KR20030040364A - 헤파린-유래 폴리사카라이드 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약학 조성물 - Google Patents
헤파린-유래 폴리사카라이드 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약학 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20030040364A KR20030040364A KR10-2003-7000689A KR20037000689A KR20030040364A KR 20030040364 A KR20030040364 A KR 20030040364A KR 20037000689 A KR20037000689 A KR 20037000689A KR 20030040364 A KR20030040364 A KR 20030040364A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- heparin
- mixture
- activity
- precipitate
- sodium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 70
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 title claims abstract description 56
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 45
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 title claims abstract description 40
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 16
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 16
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 4
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims description 56
- -1 alkaline-earth metal salts Chemical class 0.000 claims description 51
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 51
- 239000003055 low molecular weight heparin Substances 0.000 claims description 40
- 230000001858 anti-Xa Effects 0.000 claims description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 18
- 230000032050 esterification Effects 0.000 claims description 15
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims description 15
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 229960003872 benzethonium Drugs 0.000 claims description 14
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 14
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 14
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 12
- SIYLLGKDQZGJHK-UHFFFAOYSA-N dimethyl-(phenylmethyl)-[2-[2-[4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenoxy]ethoxy]ethyl]ammonium Chemical compound C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SIYLLGKDQZGJHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 claims description 9
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 8
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims description 7
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 6
- FVKFHMNJTHKMRX-UHFFFAOYSA-N 3,4,6,7,8,9-hexahydro-2H-pyrimido[1,2-a]pyrimidine Chemical compound C1CCN2CCCNC2=N1 FVKFHMNJTHKMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- IFVGFQAONSKBCR-UHFFFAOYSA-N n-[bis(aziridin-1-yl)phosphoryl]pyrimidin-2-amine Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=O)NC1=NC=CC=N1 IFVGFQAONSKBCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 claims description 5
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 4
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- ITAWMPSVROAMOE-UHFFFAOYSA-N sodium;imidazol-3-ide Chemical compound [Na+].C1=C[N-]C=N1 ITAWMPSVROAMOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- NEUSVAOJNUQRTM-UHFFFAOYSA-N cetylpyridinium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 NEUSVAOJNUQRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004830 cetylpyridinium Drugs 0.000 claims description 3
- RLGQACBPNDBWTB-UHFFFAOYSA-N cetyltrimethylammonium ion Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C RLGQACBPNDBWTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 3
- VSCBATMPTLKTOV-UHFFFAOYSA-N 2-tert-butylimino-n,n-diethyl-1,3-dimethyl-1,3,2$l^{5}-diazaphosphinan-2-amine Chemical compound CCN(CC)P1(=NC(C)(C)C)N(C)CCCN1C VSCBATMPTLKTOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical class OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 claims description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 2
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 claims description 2
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 229940127217 antithrombotic drug Drugs 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 159
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 74
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 34
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 26
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 26
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 14
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 13
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 13
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 13
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 description 7
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 description 7
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 7
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 6
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 125000001797 benzyl group Chemical class [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 6
- YRTWNFXASSUQEW-UHFFFAOYSA-M sodium;methanol;acetate Chemical compound [Na+].OC.CC([O-])=O YRTWNFXASSUQEW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 4
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 description 4
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229940127215 low-molecular weight heparin Drugs 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- IIPYXGDZVMZOAP-UHFFFAOYSA-N lithium nitrate Chemical compound [Li+].[O-][N+]([O-])=O IIPYXGDZVMZOAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- FFRBMBIXVSCUFS-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitro-1-naphthol Chemical compound C1=CC=C2C(O)=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C2=C1 FFRBMBIXVSCUFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010003178 Arterial thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 229920000045 Dermatan sulfate Polymers 0.000 description 1
- 108010029144 Factor IIa Proteins 0.000 description 1
- 238000001159 Fisher's combined probability test Methods 0.000 description 1
- 102100021194 Glypican-6 Human genes 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 229960001927 cetylpyridinium chloride Drugs 0.000 description 1
- YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M cetylpyridinium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WOWHHFRSBJGXCM-UHFFFAOYSA-M cetyltrimethylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C WOWHHFRSBJGXCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical class [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 238000012691 depolymerization reaction Methods 0.000 description 1
- AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L dermatan sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C([O-])=O)O1 AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L 0.000 description 1
- 229940051593 dermatan sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- ZAASRHQPRFFWCS-UHFFFAOYSA-P diazanium;oxygen(2-);uranium Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[O-2].[U].[U] ZAASRHQPRFFWCS-UHFFFAOYSA-P 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 229960000610 enoxaparin Drugs 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229940045627 porcine heparin Drugs 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229940061706 sulfated mucopolysaccharides Drugs 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
- C08B37/0078—Degradation products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
- A61K31/727—Heparin; Heparan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
본 발명은 헤파린-유래 폴리사카라이드 혼합물, 이의 제조방법 및 이를 함유하는 약학 조성물에 관한 것이다.
Description
헤파린은 특히 이의 항응혈성 및 항혈전성을 위해 사용되는 동물 기원의 설페이트화 뮤코폴리사카라이드의 혼합물이다.
헤파린은 그럼에도 불구하고 그의 사용 조건을 제한하는 단점이 있다. 특히, 이의 높은 항응혈 활성(항-IIa 활성)은 출혈을 일으킬 수 있다.
헤파린 에스테르의 염기성 해중합에 의해 수득된 저분자량 헤파린이 제안되었지만(EP40144); 이들 산물은 여전히 높은 항-IIa 활성을 지니고 있다.
본 발명은 헤파린으로부터 유래된 폴리사카라이드의 혼합물, 이의 제조방법 및 이를 함유하는 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 헤파린보다는 활성화된 인자 X(인자 Xa) 및 활성화된 인자 II(인자 IIa)쪽으로 더 선택적인 활성을 보유하는 헤파린으로부터 유래된 폴리사카라이드의 혼합물에 관한 것이다.
본 발명의 주제는 좀더 구체적으로 말해서, 알칼리 또는 알칼리-토금속 염형태의, 헤파린의 구성 폴리사카라이드의 일반 구조를 지니고 하기 특징을 보이는 설페이트화 폴리사카라이드의 혼합물이다:
- 이들은 1500 내지 3000 달톤의 평균 분자량, 100 내지 150 IU/mg의 항-Xa 활성, 0 내지 10 IU/mg의 항-IIa 활성 및 10보다 큰 항-Xa 활성/항-IIa 활성 비를 지닌다.
- 혼합물의 구성 폴리사카라이드는 2 내지 26 사카라이드 단위를 함유하고 그들의 말단 중 하나에 4,5-비설페이트화 글루쿠론산 2-O-설페이트 단위를 갖는다.
알칼리 또는 알칼리-토금속 염, 나트륨, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘 염이 바람직하다.
평균 분자량은 시리즈로 두 칼럼을, 예를 들면 TSK G3000 XL 및 TSK G2000 XL이라는 이름으로 판매되고 있는 것들을 사용하는 고압 액체 크로마토그래피로 측정된다. 검출은 굴절판정법으로 수행된다. 사용되는 용출제는 리튬 나이트레이트이고 유량은 0.6 ㎖/분이다. 시스템은 아가로스-폴리아크릴아미드 겔(IBF)상에서의 크로마토그래피에 의한 에녹사파린(AVENTIS)의 분별에 의해 제조된 표준으로 보정한다. 이러한 제조는 Barrowcliffe et al., Thromb. Res., 12, 27-36 (1977-778)에 의해 또는 D.A. Lane et al., Thromb. Res., 12, 257-271 (1977-78)에 의해 기재된 기술에 따라 수행된다. 결과는 GPC6 소프트웨어(Perkin Elmer)로 계산된다.
