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KR20170018076A - 척수성 근위축증을 치료하기 위한 이미다조[1,2-a]피라진-1일-벤즈아마이드 화합물 - Google Patents

척수성 근위축증을 치료하기 위한 이미다조[1,2-a]피라진-1일-벤즈아마이드 화합물 Download PDF

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KR20170018076A
KR20170018076A KR1020177002082A KR20177002082A KR20170018076A KR 20170018076 A KR20170018076 A KR 20170018076A KR 1020177002082 A KR1020177002082 A KR 1020177002082A KR 20177002082 A KR20177002082 A KR 20177002082A KR 20170018076 A KR20170018076 A KR 20170018076A
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methylimidazo
fluoro
hydrogen
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KR1020177002082A
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루크 그린
엠마뉴엘 피나르
하산 라트니
패트릭 윌리암슨
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에프. 호프만-라 로슈 아게
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Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다. 또한, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물의 제조, 이를 포함하는 약학 조성물 및 척수성 근위축증 치료용 약제로서 이의 용도에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure pct00079

상기 식에서,
A, X1, X2, R1, R2, R3, R4 및 R5는 본원에 기재된 바와 같다.

Description

척수성 근위축증을 치료하기 위한 이미다조[1,2-a]피라진-1일-벤즈아마이드 화합물{IMIDAZO[1,2-A]PYRAZIN-1YL-BENZAMIDE COMPOUNDS FOR TREATING SPINAL MUSCULAR ATROPHY}
본 발명은 SMN2 유전자 스플라이싱 조절자인 화합물, 이의 제조, 이를 포함하는 약학 조성물, 및 SMN-결핍-관련 증상의 치료, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료를 위한 약제로서의 이의 용도를 제공한다.
특히, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure pct00001
상기 식에서,
X1, X2, A, R1, R2, R3 및 R4는 본원에 기재된 바와 같다.
척수성 근위축증(SMA)은, 가장 넓은 의미에서, 척수 및 뇌간에서 점진적인 운동 뉴런을 손실하여 근육 약화 및 근위축을 특징으로 하는 선천성 및 후천성 중추신경계(CNS) 질병의 모음을 기술한다. SMA의 가장 흔한 형태는 운동 뉴런의 생존(SMN) 유전자에서 돌연변이에 의해 야기되고 성인을 통해 영아에게 영향을 끼치는 광범위한 심각성을 나타낸다(문헌[Crawford and Pardo, Neurobiol. Dis., 1996, 3:97]).
영아 SMA는 이러한 신경퇴행성 질환의 가장 심각한 형태이다. 증상은 근육 약화, 불량한 근육 긴장, 약한 울음소리, 늘어짐 또는 주저앉는 경향, 빨기 또는 뱉기의 어려움, 폐 또는 인후에 분비물 축적, 수유 곤란, 및 기도 감염에 대한 증가된 민감성을 포함한다. 다리는 팔보다 더 약해지는 경향이 있고, 발육 이정표, 예컨대, 머리 들기 또는 바로 앉기를 성취할 수 없다. 일반적으로, 증상이 초기에 나타날수록, 수명은 더 짧아진다. 운동 뉴런 세포가 약화됨으로써, 증상은 곧 나타난다. 질병의 심각한 형태는 치명적이고 모든 형태는 알려진 치료법이 없다. 심각한 형태의 SMA를 갖는 영아는 호흡을 유지하는 근육의 약화로 인해 자주 호흡기 질병에 굴복한다. 가벼운 형태의 SMA를 갖는 개인은 광범위한 의료 지원, 특히 스펙트럼의 더욱 심각한 끝에서 필요할 수 있을지라도, 더 오래 산다. SMA 질환의 임상적 스펙트럼은 하기 5개 군으로 세분되고 있다:
(a) 유형 0 SMA(태내 SMA)는 질병의 가장 심각한 형태이고 출산 전에 시작한다. 보통, 유형 0 SMA의 제 1 증상은 임신 30 내지 36주 사이에 첫 번째로 관찰될 수 있는 태아 운동의 감소이다. 출산 후, 이러한 신생아는 거의 움직이지 않고 연하 및 호흡에 어려움이 있다.
(b) 유형 1 SMA(영아 SMA 또는 베르드니히-호프만 병)는 0 내지 6 개월 사이에 증상을 나타낸다. SMA의 형태는 또한 매우 심각하다. 환자는 결코 앉는 능력을 성취하지 못하고, 통상의 호흡 장치 없이 처음 2년 이내에 사망한다.
(c) 유형 2 SMA(중간체 SMA)는 7 내지 18개월에 개시된다. 환자는 보조 없이 앉는 능력을 성취하지만, 도움없이 서거나 걸을 수 없다. 이러한 군에서 예후는 주로 호흡 관여도에 따른다.
(d) 유형 3 SMA(청소년 SMA 또는 쿠겔베르크-벨란데르 병)는 일반적으로 18개월 후 진단된다. 유형 3 SMA 개인은 그들의 질병 과정 동안 일부 시점에서 독립적으로 걸을 수 있지만 종종 청년기 또는 성인기 동안 휠체어 신세를 지게 된다.
(e) 유형 4 SMA(성인 개시 SMA). 청소년기 후반에 보통 혀, 손 또는 발에서 쇠약이 시작된 후, 신체의 다른 부위로 진행된다. 성인 SMA의 과정은 훨씬 더 느리고 기대 수명에 거의 영향을 끼치지 않거나 전혀 영향을 끼치지 않는다.
SMN 유전자는 염색체 5q에서 복합 영역에 대한 연결기 분석에 의해 맵핑되어 있다(문헌[Lefebvre S. et al ., Cell (1995) 80:155]). 인간에서, 이러한 영역은 SMN 유전자의 2개의 거의 동일한 복제(copy)를 야기하는 약 50만개 염기 쌍(kb) 역전된 중복을 함유한다. SMA는 2개 염색체에서 유전자(SMN1)의 텔로머 복제의 불활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 SMN1 유전자 기능의 손실로 야기된다. 그러나, 모든 환자는 유전자(SMN2)의 센트로머 복제를 보유하고, SMA 환자에서 SMN2 유전자의 복제 수는 일반적으로 질병의 중증도와 역으로 관련되어 있고, 즉, 덜 심각한 SMA 환자는 SMN2의 더 많은 복제를 갖는다. SMN2 프리(pre)-mRNA는 엑손 7에서 번역적 사일런트 C-T 돌연변이에 의해 야기된 엑손 7의 교번 스플라이싱을 진행한다. 결과적으로, 대부분의 전사인자는 SMN2 결핍 엑손 7(Δ7 SMN2)로부터 생성되고, 손상된 기능을 갖는 절두된(truncated) SMN 단백질을 암호화하고 신속하게 분해된다.
snRNP라 명명된 RNA-단백질 복합체의 특이적 부류의 조립을 매개하는 널리 특징된 기능을 갖는 SMN 단백질은, RNA 공정 및 대사작용에서 중요한 역할을 한다. SMN은 운동 뉴런에서 다른 기능을 가질 수 있지만, 운동 뉴런의 선택적인 퇴행을 방지하는 이의 역할은 잘 수립되지 않았다.
대부분의 경우에, SMA는 임상적 증상에 기초하고 SMN1 유전자의 엑손 7의 완전 부재에 의해 진단된다. 그러나, 약 5%의 경우에서, SMA는 SMN1의 비활성화 이외에 일부는 공지되고 다른 것은 아직 정의되지 않은 유전자에서 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 경우에, SMN1 유전자 시험이 실현가능하지 않거나 임의의 이상을 나타내지 않을 때, 근점도 검사(EMG) 및 근육 생검과 같은 다른 시험을 나타낸다.
현재 SMA 환자에 대한 의료 관리는 호흡, 영양 및 재활 관리를 비롯한 지지 요법으로 제한되고, 질병의 근본적인 원인을 설명하기 위해 알려진 약물은 없다. SMA에 대한 현재 치료는 만성 운동 단위 손실의 2차 효과의 예방 및 관리로 이루어진다. 유형 1 SMA에서 주요한 관리 문제는 대부분의 경우에 사망을 야기하는 폐 문제의 예방 및 초기 치료이다. SMA로 고통받는 일부 영아가 성인으로 성장하는 동안, 유형 1 SMA를 가진 이들은 2년 미만의 기대 수명을 갖는다.
SMA의 여러 마우스 모델이 개발되었다. 특히, SMN 델타 엑손 7(Δ7 SMN) 모델(문헌[Le et al., Hum. Mol. Genet., 2005, 14:845])은 SMN2 유전자 및 Δ7 SMN2 cDNA의 여러 복제 둘 다를 전달하고 유형 1 SMA의 많은 표현형 특징을 개괄한다. Δ7 SMN 모델은 SMN2 발현 연구, 및 운동 기능 및 생존의 평가 둘 다를 위해 사용될 수 있다. C/C-대립유전자 마우스 모델[잭슨 래보래토리(Jackson Laboratory) 균주 #008714, 더 잭슨 래보래토리(The Jackson Laboratory), 미국 마인주 바 하버 소재]은 SMN2 전장(FL SMN2)은 덜 심각한 SMA 질병 모델을 제공하지만, 명확한 균육 약화를 갖지 않는다. 이 마우스 모델은 불활성화된 쥐과 Smn1 유전자를 가지며, 완전 SMN2 유전자 및 교번 스플라이싱을 진행하는 하이브리드 mSmn1-SMN2 유전자 모두를 함유한다. C/C-대립유전자 마우스는 감소된 mRNA 및 SMN 단백질 둘 다의 수준을 갖는다. C/C-대립유전자 마우스 모델은 SMN2 발현 연구를 위해 사용된다.
SMA의 유전적 기초 및 병리생리학의 개선된 이해의 결과로서, 치료를 위한 여러 전략이 분석되었지만, 어떤 것도 아직 임상에서 성공적으로 입증되지 않았다.
바이러스 전달 벡터를 사용하는 SMA1의 유전자 대체, 및 분화된 SMN1+/+ 줄기 세포를 사용하는 세포 대체는, SMA의 동물 모델에서 효능이 입증되었다. 이러한 접근이 인간에게 적용될 수 있기 전에 신생아 단계에서 안정성 및 면역 반응을 결정하고 치료 개시에 대한 요건을 설명하기 위해 많은 연구가 요구된다.
또한, 배양된 세포에서 SMN2의 교번 스플라이싱의 수정은 합성 핵산을 사용하여 성취되었다: (i) SMN2 pre-mRNA에서 서열 요소를 표적하고 전장 SMN2 mRNA의 생성에 대한 스플라이싱 반응의 결과를 바꾸는 안티센스 올리고뉴클레오티드(문헌[Passini et al., Sci. Transl. Med., 2011, 3:72ra18]; 및 [Hua et al., Nature, 2011, 478:123]), 및 (ii) 스플라이싱 동안 돌연변이체 단편을 대체하고 전장 SMN1 mRNA를 생성하는 완전 작용성 RNA 서열을 제공하는 트랜스-스플라이싱 RNA 분자(문헌[Coady and Lorson, J Neurosci., 2010, 30:126]).
조사 중인 다른 접근법은, SMN 수준을 증가시키거나, 잔여 SMN 기능을 강화시키거나, 이의 감소된 수준을 보상하는 약물에 대한 연구를 포함한다. 아미노글리코시드는 이상 정지 코돈의 번역 통독을 촉진하여 Δ7 SMN2 mRNA로부터 생성된 안정화된 연장된 SMN 단백질의 발현을 강화시키는 것으로 나타났지만, 불량한 중추신경계 침투를 갖고 반복 투여 후 독성이 있다. 화학치료제, 예컨대, 아클라루비신은 세포 배양시 SMN 단백질을 증가시키는 것으로 나타났지만, 이러한 약물의 독성 프로필은 SMA 환자에서 장기간 사용을 금지하였다. SMA의 치료를 위해 임상 조사 중인 일부 약물은 전사 활성제, 예컨대, 히스톤 데아세틸라제("HDAC") 억제제(예를 들면, 부티레이트, 발프로산 및 하이드록시우레아), 및 SMN2 유전자로부터 전사된 총 RNA의 양을 증가시키는 것이 목적인 mRNA 안정화제[화이자(Pfizer)으로부터의 mRNA 외피제거(decapping) 억제제 RG3039]를 포함한다. 그러나, HDAC 억제제 또는 mRNA 안정화제의 사용은 SMA의 근본적인 원인을 설명하지 않고 인간에서 잠재적인 안전 문제와 함께 전사 및 유전자 발현시 전반적인 증가를 야기할 수 있다.
대안적인 접근법에서, 신경보호제, 예컨대, 올레속심(Olesoxime)은 조사를 위해 선택되었다. 상기 전략은 SMA의 치료를 위한 SMN을 목표로 하지 않지만, 대신에 신경퇴행으로부터 SMN-결핍 운동 뉴런을 보호하기 위해 조사되고 있다.
SMN의 엑손 7의 SMN2 유전자로부터 전사된 RNA로 포함을 증가시키는 화합물을 확인하기 위해 고안된 시스템 및 이로 확인된 특정한 벤조옥사졸 및 벤조이속사졸 화합물은 국제 특허 출원 WO 2009/151546 A1에 기재되어 있다. Δ7 SMN2 mRNA로부터 안정화된 SMN 단백질을 생성하기 위해 리보솜의 프레임시프트를 야기하는 화합물을 확인하기 위해 고안된 시스템 및 이로 확인된 특정한 이소인돌린온 화합물은 국제 특허 출원 WO 2010/019236 A1 및 WO 2013/119916 A2에 기재되어 있다.
SMA의 유전적 기초 및 병리생리학을 이해하는 과정에도 불구하고, 가장 충격적인 어린이 신경학적 질병 중 하나인 척수성 근위축증의 과정을 변경시키는 화합물을 확인하기 위한 요구가 남아 있다.
본 발명은 상기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 분야의 숙련자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있을지라도, 적합한 방법 및 물질이 후술된다.
본원에 언급된 모든 문헌, 특허 출원, 특허 및 다른 참고 문헌은 이의 전체가 참고로 인용된다.
본원에 사용된 명명법은, 달리 나타내지 않는 한, IUPAC 체계적 명명법에 기초한다.
본원의 구조에서 탄소, 산소, 황 또는 질소 원자를 표시하는 임의의 개방 원자가는, 달리 나타내지 않는 한, 수소의 존재를 나타낸다.
본원에 기재된 정의는 해당 용어가 단독으로 나타내든지 조합하여 나타내든지에 상관없이 적용된다. 본원에 기재된 정의는 화학적으로 관련한 조합, 예를 들면, "헤테로사이클로알킬아릴", "할로알킬헤테로아릴", "아릴알킬헤테로사이클로알킬" 또는 "알콕시알킬"을 형성하기 위해 첨부될 수 있음이 이해된다. 상기 조합의 마지막 구성원은 분자의 나머지에 결합하는 라디칼이다. 상기 조합의 다른 구성원은 일반적인 순서에 대하여 역순으로 결합 라디칼에 부착되고, 예를 들면, 조합 C1 -7-알콕시-헤테로사이클로알킬은 C1 -7-알콕시에 의해 치환되는 헤테로사이클로알킬을 나타낸다.
용어 "잔기(moiety)"는 하나 이상의 화학 결합에 의해 또 다른 원자 또는 분자에 부착되어 분자의 일부를 형성하는 원자 또는 화학적으로 결합된 원자의 군을 나타낸다. 예를 들면, 화학식 I의 변수 A, R1, R2 및 R3은 공유 결합에 의해 화학식 I의 중심 구조에 부착되는 잔기를 나타낸다.
치환기의 수를 나타낼 때, 용어 "하나 이상"은 1개 치환기로부터 가능한 가장 많은 수의 치환 범위, 즉, 치환기에 의해 1개 수소 원자의 치환으로부터 모든 수소의 치환까지를 나타낸다.
용어 "임의적인" 또는 "임의적으로"는 후술된 사건 또는 상황이 발생할 필요는 없지만, 사건 또는 상황이 발생하는 경우 및 발생하지 않는 경우를 포함함을 나타낸다.
용어 "치환기"는 모 분자에서 수소 원자를 대체하는 원자 또는 원자의 군을 타나낸다.
용어 "치환된"은 명시된 기가 하나 이상의 치환기를 가짐을 나타낸다. 임의의 기가 다중 치환기를 전달할 수 있고 다양한 가능한 치환기가 제공되는 경우, 상기 치환기는 독립적으로 선택되고 동일할 필요는 없다. 용어 "비치환된"은 명시된 기가 치환기를 갖지 않음을 의미한다. 용어 "임의적으로 치환된"은 명시된 기가 가능한 치환기의 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되거나 비치환됨을 의미한다. 치환기의 수를 나타낼 때, 용어 "하나 이상"은 1개의 치환기로부터 가능한 가장 많은 수의 치환기, 즉, 치환기에 의해 1개 수소의 치환으로부터 모든 수소의 치환까지를 의미한다.
용어 "이 발명의 화합물" 및 "본 발명의 화합물"은 본원에 개시된 바와 같은 화합물 및 이의 입체이성질체, 호변이성질체, 용매화물 및 염(예를 들면, 약학적으로 허용가능한 염)을 나타낸다. 본 발명의 화합물이 고체일 때, 이러한 화합물, 및 이의 용매화물 및 염은 상이한 고체 형태, 특히 상이한 결정형으로 존재할 수 있음이 당업자에 의해 이해되고, 이들 모두는 본 발명 및 명시된 화학식의 범주 내에서 의도된다.
용어 "약학적으로 허용가능한 염"은 생물학적으로 또는 달리 바람직한 염을 나타낸다. 약학적으로 허용가능한 염은 산 및 염기 부가 염 둘 다를 포함한다.
용어 "약학적으로 허용가능한 산 부가 염"은 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 탄산, 인산과 같은 무기 산, 및 지방족, 지환족, 방향족, 비지방족, 헤테로사이클릭 및 카보사이클릭으로부터 선택된 유기산 및 유기산의 설폰 부류, 예컨대 포름산, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 글루콘산, 락트산, 피루브산, 옥살산, 말산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 아스파르트산, 아스코르브산, 글루탐산, 안트라닐산, 벤조산, 신남산, 만델산, 엠본산, 페닐아세트산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 및 살리실산으로 형성된 약학적으로 허용가능한 염을 나타낸다. 바람직한 본 발명의 약학적으로 허용가능한 염은 염산과 형성된 염으로서, 하이드로클로라이드, 다이하이드로클로라이드 또는 트라이하이드로클로라이드 염, 더욱 바람직하게는 하이드로클로라이드 염을 제공한다.
용어 "약학적으로 허용가능한 염기 부가 염"은 유기 또는 무기 염기로 형성된 약학적으로 허용가능한 염을 나타낸다. 허용되는 무기 염기의 예는 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간 및 알루미늄 염을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 유기 무독성 염기로부터 유도된 염은 1차, 2차 및 3차 아민, 자연 치환된 아민을 비롯한 치환된 아민, 사이클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대, 이소프로필아민, 트라이메틸아민, 다이에틸아민, 트라이에틸아민, 트라이프로필아민, 엔탄올아민, 2-다이에틸아미노에탄올, 트라이메타민, 다이사이클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 하이드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌다이아민, 글루코사민, 에틸글루카민, 테오브로민, 퓨린, 피페리진, 피페리딘, N-에틸피페리딘 및 폴리아민 수지의 염을 포함한다.
본원에 사용된 입체화학 정의 및 관례는 일반적으로 문헌[S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York]; 및 [Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994]을 따른다. 광학적으로 활성인 화합물을 기재하는 경우, 접두사 D 및 L, 또는 R 및 S는 이의 키랄 중심에 대한 분자의 절대 배열을 나타내기 위해 사용된다. 고려중인 키랄 중심에 부착된 치환기는 칸, 인골드 및 그렐로그의 순위 결정 규칙(Sequence Rule of Cahn, Ingold and Prelog)에 따라 등급을 매긴다(문헌[Cahn et al. Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511]). 접두사 D 및 L, 또는 (+) 및 (-)는 화합물에 의해 평면-편광의 회전 기호를 나타내기 위해 사용되고, (-) 또는 L은 화합물이 좌회전성임을 나타낸다. (+) 또는 D로 접두된 화합물은 우회전성이다.
용어 "키랄 중심"은 4개의 상이한 치환기에 결합된 탄소 원자를 나타낸다. 용어 "키랄"은 거울상과 비중첩성을 나타내지만, 용어 "아키랄"은 이의 거울상과 중첩성인 실시양태를 나타낸다. 키랄 분자는 광학적으로 활성이고, 즉, 이들은 평면-편광을 회전하는 능력을 갖는다.
본 발명의 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 가질 수 있고 광학적으로 순수한 거울상이성질체, 거울상이성질체의 혼합물, 예를 들면, 라세미체, 광학적으로 순수한 부분입체이성질체, 부분입체이성질체의 혼합물, 부분입체이성질성 라세미체 또는 부분입체이성질성 라세미체의 혼합물의 형태로 존재할 수 있다. 키랄 중심이 화학 구조에 존재할 때마다, 모든 입체이성질체는 본 발명에 의해 포괄되는 키랄 중심과 회합됨이 의도된다.
용어 "할로", "할로겐" 및 "할라이드"는 본원에서 상호교환적으로 사용되고, 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도를 나타낸다. 할로겐의 특정한 예는 플루오로 및 클로로이다.
용어 "알킬"은 1 내지 12개의 탄소 원자의 1가 선형 또는 분지형 포화된 탄화수소 기를 나타낸다. 특정 실시양태에서, 알킬은 1 내지 7개의 탄소 원자를 갖고, 더욱 특정 실시양태에서 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는다. 알킬의 예는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소-부틸, s-부틸 또는 t-부틸을 포함한다. 알킬에 대한 특정한 예는 메틸, 에틸 및 이소프로필이다.
