KR102692717B1

KR102692717B1 - Tnfrsf14 억제 물질을 포함하는 피부 미백용 조성물 및 tnfrsf14 억제 물질의 스크리닝 방법

Info

Publication number: KR102692717B1
Application number: KR1020160122318A
Authority: KR
Inventors: 김규한; 이태룡; 조은경
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2016-09-23
Filing date: 2016-09-23
Publication date: 2024-08-08
Anticipated expiration: 2036-09-23
Also published as: WO2018056581A1; CN109789081A; JP2019529462A; KR20180032955A

Abstract

본 명세서에는 TNFRSF14 발현 또는 활성 억제 물질을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물 및 TNFRSF14 발현 또는 활성 억제 물질의 스크리닝 방법이 개시된다. 상기 TNFRSF14 발현 또는 활성 억제 물질을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부내 멜라닌 함량을 감소시켜 우수한 미백효과를 제공할 수 있다. 또한, 상기 스크리닝 방법에 따르면 TNFRSF14 유전자의 상대적 발현 억제정도를 확인함으로써, 간편하게 피부 미백 물질을 스크리닝할 수 있다.

Description

TNFRSF14 억제 물질을 포함하는 피부 미백용 조성물 및 TNFRSF14 억제 물질의 스크리닝 방법 {A composition for skin brightening comprising TNFRSF14 inhibiting materials and a method for screening TNFRSF14 inhibiting materials}

본 명세서는 피부 미백용 조성물 및 피부 미백 물질 스크리닝 방법에 관한 것이다.

사람의 피부색을 결정하는 가장 중요한 요인은 인체 내의 멜라노사이트에서 타이로시나제 등의 여러 가지 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌으로서, 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미, 주근깨 및 점 등과 같은 과색소 침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다. 그리고 피부 내, 외부의 스트레스적 자극에 의해 생겨난 멜라닌은 스트레스가 사라져도 피부 각질화를 통해서 외부로 배출되기 전까지는 없어지지 않는다.

따라서 이러한 멜라닌의 생성을 억제하기 위한 연구가 진행되고 있으며, 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용되어 오고 있다. 그러나, 이들의 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제로 인해 그 사용이 제한되고 있다.

대한민국공개특허공보 제10-2013-0025768호 (2013.03.12)

일 측면에서, 본 발명의 목적은 피부내 멜라닌 합성을 조절하는 신규한 피부 미백 물질 판별 마커를 제공하는 것이다.

다른 일 측면에서, 본 발명의 목적은 상기 피부 미백 물질 판별 마커의 발현 또는 활성 억제 물질을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공하고자 한다.

다른 일 측면에서, 본 발명의 목적은 상기 피부 미백 물질 판별 마커를 이용하여 피부 미백 물질을 스크리닝하는 방법을 제공하고자 한다.

다른 일 측면에서, 본 발명의 목적은 상기 피부 미백 물질 판별 마커를 이용한 색소관련 피부 상태 진단용 조성물 또는 키트를 제공하고자 한다.

다른 일 측면에서, 본 발명의 목적은 상기 피부 미백 물질 판별 마커를 이용한 색소관련 피부 상태 진단용 기초정보 제공방법을 제공하고자 한다.

본 발명의 일 측면은, TNFRSF14(TNF receptor superfamily member 14)의 발현 또는 활성 억제 물질을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 측면은, 피부 미백 물질을 스크리닝하는 방법으로서,

(a)멜라닌 세포(melanocyte)에 시험 물질을 처리하는 단계; 및

(b)상기 시험물질이 멜라닌 세포에서 TNFRSF14(TNF receptor superfamily member 14)의 발현을 억제하는지 여부를 확인하는 단계;

를 포함하는 피부 미백 물질 스크리닝 방법을 제공한다.

본 발명의 일 측면은, TNFRSF14의 mRNA 또는 TNFRSF14 단백질 검출 시약을 포함하는 색소관련 피부 상태 진단용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 측면은, TNFRSF14의 mRNA 또는 TNFRSF14 단백질 검출 시약을 포함하는 색소관련 피부 상태 진단용 키트를 제공한다.

본 발명의 일 측면은 시험대상으로부터 분리된 피부세포에서 TNFRSF14의 mRNA 또는 단백질 발현량을 확인하는 단계를 포함하는 색소관련 피부 상태 진단용 기초 정보 제공 방법을 제공한다.

본 발명의 일 측면에 따른 신규한 피부 미백 물질 판별 마커인 TNFRSF14는 피부내 멜라닌의 합성을 감소시킬 수 있다. 따라서, 상기 TNFRSF14의 발현 또는 활성 억제 물질을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부 미백에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 일 측면에 따르면 피부 미백 물질 스크리닝 방법은 피부에 시험물질을 처리하고 TNFRSF14 유전자의 상대적 발현 억제 정도를 확인함으로써, 간편하고 효율적으로 피부 미백 물질을 판별할 수 있다. 본 발명의 일 측면에 따른 색소관련 피부 상태 진단용 조성물 또는 키트와 색소관련 피부 상태 진단용 기초 정보 제공 방법은 피부에 포함된 TNFRSF14 유전자의 검출을 통하여 색소관련 피부 상태를 빠르고 간단하게 진단하거나, 이를 위한 기초 정보를 제공할 수 있다.

도 1은 TNFRSF14 유전자의 발현 억제에 따른 멜라닌 세포에서의 멜라닌 상대량을 비교한 도이다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 명세서에서 "피부"는 생물의 외부를 덮고 있는 기관을 의미하는 것으로서 표피, 진피 및 피하지방층으로 구성되어 있으며 얼굴 또는 몸 전체의 외부를 덮는 조직뿐만 아니라, 두피와 모발을 포함하는 최광의의 개념이다.

