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KR102311724B1 - 슈도알터로모나스 펩티도라이티카의 배양물 또는 이의 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물 - Google Patents

슈도알터로모나스 펩티도라이티카의 배양물 또는 이의 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물 Download PDF

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KR102311724B1
KR102311724B1 KR1020170118927A KR20170118927A KR102311724B1 KR 102311724 B1 KR102311724 B1 KR 102311724B1 KR 1020170118927 A KR1020170118927 A KR 1020170118927A KR 20170118927 A KR20170118927 A KR 20170118927A KR 102311724 B1 KR102311724 B1 KR 102311724B1
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South Korea
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pseudoalteromonas
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skin whitening
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명길선
고재영
김용진
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(주)아모레퍼시픽
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Abstract

본 명세서에는 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주, 이의 파쇄물, 이의 배양물, 또는 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물이 개시된다. 또한, 본 명세서에는 피부 미백 기능을 가지는 기탁번호가 KCCM12050P인 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) SNC 130 균주가 개시된다.

Description

슈도알터로모나스 펩티도라이티카의 배양물 또는 이의 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물{COMPOSITION FOR WHITENING OF SKIN COMPRISING CULTURE OR ITS EXTRACT OF PSEUDOALTEROMONAS PEPTIDOLYTICA}
본 명세서에는 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주, 이의 파쇄물, 이의 배양물, 또는 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물이 개시된다.
사람의 피부색은 카로틴, 멜라닌의 양, 헤모글로빈 등에 의해 결정되는데, 이중 멜라닌이 가장 중요한 역할을 한다. 멜라닌은 피부색뿐만 아니라 머리카락과 눈동자의 색에 관련된 색소의 일종이며 사람의 피부 보호 작용의 역할을 한다. 하지만 과도한 자외선 노출, 대기오염, 스트레스 등 외부 환경에 의해 과다하게 피부 내에 생성되면 색소 침착 현상이 일어나게 되어 피부가 검게 되거나 기미, 주근깨 등의 원인이 된다. 자외선은 멜라닌 생성 세포인 멜라노사이트의 활성 촉진, 멜라닌 생합성 자극 호르몬 분비 촉진, 멜라닌의 산화 촉진 또는 티로시나아제 활성 촉진 등을 통해 멜라닌 과다 생성을 유도하는 주요 요인으로 작용한다. 이러한 멜라닌 생성 메카니즘의 가장 큰 특징은 티로시나아제라는 효소가 관여한다는 것으로, 상기 티로시나아제 활성을 억제하여 멜라닌 생성을 방지하게 되면 미백 효과를 기대할 수 있다.
한편, 슈도알터로모나스 (Pseudoalteromonas) 속 균주는 해양 미생물 중 하나로서 바이오필름을 형성하는 특성을 가지나 피부 미백 효과에 대해서는 개시된 바가 없고, 이 중 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주의 경우 2000년에 일본 연구진에 의해 신종으로 밝혀지고 난 이후 그 활용 방안에 대해 알려진 바가 없다.
한국 등록특허공보 제10-0812922호
일 측면에서, 본 명세서는 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주의 새로운 용도를 제공하는 것을 목적으로 한다.
다른 측면에서, 본 명세서는 우수한 피부 미백 활성을 갖는 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) SNC 130 균주를 제공하는 것을 목적으로 한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주; 이의 파쇄물; 이의 배양물; 또는 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 기탁번호가 KCCM12050P인 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 SNC 130인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 16S rDNA를 갖는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 배양물은 전분, 효모 추출물, 펩톤 및 해염으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상을 포함하는 배양 배지에서 배양한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 추출물은 에틸아세테이트 분획물일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 유효성분은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 내지 30 중량%로 포함되는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 멜라닌 생성을 억제 또는 티로시나아제 활성을 억제하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 피부 미백 기능을 가지는 기탁번호가 KCCM12050P인 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) SNC 130 균주를 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 해초에서 분리된 것일 수 있다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 친환경 소재의 피부 미백 원료를 제공하는 효과가 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주의 피부 미백 용도를 제공하는 효과가 있다. 상기 균주는 멜라닌 생성 세포에서 멜라닌 생성을 억제하고 멜라닌 색소를 생성하는 효소 활성을 억제하는 효과가 있다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 우수한 피부 미백 활성을 갖는 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) SNC 130 균주를 제공하는 효과가 있다.
도 1은 본 명세서에 따른 기탁번호가 KCCM12050P인 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) SNC 130 균주의 16s rDNA 시퀀스를 나타낸 것이다.
도 2는 본 명세서의 일 실시예에 따른 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주의 피부 세포 안전성을 나타낸 것이다.
