KR20170088900A

KR20170088900A - 미엘로퍼옥시다아제의 억제제로서의 1-[2-(아미노메틸)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

Info

Publication number: KR20170088900A
Application number: KR1020177016607A
Authority: KR
Inventors: 토드 베르틸 잉하르트; 니콜라스 톰킨슨; 리-밍 간; 제프리 폴 스톤하우스; 페트라 요하네슨; 율리크 주르바; 에리크 미하엘슨; 에바-로테 린트스테트-알스테르마크
Original assignee: 아스트라제네카 아베
Priority date: 2014-12-01
Filing date: 2015-11-30
Publication date: 2017-08-02
Anticipated expiration: 2035-11-30
Also published as: US20170173025A1; US20160152623A1; SV2017005451A; US20190076432A1; JP2017535588A; BR112017011124B1; NZ732164A; UY36416A; AU2015357290A1; CN107001374A; PT3227294T; PE20170914A1; MX370492B; IL252436A0; GT201700114A; US11000525B2; DOP2017000129A; CN107001374B; US20210228585A1; HUE045606T2

Abstract

본 개시는 화학식 (I)의 특정 1-[2-(아미노메틸)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온 화합물,
[화학식 (I)]

이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이들을 포함하는 조성물 및 치료에 있어서 이들의 용도에 관한 것이다. 상기 화합물은 효소 MPO의 억제제이므로 심부전 및 관상 동맥 질병과 관련된 질환과 같은 심혈관 질환의 치료 또는 예방에 특히 유용하다.

Description

미엘로퍼옥시다아제의 억제제로서의 1-[2-(아미노메틸)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온{1-[2-(AMINOMETHYL)BENZYL]-2-THIOXO-1,2,3,5-TETRAHYDRO-4H-PYRROLO[3,2-D]PYRIMIDIN-4-ONES AS INHIBITORS OF MYELOPEROXIDASE}

본 발명의 기술분야는 화학식 (I)의 특정한 1-[2-(아미노메틸)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온 화합물, 미엘로퍼옥시다아제 관련 질병이나 질환, 예를 들어 심부전 및 관상 동맥 질병과 관련된 질환의 치료에 있어서 이의 용도 및 이를 함유한 약제 조성물에 관한 것이다.

미엘로퍼옥시다아제(MPO)는 호중성 과립구(호중구) 및 단핵구에서 발견되는 헴(heme) 함유 효소이다. MPO는 호산구 퍼옥시다아제(EPO), 갑상선 퍼옥시다아제(TPO), 타액 퍼옥시다아제 (LPO), 프로스타글란딘 H 신타아제(PGHS) 등을 포함하는 포유류 퍼옥시다아제의 다양한 단백질 군 중의 하나이다. 성숙한 효소는 절반으로 동일하게 나누어진 이량체이다. 절반의 분자 각각은 MPO의 특징적인 녹색을 담당하는 특이한 분광 특성을 나타내는 공유 결합된 헴을 포함한다. MPO의 두 개의 절반을 연결하는 이황화 브릿지가 분열되면 온전한 효소와 구분할 수 없을 정도의 분광 및 촉매특성을 나타내는 헴 효소가 수득된다. 이 효소는, 그 원천이 수퍼옥사이드 디스뮤타아제(SOD)-촉매된 NADPH-유래의 수퍼옥사이드 음이온과 크산틴 옥시다제 유래의 음이온인 하이드로젠 퍼옥사이드 및 퓨린 산화시에 형성되는 하이드로젠 퍼옥사이드에 의해서 활성화된다. MPO의 주된 생리적 기질은 차아염소산(표백제)과 차아티오시안산과 같은 살균성 차아할로겐산을 형성하는 할로겐화물(예를 들어 염화물) 및 의사 할로겐화물(티오시안산염과 같은)이다(J. Clin. Biochem. Nutr., 2011, 48, 8-19).

호중구는 미생물을 먹고(식균) 죽임으로써 중요한 살균 작용을 한다. 함몰된 부하는 식포(phagosomes)로 불리는 공포(vacuole)에 통합되며, 이 공포는 미엘로퍼옥사이드를 함유하는 과립과 결합하여 파고라이소솜(phagolysosomes)을 형성한다. 파고라이소솜에 있어서, 미엘로퍼옥시다아제의 효소 활동은 강력한 살균 화합물인 차아염소산의 형성으로 이어진다(Free Radical Biology & Medicine, 2010, 49, 1834-1845). 차아염소산은 그 자체로 산화 작용을 하며 티올 및 티오에테르와 가장 잘 반응하지만, 아민을 클로라민으로 전환하고 방향족 아미노산을 염소화한다.

염화물과의 반응으로 인접한 조직에 손상을 초래할 수 있는 경우 MPO는 세포의 외부로 방출될 수도 있다. 이러한 제어된 MPO의 방출 외에도, 호중구는 MPO와 같은 세포 내 단백질이 흩어져 있는 비농축 DNA의 웹을 세포 외 공간, 즉 호중구 세포 외 트랩(neutrophil extracellular traps, NET)에 캐스팅 할 수도 있다. 이러한 NET들은 세포 외 미생물에 대한 숙주 방어에서 중요한 역할을 하는 것으로 여겨지며, 패혈증에서 발생하는 면역 혈전증(Nature Rev. Immunol , 2013 , 13, 34)과 같은 급성 염증성 질병 및 전신홍반루푸스(SLE)와 같은 자가 면역(J. Immunol ., 2011 , 187, 538- 552)에 있어서 중요한 병리 생리학적 기전으로 제안되어왔다. MPO는 NET 형성에 특히 필요하다(Blood, 2011 , 117, 953).

MPO의 전신 수치(level)는 다양한 심혈관 질병(예를 들어 심부전, 급성 관상 동맥 증후군, 심근 경색, 안정된 관상 동맥 질병 및 죽상 동맥 경화 관련 질환 등)에 대해 잘 설명된 위험 인자이다(Circulation, 2003, 108, 1440-1445; N. Engl . J. Med ., 2003, 349,1595-604; J. Am. Coll . Cardiol ., 2007, 49, 2364-70). 이러한 병적 질환에서 MPO의 역할은 효소 생성물에 의한 산화적 손상에 관련되어 있을 뿐 아니라 혈관 및 심근 세포 이완의 중요한 조절제인 산화 질소의 소모에도 기인한다. 중요하게는 심혈관 질병에 대한 MPO의 기여는 호중구와 단핵구가 혈관과 심근으로 침투하는 것뿐만 아니라, 내피의 기저측의 프로테오글리칸에 세포 외 MPO가 전략적으로 침착하는 것을 통해서도 이루어진다(Science, 2002, 296, 2391).

심혈관 질병의 진행에 대한 MPO의 원인적 역할은 MPO-결핍 피험자들에게서 심혈관 발병률이 낮아지고(Acta Haematol ., 2000, 104, 10-15) 관동맥 혈류예비력이 감소되며(J. Biomed . Sci ., 2004, 11, 59-64) 및 MPO-촉진제에 기능증가 돌연변이를 가진 피험자들에게서 사망률이 증가된 것(New Engl . J. Med ., 2004, 350, 517; Free Rad . Biol . & Med ., 2009, 47, 1584; J. Biol . Chem ., 1996, 271, 14412-14420)으로 뒷받침된다. 혈류와 이완에 직접적인 효과는 돼지에게 MPO를 투여 한 뒤에 또한 관찰되었다(Eur . Heart J., 2011, 33, 1625).

따라서 MPO 활성과 질병의 연관성은 보존된 박출률을 동반하는 심부전, 감소된 박출률을 동반하는 심부전, 급성 관상 동맥 증후군, 심근 경색, 안정된 관상 동맥 질병 및 죽상 동맥 경화 관련 질환과 같은 심부전을 포함하는 반응성 섬유화 및 미세혈관 염증을 동반하는 심혈관 질병에 연루되어 있었다.

심부전(HF)의 이해와 치료에 있어서 주목할 만한 진전이 이루어졌음에도 불구하고 HF에 의한 발병률과 사망률은 높게 유지되고 있다. HF 발생의 근간을 이루는 심장 리모델링의 주된 원인은 지속적인 고혈압, 심근 경색, 판막 기능 부전 또는 다른 사건의 결과로 심실 벽의 응력이 증가하는 것이다. 심장 리모델링은 심장 구조, 크기, 질량 또는 기능에 있어서의 어떠한 변화를 지칭하며, 비록 애초에 심장의 출력을 유지하기 위한 보상기전일지라도 대상 부전과 HF의 발병을 초래할 수 있다(J. Am. Coll . Cardiol ., 2000, 35, 569~582). 심장 리모델링에 기여하는 주된 과정들로는 심근 세포 비대(성장), 섬유증 및 염증이 있다(Nat. Rev. Mol . Cell. Biol., 2006, 7, 589~600; Circ. Res., 2010, 106, 47~57).

현재, HF 치료의 초석은 심벽 응력의 감소에 기반을 두고 있으며, 주로 앤지오텐신-전환=효소-억제제(ACE-I)와 같은 레닌-앤지오텐신-알도스테론계의 억제제, 베타-아드레날린 효능 차단제 및 이뇨제의 사용에 있다(Eur . Heart J., 2012, 14, 803~869). 치료에도 불구하고 HF 사망률은 여전히 높고, 전체 환자의 50%가 초진 후 5년 내 사망한다(J. Am. Coll . Cardiol ., 1999, 33 , 734~742). 따라서, 심장 리모델링을 유도하는 주요 분자 및 세포 과정에 직접 초점을 맞춘 새로운 치료 옵션이 시급히 요구된다.

심부전은 감소된 박출률을 동반하는 HF(HFrEF) 및 보존된 박출률을 동반하는 HF(HFpEF)로 세분화될 수 있다(Curr . Heart Fail. Rep., 2012, 9, 363~368). HFrEF와 HFpEF는 병리 생리학, 임상 특성 및 치료에 있어서 다르다. HFrEF는 종종 수축기 HF로 불리며 ACE 억제제, β-차단제 및 이뇨제를 이용한 치료로 HFrEF 환자의 사망률과 이환율을 성공적으로 감소시켰다. 이와 대조적으로, 종종 이완기 HF로 표시되는 HFpEF의 경우, 현재까지 사망률이나 이환율을 줄이기 위한 치료법을 설득력 있게 보여주지 못했다. HFpEF의 발생률과 이환율은 그 절대치 및 HFrEF과의 비교치 모두에서 상승하고 있기 때문에 두려운 일이다(Eur . Heart J., 2013, 34, 1424~1431).

HFpEF의 핵심적인 특징은 심실 벽의 수축성 감소와 이완에 있다. 심장 섬유증은 심실 벽의 경화에 중요한 기여를 한다. 따라서 심장 섬유증을 표적으로 하는 것은 HFpEF 환자에게는 잠재적인 치료 전략이지만, 섬유증은 HFrEF 환자에서도 중요한 역할을 한다. 더구나, HFpEF는 심장 팽창 및 HFrEF로 전환될 수 있다. 그러므로 심장 섬유증의 약리학적 표적화가 HFpEF 및 HFrEF로의 잠재적 전환을 정지시키거나 감쇠시킬 수 있는지를 조사하는 것이 중요할 것이다.

간질 섬유증(interstitial fibrosis)을 초래하는 미세 혈관 염증은 HFpEF 발병에 중요한 역할을 하는 것으로 보이며(J. Am. Coll . Cardiol ., 2013, 62, 263~271), HF와 염증 효소인 미엘로퍼옥시다아제(MPO) 사이의 연관성이 입증되었다(J. Am. Coll . Cardiol ., 2007, 49, 2364~2370). 섬유증의 측면에서, MPO-제품 차아 염소산(HOCl)은 메탈로프로티나아제(MMPs)를 포함한 세포 외 기질 단백질을 조절하는 중요한 조절 스위치임을 시사하는 데이터가 있다(J. Biol . Chem., 2001, 276, 41279~41287; J. Biol . Chem ., 2003, 278, 28403~28409). 이 또한 앤지오텐신 II-유도 심방 섬유증의 감쇠 및 MPO-결핍에서 관찰된 MMP-활성의 감소로 뒷받침된다. 더욱이, Mpo-/- 쥐에게 재조합 MPO를 첨가하면 심방 섬유증이 발생하여, MPO 활성의 증가가 섬유증을 유도하는데 충분함을 나타낸다(Nat. Med ., 2010, 16, 470~474). 심근 경색(MI) 후 모델에서, Mpo-/- 쥐는 심실 리모델링 및 기능 개선이 감소한 것으로도 나타났다(J. Exp . Med ., 2003, 197, 615~624). 이러한 결과들은 MPO 활성이 병리학적 조건 하에 심근의 구조적 리모델링에 대해 중요한 역할을 한다는 것을 함께 보여준다.

MPO 활성을 약리학적으로 억제하면 심장 섬유증을 줄일 수 있고, HFpEF(이완기) 및 HFrEF(수축기)를 유발할 수 있는 조건 하에서 심장 기능을 보존할 수 있다. 특히, 광범위한 섬유증으로 인한 심장의 경화를 방지할 수 있고, 심장 기능을 보존할 수 있다.

예를 들어, 심부전 및 관상 동맥 질병 관련 질환의 치료를 위한 경구용 MPO 활성 억제제가 필요하다. 이러한 약물의 치료 지수를 올리기 위해서는, 다른 퍼옥시다아제에 비해 MPO에 대해 선택적인, 예를 들어 갑상선 관련 부작용의 위험을 줄이기 위한, 예를 들어 TPO와 같은 기타 퍼옥시다아제에 비해 MPO에 대해 선택적인 MPO 억제제를 수득하는 것이 필요하다. TPO에 비해 MPO에 대한 높은 선택도가 갑상선의 성장 위험을 감소시킬 수 있는 것으로 여겨진다(Pharm . Res., 2013, 30, 1513~24). 또한, 심혈관 치료용도의 MPO 억제제는 중추신경계(CNS)에서 효과가 최소화되도록 제한된 혈액 뇌 관문 침투 특성을 갖는 것이 바람직하다.

WO 2003/089430, WO 2005/037835, WO 2007/120097, WO 2007/120098 및 WO 2007/142576은 티옥산틴 유도체, 및 치료에서 MPO 억제제로서의 이의 용도를 개시한다.

WO 2006/062465 및 WO 2007/142577은 MPO 억제제로 청구된 2-티옥소-1,2,3,4-테트라하이드로-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온 유도체를 개시한다. 상기 화합물은 TPO와 같은 연관 효소에 대한 선택도를 나타낼 수 있는 것으로 기재되어 있다.

WO 2009/025618은 티옥산틴, 2-티옥소-1,2,3,4-테트라하이드로-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온 유도체, 및 다계통 위축증(MSA)과 헌팅톤 무도병(Huntington's disease, HD)의 치료 및 신경보호를 위한 MPO 억제제의 용도를 개시한다.

J. Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals, 2012, 55, 393~399은 ¹⁴C 표지된 피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온 화합물뿐만 아니라 ¹³C 및 ¹⁴C 표지된 일부 삼중수소 티옥산틴 유도체들을 개시한다. 상기 화합물들은 MPO 불활성화물질로 기재되어 있다.

J. Biol . Chem ., 2011, 286, 37578~37589은 특정한 티옥산틴 유도체를 개시한다. 상기 화합물은 마우스 모델에서 혈장 중의 MPO를 억제하고 단백질 염소화를 감소시키는 것으로 기재되어 있다. 이들 화합물은 소극적 TPO 억제제인 것으로도 주장된다.

WO 2013/068875는 MPO 억제제인 것으로 주장된 티오피리미돈 유도체를 개시한다.

본 발명의 일 목적은 치료에 유용한 신규 MPO 억제제를 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 TPO 효소에 비해 MPO 효소에 대해 향상된 선택도를 갖고/갖거나 제한된 혈액 뇌 관문 침투 특성을 갖는 신규 화합물을 제공하는 것이다.

화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

[화학식 I]

여기서, R ¹ 은 H, F, Cl 또는 CF₃이고,

R ² 는 H, CH₃ 또는 C₂H₅이고,

R ³ 은 H, CH₃, C₂H₅ _,n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 이차 부틸, 삼차 부틸, 사이클로프로필, 사이클로프로필메틸, 사이클로부틸, 사이클로부틸메틸 또는 사이클로펜틸임.

화학식 (I)의 화합물은 MPO 억제제이다. 따라서, 화학식 (I)의 화합물은 특히 MPO의 억제에 반응하는 장애, 질병 또는 질환, 보다 구체적으로는 MPO가 역할을 하는, 관상 동맥 질환, 심부전증(HF), 감소된 박출률을 동반하는 심부전증(HFrEF) 및 보존된 박출률을 갖는 심부전증(HFpEF)을 포함하는 심혈관 질환에 대한 약제로서 사용될 수 있다.

본 명세서에 개시된 화합물의 단일 거울상 이성질체의 절대 구성(R 또는 S)이 본 명세서에서 특정되는 경우, 이는 문제의 입체중심(키랄 중심)인 R ² 가 부착되는 탄소 원자인 것으로 이해해야 한다.

도 1은 HFpEF 환자(NYHA 클래스)의 증상의 중증도 예측을 위한 MPO-관련 바이오마커의 로딩 값을 나타낸다. 명료성을 위해, 나머지 변수들(n=240)의 로딩 값은 도면에서 생략되었다. 표시된 로딩 값을 나머지 데이터의 관점에 두기 위해, 데이터 조합의 최고 및 최저 로딩 값은 점선으로 표시된다. NP-proBNP에 대한 로딩 값을 나타내는 검은색 막대는 비교를 위해 도시된다.
도 2는 건강한 지원자에 있어서, 요산이 MPO-억제제인 AZD3241에 의해 투여량에 의존적으로 감소함을 나타낸다. 피험자들은 위약 또는 지시된 1일 투여량을 10일간 받았고, 혈중 요산염 수치(level)와 기저치의 차이가 산출되었다. 각각의 심볼은 하나의 피험자를 나타낸다.
도 3은 활성화된 MPO가 시험관 내에서 요산염의 생성을 촉진함을 나타낸다. 활성화된 MPO를 크산틴 및 실시예 3((1-{2-[(1R)-1-아미노에틸]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온)의 적정된 양으로 80분 동안 배양하고, 그 후에 요산염 수치를 LC-MS에 의해 정량화하였다. 점선은 불활성화된 MPO의 존재 하에 형성된 요산염을 나타낸다.
도 4는 실시예 3(j)(1-{2-[(1R)-1-아미노에틸]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온)에 대한 X-선 분말 회절 패턴을 나타낸다.
도 5는 실시예 7(1-[2-(아미노에틸)-4-클로로벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온)에 대한 X-선 분말 회절 패턴을 나타낸다.