본 발명의 일 실시예는, TNFRSF14의 발현 또는 활성 억제 물질을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 TNFRSF14의 발현 또는 활성 억제 물질은 TNFRSF14 mRNA의 번역을 억제하는 물질일 수 있으며, 보다 구체적으로는 TNFRSF14 mRNA의 적어도 일부에 결합하는 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다.

상기 TNFRSF14와 멜라닌 합성과의 관계는 아직까지 알려진 바 없었으나, 본 발명의 발명자들은 연구를 통하여 상기 TNFRSF14가 피부 멜라닌 세포(melanocyte)에서 멜라닌의 합성을 조절할 수 있음을 밝혀냈다. 보다 구체적으로, 피부 멜라닌 세포에서 상기 TNFRSF14의 발현 또는 활성을 억제 또는 감소시킬 경우 멜라닌의 생성량이 감소함을 확인하였다.

본 발명의 일 실시예로서, 상기 올리고뉴클레오티드는 siRNA, shRNA 및 miRNA 중 어느 하나 이상일 수 있다. 상기 TNFRSF14의 발현 또는 활성 억제 물질은 RNA 간섭(RNA interference, RNAi) 현상을 유도하는 siRNA, shRNA 및 miRNA 중 어느 하나 이상일 수 있다. 본 발명의 일 실시예는 상기 TNFRSF14 mRNA의 간섭을 유도하는 RNAi현상을 이용하여 TNFRSF14 유전자의 mRNA 발현을 억제할 수 있다.

miRNA는 세포 내에 존재하는 작은 RNA(endogenous small RNA)의 일종으로 단백질을 합성하지 않는 DNA에서 유래되어 헤어핀-구조 전사체(hairpin-shaped transcript)로부터 생성이 된다. miRNA는 표적 mRNA의 3'-UTR의 상보적 서열(sequence)에 결합하여 그 mRNA의 번역 억제 또는 불안정화를 유도하여, 궁극적으로 그 표적 mRNA의 단백질 합성을 억제하는 리프레서(repressor) 역할을 하게 된다. 하나의 miRNA는 여러 개의 mRNA를 타겟팅하며, mRNA 역시 여러 개의 miRNA에 의해 조절될 수 있다고 알려져 있다. RNAi 현상을 유도하는 다른 RNA로 19 내지 27 mer 내외의 짧은 RNA인 short interfering RNA(siRNA)가 있으며, 짧은 헤어핀(short hairpin) 구조를 가지는 shRNA가 있다.

본 발명의 일 실시예로서, 상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며, 구체적으로 siRNA, shRNA 및 miRNA중 어느 하나 일 수 있으며, 서열번호 1로 표시되는 염기 서열 및 상기 서열번호 1에 혼성화 가능한 염기 서열을 포함할 수 있다.

5'- GUGUGGUGUUUAGUGGAUA -3'(서열번호 1)

일 실시예로서, 상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며, 구체적으로 siRNA, shRNA 및 miRNA중 어느 하나 일 수 있으며, 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 염기 서열을 포함하고, 상기 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 염기 서열은 혼성화될 수 있다.

Sense: 5'- GUGUGGUGUUUAGUGGAUA -3'(서열번호 1)

Antisense: 5'- UAUCCACUAAACACCACAC -3'(서열번호 2)

일 실시예로서, 상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며, 구체적으로 siRNA, shRNA 및 miRNA중 어느 하나 일 수 있으며, 서열번호 3로 표시되는 염기 서열 및 상기 서열번호 3에 혼성화 가능한 염기 서열을 포함할 수 있다.

5'- CAGGUUAUCGUGUGAAGGA -3'(서열번호 3)

일 실시예로서, 상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며, 구체적으로 siRNA, shRNA 및 miRNA중 어느 하나 일 수 있으며, 서열번호 3 및 서열번호 4로 표시되는 염기 서열을 포함하고, 상기 서열번호 3 및 서열번호 4로 표시되는 염기 서열은 혼성화될 수 있다.

Sense: 5'- CAGGUUAUCGUGUGAAGGA -3'(서열번호 3)

Antisense: 5'- UCCUUCACACGAUAACCUG -3'(서열번호 4)

본 발명의 일 실시예에 따른 상기 올리고뉴클레오티드는 리포좀(liposome)에 포집 또는 벡터에 삽입된 형태로 포함될 수 있다.

일 실시예로서 상기 올리고뉴클레오티드는 농도가 1 내지 200nM일 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 올리고뉴클레오티드의 농도는 5 내지 50nM일 수 있다.

상기 올리고뉴클레오티드는 농도가 1 nM 이상, 2 nM 이상, 3 nM 이상, 5 nM 이상, 7 nM 이상, 9 nM 이상, 11 nM 이상, 15 nM 이상, 16 nM 이상, 17 nM 이상, 18 nM 이상, 19 nM 이상, 20 nM 이상, 21 nM 이상, 22 nM 이상, 23 nM 이상, 24 nM 이상, 25 nM 이상 또는 50 nM 이상일 수 있다.

또한, 상기 올리고뉴클레오티드는 농도가 200 nM 이하, 190 nM 이하, 180 nM 이하, 170 nM 이하, 150 nM 이하, 130 nM 이하, 100 nM 이하, 80 nM 이하, 50 nM 이하, 40 nM 이하, 30 nM 이하, 29 nM 이하, 28 nM 이하, 27 nM 이하, 26 nM 이하, 25 nM 이하, 24 nM 이하, 23 nM 이하, 22 nM 이하, 21 nM 이하, 20 nM 이하, 19 nM 이하, 18 nM 이하, 17 nM 이하, 16 nM 이하, 15 nM 이하, 14 nM 이하, 13 nM 이하, 12 nM 이하, 11 nM 이하 또는 10 nM 이하일 수 있다.