도 3은 본 명세서의 일 실시예에 따른 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주의 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 4는 본 명세서의 일 실시예에 따른 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주의 멜라닌 생성 효소 활성 억제 효과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 슈도알터로모나스 (Pseudoalteromonas) 속 균주; 이의 파쇄물; 이의 배양물; 또는 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주; 이의 파쇄물; 이의 배양물; 또는 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 피부 미백 기능을 가지는 기탁번호가 KCCM12050P인 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) SNC 130 균주를 제공한다.
본 명세서에서 "유효성분"은 단독으로 목적으로 하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체 등과 함께 목적으로 하는 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
미생물 자원은 석유, 물 등과 달리 재생산할 수 있다는 점에서 지속 가능한 자원으로 활용할 수 있는 이점이 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 균주는 균주를 배양하여 배양액을 원심분리한 다음, 멸균된 생리식염수로 세척한 후 용매, 예컨대 멸균유에 분산시키고 동결건조하여 동결건조분말 형태로 제조하여 사용될 수 있다.
상기 균주의 파쇄물이란, 균주 자체를 화학적 또는 물리적 힘에 의하여 파쇄하여 얻은 산물을 의미할 수 있다.
상기 균주의 배양물이란, 배양물의 형태를 불문하고 균주를 배양한 배지 내에 포함되어 있는 일부 또는 모든 물질을 포함하는 물질을 의미할 수 있으며, 예컨대 균주 배양의 결과물인 대사물 또는 분비물을 포함하는 물질 또는 그 파쇄물을 의미할 수 있고, 균주 자체도 배양물 내에 포함되어 있을 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 배양물은 전분, 효모 추출물, 펩톤 및 해염으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상을 포함하는 배양 배지에서 배양한 것일 수 있다.
상기 추출물이란, 균주 자체, 균주의 파쇄물, 균주의 배양물 또는 이들의 혼합물을 추출 방법, 추출 용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고 추출하여 얻어진 산물을 의미할 수 있으며, 추출 후 다른 방법으로 가공 또는 처리하여 얻어질 수 있는 물질을 모두 포함하는 광범위한 개념이다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 추출물은 에틸아세테이트 분획물일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 유효성분은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 내지 30 중량%로 포함되는 것일 수 있다. 다른 측면에서, 상기 유효성분은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 중량% 이상, 0.01 중량% 이상, 0.1 중량% 이상, 0.5 중량% 이상, 1 중량% 이상, 1.5 중량% 이상 또는 2 중량% 이상이면서 30 중량% 이하, 25 중량% 이하, 20 중량% 이하, 15 중량% 이하, 10 중량% 이하 또는 5 중량% 이하로 포함되는 것일 수 있다.
본 명세서에 따른 피부 미백용 조성물은 멜라닌 생성을 효과적으로 억제함으로써, 멜라닌 과다 생성으로 인한 증상 또는 질환을 예방, 개선 및/또는 치료하는 효과가 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 멜라닌 과다 생성으로 인한 증상 또는 질환은 기미, 주근깨, 검버섯, 잡티, 표피 멜라닌세포성 병변 (Epidermal melanocytic lesion), 밀크커피 반점 (Cafe's au lait macules), 베커 모반 (Becker's Nevus), 반문상 모반 (Nevus Spilus), 흑자 (Lentigines), 진피 멜라닌세포성 병변 (Dermal melanocytic lesions), 몽고반 (Mongolian spot), 오타 모반 (Nevus of Ota), 후천성 양측성 오타 모반양 반 (Acquired bilateral nevus of Ota-like macules), 이토 모반 (Nevus of Ito), 청색 모반 (Blue nevus), 멜라닌형성세포성 모반 (Melanocytic nevus), 경계 모반 (Junctional nevus), 복합 모반 (Compound nevus), 진피내 모반 (Intradermal nevus), 운륜모반 (Halo nevus), 선천성 멜라닌세포성 모반 (Congenital nevocytic nevus), 스피츠 모반 (Spitz nevus), 이형성 모반 (Dysplastic nevus), 흑색종 (Melanoma), 악성 흑자 흑색종 (Lentigo maligna melanoma), 표재 확장성 흑색종 (Superficial spreading melanoma), 선단 흑자성 흑색종 (Acral lentiginous melanoma), 결절성 흑생종 (Nodular melanoma), 색소성 기저세포암 (pigment basal cell carcinoma), 색소성 피부섬유종 (dermatofibromas), 색소성 피부낭종 (dermoid cyst), 색소성 켈로이드 (keloid) 및 색소성 각질극세포종 (keratoacanthomas)으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상인 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 피부 색소 침착을 예방, 개선 및/또는 치료하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 멜라닌 생성 증가로 피부에 국소적으로 발생하는 기미, 주근깨, 흑색점, 모반, 흑색종, 약물에 의한 색소 침착, 염증에 의한 색소 침착 및 피부염에 의한 색소 침착으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상의 피부 색소 침착을 예방, 개선 및/또는 치료하는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 피부 외용제 조성물일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 피부 외용제 조성물은 본 명세서에 따른 유효성분 이외에 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 비경구 투여제 형태로 제형화할 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 비경구 투여 형태로는 경피 투여형 제형일 수 있으며, 예를 들어 주사제, 연고, 로션, 겔, 크림, 스프레이, 현탁제, 유제, 패취 등의 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 피부 외용제 조성물은 멜라닌 생성과 관련된 질환에 대해 약제학적 용도를 갖는 국소 도포제일 수 있다.