용어 "할로알킬"은 알킬 기의 하나 이상의 수소 원자가 동일하거나 상이한 할로겐 원자, 특히 플루오로 원자로 대체되는 알킬 기를 나타낸다. 할로알킬의 예는 모노플루오로-, 다이플루오로- 또는 트라이플루오로-메틸, -에틸 또는 -프로필, 예를 들면, 3,3,3-트라이플루오로프로필, 2-플루오로에틸, 2,2,2-트라이플루오로에틸, 플루오로메틸 또는 트라이플루오로메틸 등을 포함한다. 용어 "퍼할로알킬"은 알킬 기의 모든 수소 원자가 동일하거나 상이한 할로겐 원자로 대체되는 알킬 기를 나타낸다. 할로알킬의 특정 예는 트라이플루오로메틸 및 다이플루오로메틸이다.
용어 "알콕시"는, R'가 알킬 기인 화학식 -O-R'의 기를 나타낸다. 알콕시 잔기의 예는 메톡시, 에톡시, 이소프로폭시 및 3급-부톡시를 포함한다. 알콕시의 특정 예는 메톡시 및 에톡시이다.
용어 "바이사이클릭 고리 시스템"은 공통의 단일 또는 이중 결합을 통해(융합된 바이사이클릭 고리 시스템), 일련의 3개 이상의 공통의 원자를 통해(가교된 바이사이클릭 고리 시스템) 또는 공통의 단일 원자를 통해(스피로 바이사이클릭 고리 시스템) 서로 융합되는 2개의 고리를 나타낸다. 바이사이클릭 고리 시스템은 포화되거나, 부분적으로 불포화되거나, 불포화되거나, 방향족일 수 있다. 바이사이클릭 고리 시스템은 N, O 및 S로부터 선택된 헤테로 원자를 포함할 수 있다. 유사하게, 용어 "트라이사이클릭 고리 시스템"은, 바이사이클릭 고리 시스템에 대해 기재된 바와 같이 서로 융합된 3개의 고리를 나타낸다.
용어 "사이클로알킬"은 3 내지 10개의 고리 탄소 원자의 포화된 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 탄화수소 기를 나타낸다. 특정 실시양태에서, 사이클로알킬은 3 내지 8개의 고리 탄소 원자의 1가 포화된 모노사이클릭 탄화수소 기를 나타낸다. 바이사이클릭은 공동으로 하나 이상의 탄소 원자를 갖는 2개의 포화된 카보사이클로 이루어짐을 의미한다. 특정한 사이클로알킬 기는 모노사이클릭이다. 모노사이클릭 사이클로알킬의 예는 사이클로프로필, 사이클로부탄일, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로헵틸이다. 바이사이클릭 사이클로알킬에 대한 예는 바이사이클로[2.2.1]헵탄일 또는 바이사이클로[2.2.2]옥탄일이다. 사이클로알킬의 일 특정한 예는 사이클로프로필이다.
용어 "헤테로사이클로알킬"은 N, O 및 S로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로 원자를 포함하고 나머지 고리 원자가 탄소인, 3 내지 9개 고리 원자의 포화된 또는 부분적으로 불포화된 모노사이클릭, 바이사이클릭 또는 트라이사이클릭 고리 시스템을 나타낸다. 특정 실시양태에서, 헤테로사이클로알킬은 N, O 및 S로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로 원자를 포함하고 나머지 고리 원자가 탄소인, 4 내지 7개 고리 원자의 1가 포화된 모노사이클릭 고리 시스템이다. 모노사이클릭 포화된 헤테로사이클로알킬에 대한 예는 아지리딘일, 옥시란일, 아제티딘일, 옥세탄일, 피롤리딘일, 테트라하이드로푸란일, 테트라하이드로티엔일, 피라졸리딘일, 이미다졸리딘일, 옥사졸리딘일, 이속사졸리딘일, 티아졸리딘일, 피페리딘일, 테트라하이드로피란일, 테트라하이드로티오피란일, 피페라진일, 모폴린일, 티오모폴린일, 1,1-다이옥소-티오모폴린-4-일, 아제판일, 다이아제판일, 호모피페라진일 또는 옥사제판일이다. 바이사이클릭 포화된 헤테로사이클로알킬에 대한 예는 8-아자-바이사이클로[3.2.1]옥틸, 퀴누클리딘일, 8-옥사-3-아자-바이사이클로[3.2.1]옥틸, 9-아자-바이사이클로[3.3.1]논일, 3-옥사-9-아자-바이사이클로[3.3.1]논일 또는 3-티아-9-아자-바이사이클로[3.3.1]논일이다. 부분적으로 불포화된 헤테로사이클로알킬의 예는 다이하이드로푸릴, 이미다졸린일, 다이하이드로-옥사졸릴, 테트라하이드로-피리딘일 또는 다이하이드로피란일이다. 헤테로사이클로알킬의 특정한 예는 1,4-다이아제판일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일, 피페리딘일, 피페라진일 및 피롤리딘일이다. 헤테로사이클로알킬의 더욱 특정한 예는 피페라진일 및 피롤리딘일이다.
용어 "N-헤테로사이클로알킬"은 하나 이상의 질소 고리 원자를 함유하는 헤테로사이클로알킬 라디칼을 나타내고, 분자의 나머지에 대한 헤테로사이클로알킬 라디칼의 부착점은 질소 고리 원자를 통한다. N-헤테로사이클로알킬의 특정한 예는 1,4-다이아제판일, 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일, 피페리딘일, 피페라진일 및 피롤리딘일이다. N-헤테로사이클로알킬의 더욱 특정한 예는 피라진일 및 피롤리딘일이다.
화합물에 관하여 용어 "염기도"는 짝산의 산도 상수의 음성 십진법 로그값에 의해 본원에 표시된다(pKa = -log Ka). 짝산의 pKa가 클수록, 염기는 더 강하다(pKa + pKb = 14). 이 경우, 원자 또는 작용기는, 양성자를 채택하기에 적합한 경우, 및 이의 짝산의 계산된 pKa가 7 이상인 경우, 더욱 특히 이의 짝산의 계산된 pKa가 7.8 이상인 경우, 더욱 특히 이의 짝산의 계산된 pKa가 8 이상인 경우, "염기성"을 나타낸다. pKa 값은 문헌[F. Milletti et al., J. Chem. Inf. Model(2007) 47:2172-2181]에 기재된 바와 같이 가상 실험(in - silico)으로 계산된다.
용어 "알킬렌"은 1 내지 7개의 탄소 원자의 2가 선형 포화된 탄화수소 기 또는 3 내지 7개의 탄소 원자의 2가 분지형 포화된 탄화수소 기를 나타낸다. 알킬렌 기의 예는 메틸렌, 에틸렌, 프로필렌, 2-메틸프로필렌, 부틸렌, 2-에틸부틸렌, 펜틸렌, 헥실렌을 포함한다. 알킬렌에 대한 특정한 예는 에틸렌, 프로필렌 및 부틸렌이다.
용어 "아미노"는 화학식 -NR'R"(여기서, R' 및 R"은 독립적으로 수소, 알킬, 알콕시, 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴이거나, 본원에 기재된 바와 같다)의 기를 나타낸다. 다르게는, R' 및 R"은 이들이 부착된 질소와 함께 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있다. 용어 "1차 아미노"는 R' 및 R" 둘 다가 수소인 기를 나타낸다. 용어 "2차 아미노"는 R'이 수소이고, R"이 수소가 아닌 기인 기를 나타낸다. 용어 "3차 아미노"는 R' 및 R" 둘 다가 수소가 아닌 기를 나타낸다. 특정한 2차 및 3차 아민은 메틸아민, 에틸아민, 프로필아민, 이소프로필아민, 페닐아민, 벤질아민, 다이메틸아민, 다이에틸아민, 다이프로필아민 및 다이이소프로필아민이다.
용어 "보호기"는, 합성 화학에서 이와 통상적으로 관련된 의미에서, 다작용성 화합물 내의 반응성 부위를 선택적으로 차단하여 화학 반응이 또 다른 비보호된 반응성 부위에서 선택적으로 수행될 수 있게 하는 기를 나타낸다. 보호기는 적절한 지점에서 제거될 수 있다. 예시적 보호기는 아미노-보호기, 카복시-보호기 또는 하이드록시-보호기이다..
용어 "아미노-보호기"는 아미노 기의 보호를 의도한 기를 나타내며, 벤질, 벤질옥시카본일(카보벤질옥시, CBZ), Fmoc(9-플루오렌일메틸옥시카본일), p-메톡시벤질옥시카본일, p-니트로벤질옥시카본일, tert-부톡시카본일(BOC), 및 트라이플루오로아세틸을 포함한다. 이들 기의 추가 예는 문헌[T. W. Greene and P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2nd ed., John Wiley & Sons, Inc., New York, NY, 1991, chapter 7]; [E. Haslam, "Protective Groups in Organic Chemistry", J. G. W. McOmie, Ed., Plenum Press, New York, NY, 1973, Chapter 5], 및 [T.W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, New York, NY, 1981]에서 확인된다. 용어 "보호된 아미노 기"는 아미노-보호기에 의해 치환된 아미노 기를 의미한다.
용어 "탈보호" 또는 "탈보호시킴"은, 상기 선택적 반응이 완료된 후 보호기를 제거하는 공정을 의미한다. 탈보호 시약은 산, 염기 또는 수소, 특히 칼륨 또는 나트륨 카보네이트, 알코올성 용액 중 리튬 하이드록사이드, 메탄올 중 아연, 아세트산, 트라이플루오로아세트산, 팔라듐 촉매, 또는 보론 트라이브로마이드를 포함한다.
용어 "활성 약학 성분"(또는 "API")는 특정한 생물학적 활성을 갖는 약학 조성물내 화합물 또는 분자를 나타낸다.
용어 "약학 조성물" 및 "약학 제형"(또는 "제형")은 상호교환적으로 사용되고, 이를 필요로 하는 포유동물, 예를 들면, 인간에게 투여되는 치료 효과량의 활성 약학 성분과 함께 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 혼합물 또는 용액을 나타낸다.
용어 "약학적으로 허용가능한"은 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로 또는 달리 바람직한 약학 조성물을 제조하는데 유용하고, 수의학 및 인간 약학 용도에 허용되는 물질의 속성을 나타낸다.
용어 "약학적으로 허용가능한 부형제", "약학적으로 허용가능한 담체" 및 "치료 불활성인 부형제"는 상호교환적으로 사용될 수 있고, 치료 활성이 없고 투여된 대상체에게 무독성인 약학 조성물에서 임의의 약학적으로 허용가능한 성분, 예컨대 약학 생성물을 제형화하는데 사용된 분해제, 결합제, 충전제, 용매, 완충제, 긴장제, 안정화제, 산화방지제, 계면활성제, 담체, 희석제 또는 활택제를 나타낸다.
용어 "개인" 또는 "대상체"는 포유동물을 나타낸다. 포유동물은, 비제한적으로, 가축(예를 들면, 소, 양, 고양이, 개 및 말), 영장류(예를 들면, 인간 및 비인간 영장류, 예컨대, 원숭이), 토끼 및 설치류(예를 들면, 마우스 및 래트)를 포함한다. 특정 실시양태에서, 개인 또는 대상체는 인간이다.
용어 "치료 효과량"은 대상체에 투여될 때, (i) 특정한 질병, 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하거나, (ii) 특정한 질병, 질환 또는 장애의 하나 이상의 증상을 약화시키거나 완화하거나 제거하거나, (iii) 본원에 기재된 특정한 질병, 질환 또는 장애의 하나 이상의 증상의 개시를 억제하거나 지연시키는, 본 발명의 화합물 또는 분자의 양을 나타낸다. 치료 효과량은 화합물, 치료되는 질병 상태, 치료된 질병의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적인 건강, 투여 경로 및 형태, 의사 또는 수의사의 판단, 및 다른 인자에 따라 달라진다.
용어 "치료하는" 또는 질병 상태의 "치료"는 질병 상태를 억제하는, 즉, 질병 상태 또는 이의 임상 증상의 발달을 저지하거나, 질병 상태를 완화하는, 즉, 질병 상태 또는 이의 임상 증상의 일시적 또는 영구적 회귀를 야기함을 포함한다.
용어 "SMN-결핍-관련 증상"은 척수성 근위축증(SMA), 신경발생적 선천성 다발성 관절구축증(AMC), 근위축성 측삭경화증(ALS)을 포함한다. 용어 "척수성 근위축증"(또는 SMA)은 2개 염색체에서 SMN1 유전자의 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 SMN1 유전자 기능의 손실을 야기하는 질병에 관한 것이다.
SMA의 증상은 근육 약화, 불량한 근육 긴장, 약한 울음소리, 약한 기침, 늘어짐 또는 주저앉는 경향, 빨기 또는 뱉기의 어려움, 호흡 곤란, 폐 또는 인후에 분비물 축적, 땀에 젖은 손으로 주먹 쥐기, 혀의 깜빡거림/떨림, 종종, 심지어 누워 있을 때 한쪽으로 기울어지는 머리, 팔보다 더 약해지는 경향이 있는 다리, 종종 "개구리 다리" 자세로 추정되는 다리, 수유 곤란, 기도 감염에 대한 민감성 증가, 장/방광 약화, 정상보다 적은 체중, 지지 없이 앉기 불가능, 걷기 실패, 기어가기 실패, 및 긴장저하, 무반사, 및 앞쪽 소마 세포의 손실과 관련된 다발성 선천적 경축(관절구축)을 포함한다.
용어 "척수성 근위축증(SMA)을 치료하는" 또는 "척수성 근위축증(SMA)의 치료"는 하기 효과 중 하나 이상을 포함한다: (i) SMA 중증도의 감소 또는 개선; (ii) SMA 개시의 지연; (iii) SMA 진행의 억제; (iv) 대상체 입원 감소; (v) 대상체의 입원 기간 감소; (vi) 대상체 생존 증가; (vii) 대상체 삶의 질 개선; (viii) SMA와 관련된 증상 수 감소; (ix) SMA와 관련된 하나 이상의 증상의 중증도 감소 또는 이의 개선; (x) SMA와 관련된 증상의 지속 감소; (xi) SMA와 관련된 증상의 재발 억제; (xii) SMA의 증상 발달 또는 이의 개시 억제; 및/또는 (xiii) SMA와 관련된 증상 진행 억제. 더욱 특히, 용어 "SMA를 치료하는"은 하기 유리한 효과 중 하나 이상을 나타낸다: (i) 근육 강도 손실의 감소; (ii) 근육 강도 증가; (iii) 근위축 감소; (iv) 운동 기능 손실의 감소; (v) 운동 뉴런 증가; (vii) 운동 뉴런 손실의 감소; (viii) 퇴행으로부터 SMN 결핍 운동 뉴런의 보호; (ix) 운동 기능 증가; (x) 폐 기능 증가; 및/또는 (xi) 폐 기능 손실의 감소. 더욱 상세하게, 용어 "SMA를 치료하는"은 도움받지 않고 앉기 위한 인간 영아 또는 인간 유아를 위한, 또는 도움받지 않고 서거나, 도움받지 걷거나, 도움받지 않고 달리거나, 도움받지 않고 호흡하거나, 도움받지 않고 취침 동안 돌거나, 도움받지 않고 삼키기 위한 인간 영아, 인간 유아, 인간 어린이 또는 인간 성인을 위한, 기능적 능력 또는 이의 유지를 나타낸다.
질병 상태의 "예방" 또는 이를 "예방하기"라는 용어는, 질병 상태에 노출되거나 이에 취약해질 수 있는 대상에서 질병 상태의 임상적 증상이 발생되지 않고, 질병 상태의 증상을 아직 경험하지 않거나 나타내지 않는 것을 의미한다.
용어 "전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도"(또는 "EC1 .5x 꼬마유전자")는 비히클-처리된 세포의 양과 비교하여 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 양을 1.5배 이상 수준으로 증가시키는데 효과적인 시험 화합물의 농도로서 정의된다.
용어 "SMN 단백질 발현을 위한 EC1 .5x 농도"(또는 "EC1 .5x SMN 단백질")는 비히클 대조군으로부터 생성된 양과 비교하여 SMA 환자 섬유아 세포에서 SMN 단백질의 양을 1.5배 생성하는데 효과적인 시험 화합물의 농도로서 정의된다.
더욱 상세히, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure pct00002
상기 식에서,
X1은 CR5 또는 N이고;
X2는 CR5 또는 N이되, 이때 X1 및 X2 둘다가 N은 아니고;
R1은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R2는 수소, 시아노, C1 -7-알킬, C1 -7-할로알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
R3은 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
R4는 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
R5는 독립적으로 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시로부터 선택되고;
A는 N-헤테로사이클로알킬 또는 NR7R8이되, 이때 N-헤테로사이클로알킬은 1 또는 2개의 질소 고리 원자를 포함하며, 임의적으로는 R6로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환되고;
R6는 독립적으로 수소, C1 -7-알킬, 아미노, 아미노-C1 -7-알킬, C3 -8-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 C1 -7-알콕시-헤테로사이클로알킬로부터 선택되거나, 또는 2개의 R6가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하고;
R7은 1개의 질소 고리 원자를 포함하는 헤테로사이클로알킬이되, 이때 헤테로사이클로알킬은 임의적으로 R6로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환되고;
R8은 수소, C1 -7-알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
단, A가 단지 1개의 질소 고리 원자를 포함하는 N-헤테로사이클로알킬인 경우, 하나 이상의 R6 치환기는 아미노 또는 아미노-C1 -7-알킬이다.
본 발명의 특정 실시양태는 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
또한, 본원에 개시된 특정 X1, X2, A, R1, R2, R3 또는 R4에 관한 모든 실시양태는 본원에 개시된 또 다른 X1, X2, A, R1, R2, R3 또는 R4 에 관한 임의의 다른 실시양태와 조합될 수도 있음을 이해해야 한다.
본 발명의 특정 실시양태는 하기와 같이 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
X1는 CH 또는 N이고;
X2는 CR5이고;
R1은 C1 -7-알킬이고;
R2는 수소, C1 -7-알킬, C1 -7-할로알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
R3은 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
R4는 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
R5는 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
A는 N-헤테로사이클로알킬이고, 이때 N-헤테로사이클로알킬은 1 또는 2개의 질소 고리 원자를 포함하며, 임의적으로는 R6로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환되고;
R6는 독립적으로 수소, C1 -7-알킬, 아미노, 아미노-C1 -7-알킬, C3 -8-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 C1 -7-알콕시-헤테로사이클로알킬로부터 선택되거나, 또는 2개의 R6가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하고;
단, A가 단지 1개의 질소 고리 원자를 포함하는 N-헤테로사이클로알킬인 경우, 하나 이상의 R6 치환기는 아미노 또는 아미노-C1 -7-알킬이다.
본 발명의 특정 실시양태는, X1이 N이되, 단 X1 및 X2 둘다가 N은 아닌, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, X1이 CR5인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, X1이 CH인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, X2가 N이되, 단 X1 및 X2 둘다가 N은 아닌 단 X1 및 X2 둘다가 N은 아닌, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, X2가 CR5인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, X2가 CH인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R1이 C1 -7-알킬, 특히 메틸인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R2가 수소, C1 -7-알킬, C1 -7-할로알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬; 특히 수소 또는 C1 -7-할로알킬; 가장 특히는 C1 -7-할로알킬인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 더욱 특정한 실시양태는, R2가 수소, 메틸, 에틸, 다이플루오로메틸, 트라이플루오로메틸 또는 사이클로프로필; 특히 수소, 다이플루오로메틸 또는 트라이플루오로메틸; 가장 특히는 트라이플루오로메틸인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R3가 수소, 할로 또는 C1 -7-알콕시, 특히 할로인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 더욱 특정한 실시양태는, R3이 수소, 플루오로, 메톡시 또는 에톡시, 특히 플루오로인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R4가 수소 또는 할로, 특히 수소인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 더욱 특정한 실시양태는, R4가 수소 또는 플루오로, 특히 수소인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R5가 수소, 할로 또는 C1 -7-알콕시, 특히 수소인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 더욱 특정한 실시양태는, R5가 수소, 플루오로, 클로로 또는 메톡시, 특히 수소인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R6가 독립적으로 C1 -7-알킬, 헤테로사이클로알킬 및 C1 -7-알콕시-헤테로사이클로알킬로부터 선택되거나, 또는 2개의 R6가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R6가 독립적으로 메틸, 에틸, 이소프로필, 메톡시-아제티딘일 및 피롤리딘일로부터 선택되거나, 또는 2개의 R6가 함께 에틸렌 또는 프로필렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R7이 R6로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 피페라진일인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R8이 수소 또는 C1 -7-알킬, 특히 수소 또는 메틸인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 하기 화학식 I'의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
