KR19990067390A

KR19990067390A - 티오페노피리미딘

Info

Publication number: KR19990067390A
Application number: KR1019980703400A
Authority: KR
Inventors: 첸 첸; 토마스 알. 웹; 제임스 알. 맥커티; 테렌스 제이. 모란
Original assignee: 뉴로크린 바이오사이언시즈 인코퍼레이티드; 반테 디르크; 얀센 파마슈티카 엔.브이.
Priority date: 1996-02-07
Filing date: 1997-01-30
Publication date: 1999-08-16
Also published as: ES2167710T3; EP0882051A1; NO981356L; ATE208395T1; DE69708059D1; PT882051E; US6255310B1; MY119118A; CA2233307A1; DK0882051T3; AR005731A1; AU725674B2; NO981356D0; WO1997029110A1; AU1720997A; TW448178B; EP0882051B1; US6469166B2; DE69708059T2; NZ330118A

Abstract

본 발명은 CRF 수용체에 대해 길항성을 갖는 하기 일반식 (I)의 화합물, 그의 입체이성체 및 약제학적으로 허용되는 산 부가염, 활성 성분으로서 이들 화합물을 함유하는 약제학적 조성물 및 유효량의 일반식 (I)의 화합물을 투여하여 우울증, 불안 및 약물 남용과 같은 CRF의 과분비와 관련된 질환을 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다.

상기식에서,

X 는 S, SO 또는 SO₂를 나타내고;

R¹은 NR⁴R⁵또는 OR⁵를 나타내며;

R²는 C_1-6알킬, C_1-6알킬옥시 또는 C_1-6알킬티오를 나타내고;

R³은 수소, C_1-6알킬, C_1-6알킬설포닐, C_1-6알킬설폭시 또는 C_1-6알킬티오를 나타내며;

R⁴는 수소, C_1-6알킬, 모노- 또는 디(C_3-6사이클로알킬)메틸, C_3-6사이클로알킬, C_3-6알케닐, 하이드록시C_1-6알킬, C_1-6알킬카보닐옥시C_1-6알킬 또는 C_1-6알킬옥시C_1-6알킬을 나타내고;

R⁵는 C_1-8알킬, 모노- 또는 디(C_3-6사이클로알킬)메틸, Ar¹CH₂, C_1-6알킬옥시C_1-6알킬, 하이드록시C_1-6알킬, C_3-6알케닐, 티에닐메틸, 푸라닐메틸, C_1-6알킬티오C_1-6알킬, 모르폴리닐, 모노- 또는 디(C_1-6알킬)아미노C_1-6알킬, 디(C_1-6알킬)아미노, C_1-6알킬카보닐C_1-6알킬, 이미다졸릴에 의해 치환된 C_1-6알킬, 또는 일반식 -Alk-O-CO-Ar¹의 래디칼을 나타내거나;

R⁴및 R⁵는 이들이 결합된 질소 원자와 함께, 각각 C_1-6알킬 또는 C_1-6알킬옥시C_1-6알킬에 의해 임의로 치환된 피롤리디닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐 또는 모르폴리닐 그룹을 형성할 수 있으며;

Ar 은 페닐, 치환된 페닐, 피리디닐 또는 치환된 피리디닐을 나타낸다.

Description

티오페노피리미딘

최초의 부신피질호르몬-방출 인자(CRF)는 양의 시상하부로부터 분리되었고, 41-아미노산 펩타이드인 것으로 확인되었다(참조: Vale et al., Science 213:1394-1397, 1981). 그 후, 인간과 랫트의 CRF 서열이 분리되어 동일한 것으로 확인되었지만, 양의 CRF와는 41개의 아미노산 잔기중에서 7개가 상이하다(참조: Rivier et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:4851, 1983; Shibahara et al., EMBO J. 2:775, 1983). CRF는 내분비계, 신경계 및 면역계 기능을 상당히 변경시키는 것으로 밝혀졌다. CRF는 부신피질호르몬("ACTH"), β-엔도르핀, 및 그밖의 다른 하수체전엽으로부터 프로-오피오멜라노코르틴("POMC")-유도된 펩타이드의 정상적 및 스트레스-방출의 주요한 생리학적 조절제인 것으로 생각된다(참조: Vale et al., Science 213:1394-1397, 1981). 간단히 말하면, CRF는 뇌(DeSouza et al., Science 221:1449-1451, 1984), 하수체(DeSouza et al., Methods Enzymol. 124:560, 1986; Wynn et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 110:602-608, 1983), 부신(Udelsman et al., Nature 319:147-150, 1986) 및 비장(Webster, E.L., and E.B. DeSouza, Endocrinology 122:609-617, 1988)의 전반에 걸쳐 분포된 것으로 확인된 혈장막 수용체와 결합함으로써 그의 생물학적 효과를 개시하는 것으로 생각된다. CRF 수용체는 CRF에 의해 유도된 cAMP의 세포내 생산 증가를 매개하는 GTP-결합 단백질(참조: Perrin et al., Endocrinology 118:1171-1179, 1986)과 커플링한다(참조: Bilezikjian, L.M., 및 W.W. Vale, Endocrinology 113:657-662, 1983).

ACTH 및 POMC의 생산을 촉진하는 역할이외에도, CRF 는 또한 스트레스에 대한 다수의 내분비 자율 및 행동적 응답에 공조하는 것으로 여겨지며, 감정적인 장애의 병태생리에 포함될 수 있다. 또한, CRF는 면역계, 중추신경계, 내분비계 및 심혈관계 간의 커뮤니케이션에 있어서 주요 매개자인 것으로 생각된다(참조: Crofford et al., J. Clin. Invest. 90:2555-2564, 1992; Sapolsky et al., Science 238:522-524, 1987; Tilders et al., Regul. Peptides 5:77-84, 1982). 종합적으로, CRF는 중추 신경계 신경전달물질의 하나이며, 스트레스에 대한 신체의 전체적 응답을 통합하는데 주요한 역할을 하는 것으로 나타났다.

CRF를 뇌에 직접 투입하면 스트레스가 많은 환경에 노출된 동물에게서 관찰된 것과 동일한 행동적, 생리학적 및 내분비 응답이 유도된다. 예를 들어, CRF를 대뇌내심실에 주입하면, 행동이 활발해지고(참조: Sutton et al., Nature 297:331, 1982), 뇌파를 장시간 활성화시키고(참조: Ehlers et al., Brain Res. 2/8332, 1983), 교감신경부신질 경로를 자극하고(참조: Brown et al., Endocrinology 110:928, 1982), 심박수 및 혈압을 중가시키고(참조: Fisher et al., Endocrinology 110:2222, 1982), 산소 소비량을 증가시키고(참조: Brown et al., Life Sciences 30:207, 1982), 위장 운동을 변경시키고(참조: Williams et al., Am. J. Physiol. 253:G582, 1987), 음식 소비를 억제하고(참조: Levine, et al., Neuropharmacology 22:337, 1983), 성적 행동을 변화시키고(참조: Sirinathsinghji et al., Nature 305:232, 1983), 면역 기능을 저하시킨다(참조: Irwin et al., Am. J. Physiol. 255:R744, 1988). 또한, 임상적 데이터는 CRF가 우울증, 불안-관련 장애 및 신경성 식욕부진 상태의 뇌에서 과분비될 수 있음을 시사한다(참조: DeSouza, Ann. Reports in Med. Chem. 25:215-223, 1990).

따라서, 임상적 데이터는 CRF 수용체 길항제가 CRF를 과분비하는 신경정신과적 질환을 치료하는데 유용할 수 있는 신규한 항우울제 및/또는 불안해소제일 수 있음을 시사한다. CRF 수용체 길항제는 예를 들어 치환된 4-티오-5-옥소-3-피라졸린 유도체를 기술하고 있는 미합중국 특허 제 5,063,245호 및 치환된 2-아미노티아졸 유도체를 기술하고 있는 오스트레일리아 특허 제 AU-A41399/93호에 기재되어 있다. 또한, WO-94/13676, WO-94/13677 및 WO-95/33750 호는 CRF 수용체 길항제로서 피롤로피리미딘, 피라졸로[3,4-d]피리미딘 및 치환된 푸린을 기재하고 있다. EP-0,452,002 호는 살충제로서 티에노피리미딘을 기재하고 있다.