예시적인 일 구현예에 따르면, 상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 화장료 조성물에는 본 명세서에 따른 유효성분 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
상기 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클렌저로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
예시적인 일 구현예에서, 본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
예시적인 일 구현예에서, 본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. 균주의 분리 및 동정
채집된 바다 해초를 60℃에 10분간 열처리하여 그람음성균을 제거한 다음, 생리식염수 (0.85% NaCl)를 이용하여 해초 표면에 존재하는 미생물을 분리하였다. 상기의 생리식염수 용액을 다시 생리식염수에 10배, 100배의 비율로 희석한 후 항생제 (Chloramphenicol 20㎍/ml)가 첨가된 분리배지 (10g/L 전분, 4g/L 효모 추출물, 2g/L 펩톤, 16g/L 한천, 34.75g/L 해염)에 접종하였다. 접종된 배지는 27℃에서 7일에서 30일까지 배양하였고, 미생물 집락 (colony)이 보이는 균주를 최소 2회에서 최대 4회까지 계대 배양하여 단일 균주를 최종 분리하였다.
분리된 균주의 동정은 27F (5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3', 서열번호 2)와 1492R (5'-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3', 서열번호 3) primer를 사용하여 16S rRNA 염기서열분석을 통하여 실시하였다. 분석된 염기서열을 Gene Bank에서 검색한 결과, 분리된 균주는 Pseudoalteromonas peptidolytica strain NBRC 101021과 99.8%의 유사성을 갖는 것을 최종 확인하여 이를 Pseudoalteromonas peptidolytica SNC 130으로 명명하고 상기 균주를 2017년 06월 27일자로 기탁기관인 한국미생물보존센터(KCCM)에 기탁하고 기탁번호 KCCM12050P를 부여받았다.
실시예 2. 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 ( Pseudoalteromonas peptidolytica ) 균주의 배양물 및 추출물 제조
상기 실시예 1에서 동정된 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 SNC 130 균주를 배양 배지 (10g/L 전분, 2g/L 효모 추출물, 4g/L 펩톤, 34.75 g/L 해염)에 접종하고 7일 동안 27℃, 120 rpm 조건에서 배양하여 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주의 배양액을 수득하였다.
또한, 수득한 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주의 배양액에 동량의 에틸아세테이트를 넣어 반응시키고 정치시켜 에틸아세테이트 분획물을 얻었다. 이후, 에틸아세테이트는 감압 농축기 (evaporator)를 이용하여 제거하고 추출물을 수득하였다.
실시예 3. 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 ( Pseudoalteromonas peptidolytica ) 균주의 피부 세포 안전성 확인
슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주가 피부 세포에 대해 안전성을 갖는지 여부를 하기와 같이 실험하였다.
구체적으로, 상기 실시예 2에서 수득한 해초에서 분리한 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주의 추출물을 DMSO (Dimethyl sulfoxide)에 용해시킨 후 피부세포 (HaCaT)에 처리하여 세포의 생활성에 영향을 미치는지 확인하였다. 2 × 105 cells/mL 농도의 피부세포를 96 well cell culture plate에 각 100 μL씩 분주하고 24시간을 배양한 다음, 여기에 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주의 추출물을 10 내지 100 μg/mL 농도로 처리하고 추가로 24시간을 배양하였다. 농도별로 3회 반복하여 실험하였다. 세포의 생활성은 MTT assay를 이용하여 비교하였고, 무처리군의 생활성을 100%로 보았을 때 추출물 처리군의 생활성을 표시하였다.
그 결과, 상기 해초에서 분리한 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주는 피부 세포의 생장에 영향을 미치지 않아 피부 세포에 대해 안전성을 갖는 것을 확인하였다 (도 2 참조).
