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KR20020002361A - 소화관 통합성의 유지 및 회복 방법 및 이를 위한 조성물 - Google Patents

소화관 통합성의 유지 및 회복 방법 및 이를 위한 조성물 Download PDF

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KR20020002361A
KR20020002361A KR1020017007472A KR20017007472A KR20020002361A KR 20020002361 A KR20020002361 A KR 20020002361A KR 1020017007472 A KR1020017007472 A KR 1020017007472A KR 20017007472 A KR20017007472 A KR 20017007472A KR 20020002361 A KR20020002361 A KR 20020002361A
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KR
South Korea
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polyunsaturated fatty
fatty acid
acid
polyunsaturated
formulation
Prior art date
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Withdrawn
Application number
KR1020017007472A
Other languages
English (en)
Inventor
카우프수잔마리
카플란마이클스콧
Original Assignee
이곤 이 버그
아메리칸 홈 푸로닥츠 코포레이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 이곤 이 버그, 아메리칸 홈 푸로닥츠 코포레이션 filed Critical 이곤 이 버그
Publication of KR20020002361A publication Critical patent/KR20020002361A/ko
Withdrawn legal-status Critical Current

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Abstract

본 발명에는 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산과 배합된 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산을 유효량 포함하는 제형을, 이를 필요로 하는 개체에게 투여함을 포함하는, 상기 개체에서 소화관 통합성의 유지 및 회복 향상방법 및 이러한 방법에 사용하기 위한 제형이 기재되어 있다.

Description

소화관 통합성의 유지 및 회복 방법 및 이를 위한 조성물{Method and composition for the maintenance and restitution of gut integrity}
몇몇 질병 상태는 소화관 투과성의 증가를 특징으로 한다. 이러한 질병 상태의 예에는 대장염, 크론병, 과민성 대장 증후군, 만성 소화장애증, 기아, 낭성 섬유증, 괴사성 장결장염, 및 화학치료 및 방사선 치료로부터 야기되는 소화관 손상이 포함된다. 더우기, 조숙아 및/또는 미숙 소화관에서의 식품 알레르기는 유아의 영양 흡수를 비정상적으로 만들고 내독소 또는 박테리아를 순환계로 이동시킬 소지가 있는 고도의 투과성과 관련되어 있다.
장내 제형 또는 조성물에서의 장쇄 PUFA는 공지되어 있다. 미국 특허제4,670,285호에는 유아식에 사용하기에 적합한 특정한 지방산 블렌드가 기재되어 있다. 지방산 블렌드는 하나 이상의 C20또는 C22n-6 지방산과 하나의 C20또는 C22n-3 지방산을 함유한다. C20또는 C22n-6 지방산은, 조성물 중의 모든 지방산의 중량을 기준으로 하여, 총 약 0.13 내지 5.6중량%의 양으로 존재한다. C20또는 C22n-3 지방산은, 조성물 중의 모든 지방산의 중량을 기준으로 하여, 총 약 0.013 내지 약 4.44중량%의 양으로 포함된다. 상기 특허에는 지방산을 공급하기 위한 난 지질의 용도가 기재되어 있다.
미국 특허 제4,918,063호에는 궤양과 염증성 장 질환을 예방 또는 치료하기 위한, 인지질과 천연 지질의 혼합물을 함유하는 제형이 기재되어 있다. 상기 특허에는 실험 동물 모델에서 궤양 보호를 제공하는 것으로서, 포화 또는 불포화 트리글리세라이드 및/또는 스테롤과 함께 포화 또는 불포화 인지질의 혼합물이 기재되어 있다.
PCT 국제 공개공보 WO 제96/10922호에는 아라키돈산과 도코사헥산산이 인지질 형태로 존재함을 특징으로 하는 유아식용 지방산 혼합물이 기재되어 있다.
유럽 특허공보 제0 376 628 B1호에는 단독 팔미트산 오일 공급원으로서 랜덤화 종려유 또는 랜덤화 종려 올레인유를 사용하는 모든 식용 오일 지방 블렌드가 기재되어 있다. 이 조성물은 특히 조산아 또는 저체중 출산아용 유아식에 특히 유용한 것으로 기재되어 있다.