항-Xa 활성은 Teien et al., Thromb. Res., 10, 399-410 (1977)에 의해 기재된 색원체 기질상에서의 아미드분해법에 의해, 표준으로서 저분자량 헤파린을 위한 첫 번째 국제 표준을 가지고 측정한다.
항-IIa 활성은 Anderson L.O. et al., Thromb. Res., 15, 531-541 (1979)에 의해 기재된 기술에 의해, 표준으로서 저분자량 헤파린을 위한 첫 번째 국제 표준을 가지고 측정한다.
바람직하게는, 전술한 바의 혼합물은 125 내지 150 IU/mg의 항-Xa 활성을 보인다.
가장 구체적으로는 전술한 바의 혼합물은 140 내지 150 IU/mg의 항-Xa 활성을 보이고 2000 내지 3000 달톤의 평균 분자량을 갖는다.
바람직하게는, 본 발명에 따른 혼합물은 0 내지 5 IU/mg의 항-IIa 활성을 갖는다.
한층 더 바람직하게는, 물은 25보다 큰 항-Xa 활성/항-IIa 활성 비를 갖는다.
본 발명에 따른 올리고사카라이드의 혼합물은 20보다 큰 pka를 갖는 강 유기염기 또는 나트륨 이미다졸레이트를 이용하여 유기 매질 중에서 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염의 해중합, 해중합 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염의 나트륨 염으로의 전환, 에스테르의 검화, 및 임의로 정제에 의해 제조될 수 있다.
헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염은 바람직하게는 벤즈에토늄, 세틸피리디늄 또는 세틸트리메틸암모늄 염이다.
해중합은 일반적으로 염소화 용매(예를 들면, 디클로로메탄), 테트라하이드로퓨란, 아니솔 같은 불활성 유기 용매중, -20 내지 40℃의 온도에서 수행된다.
20보다 큰 pka를 갖는 강 유기 염기로는, 1,5,7-트리아자-바이사이클로[4.4.0]데크-5-엔, 2-tert-부틸이미노-2-디에틸아미노-1,3-디메틸퍼하이드로-1,3,2-디아자-포스포린, 구아니딘 및 포스파진 족의 염기를 사용하는 것이 가능하다.
구아니딘 족의 염기는 바람직하게는 하기식의 것들이다;
상기식에서, R1은 수소 또는 알킬이고, R2, R3, R4및 R5는 동일하거나 상이하고, 각각은 알킬 라디칼을 나타낸다.
좀더 구체적으로, R1은 수소이고 R2, R3, R4및 R5는 메틸 라디칼이다.
포스파진 족에 관련된 강 유기 염기는 예를 들면, R. Schwesinger et al., Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 26, 1167-1169 (1987), R. Schwesinger et al., Angew. Chem. 105, 1420 (1993)에 따라 정의된다.
포스파진 족의 염기로는, 하기 화학식의 것들이 바람직하게 사용된다:
상기식에서, 라디칼 R1내지 R7은 동일하거나 상이하고 알킬 라디칼을 나타낸다.
선행 화학식에서, 알킬 라디칼은 1 내지 6개의 탄소원자를 직쇄 또는 측쇄 형태로 함유한다.
유리하게는, 20보다 큰 pka를 갖는 강 유기 염기 또는 헤파린의 벤질 에스테르의 나트륨 이미다졸레이트/4급 암모늄 염 몰비는 0.2 내지 5, 바람직하게는 1 내지 4이다.
좀더 구체적으로, 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염의 에스테르화도는 50 내지 100%, 바람직하게는 70 내지 90%이다. 이러한 에스테르화도는 헤파린의 우론산의 에스테르화의 몰%에 상응한다.
해중합 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염에서 나트륨 염으로의 전환은 반응 매질을 나트륨 아세테이트의 알콜 용액, 바람직하게는 메탄올 중의 나트륨 아세테이트의 10% 용액(중량/부피)으로, 15 내지 25℃의 온도에서 처리함으로써 일반적으로 수행된다. 첨가된 아세테이트의 당량은 바람직하게는 해중합 반응에 사용된 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염의 질량보다 3배 더 크다.
검화는 나트륨 하이드록사이드, 칼륨 하이드록사이드 또는 리튬 하이드록사이드 같은 알칼리 금속 하이드록사이드에 의하여, 수성 매질 중, 0 내지 20℃, 바람직하게는 0 내지 10℃의 온도에서 일반적으로 수행된다. 1 내지 5몰 당량의 알칼리 금속 하이드록사이드가 일반적으로 사용될 것이다. 바람직하게는, 검화는 2 내지 3몰 당량의 알칼리 금속 하이드록사이드의 존재하에 수행될 것이다.
최종 산물은 해중합 헤파린의 공지의 정제방법에 의해 및 특히 특허 EP0037319에 기재된 방법에 따라 임의로 정제될 수 있다. 바람직하게는, 정제는 과산화수소에 의해, 수성 매질 중, 10 내지 50℃의 온도에서 수행된다. 바람직하게는, 이 작업은 20 내지 40℃에서 수행된다.
헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄은 하기 반응 도식에 따라 제조될 수 있다:
a) 벤즈에토늄 헤파리네이트 수득을 위해 벤즈에토늄 클로라이드에 의한 나트륨 염 형태의 헤파린의 전환,
b) 벤질 클로라이드에 의해 상기 수득한 벤즈에토늄 염의 에스테르화 및 헤파린의 벤질 에스테르의 나트륨 염 수득을 위해 나트륨 아세테이트의 알콜 용액으로 처리,
c) 헤파린의 벤질 에스테르의 나트륨 염에서 4급 암모늄 염, 바람직하게는 벤즈에토늄, 세틸피리디늄 또는 세틸트리메틸암모늄 염으로 트랜스앨리피케이션(transalification).
단계 a)의 반응은 수성 매질에서, 벤즈에토늄 클로라이드를 과량으로 나트륨 염 형태의 헤파린상에, 15 내지 25℃ 부근의 온도에서 작용시킴으로써 수행된다. 유리하게는, 벤즈에토늄 클로라이드/나트륨 염 형태의 헤파린 몰비는 2 내지 3, 좀더 구체적으로는 2.5이다.
사용되는 나트륨 염 형태의 출발 헤파린은 바람직하게는 돼지 헤파린이다. 후자는 특허 FR2663639에 기재된 방법에 따라 이의 더마탄 설페이트 수준을 감소시키기 위해 사전에 정제될 수 있다.
단계 b)의 에스테르화는 염소화 유기 용매(예를 들면, 클로로포름 또는 메틸렌 클로라이드) 중, 25 내지 45℃, 바람직하게는 30 내지 40℃의 온도에서 바람직하게 수행된다. 이어서, 나트륨 염 형태의 에스테르가 메탄올 같은 알콜 중 10 중량/부피%에서 나트륨 아세테이트에 의한 침전으로 회수된다. 반응 매질의 부피당 알콜 1 내지 1.2 부피가 일반적으로 사용된다. 벤질 클로라이드의 양과 반응시간은 50 내지 100%, 바람직하게는 70 내지 90%의 에스테르화도를 달성하도록 조정된다. 바람직하게는, 헤파린의 벤즈에토늄 염 1 중량부에 대해 벤질 클로라이드 0.5 내지 1.5 중량부가 사용된다. 마찬가지로, 바람직하게는 반응시간은 10 내지 35시간이 될 것이다.
트랜스앨리피케이션 단계 c)는 4급 암모늄 클로라이드에 의해, 바람직하게는 벤즈에토늄 클로라이드, 세틸피리디늄 클로라이드 또는 세틸트리메틸암모늄 클로라이드에 의해, 수성 매질 중, 10 내지 25℃의 온도에서 수행된다. 유리하게는, 4급 암모늄 클로라이드/헤파린의 벤질 에스테르의 나트륨 염 몰비는 2 내지 3이다.
