KR102661225B1 - 세포 성장인자 안정화 성분을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents
세포 성장인자 안정화 성분을 함유하는 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 세포 성장인자 안정화 성분을 함유하는, 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물에 따르면, 1종 이상의 뮤코폴리사카라이드 (Mucopolysaccharide)를 포함하는 세포 성장인자 안정화 성분을 적정 비율로 사용함으로써, 종래 지적되어 왔던, 고온 조건에서 세포 성장인자의 활성 감소를 최소화시킬 수 있었는바, 이를 통해 우수한 조직 재생 효능을 오랜 기간 유지할 수 있는 화장료 조성물 등을 제공할 수 있다.
Description
본 발명은 세포 성장인자 안정화 성분을 함유하는, 화장료 조성물에 관한 것이다.
화장품 분야에서는 최근 들어 단순한 피부 미용을 위한 화장품이 아닌, 세포 자체의 재생에 초점을 맞춘 메디컬용 화장품들이 출시되고 있다. 이들 중 하나로서, 피부 노화의 빠른 진행을 억제하고 피부 재생 효과를 부여하고자, 세포 성장인자 (Epithelial growth factor, EGF)와 같은 세포 성장인자를 담지하는 등, 다양한 시도가 이루어지고 있으며, 이를 적용한 다수의 제품이 출시되고 있다.
그러나 이러한 EGF 등의 세포 성장인자들은 온도 조건에 민감하게 반응하여, 외부 환경에 대한 내구성이 높지 못한 특성을 지니며, 실제로, EGF 성분을 37℃ 조건에서 3시간 incubation시킬 경우, EGF의 활성도가 60% 손상됨이 보고된 바 있는 등, 고온 조건에 대한 세포 성장인자들의 낮은 내구성은 화장품 분야에서 해결하여야 할 필수적인 과제로 떠오르고 있다.
특히, 화장품에 EGF 등과 같은 세포 성장인자를 적용하기 위해서는, 제조 공정에서 40℃ 내외의 후첨 공정이 필요하며, 통상적으로 제조에서 사용에 이르기까지, 즉, 1년 내지 3년 정도의 품질 보증을 필요로 한다. 그러나 화장품이 제품화되어 이동 또는 소비자가 사용하는 과정에서, 생활 고온 조건 (여름철, 난방 등)에 노출되는 경우가 빈번하게 발생되며, 이러한 경우, 세포 성장인자들은 고유의 활성을 크게 상실하여 제 기능을 충분히 발휘하지 못하게 된다. 따라서, 피부에 유용한 효능 성분을 제품에 적용하였다 할지라도, 이러한 효과는 실제 소비자에게 전달되지 못하게 되어 체감 효능에 대한 만족도가 높지 못하게 될 우려가 있다.
이러한 배경 하에서, 세포 성장인자와 함께 제형 내 적용되어, 제조 및 사용 과정의 외부적 환경으로부터 세포 성장인자를 안정화시킬 수 있는 제형 관련 기술이 절실하게 요구되고 있으나 (한국 공개특허 10-2015-006687), 아직은 미비한 실정이다.
본 발명자들은, 기존 기술의 적용만으로는 어려웠던, 세포 성장인자를 함유하는 화장료의 열에 대한 낮은 내구성을 극복하기 위하여 예의 노력한 결과, 적정 비율의 세포 성장인자 안정화 성분을 혼합함으로써, 고온 조건에서도 높은 생물학적 활성을 유지할 수 있음을 확인하고, 이에 기초하여 본 발명을 완성하게 되었다.
이에, 본 발명의 목적은 세포 성장인자 안정화 성분을 적정 비율로 함유함으로써, 고온 조건에서도 세포 성장인자의 생물학적 활성이 높게 유지되는, 화장료 조성물 및/또는 세포 성장인자 안정화용 조성물을 제공하는데 있다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 과제를 해결하기 위한 수단으로서, 본 발명은 세포 성장인자; 및 1 종 이상의 뮤코폴리사카라이드를 포함하는 세포 성장인자 안정화 성분을 함유하는, 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현 예로서, 상기 세포 성장인자는 염기성 섬유아세포 성장인자 (bFGF), 상피세포 성장인자 (EGF), 케라티노사이트 성장인자 (KGF), 형질전환 성장인자 알파 (TGFα), 형질전환 성장인자 베타 (TGFβ), 과립구 형성 자극인자 (GCSF), 인슐린 유사 성장인자 (IGF), 혈관내피 성장인자 (VEGF), 종양괴사인자 (TNF) 및 인터류킨으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
구체적으로, 상기 세포 성장인자는 상피세포 성장인자 (EGF)일 수 있으며, 0.1 내지 10 ng/ml의 농도로 함유될 수 있다.