발명의 요약
본 발명은 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산과 배합된 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산을 포함하는 제형을 이를 필요로 하는 개체에게 투여함을 포함하는, 상기 개체에서의 소화관 통합성의 유지 및 소화관 통합성 회복의 향상방법, 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산과 배합된 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산을 유효량 포함하는, 상기 방법에 사용하기 위한 제형, 및 소화관 통합성의 유지 및 소화관 통합성의 회복 향상이 필요한 개체에서 이를 위해 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산과 배합된 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산 유효량의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 장쇄 다불포화 지방산(PUFA)을 함유하는 장내 제형 및 소화관 통합성을 유지하고 소화관 통합성의 회복을 향상시키는 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 소화관 통합성의 유지 및 회복 향상을 위해 소화관 투과성을 감소시키고 손상된 장관 세포를 회복시키는 방법 및 이를 위한 제형에 관한 것이다.
도 1은 본 발명의 제형이 보충된 랫트의 혈장 내독소 수준을 본 발명의 제형이 보충되지 않은 랫트의 혈장 내독소 수준과 비교한 것이다.
도 2는 장관 PLA2mRNA 발현 수준에 미치는 본 발명 제형의 효과를 나타낸다.
도 3은 RNA에서 장관 PAF-수용체 수준에 미치는 본 발명 제형의 효과를 나타낸다.
본 발명에 유용한 다불포화 지방산에는 탄소-탄소 이중결합이 2개 이상인 탄소수 20 이상의 지방산이 포함된다. 지방산에서 이중결합의 수와 위치는 통상 사용되는 명명법에 따라 지정된다. 예를 들면, 아라키돈산은 탄소수 20의 쇄 길이와 분자 말단으로부터 6번 탄소로부터 시작하는 4개의 이중결합을 갖는다. 따라서, 아라키돈산은 C20:4 n-6으로서 지시된다. 유사하게는, 도코사헥산산은 분자 말단으로부터 3번 탄소로부터 시작하는 6개의 이중결합과 함께 탄소수 22의 쇄 길이를 가지며, C22:6 n-3으로서 지시된다.
바람직하게는, 본 발명에서 사용되는 n-6 다불포화 지방산은 아라키돈산이고, 본 발명에서 사용되는 n-3 다불포화 지방산은 도코사헥산산이다.
본 발명의 방법은 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산과 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산을 함유하는 제형을 소화관 조직의 세포 손상이나 파괴를 특징으로 하는 질환을 하나 이상 갖는 개체에게 유효량 투여함을 포함한다. n-6 다불포화 지방산의 유효량은 체중(kg)당 약 5 내지 61mg이고 바람직하게는 체중(kg)당 10 내지 51mg이다. 유사하게는, n-3 다불포화 지방산의 유효량은 체중(kg)당 약 5 내지 61mg이고 바람직하게는 5 내지 51mg이다. 효과적인 아라키돈산:도코사헥산산의 비율은 약 1:1 내지 2.5:1, 바람직하게는 1:1 내지 2:1이다. 이는 유아 1kg당 1일 100kcal의 투여에 기초한 것이다.
상기한 n-6 및 n-3 다불포화 지방산의 유효량을 달성하기 위해, 본 방법에 사용되는 제형은 100ml당 약 4 내지 약 50mg, 바람직하게는 약 8 내지 약 41mg의 다불포화 지방산을 포함해야 한다. 본 방법에 사용되는 제형은 100ml당 약 4 내지약 50mg, 바람직하게는 약 4 내지 약 41mg의 n-3 다불포화 지방산을 포함해야 한다. 또한, 효과적인 아라키돈산:도코사헥산산의 비율은 1:1 내지 2.5:1 및 바람직하게는 1:1 내지 2:1이다.
본 발명은 소화관 통합성을 유지하고 소화관 통합성의 회복을 향상시키는 방법, 소화관 통합성을 유지하고 소화관 통합성의 회복을 향상시키기 위해 사용되는 제형 및 소화관 통합성을 유지하고 소화관 통합성의 회복을 향상시키는 데 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서의 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산과 배합된 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산 유효량의 용도에 관한 것이다. 소화관 통합성은 소화관 투과성을 증가시키고 소화관의 세포 손상이나 파괴를 유발하며 소화관의 세균 이동을 유발하여 내독소혈증을 유도할 수 있는 다수의 질환 상태로 지시된다. 이러한 방식으로 소화관 통합성을 유도하는 질환 상태에는 대장염, 크론병, 과민성 대장증후군, 만성 소화장애증, 기아, 낭성 섬유증, 화학치료 및 방사선 치료로부터 야기되는 손상 및 식품 알레르기가 포함된다. 또한, 조숙아에 있어서, 미숙 소화관은 또한 유아의 영양 흡수를 비정상적으로 만들고 내독소 또는 박테리아를 순환계로 이동시킬 소지가 있는 고도의 투과성과 관련되어 있다. 본 제형은 성인 및 유아 모두에게 장내로 투여된다.