의심의 소지를 없애기 위해, 본 명세서에서 그룹이 “상기 정의된 것”으로 자격이 부여되는 경우, 상기 그룹은 그 그룹에 대한 다른 정의의 각각 및 모두 뿐만 아니라 가장 먼저 발생하고 가장 넓은 정의를 포함한다.

일 양태에서, R¹은 H, F, Cl 또는 CF₃을 나타내는 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

다른 구현예에서 R¹은 Cl을 나타낸다.

일 구현예에서, R²는 H, CH₃ 또는 C₂H₅를 나타낸다.

다른 구현예에서 R²는 CH₃ 또는 C₂H₅를 나타낸다.

또 다른 구현예에서 R₂는 CH₃을 나타낸다.

일 구현예에서, R³은 H, CH₃, C2H₅, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 이차-부틸, 삼차-부틸, 사이클로프로필, 사이클로프로필메틸, 사이클로부틸, 사이클로부틸메틸 또는 사이클로펜틸을 나타낸다.

다른 구현예에서, R³은 H를 나타낸다.

또 다른 구현예에서, R²가 CH₃ 또는 C₂H₅를 나타낼 때, R²가 부착된 탄소 원자는 R-배열을 가진다.

일 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 1-{2-[(1R)-1-아미노프로필]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-[2-(1-아미노에틸)-4-클로로벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{2-[(1R)-1-아미노에틸]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{2-[(1S)-1-아미노에틸]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{4-클로로-2-[1-(메틸아미노)에틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{4-클로로-2-[(에틸아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-[2-(아미노메틸)-4-클로로벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{4-클로로-2-[(메틸아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-(2-{[(사이클로부틸메틸)아미노]메틸}벤질)-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{2-[(사이클로부틸아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{2-[(사이클로펜틸아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-(2-{[(2-메틸프로필)아미노]메틸}벤질)-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{2-[(프로페인-2-일아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-[2-(아미노메틸)-4-(트리플루오로메틸)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온,

1-{2-[(메틸아미노)메틸]-4-(트리플루오로메틸)벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염 중에서 선택된다.

이들 특정한 화합물들 중 임의의 하나는 본 명세서에 언급된 임의의 구현예들에서 청구되지 않을 수 있음에 유의해야 한다.

일 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염 및 이의 제조에 사용되는 중간체의 제조방법이 제공된다.

다른 구현예는 본 명세서에 개시된 임의의 방법 또는 실시예에 의해 수득될 수 있는 생성물이다.

또한, 본 명세서에 개시된 화합물의 거울상 이성질체의 절대 배열이, 예를 들어 X-선 연구(실시예 3(b)참조)보다는 분광 연구에 의해 결정되었다는 사실 때문에, 하나 또는 다른 이유로 분광 연구로부터의 결과가 틀린 것으로 입증되면, R 및 S 지정이 반전될 것임을 이해해야 한다.

의학적 및 약학적 용도(MEDICAL AND PHAMACEUTICAL USE)

화학식 (I)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 효소 MPO의 억제제로서 약리학적 활성을 가지고 있으므로 유용하다.

화학식 (I)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 효소 미엘로퍼옥시다아제(MPO)의 활성 조절이 바람직한 질병 또는 질환의 치료 또는 예방의 용도로 표시된다. 특히, MPO 활성과 질병의 연결성은 심혈관 질병에 연루되어 왔다. 따라서 개시된 화합물들은 인간을 포함한 포유류의 관상 동맥 질병 및 심부전이나 심장장애의 치료를 위한 용도로 구체적으로 표시된다. 또한, 개시된 화합물들은 인간을 포함한 포유류의 만성 신장 질환(CKD), 심신증후군(CRS), 비-알코올성 지방간염(NASH) 및 부정맥 질병 또는 장애의 치료를 위한 용도로 표시된다.

구체적으로 언급될 수 있는 질환이나 장애는 관상 동맥 질병, 급성 관상 동맥 증후군, 심부전, 감소된 박출률을 동반하는 심부전 및 보존된 박출률을 동반하는 심부전을 포함한다.

예방법은 문제의 질병이나 질환을 앓은 전력이 있거나, 그렇지 않으면 그럴 위험이 증가된 것으로 여겨지는 사람들의 치료와 특히 관련될 것으로 예상된다. 일반적으로, 특정 질병이나 질환의 발생위험이 있는 사람들에는 그 질병이나 질환의 가족 이력을 가진 사람들, 또는 그 질병이나 질환이 특히 쉽게 발생할 수 있음이 특정한 바이오마커 패턴을 통한 유전자 검사나 유전학적 스크리닝에 의해서 확인된 사람들이 포함된다.

상기 언급된 치료 징후에 대해서, 투여량은 물론, 사용된 화합물, 투여 방식 및 바람직한 치료에 따라 달라질 것이다. 그러나, 화합물이 1 일당 1 mg 내지 2000 mg의 고체 형태의 용량으로 투여될 때 일반적으로 만족스러운 결과가 얻어진다.

화학식 (I)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 유도체는 그대로 사용되거나, 상기 화합물 또는 유도체가 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 적절한 약학적 조성물의 형태로 사용될 수 있다. 따라서, 다른 양태는 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체에 혼합된 화학식 (I)의 신규 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 투여는 장 내(구강, 설하 또는 직장을 포함함), 비강 내, 흡입, 정맥 내, 국소 또는 다른 비경구적 경로에 의해 이루어질 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 적합한 약학적 제제의 선택 및 제조에 대한 종래 절차는 예를 들어 Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs, M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 2^nd Ed. 2002에 기술된다. 약학적 조성물은 화학식 (I)의 조성물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 바람직하게는 80% 미만, 및 더 바람직하게는 50% 미만을 포함한다.

일 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 심혈관 질병의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

다른 구현예에서, 치료, 특히 MPO의 억제가 유익한 질환의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 관상 동맥 질병의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 급성 관상 동맥 증후군의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 심부전의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 감소된 박출률을 동반하는 심부전의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 보존된 박출률을 동반하는 심부전의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 CKD의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 CRS의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 NASH의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 부정맥의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 제공된다.

일 구현에에서, 효소 MPO의 억제가 유익한 질병 또는 질환의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법으로, 상기 질병 또는 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다.

다른 구현에에서, 심혈관 질병이나 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 심혈관계 장애의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, 관상 동맥 질병 또는 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 관상 동맥 질병의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, 급성 관상 동맥 증후군 또는 그 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 급성 관상 동맥 증후군의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, 심부전 또는 그 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 심부전의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, 감소된 박출률을 동반하는 심부전 또는 그 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 감소된 박출률을 동반하는 심부전의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, 보존된 박출률을 동반하는 심부전 또는 그 질환를 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 보존된 박출률을 동반하는 심부전의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, CKD 또는 그 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 CKD의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, CRS 또는 그 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 CRS의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, NASH 또는 그 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 NASH의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

또 다른 구현예에서, 부정맥 또는 그 질환을 앓고 있거나 그럴 위험이 있는 사람에게 있어서 부정맥의 위험을 처치하거나 감소시키는 방법이 제공되되, 상기 방법은 상기 사람에게 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료학적으로 유효한 양을 투여하는 단계를 포함한다.

일 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염 및 약학적으로 허용 가능한 희석제, 부형제 및/또는 불활성 담체를 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

다른 구현예에서, 치료, 특히 MPO의 억제가 유익한 질환의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 관상 동맥 질병의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 급성 관상 동맥 증후군의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 심부전의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 감소된 박출률을 동반하는 심부전의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 보존된 박출률을 동반하는 심부전의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 CKD의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 CRS의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 NASH의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또 다른 구현예에서, 치료, 특히 구체적으로는 인간인 포유류에서의 부정맥의 예방 또는 처치에 사용하기 위한 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

또한, 상기 성분을 혼합하는 단계를 포함하는 약학적 조성물의 제조 방법이 제공된다.

일 구현예에서, 혈중 요산염 수치는 성층화 도구 및 MPO 억제제 처치를 위한 약역학적 바이오마커로서 사용될 수 있다.

MPO를 HFpEF 병리 생리학으로 맥락화하기 위해, 한 조의 MPO-관련 바이오마커가 HFpEF 환자들, 즉 KaRen 코호트의 혈장에서 정량화 되었다(Eur . J. Heart Failure, 2009 , 11, 198-204). 코호트는 HFpEF로 진단받았고, 연구에 포함시킨 후 18 개월 동안 추적 관찰했던 환자들을 나타낸다. 포함된 ECG 및 심 초음파 검사 데이터 외에도, 레지스트리에는 약물, 병력 및 임상 화학 데이터도 포함된다. MPO 수준 및 이의 활성 외에도 칼 프로텍틴, 리포칼린 -2(NGAL), sTNFR1(뉴트로필/단핵구 수반), 아르기닌(Arg), 비대칭(ADMA) 및 대칭(SDMA) 디메틸 아르기닌, 엔도텔린-1(혈관 건강), 요산염 및 알란토인(퓨린 이화작용 및 산화 상태), TIMP-1, TIMP-4 및 오스테오폰틴(조직 개질) 등의 바이오마커들이 정량화 되었다(괄호 안은 기계론적 근거/링크임).

감독된 주성분 분석-부분 최소 제곱 분석에 의한 잠재 구조에 대한 직교 투영(orthogonal projection to latent structures by partial least square analysis, OPLS)-이 수행되어 질병의 증상 정도(NYHA 스코어(New York Heart Association의 기준 위원회. Nomenclature and Criteria for the Diagnosis of Diseases of the Heart and Great Vessels. 9th ed. Boston, Mass: Little, Brown & Co; 1994: 253-256))를 설명하는 변수(n = 256)가 확인되고 등급이 매겨졌다. KaRen 레지스트리 데이터 조합은 연구에 포함된 환자로부터 추출한 혈장에서 얻어진 MPO-관련 바이오마커 데이터와 병합되었다. 모든 데이터는 단위 분산 및 평균을 중심으로 조정되었다. 또한, 최대값/평균값 비율이 10을 초과하는 변수를 로그-변환하여 모든 변수의 동등한 영향력을 높였다. 이는 Simca 13(Umetrics, Umea, Sweden)를 이용하여 주성분 분석을 받은 86 명의 환자에서 257 개의 변수로 구성된 데이터 행렬을 생성하였다. OPLS 분석에서, 예상 반응에 기여하는 변수(부하, 이 경우는 NHYA 스코어임)는 반응과는 독립적으로 변화하는 부하, 즉 직교 변수로부터 분리될 수 있다. 정보를 제공하는 이런 변수들은 결국 반응과 긍정적 또는 부정적 상관관계를 가질 수 있다. 부하 값(정이거나 부이거나)의 크기가 커질수록 예상 반응과의 상관관계는 더 좋아진다. NYHA 스코어를 예측하는 OPLS 모델은 SIMCA 소프트웨어에 구현된 전체 잭 나이프 교차 검증(Jack knife cross validation) 후 0.26의 Q2 값으로 NYHA 스코어 변동의 50%(R2Y=0.50)를 설명하였다.

도 1에 도시된 부하 값의 진폭에 의해 나타나듯이, 대부분의 MPO-관련 바이오마커들은 NYHA 스코어를 잘 예측하였고, 이러한 바이오마커들이 병리 생리학에 있어서 적극적인 참여를 나타내고, 단지 방관자 역할을 하지 않는 다는 것을 입증하였다(0에 가까운 부하 값에 의해 제안될 수 있었던 것처럼). 흥미롭게도, NT-proBNP보다는 오스테오폰틴, Arg 및 ADMA를 제외한 모든 바이오마커들이 NYHA 스코어 예측을 더 잘 수행하였다.

MPO-관련 바이오마커를 요산염 및 이의 산화 생성물인 알란토인과 함께 클러스터링 하면 요산염이 빈약한 혈관 기능으로 인한 염증 및 조직 저산소증에 대해 실제로 바이오마커가 될 수 있음을 알 수 있다(일변량 방식으로 분석했을 때 요산염과 모든 개별 바이오마커 사이의 유의한 상관관계에 의해서도 뒷받침 됨, 표 1 참조).

염증 및 혈관 기능의 정도에 의해 그 정도가 결정되는 조직 저산소증이 혈중 요산염 농도에 영향을 미친다고 가정한다. 심근허혈로 인해 ATP의 소실이 가속화되고, 이에 따라 쥐의 심장에서 요산염 수치가 상승한다(Am. J. Physiol . Heart Circ. Physiol ., 2004, 286, H677-H684; J. Biol . Chem ., 1995, 270, 18797~18803). 또한, 심근 요산염 생성의 증가는 요산염 전신 수치에 영향을 미치고, 심부전 환자의 NYHA 등급과 밀접하게 관련된다(Circ . J., 2006, 70, 1006-1011).

심벽에 침전된 미엘로퍼옥시다아제(J. Clin . Invest., 2001, 108 , 1759-1770)는 건강한 개체( Eur . Heart J., 2012, 33, 1625-1634) 및 질환이 있는 개체(Circulation, 2004, 110, 1134-1139; Circulation, 2006, 113, 1871-1878) 모두에게서 혈관 기능 장애를 초래함을 보여주었다. 따라서, 미엘로퍼옥시다아제를 억제하는 것이 혈관 기능을 향상시켜(MPO-결핍된 인간에게서 나온 데이터에 의해 뒷받침됨, Eur . Heart J., 2012, 33, 1625-1634), 조직 관류와 산소 공급을 향상시킴으로써 요산염의 국부 생성을 감소시키고, 따라서 요산염의 전신 농도를 감소시킬 것이라는 제안을 한다. 이 가설은 두 가지 별개의 미엘로퍼옥시다아제 억제제를 사용하는 임상 시험의 데이터에 의해서도 뒷받침된다(건강한 대상에서 요산염 수치를 용량 의존적으로 감소시킨 AZD5904 (http://openinnovation.astrazeneca.com/what-we-offer/compound/azd5904/?_sm_au_=isH0QK1bJkWQtMf7) 및 AZD3241 ( Nuclear Medicine and Biology , 2015, 42, 555~560, AZD3241에 대한 데이터는 도 2 참조) (ClinicalTrials.gov 식별자: NCT00914303)).

상기 논의된 바와 같이, 빈약한 관류 때문에 상승한 요산염 수치를 유지시키는 MPO의 역할 외에도, MPO가 크산틴 옥시다아제와 협력하여 크산틴을 산화시킴으로써 스스로 요산염을 생성할 수 있다는 것도 제안한다. 이는 활성화된 MPO가 체외에서 크산틴과 만날 때 일어나고, 증가된 요산염 생성은 실시예 3에 의해 농도 의존적으로 억제된다(도 3).

다른 구현예에서, 혈중 요산염 수치는 혈관 기능이 약한(상기 OPLS 분석에 따르면 고 염증 질환인) 환자를 확인하기 위해 다른 바이오마커나 임상 특징과 함께 결합하여 MPO 억제제 치료를 위한 성층화 도구 및 약역학적 바이오마커로 사용될 수 있다.

또 다른 구현예에서, 혈중 요산염 수치를 측정하는 것을 포함하는 MPO 억제제 처치에 적합한 환자를 확인하는 방법이 제공된다.

본원에서 예시된 화학식 (I)의 화합물은, 이하 설명된 시험(Test) A와 같은 MPO 결합분석으로 시험될 때, 바람직하게는 50 μM 미만의 IC₅₀를 가진다. 또한 화학식 (I)의 화합물은 체내에서 원하거나 원하지 않는 효과를 분리함으로써 유망한 약리학적 프로파일을 나타낸다.

이들 및 다른 구현예들은 본 명세서를 읽음으로써 당업자에게 추가적인 양태들이 명백해지는 이하에 상세히 기술된다.

약리학적 특성(PHARMACOLOGICAL PROPERTIES)

화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 구체적으로 사람인 포유류에 있어서의 관상 동맥 질병, 급성 관상 동맥 증후군, 심부전, 감소된 박출률을 동반하는 심부전 및 보존된 박출률을 동반하는 심부전을 포함하되 이에 제한되지 않는 심혈관 질병의 예방 또는 처치에 유용한 것으로 여겨진다.

의심의 소지를 없애기 위해, 본 명세서에 사용된 용어 “처치”는 치료적 및/또는 예방적 처치를 포함한다.

본 명세서에 기술된 화합물 또는 염이 장애의 처치를 위한 치료로서 투여되는 경우, “치료학적 유효량”은 장애의 증상이나 기타 유해한 영향을 감소시키거나 완전히 완화시키거나, 장애를 치유하거나, 장애의 진행을 역전시키거나, 완전히 정지시키거나, 늦추거나, 장애가 악화될 위험을 감소시키기에 충분한 양이다.

따라서 본 명세서에 기술된 화합물은 이러한 질환의 치료적 및/또는 예방적 처치 모두에 나타난다.

본 명세서에 기술된 화합물은 종래기술에 공지된 화합물보다 더 효과적이고, 독성을 덜 가지고, 더 선택적이고, 더 잠재적이고, 부작용을 덜 발생시키고, 더 쉽게 흡수되고 및/또는 더 나은 약동학 프로파일(가령 높은 구강 생체 이용률 및/또는 낮은 클리어런스)을 가질 수 있다는 이점을 갖는다.

병행 요법(COMBINATION THERAPY)

화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 상기 질환의 처치를 위해 사용되는 기타 화합물과 함께 투여될 수도 있다.

다른 구현예에는, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 제2 활성 성분을 상기 열거된 질환 중 하나 이상의 처치를 위해 동시에, 순차적으로 또는 혼합물로 투여하는 병행 요법이 있다. 이러한 병행은 하나 이상의 추가적인 활성 성분과 조합하여 사용될 수 있다.

