KR102208963B1 - 신규한 아크릴산 생성 경로를 갖는 미생물 및 이를 이용한 아크릴산 생산 방법 - Google Patents
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Abstract
Description
번호 | EC | 카테고리 | 소스 균주 | 유전자명 |
균주
구입처 |
서열* |
1 | 2.8.3.8 | Acetate CoA-transferase | Clostridium propionicum | pct | KCTC5582 | 1/11 |
2 | 2.8.3.8 | Acetate CoA-transferase | Escherichia coli (strain K12) | ydiF b1694 JW1684 | 보유 | 2/12 |
3 | 2.8.3.8 | Acetate CoA-transferase | Cupriavidus necator | pct | KCTC22469 | 3/13 |
4 | 6.2.1.17 | CoA transferase | Halomonas smyrnensis | acuN | DSM21644 | 4/14 |
5 | 6.2.1.17 | CoA transferase | Ruegeria pomeroyi DSS-3 | SPO2934 | DSM15171 | 5/15 |
6 | 2.8.3.8 | Acetate CoA-transferase | Desulfosporosinus youngiae DSM 17734 | DesyoDRAFT_3698 | DSM17734 | 6/16 |
7 | 3.1.2.- | Thioesterase | Peptoniphilus indolicus ATCC 29427 | HMPREF9129_0351 | KCTC15023 | 7/17 |
8 | 2.8.3.8 | Acetate CoA-transferase | Desulfosporosinus meridiei (strain ATCC BAA-275 / DSM 13257 / NCIMB 13706 / S10) | Desmer_1798 | DSM13257 | 8/18 |
9 | 2.8.3.8 | Acetate CoA-transferase | Desulfosporosinus orientis (strain ATCC 19365 / DSM 765 / NCIMB 8382 / VKM B-1628) (Desulfotomaculum orientis) | Desor_3090 | DSM765 | 9/19 |
10 | 2.8.3.8 | Acetate CoA-transferase | Peptostreptococcus anaerobius CAG:621 | BN738_00826 | KCTC5182 | 10/20 |
번호 | EC | 카테고리 | 소스 균주 | 유전자 | 구입체 | 서열* |
1 | 4.2.1.- | 3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase(Crotonase) | Dictyostelium discoideum (Slime mold) | Q869N6 | DSM947 | 21/99 |
2 | 4.2.1.55 | 3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase(Crotonase) | Clostridium acetobutylicum | crt CA_C2712 | KCTC1790 | 22/100 |
3 | 4.2.1.55 | 3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase(Crotonase) | Clostridium difficile | crt ech | KCTC5009 | 23/101 |
4 | 4.2.1.55 | 3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase(Crotonase) | Clostridium pasteurianum | F502_09038 | KCTC1674 | 24/102 |
5 | 4.2.1.55 | 3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase(Crotonase) | Clostridium pasteurianum | F502_06297 | KCTC1674 | 25/103 |
6 | 4.2.1.55 | 3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase(Crotonase) | Megasphaera elsdenii | MELS_1449 | KCTC5187 | 26/104 |
7 | 4.2.1.116 | 3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase(Crotonase) | Metallosphaera sedula | Msed_2001 | DSM5348 | 27/105 |
8 | 4.2.1.55 | 3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase(Crotonase) | Clostridicum kluyvery | crt1 | DSM555 | 28/106 |
9 | 4.2.1.- | 4-hydroxybutyryl-CoA dehydratase | Sulfolobus tokodaii | STK_16590 | DSM16993 | 29/107 |
10 | 4.2.1.- | 4-hydroxybutyryl-CoA dehydratase | Geobacter metallireducens | Gmet_2215 | DSM7210 | 30/108 |
11 | 4.2.1.- | 4-hydroxybutyryl-CoA dehydratase | Sulfolobus solfataricus | abfD-1 | DSM1617 | 31/109 |
12 | 4.2.1.- | 4-hydroxybutyryl-CoA dehydratase | Syntrophobacter fumaroxidans | Sfum_3141 | DSM10017 | 32/110 |
13 | 4.2.1.- | 4-hydroxybutyryl-CoA dehydratase | Porphyromonas gingivalis | PGN_0727 | DSM20709 | 33/111 |
14 | 4.2.1.- | 4-hydroxybutyryl-CoA dehydratase | Polynucleobacter necessarius subsp. Asymbioticus | Pnuc_0370 | DSM18221 | 34/112 |