본 발명의 바람직한 양태는 유아, 특히 조산아에 있어서 소화관 통합성을 유지하고 회복을 향상시키는 방법 또는 제형이다. 이 방법은 단백질, 탄수화물, 지질 및 유효량의 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산 및 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산을 포함하는 영양상 완전한 유아식을 유아에게 장내 투여함을 포함한다.
용어 "유아식"은 당업자에게 용이하게 인식될 수 있다. 초기에 농축 또는 분말 형태에서 희석하거나 재구성하여 즉시 먹을 수 있는 상태로 하는 경우, 전형적인 유아식은 1L당 비타민, 미네랄, 섬유질, 유화제 등 뿐만 아니라 탄수화물 약 60 내지 110g, 단백질 10 내지 35g 및 지질 20 내지 50g을 포함할 것이다. 치료를 필요로 하는 유아에서 소화관 통합성을 유지하고 회복을 향상시키기 위해서는 이러한 유아식에 적절한 양의 n-6 및 n-3 다불포화 지방산을 첨가한다. n-6 및 n-3 다불포화 지방산이 첨가될 수 있는 적합한 시판되는 유아식의 예에는 와이어쓰 뉴트리셔널스 인터네셔널(Wyeth Nutritionals International)로부터 입수가능한 S-26, S-26 LBW 및 SMA가 포함된다.
본 발명에 따르는 n-6 및 n-3 다불포화 지방산을 적당량 함유하는 지방산 블렌드의 특정한 예는 다음과 같다:
지방산 블렌드 1
지방산 지방산 %
C6:0 카프론산 --
C8:0 카프릴산 9.1
C10:0 카프린산 6.1
C12:0 라우린산 10.3
C14:0 미리스틴산 4.6
C14:1 미리스톨산 --
C16:0 팔미틴산 13.5
sn-2에서 C16:0 팔미틴산(%)
C16:1w7 팔미톨산 0.1
C18:0 스테아린산 4.8
C18:1w9 올레인산 32.3
C18:2w6 리놀산 15.9
C18:3w3 리놀렌산 1.7
C20:0 아라킨산 0.3
C20:2w6 --
C20:3w6 --
C20:4w6 아라키돈산 0.6
C22:0 도코산산 0.3
C22:6w3 도코사헥산산 0.4
C24:0 --
전체 100
지방산 블렌드 2
지방산 지방산 %
C6:0 카프론산 0.35
C8:0 카프릴산 9.87
C10:0 카프린산 4.63
C12:0 라우린산 6.4
C14:0 미리스틴산 2.46
C14:1 미리스톨산 0.02
C16:0 팔미틴산 13.43
sn-2에서 C16:0 팔미틴산(%) 39.0
C16:1w7 팔미톨산 0.03
C18:0 스테아린산 2.61
C18:1w9 올레인산 39.39
C18:2w6 리놀산 13.94
C18:3w3 리놀렌산 1.29
C20:0 아라킨산 0.01
C20:2w6 0.01
C20:3w6 0.02
C20:4w6 아라키돈산 0.61
C22:0 도코산산 0.3
C22:6w3 도코사헥산산 0.38
C24:0 0.02
전체 100
본 발명에서 사용하기에 적합한 유아식의 특정한 예는 다음과 같다:
유아식 A
성분 %
물 84.30
락토즈 1.20
탈지 건조유 2.83
유장 분말 2.83
말토덱스트린 4.45
지방 블렌드 4.11
비타민 0.02
미네랄 0.25
타우린 0.01
100.00
유아식 B
성분 %
물 57.77
탈지유(액체) 29.49
유장 단백질 농축물 2.76
락토즈 1.16
말토덱스트린 4.35
지방 블렌드 4.15
비타민 0.03
미네랄 0.28
타우린 0.01
100.00
본 발명은 하기 특정 실시예를 참조로 하여 설명될 것이다.
실시예
본 발명의 방법은 저산소증 유도된 소화관 손상된 신산 랫트 모델에서 시험한다. 소화관 투과성 감소는 내독소혈증의 감소 및 장관 포스포리파제-2(PLA2) 유전자 발현의 저하와 관련되어 있다. PLA2발현 수준의 저하는 염증 캐스케이드의 하향-조절을 의미한다.
