = 2.4, 13.2 Hz, 1 H), 1.90 - 1.81 (m, 1 H), 1.79 - 1.70 (m, 2 H), 1.70 - 1.61 (m, 2 H), 0.89 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₁H₂₇O₄ [M+H]⁺: 343.1909, 실측치 343.1919.

1-클로로이소퀴놀린 부가물 화합물 16

반응 플라스크 중 CeCl₃ (565 mg, 2.30 mmol, 10.0 당량)을 진공 하에 140℃에서 2시간 동안 가열하였다. 플라스크에 Ar을 채우고, 0℃로 냉각시켰다. 30분 후, THF (2.8 mL)를 첨가하고, 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 플라스크를 실온으로 가온되도록 하고, 추가로 16시간 동안 교반하였다.

1-클로로-7-아이오도이소퀴놀린을 문헌 [Subasinghe et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 1063-1069]에 제공된 절차에 따라 합성하였다.

THF (1.4 mL) 중 CeCl₃/THF 착물에 1-클로로-7-아이오도이소퀴놀린 (396 mg, 1.40 mmol, 6.00 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, -78℃로 냉각되도록 하였다. 이어서, 헥산 (1.6 M, 716 μL, 1.10 mmol, 5.00 당량)에 n-부틸리튬의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 동일한 온도에서 추가로 30분 동안 교반하고, 모노케톤 15 (78.5 mg, 229 μmol, 1.00 당량)를 THF (1.4 mL) 중에 캐뉼라삽입하였다. 추가로 30분 후, 포화 NH₄Cl 용액 (5 mL)을 교반된 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서 이를 실온으로 가온되도록 하였다. 혼합물을 EtOAc (5 mL)로 희석하고, 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc (3 x 5 mL)로 추출하고, 유기 층을 합하고, 염수 (5 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 이어서, 생성된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 2:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 1-클로로이소퀴놀린 부가물 16 (115 mg, 97%)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 8.34 (br. s, 1 H), 8.24 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.89 - 7.83 (m, 1 H), 7.76 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.56 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 5.63 (s, 1 H), 5.16 - 4.99 (m, 1 H), 4.02 - 3.87 (m, 4 H), 2.62 (ddd, J = 4.4, 9.8, 14.2 Hz, 1 H), 2.48 - 2.38 (m, 2 H), 2.36 - 2.26 (m, 3 H), 2.26 - 2.19 (m, 1 H), 2.18 - 2.08 (m, 2 H), 1.96 (dd, J = 2.4, 13.7 Hz, 1 H), 1.88 (dd, J = 5.1, 17.8 Hz, 1 H), 1.82 - 1.70 (m, 2 H), 1.67 - 1.57 (m, 3 H), 1.49 (d, J = 17.6 Hz, 1 H), 1.20 - 1.08 (m, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₀H₃₂NaO₄NCl [M+Na]⁺: 528.1918, 실측치 528.1929.

이소퀴놀린 화합물 17

디클로로메탄 (20 mL) 중 1-클로로이소퀴놀린 부가물 16 (115 mg, 227 μmol, 1.00 당량)의 용액을 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 피리딘 (183 μL, 2.30 mmol, 10.0 당량) 및 DMAP (13.9 mg, 114 μmol, 0.50 당량)를 용액에 순차적으로 첨가하였다. 5분 후, 트리플루오로아세트산 무수물 (158 μL, 1.14 mmol, 5.00 당량)을 적가하고, 추가로 30분 동안 교반하고, 이 시점에 pH 7 포스페이트 완충액 (15 mL)을 첨가하고, 이어서 반응 플라스크를 실온으로 가온하였다. 유기 및 수성 층을 분리하고, 수성 층을 디클로로메탄 (2 x 15 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (25 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 이어서, 생성된 잔류물을 짧은 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 2:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 트리플루오로아세틸화 생성물을 수득하였으며, 이를 신속하게 후속 단계에 사용하였다.

트리플루오로아세틸화 생성물 (130 mg, 216 mmol, 1.00 당량)을 벤젠과 공비 건조시키고, 벤젠 (4.3 mL) 중에 용해시켰다. AIBN (106 mg, 647 μmol, 3.00 당량)을 첨가하고, 반응 플라스크를 동결-펌프 해동 과정 (3 사이클)에 의해 탈기하였다. Bu₃SnH (1.16 mL, 4.31 mmol, 20.0 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 환류 하에 가온되도록 하였다. 3시간 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 이어서, 생성된 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 4:1 → 3:1 → 1:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 이소퀴놀린 17 (67.0 mg, 2 단계에서 65%)을 수득하였다. 또한 문헌 [Yamashita et al., J. Org. Chem. 2011, 76, 2408-2425]을 참조한다.

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 9.21 (s, 1 H), 8.46 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.77 (s, 1 H), 7.73 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.61 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.57 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 5.74 (s, 1 H), 5.29 - 5.23 (m, 1 H), 4.00 - 3.90 (m, 4 H), 3.11 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 2.49 (dd, J = 8.3, 11.2 Hz, 1 H), 2.47 - 2.41 (m, 1 H), 2.38 - 2.24 (m, 4 H), 2.24 - 2.14 (m, 2 H), 2.12 (d, J = 13.2 Hz, 1 H), 2.06 - 1.95 (m, 2 H), 1.91 (dd, J = 5.4, 17.6 Hz, 1 H), 1.83 (dq, J = 4.9, 11.7 Hz, 1 H), 1.77 (td, J = 2.3, 12.9 Hz, 1 H), 1.72 - 1.59 (m, 3 H), 0.52 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₀H₃₃NaNO₃ [M+Na]⁺: 478.2353, 실측치 478.2347.

케톤 1

아세톤 (1.4 mL) 및 물 (350 μL) 중 이소퀴놀린 17 (19.0 mg, 41.7 μmol, 1.00 당량)의 용액에 PTSA (20.9 mg, 83.4 μmol, 2.00 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 55℃로 가온하였다. 14.5시간 후, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 포화 NaHCO₃ 용액 (2 mL) 및 에틸 아세테이트 (2.5 mL)를 반응물에 순차적으로 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트 (2 x 2.5 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수 (2 mL)로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 이어서, 생성된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 3:2 → 1:2 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 케톤 1 (15.0 mg, 87%)을 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 9.23 (s, 1 H), 8.48 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 7.78 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.65 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 5.91 (s, 1 H), 5.40 - 5.35 (m, 1 H), 3.15 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 2.94 (d, J = 15.1 Hz, 1 H), 2.68 (d, J = 15.1 Hz, 1 H), 2.67 - 2.59 (m, 1 H), 2.58 - 2.41 (m, 4 H), 2.41 - 2.24 (m, 3 H), 2.24 - 2.10 (m, 2 H), 2.04 (tt, J = 4.6, 13.2 Hz, 1 H), 1.96 (dd, J = 5.4, 17.6 Hz, 1 H), 1.86 (dq, J = 5.1, 12.1 Hz, 1 H), 1.80 - 1.67 (m, 2 H), 0.55 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₂₈H₃₀NO₂ [M+H]⁺: 412.2271, 실측치 412.2288.

환원성 아미노화에 대한 일반적 방법

THF 및 i-PrOH (3:1, 0.02 M) 중 케톤 (1.00 당량)의 용액에 아민 (4.00 당량) 및 Ti(Oi-Pr)₄ (2.50 당량)를 순차적으로 첨가하였다. 이어서, 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -20℃로 냉각시키고, NaBH₄ (1.50 당량)를 첨가하였다. 반응이 완료되면, 포화 NaHCO₃ 용액을 첨가하고, 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 수성 층을 CHCl₃으로 추출하고, 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다.