실시예 4. 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 ( Pseudoalteromonas peptidolytica ) 균주의 피부 미백 효과 확인
슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주의 피부 미백 효과를 하기와 같이 실험하였다.
구체적으로, 상기 실시예 2에서 수득한 해초에서 분리한 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주의 추출물을 멜라닌 생성 세포 (B16 melanoma cell)에 처리하여 미백 효과를 평가하였다. 4 × 104 cells/well의 농도로 멜라닌 생성 세포를 24 well cell culture plate에 분주한 후, 24시간 동안 배양하여 실험에 이용하였다. 멜라닌 생성을 유도하기 위해 α-MSH (α-Melanocyte-stimulating hormone)를 1 μM로 처리하고 동시에 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주의 추출물을 10 내지 50 μg/mL로 농도별로 처리하였다. 농도별로 3회 반복하여 실험하였다. 추가로 72시간 동안 배양하고 배지 내 멜라닌 함량을 비교하기 위해 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 멜라닌 생성을 유도한 군의 흡광도를 100%로 보았을 때 추출물을 처리한 군의 멜라닌 생성 유도 정도를 %로 표시하였다.
또한, 티로시나아제 (tyrosinase)의 활성은 L-tyrosine을 기질로 사용하여 mushroom tyrosinase 효소와 추출물을 일정 시간 반응시킨 후 475 nm에서 흡광도를 측정하여 비교하였다. 실험에 사용할 티로시나아제를 2 units/μL의 농도로 buffer (0.1M potassium phosphate buffer)에 넣어 준비하고 기질 농도는 0.3 mg/mL로 맞추었다. 여기에 10 내지 50 μg/mL의 농도별 추출물과 L-DOPA 100 μL를 넣고 즉시 475 nm에서 흡광도를 측정하고 37℃에서 10분간 반응시킨 후 다시 흡광도를 측정하였다. 무처리군의 흡광도 차이를 100%로 표시하였을 때, 추출물 처리군의 흡광도 차이를 %로 표시하였다.
그 결과, 추출물을 멜라닌 생성 세포에 처리 시 농도 의존적으로 멜라닌의 생성을 억제하였으며 (도 3 참조), 이는 멜라닌 생성 효소인 티로시나아제 (tyrosinase)의 활성을 억제하는 데서 기인한 것으로 확인되었다 (도 4 참조). 이에 따라, 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 균주는 피부 미백 효과를 가지는 것을 알 수 있었다.
본 명세서의 일 측면에 따른 조성물의 제형예를 아래에서 설명하나, 다른 여러 가지 제형으로도 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제형예 1. 유연화장수
상기 실시예 2의 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 배양액 0.01 중량%, 글리세린 3 중량%, 부틸렌 글리콜 2 중량%, 프로필렌 글리콜 2 중량%, 카복시비닐폴리머 0.1 중량%, 에탄올 10 중량%, 트리에탄올아민 0.1 중량% 및 잔량의 방부제, 미량 색소, 미량 향료 및 미량 정제수를 혼합하여 통상의 유연화장수 제조방법에 따라 제조하였다.
제형예 2. 영양화장수
상기 실시예 2의 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 배양액 0.01 중량%, 밀납 4 중량%, 폴리소르베이트 60 1.5 중량%, 소르비탄세스퀴올레이트 0.5 중량%, 유동파라핀 5 중량%, 스쿠알란 5 중량%, 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5 중량%, 글리세린 3 중량%, 부틸렌 글리콜 3 중량%, 프로필렌 글리콜 3 중량%, 카복시비닐폴리머 0.1 중량%, 트리에탄올아민 0.2 중량%, 잔량의 방부제, 미량 색소, 미량 향료 및 미량 정제수를 혼합하여 통상의 영양화장수 제조방법에 따라 제조하였다.
제형예 3. 영양크림
상기 실시예 2의 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 배양액 0.01 중량%, 밀납 10 중량%, 폴리소르베이트 60 1.5 중량%, 소르비탄세스퀴올레이트 0.5 중량%, 유동파라핀 10 중량%, 스쿠알란 5 중량%, 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5 중량%, 글리세린 5 중량%, 부틸렌 글리콜 3 중량%, 프로필렌 글리콜 3 중량%, 트리에탄올아민 0.2 중량% 및 잔량의 방부제, 미량 색소, 미량 향료 및 미량 정제수를 혼합하여 통상의 영양크림 제조방법에 따라 제조하였다.