15 | 4.2.1.116 | 3-hydroxypropionyl-CoA dehydratase | Sulfolobus tokodaii | STK_15160 | DSM16993 | 35/113 |
16 | 4.2.1.- | 3-hydroxypropionyl-CoA dehydratase | Gordonia terrae C-6 | GTC6_11571 | KCTC9807 | 36/114 |
17 | 4.2.1.- | 3-hydroxypropionyl-CoA dehydratase | Halalkalicoccus jeotgali | HacjB3_17558 C497_07209 | DSM18796 | 37/115 |
18 | 4.2.1.- | 3-hydroxypropionyl-CoA dehydratase | Carboxydothermus hydrogenoformans | CHY_1739 | DSM6008 | 38/116 |
19 | 4.2.1.55 | 3-hydroxypropionyl-CoA dehydratase | Thermomicrobium roseum | trd_0041 | DSM5159 | 39/117 |
20 | 4.2.1.17 | 3-hydroxypropionyl-CoA dehydratase | Methylobacterium extorquens | croA METDI5699 | DSM1337 | 40/118 |
번호 | EC | 카테고리 | 소스 균주 | 유전자 | 구입처 | 서열* |
21 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | Clostridium sporogenes |
fldB | KCTC5654 | 41/119 |
22 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | fldC | KCTC5654 | 42/120 | |
23 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | fldI | KCTC5654 | 43/121 | |
24 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | fldA | KCTC5654 | 44/122 | |
25 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | Lachnoanaerobaculum saburreum |
fldC HMPREF0381_2734 | DSM3986 | 45/123 |
26 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | fldB HMPREF0381_2735 | DSM3986 | 46/124 | |
27 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | fldI2 HMPREF0381_2736 | DSM3986 | 47/125 | |
28 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | Peptostreptococcus stomatis |
fldI HMPREF0634_1391 | DSM17678 | 48/126 |
29 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | HMPREF0634_1028 | DSM17678 | 49/127 | |
30 | 4.2.1.- | R-phenyllactate dehydratase | fldB HMPREF0634_1029 | DSM17678 | 50/128 | |
31 | 4.2.1.- | 2-hydroxyisocaproyl-CoA dehydratase | Clostridium difficile |
hadB | KCTC5009 | 51/129 |
32 | 4.2.1.- | 2-hydroxyisocaproyl-CoA dehydratase | hadC | KCTC5009 | 52/130 | |
33 | 4.2.1.- | 2-hydroxyisocaproyl-CoA dehydratase | hadI | KCTC5009 | 53/131 | |
34 | 4.2.1.- | 2-hydroxyisocaproyl-CoA dehydratase | hadA | KCTC5009 | 54/132 | |
35 | 4.2.1.17 | Enoyl-CoA hydratase | Escherichia coli (strain K12) | paaF | 보유 | 55/133 |
36 | 4.2.1.17 | Enoyl-CoA hydratase | Rhodobacter capsulatus | fadB1 | KCTC2583 | 56/134 |
37 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Pseudomonas stutzeri | PSTAA_0117 | DSM4166 | 57/135 |
38 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Haliangium ochraceum | Hoch_4602 | DSM14365 | 58/136 |
39 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Anoxybacillus flavithermus | Aflv_0566 | DSM21510 | 59/137 |
40 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Streptomyces avermitilis | echA3 SAV_717 | DSM46492 | 60/138 |
41 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Advenella kashmirensis | TKWG_10020 | DSM17095 | 61/139 |
번호 | EC | 카테고리 | 소스 균주 | 유전자 | 구입처 | 서열* |
42 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Oligotropha carboxidovorans | OCA5_c12950 OCAR_6780 | DSM1227 | 62/140 |
43 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Riemerella anatipestifer | Riean_1526 RA0C_1812 | DSM15868 | 63/141 |
