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KR102238965B1 - 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물과 이를 이용한 화장료 - Google Patents

피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물과 이를 이용한 화장료 Download PDF

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KR102238965B1
KR102238965B1 KR1020200091918A KR20200091918A KR102238965B1 KR 102238965 B1 KR102238965 B1 KR 102238965B1 KR 1020200091918 A KR1020200091918 A KR 1020200091918A KR 20200091918 A KR20200091918 A KR 20200091918A KR 102238965 B1 KR102238965 B1 KR 102238965B1
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홍은미
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(주)제니트리
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Abstract

본 발명은 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부과민 반응의 예방 및 개선용 조성물로, 피부병변 치료 및/또는 미용 목적으로 사용되는 레이저에 의하여 발생할 수 있는 붉음증, 피부 착색, 피부 통증, 소양증 및 비후성 반흔 등의 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상을 예방 및/또는 개선하기 위해 피부 세포에서 HSP 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제하는 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물을 제공할 수 있다.

Description

피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물과 이를 이용한 화장료{composition for preventing and alleviating laser-induced skin damage and cosmetic comprising the same}
본 발명은 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 관한 것으로서, 피부 미용 및/또는 치료에 사용되는 레이저에 따라 피부에서 발생할 수 있는 붉음증 등의 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상, 예컨대 피부에 레이저 시술 후 발생할 수 있는 부작용인 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상을 예방 및 치료하는 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 관한 것이다.
급격히 발달한 IT 산업 및 스포츠 문화, 새로운 형태의 집단 주거 생활양식과 생활 도구의 발달, 건강 및 미용과 관련된 삶의 질을 우선시하는 사회 분위기는 다양한 원인과 형태로 피부 화상을 크게 증가시키고 있다. 예를 들어, 재해, 화재, 화학물 접촉 등의 화상으로 인한 경중증의 피부 손상 뿐만 아니라, 피부병변 치료 및 미용 목적으로 시술되는 레이저 및 고주파 등의 의료기기로 인한 경중증의 피부손상 등이 있다.
피부가 열에 노출되는 순간 단백질이 변성되고 응고하여 세포가 손상되고, 조직의 괴사가 유발된다. 44 이하의 낮은 온도라도 장시간 접촉하면 조직이 파괴되며, 44 ~ 55에서는 온도가 1도 상승할 때마다 세포의 파괴 속도가 배가되고, 70 이상에서는 조직이 즉시 파괴된다.
이처럼 피부에 화상이 발생하게 되면 신체에서 자연적으로 염증 반응이 유발되는데, 염증 반응 자체의 임상적 증상은 24 ~ 48시간 이내에 소실되지만 대사 항진 상태와 면역 반응은 피부 재생이 이루어질 때까지 지속되고, 다양한 매개체에 의한 지속적인 면역 반응이 발생하면서 다양한 부작용에 장기간 시달리게 된다. 즉, 상피화가 완료된 화상 부위라 할지라도 치료 후 남아있는 흉터는 조직학적으로 지속적인 염증 반응(prolonged inflammation), 섬유아조직의 과도한 성장(over proliferation of fibroblasts)과 콜라겐 섬유의 과생성(over production of collagen)이 발생한다. 예를 들어, 신생혈관 과생성 및 염증세포 과발현으로 인한 붉음증, 피부착색, 소양증(가려움증), 피부당김과 통증이 발생하고, 섬유아세포와 콜라겐 섬유의 과생성으로 인한 비후성 반흔(흉터), 피부 변형 및 구축 등이 발생한다.
이와 같은, 화상 치료를 위한 치료제로 종래 기술 중 한국공개특허 제10-2009-0030995호에는 시알릴올리고당을 유효성분으로 포함하는 비후성 반흔 및 켈로이드 예방 또는 치료용 조성물을 개시하고 있다.
또한, 종래 기술 중 한국등록특허 제10-1099550호에는 봉독을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 화상 치료용 조성물을 개시하고 있다.
의료계에 있어서 레이저를 치료의 목적으로 최초로 이용한 곳은 안과로서, 당뇨병 등으로 인한 안저망막출혈의 지혈을 위해서였다. 이후 레이저에 대한 발전과 개발이 거듭되어 피부과, 외과, 이비인후과 등 거의 모든 의료계에서 이용되어 지고 있다.
이 중, 피부 병변 치료 및 미용 목적으로 행해지는 레이저 시술은 최근 외모지상주의 및 고령화에 따라 건강하고 아름답게 살고 싶다는 인간의 기본욕구와 병행해 시술빈도가 급증하고 시술범위 또한 크게 확장되고 있다.
더욱이, 최근에는 미국과 유럽을 중심으로, 의료미용기구를 이용해 집에서 직접 피부를 관리하는 가정용피부관리시장(at-home skin care devices)이 크게 확대되어 레이저를 이용한 피부 관리는 지속적으로 성장하고 있다.
국제적 시장조사기관 "클라인&컴퍼니"사가 발표한 2011년도 보고서에 의하면, 가정용 피부관리 시장은 2011년기준 10억 달러에 근접하는 시장 볼륨을 형성한 데 이어, 차후 5년 동안에도 매우 괄목할만한 성장세를 이어갈 것으로 전망되었는데, 이러한 피부미용관리기구 중, 피부반점과 주름 등을 제거하거나 감소시키는 데 사용되는 레이저 빛을 이용한 기기가 한해 50%대 성장이 가능할 것으로 보고하고 있다.
레이저는 색깔에 따라 흡수하는 빛의 성질(파장)이 달라진다. 이 원리를 이용해, 정상 피부와 색깔이 달라 보이는 질환들은 이들 병변의 색깔에 잘 흡수되는 성질의 레이저 빛을 이용하면 선택적으로 원하는 조직을 파괴할 수 있다.
구체적으로, 특정 파장의 레이저 빛을 이용해 혈관 병변을 파괴시킴으로서 화염성 모반, 모세혈관 확장증, 혈관종, 안면홍조, 붉은 여드름 자국 등을 치료할 수 있으며, 혈색소와 멜라닌세포와 같은 피부 색소성 병변을 파괴시킴으로서 주근깨, 잡티, 검버섯, 문신 등의 색소성 병변을 치료할 수 있다.
이 외에도 레이저의 매질과 파장을 달리하면, 한관종, 쥐젖, 비립종, 켈로이드, 튼살, 흉터, 아포크린땀샘파괴를 통한 액취증 치료, 피부 박피술, 진피자극을 통한 주름 억제 및 피부 탄력 개선, 제모 등 다양한 피부 병변 치료 및 피부 미용 목적을 달성할 수 있다.
이렇듯 레이저는 좋은 치료 효과를 나타내기 때문에 다양한 피부 병변 치료 및 피부 미용 전 분야에서 활용되고 있다.
하지만 좋은 효과 못지않게, 피부에 레이저를 조사하면서 수반되는 다양한 피부 부작용이 발생한다.
기본적으로 빛이 피부에 흡수되면 열이 발생하는데, 살아 있는 생명체를 구성하는 세포나 조직은 열에 의하여 온도가 올라가면 손상을 받게 되고 조직이 파괴된다. 즉, 치료하고자 하는 조직 및 주변의 정상 피부 조직에 영향을 미치면서 다양한 부작용이 발생하게 된다.
또한, 레이저 시술을 받은 후에는 치료를 받은 조직이 재생 및 회복을 할 수 있도록 필요한 영양분을 공급해야 하는데, 이 과정에서 새로운 혈관이 많이 생기게 되어 시술 부위에 홍반을 동반한 다양한 피부 과민 반응이 발생하게 된다. 경우에 따라서는 딱지가 발생하기도 하며 적절한 관리가 병행되지 않을 경우, 장기간 지속되면서 색소침착, 가려움증, 피부 통증, 비후성 반흔이 발생하거나, 심할 경우 켈로이드성피부로 악화되게 된다.
따라서, 레이저 시술 후 회복기를 줄여주거나, 시술 후 발생할 수 있는 다양한 피부 과민 반응을 예방 및 개선할 수 있는 제품 및/또는 방법 등이 필요하다.
본 발명은 상술한 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 본 발명이 해결하려는 첫 번째 과제는 피부병변 치료 및/또는 미용 목적으로 사용되는 레이저에 의하여 발생할 수 있는 붉음증, 피부 착색, 피부 통증, 소양증(가려움증) 및 비후성 반흔(흉터) 등의 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상을 예방 및/또는 개선하기 위해 피부 세포에서 HSP 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제 하는 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명이 해결하려는 두 번째 과제는 천연물로부터 추출한 추출물을 사용함으로서 효능이나 안전성이 우수한 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형을 제공하는 것이다.
