KR101864463B1

KR101864463B1 - Alx 수용체 작용제로서의 옥사졸릴-메틸에테르 유도체

Info

Publication number: KR101864463B1
Application number: KR1020137017686A
Authority: KR
Inventors: 다니엘 부르; 올리비에 꼬르망뵈프; 실뱅 크랭; 코리나 그리소스토미; 사비에 르로이; 실비아 리샤르-빌드스텡
Original assignee: 이도르시아 파마슈티컬스 리미티드
Priority date: 2010-12-07
Filing date: 2011-12-06
Publication date: 2018-06-04
Anticipated expiration: 2031-12-06
Also published as: AU2011340146A1; SI2649068T1; DK2649068T3; JP5923107B2; WO2012077049A1; KR20130133240A; PT2649068E; TW201305151A; CA2816376A1; JP2013544878A; US8846733B2; US20130261159A1; PL2649068T3; RU2588567C2; TWI523853B; EP2649068A1; CN103261194B; CA2816376C; ES2526132T3; HRP20150049T1

Abstract

본 발명은 식 (I) 의 옥사졸릴-메틸에테르 유도체, 그의 제조 및 그의 약학적으로 활성인 화합물로서의 용도에 관한 것이다.

(식 중, R¹, R², R³, R⁴ 및 R⁵ 는 명세서 내에 정의한 바와 같음)

Description

ALX 수용체 작용제로서의 옥사졸릴-메틸에테르 유도체 {OXAZOLYL-METHYLETHER DERIVATIVES AS ALX RECEPTOR AGONISTS}

본 발명은 식 (I) 의 옥사졸릴-메틸에테르 유도체 및 이의 의약으로서의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 화합물의 제조 방법, 식 (I) 의 화합물을 하나 이상 함유하는 약학 조성물, 및 특히 이의 ALX 수용체 작용제로서의 용도를 비롯한 관련 양태에 관한 것이다.

ALXR (별칭 리폭신 A4 수용체, FPRL1, FPR2; 뉴클레오티드 서열 서열번호:1 및 아미노산 서열 서열번호:2 로서 WO2003/082314 에 개시됨) 은 G-단백질 커플링된 수용체 패밀리의 구성원이다. ALXR 은 고농도의 포르밀-메티오닌-류실-페닐알라닌 펩티드에 응하여 칼슘 동원을 매개하는 것으로 밝혀졌다. 또한, 지질 대사 산물인 리폭신 A4 (LXA4) 및 이의 유사체가 높은 친화성으로 ALXR 과 결합하여, ALXR 트랜스펙션된 세포 내에서 G-단백질 활성화 및 아라키돈산 생성을 증가시킨다는 것이 밝혀졌다 (Chiang et al., Pharmacol. Rev., 2006, 58, 463-487). LXA4 의 효과는 병에 걸린 각종 동물 모델에서 평가되었는데; LXA4 는 강력한 항-염증 및 친-분해 (pro-resolution) 활성을 갖는 것이 입증되었다. LXA4 또는 유도체, 또는 안정한 유사체가 생체 내 활성을 나타낸 질병 모델로는 예를 들어 피부 염증, 등 공기 주머니 (dorsal air pouch), 허혈/재관류 손상, 복막염, 결장염, 사구체간질증식 신염 (mesangioproliferative nephritis), 흉막염, 천식, 낭성 섬유증, 패혈증, 각막 손상, 혈관형성, 치주염, 카라기난-유도 통각과민, 및 이식대숙주병 (GvHD) 이 있다 (Schwab 및 Serhan, Current Opinion in Pharmacology, 2006, 414-420). ALXR 는 또한 프리온 단백질의 단편, 인간 면역결핍 바이러스 (HIV)-1_LAI 균주의 gp120 로부터 유도된 펩티드, 및 아밀로이드-베타 1-42 (Ab42) 를 비롯해, 각종 펩티드의 작용성 수용체로서 동정되었으며 (검토를 위해, Le et al., Protein Pept Lett., 2007,14, 846-853), 여러 결정적인 방식으로 알츠하이머병 (AD) 의 발병기전에 참여하는 것으로 시사된 바 있다 (Yazawa et al., FASEB J., 2001, 15, 2454-2462). 대식세포 및 미세아교 세포에 대한 ALXR 의 활성화는 지향적 세포 이동, 포식작용 및 매개체 방출을 증가시키는 G 단백질-매개 신호전달 연속단계를 개시시킨다. 이들 사건은 Ab42 가 과생성되어 축적된 AD 뇌의 질병 부위 내 노인성 플라크 근처로의 단핵 세포의 동원을 설명할 수 있다. 조직 손상 부위에 백혈구가 축적되는 것은 유해 제제의 제거를 목표로 하는 숙주 본성의 반응으로 여길 수 있으나, 활성화 단핵 포식세포는 또한 신경세포에 독성일 수 있는 초과산화물 음이온 등의 각종 물질을 방출한다. 따라서, ALXR 은 AD 뇌 내 Ab42 에 의해 유도된 친-염증 반응을 매개하여, 질병 진행을 악화시킬 수 있다. 또한, 신경보호능이 있는 펩티드인 humanin (HN) 은 단핵 포식세포 및 신경 세포주 상에서 인간 ALXR 과 Ab42 를 공유한다는 것도 보고되어 있으며, HN 의 신경보호 활성은 ALXR 의 경쟁적 점유에 기인할 수 있다고 시사된 바 있다 (Ying et al., J. Immunol., 2004, 172, 7078-7085).

ALXR 작용제의 생물학적 특성은 이에 제한되는 것은 아니나, 단핵구/대식세포/미세아교세포/수지상 세포 이동/활성화, 중성구 이동/활성화, 림프구 활성화, 증식 및 분화의 조절, 염증 조절, 사이토카인 생성 및/또는 방출 조절, 친염증 매개체 생성 및/또는 방출 조절, 면역 반응 조절이 포함된다.

본 발명은 인간 ALX 수용체의 비(非)-펩티드 작용제인 옥사졸릴-메틸에테르 유도체를 제공한다. 상기 화합물은 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환, 알레르기 병태, HIV-매개 레트로바이러스성 감염, 심장혈관 장애, 신경염증 (neuroinflammation), 신경계 장애, 통증, 프리온-매개 질병 및 아밀로이드-매개 장애 (특히, 알츠하이머병) 와 같은 ALX 수용체의 조절에 반응하는 질병의 예방 또는 치료에 유용하고; 또한 이들은 자가면역 질환의 예방 또는 치료, 및 면역 반응 (특히 예방 접종으로 유도되는 것) 의 조절에 유용하다.

또한 ALX 수용체 작용제이기도 한 다른 아미노트리아졸 유도체가 WO 2009/077990 및 WO 2010/143116 에 개시되어 있다. 추가로, ALX 수용체 작용제가 WO 2009/077954 및 WO 2010/143158 에 개시되어 있다.

WO 2009/077990 에 개시된 화합물에 반해, 알콕시-알킬에테르 부분에 부착된 헤테로아릴기의 종류는 놀랍게도 본 출원에 청구된 화합물의 작용 활성에 대해 높은 영향을 미친다. 또한, 본 발명의 화합물은 혈장 안정성 검정에서 시험했을 때 보다 안정하여 잠재적으로 혈장의 존재 하에서 더 낮은 공유 결합을 유도할 것이다.

본 발명의 여러가지 구현예를 이하에 제시한다:

1) 본 발명은 식 (I) 의 옥사졸릴-메틸에테르 유도체, 및 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 에 관한 것이다:

(식 중,

R ¹ 은 비치환되거나 또는 할로겐, (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)알콕시, (C₁-C₂)플루오로알킬 또는 (C₁-C₂)플루오로알콕시로 모노-치환된 페닐을 나타내고;

R ² 는 수소, 메틸 또는 시클로프로필 (및 바람직하게는 수소 또는 메틸) 을 나타내고;

R ³ 및 R ⁴ 는 동일하며 수소 또는 메틸을 나타내고; 및

R ⁵ 는 (C₁-C₂)알킬을 나타냄).

구현예 1) 에 따른 식 (I) 의 화합물은 하나 이상의 입체생성 (stereogenic) 또는 비대칭 중심, 예컨대 하나 이상의 비대칭 탄소 원자를 포함할 수 있다. 이중 결합에서의 치환기는 달리 언급하지 않는 한, (Z)- 또는 (E)-배치 (configuration) 로 존재할 수 있다. 따라서, 식 (I) 의 화합물은 입체이성질체의 혼합물 또는 바람직하게는 순수 입체이성질체로서 존재할 수 있다. 입체이성질체의 혼합물은 당업자에게 공지되어 있는 방식으로 분리될 수 있다.

하기의 문단은 본 발명에 따른 화합물의 각종 화학적 부분의 정의를 제공하며, 이는 달리 명백하게 제시된 정의가 더 넓거나 또는 더 좁은 정의를 제공하지 않는 한, 당해 명세서 및 청구항 전반에 걸쳐 균일하게 적용되는 것으로 의도된다.

단독으로 또는 조합되어 사용되는 용어 "알킬" 이란, 1 내지 4 개의 탄소 원자를 포함하는 직쇄 또는 분지쇄 알킬기를 지칭한다. 용어 "(C_x-C_y)알킬" (x 및 y 는 각각 정수임) 은 x 내지 y 개의 탄소 원자를 포함하는 앞서 정의한 바와 같은 알킬기를 지칭한다. 예를 들어, (C₁-C₄)알킬기는 1 내지 4 개의 탄소 원자를 포함한다. 알킬기의 대표적인 예에는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸, sec-부틸 및 tert-부틸이 포함된다.

(C₁-C₄)알킬기가 페닐기에 대한 치환기인 경우, 용어 "(C₁-C₄)알킬" 은 상기 정의한 바와 같은 (C₁-C₄)알킬기를 의미한다. 상기 기의 예로는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸, sec-부틸 및 tert-부틸이다. "R ⁵ " 가 "(C₁-C₂)알킬" 을 나타내는 경우, 상기 용어는 상기 정의한 바와 같은 (C₁-C₂)알킬기를 의미한다. 상기 기의 예는 메틸 및 에틸이다. 바람직한 것은 메틸이다.

단독으로 또는 조합해서 사용되는 용어 "알콕시" 는 알킬-O- 기를 지칭하며, 이때 알킬기는 앞서 정의한 바와 같다. 용어 "(C_x-C_y)알콕시 (x 및 y 각각은 정수임) 는 x 내지 y 개수의 탄소 원자를 포함하는 앞서 정의한 바와 같은 알콕시기를 지칭한다. 예를 들어, (C₁-C₄)알콕시기는 1 내지 4 개의 탄소 원자를 포함한다. 알콕시기의 대표적인 예에는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소-프로폭시, n-부톡시, 이소-부톡시, sec-부톡시 및 tert-부톡시가 포함된다. 바람직한 것은 메톡시이다.

용어 "플루오로알킬" 은 1 또는 2 개의 탄소 원자를 포함하는 앞서 정의한 바와 같은 알킬기를 지칭하며, 이때 1 개 이상의 (및 가능하게는 모든) 수소 원자는 불소로 대체되어 있다. 용어 "(C_x-C_y)플루오로알킬" (x 및 y 각각은 정수임) 은 x 내지 y 개의 탄소 원자를 포함하는 앞서 정의한 바와 같은 플루오로알킬기를 지칭한다. 예를 들어, (C₁-C₂)플루오로알킬기는 1 또는 2 개의 탄소 원자를 포함하고, 이때 1 내지 5 개의 수소 원자는 불소로 대체되어 있다. 플루오로알킬기의 대표적인 예에는 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸 및 2,2,2-트리플루오로에틸이 포함된다. 바람직한 것은 (C₁)플루오로알킬, 예컨대 트리플루오로메틸 및 디플루오로메틸이다. 가장 바람직한 것은 트리플루오로메틸이다.

용어 "플루오로알콕시" 란 1 또는 2 개의 탄소 원자를 포함하는 앞서 정의한 바와 같은 알콕시기를 지칭하며, 이때 1 개 이상의 (및 가능하게는 모든) 수소 원자는 불소로 대체되어 있다. 용어 "(C_x-C_y)플루오로알콕시" (x 및 y 각각은 정수임) 는 x 내지 y 개의 탄소 원자를 포함하는 앞서 정의한 바와 같은 플루오로알콕시기를 지칭한다. 예를 들어, (C₁-C₂)플루오로알콕시기는 1 또는 2 개의 탄소 원자를 포함하고, 이때 1 내지 5 개의 수소 원자는 불소로 대체되어 있다. 플루오로알콕시기의 대표적인 예에는 트리플루오로메톡시, 디플루오로메톡시 및 2,2,2-트리플루오로에톡시가 포함된다. 바람직한 것은 (C₁)플루오로알콕시기, 예컨대 트리플루오로메톡시 및 디플루오로메톡시이다. 가장 바람직한 것은 트리플루오로메톡시이다.

용어 할로겐은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도, 바람직하게는 플루오로, 클로로 또는 브로모, 가장 바람직하게는 플루오로 또는 클로로를 의미한다.

2) 본 발명의 추가의 구현예는

R ¹ 이 비치환되거나 또는 할로겐, (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)알콕시, (C₁-C₂)플루오로알킬 또는 (C₁-C₂)플루오로알콕시로 모노-치환된 페닐을 나타내고;

R ² 가 수소, 메틸 또는 시클로프로필 (및 바람직하게는 수소 또는 메틸) 을 나타내고;

R ³ 및 R ⁴ 가 동일하며 수소 또는 메틸을 나타내고; 및

R ⁵ 가 메틸을 나타내는,

구현예 1) 에 따른 옥사졸릴-메틸에테르 유도체, 및 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 에 관한 것이다.

3) 본 발명의 추가의 구현예는

R ¹ 이 비치환되거나 또는 플루오로, 클로로, 메틸, 메톡시, 트리플루오로메틸 또는 트리플루오로메톡시로 모노-치환된 (및 바람직하게는 비치환되거나 또는 플루오로, 클로로, 메틸 또는 트리플루오로메틸로 모노-치환된) 페닐을 나타내고;

R ² 가 수소 또는 메틸 (및 바람직하게는 메틸) 을 나타내고;

R ³ 및 R ⁴ 가 동일하며 수소 또는 메틸을 나타내고; 및

R ⁵ 가 메틸을 나타내는,

4) 본 발명의 추가의 구현예는

R ¹ 이 비치환되거나 또는 플루오로, 클로로, 메틸, 메톡시, 트리플루오로메틸 또는 트리플루오로메톡시로 모노-치환된 페닐을 나타내는,

구현예 1) 내지 3) 중 어느 하나에 따른 옥사졸릴-메틸에테르 유도체, 및 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 에 관한 것이다.

5) 본 발명의 추가의 구현예는

R ¹ 이 비치환되거나 또는 할로겐 또는 (C₁-C₄)알킬로 모노-치환된 (및 바람직하게는 비치환되거나 또는 플루오로, 클로로 또는 메틸로 모노-치환된) 페닐을 나타내는,

6) 본 발명의 추가의 구현예는

R ¹ 이 비치환되거나 또는 (C₁-C₄)알킬로 모노-치환된 (및 바람직하게는 메틸로 모노-치환된) 페닐을 나타내는,

7) 본 발명의 추가의 구현예는

R ¹ 이 모노-치환된 페닐기를 나타내는 경우, 상기 페닐기는 메타-위치에 치환되어 있는,

구현예 1) 내지 6) 중 어느 하나에 따른 옥사졸릴-메틸에테르 유도체, 및 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 에 관한 것이다.