CRF의 생리학적 중요성 때문에, CRF 수용체를 길항시킬 수 있고, 상당한 CRF 수용체 결합 활성을 갖는 생물학적으로 활성인 작은 분자를 개발하는 것이 주요한 과제로 남아 있다. 이러한 CRF 수용체 길항제는 일반적으로 스트레스-관련 질환을 포함한 내분비계, 정신의학계 및 신경계 증상 또는 질환을 치료하는데 유용하다.

본 발명은 CRF 수용체에 대해 길항성을 갖는 티오페노피리미딘, 활성 성분으로서 이들 화합물을 함유하는 약제학적 조성물 및 일반적으로 스트레스-관련 질환을 포함한 내분비계, 정신의학계 및 신경계 증상 또는 질환을 치료하기 위한 그의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 하기 일반식 (I)의 화합물, 그의 입체이성체 및 약제학적으로 허용되는 산부가염에 관한 것이다:

상기식에서,

X 는 S, SO 또는 SO₂를 나타내고;

R¹은 NR⁴R⁵또는 OR⁵를 나타내며;

R²는 C_1-6알킬, C_1-6알킬옥시 또는 C_1-6알킬티오를 나타내고;

Ar 은 페닐; 할로, C_1-6알킬, 트리플루오로메틸, 하이드록시, 시아노, C_1-6알킬옥시, 벤질옥시, C_1-6알킬티오, 니트로, 아미노 및 모노- 또는 디(C_1-6알킬)아미노로 구성된 그룹중에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 페닐; 피리디닐; 또는 할로, C_1-6알킬, 트리플루오로메틸, 하이드록시, 시아노, C_1-6알킬옥시, 벤질옥시, C_1-6알킬티오, 니트로, 아미노, 모노- 또는 디(C_1-6알킬)아미노 및 피페리디닐로 구성된 그룹중에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 피리디닐을 나타내고; 여기에서 치환된 페닐은 하나 또는 그 이상의 할로겐에 의해 임의로 추가로 치환될 수 있으며;

Ar¹은 페닐; 할로, C_1-6알킬, C_1-6알킬옥시, 디(C_1-6알킬)아미노C_1-6알킬, 트리플루오로메틸 및 모르폴리닐에 의해 치환된 C_1-6알킬로 구성된 그룹중에서 각각 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 페닐; 또는 피리디닐을 나타내고;

Alk 는 C_1-6알칸디일을 나타낸다.

상기 정의에서 사용된 것으로, 용어 할로는 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도를 의미하고; C_1-6알칸디일은 예를 들어 메틸렌, 1,2-에탄디일, 1,3-프로판디일, 1,4-부탄디일, 1,5-펜탄디일, 1,6-헥산디일 및 이들의 측쇄 이성체와 같은 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 2가의 직쇄 및 측쇄 포화 탄화수소 래디칼을 의미하며; C_1-2알킬은 메틸 및 에틸과 같은 탄소 원자수 1 내지 2의 직쇄 포화 탄화수소 래디칼을 의미하며; C_2-4알킬은 에틸, 프로필, 부틸, 1-메틸에틸 등과 같은 탄소 원자수 2 내지 4 의 직쇄 및 측쇄 포화 탄화수소 래디칼을 의미하고; C_3-4알킬은 프로필, 부틸, 1-메틸에틸 등과 같은 탄소 원자수 3 내지 4의 직쇄 및 측쇄 포화 탄화수소 래디칼을 의미하며; C_1-6알킬은 상기 정의된 C_1-2알킬 및 C_3-4알킬과 펜틸, 펜틸 이성체, 헥실 및 헥실 이성체와 같은 탄소 원자수 5 내지 6의 그의 고급 동족체를 의미하고; C_1-8알킬은 상기 정의된 C_1-6알킬 및 예를 들어 헵틸, 옥틸 등과 같은 탄소 원자수 7 내지 8의 그의 고급 동족체를 의미하며; C_3-6알케닐은 예를 들어 2-프로페닐, 3-부테닐, 2-펜테닐, 3-펜테닐, 3-메틸-2-부테닐 등과 같은 3 내지 6개의 탄소 원자를 갖고 하나의 이중결합을 포함하는 직쇄 및 측쇄 탄화수소 래디칼을 의미하고; C_3-6알케닐이 질소 또는 산소에 결합된 경우, 결합을 형성하는 탄소 원자는 바람직하게는 포화되어있다. C_3-6사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 및 사이클로헥실을 포함한다. 하이드록시C_1-6알킬은 하이드록실 그룹으로 치환된 C_1-6알킬을 의미한다. 호모피페리디닐은 하나의 질소 원자를 포함하는 7 원 포화환이다.

일부 치환체의 특성상, 일반식 (I)의 화합물은 일반적으로 사용되는 R 및 S 명명법으로 표시될 수 있는 하나 또는 그 이상의 비대칭 중심을 포함할 수 있다.

본 발명의 화합물은 염기성 질소 원자를 함유하며, 그 자체로서 유리 염기로서 또는 산부가염의 형태로 존재할 수 있으며, 이들은 모두 본 발명의 한 부분이다. 산부가염은 당 기술에 공지된 방법으로 제조될 수 있으며, 유기 및 무기산으로부터 형성될 수 있다. 적합한 유기산으로는 말레인산, 푸마르산, 밴조산, 아스코르브산, 석신산, 메탄설폰산, 아세트산, 옥살산, 프로피온산, 타르타르산, 살리실산, 시트르산, 글루콘산, 락트산, 만델린산, 신남산, 아스파르트산, 스테아르산, 팔미트산, 글리콜산, 글루탐산 및 벤젠설폰산이 포함된다. 적합한 무기산으로는 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산 및 질산이 포함된다.

본 발명의 화합물의 특별한 그룹은 하기 제한중의 하나 이상에 따르는 일반식 (I)의 화합물이다:

a) R¹이 NR⁴R⁵이고, 여기에서 R⁴는 C_1-6알킬 또는 C_1-6알킬옥시C_1-6알킬이며, R⁵는 C_1-6알킬, C_3-6알케닐, C_3-6사이클로알킬메틸 또는 하이드록시C_1-6알킬이고; 특히 R⁴는 C_2-4알킬 또는 메톡시C_1-2알킬이며, R⁵는 C_2-4알킬, 사이클로프로필메틸 또는 하이드록시C_2-4알킬이거나;

b) R¹은 OR⁵이고, 여기에서 R⁵는 C_1-6알킬, 특히 C_2-4알킬이며;

c) R²는 C_1-6알킬, 특히 C_1-2알킬이고;

d) R³은 수소 또는 C_1-6알킬, 특히 수소 또는 C_1-2알킬이며;

e) Ar 은 C_1-6알킬, C_1-6알킬옥시 및 할로로 구성된 그룹중에서 각각 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 페닐이고, 이 치환된 페닐상의 또다른 수소중 하나는 할로일 수 있으며; 특히 Ar 이 4-, 2,4- 또는 2,4,6-위치가 각각 독립적으로 할로, C_1-2알킬 또는 C_1-2알킬옥시에 의해 치환된 페닐이거나; Ar 이 디(C_1-6알킬)아미노 및 C_1-6알킬로 구성된 그룹중에서 각각 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 피리디닐, 특히 2,4-, 2,6- 또는 2,4,6-위치가 각각 독립적으로 디(C_1-2알킬)아미노 또는 C_1-2알킬에 의해 치환된 피리디닐이다.