44 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Fusobacterium necrophorum subsp. funduliforme Fnf 1007 |
HMPREF1127_1435 | DSM19678 | 64/142 |
45 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | HMPREF1127_1434 | DSM19678 | 65/143 | |
46 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | HMPREF1127_1436 | DSM19678 | 66/144 | |
47 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Desulfosporosinus youngiae DSM 17734 |
DesyoDRAFT_3696 | DSM17734 | 67/145 |
48 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | DesyoDRAFT_3695 | DSM17734 | 68/146 | |
49 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | DesyoDRAFT_3697 | DSM17734 | 69/147 | |
50 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Peptoniphilus indolicus ATCC 29427 |
fldB HMPREF9129_0353 | KCTC15023 | 70/148 |
51 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | HMPREF9129_0354 | KCTC15023 | 71/149 | |
52 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | HMPREF9129_0352 | KCTC15023 | 72/150 | |
53 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Desulfosporosinus meridiei (strain ATCC BAA-275 / DSM 13257 / NCIMB 13706 / S10) |
Desmer_1800 | DSM13257 | 73/151 |
54 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Desmer_1801 | DSM13257 | 74/152 | |
55 | 4.2.1.- | Enoyl-CoA hydratase | Desmer_1799 | DSM13257 | 75/153 | |
56 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Acidaminococcus fermentans |
hgdA Acfer_1815 | DSM20731 | 76/154 |
57 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | hgdB Acfer_1815 | DSM20731 | 77/155 | |
58 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | hgdC Acfer_1815 | DSM20731 | 78/156 | |
59 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Carboxydothermus hydrogenoformans |
hgdB CHY_0846 | DSM6008 | 79/157 |
60 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | hgdA CHY_0847 | DSM6008 | 80/158 | |
61 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | hgdC CHY_0848 | DSM6008 | 81/159 | |
62 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Oscillibacter valericigenes |
hgdC OBV_10870 | DSM18026 | 82/160 |
63 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | hgdA OBV_10880 | DSM18026 | 83/161 | |
64 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | hgdB OBV_10890 | DSM18026 | 84/162 |
번호 | EC | 카테고리 | 소스 균주 | 유전자 | 구입처 | 서열* |
65 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Desulfosporosinus orientis (strain ATCC 19365 / DSM 765 / NCIMB 8382 / VKM B-1628) (Desulfotomaculum orientis) |
Desor_3092 | DSM765 | 85/163 |
66 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Desor_3093 | DSM765 | 86/164 | |
67 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Desor_3091 | DSM765 | 87/165 | |
68 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Peptostreptococcus anaerobius CAG:621 |
BN738_00824 | KCTC5182 | 88/166 |
69 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | BN738_00823 | KCTC5182 | 89/167 | |
70 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | BN738_00825 | KCTC5182 | 90/168 | |
71 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Chloroflexus aggregans (strain MD-66 / DSM 9485) | Cagg_1174 | DSM9485 | 91/169 |