나트륨 염 형태의 본 발명에 따른 혼합물은 알칼리 또는 알칼리-토금속 염의 또다른 염으로 전환될 수 있다. 하나의 염에서 다른 하나로의 통과는 특허 US4168377에 기재된 방법을 이용하여 임의로 달성된다.
본 발명에 따른 혼합물은 유독하지 않으며 따라서 의약품으로 사용될 수 있다.
본 발명의 혼합물은 항혈전제로 사용될 수 있다. 특히, 이들은 특히 심근경색의 경우에, 정맥 혈전증, 동맥 혈전증 우발증후의 예방용으로 유용하다. 이들은또한 평활근 세포 증식의 예방과 치료, 맥관형성, 및 아테롬성동맥경화증과 동맥경화증에 대한 신경보호제로도 유용하다.
본 발명은 또한 활성성분으로서, 본 발명에 따른 폴리사카라이드의 혼합물을, 임의로 하나 이상의 불활성 부형제와 함께 함유하는 약학 조성물에 관한 것이다.
약학 조성물은 예를 들면, 피하 또는 정맥내 경로에 의해 주사될 수 있는 용액이다. 이들은 또한 폐 경로(흡입)에 의해서도 유용하다.
투여량은 환자의 연령, 체중 및 건강상태에 따라 다양할 수 있다. 성인의 경우, 근육내 또는 피하 경로에 의해 1일 20 내지 100 mg이 일반적이다.
하기 실시예는 본 발명을 설명한다.
실시예 A: 헤파린의 벤질 에스테르의 벤즈에토늄 염의 제조
벤즈에토늄 헤파리네이트
물 125 ㎖ 중의 벤즈에토늄 클로라이드 25 g의 용액을 20℃ 부근의 온도에서 물 100 ㎖ 중의 나트륨 염 형태의 헤파린 10 g의 용액에 첨가한다. 산물을 여과하여 물로 세척한 다음 건조시킨다.
헤파린의 벤질 에스테르(나트륨 염)
벤질 클로라이드 16 ㎖를 메틸렌 클로라이드 80 ㎖ 중의 벤즈에토늄 헤파리네이트 20 g의 용액에 첨가한다. 용액을 30℃의 온도에서 12시간 동안 가열한다. 이어서, 메탄올 중의 나트륨 아세테이트의 10% 용액 108 ㎖를 첨가하고, 혼합물을여과하여 메탄올로 세척한 다음 건조시킨다. 이에 따라 헤파린의 벤질 에스테르 7.6 g이 에스테르화도가 77%인 나트륨 염의 형태로 수득된다.
헤파린의 벤질 에스테르(벤즈에토늄 염)
헤파린의 벤질 에스테르(나트륨 염) 36 g(0.0549 몰) 및 증류수 540 ㎖를 2리터들이 삼각 플라스크 A에 도입시킨다. 약 20℃의 온도에서 균질화 후에, 담황색 용액이 수득된다. 벤즈에토늄 클로라이드 64.45 g(0.1438 몰)과 물 450 ㎖의 용액을 마그네틱 교반하에, 1-리터들이 삼각 플라스크 B에서 제조한다. 삼각 플라스크 B 중의 용액을 교반하에, 삼각 플라스크 A 중의 용액에 약 35분에 걸쳐서 부어 넣는다. 풍부한 백색 침전의 형성이 관찰된다. 삼각 플라스크 B를 증류수 200 ㎖로 세정하고 세척수를 삼각 플라스크 A에 도입시킨다. 이어서, 교반을 정지하고 현탁액을 12시간 동안 침강시킨다. 상층액의 투명한 부분을 제거하여 버린다. 물 560 ㎖를 침강 침전물(슬러리 외양)에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분간 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(560 ㎖). 증류수 약 560 ㎖로 수행하는 이러한 세척 작업을 침강 침전물에 대해 2회 반복한다. 최종 세척 작업에서, 침전물이 현탁액에 남게 되며 소결 글래스 3에서 여과한다. 이어서, 케이크를 증류수 200 ㎖로 4회 세척한다. 습윤 백색 고체를 배수시킨 다음 감압하에(2.7 kPa) 60℃ 부근의 온도에서 건조시킨다. 12시간 동안 건조시킨 후에, 벤즈에토늄 염인 헤파린의 벤질 에스테르 87.5 g을 수득한다. 수득된 수율은 94.9%이다.
실시예 1
해중합 및 나트륨 염으로의 전환;
디클로로메탄 28 ㎖를 50 ㎖들이 삼각 플라스크 A에 도입시킨다. 실시예 A에서 기술한 바와 같이 수득한 헤파린의 벤질 에스테르(에스테르화도: 77%, 벤즈에토늄 염) 4 g(0.00238 몰)을 교반하에 서서히 로딩한다. 완전히 용해시킨 후에, 1,5,7-트리아자바이사이클로[4.4.0]데크-5-엔 1.32 g(0.00948 몰)을 첨가한다. 혼합물을 20℃ 부근의 온도에서 3시간 30분간 교반한다. 이 기간동안, 나트륨 아세테이트 12 g의 용액을 4℃에서 삼각 플라스크 B내 메탄올 120 ㎖ 중에 제조한다. 삼각 플라스크 A 중의 반응 혼합물을 마그네틱 교반하에 나트륨 아세테이트의 메탄올 용액에 부어 넣는다. 거의 반투명한 젤라틴성 황색 침전물이 출현한다. 이어서, 교반을 정지하고 현탁액을 1시간 동안 침강에 의해 분리시킨다. 상층액의 투명한 부분을 제거하여 버린다(62 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물(황색 슬러리 외양)에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분간 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(49 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 이어서, 현탁액 중의 침전물을 소결 글래스 4에서 여과시킨다. 이어서, 수득된 황금빛 황색 케이크를 메탄올 25 ㎖로 2회 세척한다. 습윤 고체를 배수시킨 다음 감압하에(2.7 kPa), 60℃ 부근의 온도에서 건조시킨다. 12시간 동안 건조시킨 후, 해중합 헤파린 1.21 g을 수득한다(벤질 에스테르, 나트륨 염). 수득된 수율은 77.2%이다.
검화:
상기 수득된 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 1.21 g(0.0018 몰)과 물 11 ㎖를 25 ㎖들이 삼각 플라스크에 도입한다. 30% 가성 소다 0.18 ㎖(0.0018몰)를 마그네틱 교반하에 도입한다. 첨가 후에, 혼합물을 4℃로 냉각시키고, 2시간 동안 교반한다. NaCl 1.43 g을 첨가하고, 1 몰/ℓ(14 ㎖) HCl을 첨가하여 용액을 중화한다. 혼합물을 100 ㎖들이 삼각 플라스크에 옮기고 메탄올 52 ㎖를 첨가한다. 황색 침전물 형성이 관찰된다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 20℃ 부근의 온도에서 12시간 동안 침강시킨다. 상층액을 제거한 다음 버린다(44 ㎖). 메탄올 25 ㎖를 침강 침전물(황색 슬러리 외양)에 첨가하고, 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분간 재침강시킨다. 상층액을 제거한 다음 버린다(21 ㎖). 메탄올 25 ㎖를 침강 침전물에 첨가한 다음, 혼합물을 20분간 교반한다. 이어서 현탁액 중의 침전물을 소결 글래스 3에서 여과한다. 수득된 담황색 케이크를 메탄올 10 ㎖로 2회 세척한다. 습윤 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 조 해중합 헤파린 0.66 g을 수득한다(나트륨 염). 수득된 수율은 60%이다.
