KR20110120939A

KR20110120939A - 디아제핀디온 유도체

Info

Publication number: KR20110120939A
Application number: KR1020117021273A
Authority: KR
Inventors: 쇼고 사쿠마; 도시히로 다카하시; 마사토시 우시오다; 도시야스 이마이; 가즈히데 이노우에
Original assignee: 닛뽕 케미파 가부시키가이샤
Priority date: 2009-02-16
Filing date: 2010-02-15
Publication date: 2011-11-04
Anticipated expiration: 2030-02-15
Also published as: PL2397480T3; EP2397480A4; US8778933B2; DK2397480T3; CN102395577B; EP2397480A1; KR101727761B1; EP2397480B1; JPWO2010093061A1; WO2010093061A1; CA2789641C; CN102395577A; US8470814B2; US20130281441A1; JP5592278B2; US20110319610A1; ES2432265T3; CA2789641A1

Abstract

다음의 일반식 (I),

(식 중, R¹ 은 수소 원자 또는 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기 등을 나타내고, R² 및 R³ 은 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 또는 할로겐 원자 등을 나타내고, R⁴ 및 R⁵ 는 수소 원자 또는 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기 등을 나타내고, 그리고 W 는 테트라졸 등을 나타낸다) 로 나타내는 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염을 P2X₄ 수용체 길항제로서 사용한다.

Description

디아제핀디온 유도체{DIAZEPINEDIONE DERIVATIVE}

본 발명은 P2X₄ 수용체 길항 작용을 갖는 디아제핀디온 유도체에 관한 것이다.

ATP 수용체는 이온 채널형 수용체의 P2X 패밀리와 G 단백질 공액형 수용체의 P2Y 패밀리로 크게 구별되고, 현재까지 각각 7 종류 (P2X₁ _-7), 8 종류 (P2Y₁ _{, 2,4,6,11-14}) 의 서브 타입이 보고되어 있다.

P2X 패밀리의 서브 타입인 P2X₄ 수용체 (Genebank No.X87763) 는, 중추 신경계 등에서 널리 발현되고 있는 것이 보고되어 있다. (비특허문헌 1 : Buell et al. (1996) EMBO J.15 : 55-62, 비특허문헌 2 : Seguela et al. (1996) J.Neurosci.16 : 448-455, 비특허문헌 3 : Bo et al. (1995) FEBS Lett.375 : 129-133, 비특허문헌 4 : Soto et al. (1996) Proc Natl. Acad.Sci.USA 93 : 3684-3788, 비특허문헌 5 : Wang et al. (1996) biochem. Res.Commun. 220 : 196-202)

그런데, 신경인성 동통을 비롯한 난치성 동통은 발증의 구조를 정확히 알 수 없고, 비스테로이드계 항염증제 (NSAIDs) 나 모르피네가 효과가 없는 경우에는 치료법이 없다. 따라서, 환자나 주위 사람들의 심신에 대한 부담은 매우 크다. 신경인성 동통은 말초 신경 혹은 중추 신경의 손상에 의한 것이 많고, 예를 들어, 수술 후유증, 암, 척수 손상, 띠 형상 포진, 당뇨병성 신경염, 삼차 신경통 등에 의해 발생된다.

최근, 이노우에들은 이(異)통증 (아로디니아) 을 검출할 수 있는, 척수 신경이 손상된 동물 모델을 사용하여, 신경인성 동통에 있어서의 P2X 수용체의 관여를 검증하였다. 그리고, 척수의 미크로글리아 세포에서 발현하는 P2X₄ 수용체를 통하여 신경 상해성의 이상(異常) 동통 (특히 아로디니아) 이 유발되는 것을 발표하였다. (비특허문헌 6 : M.Tsuda et al. (2003) Nature, 424, 778-783, 비특허문헌 7 : Jeffrey A.M. Coull et al. (2005) Nature, 438, 1017-1021, 특허문헌 1 : 미국 특허 공개 20050074819)

따라서, P2X₄ 수용체의 기능을 저해하는 물질은, 침해 수용성 동통, 염증성 동통 및 신경인성 동통에 있어서의 통증 예방제 혹은 치료제로서 기대된다.

한편, 특허문헌 2 (WO 2004/085440) 에는, 다음의 일반식 (A),

(식 중, R₁ 이 할로겐이고, 또한 R₂ 가 수소, 할로겐, 니트로, 시아노, C(O)-OR₃, C(O)-NR₄R₅, SO₂-OR₃, SO₂-NR₄R₅ 이거나 또는 R₁ 이 수소이고, 또한 R₂ 가 할로겐, 니트로, 시아노, C(O)-OR₃, C(O)-NR₄R₅, SO₂-OR₃, SO₂-NR₄R₅ 이다)

로 나타내는 벤조플로-1,4-디아제핀-2-온 유도체가, P2X₄ 수용체 길항 작용을 갖는다는 요지의 보고가 되어 있다.

또 본 발명자들도 1,4-디아제핀-2-온 유도체가, P2X₄ 수용체 길항 작용을 갖는다는 요지를 알아내어, 특허를 출원하였다. (특허문헌 3 : WO 2007/072974, 특허문헌 4 : WO 2007/074940 및 특허문헌 5 : WO 2008/023847)

한편, 1,5-디아제핀 유도체에 관하여, 특허문헌 6 (일본 공개특허공보 평2-304437) 에는, 다음의 식 (C),

로 나타내는 화합물이 기재되어 있다.

그러나 특허문헌 6 에는, 상기 식 (C) 로 나타내는 화합물이 사진용 커플러로서 사용된다는 요지의 기재는 있지만, 이들 약물과 P2X₄ 수용체 길항 작용의 관계를 시사하는 기재는 없다.