다른 특별한 화합물 그룹은 R¹이 NR⁴R⁵이고, 여기에서 R⁴및 R⁵는 이들이 결합된 질소원자와 함께, 각각 C_1-6알킬 또는 C_1-6알킬옥시C_1-6알킬에 의해 임의로 치환된 피롤리디닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐 또는 모르폴리닐 그룹을 형성하는 일반식 (I)의 화합물이다.

바람직한 화합물은 R¹이 NR⁴R⁵이고, 여기에서 R⁴는 C_3-4알킬 또는 C_1-2알킬옥시C_3-4알킬, 바람직하게는 프로필이며, R⁵는 C_3-4알킬 또는 사이클로프로필메틸, 바람직하게는 프로필이거나; R¹은 OR⁵이고, 여기에서 R⁵는 C_3-4알킬이며; R²는 메틸이며; R³은 수소 또는 메틸이고; Ar 은 2-, 4- 및 6-위치가 할로 또는 C_1-4알킬에 에 의해 치환되고 3-할로에 의해 임의로 추가로 치환되며, 더욱 바람직하게는 Ar 이 2,4,6-트리메틸페닐, 3-브로모-2,4,6-트리메틸페닐, 6-(디메틸아미노)-4-메틸피리디닐 또는 2,4-디메틸피리디닐인 일반식 (I)의 화합물이다.

더욱 바람직하게는 Ar 은 4- 및/또는 6-위치가 메틸 또는 디메틸아미노에 의해 치환된 3-피리디닐이다.

가장 바람직한 화합물은 2-메틸-6-(N-프로필-N-사이클로프로필아미노)-8-(2,4,6-트리메틸페닐)티오페노[3,2-d]피리미딘 및 2-메틸-6-(N,N-디프로필아미노)-8-(2,4,6-트리메틸페닐)티오페노[3,2-d]피리미딘, 이들의 입체이성체 및 약제학적으로 허용되는 산부가염중에서 선택된 화합물이다.

본 발명의 화합물은 일반적으로 일반식 (II)의 티아졸로피리미딘을 일반식 (III)의 중간체로 알킬화시킴으로써 제조할 수 있다:

중간체 (II)에서, W 는 할로, 예를 들어 클로로 또는 브로모, 또는 설포닐옥시 그룹, 예를 들어 메실옥시 또는 토실옥시 그룹과 같은 적합한 이탈 그룹을 나타낸다. 상기 반응은 일반적으로 적합한 용매, 예를 들어 DMF 또는 아세토니트릴과 같은 비양성자성 용매, 에테르, 예를 들어 테트라하이드로푸란중, 바람직하게는 승온에서, 일반식 (III)의 중간체가 휘발성 아민인 경우에 밀폐 반응 용기에서 수행된다.

또한, R¹이 OR⁵인 일반식 (I)의 화합물[이 화합물은 일반식 (I-a)로 표시된다]은 일반식 (IX)의 중간체를 일반식 (X)의 중간체(여기에서, W 는 상기 정의된 바와 같다)로 O-알킬화시킴으로써 제조할 수 있다:

상기 반응은 반응-불활성 용매, 예를 들어 N,N-디메틸포름아미드중에서 적합한 염기, 예를 들어 수소화나트륨의 존재하에 바람직하게는 실온 내지 환류 온도에서 수행될 수 있다.

R¹이 NR⁴R⁵인 일반식 (I)의 화합물[이 화합물은 일반식 (I-c)로 표시된다]은 일반식 (XI) 또는 (XII)의 화합물을 하기 반응식과 같이 적합한 N-알킬화시킴으로써 제조할 수 있다:

상기 반응식에서, W 는 상기 정의한 바와 같다.

상기 N-알킬화는 반응-불활성 용매, 예를 들어 에테르(예: 테트라하이드로푸란)중에서 바람직하게는 강염기, 예를 들어 NaH의 존재하에 수행된다.

특정의 경우에, 상기 반응은 R²가 (R⁴또는 R⁵)-W 에 의해 알킬화된, 특히 R²가 메틸이고, R⁴또는 R⁵는 저급 알킬인 부 생성물을 형성할 수 있다.

후술하는 바와 같이, 일반식 (I)의 화합물은 당 기술에 공지된 변환방법에 따라 상호 전환시킬 수 있다.

예를 들어, X 가 S 인 일반식 (I)의 화합물은 산화 반응에 의해, 예를 들어 반응-불활성 용매, 예를 들면 디클로로메탄중에서 3-클로로퍼벤조산과 같은 퍼옥사이드로 처리함으로써 X 가 SO 또는 SO₂인 일반식 (I)의 화합물로 전환시킬 수 있다. 산화제의 양 및 다른 반응 파라미터를 조절함으로써 X 가 SO 또는 SO₂인 일반식 (I)의 화합물 또는 이들의 혼합물을 수득할 수 있으며, 이들을 계속해서 통상의 방법, 예를 들어 칼럼 크로마토그래피에 의해 분리할 수 있다. 또한, R³가 C_1-6알킬티오인 일반식 (I)의 화합물은 상기와 유사한 산화 반응에 의해 R³가 C_1-6알킬설포닐 또는 C_1-6알킬설폭시인 일반식 (I)의 화합물로 전환시킬 수 있다. 산화제의 양 및 다른 반응 파라미터를 조절하고, 최종 생성물을 분리하여 다양한 산화 생성물을 개별적으로 수득할 수 있다.

또한, 일반식 (I)의 화합물의 Ar 그룹은 적합한 용매, 예를 들어 아세트산중에서 할로겐화제, 예를 들어 염소 또는 브롬을 사용하여 할로겐화시킬 수 있으며, 임의로 반응은 실온 내지 반응 혼합물의 환류온도에서 수행할 수 있다.

입체이성체는 일반식 (I)의 최종 생성물을 당 기술에 공지된 방법에 따라 분리함으로써, 예를 들어 광학 활성산으로 처리하고, 형성된 부분입체이성체염을 선택적 결정화 또는 칼럼 크로마토그래피에 의해 분리함으로써 제조할 수 있다. 또한, 입체이성체는 상술한 반응도식에서 또는 후술하는 중간체의 제조에 있어서 입체이성체 출발물질을 사용함으로써 제조할 수 있다.

X 가 S 인 일반식 (II)의 중간체[이 중간체는 일반식 (II-a)의 화합물로 표시된다]는 이후 설명에 따라 제조될 수 있다. 일반식 (IV)의 중간체를 알콜, 예를 들어 에탄올과 같은 반응-불활성 용매중에서, 바람직하게는 강염기, 예를 들어 소듐 에톡사이드 또는 수소화나트륨의 존재하에 일반식 (V)의 에스테르로 처리하여 일반식 (VI)의 중간체를 제조한다. 일반식 (VI)의 중간체를 메탄설포닐클로라이드 및 2-(아세틸티오)-아세토니트릴과 연속 반응시켜 일반식 (VII)의 아미노티오펜 유도체를 수득한다. 일반식 (VII)의 화합물을 통상의 아실화 방법에 따라, 예를 들어 산 무수물 (R²CO)₂O 를 사용하여 중간체 (VIII)로 전환시킨다. 일반식 (VIII)의 중간체를 중간체 (II'-b)로 폐환시킨 후, 중간체 (II'-b)의 하이드록시 그룹을 메탄설포닐옥시 클로라이드 또는 할로겐화제(예: POCl₃)로 처리하여 이탈 그룹 W로 전환시킴으로써 중간체 (II-a)를 수득한다:

일반식 (II)의 중간체를 암모니아로 처리하여 일반식 (XI)의 중간체를 제조한다.

한 구체예에서, 본 발명은 또한 W' 가 하이드록시, 할로, 메실옥시 또는 토실옥시를 나타내는 일반식 (II-a)로 정의되는 일반식 (II'-a)의 화합물을 제공한다.