상기 올리고뉴클레오티드의 농도가 상기 범위내 일 때, TNFRSF14의 발현 억제 효과가 우수하며, 피부 미백 용도에 적합하다.

일 실시예로서, 상기 TNFRSF14(TNF receptor superfamily member 14)의 mRNA 서열은 NCBI Reference Sequence NM_003820.3이며, 보다 구체적으로 하기의 서열번호 5의 염기 서열로 표시될 수 있다. (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_003820.3?report=GenBank)

TCCTTCATACCGGCCCTTCCCCTCGGCTTTGCCTGGACAGCTCCTGCCTCCCGCAGGGCCCACCTGTGTC

CCCCAGCGCCGCTCCACCCAGCAGGCCTGAGCCCCTCTCTGCTGCCAGACACCCCCTGCTGCCCACTCTC

CTGCTGCTCGGGTTCTGAGGCACAGCTTGTCACACCGAGGCGGATTCTCTTTCTCTTTCTCTTTCTCTTC

TGGCCCACAGCCGCAGCAATGGCGCTGAGTTCCTCTGCTGGAGTTCATCCTGCTAGCTGGGTTCCCGAGC

TGCCGGTCTGAGCCTGAGGCATGGAGCCTCCTGGAGACTGGGGGCCTCCTCCCTGGAGATCCACCCCCAA

AACCGACGTCTTGAGGCTGGTGCTGTATCTCACCTTCCTGGGAGCCCCCTGCTACGCCCCAGCTCTGCCG

TCCTGCAAGGAGGACGAGTACCCAGTGGGCTCCGAGTGCTGCCCCAAGTGCAGTCCAGGTTATCGTGTGA

AGGAGGCCTGCGGGGAGCTGACGGGCACAGTGTGTGAACCCTGCCCTCCAGGCACCTACATTGCCCACCT

CAATGGCCTAAGCAAGTGTCTGCAGTGCCAAATGTGTGACCCAGCCATGGGCCTGCGCGCGAGCCGGAAC

TGCTCCAGGACAGAGAACGCCGTGTGTGGCTGCAGCCCAGGCCACTTCTGCATCGTCCAGGACGGGGACC

ACTGCGCCGCGTGCCGCGCTTACGCCACCTCCAGCCCGGGCCAGAGGGTGCAGAAGGGAGGCACCGAGAG

TCAGGACACCCTGTGTCAGAACTGCCCCCCGGGGACCTTCTCTCCCAATGGGACCCTGGAGGAATGTCAG

CACCAGACCAAGTGCAGCTGGCTGGTGACGAAGGCCGGAGCTGGGACCAGCAGCTCCCACTGGGTATGGT

GGTTTCTCTCAGGGAGCCTCGTCATCGTCATTGTTTGCTCCACAGTTGGCCTAATCATATGTGTGAAAAG

AAGAAAGCCAAGGGGTGATGTAGTCAAGGTGATCGTCTCCGTCCAGCGGAAAAGACAGGAGGCAGAAGGT

GAGGCCACAGTCATTGAGGCCCTGCAGGCCCCTCCGGACGTCACCACGGTGGCCGTGGAGGAGACAATAC

CCTCATTCACGGGGAGGAGCCCAAACCACTGACCCACAGACTCTGCACCCCGACGCCAGAGATACCTGGA

GCGACGGCTGCTGAAAGAGGCTGTCCACCTGGCGGAACCACCGGAGCCCGGAGGCTTGGGGGCTCCGCCC

TGGGCTGGCTTCCGTCTCCTCCAGTGGAGGGAGAGGTGGGGCCCCTGCTGGGGTAGAGCTGGGGACGCCA

CGTGCCATTCCCATGGGCCAGTGAGGGCCTGGGGCCTCTGTTCTGCTGTGGCCTGAGCTCCCCAGAGTCC

TGAGGAGGAGCGCCAGTTGCCCCTCGCTCACAGACCACACACCCAGCCCTCCTGGGCCAGCCCAGAGGGC

CCTTCAGACCCCAGCTGTCTGCGCGTCTGACTCTTGTGGCCTCAGCAGGACAGGCCCCGGGCACTGCCTC

ACAGCCAAGGCTGGACTGGGTTGGCTGCAGTGTGGTGTTTAGTGGATACCACATCGGAAGTGATTTTCTA

AATTGGATTTGAATTCGGCTCCTGTTTTCTATTTGTCATGAAACAGTGTATTTGGGGAGATGCTGTGGGA

GGATGTAAATATCTTGTTTCTCCTCAAACTGTCACCTCCCGGTGTTTCTTGCTGAACAAGGAGTTCCAGG

ATGGCTGCTGGGCTGTTCGGGGGACCCCTGCCCTCCTCCCGTCATGCCTGGGGGTTCACTCCACCCAGAG

AGGAGCCCTGGCCGCCCCTTCATATCCCAACAGCTGAGCTCTCAGTGGGCTCTTCTGACCTCTGTGGCTC

CGTCCGAGGCTATTGCTGTGGATTCTGATGCTCAAATGGTGTCAGATTTGCCCAGTAAAAACCCCAGATC

TACATCTGACCTACACTTCCCAGCTGTGTCCACCGAGAAACCCCAGTATCAGTGACGCCTGCTGTGCCCA

GCCCTCTCCACCTGCTCCGGGAACCCGCCAGGCCCAGGTCCCGCTGGCAGGGGCTTCACCAGGCCTCTGA

GCCACACATTCATTTAATGGTCGGGATGAGGCCCCTTTCCCCACATCTGAAGTTAGAAGCGGTGAGGGGA

ATGACCCTGCAGCCATGCCATGAGGATGGAGGCCACATAGCCCCTCCGAGCATGCCCGCTCCACCCCGCC

CTACCCCCTCTCCTTTCCTTGTCACCTGCCTCCAGCAGAGCCCCCAGGCTGAGCCACCCACCCCAACTCC

TCTCCTGCCACCCCTTGTCCTGTGGAAGCTTTGGCTTAGCGTCCTGGGGTGTGGAGAGGCCCATGCAGGC