상술한 첫 번째 과제를 해결하기 위한 본 발명은 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 관한 것으로서, 양파피 발효 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 상기 레이저의 시술에 의해 피부에서 발생하는 붉음증, 피부 착색, 피부 통증, 소양증 및 비후성 반흔 중에서 선택된 1종 이상을 예방 및 개선할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물의 상기 레이저는 피부병변 치료 또는 미용 목적으로 사용되며, CO2 레이저, Nd-YAG 레이저, Er-YAG 레이저, Alexandrite 레이저, He-Ne 레이저, IPL(Intense Pulsed Light), 비침습적 레이저 또는 고주파 레이저일 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 화장료, 의약품 및 의약외품 중 어느 하나의 용도일 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물의 양파피 발효 추출물의 농도는 50 ~ 10,000ppm일 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 피부 세포에서 HSP(Heat Shock Protein, 열충격단백질) 70의 발현을 억제할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 피부 미세혈관세포의 증식 또는 이동을 억제할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 피부 세포의 혈관확장 및 혈관형성을 억제할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물의 양파피 발효 추출물은 (1) 건조 분쇄된 양파피를 포함하는 배지를 제조하는 단계, (2) 상기 배지에 유산균을 접종하여 상기 양파피를 발효하는 단계, (3) 발효된 양파피를 포함하는 배지를 C1 ~ C4 알코올 용매로 추출하여 알코올 용매 추출물을 수득하는 단계 및 (4) 수득한 알코올 용매 추출물을 여과한 후, 건조하여 양파피 발효 추출물을 수득하는 단계를 포함하여 제조될 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함된 양파피 발효 추출물을 제조할 때, 상기 (1) 단계의 배지는 0.1 ~ 10 중량%의 양파피를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함된 양파피 발효 추출물을 제조할 때, 상기 (1) 단계의 배지는 탄소원(carbon source), 질소원(nitrogen source) 및 미량원소 중에서 선택된 1종 이상을 포함하고, 상기 탄소원은 글루코오스(glucose), 수크로오스(sucrose), 말토오스(maltose), 프럭토오스(fructose), 락토오스(lactose), 자일로오스(xylose), 갈락토오스(galactose) 및 아라비노오스(arabinose), 이스트추출물(yeast extract) 중에서 선택된 1종 이상을 포함하고, 상기 질소원은 이스트추출물(yeast extract), 펩톤(peptone), 비프추출물(beef extract), 대두단백질분해물 중에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다.
상기 미량원소는 아세트산나트륨(sodium acetate), 인산칼륨(potassium phosphate), 시트르산암모늄(Diammonium citrate), 황산마그네슘(magnesium sulfate, MgSO4), 황산망간(manganese sulfate, MnSO4), 황산아연(zinc sulfate, ZnSO4), 황산구리(copper sulfate, CuSO4) 중에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함된양파피 발효 추출물을 제조할 때, 상기 (1) 단계의 배지는 양파피 0.01 ~ 10 중량%, 글루코오스(glucose) 0.1 ~ 5 중량%, 이스트추출물(yeast extract) 0.1 ~ 2 중량%, 인산칼륨(potassium phosphate) 0.01 ~ 0.2 중량%, 아세트산나트륨(sodium acetate) 0.01 ~ 0.5 중량%, 시트르산암모늄(Diammonium citrate) 0.01 ~ 0.5 중량%, 황산마그네슘(magnesium sulfate, MgSO4) 0.001 ~ 0.01 중량%, 황산망간(manganese sulfate, MnSO4) 0.001 ~ 0.05 중량%, 황산아연(zinc sulfate, ZnSO4) 0.0001~0.01 중량%, 황산구리(copper sulfate, CuSO4) 0.0001 ~ 0.01 중량% 및 잔량의 정제수를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함된 양파피 발효 추출물을 제조할 때, 상기 (1) 단계는 상기 배지를 90 ~ 121에서 15 ~ 30분간 살균처리하는 단계를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함된 양파피 발효 추출물을 제조할 때, 상기 유산균은 락토바실러스 람노서스(lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 카제이(lactobacillus casei), 락토바실러스 플란타럼(lactobacillus plantarum, 락토바실러스 브레비스(lactobacillus brevis) 및 락토바실러스 애시도필러스(lactobacillus acidophilus) 중 적어도 하나 이상의 균주일 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함된 양파피 발효 추출물을 제조할 때, 상기 (2) 단계에서 유산균의 접종량은 접종 초기 균수가 105 ~ 106 cfu/㎖일 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함된 양파피 발효 추출물을 제조할 때, 상기 (3) 단계의 알코올 용매는 20 ~ 90 중량% 에탄올 수용액이고, 상기 (3) 단계의 추출은 상기 에탄올 수용액을 사용하여 12 ~ 72시간 동안 추출할 수 있다.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함된 양파피 발효 추출물을 제조할 때, 상기 (4) 단계에서 여과된 알코올 용매 추출물을 40 ~ 80 온도에서 진공농축한 후, 진공건조(vaccum dry), 분무건조(spray dry) 또는 동결건조(freeze dry)로 건조할 수 있다.
다음으로, 상술한 두 번째 과제를 해결하기 위한 본 발명은 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형에 관한 것으로서, 양파피 발효 추출물을 포함한다.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤 또는 미스트일 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 글리세린(glycerin), 부틸렌글리콜(butylene glycol), 디프로필렌글리콜(dipropylene glycol), 카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer), 폴리솔베이트(polysorbate) 80, 경화 피마자오일(hydrogenated caster oil), 글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate), 세테아릴알코올(cetearyl alcohol), 세틸에칠헥사노에이트(cetyl ethylhexanoate), 감초추출물(glycyrrhiza inflate extract) 및 레시틴(lecithin) 중에서 선택된 1종 이상을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여, 글리세린(glycerin) 500 ~ 700 중량부, 부틸렌글리콜(butylene glycol) 900 ~ 1100 중량부, 디프로필렌글리콜(dipropylene glycol) 1100 ~ 1300 중량부, 카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer) 50 ~ 70 중량부, 폴리솔베이트 80(polysorbate 80) 90 ~ 110 중량부, 경화 피마자오일(hydrogenated caster oil) 700 ~ 900 중량부, 글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate) 90 ~ 110 중량부, 세테아릴알코올(cetearyl alcohol) 180 ~ 220 중량부, 세틸에칠헥사노에이트(cetyl ethylhexanoate) 500 ~ 700 중량부, 감초추출물(glycyrrhiza inflate extract) 10 ~ 30 중량부 및 레시틴(lecithin) 10 ~ 30 중량부를 포함할 수 있다.
본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부과민 반응의 예방 및 개선용 조성물 및 화장료 제형은 피부병변 치료 및/또는 미용 목적으로 사용되는 레이저에 의하여 발생할 수 있는 붉음증, 피부 착색, 피부 통증, 소양증 및 비후성 반흔 등의 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상을 예방 및/또는 개선하기 위해 피부 세포에서 HSP 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제할 수 있다.
도 1은 통상적인 양파의 퀘르세틴 함유량을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 세포독성을 측정한 결과이다.
도 3은 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 HSP 70의 발현 억제활성을 측정한 결과이다.
도 4는 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 세포증식 억제활성을 측정한 그래프이다.
도 5는 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 세포이동 억제활성을 현미경을 통해 관찰한 결과이다.
도 6은 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 혈관확장 및 혈관형성 억제활성을 현미경을 통해 관찰한 결과이다.
도 7 내지 도 10은 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형을 피부에 도포한 후, 레이저에 의한 피부 붉음증 임상실험을 진행한 결과이다.
이하, 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
상술한 바와 같이 레이저를 이용한 피부병변 치료 및 미용은 기본적으로 정상적인 피부색 이외의 피부조직이나 피부 색소를 파괴시키는 것이 주목적인데, 이 과정에서 피부 조직에 가해지는 열에너지로 인해 피부 조직이 파괴되고, 파괴된 세포들로 인해 비세균성 염증반응을 유발하게 되어, 홍조, 부종, 통증, 출혈 등과 같은 부작용이 발생할 수 있다. 이 뿐만 아니라, 레이저에 의한 부작용으로 피부의 붉음증, 피부 착색, 피부 통증, 소양증(가려움증) 및 비후성 반흔(흉터) 등과 같은 중.경증의 피부 손상이 발생한다. 따라서, 레이저 시술 후 회복기를 줄여줄 수 있는 제품 및/또는 방법이 필요하며, 상기와 같은 부작용을 최소화 할 수 있는 제품 및/또는 방법 등이 필요하다.
이에 본 발명에서는, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물을 통해 상술한 문제의 해결을 모색하였다. 이를 통해 피부 세포에서 HSP 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관 세포 이동 억제, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제 하는 효과가 우수한 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물과 이의 제형을 제공한다.
또한, 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물과 이의 화장료 제형은 천연물로부터 추출한 추출물, 즉 양파피를 발효하여 추출물을 포함함으로서 효능이나 안전성이 우수하다.
본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 양파피 발효 추출물을 포함한다. 이를 통해, 본 발명의 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 레이저의 노출에 따라 피부에서 발생하는 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상, 예를 들어, 붉음증, 피부 착색, 피부 통증, 소양증(가려움증) 및 비후성 반흔(흉터) 중에서 선택된 1종 이상을 예방 및 개선할 수 있다. 이와 같은 상기 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상은 피부의 상피화가 완료된 화상 부위라 할지라도 치료 후 남아있거나 발생할 수 있는 손상일 수 있다. 예를 들어, 비후성 반흔(흉터)은 조직학적으로 지속적인 염증 반응(prolonged inflammation), 섬유아조직의 과도한 성장(over proliferation of fibroblasts)과 콜라겐 섬유의 과생성(over production of collagen)에 의해 발생할 수 있고, 붉음증, 피부착색, 소양증(가려움증), 피부당김 및 통증은 신생혈관 과생성 및 염증세포 과발현으로 인해 발생할 수 있다.