정제:
상기 수득된 조 해중합 헤파린 0.66 g과 증류수 5.9 ㎖를 10 ㎖들이 삼각 플라스크에 도입한다. 혼합물을 마그네틱 교반하에 40℃까지 가열한다. 0.1 몰/ℓ나트륨 하이드록사이드 및 30% 과산화수소 수용액 33 ㎕를 첨가하여 pH를 9 내지 10으로 만든다. 약 2시간 동안 교반한 후, 나트륨 클로라이드 0.65 g을 첨가한다. 이어서 0.1 ㎖/ℓHCl을 첨가하여 혼합물을 중화한다. 이어서 용액을 여과한 다음, 25 ㎖들이 삼각 플라스크에 옮긴다. 메탄올 23.3 ㎖를 부어 넣는다. 백색 침전물 형성이 관찰된다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 20℃ 부근의 온도에서 12시간 동안 침강시킨다. 이어서 상층액을 제거한 다음 버린다(5 ㎖). 메탄올 5 ㎖를 침강 침전물(슬러리 외양)에 첨가하고, 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분 동안 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(5 ㎖). 메탄올 5 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고, 혼합물을 20분간 교반한다. 현탁액 중의 침전물을 이어서 소결 글래스 3에서 여과한다. 수득된 백색 케이크를 이어서 메탄올 5 ㎖로 2회 세척한다. 습윤 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 폴리사카라이드의 정제된 혼합물(나트륨 염) 0.51 g이 수득된다. 수득된 수율은 77.2%이다.
이 혼합물의 특징은 하기와 같다:
평균 분자량: 1600 달톤
항-Xa 활성: 94 IU/mg
항-IIa 활성: < 0.1 IU/mg
항-Xa 활성/항-IIa 활성 비: > 100
실시예 2
해중합 및 나트륨 염으로의 전환:
디클로로메탄 70 ㎖를 100 ㎖들이 삼각 플라스크 A에 도입한다. 실시예 A에서 기술된 바와 같이 수득된 헤파린의 벤질 에스테르(에스테르화도: 77%, 벤즈에토늄 염) 10 g(0.00595 몰)을 교반하며 서서히 로딩한다. 완전히 용해시킨 후에, 2-tert-부틸이미노-2-디에틸아미노-1,3-디메틸퍼하이드로-1,3,2-디아자포스포린 1.7 ㎖(0.00587 몰)를 첨가한다. 20℃ 부근의 온도에서 약 3시간 30분 동안 계속 반응시킨다. 이 기간 동안에, 나트륨 아세테이트 30 g 용액을 4℃에서 삼각 플라스크 B에서 300 ㎖ 메탄올 중에 제조한다. 삼각 플라스크 A내 반응 혼합물을 나트륨 아세테이트 메탄올 용액에 마그네틱 교반하에 부어 넣는다. 거의 반투명한 젤라틴성 황색 침전물이 나타난다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 1시간 동안 침강시켜 분리한다. 상층액의 투명한 부분을 제거하여 버린다(204 ㎖). 메탄올 125 ㎖를 침강 침전물(황색 슬러리 외양)에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분간 재침강시킨다. 이어서 상층액을 제거하여 버린다(162 ㎖). 메탄올 125 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 이어서 현탁액 중의 젤라틴성 침전물을 소결 글래스 3에서 여과한다. 수득된 황색 젤라틴성 케이크를 메탄올 63 ㎖로 2회 세척한다. 젤라틴성 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 3.34 g을 수득한다. 수득된 수율은 85.3%이다.
검화:
상기 수득된 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 1.67 g을 실시예 1에서 기술된 검화 방법에 따라 검화한다. 담황색 분말 0.94 g을 수득한다. 조 해중합 헤파린(나트륨 염)의 수율은 61%이다.
정제:
상기 수득된 조 해중합 헤파린(나트륨 염) 0.94 g을 실시예 1에 기술된 정제 방법에 따라 정제한다. 백색 분말 0.71 g을 수득한다. 수율은 75.5%이다.
수득된 폴리사카라이드의 정제 혼합물(나트륨 염)은 하기 특징을 가진다:
평균 분자량: 2500 달톤
항-Xa 활성: 146.6 IU/mg
항-IIa 활성: 2.15 IU/mg
항-Xa 활성/항-IIa 활성 비: 68
실시예 3
해중합 및 나트륨 염으로의 전환:
디클로로메탄 28 ㎖를 50 ㎖들이 삼각 플라스크 A에 도입한다. 실시예 A에 따라 수득된 헤파린의 벤질 에스테르(에스테르화도: 77%, 벤즈에토늄 염) 4 g(0.00238 몰)을 교반하며 서서히 로딩한다. 완전히 용해시킨 후에, 2℃로 냉각시키고, 1,5,7-트리아자바이사이클로[4.4.0]데크-5-엔 0.333 g(0.00239 몰)을 첨가한다. 20℃ 부근의 온도에서 약 3시간 30분 동안 계속 반응시킨다. 이 기간 동안에, 나트륨 아세테이트 12 g 용액을 4℃에서 삼각 플라스크 B에서 120 ㎖ 메탄올 중에 제조한다. 삼각 플라스크 A내 반응 혼합물을 나트륨 아세테이트 메탄올 용액에 마그네틱 교반하에 부어 넣는다. 황색 침전물이 나타난다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 1시간 동안 침강시켜 분리한다. 상층액의 투명한 부분을 제거하여 버린다(90 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물(황색 슬러리 외양)에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분간 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(61 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 이어서 현탁액 중의 젤라틴성 침전물을 소결 글래스 4에서 여과한다. 수득된 케이크를 메탄올 25 ㎖로 2회 세척한다. 습윤 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 1.19 g을 수득한다. 고체는 암황색이다. 수득된 수율은 75.9%이다.
검화:
상기 수득된 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 1.19 g을 실시예 1에서 기술된 검화 방법에 따라 검화한다. 담황색 분말 0.78 g을 수득한다. 조 해중합 헤파린(나트륨 염)의 수율은 71.5%이다.
정제:
상기 수득된 조 해중합 헤파린(나트륨 염) 0.78 g을 실시예 1에 기술된 정제 방법에 따라 정제한다. 백색 분말 0.58 g을 수득한다. 수율은 72.5%이다.
수득된 폴리사카라이드의 정제 혼합물(나트륨 염)은 하기 특징을 가진다:
평균 분자량: 2700 달톤
항-Xa 활성: 100.1 IU/mg
항-IIa 활성: 3.3 IU/mg
항-Xa 활성/항-IIa 활성 비: 27.3
실시예 4
해중합 및 나트륨 염으로의 전환:
디클로로메탄 28 ㎖를 50 ㎖들이 삼각 플라스크 A에 도입한다. 실시예 A에서 기술된 대로 수득된 헤파린의 벤질 에스테르(에스테르화도: 77%, 벤즈에토늄 염) 4 g(0.00238 몰)을 교반하며 서서히 로딩한다. 완전히 용해시킨 후에, 2℃에서 2-tert-부틸이미노-트리스(디메틸아미노)포스포란 0.6 ㎖(0.00222 몰)를 첨가한다. 0℃ 부근의 온도에서 약 3시간 30분 동안 계속 반응시킨다. 이 기간 동안에, 나트륨 아세테이트 12 g 용액을 4℃에서 삼각 플라스크 B에서 120 ㎖ 메탄올 중에 제조한다. 삼각 플라스크 A내 반응 혼합물을 나트륨 아세테이트 메탄올 용액에 마그네틱 교반하에 부어 넣는다. 거의 반투명한 젤라틴성 황색 침전물이 나타난다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 1시간 동안 침강시켜 분리한다. 상층액의 투명한 부분을 제거하여 버린다(108 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물(황색 슬러리 외양)에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분 동안 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(60 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 현탁액 중의 황백색 젤라틴성 침전물을 이어서 소결 글래스 4에서 여과한다. 수득된 케이크를 메탄올 25 ㎖로 2회 세척한다. 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 1.22 g을 수득한다. 수득된 수율은 77.8%이다.