CAGGTGGAGCCCTGGGCCCCTAGAAAGCAGCACTTCTGGCTGCCCCACCCCGTGTCACCCTCTCCCCAAC

TGGAGGCGTGGTCTCCAGGGACCACGGGCCTCCCTGTGCATGGACCGGCTCCTGACCACCGTCCAGGGTC

ATTGCCAGGGTACCTTTTCAGAGGCTGACCCCATAGACCTGGCTGCCCCCCAGTGCTAGATGGGAGCCAA

GCACAGCCTGCCCTTCTGCCCACAGTCCCGGGGGCAGGTGGGAGCATGGGGCCATGGAGTGAGCGGGCAG

GGGTGGCAGAGGGCTCCCTGGTCAGGGGCCCCAACTTCCCTTCCCCCAGGGAGGCCACCTGACATCTGGG

CTCCAGGCACAGCAGGAAGCCCACCTGCCCCAACCTGTAGCTCCTCCTCCTGGGAGGAGCCATGGATCCT

GGAAAAGCTCTGGGGCCACCTCCCAGGTTTGGGGGGACAGAGCTCCAAGAGACGACGGCTGGGGACACGA

GCCCTCATGGGGCCGCTGTGTGCTCACCCCTTGATTTTCTTCTTTTCATGCATGAGATTAGGCCAAGTGT

GGAGAAATCAATGATGTTGACGATGAGGCTCCCTGAGAGAAATCACACCCAGCGGGAGCTGCTGCTCCCA

GGTCTGGCCTCGGTCACCAGCCACCTGCTGCATCCGCGGGAGTGGGGCCGAGGACATGGGAGTGGCAGGT

GCAGCCCCCGGTACTCACTCAGCCCCAGGGAGTGTCCCTGGCTCCCAGGGCTCTGGGAGGTGAGGGCAGG

TCCCGGGGGAGGCTGGGTTAGTGGCAGCTCCGGGATGAGACCTCAGAGGTCTGTCTGACTTGTCCAAGCC

CGGCTATGGGGAGGTGGGGGGAAGGAAGGAAGAGGAGAGAAATAAGGAGAGGCTGGGCAAAGAAGACAGG

ACGGCAGAGGGAGAGGGGAGAGAAGTGGGAGGCAGCCAGCAGCGCAGGGCCCTGAGAGTATTTCAGCGGC

ACCGCTGTCCTGGGCCGCCCGGTGCCACATCTTTGAAAACAGTTGTTTAATTTAAGCTTGTCCACTCAGT

AGCTGTTGAATGTGGGAGGTTATCTTGTTCTATTCAAGTTGCTATAAAAATAAAAACTACCATAGACTGG

GAAAAAAAAAAAAAAAAAA

본 발명의 일 실시예에 따른 상기 조성물은 상기 TNFRSF14 의 발현 또는 활성 억제 물질을 조성물 총 중량에 대하여 0.00001 내지 30 중량%로 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 상기 조성물은 피부 외용제 조성물일 수 있으며, 보다 구체적으로 화장품 조성물 또는 약학 조성물을 포함할 수 있다.

일 실시예로서, 상기 화장품 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있다. 예를 들면, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.

일 실시예로서, 상기 화장품 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 함유할 수 있다. 본 발명에 따른 화장품 조성물은 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 스핑고 지질로 이루어진 군에서 선택된 물질을 포함할 수 있다. 또한 상기 화장품 조성물은 일 실시예로서, 보습제, 에몰리언트제, 계면 활성제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한(制汗)제를 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 총 중량을 기준으로 0.01 내지 5 중량%, 구체적으로 0.01 내지 3 중량%일 수 있다.

또한, 일 실시예로서 상기 약학 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있다. 예를 들면, 경구, 경피(trandermally), 정맥, 근육, 피하주사에 의해 투여될 수 있다. 일 실시예로서 상기 약학 조성물은 주사제, 피부 외용 용액제, 현탁제, 유액제, 겔, 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 계면 활성제, 부형제, 수화제, 유화 촉진제, 현탁제, 삼투압 조절을 위한 염 또는 완충제, 착색제, 향신료, 안정화제, 방부제, 보존제 또는 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 약학 조성물의 유효 성분은 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 사용 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 5000mg/kg/일, 보다 구체적으로는 50 mg/kg/일 내지 500 mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 다른 일 실시예는 상기 TNFRSF14를 이용하여 피부 미백 물질을 스크리닝하는 방법을 제공할 수 있다.

일 실시예로서, 상기 방법은 (a)멜라닌 세포(melanocyte)에 시험 물질을 처리하는 단계; 및 (b)상기 시험물질이 멜라닌 세포에서 TNFRSF14의 발현을 억제하는지 여부를 확인하는 단계를 포함할 수 있다. 이때, 상기 (b)단계의 TNFRSF14 발현 억제 여부는 TNFRSF14 mRNA의 번역 억제 여부일 수 있다.