상기 레이저는 피부병변 치료 또는 미용 목적으로 사용되며, CO2 레이저, Nd-YAG 레이저, Er-YAG 레이저, Alexandrite 레이저, He-Ne 레이저, IPL(Intense Pulsed Light), 비침습적 레이저 또는 고주파 레이저일 수 있다. CO2 레이저는 10,600nm의 파장을 가지는 원적외선에 속하며, 주로 조직의 수분에 흡수되어 작용하는 레이저이다. Er-YAG 레이저는 2,940nm의 파장을 가지며, CO2 레이저에 비하여 수분에 약 10배정도 흡수가 잘 되어 주위조직으로 열 전달이 적고, 지혈이 잘 안 되는 레이저이다. 비침습적 레이저는 표피에 손상을 주지 않고 단지 진피 내 아교질 섬유에만 열에너지를 전달하여 피부 박피 효과를 나타내는 레이저이다. 고주파 레이저는 피부 안쪽, 즉 피부지지 인대나 지방조직 그리고 깊은 피부층을 타겟으로 열을 전달할 수 있는 레이저이다. 다만, 레이저는 이에 한정되는 것은 아니며 피부과 병원 또는 가정용으로 피부병변 치료 및/또는 미용 목적으로 사용되는 의료기기에서 조사되는 레이저를 모두 포함할 수 있다.
본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 화장료, 의약품 및 의약외품 중 어느 하나의 용도일 수 있다. 달리 말하면, 본 발명의 조성물을 포함하여 화장료의 용도로 사용하거나, 의약품의 용도 또는 의약외품의 용도로 사용할 수 있다.
앞서 언급했듯이, 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물은 양파피 발효 추출물을 포함함으로서, 피부 세포에서 HSP(Heat Shock Protein) 70의 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제 및/또는 미세혈관세포 이동을 억제할 수 있을 뿐만 아니라 피부 미세혈관세포의 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제하는 효과가 우수하며, 이는 하기와 같다.
우선, 도 3은 화장료, 의약품 또는 의약외품에 포함될 수 있는 양파피 발효 추출물 농도보다 10배 정도 희석된 농도로 실험을 수행한 것으로서, 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 피부 세포의 HSP 70 발현 억제활성을 측정한 도 3을 참조하면, 본 발명의 양파피 발효 추출물이 피부 세포에서 HSP 70 발현을 억제하는 효과를 보이는 것을 확인할 수 있다.
HSP는 세포나 조직 또는 개체가 생리적 온도보다 높은 온도에 노출될 때 합성되는 단백질로서 HSP의 과발현에 의해 TGF-b1이 활성화되면서 혈관 확장과 신생 혈관 생성을 유도, 염증반응 유발, 섬유아세포 합성 촉진, 콜라겐 섬유 합성 촉진 등이 연속적으로 활성화된다. 달리 말하면, 열충격반응(heat shock response)은 염증반응을 동반한 비후성반흔(흉터)에서 TGF-b1의 활성을 증가시킴으로서, 다양한 부작용을 연속적으로 유발한다. 도 3을 참조하면 본 발명의 양파피 발효 추출물이 피부 세포에서 HSP 70 발현을 억제하는 효과를 보이는 것을 확인할 수 있다.
또한, 도 4 내지 도 6은 화장료, 의약품 또는 의약외품에 포함될 수 있는 양파피 발효 추출물 농도보다 10배 정도 희석된 농도로 실험을 수행한 것으로서, 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 피부의 세포증식 억제활성을 측정한 도 4를 참조하면, 본 발명의 양파피 발효 추출물이 세포증식 억제 효과를 보이는 것을 확인할 수 있고, 본 발명의 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 피부의 세포이동 억제활성을 현미경을 통해 관찰한 도 5를 참조하면, 본 발명의 양파피 발효 추출물이 세포이동 억제 효과를 보이는 것을 확인할 수 있다. 나아가, 본 발명의 양파피 발효 추출물이 포함된 배지에 피부 세포의 혈관확장 및 혈관형성 억제활성을 현미경을 통해 관찰한 도 6을 참조하면, 본 발명의 양파피 발효 추출물이 혈관확장 및 혈관형성 억제 효과를 보이는 것을 확인할 수 있다.
특히, 본 발명의 양파피 발효 추출물의 농도가 50 ~10,000ppm, 바람직하게는 300 ~ 5,000ppm 인 경우에 우수한 HSP 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및 혈관형성 억제 효과를 보였다.
따라서, 본 발명의 양파피 발효 추출물이 50 ~ 10,000ppm 농도일 때 HSP 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및 혈관형성 억제 효과를 극대화하는데 매우 유리할 수 있다.
만일, 본 발명의 양파피 발효 추출물의 농도가 50ppm 미만일 경우 HSP 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및 혈관형성 억제 효과가 미흡하며, 10,000ppm를 초과할 경우 세포 독성이 발생할 가능성이 있다.
상기와 같은 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 조성물에 포함되는 양파피 발효 추출물은 다음과 같은 방법을 통해 제조된다.
양파피 발효 추출물 제조단계는 (1) 건조 분쇄한 양파피를 포함하는 배지를 제조하는 단계, (2) 상기 배지에 유산균을 접종하여 상기 양파피를 발효하는 단계, (3) 발효된 양파피를 포함하는 배지를 C1 ~ C4 알코올 용매로 추출하여 알코올 용매 추출물을 수득하는 단계 및 (4) 수득한 알코올 용매 추출물을 여과한 후, 건조하여 양파피 발효 추출물을 수득하는 단계를 포함한다. 이를 통해, 제조된 양파피 발효 추출물은 피부의 세포에서 HSP(Heat Shock Protein) 70의 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 형관확장 및/또는 혈관형성을 억제하는데 우수한 효과를 보인다.
먼저, (1) 단계로서 양파피를 포함하는 배지를 제조한다.
양파에는 퀘르세틴 4-글루코시드(quercetin 4-glucoside), 퀘르세틴 4,7-디글리코시드(quercetin 4,7-diglycoside), 퀘르세틴 3,7-디글리코시드(quercetin 3,7-diglycoside), 퀘르세틴 아글리콘(quercetin aglycone), 이소람네틴 모노글리코시드(isorhamnetin monoglycoside), 캠퍼롤 모노글리코시드(kaempferol monoglycoside) 등의 플라보노이드 류가 함유되어 있고, 이 중 80%가 퀘르세틴 어글리코시드(quercetin aglycoside), 모노글리코시드(monoglycoside), 퀘르세틴 글리콘(quercetin glycone)으로 구성되어 있음이 보고되었다.
퀘르세틴(quercetin)은 플라보노이드의 일종으로 이러한 플라보노이드는 피부의 신생혈관 억제 효과뿐만 아니라 혈관이나 모세혈관을 보호하는 작용이 있으며, 과산화 지질을 억제하고, 알레르기나 피부질환을 억제한다는 보고가 있다. 또한, 상피화가 완료된 시점에서 HSP의 발현을 억제한다는 보고가 있다.
본 발명의 (1) 단계에서 사용되는 양파는 양파 중에서 양파피를 사용한다. 본 발명에서 사용하는 용어인 양파피는 양파의 붉은색 겉껍질을 말한다. 달리 말하면, (1) 단계에서 분쇄된 양파피를 포함하는 배지를 제조할 때, 배지에 포함된 양파피는 양파의 가장 바깥쪽 껍질만 사용될 수 있다.
앞서 언급한 바와 같이 양파에는 퀘르세틴이라는 물질이 포함되어 있는데, 양파의 퀘르세틴 함유량은 도 1과 같다. 도 1은 양파의 퀘르세틴 함유량을 나타낸 그래프이다. 도 1을 참조하면, 양파의 안쪽 껍질보다 바깥쪽 껍질, 즉 겉껍질로 갈수록 많은 양의 퀘르세틴을 함유하고 있다. 구체적으로, 양파 겉껍질의 퀘르세틴 함유량은 322.0mg/100g, 겉껍질의 내부의 1겹에는 27.2mg/100g, 2겹에는 14.0mg/100g, 3겹에는 11.5mg/100g, 가장 안쪽은 1.1mg/100g가 함유되어 있다. 결과적으로, 양파의 안쪽 껍질을 사용하지 않고, 양파의 겉껍질인 양파피를 이용한 본 발명의 양파피 발효 추출물은 높은 농도의 퀘르세틴을 함유한다. 달리 말하면, 본 발명은 양파피를 사용함으로서 피부 세포에서 HSP(Heat Shock Protein) 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제 하는 효과가 우수하지만, 양파피가 아닌 양파 안쪽 껍질을 사용하게 된다면 본 발명의 목적인 피부 세포에서 HSP(Heat Shock Protein) 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제 하는 효과의 우수성을 달성하기 어려울 수 있다.
본 발명에서 사용되는 양파피는 세척기에서 8 ~ 12회 세척과정을 거친 후 60 ~ 100에서 8 ~ 12 시간 건조 및 로스팅 과정을 거쳐 분쇄하여 사용될 수 있다.
상기 (1)단계의 배지는 양파피를 0.1 ~ 10 중량%, 바람직하게는 2 ~ 8 중량%를 포함할 수 있다.
상기 배지는 탄소원(carbon source), 질소원(nitrogen source) 및 미량원소 중에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다.
탄소원은 글루코오스(glucose), 수크로오스(sucrose), 말토오스(maltose), 프럭토오스(fructose), 락토오스(lactose), 자일로오스(xylose), 갈락토오스(galactose) 및 아라비노오스(arabinose) 중에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있고, 바람직하게는 글루코오스(glucose)을 포함할 수 있다.