검화:
상기 수득된 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 1.22 g을 실시예 1에서 기술된 검화 프로토콜에 따라 검화한다. 매우 엷은 황색 분말 0.69 g을 수득한다. 조 해중합 헤파린(나트륨 염)의 수율은 61.6%이다.
정제:
상기 수득된 조 해중합 헤파린(나트륨 염) 0.69 g을 실시예 1에 기술된 정제 프로토콜에 따라 정제한다. 백색 분말 0.67 g을 수득한다. 수율은 97.1%이다.
수득된 폴리사카라이드의 정제 혼합물(나트륨 염)은 하기 특징을 가진다:
평균 분자량: 2900 달톤
항-Xa 활성: 145.2 IU/mg
항-IIa 활성: 4.5 IU/mg
항-Xa 활성/항-IIa 활성 비: 32.6
실시예 5
해중합 및 나트륨 염으로의 전환:
디클로로메탄 28 ㎖를 50 ㎖들이 둥근-바닥 플라스크 A에 도입한다. 벤질 헤파리네이트(에스테르화도: 77%, 벤즈에토늄 염) 4 g(0.00238 몰)을 교반하며 서서히 로딩한다. 완전히 용해시킨 후에, 40℃에서 나트륨 이미다졸레이트 0.95 g(0.00949 몰)을 첨가한다. 디클로로메탄의 환류 온도에서 약 4시간 동안 계속 반응시킨다. 이 기간 동안에, 나트륨 아세테이트 12 g 용액을 4℃에서 삼각 플라스크 B에서 120 ㎖ 메탄올 중에 제조한다. 삼각 플라스크 A내 반응 혼합물을 나트륨 아세테이트 메탄올 용액에 마그네틱 교반하에 부어 넣는다. 거의 반투명한 젤라틴성 황색 침전물이 나타난다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 1시간 동안 침강시켜 분리한다. 오렌지색 상층액의 투명한 부분을 제거하여 버린다(88 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물(오렌지색 슬러리 외양)에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분 동안 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(51 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 현탁액 중의 오렌지색 침전물을 이어서 소결 글래스 4에서 여과한다. 수득된 케이크를 메탄올 25 ㎖로 2회 세척한다. 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 1.34 g을 수득한다. 수득된 수율은 76.6%이다.
검화:
상기 수득된 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 1.2 g을 실시예 1에서 기술된 검화 프로토콜에 따라 검화한다. 베이지색 분말 0.63 g을 수득한다. 조 해중합 헤파린(나트륨 염)의 수율은 52.5%이다.
정제:
상기 수득된 조 해중합 헤파린(나트륨 염) 0.63 g을 실시예 1에 기술된 정제 방법에 따라 정제한다. 베이지색 분말 0.42 g을 수득한다. 수율은 66.7%이다.
수득된 폴리사카라이드의 정제 혼합물(나트륨 염)은 하기 특징을 가진다:
평균 분자량: 2250 달톤
항-Xa 활성: 134.5 IU/mg
항-IIa 활성: 1.5 IU/mg
항-Xa 활성/항-IIa 활성 비: 90.5
실시예 6
해중합 및 나트륨 염으로의 전환:
디클로로메탄 28 ㎖를 50 ㎖들이 삼각 플라스크 A에 도입한다. 실시예 A에서 기술된 바와 같이 수득된 헤파린의 벤질 에스테르(에스테르화도: 77%, 벤즈에토늄 염) 4 g(0.00238 몰)을 교반하며 서서히 로딩한다. 완전히 용해시킨 후에, 1,5,7-트리아자바이사이클로[4.4.0]데크-5-엔 1.33 g(0.00956 몰)을 첨가한다. 혼합물을 20℃ 부근의 온도에서 3시간 30분간 교반한다. 이 기간 동안에, 나트륨 아세테이트 12 g 용액을 4℃에서 삼각 플라스크 B에서 120 ㎖ 메탄올 중에 제조한다. 삼각 플라스크 A내 반응 혼합물을 나트륨 아세테이트 메탄올 용액에 마그네틱 교반하에 부어 넣는다. 거의 반투명한 젤라틴성 황색 침전물이 나타난다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 1시간 동안 침강시켜 분리한다. 상층액의 투명한 부분을 제거하여 버린다(56 ㎖). 메탄올 60 ㎖를 침강 침전물(황색 슬러리 외양)에 첨가하고 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 30분 동안 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(70 ㎖). 메탄올 50 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고 혼합물을 15분간 교반한다. 현탁액 중의 침전물을 이어서 소결 글래스 4에서 여과한다. 수득된 황금색 케이크를 이어서 메탄올 50 ㎖로 2회 세척한다. 습윤 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 0.92 g을 수득한다. 수득된 수율은 64%이다.
검화:
상기 수득된 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 0.92 g(0.0014 몰)과 물 17.5 ㎖를 25 ㎖들이 삼각 플라스크에 도입한다. 30% 가성 소다 0.38 ㎖(0.00379 몰)를 마그네틱 교반하에 도입한다. 첨가 후에, 혼합물을 20℃ 부근의 온도로 유지하고, 5시간 동안 교반한다. NaCl 1.8 g을 첨가하고, 농축 HCl을 첨가하여(용액의 최종 부피가 약 18 ㎖가 되도록) 용액을 중화한다. 혼합물을 100 ㎖들이 삼각 플라스크에 옮기고 메탄올 46 ㎖를 첨가한다. 황색 침전물 형성이 관찰된다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 20℃ 부근의 온도에서 12시간 동안 침강시킨다. 상층액을 제거한 다음 버린다(52 ㎖). 메탄올 25 ㎖를 침강 침전물(황색 슬러리 외양)에 첨가하고, 혼합물을 20분간 교반한다. 침전물을 약 1시간 동안 재침강시킨다. 상층액을 제거한 다음 버린다(27 ㎖). 메탄올 25 ㎖를 침강 침전물에 첨가한 다음, 혼합물을 약 1시간 동안 교반한다. 이어서 현탁액 중의 침전물을 소결 글래스 4에서 여과한다. 수득된 케이크를 메탄올 10 ㎖로 2회 세척한다. 습윤 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 3시간 건조시킨 후에, 조 해중합 헤파린 0.42 g을 수득한다(나트륨 염). 수득된 수율은 45.6%이다.
정제:
상기 수득된 조 해중합 헤파린 0.42 g과 증류수 3.8 ㎖를 10 ㎖들이 삼각 플라스크에 도입한다. 혼합물을 마그네틱 교반하에 38℃까지 가열한다. 0.1 몰/ℓ나트륨 하이드록사이드 및 30% 과산화수소 수용액 25 ㎕를 첨가하여 pH를 9 내지 10으로 만든다. 약 2시간 30분간 교반한 후, 나트륨 클로라이드 0.5 g을 첨가한다. 이어서 0.1 ㎖/l HCl을 첨가하여 혼합물을 중화한다. 이어서 용액을 여과한 다음, 25 ㎖들이 삼각 플라스크에 옮긴다. 메탄올 11.3 ㎖를 부어 넣는다. 백색 침전물 형성이 관찰된다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 20℃ 부근의 온도에서 12시간 동안 침강시킨다. 이어서 상층액을 제거한 다음 버린다(9.8 ㎖). 메탄올 5 ㎖를 침강 침전물(슬러리 외양)에 첨가하고, 혼합물을 15분간 교반한다. 침전물을 약 3시간 동안 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(6.2 ㎖). 메탄올 5 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고, 혼합물을 20분간 교반한다. 현탁액 중의 침전물을 이어서 소결 글래스 3에서 여과한다. 수득된 백색 케이크를 이어서 메탄올 5 ㎖로 2회 세척한다. 습윤 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 2시간 20분 건조시킨 후에, 순수한 해중합 헤파린(나트륨 염) 0.39 g을 수득한다. 수득된 수율은 92.8%이다.