일 실시예로서, 상기 (b) 단계는 멜라닌 세포에 시험물질의 처리하기 전과 후의 TNFRSF14의 상대적 발현 억제 정도를 확인하는 단계를 포함할 수 있다. 또는, 일 실시예로서 상기 (b) 단계는 시험물질을 처리한 멜라닌 세포와 시험물질을 처리하지 않은 멜라닌 세포의 상대적 발현 억제 정도를 확인하는 단계를 포함할 수 있다.

또한, 일 실시예는 상기 (b)단계의 확인 결과, 상기 시험물질이 TNFRSF14의 발현을 억제시키는 경우 피부 미백물질로 판정하는 단계를 더 포함할 수 있다.

본 명세서에서, "상대적 발현 억제 정도"는 시험물질을 처리하기 전의 멜라닌 세포에서의 TNFRSF14의 발현 정도에 대한 시험물질을 처리한 후 멜라닌 세포에서의 TNFRSF14의 발현 정도를 비교하였을 때 발현이 억제된 정도일 수 있다. 또는, "상대적 발현 억제 정도"는 시험 물질을 처리한 멜라닌 세포에서의 TNFRSF14의 발현 정도를 시험 물질을 처리하지 않은 멜라닌 세포에서의 TNFRSF14의 발현 정도와 비교하였을 때의 발현이 억제된 정도일 수 있다. 상기 발현 정도는 발현량 및 발현 질(quality)을 포함할 수 있다. 또한, 발현 정도는, 예컨대, 단백질의 발현 정도를 포함할 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 발현 정도는 멜라닌 세포에서의 멜라닌 합성 정도를 포함할 수 있다.

본 발명의 일 실시예로서 상기 피부 미백물질로 판정하는 단계는 "상대적 발현 억제 정도"가 2 배 이상인 경우, 피부 미백물질로 판정하는 것을 포함할 수 있다. 즉, 시험물질을 처리하기 전의 멜라닌 세포에서의 TNFRSF14의 발현 정도에 대한 시험물질을 처리한 후 멜라닌 세포에서의 TNFRSF14의 발현 정도를 비교하였을 때 발현이 약 1.1 내지 2배 이상 억제된 경우, 피부 미백물질로 판정할 수 있다. 또는, 시험 물질을 처리한 멜라닌 세포에서의 TNFRSF14의 발현 정도를 시험 물질을 처리하지 않은 멜라닌 세포에서의 TNFRSF14의 발현 정도와 비교하였을 때의 발현이 약 1.1 내지 2배 이상 억제된 경우, 피부 미백물질로 판정할 수 있다.

예를 들어, 상기 TNFRSF14의 상대적 발현 억제 정도가, 시험물질 처리 후에 시험물질 처리 전에 비하여, 1.1 배 이상, 1.2배 이상, 1.3 배 이상, 1.4배 이상, 1.5 배 이상, 1.6배 이상, 1.7배 이상, 1.8배 이상, 1.9배 이상, 또는 2배 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 발현 정도는 통계적 유의성을 확보한 상태에서 측정된 결과이다. 통계적 유의성이라는 개념은 생물학적 통계분석법을 통하여 유의적인 차이를 보이는 경우로, 정량적인 경우 p value가 0.05 미만으로 차이가 나는 경우를 포함한다.

일 실시예에 따른 상기 (a) 단계에서, 상기 시험물질은 세포의 리포좀(liposome) 또는 백터(vector)에 트렌스펙션시킬 수 있으며, 세포는 멜라닌 세포, 즉 멜라노사이트(melanocyte)일 수 있다. 상기 트랜스펙션은 미세 주입법, 칼슘 포스페이트 공동-침전법, 전기 천공법 또는 리포좀 이용법 등을 이용하여 실시할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

또한, 일 실시예로서, 상기 TNFRSF14의 발현 정도는, 공지의 기술, 예컨대, 역전사 중합효소 연쇄반응(RT-PCR), 엘라이자(ELISA), 웨스턴블럿 또는 이뮨 블롯(immune blot)을 이용하여 확인할 수 있으며, 이에 한정되는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 일 실시예는 색소관련 피부 상태 정도를 진단할 수 있는 바이오 마커를 제공할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 실시예는 이를 이용한 색소관련 피부 상태 진단용 조성물 또는 색소관련 피부 상태 진단용 키트를 제공할 수 있다. 본 발명의 다른 일 실시예는 이를 이용한 색소관련 피부 상태 진단용 기초 정보 제공 방법 또는 색소관련 피부 상태 진단방법을 제공할 수 있다.

구체적으로 본 발명의 일 실시예는 상기 TNFRSF14의 mRNA 또는 TNFRSF14 단백질 검출 시약을 포함하는 색소관련 피부 상태 진단용 조성물을 제공할 수 있다.

또다른 본 발명의 일 실시예는 시험대상으로부터 분리된 피부세포에서 TNFRSF14의 발현량을 확인하는 단계를 포함하는 색소관련 피부 상태 진단용 기초 정보 제공 방법 또는 색소관련 피부 상태 진단방법을 제공할 수 있다. 이때, 일 실시예로서 상기 TNFRSF14 발현량은 TNFRSF14의 mRNA 또는 TNFRSF14 단백질 발현량일 수 있고, 상기 시험대상으로부터 분리된 피부세포 및 정상대조군 피부세포는 멜라닌 세포(melanocyte)일 수 있다.

