KR101966184B1 - 말라세지아 퍼퍼에 대한 항진균 성능을 가진 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 묵은 김치로부터 분리한 신규 균주(락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01, 기탁번호: KCTC 13494BP)를 유효성분으로 하는 항진균용 조성물에 관한 것이다. 상기 조성물은 피부 질환과 관련된 것으로 알려진 진균인 말레세이지 속(Malassezia sp.) 진균에 대한 항진균력이 있으므로, 비듬을 예방 또는 개선하는데 사용할 수 있다.

Description

말라세지아 퍼퍼에 대한 항진균 성능을 가진 화장료 조성물{NTI-FUNGAL Cosmetic Composition of Malassezia furfur}

본 발명은 묵은 김치로부터 분리한 신규 균주를 유효성분으로 하는 말라세지아 퍼퍼에 대한 항진균 화장료 조성물에 관한 것이다.

진균(fungus)이란 곰팡이, 효모, 버섯을 포함한 미생물군을 말하는데, 대부분 스스로 영양분을 합성할 수 없어 다른 생물체에 기생하여 사는 특징이 있다. 사람에게는 죽어서 벗겨지는 세포가 많이 분포하는 두피, 모발, 얼굴, 팔, 다리, 손톱이나 발톱 등 피부에 감염되는 질환이다.

진균 중 말라세지아 속(Malassezia sp.) 진균은 인간이나 동물의 피부 표면에 주로 위치하며, 말라세지아 파치더마티스(Malassezia pachydermatis), 말라세지아 퍼퍼(Malassezia furfur), 말라세지아 글로보사(Malassezia globosa), 말라세지아 심포디알리스(Malassezia sympodialis), 말라세지아 슬로오피애(Malassezia slooffiae), 말라세지아 오브투사(Malassezia obtusa), 말라세지아 레스트릭타(Malassezia restricta) 등의 종류가 있다. 주로 피부 표면에서 서식하므로, 비듬, 지루성 피부염, 모낭염, 어루러기, 아토피 피부염 등 다양한 피부 질환과 관련 있는 것으로 알려져 있다. 특히, 지루성 피부염 중 지루성 두피염은 일반 성인에게 빈번하게 발생하며 정확한 원인은 밝혀지지 않았으나 말라세이지아 속(Malassezia sp.) 진균이 주요 원인으로 추정되고 있다. 따라서, 시중에서 항진균제로 케코코나졸(Ketoconazole)과 같은 합성물과 타르, 살리실산 등이 사용되고 있으나 인체에 대한 안전성이 제기되고 있다. 이에 인체에 안전하면서 비듬을 억제할 수 있는 물질에 대한 연구가 필요한 실정이다.

항균 및 항진균 활성을 갖는 유산균에 관한 특허로는, 한국 등록특허 제10-1256727호(특허문헌 1), 한국 공개특허공보 제10-2017-0090997호(특허문헌 2) 등이 개시되어 있다.

KR 10-1256727 (2013.04.15) KR 10-2017-0090997 (2017.08.08)

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하고자하는 것으로 그 목적은, 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus) J2K-01(기탁번호: KCTC 13494BP)의 신규한 균주를 제조하고, 이를 유효성분으로 하여 항균 및 항진균 활성을 갖고, 두피의 비듬을 예방 또는 개선할 수 있는 화장료 조성물을 제공하려는 것이다.

상기와 같은 과제를 해결하기 위하여 본 발명의 묵은 김치로부터 분리한 신규 균주를 유효성분으로 하는 항진균용 조성물은, 묵은 김치로부터 분리한 기탁번호 KCTC 13494BP의 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus) J2K-01 균주를 유효 성분으로 한다.

상기한 구성에 있어서,

상기 항진균 대상 균은 라세지아속(Malassezia sp.) 진균인 것을 특징으로 한다.

보다 구체적으로, 상기 말레세지아속 진균은 말라세지아 퍼퍼(Malassezia furfur), 말라세지아 글로보사(Malassezia globosa) 및 말라세지아 레스트릭타(Malassezia restricta)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 한다.

또한, 상기 항진균용 조성물은 비듬의 예방 또는 개선용인 것을 특징으로 한다.