8) 본 발명의 추가의 구현예는

R ² 가 수소 또는 메틸을 나타내는,

구현예 1) 내지 7) 중 어느 하나에 따른 옥사졸릴-메틸에테르 유도체, 및 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 에 관한 것이다.

9) 본 발명의 추가의 구현예는

R ² 가 수소를 나타내는,

10) 본 발명의 추가의 구현예는

R ² 가 메틸을 나타내는,

11) 본 발명의 추가의 구현예는

R ³ 및 R ⁴ 둘 모두가 수소를 나타내는,

구현예 1) 내지 10) 중 어느 하나에 따른 옥사졸릴-메틸에테르 유도체, 및 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 에 관한 것이다.

12) 본 발명의 추가의 구현예는

R ³ 및 R ⁴ 둘 모두가 메틸을 나타내는,

13) 본 발명의 추가의 구현예는

R ⁵ 가 메틸을 나타내는,

구현예 1) 내지 12) 중 어느 하나에 따른 옥사졸릴-메틸에테르 유도체, 및 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 에 관한 것이다.

14) 구현예 1) 에 정의된 바와 같은 바람직한 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:

N-(2-((4-(2-메톡시프로판-2-일)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드;

N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드;

N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-페닐옥사졸-4-카르복사미드;

5-(3-클로로페닐)-N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸옥사졸-4-카르복사미드;

N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페닐)옥사졸-4-카르복사미드;

5-(3-클로로페닐)-N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)옥사졸-4-카르복사미드;

N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(3-메톡시페닐)옥사졸-4-카르복사미드;

N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(3-메톡시페닐)-2-메틸옥사졸-4-카르복사미드;

5-(3-플루오로페닐)-N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸옥사졸-4-카르복사미드;

N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드;

N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(3-(트리플루오로메톡시)페닐)옥사졸-4-카르복사미드;

2-시클로프로필-N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드; 및

N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-페닐옥사졸-4-카르복사미드.

15) 구현예 1) 에 정의된 바와 같은 추가의 바람직한 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염 (특히, 약학적으로 허용가능한 염) 은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된다:

N-(2-((4-(에톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드; 및

N-(2-((4-(에톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-페닐옥사졸-4-카르복사미드.

본 발명은 또한 하나 이상의 원자가 동일한 원자 번호를 갖지만 자연에서 통상 발견되는 원자량과 상이한 원자량을 갖는 원자에 의해 대체될 수 있는 것 외에는 식 (I) 의 화합물과 동일한 화합물인, 식 (I) 의 동위원소 표지된, 특히 ²H (중수소) 표지된 화합물을 포함한다. 동위원소 표지된, 특히 ²H (중수소) 표지된 식 (I) 의 화합물 및 그 염은 본 발명의 범위 내이다. 수소를 더 무거운 동위원소 ²H (중수소) 로 치환시키면, 보다 큰 대사 안정성을 유도하여 예컨대 생체내 반감기의 증가 또는 투여 요구량의 감소를 제공할 수 있거나 또는 사이토크롬 P450 효소의 감소된 저해를 유도하여 예컨대 안전성 프로파일의 개선을 제공할 수 있다. 본 발명의 한 구현예에서, 식 (I) 의 화합물은 동위원소 표지되지 않거나, 또는 하나 이상의 중수소 원자로만 표지된다. 하위 구현예에서, 식 (I) 의 화합물은 동위원소 표지되지 않는다. 식 (I) 의 화합물의 동위원소 표지된 화합물은 적합한 시약 또는 출발 물질의 적절한 동위원소 변형물을 이용하는 것 외에는 이후 기재하는 방법에 준하여 제조할 수 있다.

용어 "약학적으로 허용가능한 염" 은 무독성, 무기 또는 유기 산 및/또는 염기 부가염을 지칭한다. 예를 들어 문헌 ["Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm . (1986), 33, 201-217] 을 참조한다.

화합물, 염, 약학 조성물, 질병 등에 있어서 복수형이 사용된 경우, 이는 단일 화합물, 염 등도 의미하는 것으로 의도된다.

구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약제로서 이용하기에 적합하다. 특히, 식 (I) 의 화합물은 ALX 수용체를 조절하고, 즉 이들은 ALX 수용체 작용제로서 작용하고, ALX 수용체의 활성화에 반응하는 질병, 예컨대 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환, 알레르기 병태, HIV-매개 레트로바이러스성 감염, 심장혈관 장애, 신경염증, 신경계 장애, 통증, 프리온-매개 질병 및 아밀로이드-매개 장애 (특히 알츠하이머병) 의 예방 또는 치료에 유용하며; 또한 이들은 면역 반응 (특히 예방 접종에 의해 유도됨) 의 조절에 유용하다. 특히, 식 (I) 의 화합물은 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환, 알레르기 병태, 자가면역 질환, 심장혈관 장애, 신경염증, 신경계 장애, 통증, 프리온-매개 질병 및 아밀로이드-매개 장애 (특히 알츠하이머병) 등의 질병의 예방 또는 치료에 유용하다.

특히, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환 및 알레르기 병태로부터 선택되는 질병의 예방 또는 치료에 적합하다.

염증 질환, 폐쇄성 기도 질환 및 알레르기 병태에는 하기 군의 질병 및 장애 중 하나, 몇몇 또는 전부가 포함되나, 이에 제한되는 것은 아니다:

1) 급성 폐 손상 (ALI); 성인/급성 호흡곤란 증후군 (ARDS); 만성 폐쇄성 폐병, 기도 또는 폐 질환 (COPD, COAD 또는 COLD), 이와 관련된 만성 기관지염 또는 호흡곤란 포함; 폐기종; 그리고 기타 약물 요법, 특히 기타 흡입 약물 요법의 결과로 일어나는 기도 과다 활동의 악화. 특히, 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환 및 알레르기 병태는 COPD, COAD 및 COLD 를 포함한다.

2) 추가의 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환 및 알레르기 병태에는 모든 유형 또는 기원의 기관지염이 포함된다.

3) 추가의 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환 및 알레르기 병태에는 모든 유형 또는 기원의 기관지확장증 및 진폐증이 포함된다.

4) 추가의 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환 및 알레르기 병태에는 내인성 (비-알레르기성) 천식 및 외인성 (알레르기성) 천식, 조절된 (controlled) 천식, 미조절된 (uncontrolled) 천식, 경미한 천식, 보통의 천식, 중증 천식, 기관지염성 천식, 운동-유도 천식, 직업성 천식 및 세균 감염 후 유도된 천식을 포함한, 모든 유형 또는 기원의 천식이 포함된다.

5) 추가의 구현예에서, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 염증 질환의 예방 또는 치료에 특히 적합하다. 염증 질환에는 하기 군의 질병 및 장애 중 하나, 몇몇 또는 전부가 포함된다:

5a) 특히, 염증 질환은 호중구 관련 장애를 일컫는데, 이는 기도 및/또는 폐에 영향을 끼치기 때문이며, 특히 고-호중구증가증을 비롯한 기도의 호중구 관련 장애를 지칭한다. 추가의 호중구 관련 장애에는 또한 치주염, 사구체신염, 및 낭성 섬유증이 포함된다.

5b) 추가의 염증 질환에는 피부 질환, 예컨대 건선, 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 포진성 피부염, 공피증, 과민성 혈관염, 두드러기, 홍반 루푸스, 및 표피박리증이 포함된다.

5c) 추가의 염증 질환은 또한 염증 성분을 갖는 질병 또는 병태에 관한 것이다. 염증 성분을 갖는 질병 또는 병태에는, 이에 제한되는 것은 아니나, 눈에 영향을 미치는 질병 및 병태, 예컨대 포도막염 (앞, 중간 및 뒤), 베체트 증후군 포도막염, 결막염, 건성각결막염, 및 쇼그렌 증후군 건성각결막염, 및 봄철결막염 (특히 결막염, 건성각결막염, 및 봄철결막염); 비염 및 알레르기성 비염 (특히 알레르기성 비염) 을 비롯한 코에 영향을 미치는 질병; 및 자가면역 반응이 연루되어 있거나 또는 자가면역 성분 또는 병인을 갖는 염증 질환, 예컨대 전신 홍반 루푸스, 강직성 척추염, 베체트 증후군, 쇼그렌 증후군, 다발성연골염, 공피증, 웨그너 육아종증, 피부근염, 만성 활성 간염, 중증근육무력증, 스티븐스-존슨 증후군, 특발성 스프루, 자가면역 염증성 장 질환 (예를 들어, 궤양 결장염 및 크론병), 내분비 안구병증, 만성 과민성 폐렴, 원발성 쓸개관간경화, 건성각결막염 및 봄철각결막염, 간질 폐 섬유증, 건선 관절염 및 사구체신염 (특히 전신 홍반 루푸스, 다발성연골염, 공피증, 웨그너 육아종증, 피부근염, 만성 활성 간염, 중증근육무력증, 스티븐스-존슨 증후군, 특발성 스프루, 자가면역 염증성 장 질환 (예를 들어, 궤양 결장염 및 크론병), 내분비 안구병증, 만성 과민성 폐렴, 원발성 쓸개관간경화, 건성각결막염 및 봄철각결막염, 간질 폐 섬유증, 건선 관절염 및 사구체신염) 이 포함된다.

5d) 자가면역 반응이 연루되어 있거나 또는 자가면역 성분 또는 병인을 갖는 추가의 염증 질환에는 류마티스 관절염, 하시모토 갑상샘 및 I 형 또는 II 형 당뇨병이 포함된다.

또한, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 기관 또는 조직 이식 거부의 예방 또는 치료에, 예를 들어 심장, 폐, 조합된 심장-폐, 간, 신장, 췌장, 피부 또는 각막 이식 받은 사람의 치료, 및 이식편대숙주병, 예컨대 때때로 골수 이식 이후 발생하는 것의 예방에, 특히 급성 또는 만성 동종- 및 이종이식 거부의 치료에 또는 인슐린 생성 세포, 예를 들어 췌장도 세포의 이식에 적합하다.

추가로, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물, 이의 약학적으로 허용가능한 염은 HIV-매개 레트로바이러스성 감염의 예방 또는 치료에 적합하다.

HIV-매개 레트로바이러스성 감염은, 이에 제한되는 것은 아니나, GUN-4v, GUN-7wt, AG204, AG206, AG208, HCM305, HCM308, HCM342, mSTD104, 및 HCM309 등의 HIV-1 및 HIV-2 균주에 의해 야기된 질병 및 장애 군 중 하나, 몇몇 또는 전부가 포함된다.

추가로, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 심장혈관 장애의 예방 또는 치료에 적합하다.

심장혈관 장애는 심장혈관 계통 (심장 포함) 의 하나 이상의 질병 상태 및 의존 기관의 질병을 지칭한다. 심장혈관 계통의 질병 상태 및 의존 기관의 질병에는, 이에 제한되는 것은 아니나, 심장 근육의 장애 (심근병증 또는 심근염), 예컨대 특발성 심근병증, 당뇨병 심근병증, 알코올성 심근병증, 약물-유도 심근병증, 허혈성 심근병증, 및 고혈압 심근병증을 포함하는 대사 심근병증; 대동맥, 관상동맥, 경동맥, 대뇌동맥, 콩팥동맥, 엉덩동맥, 넙다리동맥, 및 오금동맥 등의 주요 혈관의 죽상 장애 (대혈관 질환; macrovascular disease); 망막 세동맥, 사구체 세동맥, 신경속 혈관 (vasa nervorum), 심장 세동맥, 및 안구, 신장, 심장, 및 중추 및 말초 신경계의 연관 모세 혈관계 등의 소혈관의, 독성, 약물-유도, 및 대사 (고혈압 및/또는 당뇨병 포함) 장애 (미세혈관 질환); 및 대동맥, 관상동맥, 경동맥, 대뇌동맥, 콩팥동맥, 엉덩동맥, 넙다리동맥 및 오금동맥 등의 주요 혈관의 죽상 병변의 판 파열이 포함된다.

추가로, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 신경염증의 예방 또는 치료에 적합하다. 신경염증은 세포 신호전달 분자 생성, 신경교세포의 활성화 또는 신경교세포 활성화 경로 및 반응, 친염증성 사이토카인 또는 케모카인, 별아교세포의 활성화 또는 별아교세포 활성화 경로 및 반응, 미세아교세포의 활성화 또는 미세아교세포 활성화 경로 및 반응, 산화 스트레스-관련 반응, 예컨대 산화질소 합성효소 생성 및 산화질소 축적, 급성기 단백질, Post Synaptic Density-95 Protein (PSD-95) 및 시냅토피신 (synaptophysin) 의 상실, 보체 연속반응의 성분, 시냅스 기능의 상실 또는 감소, 단백질 키나아제 활성 (예를 들어, 치사 연관된 단백질 키나아제 활성), 행동 결핍, 세포 손상 (예를 들어, 신경세포 손상), 세포사 (예를 들어, 신경세포사), 및/또는 아밀로이드 판의 아밀로이드 β 침착을 지칭한다.

추가로, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 신경계 장애의 예방 또는 치료에 적합하다.

특히, 신경계 장애는, 이에 제한되는 것은 아니나, 간질, 뇌졸중, 뇌경색, 뇌성 마비, 재발 다발경화증, 진행성 다발경화증, 시신경척수염, 임상적 독립 증후군, 알퍼 (Alper) 질환, 근위축성측색경화증 (ALS), 노인성 치매, 루이체 (Lew bodies) 동반 치매, 레트 (Rett) 증후군, 척수 외상, 외상성 뇌손상, 삼차신경통, 만성 염증 탈수초화 다발성 신경병증, 귈레인-바레 (Guillain-Barre) 증후군, 설인신경통, 벨 (Bell) 마비, 중증근육무력증, 근육퇴행위축, 진행성 근육 위축, 진행성 연수 유전 근육 위축 (progressive bulbar inherited muscular atrophy), 탈출, 파열 또는 탈 척추 디스크 증후군, 경추증, 얼기 장애, 흉각 출구 파괴 증후군, 말초 신경병증, 경도 인지 저하, 인지 저하, 알츠하이머병, 파킨슨병 및 헌팅턴 무도병, 척수 근육 위축증, 폴리글루타민 질환 (예를 들어 척추 인경 근위축증 (케네디병 (Kennedy disease)), 척수소뇌성 실조증 타입 1, 2, 3 (마샤도-조세프병), 6, 7, 17) 및 뇌 말라리아 (특히 간질, 뇌졸중, 뇌경색, 뇌성 마비, 재발 다발경화증, 진행성 다발경화증, 알퍼 질환, 근위축성측색경화증 (ALS), 노인성 치매, 루이체 동반 치매, 레트 증후군, 척수 외상, 외상성 뇌손상, 삼차신경통, 설인신경통, 벨 마비, 중증근육무력증, 근육퇴행위축, 진행성 근육 위축, 진행성 연수 유전 근육 위축, 탈출, 파열 또는 탈 척추 디스크 증후군, 경추증, 얼기 장애, 흉각 출구 파괴 증후군, 말초 신경병증, 경도 인지 저하, 인지 저하, 알츠하이머병, 파킨슨병 및 헌팅턴 무도병) 이 포함된다.