[화학식 I']
Figure pct00003
상기 식에서, A, R2, R3, R4 및 R5는 본원에 기재된 바와 같다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가 1 또는 2개의 질소 원자를 포함하며, 임의적으로 R6로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환된 포화 모노- 또는 바이사이클릭 N-헤테로사이클로알킬인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, 본원에서 정의된 A에서의 N-헤테로사이클로알킬 또는 R7에서의 헤테로사이클로알킬이 R6로부터 선택된 1 또는 2개의 치환기로 치환된, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, 본원에서 정의된 A에서의 N-헤테로사이클로알킬이, 하나의 고리 질소 원자가 염기성인 것을 추가의 특징으로 갖는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가
Figure pct00004
또는
Figure pct00005
인, 화학식 I의 화합물에 관한 것으로서, 상기 식에서,
Y는 N 또는 CH이고;
R8은 수소, C1 -7-알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
R9은 수소, C1 -7-알킬, 또는 -(CH2)m-NR14R15이고;
R10은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R11은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R12는 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R13은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
R14 및 R15가 독립적으로 수소, C1 -7-알킬 및 C3 -8-사이클로알킬로부터 선택되고;
n이 0, 1 또는 2이고;
m이 0, 1, 2 또는 3이고;
또는 R9 및 R10이 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
또는 R9 및 R12가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
또는 R10 및 R11이 함께 C2 -7-알킬렌을 형성하거나;
또는 R10 및 R12가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
또는 R10 및 R14가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
또는 R12 및 R13이 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
또는 R12 및 R14가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
또는 R14 및 R15가 함께, 임의적으로 알콕시로 치환된 C2 -7-알킬렌을 형성하고;
단, Y가 CH인 경우, R9은 -(CH2)m-NR14R15이고;
단, Y가 N이고 R9이 -(CH2)m-NR14R15인 경우, m은 2 또는 3이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가
Figure pct00006
이고, 이때 Y, n, R9, R10, R11, R12 및 R13이 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
R9, R10, R11, R12 및 R13 중 하나 이상이 수소가 아닌 경우에 뇌 침투가 개선됨이 밝혀졌다. 본 발명의 특정 실시양태에서, R9, R10, R11, R12 및 R13 중 하나 이상은 수소 이외의 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, Y가 N인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, Y가 CH이고 R9이 -(CH2)m-NR14R15인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, Y가 CH이고, R9이 -(CH2)m-NR14R15이고, m이 0인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, n이 1인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R9이 수소, 피롤리딘일, 또는 메톡시-아제티딘일, 더욱 바람직하게는 수소인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R10이 수소, 메틸, 에틸 또는 이소프로필, 더욱 바람직하게는 메틸인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R11이 수소 또는 메틸, 더욱 바람직하게는 수소인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R12가 수소 또는 메틸, 더욱 바람직하게는 수소인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R13이 수소인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R9 및 R10이 함께 프로필렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R10 및 R11이 에틸렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R14 및 R15가 함께 프로필렌 또는 부틸렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R14 및 R15가 함께 프로필렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, R14 및 R15가 함께 부틸렌을 형성하는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가 하기 군으로부터 선택되는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00007
상기에서,
R8, R9, R10, R11, R12, 및 R13은 본원에 정의된 바와 같고,
R16은 수소 또는 C1 -7-알킬이고,
R17은 C1 -7-알콕시이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가 하기 군으로부터 선택되는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00008
상기에서,
R8, R9, R10, R11, R12, 및 R13은 본원에 정의된 바와 같고,
R17은 C1 -7-알콕시이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가, 각각이 본원에서 정의된 R6로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 피페라진일, 다이아제판일, 피롤리딘일 및 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일의 군으로부터 선택되는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가, 각각이 본원에서 정의된 R6로부터 선택된 1 또는 2개의 치환기로 임의적으로 치환된 피페라진-1-일, 1,4-다이아제판-1-일, 피롤리딘-1-일 및 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일의 군으로부터 선택되는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가 NR7R8이며, 이때 R7 및 R8이 본원에 기재된 바와 같은, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가
Figure pct00009
이며, 이때 R8, R9, R10, R11, R12 및 R13이 본원에 기재된 바와 같은, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가
Figure pct00010
이며, 이때 R8이 수소 또는 메틸인, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는, A가 하기의 군으로부터 선택되는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00011
.
본 발명의 특정 실시양태는, A가 하기의 군으로부터 선택되는, 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00012
.
특정한 본 발명의 화학식 I의 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-(1,4-다이아제판-1-일)-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-에톡시벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2,6-다이플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-에톡시-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(8-에틸-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2,6-다이플루오로벤즈아마이드;
N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-플루오로벤즈아마이드;
N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-[(3S)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
N-(8-에틸-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-클로로-6-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
2,5-다이플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-메틸피페라진-1-일)벤즈아마이드;
2,3-다이플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-메틸피페라진-1-일)벤즈아마이드;
4-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로벤즈아마이드;
N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3S)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]-N-[2-메틸-8-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피라진-6-일]벤즈아마이드;
N-[8-(다이플루오로메틸)-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일]-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-프로판-2-일피페라진-1-일)벤즈아마이드;
6-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)피리딘-3-카복스아마이드;
2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-6-피페라진-1-일피리딘-3-카복스아마이드;
N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-(4-피롤리딘-1-일피페리딘-1-일)벤즈아마이드; 및
N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-에톡시-4-[4-(3-메톡시아제티딘-1-일)피페리딘-1-일]벤즈아마이드.
특정한 본 발명의 화학식 I의 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
4-[(3S)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]-N-[2-메틸-8-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피라진-6-일]벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-(1,4-다이아제판-1-일)-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
2-클로로-6-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
2,5-다이플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-메틸피페라진-1-일)벤즈아마이드;
2,3-다이플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-메틸피페라진-1-일)벤즈아마이드;
4-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
N-[8-(다이플루오로메틸)-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일]-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-프로판-2-일피페라진-1-일)벤즈아마이드;
6-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)피리딘-3-카복스아마이드; 및
2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-6-피페라진-1-일피리딘-3-카복스아마이드.
특정한 본 발명의 화학식 I의 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다:
4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
4-[(3S)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드; 및
2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]-N-[2-메틸-8-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피라진-6-일]벤즈아마이드.
화학식 VIII의 화합물은 화학식 I의 화합물의 제조에서의 중간체로서 적합하다.
본 발명의 또 다른 실시양태는 화학식 VIII의 화합물 또는 이의 염에 관한 것이다:
[화학식 VIII]
Figure pct00013
상기 식에서,
X1, X2, R1, R2, R3 및 R4는 본원에 기재된 바와 같고;
Y는 할로겐 또는 트라이플루오로메탄설폰에이트이다.
본 발명의 특정 실시양태는, Y가 플루오로, 클로로, 브로모, 요오도 또는 트라이플루오로메탄설폰에이트, 특히 브로모인, 화학식 VIII의 화합물에 관한 것이다.
특정한 본 발명의 화학식 VIII의 화합물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 것들이다:
4-브로모-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
4-브로모-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드; 및
4-브로모-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드.
제조 방법
상기 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 당업계에 공지된 하기의 표준 방법에 따라 제조될 수 있다.
반응식 1에 예시된 바와 같이, 화학식 III의 화합물은, 촉매(예컨대 트리스(다이벤질리덴-아세톤)다이팔라듐(0)(Pd2(dba)3)) 및 리간드(예컨대, 2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸) 및 염기(예컨대, 세슘 카보네이트) 및 용매(예컨대, 톨루엔)의 존재 하에 화학식 II의 화합물과 화학식 A-H의 2급 아민 사이의 부흐발트-하르트비히(Buchwald-Hartwig) 아민화 반응에 의해 수득될 수 있으며, 이때 A, X1, X2, R3 및 R4는 본원에 기재된 바와 같고, R18은 C1 -7-알킬이다. 수성 염기(예컨대, LiOH, NaOH 등)의 존재 하에 에스터를 가수분해하여 산 유도체(IV)를 형성한 후, 1급 아마이드로 전환시켜(예컨대, CDI 및 수성 암모늄 하이드록사이드 사용) 화학식 V의 화합물을 수득한다. 최종적으로, 촉매(예컨대, 트리스(다이벤질리덴-아세톤)다이팔라듐(0)(Pd2(dba)3)), 리간드(예컨대 (다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐), 염기(예컨대 세슘 카보네이트) 및 용매(예컨대, 다이옥산)의 존재 하에 승온(예컨대 100℃)에서 화학식 V의 화합물과 화학식 VI의 화합물의 부흐발트-하르트비히 아마이드화 반응에 의해 R1 및 R2가 본원에 기재된 바와 같은 최종 화학식 I의 화합물을 수득한다.
화학식 A-H의 N-헤테로사이클로알킬 A가 추가의 1급 또는 2급 아미노-기를 포함하는 경우, 이런 추가의 1급 또는 2급 아미노-기는 적합한 아미노-보호기(예컨대, Boc 또는 CBZ)를 사용하여 보호될 수 있고, 화학식 V의 화합물과 화학식 VI의 화합물의 부흐발트-하르트비히 아마이드화 후에, 화학식 I의 화합물의 최종 생성물을 수득하기 위해 추가의 탈보호 단계(예컨대, 다이옥산 중 HCl 사용함)가 요구된다.
[반응식 1]
Figure pct00014
.
하나의 실시양태에서, 본 발명은, 촉매(예컨대, 트리스(다이벤질리덴-아세톤)다이팔라듐(0)(Pd2(dba)3)), 리간드(예컨대, (다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐), 염기(예컨대, 세슘 카보네이트) 및 용매(예컨대, 다이옥산)의 존재 하에 승온(예컨대 100℃)에서 하기 화학식 V의 화합물과 하기 화학식 VI의 화합물의 반응을 포함하는, 상기 정의된 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조 방법에 관한 것이다:
Figure pct00015
상기 식에서,
A, X1, X2, R1, R2, R3 및 R4는 본원에 기재된 바와 같다.
다르게는, 화학식 I의 화합물은, 촉매(예컨대, 구리 (I) 요오다이드), 리간드(예컨대, (1,10-펜안트롤린)), 염기(예컨대 K3PO4) 및 용매(예컨대, 다이옥산)의 존재 하에 승온(예컨대, 120℃)에서 하기 화학식 (VII)의 화합물과 하기 화학식 (VI)의 유도체의 커플링 반응에 의해 하기 반응식 2에 예시된 바와 같이 제조될 수 있으며, 이때 X1, X2, Y, R1, R2 , R3 및 R4는 본원에 기재된 바와 같다.
최종적으로, a) 용매(예컨대, 다이메틸 설폭사이드(DMSO), N-메틸피롤리돈(NMP), 또는 다이메틸포름아마이드(DMF)) 중에서 80℃ 내지 200℃의 온도에서 가열함에 의한 방향족 친핵성 치환 반응(특히, Y가 플루오로이거나 Y가 클로로이고 X1이 질소인 경우); 또는
b) 촉매(예컨대, 트리스(다이벤질리덴-아세톤)다이팔라듐(0)(Pd2(dba)3)), 리간드(예컨대, 2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸), 및 염기(예컨대, 세슘 카보네이트)의 존재 하에 용매(예컨대, 톨루엔) 중에서 20℃ 내지 100℃의 온도에서 가열함에 의한 부흐발트-하르트비히 아민화 반응
으로 하기 화학식 VIII의 화합물을 하기 화합물 M-A와 반응시켜 화학식 I의 화합물을 수득한다.
[반응식 2]
Figure pct00016
상기 식에서,
A는 본원에서 정의된 바와 같고,
M은 수소, 나트륨 또는 칼륨, 특히 수소이며, M은 A의 질소 원자를 통해 A에 연결된다.
하나의 실시양태에서, 본 발명은,
a) 용매(예컨대, 다이메틸 설폭사이드(DMSO), N-메틸피롤리돈(NMP), 또는 다이메틸포름아마이드(DMF))에서 80℃ 내지 200℃의 온도에서 가열함에 의한 방향족 친핵성 치환 반응(특히, Y가 플루오로이거나 Y가 클로로이고 X1이 질소인 경우); 또는
b) 촉매(예컨대, 트리스(다이벤질리덴-아세톤)다이팔라듐(0)(Pd2(dba)3)), 리간드(예컨대, 2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸), 및 염기(예컨대, 세슘 카보네이트)의 존재 하에 용매(예컨대, 톨루엔)에서 20℃ 내지 100℃의 온도에서 가열함에 의한 부흐발트-하르트비히 아민화 반응
으로 화학식 VIII의 화합물을 화합물 M-A과 반응시킴을 포함하는, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조 방법에 관한 것으로서, 이때 A, X1, X2, Y, R1, R2, R3 및 R4는 본원에서 정의된 바와 같고, M은 수소, 나트륨 또는 칼륨, 특히 수소이며, M은 A의 질소 원자를 통해 A에 연결된다.
Figure pct00017
특히, 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 본원의 실시예에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있다.