본 발명의 다른 구현 예로서, 상기 세포 성장인자 안정화 성분은, 글라이코스아미노글리칸 (Glycosaminoglycan); 및 히알루론산 (Hyaluronic acid) 또는 이의 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 뮤코폴리사카라이드를 1종 이상 포함할 수 있다.
구체적으로, 상기 글라이코스아미노글리칸 또는 히알루론산은, 하이드롤라이즈드 글라이코사미노글리칸 (Hydrolyzed glycosaminoglycan) 또는 하이드롤라이즈드 히알루론산 (Hydrolyzed hyaluronic acid)일 수 있으며, 상기 히알루론산 염은, 히알루론산 나트륨 (Sodium hyaluronate)일 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현 예로서, 상기 세포 성장인자 안정화 성분은 글라이코스아미노글리칸; 및 히알루론산 또는 이의 염을 포함할 수 있다.
구체적으로, 상기 세포 성장인자 안정화 성분은, 조성물 전체 중량에 대하여, 글라이코스아미노글리칸이 3 내지 25 중량%, 및 히알루론산 또는 이의 염이 0.03 내지 5 중량%로 함유될 수 있으며, 상기 글라이코스아미노글리칸 : 히알루론산 또는 이의 염의 조성비는 10:1 내지 300:1일 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현 예로서, 상기 조성물은, 수용성 염을 더 함유할 수 있으며, 이는 조성물 전체 중량에 대하여, 0.01 내지 3 중량%로 함유될 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현 예로서, 상기 조성물은 화장수, 로션, 크림 또는 겔로 제형화될 수 있다.
또한 본 발명은 글라이코스아미노글리칸; 및 히알루론산 또는 이의 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 뮤코폴리사카라이드를 1종 이상 포함하는, 세포성장 인자 안정화용 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물에 따르면, 1종 이상의 뮤코폴리사카라이드 (Mucopolysaccharide)를 포함하는 세포 성장인자 안정화 성분을 적정 비율로 사용함으로써, 종래 지적되어 왔던, 고온 조건에서 세포 성장인자의 활성 감소를 최소화시킬 수 있었는바, 이를 통해 우수한 조직 재생 효능을 오랜 기간 유지할 수 있는 화장료 조성물 등을 제공할 수 있다.
도 1은, 비제형 상태인 EGF를 HaCaT 세포에 처리한 뒤, 열 처리에 따른 세포 증식률 변화를 정량적으로 비교한 결과이다.
도 2는, (a) EGF를 함유하는 통상의 조성물, 및 (b) EGF 및 세포 성장인자 안정화 성분을 함유하는 본 발명의 조성물을 HaCaT 세포에 처리한 뒤, 열 처리에 따른 세포 증식률 변화를 정량적으로 비교한 결과이다.
도 2는, (a) EGF를 함유하는 통상의 조성물, 및 (b) EGF 및 세포 성장인자 안정화 성분을 함유하는 본 발명의 조성물을 HaCaT 세포에 처리한 뒤, 열 처리에 따른 세포 증식률 변화를 정량적으로 비교한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다.
