KR102141546B1 - Method of predicting hearing loss prognosis and kit using the same - Google Patents
Method of predicting hearing loss prognosis and kit using the same Download PDFInfo
- Publication number
- KR102141546B1 KR102141546B1 KR1020180168281A KR20180168281A KR102141546B1 KR 102141546 B1 KR102141546 B1 KR 102141546B1 KR 1020180168281 A KR1020180168281 A KR 1020180168281A KR 20180168281 A KR20180168281 A KR 20180168281A KR 102141546 B1 KR102141546 B1 KR 102141546B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- hearing loss
- prognosis
- kit
- predicting
- tnf
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 title claims abstract description 68
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 title claims abstract description 67
- 231100000888 hearing loss Toxicity 0.000 title claims abstract description 66
- 230000010370 hearing loss Effects 0.000 title claims abstract description 66
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 60
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 title claims abstract description 45
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims abstract description 36
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims abstract description 36
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 12
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims description 48
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 claims description 48
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 48
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 48
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 48
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 25
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 22
- 206010061373 Sudden Hearing Loss Diseases 0.000 claims description 15
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 12
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 6
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 claims description 6
- 238000002848 electrochemical method Methods 0.000 claims description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 5
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 claims description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 4
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 claims description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 4
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 claims description 4
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 claims description 4
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 claims description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 4
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 claims description 4
- 238000002493 microarray Methods 0.000 claims description 4
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 claims description 4
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 claims description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 4
- 238000003345 scintillation counting Methods 0.000 claims description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 3
- 208000032041 Hearing impaired Diseases 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 claims description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 46
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 31
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 13
- 206010011891 Deafness neurosensory Diseases 0.000 description 10
- 208000009966 Sensorineural Hearing Loss Diseases 0.000 description 8
- 231100000879 sensorineural hearing loss Toxicity 0.000 description 8
- 208000023573 sensorineural hearing loss disease Diseases 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 238000012074 hearing test Methods 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000007477 logistic regression Methods 0.000 description 5
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 208000008719 Mixed Conductive-Sensorineural Hearing Loss Diseases 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 3
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 3
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000012093 association test Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002795 fluorescence method Methods 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 2
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 2
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010050337 Cerumen impaction Diseases 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000027530 Meniere disease Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 206010065835 Oesophageal fistula Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 108091027568 Single-stranded nucleotide Proteins 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 208000027625 autoimmune inner ear disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000004097 bone metabolism Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000002939 cerumen Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 231100000895 deafness Toxicity 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 210000000883 ear external Anatomy 0.000 description 1
- 210000003027 ear inner Anatomy 0.000 description 1
- 210000000959 ear middle Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001667 episodic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005861 gene abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 208000022949 middle ear disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 238000007500 overflow downdraw method Methods 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 1
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- YVSWPCCVTYEEHG-UHFFFAOYSA-N rhodamine B 5-isothiocyanate Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=C(N=C=S)C=C1C(O)=O YVSWPCCVTYEEHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 208000023088 sudden sensorineural hearing loss Diseases 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003582 temporal bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- QQJLHRRUATVHED-UHFFFAOYSA-N tramazoline Chemical compound N1CCN=C1NC1=CC=CC2=C1CCCC2 QQJLHRRUATVHED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001262 tramazoline Drugs 0.000 description 1
- 210000003454 tympanic membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6863—Cytokines, i.e. immune system proteins modifying a biological response such as cell growth proliferation or differentiation, e.g. TNF, CNF, GM-CSF, lymphotoxin, MIF or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/52—Assays involving cytokines
- G01N2333/525—Tumor necrosis factor [TNF]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/52—Assays involving cytokines
- G01N2333/54—Interleukins [IL]
- G01N2333/5406—IL-4
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/14—Disorders of ear, nose or throat
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
난청 예후 예측방법으로, (a) 난청환자로부터 수득되는 시료의 사이토카인의 농도를 측정하는 단계, (b) 상기 측정된 사이토카인의 농도에 기초하여 기준값을 도출하는 단계, 및 (c) 상기 기준값 이상인 경우, 치료적 효과가 없을 것으로 예측하는 단계를 포함하고, 상기 사이토카인은 IL-4 및 TNF-α 중 어느 하나 이상인, 난청 예후 예측방법, 이를 이용한 키트 및 난청 예후 예측용 조성물을 제공한다. As a method for predicting prognosis of hearing loss, (a) measuring a cytokine concentration in a sample obtained from a hearing loss patient, (b) deriving a reference value based on the measured cytokine concentration, and (c) the reference value In the case of abnormality, it includes a step of predicting that there will be no therapeutic effect, and the cytokine provides a method for predicting a hearing loss prognosis, a kit using the same, and a composition for predicting a hearing loss prognosis.
Description
난청 예후 예측방법으로, (a) 난청환자로부터 수득되는 시료의 사이토카인의 농도를 측정하는 단계, (b) 상기 측정된 사이토카인의 농도에 기초하여 기준값을 도출하는 단계, 및 (c) 상기 기준값 이상인 경우, 치료적 효과가 없을 것으로 예측하는 단계를 포함하고, 상기 사이토카인은 IL-4 및 TNF-α 중 어느 하나 이상인, 난청 예후 예측방법, 이를 이용한 키트 및 난청 예후 예측용 조성물이 개시된다.As a method for predicting prognosis of hearing loss, (a) measuring a cytokine concentration in a sample obtained from a hearing loss patient, (b) deriving a reference value based on the measured cytokine concentration, and (c) the reference value If the abnormality, including the step of predicting that there will be no therapeutic effect, the cytokine IL-4 and TNF-α any one or more, methods for predicting hearing loss prognosis, kits using the same and compositions for predicting hearing loss are disclosed.
난청은 그 발생 시기에 따라, 출생시에 난청이 동반되는 선청성 난청과 성장과정에서 난청이 동반되는 후천성 난청으로 분류된다. 일반으로는, 원인 및 증상을 기준으로 분류되며, 크게 전음성 난청, 감각신경성 난청 및 혼합성 난청으로 분류된다. Hearing loss is classified into pre-hearing hearing loss accompanied by hearing loss at birth and acquired hearing loss accompanied by hearing loss in the growth process. In general, it is classified on the basis of the cause and symptoms, and is largely classified into pre-neural hearing loss, sensorineural hearing loss and mixed hearing loss.
전음성 난청은 외이와 중이의 손상에 의한 것으로, 일반적으로 발생빈도가 높은 질환에 속한다. 주로 알려져있는 중이염, 외상성 고막천공 등이 전음성 난청의 일종으로, 이과적인 수술을 통해 일부 증상은 치료가 가능하다. 전음성 난청의 원인은 귀를 통한 세균 등의 감염, 고막 천공과 같은 외상성 손상 혹은 과다한 귀지에서 비롯한 것일 수 있다. Prone hearing loss is caused by damage to the outer and middle ear, and is generally a disease with high incidence. Mainly known otitis media, traumatic tympanic perforation, etc., are a type of electroneural hearing loss, and some symptoms can be treated through a surgical procedure. Prone hearing loss may be caused by infections such as bacteria through the ear, traumatic damage such as perforation of the eardrum, or excessive earwax.
감각신경성 난청은 내이, 청신경의 손상에 의한 것으로, 일시적으로 발생하고 발생빈도가 높은 전음성 난청과는 달리, 이과적 치료가 어려워 영구적으로 진행되어 장애가 동반될 수 있는 질환에 속한다. 발생원인은, 주로 과다한 소음 노출과 심각한 감염에 의한 것일 수 있으며, 다른 질병, 종양에 의한 합병증일 수도 있다. 혹은, 약물 복용에 의한 부장용이거나, 유전자 이상에 의한 것일 수 있다. Sensorineural hearing loss is caused by damage to the inner ear and hearing nerves, and unlike episodic hearing loss, which occurs temporarily and has a high incidence, it is difficult to undergo medical treatment and belongs to a disease that can be permanently progressed and impaired. The cause of the occurrence may be mainly due to excessive noise exposure and serious infections, or may be complications from other diseases or tumors. Or, it may be due to the use of a drug or a gene abnormality.
또, 혼합성 난청은 상술한 전음성 난청 및 감각신경성 난청이 동반되어 나타난 경우를 의미한다. In addition, mixed hearing loss refers to cases in which the above-mentioned pre-neural hearing loss and sensorineural hearing loss are accompanied.
특히, 돌발성 난청은 대략 3일 이내에 갑작스럽게 발병하고 원인불명인 감각신경성 난청의 일종으로, 1944년에 처음 보고된 이래로 현재까지도 그 정확한 원인 및 예후에 대해 자세히 밝혀지지 않았으며, 별 치료없이 회복되는 경우도 있으나, 어떠한 치료방법에도 치료적 효과가 없는 경우까지 그 예후가 매우 다양하다. In particular, sudden hearing loss is a type of sensorineural hearing loss that suddenly develops and is unexplained within approximately 3 days, and since its first report in 1944, the exact cause and prognosis have not been revealed to date, and recover without much treatment. In some cases, the prognosis is very diverse until there is no therapeutic effect in any treatment method.
현재까지 알려진 돌발성 난청의 예후로, 현기증이 동반될 때 그리고 15세 이하 또는 60세 이상의 연령에서 예후가 좋지 않다는 것(Byl FM. Seventy-six cases of presumed sudden hearing loss. Prognosis and incidence. Laryngoscope 1977;87:817-25.)이고, 다른 하나는, 초기 청력손실이 클수록 예후가 불량한 것(Sheehy JL. Vasodilator therapy in sensorineural hearing loss. Laryngoscope 1960;70:885-914.)이며, 또 다른 하나로는 하강형의 청력도에서 예후가 좋지 않은 것(Mattox DE, Simmons FB. Natural history of sudden sensorineural hearing loss. Ann Otol Rhinol Laryngol 1977;86:463-80.)등이 비교적 널리 인정되고 있다.Prognosis and incidence.Laryngoscope 1977; Byl FM.Seventy-six cases of presumed sudden hearing loss. 87:817-25.), and the other, the greater the initial hearing loss, the poorer the prognosis (Sheehy JL. Vasodilator therapy in sensorineural hearing loss.Laryngoscope 1960;70:885-914.) The poor prognosis in the older brother's audiogram (Mattox DE, Simmons FB. Natural history of sudden sensorineural hearing loss. Ann Otol Rhinol Laryngol 1977; 86:463-80.) is relatively widely accepted.