동물 모델
랫트 태아를 임신 21일째에 시일 임신 스프라그-돌리 랫트로부터 복부 절개로 분만시킨다. 신산 랫트에게 생후 72시간 까지, 0.4ml 이하의 허용되는 한도에서 용량을 증가시키면서 3시간 마다 유아식 0.1ml(미국 버몬트주 버링톤 소재의 와이어쓰 뉴트리셔널스 인터네셔널로부터 입수가능한 S26-LBW 유아식)를 경구-장 경로를 통해 공급한다. 또한, 동물은 5.0초 동안 100% 질소 기체를 호흡하게 하여 1일 2회 질식시킨 다음 10분 동안 4℃에 냉 노출시켜 자극한다. 이 프로토콜을 사용하면, 동물 중 70 내지 80%는 문헌[참조: Caplan, M.S.; Hedlund, E.; Adler, L.; and Hsueh, W., "Role of Asphyxia and Feeding in a Neonatal Rat Model of Necrotizing Enterocolitis," Pedatr. Pathol., 14: 1017-1028(1994)]에 기재되어 있는 바와 같이 생후 3일 내지 4일까지 복부 괴사를 일으킨다.
처리 그룹
2개의 처리 그룹, 즉 조산 유아식(유아식 A)와 LCPUFA가 첨가된 조산 유아식(유아식 B)이 있다. 유아식 B에 첨가된 LCPUFA는 아라키돈산과 도코사헥산산이다. LCPUFA는 도코사헥산산 20mg/100kcal 및 아라키돈산 30mg/100kcal의 양으로 첨가된다. 1차 연구 성분은 육안 검사와 조직병리학으로 검시 당시 확인되는 소화관 손상을 검사한다. 육안 검사와 조직병리학은 소화관 손상, 성숙도 및 통합성의 변화를 특징으로 한다. 2차 연구 성분은 소화관 손상, 성숙도 및 통합성의 주요 기작 변화를 연구한다. 내독소혈증 및 PLA2의 산출 변수가 측정된다.
소화관 손상
안락사시킨 후, 장관은 소화관 손상 및 성숙도를 확인하기 위해 육안 검사와 조직학적 평가로 평가한다.
내독소혈증
혈장 내독소는 미국 메릴랜드주 워커스빌 소재의 바이오휘태커(Biowhittaker)로부터 입수가능한 리물러스 아메보사이트 리세이트[Limulus Amebocyte Lysate(LAL)] 검정에 제공되는 분광광도 방법을 사용하여 평가한다.
포스포리파제 A 2 mRNA 발현
PLA2mRNA 발현을 정량화하기 위해, 장관 균질물로부터 회수한 mRNA를 사용하여 경쟁적 PCR을 실시한다. cRNA의 연속 희석물을 장관 RNA에 가하고, 위에 기재된 표준 조건을 사용하여 PCR 반응을 실시한다. 생성물은 아가로즈 겔 위에서 작동시킨 다음 포스포르이미징 밀도를 이용하여 정량한다.
통계
세로좌표 데이타 그룹 사이의 차이는 예이트(Yate) 보정을 사용하는 카이 제곱 분석을 사용하여 비교한다. 적합한 경우, 연속 변수 사이의 차이는 스튜던트 t 시험 또는 분석 또는 분산을 이용하여 비교한다. P<0.05를 유의한 것으로 간주한다.
LCPUFA의 보충은 신산 랫트에 있어서 LCPUFA가 없는 유아식과 비교하여 허혈성 소화관 손상의 발생(허혈성 소화관 손상: 17/24 대조군 대 8/24 LCPUFA, 3×2 카이 제곱을 이용한 p=0.031)을 감소시킨다(표 1 참조). 동물은 통상 생후 48시간 내지 72시간에서 장관 손상 증후를 나타냈으며, 여기에는 복부 팽만, 전방 복벽의 탈색, 혈변 및 호흡 곤란이 포함된다.
허혈성 소화관 손상의 감소에 미치는 유아식 보충 효과*
유아식 번호 허혈성 소화관 손상 허혈성 소화관 손상 무
A 17 7
B 8 16
*P=.031
도 1에서 볼 수 있는 바와 같이, 48시간 내지 72시간에서 측정한 혈장 내독소 수준(25±4EU/ml)은 LCPUFA가 보충된 랫트의 혈장 내독소혈증이, 보충되지 않은 랫트(276±39EU/ml)보다 낮음을 보여준다. 도 2는 장관 PLA2mRNA 발현이, 보충되지 않은 랫트(0.68±0.11분자/조직(g))와 비교하여 LCPUFA가 보충된 랫트(0.41+0.09분자/조직(g))에서 유의적으로 낮음을 입증한다. 또한, 장관 PAF 수용체 mRNA 발현도 LCPUFA가 보충된 랫트에서 더욱 낮았다(1.5±0.3 대 2.1±0.2)(도 3).
