KR20090067135A

KR20090067135A - 계피 및 복령 조성물 및 그의 용도

Info

Publication number: KR20090067135A
Application number: KR1020097001284A
Authority: KR
Inventors: 웨이 샤오; 샹 링 다이; 야 링; 젠 중 왕; 유 안 비; 젠 콴 왕
Original assignee: 지앙수 카니온 파마수티컬 씨오., 엘티디.
Priority date: 2006-10-18
Filing date: 2007-10-17
Publication date: 2009-06-24
Anticipated expiration: 2027-10-17
Also published as: CA2659442C; MY164475A; CN101495129A; WO2008090410A2; HUE035045T2; EP2073825A2; WO2008090410A3; EP2073825B1; CN101495129B; JP5328656B2; US20100183660A1; WO2008090410A4; JP2010506899A; US8067040B2; EP2073825A4; KR101545356B1; CA2659442A1

Abstract

본 발명은 중국 한약재 계피(Ramulus cinnamomi) 및 복령(중국명: 구이즈히 및 풀링)을 포함하는 조성물을 제공하며, 상기 조성물은 향상된 크로마토그래피 방법으로부터 얻은 핑거프린트 특성으로 정의된다. 본 발명은 이러한 조성물의 다양한 용도를 제공한다.

Description

계피 및 복령 조성물 및 그의 용도{Cinnamomi and poria composition and uses thereof}

본 발명은 2006년 10월 18일 출원된 미국 가출원 60/829,945호를 우선권으로 한다. 앞의 출원의 내용 및 기재내용은 본 출원의 참고문헌으로 포함된다.

본 발명은 중국 한약(herbal medicine) 계피(Ramulus cinnamoimi) 및 복령(Poria cocos)(중국 명칭: 구이즈히 및 풀링)을 포함하는 조성물의 제조 및 사용에 관한 것이다.

전통 중국 한약은 인체 질병을 치료하기 위해 허브 제제를 이용한다. 일부 경우에서, 단일 허브 또는 허브 유도체가 사용된다. 그러나, 보다 흔히, "제제" 또는 몇 개의 특정 허브의 특정 조합물이 투여된다. 이하의 5개 허브 물질은 2000년 이상 동안 전통 중국 의약에서 사용되어 왔다. 이들은 많은 역사적 중국 의학 교과에 기록되어 있으며 현대 과학 문헌에 공개된 다수의 논문에서 인용되어 있다.

일반명 라틴 명칭 중국 명칭

계피 라물루스 신나모미(Ramulus cinnamoimi) 구이즈히

(Cassia Twig)

복령 Poria cocos 풀링

복숭아 씨 세멘 페르시카애(Semen persicae) 타오 렌

백 목단 뿌리 라딕스 파에오니아애 알바 바이 사오

(Radixpaeoniae alba)

나무 목단 수피 코르텍스 모우탄 무 단 피

(Cortex moutan)

계피는 신나모늄 카시아 프레슬 (Cinnamomum cassia Pres1) (라우라세아애(Lauraceae)과)의 건조된 어린 줄기이다. 이 식물은 봄 또는 여름에 수집된다. 이것은 수집되고 잎을 제거한 후에 태양에서 건조된다. 이것은 조각으로 잘라질 수 있다. 의약 제제는 원통형 몸체, 다분지, 30-75 cm 길이이고 직경 0.3-1 ㎝의 두꺼운 말단을 갖는 것으로 한다. 이것은 표면이 적갈색이고, 종 방향으로 줄이 있고, 미세한 주름과 잎으로 점무늬가 있고 줄기 또는 출아흔(bud scar)이 있다. 경질 및 연질이고, 쉽게 부서진다. 조각의 경우, 2-4 mm 두께이고, 표면을 잘라보면 수피 영역에 적갈색을 나타내며, 나무 부분에서는 황백색 내지 담황색-갈색을 나타낸다. 이것은 특징적인 방향취(aromatic odor)를 가지며, 단맛 또는 약간 자극성이다(특히 수피 부분에서). 의약 제제는 가시적인 불순물을 갖지 않는 계피의 깨끗한 긁어낸 부분이다. 계피의 중요한 성분은 신남알데히드 및 신남산이다.

복령은 진균인, 포리아 코코스(Poria cocos)(폴리포라세아애(Polyporaceae))의 건조된 균핵이다. 이 식물은 7월 내지 9월에 수집된다. 수집 후, 쌓아 펼쳐서 표면에 주름이 생기고 내부 수분이 증발될 때까지 공기 건조를 반복하였다. 전체 건조된 균핵은 "풀링게(Fulingge)"로 알려져 있다. 이 신선한 균핵을 건조하기 전에 벗겨내면, 분리된 부분은 "풀링피(Fulingpi)" (박리) 및 "풀링콰이(Fulinkuai)"(몸통부분)이라 부른다.