본 발명은 세포 성장인자를 함유하며, 세포 성장인자 안정화 성분으로서 1종 이상의 뮤코폴리사카라이드 (Mucopolysaccharide)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "세포 성장인자"는 세포의 증식, 사멸, 분화 등과 같은 세포의 기능을 회복시키는 생체 내 인자를 의미하며, 보다 구체적으로, 세포의 증식 등을 통해 주름 개선, 피부 탄력 개선 등의 효과를 유도하는 생체 내 인자를 총칭한다. 상기 세포 성장인자는 바람직하게, 염기성 섬유아세포 성장인자 (bFGF), 상피세포 성장인자 (EGF), 케라티노사이트 성장인자 (KGF), 형질전환 성장인자 알파 (TGFα), 형질전환 성장인자 베타 (TGFβ), 과립구 형성 자극인자 (GCSF), 인슐린 유사 성장인자 (IGF), 혈관내피 성장인자 (VEGF), 종양괴사인자 (TNF) 또는 인터류킨 (IL-1, IL-6, IL-8, IL-10)일 수 있으며, 가장 바람직하게, 상피세포 성장인자 (EGF)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 사용되는 용어, "세포성장 인자 안정화"는 세포 성장인자의 분해, 변형, 생물학적 활성의 손실로부터 보호하는 것을 일컬으며, 보다 구체적으로, 40℃ 내외의 고온 조건에서도 세포성장 인자의 생물학적 활성, 즉 세포의 증식, 사멸, 분화 등과 같은 세포의 기능을 회복시키는 활성을 유지하는 것을 의미한다.
종래의 세포 성장인자를 함유하는 화장품 또는 화장료의 효능에 있어서, 40℃ 내외의 후첨 공정 또는 생활 고온 조건 (여름철, 난방 등)에 의하여 세포 성장인자의 조직 재생 효과가 크게 감소될 우려가 존재하였는바, 이는 화장품의 품질 저하 요인이 되어왔다. 반면, 본 발명의 화장료 조성물은, 생체 친화적인 물질들로 구성된 상기 세포 성장인자 안정화 성분을 조합 및 적정 비율로 적용하여, 고온 조건에서 세포 성장인자의 활성 감소를 최소화시키고, 고유의 조직 재생 효능을 유지시킬 수 있다는 점에서 기술적 특징이 있다.
한편, 상피세포 성장인자 (EGF)와 같은 세포 성장인자는 외부 환경에 매우 민감하기 때문에 생체 내에서 독립적으로 존재하는 것이 아니라, 뮤코폴리사카라이드 (점액성 다당류), 보다 상세하게는 글라이코스아미노글리칸 (Glycosaminoglycan), 프로테오글라이칸 (Proteoglycan), 및 히알루론산 (hyaluronic acid) 등에 의해 형성된 조직 골격 (tissue's matrix)과 결합하여 안정화된 상태로 존재한다. 이러한 점에 착안하여, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 세포 성장인자 안정화 성분으로서, 뮤코폴리사카라이드인 글라이코스아미노글리칸 (Glycosaminoglycan) 및/또는 히알루론산 (hyaluronic acid) 또는 이의 염을 유효 성분으로 이용하였다.
본 발명에서, 글라이코스아미노글리칸은 식물 또는 동물성 성분에서 추출한 당단백질, 이들의 조합, 또는 이들을 포함하는 추출물 중에서 선택되는 어느 하나일 수 있으며, 바람직하게 하기 화학식 1의 구조를 갖는 물질일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한 본 발명에서, 히알루론산은 생체 내에서 존재하는 고분자 화합물 또는 이와 유사한 성질을 갖는 폴리머로 종래 사용되어왔던 물질로서, 본 발명에서는 상기 세포 성장인자를 안정화시키기 위하여 이용되었으며, 상기 히알루론산은 염의 형태 (히알루론산 나트륨, 히알루론산 칼슘, 히알루론산 칼륨 등)로 이용될 수도 있다.
또한 세포 성장인자를 함유하는 화장료 조성물에 적용하기 위하여, 상기 글라이코스아미노글리칸 또는 히알루론산은 수화된 (Hydrolyzed) 형태로 이용될 수 있으나, 이 역시 이에 제한되는 것은 아니다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은, 상기 세포 성장인자를 0.1 내지 10 ng/ml 농도로 함유하며, 상기 조성물 전체 중량에 대하여, 글라이코스아미노글리칸 3 내지 25 중량%, 및 히알루론산 또는 이의 염 0.03 내지 5.0 중량%로 함유할 수 있으며, 보다 바람직하게, 글라이코스아미노글리칸 10 내지 15 중량%, 및 히알루론산 또는 이의 염 0.1 내지 3 중량%로 함유할 수 있고, 구체적으로, 상기 글라이코스아미노글리칸 : 히알루론산 또는 이의 염의 조성비는 10:1 내지 300:1일 수 있으나, 상기 조성물의 제형 안정성, 세포 성장인자의 조직 재생 활성 등에 영향을 미치지 않은 한, 상기 범위를 벗어나는 함량 또는 조성비로 이루어질 수도 있다.