이에 따라 수득된 해중합 헤파린의 특징은 하기와 같다:
평균 분자량: 1950 달톤
항-Xa 활성: 115.6 IU/mg
항-IIa 활성: < 2 IU/mg
항-Xa 활성/항-IIa 활성 비: > 57
실시예 7
해중합 및 나트륨 염으로의 전환:
디클로로메탄 140 ㎖를 400 ㎖들이 반응기 A에 도입한다. 실시예 A에서 기술된 바와 같이 수득된 헤파린의 벤질 에스테르(에스테르화도: 77%, 벤즈에토늄 염) 20 g(0.0119 몰)을 교반하며 서서히 로딩한다. 완전히 용해시킨 후에, 반응 매질내 함수량을 Karl Fisher법으로 측정한다. 수득된 값은 0.1% 물이다. 2-tert-부틸이미노-2-디에틸-아미노-1-3-디메틸퍼하이드로-1,3,2-디아자포스포린 3.5 ㎖(0.0121 몰)를 이어 첨가한다. 25℃ 부근의 온도에서 약 24시간 동안 반응을 진행시킨다. 이 기간 동안에, 나트륨 아세테이트 30 g 용액을 4℃에서 삼각 플라스크 B에서 300 ㎖ 메탄올 중에 제조한다. 반응기 A내 반응 혼합물 절반을 나트륨 아세테이트 메탄올 용액에 마그네틱 교반하에 부어 넣는다. 거의 반투명한 젤라틴성 황색 침전물이 나타난다. 교반을 1시간 동안 계속하고, 현탁액을 약 12시간 동안 4℃에서 침강시켜 분리한다. 상층액의 투명한 부분을 제거하여 버린다(220 ㎖). 메탄올 220 ㎖를 침강 침전물(황색 슬러리 외양)에 첨가하고 혼합물을 50분간 교반한다. 침전물을 약 40분 동안 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(204 ㎖). 메탄올 204 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고 혼합물을 40분간 교반한다. 이어서 현탁액 중의 젤라틴성 침전물을 소결 글래스 3에서 여과한다. 수득된 황색 젤라틴성 케이크를 메탄올 100 ㎖로 2회 세척한다. 젤라틴성 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 2.6 g을 수득한다. 수득된 수율은 70.6%(처리된 반응 매질의 절반을 기준으로 하여 계산함)이다.
검화:
상기 수득된 해중합 헤파린(벤질 에스테르, 나트륨 염) 2.6 g을 실시예 1에서 기술된 검화 방법에 따라 검화한다. 담황색 분말 1.48 g을 수득한다. 조 해중합 헤파린(나트륨 염)의 수율은 62.9%이다.
정제:
상기 수득된 조 해중합 헤파린 1.48 g과 증류수 15 ㎖를 50 ㎖들이 삼각 플라스크에 도입한다. 혼합물을 마그네틱 교반하에 40℃까지 가열한다. 1 몰/ℓ나트륨 하이드록사이드를 첨가하여 pH를 9 내지 10으로 만든다. 용액을 1 ㎛의 다공도를 갖는 여과막에서 여과한다. 이어서 30% 과산화수소 수용액 76 ㎕를 첨가한다.약 2시간 동안 교반한 다음, 나트륨 클로라이드 1.5 g을 첨가한다. 이어서 1 몰/ℓHCl을 첨가하여 혼합물을 중화한다. 용액을 1 ㎛의 다공도를 갖는 여과막에서 여과한다. 메탄올 38 ㎖를 부어 넣는다. 백색 침전물 형성이 관찰된다. 이어서 교반을 중단하고, 현탁액을 20℃ 부근의 온도에서 1시간 동안 침강시킨다. 이어서 상층액을 제거한 다음 버린다(37 ㎖). 메탄올 37 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고, 혼합물을 45분간 교반한다. 침전물을 약 45분간 재침강시킨다. 상층액을 제거하여 버린다(34 ㎖). 메탄올 34 ㎖를 침강 침전물에 첨가하고, 혼합물을 15분간 교반한다. 이어서 현탁액 중의 침전물을 소결 글래스 3에서 여과한다. 수득된 백색 케이크를 이어서 메탄올 25 ㎖로 2회 세척한다. 습윤 고체를 배수시킨 다음, 60℃ 부근의 온도에서 감압하에(2.7 kPa) 건조시킨다. 12시간 건조시킨 후에, 순수한 해중합 헤파린(나트륨 염) 1.29 g이 수득된다. 수득된 수율은 87.2%이다.
수득된 순수한 해중합 헤파린(나트륨 염)은 하기 특징을 가진다:
평균 분자량: 2250 달톤
항-Xa 활성: 149.6 IU/mg
항-IIa 활성: < 0.85 IU/mg
항-Xa 활성/항-IIa 활성 비: 176
Claims (20)
- 알칼리 또는 알칼리-토금속 염 형태의, 헤파린의 구성 폴리사카라이드의 일반 구조를 지니고 하기 특징을 보이는 설페이트화 폴리사카라이드의 혼합물:- 이들은 1500 내지 3000 달톤의 평균 분자량, 100 내지 150 IU/mg의 항-Xa 활성, 0 내지 10 IU/mg의 항-IIa 활성 및 10보다 큰 항-Xa 활성/항-IIa 활성 비를 가짐.- 혼합물의 구성 폴리사카라이드는 2 내지 26 사카라이드 단위를 함유하고 그들의 말단 중 하나에 4,5-비설페이트화 글루쿠론산 2-O-설페이트 단위를 가짐.
- 제 1 항에 있어서, 항-Xa 활성이 125 내지 150 IU/mg임을 특징으로 하는 혼합물.
- 제 1 항 또는 2 항에 있어서, 항-Xa 활성이 140 내지 150 IU/mg이고 평균 분자량이 2000 내지 3000 달톤임을 특징으로 하는 혼합물.
- 제 1 항 내지 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 나트륨, 칼륨, 칼슘 또는 마그네슘 염 형태의 혼합물.
- 제 1 항 내지 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 0 내지 5 IU/mg의 항-IIa 활성을 갖는 혼합물.
- 제 1 항 내지 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 25보다 큰 항-Xa 활성/항-IIa 활성 비를 갖는 혼합물.
- 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염을 20보다 큰 pka를 갖는 강 유기 염기 또는 나트륨 이미다졸레이트에 의해 유기 매질 중에서 해중합시키고, 해중합 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염을 나트륨 염으로 전환시킨 다음, 에스테르를 검화시키고 산물을 임의로 정제함을 특징으로 하는, 제 1 항의 혼합물의 제조방법.
- 제 7 항에 있어서, 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염이 벤즈에토늄, 세틸피리디늄 또는 세틸트리메틸암모늄 염인 방법.
- 제 7 항에 있어서, 20보다 큰 pka를 갖는 강 유기 염기가 1,5,7-트리아자바이사이클로[4.4.0]데크-5-엔, 2-tert-부틸이미노-2-디에틸아미노-1,3-디메틸퍼하이드로-1,3,2-디아자포스포린, 구아니딘 및 포스파진 족의 염기 중에서 선택되는 방법.
- 제 9 항에 있어서, 구아니딘 족의 염기가 하기 화학식의 것들인 방법.상기식에서,R1은 수소 또는 알킬이고,R2, R3, R4및 R5는 동일하거나 상이하고, 각각은 알킬 라디칼을 나타내며, 알킬 라디칼은 직쇄 또는 측쇄 형태로 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는다.
- 제 10 항에 있어서, R1이 수소이고, R2, R3, R4및 R5가 메틸 라디칼인 방법.
- 제 9 항에 있어서, 포스파진 족의 염기가 하기 화학식의 것들인 방법.상기식에서,라디칼 R1내지 R7은 동일하거나 상이하고 직쇄 또는 측쇄 형태로 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 알킬 라디칼을 나타낸다.