더 나아가, 상기 항진균용 조성물은 상기 균주를 배지에 접종하여 배양한 배양물로 이루어지며, 상기 배양은, 배양액의 pH를 5.0 내지 6.0으로 조정하고, 배양 시간은 12시간 내지 48시간, 배양 온도는 27 내지 37℃로 하며, 배양 배지의 탄소원으로서 글루코스를 배지 총부피 대비 0.5 내지 3%(W/V) 포함시키고, 배양 배지의 질소원으로서 효모추출물을 배지 총부피 대비 0.5 내지 2%(W/V) 포함시키며, 배양 배지의 미량원소원으로서 황산망간을 배지 총부피 대비 0.05 내지 0.1%(W/V), 포함시키고, 황산마그네슘을 배지 총부피 대비 0.02 내지 0.05%(W/V) 포함시키며, 염화칼슘을 배지 총부피 대비 0.02 내지 0.05%(W/V) 포함시키는 조건으로 배양한 것을 특징으로 한다.

아울러, 상기 유효성분은 화장료 조성물 전체에 대해 0.001 ~ 30.0 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다.

본 발명을 조성물은, 두피의 비듬을 유발시키는 말라세지아 속 진균에 대한 항진균력이 있으므로, 비듬을 예방 또는 개선하는데 사용할 수 있다. 또한, 상기 조성물은 피부 흡수력이 뛰어나고, 세포 독성이 없고, 피부 자극을 유발하지 않는 효과를 나타내었다.

도 1은 본 발명에서 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus) J2K-01(기탁번호: KCTC 13494BP) 배양물의 디스크 확산법에 의해 말라세지아 퍼퍼(Malassezia furfur)에 대한 항진균력을 확인한 도이다.
도 2는 본 발명 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus) J2K-01(기탁번호: KCTC 13494BP) 배양물의 농도에 따른 말라세지아 퍼퍼(Malassezia furfur)에 대한 항진균력을 확인한 도이다.
도 3은 본 발명 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus) J2K-01(기탁번호: KCTC 13494BP)의 동정 결과 16S rRNA 서열도(actobacillus curvatus J2K-01, 16S rRNA gene complete cds, 1521bp)이다.
도 4는 본 발명 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus) J2K-01(기탁번호: KCTC 13494BP) 균주의 동정 결과를 나타낸 균주 계통도(Phylogenetic tree of Lactobacillus curvatus J2K-01)이다.
도 5는 본 발명 락토바실러스 쿠르바투스 균주의 기탁증이다.

이하 본 발명을 설명한다.

락토바실러스(Lactobacillus)는 정장 효과 및 면역 증강 효과 등의 생리학적 활성에 대한 효과로 다양한 생균제로 이용되는 것으로 잘 알려져 있는 사실이다. 이 중 락토바실러스 쿠르바투스(Lacotobacillus curvatus)는 호기적 조건과 협기적 조건에서 모두 성장이 가능한 통성혐기성이며 간균 형태의 그람양성균이다. 최근, 락토바실러스 쿠르바투스가 병원성 균의 증식 또는 활성을 억제하는 연구가 상당수 진행된 바 있다. 그러나 락토바실러스 쿠르바투스를 이용하여 두피염 및 비듬을 유발하는 진균의 말라세지아(Malassezia sp.)의 증식 또는 활성을 억제하고자 하는 연구는 전무한다.

따라서, 본 발명자들은 상기 김치로부터 분리한 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주와 그 배양물이 피부자극을 유발하지 않으면서, 두피의 비듬을 유발하는 것으로 알려진 말라세지아(Malassezia sp.)에 대하여 항진균력이 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명에서 새롭게 발견한 균주는 2018년 03월 14일자로 한국생명공학연구원 생물자원센터(Korean Collection for Type Culture, KCTC)에 락토바실러스 쿠르바투스(Lacotobacillus curvatus) J2K-01을 기탁하였다(기탁번호: KCTC 13494BP).

본 발명에 따른 배양 방법은 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus) J2K-01(기탁번호: KCTC 13494BP)를 배양하는 단계; 상기의 배양 후, 원심분리하여 배양액으로부터 균체를 제거하고 상등액을 회수하는 단계; 상기에서 회수한 상등액을 여과하여 균체를 제거하는 단계;를 통해 수득한 배양물 또는 상기에서 회수한 균체를 파쇄하여 추출한 추출물을 여과하여 균체를 제거한 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 조성물을 제공한다.