다만, 전술한 함량 범위에 비해 각 성분의 함량이 낮을 경우, 각 구성 성분들에 의한 상승 효과 (Synergic effect)에 의한 조직 모사 겔화 (tissue's matrix gelation)가 잘 이루어지지 않아 세포 성장인자 안정화가 효과적으로 이루지지 않을 수 있고, 이와 반대로, 각 성분의 함량이 높을 경우, 화장료의 점도가 지나치게 높아져 제형의 떠짐성 문제를 초래할 가능성이 존재한다. 따라서 본 발명에 따른 화장료 조성물은 성분들의 조합뿐만 아니라 각 성분들의 함량 역시 본 발명의 효과를 이끌어 내기 위한 중요한 요소로 작용할 수 있다.
여기서 각 구성성분들 간의 상승 효과 (Synergic effect)에 의한 조직 모사 겔화 (tissue's matrix gelation)가 세포 성장인자 안정화에 중요한 이유는 하기와 같다. 세포 성장인자는 단백질의 일종이기 때문에 올바른 구조의 형성은 생체 내에서의 기능 수행에 중요한 요건으로 작용하며, 열 등의 외부 환경적 스트레스는 세포 성장인자의 구조를 변형시킬 수 있는 자극원으로 작용할 수 있다. 또한, 생체 내에서 세포 성장인자는 개별적인 단백질 분자로 존재하는 것이 아니라 조직 네트워크 (tissue's matrix)와 결합한 상태로 존재하고, 이러한 결합은 세포 성장인자가 올바른 구조를 유지하도록 돕는 역할을 수행하는바, 이러한 조직 네트워크를 모사한 본 발명에 따른 조직 모사 겔을 화장품 제형으로서 구현할 경우, 세포 성장인자는 생체 내에서처럼 세포 조직 모사 겔과 결합한 상태로 존재하게 되고, 이러한 상태는 열 등의 외부 환경 변화에 의한 성장 인자 구조 변형을 완화하는 효과를 가지게 된다. 상기 기재된 세포 조직 모사 겔의 조성비와 세포 성장인자의 비율은 피부에 유용한 효과를 낼 수 있는 수준의 세포 성장 인자의 함량에 대하여 열처리 대조군 대비 세포 성장 효과에서 유의미한 성장 증진 효과를 낼 수 있는 이유로 기술적 의의를 지닌다.
또한 본 발명은 제형 안정성, 세포 성장인자의 조직 재생 활성을 보다 향상시키고자, 수용성 염 (NaCl, KCl 등)을 더 함유할 수 있고, 이들 각각은 상기 조성물 전체 중량에 대하여, 0.01 내지 3 중량%로 함유할 수 있으나, 이 역시 상기 범위를 벗어나는 함량으로 이루어질 수도 있다.
이 뿐만 아니라, 상기 전술한 유효 성분들 외에, 사용 목적 및 조건에 따라 오일, 폴리올, 방부제, 킬레이트제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따르면, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 포함하는 기능성 화장품을 제공한다.
본 발명의 기능성 화장품은 세포의 증식 등을 통한 주름 개선, 피부 탄력 개선 등의 효과를 나타내며, 그의 제형은 특별히 제한되는 것은 아니나, 예를 들면, 용액, 유탁액, 현탁액, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 파우더, 스프레이, 계면활성제-함유 클린징, 오일, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 파운데이션, 메이크업베이스, 에센스, 화장수, 폼, 팩, 유연수, 선 스크린 크림, 선오일 등의 제형으로 제조될 수 있고, 바람직하게는 피부외용연고, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 에멀젼 또는 오일젤의 제형으로 제조될 수 있는데, 이때, 사용되는 담체는 화장품의 제형에 따라 선택적으로 사용될 수 있다.