C3 α-(3S,4S)-피롤리딘-3,4-디올 D

조 혼합물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 10:1 EtOAc: MeOH 중 2M NH₃ 용액 → 90:9:1 CHCl₃:MeOH:5N NH₄OH (수성))에 의해 순차적으로 정제하여 C3 α-(3S,4S)-피롤리딘-3,4-디올 D (25 mg, 60%)를 수득하였다.

¹H NMR (600 MHz, 메탄올-d4) δ = 9.19 (s, 1 H), 8.37 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.87 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.73 (dd, J = 1.5, 8.5 Hz, 1 H), 5.71 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 5.26 (d, J = 2.9 Hz, 1 H), 4.04 (t, J = 3.8 Hz, 2 H), 3.30 (td, J = 1.5, 3.4 Hz, 1 H), 3.21 (t, J = 10.6 Hz, 1 H), 3.06 (dd, J = 5.9, 10.0 Hz, 2 H), 2.63 (dd, J = 3.5, 10.6 Hz, 2 H), 2.49 (dd, J = 8.5, 11.4 Hz, 1 H), 2.46 - 2.35 (m, 4 H), 2.34 - 2.20 (m, 3 H), 2.16 (td, J = 4.6, 9.0 Hz, 1 H), 2.09 (d, J = 12.3 Hz, 1 H), 2.05 - 1.90 (m, 4 H), 1.88 (dd, J = 5.3, 17.6 Hz, 1 H), 1.76 - 1.66 (m, 2 H), 1.61 (dt, J = 7.6, 10.6 Hz, 1 H), 1.29 (dq, J = 5.3, 12.3 Hz, 1 H), 0.54 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₂H₃₉N₂O₃ [M+H]⁺: 499.2955, 실측치 499.2960.

C3 α-피롤리딘 E

조 혼합물을 정제용 TLC (실리카 겔, 용리액: 20:10:3 EtOAc:헥산: MeOH 중 2M NH₃ 용액)에 의해 정제하여 α-피롤리딘 19A (2.5 mg, 55%)를 수득하였다.

¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ = 9.22 (s, 1 H), 8.48 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 7.75 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 7.62 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.59 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 5.72 (s, 1 H), 5.27 (d, J = 2.9 Hz, 1 H), 3.14 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 2.63 (br. s., 4 H), 2.52 (dd, J = 8.8, 11.2 Hz, 1 H), 2.42 - 2.29 (m, 3 H), 2.28 - 2.15 (m, 5 H), 2.12 (d, J = 12.3 Hz, 1 H), 2.10 - 2.00 (m, 2 H), 1.93 (dd, J = 5.3, 17.0 Hz, 1 H), 1.90 - 1.83 (m, 2 H), 1.80 (br. s., 4 H), 1.72 (td, J = 8.8, 12.9 Hz, 1 H), 1.63 (br. s., 1 H), 1.37 (dq, J = 3.5, 11.7 Hz, 1 H), 0.53 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₂H₃₉N₂O [M+H]⁺: 467.3057, 실측치 467.3064.

C3 α-아제티딘 F

조 혼합물을 정제용 TLC (실리카 겔, 용리액: 1:1 EtOAc:MeOH)에 의해 정제하여 α-아제티딘 18A (약 1.5 mg, 38%)를 수득하였다.

¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ = 9.24 (s, 1 H), 8.50 (d, J = 5.4 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 7.77 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.64 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.60 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 5.74 (s, 1 H), 5.28 (br. s., 1 H), 3.24 (br. s., 4 H), 3.16 (t, J = 9.8 Hz, 1 H), 2.54 (dd, J = 8.8, 11.2 Hz, 1 H), 2.42 - 2.30 (m, 3 H), 2.30 - 2.13 (m, 5 H), 2.12 - 2.00 (m, 2 H), 1.95 (dd, J = 5.4, 18.1 Hz, 1 H), 1.93 - 1.78 (m, 3 H), 1.74 (td, J = 8.3, 12.2 Hz, 1 H), 1.67 - 1.54 (m, 3 H), 1.11 (q, J = 12.2 Hz, 1 H), 0.55 (s, 3 H).

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₁H₃₇N₂O [M+H]⁺: 453.2906, 실측치 453.2900.

C3 α-(R)-3-(Boc-아미노)피롤리딘 18

조 혼합물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: MeOH 중 1:2 EtOAc:헥산 + MeOH 중 5% 2M NH₃ 용액 → 1:1 EtOAc:헥산 + 5% 2M NH₃ 용액)에 의해 순차적으로 정제하여 C3 α-(R)-3-(Boc-아미노)피롤리딘 18 (105 mg, 65%)을 수득하였다.

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₇H₄₈N₃O₃ [M+H]⁺: 582.3690, 실측치 582.3680.

C3 α-3-(Boc-아미노)아제티딘 19

조 혼합물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 40:1 DCM:MeOH → 20:1 DCM:MeOH)에 의해 순차적으로 정제하여 C3 α-3-(Boc-아미노)피롤리딘 19 (70 mg, 40%)를 수득하였다.

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₆H₄₆N₃O₃ [M+H]⁺: 568.3534, 실측치 568.3545.

Boc-탈보호에 대한 일반적 방법

Boc-아민을 DCM 및 TFA (6:1, 0.025 M) 중에서 2시간 동안 교반하고, 혼합물을 감압 하에 농축시켰다.

C3 α-(R)-3-아미노피롤리딘 B

조 혼합물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 90:9:1 CHCl₃:MeOH:5N NH₄OH (수성))에 의해 순차적으로 정제하여 C3 α-(R)-3-아미노피롤리딘 B (85 mg, 99%)를 수득하였다.

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ = 9.23 (s, 1 H), 8.50 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 7.77 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.63 (d, J = 5.4 Hz, 1 H), 7.60 (dd, J = 1.2, 8.5 Hz, 1 H), 5.74 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 5.28 (d, J = 2.9 Hz, 1 H), 3.57 - 3.50 (m, 1 H), 3.16 (t, J = 10.0 Hz, 1 H), 2.94 (dd, J = 6.8, 9.3 Hz, 1 H), 2.82 (dt, J = 5.6, 8.7 Hz, 1 H), 2.67 (dd, J = 8.3, 15.1 Hz, 1 H), 2.53 (dd, J = 8.3, 11.2 Hz, 1 H), 2.44 - 2.30 (m, 5 H), 2.29 - 2.14 (m, 5 H), 2.14 - 1.99 (m, 3 H), 1.95 (dd, J = 5.4, 17.1 Hz, 1 H), 1.87 (dq, J = 5.4, 12.2 Hz, 1 H), 1.84 (t, J = 12.2 Hz, 1 H), 1.73 (td, J = 8.5, 12.3 Hz, 1 H), 1.63 (dt, J = 7.8, 10.7 Hz, 1 H), 1.52 (tdd, J = 5.6, 7.6, 13.0 Hz, 1 H), 1.36 (dq, J = 4.9, 12.7 Hz, 1 H), 0.55 (s, 3 H);

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₂H₄₀N₃O [M+H]⁺: 482.3166, 실측치 482.3152.

C3 α-3-아미노아제티딘 C

조 혼합물을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 용리액: 90:9:1 CHCl₃:MeOH:5N NH₄OH (수성))에 의해 순차적으로 정제하여 C3 α-3-아미노피롤리딘 C (50 mg, 87%)를 수득하였다.