제형예 4. 팩
상기 실시예 2의 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 배양액 0.01 중량%, 폴리비닐알콜 13 중량%, 소듐카복시메틸셀룰로스 0.2 중량%, 알란토인 0.1 중량%, 에탄올 5 중량%, 노닐페닐에테르 0.3 중량% 및 잔량의 방부제, 미량 색소, 미량 향료 및 미량 정제수를 혼합하여 통상의 팩 제조방법에 따라 제조하였다.
이상, 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시 태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.
한국미생물보존센터 KCCM12050P 20170627
<110> AMOREPACIFIC CORPORATION <120> COMPOSITION FOR WHITENING OF SKIN COMPRISING CULTURE OR ITS EXTRACT OF PSEUDOALTEROMONAS PEPTIDOLYTICA <130> 17P341/IND <160> 3 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1374 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Pseudoalteromonas peptidolytica SNC 130 <400> 1 catgcagtcg agcggtaaca tttctagctt gctagaagat gacgagcggc ggacgggtga 60 gtaatgcttg ggaacatgcc ttgaggtggg ggacaaccat tggaaacgat ggctaatacc 120 gcataatgtc tacggaccaa agggggcttc ggctctcgcc tttagattgg cccaagtggg 180 attagctagt tggtgaggta agggctcacc aaggcgacga tccctagctg gtttgagagg 240 atgatcagcc acactggaac tgagacacgg tccagactcc tacgggaggc agcagtgggg 300 aatattgcac aatgggcgca agcctgatgc agccatgccg cgtgtgtgaa gaaggcctta 360 gggttgtaaa gcactttcag tcaggaggaa aggttagtag ttaatacctg ctagctgtga 420 cgttactgac agaagaagca ccggctaact ccgtgccagc agccgcggta atacggaggg 480 tgcgagcgtt aatcggaatt actgggcgta aagcgtacgc aggcggtttg ttaagcgaga 540 tgtgaaagcc ccgggcttaa cctgggaact gcatttcgaa ctggcaaact agagtgtgat 600 agagggtggt agaatttcag gtgtagcggt gaaatgcgta gagatctgaa ggaataccga 660 tggcgaaggc agccacctgg gtcaacactg acgctcatgt acgaaagcgt ggggagcaaa 720 caggattaga taccctggta gtccacgccg taaacgatgt ctactaggag ctggggtctt 780 cggacaactt ttccaaagct aacgcattaa gtagaccgcc tggggagtac ggccgcaagg 840 ttaaaactca aatgaattga cgggggcccg cacaagcggt ggagcatgtg gtttaattcg 900 atgcaacgcg aagaacctta cctacacttg acatacagag aacttaccag agatggtttg 960 gtgccttcgg gaactctgat acaggtgctg catggctgtc gtcagctcgt gttgtgagat 1020 gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cctatcctta gttgccagcg attcggtcgg 1080 gaactctaag gagactgccg gtgataaacc ggaggaaggt ggggacgacg tcaagtcatc 1140 atggccctta cgtgtagggc tacacacgtg ctacaatggc aggtacagag agcagcgagc 1200 tagcgatagt gagcgaatcc cttaaagcct gtcgtagtcc ggattggagt ctgcaactcg 1260 actccatgaa gtcggaatcg ctagtaatcg cgaatcagaa tgtcgcggtg aatacgttcc 1320 cgggccttgt acacaccgcc cgtcacacca tgggagtggg ttgctccaga agtg 1374 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 27F primer <400> 2 agagtttgat cmtggctcag 20 <210> 3 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 1492R primer <400> 3 tacggytacc ttgttacgac tt 22

Claims (10)

  1. 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) 균주; 이의 파쇄물; 이의 배양물; 또는 상기 균주, 파쇄물 또는 배양물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 균주는 기탁번호가 KCCM12050P인 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 SNC 130인, 피부 미백용 조성물.
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 균주는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 16S rDNA를 갖는 것인, 피부 미백용 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 배양물은 전분, 효모 추출물, 펩톤 및 해염으로 이루어진 군에서 선택되는 1 이상을 포함하는 배양 배지에서 배양한 것인, 피부 미백용 조성물.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 추출물은 에틸아세테이트 분획물인, 피부 미백용 조성물.
  6. 제 1항에 있어서,
    상기 유효성분은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 내지 30 중량%로 포함되는, 피부 미백용 조성물.
  7. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 멜라닌 생성을 억제 또는 티로시나아제 활성을 억제하는 것인, 피부 미백용 조성물.
  8. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 화장료 조성물인, 피부 미백용 조성물.
  9. 기탁번호가 KCCM12050P인 슈도알터로모나스 펩티도라이티카 (Pseudoalteromonas peptidolytica) SNC 130 균주.
  10. 제 9항에 있어서,
    상기 균주는 피부 미백 기능을 가지는 것인, 균주
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