외피는 얇고 거칠며, 갈색 내지 흑갈색이고, 눈에 띄게 주름져있고 또 줄무늬를 갖는다. 조직은 딱딱하고 치밀하다. 무취이고, 약한 맛을 띄며 씹으면 점착성이 된다. 의약 제제는 눈에 띄는 불순물을 갖지 않는 복령의 깨끗한 단편이다. 그의 중요한 활성 성분은 파크만(Pachman) 및 파킴산(pachymic acid)이다.

다수의 미국 특허 및 문헌은 계피, 복령 등과 같은 허브로부터 치료 조성물을 구성하는 방법을 개시하였다. 중국의 다수의 연구자는 특정의 계피 및 복령 조성물을 사용한 동물 연구 또는 임상 연구를 보고하였다.

미국특허 6,093,403호에서, 20 중량% 이하의 복령 추출물로 구성된 제제는 당 밸런스(balance) 상의 질병, 당뇨병 및 협심증과 같은 혈액 순환 질병을 치료하거나 예방하기 위해 사용된다.

복령(Poria cocos wolf)은 심혈관, 뇌혈관 질환, 알츠하이머 및 우울증을 치료하기 위해 사용된다. 복령을 20중량% 이하로 함유하는 조성물은 미국특허 5,589,182호에 기재되어 있다.

헤(He) 일행은 100개 사례의 부인과질병, 즉 자궁내막의 비정규질출혈에 의해 유발된 이상 자궁 출혈, 만성 골반 염증, 생리통 및 소형 벽속 자궁근육 종양(intramural hysteromyoma)에서 계피 및 복령 조성물의 임상 연구에 대하여 1994년 논문을 발표하였다. 다른 의약 제제(계피 및 복령의 볼루스, BCP)로 처리된 50개의 사례와 비교할 때, 다수의 증상 및 신체적 징후를 기초로 한 관찰은 2개 그룹 사이에 현저한 차이를 나타내었다.

시(Shi) 일행은 2000년에 자궁근육종양에 걸린 60명의 환자에서 계피 및 복령의 치료 효과를 보고하였다. 환자들은 신체적 부인과 검사, 초음파 검사 및 헤파토크롬(hepatochrome) 시험을 받았다. 시 일행의 연구는 91.7%의 효율을 보고하였고, 그 중 사례의 10%는 현저한 개선을 나타내었다. 상기 치료의 효능은 종양이 3-5 cm 감소하고 또 확대된 월경 유량이 50% 이상 감소하면 "현저한 개선"으로 정의되었다; 또는 종양이 2-3 cm 감소하고 월경 유량이 25% 이상 감소하면 "개선"으로 정의되었다.

도 1은 본 명세서에 기재된 계피 및 복령 캡슐 조성물의 HPLC 핑거프린트를 도시한다.

본 발명은 상술한 질병과 같은 다수의 질병의 증상을 완화하는데 효과적일 수 있는 계피 및 복령을 포함하는 허브 조성물을 제공한다. 중국 한약에서 더욱 전통적인 실시와 대조적으로, 본 발명은 계피 및 복령의 유효 성분을 더 잘 보존할 수 있는 최신 기술에 의해 제조한다.

본 출원을 통하여, 다수의 문헌이 인용되고 있으며 이들 문헌에 대한 전체 인용사항은 특허청구범위 앞에 있는 명세서의 말미에 참고서적으로 포함되어 있다. 이들 문헌의 내용은 본 발명이 기재되고 특허청구범위를 작성하는 날 기준으로 당업자에게 공지된 기술을 충분히 기재하기 위하여 본 출원에 참고문헌으로 포함된다.

발명의 요약

본 발명은 중국 한약 계피 및 복령(중국명: 구이즈히 및 풀링)을 포함하는 조성물을 제공한다. 일 양태로서, 상기 허브 조성물은 본 명세서에 참고문헌으로 포함된 미국특허 7,052,700호에 기재된 바와 같이 캡슐로 제형화된다.

본 발명의 허브 조성물은 12개 피이크를 나타내는 HPLC 핑거프린트(fingerprint)에 의해 정의된다. 메탄올을 사용하여 허브 조성물을 추출하고 파에오니플로린(paeoniflorin)을 기준으로 하여 분석하면, 상기 12개 피이크는 다음과 같은 특징을 갖는다:

일 양태로서, 본 발명은 a) 계피 및 복령을 포함하는 허브 조성물을 적합한 유기 용매로 추출하는 단계; 및 b) 크로마토그래피 분석을 실시하는 단계를 포함하는 방법에 처리될 때 12개 피이크를 생성하는, 계피 및 복령을 포함하는 허브 조성물을 제공한다. 파에오니플로린과 대조한 피이크 1-12에 대한 상대적 체류 시간 범위는 각각 0.209-0.314, 0.456-0.683, 0.733-0.999, 0.871-1.306, 0.921-1.382, 0.968-1.451, 1.009-1.514, 1.058-1.587, 1.152-1.728, 1.69-2.536, 1.771-2.657, 및 1.943-2.915 다.