72 | 4.2.1.17 | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Marivirga tractuosa (strain ATCC 23168 / DSM 4126 / NBRC 15989 / NCIMB 1408 / VKM B-1430 / H-43) (Microscilla tractuosa) (Flexibacter tractuosus) | Ftrac_3721 | KCTC2958 | 92/170 |
73 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Marinithermus hydrothermalis (strain DSM 14884 / JCM 11576 / T1) | Marky_1278 | DSM14884 | 93/171 |
74 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Chitinophaga pinensis (strain ATCC 43595 / DSM 2588 / NCIB 11800 / UQM 2034) | Cpin_6304 | KCTC3412 | 94/172 |
75 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Megasphaera elsdenii DSM 20460 | MELS_0744 | KCTC5187 | 95/173 |
76 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Megasphaera elsdenii DSM 20460 | MELS_0745 | KCTC5187 | 96/174 |
77 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Megasphaera elsdenii DSM 20460 | MELS_0746 | KCTC5187 | 97/175 |
78 | 4.2.1.- | 2-hydroxyglutaryl-CoA dehydratase | Chloroflexus aurantiacus (strain ATCC 29364 / DSM 637 / Y-400-fl) | Chy400_0108 | DSM635 | 98/176 |
79 | 4.2.1.- | enoyl-CoA hydrastase | Ruegeria pomeroyi DSS-3 | SP00147 | DSM15171 | 401/402 |
번호 | EC | 카테고리 | 소스 균주 | 유전자명 | 구입 | 서열* |
1 | 3.1.2.- | Acyl - CoA thioester hydrolase | E. coli | yciA | 보유 | 177/183 |
2 | 3.1.2.- | Acyl-CoA thioester hydrolase | Klebsiella oxytoca 10-5245 | HMPREF9689_01673 | KCTC1686 | 178/184 |
3 | 3.1.2.- | Acyl-CoA thioester hydrolase | Cronobacter turicensis | yciA | 보유 | 179/185 |
4 | 3.1.2.- | Acyl-CoA thioester hydrolase | Citrobacter freundii | D186_20262 | 보유 | 180/186 |
5 | 3.1.2.- | Acyl-CoA thioester hydrolase | Salmonella enterica | SeI_A1458 | DSM5569 | 181/187 |
6 | 3.1.2.- | Acyl-CoA thioester hydrolase | Shigella flexneri 1235-66 | SF123566_2028 | 보유 | 182/188 |
개체 (GenBank참조번호) |
유전자 기능 | |||||||
조절 |
미지 |
재활성화 (reactivation) |
미지 |
|||||
유전자 | 염기쌍 | 유전자 | 염기쌍 | 유전자 | 염기쌍 | 유전자 | 염기쌍 | |
K.pneumoniae(U30903) | orf2c | 7116-7646 | orf2b | 6762-7115 | orf2a | 5125-5556 | ||
K.pneumoniae(U60992) | GdrB | |||||||
C.freundii(U09771) | dhaR | 3746-5671 | orfW | 5649-6179 | orfX | 6180-6533 | orfY | 7736-8164 |
C.pasteurianum(AF051373) | ||||||||
C.pasteurianum(AF026270) | orfW | 210-731 | orfX | 1-196 | orfY | 746-1177 | ||
S.typhimurium(AF026270) | pduH | 8274-8645 | ||||||
K.oxytoca(AF017781) | DdrB | 2063-2440 | ||||||
K.oxytoca(AF051373) |
개체 (GenBank참조번호) |
유전자 기능 | |||||||
데히드라타제,α | 데히드라타제,α |
데히드라타제,α | 재활성화 (reactivation) |
|||||
유전자 | 염기쌍 | 유전자 | 염기쌍 | 유전자 | 염기쌍 | 유전자 | 염기쌍 | |
K.pneumoniae(U30903) | dhaB1 | 3047-4714 | dhaB2 | 2450-2890 | dhaB3 | 2022-2447 | orf2a | 186-2009 |
K.pneumoniae(U60992) | gldA | 121-1788 | gldB | 1801-2382 | gldB | 2388-2813 | gdrA | |
C.freundii(U09771) | dhaB | 8556-10223 | dhaC | 10235-10819 | dhaC | 10822-11250 | orfY | 11261-13072 |
C.pasteurianum(AF051373) | dhaB | 84-1748 | dhaC | 1779-2318 | dhaC | 2333-2773 | 2790-4598 | |
C.pasteurianum(AF026270) | orfY | |||||||
S.typhimurium(AF026270) | pduC | 3557-5221 | pduD | 5232-5906 | pduD | 5921-6442 | 6452-8284 | |
K.oxytoca(AF017781) | 241-2073 | |||||||
K.oxytoca(AF051373) | pddA | 121-1785 | pddB | 1796-2470 | pddB | 2485-3006 |
도 2 및 도 3은 pETDuetTM-1/MELS_1449_yciA_YdiF의 지도 및 부분 확대된 도면이다.