¹H NMR (600MHz,CDCl₃-d) δ = 9.22 (s, 1 H), 8.48 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.78 (s, 1 H), 7.75 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.62 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.58 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 5.75 (s, 1 H), 5.30 (s, 2 H), 4.10 - 3.72 (m, 4 H), 3.23 - 3.06 (m, 2 H), 2.51 (dd, J = 8.8, 11.2 Hz, 1 H), 2.45 - 2.30 (m, 3 H), 2.26 (t, J = 11.2 Hz, 1 H), 2.23 - 2.13 (m, 3 H), 2.08 - 2.00 (m, 1 H), 2.00 - 1.77 (m, 5 H), 1.77 - 1.69 (m, 1 H), 1.62 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 1.27 (br. s., 1 H), 0.53 (s, 3 H);

HRMS (ESI) (m/z) 계산치 C₃₁H₃₈N₃O [M+H]⁺: 468.3009, 실측치 468.3000.

실시예 3: 판랩(Panlab) 검정 스크리닝

잠재적 오프-타겟 활성을 평가하기 위해 화합물 A, B, C 및 D를 표준 검정 키트를 사용하여 판랩 검정에서 실험하였다. 이들 연구에 사용된 방법은 신뢰성 및 재현성을 극대화하도록 과학 문헌으로부터 채택하였다. 얻어진 결과의 타당성 확보를 위해 각 검정의 필수 부분으로서 참조 표준물을 실행시켰다.

IC₅₀ 값은 MathIQTM (ID 비지니스 솔루션즈 리미티드(ID Business Solutions Ltd.), 영국)를 사용한 비-선형 최소 제곱 회귀 분석에 의해 결정하였다. 억제 상수 (Ki)가 제시되는 경우, K_i 값은 시험 화합물의 관찰 IC₅₀, 검정에 사용된 방사성리간드의 농도, 및 리간드의 KD에 대한 이력 값 (유로핀스 판랩스, 인크.(Eurofins Panlabs, Inc.)에서 실험적으로 획득)을 사용하여 쳉 및 프루소프의 방정식 (Cheng, Y., Prusoff, W.H., Biochem. Pharmacol. 22:3099-3108, 1973)을 사용해 계산하였다. 제시되는 경우, 경쟁적 결합 곡선의 기울기를 정의하는 힐 계수 (nH)는 MathIQTM을 사용하여 계산하였다. 1.0과 상당히 다른 힐 계수는 결합 변위(binding displacement)가 단일 결합 부위에서의 질량 작용의 법칙을 따르지 않음을 제시하는 것일 수 있다.

화합물 A

화합물 A를 10μM에서 100개 초과의 판랩 검정에서 실험하였고 이는 단지 8개의 표적에 대하여 50% 초과의 억제를 가졌다. 추적 IC₅₀ 시험은 가장 강력한 오프-타겟 활성이 단지 3.26μM이었다는 것을 보여주었고 (도 1), 이러한 오프-타겟 활성을 갖는 경우에도 화합물 A는 거의 1000의 치료 지수를 가지며, 따라서 상당히 선택적이다. 오프-타겟에 대하여 화합물 A뿐만 아니라 대조군 화합물에 대한 용량 반응 곡선이 포스포디에스테라제 PDE3, 수송체 아데노신, 수송체 도파민, 타키키닌 NK₁ 및 오피에이트 μ(OP3, MOP)에 각각 상응하는 도 1, 2, 3, 4 및 5에 제시되어 있다.

화합물 B

화합물 B를 판랩 hERG 및 나트륨 채널 검정에 추가하여 화합물 F 스크리닝으로부터의 히트(hit)를 포함한 30개 판랩 검정의 하위세트에서 실험하였다. 이는 오프-타겟 프로파일의 관점에서 화합물 B와 화합물 F의 직접적 비교를 가능하게 한다. hERG 및 나트륨 채널 검정 (각각 10μM에서 34% 및 65% 억제)으로부터의 결과는 화합물 B가 hERG의 마이크로몰 억제제라는 것을 보여주는 실시예 4에서 확인된 결과와 일치했다. 화합물 B는 단지 8개의 표적에 대해 10μM 농도에서 50% 초과의 억제를 제시하였다.

화합물 C

화합물 C는 판랩 hERG 및 나트륨 채널 검정에 추가하여 화합물 F 스크리닝으로부터의 히트를 포함한 30개 판랩 검정의 하위세트에서 실험하였다. hERG 및 나트륨 채널 검정 (각각 10μM에서 49% 및 66% 억제)으로부터의 결과는 화합물 C가 hERG의 마이크로몰 억제제라는 것을 보여주는 실시예 4에서 확인된 결과와 일치했다. 화합물 C는 단지 4개 표적에 대해 10μM 농도에서 75% 초과의 억제를 제시하였다.

화합물 D

화합물 D는 판랩 hERG 및 나트륨 채널 검정에 추가하여 화합물 F 스크리닝으로부터의 히트를 포함한 30개 판랩 검정의 하위세트에서 실험하였다. hERG 및 나트륨 채널 검정 (각각 10μM에서 20% 및 65% 억제)으로부터의 결과는 화합물 D가 hERG의 마이크로몰 억제제라는 것을 보여주는 실시예 4에서 확인된 결과와 일치했다. 화합물 D는 단지 3개 표적에 대해 10μM 농도에서 75% 초과의 억제를 제시하였다.

화합물 F

화합물 F는 100개 초과의 판랩 검정에서 실험하였고, 10μM에서 20개 초과의 표적에 대해 50% 초과의 억제를 갖는 것으로 확인되었다. 화합물 F가 억제하는 표적 중, 단지 12개가 75% 이상의 억제를 가졌다.

실시예 4: hERG 활성의 결정

포유동물 세포에서 발현된 hERG (인간 에테르-아-고-고 관련 유전자) 칼륨 채널 전류 (신속한 활성화, 지연 정류 심장 칼륨 전류 I_Kr에 대한 대용물)에 대한 화합물 A, B, C, D, E, 및 F의 시험관내 효과를 자동화 병렬 패치 클램프 시스템인 QPatch HT (소피온 바이오사이언스(Sophion Bioscience) A/S, 덴마크)를 사용하여 실온에서 평가하였다. 시험 물품을 1μM, 3μM, 10μM 및 30μM에서 평가하였다. 각 시험 물품 농도를 적어도 3개 세포에서 실험하였다. 각 시험 물품 농도에 대한 노출의 지속시간은 최소 3분이었다. 양성 대조군 (시사프리드, 표 1)은 %억제의 예상된 범위 이내에서 시험했다.

표 1: 시사프리드의 hERG 억제

화합물 A

화합물 A는 hERG 검정에서 30μM 초과의 IC₅₀을 갖는 것으로 확인되었다 (표 2). 이는 종래 코르티스타틴 A 유사체를 능가하는 주요 개선을 이루고 (화합물 E 및 F를 참조), 화합물 A가 코르티스타틴 패밀리로부터 CDK8 및 CDK19의 전례없는 선택적 억제제임을 또한 제안한다. 10μM 및 30μM에서 관찰된 부차적 탁도에 대한 논의는 실시예 5에 제시된다.

표 2: 화합물 A의 hERG 억제

*터보솔 분석은 본 시험 물품이 이 농도에서 용해도 문제가 있을 수 있음을 나타낸다. 혼탁 형태로 가시적 침전이 관찰됨.

화합물 B

화합물 B는 hERG 검정에서 대략 10μM의 IC₅₀을 갖는 것으로 확인되었다 (표 3). 이는 종래 코르티스타틴 A 유사체를 능가하는 주요 개선을 이루고 (화합물 E 및 F를 참조), 화합물 B가 코르티스타틴 패밀리로부터 CDK8 및 CDK19의 전례없는 선택적 억제제임을 또한 제안한다. 직접적으로 유사한 비치환된 피롤리딘 (화합물 E)은 서브-마이크로몰 hERG 활성을 갖는다. 상응하는 용량 반응 곡선이 도 6에 제시된다. 30μM에서 관찰된 부차적 탁도에 대한 논의는 실시예 5에 제시된다.