추가로, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 통증의 예방 또는 치료에 적합하다. 통증에는, 이에 제한되는 것은 아니나, 당뇨병 신경병증, 포진후신경통, 삼차신경통, 통증성 당뇨병 다발신경병증, 뇌졸중 후 통증, 절단 후 통증, 척수증성 또는 신경근병증 통증, 비정형적인 얼굴 통증 및 작열통-유사 증후군 등과 같은 병태로 예시되는 신경병증성 통증이 포함된다.

추가로, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 프리온-매개 질병의 예방 또는 치료에 적합하다. 프리온-매개 질병은 전염성 해면상뇌증 (TSE) 으로도 공지되어 있으며, 이에는쿠루, Gerstmann-Straeussler-Scheinker 증후군 (GSS), 치명성 가계 불면증 (FFI) 및 크루이츠펠트 야콥병 (CJD) 이 포함되나 이에 제한되지는 않는다.

추가로, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 아밀로이드-매개 장애의 치료에 적합하다. 아밀로이드-매개 장애는 아밀로이드 또는 아밀로이드-유사 단백질과 연관되거나 또는 이로 인해 야기되는 질병 및 장애로서 정의된다. 아밀로이드 또는 아밀로이드-유사 단백질과 연관되거나 또는 이로 인해 야기된 질병 및 장애에는 이에 제한되는 것은 아니나, 인지 기억능의 손실을 특징으로 하는 질병 또는 병태, 예컨대 경도 인지 손상 (MCI) 을 비롯한 알츠하이머병 (AD); 루이체 동반 치매; 다운증후군; 아밀로이드증 수반 뇌출혈 등이 포함된다. 또다른 구현예에서, 아밀로이드 또는 아밀로이드 유사 단백질과 연관되거나 또는 이로 인해 야기되는 질병 및 장애에는 진행성 핵상 마비, 아밀로이드 경쇄 아밀로이드증, 가족성 아밀로이드 신경병증, 다발 경화증, 크루이츠펠트 야콥병, 파킨슨병, 혈관성 치매, HIV-관련 치매, 근위축성측색경화증 (ALS), 봉입체 근염 (IBM), 성인발병형 당뇨병, 및 노인성 심아밀로이드증 (특히 진행성 핵상 마비, 다발 경화증, 크루이츠펠트 야콥병, 파킨슨병, HIV-관련된 치매, 근위축성측색경화증 (ALS), 봉입체 근염 (IBM), 성인발병형 당뇨병 및 노인성 심아밀로이드증) 이 포함된다.

추가로, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 면역 반응의 조절에 적합하다.

면역 반응의 조절에는, 이에 제한되는 것은 아니나, 하나 이상의, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 및 하나 이상의 항원의 조성물을 대상체에 투여하는 것을 기초로 하는 방법이 포함된다. 일부 경우에서는, 항원-함유 조성물이 먼저 투여된 후, 하나 이상의, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 조성물이 투여된다. 다른 경우에는, 항원-함유 조성물이 마지막에 투여된다. 상이한 조성물들이 동시에, 근접하여 순서대로 또는 시간을 두고 분리해서 투여될 수 있다. 이러한 방법 및 조성물은 치료 및 예방적 면역화 (즉, 조정된 및/또는 선천적 면역 반응의, 신중한 자극, 강화, 증대 또는 조절) 에 제공된다. 특정 장점으로는 하기 중 하나 이상을 포함할 수 있다:

1) 항원의 단독 투여와 비교하여, 하나 이상의, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 및 항원의 투여 이후 촉진된 면역 반응;

2) 소량의 항원 (예를 들어, 독소 또는 병원체) 또는 습관적으로 강한 면역 반응을 유도하지 않는 항원에 대한 매우 큰 민감성; 및

3) 더욱 효과적인 항-종양 치료법.

또한, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 낭성 섬유증, 폐 섬유증, 폐동맥 고혈압, 상처 치유, 당뇨병 콩팥병증, 이식 조직의 염증 감소, 병원성 유기체로 인한 염증 질환의 치료 또는 예방에 적합하다.

특히, 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기 군의 질병 및 장애 중 하나, 몇몇 또는 전부로부터 선택되는 질병의 예방 또는 치료에 적합하다:

1) 염증 질환, 폐쇄성 기도 질환 및 알레르기 병태, 예컨대 급성 폐 손상 (ALI); 성인/급성 호흡곤란 증후군 (ARDS); 만성 폐쇄성 폐병, 기도 또는 폐 질환 (COPD, COAD 또는 COLD), 이와 관련된 만성 기관지염 또는 호흡곤란 포함; 및 내인성 (비-알레르기성) 천식 및 외인성 (알레르기성) 천식, 조절된 천식, 미조절된 천식, 경미한 천식, 보통의 천식, 중증 천식, 기관지염성 천식, 운동-유도 천식, 직업성 천식 및 세균 감염 후 유도된 천식을 포함한, 모든 유형 또는 기원의 천식 (특히 급성 폐 손상 (ALI); 성인/급성 호흡곤란 증후군 (ARDS); 및 내인성 (비-알레르기성) 천식 및 외인성 (알레르기성) 천식, 조절된 천식, 미조절된 천식, 경미한 천식, 보통의 천식, 중증 천식, 기관지염성 천식, 운동-유도 천식, 직업성 천식 및 세균 감염 후 유도된 천식을 포함한, 모든 유형 또는 기원의 천식);

2) 염증 질환, 예컨대 호중구 관련 장애, 특히 기도 및/또는 폐에 영향을 끼치기 때문에 특히 고-호중구증가증을 비롯한 기도의 호중구 관련 장애; 치주염; 사구체신염; 낭성 섬유증; 및 피부 질환, 예컨대 건선, 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 포진성 피부염, 공피증, 과민성 혈관염, 두드러기, 홍반 루푸스, 및 표피박리증;

3) 눈에 영향을 미치는 질병 및 병태와 같은 염증 성분을 갖는 질병, 예컨대 결막염, 건성각결막염, 및 봄철결막염; 자가면역 반응이 연루되어 있거나 또는 자가면역 성분 또는 병인을 갖는 염증 질환; 및 자가면역 염증성 장 질환 (예를 들어, 궤양 결장염 및 크론병);

4) HIV-매개 레트로바이러스성 감염, 예컨대 GUN-4v, GUN-7wt, AG204, AG206, AG208, HCM305, HCM308, HCM342, mSTD104, 및 HCM309 와 같은 HIV-1 및 HIV-2 균주에 의해 야기된 질병 및 장애;

5) 세포 신호전달 분자 생성, 신경교세포의 활성화 또는 신경교세포 활성화 경로 및 반응, 친염증성 사이토카인 또는 케모카인, 별아교세포의 활성화 또는 별아교세포 활성화 경로 및 반응, 미세아교세포의 활성화 또는 미세아교세포 활성화 경로 및 반응, 산화 스트레스-관련 반응, 예컨대 아밀로이드 판의 아밀로이드 β 침착을 지칭하는 신경염증;

6) 신경계 장애, 예컨대 뇌졸중, 뇌경색, 알츠하이머병, 및 파킨슨병;

7) 전염성 해면상뇌증 (TSE) 으로도 공지되어 있는 프리온-매개 질병, 예컨대 쿠루, Gerstmann-Straeussler-Scheinker 증후군 (GSS), 치명성 가계 불면증 (FFI) 및 크로이츠펠트-야콥병 (CJD);

8) 아밀로이드-매개 장애;

9) 낭성 섬유증, 상처 치유 및 병원성 유기체에 의한 염증 질환.

본 발명은 또한 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물의, 상술한 질병의 치료 및/또는 예방용 약학적 조성물의 제조를 위한 용도에 관한 것이기도 하다.

본 발명은 또한 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물의, 약학적으로 허용가능한 염 및 약학적 조성물 및 제형물에 관한 것이기도 하다.

본 발명에 따른 약학 조성물은 활성제로서 하나 이상의 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 (또는 이의 약학적으로 허용가능한 염) 및 임의로는 담체 및/또는 희석제 및/또는 보조제를 함유한다.

구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약제, 예를 들어 경장적 (특히 경구적) 또는 비경구적 투여 (국소 도포 또는 흡입 포함) 용 약학 조성물의 형태로 사용될 수 있다.

약학 조성물의 생산은 당업자에게 익숙한 방식으로 (예를 들어 문헌 [Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition (2005), Part 5, "Pharmaceutical Manufacturing"[published by Lippincott Williams & Wilkins] 참고), 상기 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을, 임의로는 기타 치료학적으로 가치 있는 물질과 조합해, 적합하고 무독성이며 불활성인 치료학적으로 상용가능한 고체 또는 액체 담체 물질 및 요구된다면 통상의 약학적 보조제와 함께 생약 투여 형태로 제공함으로써 달성될 수 있다.

본 발명은 또한 구현예 1) 내지 15) 중 어느 하나에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 약학적으로 활성인 양을 대상체에 투여하는 것을 포함하는, 본원에 언급된 질병 또는 장애의 예방 또는 치료 방법에 관한 것이기도 하다.

상기 문맥에서 식 (I) 의 화합물에 대한 모든 언급은 적절한 경우 편의에 따라 또한 상기 화합물의 염 (및 특히 약학적으로 허용가능한 염) 을 지칭하는 것으로 여겨진다. 물론, 식 (I) 의 화합물에 대해 제시된 바람직한 예는 필요한 부분만 약간 수정하여 식 (I) 의 화합물의 염 및 약학적으로 허용가능한 염에 적용된다. 이것은 약제로서의 이들 화합물, 활성 성분으로서 이들 화합물을 포함하는 약학 조성물 또는 본 발명에 따른 질병의 치료를 위한 약제 제조를 위한 이들 화합물의 용도에 적용된다.

온도에 관하여서 사용되지 않는다면, 수치 "X" 앞에 놓인 용어 "약" 은, 본 출원에서 (X) - (X 의 10%) 내지 (X) + (X 의 10%) 범위의 구간, 바람직하게는 (X) - (X 의 5%) 내지 (X) + (X 의 5%) 범위의 구간을 지칭한다. 온도의 특정한 경우에서는, 온도 "Y" 앞에 놓인 용어 "약" 은, 본 출원에서 온도 Y - 10℃ 내지 Y + 10℃ 범위의 구간, 바람직하게는 Y - 5℃ 내지 Y + 5℃ 범위의 구간을 지칭한다. 또한, 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "실온" (rt) 은 약 25℃ 의 온도를 지칭한다.

용어 "사이" 가 수치 범위를 기술하는데 사용되는 경우라면 언제든지, 제시된 범위의 끝점이 명백히 그 범위에 포함되는 것으로 여겨진다. 예시: 온도 범위가 40 ℃ 와 80 ℃ 사이인 것으로 기재된 경우, 이것은 끝점인 40 ℃ 와 80 ℃ 가 그 범위에 포함되는 것을 의미하거나; 또는 변수가 1 과 4 사이의 정수인 것으로서 한정된 경우, 이것은 정수 1, 2, 3 또는 4 인 것을 의미한다.

식 (I) 의 화합물은 하기에 주어진 방법으로, 실시예에 주어진 방법으로, 또는 유사한 방법으로 제조할 수 있다. 최적의 반응 조건은 사용되는 특정한 반응물 또는 용매에 따라 다양할 수 있으나, 이러한 조건은 통상의 최적 절차에 의해 당업자가 결정할 수 있다.

달리 언급되지 않는 한, 일반 기 R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ 및 R ⁵ 는 식 (I) 에 있어서 정의된 바와 같다. 사용된 기타 약어는 실험부에서 정의한다.

알코올과 메탄술포닐 클로라이드 (Ms-Cl) 의 반응으로부터, 사용된 반응 조건에 따라 각각의 클로라이드 또는 각각의 메실레이트 유도체가 형성될 수 있다; 이러한 반응 조건의 사전의 약간의 변경은 상기 반응의 결과에 영향을 미칠 수 있음이 당업계에 익히 공지되어 있다; 통상적으로 클로라이드 및 메실레이트의 두 시약이 하기에 논의된 반응에서 친전자체로서 유용할 수 있는 것으로 이해되어야 한다.

A. 최종 생성물의 합성

A.a) 식 (I) 의 화합물은, Et₃N 또는 DIPEA 등의 염기의 존재 하에 CH₂Cl₂ 등의 적합한 용매 중에서 약 실온의 온도에서 적절한 카르복실산 클로라이드와의 반응에 의해 구조 1 의 아민으로부터 제조할 수 있다. 적절한 카르복실산 클로라이드는 톨루엔 등의 적합한 용매 중에서 DMF 의 존재 하에 옥살릴 클로라이드 등의 시약과의 반응에 의해 구조 5 의 상응하는 카르복실산으로부터 약 실온의 온도에서 제조할 수 있다. 다르게는, 구조 1 의 아민을, CH₂Cl₂ (또는 CH₂Cl₂ 과 DMF 의 혼합물) 등의 적합한 용매 중에서 약 실온의 온도에서 DIPEA 또는 Et₃N 등의 염기의 존재 하에 EDC / HOBt / DMAP, 또는 TBTU, 또는 HBTU, 또는 PyBOP 등의 표준 아미드 커플링 조건을 이용하여 구조 5 의 적절한 카르복실산과 커플링하여 식 (I) 의 화합물을 수득할 수 있다.

B. 중간물의 합성

구조 1 의 화합물은 구조 2 의 화합물로부터 MeOH 또는 EtOH 등의 적합한 용매 중에서 약 실온의 온도에서 Pd/C, Pt/C 또는 PtO₂ 등의 금속 촉매의 존재 하의 수소화에 의한, 또는 실온 내지 약 95 ℃ 의 온도에서 염화암모늄의 존재 하에 H₂O / EtOH 등의 용매 혼합물 중에서 철 등의 금속을 이용한 환원에 의한 니트로기의 환원에 의해 수득할 수 있다.

구조 2 의 화합물은 약 실온 내지 80 ℃ 의 온도에서 아세톤 또는 AcCN 등의 용매 중에서 K₂CO₃ 또는 Cs₂CO₃ 등의 염기의 존재 하에서 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (T. E. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P. N. Neuman J. Heterocycl . Chem . 8, 51-56, 1971) 과 구조 3 의 화합물을 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 다르게는, 상기 반응은 약 실온 내지 50 ℃ 의 온도에서 DMF, 아세톤 또는 양방의 혼합물 등의 용매 중에서 DIPEA 등의 염기의 존재 하에서 실시할 수 있다.

구조 3 의 화합물은 CH₂Cl₂ 등의 용매 중에서 은(I)-산화물 (Ag₂O) 의 존재 하에 구조 4 의 알코올을 알킬 요오다이드에 의해 알킬화함으로써 제조할 수 있다.

R³ 및 R⁴ 가 메틸을 나타내는 구조 4 의 화합물은 THF 등의 용매 중에서 실온 아래의 온도 (바람직하게는 약 -78 ℃) 에서 메틸 Grignard 시약을 메틸 2-(클로로메틸)옥사졸-4-카르복실레이트 (Organic Process Research & Development 2001, 5, 37-44) 에 첨가함으로써, 또는 다르게는, CH₂Cl₂ 등의 용매 중에서 약 0 ℃ 의 온도에서 트리메틸알루미늄 시약을 첨가함으로써 제조할 수 있다.