질소원은 이스트추출물(yeast extract), 펩톤(peptone), 비프추출물(beef extract), 대두단백질분해물 중에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있고, 바람직하게는 이스트추출물(yeast extract)을 포함할 수 있다.
미량원소는 아세트산나트륨(sodium acetate), 인산칼륨(potassium phosphate), 시트르산암모늄(Diammonium citrate), 황산마그네슘(magnesium sulfate, MgSO4), 황산망간(manganese sulfate, MnSO4), 황산아연(zinc sulfate, ZnSO4), 황산구리(copper sulfate, CuSO4) 중에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다.
상기 (1)단계의 배지는 양파피, 이스트추출물(yeast extract), 아세트산나트륨(sodium acetate), 인산칼륨(potassium phosphate), 시트르산암모늄(Diammonium citrate), 황산마그네슘(magnesium sulfate, MgSO4), 황산망간(manganese sulfate, MnSO4), 황산아연(zinc sulfate, ZnSO4), 황산구리(copper sulfate, CuSO4) 및 잔량의 정제수를 포함할 수 있다.
앞서 언급했듯이, (1)단계의 배지는 양파피를 0.1 ~ 10 중량%, 바람직하게는 2 ~ 8 중량%를 포함할 수 있다.
다음으로, (1)단계의 배지는 글루코오스(glucose) 0.1 ~ 5중량%, 바람직하게는 0.5 ~ 2 중량%를 포함할 수 있으며, 이스트추출물을 0.1 ~ 2 중량%, 바람직하게는 0.3 ~ 2 중량%를 포함할 수 있고, 아세트산나트륨을 0.01 ~ 0.5 중량%, 바람직하게는 0.03 ~ 0.1 중량%를 포함할 수 있으며, 인산칼륨을 0.01 ~ 0.2 중량%, 바람직하게는 0.05 ~ 0.2 중량%를 포함할 수 있으며, 시트르산암모늄(Diammonium citrate)을 0.01 ~ 0.5 중량%, 바람직하게는 0.03 ~ 0.1 중량%를 포함할 수 있다.
또한, (1)단계의 배지는 황산마그네슘을 0.001 ~ 0.1 중량%, 바람직하게는 0.003 ~ 0.01 중량%를 포함할 수 있고, 황산망간을 0.001 ~ 0.05 중량%, 바람직하게는 0.003 ~ 0.01 중량%를 포함할 수 있고, 황산아연을 0.001 ~ 0.01 중량%, 바람직하게는 0.002 ~ 0.005 중량%를 포함할 수 있고, 황산구리를 0.001 ~ 0.01 중량%, 바람직하게는 0.002 ~ 0.005 중량%를 포함할 수 있다.
마지막으로, (1)단계의 배지는 정제수를 포함할 수 있는데, 정제수는 상기 배지에 양파피 0.1 ~ 10 중량%, 글루코오스 0.1 ~ 5 중량%, 이스트추출물 0.1 ~ 2 중량%, 인산칼륨(potassium phosphate) 0.01 ~ 0.2 중량%, 아세트산나트륨(sodium acetate) 0.01 ~ 0.5 중량%, 시트르산암모늄(Diammonium citrate) 0.01 ~ 0.5 중량%, 황산마그네슘(magnesium sulfate, MgSO4) 0.001 ~ 0.01 중량%, 황산망간(manganese sulfate, MnSO4) 0.001 ~ 0.05 중량%, 황산아연(zinc sulfate, ZnSO4) 0.0001 ~ 0.01 중량%, 황산구리(copper sulfate, CuSO4) 0.0001 ~ 0.01 중량%를 제외한 나머지가 포함, 즉 잔량을 포함할 수 있다.
(1) 단계에서 분쇄된 양파피를 포함하는 배지를 제조한 후, 상기 배지를 살균처리하는 단계가 포함될 수 있다. 이 때, 살균처리는 90 ~ 121 온도에서 15 ~ 30분간, 바람직하게는 100 ~ 110 온도에서 20 ~ 25분간 진행될 수 있다.
다음으로, (2) 단계로서 상기 (1)단계에서 제조된 배지에 유산균을 접종하여 양파피를 발효한다. (2)단계에서 접종된 유산균은 25 ~ 45 온도에서, 12 ~ 72시간, 바람직하게는 30 ~ 40 온도에서, 36 ~ 60 시간동안 배양되어 양파피가 포함된 배지를 발효하는데, 만일 배양온도가 25 미만이면 발효가 쉽게 일어나지 않으며, 45를 초과하면 열에 약한 유산균이 사멸할 수 있다.
상기 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus) 속 균주가 사용될 수 있는데, 바람직하게는 락토바실러스 람노서스(lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 카제이(lactobacillus casei), 락토바실러스 플란타럼(lactobacillus plantarum), 락토바실러스 브레비스(lactobacillus brevis) 및 락토바실러스 애시도필러스(lactobacillus acidophilus) 중 적어도 하나 이상의 균주일 수 있다.
상기 (2)단계에서 유산균의 접종량은 접종 초기 균수가 105 ~ 106cfu/㎖일 수 있다. 만일, (2)단계에서 유산균의 접종 초기 균수가 105 cfu/㎖미만이면 유산균의 배양시간이 길어지며, 106 cfu/㎖를 초과하면 종균의 생산에 있어 경제적인 부담이 될 수 있다.
다음으로, (3)단계로서 (2)단계에서 발효된 양파피를 포함하는 배지를 C1 ~ C4 알코올 용매로 추출하여 알코올 용매 추출물을 수득한다. 양파피를 포함하는 배지의 추출용매로 사용되는 알코올 용매는 C1 ~ C4 저급 알코올로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 알코올을 사용할 수 있으나, 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다. 본 발명의 알코올 용매는 알코올을 포함하는 것을 의미하며 100% 알코올로 이루어져 있거나 다른 용매에 혼합된 형태일 수 있다. 이 경우 다른 용매로서 바람직하게 물, 메틸 알코올, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 헥산 등을 사용할 수 있으며, 알코올 용매에 물을 혼합 용매로 사용하는 경우 20 ~ 90 중량%, 바람직하게는 40 ~ 80 중량%의 농도를 갖는 알코올 수용액을 사용하는 것이 추출 효율을 극대화하는데 매우 유리하다. 달리 말하면, 20 중량% 미만의 C1 ~ C4 알코올 수용액을 사용한다면 알코올에 포함되는 양파피 성분이 감소될 수 있으며 90 중량%를 초과하면 알코올에 포함되는 양파피 성분의 증가없이 경제적인 부담이 될 수 있다.
본 발명의 (2)단계에서 발효된 양파피를 포함하는 배지를 C1 ~ C4 알코올 용매로 추출하는데 있어서, 상온에서 추출할 수 있고, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게는 자명한 다양한 통상적인 추출방법이 사용될 수 있다. 또한, (2)단계에서 발효된 양파피를 포함하는 배지를 C1 ~ C4 알코올 용매로 추출하는데 있어서, 추출온도는 10 ~ 40, 바람직하게는 20 ~ 30, 추출시간은 1회 추출시 12 ~ 72시간, 바람직하게는 24 ~ 48시간, 추출횟수는 1 ~ 5회, 바람직하게는 2 ~ 3회일 수 있다.
다음으로, (4) 단계로서 (3) 단계에서 수득한 알코올 용매 추출물을 여과한 후, 건조하여 양파피 발효 추출물을 수득한다.
(4) 단계의 여과는 상기 (3) 단계에서 수득한 알코올 용매 추출물에 포함된 균체성분이나 불용성 성분을 제거하기 위해 실시하며, 필터 플레스(filter press) 또는 멤브레인 필터(membrane fiter), 원신분리(centrifuge)를 이용한 여과방법을 실시할 수 있고, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게는 자명한 다양한 통상적인 여과방법을 실시할 수 있다.
(4) 단계에서 여과된 알코올 용매 추출물은 40 ~ 80, 바람직하게는 50 ~ 70 온도에서 진공농축할 수 있다.
진공농축된 알코올 용매 추출물은 건조단계를 거치는데, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게는 자명한 다양한 통상적인 건조방법으로 건조될 수 있고, 바람직하게는 진공건조(vaccum dry), 분무건조(spray dry) 또는 동결건조(freeze dry)로 건조될 수 있다.
상기와 같은 제조방법으로 제조된 본 발명에 따른 양파피 발효 추출물은 피부 세포에서 HSP(Heat Shock Protein) 70 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관 세포 이동 억제, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제하는 효과가 우수한데, 이는 앞서 설명한 바와 같다.
나아가, 본 발명은 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형을 제공한다.
본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤 또는 미스트와 같은 피부 점착타입의 화장료의 제형을 가질 수 있다.
각 제형은 양파피 발효 추출물 이외에 다른 성분들을 사용 목적에 따라 선정하여 배합할 수 있다. 예를 들어, 배합 성분으로 유지 성분, 보습제, 에몰리언트(emollient)제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알코올, 색소, 향로, 정제수 등을 들 수 있다. 하지만, 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서는 다른 배합 성분이 배합가능하다.