본 발명의 목적은 P2X₄ 수용체 길항 작용을 갖는 하기 일반식 (I) 로 나타내는 디아제핀디온 유도체를 제공하는 데에 있다.

즉, 본 발명은, 다음의 일반식 (I),

(식 중, R¹ 은 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 탄소수 2 ∼ 8 의 알케닐기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기 또는 페닐기로 치환된 탄소수 1 ∼ 3 의 알킬기를 나타내고,

R² 및 R³ 은 동일하거나 또는 상이하여도 되는 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 할로겐 원자, 하이드록실기, 니트로기, 시아노기, 아미노기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬아미노기, 탄소수 2 ∼ 8 의 디알킬아미노기, 탄소수 2 ∼ 8 의 아실아미노기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 2 ∼ 8 의 아실아미노기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술포닐아미노기, 카르복실기, 탄소수 2 ∼ 8 의 아실기, 알콕시카르보닐기 (알콕시 부분의 탄소수는 1 ∼ 8), 카르바모일기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬티오기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술피닐기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술포닐기, 또는 술파모일기를 나타내고,

R⁴ 및 R⁵ 는 동일하거나 또는 상이하여도 되는 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기 또는 페닐기로 치환된 탄소수 1 ∼ 3 의 알킬기를 나타내고,

그리고 W 는 치환기를 갖고 있어도 되는 고리 구성 원소로서 질소 원자를 1 ∼ 4 개 함유하는 5 또는 6 원자 고리의 복소 고리를 나타낸다)

로 나타내는 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.

또, 본 발명은 상기 일반식 (I) 로 나타내는 화합물 또는 그 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로서 함유하는 P2X₄ 수용체 길항제에 관한 것이다.

또한, 본 발명은 상기 일반식 (I) 로 나타내는 화합물 또는 그 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로서 함유하는 신경인성 동통의 예방 또는 치료제에 관한 것이다.

다음으로 본 발명을 상세하게 설명한다.

상기 일반식 (I) 로 나타내는 본 발명 화합물에 있어서, R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵ 의 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기로는, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기, i-부틸기, t-부틸기, 펜틸기 또는 헥실기 등을 들 수 있다.

R¹ 의 탄소수 2 ∼ 8 의 알케닐기로는, 알릴기 등을 들 수 있다.

R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵ 의 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기로는, 1 ∼ 3 개의 불소 원자, 염소 원자 혹은 브롬 원자 등의 할로겐 원자에 의해 치환된 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기 또는 t-부틸기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 트리플루오로메틸기, 클로로메틸기, 2-클로로에틸기, 2-브로모에틸기 또는 2-플루오로에틸기 등을 들 수 있다.

R¹, R⁴ 및 R⁵ 의 페닐기로 치환된 탄소수 1 ∼ 3 의 알킬기로는, 벤질기 등을 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기로는, 메톡시기, 에톡시기, 프로폭시기, 이소프로폭시기, 부톡시기, i-부톡시기, t-부톡시기, 펜틸옥시기 또는 헥실옥시기 등을 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기로는, 1 ∼ 3 개의 불소 원자, 염소 원자 혹은 브롬 원자 등의 할로겐 원자에 의해 치환된 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기 또는 t-부틸기 등을 들 수 있고, 바람직하게는 트리플루오로메톡시기, 2-클로로에톡시기, 2-브로모에톡시기 또는 2-플루오로에톡시기 등을 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 할로겐 원자로는, 불소 원자, 염소 원자, 또는 브롬 원자 등을 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬아미노기로는, 메틸아미노기, 에틸아미노기 등을 들 수 있다.

또, R² 및 R³ 의 탄소수 1 ∼ 8 의 디알킬아미노기로는, 디메틸아미노기, 디에틸아미노기 등을 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 탄소수 2 ∼ 8 의 아실아미노기로는, 아세틸아미노기를 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 2 ∼ 8 의 아실아미노기로는, 트리플루오로메틸카르보닐아미노기를 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술포닐아미노기로는, 메틸술포닐아미노기를 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 탄소수 2 ∼ 8 의 아실기로는, 아세틸기를 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 알콕시카르보닐기 (알콕시 부분의 탄소수 1 ∼ 8) 로는, 메톡시카르보닐기, 에톡시카르보닐기 등을 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬티오기로는, 메틸티오기를 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술피닐기로는, 메틸술피닐기를 들 수 있다.

R² 및 R³ 의 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술포닐기로는, 메틸술포닐기를 들 수 있다.

W 의 치환기를 갖고 있어도 되는 고리 구성 원소로서 질소 원자를 1 ∼ 4 개 함유하는 5 또는 6 원자 고리의 복소 고리로는, 테트라졸, 1,2,4-트리아졸, 1,2,3-트리아졸, 1,2,4-옥사디아졸, 피라졸, 이미다졸, 옥사졸, 이속사졸, 피롤, 티아졸, 피리딘, 피롤리딘을 들 수 있다.

W 의 치환기를 갖고 있어도 되는 고리 구성 원소로서 질소 원자를 1 ∼ 4 개 함유하는 5 또는 6 원자 고리의 복소 고리가 갖고 있어도 되는 치환기로는, 메틸기, 에틸기 등의 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 트리플루오로메틸기 등의 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 불소 원자 등의 할로겐 원자, 시아노기, 옥소기, 티옥소기 등을 들 수 있다.