표 3: 화합물 B의 hERG 억제

*터보솔 분석은 본 시험 물품이 이 농도에서 용해도 문제가 있을 수 있음을 나타낸다. 가시적 침전이 관찰됨.

화합물 C

화합물 C는 hERG 검정에서 대략 10μM의 IC₅₀을 갖는 것으로 확인되었다 (표 4). 이는 종래 코르티스타틴 A 유사체를 능가하는 주요 개선을 이루고 (화합물 E 및 F를 참조), 화합물 C가 코르티스타틴 패밀리로부터 CDK8 및 CDK19의 전례없는 선택적 억제제임을 또한 제안한다. 직접적으로 유사한 비치환된 아제티딘 (화합물 F)은 서브-마이크로몰 hERG 활성을 갖는다. 상응하는 용량 반응 곡선이 도 7에 제시된다. 30μM에서 관찰된 부차적 탁도에 대한 논의는 실시예 5에 제시된다.

표 4: 화합물 C의 hERG 억제

*터보솔 분석은 본 시험 물품이 이 농도에서 용해도 문제가 있을 수 있음을 나타낸다. 가시적 침전이 관찰됨.

화합물 D

화합물 D는 hERG 검정의 한자리 마이크로몰 활성을 갖는 것으로 확인되었다 (표 5). 이는 종래 코르티스타틴 A 유사체를 능가하는 주요 개선을 이루고 (화합물 E 및 F를 참조), 화합물 D가 코르티스타틴 패밀리로부터 CDK8 및 CDK19의 전례없는 선택적 억제제임을 또한 제안한다. 직접적으로 유사한 비치환된 피롤리딘 (화합물 E)은 서브-마이크로몰 hERG 활성을 갖는다. 상응하는 용량 반응 곡선이 도 8에 제시된다. 30μM에서 관찰된 부차적 탁도에 대한 논의는 실시예 5에 제시된다.

표 5: 화합물 D의 hERG 억제

*터보솔 분석은 본 시험 물품이 이 농도에서 용해도 문제가 있을 수 있음을 나타낸다. 가시적 침전이 관찰됨.

화합물 E

화합물 E는 hERG 검정에서 서브-마이크로몰 활성을 갖는 것으로 확인되었다 (표 6). 직접적으로 유사한 치환된 피롤리딘 (화합물 B 및 D)은 10 내지 100배 더 낮은 hERG 활성을 갖는다. 상응하는 용량 반응 곡선이 도 9에 제시된다. 30μM에서 관찰된 부차적 탁도에 대한 논의는 실시예 5에 제시된다.

표 6: 화합물 E의 hERG 억제

*터보솔 분석은 본 시험 물품이 이 농도에서 용해도 문제가 있을 수 있음을 나타낸다. 가시적 침전이 관찰됨.

화합물 F

본 연구의 목적은 하기 3종의 심장 이온 채널 전류에 대한 화합물 F의 시험관내 효과를 평가하는 것이었다: I_Kr, 인간 에테르-아-고-고 관련 유전자에 의해 코딩된 hERG 채널을 통하여 신속한 활성화, 지연 정류기 칼륨 전류; I_Ks, hKCNQ1/hKCNE1에 의해 코딩된 느린 활성화, 지연 정류기 심장 칼륨 채널 전류; 및 I_Na, CHO 또는 HEK293 세포에서 hNav1.5에 의해 코딩된 인간 심장 Na+ 채널 전류 (표 7). 본 기능적 검정은 고처리량 평면 전압-클램프 기술 PatchXpress 7000A를 사용하여 수행되었다.

신호 진폭은 대조군 (비히클) 동안 정상 상태(steady state)에서 및 증가하는 농도의 시험 화합물의 존재하에 정량하였다. 화합물에 반응한 신호의 농도-의존성 변화는 대조군 (약물-전/촉발-전)에 대한 퍼센트 차단으로 표현되었고, 시험된 세포/웰의 명시된 수 (N)의 평균 ± SEM (표준 오차)으로 보고된다. IC₅₀ 값은 적용가능한 경우에 평균 농도-반응 데이터 (평균 ± SEM)를 힐 방정식을 사용해 피팅함으로써 결정하였다.

hERG IC₅₀은 PatchXpress로 수행된 본 기능적 전압 클램프 검정에서 0.37μM인 것으로 결정되었다. 30μM의 가장 높은 시험 농도에, 화합물은 68 ± 15%만큼 I_Ks를 억제하였다. 본 기능적 검정에서 화합물에 의한 I_Ks 억제의 계산된 IC₅₀ 값은 17μM이었다. 30μM의 가장 높은 시험 농도에서, 화합물은 3Hz의 펄스 속도에서 98 ± 1%만큼, 및 0.2Hz의 더 느린 펄스 속도에서 86 ± 2%만큼 I_Na를 억제하였고, 따라서 이는 유의한 속도-의존성 억제 효과를 나타낸다. 본 기능적 I_Na 검정의 0.2Hz 및 3Hz의 펄스 속도에서의 계산된 IC₅₀ 값은 각각 14μM 및 6.5μM이었다.

표 7: 화합물 F의 채널 차단 데이터

실시예 5: 터보솔

생리 염수 용액 (HB-PS + 0.3% DMSO) 중의 용해도를 결정하기 위해 시험 물품에 대해 터보솔 평가를 실행하였다. 비히클 대조군에 의해 결정된 바의 실험을 위한 용해도 한계는 8.0 x 103 LSU (광 산란 유닛, 수평 흑색 라인)이었다. 획득된 데이터를 기초로, 생리 염수 용액 (HB-PS + 0.3% DMSO) 중에 용해도 문제가 있을 수 있다. 침전은 가시적이었다.

화합물 A 및 E

화합물 A 및 E를, 그의 용해도를 결정하기 위해 터보솔 검정에서 실험하였다 (표 8 및 도 10). 화합물 A는 10μM 및 30μM의 농도에서 약간 불용성인 것으로 확인되었으나, 80% 투과도 표준에 대한 LSU 판독치보다 훨씬 아래에 있었다. 화합물 E는 30μM에서 약간 불용성인 것으로 확인되었다.

표 8: 화합물 A 및 화합물 E의 터보솔 분석

*터보솔 분석은 본 시험 물품이 이 농도에서 용해도 문제가 있을 수 있음을 나타낸다. 가시적 침전이 관찰됨.

LSU: 광 산란 유닛

60% TS 및 80% TS: 각각 60% 및 80% 투과도에 대한 표준.

화합물 B 및 C

화합물 B 및 C를, 그의 용해도를 결정하기 위해 터보솔 검정에서 실험하였다 (표 9 및 도 11). 화합물 B 및 C는 둘 다 30μM 농도에서 약간 불용성인 것으로 확인되었으나, 80% 투과도 표준에 대한 LSU 판독치보다 훨씬 아래에 있었다.

표 9: 화합물 B 및 화합물 C의 터보솔 분석

*터보솔 분석은 본 시험 물품이 이 농도에서 용해도 문제가 있을 수 있음을 나타낸다. 가시적 침전이 관찰됨.

LSU: 광 산란 유닛

60% TS 및 80% TS: 각각 60% 및 80% 투과도에 대한 표준.

화합물 D

화합물 D를, 그의 용해도를 결정하기 위해 터보솔 검정에서 실험하였다 (표 10 및 도 12). 화합물 D는 30μM 농도에서 약간 불용성인 것으로 확인되었으나, 80% 투과도 표준에 대한 LSU 판독치보다 훨씬 아래에 있었다.