일 실시예로서 색소관련 피부 상태 진단용 기초 정보 제공 방법 또는 색소관련 피부 상태 진단방법은 상기 시험대상으로부터 분리된 피부세포에서의 TNFRSF14 발현량을 정상대조군 피부세포에서의 TNFRSF14 발현량과 비교하는 단계를 더 포함할 수 있다. 또한, 일 실시예로서 상기 방법은 상기 시험대상으로부터 분리된 피부세포에서의 TNFRSF14 발현량이 정상대조군 피부세포에서의 TNFRSF14 발현량보다 높을 경우 색소관련 피부 상태에 이상이 있는 것으로 정보를 제공하거나, 진단하는 단계를 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 시험대상으로부터 분리된 피부세포에서의 TNFRSF14 발현량이 정상대조군 피부세포에서의 TNFRSF14 발현량보다 약 1.1 내지 2배 이상 높은 경우, 색소관련 피부 상태에 이상이 있는 것으로 판단할 수 있다. 보다 구체적으로, 예를 들어, 상기 시험대상으로부터 분리된 피부세포에서의 TNFRSF14의 발현량이 정상대조군 피부세포에 비하여, 1.1 배 이상, 1.2배 이상, 1.3 배 이상, 1.4배 이상, 1.5 배 이상, 1.6배 이상, 1.7배 이상, 1.8배 이상, 1.9배 이상, 또는 2배 이상인 경우, 색소관련 피부 상태에 이상이 있는 것으로 판단할 수 있다. 상기 발현량은 통계적 유의성을 확보한 상태에서 측정된 결과이다. 통계적 유의성이라는 개념은 생물학적 통계분석법을 통하여 유의적인 차이를 보이는 경우로, 정량적인 경우 p value가 0.05 미만으로 차이가 나는 경우를 포함한다.

또다른 본 발명의 일 실시예는 상기 TNFRSF14의 mRNA 또는 TNFRSF14 단백질 검출 시약을 포함하는 색소관련 피부 상태 진단용 키트를 제공할 수 있으며, 상기 키트는 상술된 색소관련 피부 상태 진단용 기초 정보 제공 방법 또는 색소관련 피부 상태 진단방법이 기재되어 있는 지시서를 더 포함할 수 있다.

또한, 일 실시예로서, 상기 색소관련 피부 상태 진단용 조성물 또는 색소관련 피부 상태 진단용 키트에 포함되는 TNFRSF14 mRNA 검출 시약은 TNFRSF14에 특이적으로 결합하는 프라이머 및 프로브 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 일 실시예로서 상기 TNFRSF14 단백질 검출 시약은 TNFRSF14에 특이적으로 결합하는 항체 및 프로브 중 하나 이상을 포함할 수 있다.

이하, 실시예를 통하여, 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 아래 실시예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 그에 의해 제한되는 것은 아니다.

[실험예 1]

TNFRSF14의 발현 억제에 의한 색소 형성 감소를 확인하기 위하여, 하기의 실험을 실시하였다.

중간 정도로 색소가 있는 조직에서 분리된 인간 1차 멜라노사이트(moderately pigmented Human primary Melanocyte) (Thermofisher 사에서 구입, https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/C1025C?ICID=search-product)을 준비하였다.

상기 멜라노사이트에서 TNFRSF14의 발현을 감소시키기 위해서, TNFRSF14 mRNA 서열에 특이적인, 하기 두 종류의 TNFRSF14 siRNA를 도입하였다.

- 실시예 1: si-TNFRSF14 #1

Sense: 5'- GUGUGGUGUUUAGUGGAUA -3'(서열번호 1)

Antisense: 5'- UAUCCACUAAACACCACAC -3' (서열번호 2)

- 실시예 2: si-TNFRSF14 #2

Sense: 5' - CAGGUUAUCGUGUGAAGGA -3' (서열번호 3)

Antisense: 5'- UCCUUCACACGAUAACCUG -3'(서열번호 4)

구체적으로, 멜라닌 세포주인 상기 Human primary Melanocyte 위에 상기 실시예 1의 TNFRSF14 siRNA를 농도가 20nM가 되도록 리포좀(liposome)을 이용하여 트랜스펙션하여 세포 안으로 이동시켰다. 상기 리포좀은 Lipofectaminer® RNAiMAX Reagent (Thermo Fisher Scientific, https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/13778150)를 사용하였다. 상기 실시예 2의 TNFRSF14 siRNA도 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 농도가 20nM가 되도록 리포좀(liposome)을 이용하여 트랜스펙션하여 세포 안으로 이동시켰다.

음성 대조군으로 사람의 그 어떤 유전자도 감소시키지 않은, 즉 세포 증식 및 세포 활성에 미치는 영향이 최소 수준인 것으로 기능적으로 입증된 siRNA인 Silencer® Select Negative Control No. 1 siRNA(Thermo Fisher Scientific, https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/4390843?ICID=search-product)을 사용하였다. 상기 음성 대조군의 siRNA도 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 농도가 20nM가 되도록 리포좀(liposome)을 이용하여 트랜스펙션하여 세포 안으로 이동시켰다.

상기 각 트랜스펙션시킨 실시예 1 및 2, 음성 대조군 세포를 37℃ 5% CO₂ 인큐베이터에서 약 7일간 배양하였다.

상기 각 세포들을 PBS 완충액 5ml을 이용하여 두번 워싱(washing)한 후, PBS 완충액 1ml를 넣어준 뒤 스크리퍼(scripper)를 이용하여 세포를 모두 긁어 모은 뒤 13000 rpm으로 5분간 원심 분리(centrifugation)하여 세포 알갱이(cell pellet)를 만들고 그 세포 알갱이의 색깔을 관찰하여 색소 형성 정도를 비교하였다. 또한, 상기 세포 알갱이를 200μl 부피의 1N NaOH에 녹인 뒤, 450nm 흡광도를 측정하여 멜라닌의 양을 측정하였다.