또 상기 일반식 (I) 중의 R² 및 R³ 은, R², R³ 이 치환되어 있는 벤젠 고리에, 동일하거나 또는 상이한 것이 1 ∼ 3 개 존재하고 있어도 된다.

상기 일반식 (I) 의 본 발명 화합물로는, 다음에 나타내는 화합물이 바람직하다.

(1)

W 가 치환기로서 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 할로겐 원자, 시아노기, 옥소기, 티옥소기에서 선택되는 것을 갖고 있어도 되는 테트라졸, 1,2,4-트리아졸, 1,2,3-트리아졸, 1,2,4-옥사디아졸, 피라졸 또는 이미다졸인 상기 일반식 (I) 에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(2)

W 가 치환기로서 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 할로겐 원자, 시아노기에서 선택되는 것을 갖고 있어도 되는 테트라졸, 1,2,4-트리아졸 또는 1,2,3-트리아졸인 상기 일반식 (I) 에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(3)

W 가 5-옥소-1,2,4-옥사디아졸 또는 5-티옥소-1,2,4-옥사디아졸인 상기 일반식 (I) 에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(4)

W 가 테트라졸인 상기 일반식 (I) 에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(5)

R¹ 이 수소 원자 또는 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기인 상기 일반식 (I) 또는 상기 (1) ∼ (4) 중 어느 하나에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(6)

R¹ 이 수소 원자인 상기 일반식 (I) 또는 상기 (1) ∼ (3) 중 어느 하나에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(7)

R⁴ 가 수소 원자이고, R⁵ 가 수소 원자 또는 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기인 상기 일반식 (I) 또는 상기 (1) ∼ (6) 중 어느 하나에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(8)

R⁴ 및 R⁵ 가 모두 수소 원자인 상기 일반식 (I) 또는 상기 (1) ∼ (6) 중 어느 하나에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(9)

R² 가 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 할로겐 원자, 하이드록실기, 니트로기, 시아노기, 아미노기, 카르복실기, 탄소수 2 ∼ 8 의 아실기, 알콕시카르보닐기 (알콕시 부분의 탄소수는 1 ∼ 8) 인 상기 일반식 (I) 또는 상기 (1) ∼ (8) 중 어느 하나에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(10)

R² 가 수소 원자인 상기 일반식 (I) 또는 상기 (1) ∼ (8) 중 어느 하나에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(11)

R³ 이 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 할로겐 원자, 하이드록실기, 니트로기, 시아노기, 아미노기, 카르복실기, 탄소수 2 ∼ 8 의 아실기, 알콕시카르보닐기 (알콕시 부분의 탄소수는 1 ∼ 8) 인 상기 일반식 (I) 또는 상기 (1) ∼ (10) 중 어느 하나에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

(12)

R³ 이 수소 원자인 상기 일반식 (I) 또는 상기 (1) ∼ (10) 중 어느 하나에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.

상기 일반식 (I) 로 나타내는 화합물의 약리학적으로 허용되는 염으로는, 예를 들어 일반식 (I) 의 R², R³ 이 아미노기 등인 경우에는 염산염 등을 들 수 있다. 또한, 일반식 (I) 의 R², R³ 이 카르복실기인 경우에는 나트륨, 칼륨, 리튬 등의 알칼리 금속염을 들 수 있다.

또 본 발명 화합물에는, 시스·트랜스 이성체나 광학 활성체, 라세미체 등의 광학 이성체가 존재하는 경우도 있는데, 모두 본 발명에 포함된다.

다음으로 상기 일반식 (I) 로 나타내는 본 발명 화합물의 합성 스킴을 이하에 나타낸다.

(방법 1) R¹=H 인 경우

(제 1 공정)

(제 2 공정)

(제 3 공정)

(식 중, X 는 브롬 원자 등의 할로겐 원자를 나타내고, W¹ 은 W 와 동일한 것을 나타내고, 그리고 R², R³, R⁴ 및 R⁵ 는 상기와 동일하다)

(제 1 공정)

일반식 (c) 로 나타내는 화합물은, 탄산세슘, 탄산칼륨 등의 염기의 존재하에, 톨루엔, tert-부탄올 등의 반응에 관여하지 않는 용매 중, 팔라듐 촉매 등을 사용한 일반식 (a) 로 나타내는 화합물과 일반식 (b) 로 나타내는 화합물의 크로스 커플링 반응에 의해 얻을 수 있다.

(제 2 공정)

일반식 (d) 로 나타내는 화합물은, THF, 메탄올, 클로로포름, 아세트산 등의 반응에 관여하지 않는 용매 중, 일반식 (c) 로 나타내는 화합물을 철, 염화 제 1 주석, 아연, 또는 팔라듐-탄소 등을 촉매로 하는 접촉 첨가에 의해 환원함으로써 얻을 수 있다.

(제 3 공정)

일반식 (f) 로 나타내는 본 발명 화합물은, 염기의 존재하 또는 비존재하에, 톨루엔, THF 등의 반응에 관여하지 않는 용매 중, 일반식 (d) 로 나타내는 화합물과 일반식 (e) 로 나타내는 화합물을 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 또한, W 가 보호기를 갖는 테트라졸인 경우에는, 화합물 (f) 의 탈보호를 실시함으로써, 상기 일반식 (I) 로 나타내는 발명 화합물 (R¹=H) 로 유도할 수 있다.