다른 양태로서, 본 발명의 허브 조성물은 또한 파에오니플로린 및 파에오놀을 포함한다. 바람직하게는, 1.26~1.90% 파에오니플로린 및 0.71~1.07% 파에오놀이 존재한다.

다른 양태로서, 본 발명은 (a) 복령 분말을 준비하는 단계; (b) 단피(Cortex moutan)의 추출물을 준비하는 단계; (c) 계피 추출물을 준비하는 단계; (d) 백작약(Radix paeoniae alba), 도인(Semen persicae) 및 복령의 추출물을 준비하는 단계; (e) 상기 단계(b)-(d)로부터 얻은 추출물을 조합하는 단계; (f) 복령 분말을 상기 단계(e)에서 얻은 추출물과 혼합하여 미세 분말을 생성하는 단계; 및 (g) 상기 미세 분말을 단피와 계피의 추출물을 포함하는 봉입 물질과 혼합하는 단계를 포함하는 방법에 의해 생성된 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 (a) 복령 분말을 준비하는 단계; (b) 단피(Cortex moutan)의 추출물을 준비하는 단계; (c) 계피 추출물을 준비하는 단계; (d) 백작약(Radix paeoniae alba), 도인(Semen persicae) 및 복령의 추출물을 준비하는 단계; (e) 상기 단계(b)-(d)로부터 얻은 추출물을 조합하는 단계; (f) 복령 분말을 상기 단계(e)에서 얻은 추출물과 혼합하여 미세 분말을 생성하는 단계; 및 (g) 상기 미세 분말을 단피와 계피의 추출물을 포함하는 봉입 물질과 혼합하는 단계를 포함하는, 계피 및 복령을 포함하는 조성물의 제조방법을 제공한다.

본 발명은 또한 약제학적으로 허용되는 담체 및 본 명세서에 기재된 허브 조성물을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 일차 생리통, 이차 생리통, 이상 자궁출혈, 만성 골반 염증, 및 소형 벽속 자궁근육 종양으로 구성된 군으로부터 선택된 질병 또는 상태를 치료하기 위한 의약의 제조에서 본 명세서에 기재된 조성물의 용도를 제공한다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 중국 한약재(중국 허브 약재) 구이즈히 및 풀링(계피 및 복령)을 포함하는 조성물을 제공한다. 일 양태로서, 상기 허브 조성물은 본 명세서에 참고문헌으로 포함된 미국특허 7,052,700호에 기재된 바와 같이 캡슐로 제형화될 수 있다.

일 양태로서, 본 발명은 계피 및 복령을 포함하는 허브 조성물을 적합한 유기 용매를 사용하여 추출하는 단계 및 크로마토그래피 분석을 실시하는 단계를 포함하는 핑거프린트 방법에 의해 얻은 12-피이크 핑거프린트(도 1)에 의해 정의되는, 계피 및 복령을 포함하는 허브 조성물을 제공한다. 일 양태로서, 상기 크로마토그래피 분석은 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)이다. 일반적으로, 본 발명의 허브 조성물은 유기 용매 메탄올을 사용하여 추출된 다음 당업자에게 공지된 과정에 따른 표준 파에오니플로린에 처리된다.

파에오니플로린과 비교한 피이크 1, 8, 9 및 12에 대한 상대적 피이크 영역 범위는 0.25-0.89, 0.69-1.5, 0.3-0.85, 및 1.56-3.06 이다.

파에오니플로린과 비교한 피이크 1-12에 대한 상대적 체류 시간 범위는 0.209-0.314, 0.456-0.683, 0.733-0.999, 0.871-1.306, 0.921-1.382, 0.968-1.451, 1.009-1.514, 1.058-1.587, 1.152-1.728, 1.69-2.536, 1.771-2.657, 및 1.943-2.915 이다.

본 발명의 허브 조성물은 또한 파에오니플로린 및 파에오놀을 더 포함한다.일 양태로서, 1.26~1.90% 파에오니플로린 및 0.71~1.07% 파에오놀이 존재한다.