그 결과 도 1에 나타난 바와 같이 TNFRSF14 siRNA를 사용하여 TNFRSF14의 발현을 억제시킨 실시예 1 및 2의 경우 멜라노사이트에 포함된 멜라닌의 양이 음성대조군과 비교하여 약 1.5배 이상 현저히 감소하였음을 확인할 수 있다. 이는 피부내 TNFRSF14의 발현 또는 활성 억제할 경우 피부 미백 효과를 나타낼 수 있음을 의미한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 조성물의 제형예를 아래에서 설명하나, 다른 여러 가지 제형으로도 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

[제형예 1] 영양화장수

하기 표 1에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조할 수 있다.

원료명 함량	함량(중량%)
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시비닐폴리머	0.1
실시예 1 또는 2를 포함하는 리포좀	0.01
밀납	4.0
폴리솔베이트 60	1.5
카프릴릭/카프릭 리글리세라이드	5.0
스쿠알란	5.0
솔비타세스퀴올레이트	1.5
세테아릴 알코올	1.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 향료	적량
정제수	잔량
계	100

[제형예 2] 영양로션

하기 표 2에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양로션을 제조할 수 있다.

원료명 함량	함량(중량%)
정제수	잔량
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	3.0
유동파라핀	5.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
실시예 1 또는 2를 포함하는 리포좀	0.01
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	5.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
폴리솔베이트 60	1.5
방부제	적량
향	적량
색소	적량
트리에탄올아민	0.1
계	100

[제형예 3] 영양크림

하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조할 수 있다.

원료명 함량	함량(중량%)
글리세린	3.5
부틸렌글리콜	3.0
유동파라핀	7.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
실시예 1 또는 2를 포함하는 리포좀	0.01
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	5.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
폴리솔베이트 60	1.2
트리에탄올아민	0.1
방부제, 향료	적량
정제수	잔량
계	100

[제형예 4] 주사제

하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 주사제를 제조할 수 있다.

원료명 함량	중량비(1ml 당)
염화나트륨	9.0mg
소듐 카르복시메틸셀룰로오즈	30.0mg
Tween 20	1.0mg
실시예 1 또는 2를 포함하는 리포좀	1.0mg
주사용 증류수	잔량

[제형예 5] 연고

하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 연고를 제조할 수 있다.

원료명 함량	함량(중량%)
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
유동파라핀	15.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
실시예 1 또는 2	0.01
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	1.0
세테아릴 글루코사이드	1.5
소르비탄 스테아레이트	0.4
세테아릴 알코올	1.0
방부제	적량
향	적량
색소	적량
밀납	4.0
정제수	잔량
계	100