종래에는 위와 같은 난청에 대해 치료하는 방법이나 진단방법에 대한 연구가 비교적 많이 진행되어 왔다. 그러나, 감각신경성 난청은 치료시기를 놓치면 회복이 어려운 경우가 많고, 특히나 돌발성 난청의 경우에는, 치료시기를 놓치면 30% 가량은 회복이 되지 않아 영구적으로 장애나 손상이 남는 경우가 많다. In the related art, research on a method of treating or diagnosing hearing loss as described above has been relatively conducted. However, sensorineural hearing loss is often difficult to recover if the treatment time is missed, and in the case of sudden hearing loss, about 30% is not recovered when the treatment time is missed, resulting in permanent disability or damage.
따라서, 이과적 치료가 어려운 감각신경성 난청이 발병하는 경우, 치료적 효과가 없는 치료방법으로 지속적인 치료를 하면서 경과를 지켜보는 것은, 환자에 정신적 경제적 부담을 가중시킬 수 있다. Therefore, in the case of sensorineural hearing loss, which is difficult to treat medically, it is possible to increase the psychological and economic burden on the patient by continuously monitoring the course of treatment with a treatment method having no therapeutic effect.
즉, 치료시에 예후를 예측함으로써 치료적 효과가 있는지 여부를 빠르게 판단하여 환자에 알맞은 치료를 제공하는 것이 바람직하다. That is, it is desirable to quickly determine whether or not there is a therapeutic effect by predicting the prognosis at the time of treatment to provide a treatment suitable for the patient.
즉, 난청환자로부터 수득되는 시료를 이용하여 치료적 효과가 있을지를 미리 예측하여, 환자에 필요한 치료적 처치를 가능하게 하면서도, 경제적인 부담을 줄여줄 수 있는 방안의 모색이 필요한 실정이다.That is, it is necessary to find a way to reduce the economic burden while enabling the therapeutic treatment required for the patient by predicting in advance whether there is a therapeutic effect using a sample obtained from a hearing-impaired patient.
본 발명의 목적은 난청 예후 예측방법으로, (a) 난청환자로부터 수득되는 시료의 사이토카인의 농도를 측정하는 단계 (b) 상기 측정된 사이토카인의 농도에 기초하여 기준값을 도출하는 단계 및 (c) 상기 기준값 이상인 경우, 치료적 효과가 없을 것으로 예측하는 단계를 포함하고, 상기 사이토카인은 IL-4 및 TNF-α 중 어느 하나 이상인, 난청 예후 예측방법 및 이를 이용한 키트를 제공하는 것이다.An object of the present invention is a method for predicting prognosis of hearing loss, comprising: (a) measuring the concentration of cytokines in a sample obtained from a hearing loss patient (b) deriving a reference value based on the measured concentration of cytokines and (c) ) If it is more than the reference value, it includes the step of predicting that there will be no therapeutic effect, and the cytokine is to provide a method for predicting a hearing loss prognosis and a kit using the same, which is at least one of IL-4 and TNF-α.
본 발명의 다른 목적은 IL-4 발현수준을 측정하는 제제 또는 TNF-α 발현수준을 측정하는 제제를 적어도 하나 포함하는, 난청 예후 예측용 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a composition for predicting hearing loss prognosis, comprising at least one agent that measures IL-4 expression level or TNF-α expression level.
그러나, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 해당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.However, the problems to be solved by the present invention are not limited to the problems mentioned above, and other problems not mentioned will be clearly understood by those having ordinary knowledge in the art from the following description.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 난청 예후 예측방법으로, (a) 난청환자로부터 수득되는 시료의 사이토카인의 농도를 측정하는 단계; (b) 상기 측정된 사이토카인의 농도에 기초하여 기준값을 도출하는 단계; 및 (c) 상기 기준값 이상인 경우, 치료적 효과가 없을 것으로 예측하는 단계; 를 포함하고, 상기 사이토카인은 IL-4 및 TNF-α 중 어느 하나 이상인, 난청 예후 예측방법이 제공된다.According to an embodiment of the present invention, a method for predicting hearing loss prognosis, comprising: (a) measuring the concentration of cytokines in a sample obtained from a hearing loss patient; (b) deriving a reference value based on the measured concentration of cytokines; And (c) predicting that there will be no therapeutic effect if it is equal to or greater than the reference value. Including, the cytokine IL-4 and TNF-α any one or more, hearing loss prognosis prediction method is provided.
일 측에 따르면, 상기 기준값은, IL-4 수치가 0.225 또는 TNF-α 수치가 5.155일 수 있다. According to one side, the reference value may have an IL-4 value of 0.225 or a TNF-α value of 5.155.
일 측에 따르면, 상기 난청은 돌발성 난청일 수 있다. According to one side, the hearing loss may be a sudden hearing loss.
일 측에 따르면, 상기 측정은, ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay), 비색법(colorimetric method), 전기화학법(electrochemical method), 형광법(fluorimetric method), 발광법(luminometry), 입자계수법(particle counting method), 육안측정법(visual assessment), 섬광계수법(scintillation counting method) 및 조직면역염색법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나에 의한 것일 수 있다. According to one side, the measurement, ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), colorimetric method (colorimetric method), electrochemical method (electrochemical method), fluorescence method (fluorimetric method), luminescence (luminometry), particle counting method (particle counting method) ), visual assessment, scintillation counting method, and tissue immunostaining method.
일 측에 따르면, 상기 시료는, 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 비펩티드성 화합물, 활성 화합물, 발효 생산물, 세포 추출액, 식물 추출액, 동물조직 추출액, 혈액, 혈장, 혈청, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사 산물 및 생활성 분자로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.According to one side, the sample, natural compound, synthetic compound, RNA, DNA, polypeptide, enzyme, protein, ligand, non-peptidic compound, active compound, fermentation product, cell extract, plant extract, animal tissue extract, blood, It can be any one selected from the group consisting of plasma, serum, antibodies, antigens, bacterial or fungal metabolites and bioactive molecules.
본 발명의 다른 일 실시예에 따르면, 상술한 방법 중 어느 하나의 방법을 이용하는 난청 예후 예측용 키트가 제공된다. According to another embodiment of the present invention, a kit for predicting hearing loss prognosis using any one of the methods described above is provided.
일 측에 따르면, 상기 키트는, 난청 예측인자인 IL-4 또는 TNF-α의 발현수준을 측정하는 제제를 포함하는 것일 수 있다.According to one side, the kit may include an agent that measures the expression level of IL-4 or TNF-α, which is a predictor of hearing loss.
일 측에 따르면, 상기 제제는, 프라이머, 프로브 또는 항체 중 적어도 하나를 포함할 수 있다. According to one side, the formulation may include at least one of a primer, probe, or antibody.
일 측에 따르면, 상기 키트는, 상기 키트는, 면역크로마토그래피 스트립 키트, 루미넥스 어세이 키트, 단백질 마이크로어레이 키트, ELISA 키트 및 면역학적 도트 키트로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인, 난청 예후 예측용 키트.According to one side, the kit, the kit is any one selected from the group consisting of immunochromatography strip kit, Luminex assay kit, protein microarray kit, ELISA kit and immunological dot kit, predicting hearing loss prognosis Dragon kit.
본 발명의 또 다른 일 실시예에 따르면, IL-4 발현수준을 측정하는 제제; 또는 TNF-α 발현수준을 측정하는 제제를 적어도 하나 포함하는, 난청 예후 예측용 조성물이 제공된다.According to another embodiment of the present invention, an agent for measuring IL-4 expression level; Or a composition for predicting hearing loss prognosis is provided, comprising at least one agent that measures the level of TNF-α expression.
본 발명을 이용하면 현재 이용가능한 데이터로부터 돌발성 난청의 회복가능성을 예측할 수 있다. 또, 시료로부터 획득되는 생체정보 항목의 불확실성을 해결하면서 돌발성 난청의 예후를 예측함으로써, 돌발성 난청환자의 치료효율을 높여 정신적, 경제적인 부담을 덜어줄 수 있다. 구체적로는 IL-4 또는 TNF-α가 과발현되는 경우, 치료적 효과가 없을 것으로 판단하여, 고위험군으로 분류하여 증상 초반부터 적극적인 치료를 시행할 수 있어, 향상된 치료효과를 기대할 수 있다.Using the present invention, it is possible to predict the recoverability of sudden hearing loss from currently available data. In addition, by predicting the prognosis of the sudden hearing loss while solving the uncertainty of the bio-information item obtained from the sample, it is possible to increase the therapeutic efficiency of patients with sudden hearing loss and relieve the mental and economic burden. Specifically, when IL-4 or TNF-α is over-expressed, it is determined that there is no therapeutic effect, and it can be classified as a high-risk group, and active treatment can be performed from the beginning of symptoms, so that an improved therapeutic effect can be expected.
그러나 본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.However, it should be understood that the effects of the present invention are not limited to the above-described effects, and include all effects that can be deduced from the configuration of the invention described in the detailed description or claims of the present invention.
도 1은 치료 전 청력기능에 따라 환자를 분류한 것을 나타낸 것이다.
도 2는 회복군과 비회복군으로부터 수득되는 시료의 사이토카인 농도를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 IL-4의 ROC 커브를 나타낸 것이다.
도 4는 TNF-α 의 ROC 커브를 나타낸 것이다.
도 5는 IL-4의 기준값을 기준으로 회복군 및 비회복군의 분포를 나타낸 것이다.