상기 조성물은, 말라세지아 속(Malassezia sp) 진균에 대한 항진균조성물일 수 있다. 상기 말라세지아 속 진균은 말레세지아 퍼퍼(Malassezia furfur), 말레세지아 레스트릭타(Malassezia restricta), 말레세지아 오브투사(Malassezia obtusa), 말레세지아 글로보사(Malassezia globosa), 말라세지아 슬로오피아에(Malassezia slooffiae), 말레세지아 심포디아리스(Malassezia sympodialis) 및 말레세지아 파키더마티스(Malassezia pachydermatis)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상일 수 있다.

따라서, 본 발명에서 상기 조성물은, 비듬의 예방 및 개선용 화장품 조성물을 특징으로 한다.

본 발명에서 최종적으로 얻은 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01(기탁번호: KCTC 13494BP) 균주, 그 균주의 파쇄물, 그 균주의 배양액 또는 추출물은 화장료 조성물 전체에 대해 0.001~30.0중량% 함유되는 것이 바람직한데, 0.001중량% 미만으로 포함되는 경우에는 비듬의 예방 및 개선 효과가 미미하고, 30.0중량%를 초과하는 경우에는 재료 투입량 대비 효율성이 떨어져 경제적이지 못하기 때문이다.

본 발명에서 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01(기탁번호: KCTC 13494BP) 균주의 배양은 바람직하게는 배양액의 pH를 5.0 내지 6.0으로 조정하고, 최적 배양 시간은 12시간 내지 48시간, 최적 배양 온도는 27 내지 37℃, 배양 배지의 최적 탄소원으로서 글루코스를 배지 총부피 대비 0.5 내지 3%(W/V) 포함, 배양 배지의 최적 질소원으로서 효모추출물을 배지 총부피 대비 0.5 내지 2%(W/V) 포함, 및 배양 배지의 최적 미량원소원으로서 황산망간을 배지 총부피 대비 0.05 내지 0.1%(W/V), 황산마그네슘을 배지 총부피 대비 0.02 내지 0.05%(W/V), 염화칼슘을 배지 총부피 대비 0.02 내지 0.05%(W/V) 포함하는 것을 특징으로 한다.

한편, 본 발명에서 "유효성분으로 포함된다"는 의미는 본 발명의 조성물로부터 비듬의 예방 및 개선 효과를 나타낼 수 있는 정도로 조성물에 배양물 여과액이 첨가되는 것을 의미하고, 성분 전달 및 안정화 등을 위하여 다양한 성분을 부성분으로 첨가하여 다양한 형태로 제형화하는 것을 포함하는 의미이다.

또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물이 샴푸, 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형으로 이루어진 기초 화장료 제형; 수중유형 또는 유중수형의 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우 펜슬류 중에서 선택된 화장료 조성물임을 특징으로 한다.

본 발명에서 조성물이란 바람직하게는 피부외용제 조성물을 의미하고, 피부외용제 조성물이란 일반적으로 피부에 적용되는 조성물 전부를 의미하고, 의약품,의약부외품, 화장료 등을 포함하는 것이다.

본 발명의 균주의 유효성분의 피부외용제에 대한 배합량은 조성물 총량을 기준으로 0.0001∼10% 로 하는 것이 바람직하고, 보다 바람직하게는 0.01∼1% 이다.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 좀 더 구체적으로 설명한다. 단, 이들 실시예는 본 발명의 예시적인 기재일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되는 것은 아니다.

<김치로부터 균주의 분리>

제주도산 묵은 김치를 유산균 분리 김치 시료로 사용하였다.

상기 김치 시료들은 각각 멸균 생리식염수에 현탁 및 희석하고, 이를 0.1 mL씩 취해 디프코 락토바실리 MRS 아가 (Difco Lactobacili MRS Agar) 배지에 도말하였다.

이 후, 플레이트를 35℃의 항온배양기에서 2일 동안 배양하였다.

생성된 각각의 콜로니를 MRS 아가 플레이트에 획선 접종하였고, 35℃에서 2일 동안 배양하여 백색 집락을 보이는 콜로니를 취했다.

위와 같은 방법으로 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01을 김치로부터 분리하였다.

<락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물 제조>

실시예 1로부터 순수 분리한 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 종균배양(seed culture)은 MRS 배지에 단일 콜로니를 접종하여 35℃ 항온배양기에 24시간 동안 배양하여 사용하였다.