(방법 2) R¹≠H 인 경우

(식 중 X 는 브롬 원자, 염소 원자, 요오드 원자 등의 할로겐 원자, 토실 기 또는 메실기를 나타내고, W¹ 은 W 와 동일한 것을 나타내고, 그리고 R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵ 는 상기와 동일하다)

일반식 (h) 로 나타내는 본 발명 화합물은, 수소화나트륨 등의 염기의 존재하에, 디메틸술폭사이드 등의 반응에 관여하지 않는 용매 중에서, 일반식 (f) 로 나타내는 화합물과 일반식 (g) 로 나타내는 화합물을 반응시킴으로써 얻을 수 있다.

(방법 3)

(식 중, Z 는 포르밀기, 시아노기, 카르복실기, 알콕시카르보닐기, 할로겐 원자, 아미노기를 나타내고, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, W 는 상기와 동일하다)

화합물 (i) 에 대해, Z 로 나타내는 부분을 W 로 변환할 수 있는 시약을 작용시킴으로써, 화합물 (j) 를 얻을 수 있다. 예시하면 이하와 같다.

(1) W 가 테트라졸-5-일기인 경우

Z 기가 시아노기인 화합물 (i) 에 트리-n-부틸주석아지드를 반응시키고, 이어서 산으로 처리함으로써 화합물 (j) 를 제조할 수 있다.

(2) W 가 테트라졸-1-일기인 경우

Z 기가 아미노기인 화합물 (i) 에 오르토포름산에틸 및 아지화나트륨을 반응시킴으로써 화합물 (j) 를 제조할 수 있다.

(3) W 가 (1,2,4-트리아졸)-1-일기인 경우

Z 기가 브롬 원자인 화합물 (i) 에 1,2,4-트리아졸을 반응시킴으로써 화합물 (j) 를 제조할 수 있다.

(4) W 가 (1,2,3-트리아졸)-4-일기인 경우

Z 기가 포르밀기인 화합물 (i) 에 염기성 조건하에서 메틸페닐술폰 유도체를 축합시키고, 그에 따라 얻어지는 생성물 (비닐술폰 유도체) 에 아지화나트륨을 반응시킴으로써 화합물 (j) 를 제조할 수 있다.

또 상기 일반식 (I) 로 나타내는 본 발명 화합물도 상기 합성 방법, 후기하는 실시예 이외에, 상기 특허 문헌 및 공지 문헌 등을 참고하여 제조할 수도 있다.

이렇게 하여 얻어진 본 발명 화합물 예를 표 1 ∼ 8 에 나타낸다.

(대표 화합물 I)

(식 중, R², R³ 은 수소 원자이고, R¹, R⁴, R⁵ 및 W 그리고 W 의 치환 위치는 표 1 ∼ 3 에 기재된 바와 같음)

(대표 화합물 Ⅱ)

(식 중, R¹, R², R⁴, R⁵ 및 W 그리고 W 의 치환 위치는 표 4 및 5 에 기재된 바와 같음)

(대표 화합물 Ⅲ)

(식 중, R¹, R², R³, R⁴, R⁵ 및 W 그리고 W 의 치환 위치는 표 6 및 7 에 기재된 바와 같음)

다음으로 본 발명의 약리 효과에 대해 서술한다.

본 발명 화합물의 P2X₄ 수용체 길항 작용을, 이하와 같이 측정하였다.

ATP 수용체 (인간 P2X₄) 를 1321N1 세포에 도입하고, 안정 ATP 수용체 발현계로서 사용하였다. P2X₄ 발현 1321N1 세포를 96 웰 플레이트에 파종하고, 37 ℃, 5 ％ CO₂ 조건하에서 24 시간 배양하여 칼슘 측정에 사용하였다. 칼슘 형광 지시약인 Fura-2 AM 을 칼슘 이미징용 세포외액에 용해시켜, 파종한 세포에 처치하고, 실온에서 45 분간 가만히 정지시킴으로써 세포 내에 fura-2 AM 을 유입시켰다. 측정에는 마이크로 플레이트 리더인 Fluostar optima (BMG Labtech) 를 사용하였다. 크세논 램프로부터 조사되는 광을 340 ㎚ 및 380 ㎚ 의 필터에 각각 투과시키고, 세포에 조사했을 때에 발하는 510 ㎚ 의 형광 F₃₄₀ 및 F₃₈₀ 을 관측하여, 비율값 F₃₄₀/F₃₈₀ 의 변화를 세포 내 칼슘 변화의 지표로 하였다. 측정은 ATP 최종 농도 1 μM 이 되도록 각 웰에 첨가하고, ATP 유발 Ca² ⁺ 응답을 시간 경과적으로 관찰함으로써 실시하였다. 피험 물질의 저해 활성은 피험 물질을 ATP 첨가 15 분간 전처치함으로써 측정하고, 피험 물질 비존재하인 경우와의 비교에 의해 산출하였다.

실시예 17 로부터 명확한 바와 같이 본 발명 화합물은 우수한 P2X₄ 수용체 길항 작용을 나타냈다.

따라서, 상기 일반식 (I) 로 나타내는 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염은, P2X₄ 수용체 길항 작용을 갖는다는 점에서, 침해 수용성 동통, 염증성 동통 및 신경인성 동통에 있어서의 통증의 예방 또는 치료제로서 유용하다고 생각된다. 즉 각종 암에 의한 통증, 당뇨병의 신경 장애에 수반되는 통증, 헤르페스 등의 바이러스성 질환에 수반되는 통증, 변형성 관절증 등의 예방 또는 치료제로서 유용하다. 또, 본 발명의 예방 또는 치료제는 필요에 따라 다른 약제와 병용되어도 되고, 예를 들어 오피오이드 진통약 (모르피네, 펜타닐), 나트륨 채널 차단제 (노보카인, 리드카인), NSAIDs (아스피린, 이부프로펜) 등과의 병용을 들 수 있다. 또, 암성 동통에 사용할 때에는, 화학 요법제 등의 항암제와의 병용을 들 수 있다.