도 6은 TNF-α 기준값을 기준으로 회복군 및 비회복군의 분포를 나타낸 것이다.
도 7은 로지스틱 회귀분석 결과 IL-4 및 TNF-α의 기준값 이상에서 오즈비(Odds ratio)를 나타낸 것이다.1 shows that patients are classified according to hearing function before treatment.
Figure 2 shows the results of measuring the cytokine concentration of the samples obtained from the recovery group and the non-recovery group.
3 shows the ROC curve of IL-4.
Figure 4 shows the ROC curve of TNF-α.
Figure 5 shows the distribution of the recovery group and the non-recovery group based on the reference value of IL-4.
6 shows the distribution of the recovery group and the non-recovery group based on the TNF-α reference value.
Figure 7 shows the odds ratio (Odds ratio) above the reference value of IL-4 and TNF-α as a result of logistic regression analysis.
이하에서, 첨부된 도면을 참조하여 실시예들을 상세하게 설명한다. 그러나, 실시예들에는 다양한 변경이 가해질 수 있어서 특허출원의 권리 범위가 이러한 실시예들에 의해 제한되거나 한정되는 것은 아니다. 실시예들에 대한 모든 변경, 균등물 내지 대체물이 권리 범위에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.Hereinafter, embodiments will be described in detail with reference to the accompanying drawings. However, various changes may be made to the embodiments, and the scope of the patent application right is not limited or limited by these embodiments. It should be understood that all modifications, equivalents, or substitutes for the embodiments are included in the scope of rights.
실시예에서 사용한 용어는 단지 설명을 목적으로 사용된 것으로, 한정하려는 의도로 해석되어서는 안된다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.The terms used in the examples are used for illustrative purposes only and should not be construed as limiting. Singular expressions include plural expressions unless the context clearly indicates otherwise. In this specification, terms such as “include” or “have” are intended to indicate that a feature, number, step, operation, component, part, or combination thereof described on the specification exists, and that one or more other features are present. It should be understood that the existence or addition possibilities of fields or numbers, steps, operations, components, parts or combinations thereof are not excluded in advance.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.Unless otherwise defined, all terms used herein, including technical or scientific terms, have the same meaning as commonly understood by a person skilled in the art to which the embodiment belongs. Terms, such as those defined in a commonly used dictionary, should be interpreted as having meanings consistent with meanings in the context of related technologies, and should not be interpreted as ideal or excessively formal meanings unless explicitly defined in the present application. Does not.
또한, 첨부 도면을 참조하여 설명함에 있어, 도면 부호에 관계없이 동일한 구성 요소는 동일한 참조부호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 실시예를 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 실시예의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.In addition, in the description with reference to the accompanying drawings, the same reference numerals are assigned to the same components regardless of reference numerals, and redundant descriptions thereof will be omitted. In describing the embodiments, when it is determined that detailed descriptions of related known technologies may unnecessarily obscure the subject matter of the embodiments, the detailed descriptions will be omitted.
본 명세서에서 “프라이머” 또는 “프로브”는 단일가닥의 뉴클레오타이드를 의미하는 것으로서, 폴리머레이즈를 이용한 핵산의 증폭 또는 합성반응에서 상기 폴리머레이즈 3' 말단에 뉴클레오타이드가 공유결합에 의해 추가되어 연장되는 핵산분자를 의미한다.As used herein, “primer” or “probe” refers to a single-stranded nucleotide, and in the amplification or synthesis reaction of a nucleic acid using polymerase, a nucleotide at the 3'end of the polymerase is added and extended by a covalent bond. Means
본 명세서에서 “항체”는 단일클론 항체(모노클로날 항체, 완전 길이 단일클론항체 포함), 다클론 항체(폴리클로날 항체), 다중특이 항체(예를 들어 이중특이 항체), 및 항체단편(예를 들어, 가변 영역 및 목적하는 생물 활성을 나타내는 항체의 다른 부분)을 포함한다. 또한, 본 발명의 항체는 모노클로날 항체 및 폴리클로날 항체를 모두 포함하고, 키메라 항체, 인간화된 항체, 인간항체를 모두 포함한다. 바람직하게는 Fab, F(ab)2, Fab', F(ab')2, Fv, 디아바디(diabody), 나노바디(nanobody) 또는 scFv를 포함할 수 있으며, 보다 바람직하게는 scFv, Fab, 나노바디 및 면역글로불린 분자일 수 있다.As used herein, “antibody” refers to monoclonal antibodies (including monoclonal antibodies, full-length monoclonal antibodies), polyclonal antibodies (polyclonal antibodies), multispecific antibodies (eg bispecific antibodies), and antibody fragments ( For example, variable regions and other portions of the antibody that exhibit the desired biological activity). In addition, the antibody of the present invention includes both monoclonal antibodies and polyclonal antibodies, and includes chimeric antibodies, humanized antibodies, and human antibodies. Preferably, it may include Fab, F(ab)2, Fab', F(ab')2, Fv, diabody, nanobody or scFv, more preferably scFv, Fab, Nanobodies and immunoglobulin molecules.
본 명세서에서 민감도는 확률상 1인 케이스에 대해 1로 예측한 비율을 의미하고, 상기 특이도는, 확률상 0인 케이스에 대해 1로 잘못 예측한 비율을 의미한다. In the present specification, sensitivity means a ratio predicted as 1 for a case of
본 발명의 일 실시예에 따르면, 난청 예후 예측방법으로, (a) 난청환자로부터 수득되는 시료의 사이토카인의 농도를 측정하는 단계; (b) 상기 측정된 사이토카인의 농도에 기초하여 기준값을 도출하는 단계; 및 (c) 상기 기준값 이상인 경우, 치료적 효과가 없을 것으로 예측하는 단계; 를 포함하고, 상기 사이토카인은 IL-4 및 TNF-α 중 어느 하나 이상인, 난청 예후 예측방법이 제공된다.According to an embodiment of the present invention, a method for predicting hearing loss prognosis, comprising: (a) measuring the concentration of cytokines in a sample obtained from a hearing loss patient; (b) deriving a reference value based on the measured concentration of cytokines; And (c) predicting that there will be no therapeutic effect if it is equal to or greater than the reference value. Including, the cytokine IL-4 and TNF-α any one or more, hearing loss prognosis prediction method is provided.
일 측에 따르면, 상기 기준값은, IL-4 수치가 0.225 또는 TNF-α 수치가 5.155일 수 있다. According to one side, the reference value may have an IL-4 value of 0.225 or a TNF-α value of 5.155.
일 측에 따르면, 상기 난청은 돌발성 난청일 수 있다. According to one side, the hearing loss may be a sudden hearing loss.
일 측에 따르면, 상기 측정은, ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay), 비색법(colorimetric method), 전기화학법(electrochemical method), 형광법(fluorimetric method), 발광법(luminometry), 입자계수법(particle counting method), 육안측정법(visual assessment), 섬광계수법(scintillation counting method) 및 조직면역염색법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나에 의한 것일 수 있다. According to one side, the measurement, ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), colorimetric method (colorimetric method), electrochemical method (electrochemical method), fluorescence method (fluorimetric method), luminescence (luminometry), particle counting method (particle counting method) ), visual assessment, scintillation counting method, and tissue immunostaining method.
일 측에 따르면, 상기 시료는, 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 비펩티드성 화합물, 활성 화합물, 발효 생산물, 세포 추출액, 식물 추출액, 동물조직 추출액, 혈액, 혈장, 혈청, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사 산물 및 생활성 분자로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.According to one side, the sample, natural compound, synthetic compound, RNA, DNA, polypeptide, enzyme, protein, ligand, non-peptidic compound, active compound, fermentation product, cell extract, plant extract, animal tissue extract, blood, It can be any one selected from the group consisting of plasma, serum, antibodies, antigens, bacterial or fungal metabolites and bioactive molecules.
본 발명의 다른 일 실시예에 따르면, 상술한 방법 중 어느 하나의 방법을 이용하는 난청 예후 예측용 키트가 제공된다. According to another embodiment of the present invention, a kit for predicting hearing loss prognosis using any one of the methods described above is provided.
일 측에 따르면, 상기 키트는, 난청 예측인자인 IL-4 또는 TNF-α의 발현수준을 측정하는 제제를 포함하는 것일 수 있다.According to one side, the kit may include an agent that measures the expression level of IL-4 or TNF-α, which is a predictor of hearing loss.
일 측에 따르면, 상기 제제는, 프라이머, 프로브 또는 항체 중 적어도 하나를 포함할 수 있다. According to one side, the formulation may include at least one of a primer, probe, or antibody.
일 측에 따르면, 상기 키트는, 상기 키트는, 면역크로마토그래피 스트립 키트, 루미넥스 어세이 키트, 단백질 마이크로어레이 키트, ELISA 키트 및 면역학적 도트 키트로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 일 수 있다. According to one side, the kit, the kit may be any one selected from the group consisting of immunochromatography strip kit, Luminex assay kit, protein microarray kit, ELISA kit and immunological dot kit.
본 발명의 또 다른 일 실시예에 따르면, IL-4 발현수준을 측정하는 제제; 또는 TNF-α 발현수준을 측정하는 제제를 적어도 하나 포함하는, 난청 예후 예측용 조성물이 제공된다.According to another embodiment of the present invention, an agent for measuring IL-4 expression level; Or a composition for predicting hearing loss prognosis is provided, comprising at least one agent that measures the level of TNF-α expression.
본 발명은 난청의 예후 예측에 필요한 정보를 제공하기 위한 것으로, 본 발명에 기재된 “난청”의 범주는 별도로 한정되는 것은 아니나, 감각신경성 난청일 수 있으며, 더 구체적으로는 돌발성 난청임이 바람직하다. The present invention is intended to provide information necessary for predicting the prognosis of hearing loss, and the scope of “hearing loss” described in the present invention is not particularly limited, but may be sensorineural hearing loss, and more specifically, it is preferably sudden hearing loss.