도 4는 본 실시예의 대장균에서 포도당 또는 글리세롤로부터 아크릴산의 생산의 예측 경로를 나타낸 도면이다.
번호 | 포워드 / 리버스 프라이머 (서열번호) |
1 | 206/207 |
2 | 208/209 |
3 | 210/211 |
4 | 212/213 |
5 | 214/215 |
6 | 216/217 |
7 | 218/219 |
8 | 220/221 |
9 | 222/223 |
10 | 224/225 |
번호 | 유전자명 | 소비된 acetyl - CoA (몰%) |
1 | pct | 62±4.0 |
2 | ydiF b1694 JW1684 | 66±4.0 |
3 | pct | 53±3.0 |
4 | acuN | 17±4.4 |
5 | SPO2934 | 32±2.7 |
6 | DesyoDRAFT_3698 | 37±2.4 |
7 | HMPREF9129_0351 | 33±3.8 |
8 | Desmer_1798 | 28±4.9 |
9 | Desor_3090 | 27±3.6 |
10 | BN738_00826 | 35±3.2 |
번호 | 서열번호: 포워드/리버스 |
번호 | 서열번호: 포워드/리버스 |
번호 | 서열번호: 포워드/리버스 |
1 | 226/227 | 28 | 280/ 281 | 55 | 334/335 |
2 | 228/229 | 29 | 282/ 283 | 56 | 336/337 |
3 | 230/231 | 30 | 284/285 | 57 | 338/339 |
4 | 232/233 | 31 | 286/287 | 58 | 340/341 |
5 | 234/235 | 32 | 288/289 | 59 | 342/343 |
6 | 236/237 | 33 | 290/291 | 60 | 344/345 |
7 | 238/239 | 34 | 292/293 | 61 | 346/347 |
8 | 240/241 | 35 | 294/295 | 62 | 348/349 |
9 | 242/243 | 36 | 296/297 | 63 | 350/351 |
10 | 244/245 | 37 | 298/299 | 64 | 352/353 |
11 | 246/247 | 38 | 300/301 | 65 | 354/355 |
12 | 248/249 | 39 | 302/303 | 66 | 356/357 |
13 | 250/251 | 40 | 304/305 | 67 | 358/359 |
14 | 252/253 | 41 | 306/307 | 68 | 360/361 |
15 | 254/255 | 42 | 308/309 | 69 | 362/363 |
16 | 256/257 | 43 | 310/311 | 70 | 364/365 |
17 | 258/259 | 44 | 312/313 | 71 | 366/367 |
18 | 260/261 | 45 | 314/315 | 72 | 368/369 |
19 | 262/263 | 46 | 316/317 | 73 | 370/371 |
20 | 264/265 | 47 | 318/319 | 74 | 372/373 |
21 | 266/267 | 48 | 320/321 | 75 | 374/375 |
22 | 268/269 | 49 | 322/323 | 76 | 376/377 |
23 | 270/271 | 50 | 324/325 | 77 | 378/379 |
24 | 272/273 | 51 | 326/327 | 78 | 380/381 |
25 | 274/275 | 52 | 328/329 | 79 | 403/404 |
26 | 276/277 | 53 | 330/331 | ||
27 | 278/279 | 54 | 332/333 |
번호 | 소비된 NAD(P)H(몰%) | 번호 | 소비된 NAD(P)H(몰%) | 번호 | 소비된 NAD(P)H(몰%) |
1 | 0.2 | 28 | 0.2 | 55 | 0.2 |
2 | 10.3 | 29 | 0.2 | 56 | 0.2 |
3 | 0.2 | 30 | 0.2 | 57 | 0.2 |