본 발명 화합물은 인간에 대해 경구 투여 또는 비경구 투여와 같은 적당한 투여 방법에 의해 투여할 수 있다.

제제화하기 위해서는, 제제의 기술 분야에 있어서의 통상적인 방법에 의해 정제, 과립제, 산제, 캡슐제, 현탁제, 주사제, 좌약 등의 제형으로 제조할 수 있다.

이들 조제에는, 예를 들어 정제의 경우, 통상적인 부형제, 붕괴제, 결합제, 활택제, 색소 등이 사용된다. 여기서, 부형제로는, 유당, D-만니톨, 결정 셀룰로오스, 포도당 등이, 붕괴제로는, 전분, 카르복시메틸셀룰로오스칼슘 (CMC-Ca) 등이, 활택제로는, 스테아르산마그네슘, 탤크 등이, 결합제로는, 하이드록시프로필셀룰로오스 (HPC), 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 (PVP) 등을 들 수 있다. 주사제의 조정에는 용제, 안정화제, 용해 보조제, 현탁제, 유화제, 무통화제, 완충제, 보존제 등이 사용된다.

투여량은 통상적으로 성인에 있어서는, 주사제로 유효 성분인 본 발명 화합물을 1 일 약 0.01 ㎎ ∼ 100 ㎎, 경구 투여로 1 일 1 ㎎ ∼ 2000 ㎎ 인데, 연령, 증상 등에 의해 증감할 수 있다.

다음으로, 실시예를 들어 본 발명을 더욱 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이들에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

5-[3-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

(1) 3-(1-니트로-2- 나프틸아미노 ) 벤조니트릴

1-니트로-2-나프틸아민 (875 ㎎, 4.65 mmol), 3-브로모벤조니트릴 (846 ㎎, 4.65 mmol), 탄산세슘 (3.03 g, 9.30 mmol), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐 (213 ㎎, 0.23 mmol) 및 (±)-2,2＇-비스(디페닐포스피노)-1,1＇-비나프틸 (217 ㎎, 0.35 mmol) 의 무수 톨루엔 (10 ㎖) 용액을 110 ℃ 에서 16 시간 교반하였다. 방랭 후, 반응 혼합물을 포화 중층수에 붓고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 감압하에 용매 증류 제거하고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (헥산/아세트산에틸=4/1) 에 의해 정제하여, 표제 화합물을 얻었다 (503 ㎎, 수율 37 ％).

(2) 3-(1-아미노-2- 나프틸아미노 ) 벤조니트릴

3-(1-니트로-2-나프틸아미노)벤조니트릴 (1.16 g, 3.99 mmol) 의 메탄올 (20 ㎖) 및 무수 테트라하이드로푸란 (40 ㎖) 용액에 10 ％ 팔라듐-탄소 (220 ㎎) 를 첨가하고, 실온 상압하에서 4 시간 접촉 수소 첨가하였다. 촉매를 여과 분리 후, 감압하에 용매 증류 제거하고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (클로로포름/메탄올=99/1) 에 의해 정제하여, 황색 고체로서 표제 화합물을 얻었다 (968 ㎎, 수율 93 ％).

(3) 5-(3- 시아노페닐 )-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

3-(1-아미노-2-나프틸아미노)벤조니트릴 (968 ㎎, 3.73 mmol) 의 무수 톨루엔 (10 ㎖) 용액에, 말로닐클로라이드 (436 ㎕, 4.48 mmol) 를 빙랭하에 첨가하여 80 ℃ 에서 20 분간, 110 ℃ 에서 10 분간 교반하였다. 방랭 후, 용액부는 포화 중층수에 붓고, 아세트산에틸로 추출 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 반응계에 석출된 고체는 클로로포름에 용해 후, 포화 중층수 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 상기 아세트산에틸 용액 및 클로로포름 용액으로부터 감압하에 용매를 증류 제거하고, 얻어진 미정제물을 합쳐 실리카겔 크로마토그래피 (헥산/아세트산에틸=1/4) 에 의해 정제하였다. 또한, 아세트산에틸로부터 재결정하여, 미황색 결정으로서 표제 화합물을 얻었다 (335 ㎎, 수율 27 ％).

(4) 5-[3-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

5-(3-시아노페닐)-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (150 ㎎, 0.458 mmol) 의 무수 톨루엔 (2 ㎖)-무수 DMF (0.5 ㎖) 용액에, 트리-n-부틸주석아지드 (252 ㎕, 0.916 mmol) 를 첨가하여 110 ℃ 에서 16 시간 교반하였다. 방랭 후, 1 N 염산에 붓고, 클로로포름으로 추출하여, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 감압하에 용매를 증류 제거한 후 크로마토그래피 (클로로포름/메탄올=90/10) 에 의해 정제하고, 추가로 아세트산에틸-n-헥산으로부터 재결정하였다. 감압하 50 ℃ 에서 1 시간 건조시켜, 미황색 분체로서 표제 화합물을 얻었다 (137 ㎎, 수율 78 ％).

실시예 2

5-[3-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온 칼륨염

5-[3-(1H-테트라졸-5-일)페닐]-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (100 ㎎, 0.270 mmol) 의 에탄올 (2 ㎖) 용액에 중탄산칼륨 (27 ㎎, 0.270 mmol) 의 수용액 (0.5 ㎖) 을 첨가하였다. 감압하에 농축 후, 잔류물을 물 (10 ㎖) 에 용해시키고, 클로로포름으로 2 회 세정하였다. 수층을 감압하에 농축 건고시켜, 황색 아모르퍼스로서 표제 화합물을 얻었다 (86 ㎎).