상기 일반식 (II'-a)의 중간체는 상기 일반식 (II-a)의 중간체를 제조하기 위해 사용된 방법에 따라 W' 가 하이드록시인 일반식 (II'-a)의 화합물로 정의되는 일반식 (II'-b)의 화합물을 수득하고, 임의로 일반식 (II'-b)의 화합물을 W' 가 하이드록시이외의 것인 일반식 (II'-a)의 화합물로 정의되는 일반식 (II-a)의 화합물로 전환시킴으로써 제조할 수 있다.

CRF 수용체 길항제로서 화합물의 유효성은 다양한 시험 방법에 의해 결정될 수 있다. 본 발명의 적합한 CRF 길항제는 CRF가 그의 수용체에 특이적으로 결합하는 것을 억제할 수 있으며, CRF 와 관련된 활성을 길항할 수 있다. 일반식 (I)의 화합물은 DeSouza 등에 의한 문헌 (J. Neuroscience 7:88, 1987) 및 Battaglia 등에 의한 문헌 (Synapse I:572, 1987)에 기재된 시험(이들로 한정되지 않는다)을 포함하여 이러한 목적에 일반적으로 사용되는 하나 또는 그 이상의 시험 방법에 의해 CRF 길항제로서의 활성에 대해 평가될 수 있다. 상기 언급된 바와 같이, 적합한 CRF 길항제로는 CRF 수용체에 대해 친화성을 갖는 화합물이 포함된다. CRF 수용체 친화성은 수용체(예를 들어 랫트의 대뇌피질막으로 부터 제조된 수용체)에 대한 방사표지된 CRF(예를 들어 [¹²⁵I]티로신 CRF)의 결합을 억제하는 화합물의 정도를 측정하는 결합 분석 시험에 의해 결정될 수 있다. DeSouza 등에 의한 문헌 (supra, 1987)에 기술된 방사리간드 결합 분석 시험은 CRF 수용체에 대한 화합물의 친화성을 결정하는 분석법을 제공한다. 이러한 활성은 일반적으로 수용체로부터 방사표지된 리간드의 50%를 대체시키는데 필요한 화합물의 농도로서 IC₅₀으로 부터 계산되며, 하기 식으로부터 계산된 "K_i"값으로서 기록된다:

K_i= (IC₅₀/(1+L/K_D))

상기식에서,

L 은 방사리간드이고,

K_D는 수용체에 대한 방사리간드의 친화성이다(참조: Chen 및 Prusoff에 의한 Biochem. Pharmacol. 22:3099, 1973).

CRF 수용체 결합을 억제하는 것 이외에, 화합물의 CRF 수용체를 길항하는 활성이 CRF 와 관련된 활성을 길항시킬 수 있는 화합물의 능력에 의해 결정될 수 있다. 예를 들어, CRF 는 아데닐레이트 사이클라제 활성을 포함하여 각종 생화학적 과정을 자극하는 것으로 공지되어 있다. 따라서, 화합물은, 예를 들어 cAMP 수준을 측정함으로써 CRF-유도된 아데닐레이트 사이클라제의 활성을 길항시킬 수 있는 그의 능력에 의해 CRF 길항제로서 평가될 수 있다. Battaglia 등에 의한 문헌(supra, 1987)에 기술된 CRF-유도된 아데닐레이트 사이클라제의 활성 시험으로 부터 CRF 활성을 길항하는 화합물의 능력을 측정하는 시험을 유도할 수 있다. 따라서, CRF 수용체 길항 활성은 일반적으로 초기 결합 시험(DeSouza(supra, 1987)에 기재된 것과 같이)을 수행하고, 그후에 cAMP 선별 프로토콜(Battaglia(supra, 1987)에 기재된 것과 같이)를 수행하는 과정을 포함하는 시험 기술에 의해 측정될 수 있다. CRF 수용체 결합 친화성과 관련하여, 본 발명의 CRF 수용체 길항제는 10 μM미만의 K_i를 갖는다. 본 발명의 바람직한 구체예에서, CRF 수용체 길항제는 1 μM미만 및 더욱 바람직하게는 0.25 μM(즉, 250 nM) 미만의 K_i를 갖는다.

본 발명의 CRF 수용체 길항제는 CRF 수용체 부위에서 활성을 나타내며, 내분비계, 정신의학계 및 신경계 질환 또는 병을 포함한 광범위한 질환 또는 병을 치료하기 위한 치료제로서 사용될 수 있다. 더욱 구체적으로, 본 발명의 CRF 수용체 길항제는 CRF가 과분비됨으로써 나타나는 생리학적 증상 또는 질환을 치료하는데 유용할 수 있다. CRF는 스트레스에 대한 내분비계, 행위적 및 자가 응답을 활성화하고 공조하는 중추 신경계 신경전달물질인 것으로 생각되기 때문에, 본 발명의 CRF 수용체 길항제는 신경정신과적 질환을 치료하는데 사용될 수 있다. 본 발명의 CRF 수용체 길항제에 의해 치료될 수 있는 신경정신과적 질환에는 우울증과 같은 감정 장애; 불안-관련 장애, 예를 들어 범불안 장애, 공황 장애, 강박 장애, 비정상적 공격성, 불안정 협심증 및 반응적 고혈압과 같은 심혈관 이상; 및 신경성 식욕부진, 대식증 및 과민성 장증상과 같은 음식물 섭취 장애가 포함된다. CRF 길항제는 또한 각종 질병 상태를 수반하는 스트레스에 의한 면역 억제뿐만 아니라 졸중을 치료하는데 유용할 수 있다. 본 발명에 따른 CRF 길항제의 또 다른 용도로는 염증성 증상(류마티스성 관절염, 포도막염, 천식, 염증성 장 질환 및 G.I. 운동성과 같은), 쿠싱(Cushing)병, 유아 경련, 간질, 유아 및 성인 발작, 및 각종 약물 남용 및 금단현상(알콜중독 포함)의 치료가 포함된다.

본 발명의 또 다른 구체예에서, 하나 또는 그 이상의 CRF 수용체 길항제를 함유하는 약제학적 조성물이 기재되어 있다. 투여의 목적을 위해, 본 발명의 화합물은 약제학적 조성물로 제형화될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 본 발명의 CRF 수용체 길항제(즉, 일반식 (I)의 화합물) 및 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 희석제를 함유한다. CRF 수용체 길항제는 특정 질환을 치료하는데 효과적인 양, 즉 CRF 수용체 길항 활성을 이루기에 충분한 양으로서, 및 바람직하게는 환자에 허용되는 독성 수준으로 조성물중에 존재한다. 바람직하게는, 본 발명의 약제학적 조성물은 CRF 수용체 길항제를 투여 경로에 따라 1회 복용량당 0.1 ㎎ 내지 250 ㎎, 및 더욱 바람직하게는 1 ㎎ 내지 60 ㎎의 양으로 함유할 수 있다. 적합한 농도 및 복용량은 당 기술자들에 의해 쉽게 결정될 수 있다.

약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 희석제는 당해 기술자들에 잘 알려져 있다. 액체 용액으로서 제형화된 조성물에 대해, 허용되는 담체 및/또는 희석제는 염수 및 멸균수를 포함하며, 임의로 항산화제, 완충액, 세균 발육 저지제 및 그밖의 다른 통상적인 첨가제를 함유한다. 조성물은 CRF 수용체 길항제 이외에, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 함유하는 환제, 캅셀제, 과립제 또는 정제로 제형화될 수 있다. 당해 기술자들은 CRF 수용체 길항제를 문헌 [Remington's, Pharmaceutical Sciences, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, USA, 1990]에 기술된 바와 같이, 관례에 따라 적합한 방식에 의해 추가로 제형화시킬 수 있다.