4 | 12.1 | 31 | 0.2 | 58 | 0.2 |
5 | 12.1 | 32 | 0.2 | 59 | 0.2 |
6 | 13.4 | 33 | 0.2 | 60 | 0.2 |
7 | 2.3 | 34 | 0.2 | 61 | 0.2 |
8 | 0.2 | 35 | 0.2 | 62 | 0.2 |
9 | 0.2 | 36 | 0.2 | 63 | 0.2 |
10 | 0.2 | 37 | 0.2 | 64 | 0.2 |
11 | 0.2 | 38 | 1.65 | 65 | 0.2 |
12 | 0.2 | 39 | 14.6 | 66 | 0.2 |
13 | 0.2 | 40 | 0.2 | 67 | 0.2 |
14 | 0.2 | 41 | 0.2 | 68 | 0.2 |
15 | 0.2 | 42 | 0.2 | 69 | 0.2 |
16 | 0.2 | 43 | 0.2 | 70 | 0.2 |
17 | 0.2 | 44 | 0.2 | 71 | 0.2 |
18 | 0.2 | 45 | 0.2 | 72 | 0.2 |
19 | 0.2 | 46 | 0.2 | 73 | 0.2 |
20 | 0.2 | 47 | 0.2 | 74 | 0.2 |
21 | 0.2 | 48 | 0.2 | 75 | 13.4 |
22 | 0.2 | 49 | 0.2 | 76 | 13.4 |
23 | 0.2 | 50 | 0.2 | 77 | 13.4 |
24 | 0.2 | 51 | 0.2 | 78 | 0.2 |
25 | 0.2 | 52 | 0.2 | 79 | 10.95 |
26 | 0.2 | 53 | 0.2 | ||
27 | 0.2 | 54 | 0.2 |
번호 | 서열번호:포워드/리버스 |
1 | 382/383 |
2 | 384/385 |
3 | 386/387 |
4 | 388/389 |
5 | 390/391 |
6 | 392/393 |
번호 | 생성된 CoA 양* |
1 | 0.7 |
2 | 0.2 |
3 | 0.06 |
4 | 0.06 |
5 | 0.1 |
6 | 0.2 |
Claims (20)
- 유전적으로 조작되지 않은 세포에 비하여 3-히드록시프로피온산 (3-HP)을 3-히드록시프로피오닐-CoA (3-HP-CoA)로 전환하는 것을 촉매하는 CoA 트랜스페라제 (CoA transferase), 3-HP-CoA를 아크릴릴-CoA (acrylyl-CoA)로 전환하는 것을 촉매하는 3-HP-CoA 데히드라타제, 및 아크릴릴-CoA를 아크릴레이트로 전환하는 것을 촉매하는 효소의 활성이 증가되어 있는, 아크릴레이트 생산능을 갖는 미생물로서,
상기 미생물은 CoA 트랜스페라제, 3-HP-CoA 데히드라타제, 및 아크릴릴-CoA를 아크릴레이트로 전환하는 것을 촉매하는 효소를 코딩하는 외인성 폴리뉴클레오티드가 도입된 것이고,
상기 CoA 트랜스페라제는 3-HP를 3-HP-CoA로 전환하는 것을 촉매하는 활성이 그 역반응을 촉매하는 것보다 높은 것이고,
상기 3-HP-CoA 데히드라타제는 3-HP-CoA를 아크릴릴-CoA로 전환하는 것을 촉매하는 활성이 그 역반응을 촉매하는 것보다 높은 것이고,
상기 아크릴릴-CoA를 아크릴레이트로 전환하는 것을 촉매하는 효소는 아크릴릴-CoA를 아크릴레이트로 전환하는 것을 촉매하는 활성이 그 역반응을 촉매하는 것보다 높은 것이고,
상기 미생물은 글리세롤을 3-프로피온산 알데히드 (3-propionic aldehyde: 3-HPA)로 전환하는 반응을 촉매하는 효소를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 및 3-HPA를 3-HP로 전환하는 반응을 촉매하는 효소를 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 도입되어 있어, 3-HP 생산능을 갖는 것인 아크릴레이트 생산능을 갖는 미생물. - 청구항 1에 있어서, 상기 CoA 트랜스페라제는 서열번호 1 내지 10의 아미노산 서열로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 갖는 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 CoA 트랜스페라제는 EC 2.8.3.8, EC 3.1.2.