하기에서는 본 발명의 방법을 이용하여 난청의 예후를 예측하는 방법을 자세히 설명하도록 한다. Hereinafter, a method of predicting the prognosis of hearing loss using the method of the present invention will be described in detail.
난청의 예후를 예측하기 위해서는, 난청환자의 청력을 측정하고, 이후 치료의 호전도를 평가하셔 총 4개의 등급으로 분류한다. 먼저, 청력을 측정하기 위해서는 난청환자로부터 시료를 수득해야 한다. 이 때 수득되는 시료는 생물학적 시료로, 구체적으로는 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 비펩티드성 화합물, 활성 화합물, 발효 생산물, 세포 추출액, 식물 추출액, 동물조직 추출액, 혈액, 혈장, 혈청, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사 산물 및 생활성 분자로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나임이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다. 이후, 수득된 시료에 포함된 사이토카인 농도를 측정하고, 측정된 농도에 기초하여 예후 예측에 필요한 기준값을 도출한다. 이 때, 사이토카인을 측정하는 측정 방법은 당업계에 알려진 통상의 방법이면 이용가능하고, 구체적으로는, ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay), 비색법(colorimetric method), 전기화학법(electrochemical method), 형광법(fluorimetric method), 발광법(luminometry), 입자계수법(particle counting method), 육안측정법(visual assessment), 섬광계수법(scintillation counting method) 및 조직면역염색법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법일 수 있으나 이에 제한되는 바는 아니다. 위와 같이 측정된 사이토카인의 농도로부터 난청환자의 회복에 유의미한 수치를 나타내는 사이토카인을 확인하고, 그 기준값을 도출함으로써 예후를 예측할 수 있다. 여기서 측정되는 사이토카인은, IL-1a, IL-1b, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12, TNF-α, TNF-β 또는 이와 동등의 유사인자가 포함된 의미일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 기준값의 도출은 공지된 통계방법을 이용할 수 있으며, 상기 통계방법은 T 검정(T-test), 선형대 선형 결합법(Linear-by-linear association test), 비모수통계방법(Mann-Whitney U test), 수용자 반응 특성 곡선(Receiver operating characteristic curve, ROC curve), 이분형 로지스틱 회귀분석(Binomial Logistic regression analysis) 중 적어도 하나일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 먼저, 난청환자를 치료전 청력 기능에 따라 등급을 분류한 뒤, 회복양상을 보이는 그룹과 그렇지 않은 그룹으로 나눈다. 가령, 청력 기능에 따른 등급은 완전회복, 부분회복, 약간회복, 비회복과 같이 4개의 등급으로 분류될 수 있다. 상기 4개의 등급을 2개의 그룹으로 이분하는 과정에서, 회복양상을 보이는 그룹은 회복군으로 명명하고, 상기 완전회복, 부분회복, 약간회복과 같이 비회복이 아닌 경우를 모두 회복군에 포함시켰다. 다른 한 개의 등급은 비회복군으로 명명하였다. 상기 회복군 및 비회복군의 시료로부터 사이토카인 농도를 측정하여 비교하였다. 이 때, 비모수통계방법(Mann-Whitney U test)를 이용하여 상기 회복군 및 비회복군을 비교하였으며, 그 결과, 다른 사이토카인은 유의한 차이를 보이지 않은 반면, IL-4 와 TNF-α의 수치가 회복군에 비해 비회복군에서 유의하게 높은 것으로 확인되었다. 전술한 내용으로 난청 예후 예측에 유의미한 것으로 확인된 IL-4 와 TNF-α의 농도를 기준으로 수용자 반응 특성 곡선(Receiver operating characteristic curve, ROC curve)을 구하였다. 도3 및 도 4는 각각 IL-4 및 TNF-α의 ROC 커브를 나타낸 것으로, 이를 분석하여 민감도(Sensitivity) 및 특이도(Specificity)를 종합적으로 고려한 가장 의미있는 컷-오프(cut-off) 값을 도출하였다. 이 때, 상기 민감도와 특이도가 모두 최대인 경우의 농도 값을 특정하여 IL-4 와 TNF-α 각각의 기준값을 도출하였다. In order to predict the prognosis of deafness, the hearing loss of patients with hearing loss is measured, and then the improvement of treatment is evaluated to classify them into four grades. First, in order to measure hearing, a sample must be obtained from a hearing-impaired patient. The sample obtained at this time is a biological sample, specifically, natural compounds, synthetic compounds, RNA, DNA, polypeptides, enzymes, proteins, ligands, non-peptidic compounds, active compounds, fermentation products, cell extracts, plant extracts, animal tissues It is preferably one selected from the group consisting of extracts, blood, plasma, serum, antibodies, antigens, metabolites of bacteria or fungi, and bioactive molecules, but is not limited thereto. Then, the cytokine concentration contained in the obtained sample is measured, and a reference value necessary for predicting prognosis is derived based on the measured concentration. At this time, the measurement method for measuring the cytokine can be used if it is a conventional method known in the art, specifically, ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), colorimetric method, electrochemical method, It may be any one selected from the group consisting of fluorimetric method, luminometry, particle counting method, visual assessment, scintillation counting method and tissue immunostaining method However, it is not limited thereto. From the concentration of cytokines measured as described above, it is possible to predict the prognosis by identifying cytokines showing significant values for recovery of deaf patients and deriving the reference values. The cytokines measured here are IL-1a, IL-1b, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12, TNF-α, TNF-β Alternatively, it may mean that similar factors are included, but is not limited thereto. Derivation of the reference value can use a known statistical method, the statistical method is a T-test (T-test), a linear-by-linear association test, a non-parametric method (Mann-Whitney U test) ), Receiver operating characteristic curve (ROC curve), Binomial Logistic regression analysis (Binomial Logistic regression analysis), but may be at least one. First, patients with hearing loss are classified according to their hearing function before treatment, and then divided into groups with and without recovery. For example, grades according to hearing function can be classified into four grades: complete recovery, partial recovery, slight recovery, and non-recovery. In the process of dividing the four grades into two groups, a group showing a recovery pattern was named a recovery group, and all non-recovery cases such as the complete recovery, partial recovery, and slight recovery were included in the recovery group. The other grade was designated as the non-recovered group. Cytokine concentrations were measured and compared from the samples of the recovery and non-recovery groups. At this time, the recovery group and the non-recovery group were compared using the non-parametric statistical method (Mann-Whitney U test). As a result, other cytokines did not show a significant difference, whereas IL-4 and TNF-α The value was found to be significantly higher in the non-recovered group than in the recovery group. Based on the concentrations of IL-4 and TNF-α, which were found to be significant in predicting hearing loss prognosis, the receiver operating characteristic curve (ROC curve) was obtained. 3 and 4 show the ROC curves of IL-4 and TNF-α, respectively, and the most meaningful cut-off values considering the sensitivity and specificity by analyzing them. Was derived. At this time, the concentration values in the case where both the sensitivity and specificity were the maximum were specified to derive the reference values of IL-4 and TNF-α respectively.
도출된 기준값은 각각 IL-4 수치가 0.225, TNF-α 수치가 5.155으로, 이를 기준하여 IL-4 또는 TNF-α 의 수치가 상기 기준값의 수치 이상인 경우에는, 치료적 효과가 없을 것으로 예측할 수 있다. The derived reference values may be predicted to have no therapeutic effect when the IL-4 value is 0.225 and the TNF-α value is 5.155, respectively, and the IL-4 or TNF-α value is higher than the reference value. .
본 발명의 일 실시예에서는, 상술한 난청 예후 예측방법 중 어느 하나를 이용하는 난청 예후 예측용 키트를 제공한다. In one embodiment of the present invention, a kit for predicting hearing loss prognosis using any one of the methods for predicting hearing loss prognosis is provided.
상기 키트는, 시료에 포함된 사이토카인의 발현에 의한 농도를 수치적으로 측정하기 위해, 본 발명의 방법으로 확인된 난청 예측인자인IL-4 또는 TNF-α의 발현수준을 측정하는 제제를 포함할 수 있다. The kit includes an agent that measures the expression level of the hearing loss predictor IL-4 or TNF-α identified by the method of the present invention in order to numerically measure the concentration by expression of cytokines contained in the sample. can do.
상기 제제는, 프라이머, 프로브 또는 항체 중 적어도 하나일 수 있다. 이 때, 프라이머, 프로브 또는 항체는 검출하고자 하는 인자와 상보적인 염기서열을 포함할 수 있다. The agent may be at least one of a primer, probe, or antibody. At this time, the primer, probe, or antibody may include a base sequence complementary to a factor to be detected.
여기서 항체는 앞서 설명한 “항체”의 범주에 해당하는 것이면 제약은 없으나, 구체적으로는 다클론항체 또는 단일클론항체인 것이 바람직하다.Here, the antibody is not limited as long as it falls within the category of “antibody” described above, but it is preferable that it is a polyclonal antibody or a monoclonal antibody.
다클론 항체는 당업자에 알려진 종래 방법에 따라 항원으로 IL-4 또는 TNF-α 중 어느 하나의 사이토카인 또는 이의 발현인자를 외부 숙주에 주사함으로써 제조될 수 있다. 이러한 외부 숙주로는 마우스, 랫트, 양, 토끼와 같은 포유동물을 예로 들 수 있으며, 항원은 일반적으로 항원성을 증가시키기 위한 보조제와 함께 근육내, 복강내 또는 피하주사 등의 방법으로 투여되어 외부 숙주를 면역화시킨다. 면역화된 외부 숙주로부터 정기적으로 혈청을 채취하여 향상된 역가 및 항원에 대한 특이성을 보이는 혈청을 수거하거나 이로부터 항체를 분리 및 정제하여 IL-4 또는 TNF-α에 특이적인 다클론 항체를 제조할 수 있다. Polyclonal antibodies can be prepared by injecting a cytokine of either IL-4 or TNF-α or its expression factor into an external host according to conventional methods known to those skilled in the art. Examples of such an external host include mammals such as mice, rats, sheep, and rabbits, and the antigen is generally administered by a method such as intramuscular, intraperitoneal or subcutaneous injection with an adjuvant to increase antigenicity. The host is immunized. Serum is collected regularly from an immunized external host to collect serum showing improved titer and antigen-specificity, or by separating and purifying antibodies therefrom to prepare polyclonal antibodies specific for IL-4 or TNF-α. .