표 10: 화합물 D의 터보솔 분석

*터보솔 분석은 본 시험 물품이 이 농도에서 용해도 문제가 있을 수 있음을 나타낸다. 가시적 침전이 관찰됨.

LSU: 광 산란 유닛

60% TS 및 80% TS: 각각 60% 및 80% 투과도에 대한 표준.

실시예 6: 화합물 A 및 화합물 D의 내약성 연구

25마리 암컷 NSG 마우스를 무작위로 표 11에 기재된 바와 같이 다양한 치료군에 할당하였다. 모든 마우스는 하기 명시되지 않는 한 7일 동안 치료하였다.

연구 제0일 내지 제6일 (7개 용량)에, 화합물 A를 10mL/kg의 부피로 경구 위관영양을 통해 투여하고 화합물 D를 10mL/kg의 부피로 외측 꼬리 정맥에 정맥내 주사를 통해 투여하였다. 체중은 15일 동안 (제0일 내지 제14일) 매일 기록하고 동물 건강을 매일 평가하였다.

10mg/kg의 용량으로, 화합물 A 또는 화합물 D가 투여된 2마리 마우스 중 1마리는 투여 제5일까지 >15% 체중 감소를 나타내어 치료 휴지되었다. 마우스는 관찰 주기의 추가의 7일 동안 회복되었다. 작용제 둘 다는 3mg/kg 이하의 용량에서 내약성이 있다(<6% 체중 감소).

마우스는 이환의 징후 및 체중을 임상적으로 매일 모니터링하였다. 이환의 징후를 나타내는 마우스는 연구 가이드라인에 따라 안락사시켰다. 내약성은 이환의 임상적 징후 예컨대 부스스한 털, 굽은 등, 노력성 호흡, 횡와위 또는 보행 장애 및 15% 초과의 체중 감소를 보이지 않은 용량으로 정의된다.

화합물 A는 3mg/kg 이하의 용량에서 내약성이 우수했고, 마우스는 투여 기간의 말기에 대략 자신의 초기 체중 또는 그보다 약간 높은 체중으로 돌아갔다 (도 13). 10mg/kg 용량군에서 마우스는 작은 (대략 15%) 초기 체중 감소를 나타냈지만, 휴약기 후에 건강 체중으로 회복되었다 (도 14).

화합물 D는 3mg/kg 이하의 용량에서 내약성이 우수했고, 마우스는 자신의 초기 체중 또는 그보다 약간 높은 체중으로 돌아갔다 (도 15). 10mg/kg 용량군에서 마우스는 대략 20% 초기 체중 감소를 나타냈지만, 휴약기 후에 건강 체중으로 회복되었다 (도 16).

표 11: 화합물 A 및 화합물 D에 대한 내약성 연구의 연구군

실시예 7: 코르티스타틴 A 및 화합물 F의 내약성 연구

화합물 F

27마리의 마우스를 화합물 F의 내약성 연구에 사용하였다. 마우스를 무작위로 n=3 마우스/군로 다양한 치료군에 할당하였다. IP 투여된 0.3mg/kg 화합물 F의 저용량군에서, 마우스는 8일의 휴약기 후에 20mg/kg 화합물 F, IP의 보다 높은 용량으로 다시 챌린징시켰다. 모든 마우스는 하기 명시되지 않는 한 7일 동안 치료하였다.

경구 투여군에서, 3mg/kg에서의 화합물 F는 3마리 마우스 중 3마리에서 >15% 체중 감소를 초래하여 휴약기가 요구된 한편, 10mg/kg의 용량은 >20% 체중 감소로 인해 내약성이 없었다. 1mg/kg 용량에서, 평균 체중 감소는 ~10%이었다 (도 17).

IP 투여군에서, 3마리 마우스 중 2마리에서 20mg/kg 용량은 >15% 체중 감소를 초래했다.

마우스는 이환의 징후 및 체중을 임상적으로 매일 모니터링하였다. 이환의 징후를 나타내는 마우스는 연구 가이드라인에 따라 안락사시켰다. 내약성은 이환의 임상적 징후 예컨대 부스스한 털, 굽은 등, 노력성 호흡, 횡와위 또는 보행 장애 및 15% 초과의 체중 감소를 보이지 않은 용량으로 정의된다.

코르티스타틴 A

마우스에 MV4;11-mCLP 세포를 정맥내로 주사하고 주사후 제3일 및 제7일에 촬영하였다. 이 시점에 마우스를 평균 생물발광 ~ 8x10⁶ ph/s/cm²/sr (군 당 n=3)을 갖는 7개 치료군으로 분할하였다: cA @ 5mg/kg, 2.5mg/kg, 1.25mg/kg, 0.625mg/kg, 0.3125mg/kg 및 0.15625mg/kg의 코르티스타틴 A 또는 비히클. 모든 처리는 10 ml/kg 1일 1회의 부피로 IP 투여하였다. 약물은 각각의 군에 체중 감소 ~15%에 도달될 때까지 투여되면서 용량을 기반으로 독성의 다양한 수준을 보여주었다 (도 18). 생물발광 및 체중 데이터는 7주 동안 3-4일마다 수집하였다. 마우스는 20% 체중 감소에 도달했을 때 또는 수명이 다해갈 때 희생시켰다. 희생 후에, 마우스는 보우인 (bouin) 고정제 중에 고정시켰다. 추가적으로, 혈액은 희생된 6마리 마우스로부터 제64일에 채혈하고 CBC 분석을 Hemavet 950FS에서 행하였다.

실시예 8: 화합물 A, B, C 및 D 키노메 프로파일링

방사측정 단백질 키나제 검정 (33팬퀴나제(PanQinase) 활성 검정)을 320종 단백질 키나제의 키나제 활성을 측정하기 위해 사용하였다. 모든 키나제 검정을 50μl 반응 부피로 퍼킨 엘머(Perkin Elmer) (미국 매사추세츠주 보스톤)로부터의 96-웰 플래시플레이츠(FlashPlatesTM)에서 수행하였다. 반응 칵테일을 하기 순서의 4 단계로 피펫팅하였다:

1. 비-방사성 ATP 용액 10μl (H2O 중)

2. 검정 완충제/ [γ-33P]-ATP 혼합물 25 μl

3. 10% DMSO 중 시험 샘플 5 μl

4. 효소/기질 혼합물 10 μl

모든 단백질 키나제를 위한 검정은 70mM HEPES-NaOH pH 7.5, 3mM MgCl₂, 3mM MnCl₂, 3μM Na-오르토바나데이트, 1.2mM DTT, ATP (가변량, 각 키나제의 겉보기 ATP-Km에 상응함), [γ-33P]-ATP (웰 당 대략 8 x 1005 cpm), 단백질 키나제 (가변량), 및 기질 (가변량)을 포함하였다. 모든 PKC 검정 (PKC-mu 및 PKC-nu 검정 제외)은 추가로 1mM CaCl₂, 4mM EDTA, 5μg/ml 포스파티딜세린 및 1μg/ml 1,2-디올레일-글리세롤을 함유했다.

CAMK1D, CAMK2A, CAMK2B, CAMK2D, CAMK4, CAMKK1, CAMKK2, DAPK2, EEF2K, MYLK, MYLK2 및 MYLK3 검정은 추가로 1μg/ml 칼모듈린 및 0.5mM CaCl₂를 포함하였다. PRKG1 및 PRKG2 검정은 추가로 1μM cGMP를 함유하였다. DNA-PK 검정은 추가로 2.5μg/ml DNA를 함유하였다. 단백질 키나제 반응 칵테일을 60분 동안 30℃에서 인큐베이션하였다. 반응을 2% (v/v) H₃PO₄ 50μl로 정지시키고, 플레이트는 흡인하여 200μl 0.9 % (w/v) NaCl로 2회 세척하였다. 33Pi의 도입 ("cpm"의 카운팅)을 마이크로플레이트 섬광 계수기 (마이크로베타(Microbeta), 왈락)에 의해 결정하였다. 모든 단백질 키나제 검정은 베크만 쿨터(BeckmanCoulter) 바이오멕 2000/SL 로보트 시스템으로 실행되었다.