예를 들어, 연고, 페이스트, 크림 또는 젤 형태의 화장품을 제조할 경우에는, 담체 성분으로서 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등을 단독으로 또는 조합하여 사용할 수 있고; 파우더 또는 스프레이 형태의 화장품을 제조할 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더, 클로로플루오로하드로카본, 프로판/부탄, 디메틸 에테르 등을 단독으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며; 용액 또는 유탁액 형태의 화장품을 제조할 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일, 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등을 단독으로 또는 조합하여 사용할 수 있고; 현탁액 형태의 화장품을 제조할 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록시드, 벤토나이트, 아가, 트라칸트 등을 단독으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며; 화장비누 형태의 화장품을 제조할 경우에는, 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알코올, 식물성 유, 글리세롤, 당 등을 단독으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
또한 본 발명의 다른 측면에 따르면, 본 발명은 상기의 세포 성장인자 안정화 성분을 함유하며, 고온 조건에서도 세포 성장인자의 생물학적 활성이 높게 유지되는 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.
구체적으로, 이에 제한되는 것은 아니나, (a) 물 (정제수)에 히알루론산 또는 하이드롤라이즈드 히알루론산을 첨가 및 분산화시켜 균일한 하이드로겔을 형성하는 단계; (b) 상기 형성된 하이드로겔에 글라이코스아미노글리칸 또는 하이드롤라이즈드글라이코사미노글리칸을 첨가하고 45℃ 내외로 가온하여 제형을 제조하는 단계; 및 (c) 상기 제조된 제형을 냉각한 뒤, 40℃ 이하에서 세포 성장인자를 첨가하는 단계를 포함할 수 있고, 추가적으로, 수용성 염 등을 첨가하는 단계를 더 포함할 수 있으며, 이 밖에도, 당업계에서 알려져 있는, 통상적인 폴리머 성분을 이용한 화장료의 수상 제조법을 활용하여 제조될 수 있다.
또한 본 발명의 다른 측면에 따르면, 글라이코스아미노글리칸; 및 히알루론산 또는 이의 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 뮤코폴리사카라이드를 1종 이상 포함하는, 세포성장 인자 안정화용 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실험예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
실험예
1. 열처리에 따른 세포 성장인자의 활성 변화
본 실험예에서는, 열 처리에 따른 세포 성장인자 (EGF)의 활성 변화를 세포 증식률 변화를 통해 확인하고자 하였다. 구체적으로, 비제형 상태인 Life technology사의 Recombinant human EGF (0.1, 1, 10ng/ml)를 Keratinocyte cell line인 HaCaT 세포에 처리하였으며 (비제형 대조군 1 내지 3), 화장품 제조를 위한 후첨 공정 또는 통상의 생활 보관 온도인 37℃ 조건에서 3시간 동안, 이들을 열 처리한 후, 이에 따른 세포 증식률의 변화를 정량적으로 분석하였다.
그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이, 비제형 상태인 EGF를 처리한 경우 (비제형 대조군 1 내지 3), 열 처리 전과 비교하여, 열 처리 후 세포 증식률은 각각 94.8%, 71.8%, 54.4%씩 현저하게 감소됨을 확인할 수 있었다. 상기 결과는, 상피세포 성장인자 (EGF) 등과 같은 세포 성장인자만을 단독으로 화장료의 제조에 사용할 경우, 고온 처리 또는 보관 하에서, 고유의 효능이 급격하게 감소될 수 있음을 시사하는 것이다.
실험예
2. 세포 성장인자 첨가에 따른 안정성 비교
본 실험예에서는, 글라이코스아미노글리칸 (Glycosaminoglycan) 및 히알루론산 (hyaluronic acid)을 포함하는 세포 성장인자 안정화 성분을 함유하는 본 발명의 화장료 조성물 (실시예 1 내지 9)과 상기 안정화 성분이 함유되지 않은 비교군 (비교예 1 내지 3)들에 대하여, 열처리에 따른 세포 성장인자 (EGF)의 활성 변화를 확인하고자 하였다. 구체적으로, 세포 성장인자로서, NEXGEN사의 sh-EGF (0.1, 1, 10ng/ml)를 Keratinocyte cell line인 HaCaT 세포에 처리하였으며, 상기 실험예 1과 마찬가지로, 37℃ 조건에서 3시간 동안, 이들을 열 처리한 후, 이에 따른 세포 증식률의 변화를 정량적으로 분석하였다.