단클론 항체는 당업자에 알려진 융합방법에 의해 불멸화된 세포주 생성방법(Kohler G et al., Nature, 256:495-497, 1975)을 이용하여 제조될 수 있다. 상기 방법을 간략히 설명하면, 순수한 IL-4 또는 TNF-α 또는 이들 각각의 단편으로 외부 숙주를 면역시키거나, 이의 펩티드를 합성하여 소혈청 알부민과 결합시켜 외부 숙주에 면역시킨다. 외부 숙주로 마우스를 이용하는 경우, 면역이 된 마우스로부터 분리한 항체-생산B 림프구를 인간 또는 마우스의 골수종세포와 융합하여 불멸화된 하이브리도마 세포를 생성한다. 이어서, 효소면역분석법(ELISA; Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)으로 하이브리도마 세포의 단클론 항체의 생성 여부를 조사하여 양성 클론을 선발하고 이를 배양한 후 항체를 분리, 정제하거나 마우스의 복강에 주입한 후 복수를 채취하여 IL-4 또는 TNF-α에 특이적인 단클론 항체를 제조할 수 있다. Monoclonal antibodies can be prepared using immortalized cell line production methods (Kohler G et al., Nature, 256:495-497, 1975) by fusion methods known to those skilled in the art. Briefly described above, the external host is immunized with pure IL-4 or TNF-α or their respective fragments, or a peptide thereof is synthesized and bound to bovine serum albumin to immunize the external host. When a mouse is used as an external host, antibody-producing B lymphocytes isolated from immunized mice are fused with myeloma cells of human or mouse to produce immortalized hybridoma cells. Subsequently, by investigating whether a monoclonal antibody of hybridoma cells is produced by enzyme immunoassay (ELISA; Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay), a positive clone is selected and cultured, and then the antibody is isolated, purified or injected into the abdominal cavity of a mouse. Ascites can be harvested to produce monoclonal antibodies specific for IL-4 or TNF-α.
또한, 본 발명의 IL-4 또는 TNF-α의 검출에 사용되는 항체는 2개의 전체 길이의 경쇄 및 2개의 전체 길이의 중쇄를 가지는 완전한 형태뿐만 아니라 항체 분자의 기능적인 단편을 포함한다. 항체 분자의 기능적인 단편이란 적어도 항원 결합능을 보유하고 있는 단편을 의미하며, Fab, F(ab'), F(ab')2 및 Fv 등이 있다.In addition, the antibodies used for the detection of IL-4 or TNF-α of the present invention include functional fragments of antibody molecules as well as complete forms with two full-length light chains and two full-length heavy chains. A functional fragment of an antibody molecule means a fragment having at least an antigen-binding ability, and includes Fab, F(ab'), F(ab')2, and Fv.
상기 IL-4 또는 TNF-α 또는 이의 단편에 특이적으로 결합할 수 있는 항체는 세척이나 복합체의 분리 등 그 이후의 단계를 용이하게 하기 위해 고형 기질(solid substrate)에 결합될 수 있다. 예를 들어, 고형 기질은 합성수지로 제작된 웰플레이트, 니트로셀룰로오스, 유리기판, 금속기판, 유리섬유, 미세구체 및 미세비드등이 될 수 있다. 또, 상기 합성수지에는 폴리에스터, 폴리비닐, 폴리염화비닐, 폴리스티렌, 폴리프로필렌, PVDF 및 나일론 등이 될 수 있다. 또한, 개체로부터 수득된 시료를 고형 기질에 결합된 IL-4 또는 TNF-α 또는 이의 단편에 특이적으로 결합할 수 있는 항체와 접촉시키는 경우, 시료는 항체와 접촉 전에 알맞은 정도로 희석될 수 있다.The antibody capable of specifically binding to IL-4 or TNF-α or a fragment thereof may be bound to a solid substrate to facilitate subsequent steps such as washing or separation of the complex. For example, the solid substrate may be a well plate made of synthetic resin, nitrocellulose, glass substrate, metal substrate, glass fiber, microspheres, and microbeads. In addition, the synthetic resin may be polyester, polyvinyl, polyvinyl chloride, polystyrene, polypropylene, PVDF and nylon. Further, when a sample obtained from an individual is contacted with an antibody capable of specifically binding IL-4 or TNF-α or a fragment thereof bound to a solid substrate, the sample may be diluted to an appropriate degree before contacting the antibody.
상기 제제에 항체가 포함되는 경우, 상기 키트는, IL-4 또는 TNF-α에 결합하는 항체에 특이적으로 결합하는 검출체를 더 포함할 수 있다. When an antibody is included in the preparation, the kit may further include a detection agent that specifically binds to an antibody that binds to IL-4 or TNF-α.
상기 검출체는 발색효소, 형광물질, 방사성 동위원소 또는 콜로이드 등으로 표지한 접합체(conjugate)일 수 있고, 바람직하게는 상기 IL-4 또는 TNF-α 또는 이의 단편에 특이적으로 결합할 수 있는 항체에 특이적으로 결합할 수 있는 2차 항체일 것이다. 예를 들어, 상기 발색효소는 퍼록시다제(peroxidase), 알칼라인 포스파타제(alkaline phosphatase) 또는 산성 포스파타제(acid phosphatase)[예: 양고추냉이 퍼록시다제(horseradish peroxidase)]일 수 있고; 형광물질인 경우, 콜로이드 골드(Coloid gold), 플루오레신카복실산(FCA), 플루오레신 이소티오시아네이트(FITC), RITC(Rhodamine-B-isothiocyanate), 플루오레신티오우레아(FTH), 7-아세톡시쿠마린-3-일, 플루오레신-5-일, 플루오레신-6-일, 2',7'-디클로로플루오레신-5-일, 2',7'-디클로로플루오레신-6-일, 디하이드로테트라메틸로사민-4-일, 테트라메틸로다민-5-일, 테트라메틸로다민-6-일,4,4-디플루오로-5,7-디메틸-4-보라-3a,4a-디아자-s-인다센-3-에틸 또는 4,4-디플루오로-5,7-디페닐-4-보라-3a,4a-디아자-s-인다센-3-에틸 등을 사용하는 것이 가능하나, 이에 제한되지 않는다.The detection body may be a conjugate labeled with a chromogenic enzyme, a fluorescent substance, a radioactive isotope, or a colloid, and preferably, an antibody capable of specifically binding to the IL-4 or TNF-α or a fragment thereof It may be a secondary antibody capable of specifically binding to. For example, the chromogenic enzyme may be a peroxidase, alkaline phosphatase or acid phosphatase (eg horseradish peroxidase); For fluorescent materials, colloidal gold, fluorescein carboxylic acid (FCA), fluorescein isothiocyanate (FITC), RITC (Rhodamine-B-isothiocyanate), fluorescein thiourea (FTH), 7 -Acetoxycoumarin-3-yl, fluorescein-5-yl, fluoresin-6-yl, 2',7'-dichlorofluoresin-5-yl, 2',7'-dichlorofluoresin -6-yl, dihydrotetramethylrosamin-4-yl, tetramethylrodamine-5-yl, tetramethylrodamine-6-yl,4,4-difluoro-5,7-dimethyl-4- Bora-3a,4a-diaza-s-indacene-3-ethyl or 4,4-difluoro-5,7-diphenyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene-3 -It is possible to use ethyl or the like, but is not limited thereto.
상기 제제가 항체를 포함하는 경우, 항원항체반응을 이용하여 검출체의 양을 측정함으로써 사이토카인의 발현수준을 측정함으로써 농도를 측정할 수 있다. 이 때, 항원항체반응은 효소면역측정법 (ELISA), 면역침강법, 형광면역법, 효소기질발색법, 항원항체응집법 등일 수 있고, 검출체의양 측정이나 존재 검출은 발색, 형광, 발광, 화학발광(chemiluminescence), 흡광도, 반사 또는 투과를 통해 가능할 수 있으며, 특별히 제한되는 바는 아니다. When the agent contains an antibody, the concentration can be measured by measuring the expression level of the cytokine by measuring the amount of the detection body using an antigen-antibody reaction. At this time, the antigen-antibody reaction may be an enzyme immunoassay (ELISA), an immunoprecipitation method, a fluorescence immunoassay, an enzymatic substrate coloration method, an antigen-antibody aggregation method, and the like, or the detection of the amount of a detectable substance may be color, fluorescence, luminescence, or chemiluminescence. (chemiluminescence), absorbance, may be possible through reflection or transmission, and is not particularly limited.
이 외에도, 상기 제제는, 검출의 용이성을 위해 통상적으로 증폭에 필요한 물질을 더 포함하는 것일 수 있다. In addition to this, the preparation may further include a substance necessary for amplification for ease of detection.
본 발명의 일 실시예에 따르면, IL-4 발현수준을 측정하는 제제; 또는 TNF-α 발현수준을 측정하는 제제를 적어도 하나 포함하는, 난청 예후 예측용 조성물이 제공된다. 여기서 제제는, 앞서 발현수준을 측정하기 위한 제제와 관련하여 설명한 내용에 기초하여 검출하고자 하는 대상에 따라 공지된 물질들 중 적절히 선택하여 이용해도 무방하나, 구체적으로는, 프라이머, 프로브 또는 항체를 이용하는 경우, IL-4 발현과 관련된 유전자 또는 TNF-α 발현과 관련된 유전자의 염기서열에 상보적인 것을 이용함이 바람직하다. According to an embodiment of the present invention, an agent for measuring IL-4 expression level; Or a composition for predicting hearing loss prognosis is provided, comprising at least one agent that measures the level of TNF-α expression. Here, the formulation may be appropriately selected from known substances according to the object to be detected based on the contents described in relation to the formulation for measuring the expression level, but specifically, using a primer, probe or antibody In this case, it is preferable to use a complementary to the nucleotide sequence of a gene related to IL-4 expression or a gene related to TNF-α expression.