또 다른 구체예에서, 본 발명은 내분비계, 정신의학계 및 신경계 증상 또는 질환을 포함한 각종 증상 또는 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 이 방법은 본 발명의 화합물을 온혈동물에게 이러한 증상 또는 질환을 치료하기에 충분한 양으로 투여하는 것을 포함한다. 이 방법은 본 발명의 CRF 수용체 길항제를, 바람직하게는 약제학적 조성물의 형태로 전신 투여하는 것을 포함한다. 본 원에 사용된 것으로, 전신 투여는 경구 및 비경구 투여를 포함한다. 경구 투여의 경우에, CRF 수용체 길항제의 적합한 약제학적 조성물은 분제, 과립제, 환제, 정제 및 캅셀제뿐 아니라 액제, 시럽제, 현탁제 및 유제를 포함한다. 이들 조성물은 또한 향미제, 방부제, 현탁제, 농조화제, 유화제 및 그밖의 다른 약제학적으로 허용되는 첨가제를 함유한다. 비경구 투여의 경우에, 본 발명의 화합물은 CRF 수용체 길항제 이외에 완충제, 항산화제, 세균 발육 저지제 및 이러한 용액에 공통적으로 사용되는 그밖의 다른 첨가제를 함유할 수 있는 수성 주사 용액제로 제조될 수 있다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 화합물을 투여하여 각종 장애 또는 질환을 치료할 수 있다. 특히, 본 발명의 화합물은 우울증, 감정 장애, 공황 장애, 강박 장애, 비정상적 공격성, 불안정 협심증, 반응적 고혈압, 신경성 식욕부진, 대식증, 과민성 장증상, 스트레스 관련 면역 억제, 졸중, 염증, 쿠싱병, 유아 경련, 간질, 및 각종 약물 남용 및 금단현상을 치료하기 위해 온혈 동물에 투여될 수 있다.

따라서, 의약으로서 일반식 (I)의 화합물의 용도가 제공된다.

하기 실시예는 설명할 목적으로 제시되었으며, 한정하기 위한 것은 아니다.

실험 부분

이후 "THF"는 테트라하이드로푸란을 의미하고, "DCM"은 디클로로메탄을 의미하며, "DMSO"는 디메틸설폭사이드를 의미하고, "ACN"은 아세토니트릴을 의미한다.

A. 중간체의 제조

실시예 A.1

a) 225 ㎖의 무수 에탄올중의 에틸 포르메이트(67 g) 및 2,4,6-트리메틸페닐아세토니트릴(75 g)의 용액을 적절히 교반하면서 고체 소듐 에톡사이드(36 g)로 소량씩 10 분동안 처리한다. 혼합물을 질소하에서 16 시간동안 60 ℃로 가열하고, 실온으로 냉각시킨다. 반응 혼합물을 물 1.2 ℓ에 붓고, 디에틸 에테르(3 x 200 ㎖)로 추출한다. 수성상을 6M HCl로 pH 1로 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 에틸 아세테이트 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄상에서 건조시킨 후, 농축시켜 3-하이드록시-2-(2,4,6-트리메틸페닐)아크릴로니트릴(중간체 1) 46 g(98%)을 수득한다.

b) 10 ㎖의 피리딘중의 중간체 1(1 g)의 용액을 질소하에서 0 ℃로 냉각시키고, 적절히 교반하면서 메탄설포닐 클로라이드(0.67 g)로 처리한다. 용액을 실온으로 한 후, 1 시간동안 교반한다. 반응 혼합물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기상을 1M HCl, 물 및 염수로 세척하고, 건조(MgSO₄)시킨 후, 농축시켜 3-메탄설포닐-2-(2,4,6-트리메틸페닐)아크릴로니트릴(중간체 2)을 갈색 고체로 수득한다(1.4 g).

c) 40 ㎖의 DMSO중의 NaOEt(3.7 g)의 현탁액에 2-(아세틸티오)아세토니트릴을 가한다. 30 분후, THF(80 ㎖)중의 중간체 2(13.2 g)의 용액을 가한다. LiN(TMS)₂(THF 중 1.0M, 100 ㎖)를 시린지를 통해 가한다. 실온에서 약 1 시간후 반응물을 약 1 당량의 아세트산으로 퀀치한다(quench). 증발에 의해 대부분의 THF를 제거한 후, 잔류물을 500 ㎖의 에틸 아세테이트에 용해시키고, 500 ㎖의 물로 2 회 추출한다. 조 2-시아노-3-아미노-4-(2,4,6-트리메틸페닐)티오펜(중간체 3)(6.0 g)을 다음 단계에 추가의 정제없이 사용한다.

d) 아세트산(6 ㎖)중의 중간체 3(6.0 g)의 용액에 아세트산 무수물(5 g)을 가한다. 반응 혼합물을 110 ℃에서 1 시간동안 교반한다. 냉각후, 조 혼합물을 에틸 아세테이트(400 ㎖), 물(600 ㎖) 및 포화 NaHCO₃(200 ㎖)의 혼합물에 붓는다. 유기층을 물로 세척하고, 농축시킨다. 잔류물을 SiO₂상에서 칼럼 크로마토그래피(구배; 헥산:디에틸 에테르=2:1 - 헥산:에틸 아세테이트=1:1)에 의해 정제하여 N-[2-시아노-4-(2,4,6-트리메틸페닐)-티오펜-3-일]-아세트아미드(중간체 4)를 수득한다.

e) 85%의 H₃PO₄(2 ㎖)중의 중간체 4(2.8 g)의 현탁액을 130 ℃의 오일욕 온도로 질소하에서 30 분동안 교반한다. 냉각후, 이 혼합물에 물 20 ㎖를 붓는다. 침전을 유도하기 위하여 혼합한 후, 생성된 고체를 여과하고 진공 오븐중에서 건조시켜 3-메틸-6-하이드록시-8-(2,4,6-트리메틸페닐)-티오페노[3,2-d]피리미딘(중간체 5) 2.7 g을 수득한다.

f) POCl₃(8.0 g)중의 중간체 5(2.6 g)의 현탁액을 100 ℃에서 2 시간동안 교반한다. 냉각후, 혼합물을 포화 NaHCO₃와 DCM(100 ㎖)의 혼합물에 붓는다. 유기상을 제거하여 진공중에서 농축시키고, 잔류물을 SiO₂상에서 칼럼 크로마토그래피(구배; 에틸 아세테이트:헥산=1:4 - 에틸 아세테이트:메탄올=4:1)에 의해 정제하여 2-메틸-6-클로로-8-(2,4,6-트리메틸페닐)-티오페노[3,2-d]피리미딘(중간체 6) 0.3 g을 수득한다.

표 1 에 실시예 A.1에 따라 제조된 중간체를 나타내었다:

중간체 번호	R³	Ar
678910111213141516	CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃HHHCH₃CH₃	2,4,6-트리메틸페닐 2,6-디메틸-3-피리디닐 4-클로로페닐 6-(디메틸아미노)-4-메틸-3-피리디닐 6-(디에틸아미노)-4-메틸-3-피리디닐 4,6-디메틸-3-피리디닐 2,4,6-트리메틸-3-피리디닐 6-(디메틸아미노)-2,4-디메틸-3-피리디닐 2,4,6-트리메틸페닐 4-메톡시페닐 2,4-디메톡시페닐

B. 최종 생성물의 제조

실시예 B.1

3 ㎖의 반응 바이알중의 N,N-디프로필아민과 중간체 6(20 ㎎)의 용액을 120 ℃에서 교반한다. 1 시간후, 반응 혼합물을 냉각시키고, 아세토니트릴 0.5 ㎖ 를 첨가한 후, 30 분동안 환류시킨다. 생성된 현탁액을 실온으로 냉각하고, 추가의 아세토니트릴로 희석시킨다. 잔류물을 SiO₂칼럼 크로마토그래피(디에틸 에테르/헥산)에 의해 정제하여 2-메틸-6-(N,N-디프로필아미노)-8-(2,4,6-트리메틸페닐)-티오페노[3,2-d]피리미딘(화합물 1)을 수득한다.

실시예 B.2

중간체 6 을 THF 중의 2-프로판올 및 수소화나트륨으로 처리하고, SiO₂칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-메틸-6-(이소프로폭시)-8-(2,4,6-트리메틸페닐)-티오페노[3,2-d]피리미딘(화합물 6)을 수득한다.