한편, 글라이코스아미노글리칸으로, CR&D 사의 GLYCACYD ECO (, 50% 함량), 히알루론산 나트륨으로, SHANDONG FREDA BIOPHARM 사의 Bio Hyaluronate (100% 함량), 글라이코스아미노글리칸의 적용 시 pH가 2.5~3 전후로 나오기 때문에 다른 실험군과 pH 조건을 유사하게 맞추고 화장품 적용이 가능한 pH 수준으로 맞추기 위하여, pH 조절제인 트로메타민으로, ANGUS CHEMICAL사의 TRIS AMINO ULTRA PC를 사용하였으며, 실시예 및 비교예의 구체적인 조성은 하기 표 1에 나타내었다.
그 결과, 도 2 및 하기 표 1에 나타낸 바와 같이, 통상의 제형으로 이루어진 비교군 (비교예 1 내지 3)은, 열 처리 후 세포 증식률이 각각 68.8%, 49.8%, 38.4%씩 감소하였던 반면 (도 2a 참조), 본 발명에 따른 조성물을 복합 적용한 경우 (실시예 7 내지 9)의 세포 증식 둔화율은 각각 57.2%, 21.6%, 25.2%로서, 열 처리에 기인한 EGF의 활성 감소가 유의적으로 완화됨을 확인할 수 있었다 (도 2b 참조). 또한, 세포 성장인자 안정화 성분을 개별적으로 적용했을 때 (실시예 1 내지 6)의 열 처리 후 세포 증식 둔화율을 살펴보면, 안정화 성분을 함유하지 않은 대조군에 비해서 전반적인 둔화율이 감소하였고, 특히, 글라이코스아미노글리칸 (Glycosaminoglycan)을 적용하였을 경우 세포 증식 둔화율이 유의미하게 감소한 것을 확인할 수 있었다. 아울러, 개별적으로 적용 경우 (실시예 1 내지 6)와 복합 적용한 경우 (실시예 7 내지 9)를 비교할 경우에는, 본 발명의 안정화 성분을 복합 적용한 경우, 개별적으로 적용한 경우에 비해 세포 증식 둔화율의 감소가 각 개별 효과의 합보다 크게 나타나는 것을 확인할 수 있었다.
즉, 상피세포 성장인자 (EGF) 등과 같은 세포 성장인자와 본 발명의 세포 성장인자 안정화 성분을 화장료의 제조에 함께 적용될 경우, 고온의 처리 또는 보관 하에서도 세포 성장 촉진 효과가 높게 유지됨을 알 수 있었다. 특히, 세포 성장인자 안정화 성분을 개별로 적용했을 경우 보다, 복합 적용시 각 구성 성분들의 상승 효과 (Synergic effect)에 의해 고온 처리에서도 세포 성장 인자의 안정화가 효과적으로 이루어지는 것을 확인할 수 있었다.
실험예
3. 세포
조직모사
성분 함량 비율에 따른
떠짐성
비교
본 실험예에서는, 세포 성장인자 안정화 겔을 형성하는 세포 조직모사 성분인 글라이코스아미노글리칸과 히알루로산의 제형 구성 함량 비율에 따른 제형의 떠짐성을 비교하고자 하였다. 화장품 제형에서 떠짐성은 제품을 별도의 기구 없이 손을 사용하여 간편하게 사용하기 위하여 필수적으로 확보되어야 하는 속성이라 할 수 있다. 떠짐성의 속성은 소비자가 느끼는 만족도와 연관되기 때문에, 20대부터 50대에 해당하는 일반적을 화장품을 사용해 온 여성 30명을 대상으로 떠짐의 적합한 정도에 대하여 감성 평가를 실시하여 1부터 10의 수치로 표현하는 방식으로 평가하였다. 10에 가까울수록 떠짐성이 매우 양호하고 만족스러운 것이며, 5는 떠짐성이 보통인 정도를 나타내고, 1에 가까울수록 떠짐성의 만족도가 양호하지 못함을 의미한다.
본 평가를 위해 표 3에 나타낸 바와 같이, 글라이코스아미노글리칸과 히알루론산의 함량 비율을 변화시키며 화장료 조성물을 제조하여 떠짐성을 평가하였다.