본 발명은 본 명세서에 기재된 바와 같은 허브 조성물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 일반적으로, 허브 조성물은 표준 과정에 따라서 환약, 캡슐, 정제, 현탁액 또는 시럽으로 제형화될 수 있다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 담체를 포함할 수 있다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용되는 담체"는 비독성, 불활성 고체, 반 고체 또는 액체 충전제, 희석제, 캡슐화 물질 또는 제제를 의미한다. 약제학적으로 허용되는 담체로서 사용될 수 있는 물질의 대표적인 예는 락토오스, 글루코오스 및 수크로오스와 같은 당; 옥수수 녹말 및 감자 녹말과 같은 녹말; 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 및 셀룰로오스 아세테이트와 같은 셀룰로오스 및 그의 유도체; 맥아; 젤라틴; 활석; 코코아 버터 및 좌약 왁스와 같은 부형제; 땅콩유, 면실유, 잇꽃오일, 참기름, 올리브유, 옥수수 오일, 및 대두유와 같은 오일; 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜; 에틸 올레에이트 및 에틸 라우레이트와 같은 에스테르; 한천; 수산화마그네슘 및 수산화 알루미늄과 같은 완충제; 파이로겐 유리 물; 등장 염수; 링거액; 에틸 알코올; 및 포스페이트 완충 용액뿐만 아니라 다른 비독성 혼화성 윤활제, 예컨대 나트륨 라우릴 설페이트 및 마그네슘 스테아레이트 뿐만 아니라 착색제, 이완제, 코팅제, 감미제, 향미제 및 방향제, 보존제 및 산화방지제가 허브 조성물의 사용에 따라 본 발명의 조성물에 존재할 수 있다.

본 발명은 기재된 허브 조성물의 유효량을 환자에 투여하는 단계를 포함하는 질병 또는 장애를 갖는 환자를 치료하는 방법을 제공한다. 물질 또는 조성물의 "유효량"은 소망하는 생물학적 반응을 유발하는데 필요한 양이다. 허브 또는 허브 요법의 활성 성분의 유효량은 특정 표시 및/또는 증상을 감소시키는데 필요한 양이다. 당해 분야의 숙련자는 통상의 방법 및 수법을 통하여 본 발명의 허브 조성물의 유효량을 용이하게 결정할 수 있을 것이다.

본 발명의 허브 조성물은 다양한 질병 또는 장애를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 미국 특허 7,052,700호에는 다수의 출원이 논의되어 있다. 예컨대, 계피 및 복령 캡슐은 일차 또는 이차 생리통, 자궁내막의 비정규질출혈에 의해 유발된 이상 자궁 출혈, 복부 매스에 의한 만성 골반 염증 또는 소형 벽속 자궁근육 종양(intramural hysteromyoma) 및 다수의 다른 공통되는 골반 장애를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 다른 약리학적 연구를 위하여, 본 발명의 허브 조성물을 사용한 전임상 연구뿐만 아니라 임상 연구가 미국특허 7,052,700호에 기재된 바와 같이 실시될 수 있다.

바람직하게는, 본 발명의 발명적 약제학적 조성물은 경구적으로 투여될 수 있다. 본 발명의 다른 양태로서, 약제학적 조성물은 점막에 예컨대 흡입 또는 주사에 의해 전달될 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 약제학적 조성물은 인간 또는 다른 동물에 경구적으로, 직장으로, 비경구적으로, 수조내(intracisternally), 질내, 복강내, 국소적으로 (분말, 연고 또는 점적제로서) 투여될 수 있다.

일반적으로 기재된 본 발명은 본 발명의 특정 요지 및 양태를 예시하기 위해서만 포함되는 이하의 실시예를 참조하여 용이하게 이해될 수 있으며 본 발명을 한정하는 의도가 아니다.

실시예 1

계피 및 복령 캡슐

본 발명은 캡슐 형태의 계피 및 복령을 포함하는 허브 조성물(계피 및 복령 캡슐)을 제공한다. 계피 및 복령 캡슐의 제조 방법은 본 명세서에 참고문헌으로 포함되어 있는 미국특허 7,052,700호에 기재되어 있다. 계피 및 복령 캡슐은 약간 쓴 맛을 갖는 황갈색 과립을 함유한다. 일 양태로서, 0.31 g의 과립을 함유하는 각 캡슐은 실온에서 24개월 저장될 수 있다.

일 양태로서, 계피 및 복령 캡슐은 이하에 기재된 과정에 의해 생성될 수 있다:

단계 1: 복령을 계량한다(50% - 90%의 제형 양)

단계 2: 복령을 미세 분말로 분쇄하고 100-메쉬 체를 통과시킨다.

단계 3: 복령 분말을 마이크로파로 멸균시킨다. 이것을 복령 분말로 표시한다.

단계 4: 단피(Cortex moutan)를 계량한다.