본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 글리세린(glycerin), 부틸렌글리콜(butylene glycol), 디프로필렌글리콜(dipropylene glycol), 카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer), 폴리솔베이트(polysorbate) 80, 경화 피마자오일(hydrogenated caster oil), 글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate), 세테아릴알코올(cetearyl alcohol), 세틸에칠헥사노에이트(cetyl ethylhexanoate), 감초추출물(glycyrrhiza inflate extract) 및 레시틴(lecithin) 중에서 선택된 1종 이상을 더 포함할 수 있다. 이와 같은 성분들을 포함함으로서, 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 본 발명의 효과를 지닌 레이저에 의한 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상의 예방 및 개선용 크림 제품으로서 사용가능할 수 있다. 달리 말하면, 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품으로서 사용가능할 수 있는 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 붉음증, 피부 착색, 피부 통증, 소양증(가려움증) 및 비후성 반흔(흉터) 등의 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상을 예방 및/또는 개선할 수 있고, 보습 및/또는 미백 등의 성분이 추가되어 피부 미용에 유용한 효과도 지닐 수 있다.
피부의 보습 작용을 하는 글리세린은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 500 ~ 700 중량부, 바람직하게는 550 ~ 650 중량부를 포함할 수 있고, 용제, 점도감소제, 착향제, 피부컨디셔닝제로 사용되는 부틸렌글리콜은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 900 ~ 1100 중량부, 바람직하게는 950 ~ 1050 중량부를 포함할 수 있다.
또한, 보습제, 항균제, 발효 억제제로 사용되는 디프로필렌글리콜은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 1100 ~ 1300 중량부, 바람직하게는 1150 ~ 1250 중량부를 포함할 수 있고, 유기점증제로 사용되는 카르복시비닐폴리머는 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 50 ~ 70 중량부, 바람직하게는 55 ~ 65 중량부를 포함할 수 있다.
*또한, 유화제로 사용되는 폴리솔베이트 80은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 90 ~ 110 중량부, 바람직하게는 95 ~ 105 중량부를 포함할 수 있고, 유연제로 사용되는 경화 피마자오일은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 700 ~ 900 중량부, 바람직하게는 750 ~ 850 중량부를 포함할 수 있다.
또한, 세정제, 용해보조제로 사용되는 글리세릴스테아레이트는 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 90 ~ 110 중량부, 바람직하게는 95 ~ 105 중량부를 포함할 수 있고, 유화안정제, 불투명화제, 거품형성제, 점증제로 사용되는 세테아릴알코올은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 180 ~ 220 중량부, 바람직하게는 190 ~ 210 중량부를 포함할 수 있다.
또한, 피부유연화제로 사용되는 세틸에칠헥사노에이트는 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 500 ~ 700 중량부, 바람직하게는 550 ~ 650 중량부를 포함할 수 있고, 미백작용, 피부 트러블로 인한 염증 해독작용, 향균작용, 소염작용이 우수한 감초추출물은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 10 ~ 30 중량부, 바람직하게는 15 ~ 25 중량부를 포함할 수 있으며, 유화제로 사용되는 레시틴(lecithin)은 양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여 10 ~ 30 중량부, 바람직하게는 15 ~ 25 중량부를 포함할 수 있다.
상기와 같은 물질 이외에 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 정제수, 방부제, 및/또는 향료를 더 포함할 수 있다.
앞서 언급했듯이, 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형은 피부 세포에서 HSP(Heat Shock Protein) 70의 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제 할 수 있어, 피부의 붉음증, 피부 착색, 피부 통증, 소양증(가려움증) 및 비후성 반흔(흉터) 등의 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상을 예방 및/또는 개선하는 효과가 우수하며, 이는 하기와 같다.
본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형을 피부에 도포한 후, 피부 붉음증 임상실험을 진행한 도 7 내지 도 10을 참조하면, 피부병변 치료 및/또는 미용 목적으로 레이저를 피부에 시술한 후, 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형을 피부에 도포하면, 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상 중 하나인 피부 붉음증을 예방 및/또는 개선할 수 있다. 달리 말하면, 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형을 레이저가 시술 된 피부에 도포하면, 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형이 피부에 도포되지 않는 경우 및/또는 본 발명의 양파피 발효 추출물이 포함되지 않은 일반적인 크림 제품이 피부에 도포된 경우보다 피부 붉음증이 예방 및/또는 개선될 수 있다는 것 확인할 수 있다.
이하, 본 발명은 실시예에 의해 상세히 설명하기로 한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명은 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예]
실시예 1. 양파피 발효 추출물 제조
(1) 양파피를 포함하는 배지의 제조
주식회사 샘넷식품 농업회사법인으로부터 구매한 양파의 겉껍질을 벗겨, 양파의 겉껍질(이하, "양파피"라 한다.)만을 수득한 후 세척기에 10회 정도 세척한다. 그 후, 80에서 10시간 동안 건조 및 로스팅 과정을 거친 다음 분쇄한다.
상기 분쇄된 양파피가 포함하여 하기 표 1과 같은 배지를 제조하였다.
성분명 중량%(w/w) 성분명 중량%(w/w)
분쇄된 양파피 8 황산마그네슘 0.012
글루코오스 0.5 황산망간 0.003
이스트추출물 0.5 황산아연 0.001
인산칼륨 0.25 황산구리 0.001
아세트산나트륨 0.12 정제수 90.493
시트르산암모늄 0.12
상기 표 1과 같이 제조된 배지는 121의 온도에서 20분간 살균처리하는 단계를 거친다.
(2) 양파피의 발효
실시예 1-1에서 제조된 배지에 유산균인 락토바실러스 람노서스(lactobacillus rhamnosus) 균주를 접종하고, 38의 온도에서 48시간 동안 유산균을 배양하여, 양파피를 발효시킨다. 이 때, 유산균의 접종량은 접종 초기 균수가 106cfu/㎖이다.
(3) 알코올 용매로 추출하여 알코올 용매 추출물을 수득
실시예 1-2에서 발효된 양파피를 포함하는 배지 1L에, 95 중량% 에탄올 5.34L를 가하여 최종 알코올 농도를 80 중량% 로 맞춘 후, 상온에서 48시간 동안 추출하여 최종 6.34L의 알코올 용매 추출물을 수득하였다.
(4) 알코올 용매 추출물을 여과, 건조하여 양파피 발효 추출물을 수득
실시예 1-3에서 수득된 6.34L의 알코올 용매 추출물을 필터 프레스(filter press)하여 균체성분이나 불용성 성분을 제거하였다. 이 후, 60의 온도에서 진공농축시킨 후, 동결건조(Freeze dry) 방법으로 건조하여 약 25g의 양파피 발효 추출물을 수득하였다.
실시예 2. 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품 제조
(1) 정제수 75g에 0.3g의 카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer)을 넣고 섞어준다. 여기에, 글리세린(glycerin) 3g, 부틸렌글리콜(butylene glycol) 5g, 디프로필렌글리콜(dipropylene glycol) 6g, 레시틴(lecithin) 0.1g을 넣고 80로 가온하여 수상을 제조한다.
(2) 폴리솔베이트 80(polysorbate 80) 0.5g, 경화 피마자오일(hydrogenated caster oil) 4g, 글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate) 0.5g, 세테아릴알코올(cetearyl alcohol) 1g, 세틸에칠헥사노에이트(cetyl ethylhexanoate) 3 g을 넣고 80로 가온하여 유상을 제조한다.
(3) (2)에서 제조된 유상에 (1)에서 제조된 수상을 용기에 조금씩 천천히 투입하면서 교반하여 혼합한다.
(4) 온도를 40로 낮춘 후, 용기에 방부제 0.5 g, 향료 0.5 g, 양파피 발효 추출물 0.5 g, 감초추출물 0.1g을 넣고 교반하여 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품을 제조한다.
비교예 1
실시예 1의 (2) 단계(양파피의 발효)을 제외하고 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.
*121비교예 2
실시예 1의 (1) 단계에서 양파피가 아닌 양파피를 벗긴 양파 안쪽 껍질을 사용하고, 실시예 1의 (2) 단계(양파피의 발효)을 제외하고 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.
비교예 3
추출 용매로 80 중량% 에탄올 수용액 대신 0 중량% 에탄올, 즉 100 중량%의 정제수를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.
비교예 4
실시예 2에 포함된 양파피 발효 추출물만 제외하고 실시예 2와 동일한 성분을 혼합하여 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품을 제조하였다.
준비예 1. 세포 배양
세포배양을 위해 인간피부조직(Human dermal tissue)에서 유래된 HDMECs(human dermal microvascular endothelial cells, 미세혈관세포)을 스페인의 Innoprot 사에서 분양 받아 사용하였다.
미세혈관세포를 75T 플라스크에 분주 하여 37, 5 부피% CO2 조건 하에서 배양하였다. 배양 배지는 5 부피% FBS(fetal bovine serum), 1 부피% 항생제, 1 부피% bFGF(basic fibroblast grouth factor)와 EGF(epidermal growth factor)가 포함된 ECM 배지(endothelial cell medium-innoprot)를 사용하였으며, 3일마다 배양액을 교체하였다. 상기 플라스크에 85 부피% 정도 세포가 배양되면 계대해 주었으며 한번 이상의 계대가 된 후 안정된 상태의 미세혈관세포를 이용해 실험을 진행하였다.