본 명세서에 기술된 화합물은 다음과 같은 제제와 조합하여 심혈관 질환, 대사 질환 및 신장 질병의 처치에 사용될 수 있다.

● 심장 치료제

● 항고혈압제

● 이뇨제

● 말초혈관 확장제

● 지질 개질제

● 항당뇨증제

● 항염제, 또는

● 항응고제

상기의 예는 디지털리스 배당체(digitalis glycosides), 항부정맥제, 칼슘채널 길항제, ACE 억제제, 앤지오텐신 수용체 차단제(예: 발사르탄), 엔도텔린 수용체 차단제, ß-차단제, 타이아자이드 이뇨제, 루프 이뇨제, 스타틴(예: 로수바스타틴)과 같은 콜레스테롤 합성 억제제, 콜레스테롤 흡수 억제제, 콜레스테롤에스테르 전달 단백질(CETP) 억제제, 인슐린 및 유사체와 같은 항당뇨병 약물, GLP-1 유사체, 술폰아미드, 디펩티딜 펩티다아제 4 억제제, 티아졸리딘디온, SGLT-2 억제제, NSAID 및 CCR2 길항제와 같은 항염제, 헤파린과 같은 항응고제, 트롬빈 억제제 및 인자 Xa 억제제, 혈소판 응집 억제제, P2X7 길항제 및 네프릴리신 억제제(예: 사쿠비트릴)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

병행 요법에 사용될 경우, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 기타 활성 성분은 단일 조성물, 완전히 분리된 조성물 또는 이들의 조합으로 투여될 수 있을 것이라고 고려된다. 활성 성분은 함께, 동시에, 순차적으로 또는 별도로 투여될 수도 있을 것이라고도 고려된다. 구체적인 조성물(들) 및 병행 요법의 투여 빈도(들)는 예를 들어 투여 경로, 처치 중인 질환, 환자의 종, 단일 조성물과 조합했을 경우에 활성 성분들간의 임의의 잠재적 상호작용, 동물 환자에 투여했을 경우에 활성 성분들간의 임의의 상호작용, 및 내과의사(인간 환자의 맥락에서), 수의사(인간이 아닌 환자의 맥락에서) 및 기타 당업자에게 공지된 다양한 다른 요인들을 포함하는 다양한 요인들에 따라 달라질 것이다.

약학적 조성물(PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS)

MPO의 억제가 필요한 질환의 처치 방법이 제공되며, 상기 방법은 이러한 질환을 앓고 있거나 그럴 염려가 있는 사람에게 화학식 (I)의 화합물의 약학적 유효량을 투여하는 단계를 포함한다.

화학식 (I)의 화합물은 통상 약학적으로 허용 가능한 투여 형태의 유효성분 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 제재의 형태로 경구, 국소, 비경구, 정맥 내, 근육 내, 피하 또는 기타 주사 가능한 방식으로, 협측, 직장, 질, 경피 및/또는 비강 경로를 통해서 및/또는 흡입을 통해 투여될 것이다. 처치대상 장애와 환자 및 투여 경로에 따라 조성물은 다양한 용량으로 투여될 수 있다. 적합한 약학적 제제을 선택하고 제조하는 종래 절차는 예를 들어 Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs, M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 2^nd Ed. 2002에 기술되어 있다.

인간을 치료학적으로 처치함에 있어서 화학식 (I)의 화합물의 적합한 일일 투여량은 체중 1kg당 약 0.0001 내지 100 mg이며, 바람직하게는 체중 1kg 당 0.01 내지 10 mg이다.

0.007 mg 내지 700 mg의 범위에서 예를 들어 1 mg, 3 mg, 5 mg, 10 mg, 25 ㎎, 50 ㎎, 100 ㎎ 및 250 ㎎인 활성 화합물의 투여량을 제공하도록 당업자에게 공지된 방법에 의해 조제될 수 있는 경구 제제, 구체적으로는 정제 또는 캡슐이 바람직하다.

최적의 투여량 및 빈도는 처치 중인 특정 질환 및 그 중증도, 환자의 종, 특정 환자의 연령, 성별, 키 및 체중, 식습관 및 전반적인 신체 상태, 뇌/체중 비율, 환자가 복용 중일 수 있는 기타 약물, 투여 경로, 제제, 및 내과의사 및 기타 당업자들에게 공지된 다양한 기타 요인들에 따라 달라질 것이다.

따라서, 본 발명의 다른 양태에서는, 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 및/또는 담체에 혼합된 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 유도체의 조성물을 포함하는 약학적 제제가 제공된다.

화학식 (I)의 화합물은 약학적 제제 내에 총 제제의 0.1 내지 99.5 중량%, 예를 들어 0.5 내지 95 중량%의 농도로 존재할 수 있다.

화합물의 제조(PREPARATION OF THE COMPOUNDS)

다른 양태에서는, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조과정이 제공되며, 상기 과정은 다음을 포함한다.

a) 화학식 (II)의 화합물을 화학식 (III)의 화합물과 반응시키는 단계로, 여기서 R¹, R² 및 R³은 화학식 (I)에 정의된 바와 같고, 화학식 (III)의 화합물의 환원성 알킬화가 화학식 (III)의 화합물의 질소 원자와 화학식 (II)의 화합물의 알데히드기 또는 케톤기의 탄소 원자 사이에 N-C 결합을 형성하는 조건인 단계, 필요한 경우 화학식 (I)의 생성된 화합물을 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로 전환하는 단계 및 원하는 경우 화학식 (I)의 생성된 화합물을 개별적인 광학이성질체로 분리하는 단계, 또는

[화학식 (II)] [화학식 (III)]

b) 화학식 (II)의 화합물을 히드록실아민 또는 이의 염과 반응시켜, 형성된 옥심 중간체를 환원제로 처리하는 단계로, 여기서 R¹ 및 R²가 화학식 (I)에 정의된 바와 같고, 단일 결합이 (II)의 화합물의 히드록실 아민 화합물의 질소 원자와 알데히드기 또는 케톤기의 탄소 원자 사이에 형성되는 동시에, 질소 원자에 결합 된 수산기가 수소 원자로 치환되고, 적합한 알데히드 또는 케톤 화합물 및 환원제를 사용하는 통상의 환원적 알킬화 방법에 의해, 화학식 (I)에서 정의된 치환기 R³을 도입하기 위해 수득된 1차 아민 유도체를 임의로 2차 아민 화합물로 전환시키는 조건인 단계, 필요한 경우 화학식 (I)의 생성된 화합물을 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로 전환시키는 단계, 및 원하는 경우 화학식 (I)의 생성된 화합물을 이의 개별 광학이성질체로 분리하는 단계, 또는

c) 화학식 (IV)의 화합물을 탈보호 시약으로 처치하는 단계로, 여기서 R¹ 및 R²는 화학식 (I)에서 정의된 바와 같고, PG¹ 및 PG²는 서로 동일할 수 있는 보호기이고, 적합한 알데히드 또는 케톤 화합물 및 환원제를 사용하는 통상의 환원적 알킬화 방법에 의해 화학식 (I)에서 정의된 치환기 R³을 도입하기 위해 수득된 1차 아민 유도체를 임의로 2차 아민 화합물로 전환하는 단계, 필요한 경우 화학식 (I)의 생성된 화합물을 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로 전환하는 단계 및 원하는 경우 화학식 (I)의 생성된 화합물을 이의 개별적 광학이성질체로 분리하는 단계.

[화학식 (IV)]

화학식 (II) 및 화학식 (III)의 화합물은 환원성 알킬화 조건 하에서 서로 반응한다. 일반적으로 반응은, 예를 들어 0 내지 40℃인 비 극한 온도에서, 예를 들어 N-메틸피롤리돈인 실질적으로 비활성인 용매에서 수행된다. 반응 혼합물은 고온에서, 예를 들어 100℃ 이상에서 마이크로파 조사에 의해 가열될 수도 있다. 일반적인 환원제는 나트륨 시아노보로하이드라이드와 같은 보로하이드라이드를 포함한다. 환원 반응은 가령 테트라이소프로폭시티탄 등을 이용해 금속 촉매화될 수도 있다.

화학식 (II)의 화합물 및 히드록실아민 화합물은 옥심 형성 후 환원 조건하에서 서로 반응한다. 반응은 일반적으로, 예를 들어 20 내지 70℃인 비 극한 온도에서 HOAc와 같은 실질적으로 비활성인 용매에서 수행된다. 일반적인 환원제는 아연과 같은 금속을 포함한다.

화학식 (IV)의 화합물은 보호기를 제거하기 위한 통상의 조건 하에서 탈보호 시약과 반응시킨다. 전형적으로, 보호기는 2 개의 삼차-부틸옥시카르보닐기이고 전형적인 탈보호제는 염화수소와 같은 산을 포함한다. 반응은 일반적으로 약 30 내지 50℃의 온도에서 MeOH와 같은 유기 용매에서 수행된다.

화학식 (II)의 화합물은, 예를 들어 화학식 (V)의 화합물을 벤조일 이소티오시안산염과 반응시킴으로써 제조될 수 있다.

[화학식 V]

여기서 R¹ 및 R²는 화학식 (I)에 정의된 바와 같고, PG³ 및 PG⁴는 서로 동일하거나 동일하지 않을 수 있는 보호기이고, 고리를 형성하기 위해 서로 결합되거나 결합되지 않을 수 있다. 반응 조건은 6원 2-티오피리미디논 고리가 형성되고, 보호기 PG³ 및 PG⁴를 제거하기 위해서 최종적으로 생성된 중간체를 탈보호 시약으로 처리하여 화학식 (II)의 화합물이 수득되도록 하는 것이다.

화학식 (II)의 화합물은 시판 중이거나, 당업계에 공지되어 있거나, 당업자에게 공지된 통상의 방법으로 제조될 수 있다.

화학식 (IV)의 화합물은, 예를 들어 화학식 (VI)의 화합물을 벤조일 이소티오시안산염과 반응시킴으로써 제조될 수 있다.

[화학식 (VI)]

여기서 R¹ 및 R²는 화학식 (I)에 정의된 바와 같고, PG¹ 및 PG²는 화학식 (IV)에 정의된 바와 같으며, 반응 조건은 6원 2-티오피리미돈 고리가 형성되어 화학식 (IV)의 화합물이 수득되도록 하는 것이다.

전술한 바와 같은 고리화 반응에서, 화학식 (V)의 화합물 또는 화학식 (VI)의 화합물 및 벤조일 이소티오시안산염은 MeOH와 같은 적합한 유기 용제에 서로 천천히 첨가되고, 반응이 완료될 때까지 일반적으로 실온에서 5분 내지 4시간 동안, 그리고 필요한 경우 밤새 교반된다. 그 후 일반적으로 Cs₂CO₃와 같은 염기가 첨가되고, 혼합물은 상승된 온도에서 장시간, 예를 들어 60℃에서 3 내지 4시간 동안 교반될 수 있다. 반응이 완료된 후, 혼합물은 일반적으로 HOAc와 같은 산으로 처리되어 화학식 (II) 또는 화학식 (IV)의 필요한 화합물이 수득된다.

화학식 (V)의 화합물은 예를 들어 에틸 3-아미노-1H-피롤-2-카복실레이트를 화학식 (VII)의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다.

[화학식 (VII)]

여기서 R¹ 및 R²는 화학식 (I)에서 정의된 바와 같고, PG³ 및 PG⁴는 화학식 (V)에서 정의된 바와 같으며, 반응 조건은 통상의 환원성 알킬화 조건이다. 일반적으로, 아민 화합물은 염산염으로서, 예를 들어 에탄올과 같은 유기 용매에서 N.N-디이소프로필에틸아민 및 HOAc로 처리된 후 화학식 (VII)의 알데히드 화합물이 첨가된다. 혼합물이 일정 시간 동안, 예를 들어 실온에서 한 시간 동안 교반된 후 나트륨 시아노보로하이드라이드와 같은 환원제가 첨가되고, 생성된 혼합물은 반응이 완료될 때까지 예를 들어, 실온에서 1 내지 20 시간 동안 교반되어 화학식 (V)의 화합물이 수득된다.

화학식 (VI)의 화합물은 예를 들어 환원성 알킬화 조건 하에서 에틸 3-아미노-1H-피롤-2-카르복실레이트를 화학식 (VIII)의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다.

[화학식 (VIII)]

여기서 R¹ 및 R²는 화학식 (I)에서 정의된 바와 같고,PG¹ 및 PG²는 화학식 (IV)에서 정의된 바와 같으며, 일반적으로, 아민 화합물은 염산염으로서 도입되고, 이어서 알데히드 화합물이 첨가되기 전에 과량의 N.N-디이소프로필에틸아민으로 처리된다. 아미노 화합물과 알데히드 화합물의 혼합물이 실온에서 장시간 동안, 예를 들어 18 시간 동안 교반된 후 나트륨 시아노보로하이드라이드와 같은 환원제가 첨가되는 것이 바람직하다. 반응은 통상 실온에서 및 HOAc의 존재 하에 MeHO 또는 에탄올과 같은 용매인 알코올 내에서 수행된다.

화학식 (VII)의 화합물은 하기 반응식 1에 나타난 바와 같이 및 실시예들에 설명된 것과 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다.

[반응식 1]

[화학식 (IX)] [화학식 (X)] [화학식 (VII)]

단계 1: R¹, R², PG³ 및 PG⁴가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (X)에 따른 화합물은 예를 들어 4-메틸벤젠술폰산과 같은 산의 존재 하에, 예를 들어 톨루엔과 같은 적절한 용매 내에서, R¹ 및 R²가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (IX)의 화합물을 에탄-1,2-디올과 같은 적합한 알코올 또는 디올과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. R1 및 R2가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (IX)의 화합물은 당업계에 공지되어 있거나, 당업자에 의해 공지된 통상의 방법으로 제조될 수 있다.

단계 2: R¹, R², PG³ 및 PG⁴가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (VII)에 따른 화합물은 예를 들어 THF와 같은 불활성 용매내에서, R¹, R², PG³ 및 PG⁴가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (X)의 화합물을 예를 들어 부틸리튬과 같은 강염기로 처리하고, 이어서 생성된 혼합물을 DMF로 처리함으로써 수득될 수 있다. 반응은 예를 들어 -78℃에서와 같은 저온에서 수행됨이 바람직하다.

화학식 (VIII)의 화합물은 하기 반응식 2에 나타난 바와 같이 및 실시예들에 설명된 것과 유사한 방법으로 제조될 수 있다.

[반응식 2]

단계 1: 화학식 (XII)에 따른 화합물은 예를 들어 탄산 세슘과 같은 염기의 존재 하에, 예를 들어 디클로로메탄과 같은 유기 용매 내에서, R¹이 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (XI)의 화합물을 2-메틸프로페인-2-설핀아미드의 거울상 이성질체 중 하나와 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 화학식 (XI)의 화합물은 공지되어 있거나 당업자에 의해 공지된 통상의 방법에 의해 수득될 수 있다.

단계 2: R¹ 및 R²가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (XIII)에 따른 화합물은 예를 들어 디클로로메탄과 같은 불활성 용매 내에서, 화학식 (XII)의 화합물을 R²가 앞서 정의된 바와 같은 예를 들어 R²MgBr과 같은 그리냐르 시약(Grinard reagent)과 반응시키거나, 예를 들어 실리카겔 크로마토그래피와 같은 통상의 방법으로 수득된 중간체를 이의 부분 입체이성질체로 임의로 분리함으로써 수득될 수 있다.

단계 3: R¹ 및 R²가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (XIV)에 따른 화합물은 예를 들어 MeOH와 같은 유기 용매 내에서, 화학식 (XIII)의 화합물을 예를 들어 염화수소와 같은 탈보호 시약으로 처리함으로써 수득될 수 있다. 일반적으로, 냉각 중에 산이 첨가되고, 이어서 생성된 용액은 반응이 완료될 때까지 예를 들어 실온에서 1 내지 3 시간 동안 교반된다.

단계 4: R¹, R², PG¹ 및 PG²가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (XV)에 따른 화합물은 화학식 (XIV)의 화합물을 적절한 보호기 PG¹ 및 PG²를 순차적으로 도입하기에 적합한 시약으로 처리함으로써 수득될 수 있다. 일반적으로, 아민 화합물은 N,N-디메틸피리인-4-아민의 존재 하에 디-삼차-부틸 디카보네이트로 2 회 연속적으로 처리된다. 반응은 일반적으로 대략 실온 내지 약 80°C의 온도에서 디클로로메탄 또는 2-메틸테트라하이드로퓨란과 같은 유기 용매 내에서 수행된다.

단계 5: R¹, R², PG¹ 및 PG²가 앞서 정의된 바와 같은 화학식 (VIII)에 따른 화합물은 촉매의 존재 하에, 톨루엔과 같은 유기 용매 내에서, 화학식 (XV)의 화합물을 예들 들어 디아세톡시팔라듐, 디((3S, 5S, 7S)-아다만탄-1-일)(부틸)-포스핀 및 테트라메틸에틸렌디아민의 혼합물과 같을 수 있는 합성 가스로 처리함으로써 수득될 수 있다. 일반적으로, 반응은 약 5 바(bar)에서 및 약 100℃에서 약 21 시간 동안 수행된다. 대안적으로, 화학식 (XV)의 화합물은 예를 들어 N,N-디이소프로필에틸아민과 같은 디클로로비스 (p-디메틸아미노 페닐디부틸포스핀) 팔라듐(II), 트리에틸실란 및 염기의 존재 하에 일산화탄소로 처리된다. 상기 반응은 일반적으로 용매로서의 DMSO 내에서 수행되며, 통상적으로는 상승된 온도 및 증가된 압력에서 장시간 동안, 예를 들어 90℃ 이상의 온도에서, 약 4 내지 5 bar의 압력에서 및 24 시간 동안 수행된다.

기능기의 보호 및 탈보호는 Protective Groups in Organic Synthesis, 4^th Ed, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (2006) 및 Protecting Groups, 3^rd Ed, P.J. Kocienski, Georg Thieme Verlag (2005)에 설명되어 있다.