약학 조성물
또 다른 실시양태는 본 발명의 화합물 및 치료 불활성인 담체, 희석제 또는 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물 또는 약제, 및 상기 조성물 및 약제의 제조를 위한 본 발명의 화합물의 사용 방법을 제공한다.
조성물은 우수한 의료 실시와 일치하는 방식으로 제형화되고 복용되고 투여된다. 이와 관련한 고려 요건은, 치료되고 있는 특정한 질환, 치료되고 있는 특정한 포유동물, 개인 환자의 임상 상태, 질환의 원인, 제제의 전달 부위, 투여 방법, 투여 일정 및 의사에게 공지된 다른 인자를 포함한다.
본 발명의 화합물은, 경구, 국소(구강 및 설하 포함), 직장, 질, 경피 패치, 비경구, 피하, 복강내, 폐내, 피내, 척추강내, 경막외 및 비강내를 비롯한 임의의 적합한 방식으로 투여될 수 있고, 국소 치료가 바람직한 경우, 병변 내 투여될 수 있다. 비경구 투입은 근육내, 정맥내, 동맥내, 복강내 또는 피하 투여를 포함한다.
본 발명의 화합물은 임의의 편리한 투여 형태, 예를 들면, 정제, 분말, 캡슐, 용액, 분산액, 현탁액, 시럽, 스프레이, 좌제, 젤, 에멀젼, 패치 등으로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 약학 제조에서 통상적인 성분, 예를 들면, 희석제, 담체, pH 개질제, 보존제, 용해제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미료, 착색제, 향미료, 삼투압을 변화시키는 염, 완충제, 차폐제, 산화방지제 및 추가 활성제를 포함할 수 있다. 상기 조성물은 또한 여전히 다른 치료 가치있는 물질을 포함한다.
전형적인 제형은, 본 발명의 화합물 및 담체 또는 부형제를 혼합하여 제조된다. 적합한 담체 및 부형제는 당업자에게 널리 공지되어 있고, 예를 들면, 문헌[Ansel H.C. et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (2004) Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia]; [Gennaro A.R. et al., Remington: The Science and Practice of Pharmacy (2000) Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia]; 및 [Rowe R.C, Handbook of Pharmaceutical Epicient (2005) Pharmaceutical Press, Chicago]에 상세히 기재되어 있다. 또한, 제형은 하나 이상의 완충제, 안정화제, 계면활성제, 습윤제, 활택제, 유화제, 현탁제, 보존제, 산화방지제, 불투명화제, 활주제, 가공보조제, 착색제, 감미료, 방향제, 향미제, 희석제 및 약물(즉, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물)의 우아한 제시를 제공하거나 약학 생성물(즉, 약제)의 제조에 도움을 주기 위한 다른 공지된 첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명의 화합물이 투여될 수 있는 투여량은 광범위한 제한 내에서 달라질 수 있고, 물론 각각의 특정한 경우에 개인 요건에 맞출 것이다. 일반적으로, 경구 투여의 경우에, 필요한 경우 상한치가 초과될 수 있을지라도, 1 인당 약 0.01 내지 100 mg의 화학식 I의 화합물의 일일 투여량이 적합할 수 있다.
적합한 경구 투여 형태의 예는 약 30 내지 90 mg의 무수 락토스, 약 5 내지 40 mg의 나트륨 크로스카멜로스, 약 5 내지 30 mg의 폴리비닐피롤리돈(PVP) K30 및 약 1 내지 10 mg의 마그네슘 스테아레이트로 제형화된 본 발명의 화합물을 약 100 mg 내지 500 mg 포함하는 정제이다. 분말화된 성분을 먼저 함께 혼합한 후 PVP의 용액과 혼합한다. 생성된 조성물을 건조하고 과립화하고 마그네슘 스테아레이트와 혼합하고 통상의 기기를 사용하여 정제로 압축할 수 있다.
에어로졸 제형의 예는, 적합한 완충 용액, 예를 들면 포스페이트 완충액 중에 예를 들면 10 내지 100 mg의 본 발명의 화합물을 용해하고, 바람직한 경우 긴장제, 예를 들면 염, 예컨대 나트륨 클로라이드를 첨가하여 제조될 수 있다. 상기 용액은 예를 들면, 0.2 μm 필터를 사용하여 여과하여 불순물 및 오염물이 제거될 수 있다.
용도
상기 기재된 바와 같이, 화학식 I의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 가치있는 약리 특성을 갖고, SMN1 및/또는 SMN2 유전자로부터 전사된 mRNA 내에 SMN1 및/또는 SMN2의 엑손 7의 포함을 강화함으로써, 이를 필요로 하는 인간 대상체에서 SMN 단백질의 발현을 증가시킴이 밝혀졌다.
본 발명의 화합물은, 단독으로 또는 다른 약물과 조합하여, SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위해 사용될 수 있다. 이러한 질병은 비제한적으로 척수성 근위축증(SMA)을 포함한다.
본 발명의 특정 실시양태는 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 상기 정의된 바와 같은 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 SMA의 치료 또는 예방을 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 상기 정의된 바와 같은 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 치료 활성 물질로서 사용하기 위한, 특히 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 상기 정의된 바와 같은 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방에 사용하기 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 상기 정의된 바와 같은 이의 약학적으로 허용된 염에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 대상체에게 투여함을 포함하는, SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한 방법에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 특정 실시양태는 SMN1 유전자에서 비활성화 돌연변이 또는 결실에 의해 야기되고/되거나 SMN1 유전자 기능의 손실 또는 결실과 관련된 질병의 치료 또는 예방을 위한, 특히 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조를 위한 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도에 관한 것이다. 상기 약제는 상기 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
실시예
본 발명은 하기 실시예를 참조하여 더욱 완전히 이해될 것이다. 그러나 실시예는 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
사용된 약어
ACN: 아세토니트릴; Boc: tert-부틸옥시카본일; B2(pin)2: 비스(피나콜레이토)다이보론; CBZ: 벤질옥시카본일; CDI: 1,1'-카본일다이이미다졸; CH2Cl2: 다이클로로메탄; dba: 다이벤질리덴아세톤; DIPEA: 다이이소프로필 에틸아민; DMA: 다이메틸 아세트아마이드; DMF: 다이메틸포름아마이드; DMSO: 다이메틸 설폭사이드; NMP: N-메틸피롤리돈; Pd2(dba)3: 트리스(다이벤질리덴-아세톤)다이팔라듐(0); Pd(dppf)Cl2: (1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센)팔라듐(II) 다이클로라이드; PPTS: 피리디늄 p-톨루엔설폰에이트; TEA: 트라이에틸아민; RT: 실온; 잔트포스(Xantphos): 다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐.
중간체 A.1
tert -부틸 (2R)-4-(3- 플루오로 -4- 메톡시카본일페닐 )-2- 메틸피페라진 -1- 카복 실레이트의 제조
Figure pct00018
톨루엔(11 ml) 중 메틸 4-브로모-2-플루오로벤조에이트(1.10g, 4.7 mmol), (R)-tert-부틸 2-메틸피페라진-1-카복실레이트(1.04g, 5.2 mmol), 세슘 카보네이트(2.31g, 7.1 mmol)의 혼합물에 아르곤 하에 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(0.13g, 0.1 mmol) 및 (rac)-2,2'-비스(다이페닐포스피노)-1,1'-바이나프탈렌(0.27 g, 0.4 mmol)을 첨가하고, 그 혼합물을 밀봉 튜브에서 20 시간 동안 100℃로 가열하였다. 그 후 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: Hept 0:1-4:6)로 정제하여 표제 화합물을 황색 고체(0.99g, 60%)로서 수득하였다. MS (m/e): 352.0 (M+H+)
중간체 A.1과 유사하게, 하기 표의 중간체 A.2 내지 A.23을 상응하는 아민 및 아릴 브로마이드로부터 제조하였다.
Figure pct00019
Figure pct00020
Figure pct00021
Figure pct00022
Figure pct00023
중간체 A.24
tert -부틸 4-(2,5- 다이플루오로 -4- 메톡시카본일페닐 )-2- 메틸피페라진 -1- 카복실레이트의 제조
Figure pct00024
단계 A:
DMA(5 ml) 중 메틸 2,4,5-트라이플루오로벤조에이트(1.393 g, 7.33 mmol, 당량: 1.00) 및 2-메틸피페라진(2.23 g, 21.8 mmol, 당량: 2.98)의 교반된 용액을 100℃에서 마이크로파 반응기에서 15 분 동안 가열하였다. 용매를 진공 하에 증발시키고, 잔류물을 CH2Cl2에 용해시키고, H2O로 세척하였다. 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다.
단계 B:
조질 혼합물을 CH2Cl2(10 mL)에 용해시키고, 트라이에틸아민(1.23 mL, 8.79 mmol, 당량: 1.2)을 첨가하였다. 그 용액을 0℃로 냉각시키고, CH2Cl2(3.75 ml) 중 다이-tert-부틸 다이카보네이트(2.41 g, 10.9 mmol, 당량: 1.49)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 층들을 분리시켰다. 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 헵탄/EtOAc)로 정제하여 표제 화합물을 백색 고체(1.77g, 65%)로서 수득하였다. MS (m/e): 371.1 (M+H+).
중간체 A.25
tert -부틸 4-(4- 에톡시카본일 -2,3- 다이플루오로페닐 )-2- 메틸피페라진 -1- 카복실레이트의 제조
Figure pct00025
단계 A:
DMA(5 ml) 중 에틸 2,3,4-트라이플루오로벤조에이트(1.51 g, 7.4 mmol, 당량: 1.00) 및 2-메틸피페라진(2.27 g, 22.2 mmol, 당량: 3)의 용액을 100℃에서 마이크로파 반응기에서 15 분 동안 가열하였다. 용매를 진공에서 증발시켰다. EtOAc 및 NaHCO3 수용액을 잔류물에 첨가하였다. 층들을 분리시키고, 수성 층을 CH2Cl2로 2회 역추출하였다. 합친 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공에서 농축시켜 2.15 g의 황색 오일을 수득하였다.
단계 B:
이 조질 오일을 CH2Cl2(10 ml)에 용해시키고, 트라이에틸아민(1.24 ml, 8.88 mmol, 당량: 1.2)을 첨가하였다. 그 용액을 0℃로 냉각시키고, CH2Cl2(3.75 ml) 중 다이-tert-부틸 다이카보네이트(2.45 g, 11.1 mmol, 당량: 1.5)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반하였다. 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 층들을 분리시켰다. 수성 층을 CH2Cl2로 2회 역추출하였다. 합친 유기 층들을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공에서 농축시켰다. 생성물을 플래시 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 헵탄/EtOAc)로 정제하고, 2종의 구조 이성질체를 분리시키고, 용리된 제 2 화합물이 연황색 오일(1.54 g, 54%)로서 수득된 목적하는 표제 유도체이었다. MS (m/e): 385.3 (M+H+).
중간체 B.1
tert -부틸 (2R)-4-(4- 카바모일 -3- 플루오로페닐 )-2- 메틸피페라진 -1- 카복실레이트의 제조
Figure pct00026
MeOH(6 ml) 중 tert-부틸 (2R)-4-(3-플루오로-4-메톡시카본일페닐)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(0.95g, 2.7 mmol, 중간체 A.1)의 용액에 나트륨 하이드록사이드(1.4 ml, 물 중 6M, 6.1 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 7 시간 동안 55℃로 가열하였다. 그 후 반응 혼합물을 IR120+ 수지의 첨가에 의해 산성화시키고, 여과시키고, 농축시켜 조질 (R)-4-(4-(tert-부톡시카본일)-3-메틸피페라진-1-일)-2-플루오로벤조산(0.82 g, 90%)을 백색 분말로서 수득하였다. 그 후 조질 산을 DMF(6 ml)에 재용해시키고, 1,1'-카본일다이이미다졸(0.51g, 3.2 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, 암모늄 하이드록사이드(1.3 ml, 25% 수성, 8.4 mmol)를 첨가하였다. 0.5 시간 후, 반응 혼합물을 물에 붓고, EtOAc로 추출하고, 합친 유기 층들을 염수로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켜 표제 화합물을 백색 고체(0.74g, 90%)로서 수득하였다. MS (m/e): 282.1 (M-tBu+H+).
중간체 B.1과 유사하게, 하기 표의 중간체 B.2 내지 B.17을 상응하는 에스터로부터 제조하였다.
Figure pct00027
Figure pct00028
Figure pct00029
중간체 B.18
4-[(8 aR )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2- 플루오로벤즈아마이드의 제조
Figure pct00030
MeOH(2 ml) 중 (R)-메틸 2-플루오로-4-(헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)벤조에이트(0.12g, 0.4 mmol, 중간체 A.5)의 용액에 나트륨 하이드록사이드(0.1 ml, 물 중 6M, 0.6 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 4 시간 동안55℃로 가열하였다. 그 후 반응 혼합물을 농축시켜 조질 (나트륨 (R)-2-플루오로-4-(헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진-2(1H)-일)벤조에이트를 수득한 후, DMF(2 ml)에 재용해시키고, N,N,N',N'-테트라메틸-O-(벤조트라이아졸-1-일)우로늄 테트라플루오로보레이트(0.17g, 0.5 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, 암모늄 하이드록사이드(0.9 ml, 25% 수성, 22.5 mmol)를 첨가하였다. 0.5 시간 후, 반응 혼합물을 물에 붓고, EtOAc로 추출하고, 합친 유기 층들을 염수로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축하였다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM: MeOH 95:5-9:1)로 정제하여 표제 화합물을 백색 분말(0.2g, 정량)로서 수득하였다. MS (m/e): 264.2 (M+H+)
중간체 B.18과 유사하게, 하기 표의 중간체 B.19 내지 B.24를 상응하는 에스터로부터 제조하였다.
Figure pct00031
Figure pct00032
중간체 B.25
tert -부틸 4-(4- 카바모일 -3- 클로로 -5- 플루오로페닐 )피페라진-1- 카복실레이트의 제조
Figure pct00033
단계 A:
다이옥산(15 ml) 중 4-브로모-2-클로로-6-플루오로벤조산(1.00 g, 3.95 mmol, 당량: 1.00), tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트(882 mg, 4.73 mmol, 당량: 1.2), BINAP(491 mg, 0.789 mmol, 당량: 0.2) 및 세슘 카보네이트(3.86 g, 11.8 mmol, 당량: 3), Pd(OAc)2(177 mg, 0.789 mmol, 당량: 0.2)의 용액을 100℃에서 가열하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc에 취하고, 시트르산 수용액으로 세척하였다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2 /MeOH 95/5 내지 8/2)로 정제하여 0.308 g(22%)의 4-(4-tert-부톡시카본일피페라진-1-일)-2-클로로-6-플루오로-벤조산을 연갈색 고체로서 수득하였다.
단계 B:
4-(4-(tert-부톡시카본일)피페라진-1-일)-2-클로로-6-플루오로벤조산(190 mg, 530 mmol, 당량: 1.00) 및 CDI(0.112 g, 0.688 mmol, 당량: 1.3)을 DMF(2.5 ml)에서 합쳐서 연황색 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 1.5 시간 동안 교반하였다. 추가의 CDI(85.9 mg, 0.530 mmol, 당량: 1.00)를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가 1.5 시간 동안 교반하였다. 암모늄 하이드록사이드(1.03 ml, 26.5 mmol, 당량: 50)를 첨가하고, 반응 혼합물을 1 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2 / MeOH 98/2)로써 표제 화합물(0.12 g, 62%)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS (m/e): 302.1 (M-tBu+H+).
중간체 B.26
tert -부틸 (2R)-4-(5- 카바모일 -6- 메톡시피리딘 -2-일)-2- 에틸피페라진 -1- 카복실레이트의 제조
Figure pct00034
단계 A:
DMF(2ml) 중 (R)-tert-부틸 2-에틸피페라진-1-카복실레이트(0.208 g, 0.971 mmol, 당량: 1.00) 및 트라이에틸아민(0.135 ml, 0.971 mmol, 당량: 1.00)의 용액에 메틸 2,6-다이클로로니코틴에이트(0.200 g, 0.971 mmol, 당량: 1.00)를 첨가하고, 반응 혼합물을 30℃에서 4.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물 및 염수로 세척하고, 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 용매를 증발시켰다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, EtOAc/헵탄, 1/4)로 정제하여 160 mg(43%)의 tert-부틸 (2R)-4-(6-클로로-5-메톡시카본일-2-피리딜)-2-에틸-피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체로서 수득하였다. MS (m/e): 384.2 (M+H+).
단계 B:
밀봉 튜브에서, tert-부틸 (2R)-4-(6-클로로-5-메톡시카본일-2-피리딜)-2-에틸-피페라진-1-카복실레이트(161 mg, 0.419 mmol, 당량: 1.00)를 MeOH(2 ml)에 용해시키고, 나트륨 메톡사이드(0.388 ml, 2.1 mmol, 당량: 5)를 첨가하고, 혼합물을 90℃로 가열하고, 4.5 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 시트르산 수용액으로 산성화시키고, CH2Cl2로써 추출하고, 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켜 6-[(3R)-4-tert-부톡시카본일-3-에틸-피페라진-1-일]-2-메톡시-피리딘-3-카복실산을 수득하였다. MS (m/e): 366.2 (M+H+). 조질 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.
단계 C:
DMF(3 ml) 중 6-[(3R)-4-tert-부톡시카본일-3-에틸-피페라진-1-일]-2-메톡시-피리딘-3-카복실산(135 mg, 0.369 mmol, 당량: 1.00) 및 CDI(71.9 mg, 0.443 mmol, 당량: 1.2)의 용액을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 암모늄 하이드록사이드(0.719 ml, 18.5 mmol, 당량: 50)를 첨가하고, 2 시간 이상 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 용매를 증발시켰다. 조질물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물 tert-부틸 (2R)-4-(5-카바모일-6-메톡시피리딘-2-일)-2-에틸피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체(20 mg, 15%)로서 수득하였다. MS (m/e): 365.2 (M+H+).