실시예 3

5-[4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

(1) 4-(1-니트로-2- 나프틸아미노 ) 벤조니트릴

실시예 1 (1) 과 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

(2) 4-(1-아미노-2- 나프틸아미노 ) 벤조니트릴

실시예 1 (2) 와 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

(3) 5-(4- 시아노페닐 )-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

실시예 1 (3) 과 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

(4) 5-[4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

실시예 1 (4) 와 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

실시예 4

5-[4-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온 나트륨염

중탄산나트륨을 사용하여, 실시예 2 와 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

실시예 5

1- 메틸 -5-[3-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온 및 1,3-디메틸-5-[3-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

(1) 5-(3- 시아노페닐 )-1- 메틸 -1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온 및 5-(3- 시아노페닐 )-1,3-디메틸-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

5-(3-시아노페닐)-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (98 ㎎, 3 mmol) 을 건조 디메틸술폭사이드 (1 ㎖) 에 용해시키고, 수냉 교반하 50-72 ％ 수소화나트륨 (12 ㎎) 을 첨가하여 실온에서 1 시간 교반하였다. 이것에 요오드화메틸 (0.06 ㎖, 1 mmol) 을 첨가하여 실온에서 4 시간 교반 후, 50-72 ％ 수소화나트륨 (6 ㎎), 및 요오드화메틸 (0.03 ㎖, 0.5 mmol) 을 첨가하여 실온에서 18 시간 교반하였다. 이 반응 혼합물에 냉수를 첨가하여, 아세트산에틸로 추출하고, 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하 증류 제거 후, 잔류물을 아세트산에틸 및 헥산으로 순차 세정하여 5-(3-시아노페닐)-1-메틸-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (28 ㎎, 수율 27 ％) 을 담황색 결정으로서 얻었다. 또, 세액을 감압하 농축 후, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (아세트산에틸/헥산=1/1) 에 의해 정제하여, 5-(3-시아노페닐)-1,3-디메틸-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (9 ㎎, 수율 8 ％) 을 담황색 유상물로서 얻었다.

5-(3- 시아노페닐 )-1- 메틸 -1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

5-(3- 시아노페닐 )-1,3-디메틸-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

(2) 1- 메틸 -5-[3-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

5-(3-시아노페닐)-1-메틸-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온을 사용하여 실시예 1 (4) 와 동일하게 하여 표제 화합물을 얻었다.

(3) 1,3-디메틸-5-[3-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아 제핀-2,4(3H,5H)- 디온

5-(3-시아노페닐)-1,3-디메틸-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온을 사용하여 실시예 1 (4) 와 동일하게 하여 표제 화합물을 얻었다.

실시예 6

5-[2- 클로로 -5-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

(1) 4- 클로로 -3-(1-니트로-2- 나프틸아미노 ) 벤조니트릴

1-니트로-2-나프틸트리플레이트 (1.50 g, 4.67 mmol), 3-아미노-4-클로로벤조니트릴 (1.05 g, 6.87 mmol), 탄산칼륨 (645 ㎎, 4.67 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (162 ㎎, 0.14 mmol) 및 트리페닐포스핀 (65 ㎎, 0.47 mmol) 의 무수 톨루엔 (45 ㎖) 현탁액을 110 ℃ 에서 16 시간 교반하였다. 방랭 후, 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 클로로포름으로 희석하였다. 얻어진 유기 용액을 0.2 N 염산, 포화 중층수, 포화 식염수로 순차 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 감압하에 용매 증류 제거하고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (헥산/아세트산에틸=1/1) 에 의해 정제하여, 표제 화합물을 얻었다 (900 ㎎, 수율 60 ％).

(2) 4- 클로로 -3-(1-아미노-2- 나프틸아미노 ) 벤조니트릴

실시예 1 (2) 와 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

(3) 5-(2- 클로로 -5- 시아노페닐 )-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

실시예 1 (3) 과 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

(4) 5-[2- 클로로 -5-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제 핀-2,4(3H,5H)- 디온

실시예 1 (4) 와 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

실시예 7

5-[2- 클로로 -5-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온 나트륨염

중탄산나트륨을 사용하여 실시예 2 와 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

실시예 8

5-[2- 메틸 -5-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

실시예 6 (1) ∼ (4) 에 기재된 방법과 동일하게 하여 표제 화합물을 얻었다.

실시예 9

5-[2- 메틸 -5-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온 나트륨염

실시예 10

5-[2- 브로모 -5-(1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

실시예 11

5-[3-(2- 메틸 -2H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온 및 5-[3-(1- 메틸 -1H- 테트라졸 -5-일) 페닐 ]-1H- 나프토 [1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)- 디온

5-[3-(1H-테트라졸-5-일)페닐]-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 칼륨염 (123 ㎎, 0.30 mmol) 의 디메틸술폭사이드 (3 ㎖) 용액에 요오드화메틸 (0.09 ㎖, 1.5 mmol) 을 첨가하여 실온에서 64 시간 교반하였다. 반응 혼합물에 1 M 염산을 첨가하여, 아세트산에틸로 추출하고, 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하에 증류 제거하고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (헥산/아세트산에틸=1/2 및 1/3) 에 의해 정제하였다.

이 칼럼 크로마토그래피에 있어서, 헥산/아세트산에틸=1/2 로 용출된 분획으로부터, 미황색 결정의 미정제물의 5-[3-(2-메틸-2H-테트라졸-5-일)페닐]-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온을 얻고, 이것은 아세트산에틸-헥산으로부터의 재결정에 의해 추가로 정제하였다 (57 ㎎, 수율 50 ％).