다른 구현예는 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함한다.

화학식 (I)의 화합물의 염은 상이한 온도 및 습도에서의 안정성 또는 H₂O, 오일 또는 다른 용매에서의 바람직한 용해도와 같은 이의 화학적 또는 물리적 특성 중 하나 이상으로 인해 유리할 수 있다. 일부 경우에, 염은 화합물의 단리 또는 정제를 돕는데 사용될 수 있다. 일부 경우에(구체적으로 염이 동물, 예를 들어 사람에게 투여하기 위한 것이거나, 동물에게 투여하기 위한 화합물이나 염을 만드는 시약인 경우), 염은 약학적으로 허용 가능하다.

용어 “약학적으로 허용 가능한”은 모이어티(예를 들어 염, 투여 형태 또는 부형제)를 건전한 의학적 판단에 따라 사용하기 적합한 것으로 특징짓기 위해 사용된다. 일반적으로, 약학적으로 허용 가능한 모이어티는 모이어티가 가질 수 있는 임의의 유해한 효과를 능가하는 하나 이상의 이점을 갖는다. 유해한 효과는 예를 들어 과도한 독성, 자극, 알러지 반응 및 기타 문제 및 합병증을 포함할 수 있다.

화합물이 충분히 염기성인 경우, 약학적으로 허용되는 염은 무기 또는 유기산 부가염을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

적합한 염에 대한 리뷰는 Berge 외, J. Pharm . Sci ., 1977, 66, 1~19 또는 Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, selection and use, P.H. Stahl, P.G. Vermuth, IUPAC, Wiley-VCH, 2002를 참조한다.

산 공형성체(acid co-former)가 실온에서 고체이고 화학식 (I)의 화합물과 이런 산 공형성체 사이에 양성자가 전달되지 않거나 부분적으로 전달될 경우, 염보다는 오히려 화학식 (I)의 화합물과 공형성체의 공결정이 생성될 수 있다. 화학식 (I)의 화합물의 모든 이러한 공결정 형태가 본 명세서에 포함된다.

화학식 (I)의 특정 화합물은 용매화된 형태, 예를 들어 화학식 (I)의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 용매 화합물을 포함하는 수화물로 존재할 수 있음도 이해해야 할 것이다.

다른 구현예에서, 화학식 (I)의 특정 화합물은 라세미체 및 라세미 혼합물, 단일 거울상 이성질체, 개별적 부분입체이성질체 및 부분입체이성질체 혼합물로서 존재할 수 있다. 화학식 (I)의 특정 화합물은 결합회전이 특정 연결에 대해 제한되는 연결(예를 들어, 탄소-탄소 결합, 아미드 결합과 같은 탄소-질소 결합), 예를 들어 고리 결합 또는 이중 결합의 존재로 인해 제한되는 것을 포함할 수도 있다. 입체이성질체는 예를 들어 크로마토그래피 또는 분별 결정과 같은 통상의 기술을 사용해 분리할 수 있거나, 입체선택적 합성에 의해 만들 수 있다.

다른 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 화학식 (I)의 화합물의 임의의 동위원소 표지된(또는 “방사능 표지된”) 유도체를 포함한다. 이러한 유도체는 화학식 (I)의 화합물의 유도체로서, 하나 이상의 원자가 전형적으로 자연에서 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 다른 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된다. 통합될 수 있는 동위원소의 예는 ²H(중수소의 경우 “D”로도 표시됨)를 포함한다.

다른 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 사람이나 동물의 체내에서 분해되어 화학식 (I)의 화합물을 생성하는 프로드러그의 형태로 투여될 수 있다.

다양한 형태의 프로드러그가 당업계에 공지되어 있다. 프로드러그 유도체의 예에 관해서는 Nature Reviews Drug Discovery 2008, 7, 255 및 이 문헌에 인용된 참고 문헌을 참조한다.

중간체 화합물은 거울상 이성질체의 형태로 존재할 수도 있고 정제된 거울상 이성질체, 부분 입체이성질체, 라세미체 또는 혼합물로 사용될 수 있다.

약리학적 활성(PHARMACOLOGICAL ACTIVITY)

MPO 억제 활성을 판정하는 방법은 WO 02/090575에 개시되어 있다. 본 명세서에 개시된 화합물의 약리학적 활성은 MPO 유래 차아염소산(HOCl)과 반응하여 탈수소-아스코르브산염을 형성하는 아스코르브산염의 존재 하에 화합물을 시험하는 다음 스크린(시험 A)에서 시험되었다. 아스코르브산염이 유실된 후 260 nm에서 흡수도가 측정된다.

분석 완충액: 140 mM NaCl 중 10 mM Na₂HPO₄/NaH₂PO₄, 3 mM KCl로 구성된 완충액 중 100 μM 디에틸 트리아민 펜타아세트산(DTPA), pH 7.4.

효소 용액: 분석 완충액 중, 인간 세포주 HL60, 1.38 nM(최종 농도 0.7 nM) 및 L-아스코르브산염으로부터 정제된 MPO, 100 μM(최종 농도 50 μM).

기질 용액: H₂O₂, 98 μM (최종 농도 49 μM)

DMSO에 순차적으로 희석된 0.6 μL의 화합물에 40 μL의 효소 용액을 첨가하였다. 260 nm에서 흡수도를 측정하여 화합물 블랭크 값을 수득하였다. 10분이 더 지난 후, 40 μM의 기질 용액을 첨가하고, 260 nm에서의 흡수도를 4 내지 40분 사이로 기록하여 효소 활성의 운동 판독 값을 수득하였다. 시험된 화합물의 IC₅₀ 값은 기질을 첨가하고 다시 20분 경과 후 260 nm에서의 흡수도의 판독 값을 사용하여 수득하였고, 표준 절차를 사용하여 산출하였다.

갑상선 퍼옥시다아제(TPO) 억제 활성을 검출하기 위해 차아황산(HOI)의 생성을 정량화하였다. HOI는 디하이드로-메티오닌으로 전환되는 메티오닌과 이를 반응시킴으로써 검출되었으며, 디하이드로-메티오닌은 산성 pH에서 과량의 요오드화물과 이를 반응시킴으로써 검출된다. 반응물은 I^-를 353 nm에서의 흡수도를 갖는 I₃ ^-으로 전환시킨다. 요약하자면, 353 nm에서의 흡수도를 판독하여 블랭크 값을 얻은 후의 분석 완충액(100 mM Na₂HPO₄/NaH₂PO₄, pH 7.4) 내에서, DMSO에서 순차적으로 희석된 화합물 0.6 μL를 50 nM 바큘로바이러스-발현 재조합 인간 TPO(영국 카디프의 RSR사로부터 구함.) 25 μL에 첨가하였다. 효소 반응은 분석 완충액에서 2 mM 메티오닌, 20 μM NaI 및 100 μM H₂O₂로 이루어진 혼합물 25μL를 첨가함으로써 개시되었고 10μL 카탈라아제 0.25 ㎎/mL를 첨가함으로써 중단되었다. 다시 5분 후, 25 μL의 600 mM 황산에 이어서 25 μL의 100 mM KI를 첨가하고, 첨가 5분 후에 353 nm에서의 흡수도를 판독하였다. 시험된 화합물의 IC₅₀ 값은 표준 절차를 사용하여 수득하였다.

일반적으로, 본 명세서에 개시된 시험된 화합물은 IC₅₀(TPO)/IC₅₀(MPO) 비율에 있어서 220 내지 1600의 범위에서 TPO 효소에 비해 MPO 효소에 대한 놀랍도록 높은 선택도를 가졌다. 상기 화합물의 대다수(80%)는 상기 효소의 IC₅₀ 값의 상응하는 비율이 500 이상임을 나타냈다. 한 편, WO 2006/062465에 따른 종래의 시험된 화합물은 1 내지 92 범위의 상응 비율을 나타내었고, 이런 화합물의 대다수(92%)는 50 미만의 비율을 가졌다. 따라서, 본 명세서에 개시된 화합물은 WO 2006/062465에 따른 종래 화합물의 선택도에 비해 대략 열 배가 넘은 MPO/TPO 선택도를 나타냈다.

실시예의 화합물에 대한 IC₅₀ 값(MPO 및 TPO)은 아래의 표 2에 명시되어 있다. 또한, 실시예의 화합물 각각에 대한 TPO에 대한 MPO의 선택도를 나타내는 TPO 대 MPO의 비율은 표 2에 표시된다.

실시예(EXAMPLES)

다음의 실시예들은 비한정적 실시예들이다.

다음의 약어들이 본 명세서에 사용되었다.

APCI 대기압 화학 이온화(atmospheric pressure chemical ionization)

aq 수성(aqueous)

Cs₂CO₃ 탄산 세슘(cesium carbonate)

CH₂Cl₂ 디클로로메탄(dichloromethane)

DIPEA N,N-디이소프로필에틸아민(N,N-diisopropylethylamine)

DMAP N,N-디메틸피리딘-4-아민(N,N-dimethylpyridin-4-amine)

DMF N,N-디메틸포름아미드(N,N-dimethylformamide)

DMSO 디메틸술폭사이드(dimethylsulfoxide)

Et₂O 디에틸 에테르(diethyl ether)

EtOAc 에틸 아세테이드(ethyl acetate)

EtOH 에탄올(ethanol)

FA 포름산(formic acid)

h 시간(hour(s))

HOAc 아세트산(acetic acid)

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography)

HCl 염화수소(hydrogen chloride)

KHSO₄ 황산수소칼륨(potassium hydrogensulfate)

K₂CO₃ 탄산칼륨(potassium carbonate)

MeCN 아세토니트릴(acetonitrile)

MeOH 메탄올(methanol)

MgSO₄ 황산 마그네슘(magnesium sulfate)

min 분(minutes)

MS 질량 스펙트럼(mass spectrum)

Na₂SO₄ 황산 나트륨(sodium sulfate)

NaHCO₃ 중탄산 나트륨(sodium bicarbonate)

NMP N-메틸피롤리온(N-methylpyrrolidone)

NH₃ 암모니아(ammonia)

NH₄OAc 아세트산 암모늄(ammonium acetate)

NMR 핵자기 공명(nuclear magnetic resonance)

r.t. 실온(room temperature)

sat. 포화된(saturated)

TEA 트리에틸아민(triethylamine)

TFA 트리플로오로아세트산(trifluoroacetic acid)

THF 테트라하이드로푸란(tetrahydrofuran)

TMEDA 테트라메틸에틸렌디아민(tetramethylethylenediamine)

다음과 같은 일반적인 실험 절차가 사용되었다.

(i) 실험에서 사용된 상 분리기는 ISOLUTE® 상 분리기 컬럼이다.

(ii) 직상 플래쉬 크로마토그래피를 순상 실리카 FLASH^TM(40M, 25M 또는 12M) 또는 SNAPTM KP-Sil 카트리지(340, 100, 50 또는 10)를 사용하는 Biotage^TM으로부터 SP1^TM 정제 시스템을 사용하여 수행하였다.

(iii) 제조용 역상 HPLC에 의한 정제는 이동상으로서 전형적으로 물/MeCN/HOAc 95/5/0.2에서 MeCN의 구배를 사용하는 Kromasil® prep C8 10 μM 250x50 mm 컬럼, 또는 이동상으로서 물/MeCN/FA 95/5/0.2에서 MeCN의 구배를 사용하거나, 이동상으로서 물/MeCN/0.1 M NH₄OAc에서 MeCN의 구배를 사용하는 SunFire^TM Prep C18 5 μM OBD 19x150 mm 컬럼을 사용하여 수행하였다.

(iv) ¹HNMR 측정은 400, 500 및 600 MHz의 ¹H 주파수에서 각각 동작하는 Varian INOVA 400, 500, 600 분광기 또는 Bruker Avance 400, 500, 600 분광기에서 수행하였다. 실험은 일반적으로 25°C에서 기록하였다.

(v) 일반적으로, 사용된 모든 용매는 분석 등급이었고 시판 중인 무수 용매가 반응에 일상적으로 사용되었다.

X-선 회절분석은 예를 들어 Kitaigorodsky, A.I. (1973), Molecular Crystals and Molecules, Academic Press, New York; Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London; 또는 Klug, H.P. & Alexander, L.E. (1974), X-ray Diffraction Procedures, John Wiley & Sons, New York 등의 문헌에서 참고할 수 있는 표준 방법에 따라 수행되었다.

X-선 분말 회절 데이터는 내부 기준으로서 Corundum으로 측정되었다. X-선 분말 회절(본 명세서에서 XRPD로 나타냄.) 패턴은 제로 백그라운드 홀더, 단일 실리콘 결정 상에 샘플을 장착한 뒤, 샘플을 박층으로 펼쳐서 판정하였다.

분말 X-선 회절은 Theta-Theta PANalytical X'Pert PRO(X-선 파장 1.5418ÅA, 니켈-필터링 된 Cu 방사, 전압 45kV, 필라멘트 방사 40mA)로 기록하였다. 자동 가변 발산 및 앤티스캐터(antiscatter) 슬릿을 사용하었고, 시료는 측정 중에 회전시켰다. 샘플은 PIXCEL 검출기(유효 길이 3.35° 2-θθ)와 함께 0.013° 스텝 폭과 44.37 초 계수 시간을 사용하여 2 내지 50° 2-θ에서 스캔되었다.

X-선 분말 회절(XRPD) 패턴은 Bragg-Brentano 기하학적 구조에서 수득되었다.

사용된 장비 또는 기계와 같은 측정 조건에 따라 하나 이상의 측정 오차를 갖는 X-선 분말 회절 패턴이 얻어 질 수 있다는 것은 공지되어 있다(Jenkins, R & Snyder, R.L. 'Introduction to X-Ray Powder Diffractometry' John Wiley & Sons 1996; Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London; Klug, H. P. & Alexander, L. E. (1974), X-Ray Diffraction Procedures). X-선 분말 회절 분야의 당업자는 피크의 상대 강도가 예를 들어 30 미크론 초과의 입자 및 샘플의 분석에 영향을 미치는 비-단일 종횡비에 의해 영향을 받을 수 있음을 인식할 것이다. 또한, 강도는 실험 조건 및 샘플 준비(예를 들어, 바람직한 배향)에 따라 변동될 수 있음을 이해해야 한다. 상대 강도(%)에 대해서는 다음의 정의가 사용되었다: 25 내지 100%, vs(매우 강함); 10 내지 25%, s (강함); 3 내지 10%, m (중간); 1 내지 3%, w (약함).

당업자는 반사의 위치가 샘플이 회절계에 위치하는 정확한 높이 및 회절계의 영점보정에 의해 영향을 받을 수 있다는 것도 인식할 것이다. 샘플의 표면 평탄도 역시 약간의 영향을 미칠 수 있다. 따라서 제시된 회절 패턴 데이터는 절대 값으로 간주해서는 안 된다. 일반적으로, X-선 분말 회절도의 회절 각도의 측정 오차는 대략 ±0.2° 2θ일 수 있고, 이러한 측정 오차의 정도는 X-선 분말 회절 데이터를 고려할 때 감안되어야 한다.

화학 IUPAC 명칭은 Advanced Chemistry Development사(캐나다, 온타리오, 토론토 M5C 1B5)에서 제공하는 소프트웨어 ACD/Labs 2012에 의해 생성된다.

실시예 1

1-{2-[(1 R )-1-아미노프로필]-4- 클로로벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

(a) 삼차- 부틸[(1 R )-1-(2-브로모-5-클로로페닐)프로필]카르밤산염

CH₂Cl₂(15 mL) 중의 (R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)프로페인-1-아민 염산염(실시예 3(c)에서 중간체 (R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에탄 아민이 수득된 것과 유사한 방식으로 수득되나, 메틸마그네슘 브롬화물이 아닌 에틸마그네슘 브롬화물을 사용하는) 용액(0.97 g, 0.40 mmol)에 TEA(1.42 mL, 10.21 mmol) 및 디-삼차-부틸디카보네이트(0.82 g, 3.74 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 뒤 KHSO₄ 수용액으로 세척하였다. 수성상을 CH₂Cl₂(20 mL)로 추출하고, 배합된 유기 용액을 진공에서 농축시켰다. 잔류물은 헵탄 및 EtOAc(구배, 0 내지 15% EtOAc)의 혼합물을 용리제로 사용하여 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 1.42 g(정량적 수율)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. MS(APCI+) m/z 349 [M+H] +.

(b) 디- 삼차- 부틸[(1 R )-1-(2-브로모-5-클로로페닐)프로필]이미도디카보네이트

2-메틸테트라하이드로푸란(32 mL) 중의 삼차-부틸[(1R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)프로필]카르밤산염 용액(1.19 g, 3.40 mmol)에 디-삼차-부틸 중탄산염(1.49 g, 6.81 mmol) 및 DMAP(0.83 g, 6.81 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 교반한 뒤 디-삼차-부틸 중탄산염(0.75 g, 3.40 mmol) 및 DMAP의 다른 일부(0.42 g, 3.40 mmol)를 첨가하였다.

50℃에서 또 다시 4 시간을 교반한 뒤, 디-삼차-부틸 중탄산염의 또 다른 일부(0.37 g, 1.70 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 50℃에서 밤새 교반하였다. 더 많은 디-삼차-부틸 중탄산염(0.75 g, 3.40 mmol) 및 DMAP(0.42 g, 3.40 mmol)를 첨가하고, 30분 동안 교반을 계속하였다. 혼합물을 KHSO₄(1 M) 수용액으로 세척하고 상 분리기를 통해 건조시킨 뒤 물기를 증발시켰다. 조 생성물을 용리제로서 헵탄 및 EtOAc(구배, 0 내지 12% EtOAc)를 포함하는 혼합물을 사용하여 실리카 겔 컬럼상에서 정제하였다. 조생성물을 헵탄 및 EtOAc를 용리제(구배, 0 내지 12% EtOAc)로 사용하여 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하였다. 1.10 g(72%)의 표제 화합물을 무색의 오일로 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 0.93 (t, 3H), 1.37 (d, 18H), 1.8 - 2.19 (m, 2H), 5.17 (dd, 1H), 7.33 (dd, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.65 (d, 1H).