락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 성장이 최적화된 배지조성은 글루코스 2%, 효모추출물 1%, 황산망간 0.1%, 황산마그네슘 0.05%, 염화칼슘 0.025%를 함유한 최적화된 배지로 하며 pH 5.5로 조정한 배지에 상기 종균배양액을 1%(V/V)되게 접종한 후, 온도 35℃, 회전수 120rpm 조건으로 24시간 배양하였다.

배양 후 원심분리하여 배양액으로부터 균체를 제거하고 상등액을 여과하여 균체를 완전히 제거한 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물을 수득하였다.

실험예 1-1 : 항진균력의 측정

상기 실시예 2에서 수득한 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 배양물의 말라세지아 속(Malassezia sp.) 진균에 대한 항진균력을 측정하기 위하여 Agar-Disc diffusion assay를 실시하였다.

구체적으로, 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 배양물을 0.1 mL을 직경 8 mm, 두께 1.5 mm의 paper disk (Advantec Filter Paper, Toyo Roshi Kaisha Ltd, 일본)에 흡수시키고 증발시킨 다음, mLNA agar 배지에 말라세지아 퍼퍼(Malassezia furfur) (KCTC 7744)가 1 X 10⁷ 내지 1 X 10⁸ cfu/mL 농도로 도말된 평판배지에 올려 항균활성을 시험하였다.

말라세지아 퍼퍼가 도말된 평판배지는 37℃에서 2일간 배양한 다음, 디스크 주변에 형성된 억제환의 크기를 자로 재어 결과를 판독하였다. 그 결과는 도 1에 나타나 있다.

실험예 1-2 : 항진균력의 측정

상기 실시예 2에서 수득한 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 배양물의 말라세지아 속(Malassezia sp.) 진균에 대한 항진균력을 측정하기 위하여 시료 농도의 배양 시간에 따른 말라세지아 퍼퍼(Malassezia furfur) (KCTC 7744)의 억제 정도를 Agar plate counting을 통하여 확인하였다.

구체적으로, mLNA 액상 배지를 넣은 4개의 캡 유리시험관에 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 배양물이 0%, 5%, 10%, 20%가 되도록 시료 농도를 구배하였다.

각 시험관에 말라세지아 퍼퍼를 1 X 10⁶ cfu/mL 농도가 되도록 접종 후 37℃에서 진탕배양하였다.

배양 0시간과 12시간 간격으로 2일간, 각 시험 샘플로부터 1 mL를 취하여 생리식염수에 1/10 연속 희석을 실시하고 이를 mLNA agar에 도말 후, 37℃에서 2일 배양하여 생성된 콜로니 수를 확인하여 생균수를 판독하였다(도 2).

그 결과, 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 배양물은 농도가 증가할수록 말라세지아 퍼퍼에 대한 항진균력이 증가함을 알 수 있었다.

실험예 2: 시료의 세포독성

상기 실시예 2에서 수득한 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 배양물의 피부세포에 대한 세포독성을 평가하였다.

96-웰 시험 플레이트에 세포배양 배지(DMEM에 10% FBS가 첨가된 것)에 희석된 섬유아세포(fibroblast)를 1 x 10⁵ cells/mL개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다.

실시예 2에서 수득한 시료를 각 웰에 적절한 농도로 희석하여 처리한 후 24시간 동안 배양하였다.

24시간이 지나면 배지를 제거하고, 각 웰 당 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) 용액(2.5 mg/㎖)이 함유된 세포배양 배지 200 uL를 넣은 후 2시간 동안 37℃ CO₂배양기에서 배양하였다.

배지를 제거하고 DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 100 uL씩 넣어주었다.

5분간 진탕하여 세포를 용해시킨 후 마이크로플레이트 판독기에서 565 nm 흡광도를 측정하였다. 수학시 1와 같이 세포생존율(%)을 정하였으며, 세포의 생존에 영향을 미치지 않는 시료의 농도를 결정하였다.

<수학식 1>

세포생존율(%)={(St-Bo)/(Bt-Bo)}X 100

Bo: 세포배양배지만을 발색 반응한 웰의 565 nm 흡광값,

Bt: 시료를 처리하지 않고 발색 반응한 웰의 565 nm 흡광값,

St: 시료를 처리하고 발색 반응한 웰의 565 nm 흡광값.