단계 5: 단피를 증기 증류에 의해 추출한다.

단계 6: 액체 증류물을 수집한다. 액체 증류물을 냉장하고, 여과하며 또 냉각 건조시켜 추출을 달성한다. 건조된 추출물을 파에오놀로 지칭한다.

단계 7: 추출된 원료 물질을 저장한다(고체 잔류물 I).

단계 8: 상기 고체 잔류물 I을 80~95% 에탄올을 사용하여 2회 추출(처음에는 3~5배의 부피 및 두 번째에는 2~4배의 부피)한다. 매회 1~3시간 동안 끓인다.

단계 9: 에탄올 추출물을 조합한다. 이것은 추출물 I이다.

단계 10: 고체 잔류물을 물로 2회 추출한다(첫 회는 5~7배 부피이고 두 번 째는 3~5배 부피임). 매 회 1~3시간 동안 끓인다.

단계 11: 수성 추출물을 조합한다. 이것은 추출물 II이다.

단계 12: 계피를 계량한다.

단계 13: 증기 증류에 의해 휘발성 오일을 추출한다. 휘발성 오일의 수확물을 수집한다.

단계 14: 추출된 원료 물질을 저장한다(고체 잔류물 II).

단계 15: 상기 고체 잔류물 II을 80~95% 에탄올을 사용하여 2회 추출(처음에는 3~5배의 부피 및 두 번째에는 2~4배의 부피)한다. 매회 1~3시간 동안 끓인다.

단계 16: 에탄올 추출물을 조합한다. 이것은 추출물 III이다.

단계 17: 상기 고체 잔류물을 물로 2회 추출한다(첫 회는 5~7배 부피이고 두 번 째는 3~5배 부피임). 매 회 1~3시간 동안 끓인다.

단계 18: 수성 추출물을 조합한다. 이것은 추출물 IV이다.

단계 19: 백작약(Radix paeoniae alba), 도인(Semen persicae) 및 복령을 계량한다(10% ~50%의 제형 양).

단계 20: 80~95% 에탄올 3 ~ 5배량을 부가하고 실온에서 20~40분간 방치한 다음 1~3시간 동안 끓인다.

단계 21: 상기 고체를 다시 에탄올을 사용하여 2 ~ 4회 추출하고, 1~3 시간 동안 비등시킨다.

단계 22: 에탄올 추출물을 조합한다. 이것은 추출물 V이다.

단계 23: 상기 고체 잔류물을 물로 2회 추출한다(첫 회는 5~7 배 부피이고 또 두 번째는 3 ~ 5배 부피임). 매회 1~3 시간 동안 끓인다.

단계 24: 수성 추출물을 조합한다. 이것은 추출물 VI이다.

단계 25: 추출물 I(단계 9), III (단계 16) 및 V (단계 22)를 조합한다. 진공하에서 에탄올이 더 이상 향을 내지 않을 때까지 농축시킨다. 이것은 액체 A이다.

단계 26: 추출물II (단계 11), IV(단계 18) 및 VI (단계 24)를 조합한다. 진공하에서 농축시킨다. 이것은 액체 B이다.

단계 27: 액체 A 및 B를 조합한다. 상대적 밀도가 1.15 ~ 1.35 (60~ 90℃)에 달할 때까지 진공하에서 농축시킨다. 농축된 액체 추출물은 반고체 추출물로 표시한다.

단계 28: β-시클로덱스트린을 측량하고 2~3배의 물에 부가한다. β-시클로덱스트린 용액을 50~70℃로 가열한다.

단계 29: 단계 6으로부터의 전체 파에오놀 추출물을 4~6 배의 80~95% 에탄올에 용해시킨다.

단계 30: 파에오놀 용액을 β-시클로덱스트린 용액에 부가한다.

단계 31: 10~30분간 분쇄한다.

단계 32: 12~36 시간 동안 냉장고에 둔다.

단계 33: 진공하에서 여과한다.

단계 34: 40~60℃에서 건조시킨다. 생성한 백색 분말은 봉입 기질 I이다.

단계 35: β-시클로덱스트린을 계량하고 4~6배의 10~30% 에탄올 용액에 부가한다. 단계 13으로부터 얻은 전체 휘발성 오일을, 연속적인 교반하에서 β-시클로덱스트린 용액에 부가한다.

단계 36: 20~40분간 계속 분쇄한다.

단계 37: 이어 냉장고에서 12~36 시간 동안 둔다.

단계 38: 진공하에서 여과한다.

단계 39: 40~60℃에서 건조시킨다. 생성한 백색 분말은 봉입 기질 II이다.

단계 40: 복령 분말을 전체 반고체 추출물과 혼합한다.

단계 41: 상기 혼합물을 70~100℃에서 건조시키고 미세 분말로 분쇄한다.