(c) 디- 삼차- 부틸[(1 R )-1-(5-클로로-2-포름일페닐)프로필]이미도디카보네이트

디-삼차-부틸[(1R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)프로필]-이미도디카보네이트(1.05g, 2.34 mmol), 디아세톡시팔라듐(0.053 g, 0.23 mmol) 디((3S,5S,7S)-아다만탄-1-일)(부틸)포스핀(0.26 g, 0.70 mmol) 및 TMEDA(0.26 mL, 1.75 mmol)를 톨루엔(4 mL)에 녹인 후, 생성된 용액을 오토클레이브 내에 밀봉하였다. 오토클레이브를 5 bar에서 합성 가스(일산화탄소/질소, 1:1)로 채운 뒤 유조에서 100℃로 21 시간 동안 가열하였다. 조 생성물을 헵탄 및 EtOAc의 구배를 용리제(0 내지 18% EtOAc)로 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 0.53 g(57%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 0.95 (t, 3H), 1.35 (s, 18H), 1.85 ~ 2.02 (m, 1H), 2.03 ~ 2.19 (m, 1H), 5.90 (dd, 1H), 7.60 (dd, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 10.22 (s, 1H).

(d) 에틸 3-[(2-{(1 R )-1-[ 비스(삼차-부톡시카르보닐)아미노 ]프로필}-4- 클로로벤질 )아미노]-1 H -피롤-2-카르복시산염

에틸 3-아미노-1H-피롤-2-카르복시산염, 염산염(0.29 g, 1.53 mmol) 및 EtOH(99.5%, 4 mL)의 혼합물에 EtOH(99.5%, 2.5 mL)에 용해된 DIPEA(0.46 mL, 2.66 mmol) 및 디-삼차-부틸 [(1R)-1-(5-클로로-2-포름일페닐)프로필]-이미도디카보네이트(0.53 g, 1.33 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. HOAc(0.23 mL, 4.00 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 나트륨 시아노트리하이드로보레이트(0.088 g, 1.40 mmol)를 3 분에 걸쳐 일부씩 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 45 분 동안 교반한 뒤, 물로 희석하였다. EtOAc로 2 회 추출한 후, 유기 용액을 배합한 다음 구연산(0.5 M) 수용액으로 2 회, 중탄산 나트륨 수용액으로 2 회, 마지막으로 염수(절반 포화된)로 2 회 세척 하였다. 용액을 MgSO₄ 상에서 건조시키고 증발로 용매를 제거하여 0.68 g(95 %)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 0.91 (t, 3H), 1.27 (t, 3H), 1.32 (s, 18H), 1.98 ~ 2.05 (m, 1H), 2.09 ~ 2.23 (m, 1H), 4.16 ~ 4.28 (m, 3H), 4.41 (dd, 1H), 5.26 ~ 5.33 (m, 1H), 5.43 (s, 1H), 5.82 (bs, 1H), 6.68 (t, 1H), 7.32 (s, 2H), 7.42 (s, 1H), 10.77 (s, 1H).

(e) 디- 삼차- 부틸 [(1 R )-1-{5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]페닐}프로필]이미도디카보네이트

MeOH(4 mL) 중의 에틸 3-[(2-{(1R)-1-[비스(삼차-부톡시카르보닐)아미노]프로필}-4-클로로벤질)아미노]-1H-피롤-2-카르복실레이트 용액(0.68 g, 1.26 mmol)에 벤조일 이소티오시안산염(0.20 mL, 1.51 mmol)를 적상으로 첨가 하였다. 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반한 뒤 Cs₂CO₃(0.86 g, 2.64 mmol)를 첨가하였다. 혼합물은 65℃에서 2 시간 동안 가열한 뒤 10℃로 냉각하였다. HOAc(0.32 mL, 5.67 mmol)를 서서히 첨가하고, 이어서 물(8 mL)을 서서히 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 유기 용액(Na₂SO₄)을 건조하였다. 증발로 용매를 제거하여 0.94 g(정량적 수율)의 표제 화합물을 수득하였다.

디-삼차-부틸 [(1R)-1-{5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]페닐}프로필]이미도디카보네이트의 조 혼합물(0.69 g, 1.26 mmol)에 HCl(MeOH 중의 1.25 M, 7.05 mL, 8.81 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 1 시간 동안 교반한 뒤 10℃로 냉각하였다. 물(2 mL)과 NH₃(25%, 0.63 mL, 8.81 mmol) 수용액을 순차적으로 천천히 첨가하여 pH를 9.2로 조정하였다. 형성된 침전물을 여과를 통해 수집하여 물과 MeOH의 혼합물(2:1, 2 mL)로 세척하였다. 98.8%의 과량 거울상 이성질체를 가진 0.15 g(34.6%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 0.91 (t, 3H), 1.52 ~ 1.72 (m, 2H), 4.08 (t, 1H), 5.73 (dd, 2H), 6.03 (d, 1H), 6.59 (d, 1H), 7.11 (dd, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.58 (d, 1H). [α]_D ²⁰ = +37.2° (c=0.5, EtOH). MS (APCI+) m/z 349 [M+H]⁺.

실시예 2

1-[2-(1- 아미노에틸 )-4- 클로로벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H - 피롤로[3,2-d]피리미딘 -4-온

(a) 2-(2- 브로모 -5- 클로로페닐 )-2- 메틸 -1,3- 디올솔란

딘-스탁(Dean-StarK) 트랩이 장착된 바닥이 둥근 플라스크에서 1-(2-브로모-5-클로로페닐)에탄온(8.29 g, 35.50 mmol)을 톨루엔(180 mL)에 용해시켰다. 에탄-1,2-디올(5.96 mL, 106.51 mmol) 및 4-메틸벤젠술폰산(0.67 g, 3.91 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 3.5 시간 동안 환류 하에 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, K₂CO₃(1 M) 수용액을 첨가하고, 층을 분리시켰다. 수성상을 톨루엔으로 추출하고, 배합된 유기층을 물 및 염수로 세척하였다. 상기 용액을 건조하고(MgSO₄), 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 9.29 g(94%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 1.80 (s, 3H), 3.78 (m, 2H), 4.08 (m, 2H), 7.13 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 7.66 (m, 1H).

(b) 4- 클로로 -2-(2- 메틸 -1,3- 디옥솔란 -2-일) 벤즈알데히드

-78℃의 질소 대기 하에서 부틸리튬(헥산 중의 2.5 M, 14.73 mL, 36.82 mmol)을 THF(100 mL) 중의 2-(2-브로모-5-클로로페닐)-2-메틸-1,3-디옥솔란 용액(9.29 g, 33.47 mmol)에 30 분 동안 적상으로 첨가하고, 생성된 용액을 -78℃에서 30 분 동안 교반하였다. -78℃에서 DMF(3.87 mL, 50.21 mmol)를 적상으로 첨가하였다. 첨가가 완료된 뒤, 반응물을 실온으로 가온하고 10 분 동안 계속 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 NH4Cl(포화된) 수용액으로 급냉시키고, 상을 분리하였다. EtOAc로 수성상을 2회 추출하였다. 배합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 용매를 감압 하에 제거하였다. 생성물을 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc 및 헵탄 10% 내지 20%의 구배로 용리됨)로 정제하여 5.95 g(78%)의 표제 화합물을 무색의 투명한 오일로서 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 1.68 (s, 3H), 3.64 ~ 3.66 (m, 2H), 3.94 ~ 3.97 (m, 2H), 7.24 ~ 7.28 (m, 1H), 7.52 ~ 7.54 (m, 1H), 7.74 ~ 7.77 (m, 1H), 10.52 ~ 10.53 (m, 1H).

(c) 에틸 3-{[4- 클로로 -2-(2- 메틸 -1,3- 디옥솔란 -2- yl ) 벤질 ]아미노}-1 H -피롤-2- 카르복시산염

에틸 3-아미노-1H-피롤-2-카르복시산염 염산염(3.65 g, 19.17 mmol)을 EtOH(99.5%, 100 mL)에 용해시키고, 그 용액에 DIPEA(3.34 mL, 19.17 mmol)와 이어서 HOAc(1.99 mL, 34.85 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10℃로 냉각시킨 뒤, EtOH(99.5%, 10 mL)에 용해된 4-클로로-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-일)벤즈알데히드(3.95 g, 17.43 mmol)를 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 1 시간 동안 실온으로 끌어올렸다. 나트륨 시아노트리하이드로보레이트(1.31 g, 20.91 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(mL)로 급냉하고, NaHO로 pH를 ~11로 조정하였다. 혼합물을 EtOHA로 2 회 추출하였다. 배합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 감압 하에 용매를 제거하였다. 생성물을 플래시 크로마토그래피(등용매, 헵탄/EtOAc, 90/10)로 정제하여 4.61 g(72%)의 표제 화합물을 무색의 검(gum)으로 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 1.3 ~ 1.37 (m, 3H), 1.71 (s, 3H), 3.79 ~ 3.85 (m, 2H), 4.05 ~ 4.1 (m, 2H), 4.25 ~ 4.35 (m, 2H), 4.51 ~ 4.57 (m, 2H), 5.64 ~ 5.71 (m, 1H), 6.66 ~ 6.73 (m, 1H), 7.2 ~ 7.24 (m, 1H), 7.4 ~ 7.45 (m, 1H), 7.57 ~ 7.6 (m, 1H).

(d) 1-[4- 클로로 -2-(2- 메틸 -1,3- 디옥솔란 -2-일) 벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

벤조일 이소티오시안산염(1.70 mL, 12.74 mmol)을 MeOH(14 mL) 중의 에틸 3-{[4-클로로-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-yl)벤질]아미노}-1H-피롤-2-카르복시산염 용액(4.61 g, 12.64 mmol)에 적상으로 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 10 분 동안 교반하였다. 추가 량의 벤조일 이소티오시안산염(0.17 mL, 1.26 mmol)을 첨가하고, 반응물을 30 분 동안 교반 하였다. Cs₂CO₃(8.85 g, 27.17 mmol)을 첨가하고 이 혼합물을 60℃에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 감압 하에 용매를 제거하였다. 물(30 mL)과 EtOAc(70 mL)를 첨가하고, 유기상 중에 형성되는 침전물을 여과하여 분리하였다. 이 고체를 Et₂O로 세척한 뒤, 4.71 g(99%)의 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆): δ 1.75 (s, 3H), 3.78 ~ 3.83 (m, 2H), 4.05 ~ 4.11 (m, 2H), 5.63 ~ 5.67 (m, 1H), 6.56 ~ 6.63 (m, 1H), 6.93 ~ 6.98 (m, 1H), 7.17 ~ 7.22 (m, 1H), 7.45 ~ 7.5 (m, 1H). MS (APCI-) m/z 376 [M-H]^-.

(e) 1-(2-아세틸-4- 클로로벤질 )-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H - 피롤로[3,2-d]피리미딘 -4-온

CH₂Cl₂(25 mL) 중의 1-[4-클로로-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-일)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온 현탁액(4.71 g, 12.47 mmol)에 TFA(9.26 mL, 124.65 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반한 뒤, NaOH(3.8 M) 수용액을 약 11의 pH에 도달할 때까지 첨가하였다. 형성된 고체를 여과로 단리하고, 생성물을 CH₂Cl₂로 세척한 후 Et2O로 세척하였다. 3.49 g(84%)의 표제 화합물을 백색의 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆): δ 2.69 (s, 3H), 5.63 ~ 5.7 (m, 1H), 5.79 ~ 5.83 (m, 2H), 6.79 ~ 6.86 (m, 1H), 6.89 ~ 6.95 (m, 1H), 7.4 ~ 7.5 (m, 1H), 7.96 ~ 8.04 (m, 1H). MS (APCI-) m/z 332 [M-H]^-.

(f) 1-[2-(1- 아미노에틸 )-4- 클로로벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H - 피롤로[3,2-d]피리미딘 -4-온

1-(2-아세틸-4-클로로벤질)-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온(3.39 g, 10.16 mmol), HOAc(20 mL) 및 NMP(40 mL)의 혼합물에 히드록실아민 염산염(0.78 g, 11.18 mmol)을 첨가하고, 이 혼합물을 60℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 아연(1.02 g, 15.59 mmol)을 첨가하고, 반응 화합물을 60℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 추가 량의 아연(1 g, 15.30 mmol)을 첨가하고, 이어서 이 혼합물을 60℃에서 4 시간 동안 더 교반하였다. 또 다른 분량의 아연(1 g, 15.30 mmol)을 첨가하고 80℃에서 20 시간 동안 더 교반한 뒤, 새로이 다른 분량의 아연(3 g, 45.89 mmol)을 첨가하였다. 이어서 이 혼합물을 80℃에서 40 시간 동안 교반하고, 나머지 고체를 여과하였다. 생성물을 15 분에 걸쳐 물/MeCN/HOAc(95/5/0.2)의 혼합물 중 0~70% MeCN의 구배를 사용하여 C8 컬럼상에서 제조용 HPLC(3 회 주입)로 정제하였다(용리는 0% MeCN으로 시작되어 5 분 동안 진행되었다). 0.86 g(25%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆, 40 °C): δ 1.33 ~ 1.37 (m, 3H), 4.38 ~ 4.45 (m, 1H), 5.64 ~ 5.85 (m, 2H), 6.01 ~ 6.05 (m, 1H), 6.59 ~ 6.64 (m, 1H), 7.1 ~ 7.15 (m, 1H), 7.27 ~ 7.31 (m, 1H), 7.64 ~ 7.66 (m, 1H). MS (APCI-) m/z 333 [M-H]^-.

실시예 3

1-{2-[(1 R )-1- 아미노에틸 ]-4- 클로로벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

(a) S -( E 또는 Z )-N-(2- 브로모 -5- 클로로벤질리덴 )-2- 메틸프로페인 -2- 술핀아미드

2-브로모-5-클로로벤즈알데히드(4 g, 18.23 mmol)를 CH₂Cl₂(130 mL)에 용해시키고, 이 용액에 (S)-2-메틸프로페인-2-술핀아미드(2.32 g, 19.14 mmol), 이어서 탄산 세슘(5.94 g, 18.23 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 밤새 환류시킨 다음 염수 및 CH₂Cl₂로 희석하였다. 유기층을 상 분리기를 통해 건조시킨 뒤 증발시켰다. 생성물을 용리제로서 EtOAc 및 헵탄(구배, 0% ~ 25% EtOAc)을 포함하는 혼합물을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 5.60 g(95 %)의 표제 화합물을 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.21 (s, 9H), 7.61 (dd, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 8.75 (s, 1H).

(b) ( S )-N-[(1 R )-1-(2- 브로모 -5- 클로로페닐 )에틸]-2- 메틸프로페인 -2- 술핀아미드

질소 대기 하에 S-(E 또는 Z)-N-(2-브로모-5-클로로벤질리덴)-2-메틸프로페인-2-술핀아미드(5.41 g, 16.78 mmol)을 CH₂Cl₂(200 mL)에 용해시키고, 생성된 용액에 -45℃에서 메틸마그네슘 브롬화물(11.18 mL, 33.55 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 -40℃ 내지 -50℃에서 4 시간 동안 교반하고, 이어서 밤새 천천히 실온에 도달시켰다. NH₄Cl(포화 됨, 50 mL)의 용액을 첨가하고, 이어서 물(100 mL)을 첨가하였다. 상 분리기를 이용해 층을 분리하고, 수성층을 CH2Cl2(150 mL)로 3 회 추출하였다. 배합된 유기층을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 헵탄 및 EtOAc(구배, 10 % 내지 60 % EtOAc)를 포함하는 혼합물을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하였다. 컬럼으로부터 마지막으로 용리된 주요 부분 입체이성질체를 함유하는 분획을 모으고, 용매를 증발시켜 제거하였다. 5.28 g(93 %)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.15 (s, 9H), 1.30 (d, 3H), 4.65 (m, 1H), 6.10 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.70 (s, 1H). MS (APCI+) m/z 340 [M+H]⁺.

표제 화합물의 절대배열은 실시예 3(b)에서와 유사한 실험으로부터 수득한 물질을 사용하여 진동 원편광 이색성(VCD) 분광법에 의해 결정하였다. 수득된 실험 스펙트럼을 밀도 함수 이론 계산을 사용하여 2 개의 가능한 부분 입체이성질체의 모의 스펙트럼과 비교한 결과에 기초하여, 실험 스펙트럼과 비대칭 탄소 원자에서 R-배열을 갖는 부분 입체이성질체의 모의 스펙트럼 사이에 명확한 일치가 있었다.

(c) ( R )-1-(2- 브로모 -5- 클로로페닐 ) 에탄아민

(S)-N-[(1R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에틸]-2-메틸프로페인-2-술핀아미드(5.25 g, 15.50 mmol)를 HCl(1.25 M, 150 mL, 187.50 mmol)의 MeOH 용액으로 실온에서 1.5 시간 동안 처리하였다. 용매는 증발시켜 제거하였다. 잔류물을 CH₂Cl₂(200 mL)에 용해시키고, 이 용액을 수성 NaHCO₃(100 mL)로 세척하였다. 수성상을 CH₂Cl₂(200 mL)로 추출하고, 배합된 유기층을 진공에서 농축시켜 4.02 g(정량적 수욜)의 표제 화합물을 수득하고, 이를 추가 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 1.40 (d, 3H), 4.40 (q, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.60 (s, 1H).

(d) 삼차-부틸 [(1 R )-1-(2- 브로모 -5- 클로로페닐 )에틸] 카르밤산염

CH₂Cl₂(150 mL) 중의 (R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에탄아민 용액(3.64 g, 15.52 mmol)에 TEA(2.58 mL, 18.63 mmol) 및 디-삼차-부틸 디카보네이트(3.73 g, 17.07 mmol)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 3.5 시간 동안 교반하고, 이어서 KHSO₄(1M, 100 mL) 수용액으로 세척하였다. 수성상을 CH₂Cl₂(100 mL)로 추출하고, 배합된 유기 용액을 진공에서 농축하여 5.83 g(정량적 수율)의 조 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 1.25 ~ 1.50 (d, 3H), 1.60 (s, 9H), 4.75-5.00 (m, 1H), 7.10 (dd, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.50 (d, 1H).