시료명	100% 세포 생존 농도
실시예 2	5%
실시예 2	3%
실시예 2	1%
실시예 2	0.5%

상기 표 1과 같이, 피부 섬유아세포의 100% 생존 처리농도는 실시예 2의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 배양물이 5% 이하로, 이는 일반적으로 화장품에 사용되는 농도를 고려하였을 때 피부 자극 유발 가능성이 적은 안전한 시료인 것을 말해준다.

실험예 3: 피부자극 완화 효과

상기 실시예 2에서 수득한 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 균주의 배양물을 함유한 화장료의 자극 완화 효과를 인체 첩포 시험으로 평가하였다.

일반적 화장품 처방(크림, 로션, 스킨, 에센스)에 자극을 일으키는 SLS(Sodium lauryl sulfate) 1%와 실시예 2에서 제조된 제품을 혼용하여 24시간, 48시간, 72시간 동안 첩포하여 자극 유발지수를 바탕으로 자극완화 효과를 평가한 것이다.

20-50세의 건강한 남녀 50명의 팔 상박 부위에 FINN CHAMBER(FINLAND)를 이용하여 각각의 제품을 0.3 mg씩 첩포하고, 24시간 후 급성 자극 지수를 평가하였다. 평가 후 재차 동일한 부위에 동량의 제품을 첩포하여 48시간 및 72시간 후의 지연성 자극 지수를 평가하였다.

시험 결과 SLS를 단독으로 첩포한 부분은 24시간 후부터 피부에 붉게 자극이 나타났으나, 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물을 함유하는 제품을 첩포한 경우에는 24시간, 48시간, 72시간 경과 후에도 아무런 피부 발작을 일으키지 않았다.

이 결과는 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물이 화장료에 혼용되었을 때 자극을 유발시키는 기재(계면 활성제, 향, 알콜)에 의한 피부 자극을 감소시킬 수 있는 유의한 효과가 있음을 나타내는 것이다.

이하에 그 외의 실시예를 나타내었다. 즉, 실시예 2에서 수득한 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물을 함유한 샴푸, 화장수, 유액 및 미용액을 실시예 3 내지 6와 같이 제조하였다.

실시예 3: 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물을 함유하는 샴푸 제조

95% 에탄올 5g에 암모늄라우레스설페이트 5g, 코실베타인 5g, 알킬에테르셀페이트 0.5g, 실리콘 0.5g, 폴리쿼터 0.2g, 향료 0.2g, 보존제 0.02g를 혼합하였다.

실시예 2에서 수득한 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물 5g, 글리세린 5g을 정제수 85.33g에 용해한 것에 상기 혼합액을 첨가한 후 교반하여 샴푸를 얻었다.

실시예 4: 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물을 함유하는 화장수 제조

95% 에탄올 8g에 폴리피로리돈 0.05g, 올레일알콜 0.1g, 폴리옥시에틸렌모노올레이트 0.2g, 향료 0.2g, 파라옥시안식향산메틸에스테르 0.1g, 소량의 산화방지제, 소량의 색소를 혼합하였다.

실시예 2에서 수득한 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물 10g, 글리세린 5g을 정제수 85.33g에 용해한 것에 상기 혼합액을 첨가한 후 교반하여 화장수를 얻었다.

실시예 5: 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물을 함유한 유액 제조

세틸알콜1.2g, 스쿠알란 10g, 바세린 2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.2g, 글리세린모노에스테아레이드 1g, 폴리옥시에틸렌(20몰 부가)모노올레이트 1g및 향로 0.1g을 70℃에서 가열 및 혼합하여 용해하고, 실시예 2에서 수득한 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물 0.5g, 디프로필렌글리콜 5g, 폴리에틸렌글리콜-1500 2g, 트리에탄올아민 0.2g, 정제수 76.2g을 75℃로 가열해서 용해하였다. 양자를 혼합하여 유화시킨 후 냉각하여 수중유(O/W)형의 유액을 얻었다.

실시예 6: 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물을 함유한 미용액 제조

95% 에틸알콜 5g에 폴리옥시에틸렌솔비탄모노올레이트 1.2g, 키툴로오즈 0.3g, 히아루론산나트륨 0.2g, 비타민 E-아세테이트 0.2g, 감초산 나트륨 0.2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.1g, 실시예 2에서 수득한 본 발명의 락토바실러스 쿠르바투스 J2K-01 배양물 1g 및 적량의 색소를 혼합하여 미용액을 얻었다.