R³ 및 R⁴ 가 수소를 나타내는 구조 4 의 화합물은 THF 등의 용매 중에서 0 ℃ 정도의 온도에서 디이소부틸알루미늄 히드라이드 또는 LiAlH₄ 를 이용한 메틸 2-(클로로메틸)옥사졸-4-카르복실레이트의 환원에 의해 제조할 수 있다.

구조 5 의 산은 시판되고 있으며, 당업계에 익히 공지되어 있고, WO 2009/077990 (페이지 112 내지 116) 에 기재된 방법에 따라 또는 그에 준하여 제조된다.

실험부

약어 (여기에서 및 상기 설명에서 사용됨)

Ac 아세틸

AcCN 아세토니트릴

AlMe₃ 트리메틸 알루미늄

aq. 수성

COAD 만성 폐쇄성 기도 질환

COLD 만성 폐쇄성 폐 질환

COPD 만성 폐쇄성 폐 질환

DAD 다이오드 어레이 검출기

DCC N,N'-디시클로헥실카르보디이미드

dcm 1 분 당 감쇠

DIPEA 디이소프로필에틸아민

DiBAL -H 디-이소-부틸알루미늄 히드라이드

DMAP 4-N,N-디메틸아미노피리딘

DMEM 둘베코 변형 이글 배지

DMF 디메틸포름아미드

DMSO 디메틸술폭시드

EA 에틸 아세테이트

EC₅₀ 최대 유효 농도의 절반

EDC N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸-카르보디이미드 히드로클로라이드

ELSD 증기화 광산란 검출기

eq. 당량(들)

Et 에틸

Ether 또는 Et₂O 디에틸에테르

Et₃N 트리에틸아민

EtOH 에탄올

FC 실리카 겔 상 플래시 컬럼 크로마토그래피

FLIPR 형광 영상 플레이트 판독기

FPRL1 포르밀-펩티드 수용체 유사-1

GSH 글루타티온

h 시간(들)

HBTU O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트

(Hank's) BSS (hanks') 평형 염 용액

hept 헵탄

HIV 인간 면역결핍 바이러스

HLM 인간 간 마이크로솜

HOBt 히드록시벤조트리아졸

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

IU 국제 단위

LC-MS 액체 크로마토그래피 - 질량 분광분석

lem 방출 파장

lex 여기 파장

Me 메틸

MeOH 메탄올

min 분(들)

mM 밀리몰

μM 마이크로몰

MS 질량 분광분석

Ms 메탄술포닐

NADPH 니코틴아미드 아데닌 디뉴클리오티드 포스페이트

nm 나노미터

nM 나노몰

NMR 핵자기공명

org. 유기

p 파라

PG 보호기

TPFE 폴리테트라플루오로에틸렌

PyBOP 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스-피롤리디노-포스포늄-헥사플루오로-포스페이트

Rochelle 염 칼륨 나트륨 타르트레이트

RCP 방사화학적 순도

rf 체류 인자

rpm 분당 회전수

rt 실온

sat. 포화

SDS 나트륨 도데실 술페이트

sol. 용액

TBAF 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드

TBDMS tert-부틸-디메틸-실릴

TBTU O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트

TFA 트리플루오로아세트산

THF 테트라히드로푸란

TLC 박막층 크로마토그래피

t_R 체류 시간

UV 자외

Vis 가시

I 화학

일반. 모든 온도는 섭씨 온도 (℃) 로 나타낸다. 달리 언급하지 않는 한, 반응은 실온에서 실시한다.

분석 박막층 크로마토그래피 (TLC) 를 0.2 mm 플레이트: Merck, 실리카 겔 60 F₂₅₄ 를 이용해 수행했다. 분취용 박막층 크로마토그래피 (TLC) 는 0.2 또는 0.5 mm 플레이트: Merck, 실리카 겔 60 F₂₅₄ 를 이용해 수행했다. 검출은 UV 또는 KMnO₄ (3 g), K₂CO₃ (20 g), NaOH 5% (3 mL) 및 H₂O (300 mL) 의 용액으로 후속 가열과 함께 행했다.

플래시 컬럼 크로마토그래피 (FC) 및 여과는 실리카 겔 60 Merck (0.063-0.200mm) 또는 Macherey - Nagel 실리카 겔 (0.063-0.200mm) 을 이용해 수행했다: EA, hept, CH₂Cl₂, CHCl₃, MeOH, NH₄OH 또는 이들의 혼합물로 용리.

LC-MS-조건 10 (달리 언급되지 않는다면): 분석: Dionex HPG-3000 Binary Pump, MS: Thermo MSQ MS, DAD: Dionex PDA 3000, ELSD: PolymerLab ELS 2100. 칼럼: Ascentis Express C18 2.7 μm, 2.1x30 mm ID (Sigma-Aldrich 사제), Dionex TCC-3000 컴파트먼트에서 자동온도조절. 용리액: A: H₂O + 0.05% NH₄OH + 2% AcCN; B: AcCN. 방법: 구배: 5% B → 95% B, 2.00 분에 걸침. 유량: 1.8 mL/min. 검출: UV/Vis 및/또는 ELSD, 및 MS, t_R 은 분으로 제시됨.

LC-MS-조건 02 (달리 언급되지 않는다면): 분석: Thermo Finnigan MSQ Plus MS, Agilent 1100 Binary Pump 및 DAD. 칼럼: Zorbax SB-AQ 5 μm, 4.6x50 mm ID (Agilent Technologies 사제). 용리액: A: H₂O + 0.04% TFA; B: AcCN; 구배: 5% B → 95% B, 1 분에 걸침. 유량: 4.50 mL/min. 검출: UV/Vis 및/또는 ELSD, 및 MS, t_R 은 분으로 제시됨.

LC-MS-조건 04 (달리 언급되지 않는다면): 분석: Dionex P680, MS: Thermo MSQ Plus, DAD: Agilent G1315A, ELSD: Sedere Sedex 85. 칼럼: Waters XBridge C18 5 μm, 4.6x50 mm. 용리액: A: 물/NH3 ([NH3]=13 mmol); B: AcCN. 방법: 구배: 5% B → 95% B, 0.75 분에 걸침. 유량: 4.5 mL/min. 검출: UV/Vis 및/또는 ELSD, 및 MS, t_R 은 분으로 제시됨.

LC-MS-조건 06 (달리 언급되지 않는다면): 분석. Pump: Dionex HPG-3200RS, MS: Thermo MSQ Plus, DAD: Dionex DAD-3000RS, ELSD: Sedere Sedex 85. 칼럼: Atlantis T3 5 μM, 4.6x30 mm ID (Waters 사제), Dionex TCC-3200 컴파트먼트에서 자동온도조절 (40 ℃). 용리액: A: H₂O + 0.04% TFA; B: AcCN. 방법: 구배: 5% B → 95% B, 1.00 분에 걸침. 유량: 4.5 mL/min. 검출: UV/Vis 및/또는 ELSD, 및 MS, t_R 은 분으로 제시됨.

LC-MS-조건 07 (달리 언급되지 않는다면): 분석: Pump: Dionex HPG-3200RS MS: Thermo Finnigan MSQ Plus, DAD: Dionex DAD-3000RS, ELSD: Sedere Sedex 85. 칼럼: Zorbax SB-AQ 3.5 μm, 4.6x50 mm ID (Agilent Technologies 사제), Dionex TCC-3200 컴파트먼트에서 자동온도조절 (40 ℃). 용리액: A: H₂O + 0.04% TFA; B: AcCN; 구배: 5% B → 95% B, 1 분에 걸침. 유량: 4.50 mL/min. 검출: UV/Vis 및/또는 ELSD, 및 MS, t_R 은 분으로 제시됨.

HPLC 분취용: X-Bridge C18 5μm, 50x19 mm ID (Waters 사제). 용리액: A: H₂O + 0.5% NH₄OH; B: AcCN; 구배: 10% B → 90% B, 5 분에 걸침. 유량: 40.0 mL/min. 검출: UV/Vis 및/또는 ELSD, 및 MS, t_R 은 분으로 제시됨.

NMR: Bruker Avance 400 (400 MHz); Varian Mercury 300 (300 MHz); 화학적 이동은 사용된 용매에 대한 ppm 으로 제시됨; 다중성: s = singlet, d = doublet, t = triplet, q = quadruplet, p = pentuplet, hex = hextet, hept = heptet, m = multiplet, br = broad, 커플링 상수는 Hz 로 나타냄.

하기 실시예는 본 발명을 예시하나, 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.

일반 절차

일반 절차 1 ( GP1 ): 아미드 커플링:

자석 교반자가 구비된 바이알 내에서 불활성 분위기 (N₂) 하에, 목적하는 산 (1.5 eq) 을 순차적으로 a) 4 대 1 의 CH₂Cl₂/DMF (0.25 mL) 의 혼합물 중의 0.4M 2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (0.1 mmol, 1.0 eq.), b) CH₂Cl₂ (0.25 mL) 중의 HOBT (2.0 eq.), DMAP (0.25 eq.) 및 DIPEA (2.0 eq) 의 혼합물 및 c) CH₂Cl₂ (0.5 mL) 중의 EDC (1.5 eq) 로 처리하였다. 그 후, 반응 혼합물을 실온에서 완결될 때까지 교반하였다. 수득한 용액을 물 (0.6 mL) 에 의해 컨디셔닝시킨 International Sorbent Technology 사의 규조토 (isolute HM-N)(800 mg) 를 함유하는 시린지 내에 적재하고, 시린지를 CH₂Cl₂ (5 X 1 mL) 로 세정하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 분취용 HPLC 에 의한 정제에 의해 목적하는 물질을 수득하였다.

참조 화합물의 합성

참조 화합물 1:

N-(2-((2-( 메톡시메틸 )티아졸-5-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2-메틸-5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.5 mL) 중의 2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, p. 112) (70.0 mg, 0.32 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (9.8 mg, 0.08 mmol), HOBt (52 mg, 0.39 mmol), EDC (154 mg, 0.81 mmol) 및 DIPEA (0.22 mL, 1.3 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (1.5 mL) 중의 2-((2-(메톡시메틸)티아졸-5-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (73 mg, 0.32 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (5.0 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기 상을 물 (5.0 mL) 로 세정하고, Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (4:6 hept-EA) 에 의한 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.29. LC-MS-조건 07: t_R = 0.94 분, [M+H]⁺ = 425.09.

참조 화합물 2:

N-(2-((5-( 메톡시메틸 )티아졸-2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2-메틸-5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.5 mL) 중의 2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, p. 112) (61.0 mg, 0.28 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (8.5 mg, 0.07 mmol), HOBt (45.6 mg, 0.34 mmol), EDC (135 mg, 0.70 mmol) 및 DIPEA (0.19 mL, 1.12 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 30 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (1.5 mL) 중의 2-((5-(메톡시메틸)티아졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (63 mg, 0.28 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (5.0 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 물 (5.0 mL) 로 세정하고, Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (4:6 hept-EA) 에 의한 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.29. LC-MS-조건 07: t_R = 0.92 분, [M+H]⁺ = 425.09.

참조 화합물 3:

N-(2-((5-( 메톡시메틸 )푸란-2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (3.0 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (52 mg, 0.26 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (8.1 mg, 0.07 mmol), HOBt (42.8 mg, 0.32 mmol), EDC (127 mg, 0.66 mmol) 및 DIPEA (0.2 mL, 1.17 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 30 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (3.0 mL) 중의 2-((5-(메톡시메틸)푸란-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (55 mg, 0.26 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (10.0 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 물 (10.0 mL) 에 이어서 염수 (10.0 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (6:4 hept-EA) 에 의한 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (6:4 hept-EA) = 0.23. LC-MS-조건 07: t_R = 0.87 분, [M+H]⁺ = 380.26

참조 화합물 4:

N-(2-((5-( 메톡시메틸 )티오펜-2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (4.0 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (120 mg, 0.62 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (19 mg, 0.15 mmol), HOBt (103 mg, 0.74 mmol), EDC (301 mg, 1.54 mmol) 및 DIPEA (0.5 mL, 2.77 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 15 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (8.0 mL) 중의 2-((5-(메톡시메틸)티오펜-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (131 mg, 0.61 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (15.0 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 1N HCl (15.0 mL), 물 (15.0 mL), 이어서 염수 (15.0 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (구배 85:15 hept-EA 에서 70:30 hept-EA 로) 에 의한 정제에 의해 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.2. LC-MS-조건 07: t_R = 0.90 분, [M+H]⁺ = 396.03

참조 화합물 5:

N-(2-((4-( 메톡시메틸 )티아졸-2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (3.0 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (64 mg, 0.33 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (10 mg, 0.08 mmol), HOBt (55 mg, 0.39 mmol), EDC (157 mg, 0.82 mmol) 및 DIPEA (0.25 mL, 1.48 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 15 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (3.5 mL) 중의 2-((4-(메톡시메틸)티아졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (74 mg, 0.33 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (15.0 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 1N HCl (15.0 mL), 물 (10.0 mL), 이어서 염수 (10.0 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (구배 90:10 hept-EA 에서 60:40 hept-EA 로) 에 의한 정제에 의해 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.15. LC-MS-조건 07: t_R = 0.83 분, [M+H]⁺ = 397.21

참조 화합물 6:

N-(2-((2-(메톡시 메틸 )티아졸-4- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )-5-페닐옥사졸-4-카르복사미드:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (3.0 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (42 mg, 0.21 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (6.6 mg, 0.05 mmol), HOBt (36 mg, 0.26 mmol), EDC (102 mg, 0.53 mmol) 및 DIPEA (0.16 mL, 0.96 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (3.0 mL) 중의 2-((2-(메톡시메틸)티아졸-4-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (48 mg, 0.21 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (15.0 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 1N HCl (10.0 mL), 물 (5.0 mL), 이어서 염수 (10.0 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (60:40 hept-EA) 에 의한 정제에 의해 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.15. LC-MS-조건 07: t_R = 0.83 분, [M+H]⁺ = 397.23.

참조 화합물 7:

N-(2-((2-( 메톡시메틸 )티아졸-5-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.0 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (30.0 mg, 0.16 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (4.8 mg, 0.04 mmol), HOBt (26 mg, 0.19 mmol), EDC (76 mg, 0.40 mmol) 및 DIPEA (0.11 mL, 0.63 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 30 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (0.6 mL) 중의 2-((2-(메톡시메틸)티아졸-5-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (36 mg, 0.16 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. HPLC 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 베이지색 고체로서 수득하였다. TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.30. LC-MS-조건 07: t_R = 0.87 분, [M+H]⁺ = 397.39.

참조 화합물 8:

N-(2-((5-(메톡시 메틸 )티아졸-2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )-5-페닐옥사졸-4-카르복사미드:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.0 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (30 mg, 0.16 mmol) 의 용액을 DMAP (4.8 mg, 0.04 mmol), HOBt (26 mg, 0.19 mmol), EDC (76 mg, 0.40 mmol) 및 DIPEA (0.11 mL, 0.63 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 30 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (0.6 mL) 중의 2-((5-(메톡시메틸)티아졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (36 mg, 0.16 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 분취용 HPLC 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.31. LC-MS-조건 07: t_R = 0.85 분, [M+H]⁺ = 397.40.