실험예 1 : 세포독성 확인 시험
96-웰 배양용기에 준비예 1에서 배양된 미세혈관세포를 1? 104cell/㎖이 되도록 각 웰(well)에 200㎕씩 분주하여 안정화를 위해 37, 5 부피% CO2 조건 하에서 24시간 배양하였다. 24시간 후 배양용기의 각 웰(well)에 실시예 1에서 제조된 양파피 발효 추출물을 50ppm, 100ppm, 200ppm, 300ppm, 500ppm 및 800ppm 농도별로 첨가한 다음 37, 5 부피% CO2 조건 하에서 24시간동안 배양한 후, MTS 시료(CellTiter 96 AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay kit, Cat no.G5421, Promega사) 20㎕를 넣어주고, 37, 5 부피% CO2 인큐베이터(Incubator)에서 2시간 동안 반응시킨 후 492nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정은 배양용기에 실시예 1에서 제조된 양파피 발효 추출물이 첨가되지 않은 대조군을 기준으로 미세혈관세포의 생존비를 계산하여 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에서 확인되는 바와 같이, 800ppm 농도로 첨가한 양파피 발효 추출물은 미세혈관세포에 약간의 독성을 보였으나 유의할만한 수준은 아니였으며, 50ppm, 100ppm, 200ppm, 300ppm 및 500ppm 농도로 첨가한 양파피 발효 추출물은 미세혈관세포에 독성을 나타내지 않는 것을 확인할 수 있었다.
그리고, 도 2는 화장료, 의약품 또는 의약외품에 포함될 수 있는 양파피 발효 추출물 농도보다 10배 정도 희석된 농도로 세포독성 실험을 수행한 것으로서, 양파피 발효 추출물을 포함한 화장료, 의약품 또는 의약외품 제조시에는 세포 독성 면 등을 고려할 때, 5000ppm 이하로 사용하는 것이 유리함을 추론할 수 있었다.
실험예 2 : HSP(Heat Shock Protein) 발현 억제효과 확인 시험
Fibroblast 및 HaCat 세포를 각각 준비예 1과 같은 동일한 방법으로 배양하였다. 이 후, 배양된 Fibroblast 및 HaCat 세포를 5? 104cell/㎖이 되도록 96-웰 배양용기의 각 웰(well)에 200㎕씩 seeding한 후, 배양용기의 각 웰(well)에 각각의 시료를 첨가하였다. 이 후, 24시간동안 37, 5 부피% CO2 조건하에서 배양한 뒤에 RNA 추출을 통해 HSP 70의 발현 억제 효과를 확인하였다.
각 웰(well)은 대조군 웰(well)과 함께, 본 발명의 실시예 1에서 제조된 양파피 발효추출물이 시료로서 각각 100ppm 및 500ppm 농도로 첨가된 웰(well) 및 비교예 1에서 제조된 양파피 추출물이 각각 100ppm 및 500ppm 농도로 첨가된 웰(well)이다.
각 웰(well)의 Fibroblast 및 HaCat 세포의 HSP 70 발현 억제효과에 대한 결과는 도 3에 나타내었다.
도 3에서 확인되는 바와 같이, 비교예 1에서 제조된 발효되지 않은 양파피 추출물을 각각 100ppm 및 500ppm 농도로 처리된 웰(well)의 Fibroblast 및 HaCat 세포는 대조군과 거의 유사하게 HSP 70이 발현되었으나, 실시예 1의 양파피 발효 추출물을 100ppm 및 500 ppm 농도로 처리된 웰(well)의 Fibroblast 및 HaCat 세포는 HSP 70의 발현이 현저하게 억제되었음을 확인할 수 있었다.
이를 토대로 본 발명의 양파피 발효 추출물은 피부 세포에 있어 HSP 70의 발현을 현저하게 억제할 수 있음을 알 수 있다.
그리고, 도 3은 화장료, 의약품 또는 의약외품에 포함될 수 있는 양파피 발효 추출물 농도보다 10배 정도 희석된 농도로 HSP 발현 억제 실험을 수행한 것으로서, 양파피 발효 추출물을 포함한 화장료 제조시에는 피부 세포의 HSP 발현 억제 면 등을 고려할 때, 5000ppm 이하로 사용하는 것이 유리함을 추론할 수 있었다.
실험예 3 : 미세혈관세포 증식 억제 확인 시험
96-웰 배양용기에 준비예 1에서 배양된 미세혈관세포가 1? 104cell/㎖가 되도록 각 웰(well)에 200㎕씩 분주하여 안정화를 위해 37, 5 부피% CO2 조건 하에서 24시간 배양하였다. 24시간을 배양한 후, 상층의 배지는 모두 버리고, 미세혈관세포가 포함된 하층의 배지를 1? PBS(Phosphate buffer saline)로 washing 한다. washing한 후 음성대조군 웰(well)에는 5 부피% FBS(fetal bovine serum)가 포함된 배지를 180㎕ 넣어주고 나머지 웰(well)에는 5 부피% FBS와 bFGF(basic fibroblast grouth factor) 2 ng/㎖, EGF(epidermal growth factor) 2 ng/㎖이 포함된 배지를 180㎕ 넣어 주었다.
96-웰 배양용기의 음성대조군 웰(well)을 제외한 각 웰(well)에 시료를 20㎕씩 첨가한다. 그 후, 96-웰 배양용기를 37, 5% CO2 조건 하에서 48시간 동안 배양하였다. 48시간 후, 상층의 배지는 모두 버리고, 미세혈관세포가 포함된 하층의 배지를 5 부피% PBS로 washing한 후, 5 부피% FBS가 포함된 DMEM(Dulbecco's modified eagle's medium) 배지로 갈아준 다음 MTS 시료(CellTiter 96 AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay kit, Cat no.G5421, Promega사) 20㎕를 넣어주고, 37, 5 부피% CO2 인큐베이터(Incubator)에서 2시간 동안 반응시킨 후 492nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 후 음성대조군 웰(well)를 기준으로 각 웰(well)의 세포의 생존비를 계산하였다.
각 웰(well)은 본 발명의 실시예 1에서 제조된 양파피 발효 추출물이 시료로서 각각 50ppm, 100ppm, 200ppm, 300ppm, 400ppm 및 500ppm 농도로 첨가된 웰(well), 양성대조군 웰(well)로서 실시예 1에서 제조된 양파피 발효 추출물이 시료로서 첨가되지 않은 웰(well), 비교예 2에서 제조된 양파 안쪽 껍질의 추출물이 시료로서 각각 100ppm 및 200ppm 농도로 첨가된 웰(well) 및 비교예 3에서 제조된 양파피 추출물을 각각 100ppm 및 200ppm 농도로 첨가된 웰(well)이다.
각 웰(well)의 미세혈관세포의 세포증식 억제활성 측정결과는 도 4에 나타내었다.
도 4에서 확인되는 바와 같이, 실시예 1의 양파피 발효 추출물을 50 내지 500ppm 농도로 첨가된 웰(well)은 양성대조군과 비교해 보았을 때, 미세혈관세포의 과도한 증식을 현저하게 억제하고 있음을 확인할 수 있었으며, 비교예 2 또는 비교예 3이 첨가된 웰(well)보다도 높은 세포 증식 억제 효과를 보여 주었다.
이를 토대로 본 발명의 양파피 발효 추출물은 피부 미세혈관세포의 세포 증식을 억제할 수 있음을 알 수 있고, 특히 본 발명의 양파피 발효 추출물이 100ppm 내지 500ppm 농도로 첨가되면 피부 미세혈관세포의 세포 증식을 크게 억제할 수 있음을 알 수 있다.
자극으로 인해 과발현된 미세혈관세포의 증식을 억제시키면 이로인한 피부 붉음증을 감소시킬 수 있다.
그리고, 도 4은 화장료, 의약품 또는 의약외품에 포함될 수 있는 양파피 발효 추출물 농도보다 10배 정도 희석된 농도로 세포증식 억제 실험을 수행한 것으로서, 양파피 발효 추출물을 포함한 화장료, 의약품 또는 의약외품 제조시에는 세포 활성 면 등을 고려할 때, 5000ppm 이하로 사용하는 것이 유리함을 추론할 수 있었다.
실험예 4 : 미세혈관세포 세포 이동 억제 확인 시험
96-웰 배양용기에 준비예 1에서 배양된 미세혈관세포를 1? 105cell/㎖가 되도록 각 웰(well)에 200㎕씩 분주하여 안정화를 위해 37, 5 부피% CO2 조건 하에서 15시간 배양하였다. 15시간을 배양한 다음 200㎕ tip으로 스크래치 한 후 PBS로 세척하였다. 음성대조군 웰(well)에는 5 부피% FBS(fetal bovine serum)가 포함된 배지를 180㎕ 넣어주고 나머지 웰(well)에는 5 부피% FBS와 bFGF(basic fibroblast grouth factor) 2 ng/㎖, EGF(epidermal growth factor) 2 ng/㎖이 포함된 배지를 180㎕ 넣어 주었다.
96-웰 배양용기의 음성대조군 웰(well)을 제외한 각 웰(well)에 시료를 20㎕씩 첨가한다. 그 후, 96-웰 배양용기를 37, 5 부피% CO2 조건 하에서 9시간 동안 배양하였다. 그 후 현미경(Olympus IX53-100배율)을 통해 세포의 이동 정도를 관찰하였다.
각 웰(well)은 본 발명의 실시예 1에서 제조된 양파피 발효 추출물이 시료로서 0, 100ppm, 200ppm, 300ppm 및 500ppm 농도로 첨가된 웰(well)이다.
각 웰(well)의 미세혈관세포의 세포이동 억제활성 측정결과는 도 5에 나타내었다.