(e) 디- 삼차-부틸 [(1 R )-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에틸]이미도디카보네이트

2-메틸테트라하이드로푸란(150 mL) 중의 삼차-부틸 [(1R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에틸]카르밤산염 용액(5.19 g, 15.51 mmol)에 디-삼차-부틸 디카보네이트(5.08 g, 23.26 mmol) 및 DMAP(2.84 g, 23.26 mmol)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하고, 이후 디-삼차-부틸 디카보네이트(1.69 g, 7.75 mmol) 및 DMAP(0.95 g, 7.75 mmol)을 더 첨가하였다. 이 혼합물을 50℃에서 4.5 시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 잔류물을 CH₂Cl₂(150 mL)에 용해시키고, 이 용액을 상 분리기를 사용해 KHSO₄(1M, 100 mL)로 세척하였다. 수성상을 CH₂Cl₂(100 mL)로 추출하고, 배합된 유기 용액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 헵탄과 EtOAc의 혼합물을 용리제(구배, EtOAc의 30% 내지 70%)로 사용하여 크로마토그래피로 실리카 겔 상에서 2 회 정제하였다. 5.05 g(75%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.2-1.4 (m, 21H), 4.70 (m, 1H), 7.25 (dd, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.65 (d, 1H).

(f) 디- 삼차- 부틸 [(1 R )-1-(5-클로로-2-포름일페닐)에틸]이미도디카보네이트

디-삼차-부틸 [(1R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에틸]이미도디카보네이트(4.27 g, 9.83 mmol), 디아세톡시팔라듐(0.22 g, 0.98 mmol), 디((3S,5S,7S)-아다만탄-1-일)(부틸)포스핀(1.06 g, 2.95 mmol) 및 TMEDA(1.10 mL, 7.37 mmol)를 톨루엔(18 mL)에 용해시키고, 생성된 용액을 오토클레이브에 밀봉하였다. 오토클레이브를 5 bar에서 합성가스(일산화탄소/질소, 1:1)로 채우고, 유조에서 100℃에서 21 시간 동안 가열하였다. 조 생성물을 헵탄 및 EtOAc의 구배를 용리제(0 내지 20% EtOAc)로 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여 2.15 g(57%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.34 (s, 18H), 1.58 (d, 3H), 6.06 (q, 1H), 7.61 (dd, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 10.14 (s, 1H).

(g) 에틸 3-[(2-{(1 R )-1-[ 비스( 삼차 -부톡시카르보닐)아미노 ]에틸}-4- 클로로벤질 )아미노]-1 H -피롤-2-카르복시산염

에틸 3-아미노-1H-피롤-2-카르복시산염 염산염(1.14 g, 5.99 mmol) 및 EtOH(99.5%, 20 mL)의 혼합물에 N-에틸-N-이소프로필프로페인-2-아민(1.82 mL, 10.42 mmol)과 EtOH(99.5%, 5 mL)에 용해된 디-삼차-부틸 [(1R)-1-(5-클로로-2-포름일페닐)에틸]-이미도디카보네이트(2.00 g, 5.21 mmol)를 이이서 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. HOAc(0.90 mL, 15.63 mmol)를 첨가하고, 이 혼합물을 실온에서 6 시간 동안 교반한 뒤, 나트륨 시아노트리하이드로보레이트 (0.34 g, 5.47 mmol)를 일부씩 3 분 동안 첨가하였다. 이어서 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반한 뒤 물로 희석시켰다. EtOAc(25 mL) 및 톨루엔(25 mL)의 혼합물로 추출한 후, 수용액을 EtOAc(25 mL)로 추출하였다. 배합된 유기 용액을 구연산 수용액으로 2 회 세척하고, 중탄산염 수용액으로 2 회 세척하고, 마지막으로 염수(절반 포화됨)로 2회 세척하였다. 이 용액을 MgSO4로 건조한 뒤, 용매를 40℃에서 증발시켜 제거하여 2.93 g(정량적 수율)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.27 (t, 3H), 1.31 (s, 18H), 1.59 (d, 1H), 4.21 (m, 3H), 4.37 (dd, 1H), 5.43 (m, 1H), 5.51 (q, 1H), 5.82 (bs, 1H), 6.69 (t, 1H), 7.32 (s, 2H), 7.43 (s, 1H), 10.79 (s, 1H). MS (APCI+) m/z 522 [M+H]⁺.

(h) 디- 삼차-부틸 [(1 R )-1-{5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]페닐}에틸]이미도디카보네이트

MeOH(12 mL) 중의 에틸 3-[(2-{(1R)-1-[비스(삼차-부톡시카르보닐)아미노]에틸}-4-클로로벤질)아미노]-1H-피롤-2-카르복시산염(2.79 g, 4.01 mmol)에 벤조일 이소티오시안산염(0.79 g, 4.81 mmol)을 적상으로 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 뒤, Cs₂CO₃(2.74 g, 8.42 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 60℃에서 3 시간 동안 가열한 뒤 10℃까지 냉각하였다. HOAc(1.03 mL, 18.05 mmol)를 천천히 첨가하고, 이어서 물(24 mL)을 천천히 첨가하였다. 형성된 침전물을 여과하여 수집한 뒤 MeOH로 세척하여 2.09 g(97%)의 표제 화합물을 베이지색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.33 (s, 18H), 1.67 (d, 3H), 5.48 - 5.7 (m, 3H), 5.91 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 7.25 (dd, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.48 (d, 1H), 12.43 (s, 2H).

MS (APCI+) m/z 533 [M-H]^-.

(i) 1-{2-[(1 R )-1- 아미노에틸 ]-4- 클로로벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

디-삼차-부틸 [(1R)-1-{5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]페닐}에틸]이미도디카보네이트의 조 혼합물(1.67 g, 1.74 mmol)에 HCl(1.25 M, 24.37 mL, 30.46 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 50℃에서 1 시간 동안 교반한 뒤 얼음조로 냉각하였다. 물(3 mL)을 첨가하고, NH₃(25%) 수용액을 pH 9.3까지 천천히 첨가하였다. 형성된 침전물을 여과로 수집하여 0.39 g(67%)의 표제 화합물을 99.9%의 과량 거울상 이성질체를 가진 베이지색 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.32 (d, 3H), 4.36 (m, 1H), 5.74 (dd, 1H), 6.04 (d, 1H), 6.59 (d, 1H), 7.11 (dd, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.65 (d, 1H). [α]_D ²⁰ = +76.8° (c=0.3, MeOH). MS (APCI+) m/z 335 [M+H]⁺.

(j) 질소 하에 1-{2-[(1R)-1-아미노에틸]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온(실시예 3j, 전술한 바와 같이 제조됨)(690 g, 2,06 mol), 에탄올(11040 mL) 및 물(2760 mL)을 50 L 용기에 첨가하였다. 이동성이고 자유롭게 움직이는 슬러리를 2.5 시간 동안 70℃로 가열하였다. 이 반응물을 70℃에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 실온에서 냉각시켰다. 이 혼합물을 여과하고(여과에 약 2 시간이 소요됨), 20% 물/에탄올(690 mL/2760 mL)로 세척하였다. 이이서 이 고체를 진공 하의 오븐에서 50℃로 3 일 동안 건조하여 655 g(91% 수율)을 수득하였다. ¹H NMR은 95% 이상의 순도를 나타냈다. ¹H NMR 분석은 101 % ± 2 %의 순도를 나타냈고, LC는 99.7 %의 순도를 나타냈고, 칼 피셔 적정법(Karl Fischer titration)은 0.86%의 물을 나타냈고, Pd 함량은 3ppm을 나타냈고, 키랄 순도는 99.9 % ep를 나타냈다.

고체 잔류물은 XRPD에 의해 결정성인 것으로 확인되었고, 일반적인 회절도는 도 4에 표시된다. 특성 피크 위치는 다음과 같다.

XRPD 패턴 2-θ(°) 7.4(vs), 9.0(s), 10.8(vs), 14.8(vs), 20.2(vs), 22.7(vs), 23.5(vs), 25.0(vs), 30.7(vs).

실시예 3의 메실레이트 염의 단결정 X-선 분석에 의해 표제 화합물의 절대 배열을 확인하였다.

실시예 3, 대안적 제조(alternative preparation)

(a) S -( E or Z )-N-(2- 브로모 -5- 클로로벤질리덴 )-2- 메틸프로페인 -2- 술핀아미드

톨루엔(600 mL) 중의 탄산 세슘(148.5 g, 0.46 mol), 2-브로모-5-클로로벤즈 알데히드(100.0 g, 0.46 mmol) 및 (S)-2-메틸프로페인-2-술핀아미드(55.1 g, 0.46 mol)의 혼합물을 40±5℃에서 2 시간 동안 교반한 후 30±5℃로 냉각시켰다. 이 혼합물을 여과하고, 케이크를 톨루엔(200 mL)로 세척하였다. 여과물들을 진공 하에 합치고 농축시켰다. 헵탄(1 L)를 첨가하고, 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 톨루엔 함량이 15.0% 미만이 될 때까지 이 단계를 반복하였다. 이 용액을 15±5℃로 냉각하고, 1 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 케이크를 헵탄으로 세척하였다. 고체를 진공 하에 건조하여 표제의 화합물을 수득하였다(141.0 g, 95.2%).

DCM(1.5 L) 중의 S-(E 또는 Z)-N-(2-브로모-5-클로로벤질리덴)-2-메틸프로페인-2-술핀아미드 용액(100.0 g, 0.31 mol)에 MeMgBr(2-MeTHF 중 2.8 M, 0.34 mmol)을 0±5℃에서 12 시간 동안 채웠다. 추가로 14 시간이 지난 후, 수성 염화 암모늄(20 wt%, 2 L)을 0±10℃에서 첨가하였다. 유기층을 포화 NaCl 용액(500 mL)으로 2 회 세척하고, 진공 하에 농축시켰다. 헵탄(500 mL)를 채우고, 이 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. DCM 및 2-MeTHF 모두의 함량이 5.0% 미만이 될 때까지 이 단계를 반복하였다. 석유 에테르 60~90℃(800 mL)를 첨가하고 내용물을 70~80℃로 가열한 다음 31~35℃로 냉각시켰다. 이 혼합물을 여과하고, 석유 에테르60~90℃(100 mL)로 세척하였다. 진공 하에 40℃에서 건조한 후 74.0 g(70.5%)의 표제 화합물을 수득하였다.

(c) 삼차- 부틸 [(1 R )-1-(2- 브로모 -5- 클로로페닐 )에틸] 카르밤산염

(S)-N-[(1R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에틸]-2-메틸프로페인-2-술핀아미드(720 g, 2.1 mol) 및 2-MeTHF(3.6 L)에 농축된 HCl(574.0 mL, 6.8 mol)을 25±5℃에서 1 시간에 걸쳐 첨가하였다. 이 용액을 2 시간 동안 교반한 뒤 수성 NaOH(15 wt%, 1.8 L)를 9의 pH에 도달할 때까지 첨가하였다. BOC₂O(485.3 g, 2.2mol)를 20±10℃에서 추가하고, 이 혼합물을 4 시간 동안 교반하였다. 이 혼합물을 분리하고, 유기층을 수성 NaOH(4 wt%, 2.0 L)로, 이어서 수성 NaCl(20 wt%, 2.0 L)로 2 회 세척하였다. 유기층을 진공 하에 농축하고, 헵탄(3.6 L)을 첨가하였다. 이 혼합물을 다시 농축하였다. 이 과정을 2-MeTHF 함량이 5.0% 미만이 될 때까지 반복하였다. 이 용액을 10±5℃로 냉각하였다. 이 혼합물을 여과하고 헵탄으로 세척하였다. 진공 하에 40℃에서 건조한 후 645.0 g(90.7%)의 표제 화합물을 수득하였다.

(d) 디- 삼차- 부틸 [(1 R )-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에틸]이미도디카보네이트

삼차-부틸 [(1R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에틸]카르밤산염(640 g 1.913 mol), DMAP(350.1 g, 2.870 mol) 및 2-MeTHF(3.8 L)을 75~80℃로 가열하였다. BOC₂O(542.1 g, 2.487 mol)을 적상으로 첨가하였다. 이 용액을 75~80℃에서 4 시간 동안 교반한 뒤 25~30℃로 냉각하였다. 유기층을 수성 NaOH(4 wt%, 2 L)로 세척하고, 이어서 수성 NaCl(20 wt%, 2 L)로 2 회 세척하였다. 유기층을 진공 하에 농축하고, 이어서 EtOH(3.2 L)를 첨가하였다. 이 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 이 과정을 2-MeTHF 함량이 5.0% 미만이 될 때까지 반복하였다. 이 용액을 40±5℃까지 가열하고 물 (1.6 L)을 첨가하였다. 이 혼합물을 10±5℃까지 냉각하였다. 이 혼합물을 여과하고 EtOH:물 1:1(1.9 L)로 세척하였다. 진공 하에 건조한 후 표제 화합물 770.0 g(92.0%)를 수득하였다.

(e) 디- 삼차- 부틸 [(1 R )-1-(5-클로로-2-포름일페닐)에틸]이미도디카보네이트

DMSO(800 mL), N-에틸-N-이소프로필-프로페인-2-아민(48.1 mL, 276.0 mmol) 및 트리에틸실란(103 mL, 644.0 mmol)의 혼합물을 교반하여 진공(100 mbar) 하에 두고, 질소로 3 회 재가압하였다. 이 혼합물을 디-삼차-부틸 [(1R)-1-(2-브로모-5-클로로페닐)에틸]이미도디카보네이트(80.00 g, 184.0 mmol)을 함유한 용기로 이송하였다. 비스(디-삼차-부틸(4-디메틸아미노페닐)포스핀)디클로로팔라듐(II)(6.514 g, 9.20 mmol)을 첨가하였다. 이 내용물을 질소로 2 bar까지 가압했다가 대기압으로 해제하기를 3 회 하고, 일산화탄소로 2 bar까지 가압했다가 대기압으로 해제하기를 3 회 하였다. 이 용기를 일산화탄소로 4 bar까지 가압하고, 교반을 시작한 다음 90℃로 24 시간 동안 가열하였다. 내용물을 20℃로 냉각하고 여과하였다. 하층을 제거하여 헵탄(400 mL)과 물(400 mL)의 혼합물에 첨가 하였다. 상층을 유지하고, 하층을 헵탄(200 mL)으로 추출하였다. 하층을 제거하였다. 2 개의 상층을 배합해 물(400 mL)로 세척한 다음 표제 화합물을 함유한 오일(66.5 g, 94.0%)로 농축하였다.

(f) 1-{2-[(1 R )-1- 아미노에틸 ]-4- 클로로벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

메탄올(200 mL) 중의 디-삼차-부틸 [(1R)-1-{5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]페닐}에틸]이미도디카보네이트의 슬러리(30.0 g, 52.1 mmol)에 메탄올(79.2 mL, 316.8 mmol) 중의 4.0 M HCl을 40~45℃에서 첨가하였다. 이 혼합물을 40~45℃에서 1 시간 동안 교반한 뒤 20~25℃로 냉각하였다. 물(96.5 mL)을 첨가하였다. 이 용액을 0~10℃로 냉각하고 수산화암모늄(56.6%, 31.5 mL, 448 mmol)을 pH 8.5~10가 되도록 첨가하였다. 이 슬러리를 여과하고 메탄올(60 mL), 이어서 물(60 mL), 이어서 메탄올(60 mL)로 세척하였다. 진공 하에 70℃에서 건조한 후 16.14 g(92.2%)의 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 4a

1-{2-[(1 S )-1- 아미노에틸 ]-4- 클로로벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

헵탄, EtOH 및 TEA(80/20/0.1)를 포함하는 이동상을 사용하여 Chiralpak® IA 컬럼(250x4.6 mm, 5 μm)을 사용함으로써 키랄 크로마토그래피로 1-[2-(1-아미노에틸)-4-클로로벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온의 2 개의 거울상 이성질체(실시예 2)를 수득하였다. 실시예 2에 따른 0.66 g의 라세미 화합물을 출발 물질로 사용하여, 84 %의 과량 거울상 이성질체를 갖는 0.28 g의 표제 화합물을 수득하였다. [α]_D ²⁰ = -14.9° (c=0.5, MeOH).

실시예 4b

1-{2-[(1 S )-1- 아미노에틸 ]-4- 클로로벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

2.0 g의 2-브로모-5-클로로벤즈알데히드를 출발 물질로 사용하여, S-거울상 이성질체가 아니라 2-메틸프로페인-2-술핀아민의 R-거울상 이성질체를 도입한 것을 제외하고는 실시예 3에 기술된 바와 유사한 프로토콜을 사용하여 99.2%의 과량 거울상 이성질체를 갖는 표제 화합물 0.40 g을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.34 (d, 3H), 1.91 (s, 3H), 4.41 (q, 1H), 5.57 - 5.87 (m, 2H), 6.04 (d, 1H), 6.60 (d, 1H), 7.13 (dd, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.66 (d, 1H). [α]_D ²⁰ = -43.9° (c=0.5, MeOH).

실시예 5

1-{4- 클로로 -2-[1-( 메틸아미노 )에틸] 벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

1-(2-Acetyl-4-클로로벤질)-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온(0.29 g, 0.88 mmol)을 EtOH(99.5%, 2.0 mL) 중에 현탁시키고, 이 혼합물에 테트라이소프로폭시티탄(0.52 mL, 1.79 mmol) 및 메탄아민(THF 중의 2 M, 2.68 mL, 5.36 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반한 뒤 나트륨 테트라하이드로보레이트(66.9 mg, 1.77 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30 분 동안 교반한 후, 물 및 NH₃(MeOH 중 2 M)를 첨가하여 pH를 11로 조정하였다. 이 현탁액을 실온에서 30 분 동안 교반한 뒤 침전물을 여과하여 MeOH 및 EtOAc로 세척하였다. 여과물을 감압 하에 제거하고, 생성물을 생성물을 이동상으로 구배(물 중의 0~30% MeCN, MeCN 및 FA, 95/5/0.2)를 사용하여 C18 컬럼 상에서 제조용 HPLC로 정제하였다. 0.13 g(43%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ1.35 (d, 3H), 2.29 (s, 3H), 4.14 (q, 1H), 5.73 (q, 2H), 6.00 (d, 1H), 6.65 (d, 1H), 7.18 (dd, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 8.17 (s, 1H), 12.50 (s, 1H). MS (APCI+) m/z 349 [M+H]⁺.