그 결과, 하기 표 4에 나타낸 바와 같이, 글라이코스아미노글리칸의 함량이 25 중량%를 초과할 경우, 즉 글라이코스아미노글리칸 함유 원료 (GLYCACYD ECO)의 함량이 50 중량%를 초과할 경우 (실시예 13), 또는 히알루론산의 함량이 5 중량%를 초과할 경우 (실시예 18), 떠짐성에 대한 만족도가 급격이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 즉, 본 발명에 따른 조직 모사 겔화가 이루어질 때, 성분의 함량비가 일정 수준을 이상이 되는 경우, 겔화이 지나치게 강해져 떠짐이 용이하지 않게 되는바, 화장품으로 구현함에 있어서, 이러한 떠짐성에 영향을 미치지 않도록 글라이코스아미노글리칸 및 히알루론산의 함량비를 조절하여야 함을 알 수 있었다.
실험예
4. 세포
조직모사
성분 함량 비율에 따른 세포 성장인자 안정성 비교
본 실험예에서는, 세포 성장인자 안정화 겔을 형성하는 세포 조직모사 성분인 글라이코스아미노글리칸과 히알루로산의 제형 구성 함량 비율에 따른 세포 성장인자의 안정성을 비교하고자 하였다. 이를 위해 실험예 2와 같은 방식으로 각 샘플을 열 처리한 후, 세포 증식률의 변화를 정량적으로 분석하였으며, 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.
그 결과, 글라이코스아미노글리칸 : 히알루론산의 조성비가 10.0 :1 미만일 경우 (실시예 10), 세포 증식 둔화율의 감소가 충분히 일어나지 못하였고, 본 발명의 범위 내에서 112.5:1을 초과하면 (실시예 14 내지 15), 글라이코스아미노글리칸과 히알루론산의 함량 비율이 변화함에도 세포 증식 둔화율의 감소가 유의미하게 일어나지 않았음을 알 수 있었다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
Claims (16)
- 세포 성장인자를 함유하는 화장료 조성물에 있어서,
세포 성장인자 안정화 성분으로 하이드롤라이즈드 글라이코사미노글리칸 (Hydrolyzed glycosaminoglycan); 및 히알루론산 (Hyaluronic acid) 또는 이의 염을 포함하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 세포 성장인자는, 염기성 섬유아세포 성장인자 (bFGF), 상피세포 성장인자 (EGF), 케라티노사이트 성장인자 (KGF), 형질전환 성장인자 알파 (TGFα), 형질전환 성장인자 베타 (TGFβ), 과립구 형성 자극인자 (GCSF), 인슐린 유사 성장인자 (IGF), 혈관내피 성장인자 (VEGF), 종양괴사인자 (TNF), 및 인터류킨으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제2항에 있어서,
상기 세포 성장인자는, 상피세포 성장인자 (EGF)인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제2항에 있어서,
상기 세포 성장인자는 0.1 내지 10ng/ml의 농도로 함유되는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 히알루론산 염은, 히알루론산 나트륨 (Sodium hyaluronate)인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 세포 성장인자 안정화 성분은, 조성물 전체 중량에 대하여, 하이드롤라이즈드 글라이코스아미노글리칸이 3 내지 25 중량%, 및 히알루론산 또는 이의 염이 0.03 내지 5 중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 하이드롤라이즈드 글라이코사미노글리칸 : 히알루론산 또는 이의 염의 조성비가 10 :1 내지 300:1인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은, 수용성 염을 더 함유하며,
상기 수용성 염은 NaCl 및 KCl로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 제11항에 있어서,
상기 수용성 염은, 조성물 전체 중량에 대하여, 0.01 내지 3 중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
- 하이드롤라이즈드 글라이코사미노글리칸 (Hydrolyzed glycosaminoglycan); 및 히알루론산 (Hyaluronic acid) 또는 이의 염을 포함하는, 세포성장 인자 안정화용 조성물.
- 삭제
- 제13항에 있어서,
상기 하이드롤라이즈드 글라이코사미노글리칸 : 히알루론산 또는 이의 염의 조성비가 10 :1 내지 300:1인 것을 특징으로 하는, 세포성장 인자 안정화용 조성물.
- 제13항에 있어서,
상기 히알루론산 염은, 히알루론산 나트륨 (Sodium hyaluronate)인 것을 특징으로 하는, 세포성장 인자 안정화용 조성물.
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Legal Events
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Comment text: Notification of reason for refusal Patent event date: 20230911 Patent event code: PE09021S01D |
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