참조 화합물 9:

N-(2-((2-(2- 메톡시프로판 -2-일) 옥사졸 -4-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.0 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (18 mg, 0.10 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (3.0 mg, 0.02 mmol), HOBt (15.7 mg, 0.12 mmol), EDC (46.5 mg, 0.24 mmol) 및 DIPEA (0.07 mL, 0.39 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (0.5 mL) 중의 2-((2-(2-메톡시프로판-2-일)옥사졸-4-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (23.0 mg, 0.10 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (10.0 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 물 (5.0 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (50:50 hept-EA) 에 의한 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (50:50 hept-EA) = 0.27. LC-MS-조건 07: t_R = 0.86 분, [M+H]⁺ = 408.89.

참조 화합물 10:

N-(2-((2-(메톡시 메틸 ) 옥사졸 -4- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (0.3 mL) 중의 2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, p. 112) (14 mg, 0.06 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (2 mg, 0.02 mmol), HOBt (10 mg, 0.08 mmol), EDC (31 mg, 0.16 mmol) 및 DIPEA (0.04 mL, 0.26 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (0.3 mL) 중의 2-((2-(메톡시메틸)옥사졸-4-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (13 mg, 0.06 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (5 mL) 로 희석하고, 유기상을 물 (5 mL) 로 세정하고, Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:2 hept-EA) 에 의한 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:2 hept-EA) = 0.36. LC-MS-조건 07: t_R = 0.88 분, [M+H]⁺ = 408.69.

참조 화합물 11:

N-(2-((4- 아세틸옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸 -5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (20 mL) 중의 2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, p. 112) (590 mg, 2.72 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (82 mg, 0.68 mmol), HOBt (441 mg, 3.62 mmol), EDC (1.3 g, 6.79 mmol) 및 DIPEA (1.8 mL, 10.86 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 30 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (7.0 mL) 중의 1-(2-((4-아미노-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)옥사졸-4-일)에타논 (WO 2009/077990, p. 105) (562 mg, 2.72 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (50 mL) 로 희석하고, 유기상을 물 (50 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (4:6 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다: TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.35. LC-MS-조건 07: t_R = 0.88 분, [M+H]⁺ = 407.05.

중간물의 합성

2-((5-( 메톡시메틸 )푸란-2-일) 메틸 )-4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (3.0 mL) 중의 (5-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)푸란-2-일)메탄올 (WO 2009077990A1) (186 mg, 0.83 mmol) 의 용액을 Ag₂O (288 mg, 1.24 mmol) 및 MeI (0.06 mL, 0.99 mmol) 의 현탁액에 첨가하였다. 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (7:3 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.27. LC-MS-조건 07: t_R = 0.74 분.

2-((5-(메톡시 메틸 )푸란-2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (1.6 mL) 및 물 (0.8 mL) 의 혼합물 중의 2-((5-(메톡시메틸)푸란-2-일)메틸)-4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸 (97 mg, 0.35 mmol), 철 분말 (59 mg, 1.04 mmol) 및 NH₄Cl (94 mg, 1.74 mmol) 의 혼합물을 90 ℃ 에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (20 mL) 을 첨가하고, 이어서 1N NaOH (10 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (10 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (95:5 CH₂Cl₂-MeOH) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (95:5 CH₂Cl₂-MeOH) = 0.39. LC-MS-조건 07: t_R = 0.51 분, [M+H]⁺ = 209.34.

2-(메톡시 메틸 )티오펜:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (7.5 mL) 중의 시판 티오펜-2-일메탄올 (1.46 g, 12.8 mmol) 의 용액을 MeI (3.0 mL, 48.2 mmol) 에 이어서 Ag₂O (4.44 g, 19.1 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (95:5 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.67.

5-( 메톡시메틸 )티오펜-2- 카르브알데히드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (50.0 mL) 중의 2-(메톡시메틸)티오펜 (1.23 g, 9.58 mmol) 의 용액을 -75 ℃ 에서 N,N,N',N'-테트라메틸-에틸렌디아민 (2.69 ml, 17.7 mmol) 에 이어서 n-BuLi (6.5 mL 의 2.7 M 헵탄 용액, 17.7 mmol) 로 적하 처리하였다. 수득한 혼합물을 90 분 동안 -70 ℃ 에서 교반하였다. 그 후, DMF (4.03 mL, 52.1 mmol) 를 첨가하고, 수득한 혼합물을 실온으로 천천히 가온시켰다. 그 후, 혼합물을 포화 수성 NH₄Cl (40 mL) 에 붓고, 유기층을 EA (3 x 20 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (구배 95:5 hept-EA 에서 85:15 hept-EA 로) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 주황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.62 분.

(5-(메톡시 메틸 )티오펜-2- 일 )메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (10 mL) 중의 5-(메톡시메틸)티오펜-2-카르브알데히드 (782 mg, 5.01 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 NaBH₄ (379 mg, 10.0 mmol) 로 처리하고, 수득한 용액을 5 분 동안 0 ℃ 에서 교반한 후, 실온으로 가온시켰다. 물 (5 mL) 및 EA (5 mL) 를 첨가하였다. 수층을 EA (2 x 15 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 염수로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.51 분.

2-((5-(메톡시 메틸 )티오펜-2- 일 )메틸)-4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, 건조 CH₂Cl₂ (20.0 mL) 중의 (5-(메톡시메틸)티오펜-2-일)메탄올 (900 mg, 5.69 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 Et₃N (1.19 mL, 8.53 mmol) 에 이어서 DMAP (70 mg, 0.57 mmol) 및 Ms-Cl (0.57 mL, 7.39 mmol) 로 처리하였다. 0 ℃ 에서 1 시간 동안 교반 후, 반응을 물 (5 mL) 로 켄칭시켰다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (2 x 10 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 1.38 의 미정제 (5-(메톡시메틸)티오펜-2-일)메틸 메탄술포네이트를 주황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.51 분. DMF (10.0 mL) 중의 상기 미정제 물질의 용액을, DIPEA (1.96 mL, 11.9 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (15.0 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (7.05 g 의 9.6% DMF 용액, 5.93 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (10 mL), 이어서 EA (10 mL) 를 첨가하였다. 수층을 EA (2 x 15 mL) 로 추출하고, 수합한 유기 추출물을 염수로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (구배 95:5 hept-EA 에서 80:20 hept-EA 로) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (8:2 hept-EA) = 0.36. LC-MS-조건 07: t_R = 0.80 분.

2-((5-( 메톡시메틸 )티오펜-2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (4.6 mL) 및 물 (2.4 mL) 의 혼합물 중의 2-((5-(메톡시메틸)티오펜-2-일)메틸)-4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸 (169 mg, 0.67 mmol), 철 분말 (131 mg, 2.33 mmol) 및 NH₄Cl (215 mg, 3.99 mmol) 의 혼합물을 50 ℃ 에서 30 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (20 mL) 을 첨가하고, 이어서 3N NaOH (5 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (3 x 15 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.58 분, [M+H]⁺ = 225.18.

메틸 2-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 )티아졸-4- 카르복실레이트 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, DMF (20.0 mL) 중의 메틸 2-(클로로메틸)티아졸-4-카르복실레이트 (S. A. Hermitage et al. Organic Process Research & Development, 5, 37-44, 2001) (2.05 g, 10.7 mmol) 의 용액을, DIPEA (3.21 mL, 19.4 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (20.0 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (T. E. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P. N. Neuman J. Heterocycl. Chem . 8, 51-56, 1971) (11.53 g 의 8% DMF 용액, 9.70 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (50 mL), 이어서 EA (50 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 EA (2 x 50 mL) 로 추출하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (구배 60:40 hept-EA 에서 50:50 hept-EA 로) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. TLC: rf (6:4 hept-EA) = 0.31. LC-MS-조건 07: t_R = 0.67 분, [M+H]⁺ = 270.21.

(2-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2- 일 )메틸)티아졸-4- 일 )메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (30 mL) 중의 메틸 2-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)티아졸-4-카르복실레이트 (1.10 g, 4.08 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 DiBAL-H (14.3 mL 의 1.0 M THF 용액, 14.3 mmol) 로 적하 처리하고, 수득한 용액을 1 시간 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. Rochelle 염 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 1 시간 동안 실온에서 교반하였다. 수층을 EA (2 x 40 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.53 분; [M+H]⁺ = 241.95.

4-( 메톡시메틸 )-2-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 )티아졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (15.0 mL) 중의 (2-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)티아졸-4-일)메탄올 (672 mg, 2.79 mmol) 의 용액을 Ag₂O (968 mg, 4.18 mmol) 및 MeI (0.52 mL, 8.36 mmol) 의 현탁액에 첨가하였다. 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (6:4 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.66 분, [M+H]⁺ = 226.27.

2-((4-(메톡시 메틸 )티아졸-2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (2.0 mL) 및 물 (1.0 mL) 의 혼합물 중의 4-(메톡시메틸)-2-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)티아졸 (85 mg, 0.31 mmol), 철 분말 (66 mg, 1.17 mmol) 및 NH₄Cl (108 mg, 2.0 mmol) 의 혼합물을 75 ℃ 에서 25 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (15 mL) 을 첨가하고, 이어서 1N NaOH (10 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (3 x 10 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.47 분, [M+H]⁺ = 226.30.

에틸 4-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 )티아졸-2- 카르복실레이트 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, DMF (15.0 mL) 중의 에틸 4-(클로로메틸)티아졸-2-카르복실레이트 (WO 2009077990 A1) (2.16 g, 10.5 mmol) 의 용액을, DIPEA (1.82 mL, 2.33 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (15.0 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (T. E. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P. N. Neuman J. Heterocycl . Chem . 8, 51-56, 1971) (8.0 g 의 10% DMF 용액, 7.01 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (50 mL), 이어서 EA (50 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 물 (50 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (60:40 hept-EA)) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.36. LC-MS-조건 07: t_R = 0.76 분, [M+H]⁺ = 284.28.

(4-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 )티아졸-2-일)메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (30 mL) 중의 에틸 4-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)티아졸-2-카르복실레이트 (845 mg, 2.98 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 DiBAL-H (11.3 mL 의 1.0 M 톨루엔 용액, 11.3 mmol) 으로 적하 처리하고, 수득한 용액을 1 시간 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. Rochelle 염 용액 (100 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 1 시간 동안 실온에서 교반하였다. 수층을 EA (2 x 40 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (40:60 hept-EA)) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.25. LC-MS-조건 07: t_R = 0.54 분, [M+H]⁺ = 241.95.

2-( 메톡시메틸 )-4-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 )티아졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (15.0 mL) 중의 (4-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)티아졸-2-일)메탄올 (419 mg, 1.74 mmol) 의 용액을 Ag₂O (604 mg, 2.61 mmol) 및 MeI (0.33 mL, 5.21 mmol) 의 현탁액에 첨가하였다. 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.36. LC-MS-조건 07: t_R = 0.68 분, [M+H]⁺ = 256.27.

2-((2-(메톡시 메틸 )티아졸-4- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (10.0 mL) 및 물 (5.0 mL) 의 혼합물 중의 2-(메톡시메틸)-4-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)티아졸 (200 mg, 0.78 mmol), 철 분말 (133 mg, 2.35 mmol) 및 NH₄Cl (212 mg, 3.92 mmol) 의 혼합물을 100 ℃ 에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (40 mL) 를 첨가하고, 이어서 1N NaOH (20 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (2 x 10 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 수득하고, 이를 분취용 HPLC 로 정제하여 무색 오일을 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.47 분, [M+H]⁺ = 226.30.

(E)-(2- 스티릴옥사졸 -4-일)메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (28.3 mL) 중의 (E)-에틸 2-스티릴옥사졸-4-카르복실레이트 (WO 2009077990 A1) (8.5 g, 34.9 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 DiBAL-H (85.0 mL 의 1.0 M 톨루엔 용액, 85.0 mmol) 로 적하 처리하고, 수득한 용액을 1.5 시간 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. Rochelle 염 용액을 첨가하고, 이어서 EA 를 첨가하고, 혼합물을 24 시간 동안 실온에서 교반하였다. 수층을 EA (3 x 40 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 주황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.20. LC-MS-조건 07: t_R = 0.71 분, [M+H]⁺ = 202.15.

(E)-4-((( tert - 부틸디메틸실릴 ) 옥시 ) 메틸 )-2- 스티릴옥사졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (56.0 mL) 중의 (E)-(2-스티릴옥사졸-4-일)메탄올 (5.40 g, 26.8 mmol) 의 용액을 실온에서 tert-부틸클로로디메틸silane (8.52 g, 53.67 mmol) 에 이어 이미다졸 (3.69 g, 53.67 mmol) 로 처리하고, 수득한 현탁액을 1 시간 동안 실온에서 교반하였다. 물을 첨가하였다. 수층을 로 추출하고, 수합한 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (구배 hept 에서 9:1 hept-EA 로) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (9:1 hept-EA) = 0.35. LC-MS-조건 07: t_R = 1.08 분, [M+H]⁺ = 316.13.

4-((( tert -부틸 디메틸실릴 )옥시)메틸)옥사졸-2-카르브알데히드:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, 물 (6.6 mL) 중의 NaIO₄ (726 mg, 3.33 mmol) 의 용액을 아세톤 (13.2 mL) 중의 실라카 겔 (4.46 g) 의 격렬히 교반된 현탁액에 천천히 첨가하였다. 그 후, 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 덩어리진 고체를 CH₂Cl₂ 에서 슬러리화하고, 용매를 감압 하에 증발시켰다. CH₂Cl₂ (16.5 mL) 를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 (E)-4-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)-2-스티릴옥사졸 (350 mg, 1.1 mmol) 및 RuCl₃ 히드레이트 (7.8 mg, 0.03 mmol) 로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 어두운 곳에서 밤새 교반하고, 실리카 겔을 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 표제 화합물을 적색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (1:3 EA-Hept) = 0.51. LC-MS-조건 07: t_R = 0.64 분.

1-(4-((( tert -부틸 디메틸실릴 )옥시)메틸) 옥사졸 -2- 일 )에탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (9.2 mL) 중의 4-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)옥사졸-2-카르브알데히드 (268 mg, 1.11 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 트리메틸알루미늄 (1.11 mL 의 2.0 M 톨루엔 용액, 2.22 mmol) 으로 적하 처리하고, 수득한 황색 용액을 45 분 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. 포화 수성 NH₄Cl 을 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 CH₂Cl₂ (3 x 25 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.40. LC-MS-조건 07: t_R = 0.85 분, [M]⁺ = 257.81.

1-(4-((( tert -부틸 디메틸실릴 )옥시)메틸) 옥사졸 -2- 일 )에타논:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, AcCN (7.1 mL) 중의 1-(4-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)옥사졸-2-일)에탄올 (260 mg, 1.01 mmol) 의 용액을 실온에서 MnO₂ (1488 mg, 5.05 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (2:1 hept-EA) = 0.55. LC-MS-조건 07: t_R = 0.96 분, [M]⁺ = 255.89.