프로퀴나제(ProQinase)에 의해 제공된 모든 단백질 키나제를 또한, 전장 또는 효소적 활성 단편으로서, Sf9 곤충 세포 또는 이. 콜라이에서 재조합 GST-융합 단백질 또는 His-태그부착 단백질로서 발현시켰다. 모든 키나제는 인간 cDNA로부터 생산되고 각각 GSH아피니티 크로마토그래피 또는 고정된 금속에 의해 정제하였다. 친화성 태그는 정제 동안 수많은 키나제에서 제거되었다. 단백질 키나제의 순도는 SDSPAGE/쿠마시 염색에 의해 검사하였고, 정체성은 질량 분광분석법에 의해 점검하였다.

외부 판매업체 CAR=카르나 바이오사이언시스 인크.(Carna Biosciences Inc.); INV=라이프 테크놀로지스(Life Technologies) (인비트로젠 코포레이션); MIL=머크-밀리포어 (밀리포어 코포레이션(Millipore Corporation))로부터의 키나제는 판매업체 지침서에 의해 발현, 정제 및 품질-관리하였다.

각 키나제에 대해, 3개 웰의 cpm의 중앙값은 "저 대조군"으로 정의되었다 (n=3). 이 값은 단백질 키나제의 부재하에 그러나 기질의 존재하에 플레이트에 대한 방사능의 비특이적 결합을 반영한다. 추가적으로, 각 키나제에 대해 3개의 다른 웰의 cpm의 중앙값은 억제제의 부재하의 "고 대조군", 즉 완전 활성으로 취하였다 (n=3). 각 효소의 고 대조군과 저 대조군 사이의 차이를 100 % 활성으로 취하였다. 데이터 평가의 일부로서 각 키나제의 저 대조군은 그의 상응하는 "화합물 값"으로부터 뿐만 아니라 고 대조군 값으로부터 차감했다. 각각 화합물 웰에 대한 잔류 활성 (% 단위)은 하기 화학식을 사용하여 계산되었다:

잔류 활성 (%) = 100 X [(화합물 신호- 저 대조군) / (고 대조군 - 저 대조군)]

1μM 화합물 A (CDK8/시클린 C 억제를 위한 100-배 IC₅₀)는 320종 키나제 중 CDK8/시클린 C에 대해 선택적이다 (도 19). 시험은 업체 프로퀴나제에 의한 시험관내 키나제 인산화 검정 패널을 사용하여 행하였다. 각 키나제에 대해 2개 반복물로 평균 퍼센트 억제가 제시된다. 화합물 A에 의해 > 50% 억제의 평균치를 갖는 하기 5종의 키나제가 있었다: CDK8/시클린 C, CAMK2B, LTK 및 MUSK. 그러나, 하기 이유로 인해 단지 CDK8/시클린 C만이 화합물 A에 의해 세포 또는 생체내에서 억제될 가능성이 있다: (1) GSG2는 코르티스타틴 A의 세포내 표적 중에 배제됨 (Shair Nature 2015 참조), (2) CAMK2B (36%, 79%) 및 MUSK (36%, 111%)의 경우 반복물이 불일치함, (3) LTK 억제는 ALK 억제와 불일치함. 화합물 A는 ALK를 시험관내 억제하지 않지만 (<10% 억제) LTK 및 ALK 키나제 도메인은 79% 동일한 것이고 또한 FDA 승인 ALK 억제제 크리조티닙 (잘코리(XALKORI))은 LTK를 억제한다.

재시험 시에, CAMK2B, LTK 및 MUSK는 10μM 이하의 화합물 A에 의해 억제되지 않았다. 또한 GSG2를 시험관내 억제한 코르티스타틴 A가 세포 용해물에서 GSG2를 억제하지 않았던 것이 이전에 결정된 바 있다 (Shair Nature, 2015). 따라서, CDK8/시클린 C는 키노메 패널에서 1μM 화합물 A에 의해 강하게 억제되는 유일하게 검증된 키나제였다.

또한 1μM 화합물 B, C 및 D는 각각 도 20, 도 21 및 도 22에서 제시된 바와 같이 키노메 프로파일링에서 CDK8/시클린 C에 대해 선택적이었다.

실시예 9: 화합물 A, B, C, 및 D CDK8 결합 IC₅₀

인터페론-감마 (IFNγ)-자극된 STAT1-S727 인산화의 억제에 의해 측정된 바의 세포에서의 CDK8 억제. 화합물은 바이알 중에 1 x 10^-03 M/100% 원액 200μl로서 공급되었다. 바이알은 우수한 상태로 도착하였고 원액의 2 x 100μl 각각을 표 12에 따라, 96 웰 "마스터 플레이트" (바코드 부착 "11273-UNH-01")의 웰 A2 내지 H2로 옮겼다.

표 12: CDK8 결합 검정을 위한 화합물의 웰 ID

시험전에, 마스터 플레이트의 칼럼 2 중의 1 x 10^-03 M 원액은 100 % DMSO를 용매로 사용하여 연속 반-로그 희석을 하였다. 이로써 칼럼 12 중의 3 x 10^-08 M/100% DMSO를 희석 종점으로 하여, 10개의 개별 농도가 수득되었다. 칼럼 1 및 7은 대조군으로서 100% DMSO를 채웠다. 후속하여, 연속 희석된 카피 플레이트의 각 웰로부터의 1 x 10μl를 "화합물 희석 플레이트", 바코드 부착 "11273-UNH-01" 내로 96 채널 피펫터로 분취하였다.

본 과정에서, 90μl H₂O를 화합물 희석 플레이트의 각 웰에 첨가하였다. 잠재적 침전을 최소로 하기 위해, 물은 화합물 용액을 검정 플레이트로 옮기기 단지 수분 전에 플레이트에 첨가하였다. 플레이트를 완전히 진탕시키고, 이로써 "화합물 희석 플레이트/10% DMSO"을 수득하였다. 화합물 희석 플레이트는 작업일의 종료시에 폐기되었다.

검정을 위해, 화합물 희석 플레이트/10% DMSO의 각 웰로부터의 5μl 용액을 검정 플레이트로 옮겼다. 검정의 최종 부피는 50μl이었다. 화합물은 1 x 10^-05M 내지 3 x 10^-10M의 범위에서의 10개 최종 검정 농도에서 이중으로 시험하였다. 반응 칵테일 중의 최종 DMSO 농도는 모든 경우에 1%이었다. 화합물 A는 CDK8에 대해 10.6nM 및 9.3nM의 IC₅₀을 갖는 것으로 확인되었다. 화합물 B는 CDK8에 대해 5.5nM 및 12.7nM의 IC₅₀을 갖는 것으로 확인되었다. 화합물 C는 CDK8에 대해 8.9nM 및 10.2nM의 IC₅₀을 갖는 것으로 확인되었다. 화합물 D는 CDK8에 대해 6.4nM 및 6.5nM의 IC₅₀을 갖는 것으로 확인되었다. 화합물 A, B, C 및 D는 각각 9.9nM, 9.1nM, 9.5nM 및 6.4nM의 평균 IC₅₀을 갖는 것으로 확인되었다 (표 13). 따라서, 화합물 A, B, C 및 D는 모두 CDK8의 매우 강력한 선택적 억제제이다. 화합물 A는 추가적으로 코르티스타틴 A보다 더 긴 체류 시간 갖는 것으로 확인되었다.