이 결과는 LCPUFA 보충이 허혈성 소화관 손상에 대한 신산 랫트 모델에서 소화관 손상을 감소시킴을 입증한다. 또한, 이 데이타는 LCPUFA 보충의 유리한 효과가 소화관 투과성의 감소를 포함함을 입증한다. 소화관 투과성의 감소는 내독소혈증의 감소와 관련된다. 내독소혈증은 세균 및/또는 내독소의 소화관을 통한 전신 순환으로 이동의 결과이다. 장관 PLA2mRNA와 PAF 수용체 mRNA 발현의 동시 저하는 내독소 유도된 염증 반응의 감소를 나타낸다.
본 발명은 이의 정신 또는 본질을 벗어나지 않고도 다른 특정한 형태로 실시될 수 있으며, 따라서 상기 명세서 보다는 첨부된 특허청구범위가 본 발명의 범주를 나타내는 것으로서 참조될 수 있다.

Claims (21)

  1. 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산과 배합된 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산을 유효량 포함하는 제형을 이를 필요로 하는 개체에게 투여함을 포함하는, 당해 개체에서의 소화관 통합성의 유지 및 회복 향상방법.
  2. 제1항에 있어서, n-6 다불포화 지방산이 아라키돈산이고 n-3 다불포화 지방산이 도코사헥산산인 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 제형이 유아식인 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 제형이 100ml당 다불포화 n-6 지방산 4 내지 50mg과 다불포화 n-3 지방산 4 내지 50mg을 포함하는 방법.
  5. 제4항에 있어서, 제형이 100ml당 n-6 다불포화 지방산 8 내지 41mg과 n-3 다불포화 지방산 4 내지 41mg을 포함하는 방법.
  6. 제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 제형이 n-6 다불포화 지방산과 n-3 다불포화 지방산을 1:1 내지 2.5:1의 비율로 포함하는 방법.
  7. 제6항에 있어서, 제형이 n-6 다불포화 지방산과 n-3 다불포화 지방산을 1:1 내지 2:1의 비율로 포함하는 방법.
  8. 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산과 배합된 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산을 유효량 포함하는, 이를 필요로 하는 개체에서 소화관 통합성의 유지 및 회복 향상에 사용하기 위한 제형.
  9. 제8항에 있어서, n-6 다불포화 지방산이 아라키돈산이고 n-3 다불포화 지방산이 도코사헥산산인 제형.
  10. 제8항 또는 제9항에 있어서, 유아식인 제형.
  11. 제8항 내지 제10항 중의 어느 한 항에 있어서, 100ml당 다불포화 n-6 지방산 4 내지 50mg과 다불포화 n-3 지방산 4 내지 50mg을 포함하는 제형.
  12. 제11항에 있어서, 100ml당 n-6 다불포화 지방산 8 내지 41mg과 n-3 다불포화 지방산 4 내지 41mg을 포함하는 제형.
  13. 제8항 내지 제12항 중의 어느 한 항에 있어서, n-6 다불포화 지방산과 n-3 다불포화 지방산을 1:1 내지 2.5:1의 비율로 포함하는 제형.
  14. 제13항에 있어서, n-6 다불포화 지방산과 n-3 다불포화 지방산을 1:1 내지 2:1의 비율로 포함하는 제형.
  15. 소화관 통합성의 유지 및 회복 향상을 필요로 하는 개체에서 이를 위해 사용하기 위한 약제를 제조하는 데 있어서 하나 이상의 n-3 다불포화 지방산과 배합된 하나 이상의 n-6 다불포화 지방산 유효량의 용도.
  16. 제15항에 있어서, n-6 다불포화 지방산이 아라키돈산이고 n-3 다불포화 지방산이 도코사헥산산인 용도.
  17. 제15항 또는 제16항에 있어서, 제형이 유아식인 용도.
  18. 제15항 내지 제17항 중의 어느 한 항에 있어서, 제형이 100ml당 다불포화 n-6 지방산 4 내지 50mg과 다불포화 n-3 지방산 4 내지 50mg을 포함하는 용도.
  19. 제18항에 있어서, 제형이 100ml당 n-6 다불포화 지방산 8 내지 41mg과 n-3 다불포화 지방산 4 내지 41mg을 포함하는 용도.
  20. 제19항에 있어서, 제형이 n-6 다불포화 지방산과 n-3 다불포화 지방산을 1:1내지 2.5:1의 비율로 포함하는 용도.
  21. 제20항에 있어서, 제형이 n-6 다불포화 지방산과 n-3 다불포화 지방산을 1:1 내지 2:1의 비율로 포함하는 용도.
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