실시예 B.3

1 ㎖의 DCM중의 화합물 1(5 ㎎)의 용액을 메타-클로로-퍼벤조산(20 ㎎)으로 처리한다. 이 용액을 24 시간동안 교반한 후, 에틸 아세테이트와 물의 혼합물에 붓는다. 유기상을 5% NaHCO₃수용액 및 염수로 세척하고, 건조(MgSO₄)시킨 다음, 농축시킨다. 잔류물을 예비(preparative) TLC(디에틸 에테르/헥산:1/9)에 의해 정제하여 2-메틸-6-(N,N-디프로필아미노)-8-(2,4,6-트리메틸페닐)-티오페노[3,2-d]피리미딘-S,S-디옥사이드(화합물 7)를 수득한다.

실시예 B.4

화합물 2(0.05 mmol)를 실온에서 1 ㎖의 아세트산중의 과량의 브롬과 함께 30 분동안 교반한다. 혼합물을 DCM과 포화 수성 NaHCO₃의 혼합물에 붓고, 유기층을 증발시킨다. 잔류물을 SiO₂크로마토그래피(디에틸 에테르/헥산)에 의해 정제하여 2-메틸-6-(N-프로필-N-사이클로프로필아미노)-8-(3-브로모-2,4,6-트리메틸페닐)-티오페노[3,2-d]피리미딘(화합물 5)을 수득한다.

하기 표 2, 3 및 4 에 상기 실시예중의 하나에 따라 제조된 화합물을 나타내었고, 표 5 및 6 에는 이들 화합물에 대한 분석 데이터를 나타내었다:

화합물번호	실시예번호	R³	R⁴	R⁵
1234	B.1B.1B.1B.1	HHHH	n-프로필 n-프로필 수소 n-프로필	n-프로필 사이클로프로필메틸 3-펜틸 2-메톡시에틸

화합물번호	실시예번호	R³	R⁴	R⁵
91011121314151617181920212223242526	B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1	HHHHHHHHHHHHHHHHHH	수소CH₃O(CH₂)₂수소수소n-프로필수소수소수소수소수소수소수소수소수소n-프로필수소수소에틸	(CH₃)₂N(CH₂)₃CH₃O(CH₂)₂4-메톡시페닐메틸 CH₃O(CH₂)₂2-하이드록시에틸 4-트리플루오로메틸페닐메틸 3-하이드록시프로필 1-하이드록시-2-헥실 1-하이드록시-2-펜틸CH₃CH₂-S-(CH₂)₂CH₃-S-(CH₂)₂(CH₃)₂N 2-에톡시페닐메틸 CH₃CH₂-CO-(CH₂)₂n-프로필 부틸 3-하이드록시펜틸

화합물번호	실시예번호	R³	R⁴	R⁵
272829303132333435	B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1	HHHHHHHHH	n-프로필n-부틸n-프로필n-부틸n-프로필n-프로필n-프로필n-프로필수소	3-하이드록시펜틸 3-하이드록시펜틸 3-하이드록시부틸 3-하이드록시부틸 4-모르폴리닐

화합물번호	실시예번호	R³	R⁴및 R⁵가 함께 형성한다
36373839 40	B.1B.1B.1B.1B.1	HHHHH

화합물번호	실시예번호	R³	R⁴	R⁵	Ar
5841424344454647484950515253	B.4B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1B.1	HCH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃CH₃H	n-프로필n-프로필n-프로필n-프로필n-프로필n-프로필n-프로필n-프로필2-메톡시에틸n-프로필2-메톡시에틸n-프로필에틸n-프로필n-프로필	사이클로프로필메틸n-프로필n-프로필2-하이드록시에틸n-프로필n-프로필n-프로필2-메톡시에틸2-메톡시에틸n-프로필2-메톡시에틸n-프로필n-부틸사이클로프로필메틸사이클로프로필메틸	3-브로모-2,4,6-트리메틸페닐 2,6-디메틸-3-피리디닐 4-클로로페닐 4-클로로페닐 6-(디메틸아미노)-4-메틸-3- 피리디닐 6-(디에틸아미노)-4-메틸-3- 피리디닐 4-메톡시페닐 4-메톡시페닐 4-메톡시페닐 2,4-디메톡시페닐 2,4-디메톡시페닐 4,6-디메틸-3-피리디닐 4,6-디메틸-3-피리디닐 4,6-디메틸-3-피리디닐 6-(디메틸아미노)-2,4-디메틸 -3-피리디닐

화합물번호	실시예번호	R³	R⁴	R⁵	Ar
5455565758	B.1B.1B.1B.1B.1	HHHHH	n-프로필n-프로필n-프로필n-프로필n-프로필	n-프로필2-하이드록시에틸CH₃COO(CH₂)₂2-하이드록시프로필n-프로필	6-(디메틸아미노)-2,4-디메틸 -3-피리디닐 2,4,6-트리메틸페닐 2,4,6-트리메틸페닐 2,4,6-트리메틸페닐 2,4,6-트리메틸페닐
화합물번호	실시예번호	R³	R 및 R 가 함께 형성한다	Ar
5960	B.1B.1	HCH₃		2,4,6-트리메틸페닐 4-클로로페닐

화합물번호	실시예번호	X	R¹	Ar
67	B.2B.3	SSO₂	(CH₃)₂CH-O-(CH₃CH₂CH₂)₂N-	2,4,6-트리메틸페닐 2,4,6-트리메틸페닐

C. 약물학적 실험

실시예 C.1: CRF 수용체 결합 활성을 갖는 대표적인 화합물

화합물을 DeSouza 등에 의한 문헌 [J. Neurosci. 7:88-100, 1987]에 일반적으로 기재된 표준 방사리간드 결합 분석에 의해 CRF 수용체에 대한 결합 활성에 대해 평가하였다. 여러 방사표지된 CRF 리간드를 분석에 사용하여 CRF 수용체 준타입(subtype)을 갖는 본 발명의 화합물의 결합 활성을 평가할 수 있다. 간단히 말해, 결합 분석은 CRF 수용체로부터 방사표지된 CRF 리간드를 대체시키는 것을 포함한다. 더욱 구체적으로, 결합 분석은 인간 CRF 수용체로 안정하게 형질감염된 튜브 하나당 약 1x10⁶세포를 사용하여 1.5 ㎖의 에펜도르프(Eppendorf) 튜브중에서 수행한다. 각 튜브에 비특이적 결합을 결정하는 CRF(최종 농도, 1 μM), 유로텐신 I 또는 표지되지 않은 사우바긴(sauvagine)을 함유하거나 함유하지 않는 시험 완충액(예를 들어 둘베코(Dulbecco) 인산염 완충염수, 10 mM 의 염화마그네슘, 20 μM의 바시트라신) 약 0.1 ㎖ , [¹²⁵I]티로신 - 양의 CRF(최종 농도 ∼200 pM 또는 대략 Scatchard 분석에 의해 측정된 K_D) 0.1 ㎖ 및 CRF 수용체를 함유하는 세포의 막 현탁액 0.1 ㎖를 도입한다. 혼합물을 22 ℃에서 2 시간동안 인큐베이션한 후, 원심분리하여 결합 및 유리된 방사리간드를 분리한다. 펠렛을 2회 세척하고, 튜브를 펠렛 바로 위에서 자른 후, 감마-카운터에서 약 80%의 효율로 방사활성에 대해 조사하였다. 비선형 리스트-스퀘어 커브-피팅(non-linear least-square curve-fitting) 프로그램을 사용하여 모든 방사리간드 결합 데이터를 분석하였다. 결합 활성은 수용체로부터 방사표지된 리간드의 50%를 대체시키는데 필요한 화합물의 농도(nM)에 상응한다. 표 2 내지 4에 기재된 모든 화합물이 ≤250 nM의 K_i값을 갖는다. 이 시험에서 화합물 1, 2, 8, 10, 12-18, 20, 23, 34, 35, 37-41, 43, 48-56 이 가장 좋은 점수를 갖는 것으로 확인되었다.