2-(4-((( tert - 부틸디메틸실릴 ) 옥시 ) 메틸 ) 옥사졸 -2-일)프로판-2-올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (5.6 mL) 중의 1-(4-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)옥사졸-2-일)에타논 (171 mg, 0.67 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 트리메틸알루미늄 (0.56 mL 의 2.0 M 톨루엔 용액, 1.12 mmol) 으로 적하 처리하고, 수득한 황색 용액을 90 분 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. 포화 수성 NH₄Cl 을 반응 혼합물에 첨가하고 이를 CH₂Cl₂ (3 x 25 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.88 분, [M+H]⁺ = 272.20.

4-((( tert - 부틸디메틸실릴 ) 옥시 ) 메틸 )-2-(2- 메톡시프로판 -2-일) 옥사졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (0.4 mL) 중의 2-(4-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)옥사졸-2-일)프로판-2-올 (153 mg, 0.56 mmol) 의 용액을 MeI (0.08 mL, 1.35 mmol) 에 이어 Ag₂O (196 mg, 0.85 mmol) 로 처리하였다. 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (7:3 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 주황색 오일로서 수득하였다. TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.40. LC-MS-조건 07: t_R = 0.99 분, [M+H]⁺ = 286.20.

(2-(2- 메톡시프로판 -2-일) 옥사졸 -4-일)메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (1.8 mL) 중의 4-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)-2-(2-메톡시프로판-2-일)옥사졸 (110 mg, 0.39 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 TBAF (0.39 mL 의 1M THF 용액, 0.39 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EA (10 mL) 로 희석하고, 포화 수성 NH₄Cl (5 mL) 및 염수로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (3:7 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (3:7 hept-EA) = 0.20. LC-MS-조건 07: t_R = 0.44 분, [M+H]⁺ = 172.01.

2-(2-메톡시 프로판 -2- 일 )-4-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2- 일 )메틸)옥사졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, 건조 CH₂Cl₂ (1.4 mL) 중의 (2-(2-메톡시프로판-2-일)옥사졸-4-일)메탄올 (31 mg, 0.18 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 Et₃N (0.03 mL, 0.23 mmol) 에 이어 DMAP (2.2 mg, 0.02 mmol) 및 Ms-Cl (0.02 mL, 0.23 mmol) 로 처리하였다. 0 ℃ 에서 30 분 동안 교반 후, 반응을 물 (10 mL) 로 켄칭시켰다. 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 44 mg 의 미정제 (2-(2-메톡시프로판-2-일)옥사졸-4-일)메틸 메탄술포네이트를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.62 분, [M+H]⁺ = 250.00. DMF (0.4 mL) 중의 상기 미정제 물질 (44 mg) 의 용액을, DIPEA (0.06 mL, 0.34 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (0.4 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (T. E. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P. N. Neuman J. Heterocycl . Chem. 8, 51-56, 1971) (203 mg 의 9.6% DMF 용액, 0.17 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 24 시간 동안 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (5 mL), 이어서 EA (5 mL) 를 첨가하였다. 수층을 EA (10 mL) 로 추출하고, 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.43. LC-MS-조건 07: t_R = 0.72 분, [M]⁺ = 267.96.

2-((2-(2- 메톡시프로판 -2-일) 옥사졸 -4-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (0.4 mL) 및 물 (0.2 mL) 의 혼합물 중의 2-(2-메톡시프로판-2-일)-4-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)옥사졸 (33 mg, 0.12 mmol), 철 분말 (21 mg, 0.37 mmol) 및 NH₄Cl (33 mg, 0.62 mmol) 의 혼합물을 85 ℃ 에서 30 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (5 mL) 을 첨가하고, 이어서 1N NaOH (5 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (5 x 5 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 주황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.51 분; [M]⁺ = 237.17.

2- 브로모 -5-( 메톡시메틸 )티아졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (4.0 mL) 중의 (2-브로모티아졸-5-일)메탄올 (WO 2009/077990, p. 92) (1.19 g, 6.11 mmol) 의 용액을 MeI (0.46 mL, 7.33 mmol) 에 이어서 Ag₂O (2.12 g, 9.16 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (7:3 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.33. LC-MS-조건 07: t_R = 0.66 분, [M+H]⁺ = 209.93.

(5-( 메톡시메틸 )티아졸-2-일)메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, Et₂O (10.0 mL) 중의 2-브로모-5-(메톡시메틸)티아졸 (944 mg, 4.54 mmol) 의 용액을 -70 ℃ 에서 n-BuLi (2.98 mL 의 1.6M 헥산 용액, 4.76 mmol) 로 적하 처리하였다. 수득한 혼합물을 30 분 동안 -70 ℃ 에서 교반하였다. 그 후, DMF (0.56 mL, 7.26 mmol) 를 첨가하고, 수득한 혼합물을 20 분 동안 -70 ℃ 에서 교반하였다. 포화 수성 NH₄Cl 을 첨가하고, 유기층을 EA (3 x 20 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 543 mg 의 5-(메톡시메틸)티아졸-2-카르브알데히드를 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (9:1 hept-EA) = 0.32. MeOH (10 mL) 중의 상기 물질의 용액을 0 ℃ 에서 NaBH₄ (169 mg, 4.29 mmol) 로 처리하였다. 0 ℃ 에서 15 분 후, 물에 이어서 EA 를 첨가하였다. 유기층을 EA (3 x 20 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:2 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:2 hept-EA) = 0.25. LC-MS-조건 07: t_R = 0.42 분, [M+H]⁺ = 160.17.

5-( 메톡시메틸 )-2-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 )티아졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, 건조 CH₂Cl₂ (10.0 mL) 중의 (5-(메톡시메틸)티아졸-2-일)메탄올 (201 mg, 1.26 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 Et₃N (0.23 mL, 1.63 mmol) 에 이어 DMAP (15.6 mg, 0.13 mmol) 및 Ms-Cl (0.13 mL, 1.59 mmol) 로 적하 처리하였다. 0 ℃ 에서 30 분 동안 교반 후, 반응을 물 (10 mL) 로 켄칭시켰다. 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 300 mg 의 미정제 (5-(메톡시메틸)티아졸-2-일)메틸 메탄술포네이트를 주황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.59 분, [M+H]⁺ = 238.07. DMF (3.0 mL) 중의 상기 미정제 물질 (300 mg) 의 용액을, DIPEA (0.43 mL, 2.53 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (3.0 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (1.50 g 의 9.6% DMF 용액, 1.26 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 24 시간 동안 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (10 mL), 이어서 EA (10 mL) 를 첨가하였다. 수층을 EA (10 mL) 로 추출하고, 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.29. LC-MS-조건 07: t_R = 0.70 분, [M+H]⁺ = 255.85.

2-((5-(메톡시 메틸 )티아졸-2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (1.0 mL) 및 물 (0.5 mL) 의 혼합물 중의 5-(메톡시메틸)-2-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)티아졸 (80 mg, 0.31 mmol), 철 분말 (53 mg, 0.93 mmol) 및 NH₄Cl (84 mg, 1.56 mmol) 의 혼합물을 85 ℃ 에서 30 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (5 mL) 를 첨가하고, 이어서 1N NaOH (5 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (2 x 5 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.49 분; [M+H]⁺ = 226.17.

(5-((( tert - 부틸디메틸실릴 ) 옥시 ) 메틸 )티아졸-2-일)메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, Et₂O (14.0 mL) 중의 2-브로모-5-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)티아졸 (WO 2009/077990, p. 92) (2.0 g, 6.49 mmol) 의 용액을 -70 ℃ 에서 n-BuLi (4.25 mL 의 1.6M 헥산 용액, 6.81 mmol) 로 적하 처리하였다. 수득한 혼합물을 30 분 동안 -70 ℃ 에서 교반하였다. 그 후, DMF (0.80 mL, 10.38 mmol) 를 첨가하고, 수득한 혼합물을 20 분 동안 -70 ℃ 에서 교반하였다. 포화 수성 NH₄Cl 을 첨가하고, 유기층을 EA (3 x 20 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 1.50 g 의 5-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)티아졸-2-카르브알데히드를 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (9:1 hept-EA) = 0.31. LC-MS-조건 07: t_R = 1.00 분, [M+H]⁺ = 257.93. MeOH (10 mL) 중의 상기 물질의 용액을 0 ℃ 에서 NaBH₄ (286 mg, 7.25 mmol) 로 처리하였다. 0 ℃ 에서 30 분 후, 물에 이어서 EA 를 첨가하였다. 유기층을 EA (3 x 20 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.33. LC-MS-조건 07: t_R = 0.87 분, [M+H]⁺ = 260.06.

5-((( tert -부틸 디메틸실릴 )옥시)메틸)-2-(메톡시 메틸 )티아졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (3.0 mL) 중의 (5-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)티아졸-2-일)메탄올 (1.21 g, 4.65 mmol) 의 용액을 MeI (0.35 mL, 5.57 mmol) 에 이어 Ag₂O (1.61 g, 6.97 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (4:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (4:1 hept-EA) = 0.27. LC-MS-조건 07: t_R = 0.99 분, [M+H]⁺ = 273.95.

(2-(메톡시 메틸 )티아졸-5- 일 )메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (20 mL) 중의 5-(((tert-부틸디메틸실릴)옥시)메틸)-2-(메톡시메틸)티아졸 (721 mg, 2.64 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 TBAF (5.30 mL 의 1M THF 용액, 5.30 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EA 로 희석하고, 포화 수성 NH₄Cl 및 염수로 세정하고, Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:9 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:9 hept-EA) = 0.27. LC-MS-조건 07: t_R = 0.41 분, [M+H]⁺ = 160.01.

2-(메톡시 메틸 )-5-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2- 일 )메틸)티아졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, 건조 CH₂Cl₂ (15.0 mL) 중의 (2-(메톡시메틸)티아졸-5-일)메탄올 (319 mg, 2.00 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 Et₃N (0.36 mL, 2.59 mmol) 에 이어 DMAP (25 mg, 0.20 mmol) 및 Ms-Cl (0.20 mL, 2.53 mmol) 로 처리하였다. 0 ℃ 에서 30 분 동안 교반 후, 반응을 물 (10 mL) 로 켄칭시켰다. 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 469 mg (정량적) 의 미정제 (2-(메톡시메틸)티아졸-5-일)메틸 메탄술포네이트를 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:4 hept-EA) = 0.39. DMF (4.5 mL) 중의 상기 물질 (469 mg) 의 용액을, DIPEA (0.68 mL, 3.96 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (4.5 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (2.35 g 의 9.6% DMF 용액, 1.98 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 4 일 동안 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (10 mL), 이어서 EA (10 mL) 를 첨가하였다. 수층을 EA (10 mL) 로 추출하고, 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.33. LC-MS-조건 07: t_R = 0.72 분, [M+H]⁺ = 255.95.

2-((2-( 메톡시메틸 )티아졸-5-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (2.0 mL) 및 물 (1.0 mL) 의 혼합물 중의 2-(메톡시메틸)-5-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)티아졸 (109 mg, 0.43 mmol), 철 분말 (72 mg, 1.28 mmol) 및 NH₄Cl (115 mg, 2.14 mmol) 의 혼합물을 85 ℃ 에서 15 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (5 mL) 를 첨가하고, 이어서 1N NaOH (5 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (2 x 5 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.50 분; [M+H]⁺ = 225.93.

2-(2-( 클로로메틸 ) 옥사졸 -4-일)프로판-2-올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (433 mL) 중의 메틸 2-(클로로메틸)옥사졸-4-카르복실레이트 (Organic Process Research & Development 2001, 5, 37-44) (13.00 g, 74.04 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 메틸마그네슘 클로라이드 (51.8 mL 의 3.0 M THF 용액, 155.49 mmol) 로 적하 처리하고, 수득한 주황색 용액을 1.5 시간 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 빙냉 포화 수성 NH₄Cl 용액 (300 mL) 에 조심스럽게 부었다. 이를 EA (3 x 200 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 염수 (300 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (6:4 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (6:4 hept-EA) = 0.24. LC-MS-조건 06: t_R = 0.49 분.

2-( 클로로메틸 )-4-(2-메톡시 프로판 -2- 일 )옥사졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, MeI (3.5 mL) 중의 2-(2-(클로로메틸)옥사졸-4-일)프로판-2-올 (200 mg, 1.14 mmol) 의 용액을 Ag₂O (396 mg, 1.71 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 26 시간 동안 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, MeI 를 감압 하에 제거하였다. FC (7:3 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.33. LC-MS-조건 06: t_R = 0.64 분, [M+H]⁺ = 190.17.

4-(2- 메톡시프로판 -2-일)-2-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 ) 옥사졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, DMF (2.0 mL) 중의 2-(클로로메틸)-4-(2-메톡시프로판-2-일)옥사졸 (134 mg, 0.71 mmol) 의 용액을, DIPEA (0.24 mL, 1.41 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (2.0 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (T. E. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P. N. Neuman J. Heterocycl . Chem. 8, 51-56, 1971) (1.01 g 의 8% DMF 용액, 0.71 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (16 mL), 이어서 EA (16 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 유기층을 물 (3 x 6 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.33. LC-MS-조건 06: t_R = 0.69 분, [M+H]⁺ = 268.13.

2-((4-(2- 메톡시프로판 -2-일) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (1.0 mL) 및 물 (0.5 mL) 의 혼합물 중의 4-(2-메톡시프로판-2-일)-2-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)옥사졸 (56 mg, 0.21 mmol), 철 분말 (35 mg, 0.63 mmol) 및 NH₄Cl (57 mg, 1.05 mmol) 의 혼합물을 85 ℃ 에서 15 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (2 mL) 를 첨가하고, 이어서 1N NaOH (2 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (2 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 06: t_R = 0.46 분; [M+H]⁺ = 238.09.

(2-( 클로로메틸 ) 옥사졸 -4-일)메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (400 mL) 중의 메틸 2-(클로로메틸)옥사졸-4-카르복실레이트 (Organic Process Research & Development 2001, 5, 37-44) (12.50 g, 71.20 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 DiBAL-H (242 mL 의 1.0 M THF 용액, 242.0 mmol) 로 적하 처리하고, 수득한 용액을 1 시간 동안 0 ℃ 에서 교반한 후, 실온으로 가온시켰다. 반응 혼합물을 Rochelle 염 용액 (600 mL) 에 조심스럽게 붓고, EA (250 mL) 를 첨가하였다. 혼합물을 1.5 시간 동안 교반하였다. 수층을 EA (2 x 250 mL) 로 추출하고, 수합한 유기층을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:4 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:4 hept-EA) = 0.28. LC-MS-조건 07: t_R = 0.39 분; [M+H]⁺ = 147.98.

2-( 클로로메틸 )-4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (32.0 mL) 중의 (2-(클로로메틸)옥사졸-4-일)메탄올 (8.00 g, 54.22 mmol) 의 용액을 MeI (4.05 mL, 65.06 mmol) 에 이어 Ag₂O (18.85 g, 81.32 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (6:4 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (6:4 hept-EA) = 0.31. LC-MS-조건 07: t_R = 0.54 분, [M+H]⁺ = 162.00.

4-( 메톡시메틸 )-2-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 ) 옥사졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, DMF (24.0 mL) 중의 2-(클로로메틸)-4-(메톡시메틸)옥사졸 (1.38 g, 8.55 mmol) 의 용액을, DIPEA (2.93 mL, 17.10 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (24.0 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (T. E. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P. N. Neuman J. Heterocycl . Chem. 8, 51-56, 1971) (10.16 g 의 9.6% DMF 용액, 8.55 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (200 mL), 이어서 EA (200 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 유기층을 물 (3 x 70 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (4:6 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.38. LC-MS-조건 07: t_R = 0.63 분.