단계 42: 미세 분말 I을 봉입 물질 I 및 봉입 물질 II와 혼합한다.

단계 43: 50~80% 에탄올 용액을 부가하여 반죽 같은 덩어리를 만든다.

단계 44: 상기 습윤 물질을 16~24 메쉬 체를 통과시켜 과립을 얻는다.

단계 45: 40~60℃에서 과립을 건조시킨다.

단계 46: 상기 건조된 과립을 다시 체를 통과시킨다.

단계 47: 건조된 과립을 잘 혼합한다. 이것은 최종 과립이다.

기술적 요건

(1) 복령 미세 분말은 100 메쉬 스크린에 의해 스크리닝할 필요가 있다(내경 150±6.6㎛).

(2) 천연 파에오놀의 농도는 90% 이상이어야 한다.

(3) 압축은 진공 조건하에서 실시되어야 한다.

(4) 휘발성 물질은 신남알데히드의 존재에 대해 조사되어야 한다.

(5) 재료 물질 균형은 ±5% 이어야 한다.

품질 관리

크림상 추출물: 크림상 추출물은 어두운 갈색이다. 이것의 상대적 밀도는 1.15 ~1.35 (60~70℃)이어야 하고 파에오니플로린의 함량은 1.36~2.04%이어야 한다.

복령을 혼합한 후 연질 분말: 약간의 쓴맛을 갖고 황갈색임. 미생물 제한: 세균의 수는 5000 엔트리/g를 초과할 수 없다; 진균은 100 엔트리/g를 초과할 수 없다; 생존 진드기(acarid), 진드기 알 또는 대장균은 검출되지 않아야 한다. 파에오니플로린의 함량: (1.23~0.87%). (1.23~1.87%).

최종 과립: 6.0% 이하의 물 함량을 갖는 황갈색.

캡슐: 깨끗하고, 점착성이 없거나 절단된 형태. 함량차이는 ±10% (0.31 g/캡슐) 이하이어야 한다. 용해 시간은 30분 이내이다. 물 함량은 7.0% 이하이어야 한다. 파에오니플로린의 함량은 1.26~1.90%이고 파에오놀 함량은 0.71~1.07% 이다.

실시예 2

계피 및 복령 캡슐의 핑거프린팅

시험은 HPLC 방법(Chinese Pharmacopeia 2000 Ed, Vol. One, AppendixVI D) 및 핑거프린트 요건에 따라서 실시하였다.

HPLC 조건 및 시스템 적합성

Agilent 1100 액체 크로마토그래프; Alltime C18 5 ㎛, 250 mm x 4.6 mm 칼럼. 이동상 A는 0.1% 인산 및 5% 아세토니트릴 수용액을 함유한다; 이동상 B는 0.1% 인산 및 50% 아세토니트릴 수용액을 함유한다. 유동 속도: 1 ml/분; 검출 파장: 230 nm. 파에오니플로린의 피이크를 기본으로 하여, 칼럼의 이론적 플레이트의 갯수는 6000 이상이어야 한다. 구배 용출 프로그램은 다음과 같이 진행한다:

시간 (분) A % B%

0 100 0

70 0 100

기준 용액의 제조

특정 양의 파에오니플로린 표준 기준을 정확하게 계량한 다음 적합한 양의 메탄올을 부가하여 50 ㎍/ml의 용액을 만들었다.

샘플 제조

중량을 달리하여 샘플의 함량을 취하고 완전히 혼합하고 미세 분말로 분쇄한다. 약 0.25 g의 혼합물을 정확하게 계량하고 25 ml의 50% 메탄올을 부가한다. 이 혼합물을 30분간 초음파 처리한 다음 여과한다. 여액의 제1 부분을 제거한다. 나머지 여액을 시험 용액으로 수집한다.

분석

10 ㎕의 각 기준 용액 및 시험 용액을 HPLC 시스템에 주사하고 분석 과정을 실시하였다.

결과

도 1 및 표 1에 나타낸 바와 같이, 13개 피이크(번호 1-12 및 표준, S)을 검출하였고, 이들의 상대적 체류 시간 범위를 기재하였다. 또한, 피이크 1, 8, 9 및 12는 상대적 피이크 영역(표 1)의 범위를 기재하였다. 각 상세사항은 계피 및 복령 조성물의 많은 뱃치로부터 얻은 HPLC에 의한 조합된 분석을 기본으로 하였다.