실시예 6

1-{4- 클로로 -2-[( 에틸아미노 ) 메틸 ] 벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

(a) 1- 브로모 -4- 클로로 -2-( 디에톡시메틸 )벤젠

질소 대기 하에 반응기(5 L)에 트리에틸 오르토포름산염(379 mL, 2278 mmol)을 채운 뒤 교반하면서 2-브로모-5-클로로벤즈알데히드(250 g, 1139 mmol)를 50 분에 걸쳐 나누어 첨가하였다. 첨가가 진행되는 동안 반응기를 냉각시켜 반응 온도를 21℃ 이하로 유지하였다. 이 혼합물을 17℃에서 3 시간 동안 교반하고, 트리에틸 오로토포름산염의 또 다른 일부(100 mL, 601 mmol)를 첨가한 뒤 추가로 3.5 시간 동안 교반을 계속하였다. 헵탄(300 mL)을 첨가하고, 셀라이트를 통해 이 혼합물을 여과하였다. 필터 케이크를 헵탄(200 mL)로 세척하고, 배합된 용액을 증발시켰다. 잔류물을 헵탄(200 mL)으로 4 회 공 증발시킨 후, 이동상으로서 EtOAc 및 헥산 (구배, 0% ~50% EtOAc)을 포함하는 혼합물을 사용하여 실리카겔 플래쉬 크로마토그래피로 부분 정제 하였다. 280 g(84%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.13 (t, 6H), 3.43 ~ 3.69 (m, 4H), 5.51 (s, 1H), 7.36 (dd, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.63 (d, 1H).

(b) 4- 클로로 -2-( 디에톡시메틸 ) 벤즈알데히드

질소 대기 하에 반응기(5 L)에 1-브로모-4-클로로-2-(디에톡시메틸)벤젠(251 g, 855 mmol) 및 2-메틸테트라하이드로푸란(3 L)을 채우고 이 혼합물을 -60℃로 냉각하였다. 이 용액에 튜빙을 통해 n-부틸리튬(헥산 중의 2.5 M, 342 mL, 855 mmol)을 첨가하였다. 40 분 동안 교반한 후, 12 분에 걸쳐 DMF(73 mL, 940 mmol)를 첨가하였다. 상기 첨가가 진행되는 도중 이 혼합물의 온도는 -49℃로 상승했다. 이 혼합물을 40 분 동안 교반한 뒤, 온도는 0℃로 상승했다. 30 분 동안의 추가적인 교반 후, 물(300 mL)을 5 분에 걸쳐 첨가하고, 이어서 염수 반 포화 용액(1.5 L)을 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성상을 2-메틸테트라하이드로푸란(1 L)로 추출하였다. 유기 용액을 포화 염수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄), 30℃에서 밤새 증발시켰다. 193 g의 표제 화합물을 87%의 순도(81% 유효 수율)를 가진 옅은 갈색의 오일로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 1.15 (m, 6H), 3.50 ~ 3.70 (m, 4H), 5.90 (s, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.80 (d, 1H).

(c) 에틸 3-{[4- 클로로 -2-( 디에톡시메틸 ) 벤질 ]아미노}-1 H -피롤-2- 카르복시산염

반응기(10 L)에 4-클로로-2-(디에톡시메틸)벤즈알데히드(181 g, 649 mmol) 및 MeOH(1 L)를 채우고 이 혼합물에 MeOH(100 mL)에 용해된 DIPEA(92 g, 714 mmol)를 첨가했다. 에틸 3-아미노-1H-피롤-2-카르복시산염 염산염(132 g, 648 mmol)을 MeOH(700 mL)와 함께 첨가하였다. 이 혼합물을 20℃에서 밤새 교반한 뒤 HOAc(78 g, 1298 mmol)을 첨가하였다. 교반 및 냉각시키면서 나트륨 시아노보로하이드라이드(41 g, 649 mmol)를 7 분에 걸쳐 여러 부분으로 첨가하여 온도가 27℃ 이상으로 상승하지 않도록 하였다. 이 용액을 40 분 동안 교반한 뒤 물(1.8 L)을 첨가하였다. 이 혼합물을 CH₂Cl₂(1 L)로 2 회 추출하고, 배합된 유기 용액을 건조하여(K₂CO₃) 1300 mL의 체적으로 농축하였다. 4 일 후, 이 혼합물을 MeOH의 존재 하에 농축하여 표제 화합물의 MeOH 용액(약 1L)을 수득하였다. 이 물질을 추가 정제없이 다음 단계에 사용하였다. ¹H NMR (400 MHz, MeOH-d₄): δ1.20 (t, 6H), 1.30 (t, 3H), 3.25 (m, 1H), 3.40-3.60 (m, 5H), 4.20 (q, 2H), 4.40 (s, 2H), 5.60 (d, 1H), 5.65 (s, 1H), 6.70 (d, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.50 (d, 1H).

(d) 1-[4- 클로로 -2-( 디에톡시메틸 ) 벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

에틸 3-{[4-클로로-2-(디에톡실메틸)-벤질]아미노}-1H-피롤-2-카르복시산염(550 mmol)의 MeOH 용액(약 1L)에 벤조일 이소티오시안산염(89 g, 677 mmol)을 서서히 첨가하여 반응 온도를 17℃ 내지 22℃로 유지하였다. 혼합물을 15 분 동안 교반하고, 벤조일 이소티오시안산염(13.5 g, 82.5 mmol)의 다른 부분을 첨가하고, 50 분 동안 추가로 교반한 후에, 벤조일 이소티오시안산염(8 g, 50 mmol)의 또 다른 부분을 첨가 하였다. 이 혼합물을 30 분 동안 교반한 뒤, Cs₂CO₃(383 g, 1177 mmol)을 15 분에 걸쳐 첨가하였다. 온도를 30 분 동안 30℃로, 이어서 20 분 동안 40℃로 상승시켰다. 이 혼합물을 50℃에서 4 시간 동안, 이어서 10℃에서 밤새 교반하였다. HOAc(140 mL)를 10℃에서 20 분에 걸쳐 첨가하고, 이어서 혼합물의 온도를 19℃로 상승시켰다. 형성된 침전물에 물(1.4 L)을 서서히 첨가하고, 이 고체 물질을 여과로 단리시켰다. 필터 케이크를 톨루엔(2 L)으로 세척한 뒤 진공에서 3 일 동안 건조시켰다. 201 g(80%, 2 단계)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆): δ1.20 (m, 6H), 3.50~3.70 (m, 4H), 5.80 (s, 2H), 6.00 (s, 1H), 6.75 (d, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.50 (s, 1H), 11.70~12.70 (b, 2H). MS (APCI+) m/z 395 [M+H]⁺.

(e) 5- 클로로 -2-[(4-옥소-2- 티옥소 -2,3,4,5- 테트라하이드로 -1 H - 피롤로[3,2-d]피리미딘 -1-일)메틸]벤즈알데히드

냉각된 TFA(1.89 mL, 25.39 mmol) 및 CH₂Cl₂(8 mL)의 혼합물에 1-[4-클로로-2-(디에톡시메틸)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온(1 g, 2.54 mmol)을 첨가하였다. 얼음조를 제거하고, 이 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 형성된 침전물을 여과에 의해 단리하고 CH₂Cl₂로 세척하여 0.69 g(85%)의 표제 화합물을 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 6.02 (s, 2H), 6.09 (s, 1H), 6.88 (d, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.60 (dd, 1H), 8.09 (d, 1H), 10.24 (s, 1H), 12.41 (s, 1H), 12.51 (s, 1H). MS (APCI+) m/z 320 [M+H]⁺.

(f) 1-{4- 클로로 -2-[( 에틸아미노 ) 메틸 ] 벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]벤즈알데히드(22 mg, 0.68 mmol) 및 에탄아민(THF 중의 2M, 3.39 mL, 6.79 mmol)을 마이크로파 바이알 내에서 MeOH(5 mL)에 용해시켰다. 이 반응 혼합물을 마이크로파 방사에 의해 100℃에서 5 분 동안, 이어서 140℃에서 75 분 동안 가열하였다. 나트륨 테트라하이드로보레이트(205 mg, 5.43 mmol)를 첨가하고 이 반응 혼합물을 실온에서 3 일 동안 교반하였다. 이 혼합물에 물을 첨가하여 급냉하였다. 용매를 증발시키고, 조 생성물을 물/MeCN/FA(95/5/02) 중의 0~30% MeCN의 구배를 사용해 제조용 HPLC로 정제하였다. ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆): δ 1.10 (t, 3H), 2.65 (q, 2H), 3.85 (s, 2H), 5.76 (s, 2H), 6.10 (d, 1H), 6.69 (d, 1H), 7.19 (dd, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.45 (d, 1H). MS (APCI+) m/z 349 [M+H]⁺.

실시예 7

1-[2-( 아미노메틸 )-4- 클로로벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H - 피롤로[3,2-d]피리미딘 -4-온

5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]벤즈알데히드(실시예 6(e) 참조)(194 mg, 0.61 mmol)를 히드록실아민 염산염(46 mg, 0.67 mmol) 및 HOAc(80%, 4 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하고, 이어서 아연(198 mg, 3.03 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 2 시간 동안 교반하였다. NaOH(1 M) 수용액을 첨가하여 pH를 12로 조정하였다. 감압 하에 용매를 제거하고, 잔류물을 물, MeCN 및 FA(95/5/02) 완충액 중의 5~45% MeCN의 구배를 사용하여 C8 컬럼 상에서 제조용 HPLC로 정제하였다. ¹H NMR (500 MHz, MeOH-d₄) δ 4.40 (s, 2H), 5.75 (s, 2H), 6.15 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.34 (dd, 1H), 7.53 (d, 1H). MS (APCI+) m/z 321 [M+H]⁺.

실시예 7, 대안적 제조(alternative preparation)

DMP(5000 mL) 중의 5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]벤즈알데히드(실시예 6(e) 참조)(500 g) 및 히드록실아민 염산염(88.1 g, 1.1 eq)의 현탁액을 50℃에서 3 시간 동안 가열하였다. 반응물을 밤새 18~25℃로 냉각하고, 용매를 진공에서 제거하고, 물(7500 mL)을 잔류물에 첨가하였다(최고 수조 온도 55℃). 이어서 1 M NaOH(수성)을 현탁액에 첨가하여 pH를 10으로 조정하였다(2000 mL 사용). 1 시간 동안 교반한 후, 고체를 여과하여 물(2 x 1785 mL)로 세척하고 건조하였다. 진공 오븐에서 45℃로 더 건조하여 중간체 옥심(intermediate oxime)을 백색 고체(395.0 g)로 수득하였다. 18~25℃에서, 아세트산(6760 mL) 중의 이 물질(450.7 g)의 배합된 배치의 현탁액에 아연(50 g)을 첨가하였다. 이어서 반응물을 50~60℃로 가온하였다. 추가로 아연 (830.3g, 총 첨가 된 880.3g, 10 당량)을 50~60℃에서 일부씩 첨가 하였다. 이 반응물을 50℃에서 18 시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고(고온), 진공에서 여과물을 농축하였다(최고 수조 온도 55℃). 생성된 고체를 18~25℃에서 1 시간 동안 20% HCl(수성, 3755 mL) 중에서 슬리리화 한 후 여과하고, 20% HCl(수성, 1500 mL)에 이어 물(2 x 1500 mL)로 세척한 뒤 건조시켰다. 이어서 이 고체를 물(9014 mL) 및 MeCN(3155 mL)에 용해시켰다. 1 M NaOH(수성, 1120 mL)를 첨가하여 pH를 9~10으로 조정하였다. 이 걸쭉한 현탁액을 30 분 동안 교반하고 고체를 여과하고 물(2 x 1300 mL)로 세척하고 건조하였다. 진공 오븐에서 45℃로 더 건조하여 백색 고체(390.9 g, 91%)를 수득하였다. 이 물질(1091.1 g)의 배합된 배치를 100~105℃에서 DMSO(5490 mL)에 용해시켰다. 용액을 70~80%로 냉각하고 폴리시 필터를 통해 제 2 용기로 여과하였다. 용액의 온도를 75~80℃로 조정하고 EtOH(6560 mL)를 75~80℃에서 적상으로 1 시간에 걸쳐 첨가하였다(첨가 중 결정화 일어남). 이 현탁액을 70°C에서 14 시간 동안 교반한 후 시간 당 10°C의 비율로 18~25℃로 냉각하고, 이어서 1 시간 동안 교반하였다. 이 고체를 여과하고, 에탄올(4 x 3660 mL)로 세척하고 건조하였다. 진공 오븐에서 더 건조하여 표제 화합물을 회백색의 고체(870 g)로 수득하였다. 물(9534 mL)/MeCN(3432 mL) 중의 이 물질의 현탁액(635.6 g)을 2 M 수성 HCl(1907 mL)로 pH 1까지 산성화하였다. 18~25℃에서 1 시간 동안 교반한 후, 이 고체를 여과하고 물(3180 mL then 2 x 1990 mL)로 세척하여 건조하였다. 젖은 케이크를 물(9534 mL)/EtOH (3432 mL)에 현탁하고, 1M 수성 NaOH(~2 L)를 첨가하여 pH를 9~10으로 조정하였다(pH 미터로 모니터함). 이 현탁액을 18~25℃에서 필요에 따라 pH를 9~10으로 유지하면서(1 M 수성 NaOH 사용함) 1 시간 동안 교반하였다. 이 고체를 여과하고, 물(3150 mL then 2 x 1574 mL)로 세척하여 건조하였다. 진공 오븐에서 45℃로 더 건조하여 표제 화합물을 백색의 결정(533.9 g)으로 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, MeOH-d₄) δ 4.40 (s, 2H), 5.75 (s, 2H), 6.15 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.34 (dd, 1H), 7.53 (d, 1H). MS (APCI+) m/z 321 [M+H]⁺.

LC는 0.5%를 초과하는 단일 불순물이 없는 98.4%의 순도를 나타냈다. Karl Fischer 적정법은 1.19%의 물을 나타냈다.

고체 잔류물은 XRPD에 의해 결정질인 것으로 밝혀졌으며 전형적인 회절도가 도 5에 표시된다. 특성 피크 위치는 아래에 나열된다.

XRPD 패턴 2-θ(°) 6.5 (m), 9.0 (m), 12.8 (vs), 16.8 (m), 18.0 (s), 23.5 (s), 25.6 (s), 26.3 (w), 30.5 (w), 34.0 (w).

실시예 8

1-{4- 클로로 -2-[( 메틸아미노 ) 메틸 ] 벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

5-클로로-2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸벤즈알데히드(실시예 6(e) 참조)(1.00 g, 3.13 mmol) 및 메탄아민(20 mL, 40.00 mmol)의 혼합물을 마이크로웨이브 오븐에서 100℃에서 20 분 동안 가열 하였다. 혼합물을 MeOH로 희석하고, 실온에서 교반하고, 이어서 5 분 동안 나트륨 테트라하이드로보레이트(0.95 g, 25 mmol)를 일부씩 첨가 하였다. 실온에서 1 시간 동안 교반한 후, 이 혼합물을 가열하여 2 시간 동안 환류시켰다. 나트륨 테트라하이드로보레이트의 다른 일부(0.47 g, 12.5 mmol)를 첨가하고, 이 혼합물을 15 분 동안 추가로 환류시켰다. 용매를 증발시켜 제거하고, 잔류물에 물(20 mL) 및 HCl 수용액(1M, 10 mL)을 첨가하여 pH를 1로 조정하였다. 이 혼합물을 얼음조로 냉각하고, 형성된 침전물을 여과시켜 물(100 mL)로 세척하였다. 여과물을 얼음조로 냉각하고, NH3 수용액(12%, 6 mL)을 사용하여 pH을 pH 9로 조정하였다. 침전물은 여과를 통해 단리하였다. 진공 건조한 후 700 mg(67%)의 원하는 생성물을 백색의 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 2.34 (d, 3H), 3.78 (s, 2H), 5.72 (s, 2H), 6.04 (t, 1H), 6.66 (d, 1H), 7.16 (dd, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.41 (d, 1H). MS (APCI+) m/z 335 [M+H]⁺.

실시예 9

1-(2-{[( 사이클로부틸메틸 )아미노] 메틸 } 벤질 )-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

(a) 에틸 3-{[2-(1,3- 디옥솔란 -2-일) 벤질 ]아미노}-1 H -피롤-2- 카르복시산염

EtOH(30 mL) 중 에틸 3-아미노-1H-피롤-2-카르복시산염 염산염(5.66 g, 29.69 mmol)의 용액을 DIPEA(6.22 mL, 35.63 mmol)로 처리하고 10 분 동안 교반한 후, HOAc(4.08 mL, 71.25 mmol) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.80 g, 44.53 mmol)를 첨가 하였다. 이어서, EtOH(20 mL) 중 2-(1,3-디옥솔란-2-일)벤즈알데히드(5.29 g, 29.69 mmol)의 용액을 15 분에 걸쳐 적상으로 첨가하였다. 생성된 현탁액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 증발시키고, 잔류물을 물(200 mL)로 처리하고 디클로로메탄(3 x 150 mL)으로 추출하였다. 유기 용액을 EtOAc 및 CH₂Cl₂(0~100 % EtOAc)의 구배를 사용하여 실리카 겔 컬럼을 통해 여과하였다. 표제 화합물 12.63g을 조 생성물로서 수득하였다.

(b) 에틸 3-{( 벤조일카르바모티오일 )[2-(1,3- 디옥솔란 -2-일) 벤질 ]아미노}-1 H -피롤-2-카르복시산염

에틸 3-{[2-(1,3-디옥솔란-2-일)벤질]아미노}-1H-피롤-2-카르복시산염(12.63 g, 39.92 mmol)을 CH₂Cl₂(60 mL)에 현탁시키고, DIPEA(7.09 mL, 39.92 mmol)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 0.25 시간 동안 교반한 뒤 벤조일이소티오시안산염(5.37 mL, 39.92 mmol)을 첨가하였다. 18 시간 동안 교반한 후, 용매를 진공 하에 제거하였다. 조 표제 화합물 24.8g을 수득하였고, 이를 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.