실시예 C.2

CRF 유도된 아데닐레이트 사이클라제 활성

본 발명의 화합물을 또한 각종 기능 시험에 의해 평가할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물을 CRF 유도된 아데닐레이트 사이클라제 활성에 대해 스크리닝할 수 있다. CRF 유도된 아데닐레이트 사이클라제 활성의 측정 시험을 Battaglia 등에 의한 문헌 [Synapse 1:572, 1987]에 일반적으로 기재된 방법을 전체 세포 준비물 분석에 적합하도록 변형시켜 수행할 수 있다. 더욱 구체적으로, 표준 분석 혼합물은 2 mM L-글루타민, 20 mM의 HEPES 및 DMEM 완충액중의 1 mM IMBX를 최종 부피 0.5 ㎖로 함유할 수 있다. 유도 시험에서, 형질감염된 CRF 수용체를 갖는 전체 세포를 24 개의 웰 플레이트에 플레이팅하고, CRF-관련 및 비관련 펩타이드의 농도를 변화시키면서 37 ℃에서 1 시간동안 인큐베이션하여 특정 수용체 준타입의 약물학적 순위를 정한다. 인큐베이션후, 배지를 아스피레이션하고, 웰을 신선한 배지로 1회 부드럽게 헹군후, 배지를 아스피레이션한다. 세포내 cAMP 의 양을 측정하기 위하여, 20 mM의 수성 염산 및 95% 에탄올의 용액 300 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 생성된 현탁액을 -20 ℃에서 16 내지 18 시간동안 인큐베이션한다. 용액을 꺼내 1.5 ㎖의 에펜도르프 튜브에 도입하고, 웰을 추가의 에탄올/수성 염산 200 ㎕로 세척한 다음, 제 1 분획과 풀링한다(pool). 샘플을 동결건조시키고, 500 ㎕의 소듐 아세테이트 완충액으로 재현탁시킨다. 단일 항체 키트를 사용하여 샘플중의 cAMP 를 측정한다. 화합물의 기능성 측정을 위하여, cAMP 생산의 80%를 유도하는 단일 농도의 CRF 또는 관련 펩타이드를 다양한 농도의 경쟁 화합물(10^-12내지 10^-6M)과 함께 인큐베이션한다.

D. 조성물 실시예

하기 실시예는 온혈동물에 전신적으로 또는 국소적으로 투여하기에 적합한 단위 복용형의 본 발명에 따른 대표적인 약제학적 조성물을 예시한다.

실시예에 사용된 "활성성분" (A.I.) 은 일반식 (I)의 화합물, 그의 N-옥사이드, 약제학적으로 허용되는 산 또는 염기 부가염, 입체화학적 이성체에 관한 것이다.

실시예 D.1: 경구용 용액제

메틸 4-하이드록시벤조에이트 9 g 및 프로필 4-하이드록시벤조에이트 1 g 을 비등 정제수 4 ℓ 에 용해시킨다. 이 용액 3 ℓ 에 우선 2,3-디하이드록시부타노산 10 g 을 용해시킨 후, A.I. 20 g 을 용해시킨다. 후자의 용액을 전자의 남아 있는 용액과 합치고, 여기에 1,2,3-프로판트리올 12 ℓ 및 소르비톨 70% 용액 3 ℓ 를 가한다. 사카린 나트륨 40 g 을 물 0.5 ℓ 에 용해시키고, 라즈베리 2 ㎖ 및 구즈베리 에센스 2 ㎖ 를 가한다. 후자의 용액을 전자와 합치고, 용적을 20 ℓ 로 만들기에 적합한 적당량의 물을 가하여 티스푼당(5 ㎖) 당 A.I. 5 ㎎ 을 함유하는 경구용 용액을 수득한다. 생성 용액을 적당한 용기에 충전한다.

실시예 D.2: 캅셀제

A.I. 20 g, 소듐 라우릴설페이트 6 g, 전분 56 g, 락토오스 56 g, 콜로이드성 이산화규소 0.8 g 및 마그네슘 스테아레이트 1.2 g 을 함께 격렬하게 교반한다. 생성된 혼합물을 계속해서 각각 활성성분 20 ㎎ 씩을 함유하는 1000 개의 적합한 경질 젤라틴 캅셀에 충전시킨다.

실시예 D.3: 필름-코팅 정제

정제핵의 제조

A.I. 100 g, 락토오스 570 g 및 전분 200 g 의 혼합물을 잘 혼합한 후에 물 약 200 ㎖ 중의 소듐 도데실설페이트 5 g 및 폴리비닐피롤리돈 10 g 의 용액으로 습윤시킨다. 습윤된 분말 혼합물을 체로 치고 건조시킨 후에 다시 체로 친다. 그후에 미세결정성 셀룰로오스 100 g 및 수소화 식물유 15 g 을 가한다. 전체 혼합물을 잘 혼합시키고, 타정하여 각각 활성성분 10 ㎎ 씩을 함유하는 정제 10,000 정을 수득한다.

코팅(coating)

변성 에탄올 75 ㎖ 중의 메틸셀룰로오스 10 g 의 용액에 디클로로메탄 150 ㎖ 중의 에틸 셀룰로오스 5 g 의 용액을 가한다. 그후, 여기에 디클로로메탄 75 ㎖ 및 1,2,3-프로판트리올 2.5 ㎖ 를 가한다. 폴리에틸렌글리콜 10 g 을 용융시키고 디클로로메탄 75 ㎖ 에 용해시킨다. 후자의 용액을 전자의 용액에 가한 다음, 여기에 마그네슘 옥타데카노에이트 2.5 g, 폴리비닐피롤리돈 5 g 및 농축된 색소 현탁액 30 ㎖ 를 가하고 전체 혼합물을 균질화시킨다. 이렇게 하여 수득한 혼합물로 코팅 장치내에서 정제핵을 코팅한다.

실시예 D.4 : 주사용 용액제

메틸 4-하이드록시벤조에이트 1.8 g 및 프로필 4-하이드록시벤조에이트 0.2 g 을 주사용 비등수 약 0.5 ℓ 에 용해시킨다. 약 50 ℃ 로 냉각시킨 후, 교반하면서 락트산 4 g, 프로필렌 글리콜 0.05 g 및 A.I. 4 g 을 가한다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 용적을 1 ℓ 로 만들기에 적합한 적당량의 주사용수를 보충하여 ㎖ 당 4 ㎎ 의 A.I. 용액을 수득한다. 용액을 여과에 의해 멸균시키고, 무균 용기에 충전한다.

실시예 D.5: 좌제

A.I. 3 g 을 폴리에틸렌 글리콜 400 25 ㎖중의 2,3-디하이드록시부탄디오산 3 g 의 용액에 용해시킨다. 계면활성제 12 g 및 트리글리세라이드 300 g을 함께 용융시킨다. 후자의 혼합물을 전자의 용액과 잘 혼합한다. 수득한 혼합물을 37 내지 38 ℃ 온도의 주형에 부어 각각 ㎖당 A.I. 30 ㎎을 함유하는 좌제 100 개를 수득한다.