제시된 결과에 따르면, 계피 및 복령 조성물의 뱃치의 HPLC 크로마토그램은 13개의 특징적인 피이크를 가져야 한다. 13개 피이크의 상대적 체류 시간 및 피이크 1, 8, 9 및 12의 상대적 피이크 영역은 기재된 범위이어야 한다. 이러한 대조를 통하여, 계피 및 복령 조성물의 재현성 및 내부 품질이 제어될 수 있고 확실하게 될 수 있다. 계피 및 복령 캡슐의 10개의 상이한 뱃치로부터 얻은 HPLC 데이터는 이하에 제시된 바와 같은 핑거프린트 특성을 나타냄이 확인되었다.

본 명세서에 제시된 핑거프린트 특성은 미국 특허 7,052,700호에 나타낸 것과 상이하다. 미국 특허 7,052,700호에서는 HPLC용 수성 샘플은 물 환류 추출에 의해 제조하였다. 3개의 계피 및 복령 캡슐의 내용물을 200 ml 증류수와 혼합하여 30분간 가열 환류시켰다(끓을 때부터 개시). 이 용액을 냉각시키고, 10분간 원심분리한 다음 0.45 ㎛ 여과 막으로 여과하였다. 여액의 제1 부분을 제거하고 여액의 나머지를 시험 용액으로 취하였다. 따라서, 미국 특허 7,052,700호는 4개의 크로마토그램, 즉 수용성 성분에 대하여 1개, 지질-용해성 성분(상이한 크로마토그래피 조건 및 검출 파장의)에 대해 2개 및 가스 크로마토그래피에 대해 1개를 나타내었다. 처음의 3개 크로마토그램은 불량한 재현성을 나타내고 또 각각에 대하여 일부 중복되는 피이크를 가진다.

본 발명에서는, 상기 처리 방법은 샘플을 추출하기 위하여 50% 메탄올을 사용하는 것으로 변경되었다. 중량 가변 시험에 대한 샘플의 내용물을 완전히 혼합하고 미세 분말로 분쇄한다. 25 ml의 메탄올을 0.25 g의 혼합물에 부가한 다음 30분간 초음파처리시키고 여과하였다. 여액의 제1 부분을 제거하고 여액의 나머지 부분을 시험 용액으로 수집하였다. 50% 메탄올을 사용한 추출은 더 많은 피이크를 초래함이 밝혀졌고, 계피 및 복령 캡슐의 더 많은 성분뿐만 아니라 생성물 중의 지질-용해성 및 휘발성 성분도 드러낸다. 따라서, 현재의 방법은 1개의 크로마토그램만을 생성하므로, 계피 및 복령 캡슐의 품질을 제어하기 위한 다른 품질 제어 과정과 조합되어 이용될 수 있다.

따라서, 이들 2개 방법 사이의 차이는 물 환류 추출법에 의한 전자의 방법은 주로 수용성인 성분을 추출하였고, 크로마토그램 중의 주요 피이크는 생성물 중의 수용성 화합물이었다. 대조적으로, 본 발명의 방법은 50% 메탄올을 추출 용매로 사용하여서 더 많은 수용성 성분, 지질-용해성 성분뿐만 아니라 휘발성 화합물인 파에오놀을 추출하며, 또 이들 화합물은 1개의 크로마토그램으로 표시될 수 있어 동일 샘플 양을 기준으로 더 높은 파에오놀 피이크를 나타낸다.

실시예 3

계피 및 복령 캡슐 핑거프린트의 특이성, 재현성 및 안정성

전통 중국 한약의 핑거프린트에 대한 평가 변수는 보통 기준 피이크에 대한 특징적 피이크의 체류 시간 및 영역의 비율이다. 각 피이크의 상대적 체류 시간 및 피이크 영역이 핑거프린트의 특징으로 이용된다. 표준 핑거프린팅에서, 특징 피이크의 상대적 체류 시간 및 상대적 피이크 영역이 특정된다.

각 평가 변수는 체류 시간 및 피이크 영역을 변화시킬 수 있는 기구, 칼럼, 이동상 및 환경에서의 차이에 의해 유발되는 오차를 제거할 수 있다. 따라서, 이들 변수는 객관적으로 포괄적으로 생성물 내의 성분 및 내부 품질의 실제 조건을 나타내는데 이용될 수 있다.

특이성:

여기서 제시된 핑거프린트 특징은 본 발명의 계피 및 복령 캡슐에 특이한 것이다. 핑거프린트의 특징적 피이크는 본 명세서에 개시된 제조 방법에 따라 제조된 계피 및 복령 캡슐의 각 뱃치의 구성을 나타낸다.