- 제 7 항 내지 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 20보다 큰 pka를 갖는 강 유기 염기 또는 나트륨 이미다졸레이트/헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염 몰비가 0.2 내지 5인 방법.
- 제 7 항 내지 13 항 중 어느 한 항에 있어서, 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염이 50 내지 100%의 에스테르화도를 갖는 방법.
- 제 7 항 내지 14 항 중 어느 한 항에 있어서, 해중합 헤파린의 벤질 에스테르의 4급 암모늄 염에서 나트륨 염으로의 전환이 반응 매질을 나트륨 아세테이트의 알콜 용액으로 처리함으로써 수행되는 방법.
- 제 7 항 내지 15 항 중 어느 한 항에 있어서, 검화가 알칼리 금속 하이드록사이드에 의해 수행되는 방법.
- 제 7 항 내지 16 항 중 어느 한 항에 있어서, 정제가 과산화수소에 의해 수행되는 방법.
- 의약품으로서, 제 1 항 내지 6 항 중 어느 한 항에서 정의된 혼합물.
- 항혈전증 의약품으로서, 제 1 항 내지 6 항 중 어느 한 항에서 정의된 혼합물.
- 활성성분으로서, 제 1 항 내지 6 항 중 어느 한 항에 따른 혼합물을 포함하는 약학 조성물.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR00/09572 | 2000-07-21 | ||
| FR0009572A FR2811992B1 (fr) | 2000-07-21 | 2000-07-21 | Melanges de polysaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
| PCT/FR2001/002332 WO2002008295A1 (fr) | 2000-07-21 | 2001-07-18 | Melanges de polysaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20030040364A true KR20030040364A (ko) | 2003-05-22 |
| KR100853585B1 KR100853585B1 (ko) | 2008-08-21 |
Family
ID=8852768
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020037000689A Expired - Fee Related KR100853585B1 (ko) | 2000-07-21 | 2001-07-18 | 헤파린-유래 폴리사카라이드 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약학 조성물 |
Country Status (35)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1307491B2 (ko) |
| JP (1) | JP5279160B2 (ko) |
| KR (1) | KR100853585B1 (ko) |
| CN (1) | CN1230449C (ko) |
| AP (1) | AP1703A (ko) |
| AR (1) | AR029865A1 (ko) |
| AT (1) | ATE470679T1 (ko) |
| AU (2) | AU7760201A (ko) |
| BR (1) | BR0112612B1 (ko) |
| CA (1) | CA2416673C (ko) |
| CL (1) | CL2004001154A1 (ko) |
| CY (1) | CY1110774T1 (ko) |
| DE (1) | DE60142340D1 (ko) |
| DK (1) | DK1307491T3 (ko) |
| DZ (1) | DZ3411A1 (ko) |
| EA (1) | EA005995B1 (ko) |
| EC (1) | ECSP034442A (ko) |
| ES (1) | ES2347134T5 (ko) |
| FR (1) | FR2811992B1 (ko) |
| HR (1) | HRP20030019A2 (ko) |
| HU (1) | HUP0300755A3 (ko) |
| IL (2) | IL153922A0 (ko) |
| MA (1) | MA26928A1 (ko) |
| MX (1) | MXPA03000579A (ko) |
| NO (1) | NO20030296D0 (ko) |
| NZ (1) | NZ524028A (ko) |
| OA (1) | OA12340A (ko) |
| PL (1) | PL202471B1 (ko) |
| PT (1) | PT1307491E (ko) |
| SI (1) | SI1307491T1 (ko) |
| TW (1) | TWI307278B (ko) |
| UA (1) | UA74836C2 (ko) |
| WO (1) | WO2002008295A1 (ko) |
| YU (1) | YU2903A (ko) |
| ZA (1) | ZA200300898B (ko) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6969705B2 (en) | 2000-07-21 | 2005-11-29 | Aventis Pharma S.A. | Compositions of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| ES2282368T3 (es) * | 2002-06-20 | 2007-10-16 | Chemi S.P.A. | Procedimiento para la preparacion de esteres de heparina. |
| US20040171819A1 (en) | 2002-10-10 | 2004-09-02 | Aventis Pharma S.A. | Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| FR2845686B1 (fr) | 2002-10-10 | 2013-08-30 | Aventis Pharma Sa | Melanges de polysaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
| KR101104107B1 (ko) | 2002-10-10 | 2012-01-12 | 아방티 파르마 소시에테 아노님 | 헤파린으로부터 유도된 다당류의 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약제학적 조성물 |
| US7956046B2 (en) * | 2003-07-24 | 2011-06-07 | Aventis Pharma S.A. | Oligosaccharide mixtures derived from heparin, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them |
| FR2857971B1 (fr) * | 2003-07-24 | 2005-08-26 | Aventis Pharma Sa | Melanges d'oligosaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
| DE102004059134B4 (de) | 2004-12-08 | 2011-12-15 | Siemens Ag | Expansionsvorrichtung für ein Röntgengerät und Röntgenstrahler |
| FR2889078B1 (fr) * | 2005-07-27 | 2007-11-02 | Aventis Pharma Sa | Nouvelle methode de chromatographie d'affinite d'antithrombine iii |
| CA2652205A1 (en) * | 2006-05-25 | 2007-12-06 | Mallik Sundaram | Low molecular weight heparin composition and uses thereof |
| CN101824099B (zh) * | 2010-02-12 | 2011-11-30 | 淮安麦德森化学有限公司 | 一种粗品肝素钠的纯化方法 |
| CN101824446B (zh) * | 2010-02-24 | 2012-12-12 | 淮安麦德森化学有限公司 | 反向沉淀生产硫酸软骨素的方法 |
| EP2399590A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-28 | Aventis Pharma S.A. | Semuloparin for the prevention of a mortality and/or morbidity event in a patient undergoing major orthopaedic surgery |
| EP2399592A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-28 | Aventis Pharma S.A. | Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in hip replacement surgery with improved safety in terms of clinically relevant bleedings and major bleedings |
| EP2399591A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-28 | Aventis Pharma S.A. | Semuloparin for the extended prevention of a mortality and/or morbidity event in a patient having undergone hip fracture surgery |
| EP2399593A1 (en) | 2010-06-28 | 2011-12-28 | Aventis Pharma S.A. | Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in orthopaedic surgery with improved benefit-risk profile |
| CN102399379B (zh) * | 2010-09-09 | 2016-08-31 | 上海喜恩医药科技发展有限公司 | 一种肝素衍生的多糖混合物及其制备方法和药物组合物 |
| AU2011303081B2 (en) * | 2010-09-14 | 2015-08-13 | Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. | High purity heparin and production method therefor |
| EP2446891A1 (en) | 2010-10-28 | 2012-05-02 | Aventis Pharma S.A. | Semuloparin for use as an antithrombotic treatment in major abdominal surgery with improved safety in terms of clinically relevant bleedings and major bleedings |
| WO2012055843A1 (en) | 2010-10-28 | 2012-05-03 | Aventis Pharma S.A. | Semuloparin for the prevention of major venous thromboembolism in a patient undergoing major abdominal surgery |
| EP2548561A1 (en) | 2011-07-22 | 2013-01-23 | Aventis Pharma S.A. | Semuloparin for improving the survival of patients with locally advanced cancer |
| ES2445494B1 (es) * | 2012-08-02 | 2015-03-06 | Rovi Lab Farmaceut Sa | Procedimiento de obtención de heparinas de bajo y muy bajo peso molecular |
| CN103175925B (zh) * | 2013-03-20 | 2014-12-03 | 山东辰中生物制药有限公司 | 依诺肝素钠生产过程中肝素苄基酯的酯化率的检测方法 |
| FR3016632A1 (fr) * | 2014-01-21 | 2015-07-24 | IFP Energies Nouvelles | Procede de transformation de polysaccharides en molecules oxygenees en presence de superbases organiques neutres |
| CZ306662B6 (cs) * | 2015-06-26 | 2017-04-26 | Contipro A.S. | Deriváty sulfatovaných polysacharidů, způsob jejich přípravy, způsob jejich modifikace a použití |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2478646A2 (fr) * | 1980-03-20 | 1981-09-25 | Choay Sa | Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir |
| IL61201A (en) * | 1979-10-05 | 1984-09-30 | Choay Sa | Oligosaccharides having no more than 8 saccharide moieties,their obtention from heparin and pharmaceutical compositions containing them |
| FR2482611B1 (fr) * | 1980-05-14 | 1986-03-07 | Pharmindustrie | Nouveaux polysaccharides sulfates, procedes pour leur preparation et leur utilisation comme medicaments |
| US4916219A (en) * | 1985-03-28 | 1990-04-10 | University Of Iowa Research Foundation | Oligosaccharide heparin fragments as inhibitors of complement cascade |
| EP0337327A1 (en) * | 1988-04-09 | 1989-10-18 | Bioiberica, S.A. | Process for the preparation of new oligosaccharide fractions by controlled chemical depolimerization of heparin |