한국생명공학연구원 KCTC13494BP 20180314

<110> J2KBIO CO., LTD. <120> NTI-FUNGAL COMPOSITION COMPRISING LACTOBACILLUS CURVATUS FROM KIMCHI <130> j2k-01 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1521 <212> RNA <213> Lactobacillus curvatus <400> 1 ctcaggacga acgctggcgg cgtgcctaat acatgcaagt cgaacgcact ctcgttagat 60 tgaagaagct tgcttctgat tgataacatt tgagtgagtg gcggacgggt gagtaacacg 120 tgggtaacct gccctaaagt gggggataac atttggaaac agatgctaat accgcataaa 180 acctagcacc gcatggtgca aggttgaaag atggtttcgg ctatcacttt aggatggacc 240 cgcggtgcat tagttagttg gtgaggtaaa ggctcaccaa gaccgtgatg catagccgac 300 ctgagagggt aatcggccac actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag 360 cagtagggaa tcttccacaa tggacgaaag tctgatggag caacgccgcg tgagtgaaga 420 aggttttcgg atcgtaaaac tctgttgttg gagaagaacg tatttgatag taactgatca 480 ggtagtgacg gtatccaacc agaaagccac ggctaactac gtgccagcag ccgcggtaat 540 acgtaggtgg caagcgttgt ccggatttat tgggcgtaaa gcgagcgcag gcggtttctt 600 aagtctgatg tgaaagcctt cggctcaacc gaagaagtgc atcggaaact gggaaacttg 660 agtgcagaag aggacagtgg aactccatgt gtagcggtga aatgcgtaga tatatggaag 720 aacaccagtg gcgaaggcgg ctgtctggtc tgtaactgac gctgaggctc gaaagcatgg 780 gtagcaaaca ggattagata ccctggtagt ccatgccgta aacgatgagt gctaggtgtt 840 ggagggtttc cgcccttcag tgccgcagct aacgcattaa gcactccgcc tggggagtac 900 gaccgcaagg ttgaaactca aaggaattga cgggggcccg cacaagcggt ggagcatgtg 960 gtttaattcg aagcaacgcg aagaacctta ccaggtcttg acatcctttg accactctag 1020 agatagagct ttcccttcgg ggacaaagtg acaggtggtg catggttgtc gtcagctcgt 1080 gtcgtgagat gttgggttaa gtcccgcaac gagcgcaacc cttattacta gttgccagca 1140 tttagttggg cactctagtg agactgccgg tgacaaaccg gaggaaggtg gggacgacgt 1200 caaatcatca tgccccttat gacctgggct acacacgtgc tacaatggat ggtacaacga 1260 gtcgcgagac cgcgaggttt agctaatctc ttaaaaccat tctcagttcg gattgtaggc 1320 tgcaactcgc ctacatgaag ccggaatcgc tagtaatcgc ggatcagcat gccgcggtga 1380 atacgttccc gggccttgta cacaccgccc gtcacaccat gagagtttgt aacacccaaa 1440 gccggtgagg taaccttcgg gagccagccg tctaaggtgg gacagatgat tagggtgaag 1500 tcgtaacagg gtaacccgta a 1521

Claims (6)

1. 균주 배양물 0.5 ~ 5 중량%와, 소듐라우릴설페이트 1 중량%를 포함하여 구성되고,
   상기 균주 배양물은,
   기탁번호 KCTC 13494BP로 부여된, 묵은 김치로부터 분리한 락토바실러스 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus) J2K-01 균주를 배지에 접종하여 배양하여 제조하되,
   배양액의 pH를 5.5로 조정하고, 배양 시간은 24시간, 배양 온도는 35℃로 하며,
   배양 배지의 탄소원으로서 글루코스를 배지 총부피 대비 2%(W/V) 포함시키고,
   배양 배지의 질소원으로서 효모추출물을 배지 총부피 대비 1%(W/V) 포함시키며,
   배양 배지의 미량원소원으로서 황산망간을 배지 총부피 대비 0.1%(W/V), 포함시키고, 황산마그네슘을 배지 총부피 대비 0.05%(W/V) 포함시키며, 염화칼슘을 배지 총부피 대비 0.025%(W/V) 포함시키는 조건으로 배양하며,
   배양 후 원심분리하여 배양액으로부터 균체를 제거하고 상등액을 여과하여 수득한 것을 특징으로 하는,
   말라세지아 퍼퍼에 대한 항진균 성능을 가진 화장료 조성물.
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