표 13: 화합물 A, B, C 및 D의 IC₅₀ 및 K_d 값을 코르티스타틴 A와 비교

상기 제시된 용량 반응 곡선은 웨스턴 블롯 연구에 의해 확증되었다. 도 23은 화합물 A 및 D가, 도 24는 화합물 B 및 C가 용량 의존성 반응을 갖는 것을 제시한다.

실시예 10: 다양한 인간 암 세포주에 대한 화합물 A, B, C, D 및 F의 반수-최대 성장 억제 (GI50)

화합물 A, B, C, D 및 F는 암에 대한 그의 광범위한 유용성을 검사하기 위해 다양한 세포주에 대해 시험되었다. 또한 코르티스타틴 A (CA)를 헤드 투 헤드 방식으로 세포주에 대해 시험하였다. 데이터 (하기)는 모든 5종의 시험된 CA 유사체가 본질적으로 코르티스타틴 A와 동일한 감수성 프로파일을 갖는다는 것을 제시한다.

표 14: 암성 세포주에 대한 화합물 A, B, C, D 및 F의 GI₅₀ 값

실시예 11: 화합물 A, B, C 및 D CDK8 작용 메카니즘 검증

화합물 A, B, C 및 D는 CDK8을 억제함으로써 SET-2 AML 세포주 증식을 억제한다. ZsGreen (클론테크)과 FLAG-CDK8 WT (야생형) 또는 mCherry (클론테크)과 FLAG-CDK8-W105M을 SET 2 세포에서 발현시켰다. 세포를 혼합하고, 적색 대 녹색 형광비를 유동 세포측정법에 의해 결정하고, 세포는 명시된 화합물로 처리하였다. 처리 3일 및 7일 후에, 적색 대 녹색 형광 세포비를 결정하였다. 유사체는 각각 도 25, 26, 27 및 28에 제시된 바와 같이 적색 대 녹색 세포비를 용량 의존적으로 이동시켰고, 이는 CDK8이 화합물 A, B, C 및 D의 항증식 활성을 매개한다는 것을 나타낸다.

실시예 12: 화합물 A, B, C 및 D의 약동학적 프로파일

본 연구의 목적은 화합물 A, B, C 및 D의 약동학 (PK) 프로파일을 평가하는 것이었다. 용량 투여 당일에 각각의 군에 대한 투여 용액을 비히클 [20% 2-히드록시프로필-베타-시클로덱스트린 (HPCD)]의 첨가에 의해 제조하였다. 염 함량에 대한 조성비 보정은 본 연구에 요구되지 않았다. 물질을 비히클 첨가 후에 실온에서 볼텍싱하고 초음파처리하였다. 용액은 용량 투여전에 적어도 30분 동안 암소에서 교반하면서 주위 온도에서 유지하였다. 이어서, 제제는 용해도 확보를 돕기 위해 간략하게 볼텍싱하고 초음파처리하였다. 이들 절차에 의해 투명한 무색 용액이 수득되었다.

마우스는 시험 시설의 설치류 콜로니로부터 선택되었다. 동물은 시험 물품 투여 당일에 시험 설비 인원에 의해 결정된 바의 허용가능한 건강을 기반으로 연구에 등록되었다. 동물은 투여전에 적어도 48시간 (±6시간) 동안 환경적 순응에 유지시켰다. 동물은 30-70%의 습도 범위를 갖는 16-26℃ (62-78℉)의 온도에서 유지하였다. 모든 군에서 동물은 밤새 금식시켰고 투여 4시간 후에 음식물을 돌려받았다. 물은 자유롭게 연구 전체에 걸쳐 제공하였다.

혈장을 위한 전혈 샘플을 또한 악하 정맥의 직접 정맥 천자에 의해 (생존 혈액 수집) 또는 CO₂에 의한 안락사 후에 심장 천자에 의해 (말기 혈액 수집) 각각 동물로부터 수집하였다. 투여 전체에 걸쳐 및 모든 샘플 수집 시점에, 모든 동물은 임상적으로 관련된 이상 여부를 관찰하였고 이상 없음이 관찰되었다. 수집 후에, 전혈은 K₂EDTA가 담긴 튜브에 배치되고 혈장을 위해 처리될 때까지 즉시 웨트 아이스에 두었다. 전혈 샘플은 냉장 원심분리기 (5±3℃)에서 10분 동안 2200xg에서 원심기로 분리하여 혈장을 단리시켰다. 샘플을 저장 전에 개별 폴리프로필렌 용기로 옮기고 즉시 드라이 아이스 상에 분석까지 -70±10℃에 두었다. 또한, 미투여된 여분 동물에서 수집된 혈장을 풀링하고 분석하였다.

마우스 혈장을 수집한 후에 화합물의 농도를 결정하기 위해 LCMS/MS 분광분석법을 사용하여 연구를 정량화하였다. 하기 (표 15) LC-MS/MS 방법을 사용하여 샘플을 분석하고 내부 표준 방법에 의해 모 화합물의 농도를 결정하였다. 분석물 및 내부 표준 이미프라민을 포함하는 8개 보정 표준을 과정의 초기에 및 말기에 제조하고 분석하였다. 보정 곡선을 작성하고 정량화 소프트웨어 매스헌터(MassHunter)를 사용하여 농도를 계산하였다.

표 15: PK 특성 결정에 사용된 LC-MS/MS 방법

분석된 PK 특성은 표 16에 제시된다. 화합물 A, B, C 및 D의 약동학적 특성을 프로파일링하였고, 모두는 우수한 생체이용률, 반감기, C_max, 및 비치환 유사체 화합물 E 및 F보다 인지가능하게 더 낮은 hERG 활성을 나타내었다. 특히, T_max가 0.5hr (화합물 A)에서 8.0hr (화합물 C)으로 변하였고, 이는 A 고리에 대한 작은 변형이 PK 특성의 주요 변경의 원인이 될 수 있다는 것을 시사한다.

표 16: 화합물 A, D, C 및 B의 PK 특성

실시예 13: 화합물 A, B, C, D 및 F의 생체내 효능

화합물 A, B, C, D 및 F의 생체내 항백혈병 활성을 명시된 용량 및 치료 스케줄로 시험하였다. 용량은 화합물 내약성 프로파일을 기초로 선택되었다 (즉, CA는, 보다 높은 용량은 체중 감소 또는 실시예 6에 요약된 다른 내약성 문제를 야기하기 때문에 0.16mg/kg으로 투여됨). mCherry 및 루시페라제를 발현하는 인간 AML 세포주 MV4;11을 NSG 마우스에 도입하였다. 백혈병 세포 생착의 측정 후에, 처리를 시작하였다. 체중 및 생물발광을 측정하였다. 생물발광이 백혈병 부담에 상응한다는 것이 이전에 제시된 바 있다 (Shair, Nature 2015). 도 29는 화합물 A가 적어도 1mg/kg의 용량에서 고도로 효능이 있고, 심지어 일부 효능을 0.5 3.04mg/kg에서 보였다는 것을 제시한다. 더욱이 IV 또는 PO 투여 사이에 어떤 관찰된 평가할 수 있는 장점은 없었다. 도 3,970 30 (log2 스케일)는 화합물 A가 우수한 선택성 및 내약성 프로파일 이외에도 화합물 F과 유사한 효능이 있다는 것을 제시한다. 화합물 F는 보다 높은 > 30 용량이 내약성 문제를 야기하는 것으로 밝혀졌기 때문에 1mg/kg로 투여하였다. 도 31 (log2 스케일)은 화합물 B, C 및 D가 화합물 F와 비교하여 우수한 생체내 효능을 나타낸다는 것을 제시한다. 모든 화합물은 백혈병 진행을 억제하였다.