본 발명의 키트는, 사이토카인의 농도를 측정하기 위한 것이면 될 뿐, 특별히 제한되는 것은 아니나, 면역크로마토그래피 스트립 키트, 루미넥스 어세이 키트, 단백질 마이크로어레이 키트, ELISA 키트 및 면역학적 도트 키트로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나임이 바람직하다. The kit of the present invention, as long as it is only for measuring the concentration of cytokines, but is not particularly limited, consisting of an immunochromatography strip kit, a Luminex assay kit, a protein microarray kit, an ELISA kit and an immunological dot kit It is preferably any one selected from the group.
보다 구체적인 설명은 이하의 실시예를 통해 후술하도록 한다.A more specific description will be described later through the following examples.
실시예Example
후술하는 실시예는 고려대학교 구로병원 임상시험심사위원회에 의하여 승인된 연구로(승인번호KUGH16327), 2014년 3월부터 2017년 2월까지 고려대학교 구로병원 이비인후과에 내원하여 일측의 돌발성 난청으로 진단된 환자들을 대상으로 실험을 진행 하였다. 상기 돌발성 난청의 진단은 순음청력검사에서 연속된 3개 이상의 주파수에서 30Db 이상의 청력소실이 관찰되는 경우에 진단하였다. 모든 환자들에 대하여 이학적검사, 순음청력검사, 임피던스 청력검사, 측두골 전산화 단층촬영검사 및 후두와 자기공명영상촬영검사를 진행한 뒤, 검사 결과가 다음의 (1) 내지 (10)의 경우 중, 어느 한 가지 이상에 해당하는 경우 연구에서 제외하였다. The following example is a study approved by the Institutional Review Board of the Guro Hospital of Korea University (approval number KUGH16327), and was admitted to the Department of Otolaryngology at the Guro Hospital of Korea University from March 2014 to February 2017, and was diagnosed with sudden hearing loss on one side. The experiment was conducted on patients. Diagnosis of the sudden hearing loss was diagnosed when a hearing loss of 30Db or more was observed at three or more consecutive frequencies in the pure tone hearing test. After performing physical examination, pure tone hearing test, impedance hearing test, temporal bone computed tomography test, and larynx and magnetic resonance imaging test for all patients, the test results were in the following cases (1) to (10): Any one or more of these cases were excluded from the study.
(1) 증상 발생 이후 10일이상 경과한 뒤에 내원한 경우(1) If you visit the hospital more than 10 days after symptoms occur
(2) 중이 질환이 발견된 경우(2) When middle ear disease is found
(3) 영상검사 결과 후미로성 병변이 확인된 경우(3) When a labyrinthic lesion is confirmed as a result of an imaging test
(4) 전신 스테로이드 치료를 할 수 없을 정도로 전신상태가 좋지못한 경우(4) When the systemic condition is not so good as to be unable to treat systemic steroids
(5) 난청의 가족력이 있는 경우(5) If you have a family history of hearing loss
(6) 양층 청력 저하 소견을 보이는 경우(6) In case of hearing loss
(7) 다른 병원에서 먼저 치료를 받은 후에 내원한 경우(7) If you come to a hospital after receiving treatment first
(8) 돌발성 난청 과거력이 있는 경우(8) If you have a history of sudden hearing loss
(9) 순음청력검사 결과 전음성 난청 혹은 혼합성 난청의 소견을 보이는 경우(9) When the results of pure tone hearing test show findings of total hearing loss or mixed hearing loss
(10) 메니에르병, 외림프누공 및 자가면역내이질환 등의 특이 외과적 질환이 있는 경우(10) In the case of specific surgical diseases such as Meniere's disease, oesophageal fistula, and autoimmune inner ear disease
실시예 1. 청력 검사Example 1. Hearing test
내원한 모든 환자에 대해 순음청력검사를 시행하였다. 500 Hz, 1000 Hz, 2000 Hz, 4000 Hz 각각의 공기전도역치값에 대한 평균을 계산하였다. 산출한 평균값에 기초하여, 치료 전 후의 청력을 평가하였으며, 평가 결과 피실험자의 등급은 경도(30~50dB), 중증도(51~70dB), 중등고도(71~90dB), 고도(91dB이상)로 총 4등급으로 분류하였다. 이후, 환자 전체에 대해 경구 스테로이드(prednisolone) 치료를 진행하였으며, 순차적으로 처음 5일동안 하루에 1mg/kg, 이후는 3일동안 하루에0.8mg/kg, 3일동안 0.5mg/kg, 3일동안 0.2mg/kg을 투여하여 총 14일간 모든환자에 동일한 양의 스테로이드 투여를 진행하였다. A pure tone hearing test was performed on all patients. The averages for the air conduction threshold values of 500 Hz, 1000 Hz, 2000 Hz, and 4000 Hz were calculated. Based on the calculated average value, hearing was evaluated before and after treatment. As a result of the evaluation, the subjects' grades were hardness (30-50dB), severity (51-70dB), moderate altitude (71-90dB), and altitude (over 91dB). Classified as 4th grade. Subsequently, oral steroid (prednisolone) treatment was performed for the entire patient, sequentially 1 mg/kg per day for the first 5 days, then 0.8 mg/kg per day for 3 days, 0.5 mg/kg for 3 days, 3 days During the administration, 0.2 mg/kg was administered, and the same amount of steroid was administered to all patients for a total of 14 days.
처음 치료 시작일로부터 2주, 4주, 8주에 각각 순음청력검사를 다시 시행하였고, 이 검사들 중에서 가장 청력이 좋게 측정된 값을 치료 전 청력과 비교하였다. 이를 통해서 청력 호전 정도를 평가하였으며 하기의 표 1에 따라 완전회복(Complete recovery), 부분회복(Partial recovery), 약간회복(Slight recovery), 비회복(No improvement)의 4가지 등급으로 분류하였다.Pure tone hearing test was performed again at 2 weeks, 4 weeks, and 8 weeks, respectively, from the first day of treatment, and the best measured hearing value among these tests was compared with the hearing before treatment. Through this, the degree of hearing improvement was evaluated and classified into four grades of Complete recovery, Partial recovery, Slight recovery, and No improvement according to Table 1 below.
실시예 2. 사이토카인 측정Example 2. Cytokine measurement
모든 환자에 대해 치료 시작에 앞서 채혈을 시행하였고, 원심분리를 통하여 혈청을 분리하여 -80 ℃의 냉동고에 보관하였다. 이후, Milliplex®MAP Human Cytokine Panel (HCYTOMAG-60K, Millipore, Billerica, 01821 Massachusetts, USA)을 이용하여 혈중 사이토카인 수치(pg/ml)를 측정하였으며, 측정된 사이토카인은 IL-1a, IL-1b, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12, TNF-alpha 및 TNF-beta이었다. 상기 사이토카인의 수치를 측정하기 전, 먼저 버퍼(wash buffer, 200 μl)를 이용하여 96-웰 플레이트(96-well plate)를 적셔 상온에 10분간 둔다. 이후, 버퍼를 제거하고, 앞서 냉동했던 혈청 샘플(25 μl)를 웰-플레이트에 넣고 비드(bead)를 추가한 뒤, 플레이트를 상온에서 2시간동안 배양한다. 배양된 웰-플레이트의 각 웰로부터 내용물을 제거하고 항체를 각각의 웰에 추가한 후, 다시 상온에서 1시간동안 배양한 다음, 형광물의 켤레(Streptavidin-Phycoerythrin)를 각각의 웰에 추가하고 플레이트를 30분간 더 배양한다. Blood was collected prior to the start of treatment for all patients, and serum was separated through centrifugation and stored in a freezer at -80 °C. Subsequently, blood cytokine levels (pg/ml) were measured using a Milliplex®MAP Human Cytokine Panel (HCYTOMAG-60K, Millipore, Billerica, 01821 Massachusetts, USA), and the measured cytokines were IL-1a, IL-1b. , IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL-12, TNF-alpha and TNF-beta. Before measuring the value of the cytokine, first, a 96-well plate is wetted with a wash buffer (200 μl) and placed at room temperature for 10 minutes. Thereafter, the buffer was removed, and the previously frozen serum sample (25 μl) was placed in a well-plate, beads were added, and the plate was incubated at room temperature for 2 hours. After removing the contents from each well of the cultured well-plate and adding the antibody to each well, incubate again for 1 hour at room temperature, then add a pair of fluorescence (Streptavidin-Phycoerythrin) to each well and plate Incubate for another 30 minutes.
이러한 과정으로 획득된 각각의 샘플은 복제 후 분석을 시행하였고, 분석은 Luminex 200™, HTS, FLEXMAP 3D®, MAGPIX®(with xPONENT® software)를 이용하였다. Each sample obtained through this process was analyzed after cloning, and the analysis was performed using Luminex 200™, HTS, FLEXMAP 3D®, MAGPIX® (with xPONENT® software).
실시예3. 측정된 사이토카인 농도 측정 및 기준값 도출Example 3. Measurement of measured cytokine concentration and deriving a reference value
청력 회복의 정도에 따라, 전체 환자를 회복군(Recovered group)과 비회복군(Unrecovered group)으로 나누었다. 회복군에는 앞서 실시예 1에서 나눈 4개의 등급 중, 완전회복(Complete recovery), 부분회복(Partial recovery), 약간회복(Slight recovery)으로 분류된 치료에 의해 호전을 보인 환자들이 포함되었으며, 치료적 효과가 없어 비회복(No improvement)으로 분류된 환자집단은 비회복군에 포함되었다. Depending on the degree of hearing recovery, the entire patient was divided into a recovered group and a non-recovered group. The recovery group included patients who showed improvement by treatment classified as Complete recovery, Partial recovery, and Slight recovery among the four grades previously divided in Example 1. Patient groups classified as No improvement because of no effect were included in the non-recovery group.