(c) 1-[2-(1,3- 디옥솔란 -2-일) 벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H - 피롤로[3,2-d]피리미딘 -4-온

에틸 3-{(벤조일카바모티오일)[2-(1,3-디옥솔란-2-일)벤질]아미노}-1H-피롤-2-카르복시산염(24.8 g, 51.72 mmol)을 MeOH(100 mL)에 용해하고, 용액을 수산화나트륨(10.34 g, 258.6 mmol)으로 처리하였다. 이 혼합물을 가열하여 완만하게 환류시키고 3.5 시간 동안 교반하였다. 냉각 후, 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 물에 용해시키고, HCl(2 M)을 사용하여 중화시키고, 이 혼합물을 CH₂Cl₂(3 x 50 mL)로 추출하였다. 배합된 추출물을 물(2 x 30 mL)로 세척하고, 건조시키고(MgSO₄), 여과하고 증발시켰다. 잔류물을 Et₂O와 함께 교반하고, 침전물을 수집하여 진공 하에 건조시켰다. 표제 화합물 1.2 g(3 단계에 걸쳐 12.3%)을 수득하였다.

MS (APCI+) m/z 330 [M+H]⁺.

(d) 2-[(4-옥소-2- 티옥소 -2,3,4,5- 테트라하이드로 -1 H - 피롤로[3,2-d]피리미딘 -1-일)메틸]벤즈알데히드

1-[2-(1,3-디옥솔란-2-일)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d](1.2 mL, 3.64 mmol)에 CH₂Cl₂(30 mL) 중의 TFA(5.0 mL, 64.90 mmol)의 용액을 첨가하고 이 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 화합물을 7 시간 동안 환류시킨 다음 진공 하에 농축하였다. 톨루엔을 첨가하여 TFA를 공 증발시켰다. 건조된 미정제물을 Et₂O와 함께 교반하고, 이 생성물을 분쇄하고, 이를 여과를 통해 수집하여 진공 하에 건조시켰다. 1.02 g(98 %)의 표제 화합물을 고체로서 수득하였다. MS (APCI+) m/z 286 [M+H]⁺.

(e) 1-(2-{[( 사이클로부틸메틸 )아미노] 메틸 } 벤질 )-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

건조 NMP(3 mL) 중의 2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로 [3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]벤즈알데히드(100 mg, 0.35 mmol), DIEA(0.184 mL, 1.05 mmol) 및 사이클로부틸메탄아민(128 mg, 1.05 mmol)의 혼합물을 60 분 동안 교반한 뒤, 수소화붕소나트륨(19.89 mg, 0.53 mmol)으로 처리하고, 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 이 용액을 NMP 중의 미리 불린 10g SCX 칼럼에 중력에 의해 흡착시키고, 이어서 컬럼을 MeOH(100mL)로 세척하였다. 조 생성물을 MeOH(3 M, 50 mL) 중의 NH₃ 용액을 사용해 용리하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 물 중의 MeOH의 구배(0.1% TFA)로 용리시키는 C8 컬럼 상에서 정제하였다. 생성물을 디클로로메탄(2 mL) 중에 슬러리화하여 목적 화합물 48 mg(38%)를 고체로서 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.70-3.20 (m, 9H), 4.35 (m, 2H), 5.78 (s, 2H), 6.06 (m, 1H), 6.78 (d, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.35 (m, 2H), 7.54 (d, 1H), 8.8 (b, 2H). MS (APCI+) m/z 355 [M+H]⁺.

실시예 10

1-{2-[( 사이클로부틸아미노 ) 메틸 ] 벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]벤즈알데히드(100 mg, 0.35 mmol) 및 사이클로뷰테인아민(249 mg, 3.50 mmol)을 출발 물질로 사용하여 실시예 9에 기술된 절차를 사용하여 표제 화합물을 고체로서 49%의 수율로 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.74 ~ 1.94 (m, 2H), 2.17~2.30 (m, 4H), 3.88 (s, 1H), 4.26 (s, 2H), 5.78 (s, 2H), 6.04 (t, 1H), 6.77 (d, 1H), 7.26 ~ 7.39 (m, 3H), 7.52 (dd, 1H), 9.09 (s, 2H), 12.41 (s, 1H), 12.52 (s, 1H). MS (APCI+) m/z 341 [M+H]⁺.

실시예 11

1-{2-[( 사이클로펜틸아미노 ) 메틸 ] 벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]벤즈알데히드(100 mg, 0.35 mmol) 및 사이클로펜테인아민(0.35 mL, 3.50 mmol)을 출발 물질로 사용하여 실시예 9에 기술된 절차를 사용해 표제 화합물을 고체로서 54%의 수율로 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.40~2.80 (m, 8H), 3.70 (m, 1H), 4.37 (m, 1H), 5.79 (s, 2H), 6.04 (t, 1H), 6.79 (d, 1H), 7.20~7.40 (m, 3H), 7.54 (d, 1H) 8.85 (b, 2H). MS (APCI+) m/z 355 [M+H]⁺.

실시예 12

1-(2-{[(2- 메틸프로필 )아미노] 메틸 } 벤질 )-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]벤즈알데히드(100 mg, 0.35 mmol) 및 2-메틸프로페인-1-아민(0.35 mL, 3.50 mmol)을 출발 물질로 사용하여 실시예 9에 기술된 절차를 사용하여 표제 화합물을 고체로서 71%의 수율로 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.00 (d, 6H), 2.05 (m, 1H), 2.95 (m, 2H), 4.40 (m, 2H), 5.79 (s, 1H), 6.06 (dd, 1H), 6.78 (d, 1H), 7.28 (t, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.58 (dd, 1H), 8.78 (b, 2H). MS (APCI+) m/z 343 [M+H]⁺.

실시예 13

1-{2-[(프로페인-2- 일아미노 ) 메틸 ] 벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]벤즈알데히드(100 mg, 0.35 mmol) 및 2-메틸프로페인-1-아민 프로페인-2-아민(0.45 mL, 5.61 mmol)을 출발 물질로 사용하여 실시예 9에 기술된 절차를 사용하여 표제 화합물을 고체로서 33%의 수율로 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 1.36 (d, 6H), 3.55 (m, 1H), 4.39 (m, 2H), 5.79 (s, 1H), 6.05 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 7.27 (t, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.54 (dd, 1H), 8.76 (b, 2H). MS (APCI+) m/z 329 [M+H]⁺.

실시예 14

1-[2-( 아미노메틸 )-4-( 트리플루오로메틸 ) 벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

(a) 1- 브로모 -2-( 디에톡시메틸 )-4-( 트리플루오로메틸 )벤젠

EtOH(99.5%, 6 mL) 중의 2-브로모-5-(트리플루오로메틸)벤즈알데히드(0.60 mL, 3.95 mmol), 트리에틸 오르토포름산염(1.316 mL, 7.90 mmol) 및 테트라부틸암모늄 3브롬화물(0.019 g, 0.04 mmol)의 용액을 실온에서 8 시간 동안 교반하였다. 트리에틸 오르토포름산염(1.32 mL, 7.90 mmol) 및 테트라부틸암모늄 3브롬화물(0.019 g, 0.04 mmol)을 추가로 첨가하고, 반응 혼합물을 15 시간 동안 추가로 교반하였다.

용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물에 포화 NaHCO₃ 및 EtOAc의 수용액을 첨가하였다. 층을 분리하고, 수성상을 EtOAc로 2 회 추출하였다. 배합된 유기층을 염수로 세척하고, 상 분리기로 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 0.94 g(72%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 1.27 (t, 6H), 3.58 - 3.73 (m, 4H), 5.67 (s, 1H), 7.45 (dd, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.93 (d, 1H).

(b) 2-( 디에톡시메틸 )-4-( 트리플루오로메틸 ) 벤즈알데히드

질소 대기 하에 -78℃에서 THF(130 mL) 중의 1-브로모-2-(디에톡시메틸)-4-(트리플루오로메틸)벤젠(11.5 g, 35.15 mmol) 용액에 부틸리튬(헥산 중의 2.5 M, 15.47 mL, 38.67 mmol)을 적상으로 추가하고, 생성 용액을 -78℃에서 30 분 동안 교반하였다. DMF(4.06 mL, 52.73 mmol)를 -78℃에서 적상으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온시키고 2 시간 동안 교반하였다. 포화 NH₄Cl의 수용액을 첨가하고, 상을 분리시켰다. 수성층을 EtOAc로 2 회 추출하였다. 배합된 유기층을 염수로 세척하고, 건조하고(상 분리기), 용매를 감압 하에 제거하였다. 9.0 g(33%)의 표제 화합물을 수득하였다.

(c) 에틸 3-{[2-( 디에톡시메틸 )-4-( 트리플루오로메틸 ) 벤질 ]아미노}-1 H -피롤-2-카르복시산염

에틸 3-아미노-1H-피롤-2-카르복시산염(5.02 g, 32.58 mmol)을 EtOH(99.5%, 110 mL)에 용해시키고, 그 생성 용액에 DIPEA(5.67 mL, 32.58 mmol), 이어서 HOAc(3.73 mL, 65.16 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃까지 냉각시키고 나트륨 시아노트리하이드로보레이트(2.46 g, 39.09 mmol)를 첨가하였다. 이어서, EtOH(99.5%, 10 mL)에 용해된 2-(디에톡시메틸)-4-(트리플루오로메틸)벤즈알데히드(9 g, 32.58 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 교반한 뒤, 온도가 실온으로 상승하는 16 시간 동안 교반하였다. 물을 첨가하고 톨루엔으로 혼합물을 추출하였다. 수성상을 톨루엔으로 2 회 추출하고, 배합된 유기층을 염수로 세척하고, 상 분리기를 통해 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 생성물을 C8 컬럼을 사용하고, 물, MeCN 및 아세트산 암모늄 완충액(0.1 M) 중의 구배(50% ~ 100%) MeCN을 포함하는 혼합물을 사용하여 제조용 HPLC로 정제 하였다. 4 회를 주입한 후, 4.5 g(33%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 1.25 (td, 4H), 1.34 (t, 3H), 3.51 ~ 3.7 (m, 5H), 4.31 (dd, 2H), 4.57 (s, 2H), 5.60 (dd, 1H), 5.66 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.09 (d, 1H). MS (APCI+) m/z 414 [M+H]⁺.

(d) 1-[2-( 디에톡시메틸 )-4-( 트리플루오로메틸 ) 벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

에틸 3-{[2-(디에톡시메틸)-4-(트리플루오로메틸)벤질]아미노}-1H-피롤-2-카르복시산염(4.3 g, 10.38 mmol)을 MeOH(40 mL)에 용해시키고, 생성 용액에 벤조일 이소티오시안산염(1.40 mL, 10.38 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15 분 동안 교반하고, 이어서 Cs₂CO₃(7.27 g, 22.31 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 60℃에서 6 시간 동안 교반한 뒤 용매를 가압 하에 제거하였다. 물 및 디클로로메탄을 첨가하고 수성상을 CH₂Cl₂로 2 회 더 추출하였다. 유기층을 조합하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 Et₂O로 분쇄하였다. 형성된 현탁액을 4 시간 동안 교반하고, 고체를 여과를 통해 단리시켰다. 고체를 Et₂O로 세척하여 3.46 g(78%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 1.22 (t, 6H), 3.55 ~ 3.72 (m, 4H), 5.89 (s, 3H), 5.95 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.83 (s, 1H), 12.38 (s, 2H). MS (APCI-) m/z 426 [M-H]^-.

(e) 2-[(4-옥소-2- 티옥소 -2,3,4,5- 테트라하이드로 -1 H - 피롤로[3,2-d]피리미딘 -1-일)메틸]-5-(트리플루오로메틸)벤즈알데히드

TFA(2.90 mL, 39.07 mmol) 및 CH₂Cl₂(12 mL)의 혼합물을 0℃로 냉각하고, 그 용액에 1-(2-(디에톡시메틸)-4-(트리플루오로메틸)벤질)-2-티옥소-2,3-디하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4(5H)-온(1.67 g, 3.91 mmol)을 첨가하였다. 얼음조를 제거하고, 혼합물을 실온에서 2.5 시간 동안 교반하였다. 생성된 고체를 여과하고 CH₂Cl₂로 세척하여 1.31 g(95%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 6.09 ~ 6.16 (m, 3H), 7.08 (d, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.89 (dd, 1H), 8.41 (d, 1H), 10.34 (s, 1H), 12.44 (s, 1H), 12.52 (s, 1H). MS (APCI+) m/z 352 [M-H]^-.

(f) 1-[2-( 아미노메틸 )-4-( 트리플루오로메틸 ) 벤질 ]-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

HOAc(80%, 4 mL) 중의 히드록실아민 염산염(42 mg, 0.61 mmol)의 혼합물에 2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]-5-(트리플루오로메틸)벤즈알데히드(195 mg, 0.55 mmol)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하고, 아연(181 mg, 2.76 mmol)을 첨가하였다. 60℃에서 1.5 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 냉각시키고 수성 NaOH(1 M)로 pH를 12로 조정하였다. 생성된 침전물을 여과를 통해 수집하였다. 생성물을 물, MeCN 및 FA(95/5/0.2) 중의 5~45% MeCN의 구배를 사용하여 C8 컬럼 상에서 제조용 HPLC로 정제하였다. 70 mg(36%)의 원하는 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 4.37 (s, 2H), 5.81 (s, 2H), 6.11 (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.89 (s, 1H), 8.36 (s, 2H), 12.47 (s, 1H), 12.56 (s, 1H).

실시예 15

1-{2-[( 메틸아미노 ) 메틸 ]-4-( 트리플루오로메틸 ) 벤질 }-2- 티옥소 -1,2,3,5- 테트라하이드로 -4 H -피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온

2-[(4-옥소-2-티옥소-2,3,4,5-테트라하이드로-1H-피롤로[3,2-d]피리미딘-1-일)메틸]-5-(트리플루오로메틸)벤즈알데히드(214 mg, 0.61 mmol) 및 메탄아민(MeOH 중 2 M, 3.03 mL, 6.06 mmol)을 MeOH(5 mL)에 용해시키고, 생성 용액을 마이크로웨이브 바이알에 옮겼다. 반응 혼합물을 100℃에서 5 분 동안 가열한 뒤 THF(5 mL)로 희석하였다. 나트륨 테트라하이드로보레이트(183 mg, 4.85 mmol)을 소량씩 2 분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반한 뒤 물을 첨가하여 급냉하였다. 용매를 증발시키고, 조 생성물을 물, MeCN 및 0.1 M NH4OAc 완충액(95/5/0.2) 중의 15~55% MeCN의 구배를 사용하여 C18 컬럼 상에서 제조용 HPLC로 정제하고, 이어서 물, MeCN 및 FA(95/5/0.2) 중의 0~30% MeCN의 구배를 사용하여 재정제하였다. 62 mg(28%)의 표제 화합물을 수득하였다. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 2.42 (s, 3H), 3.94 (s, 2H), 5.85 (s, 2H), 6.10 (d, 1H), 6.88 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.76 (s, 1H), 8.19 (s, 1H). MS (APCI+) m/z 369 [M+H]⁺.

Claims

화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
[화학식 (I)]

여기서, R¹은 H, F, Cl 또는 CF₃이고;
R²는 H, CH₃ 또는 C₂H₅이고;
R³은 H, CH₃, C₂H₅ _,n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 이차 부틸, 삼차 부틸, 사이클로프로필, 사이클로프로필메틸, 사이클로부틸, 사이클로부틸메틸 또는 사이클로펜틸임.
제1항에 있어서, R¹은 Cl인 화합물.
제1항에 있어서, R²는 CH₃인 화합물.
제1항에 있어서, R²는 H인 화합물.
제1항에 있어서, R³은 H인 화합물.
제1항에 있어서, R²가 부착된 탄소 원자는 R²가 CH₃ 또는 C₂H₅인 경우 R-배열을 가지는 화합물.
1-{2-[(1R)-1-아미노프로필]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-[2-(1-아미노에틸)-4-클로로벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{2-[(1R)-1-아미노에틸]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{2-[(1S)-1-아미노에틸]-4-클로로벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{4-클로로-2-[1-(메틸아미노)에틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{4-클로로-2-[(에틸아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-[2-(아미노메틸)-4-클로로벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{4-클로로-2-[(메틸아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-(2-{[(사이클로부틸메틸)아미노]메틸}벤질)-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{2-[(사이클로부틸아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{2-[(사이클로펜틸아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-(2-{[(2-페틸프로필)아미노]메틸}벤질)-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{2-[(프로페인-2-일아미노)메틸]벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-[2-(아미노메틸)-4-(트리플루오로메틸)벤질]-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온;
1-{2-[(메틸아미노)메틸]-4-(트리플로오로메틸)벤질}-2-티옥소-1,2,3,5-테트라하이드로-4H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-온으로부터 선택되는 제1항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
약제로 사용하기 위한 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 조성물로서, 선택적으로, 약학적으로 허용 가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 약학적 조성물.
효소 MPO의 억제가 유익한 질병이나 질환을 치료하거나 그 위험을 감소시키는 방법으로서, 상기 질병이나 질환을 앓고 있거나 그러한 위험이 있는 사람에게 치료 유효량의 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는 방법.
제10항에 있어서, 상기 질병이나 질환은 심부전인 방법.
제10항에 있어서, 상기 질병이나 질환은 박출률(ejection fraction)이 감소된 심부전인 방법.
제10항에 있어서, 상기 질병이나 질환은 박출률이 보존된 심부전인 방법.
약제를 제조함에 있어서, 효소 MPO의 억제가 유익한 질병이나 질환의 치료 또는 예방을 위한, 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도.
제14항에 있어서, 상기 질병이나 질환은 심부전인 용도.
제14항에 있어서, 상기 질병이나 질환은 박출률이 감소된 심부전인 용도.
제14항에 있어서, 상기 질병이나 질환은 박출률이 보존된 심부전인 용도.