2-((4-(메톡시 메틸 ) 옥사졸 -2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (30.0 mL) 및 물 (15.0 mL) 의 혼합물 중의 4-(메톡시메틸)-2-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)옥사졸 (1.46 g, 6.10 mmol), 철 분말 (1.03 g, 18.31 mmol) 및 NH₄Cl (1.65 g, 30.52 mmol) 의 혼합물을 85 ℃ 에서 15 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (55 mL) 를 첨가하고, 이어서 1N NaOH (33 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (5 x 50 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.42 분; [M+H]⁺ = 210.09.

메틸 2-( 아세톡시메틸 ) 옥사졸 -4- 카르복실레이트 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, 아세트산 (80 mL) 중의 메틸 2-(클로로메틸)옥사졸-4-카르복실레이트 (Organic Process Research & Development 2001, 5, 37-44) (20.00 g, 113.91 mmol) 의 용액을 아세트산 무수물 (8.0 mL) 에 이어 아세트산나트륨 (39.72 g, 484.14 mmol) 으로 처리하였다. 반응 혼합물을 120 ℃ 에서 3 시간 동안 교반하였다. EA (400 mL) 를 실온에서 첨가하고, 현탁액을 포화 수성 탄산나트륨으로 중화하였다. 층을 분리하고, 수층을 EA (2 x 400 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. LC-MS-조건 06: t_R = 0.48 분, [M+H]⁺ = 200.41.

메틸 2-( 히드록시메틸 ) 옥사졸 -4- 카르복실레이트 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, 나트륨 (1.32 g, 57.42 mmol) 을 MeOH (145 mL) 에 분할 첨가하였다. 그 후, 메틸 2-(아세톡시메틸)옥사졸-4-카르복실레이트 (23.30 g, 116.99 mmol) 를 첨가하고, 반응 혼합물을 1 시간 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, 포화 수성 NH₄Cl (760 mL) 을 첨가하고, 혼합물을 EA (2 x 760 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기층을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다: TLC: rf (1:9 hept-EA) = 0.33. LC-MS-조건 06: t_R = 0.31 분, [M+H]⁺ = 158.15.

메틸 2-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -4- 카르복실레이트 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (0.9 mL) 중의 메틸 2-(히드록시메틸)옥사졸-4-카르복실레이트 (231 mg, 1.47 mmol) 의 용액을 MeI (0.11 mL, 1.76 mmol) 에 이어 Ag₂O (511 mg, 2.21 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.33. LC-MS-조건 07: t_R = 0.49 분, [M+H]⁺ = 172.20.

(2-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -4-일)메탄올:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, THF (11 mL) 중의 메틸 2-(메톡시메틸)옥사졸-4-카르복실레이트 (192 mg, 1.12 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 LiAlH₄ (1.35 mL 의 1.0 M THF 용액, 1.35 mmol) 로 적하 처리하고, 수득한 용액을 20 분 동안 0 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (1.0 mL), 1N NaOH (1.0 mL) 이어서 물 (1.0 mL) 로 조심스럽게 처리하고, 혼합물을 1 시간 동안 실온에서 교반하였다. 수득한 현탁액을 여과하고, EA 로 추출하고, 수합한 유기층을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 갈색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.33 분; [M+H]⁺ = 144.08.

2-( 메톡시메틸 )-4-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 ) 옥사졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, 건조 CH₂Cl₂ (5 mL) 중의 (2-(메톡시메틸)옥사졸-4-일)메탄올 (76 mg, 0.53 mmol) 의 용액을 0 ℃ 에서 Et₃N (0.10 mL, 0.69 mmol) 에 이어 DMAP (6.6 mg, 0.05 mmol) 및 Ms-Cl (0.05 mL, 0.67 mmol) 로 적하 처리하였다. 0 ℃ 에서 30 분 동안 교반 후, 반응을 물 (5 mL) 로 켄칭시켰다. 유기층을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 118 mg 의 미정제 (2-(메톡시메틸)옥사졸-4-일)메틸 메탄술포네이트를 갈색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.51 분, [M+H]⁺ = 222.02. DMF (1.3 mL) 중의 상기 미정제 물질 (118 mg) 의 용액을, DIPEA (0.18 mL, 1.07 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (1.3 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (635 mg 의 9.6% DMF 용액, 0.53 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 24 시간 동안 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (10 mL), 이어서 EA (10 mL) 를 첨가하였다. 수층을 EA (10 mL) 로 추출하고, 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.31. LC-MS-조건 07: t_R = 0.62 분, [M+H]⁺ = 240.10.

2-((2-(메톡시 메틸 ) 옥사졸 -4- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (1.0 mL) 및 물 (0.5 mL) 의 혼합물 중의 2-(메톡시메틸)-4-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)옥사졸 (21 mg, 0.09 mmol), 철 분말 (15 mg, 0.26 mmol) 및 NH₄Cl (24 mg, 0.44 mmol) 의 혼합물을 85 ℃ 에서 15 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (5 mL) 를 첨가하고, 이어서 1N NaOH (5 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (2 x 5 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.41 분; [M+H]⁺ = 210.22.

2-( 클로로메틸 )-4-( 에톡시메틸 )옥사졸:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (2.0 mL) 중의 (2-(클로로메틸)옥사졸-4-일)메탄올 (500 mg, 3.39 mmol) 의 용액을 EtI (0.28 mL, 3.39 mmol) 에 이어 Ag₂O (1.18 g, 5.08 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물 (광으로부터 보호) 을 밤새 40 ℃ 에서 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (7:3 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.29. LC-MS-조건 07: t_R = 0.62 분, [M+H]⁺ = 176.26.

4-( 에톡시메틸 )-2-((4-니트로-2H-1,2,3- 트리아졸 -2-일) 메틸 ) 옥사졸 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, DMF (4.2 mL) 중의 2-(클로로메틸)-4-(에톡시메틸)옥사졸 (260 mg, 1.48 mmol) 의 용액을, DIPEA (0.51 mL, 2.96 mmol) 로 30 분 동안 전처리한 DMF (4.2 mL) 중의 4-니트로-2H-[1,2,3]트리아졸 (T. E. Eagles et al. Organic preparations and procedures 2 (2), 117-119, 1970; P. N. Neuman J. Heterocycl . Chem . 8, 51-56, 1971) (1.76 g 의 9.6% DMF 용액, 1.48 mmol) 의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 50 ℃ 에서 교반하였다. 물 (20 mL), 이어서 EA (20 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 유기층을 물 (3 x 10 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (1:1 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (1:1 hept-EA) = 0.40. LC-MS-조건 07: t_R = 0.69 분, [M+H]⁺ = 254.06.

2-((4-( 에톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-아민:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, EtOH (2.4 mL) 및 물 (1.2 mL) 의 혼합물 중의 4-(에톡시메틸)-2-((4-니트로-2H-1,2,3-트리아졸-2-일)메틸)옥사졸 (115 mg, 0.45 mmol), 철 분말 (77 mg, 1.36 mmol) 및 NH₄Cl (123 mg, 2.27 mmol) 의 혼합물을 85 ℃ 에서 15 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 가열 하에 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. CH₂Cl₂ (25 mL) 를 첨가하고, 이어서 1N NaOH (25 mL) 를 첨가하였다. 층을 분리하고, 수층을 CH₂Cl₂ (5 x 25 mL) 로 추출하였다. 수합한 유기 추출물을 MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS-조건 07: t_R = 0.48 분; [M+H]⁺ = 224.09.

실시예의 제조

실시예 1:

N-(2-((4-(2- 메톡시프로판 -2-일) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2-메틸-5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.0 mL) 중의 2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, p. 112) (40.0 mg, 0.18 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (5.6 mg, 0.05 mmol), HOBt (29.9 mg, 0.22 mmol), EDC (88.3 mg, 0.46 mmol) 및 DIPEA (0.13 mL, 0.74 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (0.8 mL) 중의 2-((4-(2-메톡시프로판-2-일)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (43.7 mg, 0.18 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (2.0 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 물 (2.0 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (4:6 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.35. LC-MS-조건 06: t_R = 0.94 분, [M+H]⁺ = 437.34.

실시예 2:

N-(2-((4-(메톡시 메틸 ) 옥사졸 -2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (30 mL) 중의 2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, p. 112) (1.14 g, 5.26 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (160 mg, 1.31 mmol), HOBt (854 mg, 6.32 mmol), EDC (2.52 g, 13.15 mmol) 및 DIPEA (3.60 mL, 21.03 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (22 mL) 중의 2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (1.10 g, 5.26 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (45 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 물 (45 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (4:6 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.20. LC-MS-조건 07: t_R = 0.88 분, [M+H]⁺ = 409.11.

실시예 3:

N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2-메틸-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (27 mL) 중의 2-메틸-5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, p. 113) (955 mg, 4.70 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (143 mg, 1.17 mmol), HOBt (763 mg, 5.65 mmol), EDC (2.25 g, 11.75 mmol) 및 DIPEA (3.22 mL, 18.80 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (20 mL) 중의 2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (983 mg, 4.70 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (40 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 물 (40 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. EA 에 대한 결정화에 의해 잔사를 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다: TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.14. LC-MS-조건 07: t_R = 0.84 분, [M+H]⁺ = 395.44.

실시예 4:

5-(3- 클로로페닐 )-N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸옥사졸 -4- 카르복사미드 :

5-(3-클로로페닐)-2-메틸-옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, 페이지 113) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 1.14 분, [M+H]⁺ = 429.05.

실시예 5:

N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2-메틸-5-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드 :

2-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페닐)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, 페이지 113) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 1.18 분, [M+H]⁺ = 463.03.

실시예 6:

5-(3- 클로로페닐 )-N-(2-((4-(메톡시 메틸 ) 옥사졸 -2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )옥사졸-4-카르복사미드:

5-(3-클로로페닐)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, 페이지 114) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 1.03 분, [M+H]⁺ = 415.02.

실시예 7:

N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5-(3- 메톡시페닐 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드 :

5-(3-메톡시페닐)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, 페이지 114) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 0.92 분, [M+H]⁺ = 411.09.

실시예 8:

N-(2-((4-(메톡시 메틸 ) 옥사졸 -2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )-5-(3-메톡시 페닐 )-2-메틸옥사졸-4-카르복사미드:

5-(3-메톡시페닐)-2-메틸-옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, 페이지 112) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 1.02 분, [M+H]⁺ = 425.08.

실시예 9:

5-(3-플루오로 페닐 )-N-(2-((4-(메톡시 메틸 ) 옥사졸 -2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )-2-메틸옥사졸-4-카르복사미드:

5-(3-플루오로페닐)-2-메틸옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, 페이지 112) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 1.04 분, [M+H]⁺ = 413.07.

실시예 10:

N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드 :

5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, 페이지 114) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 1.00 분, [M+H]⁺ = 395.12.

실시예 11:

N-(2-((4-(메톡시 메틸 ) 옥사졸 -2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )-2-메틸-5-(3-(트리플 루오로메톡시 )페닐)옥사졸-4-카르복사미드:

2-메틸-5-(3-(트리플루오로메톡시)페닐)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, 페이지 113) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 1.22 분, [M+H]⁺ = 479.05.

실시예 12:

2- 시클로프로필 -N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드 :

2-시클로프로필-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (에틸 3-옥소-3-(m-톨릴)프로파노에이트로부터 출발한 것 이외에는 WO 2009/077990, 페이지 114 에서의 2-시클로프로필-5-페닐-옥사졸-4-카르복실산에 대한 것과 같이 제조함) 을 이용하여 GP1 에 따라 합성함. LC-MS-조건 10: t_R = 1.25 분, [M+H]⁺ = 435.09.

실시예 13:

N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.3 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (50 mg, 0.26 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (8 mg, 0.07 mmol), HOBt (43 mg, 0.32 mmol), EDC (127 mg, 0.67 mmol) 및 DIPEA (0.18 mL, 1.06 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (1.3 mL) 중의 2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (55 mg, 0.26 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (5 mL) 로 희석하고, 층을 분리하고, 유기상을 물 (5 mL) 로 세정하고, Na₂SO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (4:6 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다: TLC: rf (4:6 hept-EA) = 0.13. LC-MS-조건 07: t_R = 0.81 분, [M+H]⁺ = 381.14.

실시예 14:

N-(2-((4-( 에톡시메틸 ) 옥사졸 -2- 일 )메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4- 일 )-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드:

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.0 mL) 중의 2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복실산 (WO 2009/077990, p. 112) (42 mg, 0.20 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (5.8 mg, 0.05 mmol), HOBt (31 mg, 0.23 mmol), EDC (91 mg, 0.48 mmol) 및 DIPEA (0.13 mL, 0.76 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (0.9 mL) 중의 2-((4-(에톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (43 mg, 0.19 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (10 mL) 로 희석하고, 유기상을 물 (10 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (3:7 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다: TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.34. LC-MS-조건 07: t_R = 0.91 분, [M+H]⁺ = 423.14.

실시예 15:

N-(2-((4-( 에톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드 :

자석 교반자가 구비된 화염 건조 환저 플라스크 내에 불활성 분위기 (N₂) 하에, CH₂Cl₂ (1.0 mL) 중의 시판 5-페닐옥사졸-4-카르복실산 (36 mg, 0.19 mmol) 의 용액을 실온에서 DMAP (5.8 mg, 0.05 mmol), HOBt (31 mg, 0.23 mmol), EDC (91 mg, 0.48 mmol) 및 DIPEA (0.13 mL, 0.76 mmol) 로 처리하고, 수득한 혼합물을 45 분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, CH₂Cl₂ (0.9 mL) 중의 2-((4-(에톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-아민 (43 mg, 0.19 mmol) 의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 CH₂Cl₂ (10 mL) 로 희석하고, 유기상을 물 (10 mL) 로 세정하고, MgSO₄ 로 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. FC (3:7 hept-EA) 에 의한 잔사의 정제에 의해 오일로서 수득하였다: TLC: rf (7:3 hept-EA) = 0.34. LC-MS-조건 07: t_R = 0.84 분, [M+H]⁺ = 395.08.

II. 생물학적 검정법

시험관 내 검정

식 (I) 의 화합물의 ALX 수용체 작용 활성을 하기 실험 방법에 따라 측정한다.