-, 또는 EC 6.2.1.7에 속하는 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 3-HP-CoA 데히드라타제는 서열번호 21 내지 98, 및 401의 아미노산 서열로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 갖는 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 3-HP-CoA 데히드라타제는 EC 4.2.1.17, EC 4.2.1.55, 및 EC 4.2.1.166를 포함한, EC 4.2.1.-에 속하는 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 아크릴릴-CoA를 아크릴레이트로 전환하는 것을 촉매하는 효소는 서열번호 177 내지 182의 아미노산 서열로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 갖는 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 아크릴릴-CoA를 아크릴레이트로 전환하는 것을 촉매하는 효소는 EC 3.1.2.4를 포함한, EC 3.1.2-에 속하는 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 아크릴릴-CoA를 아크릴레이트로 전환하는 것을 촉매하는 효소는 3-HP-CoA 히드롤라제 (3-HP-CoA hydrolase), 또는 3-히드록시이소부티릴-CoA 히드롤라제 (3-hydroxyisobutyryl-CoA hydrolase)인 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, CoA 트랜스페라제, 3-HP-CoA 데히드라타제, 및 아크릴릴-CoA를 아크릴레이트로 전환하는 것을 촉매하는 효소의 활성의 증가는 이들 효소를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 발현 증가에 의한 것인 미생물.
- 삭제
- 청구항 1에 있어서, 상기 미생물은 에세리키아 (Esherichia), 루멘박테리아,
코리네박테리움 (Corynebacterium) 속 및 브레비박테리움 (Brevibacterium) 속으로
구성된 군으로부터 선택되는 것인 미생물. - 청구항 1에 있어서, 상기 미생물은 아크릴레이트를 분해하거나 다른 산물로 전환하는 경로에 관여하는 하나 이상의 효소의 활성이 감소된 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 미생물은 아크릴레이트를 분해하거나 다른 산물로 전환하는 경로에 관여하는 하나 이상의 효소를 코딩하는 유전자가 제거 또는 파괴되어 있는 것인 미생물.
- 삭제
- 청구항 1에 있어서, 상기 미생물은 대장균인 것인 미생물.
- 청구항 1에 있어서, 글리세롤을 3-HPA로 전환하는 반응을 촉매하는 효소는 dhaB이고, 3-HPA를 3-HP로 전환하는 반응을 촉매하는 효소는 AldH 또는 gabD인 것인 미생물.
- 청구항 1의 미생물을 배지 중에서 배양하는 단계;를 포함하는, 아크릴레이트를 생산하는 방법.
- 청구항 17에 있어서, 배양물로부터 아크릴레이트를 회수하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
- 청구항 17에 있어서, 상기 미생물은 아크릴레이트를 다른 산물로 전환하는 경로를 더 포함하는 것이고, 생산된 아크릴레이트를 다른 산물로 전환하는 단계를 더 포함하는 것인 방법.
- 청구항 19에 있어서, 다른 산물은 아크릴레이트 에스테르인 것인 방법.
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