중간체 B.27
tert -부틸 4-(5- 카바모일 -6- 메톡시피리딘 -2-일)피페라진-1- 카복실레이트의 제조
Figure pct00035
중간체 B.26와 유사하게, tert-부틸 4-(5-카바모일-6-메톡시피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 메틸 2,6-다이클로로니코틴에이트 및 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트로부터 제조하였다. MS (m/e): 337.2 (M+H+).
중간체 C.1
6- 브로모 -2,8- 다이메틸이미다조[1,2-a]피라진의 제조
Figure pct00036
iPrOH(30 ml) 중 5-브로모-3-메틸피라진-2-아민(4.63g, 24.6 mmol)의 현탁액에 1-브로모-2,2-다이메톡시프로판(3.66 ml, 27.1 mmol) 및 피리디늄 파라-톨루엔 설폰산(0.62g, 2.5 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밀봉 튜브에서 36 시간 동안 65℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 was DCM으로 희석하고, 포화 나트륨 수소 카보네이트 용액으로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: Hept 1:4-1:1)로 정제하여 표제 화합물을 연황색 결정질 고체(3.96 g, 71%)로서 수득하였다. MS (m/e): 226.1 (M+H+, Br)
중간체 C.2
6- 브로모 -8-에틸-2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진의 제조
Figure pct00037
iPrOH(10 ml) 중 5-브로모-3-에틸피라진-2-아민(0.68, 3.37 mmol)의 현탁액에 1-브로모-2,2-다이메톡시프로판(0.54 ml, 4.04 mmol), 및 피리디늄 파라-톨루엔 설폰산(0.084g, 0.337 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 90℃로 4 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 포화 나트륨 수소 카보네이트 용액으로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: Hept 1:4-1:1)로 정제하여 표제 화합물을 연갈색 고체(0.51 g, 63%)로서 수득하였다. MS (m/e): 240.1 (M+H+, Br).
중간체 C.3
6- 브로모 -8- 사이클로프로필 -2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진의 제조
Figure pct00038
단계 A:
빙욕에서 냉각된 아세토니트릴(10 ml) 중 3-사이클로프로필피라진-2-아민(275 mg, 2.03 mmol, 당량: 1.00) 의 용액에 N-브로모석신이미드(362 mg, 2.03 mmol, 당량: 1.00)를 분획 첨가하였다. 20 분 후, 용매를 증발시키고, 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 헵탄/EtOAc 2/1)로 정제하여 (279 mg, 64%)의 5-브로모-3-사이클로프로필-피라진-2-아민을 연황색 고체로서 수득하였다. MS (m/e): 214.1 (M+H+, Br).
단계 B:
iPrOH(5 ml) 중 5-브로모-3-사이클로프로필피라진-2-아민(0.274, 1.28 mmol)의 현탁액에 1-브로모-2,2-다이메톡시프로판(0.207 ml, 1.54 mmol), 및 피리디늄 파라-톨루엔 설폰산(0.032g, 0.128 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 90℃로 3 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 포화 나트륨 수소 카보네이트 용액으로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: Hept 1:4-1:1)로 정제하여 표제 화합물 6-브로모-8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진을 연갈색 고체(0.158 g, 48%)로서 수득하였다. MS (m/e): 252.1 (M+H+, Br).
중간체 C.4
6- 클로로 -8- 트라이플루오로메틸 -2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진의 제조
Figure pct00039
단계 A:
물(12 ml) 중 나트륨 트라이플루오로메탄설피네이트(1.2 g, 7.7 mmol)의 용액에 DCM(30 ml) 중 5-클로로피라진-2-아민(1.0 g, 7.7 mmol)의 용액을 첨가하였다. tert-부틸하이드로퍼옥사이드(1.0 ml, 노난 중 5.5 M, 5.5 mmol)를 2 시간에 걸쳐 적가하였다. 그 후 나트륨 트라이플루오로메탄설피네이트(1.2 g, 7.7 mmol)의 제 2 분획을 첨가한 후, tert-부틸하이드로퍼옥사이드(1.0 ml, 노난 중 5.5 M, 5.5 mmol)의 제 2 분획을 6 시간에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 반복적으로 DCM으로 추출하고, 합친 유기 추출물을 염수로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM)로 정제하여 5-클로로-3-(트라이플루오로메틸)피라진-2-아민을 황색 결정(0.9 g, 57%)으로서 수득하였다. MS (m/e): 198.0. (M+H+, Cl)
단계 B:
iPrOH(6 ml) 중 5-클로로-3-(트라이플루오로메틸)피라진-2-아민(0.77 g, 3.8 mmol)의 현탁액에 1-브로모-2,2-다이메톡시프로판(0.57 ml, 4.2 mmol), 및 피리디늄 파라-톨루엔 설폰산(0.1 g, 0.4 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밀봉 튜브에서 96 시간 동안 100℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 포화 나트륨 수소 카보네이트 용액으로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: Hept 3:7-1:0)로 정제하여 표제 화합물을 갈색 분말(0.15 g, 17%)로서 수득하였다. MS (m/e): 236.1. (M+H+, Cl)
중간체 C.5
6- 클로로 -8- 다이플루오로메틸 -2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진의 제조
Figure pct00040
단계 A:
DCM(60 ml) 중 5-클로로피라진-2-아민(1.0 g, 7.7 mmol)의 용액에 물(24 ml) 중 비스(다이플루오로메틸설핀일옥시)아연(2.3 g, 7.7 mmol) 및 Fe(NO3)3.9H2O(0.3 g, 0.8 mmol)의 현탁액을 첨가하고, 혼합물을 교반하였다. tert-부틸하이드로퍼옥사이드(2.2 ml, 노난 중 5.5 M, 12.1 mmol)를 8 시간의 총 반응 시간 동안 매 45 분마다 0.2 ml 분획으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM:MeOH 1:0-4:1)로 정제하여 5-클로로-3-(다이플루오로메틸)피라진-2-아민을 황색 결정(0.6 g, 40%)으로서 수득하였다. MS (m/e): 180.0. (M+H+, Cl).
단계 B:
iPrOH(10 ml) 중 5-클로로-3-(다이플루오로메틸)피라진-2-아민(0.5 g, 2.8 mmol)의 현탁액에 1-브로모-2,2-다이메톡시프로판(1.1 ml, 8.4 mmol), 및 피리디늄 파라-톨루엔 설폰산(0.1 g, 0.3 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밀봉 튜브에서 18 시간 동안 65℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 포화 나트륨 수소 카보네이트 용액으로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: Hept 1:4-1:0)로 정제하여 표제 화합물을 갈색 분말(0.20 g, 40%)로서 수득하였다. MS (m/e): 218.1. (M+H+, Cl)
중간체 D.1
4- 브로모 -2- 플루오로 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드
Figure pct00041
밀봉 튜브에서, 다이옥산(5 mL) 중에서 4-브로모-2-플루오로벤즈아마이드(150 mg, 0.688 mmol), 6-브로모-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진(146 mg, 0.688 mmol), 구리 (I) 요오다이드(13.1 mg, 0.068 mmol, 0.1 당량), K3PO4 (307 mg, 1.44 mmol, 2.1 당량) 및 1,10-펜안트롤린(14.9 mg, 0.138 mmol, 0.2 당량)을 120℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과시키고, 진공에서 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2 / MeOH 99/1 내지 98/2) 상에서 정제하여 24 mg(10%)의 4-브로모-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드를 수득하였다. MS (m/e): 349.1 (M+H+, Br).
중간체 D.2
4- 브로모 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드
Figure pct00042
밀봉 튜브에서, 다이옥산(5 mL) 중에서 4-브로모벤즈아마이드(94.3 mg, 0.472 mmol), 6-브로모-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진(100 mg, 0.472 mmol), 구리 (I) 요오다이드(8.9 mg, 0.047 mmol, 0.1 당량), K3PO4(210 mg, 0.99 mmol, 2.1 당량) 및 1,10-펜안트롤린(17 mg, 0.094 mmol, 0.2 당량)을 120℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과시키고, 진공에서 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2 / MeOH 99/1 내지 98/2) 상에서 정제하여 42 mg(18%)의 4-브로모-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드를 백색 고체로서 수득하였다. MS (m/e): 331.1 (M+H+, Br).
중간체 D.3
4- 브로모 -2- 에톡시 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드
Figure pct00043
밀봉 튜브에서, 다이옥산(5 mL) 중에서 4-브로모-2-에톡시벤즈아마이드(288 mg, 0.1.18 mmol), 6-브로모-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진(275 mg, 1.30 mmol), 구리 (I) 요오다이드(22.5 mg, 0.118 mmol, 0.1 당량), K3PO4 (526 mg, 2.48 mmol, 2.1 당량) 및 1,10-펜안트롤린(42.5 mg, 0.236 mmol, 0.2 당량)을 120℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 상에서 여과시키고, 진공에서 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(SiO2, CH2Cl2 / MeOH 99/1 내지 98/2) 상에서 정제하여 159 mg(36%)의 표제 생성물을 백색 고체로서 수득하였다. MS (m/e): 375.2 (M+H+, Br).
일반 절차 1
부흐발트 아민화 반응
톨루엔 중 아릴 브로마이드 유도체(1 당량), 2급 아민(2 당량), 트리스(다이벤질리덴-아세톤)다이팔라듐(0)(Pd2(dba)3)(0.08 당량), 나트륨 tert-부톡사이드(1.5 당량) 및 다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐 (잔트포스)(0.12 당량)의 용액을 80 내지 130℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시키고, 생성물을 직접 실리카 겔 상 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다.
일반 절차 2
Boc 탈보호
Boc-보호된 아민을 MeOH - 다이옥산의 혼합물 중의 용액에 넣었다. 다이옥산 중 HCl(4M, 10 당량)의 용액을 첨가하고, 완료될 때까지(0.2 시간 내지 4 시간) 교반을 지속하였다. 목적 생성물을 여과로 수집하고, 진공에서 건조시켰다.
실시예 1
2- 플루오로 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일)-4-피페라진-1- 일벤즈아마이드 하이드로클로라이드의 제조
Figure pct00044
일반 절차 1(부흐발트 아민화), 이어서 일반 절차 2(Boc 탈보호)를 따라서, 2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드 하이드로클로라이드를 4-브로모-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.1) 및 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트로부터 제조하였다. MS (m/e): 391.8 (M+H+).
실시예 2
N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일)-4-피페라진-1- 일벤즈아마이드 하이드로클로라이드의 제조
Figure pct00045
일반 절차 1(부흐발트 아민화), 이어서 일반 절차 2(Boc 탈보호)를 따라서, N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드 하이드로클로라이드를 4-브로모-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.2) 및 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트로부터 제조하였다. MS (m/e): 337.1 (M+H+).
실시예 3
4-[(8 aS )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2- 에톡시 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00046
일반 절차 1(부흐발트 아민화)을 따라서, 4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드를 4-브로모-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.3) 및 (8aS)-1,2,3,4,6,7,8,8a-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진으로부터 제조하였다. MS (m/e): 421.4 (M+H+).
실시예 4
2- 에톡시 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일)-4-[(3S)-3- 메틸피페라진 -1-일] 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00047
일반 절차 1(부흐발트 아민화), 이어서 일반 절차 2(Boc 탈보호)를 따라서, 2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드를 4-브로모-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.3) 및 tert-부틸 (2S)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트로부터 제조하였다. MS (m/e): 395.3 (M+H+).
실시예 5
2- 에톡시 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일)-4-[(3R)-3- 메틸피페라진 -1-일] 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00048
일반 절차 1(부흐발트 아민화), 이어서 일반 절차 2(Boc 탈보호)를 따라서, 2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드를 4-브로모-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.3) 및 tert-부틸 (2R)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트로부터 제조하였다. MS (m/e): 395.3 (M+H+).
실시예 6
4-[(8 aR )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2- 에톡시 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00049
일반 절차 1(부흐발트 아민화)을 따라서, 4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드를 4-브로모-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.3) 및 (8aR)-1,2,3,4,6,7,8,8a-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진으로부터 제조하였다. MS (m/e): 421.4 (M+H+).
실시예 7
4-[(8 aR )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2- 플루오로 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00050
일반 절차 1(부흐발트 아민화)을 따라서, 4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드를 4-브로모-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.1) 및 (8aR)-1,2,3,4,6,7,8,8a-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진으로부터 제조하였다. MS (m/e): 395.3 (M+H+).
실시예 8
4-[(8 aS )-3,4,6,7,8,8a- 헥사하이드로 -1H- 피롤로[1,2-a]피라진 -2-일]-2- 플루오로 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00051
일반 절차 1(부흐발트 아민화)을 따라서, 4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드를 4-브로모-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.1) 및 (8aS)-1,2,3,4,6,7,8,8a-옥타하이드로피롤로[1,2-a]피라진으로부터 제조하였다. MS (m/e): 395.3 (M+H+).
실시예 9
4-(1,4- 다이아제판 -1-일)-2- 에톡시 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00052
일반 절차 1(부흐발트 아민화)을 따라서, 4-(1,4-다이아제판-1-일)-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드를 4-브로모-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.3) 및 1,4-다이아제판으로부터 제조하였다. MS (m/e): 395.3 (M+H+).
실시예 10
4-[(3S,5R)-3,5- 다이메틸피페라진 -1-일]-2- 에톡시 -N-(2- 메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일) 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00053
일반 절차 1(부흐발트 아민화)을 따라서, 4-(1,4-다이아제판-1-일)-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드를 4-브로모-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드(실시예 D.3) 및 (2R,6S)-2,6-다이메틸피페라진으로부터 제조하였다. MS (m/e): 409.3 (M+H+).
실시예 11
N-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일)-2- 플루오로 -4-[(3R)-3- 메틸피페라진 -1-일] 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00054
단계 A:
튜브에서, 다이옥산(2 ml) 중 (R)-tert-부틸 4-(4-카바모일-3-플루오로페닐)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(0.10 g, 0.3 mmol, 중간체 B.1), 6-브로모-2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진(0.08 g, 0.4 mmol, 중간체 C.1), (다이페닐포스피노)-9,9-다이메틸잔텐 (0.03 g, 0.04 mmol), 세슘 카보네이트(0.14 g, 0.4 mmol)의 현탁액을 아르곤 버블링과 함께 초음파 처리하여 탈기시켰다. 그 후, 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(0.01 g, 0.1 mmol)을 첨가하고, 튜브를 밀봉시키고, 혼합물을 3 시간 동안 100℃로 가열하였다. 그 후 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 물로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: Hept 1:1-7:3)로 정제하여 (R)-tert-부틸 4-(4-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일카바모일)-3-플루오로페닐)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(0.11 g, 77%)를 연갈색 분말로서 수득하였다. MS (m/e): 483.4 (M+H+).
단계 B:
(R)-tert-부틸 4-(4-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일카바모일)-3-플루오로페닐)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(0.10 g, 0.2 mmol)를 다이옥산 중 염산(4 ml, 4 M)에 현탁시키고, 20 분 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 증발 건조시키고, 물에 재용해시키고, DCM로 세척하고, 그 후 수성물을 포화 나트륨 수소 카보네이트 용액을 첨가하여 염기성으로 만들고, DCM:MeOH(95:5)로써 재추출하고, 농축시켜 표제 생성물(0.08 g, 정량)을 황색 분말로서 수득하였다. (m/e): 383.3 (M+H+).
실시예 11과 유사하게, 하기 표의 실시예 12 내지 47을 상응하는 카복스아마이드 및 헤테로아릴 할라이드로부터 제조하고, 이어서, 필요한 경우 후속 탈보호를 수행하였다.
Figure pct00055
Figure pct00056
Figure pct00057
Figure pct00058
Figure pct00059
Figure pct00060
Figure pct00061
Figure pct00062
Figure pct00063
Figure pct00064
실시예 48
N-(2,8-다 이메틸이미다조[1,2-a ]피라진-6-일)-2- 플루오로 -4-(4- 피롤리딘 -1- 일피페리딘 -1-일) 벤즈아마이드의 제조
Figure pct00065
단계 A:
2-플루오로-4-(1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)벤즈아마이드(A.22)를 실시예 1과 유사하게 6-브로모-2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진(C.1)과 반응시켜 N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-(1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)벤즈아마이드를 수득하였다. MS (m/e): 426.3 (M+H+)
단계 B:
N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-(1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)벤즈아마이드(0.14 g, 0.3 mmol)를 다이옥산(2.5 ml)에 용해시키고, 수성 6M HCl(2.3 ml, 13.8 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2 시간 동안 교반하고, 이후 이를 포화 수성 나트륨 수소 카보네이트의 첨가에 의해 중화시키고, EtOAc로써 추출하였다. 유기물을 염수로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켜 N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-(4-옥소피페리딘-1-일)벤즈아마이드(0.13 g, 정량)를 황색 분말로서 수득하였다.
단계 C:
DCM(2 ml) 중 N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-(4-옥소피페리딘-1-일)벤즈아마이드(0.12 g, 0.3 mmol)의 용액에 피롤리딘(0.03 ml, 0.4 mmol), 이어서 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.1 g, 0.5 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 0.5 시간 동안 교반하였다. 그 후 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 수성 나트륨 수소 카보네이트, 염수로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 농축시켰다. 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피(DCM: MeOH 9:1-7:3+ NH4OH)로 정제하여 N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-(4-피롤리딘-1-일피페리딘-1-일)벤즈아마이드(0.11 g, 82%)를 백색 분말로서 수득하였다. MS (m/e): 437.4 (M+H+)
실시예 49
N-(2,8- 다이메틸이미다조[1,2-a]피라진 -6-일)-2- 에톡시 -4-[4-(3- 메톡시아제 티딘-1-일)피페리딘-1-일] 벤즈아마이드
Figure pct00066
표제 화합물을 실시예 48(단계 C)과 유사하게, N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-(4-옥소피페리딘-1-일)벤즈아마이드(실시예 48, 단계 B)와 3-메톡시아제티딘 하이드로클로라이드의 반응에 의해 제조하였다. MS (m/e): 479.4 (M+H+)
생물학적 분석
본원을 더욱 상세히 기술하고 이해를 돕기 위해, 하기 비제한적인 생물학적 실시예를 제공하여 본원의 범주를 더욱 완전히 예시하지만, 이의 범주를 구체적으로 제한하는 것으로서 간주되지 않아야 한다. 당업자의 범위 내에서 이해될 수 있는, 현재 공지되거나 나중에 개발될 수 있는 본원의 이러한 변형은, 본원의 범주 및 후술된 청구범위 내에서 포함되는 것으로 간주된다. 이러한 실시예는 시험관내에서 및/또는 생체내에서 본원에 기재된 특정 화합물의 시험을 예시하고, SMN2 유전자로부터 전사된 mRNA로 SMN2의 엑손 7의 포함을 강화시킴으로써 SMA를 치료하기 위한 화합물의 유용성을 입증한다. 화학식 I의 화합물은 SMN2 유전자로부터 전사된 mRNA로 SMN2의 엑손 7의 포함을 강화하고, SMN2 유전자로부터 생성된 SMN 단백질 수준을 증가시킴으로써, SMA 치료를 필요로 하는 인간 대상체에서 SMA를 치료하는데 사용될 수 있다. 이러한 실시예는 또한 시험관내에서 및/또는 생체내에서 본원에 기재된 특정 화합물의 시험을 예시하고, SMN1 유전자로부터 전사된 mRNA로 SMN1의 엑손 7의 포함을 강화하기 위한 화합물의 유용성을 입증한다. 따라서, 화학식 I의 화합물은 또한 SMN1 유전자로부터 전사된 mRNA로 SMN1의 엑손 7의 포함을 강화하고, SMN1 유전자로부터 생성된 SMN 단백질 수준을 증가시킨다.
분석 1
배양된 세포에서 SMN2 꼬마유전자 프리 - mRNA 스플라이싱에 대한 RT - qPCR 분석
역 전사-정량적 PCR(RT-qPCR) 분석을 사용하여 SMN2 꼬마유전자로 안정하게 형질감염되고 시험 화합물로 처리된 HEK293H 세포주에서 SMN2 엑손 7을 함유하는 전장 SMN2 꼬마유전자(용어 "FL SMN2미니"로 본원에서 지칭됨) mRNA 수준을 정량화하였다. 사용된 물질 및 각각의 공급처를 하기 표 1에 열거하였다.
배양된 세포에서 SMN2 꼬마유전자 mRNA 스플라이싱 RT-qPCR 분석에 사용된 물질 및 이의 각각의 공급처
물질 공급처
HEK293H 세포 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드) 카탈로그 번호 11631-017
세포-To-Ct 용해 완충액 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드) 파트 번호 4399002
DMEM 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드) 카탈로그 번호 11960-044
96-웰 평편-바닥 플레이트 벡톤 디킨슨 카탈로그 번호 353072
RT-PCR 효소 믹스 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드) 파트 번호 4388520
RT-PCR 완충액 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드) 파트 번호 4388519
AgPath-ID 1-단계 RT-PCR 키트 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드) 파트 번호 4387391
유전자 증폭기 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드) 7900HT
SMN2-A 꼬마유전자 구성물을 국제특허출원공개 WO 2009/151546 A1의 145쪽, 단락 [00400] 내지 147쪽, 단락 [00412](이의 도 1 및 도 3 포함)에 기재된 바와 같이 제조하였다.
SMN2-A 꼬마유전자 구성물(10,000 세포/웰)로 안정하게 형질감염된 HEK293H 세포를 96-웰 평편-바닥 플레이트 중에서 세포 배양 배지(200 ㎍/mL 하이그로마이신을 함유하는 DMEM + 10% PBS)(200 ㎕)에 시딩하고, 상기 플레이트를 즉시 교반하여 세포의 적절한 분산 및 심지어 세포의 단층 형성을 보장하였다. 세포를 6 시간 동안 부착하도록 하였다. 시험 화합물을 100% DMSO 중에서 3.16-배 연속으로 희석하여 7-점 농도 곡선을 생성하였다. 시험 화합물의 용액(1 ㎕, DMSO 중 200x)을 각각의 세포-함유 웰에 첨가하고, 플레이트를 24 시간 동안 세포 배양 항온처리기(37℃, 5% C02, 100% 상대 습도)에서 항온처리하였다. 각각의 시험 화합물 농도에 대하여 2회 반복검정을 수행하였다. 이어서, 상기 세포를 세포-대-Ct 용해 완충액 중에서 용해하고, 용해물을 -80℃에서 저장하였다.
전장 SMN2-A 꼬마유전자 및 GAPDH mRNA를 하기 표 2에 나타낸 프라이머 및 프로브를 사용하여 정량화하였다. SMN 정방향 프라이머 A(서열번호 1)를 엑손 7의 뉴클레오티드 서열(뉴클레오티드 22 내지 뉴클레오티드 40)로 하이브리드화하고, SMN 역방향 프라이머 A(서열번호 2)를 파이어플라이(Firefly) 루시퍼라제의 암호화 서열 중에서 뉴클레오티드 서열로 하이브리드화하고, SMN 프로브 A(서열번호 3)를 엑손 7의 뉴클레오티드 서열(뉴클레오티드 50 내지 뉴클레오티드 54) 및 엑손 8의 뉴클레오티드 서열(뉴클레오티드 1 내지 뉴클레오티드 21)로 하이브리드화하였다. 이러한 3개의 올리고뉴클레오티드의 조합은 SMN1 또는 SMN2 꼬마유전자에서만 검출되고(RT-qPCR) 내인성 SMN1 또는 SMN2 유전자에서는 검출되지 않을 것이다.
프라이머 / 프로브 서열 공급처
SMN 정방향 프라이머 A 서열번호 1: GAAGGAAGGTGCTCACATT PTC1
SMN 역방향 프라이머 A 서열번호 2: TCTTTATGTTTTTGGCGTCTTC PTC1
SMN 정방향 프로브 A 서열번호 3:
6FAM- AAGGAGAAATGCTGGCAT AGAGCAGC-TAMRA		 PTC1
hGAPDH 정방향 프로브 서열번호 4: VIC-CGCCTGGTCACCAGGGCTGCT-TAMRA LTI2
hGAPDH 정방향 프라이머 서열번호 5: CAACGGATTTGGTCGTATTGG LTI2
hGAPDH 역방향 프라이머 서열번호 6: TGATGGCAACAATATCCACTTTACC LTI2
1 PTC 테라퓨틱스 인코포레이티드에 의해 고안된 프라이머 및 프로브;
2 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드)에서 시판.
SMN 정방향 및 역방향 프라이머를 0.4 μM의 최종 농도로 사용하였다. SMN 프로브를 0.15 μM의 최종 농도로 사용하였다. GAPDH 프라이머를 0.2 μM의 최종 농도로 사용하고 프로브를 0.15 μM의 최종 농도로 사용하였다.
2x RT-PCR 완충액(7.5 ㎕), 25x RT-PCR 효소 믹스(0.4 ㎕), 20x GAPDH 프라이머-프로브 믹스(0.75 ㎕), 물(4.0075 ㎕), 10-배 희석된 세포 용해물(2 ㎕), 100 μM SMN 정방향 프라이머(0.06 ㎕), 100 μM SMN 역방향 프라이머(0.06 ㎕) 및 100 μM SMN 프로브(0.225 ㎕)를 합하여 SMN2-꼬마유전자 GAPDH 믹스(15 ㎕ 총 부피)를 제조하였다.
PCR을 지시된 시간 동안 하기 온도로 수행하였다: 단계 1: 48℃(15 분); 단계 2: 95℃(10 분); 단계 3: 95℃(15 초); 단계 4: 60℃(1 분); 이어서 총 40 주기로 단계 3 및 4 반복.
각각의 반응 혼합물은 SMN2-A 꼬마유전자 및 GAPDH 프라이머/프로브 세트(멀티플렉스 디자인) 둘 다를 함유하고, 2개 전사체의 수준 측정을 동시에 수행하였다.
비히클 대조군으로 처리된 세포에 관한 FL SMN2미니 mRNA의 존재비(abundance)에서 증가를 변형된 ΔΔCt 방법(문헌[Livak and Schmittgen , Methods, 2001, 25:402-8]에 기재됨)을 사용하여 실시간 PCR 데이터로부터 측정하였다. 증폭 효율(E)을 FL SMN2미니 및 GAPDH 각각에 대한 증폭 곡선의 기울기로부터 계산하였다. 이어서, FL SMN2미니 및 GAPDH mRNA의 존재비를 (1 + E)- Ct로서 계산하였고, 이때, Ct는 각각의 앰플리콘에 대한 역치 값이다. FL SMN2미니 mRNA의 존재비는 GAPDH mRNA 존재비에 대하여 정규화되었다. 이어서, 시험 화합물-처리된 샘플로부터 정규화된 FL SMN2미니 mRNA 존재비를 비히클-처리된 세포로부터 정규화된 FL SMN2미니 mRNA 존재비로 나누어 비히클 대조군에 관한 FL SMN2미니 mRNA 수준을 측정하였다.
표 3은 본 발명의 특정한 화합물에 대하여 상기 방법에 따라 생성된 7-점 농도 데이터로부터 수득된 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도를 제공한다.
본 발명의 특정한 화합물은 1 μM 이하의 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도를 나타낸다.
본 발명의 더욱 특정한 화합물은 0.1 μM 이하의 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도를 나타낸다.
본 발명의 가장 특정한 화합물은 0.02 μM 이하의 전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도를 나타낸다.
전장 SMN2 꼬마유전자 mRNA의 생성을 위한 EC1 .5x 농도
실시예 E C 1 .5x
꼬마 유전자
[ nM ] 		　 실시예 E C 1 .5x
꼬마 유전자
[ nM ] 		　 실시예 E C 1 .5x
꼬마 유전자
[ nM ]
1 37.4 18 23.4 35 31.7
2 1045.4 19 3 36 53.4
3 102.5 20 23 37 31.7
4 26.3 21 20.4 38 57.8
5 41 22 95.2 39 118.3
6 100.6 23 26.8 40 38
7 48.4 24 51 41 46.4
8 40.7 25 14.6 42 14.4
9 98 26 59.6 43 40
10 38.3 27 16.7 44 9.5
11 16.4 28 2028.5 45 106.1
12 145 29 85.2 46 189.2
13 26.2 30 165 47 128.9
14 9.7 31 35.8 48 26.6
15 38 32 26.8 49 223.1
16 31.4 33 22.2 　
17 33.8 34 214
분석 2
배양된 세포에서 SMN 단백질 분석
SMN HTRF(균일 시간 분해 형광) 분석을 사용하여 시험 화합물로 처리된 SMA 모 섬유아 세포에서 SMN 단백질 수준을 정량화하였다. 사용된 물질 및 각각의 공급처를 하기 표 4에 열거하였다.
배양된 세포에서 SMN 단백질 분석에 사용된 물질 및 이들의 각각의 공급처
물질 공급처
SMA 유형 1 인간 세포 GM03813 (코리엘 인스티튜트)
프로테아제 억제제 칵테일 로슈 어플라이드 사이언스 카탈로그 번호 11836145001
항-SMN d2 블루 캡 시스바이오 카탈로그 번호 63IDC002-SMN
Anti-SMN 크립테이트 블루 캡 시스바이오 카탈로그 번호 63IDC002-SMN
SMN 재구성 완충액 시스바이오 카탈로그 번호 63IDC002-SMN-완충액
DMEM 써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 라이프 테크롤노지즈 인코포레이티드) 카탈로그 번호 11960-044
RIPA 용해 완충액 20 mM 트리스-HCl pH 7.5, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1% 써모 사이언티픽 NP-40 계면활성제-암피실린 세제 용액(써모 휘셔 사이언티픽 인코포레이티드(과거, 휘셔 사이언티픽), 피츠버그 /PA), 1% 나트륨 데옥시콜레이트
희석 완충액 20 mM 트리스-HCl pH 7.5, 150 mM NaCl
엔비젼(Envision)
플레이트 판독기		 퍼킨 엘머 모델 번호 2103
세포를 녹이고, DMEM-10% FBS 중에서 72 시간 동안 배양하였다. 세포를 트립신 처리하고, 카운팅하고, DMEM-10% FBS 중에서 25,000 세포/mL의 농도로 재현탁하였다. 상기 세포 현탁액을 96-웰 마이크로역가 플레이트 중에서 웰 당 5,000 세포로 플레이팅하고, 3 내지 5 시간 동안 항온처리하였다. 시험 화합물을 100% DMSO 중에서 3.16-배로 연속 희석하여 7-점 농도 곡선을 생성하였다. 시험 화합물 용액(1 ㎕)을 세포-함유 웰로 옮기고, 세포를 48 시간 동안 세포 배양 항온처리기(37℃, 5% CO2, 100% 상대 습도)에서 항온처리하였다. 각각의 시험 화합물 농도에 대하여 3회 반복검정 샘플을 설정하였다. 48 시간 후, 상청액을 웰로부터 제거하고, 프로테아제 억제제를 함유하는 RIPA 용해 완충액(25 ㎕)를 웰에 첨가하고, 진탕하면서 실온에서 1 시간 동안 항온처리하였다. 희석액(25 ㎕)을 첨가한 후, 생성된 용해물(35 ㎕)을 384-웰 플레이트로 옮겼고, 이때 각각의 웰은 항체 용액(SMN 재구성 완충액 중 항-SMN d2 및 항-SMN 크립테이트의 1:100 희석)(5 ㎕)을 함유하였다. 상기 플레이트를 1 분 동안 원심분리하여 웰의 바닥에 용액을 모은 후, 실온에서 밤새 항온처리하였다. 665 nm 및 620 nm에서 플레이트의 각각의 웰에 대한 형광을 엔비젼(EnVision) 멀티라벨 플레이트 판독기(퍼킨 엘머)로 측정하였다.
665 nm에서의 신호를 620 nm의 신호로 나누어 각각의 샘플, 블랭크 및 비히클 대조군 웰에 대한 정규화된 형광 신호를 계산하였다. 신호 정규화는 용해물의 기질 효과로 인해 급랭하는 가능한 형광을 설명한다. 각각의 샘플 웰에 대한 ΔF 값(% 값으로서 SMN 단백질 존재비의 측정)은, 각각의 샘플 웰에 대한 정규화된 형광값으로 블랭크 대조군 웰에 대한 정규화된 평균 형광값을 뺀 후, 이 차이를 블랭크 대조군 웰에 대한 정규화된 평균 형광값으로 나누고 100을 곱하여 계산하였다. 각각의 샘플 웰에 대한 ΔF 값은 시험 화합물-처리된 샘플로부터 SMN 단백질 존재비를 나타낸다. 각각의 샘플 웰에 대한 ΔF 값을 비히클 대조군 웰에 대한 ΔF 값으로 나눠 비히클 대조군에 관한 SMN 단백질 존재비의 배수 증가를 계산하였다. 표 5는 본 발명의 특정한 화합물에 대하여 상기 방법에 따라 생성된 7-점 농도 데이터로부터 수득된 SMN 단백질 발현을 위한 EC1 .5x 농도를 제공한다.
본 발명의 특정한 화합물은 10 μM 이하의 SMN 단백질 발현을 위한 EC1 .5x 농도를 나타낸다.
본 발명의 더욱 특정한 화합물은 1000 nM 이하의 SMN 단백질 발현을 위한 EC1.5x 농도를 나타낸다.
본 발명의 가장 특정한 화합물은 500 nM 이하의 SMN 단백질 발현을 위한 EC1.5x 농도를 나타낸다.
표 6은 본 발명의 특정한 화합물에 대하여 상기 방법에 따라 생성된 7-점 농도 데이터로부터 수득된 SMN 단백질의 최대 배수 증가를 제공한다.
본 발명의 특정한 화합물은 1.5 초과의 최대 배수 증가를 나타낸다.
본 발명의 더욱 특정한 화합물은 1.7 초과의 최대 배수 증가를 나타낸다.
본 발명의 가장 특정한 화합물은 1.8 초과의 최대 배수 증가를 나타낸다.
SMN 단백질 발현을 위한 EC1 .5x 농도
실시예 EC 1 .5x
SMN 단백질
( nM ) 		　 실시예 EC 1 .5x
SMN 단백질
( nM ) 		　 실시예 EC 1 .5x
SMN 단백질
( nM )
1 87 18 116.8 35 504.6
2 2248.9 19 27.4 36 1091.1
3 409.4 20 100.6 37 286.9
4 122 21 162.4 38 206.1
5 185.3 22 660 39 378.6
6 428.5 23 62.2 40 387.6
7 872.2 24 113.4 41 242.5
8 351.5 25 122.8 42 230.6
9 344.9 26 1608.8 43 87
10 130.4 27 1523.7 44 35
11 52.2 28 8764.8 45 264.4
12 1734.9 29 495.3 46 579.5
13 108.7 30 603 47 551
14 124 31 221 48 230
15 303.2 32 125.9 49 1977.8
16 237.2 33 121.9 　
17 1700.2 34 1253.3
Figure pct00067