| ES2077533B1 (es) * | 1994-02-28 | 1996-07-01 | Bioiberica | Procedimiento de obtencion de fracciones de oligosacaridos por despolimerizacion quimica de heparina. |
| JP4897991B2 (ja) * | 1999-07-23 | 2012-03-14 | ラボラトリオス ファルマセウティコス ロビ ソシエダッド アノニマ | 超低分子量ヘパリン組成物 |
| ES2161615B1 (es) * | 1999-07-23 | 2003-03-16 | Rovi Lab Farmaceut Sa | Composiciones de heparinas de muy bajo peso molecular. |
-
2000
- 2000-07-21 FR FR0009572A patent/FR2811992B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
2001
- 2001-07-18 DE DE60142340T patent/DE60142340D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-18 JP JP2002514199A patent/JP5279160B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-18 AP APAP/P/2003/002744A patent/AP1703A/en active
- 2001-07-18 YU YU2903A patent/YU2903A/sh unknown
- 2001-07-18 CN CNB018141870A patent/CN1230449C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-18 OA OA1200300012A patent/OA12340A/fr unknown
- 2001-07-18 EP EP01955436.9A patent/EP1307491B2/fr not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-18 UA UA2003010495A patent/UA74836C2/uk unknown
- 2001-07-18 WO PCT/FR2001/002332 patent/WO2002008295A1/fr active IP Right Grant
- 2001-07-18 PL PL365561A patent/PL202471B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2001-07-18 BR BRPI0112612-1A patent/BR0112612B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-07-18 HU HU0300755A patent/HUP0300755A3/hu unknown
- 2001-07-18 DZ DZ013411A patent/DZ3411A1/fr active
- 2001-07-18 MX MXPA03000579A patent/MXPA03000579A/es active IP Right Grant
- 2001-07-18 ES ES01955436.9T patent/ES2347134T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-18 PT PT01955436T patent/PT1307491E/pt unknown
- 2001-07-18 HR HR20030019A patent/HRP20030019A2/xx not_active Application Discontinuation
- 2001-07-18 IL IL15392201A patent/IL153922A0/xx unknown
- 2001-07-18 EA EA200300178A patent/EA005995B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-07-18 CA CA2416673A patent/CA2416673C/fr not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-18 SI SI200130977T patent/SI1307491T1/sl unknown
- 2001-07-18 DK DK01955436.9T patent/DK1307491T3/da active
- 2001-07-18 KR KR1020037000689A patent/KR100853585B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-18 AU AU7760201A patent/AU7760201A/xx active Pending
- 2001-07-18 AT AT01955436T patent/ATE470679T1/de active
- 2001-07-18 AU AU2001277602A patent/AU2001277602B2/en not_active Ceased
- 2001-07-18 NZ NZ52402801A patent/NZ524028A/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-07-19 TW TW090117709A patent/TWI307278B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-07-20 AR ARP010103476A patent/AR029865A1/es active IP Right Grant
-
2003
- 2003-01-10 MA MA26996A patent/MA26928A1/fr unknown
- 2003-01-13 IL IL153922A patent/IL153922A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-01-20 EC EC2003004442A patent/ECSP034442A/es unknown
- 2003-01-20 NO NO20030296A patent/NO20030296D0/no not_active Application Discontinuation
- 2003-01-31 ZA ZA200300898A patent/ZA200300898B/en unknown
-
2004
- 2004-05-19 CL CL200401154A patent/CL2004001154A1/es unknown
-
2010
- 2010-09-09 CY CY20101100819T patent/CY1110774T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100853585B1 (ko) | 헤파린-유래 폴리사카라이드 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약학 조성물 | |
| US20110152509A1 (en) | Compositions of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| JP5389140B2 (ja) | ヘパリン誘導多糖類混合物、その製造およびそれを含有する医薬組成物 | |
| IE64884B1 (en) | Low molecular weight heparins of regular structure their preparation and their biological uses | |
| US8003623B2 (en) | Mixtures of sulfated oligosaccharides | |
| AU2004259111B2 (en) | Heparin-derived oligosaccharide mixtures, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing said mixtures | |
| KR101104107B1 (ko) | 헤파린으로부터 유도된 다당류의 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약제학적 조성물 | |
| NZ537411A (en) | Heparin-derived polysaccharide mixtures and preparation method | |
| HK1094806B (en) | Heparin-derived oligosaccharide mixtures, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing said mixtures | |
| HK1145030A (en) | Heparin-derived polysaccharide mixtures, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing same | |
| HK1145026A (en) | Heparin-derived polysaccharide mixtures, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing same | |
| HK1145031A (en) | Heparin-derived polysaccharide mixtures, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing same |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PA0105 | International application |
Patent event date: 20030116 Patent event code: PA01051R01D Comment text: International Patent Application |
|
| PG1501 | Laying open of application | ||
| A201 | Request for examination | ||
| PA0201 | Request for examination |
Patent event code: PA02012R01D Patent event date: 20060718 Comment text: Request for Examination of Application |
|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| PE0902 | Notice of grounds for rejection |
Comment text: Notification of reason for refusal Patent event date: 20070625 Patent event code: PE09021S01D |
|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| PE0902 | Notice of grounds for rejection |
Comment text: Notification of reason for refusal Patent event date: 20080226 Patent event code: PE09021S01D |
|
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| PE0701 | Decision of registration |
Patent event code: PE07011S01D Comment text: Decision to Grant Registration Patent event date: 20080529 |
|
| GRNT | Written decision to grant | ||
| PR0701 | Registration of establishment |
Comment text: Registration of Establishment Patent event date: 20080814 Patent event code: PR07011E01D |
|
| PR1002 | Payment of registration fee |
Payment date: 20080814 End annual number: 3 Start annual number: 1 |
|
| PG1601 | Publication of registration | ||
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20110719 Start annual number: 4 End annual number: 4 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20120727 Year of fee payment: 5 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20120727 Start annual number: 5 End annual number: 5 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20130723 Year of fee payment: 6 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20130723 Start annual number: 6 End annual number: 6 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20140722 Year of fee payment: 7 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20140722 Start annual number: 7 End annual number: 7 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20150716 Year of fee payment: 8 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20150716 Start annual number: 8 End annual number: 8 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20160720 Year of fee payment: 9 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20160720 Start annual number: 9 End annual number: 9 |
|
| LAPS | Lapse due to unpaid annual fee | ||
| PC1903 | Unpaid annual fee |
Termination category: Default of registration fee Termination date: 20180525 |