재현성:

현재 핑거프린트 표준은 많은 뱃치로부터 수집된 분석 조건 및 데이터를 최적화함으로써 유도된다. 동일 뱃치 뿐만 아니라 상이한 뱃치의 반복된 분석에 의한 결과(표 2-3)는, 현재의 방법이 계피 및 복령 캡슐을 양호한 재현성으로 정확하게 핑거프린트할 수 있음을 보여준다. 이 결과는 또한 성분 함량이 상이한 뱃치에서 유사하며, 모든 특징적 피이크의 상대적 체류 시간 및 피이크 영역은 특정 범위 내에 있음을 보여준다.

안정성:

연속적인 3개 뱃치의 핑거프린트를 0 내지 12개월간 조사하였다. 이 결과는 12개월 동안 특징적 피이크의 현저한 변화가 없음을 보여주며, 이는 생성물뿐만 아니라 핑거프린트 분석 방법의 안정성을 나타낸다(표 4-6).

Claims

a) 계피 및 복령을 포함하는 조성물을 적합한 유기 용매로 추출하는 단계; 및 b) 크로마토그래피 분석을 실시하는 단계를 포함하는 방법에 처리될 때 12개 피이크를 생성하는

계피 및 복령을 포함하는 조성물.
제 1항에 있어서,

파에오니플로린과 비교한 피이크 1, 8, 9 및 12에 대한 상대적 피이크 영역 범위가 각각 0.25-0.89, 0.69-1.5, 0.3-0.85 및 1.56-3.06인

계피 및 복령을 포함하는 조성물.
제 1항에 있어서,

파에오니플로린과 비교한 피이크 1-12에 대한 상대적 체류 시간 범위가 각각 0.209-0.314, 0.456-0.683, 0.733-0.999, 0.871-1.306, 0.921-1.382, 0.968-1.451, 1.009-1.514, 1.058-1.587, 1.152-1.728, 1.69-2.536, 1.771-2.657, 및 1.943-2.915인

계피 및 복령을 포함하는 조성물.
제 1항에 있어서,

상기 유기 용매가 메탄올인

계피 및 복령을 포함하는 조성물.
제 1항에 있어서,

파에오니플로린이 상기 크로마토그래피 분석에서 표준으로 사용되는

계피 및 복령을 포함하는 조성물.
제 1항에 있어서,

상기 크로마토그래피 분석이 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)인

계피 및 복령을 포함하는 조성물.
제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서,

파에오니플로린 및 파에오놀을 더 포함하는

계피 및 복령을 포함하는 조성물.
제 7항에 있어서,

상기 파에오니플로린은 1.26~1.90%로 존재하고, 상기 파에오놀은 0.71~1.07%로 존재하는

계피 및 복령을 포함하는 조성물.
제 1항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서,

조성물이 다음 단계를 포함하는 방법에 의해 제조되는 조성물:

(a) 복령 분말을 준비하는 단계;

(b) 단피(Cortex moutan)의 추출물을 준비하는 단계;

(c) 계피 추출물을 준비하는 단계;

(d) 백작약(Radix paeoniae alba), 도인(Semen persicae) 및 복령의 추출물을 준비하는 단계;

(e) 상기 단계(b)-(d)로부터 얻은 추출물을 조합하는 단계;

(f) 상기 복령 분말을 상기 단계(e)에서 얻은 추출물과 혼합하여 미세 분말을 생성하는 단계; 및

(g) 상기 미세 분말을 단피와 계피의 추출물을 포함하는 봉입 물질과 혼합하는 단계.
제 1항에 다른 조성물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는

약제학적 조성물.
제 10항에 있어서,

상기 조성물은 환약, 캡슐, 과립, 정제, 현탁액 및 시럽으로 구성된 군으로부터 선택되는 형태로 제형화되는

약제학적 조성물.
(a) 복령 분말을 준비하는 단계;

(b) 단피(Cortex moutan)의 추출물을 준비하는 단계;

(c) 계피 추출물을 준비하는 단계;

(d) 백작약(Radix paeoniae alba), 도인(Semen persicae) 및 복령의 추출물을 준비하는 단계;

(e) 상기 단계(b)-(d)로부터 얻은 추출물을 조합하는 단계;

(f) 상기 복령 분말을 상기 단계(e)에서 얻은 추출물과 혼합하여 미세 분말을 생성하는 단계; 및

(g) 상기 미세 분말을 단피와 계피의 추출물을 포함하는 봉입 물질과 혼합하는 단계를 포함하는

계피 및 복령을 포함하는 조성물의 제조방법.
일차 생리통, 이차 생리통, 이상 자궁출혈, 만성 골반 염증, 및 소형 벽속 자궁근육 종양으로 구성된 군으로부터 선택된 질병 또는 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에서 제1항 또는 제10항의

조성물의 용도.
제 13항에 있어서,

상기 조성물은 경구, 직장, 비경구, 질내, 복강내, 국소적으로 또는 경구 또는 경비 스프레이로 투여되는

조성물의 용도.