또, 헥산/아세트산에틸=1/3 로 용출된 분획으로부터, 5-[3-(1-메틸-1H-테트라졸-5-일)페닐]-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온을 백색 결정으로서 얻었다 (18 ㎎, 수율 16 ％).

실시예 12

5-[3-(5-옥소-4H-[1,2,4] 옥사디아졸 -3-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

(1) 5-[3-(N- 하이드록시아미디노 ) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

5-(3-시아노페닐)-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (37 ㎎, 0.11 mmol), 염산하이드록실아민 (76 ㎎, 1.1 mmol) 및 트리에틸아민 (0.16 ㎖, 1.1 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (0.65 ㎖)/메탄올 (1.3 ㎖) 용액을 2 시간 가열 환류하였다. 감압하에 용매 증류 제거 후, 잔류물에 물 (4 ㎖) 을 첨가하였다. 석출된 결정을 여과 채취하여, 물 (2 ㎖) 로 4 회 세정, 50 ℃ 에서 감압 건조시켜, 담회색 결정으로서 표제 화합물을 얻었다 (36 ㎎, 수율 91 ％).

(2) 5-[3-(5-옥소-4H-[1,2,4] 옥사디아졸 -3-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

5-[3-(N-하이드록시아미디노)페닐]-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (36 ㎎, 0.1 mmol) 의 무수 디클로로메탄 (18 ㎖) 현탁액에 피리딘 (0.012 ㎖, 0.15 mmol), 계속해서 클로로탄산페닐 (0.016 ㎖, 0.13 mmol) 을 첨가하여 실온에서 1 시간 반 교반하였다. 반응 혼합물에 냉수를 첨가하여 20 분간 교반하고, 디클로로메탄층을 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 증류 제거 후, 얻어진 미황색 결정을 아세토니트릴 (10 ㎖) 에 현탁하고, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센 (0.03 ㎖, 0.2 mmol) 을 첨가하여 실온에서 15 분간 교반하였다. 감압하에 용매를 증류 제거하고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (클로로포름/메탄올=10/1) 에 의해 정제하여 미황색 결정을 얻었다. 이것을 클로로포름으로 세정하여, 백색 결정으로서 표제 화합물을 얻었다 (20 ㎎, 수율 52 ％).

실시예 13

5-[3-(5- 티옥소 -4H-[1,2,4] 옥사디아졸 -3-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디 아제핀-2,4(3H,5H)- 디온

5-[3-(N-하이드록시아미디노)페닐]-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (310 ㎎, 0.94 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5,4,0]-7-운데센 (561 ㎕, 3.75 mmol) 의 아세토니트릴 (5.7 ㎖) 용액을 빙랭하고, 티오카르보닐디이미다졸 (251 ㎎, 1.41 mmol) 의 아세토니트릴 (6 ㎖) 용액을 첨가하고, 그 후 실온에서 1.5 시간 교반하였다. 반응액을 1 N 염산에 붓고, 클로로포름으로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 감압하에 용매 증류 제거하고, 잔류물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (헥산/아세트산에틸=1/1 ∼ 0/1) 에 의해 정제하여, 표제 화합물을 얻었다 (161 ㎎, 수율 41 ％).

실시예 14

5-[3-(5- 티옥소 -4H-[1,2,4] 옥사디아졸 -3-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온 나트륨염

5-[3-(5-티옥소-4H-[1,2,4]옥사디아졸-3-일)페닐]-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (83 ㎎, 0.20 mmol) 의 에탄올 (8.7 ㎖) 용액에, 0.01 mol/ℓ 수산화나트륨 수용액 (19.5 ㎖) 을 첨가하여 실온에서 10 분간 교반하였다. 반응액을 감압 농축하여, 표제 화합물을 얻었다 (89 ㎎, 정량적).

실시예 15

5-[3-( 옥사졸 -2-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

(1) 1-니트로-N-[3-( 옥사졸 -2-일) 페닐 ]-2- 나프틸아민

1-니트로-2-나프틸트리플레이트 및 3-(옥사졸-2-일)아닐린을 사용하여, 실시예 6 (1) 과 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

(2) N ² -[3-( 옥사졸 -2-일) 페닐 ]나프탈렌-1,2- 디아민

실시예 1 (2) 와 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

(3) 5-[3-( 옥사졸 -2-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

실시예 1 (3) 과 동일한 수법으로 표제 화합물을 얻었다.

실시예 16

5-[3-(1H- 피라졸 -4-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

(1) 5-(3- 브로모페닐 )-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)- 디온

1-니트로-2-나프틸트리플레이트 및 3-브로모아닐린을 출발 원료로서 사용하고, 실시예 6 (1), 실시예 1 (2) 및 실시예 1 (3) 에 기재된 방법과 동일하게 하여 표제 화합물을 얻었다.

(2) 5-[3-(1H- 피라졸 -4-일) 페닐 ]-1H- 나프토[1,2-b][1,4]디아제핀 -2,4(3H,5H)-디온

5-(3-브로모페닐)-1H-나프토[1,2-b][1,4]디아제핀-2,4(3H,5H)-디온 (96 ㎎, 0.25 mmol), 1-(tert-부톡시카르보닐)-1H-피라졸-4-보론산피나콜에스테르 (88 ㎎, 0.30 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐 (0) (15 ㎎, 0.013 mmol), 2 M 탄산칼륨 수용액 (0.38 ㎖), 톨루엔 (7 ㎖) 및 에탄올 (3 ㎖) 혼합물을 질소 분위기하에 4 시간 가열 환류하였다. 불용물을 여과 분리하고, 여과액을 아세트산에틸로 희석하고, 물, 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압하 증류 제거하여, 갈색 결정 125 ㎎ 을 얻었다. 이것을 아세트산에틸, 헥산, 계속해서 클로로포름으로 세정하여, 회색 결정으로서 표제 화합물을 얻었다 (65 ㎎, 수율 72 ％).