두 그룹의 나이, 당뇨, 어지럼 유무, 증상 발생일로부터 초기 치료까지의 기간 등의 차이를 분석하기 위하여 T 검정(T-test)을 사용하였고, 초기 청력과의 상관관계를 분석하기 위해 선형대 선형 결합법(Linear-by-linear association test)을 이용하였다. 두 그룹간의 사이토카인 수치 비교는 비모수통계방법(Mann-Whitney U test)을 이용하였다. T-test was used to analyze the difference between age, diabetes, dizziness, and the period from symptom onset to initial treatment, and linear vs. linear to analyze correlation with initial hearing. The linear-by-linear association test was used. To compare the cytokine levels between the two groups, the non-parametric statistical method (Mann-Whitney U test) was used.
각각의 인자들이 환자의 청력 회복에 미치는 오즈비를 구하기 위하여 수용자 반응 특성 곡선(Receiver operating characteristic curve, ROC curve), 이분형 로지스틱 회귀분석(Binomial Logistic regression analysis)을 이용하고, SPSS version 22(SPSS Software, SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 이용하여 통계적으로 분석하였다. To determine the odds ratio of each factor on the patient's hearing recovery, a receiver operating characteristic curve (ROC curve), a binary logistic regression analysis, and SPSS version 22 (SPSS Software) , SPSS Inc., Chicago, IL, USA).
실시예 4. 돌발성 난청 예후 예측Example 4. Prediction of sudden hearing loss prognosis
실시예 1내지 3의 방법을 이용하여 돌발성 난청 환자 집단의 예후를 예측하는 임상실험을 진행하였다. Clinical trials were conducted to predict the prognosis of a group of patients with sudden hearing loss using the methods of Examples 1 to 3.
총 55명의 환자의 청력검사가 진행되었다. 전체 환자의 평균 나이는 51.0±15.9 세로, 남성이 31명(56.4%), 여성이 24명(43.6%) 이었다. 발병 후 초기 치료까지의 기간은 3.6±2.8일이었고, 15명(27.3%)은 현훈성 어지럼을 동반하였으며 9명(16.4%)은 기저질환으로 당뇨가 확인되었다. 먼저, 치료 전 청력기능에 따라 환자를 분류하였을 때, 20명(36.7%)이 경도(mild), 11명(20%)이 중등도(moderate), 15명(27.3%)이 중등고도(severe), 9명(16.3%)이 고도(profound)의 분포를 나타내었다. 또, 청력 회복의 정도에 따라 분류하였을 때, 20명(36.7%)에서 ‘완전 회복 (complete recovery)’, 9명(16.4%)에서 ‘부분 회복 (partial recovery)’, 6명(10.9%)에서 ‘약간 회복 (slight recovery), 20명(36.7%)에서 ‘회복 없음(no improvement)’ 의 분포를 나타내었다. (도 1)A total of 55 patients were tested for hearing. The average age of all patients was 51.0±15.9 years, 31 males (56.4%) and 24 females (43.6%). The period from onset to initial treatment was 3.6±2.8 days, 15 patients (27.3%) were accompanied by dizziness and 9 patients (16.4%) were diagnosed with diabetes as a underlying disease. First, when patients were classified according to their hearing function before treatment, 20 (36.7%) were mild, 11 (20%) were moderate, and 15 (27.3%) were moderate. , 9 (16.3%) had a profound distribution. In addition, when classified according to the degree of hearing recovery,'complete recovery' in 20 (36.7%),'partial recovery' in 9 (16.4%), and 6 (10.9%) In the distribution of'slight recovery' and'no improvement' in 20 (36.7%). (Figure 1)
‘완전 회복’, ‘부분 회복’, ‘약간 회복’ 의 환자들을 한 그룹으로 묶어서 회복군 (Recovered group) 으로 분류하였고, 청력 회복의 정도가 ‘회복 없음 (No improvement) 인 환자들을 비회복군 (Unrecovered group) 으로 분류하여, 두 그룹 환자들로 수득한 혈액으로부터 사이토카인 농도를 측정하여 비교하였다. 이 때, 중위수와 제 1사분위수 및 제 3사분위수로 표시하였다. 비모수통계방법(Mann-Whitney U test)를 시행하여 두 그룹을 비교하였을 때, IL-4 와 TNF-α 의 수치가 회복군에 비하여 비회복군에서 유의하게 높은 것을 확인하였다. 그 외에 다른 사이토카인들은 유의한 차이를 보이지 않았다. (도 2)Patients with'complete recovery','partial recovery', and'slight recovery' were grouped into a group and classified as a recovery group, and patients with hearing recovery of'no improvement' were not recovered. Unrecovered group), it was compared by measuring the cytokine concentration from the blood obtained from the two groups of patients. At this time, the median, the first quartile, and the third quartile were represented. When the two groups were compared by performing the non-parametric statistical method (Mann-Whitney U test), it was confirmed that the levels of IL-4 and TNF-α were significantly higher in the non-recovered group than in the recovery group. Other cytokines did not show any significant differences. (Figure 2)
이후, 전체 환자의 IL-4 와 TNF-α 를 기준으로 수용자 반응 특성 곡선 (Receiver operating characteristic curve, ROC curve) 을 구하였다. (도 3 및 도 4)Thereafter, a receiver operating characteristic curve (ROC curve) was obtained based on IL-4 and TNF-α of all patients. (Fig. 3 and Fig. 4)
이와 같이 ROC 커브로 분석한 결과, 민감도 (sensitivity) 및 특이도 (specificity) 를 종합적으로 고려하여 가장 의미 있는 컷-오프(cut-off) 값을 도출했으며, 도출한 컷-오프 값을 기준으로 환자를 두 군으로 나누어 분석하였다. IL-4 수치가 0.225 이상인 28명 중에서 비회복군은 16명(57.1%)이고 IL-4 이 0.225 미만인 27명 중에서 비회복군은 4명(14.8%)으로, IL-4 이 0.225 이상일 때 비회복군이 유의하게 많음을 확인하였다.(도 5) 마찬가지로 TNF-α 값이 5.155 이상인 경우에서도 TNF-α 값이 5.155 미만인 경우보다 비회복군이 유의하게 많았다.(도 6) As a result of the analysis with the ROC curve, the most meaningful cut-off value was derived considering the sensitivity and specificity comprehensively, and the patient was based on the derived cut-off value. Was divided into two groups and analyzed. Among 28 patients with IL-4 levels above 0.225, 16 (57.1%) were non-recovered, and among 27 patients with IL-4 less than 0.225, 4 (14.8%) were non-recovered. It was confirmed that the recovery group was significantly higher. (FIG. 5) Similarly, even in the case where the TNF-α value was 5.155 or more, the non-recovery group was significantly higher than the TNF-α value was less than 5.155 (FIG. 6).
다중 로지스틱 회귀분석으로 시행하였을 때 IL-4 의 수치가 0.225 이상일 때 오즈비는 13.329 (p=0.017) 이고, TNF-α 의 수치가 5.155 이상일 때 오즈비는 15.319 (p-0.005) 으로 나타났다. 따라서 IL-4 수치가 0.225 이상일 때, TNF-α 수치가 5.155 이상일 때에 치료에 호전이 없을 가능성이 증가하는 것을 확인하였다. (도 7)When performed by multiple logistic regression analysis, the odds ratio was 13.329 (p=0.017) when the IL-4 level was 0.225 or higher, and the odds ratio was 15.319 (p-0.005) when the TNF-α level was 5.155 or higher. Therefore, it was confirmed that when the IL-4 level is 0.225 or more and the TNF-α level is 5.155 or more, the likelihood of improvement in treatment is increased. (Fig. 7)
위 실시예 결과, 환자의 나이가 1세 증가할수록 청력 호전이 없을 오즈비가 1.071배 증가하고, 치료 전 IL-4≥0.225 pg/mL 인 경우 청력 호전이 없을 오즈비가 13.329배 증가함을 확인하였다. 또, 치료 전 TNF-α≥5.155 인 경우 청력 호전이 없을 오즈비가 15.319배 증가하고, 치료 전 청력이 좋지 않을수록 치료 후 청력 호전이 없을 위험이 증가함을 확인하였다. As a result of the above example, it was confirmed that as the patient's age increased by 1 year, the odds ratio without hearing improvement increased 1.071 times, and when IL-4≥0.225 pg/mL before treatment, the odds ratio without hearing improvement increased by 13.329 times. In addition, it was confirmed that in the case of TNF-α≥5.155 before treatment, the odds ratio without hearing improvement increased by 15.319 times, and the worse the hearing before treatment, the greater the risk of hearing improvement after treatment.
즉, 위 실시예를 통해, 치료 시작 전에 IL-4 및 TNF-α 의 수치가 컷-오프값보다 높을 경우 청력의 호전이 없을 가능성이 매우 높다는 사실을 검증하였으며, 치료적 효과에 유의한 요인들로 생각되는 환자의 연령, 초기 청력, IL-4 및 TNF-α 의 수치 등을 고려하여 환자의 치료 이전에 위험도를 평가할 수 있음을 확인하였다. That is, through the above example, it was verified that the probability of hearing improvement is very high when the levels of IL-4 and TNF-α are higher than the cut-off value before starting treatment, and significant factors for the therapeutic effect Considering the patient's age, initial hearing, IL-4 and TNF-α levels, etc., it was confirmed that the risk can be evaluated before treatment.
특히, 위의 방법으로 확인된 고위험군의 환자는 치료 전에 현재 진행하려는 치료적 효과가 없을 수 있음을 미리 인지시키고 더 적극적인 치료가 가능하다.In particular, the patients in the high-risk group identified by the above method can recognize that there may be no therapeutic effect to proceed before treatment, and more active treatment is possible.