도 5에서 확인되는 바와 같이, 실시예 1의 양파피 발효 추출물을 100 내지 500ppm 농도로 첨가된 웰(well)은 양성대조군과 비교해 보았을 때 미세혈관세포의 이동이 현저히 억제되는 것을 현미경을 통해 확인할 수 있었다.
이를 토대로 본 발명의 양파피 발효 추출물은 피부 미세혈관세포의 세포 이동을 억제할 수 있음을 알 수 있으며, 손상피부 주위로 몰려드는 혈관세포의 이동을 억제 시키면 손상피부 주위의 피부 붉음증을 감소시킬 수 있다.
그리고, 도 5은 화장료, 의약품 또는 의약외품에 포함될 수 있는 양파피 발효 추출물 농도보다 10배 정도 희석된 농도로 세포이동 억제 실험을 수행한 것으로서, 양파피 발효 추출물을 포함한 화장료, 의약품 또는 의약외품 제조시에는 세포 활성 면 등을 고려할 때, 5000ppm 이하로 사용하는 것이 유리함을 추론할 수 있었다.
실험예 5 : 혈관확장 및 혈관형성 억제 확인 시험
96-웰 배양용기에 세포부착성 단백질(Growth factor reduced matrigel) 100㎕를 분주하여 37에서 30분간 코팅하였다.
96-웰 배양용기의 음성대조군 웰(well)에는 5 부피% FBS(fetal bovine serum)가 포함된 배지로 미세혈관세포를 희석하여 3.6? 104cell/㎖가 되도록 각 웰(well)에 450㎕씩 분주하고, 양성대조군에는 5 부피% FBS와 bFGF(basic fibroblast grouth factor) 2 ng/㎖, EGF(epidermal growth factor) 2 ng/㎖이 포함된 배지로 미세혈관세포를 희석하여 3.6? 104cell/㎖가 되도록 각 웰(well)에 450㎕씩 분주한다. 이후, 시료를 50㎕씩 첨가한다. 그 후, 96-웰 배양용기를 37, 5 부피% CO2 조건 하에서 24시간동안 배양하고, 현미경(Olympus IX53-100배율)을 통해 혈관확장 및 혈관형성 정도를 관찰하였다.
웰(well)은 본 발명의 실시예 1에서 제조된 양파피 발효 추출물이 시료로서 0, 100ppm, 200ppm, 300ppm 및 500ppm 농도로 첨가된 웰(well)이다.
각 웰(well)의 미세혈관세포의 혈관확장 및 혈관형성 억제활성 측정결과는 도 6에 나타내었다.
도 6에서 확인되는 바와 같이, 실시예 1의 양파피 발효 추출물을 100ppm 내지 500ppm 농도로 첨가된 웰(well)의 미세혈관세포의 혈관확장 및 혈관형성을 현저히 억제함을 현미경을 통해 관찰하였다.
이를 토대로 본 발명의 양파피 발효 추출물은 피부 세포의 혈관확장 및 혈관형성을 억제할 수 있음을 알 수 있다.
그리고, 도 6은 화장료, 의약품 또는 의약외품에 포함될 수 있는 양파피 발효 추출물 농도보다 10배 정도 희석된 농도로 혈관확장 및 혈관형성 억제 실험을 수행한 것으로서, 양파피 발효 추출물을 포함한 화장료, 의약품 또는 의약외품 제조시에는 세포 활성 면 등을 고려할 때, 5000ppm 이하로 사용하는 것이 유리함을 추론할 수 있었다.
이와 같이, 본 발명의 양파피 발효 추출물은 피부 세포에서 HSP(Heat Shock Protein) 70의 발현 억제, 미세혈관세포 증식 억제, 미세혈관세포 이동 억제 및/또는 혈관형성을 억제하기 때문에, 자외선의 지속적인 노출에 따라 피부에서 발생하는 비후성 반흔, 소양증, 붉음증, 피부착색 및 통증 등의 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상을 예방 및/또는 개선할 수 있는 복합소재 물질로서 활용가능성이 큰 물질임이 자명하다.
실험예 6 : 레이저에 의한 피부 붉음증의 발생 억제 확인 임상 시험
(1) 시험은 피부 질환을 포함하는 급, 만성 신체 질환이 없는 건강한 자를 대상으로 피험자를 선정하였다.
(2) 피부 발열과 붉음증을 유발할 수 있을 정도의 최소 조사량(10.6㎛ wavelength, 2.5J energy)으로 피험자의 얼굴 전체에 8분 동안 레이저(플라톤 factional CO2 laser, (주)닥터메드)를 조사하였다.
(3) 피험자의 얼굴 전체에 레이저 조사가 끝난 직 후, 피험자의 얼굴 전체 중 절반에 해당하는 부분에는 실시예 2에서 제조된 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품을 도포 하였고, 다른 피험자의 얼굴 전체 중 절반에 해당하는 부분에는 비교예 4에서 제조된 양파피 발효 추출물이 포함되지 않은 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품을 도포하였다.
(4) 60분이 지난 후 피험자의 피부에 붉음증 및 발열 정도를 열화상 카메라(ULIR vision TI120, (주)세인교정)를 이용하여 측정하였다.
(5) 측정 시 확인되는 피험자의 얼굴 피부온도와 육안을 통해 붉음증 개선 여부를 판정하였다.
상기와 같은 피험자의 얼굴 피부 상태의 측정결과는 도 7 내지 도 10에 나타내었다.
도 7 내지 도 10에서 확인되는 바와 같이, 피험자 1 내지 4는 실시예 2의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품이 레이저가 조사된 피부에 도포된 경우, 피부에 비교예 4의 양파피 발효 추출물이 포함되지 않은 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품이 도포된 경우보다 얼굴 피부의 온도가 낮게 측정되었다. 달리 말하면, 모든 피험자(피험자 1 ~ 4)가 레이저 시술에 의해 얼굴피부 온도가 증가된 후, 얼굴피부 중 실시예 2의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품을 도포한 부위가 얼굴피부 중 비교예 4의 양파피 발효 추출물이 포함되지 않은 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 크림 제품이 도포한 부위보다 피부온도가 더 낮게 측정되었다.
이와 같이, 본 발명의 양파피 발효 추출물은 피부 세포에서 HSP 70의 발현 억제, 미세혈관세포 증식, 미세혈관세포 이동, 혈관확장 및/또는 혈관형성을 억제 하기 때문에, 본 발명의 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 화장료 제형을 피부에 도포함으로서 레이저에 의한 피부 과민 반응 및/또는 피부 손상, 대표적으로 피부 붉음증 등을 예방 및/또는 개선할 수 있는 제형으로서 활용가능성이 큰 물질임이 자명하다.