실험 방법:

세포내 칼슘 측정:

재조합 인간 ALX 수용체 및 G-단백질 Gα16 (HEK293-hALXR-Gα16) 을 발현하는 세포를 성장 배지 (GM) 에서 80% 컨플루언시 (confluency) 까지 성장시켰다. 세포를 배양 접시로부터 세포 해리 완충액 (Invitrogen, 13151-014) 을 이용해 분리시키고, 1,000 rpm 으로 실온에서 5 분간 검정 완충액 (AB; 동일 부의 Hank's BSS (Gibco, 14065-049), 및 Phemol Red 가 없는 DMEM (Gibco, 11880-028)) 중에서 원심분리하여 수집하였다. 1 μM Fluo-4 (AM) (Invitrogen, F14202) 및 20 mM HEPES (Gibco, 15630-056) 로 보충된 AB 중에서 37℃ 에서 5% CO₂ 하에 60 분 인큐베이션 후, 세포를 세정하고 AB 중에서 재현탁시켰다. 이어서, 이들을 384-웰 FLIPR 검정 플레이트 (Greiner, 781091) 상에, 웰 당 70 ㎕ 내 50,000 개의 세포로 접종하고, 1 분간 1,000 rpm 으로 원심분리하여 침전시켰다. 시험 화합물의 스톡 용액을 DMSO 중 10 mM 의 농도로 만들고, 활성화 용량 반응 곡선에서 요구되는 농도로 AB 중에 단계적으로 희석했다. WKYMVm (Phoenix Peptides) 를 참조 작용제로서 이용했다. FLIPR Tetra 기기 (Molecular Devices) 를 제조자 표준 지침서에 따라, 검정 완충액 중에, 실험 전에 DMSO 중 10 mM 으로 용해하고 희석시킨 시험 화합물 4 ㎕ 를 첨가하여 작동시켰다. lex=488 nm 및 lem=540 nm 에서 시험 화합물을 첨가하기 전후의 형광 변화를 모니터링하였다. 화합물 첨가 후 기준 수준 초과의 방출 피크 수치를 기준선 감산 후 엑스포트하였다 (export). 상기 수치를 기준선 감산 후 (AB 첨가) 고-수준 대조군 (WKYMVm 화합물, 10 nM 최종 농도) 에 대해 정규화하였다.

예시 화합물의 ALX 수용체에 대한 작용 활성 (EC₅₀ 값) 을 표 1 에 나타낸다.

화합물	EC₅₀ [nM]
실시예 1: N-(2-((4-(2- 메톡시프로판 -2-일) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸 -5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드	6.6
실시예 2: N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸 -5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드	1.7
실시예 3: N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸 -5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드	4.3
실시예 4: 5-(3- 클로로페닐 )-N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸옥사졸 -4- 카르복사미드	2.1
실시예 5: N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸 -5-(3-( 트리플루오로메틸 ) 페닐 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드	5.6
실시예 6: 5-(3- 클로로페닐 )-N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일) 옥사졸 -4- 카르복사미드	4.0
실시예 7: N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5-(3-메톡시페닐) 옥사졸 -4- 카르복사미드	17.5
실시예 8: N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5-(3-메톡시페닐)-2- 메틸옥사졸 -4- 카르복사미드	8.8
실시예 9: 5-(3- 플루오로페닐 )-N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2- 메틸옥사졸 -4- 카르복사미드	3.7
실시예 10: N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5-(m-톨릴) 옥사졸 -4- 카르복사미드	4.6
실시예 11: N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸 -5-(3-( 트리플루오로메톡시 ) 페닐 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드	7.4
실시예 12: 2- 시클로프로필 -N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드	11.6
실시예 13: N-(2-((4-( 메톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드	5.0
실시예 14: N-(2-((4-( 에톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-2- 메틸 -5-(m- 톨릴 ) 옥사졸 -4- 카르복사미드	6.7
실시예 15: N-(2-((4-( 에톡시메틸 ) 옥사졸 -2-일) 메틸 )-2H-1,2,3- 트리아졸 -4-일)-5- 페닐옥사졸 -4- 카르복사미드	8.6

비교 시험 결과

WO 2009/077990 에 개시된 화합물과 대비하여, 놀랍게도 알콕시-알킬에테르 부분에 부착된 헤테로아릴기의 종류가 본 발명의 작용 활성에 큰 영향을 미친다. 2 개의 치환된 탄소 원자들 사이에 질소 원자를 갖는 헤테로아릴기에 대하여만, 특히 4-위치에서 알콕시-알킬 부분에 의해 치환된 옥사졸-2,4-디일기에 대하여만 높은 작용 활성이 얻어진다. 표 2 에 제시된 결과는 상기 기재한 세포내 칼슘 측정에 의해 얻어진다.

[표 2]

참조 화합물

인간 간 마이크로솜을 이용한 반응성 대사산물과 단백질 간의 공유 결합에 대한 검정

기재하는 공유 결합 검정의 목적은 NADPH 재생 시스템의 존재 하의 인큐베이션 후 시간 당 인간 간 마이크로솜 (HLM) 의 반응성 대사산물과 단백질 간의 공유 결합의 양을 측정하는 것이다. 측정된 공유 결합율은, 결합된 약물 당량의 pmol / 단백질의 mg / h 로 나타낸다. 화합물들이 단백질과 공유 결합하는 경향이 낮다면 이는 잘 알려져 있는 이점이다.

인큐베이션

방사성표지 화합물 (³H 또는 ¹⁴C) 을 0.1 M 인산염 완충액 (pH 7.4) 중의 1.0 mg/mL 의 인간 간 마이크로솜을 이용해 단일 96 웰 플레이트에서 10 μM 의 농도로 인큐베이션하였다. 이를 위해, 개개의 용매 (에탄올) 중에서 제조한 2.5 μL 부피의 1 mM 스톡 용액을 250 μL 의 최종 부피까지 첨가했다. 글루코오스-6-포스페이트 데히드로게나아제를 포함하는 NADPH-재생 시스템 (20 IU/ml 데히드로게나아제, 0.1 M Tris 완충액 중 11 mM NADP 나트륨 염, 100 mM 글루코오스-6-포스페이트 2나트륨 염, 100 mM MgCl₂ 를 함유하는 25 μl, pH 7.4) 의 부재 또는 존재 하에서 및 추가적으로 개개의 중간물을 포획하기 위해 5 mM GSH 의 존재 또는 부재 하에서 인큐베이션을 수행하였다. 인큐베이션 없이 NADPH 를 사용하지 않은 초기 블랭크 값을 또한 측정하여 비특이적 빠른 결합을 측정하였다. 25 μL 의 NADPH-재생 시스템의 첨가에 의해 반응을 개시하고, 260 μL 의 빙냉 아세토니트릴을 함유하는 멀티스트린 딥 웰 solvinert 96 소수성 PTFE 필터 플레이트 (Millipore, 스위스 추크) 상에의 200 μL 의 인큐베이션 혼합물의 첨가에 의해 1 시간 후 종결시켰다. 15 ℃ 의 온도에서 15 분 동안 600 rpm 으로 플레이트를 쉐이킹하여 마이크로솜 단백질의 침전을 완결하였다. 최종적으로 침전된 인큐베이션 물질을 냉장고에서 4 ℃ 에서 15 분 동안 보관하였다.

10 ℃ 에서 20 분 동안의 1800 g 에서의 원심분리에 의해 단백질과 여과액을 분리하였다. 단백질 펠릿을 세정하여 1500 g, 10 ℃ 및 2 분에서의 원심분리에 의해 800 μL 의 메탄올/0.1% 황산 (v/v) 과의 비특이적 결합을 제거하였다. 세정 단계를 6 회 반복하였다. 세정한 단백질 펠릿을 500 μL 의 수성 0.1 % (w/v) NaOH / 1 % (w/v) SDS 의 첨가에 의해 재용해하였다. 필터 플레이트를 60 ℃ 에서 45 분 동안 400 rpm 으로 쉐이킹하고, 35 ℃ 에서 20 분 동안 2000 g 에서 원심분리하였다. 이 단계를 한 번 반복하고 단백질 용액을 조합하였다.

전체 방사능의 측정을 위해, 400 μL 단백질 용액의 분취량을 4 mL 의 액체 신틸레이션 칵테일 (Irga Safe plus, Perkin Elmer, 스위스 취리히) 과 혼합하고, 외부 표준 (¹³³Ba) 을 이용한 발광 보정 및 온-라인 소광 보정에 의해 Tricarb 2300 TR 액체 신틸레이션 분석기 (Perkin Elmer) 를 이용해 분석하였다. 전체 단백질 함량의 측정을 위해, 20 μL 단백질 용액의 분취량을 BCA 단백질 검정 키트 (Perbio Science Switzerland SA, 스위스 로잔) 를 이용해 분석하였다. 마이크로솜 단백질과의 공유 결합의 양을 다음과 같이 산출하였다: NADPH 를 이용한 결합된 약물 당량의 측정량 (백그라운드에서 NADPH 를 이용하지 않는 결합된 약물 당량의 양을 뺌) 을 각 웰 내의 재용해한 세정 단백질 펠릿의 단백질의 산출량으로 나누면, 시간 당 결합된 약물 당량의 양 pmol/mg 단백질이 제공된다.

혈장 안정성 검정

락트산 또는 수산화암모늄을 이용해 pH 7.4 로 조정한 래트 또는 인간 혈장을, 5% CO2 를 함유하는 인큐베이터에서 궤도형 (orbital) 쉐이킹 하에 37 ℃ 에서 평형화하였다. 1 μM 의 화합물 (999 μl 의 혈장 중에 DMSO 중 1 mM 스톡 용액 1μl) 의 첨가에 의해 반응을 개시하였다. 0.01 시간, 0.25 시간, 0.5 시간, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 6 시간 및 24 시간 시점에서, 분취량 (30 μl) 을 얼음 위에 놓인 90 μl MeOH 를 함유하는 96 웰 플레이트 내로 옮기어 반응을 중단시켰다. Eppendorf thermomixer 상에서 1400 rpm 에서 20 분 동안 볼텍싱 (vortexing) 후, 플레이트를 4 ℃ 에서 20 분 동안 3220 g 에서 원심분리하고, 상청액을 LC-MSMS 로 분석하였다. 0.1% 의 디클로로보스를 함유하는 혈장 중의 보정 시료를 제조하여 인큐베이션 샘플과 병행하여 분석하여 정량화를 할 수 있었다. 그 후, 반감기 (시간) 를 산출하였다. 또한, 초기 농도에 대한 시간 T_last 후의 개개의 화합물의 잔여 농도를 측정하였다 (표 3).

[표 3]

혈장 내 안정성

상기 데이터는 실시예 2 가 참조 화합물 11 보다 혈장 내에서 현저히 더 안정적임을 보여준다.

삼중수소화 화합물을 이용한 혈장 안정성 검정

락트산을 이용해 pH 7.4 로 조정한 래트 또는 인간 혈장을 궤도형 쉐이킹 하에 37 ℃ 에서 평형화하였다. 상기 반응을 10 μM 의 삼중수소화 화합물 (742.5 μl 의 혈장 중의 DMSO 중 1 mM 스톡 용액 7.5 μl) 의 첨가에 의해 개시하였다. 개시 시점 및 4 시간, 6 시간 및 24 시간 후에, 분취량 (100 μl) 을 얼음 위에 놓은 400 μl MeOH 를 함유하는 튜브에 옮겨 반응을 중단시켰다. Eppendorf thermomixer 상에서 1400 rpm 에서 20 분 동안 볼텍싱 후, 4 ℃ 에서 20 분 동안 3220 g 에서 원심분리하고, 상청액의 분취량을 H3-radiodetector 가 결합된 액체 크로마토그래피에 의해 분석하였다. 재현탁, eppendorf thermomixer 상에서 2000 rpm 으로 20 분 혼합, 및 원심분리 (4 ℃ 에서 20 분 동안 3220 g) 의 3 회 추가적인 사이클로 잔여 펠릿을 AcCN 으로 추가로 추출하였다. 전체 방사능을 수집한 상청액 중에서 측정하였다. 그 후, 최종 펠릿을 NaOH 1N 에 용해시키고, 전체 방사능을 측정하였다 (표 4).

[표 4]

혈장 내 참조 화합물 11 의 안정성

HPLC 분석 후, 오직 참조 화합물 11 만이 1 차 사이클의 추출 상청액 중에서 상이한 시점들에서 검출되었다. 참조 화합물 11 은 상청액으로부터 사라지는 반면 방사능은 수집한 펠릿에서 출현하고 있는데, 이는 혈장 단백질과 약물 관련 물질의 강한 연관성을 시사하는 것이다.

Claims

하기 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염:

(식 중,
R ¹ 은 비치환되거나 또는 할로겐, (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)알콕시, (C₁-C₂)플루오로알킬 또는 (C₁-C₂)플루오로알콕시로 모노-치환된 페닐을 나타내고;
R ² 는 수소, 메틸 또는 시클로프로필을 나타내고;
R ³ 및 R ⁴ 는 동일하며 수소 또는 메틸을 나타내고; 및
R ⁵ 는 (C₁-C₂)알킬을 나타냄).
제 1 항에 있어서,
R ¹ 이 비치환되거나 또는 플루오로, 클로로, 메틸, 메톡시, 트리플루오로메틸 또는 트리플루오로메톡시로 모노-치환된 페닐을 나타내고;
R ² 가 수소 또는 메틸을 나타내고;
R ³ 및 R ⁴ 가 동일하며 수소 또는 메틸을 나타내고; 및
R ⁵ 가 메틸을 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 1 항에 있어서, R¹ 이 비치환되거나 또는 플루오로, 클로로, 메틸, 메톡시, 트리플루오로메틸 또는 트리플루오로메톡시로 모노-치환된 페닐을 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, R ¹ 이 모노-치환된 페닐기를 나타내는 경우, 상기 페닐기가 메타-위치에서 치환되어 있는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 4 항에 있어서, R² 가 수소 또는 메틸을 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, R² 가 메틸을 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 4 항에 있어서, R² 가 메틸을 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, R³ 및 R⁴ 둘 모두가 수소를 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 7 항에 있어서, R³ 및 R⁴ 둘 모두가 수소를 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, R³ 및 R⁴ 둘 모두가 메틸을 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 7 항에 있어서, R³ 및 R⁴ 둘 모두가 메틸을 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 1 항 또는 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, R⁵ 가 메틸을 나타내는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염.
제 1 항에 있어서, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염:
N-(2-((4-(2-메톡시프로판-2-일)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드;
N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드;
N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-페닐옥사졸-4-카르복사미드;
5-(3-클로로페닐)-N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸옥사졸-4-카르복사미드;
N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)페닐)옥사졸-4-카르복사미드;
5-(3-클로로페닐)-N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)옥사졸-4-카르복사미드;
N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(3-메톡시페닐)옥사졸-4-카르복사미드;
N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(3-메톡시페닐)-2-메틸옥사졸-4-카르복사미드;
5-(3-플루오로페닐)-N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸옥사졸-4-카르복사미드;
N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드;
N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(3-(트리플루오로메톡시)페닐)옥사졸-4-카르복사미드;
2-시클로프로필-N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드; 및
N-(2-((4-(메톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-페닐옥사졸-4-카르복사미드.
제 1 항에 있어서, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 식 (I) 의 화합물 또는 그 화합물의 염:
N-(2-((4-(에톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-2-메틸-5-(m-톨릴)옥사졸-4-카르복사미드; 및
N-(2-((4-(에톡시메틸)옥사졸-2-일)메틸)-2H-1,2,3-트리아졸-4-일)-5-페닐옥사졸-4-카르복사미드.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 약제로서의 사용을 위한, 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
류마티스 관절염, 급성 폐 손상, 천식, 낭성 섬유증, 자가면역 염증성 장 질환, 건성각결막염, HIV-매개 레트로바이러스성 감염, 심장혈관 장애, 아토피성 피부염, 폐 섬유증 및 알츠하이머병으로부터 선택된 질병의 치료를 위한 약학 조성물로서;
활성 성분으로서 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 따른 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 및 하나 이상의 치료학적으로 불활성인 부형제를 함유하는 약학 조성물.