Claims (58)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 I]
    Figure pct00068

    상기 식에서,
    X1은 CR5 또는 N이고;
    X2는 CR5 또는 N이되, 이때 X1 및 X2 둘다가 N은 아니고;
    R1은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
    R2는 수소, 시아노, C1 -7-알킬, C1 -7-할로알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
    R3은 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
    R4는 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
    R5는 독립적으로 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시로부터 선택되고;
    A는 N-헤테로사이클로알킬 또는 NR7R8이되, 이때 N-헤테로사이클로알킬은 1 또는 2개의 질소 고리 원자를 포함하며, 임의적으로는 R6로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환되고;
    R6는 독립적으로 수소, C1 -7-알킬, 아미노, 아미노-C1 -7-알킬, C3 -8-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 C1 -7-알콕시-헤테로사이클로알킬로부터 선택되거나, 또는 2개의 R6가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하고;
    R7은 1개의 질소 고리 원자를 포함하는 헤테로사이클로알킬이되, 이때 헤테로사이클로알킬은 임의적으로 R6로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환되고;
    R8은 수소, C1 -7-알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
    단, A가 단지 1개의 질소 고리 원자를 포함하는 N-헤테로사이클로알킬인 경우, 하나 이상의 R6 치환기는 아미노 또는 아미노-C1 -7-알킬이다.
  2. 제 1 항에 있어서,
    X1는 CH 또는 N이고;
    X2는 CR5이고;
    R1은 C1 -7-알킬이고;
    R2는 수소, C1 -7-알킬, C1 -7-할로알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
    R3은 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
    R4는 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
    R5는 수소, 할로, C1 -7-알킬, 또는 C1 -7-알콕시이고;
    A는 N-헤테로사이클로알킬이고, 이때 N-헤테로사이클로알킬은 1 또는 2개의 질소 고리 원자를 포함하며, 임의적으로는 R6로부터 선택되는 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환되고;
    R6는 독립적으로 수소, C1 -7-알킬, 아미노, 아미노-C1 -7-알킬, C3 -8-사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬 및 C1 -7-알콕시-헤테로사이클로알킬로부터 선택되거나, 또는 2개의 R6가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하고;
    단, A가 단지 1개의 질소 고리 원자를 포함하는 N-헤테로사이클로알킬인 경우, 하나 이상의 R6 치환기는 아미노 또는 아미노-C1 -7-알킬인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    X1이 CH인, 화합물.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
    X2가 CH인, 화합물.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 C1 -7-알킬인, 화합물.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 메틸인, 화합물.
  7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R2가 수소, C1 -7-알킬, C1 -7-할로알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬인, 화합물.
  8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R2가 수소, 메틸, 에틸, 다이플루오로메틸, 트라이플루오로메틸 또는 사이클로프로필인, 화합물.
  9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3이 수소, 할로 또는 C1 -7-알콕시인, 화합물.
  10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3이 수소, 플루오로, 메톡시 또는 에톡시인, 화합물.
  11. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4가 수소 또는 할로인, 화합물.
  12. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4가 수소 또는 플루오로인, 화합물.
  13. 제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4가 수소인, 화합물.
  14. 제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5가 수소, 할로 또는 C1 -7-알콕시인, 화합물.
  15. 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5가 수소, 플루오로, 클로로 또는 메톡시인, 화합물.
  16. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5가 수소인, 화합물.
  17. 제 1 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6가 독립적으로 C1 -7-알킬, 헤테로사이클로알킬 및 C1 -7-알콕시-헤테로사이클로알킬로부터 선택되거나, 또는 2개의 R6가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하는, 화합물.
  18. 제 1 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6가 독립적으로 메틸, 에틸, 이소프로필, 메톡시-아제티딘일 및 피롤리딘일로부터 선택되거나, 또는 2개의 R6가 함께 에틸렌 또는 프로필렌을 형성하는, 화합물.
  19. 제 1 항 내지 제 18 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R7이, 임의적으로 R6로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환된 피페라진일인, 화합물.
  20. 제 1 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R8이 수소 또는 C1 -7-알킬인, 화합물.
  21. 제 1 항 내지 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가
    Figure pct00069
    또는
    Figure pct00070
    인, 화합물:
    상기 식에서,
    Y는 N 또는 CH이고;
    R8은 수소, C1 -7-알킬 또는 C3 -8-사이클로알킬이고;
    R9은 수소, C1 -7-알킬, 또는 -(CH2)m-NR14R15이고;
    R10은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
    R11은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
    R12는 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
    R13은 수소 또는 C1 -7-알킬이고;
    R14 및 R15는 독립적으로 수소, C1 -7-알킬 및 C3 -8-사이클로알킬로부터 선택되고;
    n은 0, 1 또는 2이고;
    m은 0, 1, 2 또는 3이고;
    또는 R9 및 R10이 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
    또는 R9 및 R12가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
    또는 R10 및 R11이 함께 C2 -7-알킬렌을 형성하거나;
    또는 R10 및 R12가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
    또는 R10 및 R14가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
    또는 R12 및 R13이 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
    또는 R12 및 R14가 함께 C1 -7-알킬렌을 형성하거나;
    또는 R14 및 R15가 함께, 임의적으로 알콕시로 치환된 C2 -7-알킬렌을 형성하고;
    단, Y가 CH인 경우, R9은 -(CH2)m-NR14R15이고;
    단, Y가 N이고 R9이 -(CH2)m-NR14R15인 경우, m은 2 또는 3이다.
  22. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    Y가 N인, 화합물.
  23. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    Y가 CH이고, R9이 -(CH2)m-NR14R15인, 화합물.
  24. 제 1 항 내지 제 23 항 중 어느 한 항에 있어서,
    n이 1인, 화합물.
  25. 제 1 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R9이 수소, 피롤리딘일, 또는 메톡시-아제티딘일인, 화합물.
  26. 제 1 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R10이 수소, 메틸, 에틸 또는 이소프로필인, 화합물.
  27. 제 1 항 내지 제 26 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R11이 수소 또는 메틸인, 화합물.
  28. 제 1 항 내지 제 27 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R12가 수소 또는 메틸인, 화합물.
  29. 제 1 항 내지 제 28 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R13이 수소인, 화합물.
  30. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R9 및 R10이 함께 프로필렌을 형성하는, 화합물.
  31. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R10 및 R11이 함께 에틸렌을 형성하는, 화합물.
  32. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R14 및 R15가 함께 프로필렌 또는 부틸렌을 형성하는, 화합물.
  33. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가 하기 군으로부터 선택되는, 화합물:
    Figure pct00071