<110> AMOREPACIFIC CORPORATION <120> A composition for skin brightening comprising TNFRSF14 inhibiting materials and a method for screening TNFRSF14 inhibiting materials <130> 16P546IND <160> 5 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense siRNA of TNFRSF14 #1 <400> 1 gugugguguu uaguggaua 19 <210> 2 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense siRNA of TNFRSF14 #1 <400> 2 uauccacuaa acaccacac 19 <210> 3 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense siRNA of TNFRSF14 #2 <400> 3 cagguuaucg ugugaagga 19 <210> 4 <211> 19 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense siRNA of TNFRSF14 #2 <400> 4 uccuucacac gauaaccug 19 <210> 5 <211> 3519 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> mRNA of TNFRSF14 <400> 5 tccttcatac cggcccttcc cctcggcttt gcctggacag ctcctgcctc ccgcagggcc 60 cacctgtgtc ccccagcgcc gctccaccca gcaggcctga gcccctctct gctgccagac 120 accccctgct gcccactctc ctgctgctcg ggttctgagg cacagcttgt cacaccgagg 180 cggattctct ttctctttct ctttctcttc tggcccacag ccgcagcaat ggcgctgagt 240 tcctctgctg gagttcatcc tgctagctgg gttcccgagc tgccggtctg agcctgaggc 300 atggagcctc ctggagactg ggggcctcct ccctggagat ccacccccaa aaccgacgtc 360 ttgaggctgg tgctgtatct caccttcctg ggagccccct gctacgcccc agctctgccg 420 tcctgcaagg aggacgagta cccagtgggc tccgagtgct gccccaagtg cagtccaggt 480 tatcgtgtga aggaggcctg cggggagctg acgggcacag tgtgtgaacc ctgccctcca 540 ggcacctaca ttgcccacct caatggccta agcaagtgtc tgcagtgcca aatgtgtgac 600 ccagccatgg gcctgcgcgc gagccggaac tgctccagga cagagaacgc cgtgtgtggc 660 tgcagcccag gccacttctg catcgtccag gacggggacc actgcgccgc gtgccgcgct 720 tacgccacct ccagcccggg ccagagggtg cagaagggag gcaccgagag tcaggacacc 780 ctgtgtcaga actgcccccc ggggaccttc tctcccaatg ggaccctgga ggaatgtcag 840 caccagacca agtgcagctg gctggtgacg aaggccggag ctgggaccag cagctcccac 900 tgggtatggt ggtttctctc agggagcctc gtcatcgtca ttgtttgctc cacagttggc 960 ctaatcatat gtgtgaaaag aagaaagcca aggggtgatg tagtcaaggt gatcgtctcc 1020 gtccagcgga aaagacagga ggcagaaggt gaggccacag tcattgaggc cctgcaggcc 1080 cctccggacg tcaccacggt ggccgtggag gagacaatac cctcattcac ggggaggagc 1140 ccaaaccact gacccacaga ctctgcaccc cgacgccaga gatacctgga gcgacggctg 1200 ctgaaagagg ctgtccacct ggcggaacca ccggagcccg gaggcttggg ggctccgccc 1260 tgggctggct tccgtctcct ccagtggagg gagaggtggg gcccctgctg gggtagagct 1320 ggggacgcca cgtgccattc ccatgggcca gtgagggcct ggggcctctg ttctgctgtg 1380 gcctgagctc cccagagtcc tgaggaggag cgccagttgc ccctcgctca cagaccacac 1440 acccagccct cctgggccag cccagagggc ccttcagacc ccagctgtct gcgcgtctga 1500 ctcttgtggc ctcagcagga caggccccgg gcactgcctc acagccaagg ctggactggg 1560 ttggctgcag tgtggtgttt agtggatacc acatcggaag tgattttcta aattggattt 1620 gaattcggct cctgttttct atttgtcatg aaacagtgta tttggggaga tgctgtggga 1680 ggatgtaaat atcttgtttc tcctcaaact gtcacctccc ggtgtttctt gctgaacaag 1740 gagttccagg atggctgctg ggctgttcgg gggacccctg ccctcctccc gtcatgcctg 1800 ggggttcact ccacccagag aggagccctg gccgcccctt catatcccaa cagctgagct 1860 ctcagtgggc tcttctgacc tctgtggctc cgtccgaggc tattgctgtg gattctgatg 1920 ctcaaatggt gtcagatttg cccagtaaaa accccagatc tacatctgac ctacacttcc 1980 cagctgtgtc caccgagaaa ccccagtatc agtgacgcct gctgtgccca gccctctcca 2040 cctgctccgg gaacccgcca ggcccaggtc ccgctggcag gggcttcacc aggcctctga 2100 gccacacatt catttaatgg tcgggatgag gcccctttcc ccacatctga agttagaagc 2160 ggtgagggga atgaccctgc agccatgcca tgaggatgga ggccacatag cccctccgag 2220 catgcccgct ccaccccgcc ctaccccctc tcctttcctt gtcacctgcc tccagcagag 2280 cccccaggct gagccaccca ccccaactcc tctcctgcca ccccttgtcc tgtggaagct 2340 ttggcttagc gtcctggggt gtggagaggc ccatgcaggc caggtggagc cctgggcccc 2400 tagaaagcag cacttctggc tgccccaccc cgtgtcaccc tctccccaac tggaggcgtg 2460 gtctccaggg accacgggcc tccctgtgca tggaccggct cctgaccacc gtccagggtc 2520 attgccaggg taccttttca gaggctgacc ccatagacct ggctgccccc cagtgctaga 2580 tgggagccaa gcacagcctg cccttctgcc cacagtcccg ggggcaggtg ggagcatggg 2640 gccatggagt gagcgggcag gggtggcaga gggctccctg gtcaggggcc ccaacttccc 2700 ttcccccagg gaggccacct gacatctggg ctccaggcac agcaggaagc ccacctgccc 2760 caacctgtag ctcctcctcc tgggaggagc catggatcct ggaaaagctc tggggccacc 2820 tcccaggttt ggggggacag agctccaaga gacgacggct ggggacacga gccctcatgg 2880 ggccgctgtg tgctcacccc ttgattttct tcttttcatg catgagatta ggccaagtgt 2940 ggagaaatca atgatgttga cgatgaggct ccctgagaga aatcacaccc agcgggagct 3000 gctgctccca ggtctggcct cggtcaccag ccacctgctg catccgcggg agtggggccg 3060 aggacatggg agtggcaggt gcagcccccg gtactcactc agccccaggg agtgtccctg 3120 gctcccaggg ctctgggagg tgagggcagg tcccggggga ggctgggtta gtggcagctc 3180 cgggatgaga cctcagaggt ctgtctgact tgtccaagcc cggctatggg gaggtggggg 3240 gaaggaagga agaggagaga aataaggaga ggctgggcaa agaagacagg acggcagagg 3300 gagaggggag agaagtggga ggcagccagc agcgcagggc cctgagagta tttcagcggc 3360 accgctgtcc tgggccgccc ggtgccacat ctttgaaaac agttgtttaa tttaagcttg 3420 tccactcagt agctgttgaa tgtgggaggt tatcttgttc tattcaagtt gctataaaaa 3480 taaaaactac catagactgg gaaaaaaaaa aaaaaaaaa 3519

Claims

TNFRSF14(TNF receptor superfamily member 14)의 발현 또는 활성 억제 물질을 유효성분으로 포함하고, 상기 TNFRSF14의 발현 또는 활성 억제 물질은 TNFRSF14 mRNA의 적어도 일부에 결합하는 올리고뉴클레오티드이고, 상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며 서열번호 1 내지 4로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 염기 서열을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물.
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제1항에 있어서,
상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며, 서열번호 1로 표시되는 염기 서열 및 상기 서열번호 1에 혼성화 가능한 염기 서열을 포함하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며, 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 염기 서열을 포함하고, 상기 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 염기 서열은 혼성화된, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며, 서열번호 3로 표시되는 염기 서열 및 상기 서열번호 3에 혼성화 가능한 서열을 포함하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 올리고뉴클레오티드는 이중가닥이며, 서열번호 3 및 서열번호 4로 표시되는 염기 서열을 포함하고, 상기 서열번호 3 및 서열번호 4로 표시되는 염기 서열은 혼성화된, 조성물.
제1항 및 제5항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 올리고뉴클레오티드는 리포좀에 포집된 형태 또는 백터에 삽입된 형태로 포함되는, 조성물.
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제1항에 있어서,
상기 조성물은, TNFRSF14 발현 또는 활성 억제 물질을 조성물 총 중량을 기준으로, 0.00001 내지 30 중량%로 포함하는, 조성물.
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