[제조예]
제조예 1 : 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 제형의 제조예
본 발명의 양파피 발효 추출물을 포함하는 피부병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 피부 과민 반응의 예방 및 개선용 제형을 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제조예 1-1. 크림
양파피 발효 추출물 0.5 g
글리세린(glycerin) 3 g
부틸렌글리콜(butylene glycol) 5 g
디프로필렌글리콜(dipropylene glycol) 6 g
카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer) 0.3 g
폴리솔베이트 80(polysorbate 80) 0.5 g
경화 피마자오일(hydrogenated caster oil) 4 g
글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate) 0.5 g
세테아릴알코올(cetearyl alcohol) 1 g
세틸에칠헥사노에이트(cetyl ethylhexanoate) 3 g
감초추출물(glycyrrhiza inflate extract) 0.1 g
레시틴(lecithin) 0.1 g
*방부제 0.5 g
향료 0.5 g
*194정제수 75 g
상기 성분을 혼합한 후, 통상의 크림형태 제품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하였다. 또한, 상기 정제수와 상기 방부제 및/또는 향료의 혼합비는 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제조예 1-2. 앰플
양파피 발효 추출물 0.5 g
디프로필렌글리콜(propylene glycol) 7 g
1,3-부틸렌글리콜(1,3-butylene glycol) 5 g
폴리솔베이트 80(polysorbate 80) 3 g
디포타슘글리시리제이트(dipotassium glycyrrhizate) 0.5 g
알란토인(allantoin) 0.5 g
판테놀(panthenol) 0.5 g
글리세린(glycerin) 3 g
방부제 0.5 g
향료 0.5 g
정제수 79 g
상기 성분을 혼합한 후, 통상의 앰플형태 제품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하였다. 나아가, 상기 정제수와 상기 방부제 및/또는 향료의 혼합비는 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제조예 1-3. 스킨
양파피 발효 추출물 0.5 g
1,3-부틸렌글리콜(1,3-butylene glycol) 5 g
글리세린(glycerin) 4 g
폴리솔베이트 80(polysorbate 80) 2 g
초산토코페롤(tocopherol acetate) 0.05 g
니코틴산아마이드(nicotinic acid amide) 0.5 g
디포타슘글리시리제이트(dipotassium glycyrrhizate) 0.5 g
알란토인(allantoin) 0.5 g
염산피리독신(pyridoxine hydrochloride) 0.5 g
*방부제 0.5 g
향료 0.5 g
정제수 85.45 g
상기 성분을 혼합한 후, 통상의 스킨형태 제품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하였다. 나아가, 상기 정제수와 상기 방부제 및/또는 향료의 혼합비는 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제조예 1-4. 팩
양파피 발효 추출물 0.5 g
글리세린(glycerin) 5 g
부틸렌글리콜(butylene glycol) 2 g
셀룰로오스검(cellulose gum) 1 g
카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer) 0.2 g
폴리솔베이트 80(polysorbate 80) 1 g
알란토인(allantoin) 0.3 g
판테놀(panthenol) 0.5 g
알지닌(arginine) 0.3 g
피이지-40 하이드로제네이티드 캐스터 오일(PEG-40 hydrogenated caster oil) 0.3g
감초추출물 0.1g
레시틴(lecithin) 0.1 g
방부제 0.5 g
향료 0.5 g
정제수 87.7 g
상기 성분을 혼합한 후, 통상의 팩형태 제품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하였다. 나아가, 상기 정제수와 상기 방부제 및/또는 향료의 혼합비는 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제조예 1-5. 로션
양파피 발효 추출물 0.5 g
글리세린(glycerin) 3 g
부틸렌글리콜(butylene glycol) 5 g
에리스리톨(erythritol) 1 g
카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer) 0.3 g
잔탄검(xanthan gum) 0.3 g
경화 피마자오일(hydrogenated caster oil) 0.5 g
글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate) 0.5 g
세테아릴알코올(cetearyl alcohol) 1 g
세틸에칠헥사노에이트(cetyl ethylhexanoate) 3 g
피이지-100 스테아레이트(PEG-100 stearate) 0.8 g
알지닌(arginine) 0.2 g
감초추출물 0.1 g
레시틴(lecithin) 0.1 g
방부제 0.5 g
향료 0.5 g
정제수 82.7 g
상기 성분을 혼합한 후, 통상의 로션형태 제품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하였다. 나아가, 상기 정제수와 상기 방부제 및/또는 향료의 혼합비는 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
제조예 1-6. 에센스
양파피 발효 추출물 0.5 g
글리세린(glycerin) 3 g
부틸렌글리콜(butylene glycol) 5 g
에리스리톨(erythritol) 1 g
카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer) 0.15 g
잔탄검(xanthan gum) 0.2 g
글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate) 0.5 g
세테아릴알코올(cetearyl alcohol) 1 g
알지닌(arginine) 0.15 g
감초추출물 0.1 g
레시틴(lecithin) 0.1 g
방부제 0.5 g
향료 0.5 g
정제수 87.3 g
상기 성분을 혼합한 후, 통상의 에센스형태 제품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하였다. 나아가, 상기 정제수와 상기 방부제 및/또는 향료의 혼합비는 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

Claims (17)

  1. 양파피 발효 추출물을 50 내지 500ppm 농도로 포함하는 것을 특징으로 하고,
    피부 세포의 혈관확장 및 혈관형성을 억제하는 것을 특징으로 하고,
    상기 양파피 발효 추출물은
    (1) 건조 분쇄된 양파피 0.01 ~ 10 중량%, 글루코오스(glucose) 0.1 ~ 5 중량%, 이스트추출물(yeast extract) 0.1 ~ 2 중량%, 인산칼륨(potassium phosphate) 0.01 ~ 0.2 중량%, 아세트산나트륨(sodium acetate) 0.01 ~ 0.5 중량%, 시트르산암모늄(Diammonium citrate) 0.01 ~ 0.5 중량%, 황산마그네슘(magnesium sulfate, MgSO4) 0.001 ~ 0.01 중량%, 황산망간(manganese sulfate, MnSO4) 0.001 ~ 0.05 중량%, 황산아연(zinc sulfate, ZnSO4) 0.0001 ~ 0.01 중량%, 황산구리(copper sulfate, CuSO4) 0.0001 ~ 0.01 중량% 및 잔량의 정제수를 포함하는 배지를 제조하는 단계;
    (2) 상기 배지에 락토바실러스 람노서스(lactobacillus rhamnosus)를 접종하여 상기 양파피를 발효하는 단계;
    (3) 발효된 양파피를 포함하는 배지를 80 중량 % 에탄올 용매로 추출하여 알코올 용매 추출물을 수득하는 단계; 및
    (4) 수득한 에탄올 용매 추출물을 여과한 후, 건조하여 양파피 발효 추출물을 수득하는 단계; 를 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는,
    피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 치료용 제약 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 레이저는 피부병변 치료 또는 미용 목적으로 사용되며, CO2 레이저, Nd-YAG 레이저, Er-YAG 레이저, Alexandrite 레이저, He-Ne 레이저, IPL(Intense Pulsed Light), 비침습적 레이저 또는 고주파 레이저인 것을 특징으로 하는,피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 치료용 제약 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 피부 세포에서 HSP(Heat Shock Protein) 70의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는, 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 치료용 제약 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 피부 세포의 증식 또는 이동을 억제하는 것을 특징으로 하는, 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 치료용 제약 조성물.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 제 1항에 있어서,
    상기 (1) 단계는 상기 배지를 90 ~ 121에서 15 ~ 30분간 살균처리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 치료용 제약 조성물.
  10. 삭제
  11. 제 1항에 있어서,
    상기 (2) 단계에서 유산균의 접종량은 접종 초기 균수가 105 ~ 106 cfu/㎖인 것을 특징으로 하는, 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 치료용 제약 조성물.
  12. 제 1항에 있어서,
    상기 (3) 단계의 추출은 상기 80 중량% 에탄올 수용액을 사용하여 12 ~ 72시간 동안 추출하는 것을 특징으로 하는 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 치료용 제약 조성물.
  13. 제 1항에 있어서,
    상기 (4) 단계에서 여과된 80 중량% 에탄올 용매 추출물을 40 ~ 80 온도에서 진공농축한 후, 진공건조(vaccum dry), 분무건조(spray dry) 또는 동결건조(freeze dry)로 건조하는 것을 특징으로 하는 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 치료용 제약 조성물.
  14. 양파피 발효 추출물을 50 내지 500ppm 농도로 포함하는 것을 특징으로 하는, 상기 양파피 발효 추출물은 80 중량% 에탄올로 추출되는 것을 특징으로 하며, 피부 세포의 혈관확장 및 혈관형성을 억제하는 것을 특징으로 하며
    상기 양파피 발효 추출물은
    (1) 건조 분쇄된 양파피 0.01 ~ 10 중량%, 글루코오스(glucose) 0.1 ~ 5 중량%, 이스트추출물(yeast extract) 0.1 ~ 2 중량%, 인산칼륨(potassium phosphate) 0.01 ~ 0.2 중량%, 아세트산나트륨(sodium acetate) 0.01 ~ 0.5 중량%, 시트르산암모늄(Diammonium citrate) 0.01 ~ 0.5 중량%, 황산마그네슘(magnesium sulfate, MgSO4) 0.001 ~ 0.01 중량%, 황산망간(manganese sulfate, MnSO4) 0.001 ~ 0.05 중량%, 황산아연(zinc sulfate, ZnSO4) 0.0001 ~ 0.01 중량%, 황산구리(copper sulfate, CuSO4) 0.0001 ~ 0.01 중량% 및 잔량의 정제수를 포함하는 배지를 제조하는 단계;
    (2) 상기 배지에 락토바실러스 람노서스(lactobacillus rhamnosus)를 접종하여 상기 양파피를 발효하는 단계;
    (3) 발효된 양파피를 포함하는 배지를 80 중량 % 에탄올 용매로 추출하여 알코올 용매 추출물을 수득하는 단계; 및
    (4) 수득한 에탄올 용매 추출물을 여과한 후, 건조하여 양파피 발효 추출물을 수득하는 단계; 를 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는,
    피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 개선용 화장료 조성물.

  15. 제14항에 있어서,
    유액, 화장수, 크림, 로션, 에센스, 팩, 젤 또는 미스트인 것을 특징으로 하는 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 개선용 화장료 조성물.
  16. 제 15항에 있어서,
    글리세린(glycerin), 부틸렌글리콜(butylene glycol), 디프로필렌글리콜(dipropylene glycol), 카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer), 폴리솔베이트(polysorbate) 80, 경화 피마자오일(hydrogenated caster oil), 글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate), 세테아릴알코올(cetearyl alcohol), 세틸에칠헥사노에이트(cetyl ethylhexanoate), 감초추출물(glycyrrhiza inflate extract) 및 레시틴(lecithin) 중에서 선택된 1종 이상을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 개선용 화장료 조성물.
  17. 제 16항에 있어서,
    양파피 발효 추출물 100 중량부에 대하여, 글리세린(glycerin) 500 ~ 700 중량부; 부틸렌글리콜(butylene glycol) 900 ~ 1100 중량부; 디프로필렌글리콜(dipropylene glycol) 1100 ~ 1300 중량부; 카르복시비닐폴리머(carboxyvinylpolymer) 50 ~ 70 중량부; 폴리솔베이트 80(polysorbate 80) 90 ~ 110 중량부; 경화 피마자오일(hydrogenated caster oil) 700 ~ 900 중량부; 글리세릴스테아레이트(glyceryl stearate) 90 ~ 110 중량부; 세테아릴알코올(cetearyl alcohol) 180 ~ 220 중량부; 세틸에칠헥사노에이트(cetyl ethylhexanoate) 500 ~ 700 중량부; 감초추출물(glycyrrhiza inflate extract) 10 ~ 30 중량부; 및 레시틴(lecithin) 10 ~ 30 중량부를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 병변의 치료 또는 미용 목적으로 시술되는 레이저에 의한 붉음증의 피부과민반응 질환 예방 및 개선용 화장료 조성물.










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