실시예 17

(시험 방법)

ATP 수용체 (인간 P2X₄) 를 1321N1 세포에 도입하고, 안정 ATP 수용체 발현계로서 사용하였다. P2X₄ 발현 1321N1 세포를 96 웰 플레이트에 파종하고, 37 ℃, 5 ％ CO₂ 조건하에서 24 시간 배양하여 칼슘 측정에 사용하였다. 칼슘 형광 지시약인 Fura-2 AM 을 칼슘 이미징용 세포외액에 용해시켜, 파종한 세포에 처치하고, 실온에서 45 분간 가만히 정지시킴으로써 세포 내에 fura-2 AM 을 유입시켰다. 측정에는 마이크로 플레이트 리더인 Fluostar optima (BMG Labtech) 를 사용하였다. 크세논 램프로부터 조사되는 광을 340 ㎚ 및 380 ㎚ 의 필터에 각각 투과시켜, 세포에 조사했을 때에 발하는 510 ㎚ 의 형광 F₃₄₀ 및 F₃₈₀ 을 관측하여, 비율값 F₃₄₀/F₃₈₀ 의 변화를 세포 내 칼슘 변화의 지표로 하였다. 측정은, ATP 최종 농도 1 μM 이 되도록 각 웰에 첨가하고, ATP 유발 Ca² ⁺ 응답을 시간 경과적으로 관찰함으로써 실시하였다. 피험 물질의 저해 활성은 피험 물질을 ATP 첨가 15 분간 전처치함으로써 측정하고, 피험 물질 비존재하인 경우와의 비교에 의해 산출하였다.

(시험 결과)

따라서, 표 8 에 기재된 바와 같이 본 발명 화합물은, 우수한 P2X₄ 수용체 길항 작용을 갖는 것이 판명되었다.

Claims

다음의 일반식 (I),

(식 중, R¹ 은 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 탄소수 2 ∼ 8 의 알케닐기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기 또는 페닐기로 치환된 탄소수 1 ∼ 3 의 알킬기를 나타내고,
R² 및 R³ 은 동일하거나 또는 상이하여도 되는 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 할로겐 원자, 하이드록실기, 니트로기, 시아노기, 아미노기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬아미노기, 탄소수 2 ∼ 8 의 디알킬아미노기, 탄소수 2 ∼ 8 의 아실아미노기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 2 ∼ 8 의 아실아미노기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술포닐아미노기, 카르복실기, 탄소수 2 ∼ 8 의 아실기, 알콕시카르보닐기 (알콕시 부분의 탄소수는 1 ∼ 8), 카르바모일기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬티오기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술피닐기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬술포닐기, 또는 술파모일기를 나타내고,
R⁴ 및 R⁵ 는 동일하거나 또는 상이하여도 되는 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기 또는 페닐기로 치환된 탄소수 1 ∼ 3 의 알킬기를 나타내고,
그리고 W 는 치환기를 갖고 있어도 되는 고리 구성 원소로서 질소 원자를 1 ∼ 4 개 함유하는 5 또는 6 원자 고리의 복소 고리를 나타낸다)
로 나타내는 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항에 있어서,
W 가 치환기로서 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 할로겐 원자, 시아노기, 옥소기, 티옥소기에서 선택되는 것을 갖고 있어도 되는 테트라졸, 1,2,4-트리아졸, 1,2,3-트리아졸, 1,2,4-옥사디아졸, 피라졸 또는 이미다졸인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항에 있어서,
W 가 치환기로서 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 할로겐 원자, 시아노기에서 선택되는 것을 갖고 있어도 되는 테트라졸, 1,2,4-트리아졸 또는 1,2,3-트리아졸인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항에 있어서,
W 가 5-옥소-1,2,4-옥사디아졸 또는 5-티옥소-1,2,4-옥사디아졸인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항에 있어서,
W 가 테트라졸인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
R¹ 이 수소 원자 또는 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
R¹ 이 수소 원자인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
R⁴ 가 수소 원자이고, R⁵ 가 수소 원자 또는 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
R⁴ 및 R⁵ 가 모두 수소 원자인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
R² 가 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 할로겐 원자, 하이드록실기, 니트로기, 시아노기, 아미노기, 카르복실기, 탄소수 2 ∼ 8 의 아실기, 알콕시카르보닐기 (알콕시 부분의 탄소수는 1 ∼ 8) 인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
R² 가 수소 원자인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³ 이 수소 원자, 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알킬기, 1 ∼ 3 의 할로겐 원자로 치환된 탄소수 1 ∼ 8 의 알콕시기, 할로겐 원자, 하이드록실기, 니트로기, 시아노기, 아미노기, 카르복실기, 탄소수 2 ∼ 8 의 아실기, 알콕시카르보닐기 (알콕시 부분의 탄소수는 1 ∼ 8) 인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
R³ 이 수소 원자인 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염.
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로서 함유하는 P2X₄ 수용체 길항제.
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 기재된 디아제핀디온 유도체 또는 그 약리학적으로 허용되는 염을 유효 성분으로서 함유하는 신경인성 동통의 예방 또는 치료제.