실시예 14. 화합물 A, B, C, D, E, F 및 CA의 비교

화합물 A, B, C 및 D는 화합물 E 및 F와 비교하여 hERG 이온 채널 억제를 감소시켰다. 게다가 화합물 A, B, C 및 D는 118개 오프-타겟 (판랩스)에 대해 10μM로 투여되어 >70%만큼 억제된 표적의 수에 의해 측정 시에 오프-타겟 상호작용의 수가 감소되었다. 이들 결과는 화합물 A, B, C 및 D가 화합물 E 및 F와 비교하여 개선된 안전성 프로파일을 갖는 것을 나타낸다.

화합물 A, B, C 및 D는 또한 CA 및 화합물 F를 비롯한 이전 화합물보다 마우스에서 상당히 보다 높은 노출 (AUC)를 달성할 수 있다. 상기 신규 유사체의 개선된 안전성 프로파일은 우수한 내약성의 용량에서 달성할 수 있는 보다 큰 노출을 가능하게 할 수 있다. 화합물 B, C 및 D는 CA 및 화합물 F보다 AML의 마우스 모델에서 더 우수한 효능을 나타내며, 화합물 A는 비교가능한 효능을 갖는다. 이들 화합물의 보다 큰 효능은, 우수한 내약성의 용량에서 달성할 수 있는 상승된 노출과 크게 상관관계가 있다. 이들 신규 유사체로 달성할 수 있는 보다 높은 노출은 보다 큰 효능으로 변환될 수 있고/거나 보다 우수한 안전성 프로파일은 생체내 보다 높은 노출 따라서 개선된 효능을 가능하게 하고 있다. 다시 말해서, CA 및 화합물 F의 오프-타겟 상호작용은 노출 및 효능을 제한한다. 이들 오프-타겟 상호작용이 본 발명에 제시된 신규 화합물에 의해서는 완화되었고, 이는 보다 큰 노출 및 생체내 효능을 결과한다.

표 17: 화합물 A, B, C, D, E, 및 F의 생체내 효능

용량/스케줄: QD= 1일 1회 (QDx15 = 15개 용량에 대해 1일 1회); 온/오프=매일 치료 또는 휴약 (QD 7온/2오프=7일 동안 1일 1회 온/2일 오프; PO=경구, IP= 복강내, IV= 정맥내

생체내 효능 = NSG 마우스의 MV4;11 파종성 백혈병 모델. 3개의 개별 연구로부터의 데이터: (1) 코르티스타틴 A, (2) 화합물 F 및 (3) 화합물 A, B, C 및 D. 비히클은 연구 3에 제시되었다. 코르티스타틴 A에 대한 비히클 및 화합물 F 연구는 유사한 배수-변화 (각각 118 및 122)를 가졌다.

AUCinf = 명시된 효능 용량에서의 곡선하 면적. 값은 수컷 CD-1 마우스에서 수행된 약동학적 연구로부터의 보간된 것의 실제값임

안전성 패널 = 28개 결합 검정 (유로핀스 판랩스)

생체내 효능 = NSG 마우스의 MV4;11 파종성 백혈병 모델

*화합물 D IV는 마우스의 정맥을 찾기 곤란해진 후에는 IP로 전환함

**일부 불용해성이 10μM 및 30μM에서 관찰되고, 단지 9% 억제가 3μM에서 관찰됨.

본 명세서는 본 발명의 실시양태와 관련하여 기재되었다. 그러나, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 하기 청구범위에 제시된 바와 같은 본 발명의 범주를 벗어나지 않으면서 다양한 변형 및 변경이 이루어질 수 있음을 인지한다. 따라서, 본 명세서는 제한적 관점이 아니라 예시적인 관점으로 고려되어야 하며, 모든 이러한 변형은 본 발명의 범주 내에 포함되도록 의도된다.

Claims (42)

1. 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
   

   
2. 제1항에 있어서, 화합물 B인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
3. 제1항에 있어서, 화합물 C인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
4. 제1항에 있어서, 화합물 D인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
5. 제1항에 있어서, 화합물 B인 화합물.
6. 제1항에 있어서, 화합물 C인 화합물.
7. 제1항에 있어서, 화합물 D인 화합물.
8. 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
   

   

   
   

   

   
   

   
9. 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
   

   

   
   

   
10. 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    

    

    
    

    
11. 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    

    

    
    

    
12. 적어도 1개의 수소가 중수소로 대체된 것인 화합물 A, 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    

    
13. 적어도 1개의 수소가 중수소로 대체된 것인 화합물 B, 또는 그의 제약상 허용되는 염.
14. 적어도 1개의 수소가 중수소로 대체된 것인 화합물 C, 또는 그의 제약상 허용되는 염.
15. 적어도 1개의 수소가 중수소로 대체된 것인 화합물 D, 또는 그의 제약상 허용되는 염.
16. 숙주에게 유효량의 하기에서 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
    

    
17. 제16항에 있어서, 화합물이 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
18. 제16항에 있어서, 화합물이 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
19. 제16항에 있어서, 화합물이 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
20. 숙주에게 유효량의 제8항의 구조로부터 선택된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
21. 숙주에게 유효량의 제9항의 구조로부터 선택된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
22. 숙주에게 유효량의 제10항의 구조로부터 선택된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
23. 숙주에게 유효량의 제11항의 구조로부터 선택된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
24. 제16항에 있어서, 장애가 종양, 암, 비정상적 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애, 자가면역 장애, 또는 급성 골수성 백혈병 (AML)인 방법.
25. 제20항에 있어서, 장애가 종양, 암, 비정상적 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애, 자가면역 장애, 또는 급성 골수성 백혈병 (AML)인 방법.
26. 제21항에 있어서, 장애가 종양, 암, 비정상적 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애, 자가면역 장애, 또는 급성 골수성 백혈병 (AML)인 방법.
27. 제22항에 있어서, 장애가 종양, 암, 비정상적 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애, 자가면역 장애, 또는 급성 골수성 백혈병 (AML)인 방법.
28. 제23항에 있어서, 장애가 종양, 암, 비정상적 증식과 관련된 장애, 염증성 장애, 면역 장애, 자가면역 장애, 또는 급성 골수성 백혈병 (AML)인 방법.
29. 숙주에게 유효량의 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 바이러스를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
    

    
30. 제29항에 있어서, 화합물이 화합물 B 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
31. 제29항에 있어서, 화합물이 화합물 C 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
32. 제29항에 있어서, 화합물이 화합물 D 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
33. 숙주에게 유효량의 제8항의 구조로부터 선택된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 바이러스를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
34. 숙주에게 유효량의 제9항의 구조로부터 선택된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 바이러스를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
35. 숙주에게 유효량의 제10항의 구조로부터 선택된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 바이러스를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
36. 숙주에게 유효량의 제11항의 구조로부터 선택된 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 바이러스를 갖는 숙주를 치료하는 방법.
37. 숙주에게 CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애의 치료를 위한 유효량의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
    

    
38. 숙주에게 바이러스의 치료를 위한 유효량의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
    

    
39. CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애의 치료를 위한 의약의 제조에서 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
    

    
40. 바이러스의 치료를 위한 의약의 제조에서 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
    

    
41. CDK8 및/또는 CDK19에 의해 매개된 장애의 치료에 사용하기 위한 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    

    
42. 바이러스의 치료에 사용하기 위한 하기로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    

    

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