Claims

하기 일반식 (I)의 화합물, 그의 입체이성체 및 약제학적으로 허용되는 산부가염:

상기식에서,

X 는 S, SO 또는 SO₂를 나타내고;

R¹은 NR⁴R⁵또는 OR⁵를 나타내며;

R²는 C_1-6알킬, C_1-6알킬옥시 또는 C_1-6알킬티오를 나타내고;

R³은 수소, C_1-6알킬, C_1-6알킬설포닐, C_1-6알킬설폭시 또는 C_1-6알킬티오를 나타내며;

R⁴는 수소, C_1-6알킬, 모노- 또는 디(C_3-6사이클로알킬)메틸, C_3-6사이클로알킬, C_3-6알케닐, 하이드록시C_1-6알킬, C_1-6알킬카보닐옥시C_1-6알킬 또는 C_1-6알킬옥시C_1-6알킬을 나타내고;

R⁵는 C_1-8알킬, 모노- 또는 디(C_3-6사이클로알킬)메틸, Ar¹CH₂, C_1-6알킬옥시C_1-6알킬, 하이드록시C_1-6알킬, C_3-6알케닐, 티에닐메틸, 푸라닐메틸, C_1-6알킬티오C_1-6알킬, 모르폴리닐, 모노- 또는 디(C_1-6알킬)아미노C_1-6알킬, 디(C_1-6알킬)아미노, C_1-6알킬카보닐C_1-6알킬, 이미다졸릴에 의해 치환된 C_1-6알킬, 또는 일반식 -Alk-O-CO-Ar¹의 래디칼을 나타내거나;

R⁴및 R⁵는 이들이 결합된 질소 원자와 함께, 각각 C_1-6알킬 또는 C_1-6알킬옥시C_1-6알킬에 의해 임의로 치환된 피롤리디닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐 또는 모르폴리닐 그룹을 형성할 수 있으며;

Ar 은 페닐; 할로, C_1-6알킬, 트리플루오로메틸, 하이드록시, 시아노, C_1-6알킬옥시, 벤질옥시, C_1-6알킬티오, 니트로, 아미노 및 모노- 또는 디(C_1-6알킬)아미노로 구성된 그룹중에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 페닐; 피리디닐; 또는 할로, C_1-6알킬, 트리플루오로메틸, 하이드록시, 시아노, C_1-6알킬옥시, 벤질옥시, C_1-6알킬티오, 니트로, 아미노, 모노- 또는 디(C_1-6알킬)아미노 및 피페리디닐로 구성된 그룹중에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 피리디닐을 나타내고; 여기에서 치환된 페닐은 하나 또는 그 이상의 할로겐에 의해 임의로 추가로 치환될 수 있으며;

Ar¹은 페닐; 할로, C_1-6알킬, C_1-6알킬옥시, 디(C_1-6알킬)아미노C_1-6알킬, 트리플루오로메틸 및 모르폴리닐에 의해 치환된 C_1-6알킬로 구성된 그룹중에서 각각 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 페닐; 또는 피리디닐을 나타내고;

Alk 는 C_1-6알칸디일을 나타낸다.
제 1 항에 있어서, R¹이 OR⁵이고, R⁵는 C_1-6알킬이거나; R¹이 NR⁴R⁵이고, R⁴는 수소, C_1-6알킬 또는 C_1-6알킬옥시C_1-6알킬이고, R⁵는 C_1-6알킬, 하이드록시C_1-6알킬, C_3-6알케닐 또는 C_3-6사이클로알킬메틸이거나; R¹이 NR⁴R⁵이고, R⁴및 R⁵는 이들이 결합된 질소원자와 함께, 각각 C_1-6알킬 또는 C_1-6알킬옥시C_1-6알킬에 의해 임의로 치환된 피롤리디닐, 피페리디닐, 호모피페리디닐 또는 모르폴리닐 그룹을 형성하며; R²는 C_1-6알킬이고; R³은 수소 또는 C_1-6알킬이고; Ar 은 C_1-6알킬, C_1-6알킬옥시 및 할로로 구성된 그룹중에서 각각 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 페닐이거나, Ar 은 C_1-6알킬 및 디(C_1-6알킬)아미노로 구성된 그룹중에서 각각 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환체에 의해 치환된 피리디닐인 화합물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, R¹이 R⁴가 C_2-4알킬 또는 메톡시C_1-2알킬이고, R⁵가 C_2-4알킬, 사이클로프로필메틸 또는 하이드록시C_2-4알킬인 NR⁴R⁵이고; R²는 C_1-2알킬이며; R³은 수소 또는 C_1-2알킬인 화합물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, R¹이 R⁴가 C_2-4알킬이고, R⁵가 C_3-4알킬 또는 사이클로프로필메틸인 NR⁴R⁵이고; R²는 메틸이며; R³은 수소 또는 메틸이고; Ar 은 4- 및/또는 6-위치가 메틸 또는 디메틸아미노에 의해 치환된 3-피리디닐인 화합물.
제 1 항에 있어서, 2-메틸-6-(N-프로필-N-사이클로프로필아미노)-8-(2,4,6-트리메틸페닐)티오페노[3,2-d]피리미딘 또는 2-메틸-6-(N,N-디프로필아미노)-8-(2,4,6-트리메틸페닐)티오페노[3,2-d]피리미딘, 또는 이들의 입체화학적 이성체 또는 이들의 약제학적으로 허용되는 산부가염인 화합물.
활성성분으로서 치료학적으로 유효한 양의 제 1 항 내지 제 5 항중의 어느 한 항에서 청구한 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 조성물.
치료학적으로 유효한 양의 제 1 항 내지 제 5 항중의 어느 한 항에서 청구한 화합물을 약제학적으로 허용되는 담체와 완전히 혼합함을 특징으로 하여 제 6 항에서 청구한 조성물을 제조하는 방법.
제 1 항 내지 제 5 항중의 어느 한 항에 있어서, 의약으로서 사용하기 위한 화합물.
일반식 (II')의 화합물, 그의 입체이성체 또는 산부가염:

상기식에서,

R², R³및 Ar 은 제 1 항 내지 제 4 항중의 어느 한항에 정의된 바와 같고,

W' 는 하이드록시, 할로, 메실옥시 또는 토실옥시를 나타낸다.
a) 일반식 (II)의 중간체를 반응-불활성 용매중에서 일반식 (III)의 중간체와 반응시키거나;

b) 일반식 (IX)의 중간체를 반응-불활성 용매중에서 적합한 염기의 존재하에 일반식 (X)의 중간체로 O-알킬화시켜 R¹이 OR⁵인 일반식 (I)의 화합물로 정의되는 일반식 (I-a)의 화합물을 수득하거나,

필요에 따라 일반식 (I)의 화합물을 당 기술에 공지된 작용 그룹 변환 반응에 따라 일반식 (I)의 다른 화합물로 전환시키고; 필요에 따라 일반식 (I)의 화합물을 산으로 처리하여 산-부가염을 제조하거나, 반대로 산부가염을 알칼리로 처리하여 유리 염기로 전환시키고; 필요에 따라 이들의 입체화학적 이성체를 제조함을 특징으로 하여 제 1 항에서 청구한 화합물을 제조하는 방법:

상기 반응식에서,

R¹, R², R³, R⁵및 Ar 은 제 1 항에 정의된 바와 같고,

W 는 이탈 그룹을 나타낸다.
일반식 (VIII)의 중간체를 폐환시켜 W' 가 하이드록시인 일반식 (II'-a)의 화합물로 정의되는 일반식 (II'-b)의 중간체를 수득하고, 임의로 일반식 (II'-b)의 화합물을 W' 가 하이드록시이외의 것인 일반식 (II'-a)의 화합물로 정의되는 일반식 (II-a)의 화합물로 전환시키거나,

필요에 따라 일반식 (II'-a)의 화합물을 당 기술에 공지된 작용 그룹 변환 반응에 따라 일반식 (II'-a)의 다른 화합물로 전환시키고; 필요에 따라 일반식 (II'-a)의 화합물을 산으로 처리하여 산-부가염을 제조하거나, 반대로 산부가염을 알칼리로 처리하여 유리 염기로 전환시키고; 필요에 따라 이들의 입체화학적 이성체를 제조함을 특징으로 하여 제 9 항에서 청구한 일반식 (II'-a)의 화합물을 제조하는 방법:

상기 반응식에서,

R², R³및 Ar 은 제 1 항 내지 제 4 항중의 어느 한항에 정의된 바와 같고,

W' 는 하이드록시, 할로, 메실옥시 또는 토실옥시를 나타내며,

W 는 할로, 메실옥시 또는 토실옥시를 나타낸다.