이상과 같이 실시예들이 비록 한정된 도면에 의해 설명되었으나, 해당 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기를 기초로 다양한 기술적 수정 및 변형을 적용할 수 있다. 예를 들어, 설명된 기술들이 설명된 방법과 다른 순서로 수행되거나, 및/또는 설명된 구성요소들이 설명된 방법과 다른 형태로 결합 또는 조합되거나, 다른 구성요소 또는 균등물에 의하여 대치되거나 치환되더라도 적절한 결과가 달성될 수 있다.As described above, although the embodiments have been described by the limited drawings, those skilled in the art can apply various technical modifications and variations based on the above. For example, even if the described techniques are performed in a different order than the described method, and/or the described components are combined or combined in a different form from the described method, or replaced or replaced by another component or equivalent Appropriate results can be achieved.
그러므로, 다른 구현들, 다른 실시예들 및 특허청구범위와 균등한 것들도 후술하는 청구범위의 범위에 속한다.Therefore, other implementations, other embodiments, and equivalents to the claims are also within the scope of the following claims.
Claims (10)
(a) 난청환자로부터 수득되는 시료의 사이토카인의 농도를 측정하는 단계;
(b) 상기 측정된 사이토카인의 농도에 기초하여 기준값을 도출하는 단계; 및
(c) 상기 기준값 이상인 경우, 치료적 효과가 없을 것으로 예측하는 단계;
를 포함하고,
상기 사이토카인은 IL-4 및 TNF-α인, 난청 예후 예측을 위한 정보제공방법.As a method of providing information for predicting hearing loss prognosis,
(a) measuring the concentration of cytokines in a sample obtained from a hearing-impaired patient;
(b) deriving a reference value based on the measured concentration of cytokines; And
(c) predicting that there will be no therapeutic effect if it is equal to or greater than the reference value;
Including,
The cytokine is IL-4 and TNF-α, a method of providing information for predicting hearing loss prognosis.
상기 기준값은, IL-4 수치가 0.225 및 TNF-α 수치가 5.155인, 난청 예후 예측을 위한 정보제공방법.According to claim 1,
The reference value, IL-4 value is 0.225 and TNF-α value is 5.155, information providing method for predicting hearing loss prognosis.
상기 난청은, 돌발성 난청인, 난청 예후 예측을 위한 정보제공방법.According to claim 1,
The hearing loss is a sudden hearing loss, information providing method for predicting the prognosis of hearing loss.
상기 측정은, ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay), 비색법(colorimetric method), 전기화학법(electrochemical method), 형광법(fluorimetric method), 발광법(luminometry), 입자계수법(particle counting method), 육안측정법(visual assessment), 섬광계수법(scintillation counting method) 및 조직면역염색법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나에 의한, 난청 예후 예측을 위한 정보제공방법.According to claim 1,
The measurement includes an ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), colorimetric method, electrochemical method, fluorimetric method, luminometry, particle counting method, and visual measurement method ( A method for providing information for predicting hearing loss prognosis by at least one selected from the group consisting of visual assessment, scintillation counting, and tissue immunostaining.
상기 시료는, 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 비펩티드성 화합물, 활성 화합물, 발효 생산물, 세포 추출액, 식물 추출액, 동물조직 추출액, 혈액, 혈장, 혈청, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사 산물 및 생활성 분자로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인, 난청 예후 예측을 위한 정보제공방법.According to claim 1,
The sample is a natural compound, synthetic compound, RNA, DNA, polypeptide, enzyme, protein, ligand, non-peptide compound, active compound, fermentation product, cell extract, plant extract, animal tissue extract, blood, plasma, serum, antibody , Antigen, bacteria or fungi metabolites and any one selected from the group consisting of bioactive molecules, information providing method for predicting hearing loss prognosis.
상기 키트는, 난청 예측인자인 사이토카인 IL-4 및 TNF-α의 발현수준을 측정하는 제제를 포함하는, 난청 예후 예측용 키트.The method of claim 6,
The kit includes a preparation for measuring the expression level of cytokine IL-4 and TNF-α, which are predictors of hearing loss, and a kit for predicting hearing loss prognosis.
상기 제제는, 프라이머, 프로브 또는 항체 중 적어도 하나를 포함하는, 난청 예후 예측용 키트.The method of claim 7,
The formulation is a kit for predicting hearing loss prognosis, comprising at least one of a primer, a probe, or an antibody.
상기 키트는, 면역크로마토그래피 스트립 키트, 루미넥스 어세이 키트, 단백질 마이크로어레이 키트, ELISA 키트 및 면역학적 도트 키트로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인, 난청 예후 예측용 키트.The method of claim 6,
The kit is any one selected from the group consisting of immunochromatography strip kit, Luminex assay kit, protein microarray kit, ELISA kit, and immunological dot kit, a kit for predicting hearing loss prognosis.
Agents measuring IL-4 expression levels; And an agent for measuring TNF-α expression level.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020180168281A KR102141546B1 (en) | 2018-12-24 | 2018-12-24 | Method of predicting hearing loss prognosis and kit using the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020180168281A KR102141546B1 (en) | 2018-12-24 | 2018-12-24 | Method of predicting hearing loss prognosis and kit using the same |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20200078929A KR20200078929A (en) | 2020-07-02 |
| KR102141546B1 true KR102141546B1 (en) | 2020-08-05 |
Family
ID=71599672
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020180168281A Active KR102141546B1 (en) | 2018-12-24 | 2018-12-24 | Method of predicting hearing loss prognosis and kit using the same |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102141546B1 (en) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101836929B1 (en) | 2016-09-23 | 2018-03-09 | 충남대학교산학협력단 | A kit for Prognostic Analysis of Sudden Sensorineural Hearing Loss, including agent measuring the GDF15 expression level |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AR084210A1 (en) | 2010-12-08 | 2013-05-02 | Abbott Lab | PROTEINS OF UNION TO TNF-a |
| KR101494185B1 (en) * | 2013-01-03 | 2015-02-17 | 경북대학교 산학협력단 | Marker composition for diagnosis of hereditary hearing loss in Korean population |
-
2018
- 2018-12-24 KR KR1020180168281A patent/KR102141546B1/en active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101836929B1 (en) | 2016-09-23 | 2018-03-09 | 충남대학교산학협력단 | A kit for Prognostic Analysis of Sudden Sensorineural Hearing Loss, including agent measuring the GDF15 expression level |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Zinovia Tsinaslanidou et al., 'The Expression of TNFα, IL-6, IL-2 and IL-8 in the Serum of Patients with Idiopathic Sudden Sensorineural Hearing Loss: Possible Prognostic Factors of Response to Cortic* |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20200078929A (en) | 2020-07-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11994523B2 (en) | Biomarkers and methods for diagnosing and evaluating traumatic brain injury | |
| AU2018378971B9 (en) | Methods for aiding in the diagnosis and evaluation of a subject who has sustained an orthopedic injury and that has or may have sustained an injury to the head, such as mild traumatic brain injury (TBI), using glial fibrillary acidic protein (GFAP) and/or ubiquitin carboxy-terminal hydrolase l1 (UCH-L1) | |
| US9410967B2 (en) | Methods and materials for monitoring myeloma using quantitative mass spectrometry | |
| CN104136924A (en) | Biomarkers and parameters for hypertensive disorders of pregnancy | |
| KR102164490B1 (en) | Biomarker composition for diagnosing Alzheimer's dementia and use thereof | |
| US8017345B2 (en) | Diagnostic kit for malignant melanoma | |
| TW201403068A (en) | Kit for diagnosis of melanoma | |
| JP5892169B2 (en) | Diagnostic kit, diagnostic marker and detection method for Alzheimer type dementia by measuring sugar chain of complement C3 protein | |
| KR102141546B1 (en) | Method of predicting hearing loss prognosis and kit using the same | |
| CN111579784A (en) | Method for detecting arteriosclerosis and cancer using DHPS gene as indicator | |
| KR101836929B1 (en) | A kit for Prognostic Analysis of Sudden Sensorineural Hearing Loss, including agent measuring the GDF15 expression level | |
| EP2646462B1 (en) | Methods and compositions for monitoring phagocytic activity | |
| EP2924437B1 (en) | Method for detecting neurological disease accompanied by inflammation and/or demyelination | |
| JP7432190B2 (en) | Data acquisition methods and kits for identifying patients with antidepressant-resistant major depression | |
| US20220244274A1 (en) | Quantitative biomarkers for assessing mild traumatic brain injury and methods of use thereof | |
| JP7565046B2 (en) | Method and reagent for detecting bone metastasis of cancer | |
| US9182413B2 (en) | Methods and devices for diagnosing cardiac disorders | |
| EP2850436B1 (en) | An in vitro method for diagnosing of endometriosis | |
| WO2013164787A1 (en) | Assay methods for diagnosing and monitoring cancer | |
| WO2016005916A1 (en) | A method and kit for the detection of a biomarker of thyroid cancer in biological samples |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PA0109 | Patent application |
Patent event code: PA01091R01D Comment text: Patent Application Patent event date: 20181224 |
|
| PA0201 | Request for examination | ||
| PE0902 | Notice of grounds for rejection |
Comment text: Notification of reason for refusal Patent event date: 20200114 Patent event code: PE09021S01D |
|
| PG1501 | Laying open of application | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| PE0701 | Decision of registration |
Patent event code: PE07011S01D Comment text: Decision to Grant Registration Patent event date: 20200729 |
|
| GRNT | Written decision to grant | ||
| PR0701 | Registration of establishment |
Comment text: Registration of Establishment Patent event date: 20200730 Patent event code: PR07011E01D |
|
| PR1002 | Payment of registration fee |
Payment date: 20200731 End annual number: 3 Start annual number: 1 |
|
| PG1601 | Publication of registration | ||
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20230621 Start annual number: 4 End annual number: 4 |
|
| PR1001 | Payment of annual fee |
Payment date: 20240701 Start annual number: 5 End annual number: 5 |