    Figure pct00072

    상기에서,
    R8, R9, R10, R11, R12, 및 R13은 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같고,
    R16은 수소 또는 C1 -7-알킬이고,
    R17은 C1 -7-알콕시이다.
  34. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가 하기 군으로부터 선택되는, 화합물:
    Figure pct00073

    상기에서,
    R8, R9, R10, R11, R12, 및 R13은 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같고,
    R17은 C1 -7-알콕시이다.
  35. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가, 각각이 본원에서 정의된 R6로부터 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 임의적으로 치환된 피페라진일, 다이아제판일, 피롤리딘일 및 헥사하이드로피롤로[1,2-a]피라진일의 군으로부터 선택되는, 화합물.
  36. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가 NR7R8이며, 이때 R7 및 R8이 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은, 화합물.
  37. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가
    Figure pct00074
    이며, 이때 R8, R9, R10, R11, R12 및 R13이 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은, 화합물.
  38. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
    A가 하기의 군으로부터 선택되는, 화합물:
    Figure pct00075
    .
  39. 제 1 항 내지 제 38 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
    N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-(1,4-다이아제판-1-일)-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-에톡시벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
    N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2,6-다이플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-에톡시-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(8-에틸-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2,6-다이플루오로벤즈아마이드;
    N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-플루오로벤즈아마이드;
    N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-[(3S)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
    N-(8-에틸-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
    N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-클로로-6-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
    2,5-다이플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-메틸피페라진-1-일)벤즈아마이드;
    2,3-다이플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-메틸피페라진-1-일)벤즈아마이드;
    4-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
    4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로벤즈아마이드;
    N-(8-사이클로프로필-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-플루오로벤즈아마이드;
    2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3S)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]-N-[2-메틸-8-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피라진-6-일]벤즈아마이드;
    N-[8-(다이플루오로메틸)-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일]-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-프로판-2-일피페라진-1-일)벤즈아마이드;
    6-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)피리딘-3-카복스아마이드;
    2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-6-피페라진-1-일피리딘-3-카복스아마이드;
    N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-플루오로-4-(4-피롤리딘-1-일피페리딘-1-일)벤즈아마이드; 및
    N-(2,8-다이메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-2-에톡시-4-[4-(3-메톡시아제티딘-1-일)피페리딘-1-일]벤즈아마이드.
  40. 제 1 항 내지 제 39 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(3S)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]-N-[2-메틸-8-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피라진-6-일]벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(8aR)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(8aS)-3,4,6,7,8,8a-헥사하이드로-1H-피롤로[1,2-a]피라진-2-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-(1,4-다이아제판-1-일)-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3S)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    2-클로로-6-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-피페라진-1-일벤즈아마이드;
    2,5-다이플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-메틸피페라진-1-일)벤즈아마이드;
    2,3-다이플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-메틸피페라진-1-일)벤즈아마이드;
    4-[(3R,5S)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-(3,3-다이메틸피페라진-1-일)-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    N-[8-(다이플루오로메틸)-2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일]-2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-(3-프로판-2-일피페라진-1-일)벤즈아마이드;
    6-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)피리딘-3-카복스아마이드; 및
    2-메톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-6-피페라진-1-일피리딘-3-카복스아마이드.
  41. 제 1 항 내지 제 40 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    4-(4,7-다이아자스피로[2.5]옥탄-7-일)-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3S,5R)-3,5-다이메틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-[(3R)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)-4-[(3R)-3-피롤리딘-1-일피롤리딘-1-일]벤즈아마이드;
    4-[(3S)-3-에틸피페라진-1-일]-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드; 및
    2-플루오로-4-[(3R)-3-메틸피페라진-1-일]-N-[2-메틸-8-(트라이플루오로메틸)이미다조[1,2-a]피라진-6-일]벤즈아마이드.
  42. 화학식 VIII의 화합물 또는 이의 염:
    [화학식 VIII]
    Figure pct00076

    상기 식에서,
    X1, X2, R1, R2, R3 및 R4는 제 1 항 내지 제 40 항 중 어느 한 항에 기재된 바와 같고;
    Y는 할로겐 또는 트라이플루오로메탄설폰에이트이다.
  43. 제 42 항에 있어서,
    Y가 브로모인, 화합물.
  44. 제 42 항에 있어서,
    하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 화합물:
    4-브로모-2-플루오로-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드;
    4-브로모-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드; 및
    4-브로모-2-에톡시-N-(2-메틸이미다조[1,2-a]피라진-6-일)벤즈아마이드.
  45. 승온에서 촉매, 리간드, 염기 및 용매의 존재 하에 하기 화학식 V의 화합물과 하기 화학식 VI의 화합물을 반응시키는 것을 포함하는, 화학식 I의 화합물의 제조 방법:
    Figure pct00077

    상기 식에서,
    A, X1, X2, R1, R2, R3 및 R4는 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같다.
  46. a) 용매 중에서 80℃ 내지 200℃의 온도에서 가열함에 의한 방향족 친핵성 치환 반응; 또는
    b) 촉매, 리간드, 및 염기의 존재 하에 용매 중에서 20℃ 내지 100℃의 온도에서 가열함에 의한 부흐발트-하르트비히 아민화 반응
    으로 하기 화학식 VIII의 화합물을 화합물 M-A와 반응시킴을 포함하는, 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 정의된 화학식 I의 화합물의 제조 방법:
    Figure pct00078

    상기 식에서,
    A, X1, X2, Y, R1, R2, R3 및 R4는 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같고,
    M은 수소, 나트륨 또는 칼륨이며, M은 A의 질소 원자를 통해 A에 연결된다.
  47. 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 있어서,
    제 45 항 또는 제 46 항 중 어느 한 항에 따른 방법에 의해 수득가능한 화합물.
  48. 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 약학 조성물.
  49. 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 있어서,
    치료 활성 물질로서 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  50. 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 있어서,
    SMN-결핍-관련 증상의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  51. 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 있어서,
    척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  52. 대상체에게 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함을 포함하는, SMN-결핍-관련 증상의 치료 또는 예방 방법.
  53. 대상체에게 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함을 포함하는, 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방 방법.
  54. SMN-결핍-관련 증상의 치료 또는 예방을 위한, 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도.
  55. 척수성 근위축증(SMA)의 치료 또는 예방을 위한, 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도.
  56. SMN-결핍-관련 증상 치료용 또는 예방용 약제의 제조를 위한, 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도.
  57. 척수성 근위축증(SMA) 치료용 또는 예방용 약제의 제조를 위한, 제 1 항 내지 제 41 항 중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도.
  58. 본원에 전술된 발명.
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Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2016109324A (ru) 2013-08-19 2017-09-26 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Способ скрининга
CN113750101A (zh) 2015-12-10 2021-12-07 Ptc医疗公司 用于治疗亨廷顿病的方法
CA3066224A1 (en) 2017-06-05 2018-12-13 Ptc Therapeutics Inc. Compounds for treating huntington's disease
BR112019027719A2 (pt) 2017-06-28 2020-07-28 Ptc Therapeutics, Inc. métodos para tratar a doença de huntington
WO2019005980A1 (en) 2017-06-28 2019-01-03 Ptc Therapeutics, Inc. METHODS OF TREATING HUNTINGTON'S DISEASE
CN111936136B (zh) * 2017-11-14 2024-07-05 儿童医学中心公司 新咪唑并嘧啶化合物及其用途
KR20250030535A (ko) 2017-11-14 2025-03-05 칠드런'즈 메디컬 센터 코포레이션 인간 면역 반응을 조정하기 위한 이미다조피리미딘의 용도
CA3094703A1 (en) 2018-03-27 2019-10-03 Ptc Therapeutics, Inc. Compounds for treating huntington's disease
BR112020026534A2 (pt) 2018-06-27 2021-03-23 Ptc Therapeutics, Inc. Compostos de heteroarila para o tratamento da doença de huntington
HUE068060T2 (hu) 2018-06-27 2024-12-28 Ptc Therapeutics Inc Heterociklikus és heteroaril vegyületek Huntington-kór kezelésére
WO2020005882A1 (en) 2018-06-27 2020-01-02 Ptc Therapeutics, Inc. Heteroaryl compounds for treating huntington's disease
MX2020014116A (es) 2018-06-27 2021-06-15 Reborna Biosciences Inc Agente profilactico o terapeutico para atrofia muscular espinal.
JP7576552B2 (ja) * 2019-01-18 2024-10-31 バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッド イミダゾ［１，２－ａ］ピリジニル誘導体及び疾患の処置におけるその使用
WO2021007378A1 (en) 2019-07-11 2021-01-14 Ptc Therapeutics, Inc. Compounds for use in treating huntington's disease
EP4110459A1 (en) * 2020-02-28 2023-01-04 Remix Therapeutics Inc. Heterocyclic amides and their use for modulating splicing
BR112022023025A2 (pt) 2020-05-13 2023-03-28 Chdi Foundation Inc Moduladores de htt para tratar doença de huntington
WO2023283372A1 (en) * 2021-07-07 2023-01-12 Biogen Ma Inc. Compounds for targeting degradation of irak4 proteins
CN118510769A (zh) 2021-11-17 2024-08-16 Chdi基金会股份有限公司 用于治疗亨廷顿病的htt调节剂
US20250122192A1 (en) * 2021-12-03 2025-04-17 Rgenta Therapeutics, Inc. 5-pyrimidinecarboxamide derivatives and methods of using the same
AR132351A1 (es) 2023-04-13 2025-06-18 Syngenta Crop Protection Ag Derivados de imidazo[1,2-a]pirazina

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014012050A2 (en) * 2012-07-13 2014-01-16 Indiana University Research & Technology Corporation Compounds for treatment of spinal muscular atrophy
WO2014209841A2 (en) * 2013-06-25 2014-12-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Compounds for treating spinal muscular atrophy

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005085252A1 (en) * 2004-03-04 2005-09-15 Biofocus Discovery Limited Imidazo ‘1,2-a’ pyrazine compounds which interact with protein kinases
EP2167491A1 (en) * 2007-06-08 2010-03-31 Abbott Laboratories 5-heteroaryl substituted indazoles as kinase inhibitors
WO2012080234A1 (en) * 2010-12-17 2012-06-21 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Substituted 6-imidazopyrazines for use as mps-1 and tkk inhibitors in the treatment of hyperproliferative disorders
CN104244944B (zh) * 2011-12-30 2018-06-08 Ptc医疗公司 用于治疗脊髓性肌萎缩症的化合物
TW201350481A (zh) * 2012-05-11 2013-12-16 Abbvie Inc Ｎａｍｐｔ抑制劑
GB201212513D0 (en) * 2012-07-13 2012-08-29 Ucb Pharma Sa Therapeutic agents
CN105189506A (zh) * 2012-11-19 2015-12-23 诺华股份有限公司 用于治疗寄生虫疾病的化合物和组合物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014012050A2 (en) * 2012-07-13 2014-01-16 Indiana University Research & Technology Corporation Compounds for treatment of spinal muscular atrophy
WO2014209841A2 (en) * 2013-06-25 2014-12-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Compounds for treating spinal muscular atrophy

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